SK285398B6

SK285398B6 - 3-Metylén steroidné deriváty, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Info

Publication number: SK285398B6
Application number: SK727-2002A
Authority: SK
Inventors: Ralf Plate; Wilhelmina Maria Bagchus
Original assignee: Akzo Nobel N.V.
Priority date: 1999-11-29
Filing date: 2000-11-23
Publication date: 2007-01-04
Also published as: AR033503A1; AU2508701A; SK7272002A3; HUP0203596A3; PL355968A1; EP1240179A2; PT1240179E; US20040043972A1; DE60026608D1; IL149412A0; KR20030024656A; NO20022521L; CY1106088T1; NZ518756A; WO2001040253A2; BR0015950A; HK1047595B; TWI265167B; HK1047595A1; WO2001040253A3

Abstract

Opísané sú deriváty všeobecného vzorca (I), kde R1 je H alebo spolu s R3 tvoria ß-epoxid, alebo R1 chýba, ak je v polohe 5-10 alebo 4-5 dvojitá väzba, R2 je C1-5-alkyl alebo CF3, R3 je ßH, ßCH3 alebospolu s R1 tvoria ß-epoxid, alebo R3 chýba, ak jev polohe 5-10 dvojitá väzba, R4 je H, nižší alkyl, Y je [H, H] [OH, H], =O, [OH, nižší alkyl], [OH,C2-5-alkenyl], [OH, C2-5-alkinyl] alebo C1-6-alkylidén, kde uvedený alkyl, alkenyl, alkinyl a alkylidén je voliteľne halogenovaný alebo =NOR5, kde R5je H, nižší alkyl, bodkované čiary znamenajú voliteľnú väzbu, ktoré sú užitočné na liečenie a/aleboprofylaxiu artritických chorôb a/alebo autoimunitných chorôb.

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových 3-metylén-steroidných derivátov s terapeutickými účinkami a prípravy farmaceutických prípravkov, obsahujúcich 3-alkylidén-steroid.

Doterajší stav techniky

Steroidy s metylénovými substituentmi v polohe 3 kostry steroidu a s dvojitými väzbami v polohe 1 - 2 alebo 4 5 sú známe a považované za užitočné na terapeutické použitie (BE 696 235 alebo BE 654 772). Predpokladaná lekárska indikácia je následkom anabolických, estrogénových a progestogénových účinkov. Žiadne z týchto zlúčenín nenapĺňali vyhliadky na takéto použitie a neboli žiadne vyhliadky ich prospešnosti ako lieku v iných oblastiach, hoci množstvo chorôb naďalej zostáva nevyhovujúco liečených v súčasnosti dostupnými liekmi. Predovšetkým choroby imunitného systému, napríklad ako je reumatická artritída a autoimunitné choroby, potrebujú lepšie lieky. Kortikosteroidné látky sú takisto užitočné na liečbu takýchto chorôb, ale ich vylepšenia, nielen s ohľadom na účinnosť a početnosť alebo tiež na vážnosť vedľajších účinkov, sú potrebné.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu sú 3-metylén-steroidné deriváty a ich prekurzory všeobecného vzorca (I)

kde

R1 je H alebo spolu s R3 tvoria í3-cpoxid, alebo R1 chýba, ak je v polohe 5-10 alebo 4-5 dvojitá väzba;

R2 je C,.5-alkyl alebo CF₃;

R3 je 0H, 0CH₃ alebo spolu s R1 tvoria (3-epoxid, alebo R3 chýba, ak je v polohe 5-10 dvojitá väzba;

R4 je H, Cj-s-alkyl;

Y je [H, H] [OH. H], =0, [OH, Cj.e-alkyl], [OH, C₂.₅-alkenyl], [OH, C₂.₅-alkinyl] alebo Ci.₆-alkylidén, kde uvedený alkyl, alkenyl, alkinyl a alkylidén je voliteľne halogenovaný; alebo =NOR5, kde R5 jc H, C|.₆-alkyl.

Bodkované čiary znamenajú možnú dvojitú väzbu.

Výhodnými zlúčeninami podľa predkladaného vynálezu sú tie, v ktorých R⁴ je H a Y je [OH, H], =0, [OH, C|_₆-alkyl], [OH, C₂.₅-alkenyl], [OH, C₂.₅-alkinyl] alebo C|.₆-alkylidén, kde uvedený alkyl, alkenyl, alkinyl a alkylidén môže byť voliteľne halogenovaný.

V tomto opise majú pojmy nasledujúci význam.

Nižší alkyl je rozvetvená alebo nerozvetvená alkylová skupina obsahujúca výhodne 1 až 6 atómov uhlíka, ako napríklad hexyl, izobutyl, rerc-butyl, propyl, izopropyl, etyl a metyl. Najvýhodnejšie sú alkylové skupiny obsahujúce 1 až 3 atómy uhlíka.

Cj.s-alkyl je rozvetvená alebo nerozvetvená alkylová skupina obsahujúca 1 až 5 atómov uhlíka, napríklad metyl, etyl, izopropyl, butyl, seŕ-butyl, terc-butyl atď. Výhodné sú alkylové skupiny obsahujúce 1 až 3 atómy uhlíka.

C₂,₅-aIkenyl je rozvetvená alebo nerozvetvená alkenylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka, napríklad ako etenyl, 2-butenyl atď. Výhodné sú alkenylové skupiny obsahujúce 2 až 3 atómy uhlíka.

C₂.₅-alkinyl je rozvetvená alebo nerozvetvená alkinylová skupina obsahujúca 2 až 5 atómov uhlíka, napríklad ako etinyl a propinyl atď. Výhodné sú alkinylové skupiny obsahujúce 2 až 3 atómy uhlíka.

Cj.s-alkylidén je rozvetvená alebo nerozvetvená alkylidénová skupina obsahujúca 1 až 5 atómov uhlíka, napríklad ako metenyl, butylidén atď. Výhodné sú alkylidénové skupiny obsahujúce 2 až 3 atómy uhlíka.

Halogénom je fluór, chlór, bróm a jód.

Prekurzory sú zlúčeniny, ktoré sú navrhnuté tak, aby v tele príjemcu lieku vytvorili zlúčeninu podľa vynálezu. Vo všeobecnosti môžu byť takými prekurzormi estery alebo étery 17-hydroxylovej funkčnej skupiny.

Výhodným uskutočnením tohto vynálezu je zlúčenina, ako bola opísaná, obsahujúca dvojitú väzbu v polohe 5 - 10. Najvýhodnejšou je zlúčenina (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5(10)-én-20-ín-17-ol. Z vynálezu sú vylúčené zlúčeniny (7a,17/J)-7a-metyl-3-metylén-4-estrén-17-ol, (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-4-én-l 7-ol, (7o,l 7o)-7-metyl-3-metylén-19,21-dinorpregn-4-én-l 7ol, (7a)-17-keto-7-metyl-3-metylén-4-estrén, (7α,17α)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-4-én-20-ín-17-ol, 17/3-hydroxy-7a-metyl-3-metylén-17a-(2-propenyl)-4-estrén a 17/3-hydroxy-7oí-metyl-3-metylén-17a-(2-metyl-2-propenyl)-4-estrén. Tento diselaimer sa vzťahuje na opis v BE 696 235.

Epoxidové zlúčeniny (R1 a R3 spoločne tvoria β-Ο-) podľa vynálezu môžu byť pripravené oxidáciou zlúčeniny všeobecného vzorca (II), v ktorom majú symboly určený význam, s kyselinou metachlórperoxybenzoovou

(II)

3-Metylénová skupina v zlúčeninách podľa vynálezu sa môže získať uskutočnením Wittigovej reakcie s použitím metyltrifenylfosfóniumbromidu a /erc-butoxidu draselného s príslušnými 3-ketónovými prekurzorovými steroidmi, ktoré sú charakterizované všeobecným vzorcom (III), kde Y2 je určené ako Y, ako bolo uvedené s výnimkou, že to nie jc =0 a ostatné symboly majú význam určený.

(III)

17-Alkylidénové zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť pripravené Wittigovou reakciou 3-ketálových derivátov 17-keto-derivátov všeobecného vzorca (IV), kde majú symboly určený význam, s alkyltrifenylfosfóniumbromidom, nasledovanou hydrolýzou 3-ketálovej funkčnej skupiny. Zlúčeniny, kde Y=H, H v polohe 17 (vzorec II) podľa vynálezu môžu byť pripravené Wolff-Kishnerovou redukciou 17-keto-skupín 3-ketálových zlúčenín všeobecného vzorca (IV), v ktorom majú symboly určený význam. 17-Oxímové deriváty podľa vynálezu môžu byť pripravené kondenzáciou 17-ketónovej funkčnej skupiny (vzorec IV) s hydroxylamínovými derivátmi. 16-Alkylová zlúčenina podľa vynálezu môže byť pripravená alkyláciou polohy 16 17-keto-zlúčeniny (Y=O, vzorec IV).

Uvedené reakčné činidlá na transformáciu východiskových zlúčenín a ich spôsob reagovania so zlúčeninami sú v danej oblasti techniky známe, ale doteraz neboli použité pre skupinu zlúčenín, ktoré majú byť pripravené na získanie zlúčenín podľa vynálezu. Východiskové zlúčeniny môžu byť získané spôsobmi opísanými v literatúre. Konkrétnym príslušným odkazom je Van Vliet a kol. Recl. Tráv. Chim. Pays-Bas; EN; 105; 4; 1986; 111 - 115, ktorého text je vložený do tohto opisu citáciou. Predovšetkým sa tam uvádza, že 17-alkyl-3-keto-deriváty všeobecného vzorca (III), v ktorých Y2 je [OH, C₁.₆-alkyl] a ostatné symboly majú určený význam, môžu byť získané katalytickou hydrogenáciou, napríklad s PtO₂/H₂, zlúčeniny všeobecného vzorca (III), v ktorom Y2 je [OH, alkenyl] alebo [OH, alkinyl] a ostatné symboly majú určený význam.

Deriváty všeobecného vzorca (V) môžu byť získané čistením zo zmesi zlúčenín, ktoré sa vytvoria po Birchovej redukcii 4-én-3-ónového derivátu všeobecného vzorca (VI), kde vo vzorci (V) a (VI) majú symboly určený význam.

4-Én-3-ónový derivát všeobecného vzorca (VI), kde R3 je H a ostatné symboly majú určený význam, môže byť získaný zo zlúčeniny všeobecného vzorca (VII) izomerizáciou dvojitej väzby (podľa spôsobu opísaného vo van Vliet a kol. 1986).

4-Én-3-ónový derivát všeobecného vzorca (VI), kde R3 je metyl a ostatné symboly majú určený význam, môže byť získaný spôsobom opísaným v Grunwell a kol., Steriods, zv. 27, strany 759 - 771, 1976, ktorého publikácia je sem včlenená ako odkaz.

Ďalšie metódy získania zlúčenín všeobecného vzorca (VII) ako východiskovej zlúčeniny môžu byť pripravené spôsobom opísaným van Vliet a kol. 1986.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sú užitočné na imunomoduláciu u cicavcov. Zlúčenina podľa vynálezu môže byť obzvlášť užitočná na liečenie artritických chorôb, ako je napríklad reumatická artritída (RA) a autoimunitných chorôb (AIDs), ako je napríklad Sjôrgenov syndróm a celkový lupus erythematosus (SLE). Taktiež môže byť použitá profylaktický proti takýmto chorobám. Ďalej môže byť zlúčenina podľa vynálezu použitá na výrobu farmaceutického prostriedku obsahujúceho zlúčeninu podľa vynálezu ako účinnú zložku.

Predkladaný vynález sa taktiež vzťahuje na farmaceutický prostriedok obsahujúci steroidnú zlúčeninu podľa vynálezu, zmiešanú s jednou alebo viacerými pomocnými látkami, napríklad ako sú bežne opísané v Gennaro a kol., Remmington's Pharmaceutical Sciences, (18. vydanie, Mack publishing Company, 1990, pozri najmä časť 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture.). Zmes jednej alebo viacerých steroidných zlúčenín podľa vynálezu ajednej alebo viacerých farmaceutický prijateľných pomocných látok môže byť stlačená do tuhých dávkových jednotiek, ako sú napríklad pilulky, tablety alebo môžu byť spracované do kapsúl alebo čapíkov. Prostredníctvom farmaceutický vhodných tekutín môžu byť zlúčeniny taktiež aplikované ako injekčné prostriedky vo forme roztoku, suspenzie, emulzie alebo ako sprej, napríklad nazálny sprej. Na prípravu dávkových jednotiek, napríklad tabliet sa zvažuje použitie konvenčných prísad, ako sú napríklad plnivá, farbivá, polyméme spojivá a podobne. Vo všeobecnosti môžu byť použité akékoľvek farmaceutický prijateľné prísady, ktoré neinterferujú s funkčnou skupinou účinných zlúčenín. Steroidné zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť taktiež zahrnuté v implantáte, náplasti, géli a akýchkoľvek iných prípravkoch na nepretržité uvoľňovanie. Vhodnými nosičmi, s ktorými môžu byť dané prostriedky podávané, zahrnujú laktózu, škrob, celulózové deriváty a podobne, alebo ich zmesi, použité vo vhodných množstvách.

Z iného hľadiska vynález poskytuje použitie steroidnej zlúčeniny podľa vynálezu na výrobu lieku na modulovanie imunitného systému cicavcov. Konkrétnejšie sa vynález vzťahuje na použitie steroidných zlúčenín podľa vynálezu na výrobu lieku na liečenie artritických chorôb, napríklad ako reumatická artritída (RA) a autoimunitných chorôb, napríklad ako Sjorgenov syndróm a celkový lupus erythematosus (SLE). Takéto lieky môžu byť taktiež použité profylaktický proti takýmto chorobám. Zvlášť výhodne je liek vyrábaný na liečenie ľudí, v súlade s predpismi zdravotných úradov v rozličných krajinách. Použitie 3-metylén-steroidných derivátov, ako je (7a,170)-7a-metyl-3-metylén-4-estrén-17-ol, (7α, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-4-én-l 7-ol, (7α, 17a)-7-metyl-3-metylén-19,21 -di-norpregn-4-én-17-ol, (7a)-17-keto-7-metyl-3-metylén-4-estrén, (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-4-én-20-ín-17-ol, 17/3-hydroxy-7a-metyl-3-metylén-17a-(2-propenyl)-4-estrén a 17/3-hydroxy-7a-mctyl-3-mctylcn-17a-(2-metyl-2-propenyl)-4-estrén, ide nad rámec predkladaného vynálezu.

Vynález ďalej poskytuje liečenie artritických chorôb, napríklad ako je reumatická artritída (RA) a autoimunitných chorôb, napríklad ako je Sjorgenov syndróm a celkový lupus erythematosus (SLE), zahrnujúcemu podanie opísanej zlúčeniny pacientovi (vo vhodnej farmaceutickej dávkovej forme). Dávkové množstvá predkladaných steroidov budú z rozsahu od 0,001 do 100 mg na podanie subjektu, ktorý danú liečbu potrebuje. Následkom toho môžu dávkové jednotky zlúčeniny podľa vynálezu obsahovať množstvo aktívnej zložky z rozsahu od 0,001 do 100 mg.

Imunomodifikačné vlastnosti zlúčenín tohto vynálezu môžu byť názorne ukázané a použité v nasledujúcich postupoch.

V postupe oneskorenej typovej hypercitlivosti (DTH) môže byť účinok zlúčeniny na vývoj imunitnej reakcie sledovaný na myšiach (podrobnosti v príklade 16). V stručnosti, zlúčenina sa podáva denne a zvieratá sa následne imunizujú antigénom vadjuvans. Po siedmich dňoch sa zvieratá lokálne imunologický testujú lokálnym vpichnutím antigénu (väčšinou do labky) a meria sa následne sa vyvíjajúci lokálny opuch ako odozva na uloženie antigénu. Stupeň opuchu je vo vzťahu k vyvolanej imunitnej odpovedi proti zisťovanému antigénu. Inhibičný účinok zlúčeniny podľa vynálezu na vývoj tohto opuchu môže byť stanovený porovnaním liečených skupín s placebom liečenými skupinami. Ako referenčná liečba môže byť použité podávanie glukokortikoidov.

Účinok zlúčenín podľa vynálezu sa taktiež testoval na artritických myšiach. V tejto procedúre sa myš imunizovala kolagénom typu II, väčšinou z hovädzej chrupky, v adjuvans. Po troch týždňoch sa podala druhá injekcia s tým istým antigénom. Približne po siedmich až desiatich dňoch po druhej injekcii môže byť pozorovaný opuch kĺbov (najmä predných a zadných labiek). Tento opuch sa rapídne zväčšuje, vedie k sčervenaniu, zápalu a deformácii normálnej funkcie. Prostredníctvom rôntgenovej analýzy môže byť pozorované narušenie normálnej stavby kĺbov. Histologickým vyšetrením týchto kĺbov môžu byť pozorované vážne zápaly, vedúce k narušeniu normálnej stavby chrupky. Rozsah pozorovateľných zmien môže byť odstupňovaný; taktiež môže byť odstupňovaný rozsah histologických zmien.

Ďalej môže byť účinok zlúčeniny podľa vynálezu pozorovaný na neobéznych diabetických (NOD) myšiach.

V tomto postupe sa myši spontánne a postupne nakazujú autoimunitnými chorobami so symptómami pripomínajúcimi ľudský, od inzulínu závislý diabetes mellitus (IDDM) a Sjogrenov syndróm. Sjogrenov syndróm sa vyznačuje tvorbou infiltrátov v slinnej a slznej žľaze. V NOD myšiach sa najmä slinná žľaza vyznačuje postupným vývojom infiltrátov. Zlúčenina podľa vynálezu v závislosti od dávky inhibuje vývoj týchto infiltrátov v submandibulárnych žľazách.

IDDM sa vyznačuje vývojom infiltrátov v pankrease, vedúcich k deštrukcii Langerhansových ostrovčekov vytvárajúcich inzulín. Po postupnom zničení všetkých týchto ostrovčekov už nikdy neprebieha tvorba žiadneho inzulínu, čo vedie k vývoji IDDM.

Vynález je doložený nasledujúcimi príkladmi.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5(10)-én-20-ín-17-olu

Metyltrifenylfosfóniumbromid (26,4 g, 73,9 mmol) sa pridal k miešanému roztoku Zerc-butoxidu draselného (7,9 g, 70,4 mmol) v 130 ml suchom THF v dusíkovej atmosfére. Žltá suspenzia sa miešala pri izbovej teplote počas 45-tich minút. K suspenzii sa rýchlo (približne počas 30-tich sekúnd) pridal roztok 20 g, 64 mmol tibolónu v 200 ml suchého THF, čo malo za následok pomalú exotermickú reakciu (z 20 °C na 33 °C). Žltá reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote počas 30-tich minút, vliala sa do ľadovej vody (700 ml) a extrahovala sa etylacetátom (700 ml). Organická vrstva sa premyla vodou (300 ml), vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 41,8 g žltého oleja. Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla 19,5 g bezfarebného oleja, obsahujúceho približne 90 % (7a, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5( 10)-én-20-ín-17-olu a 10 % izomémeho Δ⁴ derivátu. Rekryštalizácia (3-násobná) s použitím heptán/petroléteru ako rozpúšťadla poskytla zlúčeninu uvedenú v nadpise (6,44 g, výťažok 32 %) ako bielu tuhú látku s teplotou topenia 91,6 °C.

Príklad 2

Príprava (7a,170)-7-metyl-3-metylénestr-5(lO)-én-17-olu

Metyltrifenylfosfóniumbromid (4,21 g, 11,8 mmol) sa pridal k miešanému roztoku íerc-butoxidu draselného (1,26 g, 11,2 mmol) v 20 ml suchého THF v dusíkovej atmosfére. Žltá suspenzia sa miešala pri izbovej teplote počas 45-tich minút. K suspenzii sa rýchlo pridal roztok (70,170)-7-metyl-3-keto-estr-5(10)-én-17-oIu (3,4 g, 11,8 mmol) v 25 ml suchého THF. Žltá reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote počas 30-tich minút, vliala sa do ľadovej vody a extrahovala sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 5,3 g zlúčeniny uvedenej v nadpise, vo forme žltého oleja. Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla 2,3 g bezfarebného oleja.

Rekryštalizácia s použitím heptán/petroléteru poskytla (7a,170)-7-metyl-3-metylénestr-5(lO)-én-17-ol (1,47 g, 44 %) ako bielu tuhú látku s teplotou topenia 111,8 °C.

Príklad 3

Príprava (50,7α; 17α)-5,10-epoxy-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-ín-l 7-olu

Zlúčenina (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5(10)-én-20-ín-l7-ol (390 mg, 1,26 mmol), získaná podľa príkladu 1 sa premiešavala v 15 ml suchého dichlórmetánu v dusíkovej atmosfére. Roztok sa ochladil na 0 “C a pridala sa kyselina weto-chlórperoxybenzoová (1,26 mmol, 310 mg 70 % MCPBA). Reakčná zmes sa premiešavala pri teplote 0 °C počas 2 hodín, premyla sa nasýteným roztokom tiosíranu sodného, nasýteným roztokom uhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušila sa (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 450 mg surovej zlúčeniny (50,7a,17a)-5,lO-epoxy-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-ín-17-ol. Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla vyčistenú zlúčeninu uvedenú v nadpise (150 mg, 37 %) vo forme peny.

Príklad 4

Príprava (50,7α, 170)-5,10-epoxy-7-metyl-3-metylénestrán-17-olu

Zlúčenina (7a,170)-7-metyl-3-metylénestr-5(lO)-én-17-ol (350 mg, 1,22 mmol), získaná podľa príkladu 2 sa premiešavala v 15 ml suchého dichlórmetánu v dusíkovej atmosfére. Roztok sa ochladil na 0 °C a pridala sa kyselina /neía-chlórperoxybenzoová (1,22 mmol, 301 mg 70 % MCPBA). Reakčná zmes sa premiešavala pri teplote 0 °C počas 75 minút, premyla sa nasýteným roztokom tiosíranu sodného, nasýteným roztokom uhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušila sa (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 370 mg surového (50,7α, 170)-5,10-epoxy-7-metyl-3-metyIénestran-17-olu.

Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla ďalej čistenú zlúčeninu uvedenú v nadpise (230 mg, 63 %). Kryštalizácia s použitím heptán/etylacetátu 95/5 (objem. %) poskytla vyčistenú zlúčeninu uvedenú v nadpise (120 mg , 33 %) ako bielu tuhú látku s teplotou topenia 125 °C.

Príklad 5

Príprava (5α,7α,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-én-17-olu

Metyltrifenylfosfóniumbromid (688 g, 1,93 mmol) sa pridal k premiešavanému roztoku Zerc-butoxidu draselného (196 g, 1,75 mmol) v 2 ml suchého THF v dusíkovej atmosfére. Žltá suspenzia sa miešala pri izbovej teplote počas 45-tich minút. K suspenzii sa rýchlo pridal roztok (5α,7α, 17a)-7-metyl-3-keto-19-norpregn-20-én-17-olu (220 mg, 0,7 mmol) v 3 ml suchého THF. Žltá reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote počas 2,5-hodiny, vliala sa do ľadovej vody a extrahovala sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 500 mg oleja. Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla 200 mg surového (5a,7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-én-l 7-olu. Kryštalizácia z heptánu poskytla vyčistenú zlúčeninu uvedenú v nadpise (120 mg, 55 %) ako biciu tuhú látku s teplotou topenia 105 °C.

Príklad 6

Príprava (5α,7α,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-in-17-ol

Metyltrifenylfosfóniumbromid (1,85 g, 5,18 mmol) sa pridal k miešanému roztoku íerc-butoxidu draselného (527 mg, 4,7 mmol) v 4 ml suchého THF v dusíkovej atmosfére. Žltá suspenzia sa miešala pri izbovej teplote počas 45-tich minút. K suspenzii sa rýchlo pridal roztok (5a,7a,17a)-7-metyl-3-keto-19-norpregn-20-ín-l7-olu (590 mg, 1,88 mmol) v 8 ml suchého THF. Žltá reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote počas 2,5-hodiny, vliala sa do ľadovej vody a extrahovala sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 1,8 g oleja. Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla 590 mg surového (5a,7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-ín-17-olu. Kryštalizácia z heptánu poskytla vyčistenú zlúčeninu uvedenú v nadpise (290 mg, 50 %) ako bielu tuhú látku s teplotou topenia 97 °C.

Príklad 7

Príprava (50,7a, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregnan-17-olu

Metyltrifenylfosfóniumbromid (5,4 g, 15,1 mmol) sa pridal k premiešavanému roztoku íerc-butoxidu draselného (1,62 g, 14,4 mmol) v 27 ml suchého THF v dusíkovej atmosfére. Žltá suspenzia sa miešala pri izbovej teplote počas 40-tich minút. K suspenzii sa rýchlo pridal roztok (50,7a, 17a)-7-metyl-3-keto-19-norpregnan-l 7-olu (4,56 g, 14,4 mmol) v 50 ml suchého THF. Žltá reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote počas 30-tich minút, vliala sa do ľadovej vody a extrahovala sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou a soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo 8,2 g oleja. Kolónová chromatografia, s použitím toluén/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla (50,7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregnan-17-ol (3,65 g, 81 %), ktorý státím tuhne, s teplotou topenia 104 °C.

Príklad 8

Príprava (7a)-7-metyl-3,17-dimetylénestr-5(10)-énu

Metyltrifenylfosfóniumbromid (2,2 g, 6 mmol) sa pridal k premiešavanému roztoku íerc-butoxidu draselného (680 mg, 6 mmol) v 25 ml suchého THF v dusíkovej atmosfére. Žltá suspenzia sa miešala pri izbovej teplote počas 30-tich minút. K suspenzii sa rýchlo (v priebehu 30-tich sekúnd) pridal roztok (7a)-7-metyl-3-keto-17-metylénestr-5(10)-énu (850 mg, 3 mmol) v 25 ml suchého THF, čo malo za následok pomalú exotermickú reakciu. Reakčná zmes sa miešala pri izbovej teplote počas 30-tich minút, vliala sa do ľadovej vody (100 ml) a extrahovala sa etylacetátom (100 ml). Organická vrstva sa premyla vodou (50 ml), vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo (7a)-7-metyl-3,17-dimetylénestr-5(10)-énu (680 mg, 80 %) ako bezfarebného oleja. [a]_D = +115° (c = 0,185 v etanole).

Príklad 9

Príprava (7α, 16α, 170)-7,16-dimetyl-3 -metylén-17-(1 -propinyl)estr-5( 10)-én-17-olu

Roztok (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ónu (1,5 g, 4,5 mmol) a l,3-dimetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(lH)-pyrimidinónu (DMPU, 1,2 ml, 9,9 mmol) v 30 ml destilovaného THF sa pridal v priebehu približne 8-mich minút k miešanému roztoku bis(trimetylsilyl)amidu lítneho (LiHMDS, 4,96 ml, IM v THF) v 15 ml destilovaného THF pri teplote -40 °C v dusíkovej atmosfére. Reakčná zmes sa premiešavala pri teplote -40 °C počas 45-tich minút. Pridal sa roztok j odmetanú (730 μΐ, 11,7 mmol) v 1 ml destilovaného THF a reakčná zmes sa miešala počas 1-nej hodiny a teplota sa nechala stúpnuť na 0 °C. Pridala sa voda a nasýtený roztok chloridu amónneho a reakčná zmes sa extrahoval etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou a soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha. Kolónová chromatografia, s použitím heptán/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta poskytla (7a,16a)-3,3-dimetoxy-7,16-dimetylestr-5(10)-én-17-ón (990 g, výťažok 65 %).

Propín (približne 4 g, 100 mmol) sa pri teplote -70 °C prebublal cez roztok n-BuLi (9 ml, 1,6M v hexáne) v 19 ml suchého THF, čo poskytlo exotermickú reakciu (z teploty -70 °C na -30 °C). K bielej suspenzii sa v priebehu približne 5-tich minút v dusíkovej atmosfére pridal roztok (7α, 16a)-3,3-dimetoxy-7,16-dimetylestr-5(l 0)-én-l 7-ónu (990 mg, 2,86 mmol) v 10 ml suchého THF. Reakčná zmes sa premiešavala počas 45-tich minút a teplote sa umožnilo pomaly ohriať na izbovú teplotu. Pridala sa voda a nasýtený roztok chloridu amónneho a extrahovalo sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo (7α,16α,170)-3,3-dimetoxy-7,16-dimetyl-17-(1 -propinyl)-estr-5( 10)-én-17-ol. K roztoku (7a,16a,170)-3,3-dimetoxy-7,16-dimetyl-17-(l-propinyl)-estr-5(l 0)-én-l 7-olu (2,86 mmol) v 25 ml etanolu sa pridal roztok kyseliny oxálovej (72 mg, 0,57 mmol) v 6 ml vody a reakčná zmes sa premiešavala pri izbovej teplote počas 45-tich minút. Pridal sa roztok nasýteného hydrogenuhličitanu sodného a extrahovalo sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha. Kolónová chromatografia, s použitím heptán/etylacetátu 9/1 (objem. %) ako eluenta, poskytla (7 ος 16α, 170)-7,16-dimetyl-17-hydroxy-17-(l-propmyl)estr-5(10)-en-3-ón (940 g, výťažok 97 %).

Metyltrifenylfosfóniumbromid (1,7 g, 4,7 mmol) sa pridal k suspenzii ŕerc-butoxidu draselného (470 mg,

4,2 mmol) v 31 ml suchého THF v dusíkovej atmosfére. Reakčná zmes sa miešala pri refluxnej teplote počas 45-tich minút. Reakčná zmes sa ochladila na teplotu 4 °C a v priebehu približne 10-tich minút sa pridal roztok (7 α, 16a, 17/3)-7,16-dimetyl-17-hydroxy-17-(1 -propinyl)estr-5( 10)-én-3 -ónu (940 mg, 2,76 mmol) v 39 ml suchého THF. Reakčná zmes sa miešala pri teplote 4 °C počas 20-tich minút, pridal sa zriedený chlorid sodný a zmes sa extrahovala etylacetátom. Organická vrstva sa premyla soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha. Kolónová chromatografia, s použitím heptán/etylacetátu 95/5 (objem. %) ako eluenta, poskytla (7α, 16a, 17/3)-7,16-dimetyl-3-metylén-17-(1-propinyl)estr-5(10)-én-17-ol (630 mg, výťažok 67 %) vo forme oleja. Produkt sa vysušil vymrazením z dioxánu. [a]_D = = +83° (c = 0,15 v etanole).

Príklad 10

Syntéza (7 α, 16a, 17/3)-16-etyl-7-metyl-3-metylén-17-(1-propinyl)estr-5(l 0)-én-l 7-olu

Táto zlúčenina sa pripravila podľa uvedeného spôsobu, vychádzajúc z (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ónu a etyljodidu; [a]_D = +54° (c = 0,13 v etanole).

Príklad 11

Syntéza (7α, 17ffi-7-metyl-3-metylén-17-(1 -propi nyl )estr-5(10)-én-17-olu

Táto zlúčenina sa pripravila podľa uvedeného spôsobu, vychádzajúc z (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ónu; [a]_D = +80° (c = 0,14 v etanole).

Príklad 12

Syntéza (7α, 16β,17/3)-16-etyl-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5 (10)-én-20-ín-17-ol

Táto zlúčenina sa pripravila podľa uvedeného spôsobu, vychádzajúc z (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ónu; [a]_D = +94° (c = 0,10 v etanole).

Príklad 13

Príprava (7a)-3-metylén-7-metylestr-5(l 0)-énu

K suspenzii (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ónu (1 g, 3 mmol) v 17 ml dietylénglykolu sa pri izbovej teplote a v dusíkovej atmosfére pridal hydroxid draselný (1,5 g, 27 mmol) a monohydrát hydrazínu (3 ml, 62 mmol). Reakčná zmes sa počas 1 hodiny ohrievala pri teplote 130 “C a následne 1 hodinu a 15 minút pri teplote 230 °C. Na odstránenie vody a prebytočného hydrazínu sa použil Dean-Starkov odlučovač. Reakčná zmes sa ochladila na izbovú teplotu, pridala so voda a extrahovala sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyla soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo surový produkt (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én, ktorý premenil na (7a,16a,17P)-7,16-dimetyl-3-metylén-17-(l-propinyl)estr-5(10)-én-17-ol, podľa opísaných spôsobov, s teplotou topenia 57 °C.

Príklad 14

Syntéza (7a)-3-metylén-7-metylestr-5(10)-én-17-ón-O-metyloxímu

K roztoku metoxylamin.HCl (100 mg, 1,2 mmol) a octanu sodného (123 mg, 1,5 mmol) v 6 ml MeOH sa pridal (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ón (100 mg, 0,3 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri izbovej teplote počas troch dní. Pridala sa voda a roztok nasýteného hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahovala etylacetátom. Organická vrstva sa premyla soľankou, vysušila (Na₂SO₄) a odparila sa do sucha, čo poskytlo surový (7a)-3,3 -dimetoxy-7-metylestr-5 (10)-én-17-ón-O-metyloxím, ktorý sa premenil na (7a)-3-metylén-7-metylestr-5(10)-én-17-ón-O-metyloxím, opísanými spôsobmi; [a]_D = +149° (c = 0,11 v etanole).

Príklad 15

Syntéza (7a)-3-metylén-7-metylestr-5(10)-én-17-ón-oxímu

Tento oxím sa pripravil zo (7a)-3,3-dimetoxy-7-metylestr-5(10)-én-17-ónu a hydroxylamín.HCl, opísanými spôsobmi, s teplotou topenia 149 °C.

Príklad 16

Reakcia oneskorenej typovej hypercitlivosti (DTH)

Použili sa skupiny po ôsmich samiciach Balb/c (Harlan, Zeist, The Netherlands) myší, približne vo veku 8-mich týždňov na začiatku experimentu. Myši sa umiestnili v klietkach Macrolon, pri štandardných podmienkach a aklimatizovali sa tri až päť dní pred začatím experimentu. Skupinám sa podávala buď zlúčenina, alebo placebo.

Určila sa ich hmotnosť v deň 1 a v posledný deň liečby. Zvieratá sa liečili raz denne podaním podkožnej (sc) injekcie do zadnej časti krku alebo orálnym plnením žalúdka sondou od dňa 1 po deň 11 testovacou zlúčeninou v koncentračnom rozsahu od 1,2, 3, 4, 6 do 12 mg/kg. Injekčný objem bol 0,1 ml vehikula pre injekcie pozostávajúci z fyziologického soľného roztoku, obsahujúceho 0,5 % želatíny a 5 % manitolu. Do každého experimentu bola zahrnutá skupina liečená placebom (iba vehikulum) a skupina liečená 4 mg/kg dexametazónu ako referenčnou zlúčeninou.

V deň 2 boli zvieratá na dvoch miestach na prsiach vnútrokožne imunizované s 0,1 ml stabilnej suspenzie 3,75 Lf Tetanus Toxoid antigénom (TT od RIVM, Zeist, Holandsko) v 1 mg/ml dimetyldioktadecylamóniumbromidu (DDA) od Phase Sep.

V deň 9 boli zvieratá imunologický testované na ventrálnej strane pravej [R] labky 0,05 ml roztoku, obsahujúceho 50 Lf TT a 1 mg A1(OH)₃ na ml. Ľavá labka [L] (kontrolná) dostala len vehikulum s A1(OH)₃. Po 24-och a 48mich hodinách sa zmerali pomocou posuvného denzitometra hrúbky pravej a ľavej labky (parametre L alebo R) v mm a podľa vzorca: [(R-L)/L] x 100 % sa vypočítalo percento antigén-špecifického opuchnutia labky.

Výsledky

Zlúčenina	Množstvo zlúčeniny podanej sc. v mg/kg, vedúce k 50 % redukcii DTH reakcie v porovnaní s placebom
Príklad 1	1,9-3,4
Príklad 2	20
Príklad 3	11
Príklad 4	>20
Príklad 5	10
Príklad 7	6

Príklad 17

Neobézne diabetické (NOD) myši

Použité NOD myši boli buď množené v hniezde (chovné páry pôvodne získané od Hattori, Boston, USA, v generácii 58), alebo boli získané od Bomholtgärd (Dánsko) vo veku 6 až 7 týždňov.

Na posúdenie účinku zlúčenín na spontánny vývoj sialadenitis, charakterizovaného leukocytovými infiltráciami v submandibulámych žľazách, sa použili len myšie samice.

Skupiny šiestich až ôsmich myších samíc boli držané pri štandardných podmienkach a boli liečené raz denne (buď sc., alebo orálne) od veku ôsmeho týždňa až do 14-teho alebo 20-teho týždňa podaním 0,1 ml zlúčeniny (koncentrácia 1,2, 4 alebo 12 mg/kg/deň) alebo podaním placeba (iba vehikulum), alebo neboli liečené vôbec. Od 12-teho týždňa sa začali vykonávať testy na prítomnosť glukózy v moči (Diabur-test 5000, Boehringer Mannheim).

V týždni 8 (predliečená skupina ) alebo v týždni 14, alebo 20, po jednotlivých 6-tich alebo 12-tich týždňoch liečby sa zvieratá usmrtili pomocou anestézie, orgány sa vybrali, oddelili sa od tuku a zvážili sa. Submandibuláme žľazy sa fixovali v sublimovanom formaline počas 18-tich až 20-tich hodín a potom sa premiestnili do 70 %-ného alkoholu. Časti tkaniva boli zasadené do parafínu a zafarbené HE štandardnými spôsobmi. Stav častí tkaniva pre infiltráty sa vykonal mikroskopicky dvomi nezávislými pozorovateľmi štandardnými postupmi. Aktivita zlúčenín podľa vynálezu môže byť demonštrovaná v tomto teste.

Príklad 18

Kolagénová artritída

DBA-1J/BOM myšie samice sa získali od Bomholtgärd, Dánsko. Všetky zvieratá sa držali pri štandardných podmienkach a aklimatizovali sa prinajmenšom počas siedmich dní.

Vo veku 10-tich až 12-tich týždňov sa všetky zvieratá imunizovali vnútrokožne na koreni chvosta so 100 gg emulzie vyčisteného hovädzieho kolagénu typu II [CH] (2 mg/ml v 0,05M kyseline octovej), emulzifíkovaného v rovnakých objemoch Complete Freunďs Adjuvantu (CFA, obsahujúci 4 mg/ml MT H37Ra, Difco Laboratories, Detroit, USA). 21 dní po imunizácii sa intraperitoneálne podala druhá imunizačná injekcia 100 gg CH, rozpusteného v soľnom roztoku. Liečba sa aplikovala raz denne, dňom 1 počínajúc (deň pred imunizáciou), až po pitvu v dni 44.

Skupiny, pozostávajúce z9-tich až 10-tich zvierat boli ošetrované buď testovanou zlúčeninou (denne 1,5 mg/kg/deň až po deň 22, od toho dňa obmedzené na 3-krát týždenne), alebo cyklosporínom A (spočiatku 100 mg/kg/deň, od dňa 4 20 mg/kg), alebo dexametazónom (2 mg/kg/deň), alebo vehikulom (5 % Mulgofen (EL 719, GAF) v soľnom roztoku). Neošetrovaná kontrolná skupina bola zahrnutá.

Myši sa vážili každý týždeň a vyhodnocovala sa (podľa štandardných postupov) klinická artritidová aktivita (vizuálny výskyt artritídy v periférnych kĺboch) jedným pozorovateľom, neoboznámeným s faktom, aká liečba sa podáva, od dňa 19 pokračujúca každé 2 až 3 dni, po pitvu v dni 44.

Klinická artritída bola odstupňovaná na stupnici 0 až 2 na labku a bola vyjadrená ako kumulované artritídové skóre na myš, s maximálnym skóre 8. V závere experimentu sa izolovali kolenné a členkové kĺby a použili sa na rôntgenovú analýzu ako znak deštrukcie kostí, nasledované okamžitou fixáciou v 4%-nom formaldehyde na histológiu.

Rontgenové snímky sa dôkladne preskúmali použitím stereo mikroskopu a kostná deštrukcia kĺbov sa zaznamenala na stupnici 0 až 5 podľa štandardných postupov/siahajúca od nepoškodenia po úplnú deštrukciu.

Aktivita zlúčenín podľa vynálezu môže byť demonštrovaná v tomto teste.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 3-Metylén-steroidné deriváty všeobecného vzorca (I) kde

R1 je H alebo spolu s R3 tvoria β-epoxid, alebo R1 chýba, ak je v polohe 5-10 alebo 4-5 dvojitá väzba;

R2 je C|_₅-alkyl alebo CF₃;

R3 je βΗ, [ICH, alebo spolu s R1 tvoria β-epoxid, alebo R3 chýba ak je v polohe 5-10 dvojitá väzba;

R4 je H, Ci.₆-alkyl;

Y je [H, H] [OH, H], =0, [OH, C^-alkyl], [OH, C₂._s-alkenyl], [OH, C₂.₅-alkinyl] alebo Ci.₆-alkylidén, kde uvedený alkyl, alkenyl, alkinyl a alkylidén je voliteľne halogenovaný; alebo =NOR5, kde R5 je H, C].₆-alkyl; bodkované čiary znamenajú voliteľnú dvojitú väzbu;

s výhradou, že 3-metylén-steroidným derivátom nie je žiadna zlúčenina zo zoznamu: (7a,173)-7o-metyl-3-metylén-4-estrén-17-ol, (7α, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-4-én-17-ol, (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19,21-dinorpregn-4-én-17-o 1, (7a)-17-keto-7-metyl-3 -metylén-4-estrén, (7a,17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-4-én-20-ín-17-ol, 17P-hydroxy-7a-metyl-3-mctylcn-17a-(2-propenyl)-4-estrén a l7P-hydroxy-7a-metyl-3-metylén-17a-(2-metyl-2-propenyl)-4-estrén.
2. 3-Metylén-steroidný derivát podľa nároku 1, ktorý má v polohe 5-10 dvojitú väzbu a R¹ a R³ chýbajú.
3. 3-Metylén-steroidný derivát, vybraný zo skupiny pozostávajúcej z (7α, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5(l 0)-én-20-ín-17-olu;

(7a, 17β)-7-metyl-3-metylénestr-5( 10)-én-17-olu; (5[),7a,17a)-5.10-epoxy-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-ín-17-olu;

(5β,7α, 17β)-5,10-epoxy-7-metyl-3-metylénestrán-17-olu; (5a, 7 a, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-én-17-olu; (5a,7a, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-20-ín-l 7-ol; (5β,7α, 17a)-7-metyl-3-metylén-19-norpregnan-17-olu; (7a)-7-metyl-3,17-dimetylénestr-5 (10)-énu;

(7 a, 16a, 17β)-7,16-dimetyl-3-metylén-17-(1 -propinyljestr-5(10)-én-17-olu;

(7 a, 16a, 17 β)-16-etyl-7-metyl-3-metylén-17-(1 -propinyl)estr-5( 10)-én-17-olu;

(7a, 17[l)-7-mctyl-3-metylén-l 7-(l -propinyl)estr-5( 10)-én-17-olu;

(7 a, 16 β, 17β)-16-etyl-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5(10)-én-20-ín-17-ol;

(7a)-3-metylén-7-metylestr-5( 10)-énu; (7a)-3-metylén-7-metylestr-5(l 0)-én-17-ón-O-metyloxímu alebo (7a)-3-metylén-7-metylestr-5 (10)-én-17-ón-oxímu.
4. 3-Metylén-steroidný derivát, ktorým je (7α,17α)-7-metyl-3-metylén-19-norpregn-5(l 0)-én-20-ín-17-ol.
5. 3-Metylén-steroidný derivát podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na použitie ako liek.
6. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje 3-metylén-steroidný derivát podľa nárokov 1 až 4 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ alebo solvát, spolu s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou.
7. Použitie 3-metylén-steroidných derivátov všeobecného vzorca (I)

d), kde

R1 je H alebo spolu s R3 tvoria β-epoxid, alebo R1 chýba, ak je v polohe 5-10 alebo 4-5 dvojitá väzba;

R2 je C|.₅-alkyl alebo CF₃;

R3 je βΗ, [JCH₃ alebo spolu s R1 tvoria β-epoxid, alebo R3 chýba ak je v polohe 5-10 dvojitá väzba;

R4 je H, C^-alkyl;

Y je [H, H] [OH, H], =0, [OH, 0,^-alkyl], [OH, C₂.₅-alkenyl], [OH, C₂_5-alkinyl] alebo C^-alkylidén, kde uvedený alkyl, alkenyl, alkinyl aalkylidén je voliteľne halogenovaný; alebo =NOR5, kde R5 je H, C|.₆-alkyl; bodkované čiary znamenajú voliteľnú dvojitú väzbu;

na výrobu lieku na liečenie a/alebo profylaxiu artritických chorôb a/alebo autoimunitných chorôb.