SK282305B6 - Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku - Google Patents

Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku Download PDF

Info

Publication number
SK282305B6
SK282305B6 SK329-96A SK32996A SK282305B6 SK 282305 B6 SK282305 B6 SK 282305B6 SK 32996 A SK32996 A SK 32996A SK 282305 B6 SK282305 B6 SK 282305B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
galacturonide
degree
polymerization
germs
adherence
Prior art date
Application number
SK329-96A
Other languages
English (en)
Other versions
SK32996A3 (en
Inventor
Josef Peter Guggenbichler
Peter Meissner
Johann Jurenitsch
Bettignies-Dutz Andreas De
Original Assignee
Josef Peter Guggenbichler
Johann Jurenitsch
Bettignies-Dutz Andreas De
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Josef Peter Guggenbichler, Johann Jurenitsch, Bettignies-Dutz Andreas De filed Critical Josef Peter Guggenbichler
Publication of SK32996A3 publication Critical patent/SK32996A3/sk
Publication of SK282305B6 publication Critical patent/SK282305B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku na inhibíciu adherencie zárodkov na bunky cicavcov, kde jeden alebo viaceré galakturonidy s polymerizačným stupňom >= 2 a esterifikačným stupňom < 20 %, prípadne spolu s farmaceuticky prijateľnými nosičmi, riediacimi, pomocnými a plniacimi látkami, sú vyrobené vo forme vhodnej na podanie.ŕ

Description

Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka spôsobu výroby farmaceutického prostriedku na blokovanie adherencie zárodkov na bunky cicavcov.
Doterajší stav techniky
Galakturónové kyseliny majú široký rozsah použitia, ako je opísané napríklad v Hcinrichová a Šimon (Biológia, Vol. 46, s. 1081 až 1087, 1991). Známe použitia zahŕňajú napríklad použitie na kategorizáciu a klasifikovanie galakturonanáz a pektátlyáz alebo ako ligandy na selektívnu bioafinitnú chromatografiu. K známym účinkom patrí spúšťanie obranných mechanizmov vyšších rastlín a odstránenie toxických katiónov, ako napr. Cd2+,Cu2+ a Pb2+ v ľudskom gastrointestinálnom trakte. Roztoky výťažkov, ako aj šťavy z rôznych rastlinných produktov, sú v ľudovom liečiteľstve a v klinickom lekárstve známe svojimi účinkami proti ochoreniam v intestinálnom a urogenitálnom trakte, spôsobeným patogénnymi zárodkami. Farmaceutický účinok týchto prostriedkov v intestinálnom trakte bol doteraz vysvetľovaný reguláciou hospodárenia s vodou pomocou pektínov existujúcich v rastlinných produktoch.
Adherencia zárodkov, ako aj bakteriálnych mikroorganizmov na bunky je prvý krok pri vypuknutí každej infekcie. Až keď sa zárodky (napríklad baktérie a/alebo vírusy) naviažu na špecifické receptory na povrchu bunky a tým sa vyhnú telu vlastnej nešpecifickej obrane, ako je peristaltika, muciláma clearance, sekrečný tok, atď., môžu sa tu rozmnožiť, vniknúť do tela, rozvinúť toxické účinky a tým vytvoriť obraz choroby.
EP-A-0080442 objasňuje viacstupňový postup chemickej syntézy na výrobu oligosacharidov, ako aj oligogalaktozidov z pektínu, prípadne polygalakturónovej kyseliny. Z toho možno predvídať farmaceutické použitie oligosacharidov a acylovaných derivátov, vychádzajúc zo správ, ktoré naznačujú inhibičný účinok určitých galaktozidov, prípadne ich metyl- a p-nitrofenylderivátov, na adherenciu uropatogénnych Coli baktérií na určité červené krvinky.
Elegantným krokom antimikrobiálnej terapie by bolo, keby sa adherencia zárodkov ako podstatný mechanizmus virulencie oslabila a tým by sa telu umožnilo odplaviť zárodky z povrchu buniek, prípadne ich odtiaľ vytlačiť. Z toho vyplýva úloha predloženého vynálezu pripraviť prostriedok, ktorý blokuje adherenciu zárodkov na bunky cicavcov, najmä na epiteliálne bunky.
Podstata vynálezu
Táto úloha sa týka spôsobu prípravy farmaceutického prostriedku na inhibíciu adherencie zárodkov na bunky cicavcov, kde jeden alebo viaceré galakturonidy s polymerizačným stupňom ž 2 a esterifikačným stupňom < 20 %, prípadne spolu s farmaceutický prijateľnými nosičmi, riediacimi, pomocnými a plniacimi látkami, sú vyrobené vo forme vhodnej na podanie.
Prekvapujúco sa zistilo, že pomocou mrkvovej polievky klasicky pripravenej podľa MORa, pomocou urologického čaju (napríklad zmes prasličky roľnej, prvosienky jarnej, jahodových listov, islandského machu) pomocou kokosového mlieka, kaliny, atď., je možné (to znamená až do 90 %) redukovať adherenciu patogénnych zárodkov, ako napríklad E. coli, na bunky, najmä na epitelové bunky gastrointestinálneho a urogenitálneho traktu. Tento účinok sa dá odvodiť od pektínov, ktoré sú obsiahnuté v rastlinných produktoch, pri ktorých ide o určité reťazce 1,4-d-glykozidicky viazané galakturonidy, ktorých kyselinové skupiny sú od 20 do 80 % esterifikované metanolom a popri kyseline galakturónovej môžu v danom prípade obsahovať aj iné stavebné látky cukrov, napríklad glukózu, galaktózu, xylózu a arabinózu.
S prekvapením sa zistilo, že pektíny, prípadne galakturonidy, ktoré sa doteraz používali na tvorbu želatíny, ako zahusťovadlo alebo ako balastná látka, blokujú adherenciu zárodkov na bunky cicavcov a najmä na ľudské bunky.
Galakturonid účinný pri blokovaní adherencie zárodkov musí má určitý polymerizačný stupeň a najmä určitý esterifikačný stupeň. Pojem „polymerizačný stupeň” označuje v zmysle predloženého vynálezu počet jednotiek kyseliny galakturónovej, ktoré galakturonid obsahuje. Pojem „esterifikačný stupeň” označuje percentá (väčšinou metylom) esterifikovaných jednotiek kyseliny galakturónovej jedného galakturonidu vzťahujúc sa na celkový počet jednotiek galakturónovej kyseliny. Zistilo sa, že na blokovanie adherencie zárodkov na bunky cicavcov je potrebný polymerizačný stupeň > 2, to znamená, že monoméma kyselina galakturónová má, rovnako ako veľký počet iných sacharidov (napríklad neutrálne sacharidy, kyselina glukónová, arabinogalaktan, galaktóza-1-fosfát, glukóza-1-fosfát), žiadne blokovanie adherencie zárodkov. Vo výhodnom spôsobe výroby farmaceutického preparátu podľa vynálezu je esterifikačný stupeň galakturonidov < 20 %, obzvlášť výhodný < 10 % a ešte výhodnejší < 5 %. Najviac je výhodné, ak v podstate neexistujú žiadne ( < 2 % ) esterové skupiny. Galakturonidy s esterifikačným stupňom < 20 % sú získateľné z pektínov vyskytujúcich sa v prírode úplnou alebo čiastočnou demetylizáciou, napríklad zmydelnením s alkáliami. Polymerizačný stupeň galakturonidov vo vynájdenom preparáte je > 2, to znamená, že galakturonid má minimálne 2 jednotky kyseliny galakturónovej. Výhodný polymerizačný stupeň galakturonidu je 2 až 7, viac výhodný je 2 až 4, obzvlášť výhodný je 2 až 3 a najvýhodnejší je 2. To znamená, že digalakturonid, trigalakturonid, tetregalakturonid, pentagalakturonid, hexagalakturonid, heptagalakturonid a zmesi viacerých týchto substancií sú výhodnými galakturonidmi pre vynájdené prostriedky, pričom najvýhodnejší je digalakturonid, prípadne digalakturonová kyselina. V závislosti od spôsobu použitia sa môžu používať aj prostriedky, ktoré z hľadiska účinku neobsahujú najlepšie substancie, keď je táto substancia z farmaceuticko-technologických dôvodov menej výhodná na špeciálne aplikačné formy.
Galakturonidy s polymerizačným stupňom 2 až 4 možno z vyššie molekulárnych pektínov vyskytujúcich sa v prírode získať enzymatickou hydrolýzou s použitím pektín štiepiacich enzýmov (napríklad pektináza), ktoré sa priemyselne získavajú najmä z húb, ako napríklad Aspergillus alebo penicilínotvomých druhov. Na druhej strane môže byť hydrolýza vyššie molekulárnych pektínov prevedená aj kyslou hydrolýzou napríklad HC1. Vynájdené farmaceutické prostriedky môžu blokovať prichytávanie zárodkov, obzvlášť bakteriálnych zárodkov (napríklad E. coli, streptokoky, Haemophilis influenzae, pneumokoky, atď.) na bunky cicavcov, prípadne už naviazané zárodky vytlačiť. Obzvlášť sú prostriedky podľa vynálezu vhodné na liečbu infekcií gastrointestinálneho traktu (napríklad kolonizácia horných úsekov tenkého čreva pri hnačkovom ochorení), krvného systému (hemolytický uremický syndróm, zapríčinený E. coli 0157), dýchacích ciest (napríklad stúpajúce infekcie u pacientov v intenzívnej starostlivosti napojených na umelé dýchanie), urogenitálneho traktu (napríklad recidivujúce infekcie močového traktu) a/alebo nosohltanovej
SK 282305 Β6 dutiny (napríklad streptokokmi, H. influenzae, pneumokokmi).
Vynájdené farmaceutické prostriedky podľa vynálezu môžu byť podávané pri už existujúcej chorobe a rovnako aj profylaktický. Možno uvažovať o nasledovných možnostiach aplikácie:
a) perorálna aplikácia pri liečbe gastrointestinálneho traktu, močového traktu, ako prísada do rehydratačných roztokov, ako profylaktikum proti kolonizácii patogénov v žalúdočno-črevnom trakte, atď., u pacientov v intenzívnej starostlivosti s umelým dýchaním,
b) povrchová aplikácia na ošetrenie nosohltanovej dutiny, urogenitálneho traktu, atď. a
c) parenterálne podávanie.
Galakturonidy ako súčasti štruktúry polysacharidov sa vyskytujú vo veľkom množstve potravín a potravinových pomocných látok a sú takto prijímané perorálne, to znamená, že nie sú toxické a sú zvlášť vhodné na farmaceutické použitie. Získavanie galakturonidov používaných pri farmaceutických prostriedkoch podľa vynálezu možno dosiahnuť z polysacharidov vyskytujúcich sa v rastlinách, napríklad z mrkvy, citrusového ovocia, jabĺk, cukrovej repy, kokosového mlieka a iných rastlín alebo rastlinných produktov. Z dôvodov získania galakturonidov sa východiskové materiály najprv rozdrobia a extrahujú horúcou vodou. Extrakty sa môžu najprv lyofilizovať alebo ich možno ďalej priamo spracovať. Ďalšie spracovanie prebieha prevažne použitím chromatografických metód, ktorými je možné oddelenie galakturonidov od ostatných súčastí extraktu (napríklad iných sacharidov). Výhodnými deliacimi chromatografickými metódami sú gélová chromatografia (napríklad oddelovače BioGelR, SephacrylR) a/alebo chromatografia na anexoch (napríklad DEAE-SephacelR- oddeľovacie látky). Získané pektíny môžu byť ďalej čiastočne alebo úplne zmydelnené, aby sa znížil esterifikačný stupeň a/alebo hydrolyzované prostredníctvom opracovania kyselinou, prípadne enzymaticky, aby sa znížil polymerizačný stupeň. Na objasnenie vynálezu slúžia ďalej nasledovné príklady.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Čerstvé mrkvy sa umyjú, olúpu a nastrúhajú. Extrakciou s vriacou vodou a následnou lyofilizáciou sa získajú vodné roztoky polysacharidov.
Nasleduje prvý deliaci stupeň gélovou chromatografiou na stĺpci s BioGelom P2 a destilovanou vodou ako eluentom. Substancie, ktoré eluujú vo vylučovacom objeme tohto stĺpca sa spoja a druhýkrát sa oddelia gélovou chromatografiou. Ako deliaca látka slúži Sephacryl S-3000 HR a ako eluent opäť destilovaná voda. Z dvoch substančných píkov, ktoré sa teraz objavia, sa zozbiera ten, ktorý eluuje neskôr. Tretím krokom úpravy je chromatografia na ionexoch DEAE - Sephacel s pufrovým gradientom ako eluentom (0,011 M až 1 M fosfátového pufra, pH 6,4). Frakcia, ktorá eluuje pri vyššej molarite (SF II), sa spojí a ďalej spracováva. Potom nasleduje hydrolýza s HC1 (pH 1,00,37 C, 45 minút) a spätné získavanie sacharidov alkoholovým zrážaním. Hydrolyzát sa pomocou gélovej chromatografie (Sephacryl S-2000HR, eluent: destilovaná voda) rozdelí do troch skupín látok, pričom sa pozbierajú uhľohydráty s najmenšou molekulovou hmotnosťou (SF 2/3). Antiadhezívna aktivita frakcií, s ktorými sa ďalej pracuje, prevyšuje aktivitu prípadných vedľajších produktov. Inhibíčna intenzita jednotlivých substancií stúpa v priebehu spracovania z 50 % v 0,7 %-nom roztoku (pri SF A) nad 86,4 % v 0,005 %-nom roztoku (pri SF II) až po úplnú inhibíciu rovnako v 0,005 %-nom roztoku (pri SF 2/3). Z tohto vyplýva, že so zvyšujúcou sa čistotou, je koncentrácia potrebná na určitý účinok značne menšia. Toto je v protiklade s pektínmi dostupnými komerčne, ktoré musia byť použité vo veľmi vysokej koncentrácii, aby sa dosiahli podobné účinky.
Príklad 2
Zmydelnenie
11,3 g citruspektínu, Fa Grindstedt (Substancia AJ sa rozpustí v 1200 ml destilovanej vody, zmieša sa s 480 ml 0,5 N NaOH a 15 min. sa pri izbovej teplote zmydelňuje. Roztok sa upraví kyselinou mravčou na pH 4,0. Zmydelnený pektín sa vyzráža s dvojitým množstvom metanolu, rozpustí sa v 200 ml vody a zrážanie sa ešte dvakrát rovnakým spôsobom opakuje. Naposledy získaná zrazenina sa vysuší pri 50 “C (Substancia AJ. Navážka: 7,15 g.
Enzymatická hydrolýza
Usušená zrazenina sa rozpustí v 100 ml 0,1 M roztoku nátriumhydrogenkarbonátu, kyselinou mravenčou (IM) sa upraví pH na 4,5, zmieša sa s 21 mg pektinázy 5S z Aspergillus niger (SERVA) a počas 60 minút sa pri teplote 60 °C inkubuje. Usadenina sa krátko ohreje na 80 °C kvôli aktivácii enzýmov, ochladí sa a opísaným postupom sa vyzráža s metanolom. Centrifugovaním (20 minút, 4000 otáčok/min.) sa získa zrazenina a vysuší sa. Navážka: 5g (substancia A2). Tenkovrstvovou chromatografickou kontrolou sa otestuje, či hydrolýza vytvorila dostatočné množstvá požadovaných oligogalakturonidov.
Podmienky tenkovrstvovej chromatografie
Stacionárna fáza : DC - hotové platne Silikagél 60 (MERCK), 10 cm x 20 cm
Rozpúšťadlo: etanol/roztok kyseliny octovej 25 mM 1:1
Vyvíjanie: pri 35 °C
Činidlo na detekciu: 200 mg naftalín-l,3-diolu v 50 ml metanolu plus 50 ml H2SO4 (20 % g/g)
Chromatografia
1,5 g produktu hydrolýzy sa rozpustí v 15 ml destilovanej vody a podrob! sa chromatografickej frakcionácii.
Stĺpec: Sklenený stĺpec Bio-Rad (2,5/40 cm) obsah lôžka 150 ml
Eluent: Mravčan sodný ako pufer pH 4,7, stupňový gradient každých 182 ml 0,2,0,3,0,4, 0,5,0,6,0,7 M Stacionárna fáza: Bio-Rad AGMP 1 anexová živica (rovnovážne s eluentom)
Prietoková rýchlosť: 3ml/minutu Objem frakcie: 22 ml
Jednotlivé frakcie sa hodnotia na svoje zloženie pomocou DC (podmienky pozri hore). Frakcie rovnakého zloženia sa spoja a vyzrážajú sa s dvojitým objemom acetónu. Týmto spôsobom a za týchto podmienok sa oligogalakturonidy získajú centrifúgáciou (4000 otáčky/minútu) a pridajú sa do 20 ml destilovanej vody.
Do roztoku sa primieša Bio-Rad AG 50 W X-8 katex (H+), aby sa galakturonidy previedli do formy voľnej kyseliny. Po odstránení živice a po lyofilizácii filtrátu sa získa vločkovitý biely prášok. Výsledky inhibicie sú uvedené v tabuľke 1.
SK 282305 Β6
Tabuľka 1
Označenie substancie Charakteristika Koncentrácia v % Inhibícia v%
Ao Pektín USP1' 0,7 15,3
Aj zmydelnený pektín 0,2 10,0
Az čiastočne hydrolyz. A1 0,05 30,2
Fl neutrálny Di- a Trisacharid 0,005 0,0
F? neutrálny trisacharid 0,005 0,0
F, neutrálny tetrasacharid 0,005 0,0
f4 trigalakturonid 0,005 84,6
f5 tetragalakturonid so stopami trigalakturonidu 0,005 58,6
f6 tetragalakturonid 0,005 52,7
f7 penta-hexagalakturonid 0,005 23,9
''citruspektín (Grindstedt)
Metódy na skúšanie účinnosti inhibície
Test adhézie
1) Hemaglutinácia ľudských 0+ erytrocytov
Po zlúčení erytrocytov so zárodkami dochádza pri silne hemaglutinujúcich kmeňov do 20-tich sekúnd k aglutinácii erytrocytov, ktorá zodpovedá, čo do intenzity neznášanlivosti krvných skupín.
Koncentrácia erytrocytov: 1 až 1,5 % Suspenzia zárodkov: kalná suspenzia OD 1 pri 462 nm=109 zárodkov/ml.
Pri hodnotení inhibície aglutinácie sa zárodky pred pridaním k erytrocytom inkubujú 2 hodiny s uhľohydrátovými roztokmi želanej koncentrácie a potom sa hemaglutinácia semikvantitatívne hodnotí okom.
2) Adherencia na ľudské uroepitélie
Uroepitélie z ranného moču sa izolujú centrifúgáciou. Suspenzie zárodkov sa spoja s epitelovými bunkami a inkubujú, potom sa prefiltrujú cez 8 μ polykarbonátový filter a viackrát sa premyjú. Filtre sa odstránia, dajú sa do fyziologického roztoku NaCl a epitelové bunky sa pretrepávajú. Suspenzia NaCl sa opäť centrifuguje a sediment sa nanesie na podložné sklíčko, zafarbí sa podľa May Griinwalda a Giemsu a priľnuté zárodky sa spočítajú na 50 epitelových buniek. Kontroly: epitelové bunky bez kontaktu so zárodkami. Inhibícia adherencie: rovnaká metóda, len zárodky sa pred pridaním do suspenzie epiteliálnych buniek na 1 až 3 hodiny vložia do roztoku (0,5 0,1 0,05 0,001 %) rôznych uhľohydrátov. Použité zárodky: 4 E. coli- kmene divokého typu, ktoré sa izolujú od pacientov, a 2 komerčné kmene sa použijú v rovnakých množstvách.
Výsledky
V rámci mikrobiologických sledovaní sa popri taxatívne vytváraných kyslých oligo- a polysacharidov použijú aj neutrálne sacharidy, ktoré nemajú žiadne inhibičné účinky na adherenciu (napríklad fruktány ako inulín, disacharidy ako laktóza a laktulóza, atď.)
Natívne, to znamená extrakciou získané pektíny účinok inhibujúci adherenciu, ktorý však môže byť ďalším spracovaním, napríklad zmydelnením a hydrolýzou zvýšený.
Tak v uvedenej testovacej vzorke mal pektín získaný vodnou extrakciou z mrkiev 46 % inhibíciu v 1 % roztoku testovanej vzorky, inhibícia purifikovaných produktov z tej istej vzorky pri koncentrácii 0,1 % bola 80 %.
V nasledovnej tabuľke 2 sú zhrnuté ďalšie výsledky mikrobiologických sledovaní.
Inhibícia bakteriálnej adhézie na epiteliálne bunky zvolenými substanciami v %:
Tabuľka 2
Označenie substancie Koncentrácia v% Inhibícia v %
vodný extrakt z mrkvy'1 1 46,0
SF A (pozri príklad 1) 0,7 50,0
SF II (pozri príklad 1) 0,005 86,4
SF 2/3 (pozri príklad 1) 0,005 113,5
Kys. polygalakturónová z pomarančov 0,2 99,0
Kys. polygalakturónová z pomarančov 0,05 72,0
Kyselina monogalakturónová 1 žiadna inhib.
Kyselina digalakturónová 0,005 91,7
Trigalakturonid2' 0,005 84,6
Tetragalakturonid2' 0,005 52,7
Penta-hexagalakturonid 0,005 23,9
Arabinogalaktan 0,005 žiadna inhib.
Jablčný pektín 0,05 20,5
Pektínová kyselina z jabĺk 0,05 64,8
Galaktóza-1 -fosfát 0,005 3,4
Glukóza-1-fosfát 0,005 žiadna inhib.
Kyselina glukorónová 0,005 žiadna inhib.
''podobne ako príklad 1 2)získaný podobne ako v príklade 2
Ako je viditeľné z tabuľky 2, zvýšenie účinku sa dá odvodiť v závislosti od esterifikačného stupňa a od veľkosti molekúl (polymerizačného stupňa). Výhodné výsledky sa získajú pri polymerizačnom stupni 2 až 7.
Zmydelnením (to znamená odstránením esterových skupín) sa rovnako zistilo zlepšenie inhibície.

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku na inhibíciu adherencie zárodkov na bunky cicavcov, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viaceré galakturonidy s polymerizačným stupňom > 2 a esterifikačným stupňom < 20 %, prípadne spolu s farmaceutický prijateľnými nosičmi, riediacimi, pomocnými a plniacimi látkami sú spracované do formy vhodnej na podanie.
  2. 2. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že esterifikačný stupeň galakturonidu je < 10 %.
  3. 3. Spôsob podľa nároku 1 alebo 2, vyznačujúci sa t ý m , že esterifikačný stupeň galakturonidu je < 5 %.
  4. 4. Spôsob podľa jedného z nárokov laž 3, vyznačujúci sa tým, že polymerizačný stupeň galakturonidu je 2 až 7.
  5. 5. Spôsob podľa jedného z nárokov laž 4, vyznačujúci sa tým, že polymerizačný stupeň galakturonidu je 2 až 6.
  6. 6. Spôsob podľa jedného z nárokov laž 5, vyznačujúci sa tým, že polymerizačný stupeň galakturonidu je 2 až 5.
    SK 282305 Β6
  7. 7. Spôsob podľa jedného z nárokov laž 6, vyznačujúci sa tým,žepolymerizačnýstupeňgalakturoniduje 2 až 4.
  8. 8. Spôsob podľa jedného z nárokov laž 7, vyznačujúci sa tým,žepolymerizačnýstupeňgalakturonidu je 2 až 3.
  9. 9. Spôsob podľa jedného z nárokov laž 8, vyznačujúci sa tým,žepolymerizačnýstupeňgalaktuTonidu je 2.
  10. 10. Spôsob podľa jedného z nárokov 1 až 9 na výrobu farmaceutického prostriedku na liečbu infekcií gastrointestinálneho traktu, krvného systému, dýchacích ciest, urogenitálneho traktu a/alebo nosohltanovej dutiny.
SK329-96A 1993-09-10 1994-09-08 Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku SK282305B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4330773A DE4330773A1 (de) 1993-09-10 1993-09-10 Blockierung der Anlagerung von Keimen an menschliche Zellen
PCT/EP1994/003006 WO1995007084A1 (de) 1993-09-10 1994-09-08 Blockierung der anlagerung von keimen an menschliche zellen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK32996A3 SK32996A3 (en) 1997-03-05
SK282305B6 true SK282305B6 (sk) 2002-01-07

Family

ID=6497409

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK329-96A SK282305B6 (sk) 1993-09-10 1994-09-08 Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku

Country Status (16)

Country Link
US (1) US5683991A (sk)
EP (1) EP0716605B1 (sk)
JP (1) JP3798425B2 (sk)
AT (1) ATE174222T1 (sk)
AU (1) AU679262B2 (sk)
CA (1) CA2171197A1 (sk)
CZ (1) CZ288050B6 (sk)
DE (2) DE4330773A1 (sk)
DK (1) DK0716605T3 (sk)
ES (1) ES2127940T3 (sk)
GR (1) GR3029619T3 (sk)
HU (1) HU223043B1 (sk)
PL (1) PL313393A1 (sk)
RU (1) RU96107098A (sk)
SK (1) SK282305B6 (sk)
WO (1) WO1995007084A1 (sk)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19503423A1 (de) * 1995-02-03 1996-08-08 Beiersdorf Ag Antiadhäsive Wirkstoffe
US5951965A (en) * 1998-08-28 1999-09-14 Colgate Palmolive Company Method for visually demonstrating the effectiveness of an anti-bacteria attachment composition
AU730929B2 (en) * 1999-07-06 2001-03-22 Nestec S.A. Composition and method for prolonging the useful life of enteral feeding tubes
DE10006989A1 (de) * 2000-02-16 2001-08-23 Nutricia Nv Antiadhäsive Kohlenhydratmischung
DE10057976B4 (de) 2000-11-22 2005-02-03 Südzucker AG Mannheim/Ochsenfurt Verfahren zur Herstellung von Pektinhydrolyseprodukten
DE10061574A1 (de) * 2000-12-11 2002-06-13 Josef Peter Guggenbichler Blockierung der Anlagerung von Keimen bei Vögeln
FR2831819B1 (fr) * 2001-11-08 2004-09-03 Rocher Yves Biolog Vegetale Utilisation d'oligosaccharides dans des compositions cosmetiques ou dermatologiques pour stimuler l'adhesion de keratinocytes sur les proteines majeures de la jonction dermo-epidermique
FR2852242B1 (fr) * 2003-03-13 2007-09-14 Utilisation d'oligogalacturonides en cosmetique ou pour la preparation d'une composition dermatologique ou pharmaceutique
GB0321996D0 (en) * 2003-09-19 2003-10-22 Novartis Nutrition Ag Organic compounds
US8110215B2 (en) * 2004-04-30 2012-02-07 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Personal care products and methods for inhibiting the adherence of flora to skin
BRPI0514482A (pt) * 2004-08-18 2008-06-17 Biolog Health Solutions Pty Lt composições herbais para a prevenção ou tratamento de incontinência urinária e bexiga superativa
GB2430881B (en) * 2005-10-06 2010-10-13 Ntnu Technology Transfer As Oligoelectrolyte polyols for the treatment of mucosal hyperviscosity
GB0707096D0 (en) * 2007-04-12 2007-05-23 Ntnu Technology Transfer As Method
SI2268142T1 (sl) 2007-11-27 2017-09-29 Algipharma As Uporaba alginiranih oligomerov v boju proti biofilmom
GB0904942D0 (en) 2009-03-23 2009-05-06 Ntnu Technology Transfer As Composition
GB0904941D0 (en) 2009-03-23 2009-05-06 Ntnu Technology Transfer As Composition
GB0909529D0 (en) * 2009-06-03 2009-07-15 Algipharma Ipr As Alginate oligomers for the inhibition of microbial adherence to surfaces
PT2437784E (pt) 2009-06-03 2014-02-13 Algipharma As Oligómeros de alginato para utilização na ultrapassagem da resistência de bactérias contra múltiplos fármacos
WO2011060474A1 (de) 2009-11-20 2011-05-26 Erber Aktiengesellschaft Verfahren zur herstellung eines futtermittelzusatzes sowie futtermittelzusatz
US20150080826A1 (en) * 2013-08-28 2015-03-19 The Procter & Gamble Company Substrate comprising oligogalacturonides and disposable absorbent article comprising the substrate
DE102013022109A1 (de) * 2013-12-27 2015-07-02 Markus Paulmichl Oligo-(2-7)-Glucuronat umfassendes Medikament (zweite medizinische Indikation)

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2987448A (en) * 1959-12-11 1961-06-06 Oil Seed Products Inc Recovery of galacturonic acid
US4521592A (en) * 1981-10-23 1985-06-04 Svenska Sockerfabriks Ab Compounds for therapeutic or diagnostic use, a process and intermediates for their preparation
US4885128A (en) * 1985-07-30 1989-12-05 Janez Megusar Method for improving performance of irradiated structural materials
GB8803157D0 (en) * 1988-02-11 1988-03-09 Nat Res Dev Denture protection
US5055455A (en) * 1988-09-28 1991-10-08 Brigham And Women's Hospital Capsular polysaccharide adhesin antigen, preparation, purification and use
WO1991016449A1 (en) * 1990-04-16 1991-10-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis
US5523014A (en) * 1994-05-16 1996-06-04 Gojo Industries, Inc. Flowable, pumpable cleaning compositions and method for the preparation thereof

Also Published As

Publication number Publication date
JPH09502195A (ja) 1997-03-04
EP0716605A1 (de) 1996-06-19
DK0716605T3 (da) 1999-08-16
HUT74431A (en) 1996-12-30
CA2171197A1 (en) 1995-03-16
AU7695694A (en) 1995-03-27
DE4330773A1 (de) 1995-03-16
GR3029619T3 (en) 1999-06-30
WO1995007084A1 (de) 1995-03-16
JP3798425B2 (ja) 2006-07-19
ES2127940T3 (es) 1999-05-01
EP0716605B1 (de) 1998-12-09
AU679262B2 (en) 1997-06-26
RU96107098A (ru) 1998-07-27
US5683991A (en) 1997-11-04
ATE174222T1 (de) 1998-12-15
PL313393A1 (en) 1996-06-24
HU9600602D0 (en) 1996-05-28
CZ70896A3 (en) 1996-10-16
HU223043B1 (hu) 2004-03-01
DE59407457D1 (de) 1999-01-21
CZ288050B6 (cs) 2001-04-11
SK32996A3 (en) 1997-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK282305B6 (sk) Spôsob prípravy farmaceutického prostriedku
US5322841A (en) Method for producing neutral glucans for pharmaceutical applications
JP4965043B2 (ja) 抗癒着性炭水化物
US4857512A (en) Immunostimulating polysaccharides, method for using such, and pharmaceutical preparations containing them
JP4948162B2 (ja) 新規アラビノガラクタン及び抗糖尿病薬
US6420348B1 (en) Pectic polysaccharides purified from Angelica gigas nakai and purification method and use as immunostimulating agent thereof
Mzoughi et al. Pectic polysaccharides from edible halophytes: Insight on extraction processes, structural characterizations and immunomodulatory potentials
EP0296626B1 (en) Anti-hiv agents and method of producing the same
JP6205350B2 (ja) 同じ多糖鎖の４位または６位でバイオテクノロジー的に硫酸化されたコンドロイチン硫酸、およびその調整方法
JPH0245499A (ja) オタネニンジン糖タンパク質およびその用途
EP0894001A1 (en) Inhibitor of immunoglobulin e antibody production
JPH0245501A (ja) 竹節ニンジン多糖およびその用途
KR20010040752A (ko) 에이즈 치료제
KR101989980B1 (ko) 청귤 추출박 또는 청피 유래의 항암 또는 면역활성 다당 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물
US20240148778A1 (en) Glycoside inhibitors of yeast
JPH06256198A (ja) 血中コレステロール上昇抑制剤
RU2281104C2 (ru) Блокирование накопления микроорганизмов у птиц
JP3048628B2 (ja) 還元ヘキサ―ｎ―アセチル―キトヘキサオースを有効成分とする抗腫瘍剤
JP2000159809A (ja) シイタケ菌糸体抽出物の分画物及びその用途
TW202410907A (zh) Cs-4發酵菌絲體雜聚多醣及其製備方法與用途
CN116253806A (zh) 一种黄精果聚糖、药物组合物及应用
JPH06135839A (ja) コレステロール抑制剤
JPH0345601A (ja) クレブシエラ属から抽出されたガラクタン、その製造方法及び薬剤としての使用
JPH10287571A (ja) ヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤
JP2000159807A (ja) シイタケ菌糸体抽出物の分画物及びその用途

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20090908