JPH10287571A - ヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ヘリコバクター・ピロリによる胃粘膜上皮細
胞への接着を阻害するヘリコバクター・ピロリ接着阻害
剤を提供することを目的とする。 【解決手段】 グルクロン酸含有フコイダンを有効成分
とするヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヘリコバクター・
ピロリ（Helicobacter pylori）接着阻害剤に関する。
さらに詳しくは、胃粘膜上皮細胞へのヘリコバクター・
ピロリ接着阻害剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、強酸性である胃内には細菌は棲息
していないと考えられていた。しかし、オーストラリア
のＷａｒｒｅｎ、Ｍａｒｓｈａｌｌらは、ヒトの胃粘膜
からヘリコバクター・ピロリという鞭毛を有するグラム
陰性桿菌を単離し、培養に成功した（Warren J R et a
l、Lancet、１、１２７３（１９８３）参照）。種々の
研究の結果、この菌は胃炎（Morris. A et al、Am. J.
Gastroenterol.、８２、１９２（１９８７）参照）や胃
十二指腸潰瘍（Asaka. M et al、Gastroenterol. Ja
p.、２８（suppl. 5）１６３（１９９３）参照）、さら
には胃癌（Personnet.J et al、N. Eng. J. Med.、３２
５、１１２７（１９９１）参照）の発症に関与すること
が強く推察されている。さらにこの菌の除菌により胃炎
や胃十二指腸潰瘍の再発が見られなくなることから（Ma
rshall B J et al、Lancet、２、１４３７（１９８８）
参照）、Ｈ₂ブロッカーなどを用いた従来型の治療で見
られた再発という現象にこの細菌が大きく関与している
ことが明らかになった。

【０００３】近年、抗生剤とプロトンポンプインヒビタ
ーを用いたヘリコバクター・ピロリの除菌治療が行なわ
れているが、大量の抗生剤を長期投与する必要があるた
め、副作用や耐性菌の出現などの問題が生じており（Ma
eyama. H et al、日本消化器病学会雑誌、９２、２３７
（１９９５）参照）、より副作用の少ないヘリコバクタ
ー・ピロリ除菌剤の開発が求められている。そこで、我
々は、新たなヘリコバクター・ピロリ除菌剤の開発を目
指して、ヘリコバクター・ピロリと胃粘膜上皮細胞の接
着過程に注目した。

【０００４】ヘリコバクター・ピロリはアンモニアの産
生源であるウレアーゼや重炭酸イオン、各種栄養物質に
対する正の走化性（これらの物質、つまりウレアーゼや
重炭酸イオン、各種栄養物質の産生源へ移動する）およ
び、酸に対する負の走化性を有しており、これらの条件
のえられる部位、つまり幽門部の上皮細胞（ｐＨ７〜
８）に最初に接着する（中澤晶子、日本細菌学雑誌、５
０（３）、７７７（１９９５）参照）。この際、ヘリコ
バクター・ピロリ側では、ｉｃｅ遺伝子（上皮と接触す
ることにより誘導される遺伝子）由来の２０．６ｋＤａ
のタンパクの産生が高まり、接着能が亢進することが報
告されている（杉山敏郎、Mebio、１３（１０）、２５
（１９９６）参照）。また、ヘリコバクター・ピロリと
細胞との接着には硫酸化糖（Sloamiany B L et al、Bio
chem. International、１９（４）、９２９（１９８
９）参照）やフコース（Falk. P、Proc. Natl. Acad. S
ci. U.S. A.、９０、２０３５（１９９３）参照）、シ
アル酸糖（Evans D G et al、J. Bacteriol.、１７５、
６７４（１９９３）参照）の関与が報告されている。

【０００５】フコースはＡＢＯ式血液型のうちＯ型の血
液型物質の糖鎖を構成する糖の中の１つであり、フコー
スを有するルイス血液型抗原Ｌｅｗｉｓ ｂにヘリコバ
クター・ピロリが結合したという報告がサイエンス誌
（Boren. T et al、Science、２６２、１８９２（１９
９３）参照）に掲載され注目を集めたが、Ｌｅｗｉｓｂ
分泌型、非分泌型でヘリコバクター・ピロリ感染率に差
違を認めないとの報告（Yaron. N et al、Am. J. Gastr
oenterol.、９１、１０１（１９９６）参照）が多く出
され、現在では否定的である。また、シアル酸に関して
は、Ｎ−アセチルノイラミニル−α（２，３）ラクトー
スに特異的な２０ｋＤａのＨｐａＡタンパクが菌体に認
められている点（Evans D G、J. Bacteriol.、１７５、
６７４（１９９３）参照）、シアル酸残基を多く持つフ
ェツインによりヘリコバクター・ピロリと細胞の接着が
阻害されたという報告（Kobayashi. Y et al、Infect.
Immun.、６１、４０５８（１９９３）参照）から注目さ
れているが、フェツインによりヘリコバクター・ピロリ
と細胞の接着は影響されなかった（Kobayashi. Y et a
l、Infect. Immun.、６１、４０５８（１９９３）参
照）という先ほどの報告とは逆の結果が出されている
点、細胞をシアリダーゼ処理してシアル酸を除いても接
着に影響がなかったという報告（Kamisago. S et al、I
nfect. Immun.、６４、６２４（１９９６）参照）から
シアル酸受容因子説には不明な点が多い。一方、硫酸化
糖脂質であるスルファチドは酸性条件下でも安定であ
り、ヘリコバクター・ピロリが最初に生着する幽門部に
多く存在する（Natomi. H et al、Biochim. Biophys. A
cta、９６１、２１３（１９８８）参照）。また、ヒト
の胃粘膜から抽出した糖脂質をＴＬＣで展開し、ヘリコ
バクター・ピロリとインキュベートしたところ、スルフ
ァチド画分に強い接着が見られたという報告（Saitoh.
Tet al、FEBS. Lett.、２８２、３８５（１９９１）参
照）、細胞に対するヘリコバクター・ピロリの接着が抗
スルファチド抗体で抑制されたという報告（Saitoh. T
et al、FEBS. Lett.、２８２、３８５（１９９１）参
照）、ヘリコバクター・ピロリを酸処理したところ様々
な糖脂質のうちスルファチドに対する接着能が顕著に強
くなったという報告（Huesca. M et al、Infect. Immu
n.、６４、２６４３（１９９６）参照）がある。

【０００６】本発明者らは、スルファチドが有力なヘリ
コバクター・ピロリの胃粘膜上皮細胞側の接着因子では
ないかと考え、ＥＬＩＳＡ法を用いたスルファチドに対
するヘリコバクター・ピロリの接着系を確立し、さら
に、砂ネズミを用いたヘリコバクター・ピロリ感染モデ
ル（Hirayama. F et al、実験潰瘍、２３（１）、５６
（１９９６）参照）を用いて、ヘリコバクター・ピロリ
接着阻害物質の検討をした。

【０００７】一方、フコイダンは褐藻類（たとえば、ヒ
バマタ（Fucus）属、コンブ（Laminaria）属またはエゾ
イシゲ（Pelvetia）属など）由来のフコース硫酸含有多
糖類である。

【０００８】このフコイダンは血液凝固阻止作用、抗高
脂血症作用、制癌作用などの生理活性を示すことが報告
されている。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ヘリ
コバクター・ピロリの胃粘膜上皮細胞への接着を阻害す
る物質を有効成分とするヘリコバクター・ピロリ接着阻
害剤を提供することである。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、新しいヘ
リコバクター・ピロリ接着阻害剤を開発すべく、鋭意検
討した結果、ガゴメコンブ（Kjellmaniella crassifoli
a）から、グルクロン酸含有フコイダンとグルクロン酸
非含有フコイダンとを分離することに成功し、前記グル
クロン酸含有フコイダンがヘリコバクター・ピロリのス
ルファチドに対する接着を強く阻害することを見いだ
し、本発明を完成した。

【００１１】本発明は、グルクロン酸含有フコイダンを
有効成分とするヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤に関
する。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明のヘリコバクター・ピロリ
接着阻害剤の有効成分であるフコイダンは海藻由来のフ
コイダンから調製されるグルクロン酸を有意に含有する
グルクロン酸含有フコイダンであればよく、とくに制限
はないが、ガゴメコンブ由来の多糖類から調製されるグ
ルクロン酸含有フコイダンが好ましい。

【００１３】以下、ガゴメコンブを出発物質とするばあ
いについて具体的に説明する。

【００１４】ガゴメコンブは通常食用として用いられて
おり、本発明で用いるガゴメコンブは、天然のものであ
っても加工されたものであってもいずれのものでもよ
い。

【００１５】ガゴメコンブ由来のフコイダン中グルクロ
ン酸含有フコイダンとグルクロン酸非含有フコイダンの
存在比は約１：２であり、グルクロン酸含有フコイダン
はフコース、マンノース、ガラクトース、グルクロン酸
などを含み、該フコイダン中のグルクロン酸含量は１０
〜３０重量％、通常１５〜２４重量％、硫酸含量は約２
０重量％である。一方、グルクロン酸非含有フコイダン
はフコースとガラクトースを含み、硫酸含量は約５０重
量％である。分子量は両物質ともに約２０万を中心に分
布している（第１８回糖質シンポジウム要旨集、１５９
頁、（１９９６）参照）。

【００１６】ガゴメコンブ由来のフコイダンは、通常の
フコイダンの製造法にしたがって製造される。たとえ
ば、エタノール洗浄、熱水抽出を行なったのちに、塩化
セチルピリジニウムを用いてフコイダンを沈殿させるこ
とによりえられる。

【００１７】グルクロン酸含有フコイダンおよびグルク
ロン酸非含有フコイダンはガゴメコンブから前記のよう
にしてフコイダンを調製したのち、陰イオン交換樹脂、
界面活性剤などを用いて分離される。

【００１８】前記陰イオン交換樹脂の具体例としては、
ＤＥＡＥ−セルロース、ＤＥＡＥ−デキストランなどが
あげられ、なかでもＤＥＡＥ−セルロファイン（Cellul
ofine、商品名、生化学工業（株）製、ＤＥＡＥ−セフ
ァデックス（Sephadex、商品名、ファルマシア社製）が
好ましく、とりわけＤＥＡＥ−セルロファインＡ−８０
０（商品名、生化学工業（株）製）が好ましい。

【００１９】陰イオン交換樹脂を用いる分離方法として
は、前記樹脂を充填剤とするカラムクロマトグラフ法に
おいて緩衝液としてＣａＣｌ₂／酢酸ナトリウム、展開
溶媒としてＮａＣｌ溶液を用いる勾配溶出法がよい。こ
の分離法ではグルクロン酸含有フコイダンが１番目のピ
ークとして、グルクロン酸非含有フコイダンが２番目の
ピークとして溶出する。

【００２０】前記界面活性剤の好ましい具体例として
は、陽イオン性界面活性剤があげられ、なかでも塩化セ
チルピリジニウムが好ましい。

【００２１】界面活性剤を用いる分離方法としては、界
面活性剤を溶解したＮａＣｌ溶液にフコイダンを溶解
し、溶解性のグルクロン酸含有フコイダンを遠心分離上
清として調製し、そののち限界ろ過、エタノール沈殿を
行なう方法がよい。

【００２２】本発明でいう、ヘリコバクター・ピロリの
接着とは、胃粘膜上皮細胞に対するヘリコバクター・ピ
ロリの接着を意味する。

【００２３】本発明で用いるＥＬＩＳＡ法を用いたヘリ
コバクター・ピロリの接着系とは、胃粘膜上皮細胞のヘ
リコバクター・ピロリの接着因子の１つと考えられてい
るスルファチドをＥＬＩＳＡプレートにコーティング
し、そこに各試験物質と前培養したヘリコバクター・ピ
ロリを加え、接着したヘリコバクター・ピロリを抗原・
抗体反応により検出する系である。

【００２４】本発明の接着阻害剤は、一般的な医薬製剤
の形態に調製される。前記製剤は、通常使用される充填
剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤およ
び滑沢剤などの希釈剤あるいは賦形剤を用いて通常の方
法で調製される。これら医薬製剤は、各種の形態が治療
目的に応じて選択でき、その代表的なものとして、錠
剤、丸剤、散剤、液剤、顆粒剤、カプセル剤またはシロ
ップ剤などがあげられる。

【００２５】本発明の医薬の投与方法は、各種製剤形
態、患者の年齢、性別そのほかの条件、疾患の程度など
に応じて経口投与されるほか、任意の飲食品に添加して
日常的に摂取させることもできる。。

【００２６】所望の治療的効果を達成するためには、有
効成分の投与量は、用法、患者の年齢、性別およびその
ほかの条件、疾患の程度などにより適宜選択されるが、
通常、成人１日当り１〜５００００ｍｇの範囲にあり、
好ましくは５〜１００００ｍｇから選択される。単位投
与形態は少なくとも１日１回、好ましくは１日３回、よ
り好ましくは１日５回投与することができる。

【００２７】また、経口投与では１０００ｍｇ／ｋｇの
投与量でも毒性が認められなかった。

【００２８】本発明のヘリコバクター・ピロリ接着阻害
剤は、胃炎、胃十二指腸潰瘍の予防薬または治療薬とし
て、さらには胃癌の発症を抑制する薬物として有用であ
る。加えて、本発明に用いるガゴメコンブ由来フコイダ
ンは工業的に供給可能である点、原料の褐藻類は日常的
に食品として摂取しているものであり、安全性が高いと
いう点でもすぐれている。

【００２９】

【実施例】つぎに、実施例をあげて、本発明をさらに具
体的に説明するが、本発明はこれらの記載に何ら限定さ
れるものではない。なお、実施例における％は重量％を
意味する。

【００３０】実施例１ （１）市販のガゴメコンブ粉末２ｋｇを８０％エタノー
ルで８０℃、２時間洗浄し、ろ過によりエタノール洗浄
粉末を調製した。つぎに９５℃、２時間の熱水抽出を行
ない、ろ過により熱水抽出液４０リットルをえた。この
抽出液に塩化セチルピリジニウムをこれ以上沈殿が生成
しなくなるまで添加し、生成した沈殿（フコイダン）を
遠心分離し、えられた沈殿を８０％エタノールで洗浄し
たのち、２ＭのＮａＣｌ溶液に溶解し、３リットルの溶
液を調製した。この溶液を陰イオン交換樹脂であるＤＥ
ＡＥ−セルロファインＡ−８００（生化学工業（株）
製）処理、ポアサイズ１０万の限外ろ過膜を用いる限外
ろ過処理、１１０００ｇ、４０分間の遠心分離処理を
し、精製フコイダン溶液４リットルを調製した。ついで
凍結乾燥により精製乾燥フコイダン約８０ｇを調製し
た。

【００３１】（２）前記（１）でえられた精製フコイダ
ン８ｇをＤＥＡＥ−セルロファインＡ−８００カラムに
よりグルクロン酸含有フコイダンとグルクロン酸非含有
フコイダンに分離し、脱塩後各フコイダンの凍結乾燥物
を調製した。カラムサイズが１０．５×４６．５ｃｍの
カラム、０．１Ｍ ＣａＣｌ₂／２０ｍＭ酢酸ナトリウ
ム（ｐＨ６．０）の緩衝液、０．０〜１．５Ｍの濃度勾
配のＮａＣｌを用いてクロマトグラフィーを行なった。
結果を図１に示す。図１はグルクロン酸含有フコイダン
とグルクロン酸非含有フコイダンの分離パターンを示す
図であり、縦軸は吸光度、横軸は１画分５００ｍｌでの
画分番号を示し、図中、黒丸はＤｕｂｏｉｓらの方法
（Analytical Chemistry、２８、３５０〜３５６、（１
９５６））のフェノール硫酸法により測定した各画分の
４８０ｎｍでの吸光度、黒三角はＢｉｔｔｅｒらの方法
（Analytical Biochemistry、４、３３０〜３３４、
（１９６２））のカルバゾール硫酸法で測定した各画分
の５３０ｎｍでの吸光度を示す。図中、前ピークがグル
クロン酸含有フコイダン、後ろピークがグルクロン酸非
含有フコイダンを示すピークである。

【００３２】（３）前記（１）でえられた精製フコイダ
ン１１７ｇを５８５０ｍｌの２ＭＮａＣｌ溶液に溶解
後、陽イオン性界面活性剤である塩化セチルピリジニウ
ムを２Ｍ ＮａＣｌ溶液に１．２５％で溶解したもの１
８．７２リットルを添加し、グルクロン酸含有フコイダ
ンを溶解し、溶解性のグルクロン酸含有フコイダンを１
１００ｇ、４０分間遠心分離処理することにより調製し
た。この遠心分離上清をポアサイズ１０万の限外ろ過膜
を用いる限外ろ過法により濃縮し、限外ろ過内液中のグ
ルクロン酸含有フコイダンを終濃度８０％のエタノール
により沈殿させた。エタノール沈殿を１００％エタノー
ルで洗浄後、１０ｍＭ ＮａＣｌ ３００ｍｌに溶解
後、凍結乾燥によりグルクロン酸含有フコイダン１６．
４ｇを調製した。

【００３３】２Ｍ ＮａＣｌ存在下で塩化セチルピリジ
ニウムに非溶解性のグルクロン酸非含有フコイダンは、
前記遠心分離により沈殿としてえたのち、１００％エタ
ノールで洗浄し、１０ｍＭ ＮａＣｌ ２リットルに溶
解後、凍結乾燥により調製した（７７ｇ）。

【００３４】実施例２ ５ｇのグルクロン酸含有フコイダンを水などで溶解し、
ヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤とした。

【００３５】実施例３ ５ｇのグルクロン酸含有フコイダンと４００ｍｇのファ
モチジンを水などで溶解し、ヘリコバクター・ピロリ接
着阻害剤とした。

【００３６】実施例４ ５ｇのグルクロン酸含有フコイダンと２０ｍｇのオメプ
ラゾールを水などで溶解し、ヘリコバクター・ピロリ接
着阻害剤とした。

【００３７】実施例５ ５ｇのグルクロン酸含有フコイダン、２０ｍｇのオメプ
ラゾール、４００ｍｇのクラリスロマイシン、５００ｍ
ｇのメトロニダゾールを水などで溶解し、ヘリコバクタ
ー・ピロリ接着阻害剤とした。

【００３８】つぎに、試験例によって本発明の接着阻害
剤の作用効果を説明する。

【００３９】［試験例］ 実験動物 ヘリコバクター・ピロリ感染モデル用として６週齢のＭ
ＧＳ／Ｓｅａ系砂ネズミ（セアック吉富（株）製）を１
週間予備飼育したのち実験に供した。予備飼育期間中、
滅菌済飼料であるＭＦ（オリエンタル酵母工業（株）
製）および水（水道水、滅菌済）は自由摂取させた。

【００４０】投与菌液の調製 ヘリコバクター・ピロリ ＡＴＣＣ４３５０４株をＢＨ
ＩＡ（ブレインハートインフュージョン寒天培地、日水
製薬（株）製）を用いて３７℃、微好気性条件下で７２
時間培養し、発育したコロニーを７％ＦＣＳ添加ブルセ
ラブロスに懸濁した。懸濁液を３７℃、微好気性条件下
で２４時間振とう培養した。培養菌液を新鮮７％ＦＣＳ
添加ブルセラブロスで１００倍希釈してさらに３７℃、
微好気性条件下で２４時間振とう培養したのち、２５０
０ｒｐｍ、４℃、１０分間遠心し、菌体を集めた。これ
を元の溶液量の１／４量のリン酸緩衝液で懸濁した。こ
の菌液と表の各試験物質を等量混合し、１時間微好気性
条件下で振とう培養した（約１０⁸ ＣＦＵ（コロニー
形成単位））。

【００４１】

【表１】

【００４２】実験方法 （Ａ）in vitro試験（ＥＬＩＳＡ法を用いたヘリコバク
ター・ピロリ接着阻害剤の探索） （１）スルファチド（シグマ社製）を９６ウェルマイク
ロプレートにコートし（１μｇ）、表１に示す各試験物
質と振とう培養したヘリコバクター・ピロリ菌液をプレ
ートに添加し、微好気性条件下で、３７℃、９０分間イ
ンキュベートした。そこにヘリコバクター・ピロリ抗血
清を加え反応させた。つぎに、アフィニティ精製ぺルオ
キシダーゼ標識抗マウス免疫グロブリン抗体（オルガノ
ン・テクニカ社製）を反応させた。発色試薬により発色
をさせた。０．５Ｍ硫酸を加え反応を停止し、プレート
リーダー（ＥＦＬＡＢ社製）で波長４５０ｎｍ〜６２０
ｎｍの吸光度を測定した。

【００４３】（２）ガゴメコンブ由来グルクロン酸含有
フコイダンのヘリコバクター・ピロリ接着阻害作用（用
量反応性の検討−１） 前記Ａ−（１）で効果の見られたガゴメコンブ由来グル
クロン酸含有フコイダンについて用量反応性を調べた。
測定は、表１に示す各試験物質を用いて前記Ａ−（１）
と同様に行なった。

【００４４】（３）ガゴメコンブ由来グルクロン酸含有
フコイダンのヘリコバクター・ピロリ接着阻害作用（用
量反応性の検討−２） ガゴメコンブ由来グルクロン酸含有フコイダンについ
て、in vivoで効果がえられると考えられる用量を決め
るために、前記Ａ−（１）および（２）よりもさらに高
用量の前記フコイダンを用いてヘリコバクター・ピロリ
接着阻害作用を調べた。測定は表１に示す各試験物質を
用いて前記Ａ−（１）と同様に行なった。

【００４５】（Ｂ）in vivo試験（ヘリコバクター・ピ
ロリ感染モデル） （１）ヘリコバクター・ピロリ感染砂ネズミモデル 表１に示す試験物質と振とう培養したヘリコバクター・
ピロリ菌液０．５ｍｌを、７週齢の砂ネズミ４６匹に１
日３回、４時間間隔で経口投与して感染させた。その後
さらに、試験物質（実施例１（２）のグルクロン酸含有
フコイダンおよびヒバマタ由来フコイダン（シグマ社
製）各１０ｍｇ／匹、ならびにリン酸緩衝液（溶媒）
０．５ｍｌ）を、８時間おきに２回（感染１日後に解剖
する砂ネズミのばあい）または５回（感染２日後に解剖
する砂ネズミのばあい）、経口投与した。最終投与の４
時間後（感染１日後および２日後）に胃を摘出して感染
率および生菌数をつぎの培養法で測定した。

【００４６】（２）胃内菌数の測定 摘出した胃を大弯に沿って開き、スライドガラスで粘膜
をかきとり、２．５％ＦＣＳ添加ブルセラブロスに浮遊
させた。浮遊液をガラスホモジナイザーを用いて懸濁し
た。懸濁液を２．５％ＦＣＳ添加ブルセラブロスで適宜
希釈して、選択培地上で７日間培養した。ヘリコバクタ
ー・ピロリのコロニーをカウントし、胃あたりの菌数と
した。

【００４７】データの表示法とその解析法 ヘリコバクター・ピロリ感染率（感染例）と生菌数を表
示し、ＫＲＵＳＫＡＬ−ＷＡＬＬＩＳ（クラスカル−ワ
ーリス）検定（分類値）を行なった。

【００４８】実験結果 （Ａ）in vitro試験（ＥＬＩＳＡ法を用いたヘリコバク
ター・ピロリ接着阻害剤の探索） （１）ガゴメコンブ由来フコイダンのヘリコバクター・
ピロリ接着阻害作用 結果を表２に示す。表２に示したように、実施例１
（２）でえられたガゴメコンブ由来グルクロン酸含有フ
コイダン（陰イオン交換クロマト分離精製物）および実
施例１（３）でえられたガゴメコンブ由来グルクロン酸
含有フコイダン（界面活性剤分離精製物）は、ヘリコバ
クター・ピロリのスルファチドに対する接着をそれぞれ
５４、５６％阻害した。しかし、ほかの試験物質では接
着阻害作用は見られなかった。

【００４９】

【表２】

【００５０】（２）ガゴメコンブ由来グルクロン酸含有
フコイダンのヘリコバクター・ピロリ接着阻害作用（用
量反応性の検討−１） 結果を表３に示す。実施例１（２）でえられたガゴメコ
ンブ由来グルクロン酸含有フコイダン（陰イオン交換ク
ロマト分離精製物）および実施例１（３）でえられたガ
ゴメコンブ由来グルクロン酸含有フコイダン（界面活性
剤分離精製物）のいずれも、試験物質の用量が３０、１
００、３００、１０００μｇ／ｍｌと増加するにしたが
い、３４、５７、５９、６９％（前者のばあい）、３
３、４９、５８、７２（％）（後者のばあい）の接着阻
害率で用量依存的にヘリコバクター・ピロリの接着を阻
害した。

【００５１】

【表３】

【００５２】（３）ガゴメコンブ由来グルクロン酸含有
フコイダンのヘリコバクター・ピロリ接着阻害作用（用
量反応性の検討−２） 結果を図２に示す。図中、縦軸は接着阻害（％）を、横
軸は試験物質の用量（ｍｇ／ｍｌ）を示す。図２からわ
かるように、ガゴメコンブ由来グルクロン酸含有フコイ
ダンは、試験物質の用量が０．３、０．６、１．２５、
２．５、５、１０ｍｇ／ｍｌと増加するにしたがい、４
０．５、５３．６、６１．５、７８．６、８５．５、９
３．８（％）の接着阻害率で用量依存的にヘリコバクタ
ー・ピロリの接着を阻害し、１０ｍｇ／ｍｌでヘリコバ
クター・ピロリの接着をほぼ完全に阻害した。

【００５３】（Ｂ）in vivo試験（ヘリコバクター・ピ
ロリ感染砂ネズミモデル） 結果を表４に示す。表４に示したように溶媒群ではヘリ
コバクター・ピロリ感染１日後は７例中６例（感染率８
５．７％）が感染し、その生菌数は９８ＣＦＵであっ
た。それに対して、ガゴメコンブ由来フコイダン（陰イ
オン交換クロマト分離精製物）投与群では８例中２例
（感染率２５．０％）、生菌数５５ＣＦＵと有意な（ｐ
＝０．０２３２７）感染阻害効果がみられた。また、溶
媒群ではヘリコバクター・ピロリ感染２日後は７例中６
例（感染率８５．７％）が感染し、その生菌数は１８０
ＣＦＵであり、生菌数の増加が見られた。それに対し
て、ガゴメコンブ由来フコイダン投与群（６例）のいず
れも感染は認められなかった。一方、ヒバマタ由来フコ
イダン投与群ではヘリコバクター・ピロリ感染阻害効果
は見られなかった。

【００５４】

【表４】

【００５５】

【発明の効果】本発明によれば、ヘリコバクター・ピロ
リによる胃粘膜上皮細胞への接着を阻害しうるグルクロ
ン酸含有フコイダンを有効成分とするヘリコバクター・
ピロリ接着阻害剤をえることができ、この阻害剤によ
り、胃炎や胃十二指腸潰瘍さらには胃癌の発症を抑制す
る可能性を高めることができると考えられる。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１（２）で行なった、ガゴメコンブ由来
グルクロン酸含有フコイダンとグルクロン酸非含有フコ
イダンとの分離パターンを示す図である。

【図２】試験例Ａ−（３）で行なった、ガゴメコンブ由
来グルクロン酸含有フコイダンのヘリコバクター・ピロ
リ接着阻害作用における用量反応性試験の結果を示す図
である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 木村 国雄 京都市山科区四ノ宮南河原町14番地 科研 製薬株式会社総合研究所 (72)発明者 伊藤 修子 京都市山科区四ノ宮南河原町14番地 科研 製薬株式会社総合研究所 (72)発明者 井狩 隆 京都市山科区四ノ宮南河原町14番地 科研 製薬株式会社総合研究所 (72)発明者 巽 容子 滋賀県大津市瀬田三丁目４番１号 寳酒造 株式会社中央研究所 (72)発明者 小山 信人 滋賀県大津市瀬田三丁目４番１号 寳酒造 株式会社中央研究所 (72)発明者 荻屋 道雄 滋賀県大津市瀬田三丁目４番１号 寳酒造 株式会社中央研究所 (72)発明者 猪飼 勝重 滋賀県大津市瀬田三丁目４番１号 寳酒造 株式会社中央研究所 (72)発明者 加藤 郁之進 滋賀県大津市瀬田三丁目４番１号 寳酒造 株式会社中央研究所

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 グルクロン酸含有フコイダンを有効成分
   とするヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤。