JPH0245499A - オタネニンジン糖タンパク質およびその用途 - Google Patents
オタネニンジン糖タンパク質およびその用途Info
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- JPH0245499A JPH0245499A JP63196455A JP19645588A JPH0245499A JP H0245499 A JPH0245499 A JP H0245499A JP 63196455 A JP63196455 A JP 63196455A JP 19645588 A JP19645588 A JP 19645588A JP H0245499 A JPH0245499 A JP H0245499A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の背景〕
技術分野
本発明は、オタネニンジンから単離された糖タンパク質
及びその糖タンパク質を有効成分とする生体防御能亢進
剤に関する。
及びその糖タンパク質を有効成分とする生体防御能亢進
剤に関する。
従来の技術
オタネニンジン(Panax ginseng C,A
、MEYER)は朝鮮ニンジンとも呼ばれ、古来より強
壮、強精、消炎、利尿、抗糖尿病用の薬剤とて用いられ
てきたことは周知のことである。
、MEYER)は朝鮮ニンジンとも呼ばれ、古来より強
壮、強精、消炎、利尿、抗糖尿病用の薬剤とて用いられ
てきたことは周知のことである。
また、オタネニンジンの中の成分についての薬理作用の
報告については、主にサポニン成分について行なわれ、
例えば抗糖尿病作用(時開55−122721号公報な
ど)、抗腫瘍作用(時開−54−89012号公報など
)が報告されている。
報告については、主にサポニン成分について行なわれ、
例えば抗糖尿病作用(時開55−122721号公報な
ど)、抗腫瘍作用(時開−54−89012号公報など
)が報告されている。
しかしながら糖タンパク成分についての報告はほとんど
見当たらず、まだまだ研究の余地を残しているのが現状
である。
見当たらず、まだまだ研究の余地を残しているのが現状
である。
ところで、人間は一般に老令になると諸疾患に対する抵
抗能が低下して種々の病気に罹患しやすくなる。原因と
しては、体内諸器官や種々の代謝作用が衰えるとともに
異物や老廃物の処理作用のある食細胞の機能が低下し、
生体防御能が衰えることが考えられる。
抗能が低下して種々の病気に罹患しやすくなる。原因と
しては、体内諸器官や種々の代謝作用が衰えるとともに
異物や老廃物の処理作用のある食細胞の機能が低下し、
生体防御能が衰えることが考えられる。
本発明はオタネニンジンの成分について研究を重ねた結
果、オタネニンジン中から新規糖タンパク質を分離し、
これに生体防御能があることを発見して本発明を完成す
るに至った。
果、オタネニンジン中から新規糖タンパク質を分離し、
これに生体防御能があることを発見して本発明を完成す
るに至った。
要旨
本発明は新規な糖タンパク質及びこれを有効成分とする
生体防御能亢進剤の提供を目的とし、オタネニンジン中
の糖タンパク質成分がこの作用を有するという当業者に
とっても思わぬ発見に基づくものである。
生体防御能亢進剤の提供を目的とし、オタネニンジン中
の糖タンパク質成分がこの作用を有するという当業者に
とっても思わぬ発見に基づくものである。
したがって、本発明による糖タンパク質は、分子量が約
20,000〜110,000で、且つ糖部分の構成糖
がアラビノース、ラムノース、マンノース、グルコース
、ガラクトース、グルクロン酸およびガラクツロン酸か
ら選ばれたものであるオタネニンジン由来の糖タンパク
質であること、を特徴とするものである。
20,000〜110,000で、且つ糖部分の構成糖
がアラビノース、ラムノース、マンノース、グルコース
、ガラクトース、グルクロン酸およびガラクツロン酸か
ら選ばれたものであるオタネニンジン由来の糖タンパク
質であること、を特徴とするものである。
また本発明による生体防御能亢進剤は、分子量が約20
,000〜110,000で、且つ糖部分の構成糖がア
ラビノース、ラムノース、マンノース、グルコース、ガ
ラクトース、グルクロン酸およびガラクツロン酸から選
ばれたものであるオタネニンジン由来の糖タンパク質を
有効成分とすること、を特徴とするものである。
,000〜110,000で、且つ糖部分の構成糖がア
ラビノース、ラムノース、マンノース、グルコース、ガ
ラクトース、グルクロン酸およびガラクツロン酸から選
ばれたものであるオタネニンジン由来の糖タンパク質を
有効成分とすること、を特徴とするものである。
効果
本発明によるオタネニンジンの新規な糖タンパク質成分
は優れた生体防御能を有しており、この糖タンパク質成
分を有効成分とする本発明による生体防御能亢進剤は、
生体に侵入した細菌やウィルス等の異物に対するマクロ
ファージの貧食作用等の生体防御反応を活性化して、異
物を生体から排除する機能を増加させ、これによって諸
疾患に対する抵抗能を高めることができるものであり、
しかもその毒性も低いものである。従って本発明による
糖タンパク質およびこれを有効成分とする生体防御能亢
進剤の提供は、生体の抵抗性に係る諸疾患対策に有意義
な貢献をなすものである。
は優れた生体防御能を有しており、この糖タンパク質成
分を有効成分とする本発明による生体防御能亢進剤は、
生体に侵入した細菌やウィルス等の異物に対するマクロ
ファージの貧食作用等の生体防御反応を活性化して、異
物を生体から排除する機能を増加させ、これによって諸
疾患に対する抵抗能を高めることができるものであり、
しかもその毒性も低いものである。従って本発明による
糖タンパク質およびこれを有効成分とする生体防御能亢
進剤の提供は、生体の抵抗性に係る諸疾患対策に有意義
な貢献をなすものである。
オタネニンジン
本発明でいうオタネニンジンとは、ウコギ科(Aral
laceae) 、パナックス属(Panax )に属
するPanax Schjnseng Nees (−
P、Ginseng C,A、Mey、)であり、別名
朝鮮ニンジンとも呼ばれている。多糖成分を取得すべき
部分はとりわけ根部が好ましく、取得効率を考えれば乾
燥したもの(虫干ニンジン)を用いるのが好都合である
。また、これらのパナックス属植物の適当な部位を常法
によって組織培養に付し、その培養物を用いることもで
きる。
laceae) 、パナックス属(Panax )に属
するPanax Schjnseng Nees (−
P、Ginseng C,A、Mey、)であり、別名
朝鮮ニンジンとも呼ばれている。多糖成分を取得すべき
部分はとりわけ根部が好ましく、取得効率を考えれば乾
燥したもの(虫干ニンジン)を用いるのが好都合である
。また、これらのパナックス属植物の適当な部位を常法
によって組織培養に付し、その培養物を用いることもで
きる。
糖タンパク質成分およびその取得方法
本発明でいうオタネニンジン由来の糖タンパク質とは、
分子量が約20,000〜 110.000で、且つ糖部分の構成糖がアラビノース
(Ara ) 、ラムノース(Rha ) 、7ンノー
ス(Man ) 、グルコース(Glc ) 、ガラク
トース(Gal ) 、グルクロン酸(Glc^)及び
ガラクツロン酸(GalA)から選ばれたものである。
分子量が約20,000〜 110.000で、且つ糖部分の構成糖がアラビノース
(Ara ) 、ラムノース(Rha ) 、7ンノー
ス(Man ) 、グルコース(Glc ) 、ガラク
トース(Gal ) 、グルクロン酸(Glc^)及び
ガラクツロン酸(GalA)から選ばれたものである。
従って、この糖タンパク質における多糖部分は実質的に
上記の糖のみからなっており、その構成糖の種類は上記
糖の一種のみでもよいし、複数種の組み合わせてあって
もよい。
上記の糖のみからなっており、その構成糖の種類は上記
糖の一種のみでもよいし、複数種の組み合わせてあって
もよい。
この様な糖タンパク質の具体例について示せば以下の通
りである。
りである。
本発明でいう糖タンパク質成分を取得するためにはオタ
ネニンジンから該成分を単離することのできる任意の方
法を用いればよい。例えばオタネニンジンを好ましくは
破砕後、水もしくは水溶性6機溶媒に浸漬して抽出を行
ない、その残渣を水で抽出し、これに水溶性有機溶媒を
加えて沈澱物を得る。そして沈澱物を透析、イオン交換
樹脂もしくはゲル濾過剤を用いたクロマトグラフィーに
付し、目的物を得ることができる。原料のオタネニンジ
ンは脱脂燥作に付してもよく、また上記沈澱物を透析に
付しても目的物を得ることができよう。
ネニンジンから該成分を単離することのできる任意の方
法を用いればよい。例えばオタネニンジンを好ましくは
破砕後、水もしくは水溶性6機溶媒に浸漬して抽出を行
ない、その残渣を水で抽出し、これに水溶性有機溶媒を
加えて沈澱物を得る。そして沈澱物を透析、イオン交換
樹脂もしくはゲル濾過剤を用いたクロマトグラフィーに
付し、目的物を得ることができる。原料のオタネニンジ
ンは脱脂燥作に付してもよく、また上記沈澱物を透析に
付しても目的物を得ることができよう。
この糖タンパク質の単離に関する詳細は、後記実験例を
参照されたい。
参照されたい。
生体防御能亢進剤
本発明の生体防御能亢進剤は、オタネニンジンの糖タン
パク質成分それ自体または適宜製剤用の賦形剤、結合剤
、希釈剤と混合して成るものであり、粉末、顆粒、錠剤
、カプセル剤、シロップ剤、注射剤などの形態で経口的
または非経口的に投与することができる。また、必要に
応じて他の薬剤を調合させてもよい。投与量は、年齢、
体重、症状により適宜増減するが、経口的には通常成人
、1日、糖タンパク質成分として0,1〜1000mg
が望ましい。好ましい具体例は、オタネニンジンの糖タ
ンパク質成分と製剤上の補助成分とからなるものである
。また、本発明の他の好ましい具体例は、上記1日当た
りの投与量を1回ないし数回に分けて服用させるための
単位投与形態のものである。
パク質成分それ自体または適宜製剤用の賦形剤、結合剤
、希釈剤と混合して成るものであり、粉末、顆粒、錠剤
、カプセル剤、シロップ剤、注射剤などの形態で経口的
または非経口的に投与することができる。また、必要に
応じて他の薬剤を調合させてもよい。投与量は、年齢、
体重、症状により適宜増減するが、経口的には通常成人
、1日、糖タンパク質成分として0,1〜1000mg
が望ましい。好ましい具体例は、オタネニンジンの糖タ
ンパク質成分と製剤上の補助成分とからなるものである
。また、本発明の他の好ましい具体例は、上記1日当た
りの投与量を1回ないし数回に分けて服用させるための
単位投与形態のものである。
なお、本発明における糖タンパク質成分の毒性は、例え
ば、後記実験例におけるPO2−1及びPO2−2の場
合、ICR系雄性マウス(5匹)に対する4mg/kg
の腹腔的投与で一般症状に異常が全く認められなかった
こと、およびこれらの物質と構造類似であるレンチナン
(木村郁部はか、最新医学、36.1084 (198
1) )およびPS−K (クレスチン(三共))等が
周知の通り低毒性であることにより、一般に低いものと
考えることができる。
ば、後記実験例におけるPO2−1及びPO2−2の場
合、ICR系雄性マウス(5匹)に対する4mg/kg
の腹腔的投与で一般症状に異常が全く認められなかった
こと、およびこれらの物質と構造類似であるレンチナン
(木村郁部はか、最新医学、36.1084 (198
1) )およびPS−K (クレスチン(三共))等が
周知の通り低毒性であることにより、一般に低いものと
考えることができる。
生体防御能亢進作用
生物に異物(細菌、ウィルス、等)が侵入すると、これ
に対してマクロファージの貧食作用、等の生体防御反応
が現われ、外敵を排除する巧妙な機構が生じてくる。し
かし、免疫低下または防御因子低下時には、攻撃因子(
異物)優勢となって、日和見感染等の各種疾患に罹りや
すくなる。
に対してマクロファージの貧食作用、等の生体防御反応
が現われ、外敵を排除する巧妙な機構が生じてくる。し
かし、免疫低下または防御因子低下時には、攻撃因子(
異物)優勢となって、日和見感染等の各種疾患に罹りや
すくなる。
本発明でいう生体防御能亢進作用は、上記に示した様な
生体防御反応を活性化して、異物を生体から排除する作
用をいい、二次的な抗ウィルス、抗腫瘍、抗寄生虫、抗
細菌作用およびその他の外来性抗原の排除に関するもの
である。
生体防御反応を活性化して、異物を生体から排除する作
用をいい、二次的な抗ウィルス、抗腫瘍、抗寄生虫、抗
細菌作用およびその他の外来性抗原の排除に関するもの
である。
実験例
1) 糖タンパク質の取得
第1図の工程図に従い、オタネニンジンの乾燥物である
キモニンジン1kgを冷および熱メタノール(MeOH
)にて抽出後、その残さ(収率22.8%)を水に溶解
し、3倍量のEtOHを加えて得た沈澱(収率16,5
%)を透析に付して透析内液(収率6.5%)を得た。
キモニンジン1kgを冷および熱メタノール(MeOH
)にて抽出後、その残さ(収率22.8%)を水に溶解
し、3倍量のEtOHを加えて得た沈澱(収率16,5
%)を透析に付して透析内液(収率6.5%)を得た。
これをDEAE TOYOPEARL 650M(
東洋聾達)を充填したカラム(40mmX 70m5)
に付し、0.02M NHHCO3(Na Cl
濃度勾配)により溶出させて素通り画分およびフラクシ
ョン]、−フラクション6 (Fr、 1−Fr。
東洋聾達)を充填したカラム(40mmX 70m5)
に付し、0.02M NHHCO3(Na Cl
濃度勾配)により溶出させて素通り画分およびフラクシ
ョン]、−フラクション6 (Fr、 1−Fr。
6)の画分を得た。Fr、4はさらに
TOYOPEARL HW65F (28imX10
0cm)に付し、H2Oにより溶出させて細分画しPO
2−1(収率0.002%)、PO2−2(収率0.0
01%)及びその他(収率0.002%)を得た。
0cm)に付し、H2Oにより溶出させて細分画しPO
2−1(収率0.002%)、PO2−2(収率0.0
01%)及びその他(収率0.002%)を得た。
これらのフラクションは、糖含量をフェノール硫酸法に
より、ウロン酸含量をカルバゾール硫酸法により、また
タンパク含量をローリ−(Lowry)法によって各々
測定した。
より、ウロン酸含量をカルバゾール硫酸法により、また
タンパク含量をローリ−(Lowry)法によって各々
測定した。
また、多糖部分の構成糖の決定にあたっては、INの硫
酸で氷解後、常法により還元、アセチル化後、ガスクロ
マトグラフィー(G L C)によ・り分析した。
酸で氷解後、常法により還元、アセチル化後、ガスクロ
マトグラフィー(G L C)によ・り分析した。
また、糖の結合様式の決定にあたっては、メチル化、酸
加水分解後、ガスクロマトグラフ質量分析(GC−MS
)により分析した。
加水分解後、ガスクロマトグラフ質量分析(GC−MS
)により分析した。
これらの結果は、以下に示す通りである。
(i)PO2−1(収率:0.002%)分子# 10
5,000 (ゲルパーミェーションクロマトグラフィ
ー〇PC) 総轄量:47.2% (標準物質: G l c、フェノール硫酸法)ウロン
酸分析:4.3.9% (標準物質:G1 cAsカルバゾール硫酸法)タンパ
ク分析:11.5% (標準物質:BSA、 ローリ−法) カルボキシル基の還元(テーラ−・コンラッドの還元)
PO2−1−PO2−IR(還元物) 酸加水分解 L−Ara:L−Rha:I)−Man:1)−Gal
:I)−GlcPG5−1 1.0 0.3 0
.2 0゜50.3PG5−IRL、OO,30,21
,80,8(いずれもモル比) (it) PO2−2(収率:0.001%)分子量
=29.000 (GPC) 総轄量:87.6% (標準物質: G I c、フェノール硫酸法)ウロン
酸分析:17.1% (標準物質: G 1 c Asカルバゾール硫酸法)
タンパク分析:12.5% (標章物質:BSA、 ローリ−法) カルボキシル基の還元(テーラ−・コンラッドの還元)
PO2−2→PG5−2R(還元物) 酸加水分解 L−Ara:L−Rha:D−Man:I)−Gal
:D−CJlcPG5−2 1.0 0J O,
11,20,8PG5−2R1,ロ 0.3
0.1 1.6 1.1(いずれもモル比)2
) 糖タンパク質のカーボンクリアランス(Carbo
n clearance)能活性効果(1) 実験動
物 ICR系雄性マウスを一定期間飼育後、健康と思われる
5週齢のものを1群10匹として本実験に使用した。
5,000 (ゲルパーミェーションクロマトグラフィ
ー〇PC) 総轄量:47.2% (標準物質: G l c、フェノール硫酸法)ウロン
酸分析:4.3.9% (標準物質:G1 cAsカルバゾール硫酸法)タンパ
ク分析:11.5% (標準物質:BSA、 ローリ−法) カルボキシル基の還元(テーラ−・コンラッドの還元)
PO2−1−PO2−IR(還元物) 酸加水分解 L−Ara:L−Rha:I)−Man:1)−Gal
:I)−GlcPG5−1 1.0 0.3 0
.2 0゜50.3PG5−IRL、OO,30,21
,80,8(いずれもモル比) (it) PO2−2(収率:0.001%)分子量
=29.000 (GPC) 総轄量:87.6% (標準物質: G I c、フェノール硫酸法)ウロン
酸分析:17.1% (標準物質: G 1 c Asカルバゾール硫酸法)
タンパク分析:12.5% (標章物質:BSA、 ローリ−法) カルボキシル基の還元(テーラ−・コンラッドの還元)
PO2−2→PG5−2R(還元物) 酸加水分解 L−Ara:L−Rha:D−Man:I)−Gal
:D−CJlcPG5−2 1.0 0J O,
11,20,8PG5−2R1,ロ 0.3
0.1 1.6 1.1(いずれもモル比)2
) 糖タンパク質のカーボンクリアランス(Carbo
n clearance)能活性効果(1) 実験動
物 ICR系雄性マウスを一定期間飼育後、健康と思われる
5週齢のものを1群10匹として本実験に使用した。
(2) 実験方法
ハルパーン(llalpern )らのカーボン・クリ
アランス法(Ilalpern B、Il、、etal
、、 J、 Reticuloen−dothel、S
oe、1.77 (1964) )に従い、上記のマ
ウスに下記に示す濃度の被検液(糖タンパク質としては
前記PG5−1及びPO2−2を用いた)を腹腔的投与
し、24時間後にカーボン懸濁液(ペリカン・インク(
ペリカン社製)を生理食塩水で4倍希釈したもの)を5
ml / kgの割合で、尾静脈投与した。2分およ
び10分後にマウスの眼窩からマイクロピペットを用い
て20Mgの血液を採取した。
アランス法(Ilalpern B、Il、、etal
、、 J、 Reticuloen−dothel、S
oe、1.77 (1964) )に従い、上記のマ
ウスに下記に示す濃度の被検液(糖タンパク質としては
前記PG5−1及びPO2−2を用いた)を腹腔的投与
し、24時間後にカーボン懸濁液(ペリカン・インク(
ペリカン社製)を生理食塩水で4倍希釈したもの)を5
ml / kgの割合で、尾静脈投与した。2分およ
び10分後にマウスの眼窩からマイクロピペットを用い
て20Mgの血液を採取した。
得られた血液に0.1%Na2CO3溶液2mlを加え
て溶血させた後、分光光度計(島津製作所)を用いて6
75r+mにおける吸光度(OD675)をn1定して
、カーボン懸濁液の血中消失速度を求めた。
て溶血させた後、分光光度計(島津製作所)を用いて6
75r+mにおける吸光度(OD675)をn1定して
、カーボン懸濁液の血中消失速度を求めた。
(被検液の投与量)
(イ) 生理食塩水(対照) 5 ml / kg
(ロ) 糖タンパク質 4 mg/ kg−” 0 、
8 rng/ ml(5ml/kg) なお、結果の統計的処理はステニープント(Stude
nt’s ) を検定ニテ行なツタ。
(ロ) 糖タンパク質 4 mg/ kg−” 0 、
8 rng/ ml(5ml/kg) なお、結果の統計的処理はステニープント(Stude
nt’s ) を検定ニテ行なツタ。
実験結果
オタネニンジンを乾燥した虫干ニンジン由来のPO2−
1及びPO2−2各4a+g/kgをマウスに投与した
際のカーボンクリアランス試験の結果を第2図に示す。
1及びPO2−2各4a+g/kgをマウスに投与した
際のカーボンクリアランス試験の結果を第2図に示す。
オタネニンジン糖タンパク質を投与した群ではいずれも
対照群より有意に速い消失速度を示し、炭素粒子の血中
からの消失すなわち、肝あるいは牌臓の食細胞の活性が
著しく促進されていることが示された。またこれらの数
値は陽性対照として用いたザイモサン(zymosan
) 40mg/kg投与群よりも高い値を示した。な
お、グラフの縦軸は血中よりのカーボン粒子の消息速度
を示している。虫干ニンジンより得られた糖タンパク質
は、わずか4 mg / kgの投与量で顕著なカーボ
ンクリアランス能の増強が認められ、生体防御能すなわ
ち細網内皮系機能及び、細菌感染抵抗性に対して促進的
に作用するものと考えられる。
対照群より有意に速い消失速度を示し、炭素粒子の血中
からの消失すなわち、肝あるいは牌臓の食細胞の活性が
著しく促進されていることが示された。またこれらの数
値は陽性対照として用いたザイモサン(zymosan
) 40mg/kg投与群よりも高い値を示した。な
お、グラフの縦軸は血中よりのカーボン粒子の消息速度
を示している。虫干ニンジンより得られた糖タンパク質
は、わずか4 mg / kgの投与量で顕著なカーボ
ンクリアランス能の増強が認められ、生体防御能すなわ
ち細網内皮系機能及び、細菌感染抵抗性に対して促進的
に作用するものと考えられる。
第1図は、オタネニンジンから目的糖タンパク質を取得
する工程を示す図である。 第2図は、上記糖タンパク質成分のカーボンクリアラン
ス能増強作用を示すグラフである。
する工程を示す図である。 第2図は、上記糖タンパク質成分のカーボンクリアラン
ス能増強作用を示すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、分子量が約20,000〜110,000で、且つ
糖部分の構成糖がアラビノース、ラムノース、マンノー
ス、グルコース、ガラクトース、グルクロン酸およびガ
ラクツロン酸から選ばれたものである、オタネニンジン
由来の糖タンパク質。 2、分子量が約20,000〜110,000で、且つ
糖部分の構成糖がアラビノース、ラムノース、マンノー
ス、グルコース、ガラクトース、グルクロン酸およびガ
ラクツロン酸から選ばれたものである、オタネニンジン
由来の糖タンパク質を有効成分とする生体防御能亢進剤
。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63196455A JPH0245499A (ja) | 1988-08-06 | 1988-08-06 | オタネニンジン糖タンパク質およびその用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63196455A JPH0245499A (ja) | 1988-08-06 | 1988-08-06 | オタネニンジン糖タンパク質およびその用途 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0245499A true JPH0245499A (ja) | 1990-02-15 |
Family
ID=16358096
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63196455A Pending JPH0245499A (ja) | 1988-08-06 | 1988-08-06 | オタネニンジン糖タンパク質およびその用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0245499A (ja) |
Cited By (9)
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---|---|---|---|---|
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JP2005531576A (ja) * | 2002-05-28 | 2005-10-20 | エムディー バイオアルファ カンパニー リミテッド | 人参の葉および茎からの、抗癌および抗転移活性を有する画分 |
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-
1988
- 1988-08-06 JP JP63196455A patent/JPH0245499A/ja active Pending
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