SK138394A3 - Method for separating of liquid sample and device for realization of this method - Google Patents

Description

SPÔSOB ROZDEĽOVANIA KVAPALNEJ VZORKY A ZARIADENIE NA VYKONÁVANIE TOHTO SPÔSOBU

Oblasť techniky

Vynález sa týka spôsobu rozdeľovania kvapalnej vzorky ktorá má fázové časti rôznych hustôt do týchto fázových častí odstredivým rozdeľovaním. Vynález sa ďalej týka zariadenia na ·* vykonávanie vyššie definovaného spôsobu.

* Doterajší stav techniky

Rozdeľovanie kvapaliny do jej podielov alebo zložiek rôznej mernej hmotnosti bolo vykonávané, inter alia, vo veľa liečebných ústavoch, laboratóriách a priemyselných závodoch odstreďovaním. Tak napríklad odstreďovanie je často používané v technikách rozdeľovania krvi pre rozdelenie krvi do podielov obsahujúcich plazmu, krvné doštičky, červené krvinky, biele krvinky a/alebo vytvárané zložky, napríklad fibrinogén, fibronektín, faktor Vili, faktor XIII a podobne. Stručne povedané, prístroje používané v takýchto technikách pracujú tak, že hustejšie zložky krvi, napríklad podiely obsahujúce krvinky, sa pudia odstredivou silou do vzdialenej časti prístroja.

Množstvo návrhov prístrojov, ktoré využívajú odstreďovanie, môže byt rozdelené do dvoch kategórií: prvá kategória, v ktorej zásobník vzorky sa otáča okolo strednej osi systému odstredivky * a do druhej kategórie, v ktorej sa zásobník vzorky otáča okolo svojej vlastnej osi. V prvej kategórii je zásobník vak alebo rúrka z plastu s uzáverom na jednom konci. Takéto zásobníky sa otáčajú okolo strednej osi systému odstredivky, takže hustejšie zložky sú pudené k dnu rúrky alebo k jednej strane vaku. Potom sú vytvorené prostriedky pre selektívne odstránenie zložky nižšej hustoty, ako plazmy z hustejšej zložky, ako sú krvinky a krvné doštičky alebo naopak. Typicky je takýto prostriedok tvorený zostavou separátora, ktorý je prispôsobený na vloženie do pozdĺžnej rúrky obsahujúcej krv. Alternatívne, keď sa použije vak z plastu, tento sa starostlivo stlačí kvôli vypudeniu plazmy. Patentový spis Spojených štátov U.s. 3,932,277 popisuje prístroj obsahujúci rúrku so vzorkou a zbernou rúrkou. Zberná rúrka má filter a skúšobný ventil pri jednom konci, ktorý je vložený do jednej práve odstreďovanej rúrky so vzorkou na zhromaždenie plazmy. Podobne patentový spis Spojených štátov amerických U.S. 3,799,342 používa separátor ktorý má skúšobný ventil, ktorý sa otvorí po stlačení zásobníka so vzorkou na umožnenie prietoku oddelenej plazmy ventilom do zbernej komory. Patentový spis Spojených štátov amerických U.S. 4,818,386 používa separátor navrhnutý tak, že má mernú hmotnosť uprostred medzi mernými hmotnosťami obidvoch zložiek, do ktorých má byť kvapalina rozdelená. Pri odstreďovaní sa separátor pohybuje vo vnútri pozdĺžnej rúrky so vzorkou krvi do polohy v podstate medzi hustejšími látkami na dne a látkami s nižšou hustotou pri vrchole. Nádoba z elastoméru obklopujúca separátor ho zadrží na mieste, keď je odstreďovanie skončené kvôli uľahčeniu selektívneho odstránenia zložky s nižšou hustotou.

Ako bolo uvedené, druhá kategória obsahuje prístroje, pri ktorých komora obsahujúca kvapalinu sa otáča okolo vlastnej pozdĺžnej osi. Komora obsahujúca kvapalinu je typicky valcového alebo guľového tvaru, takže pri odstreďovaní ťažšie zložky kvapaliny, napríklad krvinky, migrujú k obvodu k stene komory a ľahšie zložky, napríklad plazma, zostávajú vo vnútri. V tejto kategórii sú prístroje, ktoré obsahujú potrubia vedúce do iných oddelených zásobníkov, typických pre príjem a/alebo prevedenie kvapaliny počas odstreďovania, a prístroje, ktoré sú samočinne naplňované pre spracovanie pevného objemu kvapaliny. Jeden takýto prístroj z prvej skupiny je Lathamova nádoba popisovaná množstve patentových spisov, spisoch Spojených štátov

U.S. 4,086,924, U.S. 4,300,717 atď. Lathamova nádoba je navrhnutá tak, že zložky s nižšou hustotou pri vnútornej časti otáčajúcej sa nádoby sú pudené nahor do zbernej oblasti vo vnútri najväčšieho vonkajšieho polomeru nádoby. Tento systém však vyžaduje stály prietok krvi na pudenie oddelenej plazmy smerom von a tento prúd pri otáčaní vyžaduje zložité a nákladné h

I* ii l;

É

t..

b napríklad amerických a obmieňaná v v patentových tesnenia otáčavých častí.

Podía patentového spisu Spojených štátov amerických U.S.4,820,716 sa kvapalina, napríklad krv, rozdeíuje do zložiek, ako je plazma a červené krvinky, odstreďovaním v pozdĺžnej rúrke pri rýchlostiach dostatočných na vytvorenie sústredného rozhrania medzi týmito zložkami. To znamená, že v podstate valcový prístroj sa otáča okolo svojej strednej alebo pozdĺžnej osi, takže hustejšie zložky tvorené krvinkami a zložky nižšej hustoty sú vo

Popisovaný prístroj potom zmenši objem pracovnej komory a zhromaždí zložky nižšej hustoty obsahujúce plazmu vypudením do stredného zberného kanálu.

Vyššie popísané sústredné rozdelenie nastáva pôsobením odstredivej sily alebo G-sily pôsobiacej na zložky a závislej na polomere a vyjadrenej vzorcom ;a pohybujú k vonkajšej stene vnútri hustejších zložiek.

G = 1,18 x 10⁵ x polomer (CM) x RPM²

Kvôli zaisteniu dobrého rozdelenia zložiek je výhodné vytvoriť čo najostrejšie rozhranie medzi zložkami rôznych hustôt. Pre každú kvapalinu pozostávajúcu z dvoch alebo viacerých zložiek je teda kvôli udržovaniu tohto sústredného rozhrania nevyhnutná minimálna G-sila. Jeden potenciálny problém takýchto prístrojov podía doterajšieho stavu techniky so zmenšením objemu a so sústredným rozhraním spočíva v tom, že je ncíahké udržiavať žiadané rozhranie, pretože keď sa objem zmenšuje a plazma sa zhromažďuje, zmenšuje sa tiež výška pracovnej komory. To zrejme spôsobuje, že kontaktný objem hustejšej látky obsahujúcej krvinky je pudený do vnútra k menšiemu polomeru. Tiež toto musí nastať u prístroja podía doterajšieho stavu techniky pri pudení látky obsahujúcej plazmu centrálne k zbernému kanálu. Avšak je možné uvážiť, že keď sa polomer látky obsahujúcej krvinky zníži pod kritickú hodnotu nevyhnutnú na udržiavanie sústredného rozhrania pri danej rýchlosti, rozhranie sa stáva menej určité, pokiaí úplne nezmizne a dochádza k zhromažďovaniu nežiaducej látky obsahujúcej krvinky. Na rozdeľovanie krvi spôsobom popísaným v zmienenom patentovom spise U.S. 4,828,716 nie je objem čistej plazmy tak kritický ako v iných aplikáciách. Príslušný prístroj tiež pracoval v režimoch ultraodstredivky.

V bežnejších technológiách sa stalo problematickým rozdeliť zložky krvi s oveľa vyššou čistotou rozdelenia majúcou za následok vyššiu hodnotu hematokritu, t.j. pomeru červených krviniek k celkovému objemu vzorky. Tiež je žiaduce, aby bolo možné vykonať rozdelenie v kratších časoch a s minimálnou potrebou detekčných prístrojov. Ďalej je potrebné uvážiť, že ultraodstred'ovanie môže vyvíjať nadmerné šmykové sily na zložky krvi, ktoré majú nežiaduce účinky, napríklad hemolýzu. V mnohých aplikáciách by mohlo byt užitočné zaistiť vyššie uvedené výhody rozdelenia kvapalín, hlavne pri rýchlostiach odstredivky nižších ako 20 000 ot./min., prednostne 3 000 až 15 000 ot./min. a optimálne 5 000 až 10 000 ot./min. Rýchlosti odstredivky vyššie ako 10 000 ot./min. majú za následok velké problémy s uložením a s ložiskami, hlavne problémy so zaistením vhodného mazania.

Úlohou predloženého vynálezu je vytvoriť oveľa presnejšie a účinnejšie rozdelovanie kvapaliny, hlavne krvi, do ich fázových častí rôznych hustôt použitím vylepšených techník rozdeľovania.

Podstata vynálezu

Vynález rieši úlohu tým, že vytvára zariadenie na rozdeľovanie kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeľovaním, ktorého podstata spočíva v tom, že obsahuje nádrž na rozdelovanie fáz obsahujúcu skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestnitelný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, prívodný prostriedok kvapaliny na privedenie kvapalnej vzorky do prsteňovitej komory, komory na rozdeľovanie fáz, keď je piest vo svojej prvej polohe, motor na otáčanie nádrže pre rozdeľovanie fáz okolo jej pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do zmienených fázových časti a ovládací prostriedok na premiestňovanie piestu vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, zatiaľ čo nádrž pre rozdeľovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania pre vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory zmieneným vypúšťacím potrubím.

Podľa výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je vypúšťacie potrubie usporiadané pri alebo blízko vnútornej valcovej steny, takže fázová časť, ktorá má byť vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najnižšej hustoty.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vypúšťacie potrubie je tvorené potrubím prechádzajúcim spodnou stenou a opatreným ovládacím ventilom, ktorý je ovládateľný z uzatvorenej polohy do otvorenej polohy, aby bolo spôsobené vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je potrubie usporiadané pri vonkajšej valcovej stene a jedna z fázových častí, ktorá má byť vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najvyššej hustoty.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu ovládací ventil je skúšobný ventil, ktorý je prepínateíný z uzatvorenej polohy do otvorenej polohy, keď je vystavený odstredivej sile, keď nádrž pre rozdeľovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vypúšťacie potrubie pozostáva z potrubia prechádzajúceho hornou stenou.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je potrubie usporiadané pri vnútornej valcovej stene a jedna z fázových častí, ktorá má byť vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najnižšej hustoty.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je potrubie usporiadané pri vonkajšej valcovej stene a jedna z fázových časti, ktorá má byť vypudená z prsteňovitej komory, je

Podľa zariadenie vypudenej z

Podľa vypúšťacie uzatvorené vypudenou z

Podľa fázová časť najvyššej hustoty.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu motor vytvára otáčanie nádrže pre rozdeľovanie fáz okolo pozdľžnej osi pri rýchlosti otáčania dostatočnej na vyvíjanie tiažového poľa vo vnútri prsteňovitej komory pre rozdelenie kvapalnej vzorky do fázových časti v ktoromkoľvek mieste vo vnútri prsteňovitej komory.

ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu obsahuje prijímaciu komoru na príjem fázovej časti prsteňovitej komory.

ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu potrubie obsahuje reakčnú komoru, v ktorej je činidlo pre reakciu s jednou z fázových časti prsteňovitej komory na vytvorenie reakčného produktu, ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu prijímacia komora tvorí reakčnú komoru, v ktorej je uzatvorené činidlo pre reakciu s jednou z fázových častí vypudenou z prsteňovitej komory na vytvorenie reakčného produktu.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vnútorná valcová stena vymedzujúca ďalšiu prijímaciu komoru je usporiadaná okolo rovnakej pozdĺžnej osi ako prsteňovitá komora, pričom tieto komory sú oddelené zmieneným piestom.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vnútorná valcová stena vymedzujúca prsteňovitú komoru obsahuje valcovú stenu piestu.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vnútorná valcová stena vymedzuje ďalšiu prijímaciu komoru spojenú s reakčnou komorou ďalším potrubím pre príjem reakčného produktu z reakčnej komory.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je ďalšia prijímacia komora tvorená oddelenou injekčnou striekačkou uloženou vo vnútri vnútornej valcovej steny.

Vynález ďalej vytvára zariadenie pre rozdeľovanie kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt, do zmienených fázových častí odstredivým rozdeľovaním, ktorého podstata spočíva v tom, že obsahuje nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúcu skriňu majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, vnútorná valcová stena a vonkajšia valcová stena vymedzujú vnútorný polomer rj a vonkajší polomer r_Q vzhíadom na pozdĺžnu os a pomer vnútorného polomeru k vonkajšiemu polomeru r/^Γθ je rovný od 0,3:1 do 0,8:1, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteíný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, prívodný prostriedok kvapaliny na privedenie kvapalnej vzorky do prsteňovitej komory na rozdeľovanie fáz, keď je piest vo svojej prvej polohe, motor pre otáčanie nádrže na rozdeíovanie fáz okolo jej pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do zmienených fázových častí a ovládací prostriedok na premiestňovanie piestu vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, zatiaí čo nádrž na rozdeíovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania kvôli vypudeniu jednej z fázových častí z prsteňovitej komory zmieneným vypúšťacím potrubím.

Podía výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je pomer r^/r_Q rovný 0,5:1.

Podía ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vnútorný polomer r^ a rýchlosť otáčania sú zvolené tak, že tiažová sila potrebná na sústredné rozdelenie fázových častí rôznych hustôt je vytvorená vo všetkých oblastiach vo vnútri prsteňovitej komory.

Podía zariadenie s motorom.

Podía ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu obsahuje spojovací prostriedok na spojenie skrine ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu je spojovací prostriedok tvorený zvierajúcim spojovacím prostriedkom usporiadaným na vonkajšej valcovej stene skrine.

Vynález ďalej vytvára spôsob rozdeľovania kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeíovaním, ktorého podstata spočíva v tom, že sa opatrí nádrž pre rozdeíovanie fáz obsahujúca skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem a vypúšťacie potrubie usporiadané pri vnútornej valcovej stene a spojené s prsteňovitou komorou, kvapalná vzorka sa privedie do prsteňovitej komory, komory pre rozdeíovanie fáz, keď je piest v prvej polohe, nádrž na rozdeíovanie fáz sa otáča okolo pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do fázových častí, piest sa premiestni vo vnútri prsteňovitej komory do druhej polohy, zatiaí čo sa nádrž pre rozdeíovanie fáz otáča rýchlosťou otáčania kvôli vypudeniu jednej z fázových častí z prsteňovitej komory vypúšťacím potrubím.

Vynález ďalej vytvára spôsob rozdeľovania kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeíovaním, ktorého podstata spočíva v tom, že sa opatrí nádrž pre rozdeíovanie fáz obsahujúca skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, kvapalná vzorka sa privedie do prsteňovitej komory, komory na rozdeíovanie fáz, keď je piest v prvej polohe, nádrž na rozdeíovanie fáz sa otáča okolo pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania na vyvíjanie tiažového poía v prsteňovitej komore pre rozdelenie kvapalnej vzorky do fázových časti vo všetkých miestach prsteňovitej komory, piest sa premiestni vo vnútri prsteňovj tej komory do druhej polohy, zatiaľ čo sa nádrž pre rozdeľovanie fáz otáča rýchlosťou otáčania pre vypudenie jednej z fázových časti z prsteňovitej komory vypúšťacím potrubím.

Vynález ďalej vytvára spôsob rozdeľovania kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeľovaním, ktorého podstata spočíva v tom, že sa opatri nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúca skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoria spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premicstniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, a vypúšťacie potrubie usporiadané pri vnútornej valcovej stene a spojené s prsteňovitou komorou, kvapalná vzorka sa privedie do prsteňovitej komory, komory pre rozdeľovanie fáz, keď je piest v prvej polohe, nádrž pre rozdeľovanie fáz sa plynulo otáča okolo pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou oddelenie jednej z fázových častí, ktorá má byt oddelená z kvapalnej vzorky a piest sa premiestni vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, zatiaľ čo nádrž pre rozdeľovanie fáz sa otáča rýchlosťou otáčania pre plynulé vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory vypúšťacím potrubím, keď je jedna z fázových častí oddelená od kvapalnej vzorky.

Vynález ďalej vytvára zariadenie pre rozdeľovanie kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeľovaním, ktorého podstata spočíva v tom, že obsahuje nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúcu skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, vnútorná valcová stena a vonkajšia valcová stena vymedzujú vnútorný polomer r^ a vonkajší polomer r_Q vzhladom na pozdĺžnu os a pomer vnútorného polomeru k vonkajšiemu polomeru r^/r_Q je rovný od 0,3:1 do 0,8:1, prednostne 0,5:1, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteíný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, prívodný prostriedok kvapaliny na privedenie kvapalnej vzorky do prsteňovitej komory na rozdcíovanie fáz, keď je piest vo svojej prvej polohe, motor na otáčanie nádrže pre rozdeíovanie fáz okolo jej pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do zmienených fázových častí a ovládací prostriedok pre premiestňovanie piestu vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, zatiaí čo nádrž pre rozdeíovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania pre vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory zmieneným vypúšťacím potrubím a prostriedok na zaistenie vlastností jednej alebo obidvoch zložiek vo vnútri nádrže na rozdeíovanie fáz počas procesu rozdeľovania.

Podía výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu kvapalná vzorka je vzorka krvi a zmienená jedna fázová časť je plazma.

Vynález ďalej vytvára spôsob rozdelenia kvapaliny do dvoch alebo viacerých jej zložiek sústredným usporiadaním zložiek odstredením, ktorého podstata spočíva v tom, že obsahuje kroky:

a) zavedenie pevného množstva kvapaliny do valcovej pracovnej komory premenlivého objemu, táto komora je vymedzená vonkajšou stenou a vnútornou stenou s pevnými polomermi vzhladom na pozdĺžnu os komory, pričom polomer vnútornej steny je zvolený tak, že pri žiadanej rýchlosti otáčania je pri vnútornej stene vyvíjaná tiažová sila aspoň rovná sile, ktorá je nevyhnutná na udržiavanie sústredného rozhrania medzi prvou a druhou zložkou kvapaliny,

b) otáčanie komory okolo jej pozdĺžnej osi žiadanou rýchlosťou na vytvorenie zmieneného sústredného rozhrania a pokračovania v otáčaní, zatiaľ čo sa

c) vykoná zmenšenie objemu pracovnej komory na vypudenie jednej zo zložiek kvapaliny vypúšťacím prostriedkom na rozdelenie zložiek, čím je sústredné rozhranie zložiek v podstate udržiavané počas kroku c).

Vynález ďalej vytvára prsteňovitú sústavu prispôsobenú umiestneniu vo vnútri odstredivky na vystavenie kvapaliny pôsobeniu chemického alebo biologického činidla v priebehu odstreďovania, ktorého podstata spočíva v tom, že obsahuje v sústrednom usporiadaní ► a) vonkajšiu prsteňovitú stenu vymedzujúcu prsteňovitú vonkajšiu komoru pre vstup kvapaliny,

b) prvý prsteňovitý filter umiestnený vo vnútri vstupnej komory,

c) prsteňovitú komoru pre činidlo obsahujúce zdroj chemického alebo biologického činidla a umiestnenú vo vnútri prvého filtra,

d) druhý prsteňovitý filter umiestený vo vnútri komory pre činidlo,

e) vnútorné výstupné potrubie kvapaliny umiestnenej vo vnútri druhého filtra a

f) tlakový prostriedok prispôsobený na zaistenie prietoku kvapaliny smerom do vnútra v priebehu odstreďovania.

Vynález ďalej vytvára spôsob rozdeľovania zložiek krvi zo vzorky krvi, ktorého podstata spočíva v tom, že zahrňuje zavedenie pevného objemu krvi do prvej prsteňovitej komory • odstredivky, kde je prsteňovitú komora vymedzená vonkajšou valcovou stenou a vnútornou valcovou stenou, tieto steny sú ' súosové, ako i hornou stenou a spodnou stenou, ktoré sú tvorené piestom premiestnitelným vo vnútri prvej komory, otáčanie odstredivky okolo spoločnej osi na odstredivé rozdelenie krvi na dve alebo viac zložiek rôznej hustoty, prenesenie jednej zo zložiek do druhej komory pôsobením piestu, zatiaľ čo odstreďovanie pokračuje na udržiavanie rozdeľovania v prvej komore, pričom druhá komora je vymedzená valcovou stenou súosovou so zmienenou spoločnou osou, vystavenie prenesenej zložky pôsobenia činidla schopného oddelenia žiadanej zložky krvi z prenesenej zložky a odstránenie zložky krvi z prenesenej zložky pri použití zariadenia definovaného vyššie.

Vynález ďalej vytvára spôsob prípravy monoméru fibrínu z krvi, ktorého podstata spočíva v tom, že sa pevný objem krvi zavedie do prvej prsteňovitej komory odstredivky, kde prsteňovitá komora je vymedzená vonkajšou valcovou stenou a vnútornou valcovou stenou, ktoré sú súosové vzhľadom na spoločnú os, a hornou stenou a spodnou stenou, kde horná stena alebo spodná stena je tvorená piestom premiestniteľným v prvej komore, odstredivka sa otáča okolo spoločnej osi kvôli odstredivému rozdeleniu krvi na zložku krviniek a zložku plazmy, zložka plazmy sa prenesie do druhej komory pôsobením piestu, zatiaľ čo odstreďovanie pokračuje kvôli udržiavaniu rozdelenia v prvej komore, pričom druhá komora je vymedzená vonkajšou valcovou stenou súosovou so spoločnou osou, zložka plazmy v druhej komore sa vystaví pôsobeniu enzýmu ako je trombín, v ktorom sa zložka plazmy rozdelí na tekutý podiel a na podiel obsahujúci nezosietovaný polymér fibrínu, tekutý podiel sa z druhej komory odstráni, nezosietovaný polymér fibrínu sa stane rozpustný na vytvorenie roztoku obsahujúceho monomér fibrínu a enzým ako trombín sa z roztoku takto vytvoreného a obsahujúceho monomér fibrínu odstráni s použitím zariadenia definovaného vyššie.

Podľa výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu vo vnútri vnútornej valcovej steny prsteňovitej komory je tretia komora, ktorá obsahuje roztok na obnovenie rozpustnosti, ktorý sa dávkuje do druhej komory kvôli vytvoreniu rozpustnosti nezosietovaného polyméru fibrínu a pričom tretia komora je prispôsobená na zhromaždenie roztoku obsahujúceho monomér fibrínu po vytvorení rozpustnosti a prípadnom odstránení enzýmu.

Podľa výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu tretia komora je injekčná striekačka.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu nezosietovaný polymér fibrínu a monomér fibrínu sú zvolené zo skupiny zahrňujúcej fibrín I, fibrín II a des BB fibrín.

Podľa ďalšieho výhodného vyhotovenia predloženého vynálezu enzým ako trombín je zvolený zo skupiny zahrňujúcej akutín, venzým, asperázu, botropázu, krotalázu, flavoxobín, gabonázu, batroxobín a trombín.

Zvláštna výhoda predloženého vynálezu spočíva v tom, že vynález umožňuje rýchle a účinné rozdeľovanie zložiek kvapaliny pri vylúčení nevýhod doterajšieho stavu techniky, to znamená vylúčenie vysoko nákladného a zložitého zariadenia, ako i vylúčenie poškodenia zložiek rozdeľovanej kvapaliny, napríklad zložiek krvi, ku ktorému môže dôjsť v systéme ultraodstred’ovania.

Zvláštne vytvorenie predloženého vynálezu súvisí so skutočnosťou, že v súlade s novými technikami rozdeľovania a zhromažďovania podľa predloženého vynálezu môže byt použitá vzorka krvi na vykonávanie extrakcie fibrínu, ktorý má byť použitý pri príprave látky podporujúcej opravu tkaniva, tzv. lepidla tkaniva, ktorého rozdelenie a príprava sú vykonávané v oblasti poľa vylučujúceho nebezpečenstvo, že laboratórny personál alebo operátori budú vystavení účinkom infekčných činidiel následkom styku s krvou, spôsobujúcich napríklad hepatitídu alebo AIDS.

Zvláštna výhoda predloženého vynálezu sa týka nového spôsobu rozdeľovania a zhromažďovania, ktorý umožňuje vykonávať vzorky krvi za účelom rozdelenia krvi na plazmu ďalej na oddelenie krvných doštičiek z krviniek a potom umožňuje získať plazmu so žiadaným vysokým alebo nízkym podielom krvných doštičiek zmenou vhodných parametrov procesu rozdeľovania.

rozdeľovanie a krvinky a

Prehľad obrázkov na výkresoch

Vynález je znázornený na výkresoch, kde obr. 1 je schematický osový rez prvým vyhotovením nádrže na vzorku zariadenia pre odstredivé rozdeľovanie a spracovanie kvapalnej vzorky podľa predloženého vynálezu, obr. 2 až 10 sú schematické osové rezy podobné obr. 1 a znázorňujúce špecifické kroky spôsobu rozdeľovania a extrakcie pri použití prvého vyhotovenia zariadenia znázorneného na obr. 1, obr. 11 je schematický osový rez podobný obr. 1 znázorňujúci druhé vyhotovenie nádrže pre vzorku zariadenia pre odstredivé rozdeľovanie a spracovanie r;

»:

technikami podľa predloženého vynálezu, obr. 12 až 18 sú f schematické osové rezy podobné obr. 2 až 10 a znázorňujúce t špecifické kroky spôsobu rozdeľovania a extrakcie pri použití · druhého vyhotovenia zariadenia znázorneného na obr. 11, obr. 19 ;

je schematický osový rez tretím vyhotovením alebo prototypom ' nádrže pre vzorku zariadenia pre odstredivé rozdeľovanie i

a spracovanie technikami podľa predloženého vynálezu, obr. 20 je ' perspektívny a rozložený pohľad na zložku tretieho vyhotovenia zariadenia znázorneného na obr. 19, obr. 21 je schematický čiastočný rez zariadenia pre odstredivé rozdeľovanie a spracovanie, v ktorom nádrž pre vzorku je prispôsobená k vykonávaniu procesu rozdeľovania a extrakcie automatizovaným alebo poloautomatizovaným spôsobom, obr. 22a až 22c sú schematické rezy mechanizmom pre aretáciu a upevnenie nádrže na vzorku vzhľadom k zariadeniu pre odstredivé rozdeľovanie a spracovanie, znázorňujúce kroky procesu aretácie a upevnenia, obr. 22d a 22e sú schematické osové rezy vekom nádrže na vzorku spojené s optickými detektormi použitými v súlade s dvoma alternatívnymi princípmi optických detektorov, obr. 23 je diagram znázorňujúci závislosť medzi tiažovou silou pri vnútornej a pri vonkajšej stene komory pre rozdeľovanie fáz nádrže na vzorku a rýchlostí otáčania nádrže pre vzorku, obr. 24 je diagram znázorňujúci percentuálny výťažok špecifickej vzorky krvi pri rozdeľovaní vzorky krvi použitím nádrže pre vzorku podľa predloženého vynálezu v závislosti od času vykonávania procesu rozdeľovania, ďalej znázorňujúci dve špecifické krivky výťažku zodpovedajúce výťažkom plazmy s vysokým a s nízkym obsahom krvných doštičiek a obr. 25 je diagram znázorňujúci závislosť medzi objemom vzorky krvi, ktorý má byt rozdelený s použitím nádrže pre vzorku zariadenia pre odstredivé rozdeľovanie a spracovanie podľa predloženého vynálezu a čas vykonávania procesu rozdeľovania.

Príklady vyhotovenia vynálezu

Na obr. 1 je znázornené prvé použitú v súlade s technikami vyhotovenie nádrže pre vzorku podľa predloženého vynálezu všeobecne zahrňujúci a označené vzťahovou značkou 10. Nádrž 10 pre vzorku tvori konštrukčnú jednotku použitú v zariadení pre odstredivé rozdeľovanie a spracovanie popísané ďalej. Hoci jc predložený vynález popisovaný v termínoch týkajúcich sa rozdeľovania krvi, prednostne pre prípravu zložiek vhodných pre fibrínový glej, je potrebné uviesť, že prístroje, zariadenia a spôsoby tu popísané môžu byt použité pri rozdeľovaní akýchkoľvek kvapalín. Predložený vynález je obzvlášť vhodný na rozdeľovanie vzorky krvi na krvinky a plazmu a pre prípravu fibrinového výťažku z plazmy, napríklad podľa techniky popísanej v medzinárodnej prihláške vynálezu číslo PCT/DK87/00117, publikačné číslo WO 88/02259 a v európskej prihláške vynálezu EP 592,242 majúcej názov Fibrínové tesniace zmesi a spôsoby ich použitia.

V prihláške vynálezu EP 592,242 sú popísané spôsoby a zmesi pre úplne nový fibrínový glej. Prihláška vynálezu EP 592,242 popisuje spôsob vytvorenia fibrinového tesnenia, styk žiadaného miesta so zmesou obsahujúcou monomér fibrínu a premenu tohto monoméru na polymér fibrínu súčasne so stykom, čím sa vytvorí tesnivo na žiadanom mieste. Výraz fibrín zahrňuje fibrín I, fibrín II a des BB fibrín. Prihláška vynálezu EP 592,242 ďalej popisuje spôsob vytvorenia zmesi monomérov fibrínu obsahujúci kroky:

a) styk zmesi obsahujúcej fibrinogén s enzýmom ako trombín na vytvorenie nezosietovaného polyméru fibrínu,

b) oddelenie nezosietovaného polyméru fibrínu od zmesi fibrinogénu a

c) solubilizáciu nezosietovaného polyméru fibrínu na vytvorenie zmesi obsahujúcej monomér fibrínu.

Enzým ako trombín môže byť samotný trombín alebo iný enzým majúci podobnú aktivitu, napríklad ankrod, akutín, venzým, asperáza, botropáza, krotaláza, flavoxobín, gabonáza alebo batroxobín, ktorý je prednostný.

Podľa prednostného vyhotovenia predloženého vynálezu môže byť prv popísaná príprava monoméru fibrínu vykonávaná rýchlym, účinným a bezpečným spôsobom na prístrojovej jednotke s dvoma alebo viacerými komorami. Predmetný pristroj vykonáva prípravu takéhoto monoméru fibrínu za čas kratší ako 30 minút a je obzvlášť užitočný pri príprave z. jediného donora alebo prednostne pri autologickej príprave fibrínového tesniva. Zmes monoméru fibrínu z jediného donoru alebo autologickou prípravou môže byt súčasne podávaná s alkalickým pufrom alebo s destilovanou vodou prednostne obsahujúcou zdroj v.ipnikových iónov.

Nádrž 10 pre vzorku obsahuje skriňu 12 pozostávajúcu z valcovej steny 14, z hornej steny 16 a zo spodnej steny 18. Horná stena 16 je opatrená stredným priechodným otvorom 20. v ktorom je zasadený piest 22 utesnený vzhladom na stredný priechodný otvor 20 hornej steny 16 typicky tesniacim O-krúžkom

24.

Steny 14., 16 a 18 sú po uložení piestu 22 do stredného priechodného otvoru 20 hornej steny 16 navzájom spojené niektorým zvyčajným spôsobom, napríklad závitmi alebo vzájomným zlepením. Valcová stena 14 a spodná stena 18 môžu tiež byt z jedného kusu, ktorý je spojený napríklad zlepením alebo závitmi s hornou stenou

16. Alternatívne môžu byt horná stena 16 a valcová stena 14. z jedného kusa, ktorý je spojený s oddelenou spodnou stenou 18. Podlá ďalšej alternatívy môžu steny 14., 16 a 18 tvorit tri oddelené zložky, ktoré sú spolu spojené závitmi alebo nejako inak, napríklad zlepením alebo zváraním.

Ako je vidno, tvoria vnútorná valcová stena 26 a vonkajšia valcová stena 14 prsteňovitú komoru, v ktorej sa vykonáva odstreďovanie. Polomery týchto stien 14 a 26 od strednej osi nádrže 10 sú zvolené tak, že pri žiadanej rýchlosti otáčania sa vyvíja dostatočná G-sila na udržiavanie sústredného rozdelenia zložiek kvapaliny. To sa bude menit v závislosti od kvapaliny a od žiadaných rýchlostí. Tak napríklad pre rozdeľovanie krvi sa pri použití predmetného zariadenia má udržiaval: G-sila v rozmedzí 400 až 1 000 G. To spôsobuje, že pre rýchlosti od 5 000 do 10 000 ot./min., prednostne pre 5 000 ot./min., jc polomer vnútornej valcovej steny 26 typicky aspoň od 1,0 cm do 1,5 cm v závislosti od rýchlosti a od vzorky krvi. Polomer vonkajšej valcovej steny sa môže meniť v závislosti od veľkosti vzorky, ktorá má byť uložená. Pre rozdeľovanie zložiek krvi sú vhodné polomery vonkajšej valcovej steny 14 od 2,0 cm do 3,5 cm a vyššie pri rozsahu rýchlosti od 5 000 do 10 000 ot./min. Prednostne je pomer polomeru r^ vnútornej steny k polomeru r_Q vonkajšej steny od 0,3:1 do 0,8:1, prednostne asi 0,5:1.

Piest 22 má valcovú stenu 26, ktorá je utesnená tesniacim O-krúžkom 24. Valcová stena 26 je vytvorená vcelku s kruhovou doskou 28., ktorá je utesnená vzhľadom na vnútorný povrch valcovej steny 14 tesniacim O-krúžkom 30. Tesniace O-krúžky 24 a 30 umožňujú zdvih piestu 22 a jeho spustenie vzhľadom ku skrini £2 pre zmenu objemu vnútorných komôr vymedzených vo vnútri nádrže 10 pre vzorky, ako bude ďalej podrobnejšie vysvetlené a pre utesnenie vnútorných komôr navzájom i vzhľadom k okoliu.

Piest 22 môže v základe vymedziť vo vnútri skrine 12 nádrže 10 pre vzorku jednu, dve alebo tri komory, totiž prvú komoru 32, ktorá má prsteňovitý tvar vymedzený medzi valcovými stenami 14 a 26, pripadne druhú komoru vymedzenú medzi spodnou stenou 18 a kruhovou doskou 28., a prípadnú tretiu komoru 36 vymedzenú vo vnútri valcovej steny 26 piestu 22.

Z vnútorného povrchu spodnej steny 18 vyčnieva smerom nahor výstupok 38 tvorený jedným alebo niekoľkými oddeleným vreckovými prvkami alebo kruhovým rebrom, takže vnútorný objem druhej komory 34 nikdy nemôže byt nulový. V druhej komore 34 môže byt uložené žiadané prvé chemické alebo biochemické činidlo 40 v ľubovoľnej forme, použité pre spracovanie alebo pre reakciu so zložkou kvapaliny oddelenou v prvej komore 32 a extrahovanou do druhej komory 34.

Piest 22 môže byt prípadne opatrený prstefiovitým vekom 42 slúžiacim na uloženie a nesenie prípadnej injekčnej striekačky 44. Injekčná striekačka 44 môže byť bežného typu s valcovým puzdrom 46. Injekčná striekačka 44 ďalej popísaná je v tomto prednostnom vyhotovení užitočná na zavedenie žiadaného druhého chemického alebo biochemického činidla alebo roztoku do druhej komory 34. Alternatívne môže byť injekčná striekačka 44 nahradená ampulou alebo injekčnou striekačkou trochu inej konštrukcie špecifickým požiadavkám týkajúcim sa s dávkovačom alebo zostavou injekčnej striekačky, v ktorej má byť použitá ampula alebo injekčná striekačka. Pri najvyššom konci valcového puzdra 46 je vytvorená a tvaru kvôli vyhoveniu mechanickej znášanlivosti von vyčnievajúca prsteňovitá príruba 46 a najnižší koniec valcového puzdra 46 je opatrený kužeíovitou rúrou 50 pripojenou k vonkajšej valcovej stene valcového puzdra 46 spodnou stenou 52 valcového puzdra 46. Vo vnútri valcového puzdra 46 je uložený plunžer 54.

Kužeíovitá rúrka 50 môže byť uložená v kužeľovitom nástavci 56. ktorý je pri svojom spodnom konci spojený s potrubím 58. Potrubie 58 môže mať značnú dĺžku umožňujúcu vybranie injekčnej striekačky 44 z vnútra tretej komory 36 bez odpojenia kužeíovitej rúrky 50 injekčnej striekačky 44 od kužeíovitého nástavca 56. Potrubie 58 prechádza stredným otvorom kruhovej dosky 28 do druhej komory 34 a je spojené odbočkou s ďalším potrubím 60. Ďalšie potrubie 60 je spojené s vtokom 62 vytvoreným pri najvyššom konci valcovej steny 26 piestu 22 a pri vtoku 62 je umiestnený filtračný prvok 64.. Potrubie 60 tvorí vtokové potrubie, ktorým sa druhé chemické alebo biochemické činidlo 88 znázornené na obr. 2 zavádza do vnútorného priestoru vymedzeného vo vnútri valcového puzdra 46 injekčnej striekačky £4, pričom tento vnútorný priestor je vymedzený pod plunžrom 54 pri jeho zdvihnutí z polohy znázornenej na obr. 1 do polohy znázornenej na obr. 2. Po zavedení činidla 88 do vnútorného priestoru injekčnej striekačky 44 sa vtok 62 prednostne utesní neznázorneným tesniacim vekom. Alternatívne môže vtok 62 slúžiť ako odvzdušňovacia výpust na odvádzanie prebytočného vzduchu z potrubia 58 a z potrubia 60 do atmosféry pri vykonávaní spôsobu popísaného ďalej s prihliadnutím na obr. 2 až 10.

Spojenie z druhej komory 4. do potrubia 58 môže obsahovať mikroporózny filter 66, ktorý je uložený vo výklenku vytvorenom v kruhovej doske 28 na jej spodnom povrchu. Žiadané biochemické alebo chemické činidlo môže byť tiež uložené alebo adsorbované na mikroporéznom filtri 66 alebo kdekoívek vo vnútri potrubia 58 na spracovanie prvej zložky kvapaliny oddelenej v prvej komore 32. a z nej extrahovanej. Z prvej komory 32 je vytvorené spojenie do druhej komory 34 kanálom 65, ktorý je vytvorený vo valcovej stene 26 a v kruhovej doske 28 piestu 22. Kanál 65 má byť vytvorený pri radiálnej polohe vo vnútri vonkajšieho povrchu valcovej steny 26. Kanál 65 môže byt prípadne vytvorený kdekoívek v hornom povrchu kruhovej dosky 28 vo vnútri prvej komory 32, kde sa majú zhromažďovať zložky kvapaliny. Kanál 65 je normálne uzatvorený skúšobným ventilom 68., ktorý môže obsahovať tesniacu zátku 70 a pružinu 72 uloženú na nosnom drieku 73 a tlačiaci tesniacu zátku 70 do tesniacej alebo uzatváracej polohy. Skúšobný ventil 68 je prednostne uložený čo možno najbližšie k pozdĺžnej osi nádrže 10 pre vzorku. V jednom alternatívnom alebo obmenenom vyhotovení nádrže 10 pre vzorku je skúšobný ventil 68 uzatvorený vo vnútri oddelenej komôrky umiestnenej vo vnútri tretej komory 36 a oddelenej od nej zvláštnou stenou a ďalej spojenou s prvou komorou 32 potrubím prechádzajúcim valcovou stenou 26 piestu 22. Alternatívne môže byť skúšobný ventil 68 uložený v oddelenom výklenku vytvorenom vo vnútri kruhovej dosky 28. Spojenie kanálom 65 do druhej komory 34 je vytvorené ďalším mikroporéznym filtrom 74 podobným mikroporéznemu filtru 66 popísanému vyššie. Mikroporézny filter 74 je uložený vo výklenku vytvorenom pri spodnom povrchu kruhovej dosky 28 piestu 22.

Prvá komora 32 je ďalej spojená s prívodným potrubím 76 cez vývrt 78 vytvorený pri hornej stene 16 skrine 12. Prívodné potrubie 76 môže byt pri svojom vonkajšom konci opatrené puzdrom na zasunutie ihly neznázornenej injekčnej striekačky obsahujúcej vzorku, prednostne vzorku krvi, ktorá má byt zavedená do prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku.

Prvá komora 32 je prednostne spojená s okolím odvzdušňovacím potrubím alebo potrubím 82 tvoriacim spojenie z vnútra prvej komory 32 do odvzdušňovacej výpuste 84 protiíahlej k výpusti 62 popisovanej vyššie. Spojenie z prvej komory 32 odvzdušňovacím potrubím 82 je všeobecne vytvorené za predpokladu, že piest 22 je v najnižšej polohe, ako je znázornené na obr. 1, ked vtok do odvzdušňovacieho potrubia 82 je zdvihnutý nad tesniaci O-krúžok 24 za predpokladu, že piest 22 je zdvihnutý do polohy znázornenej napríklad na obr. 4.

Alternatívne môže byť odvzdušňovací prostriedok usporiadaný v ktoromkoívek vhodnom mieste nádrže ]0 pre vzorku.

Nádrž 10 pre vzorku je, ako bolo uvedené vyššie, prednostne použitá pre rozdeľovanie vzorky krvi do krviniek a plazmy majúcej vysoký obsah krvných doštičiek alebo alternatívne nízky obsah krvných doštičiek a ďalej na extrakciu krvnej zložky z plazmy, ako bude vysvetlené ďalej s prihliadnutím k obr. 2 až 10.

V obr. 2 je znázornený prvý krok prvého spôsobu rozdelenia vzorky 86 krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddelenie zložky krvi z jednej z kvapalných zložiek.

Na obr. 2 je vzorka 86 krvi uložená v prvej komore 32 a vypĺňa špecifický objem prvej komory 32 pri zaistený zvyškového vzdušného priestoru 87 nad vzorkou 86 krvi. V prednostnom vyhotovení je vzorka 86 krvi v prvej komore 32 v prítomnosti nejakého antikoagulačného činidla. Môže byt použité akékoívek antikoagulačné činidlo a vhodné príklady sú heparín, EDTA, hirudín, citrán a iné chelátory vápnika, ako NTA, HĽDTA, EDDHA, EGTA, DTPA, DCTA, HEPES, ΙΙΙΜ0Λ atď. Vzorka 86 krvi uložená v prvej komore 32 je vyznačená množstvom malých krúžkov. Nad vzorkou 86 krvi je zaistený vzdušný priestor 8.7· Na obr. 2 je plunžer 54 injekčnej striekačky 44 zdvihnutý a pufrové činidlo 88 opätovného rozpustenia, čo môže byt napríklad roztok pufra opätovného rozpustenia a ktoré bolo prednostne zavedené do vnútra injekčnej striekačky 44 potrubím 60, ako bolo uvedené vyššie, je uložené vo vnútri injekčnej striekačky 44. Piest 22 nádrže 10 pre vzorku je v najnižšej polohe, takže prvá komora 32 je odvzdušňovaná odvzdušňovacím potrubím 82, keď je vzorka 86 krvi zavádzaná do prvej komory 32. Pufor 88 opätovného rozpustenia je vyznačený množstvom malých trojuholníkov.

Pufrové činidlo 88 opätovného rozpustenia môže byt nejaký roztok kyslého pufra prednostne majúci pH medzi 1 a 5. Vhodné príklady sú kyselina octová, kyselina jantárová, kyselina glukuronová, kyselina cysteínová, kyselina krotónová, itakonová, kyselina glutonová, adipová a kyselina kyselina sa dáva adipovej sodnému.

kyselina ich soli.

mravčia, Prednosť kyseline octanu asparágová, kyselina kyseline jantárovej, kyseline asparágovej, a soliam kyseliny octovej, napríklad Solubilizácia môže byť tiež vykonaná pri neutrálnom pH prostredníctvom chaotropného činidla. Vhodné činidlá sú močovina, bromid sodný, guanidínhydrochlorid, KCNS, jodid draselný a bromid draselný. Koncentrácia a objemy takéhoto kyslého pufra alebo chaotropného činidla sú uvedené v európskej prihláške vynálezu

ΕΡ 599,242.

Na obr. 3 je znázornený druhý krok prvého spôsobu, keď nádrž 10 obsahujúca celú vzorku je otáčaná okolo pozdĺžnej osi nádrže 10 pre vzorku. Je potrebné, aby celková konštrukcia nádrže 10 pre vzorku mala v zásade súmerný tvar, ako je zrejmé z obr. 1. Ďalej je potrebné zaistiť, aby vzorka krvi uložená v prvej komore 32 bola vystavená v zásade konštantnej odstredivej sile rovnej od 500 G do 1 000 G, ked prvá komora 32 má celkový prsteňovitý tvar s nepatrnou radiálnou variáciou a ked nádrž 10 pre vzorku je otáčaná rýchlosťou asi 5 500 ot./min. Na obr. 3 vzorka krvi obsiahnutá v prvej komore 32 je rozdelená do dvoch zložiek, kvapaliny 90 obsahujúcej krvinky a označené vyššie popísanými krúžkami a plazmy 92 označenej množstvom malých štvorčekov. Kvapalina 90 obsahujúca krvinky má trocha vyššiu hustotu ako plazma 92. čo spôsobuje rozdelenie následkom vysokej rýchlosti otáčaním vyvinutej, keď sa nádrž 10 pre vzorku otáča vysokou rýchlosťou 5 000 až 10 000 ot./min.

Ked sa nádrž 10 pre vzorku otáča vyššie uvedenou vysokou rýchlosťou, skúšobný ventil 68 je otvorený, lebo tesniaca zátka 70 je pudená radiálne von. Hoci je skúšobný ventil 68 otvorený, kvapalina obsiahnutá vo vnútri prvej komory 32 nepreteká kanálom 65, lebo jednak kvapalina, ktorá je rozdelená do kvapaliny 90 a do kvapaliny 92 je pudená radiálne von k valcovej stene 14. a jednak kanál 65, ako bolo uvedené vyššie, je vytvorený v radiálnej polohe vo vnútri valcovej steny 26. Zatiaí čo nádrž 10 pre vzorku sa stále otáča, piest 22 je v tretom kroku prvého spôsobu zdvihnutý z polohy znázornenej na obr. 3 do polohy znázornenej na obr. 4, čo spôsobuje prevedenie kvapaliny z prvej komory 32 do druhej komory 34.

V priebehu počiatočného zdvihu piestu 22 je vzduch obsiahnutý v prvej komore 32 vypudený odvzdušňovacím potrubím 82. Po zdvihnutí odvzdušňovacieho potrubia 82 nad tesniaci O-krúžok 24 je akýkoívek prebytočný vzduch vzdušného priestoru 87 hore na obr. 2 v prvej komore 32 prevedený do druhej komory 34. ked akékoívek objemové rozdiely medzi prvou komorou 32 a druhou komorou 34 sú vyrovnané odvzdušňovacím potrubím 60 spojeným s druhou komorou 34 cez mikroporézny filter 66. Plazma g

ί &

ľ?

]Τ» k

I · znázornená na obr. 3 je tiež prevedená z prvej komory 32 do prípadnej druhej komory 34 kanálom 65. Na obr. 4 je plazma prevedená do druhej komory 34 označená vzťahovou značkou 94 a je vyznačená malými štvorcami, ako bolo uvedené vyššie. Keď sa objem druhej komory 34 zväčší, prípadne chemické alebo biochemické činidlo 40 je tiež prevedené z polôh znázornených na obr. 2 a 3 do polôh pri vnútornom valcovom povrchu zväčšenej druhej komory 34. Činidlo 40, ako bolo uvedené vyššie, môže byt v akejkoľvek forme, napríklad činidlo alebo enzým môže byť adsorbovaný alebo nanesený na podklad z čiastočiek ako enzým viazaný na gel agarózy alebo inej takejto čiastočky.

Keď bolo vopred určené množstvo plazmy prevedené z prvej komory 32 do druhej komory 34 alebo keď v podstate všetka plazma bola prevedená z prvej komory 32 do druhej komory 34., zdvih piestu 22 sa zastaví. Je potrebné zaistiť, aby mikroporézny filter 74 zamedzil prevedenie akýchkoľvek čiastočiek, ako sú krvinky z prvej komory 32 do druhej komory 34., ak piest 22 je zdvihnutý nad polohu, v ktorej všetka plazma bola prevedená z prvej komory 32 do druhej komory 34.. Ďalej má byť zaistené, aby prevedenie kvapaliny z prvej komory 32 do druhej komory 34. a hlavne stav, v ktorom bola plazma prevedená a prvá komora 32 obsahuje výlučne krvinky, bola ľahko zistená detekciou sily, ktorá je použitá pre zdvih piestu 22 ako sily potrebnej pre prevedenie krviniek z prvej komory 32 do druhej komory ,34. mikroporéznym filtrom 74., pričom táto sila je podstatne vyššia ako sila potrebná na zdvih piestu 22 spôsobujúci prevedenie plazmy z prvej komory 32 do druhej komory 34.. Prevedenie všetkej plazmy z prvej komory do druhej komory 34 je následne ľahko zistiteľné ako radikálne zväčšenie sily potrebnej pre ďalší zdvih piestu 22.

Potom sa v štvrtom kroku prvého spôsobu zastaví otáčanie nádrže 10 pre vzorku, ako je znázornené na obr suspenzia činidla 40 v plazme 94 obsiahnutá v nechá reagovať počas vopred určeného času. Tak napríklad enzým, ako batroxobín, premieňa fibrinogén z plazmy na monomér fibrínu, ktorý naviac okamžite polyméruje na nezosieťovaný polymér fibrínu typicky vo forme gélu, ako je oveľa podrobnejšie popísané vo

5. Na obr. 5 sa druhej komore 34 vyššie uvedenej európskej prihláške vynálezu EP 592,242.

V piatom, prípadne šiestom kroku prvého spôsobu, ktoré sú znázornené na obr. 6, prípadne na obr. 7, sa nezosietovaný polymér fibrínu a batroxobín zachytený v gcle agarózy ako čiastočky 40 a označený množstvom vlniek, oddelí z plazmy 94. obsiahnutej v druhej komore 34.. Druhá komora 34 môže tiež mat vnútornú valcovú stenu, aby bolo zaistené, že druhá komora 34 je tiež prsteňovitá. Na obr. 6 sa nádrž 10 pre vzorku v piatom kroku prvého spôsobu otáča rýchlosťou otáčania spôsobujúcou oddelenie fázy 96 obsahujúcou gel polyméru fibrínu a čiastočky 40 z plazmy 94. Rýchlosť otáčania, ktorou sa otáča nádrž 10 pre vzorku v piatom kroku prvého spôsobu, môže byť rôzna, ale v tomto spôsobe je trocha nižšia ako prv použitá rýchlosť otáčania, ktorou sa nádrž 10 pre vzorku otáča v druhom kroku prvého spôsobu, ako je popísané vyššie v súvislosti s obr. 3, a je asi polovičná vzhľadom na vyššie uvedené rýchlosti otáčania, t.j. 2 500 až 3 000 ot./min., alebo i menej. Po oddelení fázy 96 zloženej z gélu a čiastočiek z plazmy 94 obsiahnuté v druhej komore 34 sa piest 22 v šiestom kroku prvého spôsobu spustí, čo spôsobí prevedenie plazmy 94 z druhej komory 34 kanálom 65 do prvej komory 32. keď je skúšobný ventil 68 otvorený. Je potrebné vykonať opatrenia, aby mikroporézny filter 74 zamedzil prevedeniu akýchkoľvek čiastočiek alebo väčších teliesok ako sú čiastočky činidla 40 z druhej komory 34 kanálom 65 do prvej komory 32, keď mikroporézny filter 74 jednoducho blokuje prenos čiastočiek alebo teliesok.

Po skončení druhého odstredivého rozdeľovania a kroku prenesenia plazmy iba druhá komora 34 obsahuje kvapalinu 96 obsahujúcu nezosietovaný polymér fibrínu a čiastočky činidla 40. ako je znázornené na obr. 7. Vo vnútri prvej komory 32 je uložená zmes 98 kvapaliny obsahujúcej krvinky a plazmu prevedenú z druhej komory 34., ako je označené kombinovanými symbolmi krúžkov a štvorcov.

Na obr. 7 je pufor 88 opätovného rozpustenia v siedmom kroku prvého spôsobu pridaný z injekčnej striekačky 44 do druhej komory 34 spustením plunžra 52 injekčnej striekačky 44 a súčasným zdvihnutím piestu 22 na zaistenie úplného prevedenia pufra 88 opätovného rozpustenia z injekčnej striekačky 44 do druhej komory 44 a zamedzením pudenia pufra 88 opätovného rozpustenia do odbočky potrubia 58 a ďalej do odvzdušňovacieho potrubia 60.

Po určitej dobe, počas ktorej pufor 88 opätovného rozpustenia spôsobí rozpustenie nezosieťovaného polyméru fibrínu z čiastočiek činidla 40 a vytvorí sa roztok obsahujúci monomér fibrínu, ktorý má byť prevedený do injekčnej striekačky 44. v ôsmom a deviatom kroku, ktoré sú znázornené na obr. 9a 10. Oddelenie monoméru fibrínu od batroxobínu v kvapaline 100 vytvorenej v druhej komore 34 akciou z pufru 88 opätovného rozpustenia sa jednoducho prevedie nejakým vhodným spôsobom rozdelovania, napríklad filtráciou alebo prednostne spôsobom odstredivého rozdeľovania alebo ich kombinácií, ako je znázornené na obr. 9. Spôsob odstredivého rozdeľovania je vykonaný na obr.

a čiastočky činidla 40 sú ním oddelené od kvapaliny 100 a zhromaždené pri vnútornom bočnom povrchu valcovej steny 14 druhej komory 34 pri otáčaní nádrže 10 pre vzorku rýchlosti otáčania, ktorá je normálne menšia ako rýchlosť otáčania, pri ktorej sa nádrž 10 pre vzorku otáča pri krokoch rozdeľovania znázornených na obr. 3,4 a 6, keď skúšobný ventil 58 nie je otváraný na zaistenie prietoku kanálom 65 z druhej komory 34 do prvej komory 32.· Na obr. 9 kvapalina 98 obsiahnutá v prvej komore 32 jasne nie je vystavená silnému tiažovému pólu, keď kvapalina jednak nie je rozdeľovaná do kvapalných zložiek rôznych hustôt a jednak nie je premiestňovaná z polohy tiež znázornenej na obr. 8, v ktorej je povrch kvapaliny vodorovný.

Po oddelení čiastočiek činidla 40 od kvapaliny 100 v deviatom kroku prvého spôsobu znázornenom na obr. 10, ako bolo vysvetlené vyššie s prihliadnutím k obr. 9, je kvapalina 100 prevádzaná z druhej komory 34 nádrže 10 pre vzorku do injekčnej striekačky 44 uloženej v tretej komore 36 nádrže 10 pre vzorku súčasným zdvihnutím plunžra 54 injekčnej striekačky 44.

Po prevedení roztoku monoméru fibrínu do 44 v deviatom kroku prvého spôsobu znázornenom na obr. 10 sa injekčná striekačka 44 vyberie z nádrže pre vzorku ako konštrukčná jednotka spojená s potrubím 58 kužeľovitým nástavcom 56, na ktorom je nasadená kužeľovitá rúrka

Iŕ t

a spustením piestu 22. injekčnej striekačky

P

Ĺ fe injekčnej striekačky 44 . pričom potrubie 58 má značnú dĺžku, b ako bolo vysvetlené vyššie. Potom sa injekčná striekačka 44 jí oddelí od nádrže 10 pre vzorku tým, že potrubie 58 sa prereže ;

horúcim nástrojom pri súčasnom utesnení voíného konca potrubia y pripojeného ku kužeíovitému nástavcu 56. Kužeíovitý nástavec j·.

t ďalej slúži na utesnenie vnútra injekčnej striekačky 44 [· vzhíadom k okoliu, keď je utesnený voíný koniec potrubia !pripojeného ku kužeíovitému nástavcu 56. Po vybraní a odpojení injekčnej striekačky 44 od nádrže 10 pre vzorku sa zvyšná časť nádrže 10 pre vzorku zahodí a zničí bez vyliatia akýchkoľvek i kvapalných zložiek z nádrže 10 pre vzorku, pričom tieto zložky by · í

mohli osobu alebo osoby pracujúce pri odstredivom rozdeľovaní i

a so zariadením, na ktorom sa nádrž 10 pre vzorku spracováva, :

vystaviť nebezpečným infekčným činidlám ako baktériám či vírom spôsobujúcim nebezpečné choroby ako je hepatitis alebo AIDS.

Ako bolo uvedené vyššie, táto injekčná striekačka 44 môže byť použitá na súčasné podávanie koprodukovaného roztoku polyméru fibrínu s vhodným alkalickým pufrom alebo s destilovanou vodou, prednostne so zdrojom vápnikových iónov na vytvorenie fibrínového tesniva pre pacienta.

Vyššie popísaná nádrž 10 pre vzorku a vyššie popísaný prvý spôsob rozdeľovania vzorky krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddeľovanie základnej súčasti krvi od jednej z kvapalných zložiek môžu byť obmeňované mnohými spôsobmi. Po prvé môže byt vynechaná injekčná striekačka 44, ak tretia komora 36 nádrže 10 pre vzorku môže tvoriť komoru, v ktorej je pôvodne uložený redifúzny pufor alebo je tam privádzaný v kroku prvého spôsobu zodpovedajúcom kroku znázornenom na obr. 8 a do ktorej sa kvapalina 100 obsahujúca fibrín neskôr prevedie v konečnom kroku spôsobu podobnom kroku znázornenom na obr. 10.

Oddelenie plazmy v kroku znázornenom na obr. 6 odstredivým rozdeľovaním môže byť nahradené jednoduchým krokom filtrácie, v ktorom je mikroporézny filter 74 jednoducho použitý na zadržanie teliesok činidla 40, na ktoré je viazaný fibrín v druhej komore .34, keď je plazma jednoducho pudená späť do prvej komory 32. Podobne krok filtrácie teliesok činidla 40 z kvapaliny 100 znázornený na obr. 9 a 10 odstredivým rozdeľovaním môže byť nahradený jednoduchým krokom rozdeľovania filtráciou, v ktorom sa použije mikroporézny filter 66 pre zadržanie teliesok činidla 40 v druhej komore 34, keď puf or opätovného rozpustenia obsahujúci fibrín je pudený do injekčnej striekačky 44 alebo alternatívne do tretej komory 36 nádrže 10 pre vzorku.

Na obr. 11 je znázornené druhé vyhotovenie nádrže 10¹ pre vzorku použitú v rámci predloženého vynálezu. Na obr. 11 a na obr. 12 až 18, ktoré znázorňujú jednotlivé kroky druhého spôsobu rozdeľovania vzorky krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddeľovanie základnej súčasti krvi z jednej z kvapalných zložiek, keď sa použije nádrž 10¹ pre vzorku v druhom spôsobe veľmi podobnom spôsobu vysvetlenému vyššie s prihliadnutím k obr. 2 až 10 sú súčasti nádrže 10¹ pre vzorku v druhom vyhotovení, ktoré sú zhodné so súčasťami popísanými vyššie s prihliadnutím k obr. 1 až 10, označené rovnakými vzťahovými značkami ako v obr. 1 až 10. Druhé vyhotovenie nádrže 10¹ pre vzorku sa zásadne líši od vyššie popísaného prvého vyhotovenia v tom, že piest 22 prvého vyhotovenia nádrže 10 pre vzorku je nahradený piestom 22¹ trochu iného tvaru a konštrukcie. Piest 22' má valcovú stenu 26¹ a kruhovú dosku 28^r. Je tiež zrejmé, že valcová stena 26¹ má mierny výklenok pri a nad potrubím 63¹ vzhľadom k oblasti valcovej steny 26¹ pod potrubím 63¹. Rameno tu vytvorené napomáha udržiavať krvinky mimo potrubie 63¹ v priebehu konečných krokov rozdeľovania. Ďalej môže byť výstupok 38 znázornený na obr. 1 až 10 vynechaný, ak chemické alebo biochemické činidlo, napríklad batroxobín zachytený v gele agarózy sa zavedie do filtračnej nádrže.

V pieste 22¹ druhého vyhotovenia nádrže 10¹ pre vzorku je injekčná striekačka 44 uložená v tretej komore 36 a je spojená s druhou komorou 34 nádrže 10¹ pre vzorku potrubím 58¹ podobným potrubiu 58 znázornenému na obr. 1, ale odlišným od potrubia 58 popísaného vyššie v tom, že odbočka vytvárajúca spojenie z potrubia 58 do odvzdušňovacieho potrubia 60 je vynechaná, lebo odvzdušňovacie potrubie 60, výpust 52 a filter výpusti 52 sú vynechané. Spojenie medzi prvou komorou 32 a druhou komorou 34. nádrže 10¹ pre vzorku má tiež trocha inú konštrukciu ako je konštrukcia popisovaná vyššie s prihliadnutím k obr. 1. Spojenie iobsahuje skúšobné ventily, ktorú však sú otvárané vyvíjaním rozdielu tlakov a nie tiažovej sily, čo je jasný rozdiel od skúšobného ventilu 6.3 znázorneného na obr. 1 a popísaného vyššie.

Spojenie medzi prvou komorou 32 a druhou komorou 34 nádrže 10¹ pre vzorku obsahuje dve potrubia. Prvé potrubie zahrňuje dva úseky 63¹ a 65¹ a a prvý skúšobný ventil 68 spájajúci obidva úseky 63¹ a 65¹ a vytvorený ako guličkový skúšobný ventil obsahujúci guličku 70¹ a umožňujúci prevádzanie kvapaliny z druhej komory 34 do prvej komory 32 a zabraňujúci prevádzaniu kvapaliny z prvej komory 32 do druhej komory 34 prvým potrubím. Druhé potrubie zahrňuje dva úseky 63¹¹ a 65 a skúšobný ventil 68 vytvorený ako guličkový ventil obsahujúci guličku 70 a ďalej nádrž 69, v ktorej je činidlo, napríklad batroxobín, nanesený na filter 66. Vyhotovenie je také, že vtok druhého potrubia z prvej komory 32 je odstupňovaný vzhľadom na výtok prvého potrubia 63¹, pričom prsteňovitá komora trochu zmenšeného objemu spojená s druhým potrubím výlučne ďalej zvyšuje presnosť oddelenia plazmy od vzorky krvi, ktorá je zavedená do nádrže 10¹ pre vzorku, ako bude ďalej popísané s prihliadnutím k obr. 12 až 18. Druhý skúšobný ventil 68 umožňuje prevedenie kvapaliny z prvej komory 32 do druhej komory 34 a zamedzuje spätné prevedenie kvapaliny z druhej komory 34 do prvej komory 32 cez nádrž 69. Spojenie do a z prvej komory 32 prvým potrubím obsahujúcim úseky 63' a 65¹ je vyhotovené cez jediný mikroporézny filter 66, ktorý je uložený v strednom výklenku kruhovej dosky 28¹ na jej spodnom povrchu.

Druhé vyhotovenie nádrže 10¹ pre vzorku je podobné prvému vyhotoveniu nádrže 10 pre vzorku prednostne použitú na rozdelenie vzorky krvi do krviniek a do plazmy a ďalej pre extrakciu základnej súčasti krvi z plazmy, ako bude vysvetlené ďalej s prihliadnutím k obr. 12 až 18.

Na obr. 12 je znázornený prvý krok podobný prvému kroku popísanému vyššie s prihliadnutím k obr. 2, druhého spôsobu rozdelenia vzorky 86 krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddelenie základnej súčasti krvi od jednej z kvapalných zložiek.

Na obr. 13 je znázornený druhý krok druhého spôsobu podobný druhému kroku popísanému vyššie s prihliadnutím k obr. 3, v ktorom sa plazma 92 oddeľuje od kvapaliny 90 obsahujúcej ‘ krvinky. ΐ

K

V obr. 14 je znázornený tretí krok druhého spôsobu podobný j tretiemu kroku popísanému vyššie s prihliadnutím k obr. 4, i v ktorom sa plazma 92 prevádza z prvej komory 32 do druhej komory i

I druhým potrubím obsahujúcim úseky 63 a 65 a d'alej skúšobný :

ventil 68 a nádrž 69. Plazma prevádzaná z prvej komory 32 do druhej komory 34 sa dostáva do styku s batroxobínom obsiahnutým v nádrži 69, takže plazma obsiahnutá v druhej komore 34 obsahuje batroxobín spôsobujúci premenu fibrinogénu z plazmy na monomér fibrínu, ktorý ihnedf polyméruje na gel polyméru nezosietovaného fibrínu. Prevedenie plazmy z prvej komory 32 do druhej komory 34. má byť vykonané pri velmi nízkej rýchlosti, aby bola umožnená reakcia plazmy s batroxobínom obsiahnutým v nádrži 69. Je zrejmé, že rýchlosť tohto prevedenia by mala zodpovedať času nevyhnutnému na reakciu batroxobínu alebo iného chemického činidla s fibrinogénom plazmy.

Po prevedení plazmy 94 do druhej komory 34 a prípadne po špecifickej reakčnej dobe, počas ktorej sa vytvára zosietovanie gélu fibrínu, nádrž 10¹ pre vzorku môže byt otáčaná alebo môže byť zastavená, gel fibrínu sa oddelí od zvyšnej kvapalnej plazmy 94 a od teliesok činidla 40 znázornených v štvrtom a piatom kroku druhého spôsobu na obr. 15 a 16, ktoré zodpovedajú piatemu a šiestemu kroku druhého spôsobu popísaného vyššie s prihliadnutím k obr. 6a 7. Plazma 94 obsiahnutá v druhej komore 34 nádrže 10 sa prevedie z druhej komory 34 do prvej komory 32 prvým potrubím obsahujúcim úseky 63¹ a 65' a skúšobný ventil 68'. zatial čo skúšobný ventil 68 zamedzuje prevádzanie plazmy 94 druhým potrubím.

Na obr. 17 je znázornený šiesty krok druhého spôsobu, v ktorom pufor 88 opätovného rozpustenia sa zavedie do kvapaliny 100 obsahujúcej fibrín jednoduchým vypudením pufra 88 opätovného rozpustenia z injekčnej striekačky 44 spôsobom podobným kroku popísanému vyššie s prihliadnutím k obr. 8.

Druhý spôsob rozdelovania vzorky krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddelenie základnej súčasti krvi, fibrínu vzorky krvi od jednej z kvapalných zložiek pri použití nádrže

10¹ sa ukončuje v siedmom kroku druhého spôsobu znázornenom na obr. 18 a zodpovedajúcim deviatemu kroku znázornenému na obr. 10, prevedením kvapaliny 100 obsahujúcej fibrín z druhej komory 34 nádrže 10' do injekčnej striekačky 44 uloženej vo vnútri tretej komory 36 nádrže 10¹ pre vzorku súčasným zdvihnutím plunžra 54 injekčnej striekačky 44 a spustením piestu 22'. Alternatívne môže byt prevedenie kvapaliny 100 z druhej komory 34 nádrže 10¹ pre vzorku do injekčnej striekačky 44 riadené detekciou sily použitej pre pohyb kruhovej dosky 28¹ vzhladom k skrini 12 nádrže 10¹ pre vzorku, ako bolo popísané vyššie v spojení s prvým vyhotovením nádrže 10 pre vzorku použitú podľa predloženého vynálezu.

Podobne ako prvý spôsob popísaný vyššie s prihliadnutím k obr. 2 až 10 a prvé vyhotovenie nádrže 10 pre vzorku popísanú vyššie s prihliadnutím na obr. 1, môže byt i druhý spôsob popísaný vyššie s prihliadnutím k obr. 12 až 18 a druhé vyhotovenie nádrže 10¹ pre vzorku popísanú vyššie s prihliadnutím k obr. 11 obmenené rôznymi spôsobmi, napríklad ako bolo vysvetlené vyššie. Ďalej je potrebné uviest, že prvé vyhotovenie nádrže 10 pre vzorku a druhé vyhotovenie nádrže 10¹ pre vzorku popísanú vyššie s prihliadnutím k obr. 1 až 10, prípadne k obr. 11 až 18 môžu byť ďalej obmenené jednoduchým prevrátením nádrží

10. 10' pre vzorku vo zvislom smere, pričom v tomto prípade je druhá komora 34 umiestnená nad prvou komorou 32 a nad tretou komorou 36.

Na obr. 19 je znázornené tretie vyhotovenie nádrže 10 pre vzorku ako prototypové vyhotovenie. Nádrž 10 pre vzorku má v podstate rovnakú konštrukciu ako prvé a druhé vyhotovenie 10 a 10¹ popísané vyššie s prihliadnutím k obr. la 11. Súčasti zhodné so súčasťami znázornenými na obr. 1 a 11 majú zhodné vzťahové značky. Skriňa 12 tretieho vyhotovenia nádrže 10 pre vzorku sa líši od skrine 12 prvého a druhého vyhotovenia 10¹ a 10 v tom, že horná stena 16 tretieho vyhotovenia obsahuje prírubu 17, ktorá obvodovo uzatvára obvodovú stenu 14 a vytvára tesné spojenie s touto obvodovou stenou .14. V hornej stene 16 je vývrt 78 a prídavný kanál 82 tvoriaci odvzdusňovacie potrubie podobné potrubiu 82¹ popísané vyššie s prihliadnutím k obr.11

V

F.

r, a spojené s odvzdušňovacim výtokom 64 podobným odvzdušňovaciemu ;

l výtoku 84¹ znázornenému na obr. 11. Alternatívne môže byt odvzdušňovací výtok 84¹¹ uzatvorený uzáverom alebo neznázorneným tesniacim krytom. Vo vnútri skrine 12 je uložený piest 22 slúžiaci rovnakému účelu ako piesty 22 a 22¹ popísané vyššie s prihliadnutím k obr. 1 a 11, a utesnený vzhladom k hornej stene tesniacim O-krúžkom 24., ktorý utesňuje voči obvodovej vonkajšej stene valcové steny 26 piestu 22. Valcová stena 26 je kus rúrky opatrený u obidvoch koncov vonkajšími závitmi na vytvorenie spojenia s hornou prírubou slúžiacou k podopretiu príruby 48 injekčnej striekačky 44, pričom táto horná príruba nie je na výkresoch znázornená. Spodný vonkajší závit valcovej steny 26 je zaskrutkovaný do vnútorného závitu valcového spojovacieho kusa vytvoreného vcelku s kruhovou doskou 28 podobnou kruhovým doskám 28 a 28¹ popísaným vyššie s prihliadnutím k obr. 1 a 11.

Spojenie medzi valcovým spojovacím kusom 29 a valcovou stenou 26 je utesnené tesniacim O-krúžkom 31.

Pod spodným povrchom kruhovej dosky 28 je usporiadaný j mikroporézny filter 66 tvorený napríklad kusom bežnej tkaniny , prednostne uloženej na mikroporéznom filtre tvoriacej zloženú štruktúru filtra. Mikroporézny filter 66 má rovnaký účel ako mikroporézny filter 66¹ znázornený na obr. 11. Vo valcovej stene 26 sú vytvorené dva súmerne usporiadané otvory 27 tvoriace spojenie z prvej komory 32 obklopujúcej obvodovo valcovú stenu 26 do vnútra piestu 22.

Pri spodnom konci piestu 22 je vo vnútri piestu 22 uložená zostava obsahujúca niekoľko prsteňovitých prvkov a vo vnútri í piestu 22 je uložený rúrkový prvok. Táto prsteňovitá zostava tu znázornená vo vnútri telesa piestu 22. ale schopná umiestnenia !

I kdekoľvek alebo v inom odstredivom prístroji, slúži účelu filtrovania a chemického spracovania kvapalnej zložky oddelenej v prvej komore 32. Všeobecne táto zostava obsahuje v prsteňovitom j sústrednom usporiadaní najviac vonkajšiu prsteňovitá podperu v telese 108 a dva prsteňovitá filtre umiestnené vo vnútri telesa 108. takže tieto otvorené prsteňovitá oblasti sú vymedzené

1. vo vnútri telesa 108,

2. vo vnútri prvého filtra a

3. vo vnútri druhého filtra.

Rúrkový prvok a priečnym vývrtom valcovej stene 26.

Tresnejšie povedané, zostava obsahuje strednú súčasť 102. ktorá je vytvorená vcelku s rúrkovým prvkom 103. ktorý je opatrený vonkajším závitom na svojom hornom konci, ktorý je zaskrutkovaný do vnútorného závitu nástavca 56. ktorý slúži na rovnaký účel ako kužeľovitý nástavec 56 popísaný vyššie v spojení s obr. 1, totiž uloženiu a vytvoreniu spojenia s injekčnou striekačkou 44.

103 je opatrený priebežným vývrtom 105

104 usporiadaným súosovo s otvormi 27 vo Stredná súčasť 102 je upevnená a utesnená vzhľadom ku kruhovej doske 28 dvoma tesniacimi o-krúžkami 106 a 107. Stredná súčasť 102 ďalej slúži na podoprenie prsteňovitého podporného telesa 108. ktoré je obvodovo utesnené vzhľadom k vnútornému valcovému povrchu valcovej steny 26 tesniacim O-krúžkom 109. Prsteňovité podperné teleso 108 podopiera sústavu prsteňovitých filtračných prvkov 110 a 112, ktoré medzi sebou vymedzujú prsteňovitý priestor. Prsteňovité filtračné prvky 110 a 112 sú, ako je zrejmé z obr. 19, usporiadané v zákryte s priebežnými vývrtmi 27 a 104 valcovej steny 26 a rúrkového prvku 103. Prsteňovité filtračné prvky 110 a 112 sú ďalej podoprené prídavnou podperou 114. ktorá je opatrená obvodovým vonkajším tesniacim O-krúžkom 115 a ktorá má tvar podobný tvaru prsteňovitého podperného telesa 108. Na vrchole prídavnej podpery 114 je uložený dištančný prvok 116. ktorý je opatrený vnútorným závitom zoskrutkovaným s vonkajším závitom rúrkového prvku 103.

Vyššie popísaná zostava s odkazom na obr. 19 je znázornená v rozvinutom usporiadaní na obr. 20.

Tretie vyhotovenie nádrže 10 pre vzorku znázornené na obr. 19 a 20 pracuje spôsobom podobným spôsobu popísanému vyššie v súvislosti s obr. 2 až 10 a s obr. 12 až 18 pre rozdeľovanie vzorky krvi do špecifických kvapalných súčastí a pre oddelenie základnej súčasti krvi od jednej z kvapalných zložiek. Vzorka krvi sa zavedie ako bolo popísané vyššie, do prvej komory 32 a rozdelí sa do kvapaliny obsahujúcej krvinky a plazmu otáčaním celej nádrže 10 pre vzorku okolo jej pozdĺžnej osi vysokou rýchlosťou otáčania spôsobujúcou odstredivé oddelenie krviniek vyššej hustoty od plazmy. Plazma sa prevedie z prvej komory 32 do druhej komory 34 zdvihnutím piestu 22. zatial čo nádrž 10 pre vzorku sa otáča vysokou rýchlosťou otáčania spôsobujúcou počiatočné odvetranie prebytočného vzduchu odvzdušňovacím výtokom 84 a prevedenie plazmy do druhej komory 34 priebežnými otvormi 27 a 104 valcovej steny 26 a rúrkového prvku 103 a filtračnými prvkami 110 a 112 umiestnenými medzi priebežnými otvormi 27 a 104 a ďalej stredným priebežným vývrtom 105 rúrkového prvku 103 k mikroporéznemu filtru 66 agarózy môže byť uzatvorený v prsteňovitými filtračnými prvkami

Batroxobín uložený v gele priestore vymedzenom medzi 110 a 112, ktoré tvoria štruktúru majúcu podobnú funkciu ako nádrž 69 popisovaná vyššie v súvislosti s obr. 11 alebo alternatívne uložený vo vnútri druhej komory 34 a nesený na telieskach agarózy ako nosiča podobných telieskam činidla 40 opísaného v súvislosti s obr. 2 až 10. Po extrakcii fibrínu z plamy, premene fibrínu na fibrín I a napojení fibrínu I na batroxobín môže byť plazma opäť prevedená do prvej komory 32 podlá prvého spôsobu opísaného vyššie s prihliadnutím k obr. 2 až 10 alebo alternatívne prevedená do injekčnej striekačky 44 aktiváciou plunžra 54 spôsobujúcou pudenie plazmy do vnútra injekčnej striekačky 44.

Na obr. 21 je znázornené zariadenie 120 pre uloženie nádrže 10 pre vzorku používanú v rámci techník podlá predloženého vynálezu a vykonávanie spôsobu rozdelovania vzorky krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddelenie základnej súčasti krvi od jednej z kvapalných zložiek automatizovaným alebo poloautomatizovaným spôsobom. Zariadenie 120 obsahuje skriňu 122. ktorá je rozdelená do troch oddielov, horného oddielu 126. stredného oddielu 124 a spodného oddielu 128. Horný oddiel 126 je špecifickú teplotu a prístup >re vyberanie nádrže 10 pre z horného oddielu 126 je vytvorený dvermi 127.

V strednom oddiele 124 je nádrž 10 pre vzorku uložená a nesená na otočnom stole 130, ktorý je uložený na hriadeli 132. ktorý je výstupným hriadelom motora 134 uloženého v spodnom

prednostne	nastavený	termostatom	na
do vnútra	horného	oddielu 126	a
vzorku a	injekčnú	striekačku	44

oddieli 128. Motor 134 tvorí prostriedok pre vyvíjanie vysokej rýchlosti otáčania, pri ktorej nádrž 10 pre vzorku je otáčaná v špecifických krokoch vyššie opísaného spôsobu rozdelovania vzorky krvi do špecifických kvapalných zložiek a oddeľovania základnej súčasti krvi od jednej z kvapalných zložiek.

V hornom oddieli 126 sú usporiadané dva motory 136 a 138 spolupôsobiace so zvislo vratne sa pohybujúcimi ovládacími pákami 140 a 142, ktoré spolupôsobia s plunžrom 54 injekčnej striekačky 44 a s prsteňovitým vekom 42 piestu 22.

Zariadenie 120 ďalej obsahuje riadiaci oddiel 146 skrine 122 obsahujúci elektronický obvod, prednostne mikroprocesorom riadený elektronický obvod, ktorý je ovládaný klávesami 148 na začatie a riadenie spôsobu činnosti zariadenia 120 pre vykonávanie vyššie popísaného spôsobu rozdelovania vzorky. Riadiaci oddiel 146 je ďalej opatrený displejom 150. na ktorom sa operátorovi predvádza práve prebiehajúci krok spôsobu rozdeľovania vzorky a niektoré relevantné informácie ako je doba trvania spôsobu, či teplota horného oddielu 126 skrine 122. Riadiaci oddiel 146 je prednostne ďalej opatrený rozhraním pre spojenie zariadenia 120 s externým počítačom, ako je osobný počítač a opatrený detekčnými prostriedkami na detekciu celkovej prevádzky zariadenia včítane prevádzania kvapaliny z jednej z vyššie opísaných komôr. Detekcia prevádzania kvapaliny môže byť založená na optickej detekcii vodivosti obsahujúcej detekciu stálych alebo premenlivých elektrických alebo magnetických polí. Detekcia prevádzania kvapaliny z prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku do druhej komory 34 nádrže 10 pre vzorku, z druhej komory 34 nádrže 10 pre vzorku do tretej komory 36 nádrže 10 a z druhej komory 34 nádrže 10 pre vzorku do prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku môže byť alternatívne založená na detekcii sily prenášanej na piest 22, keď sila prenášaná na piest 22 radikálne rastie, ked filtračné prvky, ktorými má byť kvapalina prenášaná, sú blokované krvinkami alebo inými väčšími telieskami ako sú telieska gélu agarózy. Vyššie popísané vyhotovenie nádrže 10 pre vzorku tvoriacu oddeľovaciu súčasť, v ktorej sa vzorka krvi rozdeľuje do krviniek a plazmy, ktorá sa ďalej spracováva kvôli získaniu výťažku fibrínu, predstavuje súčasť, v ktorej vzorka krvi odobraná pacientovi sa jednoducho zavedie do prvej komory 32, nádrže 10 pre vzorku, v ktorej sa vykoná celé rozdelenie a spracovacia operácia bez potreby styku človeka so vzorkou krvi čím sa podstatne vylúči laboratórií alebo operátorov ktoré môžu spôsobiť choroby alebo jej základnej súčasti, nebezpečenstvo vystavenia personálu infekčným činidlám zo vzorky krvi, ako je hepatitis alebo AIDS. Výťažok fibrínu, ktorý je vyrábaný podľa predloženého vynálezu, spôsobom popísaným vyššie, je uložený v injekčnej striekačke 44 typu popísaného v medzinárodnej prihláške vynálezu číslo PCT/DK92/00287, v medzinárodnej publikácii WO 93/06940, v ktorého aplikátore kvapalina obsahujúca monomér fibrínu obsiahnutá v injekčnej striekačke 44 je neutralizovaná zmesou s neutralizačným činidlom. Spôsob oddelenia plazmy zo vzorky krvi a extrakcie alebo oddelenia fibrínu z plazmy môže byt vykonávaný napríklad technikami popisovanými vo vyššie uvedenej medzinárodnej prihláške vynálezu číslo PCT/DK87/00117, publikácii číslo WO 88/02259 alebo EP 592,242.

Nádrž 10 pre vzorku, ktorá je nesená na otočnom stole 130 môže byt prednostne aretovaná a upevnená vzhľadom k otočnému stolu 130 aretačnými a upevňovacími súčasťami, ktoré sú podrobne znázornené na obr. 22a, 2b a 22c. Upevňovacie súčasti sú tvorené dole vyčnievajúcou obvodovou obrubou 160 valcovej steny 14 skrine 12 nádrže 10 pre vzorku. Obruba 160 je opatrená 900 až 1 200 rovnomerne rozmiestnenými otvormi 162, z ktorých jeden je znázornený na obr. 22a až 22c. Obruba 160 je prispôsobená na zasunutie do obvodovej drážky vytvorenej v hornom povrchu otočného stola 130. V radiálnom vývrte vychádzajúcom z vonkajšieho obvodového povrchu otočného stola 130 sú uložené dva upevňovacie kolíky 166 a 170. Upevňovacie kolíky 166 a 170 sú predpäté pružinami 168. prípadne 172 navzájom a sú opatrené kužeľovitými koncovými časťami 167 a 171, ktoré sú vo vzájomnom dotyku v strede obvodovej drážky vytvorenej v hornom povrchu otočného stola 130. takže koliky sa pohybujú od seba, keď podľa obr. 22a spodná koncová čast 164 obvodovej obruby 360 je pudená dole medzi kolíky 166 a 170. takže tieto sú od seba odďaľované. Kolíky 166 a 170 a pružiny 168 a 172 sú aretované vo vnútri radiálneho vývrtu otočného stola 130 tesniacou zátkou 174, ktorá je upevnená v polohe vzhľadom k vonkajšiemu obvodovému povrchu otočného stola 130 závitmi alebo inou vhodnou upevňovacou konštrukciou.

Na obr. 22a je znázornený prvý krok uloženia nádrže 10 pre vzorku vzhľadom k otočnému stolu 130. pričom v tomto kroku sú kolíky 166 a 170 popísané vyššie pudené od seba, keď spodná koncová časť 164 pudí kolíky 166 a 170 od seba a pohybuje sa smerom dole vzhľadom ku kolíkom 166 a 170.

Na obr. 22b je znázornený druhý krok aretácie nádrže 10 pre vzorku vzhľadom k otočnému stolu 130, pričom v tomto kroku sú kolíky 166 a 170 pudené do vzájomného styku vo vnútri priechodného vývrtu 162 dole vyčnievajúcej obruby 160 valcovej steny 14 skrine 12· Avšak nádrž 10 pre vzorku môže byt jednoducho zdvihnutá z polohy znázornenej na obr. 22b, čím sa spôsobí vzájomné odďaľovanie kolíkov 166 a 170. ako je znázornené na obr. 22a.

Uloženie a odstránenie nádrže 10 pre vzorku vzhľadom k otočnému stolu 130 je znázornené na obr. 22a a 22b a vykonáva sa, keď je otočný stôl 130 v pokoji. Keď sa otočný stôl 130 začne otáčať pôsobením motora 134 zariadenia znázorneného na obr. 21, kolíky 166 a 170 sú ovplyvnené odstredivou silou, ktorá spôsobí, že kolíky 166 a 170 sú presunuté do radiálnej presadenej polohy znázornenej na obr. 22c, v ktorej kolík 166 je uložený vo vývrte 162 obruby 160 a zabraňuje uvoľneniu skrine 12 od otočného stola 130. zatiaľ čo otočný stôl 130 a nádrž 10 pre vzorku sú otáčané vysokou a nízkou rýchlosťou otáčania v priebehu spôsobu rozdeľovania popísaného vyššie s prihliadnutím na obr. 1 až 18.

Na obr. 22d a 22e sú znázornené dve alternatívne vyhotovenia optického detektora pre detekciu prevedenia kvapaliny z prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku do druhej komory 34 nádrže 10 pre vzorku. V obr. 22d a 22e má horná stena 16 nádrže 10 pre vzorku kužeľovitý tvar a je pripojená k prsteňovitej stene, v ktorej je uložená valcová stena 26 piestu 22 utesnená tesniacim O-krúžkom 24. Prsteňovitá stena 17 je podobne ako valcová stena 26 piestu 22 prednostne vyrobená z ľahkého priehľadného materiálu umožňujúceho prenikanie svetla stenami. Na obr. 22d je začaté prevádzanie kvapaliny z prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku a plazma 92 je pudená do úzkej prsteňovitej komory vytvorenej medzi vonkajším povrchom steny 26 piestu 22 a vnútorným povrchom steny 17. Keď pokračuje prevedenie plazmy z prvej komory 32 nádrže 1.0 pre vzorku, kvapalina 90 obsahujúca krvinky, je pudená do vyššie opísanej úzkej prsteňovitej komory, keď je plazma 92 odvádzaná z prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku. Prítomnosť plazmy alebo alternatívne krviniek v úzkej prsteňovitej komore vymedzenej medzi vonkajším povrchom valcovej steny 26 piestu 22 a vnútorným povrchom prsteňovitej steny 17 je detekovaná optickým detektorom obsahujúcim zdroj svetla 180 a optický detektor 188. Zdroj svetla 180 je umiestnený mimo prsteňovitej steny 17 a obsahuje lampu 184 spojenú elektrickým vedením 182 s riadiacim oddielom 146 zariadenia 120 znázorneného na obr. 21. Lampa 184 vyvíja svetlo, ktoré je zaostrené zaostrovacou šošovkou 186 vytvárajúcou v podstate rovnobežný zväzok 192 lúčov ožarujúcich vyššie popísanú prsteňovitú komoru a kvapalinu v nej obsiahnutú. Proti zdroju svetla 180 je umiestnený optický detektor 188. ktorý je spojený s riadiacim oddielom 146 zariadenia 120 elektrickým vedením 190. Optický detektor ]80 prijíma svetlo vysielané lampou 184 a zaostrené zaostrovacou šošovkou 186 cez vyššie popísanú prsteňovitú komoru. Svetlo vyvíjané lampou 184 je prípadne filtrované kvôli vytvoreniu v podstate úzkeho svetelného spektra, ktoré vyvíja vysoké prenosové charakteristiky plazmou a nízke prenosové charakteristiky krvinkami za účelom zlepšenia detekcie červených krviniek vo vnútri prsteňovitej komory. Zdroj svetla 180 a optický detektor 188 môžu byť uložené vo vnútri druhého oddielu 124 skrine 122 popísanej vyššie v súvislosti s obr. 21 pre ožarovanie vyššie opísanej prsteňovitej komory a pre detekciu svetla prijímaného z prsteňovitej komory.

Na obr. 22d sa detekuje prítomnosť krviniek v prsteňovitej komore technikou detekcie vysielaného svetla. Alternatívne môže byt prítomnosť červených krviniek vo vnútri prsteňovitej komory znázornenej na obr. 22d a 22e detekovaná technikou detekcie odrazeného svetla znázornenou na obr. 22e.

Na obr. 22e sú zdroj svetla 180 a optický detektor 188 nahradené integrovaným zdrojom svetla a optickým detektorom 180¹ obsahujúcim lampu 184¹ podobnú lampe 184 znázornenej na obr. 22d a optický detektor 188¹ podobný optickému detektoru 188 tiež znázornenému na obr. 22d. Lampa 184¹ a optický detektor 188¹ sú pripojené k elektronickému obvodu zriadenia 120 elektrickými vedeniami 182¹ a 190¹.Lampa 184¹ vyvíja svetelný zväzok 192¹. ktorý ožaruje prsteňovitú komoru vymedzenú medzi vonkajším povrchom valcovej steny 26 piestu 22 a vnútorným povrchom prsteňovitej steny 17. Prsteňovitá stena 17 je podobne ako prsteňovité steny 17 popísaná vyššie v súvislosti s obr. 22d prednostne vyrobená z íahkého priehíadného materiálu, zatiaí čo valcová -tena 26 môže byť vyrobená z nepriehľadného materiálu, napríklad z íahkého odrazivého materiálu. Svetlo vyžarované do kvapaliny prítomné v prsteňovitej komore sa čiastočne odráža ako svetelný zväzok 194¹. Prítomnosť krviniek vo vnútri prsteňovitej komory je v súlade s technikou detekcie odrazeného svetla detekovaná za predpokladu, že svetlo, ktoré je vyžarované do prsteňovitej komory, je čiastočne pohltené červenými krvinkami. Svetlo vyvíjané lampou 184¹ je prednostne prevažne zelené svetlo, ktoré je odrážané plazmou 92 a pohlcované červenými krvinkami kvapaliny 90. Na základe posunutia detekčného signálu vyvíjaného optickým detektorom 188¹ je určená prítomnosť krviniek vo vnútri prsteňovitej komory elektronickým obvodom riadiaceho oddielu 146 zariadenia 120.

Príklad

Vytvorenie prototypu nádrže 10 pre vzorku, použitý ako je znázornené na obr. 19 a 20, obsahoval tieto súčasti:

Skriňa 12 nádrže 10 pre vzorku pozostávala z valcovej súčasti s vnútorným priemerom 70 mm, vonkajším priemerom 75 mm a výške 80 mm. Spodná stena 18 skrine 12 mala hrúbku 2,5 mm. Skriňa 12 bola odliata z polymetylmetakrylátu (PMMA). Veko 17” bolo odliate z POM a malo vnútorný priemer 75 mm a vonkajší priemer 80 mm a osovú výšku 13 mm. Piest 22 pozostával z kruhovej dosky 28 s vonkajším priemerom 70 mm - 0,1 mm a hrúbkou 7,4 mm. Tesniaci O-krúžok 30 bol uložený v drážke s výškou 3,4 mm a hĺbkou 2,5 mm. Kruhová doska 28 bola tiež odliata z PMMA. Valcová stena 26 bola vyrobená z rúrky z PMMA s dĺžkou 10 mm a vnútorným priemerom 30 mm. Valcová stena 26 bola ku kruhovej doske 28 prilepená. Stredná súčasť 102. rúrkový prvok 103. prsteňovité podperné teleso 108. prídavná podpera 114 a dištančný prvok 116 boli všetky vyrobené z PMMA.

Pri rýchlosti otáčania asi 5 500 ot./min. môže byt sústredné rozdelenie plazmy a červených krviniek vedené z hornej strany nádrže 10 pre vzorku ako zretelné sústredné kruhy takmer bezprostredne počas prvej minúty. V priebehu ďalšej minúty alebo dvoch minút môžu byt videné krvné doštičky vystupujúce z plazmy, čo je zrejmé zosvetlením farby plazmy. Pre zhromaždenie plazmy zbavenej krvných doštičiek nesmie byť piest zdvihnutý, pokial plazmy

Kvôli zhromaždeniu piest zdvihnutý bezprostredne ale pred migráciou krvných nedošlo k úplnému rozdeleniu obsahujúcej krvné doštičky má byt po oddelení červených krviniek, doštičiek. To sa vykoná plynulým zdvihnutím piestu počas procesu oddeľovania krvných doštičiek. Týmto spôsobom prv zhromaždený podiel vzorky má vysoký obsah krvných doštičiek a neskorší podiel má nízky obsah krvných doštičiek. Akýkoľvek žiadaný podiel takejto vzorky alebo i celý podiel obsahujúci krvné doštičky môže byť využitý ako je žiadané. Ako je teda jasné odborníkom školeným v odbore, vzorky plazmy so špecifickým obsahom krvných doštičiek alebo špecifickej čistoty môžu byť zhromaždené zmenou rýchlosti, času zhromažďovania, zhromaždeného množstva, atd.

Na obr. 23 je znázornený diagram podávajúci závislosť medzi tiažovou silou vyvíjanou vo vnútri prvej komory 32 prototypu nádrže 10 pre vzorku znázornenú na obr. 19 a 20 a popísané vo vyššie uvedenom príklade a rýchlosťou otáčania nádrže 10 pre vzorku. Krivka A znázorňuje tiažovú silu pri vonkajšej stene skrine 12, to znamená v blízkosti vnútornej strany steny 14. a krivka B znázorňuje tiažovú silu pri vonkajšej strane valcovej steny 26 piestu 22 Z obr. 23 je zrejmé, že tiažová sila vyvíjaná vo vnútri prsteňovitej prvej komory 32 je predstavovaná plochou medzi krivkami A a B a ďalej, že tiažová sila pri vonkajšej stene 14 je približne rovná dvojnásobku tiažovej sily pri valcovej stene 26. Pri otáčaní nádrže 10 pre vzorku sa teda tiažová sila vyvíjaná vo vnútri prvej komory 32 mení so súčiniteľom menším ako asi 2.

Na obr. 24 je znázornený diagram predstavujúci závislosť, medzi dobou otáčania prototypu nádrže 10¹¹ pre vzorku znázornenú na obr. 19 a 20 a opísaného vo vyššie uvedenom príklade pri rýchlosti otáčania asi 5 500 ot./min. a percentuálnom podiele vzorky krvi s objemom 90 ml, ktorý bol rozdelený do plazmy a krviniek. Na obr. 24 sú dve krivky C a D predstavujúce dobu rozdelenia percentuálneho podielu vzorky krvi pre oddelenie plazmy od krviniek, pričom táto plazma obsahuje krvné doštičky, ako je znázornené krivkou C a ďalej oddelenie krvných doštičiek od plazmy, ako je znázornené krivkou D. Z obr. 24 je zrejmé, že bolo dosiahnuté takmer úplné rozdelenie vzorky krvi do krviniek a do plazmy asi po 1,5 minúty alebo i asi po 1 minúte, keď krvinky tvoria asi 15 % vzorky krvi, pričom tento podiel nemôže byť ďalej oddelený. Za predpokladu, že krvné doštičky majú byť oddelené od plazmy, je úplné oddelenie krvných doštičiek od plazmy dosiahnuté asi po 3 minútach.

Oddelenie plazmy obsahujúcej krvné doštičky od krvnej vzorky je, ako bolo uvedené vyššie, vykonané plynulým spôsobom, v ktorom piest 22 prvého vyhotovenia nádrže 10 pre vzorku alebo piest 22' druhého vyhotovenia nádrže 10¹ pre vzorku je zdvíhaný plynulé pre plynulé prevedenie plazmy z prvej komory 32 nádrže 10 pre vzorku do druhej komory 34 nádrže 10 pre vzorku, zatiaľ čo nádrž 10 pre vzorku ca otáča vysokou rýchlosťou spôsobujúcou rozdelenie vzorky krvi do plazmy a do krviniek. Plynulé zdvíhanie piestu 22 sa ľahko riadi detekciou prevádzania plazmy z prvej komory 32 do druhej komory 34 založenou na vyššie opísaných technikách optického detektora 188 alebo alternatívne detekciou sily vyvíjanej na piest 22 kvôli jeho zdvíhaniu. Za predpokladu, že prevedenie plazmy z prvej komory 32 do druhej komory 34 sa vykoná po úplnom oddelení plazmy od vzorky krvi, plazma obsahuje veľmi málo krvných doštičiek a môže byt úplne zbavená krvných doštičiek za predpokladu, že odstredivé rozdeľovanie bolo vykonávané po predĺženú dobu, napríklad po 3 minúty, ako bolo uvedené vyššie.

Na základe údajov uvedených na obr. 24 je v diagrame na obr. 25 znázornená krivka E znázorňujúca dobu potrebnú pre vykonanie úplného rozdelenia vzorky krvi špecifického objemu v závislosti od doby otáčania vyššie popísaného prototypu nádrže 10 pre vzorku pri rýchlosti otáčania 5 500 ot./min. Z obr. 25 je zrejmé, že za 60 sekúnd môže byt vzorka krvi s objemom 90 ml rozdelená do krviniek a plazmy obsahujúcej krvné doštičky. Vzorka krvi s objemom rádovo 100 ml je maximálna vzorka krvi, ktorá môže byt rozdelená použitím nádrže 10 pre vzorku podľa vyššie uvedeného príkladu, keď vzorka krvi vypĺňa najväčšiu čast prsteňovitej prvej komory 32 nádrže 10” pre vzorku. Je možné použiť i väčšie nádrže 10” pre vzorku v rámci predloženého vynálezu, ak sa to žiada.

Claims (35)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Zariadenie na rozdeľovanie kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeľovaním, vyznačujúce sa tým, že obsahuje nádrž na rozdeľovanie fáz obsahujúcu skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteíný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, prívodný prostriedok kvapaliny na privedenie kvapalnej vzorky do prsteňovitej komory, komory na rozdeľovanie fáz, keď je piest vo svojej prvej polohe, motor na otáčanie nádrže pre rozdeľovanie fáz okolo jej pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou kvapalnej vzorky do zmienených fázových časti prostriedok na premiestňovanie piestu vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, nádrž pre rozdeľovanie fáz je otáčaná zmienenou otáčania pre vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory zmieneným vypúšťacím potrubím.

   rozdelenie a ovládací zatiaľ čo rýchlosťou
2. 2. Zariadenie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že vypúšťacie potrubie je usporiadané pri alebo blízko vnútornej valcovej steny, takže fázová časť, ktorá má byt vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najnižšej hustoty.
3. 3. Zariadenie podľa nároku 2, vyznačujúce sa tým, že vypúšťacie potrubie je potrubie prechádzajúce spodnou stenou a opatrené ovládacím ventilom, ktorý je ovládateľný z uzatvorenej polohy do otvorenej polohy, aby bolo spôsobené vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory.
4. 4. Zariadenie podľa nároku 2, vyznačujúce sa tým, že potrubie je usporiadané pri vonkajšej valcovej stene a jedna z fázových častí, ktorá má byť vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najvyššej hustoty.
5. 5. Zariadenie podľa nároku 2, vyznačujúce sa tým, že ovládací ventil je skúšobný ventil, ktorý je prepínateľný z uzatvorenej polohy do otvorenej polohy, keď je vystavený odstredivej sile, keď nádrž pre rozdelovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania.
6. 6. Zariadenie vypúšťacie potrubie stenou.

   podlá nároku 1, vyznačujúce sa tým, že pozostáva z potrubia prechádzajúceho hornou
7. 7. Zariadenie podlá nároku 6, vyznačujúce sa tým, že potrubie je usporiadané pri vnútornej valcovej stene a jedna z fázových častí, ktorá má byt vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najnižšej hustoty.
8. 8. Zariadenie podlá nároku 6, vyznačujúce sa tým, že potrubie je usporiadané pri vonkajšej valcovej stene a jedna z fázových častí, ktorá má byť vypudená z prsteňovitej komory, je fázová časť najvyššej hustoty.
9. 9. Zariadenie podlá ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, vyznačujúce sa tým, že motor vytvára otáčanie nádrže pre rozdelovanie fáz okolo pozdĺžnej osi pri rýchlosti otáčania dostatočnej na vyvíjanie tiažového póla vo vnútri prsteňovitej komory pre rozdelenie kvapalnej vzorky do fázových časti v ktoromkoľvek mieste vo vnútri prsteňovitej komory.
10. 10. Zariadenie podlá nároku 1, vyznačujúce sa tým, že obsahuje prijímaciu komoru na príjem z prcteňovitej komory.

    fázovej časti vypudenej
11. 11. Zariadenie podía nároku 10, vyznačujúce sa tým, že vypúšťacie potrubie obsahuje reakčnú komoru, v ktorej je uzatvorené činidlo pre reakciu s jednou z fázových častí vypudenej z prsteňovitej komory na vytvorenie reakčného produktu.
12. 12. Zariadenie podía nároku 10, vyznačujúce sa tým, že prijímacia komora tvorí reakčnú komoru, v ktorej je uzatvorené činidlo pre reakciu s jednou z fázových častí vypudenej z prsteňovitej komory na vytvorenie reakčného produktu.
13. 13. Zariadenie podía nároku 10, vyznačujúce sa tým, že vnútorná valcová stena vymedzujúca ďalšiu prijímaciu komoru je usporiadaná okolo rovnakej pozdĺžnej osi ako prsteňovitá komora, pričom tieto komory sú oddelené zmieneným piestom.
14. 14. Zariadenie podía ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 13, vyznačujúce sa tým, že vnútorná valcová stena vymedzujúca prsteňovitú komoru obsahuje valcovú stenu piestu.
15. 15. Zariadenie podía nároku 14, vyznačujúce sa tým, že vnútorná valcová stena vymedzuje ďalšiu prijímaciu komoru spojenú s reakčnou komorou ďalším potrubím pre príjem reakčného produktu z reakčnej komory.
16. 16. Zariadenie podía nároku 15, vyznačujúce sa tým, že ďalšia prijímacia komora je tvorená oddelenou injekčnou striekačkou uloženou vo vnútri vnútornej valcovej steny.
17. 17. Zariadenie na rozdeľovanie kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových časti odstredivým rozdeľovaním, vyznačujúce sa tým, že obsahuje nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúcu skriňu majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, vnútorná valcová stena a vonkajšia valcová stena vymedzujú vnútorný polomer r^ a vonkajší polomer r_Q vzhľadom na pozdĺžnu os a pomer vnútorného polomeru k vonkajšiemu polomeru γ^/γ_ο je rovný od 0,3:1 do 0,8:1, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestnitelný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, potrubie spojené s prsteňovitou komorou, prívodný kvapaliny na privedenie kvapalnej vzorky do prsteňovitej komory na rozdeľovanie fáz, keď je piest vo svojej prvej polohe, motor pre otáčanie nádrže na rozdeľovanie fáz okolo jej pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do zmienených fázových častí a ovládací prostriedok na premiestňovanie piestu vo komory z prvej polohy do druhej polohy, rozdeľovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania kvôli vypudeniu jednej z fázových častí z prsteňovitej komory zmieneným vypúšťacím potrubím.

    a vypúšťacie prostriedok vnútri prsteňovitej zatial čo nádrž na
18. 18. Zariadenie podlá nároku 17, vyznačujúce sa tým, že pomer r^/r_Q j e rovný 0,5:1.
19. 19. Zariadenie podlá nároku 17, vyznačujúce sa tým, že vnútorný polomer r^ a rýchlosť otáčania sú zvolené tak, že tiažová sila potrebná na sústredné rozdelenie fázových časti rôznych hustôt je vytvorená vo všetkých oblastiach vo vnútri prsteňovitej komory.
20. 20. Zariadenie podlá ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 19, že obsahuje spojovací prostriedok na spojenie skrine s motorom.
21. 21. Zariadenie podlá nároku 20, vyznačujúce sa tým, že spojovací prostriedok je tvorený zvierajúcim spojovacím prostriedkom usporiadaným na vonkajšej valcovej stene skrine.
22. 22. Nádrž pre rozdeľovanie fáz podľa nárokov l až 21.
23. 23. Spôsob rozdeľovania kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových časti odstredivým rozdeľovaním, vyznačujúci sa tým, že sa opatrí nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúca skriňu majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a prcmiestniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem a vypúšťacie potrubie usporiadané pri vnútornej valcovej stene a spojené s prsteňovitou komorou, kvapalná vzorka sa privedie do prsteňovitej komory, komory pre rozdeľovanie fáz, ked je piest v prvej polohe, nádrž na rozdeľovanie fáz sa otáča okolo pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do fázových častí, piest sa premiestni vo vnútri prsteňovitej komory do druhej polohy, zatiaľ čo sa nádrž pre rozdeľovanie fáz otáča rýchlosťou otáčania kvôli vypudeniu jednej z fázových častí z prsteňovitej komory vypúšťacím potrubím.
24. 24. Spôsob rozdeľovania kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeľovaním, vyznačujúci sa tým, že sa opatri nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúca skriňu majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem,

    - 4G a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, kvapalná vzorka sa privedie do prsteňovitej komory, komory na rozdeíovanie fáz, keď je piest v prvej polohe, nádrž na rozdeíovanie fáz sa otáča okolo pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania na vyvíjanie tiažového póla v prsteňovitej komore pre rozdelenie kvapalnej vzorky do fázových častí vo všetkých miestach prsteňovitej komory, piest sa premiestni vo vnútri prsteňovitej komory do druhej polohy, zatial čo sa nádrž pre rozdeíovanie fáz otáča rýchlosťou otáčania pre vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory vypúšťacím potrubím.
25. 25. Spôsob rozdeľovania kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových častí odstredivým rozdeíovaním, vyznačujúci sa tým, že sa opatrí nádrž pre rozdeíovanie fáz obsahujúca skriňu majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, a vypúšťacie potrubie usporiadané pri vnútornej valcovej stene a spojené s prsteňovitou komorou, kvapalná vzorka sa privedie do prsteňovitej komory, komory pre rozdeíovanie fáz, keď je piest v prvej polohe, nádrž pre rozdeíovanie fáz sa plynulo otáča okolo pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou oddelenie jednej z fázových častí, ktorá má byt oddelená z kvapalnej vzorky a piest sa premiestni vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, zatial čo nádrž pre rozdeíovanie fáz sa otáča rýchlosťou otáčania pre plynulé vypudenie jednej z fázových častí z prsteňovitej komory vypúšťacím potrubím, keď je jedna z fázových častí oddelená od kvapalnej vzorky.
26. 26. Zariadenie pre rozdeíovanie kvapalnej vzorky majúcej fázové časti rôznych hustôt do zmienených fázových časti .· .·»».% í t'r. .

    •1.

    1 >

    odstredivým rozdeľovaním, vyznačujúce sa tým, že obsahuje nádrž pre rozdeľovanie fáz obsahujúcu skriňu, majúcu sústrednú vnútornú a vonkajšiu valcovú stenu vymedzujúcu pozdĺžnu os, spodnú stenu a hornú stenu, pričom vonkajšia valcová stena, vnútorná valcová stena, spodná stena a horná stena spoločne vymedzujú prsteňovitú komoru na uloženie kvapalnej vzorky, vnútorná valcová stena a vonkajšia valcová stena vymedzujú vnútorný polomer r^ a vonkajší polomer r_Q vzhľadom k pozdĺžnej osi a pomer vnútorného polomeru k vonkajšiemu polomeru je rovný od 0,3:1 do 0,8:1, prednostne 0,5:1, piest tvoriaci spodnú stenu alebo hornú stenu skrine a premiestniteľný vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený maximálny vnútorný objem, do druhej polohy, v ktorej je vo vnútri prsteňovitej komory vymedzený minimálny vnútorný objem, a vypúšťacie potrubie spojené s prsteňovitou komorou, prívodný prostriedok kvapaliny na privedenie kvapalnej vzorky do prsteňovitej komory na rozdeľovanie fáz, keď je piest vo svojej prvej polohe, motor na otáčanie nádrže pre rozdeľovanie fáz okolo jej pozdĺžnej osi rýchlosťou otáčania spôsobujúcou rozdelenie kvapalnej vzorky do zmienených fázových častí a ovládací prostriedok pre premiestňovanie piestu vo vnútri prsteňovitej komory z prvej polohy do druhej polohy, zatiaľ čo nádrž pre rozdeľovanie fáz je otáčaná zmienenou rýchlosťou otáčania pre vypudenie jednej z fázových časti z prsteňovitej komory zmieneným vypúšťacím potrubím a prostriedok na zaistenie vlastností jednej alebo obidvoch zložiek vo vnútri nádrže na rozdeľovanie fáz počas procesu rozdeľovania.
27. 27. Spôsob podľa nároku 26, vyznačujúci sa tým, že kvapalná vzorka je vzorka krvi a zmienená jedna fázová čast je plazma.
28. 28. Spôsob rozdelenia kvapaliny do dvoch alebo viacerých jej zložiek sústredným usporiadaním sa tým, že obsahuje kroky: a) zavedenie pevného množstva komory premenlivého objemu, zložiek odstredením, vyznačujúci kvapaliny do valcovej pracovnej pričom táto komora je vymedzená vonkajšou stenou a vnútornou stenou s pevnými polomermi vzhľadom na pozdĺžnu os komory, pričom polomer vnútornej steny je zvolený tak, že pri žiadanej rýchlosti otáčania je pri vnútornej stene vyvíjaná tiažová sila aspoň rovná sile, ktorá je nevyhnutná na udržiavanie sústredného rozhrania medzi prvou a druhou zložkou kvapaliny,

    b) otáčanie komory okolo jej pozdĺžnej osi žiadanou rýchlosťou na vytvorenie zmieneného sústredného rozhrania a pokračovania v otáčaní, zatiaľ čo sa

    c) vykoná zmenšenie objemu pracovnej komory na vypudenie jednej zo zložiek kvapaliny vypúšťacím prostriedkom na rozdelenie zložiek, čim je sústredné rozhranie zložiek v podstate udržiavané počas kroku c).
29. 29. Prsteňovitá sústava prispôsobená umiestneniu vo vnútri odstredivky na vystavenie kvapaliny pôsobeniu chemického alebo biologického činidla v priebehu odstreďovania, vyznačujúca sa tým, že obsahuje v sústrednom usporiadaní

    a) vonkajšiu prsteňovitú stenu vymedzujúcu prsteňovitú vonkajšiu komoru pre vstup kvapaliny,

    b) prvý prsteňovitý filter umiestnený vo vnútri vstupnej komory,

    c) prsteňovitú komoru pre činidlo obsahujúce zdroj chemického alebo biologického činidla a umiestnenú vo vnútri prvého filtra,

    d) druhý prsteňovitý filter umiestený vo vnútri komory pre činidlo,

    e) vnútorné výstupné potrubie kvapaliny umiestnenej vo vnútri druhého filtra a

    f) tlakový prostriedok prispôsobený na zaistenie prietoku kvapaliny smerom do vnútra v priebehu odstreďovania.
30. 30. Spôsob rozdeľovania zložiek krvi zo vzorky krvi, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje zavedenie pevného objemu krvi do prvej prsteňovitej komory odstredivky, kde je prsteňovitá komora vymedzená vonkajšou valcovou stenou a vnútornou valcovou stenou, tieto steny sú súosové, ako i hornou stenou a spodnou stenou, ktoré sú tvorené piestom premiestnitelným vo vnútri prvej komory, otáčanie odstredivky okolo spoločnej osi na odstredivé rozdelenie

    - 49 krvi na dve alebo viac zložiek rôznej hustoty, prenesenie jednej zo zložiek do druhej komory pôsobením piestu, zatiaľ čo odstreďovanie pokračuje na udržiavanie rozdeľovania v prvej komore, pričom druhá komora je vymedzená valcovou stenou súosovou so zmienenou spoločnou osou, vystavenie prenesenej zložky pôsobeniu činidla schopného oddelenia žiadanej zložky krvi z prenesenej zložky a odstránenie zložky krvi z prenesenej zložky pri použití zariadenia podľa nárokov 1 až 21.
31. 31. Spôsob prípravy monoméru fibrínu z krvi, vyznačujúci sa tým, že sa pevný objem krvi zavedie do prvej prsteňovitej komory odstredivky, kde prsteňovitá komora je vymedzená vonkajšou valcovou stenou a vnútornou valcovou stenou, ktoré sú súosové vzhľadom na spoločnú os, a hornou stenou a spodnou stenou, kde horná stena alebo spodná stena je tvorená piestom premiestniteľným v prvej komore, odstredivka sa otáča okolo spoločnej osi kvôli odstredivému rozdeleniu krvi na zložku krviniek a zložku plazmy, zložka plazmy sa prenesie do druhej komory pôsobením piestu, zatiaľ čo odstreďovanie pokračuje kvôli udržiavaniu rozdelenia v prvej komore, pričom druhá komora je vymedzená vonkajšou valcovou stenou súosovou so spoločnou osou, zložka plazmy v druhej komore sa vystaví pôsobeniu enzýmu ako je trombín, v ktorom sa zložka plazmy rozdelí na tekutý podiel a na podiel obsahujúce nezosieťovaný polymér fibrínu, tekutý podiel sa z druhej komory odstráni, nezosietovaný polymér fibrínu sa stane rozpustný na vytvorenie roztoku obsahujúceho monomér fibrínu a enzým ako trombín sa z roztoku takto vytvoreného a obsahujúceho monomér fibrínu odstráni s použitím zariadenia podía nárokov 1 až

    21.
32. 32. Spôsob podľa nároku 31, vyznačujúci sa tým, že vo vnútri vnútornej valcovej steny prsteňovitej komory je tretia komora, ktorá obsahuje roztok na obnovenie rozpustnosti, ktorý sa dávkuje do druhej komory kvôli vytvoreniu rozpustnosti nezosietovaného polyméru fibrínu a pričom tretia komora jc prispôsobená na zhromaždenie roztoku obsahujúceho monomér fibrínu po vytvorení rozpustnosti a prípadnom odstránení enzýmu.

    ľ 'u
33. 33. Spôsob podía nároku 31 alebo 32, vyznačujúci sa tým, že tretia komora je injekčná striekačka.
34. 34. Spôsob podía nároku 31, vyznačujúci sa tým, že nezosietovaný polymér fibrínu a monomér fibrínu sú zvolené zo skupiny zahrňujúcej fibrín I, fibrín II a des BB fibrín.
35. 35. Spôsob podía nároku 31, vyznačujúci sa tým, že enzým ako trombín je zvolený zo skupiny zahrňujúcej akutín, venzým, asperázu, botropázu, krotalázu, flavoxobín, gabonázu, batroxobín a trombin.