SE457085B - Oleandomycinderivat till anvaendning som mellanprodukt foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara derivat av 4"-desoxi-4"-amino-oleandomycin - Google Patents

Description

457 085 och farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter därav, i vilka formler R och R1 vardera representerar en vâteatom eller en alkanoyl- grupp med 2-3 kolatomer; R2 representerar väte; och R3 representerar väte eller alkyl med 1-6 kolatomer.

En föredragen grupp av föreningar inom denna klass av kemotera- peutika är de med den ovan angivna formeln IV. Speciellt föredragna inom denna grupp är de föreningar, i vilka R2 och R3 vardera represen- terar väte och R acetyl. Föredragna är också föreningar med formlerna V och VI, i vilka R representerar acetyl.

De nya mellanprodukterna för framställning av de antibakteríella föreningarna IV, V och VI har följande formler: 457 Û85 Ze eller III i vilka formler R och R1 vardera representerar väte eller alkanoyl med 2-3 xolacomer och x är o, N-ou, N-øcn3 eller n-o-Écxg.

Föredragna föreningar inom denna grupp av mellanprodgkter är de med formeln I, i vilken X representerar O, N-OH eller N-0-8CH3. Före- dragna är även de mellanprodukter med formeln II, i vilka X represen- terar 0, N-OH eller N-0-QCH3. Slutligen föredrages bland dessa mel- . . r I lanprodukter de föreningar III 1 vllka X ar 0, N-OH eller N-0-CCH3.

De nya mellanprodukterna enligt uppfinningen framställes genom att man omsätter en förening med någon av formlerna IA, IIA eller IIIA 457 085 IIIÅ med en mol vardera av N-klorbärnstenssyraimid och dímetylsulfid í ett gentemot reaktionen inert lösningsmedel vid en temperatur mellan ca 0 och ca -25°C, varpå reaktionsblandningen bringas i kontakt med en mol tríetylamin. _ Det föredrages enligt uppfinningen att oxidera föreningar med formeln IA, varvid lösningsmedlet är toluen.

Ehuru föreningarna II, III, V och VI härrör från i naturen förekommande oleandomycin, skiljer de sig med avseende på struk- turen i 8-ställníngen. I det naturliga materialet I och IV är denna struktur en epoxidring som àskádliggöres enligt följande: ß, 457 085 Föreningar hänförande sig till II och V innehåller en metyl- grupp i 8-ställningen med den angivna stereokemin och åskådliggöres enligt följande: O å; >nllï Den nomenklatur, som användes för benämning av de modifierade oleandomycinerna II och V är 8,8a~deoxi-8,8a-dihydro-oleandomycin.

De föreninger III och VI som innehåller en cyklopropylring i 8-ställningen benämnes 8,8a-deoxi-8,8a~metylen-oleandomycin och åskådliggöres enligt följande: Enligt det förfarande, som tillämpas för syntetisering av de från 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin härrörande antibakteriella medlen med formlerna IV, V och VI är följande schema, som utgår från ett l1,2'-díalkanoyl- eller 2'-alkanoyloleandomycin, belysande: 457 085 6 V(CH3)2 > O CH3 O CH3 lI/'o H OCH3 IA (R = väte eller alkancyl med (X = O) 2-3 kolatomer; Ac = aškanoyl med 2-3 kolatomer) [I (X = N-OH, N-OCH3 eller N-O-CCH3) (íorts.) 7 457 085 =\ <2 = Iv-OH. f-OCH; eller »z-oëanï) I J Ovanstående schema kan också tillämpas för omvandling .av föreningar IIA-och IIIA till produkterna V respektive VI, vilka föreningar har formlernar Illa OCH3 V: där R och Åc har om' æ-ginta betydelser.

...» ~A¿--n..-n-_-M..- ...___ 457 Û85 8 Den första reaktionen i dessa sekvenser är den selektiva oxidationen av 4"-hydroxylgruppen. Detta förfarande innefattar omsättning av föreningarna IA, IIA eller IIIA med N-klorbärnstens- syraimid och dimetylsulfid åtföljd av tillsats av en tertíär amin, exempelvis trietylamin.

I praktiken förenas först N-klorbärnstenssyraimid och dimetyl- sulfid i ett gentemot reaktionen inert lösningsmedel vid en tempera- tur av ungefär O°C. Efter lO-20 minuter injusteras temperaturen hos den så erhållna blandningen till ett värde mellan ca 0 och ca -25°C och substrat IA, IIA eller IIIA tillsättes medan nämnda temperatur upprätthålles. Efter 2-4 timmars reaktion tillsättes den tertiära aminen och kylbadet avlägsnas.

Beträffande de mängder, varmed reaktionskomponenterna användes, kan nämnas att det för varje mol använt alkoholsubstrat erfordras en mo N-klorbärnstenssyraimid och en mol dimetylsulfid. Experimentellt är det fördelaktigt att använda ett l-20-faldigt överskott av bärn- stenssyraimiden och sulfiden, detta för att reaktionen snabbare skall fullbordas. Mängden använd tertiär amín bör svara mot den molara mängden använd bärnstenssyraimid.

Det gentemot reaktionen inerta lösningsmedlet bör vara ett som påtagligt solubiliserar reaktionskomponenterna och icke reagerar i någon nämnvärd grad varken med reaktionskomponenterna eller de bildade produkterna. Enär reaktionen genomföres vid en temperatur mellan ca 0 och ca -25°C föredrages att lösningsmedlet förutom de ovan angivna egenskaperna har en fryspunkt, som ligger under reaktionstemp- eraturen. Lösningsmedel eller blandningar därav, som uppfyller dessa krav, är toluen, etylacetat, kloroform, metylenklorid och tetrahydro- furan. Lösningsmedel som uppfyller de ovan angivna kraven men som har en fryspunkt över reaktionstemperaturen kan också användas i små mängder i kombination med ett eller flera av de föredragna lösnings- medlen. Speciellt föredraget lösningsmedel är toluen innehållande bensen.

Det ovan definierade förfarandet anses vara egenartat, enär oxidationen sker i 4"-ställningen medan 11-ställningen lämnas väsentligen opàverkad, när R är väte.

Alkanoylgruppen í 2'-ställningen avlägsnas genom solvolys, varvid den 2'-alkanoyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycinbesläktade föreningen omröres i ett överskott på metanol hela natten vid 457 085 9 rnmstemperaturen. Sedan man avlägsnat metanolen och renat åter- stoden erhàlles föreningar I, II eller III, i vilka R1 är väte och X är O.

Hydroxylgrupperna i ställningarna ll (R=H) och 2' (R1=H) i ketonerna (X=0) I, II eller III kan aoyleras genom behandling av nämnda föreningar med två mol pyridin och ett överskott på alkansyra- anhydrid vid isbadstemperatur. I praktiken sättes den hydroxylhaltiga föreningen till kyld alkansyraanhydrid, varpå pyridinet tillsättes.

Sedan tillsatserna slutförts avlägsnas isbadet och blandningen om- röres hela natten vid rumstemperaturen. Produkten erhålles genom hydrolys av reaktionsblandningen med vatten och efterföljande extrak- tion av produkten med etylacetat. Alternativt kan överskottet på den som lösningsmedel använda alkansyraanhydriden avlägsnas i vakuum och det som återstod erhållna materialet renas på konventionellt sätt.

De nya föreningarna I, II och III, i vilka X är O och R och R1 har ovan angivna betydelser, är användbara som mellanprodukter för framställning av de 4"-amínoantibakteriella medlen med formlerna IV, V och VI. Föredragna som mellanprodukter i denna grupp är l1,2'- diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin, 11-acetyl-4"-deoxi-4“-oxo- oleandomycin, 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin, 2'-acetyl~4"-deoxi-4"- oxo-oleandomycin, 11,2'-diacetyl-8,8a~deoxí-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"- oxo-oleandomycin, ll-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomycin, 8,8a-deoxi-8,Ba-dihydro-4“-deoxi-4"-oxo-oleandomycin, 2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a~dihydro-4"-deoxi-4“-oxo-oleandomycin, 11,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycin, 11-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4“-oxo-oleandomycin, 8,8a- deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin och 2'-acetyl-8,8a- deoxi~8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin.

För framställning av de från 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin härrörande föreningarna kan man tillämpa flera olika syntesförfaran- den. Det första innefattar en inledande omvandling av 4"-deoxí-4"-oxo- föreningarna till oxim eller oxímderivat, dvs. X = N-OH, N-OCH5 eller O N-OÖCH5, och åtföljande reduktion av oximen eller derivatet därav till aminen med formeln IV (H2, R5 = H), V eller VI. 457 085 lo Oximerna av ketonerna (X=0) framställes genom omsättning av nämnda ketoner med hydroxylaminhydroklorid i en lösning av metanol- vatten vid rumstemperatnren. I praktiken föredrages att använda ett överskott på hydroxylamin och vid användning av så mycket $°m ett -faldigt överskott erhålles den önskade mellanprodukten i goda ut- byten. Vid tillämpning av en reaktionstemperatur överensstämmande med rumstemperaturen och användning av ett överskott av hydroxylaminen kan man framställa det önskade oximderivatet på l-2 timmar. Produkten isoleras genom att man till reaktionsblandningen sätter vatten, gör reaktionsblandningen basisk till pH 9,5 och genomför extraktion med ett med vatten iqke blandbart lösningsmedel, exempelvis etylaoetat.

När man i stället för hydroxylamin-hydroklorid använder 0-metyl- hydroxylamin-hydroklorid, erhålles vid reaktionen O-metyloximderivatet.

Vid användning av O-metylhydroxylamin föredrages att utsträcka reak- tionstiden till 6-12 timmar. Produkten isoleras på det sätt som här ovan angivits beträffande isoleringen avboximderivatet. 0-acetyloximföreningarna (X = N-OÖCH5) framställes genom acety- lering av den motsvarande oximen. Experimentellt omsättes en mol av oximen med en mol ättiksyraanhydrid i närvaro av en mol pyridin. Om man använder ett överskott på anhydriden och pyridinet har reaktionen lättare att bli fullständig och det föredrages att använda ett 2-5- faldigt överskott. Reaktionen genomföras bäst i ett aprotiskt kolväte- lösningsmedel, exempelvis bensen eller toluen, vid rumstemperaturen hela natten. Sedan reaktionen slutförts tillsättes vatten och produk- ten separeras i kolväteskiktet. Alternativt kan 0-acetylderivat fram- ställas genom att man behandlar den erforderliga ketonen med O-acetyl- hydroxylamin-hydroklorid under de reaktionsbetingelser, som är tillämp- liga för framställning av oximderivaten. 457 085 ll Föredragen oxim och föredragna oximderivat, som är användbara mellanprodukter för framställning av de från 4"-deoxi-4"-amino-oleando- mycin härrörande antibakteríella medlen är bl.a. ll,2'-diacetyl-4"- deoxi-4"-oxo-olenadomycinoxim, ll-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin- oxim, ll,2'-diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin O-acetyloxim, ll- acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin O-acetyloxim, ll,2'-díacetyl~8,8a- deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycinoxim, ll-acetyl-8,8a- deoxí-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycinoxím, 1l,2'-díacetyl- 8,8a-deoxí-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin O-acetylorím, ll-acetyl-8,8a-deoxí-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4”-oxo-oleandomycin O- acetyloxim, ll,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a~metylen-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomycinoxim, ll-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen~4"-deoxi-4"-oxo- oleandomycínoxim, ll,2'-diacetyl-8,8a-deoxi~8,8a-metylen-4"-deoxi-&"~ oxo-oleandomycín 0-acetyloxim och ll-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen- 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin O-acetyloxim. O Ketonderívaten (X¿N-OH, N-OCH5 eller N-OÖCH5) reduceras genom katalytísk hydreríng, varvid en lösning av oximen eller derivat därav i en lägre alkanol, som isopropanol, och som katalysator Raney-nickel, % palladium på träkol eller palladiumoxid skakas i en väteatmosfär vid ett ursprungligt tryck av 345 kPa vid rumstemperaturen hela natten.

Den förbrukade katalysatorn avfiltreras och lösningsmedlet avlägsnas från filtratet i och för isolering av det önskade 4"-deoxí-4"-amino- substituerade, antíbakteriella medlet IV, V eller VI. Om metanol an- vändes som reduktionslösningsmedel sker solvolys av 2'-alkanoylgruppen.

För att undvika att denna grupp avlägsnas föredrages isopropanol som lösningsmedel.

Det andra, och föredragna, sättet att ur ketonerna (X=O) I, II och III framställa de primära aminerna IV, V och VI innefattar kon- densation av nämnda ketoner med ammoniumsaltet av en lägre alkansyra och efterföljande reduktion av den in situ bildade imínen. Förutom ammoniumsalter av lägre alkansyror kan man använda andra ammonium- salter, såsom ammoníumsalter av oorganiska syror. 457 085 12 Vid praktisk tillämpning behandlas en lösning av ketonen I, II eller III (X=O) i en lägre alkanol, exempelvis metanol, med ett am- moniumsalt av en alkansyra, exempelvis ättiksyra, och den kylda reak- tionsblandningen behandlas med reduktionsmedlet natriumcyanoborhydrid.

Reaktionen får fortsätta vid rumstemperaturen i flera timmar, varpå hydrolys genomföres och produkten isoleras.

Ehuru en mol ammoniumalkanoat erfordras per mol keton, är det lämpligt att tillsätta ett överskott i ändamål att tillförsäkra snabb bildning av iminen. Man kan använda ända upp till ett 10-faldigt över- skott utan att pàverka slutproduktens kvalitet. p Beträffande den för användning avsedda mängden reduktionsmedel per mol keton kan nämnas, att man föredrar ca två mol natríumšyanobor- hydrid per mol keton.

Reaktíonstiden för reduktionen varierar mellan 2 och 5 timmar vid omgivningens temperatur.

Såsom ovan påpekats föredrages metanol som lösningsmedel och ammoniumacetat som ammoniumalkanoat. Isopropanol kan också användas som lösningsmedel och är speciellt lämplig, när solvolys av 2'-alkanoyl- gruppen skall undvikas.

Vid isolering av de önskade 4"-deoxi-4"-amino~o1eandomycinderi- vaten från de icke basiska biprodukterna eller utgàngsmaterialet ut- nyttjar man slutproduktens basiska natur. Följaktligen extraheras en vattenlösning av produkten inom ett intervall av småningom stigande _pH, så att neutrala eller icke basiska material extraheras vid lägre pH och produkten vid ett pH av ungefär 9. Extraktionslösningsmedlen, nämligen etylacetat eller dietyleter, tvättas med koksaltlösning och med vatten, torkas över natriumsulfat och produkten utvinnes genom avlägsnande av lösningsmedlet. _ Ytterligare rening kan, om så erfordras, åstadkommas genom på i och för sig känt sätt genomförd kolonnkromatografering på kiseldi- oxidgel.

Den ovannämnda, reduktiva amineringen kan åstadkommas under andra reducerande betingelser förutom genom användning av natrium- cyanoborhydrid. Vissa platinametallkatalysatorer, såsom palladium på träkol, kan användas tillsammans med väte och ett ammoniumalkanoat för effektiv omvandling av föreningarna I, II och III (X=O) till IV, V respektive VI. 40 12 457 085 Experimentellt behandlas en lösning av den lämpliga ketonen i en lägre alkanol, såsom metanol eller isopropanol, med ett ammonium~ alkanoat, såsom ammoniumacetat, och 10% palladium på träkol, och den så erhållna suspensionen skakas i väteatmosfär vid en temperatur mel- lan ca 25 och ca 50°C, till dess den teoretiska mängden väte absorberats.

Beträffande mängdförhàllandet mellan reaktionskomponenterna kan nämnas, att man föredrar ett 10-faldigt överskott på ammoniumalkanoat för tillförsäkring av fullständig reaktion på rimlig tid. Mängden katalysator kan variera mellan lO och 50 viktprocent räknat på vikt- mängden av den som utgångsmaterial använda ketonen. Begynnelsetrycket i vätgasen är icke av avgörande betydelse och ett tryck mellan en atmosfär och 5500 kPa föredrages för förkortning av reaktionstiden.

Hed nämnda parametrar varierar reaktionstiden mellan 2 och 6 timmar.

Vid slutet av den reduktiva amineringen avfiltreras katalysa- torn och filtratet indunstas till torrhet. Produkten renas på ett sätt, som här ovan angives beträffande reningen av den produkt, som framställes med användning av natriumcyanoborhydrid som reduktions- medel.

Antibakteriella föreningar med formeln IV, i vilken R, är väte och R5 alkyl med l-6 kolatomer, syntetiseras bekvämt ur ketönen I (X=O) och lämplig amin R5NH2 med användning av natriumcyanoborhydrid som reduktionsmedel. För att hålla pH mellan ca 6 och ca 7 användes en alkansyra, exempelvis ättiksyra, i en molar mängd, som överens- stämmer med den molara mängden använd anin. Alternativt kan en mot- 'svarande mängd klorvätegas användas i stället för alkansyran.

Nängdförhàllandet mellan reaktionskomponenterna, reaktionstempe- raturen och -tiden liksom även upparbetningen av den reduktiva amine- ringsreaktionen överensstämmer med de motsvarande parametrarna för den reaktion, som ger upphov till bildning av föreningar, i vilka var och en av R2 och R5 är väte och natriumcyanoborhydrid användes som reduktionsmedel.

Såsom ovan påpekats kan 2'-alkanoylgruppen solvolyseras genom att man omrör nämnda derivat av aminen hänförande sig till IV, V eller VI i en metanollösning hela natten vid omgivningens temperatur.

Bland dessa föreningar föredrages på grund av antibakteriell användbarhet 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin, 11-acetyl-4"-deoxi-4"- amino-oleandomycin, 11,2'-diacetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin, ll-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin, 11,2'-díacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-díhydro-4"-deoxi-4"-amíno-oleandouycín, ll-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycín och ll,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin. 457 085 14 När man utnyttjar den kemoterapeutiska aktiviteten hos de före- ningar med formeln IV, V eller VI, vilka bildar salter, föredrages gi- vetvis att använda de farmaceutiskt godtagbara salterna. Ehuru vatten- olöslighet, hög toxicitet eller bristande kristallinitet kan göra några speciella slag av salter olämpliga eller mindre önskvärda för användning, exempelvis för en viss farmaceutisk applikation, kan de vattenolösliga eller giftiga salterna omvandlas till de motsvarande farmaceutiskt godtagbara baserna genom sönderdelning av saltet på ovan beskrivet sätt eller också kan de omvandlas till något önskvärt, farma- ceutiskt godtagbart syraadditionssalt.

Som exempel på syror, som ger farmaceutiskt godtagbara anjoner, kan nämnas saltsyra, bromvätesyra, jodvätesyra, salpetersyra, svavel- syra och svavelsyrlighet, fosforsyra, ättiksyra, mjölksyra, citron- syra, vinsyra, bärnstenssyra, äppelsyra, glukonsyra och asparaginsyra.

De för framställning av de antíbakteriella medlen med formlerna IV, V och VI använda utgàngsmaterialens stereokemi överensstämmer med de naturliga materialens. Oxidationen av 4"-hydroxylgruppen till en ketongrupp och den därpå följande omvandlingen av den så erhållna ketonen till 4"-aminerna möjliggör en förändring av 4"-substituentens stereokemi från den som gäller för den naturliga produkten. Följaktli- gen är det vid omvandling på de här ovan beskrivna sätten av förening- arna I, II och III (X=O) till aminer möjligt att tvâ epimera aminer bildas. Experimentellt är att märka, att båda de epimera aminerna föreligger i slutprodukten i varierande mängder beroende på valet av syntesmetod. Om den isolerade produkten till övervägande del består av en av epimererna kan denna epimer renas genom upprepad kristallisation i ett lämpligt lösningsmedel till konstant smältpunkt. Den andra epi- meren, dvs. den som föreligger i mindre mängd i det ursprungligen isolerade fasta materialet, blir den förhärskande produkten i moder- luten. Den kan utvinnas ur denna pá känt sätt, exempelvis genom in- dunstning av moderluten och upprepad omkristallisation av indunstnings- återstoden, till dess att man erhåller en produkt med konstant smält- punkt, eller också kan den utvinnas genom kromatografering.

Ehuru nämnda blandning av epimerer kan separeras på känt sätt är det av praktiska skäl fördelaktigt att använda nämnda blandning sådan den isoleras från reaktionen. Det är emellertid ofta fördelaktigt att rena epimerblandningen genom åtminstone en omkristallisation i ett lämpligt lösningsmedel, kolonnkromatografering, fördelning mellan lös- 457 085 níngsmedel eller triturering i ett lämpligt lösningsmedel. Även om man vid en sådan rening icke nödvändigtvis uppnår separation av epimererna avlägsnas främmande material, sásom utgàngsmaterial och icke önskvärda biprodukter.

Den absoluta stereokemiska specificeringen har ännu icke helt fastställts. Båda epimererna av en given förening uppvisar emellertid samma typ av aktivitet, exempelvis som antibakteriella medel.

De här beskrivna, nya 4"-deoxi-4"-amino-olenadomycinderivaten uppvisar in vitro aktivitet gentemot ett flertal grampositiva mikro- organismer, såsom Staphylococcus aureus och Streptococcus pyogenes och gentemot vissa gramnegativa mikroorganismer, såsom de med sfärisk eller ellipsoid form (kockar). Deras aktivitet kan lätt demonstreras in vitro gentemot olika mikroorganismer i ett hjärna-hjärta-infusions- medium genom den vanliga dubbla serieutspädningstekniken. Deras akti- vitet in vitro gör dem användbara för topisk applikation i form av salvor, krämer och liknande, för sterilisering, exempelvis av sjukrums- utensilier och som industriella antimikrobmedel, exempelvis för vat- tenbehandling, för slembekämpning, för träkonservering och som till- sats till màlníngsfärg.

I följande exempel belyses uppfinningen, men denna är givetvis icke begränsad till de i exemplen angivna detaljerna eller speciella åtgärderna utan innefattar allt det som faller inom de efterföljande kraven. Uppfinningen kan.varieras utan att man därför frångår upp- finningsidên eller överskrider uppfinningens ram.

Exempel 1: 2'-Acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomgcin. Dimetylsulfid (0»557 ml) sattes till en grumlig lösning av 467 mg N-klorbärnstensf syraimid i 20 ml toluen och 6 ml bensen kyld till -5°C och hällen under kväveatmosfär. Efter omrörning vid 0°C i 20 minuter kyldes blandningen till -25°C och 1,46 g 2'-acetyloleandomycin och 15 ml toluen tillsattes. Omrörningen fortsattes i 2 timmar vid -20°C, var- på 0,46 ml trietylamin tillsattes. Reaktionsblandningen hölls vid lO l5 457 085 16 -20°C i ytterligare 5 minuter, varpå dess temperatur tilläts stiga till O°C. Blandningen hälldes under omrörning i 50 ml vatten och SO ml etylacetat. Den vattenhaltiga blandningens pH injusterades på 9,5 genom tillsats av en vattenlösníng av natriumhydroxid. Den or- ganiska fasen avskildes därefter, torkades över natriumsulfat och indunstades i vakuum, varigenom man erhöll ett vitt skum, (1,5 g).

Vid triturering med dietyleter erhölls 864 mg råprodukt. Vid om- kristallisation av denna ràprodukt två gånger i metylenklorid-diety1- eter erhölls 212 mg av den rena produkten, som hade en smältpunkt av 185-185,5°C.

Analys - %C %H~ %N - Beräknat för C5?HšlOl3N: 61,1 8,S 1,9 Funnet 60,9 8,4 1,9 NHR (J, CDC15): §,6O (lH)m, },5O (§H)S, 2,?§ (2H)m, 2323 (6H)s och 2,05 (äns.

Det ovan beskrivna förfarandet upprepades men med användning av 2'-propíonyloleandomwcin som utgángsmaterial och man erhöll 2'-propio- nyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. 4"-Deoxi-4"-oxo~oleandomycin. En lösning av 1,0 g 2'-acetyl- 4"-deoxi-4"oxo-oleandomycin i 20 ml metanol omrördes vid rumstempera- turen hela natten. Iösningen indunstades i vakuum och man erhöll den önskade produkten i formgav ett vitt skum (957 mg).

NHR (5, cDc13): 5,60 (1H)m, 5,50 (5H)s, 2,85 (2H)m och 2,26 (6H)s.

Exempel 5: ll,2'-Diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin.

A. Via acetlleringz Till 4,0 ml ättiksyraanhydrid, som kylts till O°C i ett isbad och som hölls under kväveatmosfär, sattes 727 WS 2'-acety1- 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomvcin. Efter 5 minuter tillsattes 0,158 ml Exempel 2: pyridín och den grumliga suspensíonen omrördes hela natten vid rums- år* 55 40 17 457 085 temperaturen. Den så erhållna lösningen hälldes i vatten urskiktat med etylacetat och pH ínjusterades på 7,2 genom tillsats av fast natriumbikarbonat och därefter på 9,5 med användning av IN-Na0H.

Den organiska fasen avskildes, tvättades först med vatten och där- efter med en mättad koksaltlösning och torkades över natriumsulfat.

Iösningsmedlet avlägsnades under reducerat tryck och man erhöll 588 mg av den önskade produkten. mm (s, cnc13)= 3,48 (ams, 2,63 (amm, 2,26 (sms och 2,06 (sms.

Det ovan beskrivna förfarandet upprepades med användning av de erforderliga utgàngsmaterialen, nämligen 2'-alkanoyl-4"-deoxi-4"- oxo-oleandomcin och acyleringsmedel för syntetisering av följande föreningar: ll-acetyl-Z'-propionyl-lW-deoxi-Lß"-oxo-oleandomycin, ll- propiönyl-2'-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin och ll,2'-dipropio- nyl-4"-deoxi-Q"-oxo-oleandomycin. ' B. Via oxidation: Till 4,5 g N-klorbärnstenssyraimid, 50 ml bensen och 150 ml toluen i en torr kolv försedd med magnetisk omrörare och kväveinlopp och kyld till -5°C sattes 5,36 ml dimetylsulfid. Efter omrörning vid O°C i 20 minuter kyldes innehållet till -25°C och be- handlades med 5,0 g ll,2'-diacetyl-oleandomycin i 100 ml toluen.

Kylningen och omrörningen fortsattes i 2 timmar, varpå 4,73 ml tri- etylamin tillsattes. Reaktionsblandningen omrördes vid O°C i 15 minu- ter och hälldes därefter i 500 ml vatten. pH injusterades på 9,5 med en l-normal vattenlösning av natriumhydroxid och den organiska fasen avskildes, tvättades med vatten, med en koksaltlösning, torkades över natriumsulfat och lösningsmedlet avlägsnades i vakuum, varige- nom man erhöll 4,9 g av den önskade produkten i form av ett skum, vilket visade sig vara identiskt med produkten enligt exempel BA.

NHR (8, CDC15): 5,48 (5H)s, 2,61 (2H)m, 2,25 (6H)s och 2,03 (6H)s.

Exempel 42 ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. En lösning av 4,0 g ll,2'-diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin i 75 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen hela natten. Reaktíonsblandningen indunstades un- der reducerat tryck, varígenom man erhöll produkten i form av ett skum. En dietyleterlösning av indunstningsåterstoden gav vid behand- ling med hexan 2,6 g av produkten i form av en vit, fast substans med en smältpunkt av 112-l17°C. mm (s, 011015» 3,45 (ßms, 2,60 (amm, 2,25 (sms och 2,01 (ams.

Det ovan beskrivna förfarandet upprepades men med användning av ll,2'- dipropionyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomvcin och-1l-propionyl- 2'-acetyl-4"-depxo-4"-oxr-oleandomycin, varigenom man erhöll ll- propionyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin.

Exemoelg5= ll,2'-Diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. En reaktions- äs 18 457 085 blandning av 1,0 g ll,2'-diacetyl-oleandomycin, 7,09 ml dimetylsulf- oxid och 9,44 ml ättiksyraanhydrid omrördes vid rumstemperaturen i 4 dagar. Den därvid erhållna gula lösningen sattes till vatten över- skiktat med bensen. pH injusterades därefter med en l-normal vatten- lösning av natriumhydroxid pà 9,5 och den organiska fasen avskildes, torkades över natriumsulfat och indunstades i vakuum till torrhet. Det gula, oljeartade skummet (l,14 g) kromatograferades över 20 g kisel- dioxidgel med användning av en blandning av kloroform och aceton i mängdförhållandet 9íl som elueringsmedel. Iösningsmedlet avlägsnades från frsktionerna och man erhöll 800 mg av den önskade produkten och 110 mg av en biprodukt.

Det ovan beskrivna oxidationsförfarandet upprepades med använd- ning av ll-acetyl:2'-propionyloleandomycin; ll,2'-dipropionyloIeando- mycin; och ll-propionyl-2'-acetyloleandomycin som utgângsmaterial, varvid man erhöll ll-acetyl-2'-propionyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin; ll,2'-dipropionyl-4"-deoxi-4"-oxn-oleandomycin respektive ll-propiony1- 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. I Exempel 6: 2'-Acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleando- gcin. I en torr kolv försedd med magnetisk omrörare och kväveinlopp, vilken kolv innehöll en till -5°C kyld blandning av 11,6 g N-klor- bärnstenssyraimid, 750 ml toluen och 250 ml bensen, satsades 6,0 ml dimetylsulfid och den så erhållna lösningen omrördes i 20 minuter.

Temperaturen sänktes ytterligare till -20°C och 25 g 2'-acetyl-8,8a- deoxi-8,8a-dihydro-oleandomycin i 500 ml toluen tillsattes. Efter omrörning i 2 timar vid -20°C tillsattes ll,4 ml trietylamin och reaktionsblandningens temperatur fick småningom stiga till 0°C. Reak- tionsblandningen hälldes därefter i 1500 ml vatten och pH injustera- des på 9,5 med 1N-NaOH. Den organiska fasen avskildes, tvättades, först tre gånger med vatten, därefter en gång med en mättad koksalt- lösning och torkades över natriumsulfat, varpå lösningsmedlet av- lägsnades under reducerat tryck. Det därvid bildade skummet omkristal- liserades i dietyleter och man erhöll 15 g av den rena produkten med en smältpunkt av 197-l99°C.

NHR (3, CDClà)= 5,11 (lH)m, 3,51 (§H)s, 2,25 (6H)s och 2,05 (}H)s.

Exempel 7: 8,8a-Deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin.

En suspension av 2,0 g 2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4“-deoxi- 4"-oxo-oleandomycin i 100 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen i 20 timmar. Reaktionsblandningen indunstades under reducerat tryck och man erhöll 1,8 g av den önskade produkten i form av ett vitt skum.

NHR Ci, CDC15)= 5150 (1H)m, 5,51 (5H)s och 2,26 (6H)s.

Exempel 8: ll,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo- 55 40 19 457 085 glgagdogqcin. Till en i ett isbad kyld suspension av 13,0 g 2'-acetyl- 8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomwcin i 65,0 ml ättik- syraanhydrid sattes 2,8 ml pyrídin. Kylbadet avlägsnades och reaktions- blandningen omrördes vid rumstemperaturen hela natten. Den så erhållna lösningen sattes därefter till 500 ml vatten och 500 ml etylacetat. pH injusterades på 7,0 med fast natriumbikarbonat och därefter på 9,5 med en 4-normal vattenlösning av natriumhydroxid. Den organiska fasen avskildes, tvättades två gånger med vatten och därefter en gång med en koksaltlösning och torkades över natriumsulfat, varpå lösnings- medlet avlägsnades i vakuum. Man erhöll på detta sätt råprodukten i form av ett skum.

Enär resultat erhållna genom kromatografering av ett prov av ràprodukten antyder ofullständig reaktion, kombinerades den i'Yorm av ett skum erhållna råprodukten med 28 ml pyridin och 79 ml ättik- syraanhydrid och det hela omrördes vid rumstemperaturen i 72 timmar.

Reaktionsblandningen upparbetades på ovan angivet sätt och man er- höll l2,4 g av den önskade produkten. mm (s, cnc15)= 3,51 (5208, 2,26 (sms och 2,10 (sms.

Exempel 9: ll-Propionyl-2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi- 4"-oxo-oleandomlcin. Det i exempel 8 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från 6,5 g 2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi- 4”-oxo-oleandomycin, 40 ml propionsyraanhydrid och 14 ml pyridin.

Efter 72 timmars omsättning upparbetades blandningen på sätt som an- gives i exempel 8 och man erhöll den önskade produkten.

Exempel 10: ll-Acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleando- ggcin. En lösning av 11,5 g 11,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro- 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin i lOO ml metanol omrördes hela natten vid rumstemperaturen, varpå reaktíonsblandningen indunstades till torrhet under reducerat tryck. Man erhöll på detta sätt 10,6 g rå- produkt i form av ett skum. Råprodukten löstes i kloroform och lös- ningen hälldes i en kiseldioxidgelkolonn. Sedan 5 l kloroform bringats att passera genom kolonnen eluerades produkten med kloroform/metanol (l9:l). Fraktioner om vardera 800 droppar upptogs i en automatisk fraktionsuppsamlare. Fraktionerna 50-56, 5?-62, 63-69 och 70-80 kom- binerades och indunstades i vakuum till torrhet, varigenom man erhöll 2,9 g av den rena produkten. mm (6. cnc13)= 5,55 (5198, 2,31 (erna och 2,05 (3105.

Exempel ll: ll-Propíonyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomïcin. Det i exempel 10 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från ll-propionyl-2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-díhydro-4"-deoxi- 4"-oxo-oleandomycin enligt exempel 9 och man erhöll den önskade, i 55 40 457 085 rubriken till förevarande exempel angivna föreningen.

Exempel 12: 2'-Acetyl-8,8a-deoxi-8lßa-dihydro-oleandomwcin. Till en lösning av 5,0 g 8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-oleandomcin i 15 ml bensen sattes 0,75 ml ättiksyraanhydrid och den så erhållna reaktionsbland- ningen omrördes vid rumstemperaturen i 1,5 timmar. Iösningen sattes till 100 ml vatten och pH injusterades på 7,5 med fast natriumbikarbo- nat och därefter på 9,5 med en l-normal vattenlösning av natrium- hydroxid. Efter l0 minuters omrörning avskíldes det organiska skiktet, tvättades först två gånger med vatten, därefter en gång med en mättad koksaltlösning, torkades över natriumsulfat, varpå lösningsmedlet avlägsnades under reducerat tryck. Man erhöll på detta sätt 4,9 g av den önskade produkten med en smältpunkt av 202-204°C. ' NHR (¿, cnc15)= 5,05 (1H)m, 5,4o (ams, 2,25 (sms och 2,05 (ams.

Det ovan öeskrivna förfarandet upprepades men ättiksyraanhydri- den utbyttes mot en ekvivalent mängd propionsyraanhydrid och man er- höll 2'-propionyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-oleandomycin.

Exempel 15: 2'- Propionyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihvdro~4"-deoxi-4"-oxo- oleandomycin. Till en lösning av 575 ml toluen och 125 ml bensen sattes 5,8 g Nëklorbärnstenssyraimid och blandningen omrördes vid rumstemperaturen i 15 minuter. Reaktionsblandníngen kyldes till -5°C och försattes med 5,0 ml dimetylsulfid, varpå omrörningen fortsattes i ytterligare 20 minuter. Temperaturen sänktes till -20°C, varpå 12,8 g 2'-propionyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-oleandomycin i 250 ml toluen tillsattes. Efter 2 timmar tillsattes 5,7 ml dietylamin och kylbadet avlägsnades. När reaktíonstemperaturen stigit till 0°C kyldes bland- ningen i 750 ml vatten. pH injusterades på 9,5 med lN~NaOH och den organiska fasen avskildes. Efter tvättning med vatten tre gånger och med en mättad koksaltlösning, torkades den organiska fasen och in- dunstades under reducerat tryck, varigenom man erhöll den önskade produkten.

Exempel 14: 11,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo- oleandogcin. Till en till -5°C kyld, grumlig lösning av 454 mg N- klorbärnstenssyraimid i 15 ml toluen och 5 ml bensen sattes 0,527 ml dimetylsulfid. Efter omrörning i 20 minuter vid 0°C kyldes reaktions inandning-en till -25°c och försattes med soo mi llz-diacetyl-aaa- deoxi-8,8a~metylen-oleandomycin och 10 ml toluen. Omrörningen fort- sattes i 2 timmar vid -20°C, varpå 0,46 ml tríetylamin och 1 ml toluen tillsattes. Kylbadet avlägsnades och reaktionsblandningens temperatur fick stiga till 0°C. Den hälldes därefter i 50 ml vatten och 50 ml etylacetat. pH injusterades omsorgsfullt på 9,5 och den organiska fasen avskildes, torkades och indunstades till torrhet. På detta sätt 21 457 085 erhölls 520 mg av den nâgøt våta, önskade produkten i form av ett vitt skum.

NM (8, CDCl5): 5,50 (5H)s, 2,50 (6H)s, 2,06 (6H)s och 0,58 (4H)m.

Exemgel l§= Det i exempel 14 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från lämpligt 8,8a-deoxi-8,8a-metylen~o1eandomycin för fram- ställning av följande 8,8a-deoxi-8,8a-mety1en~4"-deoxi-4"-oxo~oleando- mycinderívat: R1 '-' \ IHCH 1 o g: 014 3 2 CH 3 R ol,/,, “uo O "\\\ ' IUO", 0 CR; OCB3 ß a O O en ö- an ca Ö- 5 2 0 O ll Il CH5CH2C~ CHEQ- 0 Q' II CH5CH2C- CH3CH2C- O ö' H- CH5 - O u - CH CH C- H ß a Exempel 16: ll-Acetyl-8,8a-deoxi-8,8a~mety1en-4"-deoxi-4"-oxø- oleandogqcin. En lösning av 400 mg 11,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a~ metylen-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin i 10 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen hela natten, varpå den indunstades i vakuum. Man erhöll på detta sätt 270 mg av den önskade produkten. _ NMR (5, cnc15)= 3,46 (5H)s, 2,26 (6H)s, 2,05 (5H)s och 0,56 (4H)m. 22 457 085 Exemgel 12: Det i exempel 16 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från lämpligt 2'~a1kanoyl-8,8a-deoxi-8,8a-mety1en-4"-deoxi- 4"-oxo-oleandomycin för framställning av följande föreningar: - 91 z: \g N (C113) 2 CH 3 R 001,, “ÜO O C H 3 CH CBum ”mo 3 0 Ca 3 l/ 3 cfla " 1 g CH3 Qëc) _ ' - oca3 G Utgángsmateríal Produkt R Rl R Rl 0 O O u n å' H CH5C- _CH5CH2C CH5 - - O 0 O “- 3- CH CH ä- H- CH5CH2C CH5 5 2 9 9 9 CH5CH2C- CH5CH2C- CH5CH2C H- L 9 H- CH5C- H- I H- x 9 H- CH5CH2C- H- H- Exempel 18: 11,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxí-4"-oxo- oleandomcin. I en torr kolv försedd med kväveinlopp satsades 18 ml metylendikloríd och 1,97 ml dimetylsulfoxid och den så erhållna lös- l5 ningen kyldes till -60°C. Trifluorättíksyraanhydríd (3,9 ml) till- sattes småníngom och omrörningen fortsattes i kyla i 10 minuter.

Reaktíønsblandningen kyldes ytterligare till -70°C och 5;34 g ll,2'- diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-oleandomwcin i 2? ml metylendiklorid tillsattes droppvis med sådan hastighet, att temperaturen icke steg 23 457 085 över -50°C. Sedan reaktionsblandningen kylts på nytt till -?O°C till- sattes 9,69 ml trietylamin och kylningen fortsattes i 10 minuter.

Reaktionsblandningens temperatur tilläts därefter stiga till -lO°C, varpå reaktionsblandningen hälldes i 75 ml vatten. pH injusterades på 9,5 med lN-NaOH och metylendikloriden avskildes. Den organiska fasen tvättades därefter med vatten (2x50 ml) och med en mättad kok- saltlösning (lx2O ml), varpå den torkades över natriumsulfat. Iös- ningsmedlet avlägsnadeš i vakuum och man erhöll 6,2 g av produkten, som förutom en spårmängd föroreningar visade sig vara identisk med produkten enligt exempel 14. .

Exemgel 12: Det i exempel 18 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från det erforderliga 2'-alkanoyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen- oleandomycínet för erhållande av följande 4"-deoxi-4"-oxoderivât= o fl H- snäc- o I' H- cašcazc- o o en ö- cH ca É- 5 2 o o || II cašcazc- cašcnac- 24 457 085 Exempel 20: ll,2'-Díacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin-oxím. Till en lösning av 18,1 g hydroxylamínhydrokloríd i 500 ml vatten och 200 ml metanol sattes 50 g ll,2'-díacetyl-4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycin och reaktionsblandningen omrördes vid rumstemperaturen i en timme. Den så erhållna lösningen sattes till vatten och pH injusterades därefter på 7,5 med fast natriumbikarbonat och därefter på 9,5 med IN-NaOH.

Produkten extraherades med etylacetat och de torra extrakten koncentre- rades till ungefär 170 ml. Hexan sattes till den upphettade etyl- acetatlösningen till grumlingspunkten och den grumlíga lösningen kyl- des- Den utfällda produkten avfiltrerades och torkades och man erhöll 29,8 g med en smältpunkt av 225,5-225°C. mm (61 CDC13): 5950 (ansa 2165 (2H)ms 2935 (6H)3 och 2119 (5H)5- Det ovan beskrivna förfarandet upprepades men utgående från 0-acetylhydroxylåmin-hydroklorid och erforderlig keton för erhållande av 2'-acetyl~4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-0-acetyloxím och 2'-propio- nyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-0-acetyloxim. 457 oss Exemgel 21: Det i exempel 20 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från lämpligt 4"-deoxi-lU-oxo-oleandoznycin för erhållande av följande oximer; - R RI _ šï H- cfišc- f? H- cušcfizc- f? f? cfišc- cašcnac- .. f? cnšcng - cnšc- f? f? cnšcnzc- cfišcnzcf f? cnšc- H- f? cnåcfizc- H- IL 26 457 085 Exempel 22: ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomíçin-oxim. En lösning av 500 mg ll,2'-diacetyl-4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycín-oxim i 100 ml metanol omrördes i 72 timmar vid rumstemperaturen, varpå den indunsta- des till torrhet under reducerat tryck. Man erhöll på detta sätt ett skum, som efter omkristallísation i etylacetat-hexan vägde 572 mg och hade en smältpunkt av 184-l86°C. mm (6, cnclšy 5,30 (nns, 2,66 (aina, 2,56 (sms och 2,10 (5103.

Exemgel 2§: Det i exempel 22 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från erforderlig oxím för erhållande av följande föreningar: R R _ _l _ _1 9 H- CHEC- H- H- 9 H- cnöcnac- H- H- E? E? 9 CH3Ce CH5CH2C- CH3C- H- S? S? f? CH5CH2C- CH5C- CH5CH2C- H- 9 S? f? CH3CH2C- CHäCH2C- CH5CH2C- H- Exemgel 24: ll,2'-Díacetyl-4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycín-O-acetyloxim.

Till en under omrörning hàllen, grumlig lösning av 20 g ll,2'-diacety1- 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycín-oxím i 250 ml bensen sattes 8,21 ml pyri- din och därefter 9,62 ml ättiksyraanhydríd. Den så erhållna reaktions- 17 27 457 085 blandningen omrördes vid rumstemperaturen hela natten. lösningen häll- des i vatten och den organiska fasen tvättades först med vatten och därefter med en mättad koksaltlösning, varpå den torkades och índunsta- des till torrhet. Genom omkrístallisation av indunstningsåterstoden (skum) i etylacetat-hexan erhölls 15,4 5 av den rena produkten, som hade en smältpunkt av 198-202°C.

NM (8, CDC15): 5,58 (5H)s, 2,66 (2H)m, 2,55 (6H)s, 2,26 (3H)s och 2,10 (6H)s.

Exempel 25: Det i exempel 24 beskrivna förfarandet upprepades på nytt men utgående från lämplig oxim för erhållande av följande produkter: ° 9 N I CHBCHZC- CH3C- O II H.- CH5C- O II CH5CH2C- H- Exempel 26: 11,2'-Díacetvl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycín-O-metyloxím.

Till 50 ml vatten och 50 ml metanol sattes 1,25 5 metoxiamin-hydro- kloríd och 2,5 g ll,2'~diacety1-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin och den så erhållna reaktionsblandníngen omrordes vid rumstemperaturen hela natten. lösningen sattes till vatten och pH ínjusterades på 7,5 med fast natríumbíkarbonat och därefter på 9,5 med en 1-normal vatten- 28 457 085 lösning av natriumhydroxid. Produkten extraherades med etylacetat och extraktet torkades över natriumsulfat. Genom indunstning av lösnings- medlet i vakuum erhölls 2,4 g av den önskade produkten i form av ett vitt skum.

NNE (6, CDC15): 5,88 (5H)s, 5,26 (3H)s, 2,56 (2H)m, 2,50 (6H)s och 2,06 (6H)s. , Exempel_gZ: Det i exempel 26 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från metoxiamín-hjdroklorid och det erforderliga 4"-deoxi- 4"-oxo-oleandomycinet för erhållande av följande föreningar: 2'-acety1- 4"-deoxi-4"-oxn-oleandomycin-0-metyloxim, 2'-propionyl-4"-deoxi-4"- oxo-oleandomycin-O-metyloxim, ll-acetyl-2'-propionyl-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomycin-O-metyloxim, 11-propionyl-2'-acetyl~4"-oxn-o1eandomycin- 0-metyloxim, ll-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin-O-metyloxïm och ll-propionyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-O-metylóxim.

Exempel 28: ll,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,Ba-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomgcin-oxim. En lösning av 49,0 g 11,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a- dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin och 18,1 g hydroxy1amin-hydro- klorid i 300 ml vatten och 300 ml metanol omrördes vid rumstemperatu- ren i 1,5 timmar. Den så erhållna lösningen sattes till 250 ml vatten och pH injusterades på 7,5 och 9,5 med fast natriumbikarbonat resp. 1N-NaOH. Produkten extraherades.med etylacetat, extraktet torkades över natriumsulfat och indunstades till torrhet. Indunstningsàtersto- den omkristalliserades i etylacetat-hexan och man erhöll den önskade produkten.

Exempel 23: Det i exempel 28 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från lämpligt 4"-deoxí-4"-oxo-oleandomcin och erforderligt hydroxylaminderivat för erhållande av följande föreningar: H- N-OH N- OH N- OH N-OH N-OH N-OCH N~0CH N-OCH n-ocH N-OCH 55 50 457 085 Exempel 50: ll,2'-Díacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"~deoxi-4"-oxo- oleandomycin-0-acetyloxim: Till en lösning av 9,9 g ll,2'-diacetyl- 8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-oxim och 4,1 ml pyridin i 125 ml bensen sattes 4,81 ml ättiksyraanhydrid och den så erhållna reaktionsblandningen omrördes vid rumstemperaturen hela nat- ten. Reaktionsblandningen hälldes i vatten och pH injusterades på 7,5 och 9,5 med fast natriumbikarbonat respektive lN>Na0H. Bensenfasen avskildes, torkades över natriumsulfat och indunstades, varigenom man erhöll den önskade produkten i form av ett vitt skum.

Exempel ål: Det i exempel 50 beskrivna förfarandet upprepades ut- gående fràn lämplig oxim för framställning av följande föreningar: 2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomwcin-0- acetyloxim, ll-propionyl-2'-acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"=deoxi- 4"-oxo-oleandomycin-O-acetyloxim, ll-propionyl-8,8a-deoxí-8,8a-dihydro- 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-0-acetyloxim, 2'-propionyl-8,8a-deoxi- 8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-0-acetyloxim och ll-acetyl- 8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycin-O-acetyloxim.

Exempel 52: ll-Propionyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomzcin-oxim. En lösning av 500 ml ll-propionyl-2'-acetyl-8,8a- deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin~oxim i 100 ml meta- nol omrördes hela natten vid rumstemperaturen. lösningen indunstades till torrhet och den i form av ett skum erhållna índunstningsâtersto- den renades genom omkristallisatíon i etylacetat-hexan.

Det ovan beskrivna förfarandet upprepades för framställning av 8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-oxím ur 2'-acetyl- 8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin-oxim.

Exempel 35: ll,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomgcin-0-metyloxim. En lösning av 90 mg_ll,2'-diacetyl-8,8a- deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin och 45 mg metoxiamin- hydroklorid i 2 ml vatten och 2 ml metanol omrördes vid rumstempera- turen hela natten. lösningen häl1desi.vatten och pH injusterades på 7,5 och 9,5 med fast natriumbikarbonat respektive lN-Na0H. Produkten extraherades med etylacetat, den organiska fasen torkades och indunsta- des och man erhöll 89,2 mg av den önskade produkten.

NN (6, CDCl5)= 5.56 (3H)S. 5,53 (1»5H)S. 3.26 (1~5H)S. 2,25 (5H)S» 2,06 (6H)s och 0,56 (4H)m.

Exempel 54: ll,2'-Diacetyl~8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxí-4"-oxo- oleandomlcin-oxim. Det i exempel 35 beskrivna förfarandet upprepades med användning av 10,0 g 11,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"- deoxi-4"-oxo-oleandomycin, 5,4 g hydroxylaminhydroklorid, 50 ml meta- nol och 50 ml vatten, varigenom man efter upparbetning erhöll 9,2 g 51 457 oss av den önskade produkten, som kan renas ytterligare genom omkristallísa- tion i etylacetat. Smältpunkt 177-l80°C.

NNE (6, CDC15)= 5.55 (1.5H)S, 5.25 (l,5H)S, 2,55 (6H)S, 2,06 (5H)s och 0,53 (4H)m.

Exemgel 'ââz Det i exempel 55 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från den erforderliga hydroxylamín-hydrokloriden och lämp- ligt 8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin för syn- tetísering av följande föreningar: f* 457 085 R x S? S? - cH5c~ _ cnšcnzc-¶ n>on S? S? cflšcnzc- csâc- N-on S? S? cH¿cH2c~ cušcnac- N-on S? H- cnšc- N-on S? H- cnšcfiâc- N-on S? cnšc- _ H- S N-ou S? S? cnšcnac- cnšc- n>ocH5 S? S? cušcnzc- cnšcnâc- N>ocH5 S? H- cašc- N=ocH5 S? ca c- H- N-ocn 55 55 457 085 Exempel 562 ll,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo- oleandomycin-0-acetyloxim: Till en suspension av 1,0 g ll,2'-diacetyl- 8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4”-oxo-oleandomycin-oxim i 10 ml bensen sattes 0,18 ml pyridin och därefter 0,24 ml ättiksyraanhydrid.

Efter 2 timmars omrörning vid rumstemperaturen tillsattes ytterligare 0,09 ml pyridin och 0,12 ml ättiksyraanhydrid och omrörningen fort- sattes hela natten. Reaktionsblandningen hälldes i vatten och pH in- justerades på 7,5 och därefter på 9,5 genom tillsats av fast natrium- bikarbonat respektive lN-Na0H. Bensenfasen avskildes, torkades över natriumsulfat och indunstades i vakuum till torrhet, varigenom man erhöll 890 mg av den önskade produkten.

NHR (31 CDC15): 3131 (l15H)Ss 5125 (125H)sa 2925 (6H)S9 2i16 (šfnsø 2,01 (sms och 0,55 (alnm. ' På samma sätt omvandlades oximerna enligt exempel 55 till sina 0-acetylderívat.

Exempel 57: ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin. Till en sus- pension av 10 g 10% palladium på träkol i 100 ml metanol sattes 21,2 g ammoniumacetat och den så erhållna uppslamningen behandlades med en lösning av 20 g ll-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin i 100 ml av samma lösningsmedel. Suspensionen skakades vid rumstemperaturen i väteatmosfär med ett begynnelsetryck av 545 kPa. Efter 1,5 timmar av- filtrerades katalysatorn och filtratet sattes under omrörning till en blandning av 1200 ml vatten och 500 ml kloroform. pH injusterades från 6,4 till 4,5 och den organiska fasen avskildes. Efter en ytter- ligare extraktion med 500 ml kloroform behandlades den vattenhaltiga fasen med 500 ml etylacetat, varpå pH injusterades på 9,5 med lN-Na0H.

Etylaoetatfasen avskildes och den vattenhaltiga fasen extraherades på nytt med etylacetat. Etylacetatextrakten kombinerades, torkades över natriumsulfat och indunstades till ett gult skum (l8,6 g). Ur detta erhölls genom omkristallisation i diisopropyleter 6,85 g av den renade produkten med en smältpunkt av 157-l60°C. mm (J, onclšy 3,41 (5H)S, 2,70 (2H)m, 2,56 (6H)s och 2,10 (5195.

Den andra epimeren, som förekom i det råa skummet i en mängd motsvarande 20-25%, erhölls genom småningom skeende koncentration och filtrering av moderluten.

Exempel 581 Det i exempel 57 beskrivna förfarandet upprepades ut- gående från lämpligt 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin för framställning av följande aminer= 50 457 085 f f; mm (5, cnclâ) O O _ CH3C- CH5C- 5,45 (5H)S, 2,70 (2H)m, 2,50 (6H)S ' och 2,10 (6H)s. .

H- H- 5,50 (1H)m, 5,56 (3H)S, 2,55 (2H)m Och 2,50 (6H)S.

O H- CH3C- 5,80 ElH)m, 5,45 (5H)S, 2,80 (2H)m, 2,50 6H)s och 2,10 (5H)s.

Exempel 59: Det i exempel 57 beskrivna förfarandet upprepades på nytt med användning av isopropanol som lösningsmedel och erforder- ligt 4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycin för erhållande av följande pro- dukter: 2'-propionyl~4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin, ll-acety1-2'- propionyl-4"-deoxi-4"-amíno-oleandomycin, l1-propionyl-2'-acetyl- 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin och 11,2'-dipropíonyl-4“-deoxi-4"- oxo-oleandomycin.

Exempel 40: ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin. Till en till -lO°C kyld och under omrörning hållen suspension av 50 g ll-acetyl- 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin och 55 g ammoniumacetat i 500 ml meta- nol sattes droppvis under loppet av en timme en lösning av 5,7 g av en 85%-ig natriumborcyanohydrid i 200 ml metanol. Efter omrörning i _ 2 timmar i kyla hälldes reaktionsblandningen i 2,5 liter vatten ooh 1 liter kloroform. pH injusterades från 7,2 till 9,5 Senom tillsats av lN-Na0H och den organiska fasen avskildes. Den vattenhaltiga fa- sen tvättades en gång med kloroform och de organiska faserna kombi- nerades. Kloroformlösningen av produkten behandlades med 1,5 liter vatten vid pH 2,5 och vattenfasen avskildes. Vattenfasens pH injuste- rades från 2,5 till 7,5 och därefter till 8,25 och underkastades extraktion med etylacetat. De så erhållna extrakten kasserades och slutligt pH höjdes till 9,9. Vattenfasen extraberades med etylacetat- (2x825 ml) och extrakten kombinerades och torkades över natriumsulfat. 55 55 457 085 Iösningsmedlet avlägsnades under reducerat tryck och man erhöll 23,9 g av produkten i form av ett skumi mm (5, cnc15)= 3,41 (5205, 2,70 (2H)m, 2,56 (sms och 2,10 (3108.

Exempel 41: 4"-Deoxi-4"-amino-oleandomycin. En lösning av 20 g 2'- acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomcin i 125 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen hela natten och behandlades därefter med 21,2 g ammoniumacetat. Den så erhållna lösningen kyldes i ett isbad och behandlades med 1,26 5 natriumcyanoborhydrid. Kylbadet avlägsnades därefter och reaktionsblandningen omrördes vid rumstemperaturen i 2 timmar. Reaktionsblandningen hälldes i 600 ml vatten och 600 ml dietyleter och pH injusterades från 8,5 till 7,5. Eterfasen avskil- des och den vattenhaltiga fasen extraherades med etylacetat. Extrak- ten ställdes undan och den vattenhaltiga fasens pH injusteradés på 8,25. Dietyleterl och etylacetatextrakten framställda vid detta pH ställdes också undan och pH höjdes till 9,9. Díetyleter- och etyl- acetatextrakten vid detta pH kombinerades, tvättades först en gång med vatten och därefter med en mättad koksaltlösning och torkades över natriumsulfat. Extrakten, som framställdes vid pH 9,9, koncen- trerades till ett skum och kromatograferades på 160 g kiseldioxidgel _ med användning av kloroform som lösningsmedel och begynnelseeluerings- medel. Efter elva fraktioner om vardera 12 ml ändrades eluerings- medlet till 5% metanol - 95% kloroform. Vid fraktíonen 370 ändrades elueringsmedlet till 10% metanol - 90% kloroform och vid fraktionen 440 användes 15% metanol - 85% kloroform. Fraktionerna 85-260 kombi- nerades och indunstades i vakuum till torrhet och man erhöll 2,44 g av den önskade produkten.

NNE (S, CDCl5): 5,56 (lH)m, 5,56 (5H)s, 2,9 (2H)m och 2,26 (6H)s.

Exempel 42: Det i exempel 40 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från isopropanol som lösningsmedel och lämpligt 4"-deoxi- 4"-oxo~oleandomycin för erhållande av följande föreningar:'ll,21 díacetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin, 2'-propionyl-4"-deoxi-4"- amino-oleandomycin, 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin, ll- acetyl-2'-propionyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomcin, ll-propionyl~ 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin och ll,2'-dipropiony1-4“- deoxi-4"-amino-oleandomycin.

Exempel 45: 4"-Deoxi~4"-amino-oleandomycin. En lösning av 500 g 2'- acetyl-4"-deoxi-4“~amino-oleandomcin i 25 ml metanol omrördes under kväveatmosfär hela natten vid rumstemperaturen. Reaktionsblandníngen koncentrerades i vakuum och man erhöll 286 mg av den önskade produk- ten i form av ett vitt skum.

NHR (8, CDCl5): 5,56 (lH)m, 5,56 (5H)s, 2,90 (2H)m och 2,26 (6H)s. 56 4 5 7 Û 8 5 Exemgel 44: Det i exempel 45 beskrivna förfarandet upprepades men utgående från det erforderliga 2'-alkanoyl-U-deozcí-llfißamino-oleando- mycinet för erhållande av följande föreningar: I 2 _ Produkt É i o i ö- H- “H5 o o o ë- ca cH 5- 0H ö- H- °H5 5 2 5 o o o ll II N cnšcazc- 02150- 0550520- H- o o o II H 'I 03501120- cflšcazc- 011501120- H- 0 É Il z H- cnšcnzo- H- H- Exempel 45: ll-Acetyl-Bßa-deoxí-Bßa-dihjïdro-l-lfl-deoxí-IP'-amino- oleandogícin. En lösning av 2,15 g ll-acetyl-Bßa-deoxi-Blßa-dihydro- M-deozci-Llfl-oxo-oleandomycin och 2,51 g ammoniumacetat i 15 ml meta- nol kyldes till 20°C och* behandlades med 156 mg natriumcyanoborhydrid.

Efter omrörning i #5 minuter vid rumstemperaturen hälldes reaktions- blandningen i 60 ml vatten och 60 ml dietyleter och pH injusterades från 8,1 till 7,5- Eterfasen avskildes och kasserades och den vatten- haltíga fasens pH höjdes till 8,0. Ny eter tillsattes, skakades med den vattenhaltiga fasen och kasserades; pH injusterades på 8,5 och 55 57 457 085 förfarandet upprepadea. Slutligen injusterades pH på 10,0 och 60 ml etylacetat tillsattes. Den vattenhaltiga fasen kasserades och etyl- acetatfasen behandlades med 60 ml nytt vatten. Vattenfasens pH in- justerades på 6,0 med lN-H01 och etylacetatfasen kasserades. Den vattenhaltíga fasen extraherades successivt vid pH 6,5; 7,0; 7,5; 8,0 och 8,5 med 60 ml etylacetat och de organiska extrakten ställdes undan. pH höjdes slutligen till 10,0 och den vattenhaltiga fasen ext- raherades .med etylacetat. Extrakten vid pH 8,0; 8,5 och 10,0 kombi- nerades och indunstades i vakuum, varigenom man erhöll 585 mg av ett vitt skum, som bestod av ett par av 4"-epimerer.

NM (6, CDCl5): 3,38 och 3,35 (3H) 2 singletter, 2,31 och 2,28 (6H) 2 singletter och 2,03 (3H).

Exempel 461 8,8a-Deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin_ Natriumcyanoborhšdrid (126 mg) sattes till en lösning av 1,86 g 8,8a- deoxi-8,8a-dihydro-4"-deoxi~4"-oxo-oleandomcin och 2,1 g ammoníum- acetat i 10 ml metanol vid rumstemperaturen. Efter en timme kyldes reaktionsblandningen till 0°C och omrördes i 2,5 timmar. Reaktions- blandningen hälldes i 60 ml vatten och 60 ml dietyleter och pH in- justerades på 7,5. Eterfasen kasserades och den vattenhaltiga fasen injusterades successivt på pH 8,0 och 8,5 och extraherades med eter efter varje injustering. Den vattenhaltiga fasen injusterades s1ut~ ligen på pH 10,0 och extraherades med etylacetat. Nytt vatten sattes till etylacetatextraktet och pH injusterades på 6,0. Etylacetatfasen kasserades och den vattenhaltiga fasen injusterades successivt på pH 6,5; 7,0; 8,0; 8,5 och 10,0, varvid den vattenhaltiga fasen efter varje pH-injustering extraherades med etylacetat. Etylacetatextrakten vid pH 7,5; 8,0 och 10,0 kombinerades och koncentrerades till ett skum, som rekonstituerades i etylacetat och extraherades med nytt vatten vid pH 5,5. Iáksom tidigare injusterades den sura, vattenhal- tiga fasen på pH 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; 8,0 och 10,0 och extraherades med dietyleter efter varje injustering. Eterextrakten vid pH 7,5; 8,0 och 10,0 kombinerades och koncentrerades till torrhet i vakuum, varigenom man erhöll 166 mg av den önskade produkten.

NNE (8, CDGl5)= 5,48 (1H)m, 3,40 (3H)s och 2,30 (6H)s.

Exemgel 42: Det i exempel 45 beskrivna förfarandet upprepades ut- gående från ísopropanol som lösningsmedel och erforderligt 8,8a-deoxi- 8,8a-dihydro-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin för erhållande av följande föreningar: 487 085 FU W _. .Ä - . o U H- ca3c- o o II ll cH3c- ca3c- o o Il If c 2 E T U? O m Q f) 2 I Di I Exempel 48: ll-Acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-amino- oleandomzcin. Till 30 ml av en metanollösning av 5,0 g l1-acetyl- 8,8a-deoxí-8,8a-metylen-4"-deoxí-4"-oxo-oleandomycin och 5,2 g ammoniumacetat, som kylts till 20°C, sattes 500 mg natriumcyano- borhydrid. Reaktíonsblandningen omrördes vid rumstemperaturen i en timme och hälldes därefter i 120 ml vatten och 120 ml dietyl- eter. Vattenfasen injusterades successivt på pH 7,5; 8,0; 8,5 och ,0 och extraherades efter varje pH-injustering med etylacetat.

Det slutliga organiska extraktet framställt vid pH 10,0 behandla- des med vatten och pH injusterades på 6. Vattenfasen behandlades återigen på ovan angivet sätt och pH injusterades på 7,0; 7,5; 8,0; 8,5 och 10,0 och extraherades med etylacetat efter varje pH-ändring.

Etylacetatextrakten efter pH-ändringarna vid 8,0; 8,5 och 10,0 kombinerades och koncentrerades i vakuum, varigenom man erhöll 1,5 g av den önskade produkten.

NHR (3, CDCl5): 5,58 (3H)s, 2,50 (6H)s, 2,05 (5H)s och 0,65 (4H)m. .. ... ..._..... ......_.._.-..._.._. ' 59 457 085 Exempel 42: Det i exempel 48 beskrivna förfarandet upprepades ut- gående från isopropanol som lösningsmedel och lämpligt 8,8a-deoxi- 8,8a-metylen-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin för syntetisering av föl- jande föreningar: R fa 0 0 _ C- CH3C CH3 0 0 n II CH3C- CH3CH2C- 0 0 || Il CH3CH2C- CH3Cf 0 0 n II CH3CH2C- CH3CH2C- 0 II E' Cflscf 0 II _ C- H macflz Exempel 50: ll,2'-Diacetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomïcin. Med iso- propanol tvättat Raney-nickel (lg) suspenderat i 25 ml isopropanol innehållande 250 mg ll,2'-díacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycín-O acetyloxim skakades i väteatmosfär med ett begynnelsetryck av 545 kïa vid rumstemperaturen hela natten. Reaktionsblandníngen filtrerades och fíltratet indunstades under reducerat tryck, varígenóm man erhöll 201 mg av den önskade produkten. 457 085 14-0 Hela mängden produkt (201 mg) i metanol (10 ml) kokades under återflöde i en timme, varigenom man erhöll ll-acetyl-4"-deoxi.-4"- amino-oleandomycín, som visade sig vara identiskt med det, som er- hölls i exempel 57.

Exemgel ål: Det i exempel 50 beskrivna förfarandet upprepades ut- gående från det angivna 4"-deoací-IW-oxo-oleandomycinderívatet och den angivna katalysatorn, varigenom följande lU-deoxi-IW-amino- ole andomycinder erhölls: Derivat ___-m oxim oxim- oxim- oxim. oxim- O-acecyloxím- O-ace cyloximve; O-acetyloxim O-metyloxim- O-metyloxim O-metyloxim Katalysator Ni Pd/C Ni Pa/c Pko Pd/ C Pd/C 41 457 085 Exemgel 22: Ned tillämpning av det i exempel 50 beskrivna förfarandet framställdes 8,Ba-deoxí-öpßa-díhydro-lfl'-deoxí-LL"-amino-oleandomyciner, som svarade mot redulctíonsprodukterna av följande Ll-'H-oxo-derívat med användning av angiven katalysator: 3 C33 _ I X R El X Katalysator O II H- CH3C- N-OH På/C 0 0 II II CHBCHZC- CH3C- N-OH Ni 0 II CH3C~ H- N-OH N1 O II CE3CH2C- H- N-OH PÉ02 0 Il E- CH3CH2C- N-OH Ni O 0 II ll CH3CH2C- CH3C- ' N-OCH3 PtO2 O II H- CHBC- N-OCH3 Pd/C 0 II _ CH3C- - H- N-OCH3 Pd/C 0 II CH3CH2C- H- N-OCH3 Pt02 0 O 0 II II II CB3C- _ CH3C- N-0-CCH3- PtO2 (Fort sättn- ) 42 457 085 (Fortsättm) R RI X Katalysator _ 0 0 0 çu3cazlc- cfl3c- N-0-ccx3- ni 0 O , n Cg3ca2§_ H- x-o-ccu3- Pd/C 0 s: C530- H- N-o-ccH3- Ni Exemgel ä: Det i exempel 50 beskrivna förfarandet upprepadeš på nytt, varvid man utgick från nedan angivet 8,8a-deoxí.-8,8a-metylen- 4"-deoxí-IL"-oxo-oleandomycinderívat och katalysator för framställ- ning av följande föreningar: - N(CH ) Z 3 2 = Ra, _ 9 CH 3 R Ofin/ fl"o O CH3 C33 CH 3 Ino/I” 0 CH 3 CH 3 0 CH _ H 3 “PÜQ O OCHB R R Utgångs- __ .i derivat ' Katalysator O O ll II CH3C~ CHBC- oxim Ni O 0 ll II CHBC- CH3CH2C- oxim. Pt02 o ; 0 ll ' II CHàCH2C- CH3CH2C- exim- PtO2 0 .

II _ a- ca3c- oxim Pd/c O II ' C330- H- oxin Pnoz (Forrsätfn.) 43 (fortsättn.) É ïl. 9 f? CH5CH2C- CHBC- f? CH5C- H- ? f? CH5C- . CH3C- f? CHBC- H- ? f? CH5C- CH5C- 457 085 Utgångs- derivat O-metyloxím 0-metyloxim O-acetyloxim O-acetyloxim 0-acetyloxim Katalysator Pd/C Ni Ni ' Ni Pd/C Exempel 54: 4"-Deoxi-4"-etylamíno-oleandomycin. Till 25 ml metanol innehållande 4,59 g 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin, 6,6 ml av en 5Hf lösning av etylamin i etanol och 1,89 ml ättíksyra sattes 565 mg natríumcyanoborhydrid i portioner om 50-60 mg. Efter omrörning vid rumstemperaturen í en timme hälldes reaktionsblandningen i ll0 ml vatten och 120 ml etylacetat. vacuenfasen injuscerades successivt på pH 7,5; 8,0; 8,5 och 10,0 och extraherades med etylacetat efter varje pH-ínjustering. Det sis- ta organiska extraktet, som erhölls vid pH 10,0, behandlades med vatten och pH injusterades på 6. Vattenfasen behandlades åter igen på ovan angivet sätt och pH ínjusterades på 7,0; 7,5; 8,0; 8,5 och ,0 och extraherades med etylacetat efter varje pH-ínjusteríng.

Etylacetatextrakten efter varje pH-förändring vid 8,0; 8,5 och 10,0 kombinerades och índunstades i vakuum till ett skum. Produkten re- nades ytterligare genom kromatografering på 75 3 kiseldioxidgel med användning av aceton som elueríngsmedel. Fraktionerna 62-104 (varje fraktion bestod av 4 ml)3kombínerades och índunstades under reduce- rat tryck och man erhöll 910 mg av den önskade produkten.

NMR (J§C0Cl3): 3,46(3H)s, 2,36(6H)s och 5,7(lH)q. NMR (¿,C0Cl3): 457 G85 44 Exempel 55: ll-Acetïl-4"-deoxi-4"-etylamino-oleandomqcin. På sätt som angives i exempel 54 sattes 366 mg natriumcyanoborhydrid por- tíonsvis till en lösning av 5,82 g 11-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-olean- domcin och 16 ml av en SM-lösning av etylamin i etanol i 27,4 ml av en 2,92 M-lösning av HCI i etanol. Efter omrörning vid rumstempe- raturen i 1,5 timmar hälldes reaktionsblandningen i 120 ml vatten och 120 ml etylacetat och upparbetades på sätt som angíves i exem- pel 54, varigenom man erhöll 1,2 g av den önskade produkten.

NMR (J, C0Cl3): 3,35(3H)s, 2,36(6H)s och 2,08(3H)s.

Exempel 56: ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-n-hexylamino-oleandomgcin. Det i exempel 54 beskrivna förfarandet upprepades utgående från 4,8 g 11- acetyl-4"-deoxi-§"-oxo-oleandomycin, 6,7 g n-hexylamin, 5,78 ml ättiksyra, 502 mg natriumcyanoborhydrid och 25 ml metanol och man erhöll efter kromatograferíng på 80 g kiseldioxidgel med användning av kloroform som elueringsmedel 1,5 g av den önskade produkten.

NMR (Ä]COCl3): 3,40(3H)S, 2,36(6H)S Och 2,08(3H)S. §§§9pgl_22= Man förfor på sätt som angives i exempel 54 utgående från lämplig 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin, isopropanol som lösnings- medel och amin för framställning av följande föreningar: få il. å: o II cH3c- h~ cn3- 0 ll cH3c- H- ¿-c3H7- o II cH3c~ H- 1-c3H7- o II caac- H- Efcsnll- o o g n n cu3c> cszc- czßš- o o II Il csaç- ca3c- ¿-c3s7- o. 0 u n _ ca3c- ca3c_ ¿¿c4H9- o o II II cH3c- caßcezç- cua- o o n II cajc- ca3ca2c- g-c6al3- (Exempel 57, fortsätta.) CHBCHZC- O CHSCHZC- O CH3CH2C- 0 H CH3CH2C~ 0 II CHBCHZC- 0 CH3CH2C- 0 CH3CH2C~ 0 il CH3CH2C- 0 II CH3CH2C- 0 n CHSCHZC- 45 f; 0 CH3CH2C- 457 085 LJ i“°s“11' n-C3H7- 2f°4~9 fifcefilz" CH - Éfcaflv' BTCSH11' ÉTCSH11' c H-- J 5ÉC6H13' ÉTCAHQ' gg _ C H - 54439" Éfcšnll' 57C6H13' ' 46 457 085 Exempel 58: ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-dimetylamino-oleandomycin. Två gram ll-acetyl-4"-deoxi-4"-aminb-oleandomycin, 1 5 10 % palladium på trä- kol och 2,06 ml formalinlösning kombinerades i 40 ml metanol och skakades i väteatmosfär vid ett begynnelsetryck av 545 kPa hela nat- ten. Den förbrukade katalysatorn avfiltrerades och fíltratet indunsta- des till torrhet under reducerat tryck. Indunstníngsåterstoden (l,97 g) kromatograferades på 40 5 kiseldioxídgel med användning av kloroform som första elueringsmedel. Efter fraktion nummer 25 (varje fraktion bestod av 650 droppar) satsades eluatet i 5% metanol i kloroform.

Fraktionerna 36-150 kombinerades och indunstades i vakuum och man erhöll 704 mg av den önskade produkten i form av ett vitt skum. mm (s, cDc13)= 5,55 (5195, 2,65 (zum, 2,50 (12H)s och 2,10 (5H)s. §§§gQgl_§2= Det i exempel 58 beskrivna förfarandet upprepades med den ändringen, att man som lösningsmedel använde isopropanol och er- forderligt 4"-deoxi-4"-amino~oleandomycin för syntetísering av föl- jande föreningar: i il. 0 0 .y n Cï-IBC- C536- 0 O u 'l cx-13c- ca3ca2c- 0 u Ei- CHBC- 0 0 u I' CH3CH2C- CH3C- O _ 3- CH3CB2C 0 0 u n CH3CH2C- Cd3CH2C- 55 40 47 457 085 Exempel 60: ll-Acetyl-4"-deoxi~4"-amino-oleandomycin-dihydroklorid.

Till 7,28 g ll-acetyl-4"-dèoxi-4"-amino-oleandomycin i 50 ml torrt etylacetat sattes 20 ml av en l-normal lösning av H01 i etylacetat och den så erhållna lösningen indunstades till torrhet under redu- cerat tryck. Indunstningsàterstoden triturerades med eter och filt- rerades och man erhöll det önskade saltet.

På liknande sätt omvandlades aminföreningarna enligt förevarande uppfinning till sina disyraadditionssalter.

Exempel 61: ll,2'-Diacetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin-hydrokloríd.

Det i exempel 60 beskrivna förfarandet upprepades med den ändringen, att 10 ml av en l-normal lösning av HCl i etylacetat tillsattes. Iös- ningen indunstades till torrhet i vakuum och det som en indunstnings- återstod erhållna_mono-hydrokloridsaltet triturerades med eter_och filtrerades. ' På liknande sätt omvandlades aminföreningarna enligt förevarande uppfinning till sina mono-syraadditionssalter.

Exempel 62= ll-Acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandom1cin-aspartat.

Till 960 mg ll-acetyl-4"-deoxi-4"-amino~oleandomycin i 6 ml aceton med en temperatur av 40°C sattes 18 ml vatten och därefter 175 mg asparaginsyra. Blandningen upphettades under återflödeskokning, till dess att det bildades en grumlig lösning. Blandningen filtrerades i hett tillstånd och det klara filtratet indunstades i och för avlägs- nande av acetonen. Den återstående lösningen frystorkades därefter, varigenom man erhöll produkten i form av en återstod.

Preparation A. 2'-Acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-oleandomycin. la. 2'-Acetyl-8,8a-deoxi-oleandomwcin.

En 250 ml rundkolv med 3 halsar beskickades med zinkpulver (10 g) och kvicksilver(II)k1oríd (1 g). Sedan de fasta materialen väl sam- manblandats tillsattes lN-H01 (25 ml) och blandningen omrördes kraf- tigt í 15 minuter. Det övre, vattenhaltiga skiktet avlägsnades och ny lN-HCI ( 25 ml) tillsattes, varpå kolvinnehållet sattes under kol- dioxídatmosfär. En filtrerad lösning av krom(III)klorid (50 g i 65 ml lN-H01) sattes snabbt till zinkamalgamet. Blandningen omrördes i koldioxidatmosfär i en timme, varunder det utbildades en ljusblå färg, som visade närvaron av krom(II)k1orid. Omrörningen avbröts efter en timme och zinkamalgamet fick avsätta sig på kolvens botten.

En lösning av 2'-acetyl-oleandomycin (29,2 g) i aceton (200 ml) och vatten (100 ml) satsades i en dropptratt monterad på en 600 ml rundkolv med 3 halsar och försedd med en mekanisk omrörare med driv- anordning ovanför kolven. I kolven satsades under koldioxidatmosfär och under omrörning en lösning av 2'-acetyl-oleandomycin och den på 40 48 457 085 ovan angivet sätt framställda krom(II)kloridlösningen. lösningarna tillsattes samtidigt och med sådana hastigheter, att tillsatsen av båda slutfördes samtidigt. Detta tog ca 12 minuter. Efter 35 minu- ters omrörning vid rumstemperaturen tillsattes 100 ml vatten och 100 ml etylacetat till reaktionsblandningen och omrörningen fort- sattes i 15 minuter. Etylacetatfasen avskildes och tvättades med 80 ml vatten. Etylacetatet avskildes och de vattenhaltiga extrakten kombinerades och tvättades med 100 ml nytt etylacetat. Etylacetat- fasen avskildes och tvättades med 100 ml vatten.

Den organiska fasen avskildes och tvättvattnen kombinerades och behandlades med 75 g natriumklorid. Den ytterligare mängd etyl- acetat, som avskilde sig avtappades med hjälp av en sifon och kombi- nerades med de andra etylacetatextrakten. Vatten sattes till de kom- binerade etylacetatextrakten och det hela injusterades på pH 8,5 med natriumbikarbonat. Den organiska fasen avskildes, tvättades med vatten, med mättad natriumkloridlösning, torkades över vattenfritt natriumsulfat och filtrerades, varpå lösningsmedlen indunstades un- der reducerat tryck och man erhöll den önskade föreningen i form av en vit, fast substans, som kristalliserade i etylacetat/heptan. Ut- byte 8,4 g, smältpunkfi 183,5-1s5°c.

Analys- %C %H %N Beräknat för c57H65o15N 62,2 9,0 2,0 Funnet 62,0 8,9 _ 2,0 Nmm (S, cnc15)= 5,65 (1H)s, 5,58 (1H)s, 3,43 (5H)s, 2,56 (sH)s een 2,08 (5H)s. lb. 2'-Acetyl-8,8a-deoxi-8,8a-dihydro-oleandomycin.

Aluminiumfolie (4,0 g) skuren i 6 mm bitar och övertäckt med 290 ml av en vattenlösning av kvicksilver(II)klorid omrördes i 30-45 sekunder. lösningen avdekanterades och det amalgamerade aluminiumet tvättades först två gånger med vatten, därefter en gång med isopro- panol och till sist en gång med tetrahydrofuran. Bitarna överskikta- des med 45 ml tetrahydrofuran, 45 ml isopropanol och 10 ml vatten och kyldes därefter till 0°C i ett isbad. En lösning av 2,0 g 8,8a- deoxi-2'-acetyl-oleandomcin i tetrahydrofuran, isopropanol och vat- ten sattes droppvís till det amalgamerade aluminiumet med.sådan has- tighet, att temperaturen hölls.vid 0°C. När tillsatsen slutförts av- lägsnades badet och reaktionsblandningen omrördes vid rumstempera- turen hela natten. De fasta beståndsdelarna avfiltrerades och filt- ratet indunstades i vakuum till torrhet. Återstoden behandlades med etylacetat-vatten och pH injusterades på 9,0 med en mättad natrium- 49 457 085 karbonatlösning. Den organiska fasen avskildes, tvättades med vatten, med en mättad koksaltlösning och torkades över natríumsulfat. Iös- ningsmedlet avlägsnades och man erhöll 2,27 g av den önskade produk- ten. - Preparation B. 2a. ll,2'-Diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a-metylen-oleandomycin.

I en flamtorkad 200 ml kolv med 5 halsar försedd med en dropp- tratt, en magnetomrörare och ett övertryckskväveinlopp satsades 16,4 g trímetylsulfoxoniumjodid och 5,4 g av en 50%-ig oljedispersion av natriumhydrid. De fasta beståndsdelarna sammanblandades väl och 45,2 ml dimetylsulfoxid tillsattes via dropptratten. Efter en time sedan väteutvecklingen avklingat kyldes suspensionen till 5-lO°C och en lösning av 22,6 g ll,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-oleandomycin i 52 ml tet- rahydrofuran och l6 ml dimetylsulfoxid tillsattes under loppet av minuter. Suspensionen omrördes vid rumstemperaturen i 90 minuter, hälldes i 500 ml vatten och extraherades med etylacetat (2x5OO ml).

De organiska extrakten tvättades med vatten, med mättad natriumklorid- lösning, torkades över vattenfrítt natriumsulfat, filtrerades och indunstades till torrhet under reducerat tryck. Återstoden kristalli- serades i eter och man erhöll 8,9 g ll,2'-diacetyl-8,8a-deoxi-8,8a- metylen-oleandomvcin.

Claims (14)

457 085 ío PATENTKRAV '

1. l. Mellanprodukter för framställning av 4"-desoxi-4' '- -amino-oleandomycinderivat för användning sem antibio- tika, kännetecknade däramattdehar formeln - i vilka formler var och en av R och Rl representerar väte 457 085 eller alkanoyl med 2-3 kolatomer och X är O, N-OH, N-OCH3 eller N-OCOCH3.

2. Förening enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d av att X representerar 0.

3. Förening enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d av att var och en av R och R1 i formeln I representerar acet¿ yl. _

4. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att R och RI i formeln I representerar acetyl respektive väte.

5. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att var och en av R och R1 i formeln I representerar väte.

6. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att R och R i formeln I representerar väte respektive acetyl.

7. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att var och en av R och R1 i formeln II representerar acetyl.

8. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att R och R1 i formeln II representerar acetyl respektive väte.

9. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att var och en av R och R1 i formeln II representerar väte.

10. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att R och R1 i formeln II representerar väte respek- 457 085 97. tive acetyl.

11. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att var och en av R och Rl i formeln III representerar acetyl.

12. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att R och RI i formeln III representerar acetyl res- pektive väte.

13. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k-n a d av att var och en av R och Rl i formeln III representerar väte.

14. Förening enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a d av att R och R i formeln III representerar väte respektive acetyl.