SE437522B - (6r,7r)-7-/2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-(z-metoxiimino)-acetamido/-3-(substituerad tiometyl)-cefalosporinsyra samt legre alkanoylalkyl estar/etrar derav - Google Patents

Description

7904682-7 som lätt hydrolyserbara estrar, etrar och salter av denna förening och hydrat av föreningen med formeln I eller av dess esfrar, etrar och salferi Med lätt hydrolyserbar ester av föreningen med formeln I avses föreningar motsvarande formeln I, vars karboxigrupp föreligger i form av en lätt hydrolyserbar estergrupp. Exempel på sådana estrar, som kan vara vanligt förekommande, är de lägre alka- noyloxialkylestrarna, t.ex. acetoximetyl-, pivaloyloximetyl-, l-acetoxiety1- och l-pivaloyloxietylestrar; de lägre alkoxi- karbonyloxialkylestrarna, t.ex. metoxikarbonyloximetyl-, l-etoXikarbonyloxietyl- och l-isopropoxikarbonyloxietylestrar; laktonylestrar, t.ex. ftalidyl- och tioftalidylestrar; lägre alkoximetylostrar, t.ex. metoximetylestrar; och de lägre alka- noylaminometylestrarna, t.ex. acetamidometylestrar. Även andra estrar kan användas, t.ex. bensyl- och cyanmetylestrar.

Såsom lätt hydrolyserbara etrar av föreningen med formeln I avses föreningar motsvarande formeln I, vari X betecknar gruppen 2,5- díhydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin-5-yl, vars enoliska OH-grupp föreligger i form av en lätt hydrolyserbar etergrupp.

Såsom etergrupper ifrågakomma sådana grupper, som ovan nämnts för de lätt hydrolyserbara estergrupperna. Exempel på sådana etrar är även exempelvis de lägre alkanoyloxialkyletrarna, t.ex. acetoxímetyl-, pivaloyloximetyl-, l-acetoxietyl- och l-pívaloyloxietyletrar; de lägre alkoxikarbonyloxialkyl- etrarna, t.ex. metoxikarbonyloximetyl-, l-etoxíkarbony1oxí- etyl- och l-isopropoxíkarbonyloxietyletrar; laktonyletrar, t.ex. ftalidyl~ och tioftalidyletrar; de lägre alkoximetyl- etrarna, t.ex. metoximetyletrar; samt de lägre alkanoylamino- metyletrarna, t.ex. acetamidometyletrar.

Exempel på eelter ev föreningen med formeln 1 är alkali- metallsalter såsom natrium- och kaliumsalter; ammoniumsalter; jordalkalimetallsalter såsom kalciumsalter; salter med orga- niska baser såsom salter med aminer, t.ex. salter med N-etyl- piperidin, prokain, dibensylamín, N,N'-dibensyletyletylen- 7904682-7 \)~1 diamin, alkylaminer eller dialkylaminer såväl som salter med aminosyror, t.ex. salter med arginin eller lysin. Salterna kan vara monosalter eller disalter. Den andra saltbildningen kan uppkomma i föreningar med hydroxigruppen i 2,5-dihydro-6- hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin-3~yl-gruppen.

Föreningen med formeln I bildar likaledes additionssalter med organiska eller oorganiska syror. Exempel på sådana sal- ter är hydrohalogenider, exempelvis hydroklorider, hydrobro- mider, hydrojodider såväl som andra mineralsyrasalter såsom sulfat, nitrat, fosfat och liknande, alkyl- och monoaryl~ sulfonat såsom etansulfonat, toluensulfonat, bensensulfonat och liknande och även andra organiska syrasalter såsom acetat, tartrat, maleat, citrat, bensoat, salicylat, askorbat och liknande.

Föreningen med formeln I samt dess salter, lätt hydrolyserbara estrar och etrar kan vara hydratiserade. Hydratise- ringen kan ske i samband med framställningsförfarandet eller efter någon tid till följd av deras hygroskopiska egenskaper med användning av en till en början vattenfri produkt.

Produkterna enligt uppfinningen kan föreligga i den syn- isomera formen 7 \ Ü-CONH-g HN/Q N 2 s \\ OCH3 eller i den anti-isomera formen HzN/(Nflaofvra-šg cH3o 7904682-7 resp. såsom blandningar av dessa båda former. Syn-isomer- formen föredrages resp. blandningar, vari syn-isomerformen överväger.

Föredragna produkter är de följande: (6R,7R)-7-[2-(2-amino-H-tiazolyl)-2-(Z-metoxiimino)-acet- amido]-3-/[(2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazín- 5-yl)tio]-metyl/-8-oxo-5-tia-l-azabicyklo-[U.2.0]okt-2-en-2- karbonsyra och salter därav såväl som motsvarande hydrat.

De ovannämnda acylderivaten framställes enligt uppfinningen på så sätt, att man a) i en förening som har den allmänna formeln uuuI 1 uuuI CH3ON=:c-CoNH- r N » - II w OM f Ce-S-X RHN S - COOH vari X har ovan angiven betydelse, R betecknar en avspaltnings- bar skyddsgrupp och karboxigruppen kan föreligga i skyddad form, avspaltar skyddsgruppen R, eventuellt även en förefint- lig karboxiskyddsgrupp, eller att man b) för framställning av en lätt hydrolyserbar ester resp. eter av föreningen med formeln I underkastar en karbonsyra resp. en enol med formeln I en motsvarande förestring resp. för- etring, eller att man c) för framställning av salter eller hydrat av föreningen med formeln I resp. hydrat av dessa salter överför föreningen med formeln I till ett salt eller ett hydrat resp. ett hydrat av 7904682-7 detta salt.

Den i utgångsföreningen med formeln II förefintliga karboxi- gruppen kan valfritt skyddas, exempelvis genom förestring till en lätt spaltbar ester, t.ex. en silylester, t.ex. trimetyl- silylestern. De ovan belysta lätt hydrolyserbara estrarna kommer även i betraktande. Karboxigruppen kan även skyddas genom saltbildníng med en oorganisk eller tertiär organisk bas såsom trietylamin. Möjliga R-skyddsgrupper är exempelvis syrahydrolytiskt avspaltbara skyddsgrupper, t.ex. t-butoxi- karbonyl eller trítyl, eller även bashydrolytiskt avspaltbara skyddsgrupper, t.ex. trifluoroacetyl. Föredragna R-skydds- grupper är klor-, brom- och jodacetyl, särskilt kloracetyl.

De senare skyddsgrupperna kan avspaltas genom behandling med tiourea.

Utgångsföreningarna med formeln II kan exempelvis framställas genom N-acylering av motsvarande 7-aminoförening och närmare bestämt på så sätt att man omsätter en förening som har den allmänna formeln H Hw- ” 2' I III _ 0//--N / CHg-S-X COOH vari X har ovan angiven betydelse och karboxigruppen och/eller aminogruppen kan föreligga i skyddad form, med en syra som har .nnuI den allmänna formeln oH3oN==c-coon 7\ IV RHN 7904682-7 vari R har ovan angiven betydelse, eller omsätter med ett reaktionsbenäget funktionellt derivat av denna syra och even- tuell avspaltar en förefintlig karboxiskyddsgrupp.

Den i 7-aminoföreningen med formeln III förefintliga karboxi- gruppen kan valfritt skyddas och särskilt på ovan för fram- ställning av utgångsföreningen med formeln II angivet sätt.

Aminogruppen i föreningen med formeln III kan exempelvis skyddas med en silylskyddsgrupp såsom trimetylsilyl.

Såsom reaktionsbenägna funktionella derivat av syror med for- meln IV ifrågakomma exempelvis halogenider, d.v.s. klorider, bromider och fluorider; azider; anhydrider, särskilt blandade anhydrider med starka syror; reaktionsbenägna estrar, t.ex.

N-hydroxisuccinimidestrar, samt amider, t.ex. ímidazolid.

Omsättningen av 7-aminoföreningen med formeln III med syran med formeln IV eller ett reaktionsbenäget funktionellt derivat därav kan genomföras på i och för sig känt sätt. Sålunda kan man exempelvis kondensera en fri syra med formeln IV med en av de omnämnda estrarna motsvarande formeln III med en kar- boxidiimid såsom dicyklohexylkarbodiimid, i ett inert lösnings- medel såsom ättikester, acetonitril, dioxan, kloroform, metylenklorid, bensen eller dimetylformamid och därefter av- spalta estergruppen. I stället för karbodiimiderna kan man såsom kondensationsmedel även använda oxazoliumsalter, t.ex.

N-etyl-5-fenyl-isoxazolium-3'-sulfonat.

Enligt en annan utföringsform omsätter man ett salt av en syra med formeln III, t.ex. ett trialkylammoniumsalt såsom trietylammoniumsalt, med ett reaktionsbenäget funktionellt derivat av en syra med formeln IV såsom ovan nämnts i ett inert lösningsmedel, t.ex. ett av de ovannämnda.

Enligt en ytterligare utföringsform omsättes en syrahalogenid företrädesvis med kloriden av en syra med formeln IV, med æninen enligt formeln III. Omsättningen sker företrädesvis i 7904682-7 närvaro av ett syrabindande medel, t.ex. i närvaro av vatten- haltig alkali, företrädesvis natronlut, eller i närvaro av ett alkalimetallkarbonat såsom kaliumkarbonat, eller i närvaro av en lägre-alkylerad amin, t.ex. trietylamin. Såsom lösnings- medel användes företrädesvis vatten, eventuellt i blandning med ett inert organiskt lösningsmedel såsom tetrahydrofuran j eller dioxan. Man kan även arbeta i ett aprotiskt organiskt lösningsmedel såsom exempelvis dimetylformamid, dimetylsulf- oxid eller hexametylfosforsyratriamid. Med användning av sily- lerade utgångsföreningar med formeln III arbetar man i vatten- fritt medium.

Omsättningen av 7-aminoföreningen enligt formeln III med syran enligt formeln IV eller ett reaktionsbenäget funktionellt de- rivat därav kan lämpligen ske vid en temperatur mellan ungefär -4000 och rumstemperatur, exempelvis vid ungefär O - 1000.

Enligt förfarandevarianten a) enligt uppfinningen avspaltas aminoskyddsgruppen R i en utgångsförening med formeln II. Ge- nom sur hydrolys avspaltbara skyddsgrupper avlägsnas före- trädesvis med hjälp av en lägre alkankarbonsyra, som eventueüt kan vara halogenerad. Särskilt använder man myrsyra eller tri- fluorättiksyra. Temperaturen är i regel rumstemperatur även om man kan använda något höjda eller något sänkta temperaturer, t.ex. inom intervallet ungefär o°c till +14o°c. Aixaliskt av- spaltbara skyddsgrupper hydrolyseras i allmänhet med utspädd vattenlösning av lut vid OOC till 3000. Kloracetyl-, brom- acetyl- eller jodacetyl-skyddsgrupper kan avspaltas medelst tiourea i sur, neutral eller alkalisk miljö vid ungefär O - BOOC. Hydrogenolytisk avspaltning (t.ex. avspaltning av bensyl) är här olämplig, emedan oximfunktionen vid hydrogeno- lysen reduceras till en aminogrupp.

Efter genomförande av förfarandevarianten a) kan eventuellt en i reaktionsprodukten förefintlig karboxiskyddsgrupp av- lägsnas. När skyddsgruppen är en silylgrupp (silylester), kan denna grupp särskilt lätt avspaltas genom behandling av om- Iï§{}¶ QÜÄLITY 7904682-7 sättningsprodukten med vatten. Lägre alkanoyloxialkyl-, al- koxikarbonyloxialkyl-, laktonyl-, alkoximetyl- och alkanoyl- aminometylestrar avspaltas företrädesvis enzymatiskt med hjälp av ett lämpligt esteras (vid ungefär 20 - UOOC). När karboxylgruppen är skyddad genom saltbildning (t.ex. med tri- etylamin), så kan avspaltningen av denna saltbildande skydds4 grupp ske genom behandling med syra. Såsom syra kan man här- vid använda exempelvis saltsyra, svavelsyra, fosforsyra eller citronsyra.

Karboxiskyddsgruppen kan på samma sätt som ovan beskrivits avspaltas även före avspaltning av skyddsgruppen R.

För framställning av de lätt hydrolyserbara estrarna av karbonsyran med formeln I enligt variant b) omsättes kar- bonsyran företrädesvis med motsvarande halogenid innehållande estergruppen, företrädesvis med jodiden. Reaktionen kan på- skyndas med hjälp av en bas, t.ex. en alkalimetallhydroxid eller -karbonat eller en organisk amin såsom trietylamin. 2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin~3-yl-gruppen X med sin enoliska funktion företras under bildning av mot- svarande, lätt hydrolyserbara etrar. (De så erhållna, samtidigt förestrade resp. företrade produkterna benämnes ovan och nedan "lätt hydrolyserbara estrar/etrar'J Företrädesvis använder man därvid ett överskott av motsvarande halogenid. Förestrings-/ företrings-reaktionen genomföras företrädesvis i ett inert organiskt lösningsmedel såsom dimetylacetamid, hexametylfos- forsyratriamid, dimetylsulfoxid eller företrädesvis dimetyl- formamid. Temperaturen ligger företrädesvis inom intervallet ungefär O-40°C.

Framställning av salterna och hydraten av föreningen med formeln I resp. hydrat av dessa salter kan ske på i och för sig känt sätt, t.ex. genom omsättning av karbonsyran enligt formeln I med en ekvivalent mängd av den önskade basen, lämp- ligen i ett lösningsmedel, såsom vatten eller i ett organiskt lösningsmedel såsom etanol, metanol, aceton och andra. Vid användning av en andra ekvivalent av basen sker saltbildning även vid den tautomera enolformen (2,5-dihydro-6- ..-_ _. . .._....-.._.._-.~._. _. . ..~ .w-.u-qfimfiwq. 7904682-7 hydroxi-2-metyl-5-oxo~as-triazin-5-yl-grupp X), varvid ett disalt bildas. Temperaturen vid saltbildníngen är icke kritisk.

Den ligger i allmänhet vid rumstemperatur men kan även vara något däröver eller därunder, ungefär inom intervallet Oo till +5o°C.

Framställning av hydraten sker vanligen automatiskt i samband med framställningsförfarandet eller såsom följd av hydrosko- piska egenskaper hos en till en början vattenfri produkt. För avsedd framställning av ett hydrat kan en helt eller delvis vattenfri produkt (karbonsyra enligt formeln I resp. ester, etor eller salt därav), utsättas för inverkan av en fuktig atmosfär, t.ex. vid ungefär +lOoC till +&OoC.

De Ovan använda 'l-aminoföreningarna enligt formeln III kan framställas av en förening som har formeln HQN-¶ a/r-*NX / "nu I ~uII 9% CH_,___Y vi: COOH vari Y betecknar en bortgående grupp, genom reaktion med en tiol, som har den allmänna formeln HS-fiX VI vari X har den ovan angivna betydelsen.

Såsom bortgående grupp Y i en förening med formeln V ifråga- kommer exempelvis halogener, t.ex. klor, brom eller jod, acyl- oxigrupper, t.ex. lägre alkanoyloxigrupper såsom acetoxi, lägre alkyl- eller arylsulfonyloxigrupper, såsom mesyloxi eller tosyl~ oxi eller en azidogrupp. 7904682-7 10 Omsättningen av den förening, som har formeln V med en tiol, som har formeln VI kan ske på i och för sig känt sätt, t.ex. vid en temperatur mellan ungefär 40 och BOOC, lämpligen vid ungefär GOOC, i vatten eller i en buffertlösning med ett pH av ungefär 6-7, företrädesvis 6,5.

En erhållen syn/anti-blandning av föreningen, som har formeln I, kan uppdelas i motsvarande syn- och anti-former på vanligt förekommande sätt, exempelvis genom omkristallisation eller medelst kromatografiska metoder med användning av ett lämpligt lösningsmedel resp. en lösningsmedelsblandning.

Föreningarna med formlerna I och II såväl som de motsvarande lätt hydrolyserbara estrarna /etrarna och salterna resp, hydraten av dessa produkter är antibiotiskt verksamma, sär- skilt bakterisidalt verksamma. De uppvisar ett brett verk- ningsspektrum gentemot grampositiva och gramnegativa mikro- organismer, innefattande stafylokocker som bildar B-laktamas och olika B-laktamasbildande gramnegativa bakterier, såsom exempelvis Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Escherichia coli, Serratia marcescens, Proteus- och Kleb- siella-arter.

Föreningarna enligt formlerna I och II såväl som de mot- svarande lätt hydrolyserbara estrarna/etrarna och salterna resp. hydraten av dessa produkter kan användas för behandling och profylax av infektionssjukdomar. För vuxna ifrågakommer en dagsdos av ungefär 0,1 g till ungefär 2 g. Parenteral till- försel av föreningarna enligt uppfinningen är särskilt före- dragen.

För att påvisa den antimikrobiella verkan av de omnämnda pro- dukterna testades följande representativa föreningar: 79134682-“7 ll Produkt A: (6R,7R)-7~[2-(2-amino-H-tíazolyl)-2-(Z-metoxi- imino)acetamido]-3-/[2,5-díhydro-6-hydroxi-2- metyl-5-oxo-as-triazin-3-yl)tio]metyl/-8-oxo-5- tia-1-azabicyklolü.2.0]okt-2-en-2-karbonsyra Produkt B: (6R,YR)-7-/2-[2-(2-kloracetamido)-H-tiazolyl]- -2(Z-metoxiimino)acetamido/-5-/[2,5-dihydro-6- hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin-3-yl)tio]- metyl/-8-oxo-5-tia-1-azabicyklo[H.2.0]okt-2-en-2- karbonsyra Aktivitet in vitro: 7904682-7 12 minsta hämmande koncentration (Hg/ml) A B Haemophilus influenzae Stam 1 0,08 1,2 V Stam 2 0,005 0,3 Stam 3 0,005 0,16 Stam 4 0,005 0,16 stam 5 o,oo25 0,08 Stam 6 0,0025 0,16 Stam 7 0,0025 0,16 Klebsiella pneumoniae 1,2 10 Escherichia coli Stam 0,02 0,16 Stam 2 0,6 5 Proteus mirabilis Stam 1 50,01 0,08 stam 2 '~_o,o1 0,16 Proteus vulgaris 50,01 0,16 Proteus rettgeri 50,01 0,16 Staphylococcus aureus Stam ATCC 6538 2,5 2,5 Penicillin- resistent Stam 2,5 5 | Pseudomonas aeruginosa Stam l 0,3 1,2 š Stam. 2 10 >80 i Stam 3 2,5 40 ¿ .stam 4 80 i I Stam 5 80 2 stam e lo ao stam 7 s ao l Serratia marcescens 0,08 2,5 i h»- 7904632"7 13 Grupper om fem möss infekterades med en vattenhaltig suspen- sion av Escherichia coli intraperitonealt. Tre gånger, d.v.s. 1 timme, 2,5 timmar och H timmar efter infektionen tillfördes testsubstansen subkutant i fysiologisk koksaltlösning. Anta- let överlevande djur bestämdes vid fjärde dagen. Olika dose~ ringar användes och genom interpolering bestämdes den dos vid vilken 50% av försöksdjuren överlevde (CDSO, mg/kg).

Testsubstans A B CDSO, mg/kg $0,005 0,16 Toxicitet .cdi Testsubstans A B LD5O, mg/kg i.v. 250-500 250-500 s.c. >HOOO 2000-UOOO p.o. >5000 >5000 I de svenska patentansökningarna nr. 7701964-4, 7702909-8 och 7704233-l anges cefalosporiner som, liksom cefalosporinerna enligt uppfinningen, uppvisar en 7-12-(2-amino-4-tiazolyl)-2- -(Z-metoxiimino)-acetamidQ7-grupp. Cefalosporinerna enligt upp- finningen skiljer sig dock karaktäristiskt från de tidigare kända genom konfigurationen i substituenterna i 3~stä1lning, varigenom nya föreningar med överraskande verkningsfördelar erhålles. Sålunda visade en jämförelse med en strukturellt närmast jämförbar förening ur den ovannämnda teknikens stånd- punkt (den . förening som i 3-ställning liksom cefalospo- rinerna enligt uppfinningen, uppvisar en 6-atomig N-hetero- cyklisk tiometylgrupp, närmare bestämt en (6-metyl~l-oxido- pyridazin-3-yl)-tiometylgrupp), att den cefalosporin enligt uppfinningen md formeln I, vari X betecknar en l,2,5,6~tetra- hydro-2-metyl-5,6-dioxo-as-triazin-3-yl-grupp eller dess mot- svarande tautomera form, gruppen 2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl- PQQLIR~ 7904682-7 14 -5-oxo-as-triazin-3-yl, en massiv (mer än 50 gånger större) överlägsenhet med avseende på effekt vid profylaktiska test in vivo på möss gentemot de patogena mikroorganismerna Serra- tia marcescens, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis och Proteus vulgaris.

Produkterna enligt uppfinningen kan användas såsom läkemedel, exempelvis i form av farmacevtiska preparat, som innehålla produkterna eller deras salter i blandning med en för enteral eller parenteral tillförsel lämplig farmacevtisk, organisk eller oorganisk inert bärare, t.ex. vatten, gelatin, gummi arabicum, mjölksocker, stärkelse, magnesiumstearat, talk, vegetabiliska oljor, polyalkylenglykoler, vaselin o.s.v. De farmacevtiska preparaten kan föreligga i fast form, t.ex. som tabletter, drageer, suppositorier, kapslar; eller i flytande form, t.ex. såsom lösningar, suspensioner eller emulsioner.

Eventuellt är de steriliserade och/eller innehåller hjälp- substanser såsom konserveringsmedel, stabilisatorer, vätmedel eller emulgatorer, salter för förändring av det osmotiska trycket, Anaestetica eller buffertsubstanser. De kan även innehålla andra terapeutiskt värdefulla substanser. Förenin- garna enligt formeln I och deras salter och hydrat ifrågakomma för parenteral tillförsel och upparbetas för detta ändamål företrädesvis såsom lyofilisat eller torrpulver för utspädning med vanligt förekommande medel såsom vatten eller ísoton kok- saltlösning. De lätt hydrolyserbara estrarna eller etrarna av föreningarna som har formeln I och deras salter resp. hydrat ifrâgakoma även för enteral tillförsel.

Uppfinningen beskrivas närmare medelst följande exempel.

Exempel l Framställning av dinatriumsaltet av (6R,7R)-7¥[2-(2-amino-H- tiazolyl)-2-(Z-metoxiimino]-3-/[(2,5-dihydro-6-hydroxi-2- metyl~5-oxo-as-triazin-3-yl)tio]-metyl-8-oxo-5-tia-l-azabi- cyklo[H.2.01okt~2-en-2-karbonsyra. 7904682-7 15 15,3 g (6R,7R-7-/2-[2-(2-kloracetamido)-Ä-tiazolyl]~2-(Z- metoxiimino)acetamido/-3-/[(2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5- oxo-as-triazín-3-yl)-tiolmetyli-8-oxo-5-tia-l-azabicyklo- -[H.2.0]okt-2-en-2-karbonsyra (fraktion I, se nedan) suspen- 5 derades tillsammans med 5 g tiourea i 150 ml vatten. Under god kvävgastillförsel och omrörning inställdes pH med mättad natriumvätekarbonatlösning på 6,8 - 7,0, varvid en orangefär- gad lösning bildades. Medelst autotítrator under tillsats av natriumvätekarbonatlösning hölls reaktionslösningens pH kon- stant vid 6,8 under 6 timmar. Därefter tillsattes ytterligare 2,5 g tiourea och lösningen omrördes ytterligare 3 timmar, varvid pH under tillsats av mättad natriumvätekarbonatlösning hölls vid 6,8. Därefter förvarades den röda lösningen över natten i kylskåp, varvid den blev mörkare. Lösningens pH in- ställdes på 2,0 - 2,5 genom tillsats av 100%-ig myrsyra, var- vid substansen utföll. Denna avsögs och tvättades med 100 ml 10%-ig myrsyra. Moderluten bortkastades. Den brunaktiga av- sugna substansen suspenderades i 200 ml vatten och inställdes med trietylamin på 7, varvid en brun lösning bildades. Denna lösning omrördes 30 minuter med 2 g aktivt kol, varefter kolet avfiltrerades och det fortfarande bruna filtratet inställdes på pH 3,5 med 100%-ig myrsyra under noggrann omrörning. Den därvid utfallna substansen avsögs, tvättades med 50 ml 10%-ig myrsyra och bortkastades. Det mörkgula filtratet inställdes på pH 2 - 2,5 med 100%-ig myrsyra, varvid substansen utföll.

Denna avsögs, tvättades med isvatten och torkades. Den erhåll- na cefalosporinsyran suspenderades för överföring till di- natriumsaltet i en blandning av H0 ml aceton och H0 ml vatten och försattes med 20 ml av en 2N lösning av 2-etylkapronsyra- natriumsalt i ättikester. Till den därvid bildade orangefär- gade lösningen sattes 50 ml aceton, varvid ett brunt harts ut- föll, som avskildes genom filtrering. Det gula filtratet om- rördes 50 minuter, varvid dinatriumsaltet kristalliserade.

Blandningen försattes ytterligare portionsvis med 50 ml aceton och förvarades över natten i kylskåp. Kristallisatet avsögs, tvättades efter vart annat med en aceton/vatten-blandning (85:15), ren aceton och lågkokande petroleumeter och torkades p All mtlï-'gßllwï v* 1,53 “'~1~-Å1"'" >:fl=f 7904682-7 16 över vakuum över natten vid HOOC. Titelsubstansen erhölls i form av beigefärgade kristaller. [alšo = -lüho (c = 0,5 i vat- ten). Kärnresonansspektrum och mikroanalys svarade mot den angivna strukturen.

Den såsom utgângsmaterial använda (6R,7R)-7-/2-[2-(2-klor- acetamido)-Ä-tiazolyl]-2-(Z-metoxiimino)acetamido/-3-/[(2,5- dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin-3-yl)-tic]metyl/-8- oxo-5-tia-1-azabícyklo[Ä.2.0lokt-2-en-2-karbonsyran kunde framställas på följande sätt: 22,2H g 2-(2-kloracetamido-tiazol-H-yl)-2-(Z-metoXiïmino)- ättiksyra suspenderades i 2UO ml metylenklorid. Denna suspen- sion försattes med l3,39 ml trietylamin, varvid en ljusbrun lösning bildades. Denna lösning kyldes till 0 - 500 och för- sattes med 16,72 g fosforpentaklorid, omrördes 5 minuter vid 0 - 5°C och 20 minuter utan kylning. Den gula lösningen indunstades i vakumm vid 3500. Indunstningsåterstoden skaka- des två gånger med n-heptan och den senare avdekanterades.

Den hartsartade återstoden behandlades med 2ÄO ml tetrahydro- furan och den icke lösta trietylaminhydrokloriden avfiltre- rades. Det gula filtratet innehöll syrakloriden. 22 g (TR)-7-amino-3-desacetoxi-3-I(2,5-dihydro-6-hydroxi-2- metyl-5-oxo-as-triazin-3-yl)-tio]-cefalosporansyra suspende- rades i en blandning av 300 ml vatten och 150 ml tetrahydro- furan. För suspension tilldroppades under noggrann kvävgas- tillförsel 2N natronlut med hjälp av en autotitrator tills en brunröd lösning med pH 8 bildats. Denna kyldes till 0 - 5°C_ och försattes droppvis under 15 minuter med den ovan fram- ställda lösningen av syrakloriden i tetrahydrofuran. Därefter omrördes 2,5 timmar vid 2500. Acyleringsblandningens pH hölls konstant vid 8 genom tillsats av 2N natronlut. Den praktiskt taget svarta lösningen befriades i vakuum vid HOOC från tetra- hydrofuran. Därefter tillsattes 100 ml 2N svavelsyra. Den där- vid utfallna substansen avsögs, tvättades med vatten och av- sögs noggrant. Den fuktiga bruna avsugna substansen löstes i 1,5 l aceton. Den mörka lösningen befriades över "Hyflo" från ............._.._....._.....__.._ . . . . i, . -._......... .__ if' 1.1.: t_.- _, - 1 .7904682-7 17 en ringa mängd mörkt olöst material, försattes med kol, om- rördes 30 minuter och filtrerades därefter åter över "Hyflo".

Det orangeröda filtratet torkades över natriumsulfat, in- dunstades i vakuum och indunstades med ättikester. Därvid ut- föll ett svart harts, som avfiltrerades och bortkastades. Det 2-fasiga filtratet som fortfarande innehöll vatten azeotrope- rades tre gånger med bensen i vakuum vid ÄOOC. Den därvid utfallna substansen avsögs och torkades i vakuum vid HOOC.

Den senare utrördes två gånger med vardera l liter aceton, varvid ett brunt harts kvarblev, vilket bortkastades. De förenade orangefärgade aoetonextrakten indunstades i vakuum vid HOOC till ungefär 150 ml, varvid ett brunt harts avfiltre- rades och bortkastades. Filtratet försattes med l liter ättik- ester och indunstades i vakuum vid HOOC. Den därvid utfallna substansen avsögs, tvättades med ättikester och därefter med eter och utgjorde [(6R,7R)-7-/[2-(2-kloracetamido)-H-tiazolyl]- -2-(Z-metoxiimino)acetamido/-3-[(2,5-dihydro-6-hydroxi-2- metyl-5-oxo-as-triazin-3-yl)tio]-metyl-8-oxo-5-tia-l~azabi- cyklo[U.2.G1okt-2-en-2-karbonsyra, fraktion l: en beigefärgad amorf syra]. Denna fraktion I kunde direkt användas för fram- ställning av den önskade slutprodukten. Ättikestermoderluten indunstades kraftigt i vakuum vid ÄOOC, utspäddes med eter och den utfallna substansen avsögs [(6R,7R)-7-/2-[2-(2-kloracetamido)-H-tiazolyl]-2-(Z-metoxi- imino)acetamido/-3-/[(2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as- triazin~3-yl)tio]-metyl/-8-oxo-5-tia-l-azabicyklo[H.2.0]okt- -2-en-2-karbonsyra, fraktion II: en ljusbeige amorf syra, tunnskiktskromatografiskt något renare än fraktion I].

För framställning av dinatriumsaltet löstes 3,5 g syra (frak- tion II) i en blandning av 20 ml aceton och ll ml vatten. Lös- ningen försattes med 7 ml av en 2N lösning av 2-etylkapronsyra- natriumsalt i ättikester, varvid dinatriumsaltet kristallise- rade. Därefter tillsattes ytterligare portionsvis 25 ml ace- ton och blandningen förvarades 2 timmar i frysskåp. Därefter avsögs kristallerna, tvättades efter vart annat med 25 ml av 7904682-7 slav en iskall blandning av aceton och vatten (80:20), ren aceton och lågkokande petroleumeter och torkades över natten i hög- vakuum vid uo°c. Man erhöll ainatriumsaitet av (6R,7R)-7~/2- -[2-kloracetamido)-U-tíazolyl]-2-(Z-metoxiímino)-acetamido/- -5-/[(2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin-3-yl)- tio]-metyll-8-oxo-5-tia-1~azabicykloIÄ.2.0]okt-2-en*2-karbon- š° = -142,7°c (c = 1 i vatten). Kärnresonansspektrum och mikroanalys svarade mot den syra i form av ljusgula kristaller. [a] angivna strukturen.

Exempel 2 Framställning av metylen-(6R,7R)-7*[2-(2-amino-H-tiazolyl)- -2-(z-metoxiimino)a@etamiao1-3-[II2,5-aihydr0-2-metyl-5-0X0- -6-[(piva1oyloxi)metoxi]-as-triazin-3-y1]-tio]metyl]-8-oxo-5- tia-1-azabicyklo[H.2.0]okt-2-en-2-karboxylatpivalat. l,85 g av det i exempel 1 framställda cefalosporin-dinatrium- saltet suspenderades i 50 ml dimetylformamid och försattes under kvävetillförsel vid 0 - 5°C med 1,35 g pívaloyloxi- metyljodid. Reaktionsblandningen omrördes 50 minuter vid 0 - 5°C och därefter uthälldes densamma på 500 ml ättikester.

Blandningen tvättades tre gånger med vatten, två gånger med 5%-ig natriumvätekarbonatlösning och slutligen ytterligare med vatten. Lösningen torkades över natriumsulfat och in- dunstades kraftigt i vakuum vid 3506. Efter tillsats av eter utföll títelsubstansen amorft. Denna avsögs, tvättades med eter och lågkokande petroleumeter och torkades i högvakuum vid 25°C över natten. Titelsubstansen erhölls i form av ett beigefärgat amorft pulver. Kärnresonansspektrum och mikro- analys överensstämde med den angivna strukturen. 7904682-7 19- Exempel Framställníng av torrampuller för intramuskulär tillförsel: På vanligt sätt framställdes ett lyofilisat av 1 g av di- natriumsaltet av (5R,7R)-7-[2-(2-amino-Ä-tiazolyl)-2-(Z- metoxiimino)acetamído]-3-/[(2,5-dihydro-6-hydroxí-2-metyl-5- oxo-as-triazin-3-yl)tio]metyl/-8-oxo-5-tia-l-azabicyklo- -[ü.2.0]okt-2-en-2-karbonsyra och fylldes i en ampull. Före tillförsel försattes lyofilisatet med 2,5 ml av en 2%-ig vattenlösning av lidokainhydroklorid.

Exempel På vanligt sätt framställdes en gelatinkapsel med följande sammansättning: metylen(6R,7R)-7-[2-(2-amino-U-tiazolyl)-2-(Z- metoxiimino)acetamido]-3-[[[2,5-dihydro-2- metyl-5-oxo-6-I(piValoyloxi)metoxi]-as- triazin-5-yl]tio]metyl]-8-oxo-5-tia-l-azabi- cyklo[4.2.0]okt-2-en-2-karboxylatpivalat 500 mg "Luviskol" (vattenlöslig polyvinylpyrrolídon) 20 mg Mannitol 20 mg Talk 15 mg Magnesiumstearat 2 mg 557 må

Claims (5)

7904682-7 ao PATENTKRAV

1. l. Acylderivat, k ä n n e t e c k n a t därav, att det har den allmänna formeln çHapN-i-comn-š 5 I N '_ a Å-š / GHz-s x HZN _ S ' _ COOH vari X betecknar gruppen l,2,5,6-tetrahydro-2-metyl-5,6-dioxo~ -as-triazin-3-yl resp. 2,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as- -triazin-3-yl, samt lägre alkanoyloxialkyl-estrar/etrar och salter av denna förening samt hydrat av föreningen med formeln I resp. av dess estrar/etrar och salter.

2. Föreningar enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d e därav, att de föreligger i syn-isomer form resp. blandningar, vari den syn-isomera formen överväger.

3. (6R,7R)-7-[2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-(Z-metoxiimino)-acet- amidq]-3-[12,5-dihydro-6-hydroxi-2-metyl-5-oxo-as-triazin-3- yl)-tio]-metyl]-8-oxo-5-tia-1-azabicyklo[Ä.2.Q]okt-2-en-2- karbonsyra såväl som salter och hydrat av denna förening resp. salterna därav. BfligtIufivet1.

4. Lägre alkanoyloxialkyl-estrar/etrar av acylderivat med formeln I enligt något av patentkraven_l-3 såväl som salter av dessa estrar/etrar och hydrat av dessa estrar/etrar samt salter.

5. Metylen-(6R,7R)-7-[ï-(2-amino-4-tiazolyl)-2-(Z-metoxiimino)- acetamidq]-3-[IZ2,5-dihydro-2-metyl-5-oxo-6-Lflpivaloyloxi)met- oxi]-as-triazin-3-yl]-tiQ]metyl]-8-oxo-5-tia-l-azabicyklo[Ä.2.Q]- 0kt-2-en-2-karboxylatpivalat såväl som salter av denna före- ning samt hydrat av denna förening och salter.EWHgt h¶vet1.