RU99107670A

RU99107670A - Высокопродуктивная экспрессия белков

Info

Publication number: RU99107670A
Application number: RU99107670/13A
Authority: RU
Inventors: Брайан СИД; Юрген ХААС
Original assignee: Дзе Дженерал Хоспитал Корпорейшн
Priority date: 1996-09-20
Filing date: 1997-09-18
Publication date: 2001-03-10

Claims

1. Синтетический ген, кодирующий зеленый флуоресцентный белок, в котором, как минимум, один непредпочтительный или менее предпочтительный кодон природного гена, кодирующего указанный белок, был заменен предпочтительным кодоном, кодирующим ту же аминокислоту, отличающийся тем, что указанный синтетический ген способен экспрессировать указанный белок на уровне, который, как минимум, составляет 110% от уровня экспрессии указанного природного гена в in vitro культуральной системе клеток млекопитающего в идентичных условиях.

2. Синтетический ген, кодирующий белок Фактор VIII, не содержащий центрального домена В-области, в котором, как минимум, один непредпочтительный или менее предпочтительный кодон природного гена, кодирующем указанный белок, был заменен предпочтительным кодоном, кодирующим ту же аминокислоту, отличающийся тем, что указанный синтетический ген обладает способностью экспрессировать указанный белок на уровне, который, как минимум, составляет 110% от уровня экспрессии указанного природного гена в in vitro культуральной системе клеток млекопитающего в идентичных условиях.

3. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором указанный синтетический ген способен экспрессировать указанный белок на уровне, который составляет, как минимум, 150% от уровня экспрессии указанного природного гена в in vitro клеточной культуральной системе в идентичных условиях.

4. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором указанный синтетический ген способен экспрессировать указанный белок на уровне, который составляет, как минимум, 200% от уровня экспрессии указанного природного гена в in vitro клеточной культуральной системе в идентичных условиях.

5. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором указанный синтетический ген способен экспрессировать указанный белок на уровне, который составляет, как минимум, 500% от уровня экспрессии указанного природного гена в in vitro клеточной культуральной системе в идентичных условиях.

6. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором указанный синтетический ген способен экспрессировать указанный белок на уровне, который составляет, как минимум, 1000% от уровня экспрессии указанного природного гена в in vitro клеточной культуральной системе в идентичных условиях.

7. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором указанный синтетический ген содержит менее 5 встречаемых последовательностей CG.

8. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором, как минимум, 10% кодонов в указанном природном гене представляют собой непредпочтительные кодоны.

9. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором, как минимум, 50% кодонов в указанном природном гене представляют собой непредпочтительные кодоны.

10. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором, как минимум, 50% непредпочтительных кодонов и менее предпочтительных кодонов, представленных в указанном природном гене, были заменены предпочтительными кодонами.

11. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором, как минимум, 90% непредпочтительных кодонов и менее предпочтительных кодонов, представленных в указанном природном гене, были заменены предпочтительными кодонами.

12. Синтетический ген по п.1 или 2, в котором 20% кодонов представляют собой предпочтительные кодоны.

13. Синтетический ген по п.1, в котором указанный ген обладает кодирующей последовательностью, представленной в SEQ ID NO : 40.

14. Синтетический ген по п.2, в котором указанный ген обладает кодирующей последовательностью, представленной в SEQ ID NO : 42.

15. Экспрессионный вектор, включающий синтетический ген по п.1 или 2.

16. Экспрессионный вектор по п.15, отличающийся тем, что указанный экспрессионный вектор представляет собой экспрессионный вектор млекопитающего.

17. Клетка млекопитающего, несущая синтетический ген по п.1 или 2.

18. Способ получения синтетического зеленого флуоресцентного гена, включающий определение непредпочтительных и менее предпочтительных кодонов в природном гене зеленого флуоресцентного белка и замену одного или нескольких непредпочтительных или менее предпочтительных кодонов предпочтительным кодоном, кодирующим ту же аминокислоту, что и замещаемый кодон.

19. Способ получения синтетического гена, кодирующего белок Фактор VIII, не содержащий в центральный домен В-области, включающий определение непредпочтительных и менее предпочтительных кодонов в природном гене, кодирующем указанный белок Фактор VIII, не содержащий центральный домен В-области, и замену одного или нескольких указанных непредпочтительных и менее предпочтительных кодонов предпочтительным кодоном, кодирующим ту же аминокислоту, что и замещаемый кодон.