RU98100099A

RU98100099A - Способ получения l-лизина

Info

Publication number: RU98100099A
Application number: RU98100099/13A
Authority: RU
Inventors: Оцуна Сейко; Сугимото Масаказу; Изуи Масако; Хаякава Ацуси; Накано Еити; Кобаяси Масаки; Есихара Ясухико; Накамацу Цуеси
Original assignee: Адзиномото Ко., Инк.
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-06-05
Publication date: 2000-07-20

Claims

1. Рекомбинантная ДНК, автономно реплицируемая в клетках коринеформных бактерий, содержащая последовательность ДНК, кодирующую аспартокиназу, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином и L-треонином по существу десенсибилизировано, и последовательность ДНК, кодирующую дигидродипиколинатредуктазу.

2. Рекомбинантная ДНК по п.1, дополнительно содержащая последовательность ДНК, кодирующую дигидродипиколинатсинтазу.

3. Рекомбинантная ДНК по п.2, дополнительно содержащая последовательность ДНК, колирующую диаминопимелатдекарбоксилазу.

4. Рекомбинантная ДНК по п.3, дополнительно содержащая последовательность ДНК, кодирующую диаминопимелатдегидрогеназу.

5. Рекомбинатная ДНК по любому из пп.1 - 4, где аспартокиназа, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином и L-треонином по существу десенсибилизировано, представляет собой аспартокиназу, происходящую из коринеформных бактерий, и где аспартокиназа обеспечена в виде мутантной аспартокиназы, в которой 279-ый остаток аланина при отсчете от ее N-конца заменен на аминокислотный остаток, иной, чем аланин, и иной, чем кислая аминокислота, в ее α- субъединице, а 30-ый остаток аланина заменен на аминокислотный остаток, иной, чем аланин, и иной, чем кислая аминокислота, в ее β-субъединице.

6. Рекомбинантная ДНК по любому из пп.1 - 4, где последовательность ДНК, кодирующая дигидродипиколинатредуктазу, кодирует аминокислотную последовательность, изображенную в SEQ 1D N 15 в Списке последовательностей, или аминокислотную последовательность, в основном одинаковую с аминокислотной последовательностью, изображенной в SEQ 1D N 15.

7. Рекомбинантная ДНК по п.2, где последовательность ДНК, кодирующая дигидродипиколинатсинтазу, кодирует аминокислотную последовательность, изображенную SEQ 1D N 11 в Списке последовательностей, или аминокислотную последовательность, в основном одинаковую с аминокислотной последовательностью, изображенной в SEQ 1D N 11.

8. Рекомбинантная ДНК по п.3, где последовательность ДНК, кодирующая диаминопимелатдекарбоксилазу, кодирует аминокислотную последовательность, изображенную в SEQ 1D N 19 в Списке последовательностей, или аминокислотную последовательность, в основном одинаковую с аминокислотной последовательностью, изображенной в SEQ 1D N 19.

9. Рекомбинантная ДНК по п.4, где последовательность ДНК, кодирующая диаминопимелатдегидрогеназу, кодирует аминокислотную последовательность, изображенную в SEQ 1D N 24 в Списке последовательностей, или аминокислотную последовательность, в основном одинаковую с аминокислотной последовательностью, изображенной в SEQ 1D N 24.

10. Коринеформная бактерия, несущая аспартокиназу, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином и L-треонином по существу десенсибилизировано, и содержащая усиленную последовательность ДНК, кодирующую дигидродипиколинатредуктазу.

11. Коринеформная бактерия по п.10, трансформированная введением рекомбинантной ДНК по п.1.

12. Коринеформная бактерия по п.10, дополнительно содержащая усиленную последовательность ДНК, кодирующую дигидродипиколинатсинтазу.

13. Коринеформная бактерия по п.12, трансформированная введением рекомбинантной ДНК по п.2.

14. Коринеформная бактерия по п.12, дополнительно содержащая усиленную последовательность ДНК, кодирующую диаминопимелатдекарбоксилазу.

15. Коринеформная бактерия по п.14, трансформированная введением рекомбинантной ДНК по п.3.

16. Коринеформная бактерия по п.14, дополнительно содержащая усиленную последовательность ДНК, кодирующую диаминопимелатдегидрогеназу.

17. Коринеформная бактерия по п.16, трансформированная введением рекомбинантной ДНК по п.4.

18. Способ получения L-лизина, включающий в себя стадии культивирования коринеформной бактерии по любому из пп.10 - 17 в подходящей среде, продуцирования и накопления L-лизина в культуре этой бактерии и сбора L-лизина из культуры.