RU2769512C2 - Способ выделения восьми соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины - Google Patents

Способ выделения восьми соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины Download PDF

Info

Publication number
RU2769512C2
RU2769512C2 RU2020118878A RU2020118878A RU2769512C2 RU 2769512 C2 RU2769512 C2 RU 2769512C2 RU 2020118878 A RU2020118878 A RU 2020118878A RU 2020118878 A RU2020118878 A RU 2020118878A RU 2769512 C2 RU2769512 C2 RU 2769512C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
methanol
reduced pressure
water
under reduced
ods
Prior art date
Application number
RU2020118878A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2020118878A3 (ru
RU2020118878A (ru
Inventor
Чуанфэн ЧЖАН
Шуо ШЭНЬ
Ляньцян СУН
Original Assignee
Шицзячжуан Илин Фармасьютикал Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Шицзячжуан Илин Фармасьютикал Ко., Лтд. filed Critical Шицзячжуан Илин Фармасьютикал Ко., Лтд.
Publication of RU2020118878A3 publication Critical patent/RU2020118878A3/ru
Publication of RU2020118878A publication Critical patent/RU2020118878A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2769512C2 publication Critical patent/RU2769512C2/ru

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/265—Adsorption chromatography
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
    • A61K36/634—Forsythia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/11—Pteridophyta or Filicophyta (ferns)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/17—Gnetophyta, e.g. Ephedraceae (Mormon-tea family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/31—Brassicaceae or Cruciferae (Mustard family), e.g. broccoli, cabbage or kohlrabi
    • A61K36/315—Isatis, e.g. Dyer's woad
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/35—Caprifoliaceae (Honeysuckle family)
    • A61K36/355—Lonicera (honeysuckle)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/41—Crassulaceae (Stonecrop family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/534—Mentha (mint)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/708—Rheum (rhubarb)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A61K36/736—Prunus, e.g. plum, cherry, peach, apricot or almond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/78—Saururaceae (Lizard's-tail family)
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
    • B01D15/1864—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using two or more columns
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/32—Bonded phase chromatography
    • B01D15/325—Reversed phase
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/34—Size selective separation, e.g. size exclusion chromatography, gel filtration, permeation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C67/56—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/244—Anthraquinone radicals, e.g. sennosides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/26—Acyclic or carbocyclic radicals, substituted by hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/06—Benzopyran radicals
    • C07H17/065—Benzo[b]pyrans
    • C07H17/07—Benzo[b]pyran-4-ones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/13—Preparation or pretreatment of starting material involving cleaning, e.g. washing or peeling
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/15—Preparation or pretreatment of starting material involving mechanical treatment, e.g. chopping up, cutting or grinding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/16—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the conditioning of the fluid carrier
    • B01D15/166—Fluid composition conditioning, e.g. gradient

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу выделения компонентов из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины. По результатам систематических исследований в отношении материалов лекарственных средств китайской медицины для прояснения фармакологического механизма действия соединения и закономерности совместимости соединений с одновременным тщательным изучением химического состава фармацевтической композиции по данной схеме было выделено 8 соединений, которые представляли собой 10-О- (п-гидроксициннамоил)-адоксозидовую кислоту, алоэ-эмодин-8-О-β-D-глюкопиранозид, кверцетин, матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозид, ликвиритин-апиозид, эпивогелозид, вогелозид и этилкофеат. Изобретение обеспечивает повышение качества полученной фармацевтической композиции с проявлением более сильного терапевтического эффекта по сравнению с однокомпонентными лекарственными средствами. 5 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

Description

Область техники
Настоящее изобретение относится к способу выделения нескольких компонентов из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины.
Предпосылки изобретения
Многокомпонентные составы являются основной формой лекарственных средств китайской медицины. За прошедшие несколько тысяч лет клинического применения лекарственные средства на основе многокомпонентных составов смогли продемонстрировать более сильный терапевтический эффект по сравнению с однокомпонентными лекарственными средствами, что уже полностью доказывает научность получения многокомпонентного состава. Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим решением состоит из 13 лекарственных средств китайской медицины, таких как форсайтия свисающая, жимолость японская, сушеная эфедра китайская и др., при этом она обладает противоэпидемическим и дезинтоксикационным действием, а также удаляет жар для повышения рассеивающей функции легких и применяется в лечении эпидемического гриппа. Клинические исследования подтверждают однозначное лечебное действие и выраженный эффект фармацевтической композиции в соответствии с настоящим решением при лечении гриппа и острой инфекции верхних дыхательных путей. Для выяснения фармакологического механизма действия многокомпонентных составов и научного обоснования закономерности совместимости лекарственных веществ в многокомпонентных составах крайне необходимо провести систематическое исследование их материальной основы. Поэтому химический состав фармацевтической композиции в соответствии с настоящим решением был тщательно изучен, при этом было выделено 8 соединений, которые представляли собой 10-O-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовую кислоту, алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозид, кверцетин, матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозид (матаирезинол-4'-O-глюкозид), ликвиритин-апиозид, эпивогелозид, вогелозид и этилкофеат. На основании этого предложен новый способ выполнения контроля качества фармацевтической композиции в соответствии с настоящим решением.
Суть изобретения
Техническая задача
Согласно настоящему изобретению предложен способ выделения 8 соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины.
Техническое решение
Композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях: форсайтии свисающей 200–300; эфедры китайской 60–100; ревеня лекарственного 40–60; гуттуинии сердцелистной 200–300; жимолости японской 200–300; вайды красильной 200–300; пачули 60–100; высушенных корневищ щитовника 200–300; родиолы розовой 60–100; ментола 5-9; горького миндаля 60–100; корня солодки 60–100 и гипса 200–300.
Указанный способ выделения согласно настоящему изобретению включает следующие этапы, на которых:
(1) общий экстракт композиции на основе лекарственных средств китайской медицины адсорбируют на макропористую смолу AB-8; затем элюируют водой, 10% этанолом, 30% этанолом и 50% этанолом; соответственно, собирают элюат каждой части и после концентрирования получают экстракт каждой части;
(2) берут экстракт элюированной 50% этанолом части, полученный на этапе (1), добавляют в обращенно-фазовый силикагель ODS-AQ-HG; после высыхания перемешанного образца загружают образец и выполняют разделение с помощью полой обращенно-фазовой колонки ODS-AQ-HG; последовательно элюируют раствором метанол-вода при соотношениях 20:80, 40:60, 60:40, 80:20 и 100% метанолом с получением в результате Fr.A - Fr.E;
(3) берут образец Fr.A, полученный на этапе (2), добавляют в обращенно-фазовый силикагель ODS-AQ-HG, после высыхания перемешанного образца загружают образец с ODS в колонку, получают жидкую фазу для разделения под средним давлением и выполняют градиентное разделение под средним давлением с помощью полученной жидкой фазы, объемное соотношение метанола-воды: 25:75–60:40, скорость потока: 25 мл/мин, в конической колбе получают фракции одинакового объема 500 мл и концентрируют при пониженном давлении, объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1 – Fr.A-7;
(4) берут образец Fr.A-2, полученный на этапе (3), и смешивают его с силикагелем, затем загружают в колонку с силикагелем и разделяют в изократическом режиме при объемном соотношении дихлорметана-метанола 8:1, получают фракции одинакового объема 50 мл при объеме элюирования 800 мл, и объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии, и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1-1 – Fr.A-1-4;
(5) берут образец Fr.A-1-2, полученный на этапе (4), и растворяют его в метаноле, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 50:50, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм; соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 6-8 мин, 9-10 мин и 12-13 мин, растворитель удаляют при пониженном давлении, выполняют следующие разделения:
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 6-8 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 8-9 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 2, алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозида;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 9-10 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 45:55, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 21-23 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 3, кверцетина;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-12 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 9-10 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 4, матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозида;
(6) берут образец Fr.A-1-3, полученный на этапе (4), и растворяют его в метаноле, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со временем удерживания 10-11 мин, 17-19 мин и 21-24 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении; при этом время удерживания 17-19 мин соответствует соединению 6, эпивогелозиду; 21-24 мин - соединению 7, вогелозиду; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-11 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 15:85, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 14-16 мин, и после удаления растворителя при пониженном давлении получают соединение 5, ликвиритин-апиозид;
(7) берут образец Fr.A-3, полученный на этапе (3), и растворяют его в метаноле, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 60:40, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 14-15 мин и 19-21 мин соответственно, и удаляют растворитель при пониженном давлении, собранную жидкость, соответствующую хроматографическому пику при 19-21 мин, осаждают с образованием белого осадка с помощью раствора метиленхлорида-метанола с объемным соотношением 2:1 с получением соединения 8; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 14-15 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, колонка для хроматографии: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 18-20 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 1, 10-O-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовой кислоты.
Предпочтительный способ выделения согласно настоящему изобретению включает следующие этапы, на которых:
(1) 5 кг общего экстракта композиции на основе лекарственных средств китайской медицины адсорбируют на макропористую смолу AB-8; затем элюируют с помощью 150 л воды, 87,5 л 10% этанола, 225 л 30% этанола и 250 л 50% этанола;
(2) берут 200 г экстракта элюированной 50% этанолом части, полученного на этапе (1), добавляют к 200 г обращенно-фазового силикагеля ODS-AQ-HG S-50 мкм, после высыхания перемешанного образца загружают образец и выполняют разделение с помощью полой обращенно-фазовой колонки ODS-AQ-HG, S-50 мкм с соотношением высоты слоя 1:4, при пониженном давлении последовательно элюируют с помощью 6 л раствора метанол-вода с соотношением 20:80, с помощью 7 л раствора с соотношением 40:60, с помощью 7 л раствора с соотношением 60:40, с помощью 5 л раствора с соотношением 80:20 и с помощью 3 л 100% метанола с получением в результате Fr.A – Fr.E;
(3) берут 50,0 г образца Fr.A, полученного на этапе (2), добавляют к 50 г обращенно-фазового силикагеля ODS-AQ-HG, после высыхания перемешанного образца загружают образец с ODS в колонку, получают жидкую фазу для разделения под средним давлением и выполняют градиентное разделение под средним давлением с помощью полученной жидкой фазы, объемное соотношение метанола-воды: 25:75–60:40, скорость потока: 25 мл/мин, в конической колбе получают фракции одинакового объема 500 мл и концентрируют при пониженном давлении, объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1 – Fr.A-7;
(4) берут 3,2 г образца Fr.A-2, полученного на этапе (3), и смешивают его с 6,4 г силикагеля, 200–300 меш, помещают в колонку с силикагелем, соотношение высоты слоя 1:50, разделяют в изократическом режиме с объемным соотношением дихлорметана-метанола 8:1, получают фракции одинакового объема 50 мл при объеме элюирования 800 мл, и объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии, и снова концентрируют при пониженном давлении с получением Fr.A-1-1 – Fr.A-1-4;
(5) берут образец Fr.A-1-2, полученный на этапе (4), растворяют в метаноле, раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 50:50, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм; соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 6-8 мин, 9-10 мин, 12-13 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении, и выполняют следующие разделения:
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 6-8 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 8-9 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 2, алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозида;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 9-10 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 45:55, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 21-23 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 3, кверцетина;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-12 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 9-10 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 4, матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозида;
(6) берут образец Fr.A-1-3, полученный на этапе (4), растворяют его в метаноле, раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 10-11 мин, 17-19 мин, 21-24 мин соответственно, и растворитель удаляют при пониженном давлении, при этом время удерживания 17-19 мин соответствует соединению 6, эпивогелозиду; время удерживания 21-24 мин - соединению 7, вогелозиду, фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-11 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 15:85, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 14-16 мин, после удаления растворителя при пониженном давлении получают соединение 5, ликвиритин-апиозид;
(7) берут образец Fr.A-3, полученный на этапе (3), и растворяют его в метаноле, и раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 60:40, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 14-15 мин и 19-21 мин, растворитель удаляют при пониженном давлении и собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 19-21 мин, в растворе дихлорметана-метанола с объемным соотношением 2:1 осаждают белый осадок с получением соединения 8; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 14-15 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 18-20 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 1, 10-О-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовой кислоты.
Предпочтительная композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях:
форсайтии свисающей 200, жимолости японской 300, вайды красильной 200, ревеня лекарственного 40, пачули 60, высушенных корневищ щитовника 300, родиолы розовой 100, ментола 9, эфедры китайской 60, горького миндаля 100, гуттуинии сердцелистной 200, корня солодки 100 и гипса 200.
Предпочтительная композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях:
форсайтии свисающей 300, жимолости японской 200, вайды красильной 300, ревеня лекарственного 60, пачули 100, высушенных корневищ щитовника 200, родиолы розовой 60, ментола 5, эфедры китайской 100, горького миндаля 60, гуттуинии сердцелистной 300, корня солодки 60 и гипса 300.
Предпочтительная композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях:
форсайтии свисающей 278, жимолости японской 294, вайды красильной 285, ревеня лекарственного 55, пачули 95, высушенных корневищ щитовника 290, родиолы розовой 87, ментола 8,5, эфедры китайской 88, горького миндаля 80, гуттуинии сердцелистной 284, корня солодки 95 и гипса 277.
Общий экстракт композиции на основе лекарственных средств китайской медицины, описанной в настоящем решении, получают с помощью следующих этапов:
(1) взвешивают лекарственные средства китайской медицины в соответствии с весовым соотношением сырья, тщательно промывают их и измельчают их соответствующим образом;
(2) измельчают пачули, добавляют 10-кратное количество воды с извлечением эфирного масла, время экстракции масла составляет 8 часов, собирают эфирное масло и хранят, после фильтрации экстракта остаток удаляют и применяют фильтрат;
(3) форсайтию свисающую, эфедру китайскую, гуттуинию сердцелистную, ревень лекарственный 3 раза экстрагируют 12-кратным количеством 70% этанола, каждый раз в течение 2,5 часа, экстракты объединяют и фильтруют, этанол удаляют и применяют фильтрат;
(4) жимолость японскую, гипс, вайду красильную, высушенные корневища щитовника, корень солодки, родиолу розовую добавляют в 12-кратное количество воды и нагревают до кипения, добавляют горький миндаль и 2 раза нагревают, каждый раз в течение 1 часа, экстракты объединяют и фильтруют, фильтрат объединяют с фильтратом, полученным после экстракции масла пачули на этапе (2), концентрируют до прозрачной пасты с относительной плотностью от 1,10 до 1,15, измеренной при 60°C, добавляют этанол с доведением концентрации спирта до 70%, помещают в холодильник, фильтруют и удаляют этанол до исчезновения запаха спирта, получают прозрачную пасту, подлежащую применению;
(5) объединяют экстракт, полученный на этапе (4), со спиртовым экстрактом, полученным на этапе (3), концентрируют до получения экстракта с относительной плотностью от 1,15 до 1,20, измеренной при 60°С, и высушивают с получением общего экстракта, подлежащего применению.
Полезный эффект
Способ выделения согласно настоящему решению обеспечивает выделение 8 соединений, которые представляют собой 10-O-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовую кислоту, алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозид, кверцетин, матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозид, ликвиритин апиозид, эпивогелозид, вогелозид и этилкофеат.
Варианты осуществления данного изобретения
Пример 1
Взвешивают в пропорциях: 20 кг форсайтии свисающей, 30 кг жимолости японской, 20 кг вайды красильной, 4 кг ревеня лекарственного, 6 кг пачули, 30 кг высушенных корневищ щитовника, 10 кг родиолы розовой, 0,9 кг ментола, 6 кг эфедры китайской, 10 кг горького миндаля, 20 кг гуттуинии сердцелистной, 10 кг корня солодки, 20 кг гипса, и выполняют выделение в соответствии со следующим способом:
(1) взвешивают лекарственные средства китайской медицины в соответствии с весовым соотношением сырья, тщательно промывают их и измельчают их соответствующим образом;
(2) измельчают пачули, добавляют 10-кратное количество воды с извлечением эфирного масла, время экстракции масла составляет 8 часов, собирают эфирное масло и хранят, после фильтрации экстракта остаток удаляют и применяют фильтрат;
(3) форсайтию свисающую, эфедру китайскую, гуттуинию сердцелистную, ревень лекарственный 3 раза экстрагируют 12-кратным количеством 70% этанола, каждый раз в течение 2,5 часа, экстракты объединяют и фильтруют, этанол удаляют и применяют фильтрат;
(4) жимолость японскую, гипс, вайду красильную, высушенные корневища щитовника, корень солодки, родиолу розовую добавляют в 12-кратное количество воды и нагревают до кипения, добавляют горький миндаль и 2 раза нагревают, каждый раз в течение 1 часа, экстракты объединяют и фильтруют, фильтрат объединяют с фильтратом, полученным после экстракции масла пачули на этапе (2), концентрируют до прозрачной пасты с относительной плотностью 1,15, измеренной при 60°C, добавляют этанол с доведением концентрации спирта до 70%, помещают в холодильник, фильтруют и удаляют этанол до исчезновения запаха спирта, получают прозрачную пасту, подлежащую применению;
(5) объединяют экстракт, полученный на этапе (4), со спиртовым экстрактом, полученным на этапе (3), концентрируют до экстракта с относительной плотностью 1,20, измеренной при 60°С, и высушивают с получением общего экстракта, подлежащего применению.
Стадии способа выделения являлись следующими.
1. Инструменты и материалы
Инфракрасный спектрометр Bruker Alpha (компания Bruker в Швейцарии); спектрометр ядерного магнитного резонанса Bruker AVIIIHD 600 (компания Bruker в Швейцарии); масс-спектрометр Synapt G2-S (компания Waters, США); препаративный жидкостный хроматограф среднего и низкого давления Combi Flash Rf (компания Teledvne ISCO, США); препаративный жидкостный хроматограф NP7000 (Jiangsu Hanbon Science & Technology, Co.); очиститель чистой воды Milli-Q (компания Millipore, США); аналитические электронные весы AL204 (компания Mettler Toledo, США); обращенно-фазовый силикагель YMC ODS-A-HG, 50 мкм (компания YMC, Япония), силикагель для колоночной хроматографии (100-200 меш и 200-300 меш, Qingdao Ocean Chemical Industry, LC), тонкослойная тоска с силикагелем хроматографии GF254 (Qingdao Ocean Chemical Industry, LC); YMC-Pack R&D ODS-A (250 × 20 мм, S-10 мкм, компания YMC, Япония), общий экстракт композиции на основе лекарственных средств китайской медицины согласно настоящему решению (Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co., Ltd., номер партии: B1509001); хроматографически чистые ацетонитрил и метанол (Shanghai Adamas Reagent Company); аналитические реагенты (Beijing Chemical Factory).
2. Извлечение и выделение
(1) 5 кг общего экстракта композиции на основе лекарственных средств китайской медицины, адсорбируют на макропористую смолу AB-8; затем элюируют с помощью 150 л воды, 87,5 л 10% этанола, 225 л 30% этанола и 250 л 50% этанола и, соответственно, собирают элюат каждой части и после концентрирования получают экстракт каждой части;
(2) берут 200 г экстракта элюированной 50% этанолом части, полученного на этапе (1), добавляют к 200 г обращенно-фазового силикагеля ODS-AQ-HG S-50 мкм, после высыхания перемешанного образца загружают образец и выполняют разделение с помощью полой обращенно-фазовой колонки ODS-AQ-HG, S-50 мкм с соотношением высоты слоя 1:4, при пониженном давлении последовательно элюируют с помощью 6 л раствора метанол-вода с соотношением 20:80, с помощью 7 л раствора с соотношением 40:60, с помощью 7 л раствора с соотношением 60:40, с помощью 5 л раствора с соотношением 80:20 и с помощью 3 л 100% метанола с получением в результате Fr.A – Fr.E;
(3) берут 50,0 г образца Fr.A, полученного на этапе (2), добавляют к 50 г обращенно-фазового силикагеля ODS-AQ-HG, после высыхания перемешанного образца загружают образец с ODS в колонку, получают жидкую фазу для разделения под средним давлением и выполняют градиентное разделение под средним давлением с помощью полученной жидкой фазы, объемное соотношение метанола-воды: 25:75–60:40, скорость потока: 25 мл/мин, в конической колбе получают фракции одинакового объема 500 мл и концентрируют при пониженном давлении, объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1 – Fr.A-7;
(4) берут 3,2 г образца Fr.A-2, полученного на этапе (3), и смешивают его с 6,4 г силикагеля, 200–300 меш, помещают в колонку с силикагелем, соотношение высоты слоя 1:50, разделяют в изократическом режиме с объемным соотношением дихлорметана-метанола 8:1, получают фракции одинакового объема 50 мл при объеме элюирования 800 мл, и объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии, и снова концентрируют при пониженном давлении с получением Fr.A-1-1 – Fr.A-1-4;
(5) берут образец Fr.A-1-2, полученный на этапе (4), растворяют в метаноле, раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 50:50, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм; соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 6-8 мин, 9-10 мин, 12-13 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении, и выполняют следующие разделения:
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 6-8 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 8-9 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 2, алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозида;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 9-10 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 45:55, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 21-23 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 3, кверцетина;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-12 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 9-10 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 4, матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозида;
(6) берут образец Fr.A-1-3, полученный на этапе (4), растворяют его в метаноле, пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, соответственно, собирают фракцию, соответствующую хроматографическим пикам со значением времени удерживания 10-11 мин, 17-19 мин, 21-24 мин соответственно, и растворитель удаляют при пониженном давлении, при этом время удерживания 17-19 мин соответствует соединению 6, эпивогелозиду, 21-24 мин - соединению 7, вогелозиду, фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-11 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 15:85, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 14-16 мин, после удаления растворителя при пониженном давлении получают соединение 5, ликвиритин-апиозид;
(7) берут образец Fr.A-3, полученный на этапе (3), растворяют в метаноле, раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 60:40, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 14-15 мин и 19-21 мин, удаляют растворитель при пониженном давлении и собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 19-21 мин, осаждали в растворе дихлорметана-метанола с объемным соотношением 2:1 осаждают белый осадок с получением соединения 8; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 14-15 мин, дополнительно очищали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 18-20 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 1, 10-О-(п-гидроксициннамоил)адоксозидовой кислоты.
3. Идентификация структуры
3.1 Идентификация структуры новых соединений
Соединение 1: светло-желтый порошок, УФ λmax (MeOH): 228, 312 нм. Инфракрасная спектроскопия показала, что присутствуют гидроксильная группа (3330 см-1), α,β-ненасыщенная карбонильная группа (1680, 1630 см-1) и бензольное кольцо (1603, 1514 см-1). HR-ESI-MS масса/заряд: 521,1699[M-H]- (рассчитанное значение: 521,1659) в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула данного соединения представляет собой C25H30O12. Ненасыщенность составляет 11.
На спектре 1H-ЯМР (DMSO-d6, 600 МГц) (таблица 1) показано, что соединение содержит пару двойных транс-связей: δ 7,56 (1H, d, J = 16,2 Гц), 6,39 (1H, d, J = 16,2 Гц) и соответствующие ароматической системе AB атомы водорода: δ 7,55 (2H, d, J = 8,4 Гц), 6,79 (2H, d, J = 8,4 Гц), химический сдвиг водорода на спектре составляет 4,52 (1H, d, J = 7,8 Гц), предположительно водорода является концевым атомом сахара.
На спектре 13C-ЯМР (DMSO-d6, 150 МГц) (таблица 1) показано, что соединение содержит два сопряженных карбонильных углерода (δC: 168,4, 167,2) и два различных фрагмента, δC: 116,2 (2C), 130,8 (2C), 160,2 представляет собой п-гидроксифенильный фрагмент, δC: 99,3, 77,6, 77,1, 73,6, 70,4, 61,6 представляет собой фрагмент на основе глюкозы.
Согласно HMBC двойные связи с δH 7,56 и 6,39 связаны с фенильным углеродом с δC 125,5, двойные связи с δH 6,39 и -CH2-δH 4,12 связаны с карбонилом с δC 167,2. Указанный выше фрагмент не имеет корреляций с другими химическими сдвигами C и H. Предполагается, что этот фрагмент представляет собой независимый фрагмент п-гидроксициннамоила, а оставшийся фрагмент, не включающий сахар, считается ядром. После расчета ненасыщенность ядра равна 4 (содержит карбонильную группу и двойную связь), и предполагается, что ядро имеет структуру двойного кольца. Посредством присваивания и объединения HSQC и HMBC предполагается, что это соединение является иридоидным соединением, а также путем поиска в литературе определили, что ядром данного соединения является аксоксозидовая кислота.
Можно увидеть, что оставшийся фрагмент представляет собой п-гидроксициннаминовую кислоту, которая образует сложный эфир относительно положения 10 ядра на основе адоксозидовой кислоты. Посредством поиска в базе данных SciFinder и Reaxys было определено, что это соединение является новым соединением (конфигурация данного соединения не была подтверждена в этом эксперименте и будет подтверждена в последующих исследованиях), а именно представляет собой 10-О-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовую кислоту.
Таблица 1. Данные ЯМР для соединения 1
Figure 00000001
aВозможно, химические сдвиги обусловлены обменом
Figure 00000002
Figure 00000003
3.2 Идентификация структуры известных соединений
Соединение 2: желтый порошок, ESI-MS масса/заряд: 431[M-H]-, в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула данного соединения представляет собой C21H20O10. 1H-ЯМР (DMSO-d6, 600 МГц) δH: 12,88 (1H, s, OH), 7,89 (1H, dd, J = 1,2, 8,4 Гц, H-5), 7,86 (1H, t, J = 7,8 Гц, H-6), 7,72 (1H, dd, J = 1,2, 8,4 Гц, H-7), 7,66 (1H, brs, H-4), 7,28 (1H, brs, H-2), 5,17 (1H, d, J = 7,8 Гц, аномерный H), 4,62 (2H, s, CH2OH), 3,72~3,23 (Glc-H). 13C-ЯМР (DMSO-d6, 150 МГц) δH: 188,8 (C-9), 182,6 (C-10), 162,2 (C-1), 158,7 (C-8), 152,7 (C-3), 136,4 (C-6), 135,3 (C-10a), 132,7 (C-4a), 122,9 (C-7), 121,2 (C-2), 121,0 (C-5), 116,4 (C-8a, C-9a), 100,9 (C-1'), 77,7 (C-5'), 77,0 (C-3'), 73,7 (C-2'), 70,0 (C-4'), 62,5 (CH2OH), 61,0 (C-6'). Приведенные выше характеристики водородного спектра и данные углеродного спектра в основном согласуются с литературными сведениями, и соединение идентифицировано как алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозид.
Соединение 3: желтый порошок, ESI-MS масса/заряд: 447[M-H]-, в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула данного соединения представляет собой C21H20O11. 1H-ЯМР (DMSO-d6, 600 МГц) δH: 12,66 (1H, s, 5-OH), 7,31 (1H, d, J = 2,4 Гц, H-2'), 7,26 (1H, d, J = 2,4, 8,4 Гц, H-6'), 6,87 (1H, d, J = 8,4 Гц, H-5'), 6,39 (1H, d, J = 2,4 Гц, H-8), 6,21 (1H, d, J = 2,4 Гц, H-6), 5,26 (1H, d, J = 1,8 Гц, аномерный H), 0,82 (3H, d, J = 6,0 Гц, CH 3). 13C-ЯМР (DMSO-d6, 150 МГц) δC: 178,2 (C-4), 164,6 (C-7), 161,7 (C-5), 157,7 (C-2), 156,9 (C-9), 148,9 (C-4'), 145,6 (C-3'), 134,7 (C-3), 121,5 (C-6'), 121,2 (C-1'), 116,1 (C-5'), 115,9 (C-2'), 104,5 (C-10), 102,3 (C-1''), 99,1 (C-6), 94,1 (C-8), 71,6 (C-4''), 71,0 (C-3''), 70,8 (C-2''), 70,5 (C-5''), 17,9 (C-6''). Приведенные выше характеристики водородного спектра и данные углеродного спектра в основном согласуются с литературными сведениями и соединение идентифицировано как кверцетин.
Соединение 4: желтый порошок, ESI-MS масса/заряд: 519[M-H]-, в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула данного соединения представляет собой C26H32O11. 1H-ЯМР(DMSO-d6, 600 МГц) δH: 6,99 (1H, d, J = 8,4 Гц, H-5), 6,78 (1H, d, J = 1,8 Гц, H-2'), 6,67 (2H, m, H-5, H-6'), 6,63 (1H, s, H-2), 6,50 (1H, dd, J = 1,8, 8,4 Гц, H-6), 4,84 (1H, d, J = 7,8 Гц, H-1''), 4,09 (1H, t, J = 7,8 Гц, H-9a), 3,86 (1H, t, J = 8,4 Гц, H-9b), 3,72 (6H, d, J = 2,4 Гц, 2×OCH3). 13C-ЯМР (DMSO-d6, 150 МГц) δC: 178,9 (C-9'), 149,1 (C-3'), 147,9 (C-3), 145,7 (C-4'), 145,4 (C-4), 132,2 (C-1'), 130,0 (C-1), 121,8 (C-6'), 121,2 (C-6), 115,9 (C-5'), 115,6 (C-5), 114,3 (C-2'), 113,1 (C-2), 100,6 (C-1''), 77,4 (C-5''), 77,3 (C-3''), 73,7 (C-2''), 71,1 (C-9), 70,1 (C-4''), 61,1 (C-6''), 56,1 (OCH3), 56,0 (OCH3), 46,0 (C-8'), 41,3 (C-8), 37,3 (C-7), 33,9 (C-7'). Приведенные выше данные об углеродном спектре в основном согласуются с литературными сведениями, и это соединение идентифицировано как матаирезинол-4'-O-глюкозид.
Соединение 5: белый порошок, ESI-MS масса/заряд: 549[M-H]-, в сочетании с данными ЯМР молекулярная формула данного соединения представляет собой C26H30O13. 1H-ЯМР (CD3OD, 600 МГц) δH: 7,70 (1H, d, J = 9,0 Гц, H-5), 7,40 (2H, d, J = 8.4 Гц, H-2', 6'), 7,09 (2H, d, J = 9,0 Гц, H-3', 5'), 6,48 (1H, dd, J = 2,4, 9,0 Гц, H-6), 6,34 (1H, d, J = 2,4 Гц, H-8), 5,46 (1H, d, J = 1,2 Гц, H-1'''), 5,39 (1H, dd, J = 2,4, 13,2 Гц, H-2), 4,98 (1H, d, J = 7,2 Гц, H-1''), 4,04 (1H, d, J = 9,6 Гц, H-5'''a), 3,89 (1H, d, J = 1,2 Гц, H-2'''), 3,88 (1H, dd, J = 1,2, 12,0 Гц, H-6''a), 3,79 (1H, d, J = 9,6 Гц, H-5'''b), 2,99 (1H, m, H-3a), 2,74 (1H, dd, J = 2,4, 16,8 Гц, H-3b). 13C-ЯМР (CD3OD, 150 МГц) δC: 193,2 (C-4), 166,7 (C-7), 165,3 (C-8a), 159,0 (C-4'), 134,3 (C-1'), 129,9 (C-5), 128,8 (C-2', 6'), 117,6 (C-3', 5'), 114,9 (C-4a), 111,8 (C-6), 110,7 (C-1'''), 103,8 (C-8), 100,7 (C-1''), 80,7 (C-2), 80,6 (C-3'''), 78,8 (C-5''), 78,6 (C-2'''), 78,0 (C-2''), 77,9 (C-3''), 75,4 (C-4'''), 71,4 (C-4''), 66,0 (C-5'''), 62,4 (C-6''), 44,9 (C-3). Приведенные выше характеристики водородного спектра и данные углеродного спектра в основном согласуются с литературными сведениями, и соединение идентифицировано как ликвиритин-апиозид.
Соединение 6: белый порошок, ESI-MS масса/заряд: 387[M-H]-, в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула соединения представляет собой C17H24O10. 1H-ЯМР (CD3OD, 600 МГц) δH: 7,60 (1H, d, J = 2,4 Гц, H-3), 5,55 (1H, d, J = 1,8 Гц, H-1), 5,48 (1H, m, H-8), 5,31 (1H, s, H-7), 5,29 (1H, m, H-10a), 5,25 (1H, m, H-10b), 4,67 (1H, d, J = 7,8 Гц, H-1'), 3,50 (1H, s, 7-OCH3), 3,18 (1H, m, H-5), 2,63 (1H, m, H-9), 1,85 (1H, dd, J = 6,0, 13,2 Гц, H-6a), 1,69 (1H, td, J = 3,0, 13,8 Гц, H-6b). 13C-ЯМР(CD3OD, 150 МГц) δC: 167,4 (C-11), 154,4 (C-4), 133,3 (C-8), 121,0 (C-10), 105,3 (C-4), 103,3 (C-7), 100,3 (C-1'), 98,5 (C-1), 78,3 (C-5'), 78,0 (C-3'), 74,6 (C-2'), 71,4 (C-4'), 62,6 (C-6'), 57,0 (7-OCH3), 43,5 (C-9), 30,2 (C-6), 22,8 (C-5). Вышеуказанные характеристики водородного спектра и данные углеродного спектра в основном согласуются с литературными сведениями, и соединение идентифицировано как эпивогелозид.
Соединение 7: белый порошок, ESI-MS масса/заряд: 387[M-H]-, в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула соединения представляет собой C17H24O10. 1H-ЯМР (CD3OD, 600 МГц) δH: 7,58 (1H, d, J = 2,4 Гц, H-3), 5,55 (1H, d, J = 1,2 Гц, H-1), 5,47 (1H, m, H-8), 5,31 (1H, s, H-7), 5,29 (1H, m, H-10a), 5,26 (1H, m, H-10b), 4,66 (1H, d, J = 7,8 Гц, H-1'), 3,54 (1H, s, 7-OCH3), 3,16 (1H, m, H-5), 2,67 (1H, m, H-9), 1,97 (1H, m, H-6a), 1,44(1H, m, H-6b). 13C-ЯМР(CD3OD, 150 МГц) δC: 167,6 (C-11), 154,1 (C-4), 133,0 (C-8), 121,1 (C-10), 105,4 (C-4), 105,1 (C-7), 99,7 (C-1'), 97,9 (C-1), 78,4 (C-5'), 77,8 (C-3'), 74,7 (C-2'), 71,5 (C-4'), 62,6 (C-6'), 57,1 (7-OCH3), 43,7 (C-9), 31,7 (C-6), 25,3 (C-5). Вышеуказанные характеристики водородного спектра в основном согласуются с литературными сведениями, и сигналам на углеродном спектре присвоены значения, и соединение идентифицировано как вогелозид.
Соединение 8: белый порошок, ESI-MS масса/заряд: 209[M + H]+, в сочетании с данными ЯМР определили, что молекулярная формула данного соединения представляет собой C11H12O4. 1H-ЯМР (DMSO-d6, 600 МГц) δH: 7,46 (1H, d, J = 15,9 Гц, H-7), 7,04 (1H, brs, H-2), 6,99 (1H, d, J = 8,1 Гц, H-6), 6,75 (1H, d, J = 8,1 Гц, H-5), 6,24 (1H, d, J = 15,9 Гц, H-8), 4,15 (2H, q, J = 7,1 Гц, H-10), 1,24 (3H, t, J = 7,1 Гц, H-11). 13C-ЯМР (DMSO-d6, 150 МГц) δC: 166,5 (C-9), 148,6 (C-4), 145,0 (C-7), 145,6 (C-3), 121,3 (C-6), 125,3 (C-1), 115,7 (C-5), 114,7 (C-2), 113,9 (C-8), 59,6 (C-10), 14,3 (C-11). Приведенные выше характеристики водородного спектра и данные углеродного спектра в основном согласуются с литературными сведениями, и соединение идентифицировано как этилкофеат.
Пример 2
Взвешивают в пропорциях: 30 кг форсайтии свисающей, 20 кг жимолости японской, 30 кг вайды красильной, 6 кг ревеня лекарственного, 10 кг пачули, 20 кг высушенных корневищ щитовника, 6 кг родиолы розовой, 0,5 кг ментола, 10 кг эфедры китайской, 6 кг горького миндаля, 30 кг гуттуинии сердцелистной, 6 кг корня солодки, 30 кг гипса, и выполняют выделение в соответствии со следующим способом:
(1) взвешивают лекарственные средства китайской медицины в соответствии с весовым соотношением сырья, тщательно промывают их и измельчают их соответствующим образом;
(2) измельчают пачули, добавляют 10-кратное количество воды с извлечением эфирного масла, время экстракции масла составляет 8 часов, собирают эфирное масло и хранят, после фильтрации экстракта остаток удаляют и применяют фильтрат;
(3) форсайтию свисающую, эфедру китайскую, гуттуинию сердцелистную, ревень лекарственный 3 раза экстрагируют 12-кратным количеством 70% этанола, каждый раз в течение 2,5 часа, экстракты объединяют и фильтруют, этанол удаляют и применяют фильтрат;
(4) жимолость японскую, гипс, вайду красильную, высушенные корневища щитовника, корень солодки, родиолу розовую добавляют в 12-кратное количество воды и нагревают до кипения, добавляют горький миндаль и 2 раза нагревают, каждый раз в течение 1 часа, экстракты объединяют и фильтруют, фильтрат объединяют с фильтратом, полученным после экстракции масла пачули на этапе (2), концентрируют до прозрачной пасты с относительной плотностью 1,10, измеренной при 60°C, добавляют этанол с доведением концентрации спирта до 70%, помещают в холодильник, фильтруют и удаляют этанол до исчезновения запаха спирта, получают прозрачную пасту, подлежащую применению;
(5) объединяют экстракт, полученный на этапе (4), со спиртовым экстрактом, полученным на этапе (3), концентрируют до экстракта с относительной плотностью 1,15, измеренной при 60°С, и высушивают с получением общего экстракта, подлежащего применению.
1. Инструменты и материалы такие же, как в Примере 1.
2. Извлечение и выделение
Берут 5 кг общего экстракта композиции на основе лекарственных средств китайской медицины согласно настоящему решению, адсорбируют на макропористую смолу d-101; затем элюируют водой, 10% этанолом, 30% этанолом, 50% этанолом, после концентрирования получают экстракты каждой части; другие стадии выполняют как в примере 1.
3. Результаты оценивали так же, как в примере 1, восемь выделенных соединений представляют собой точно такие же, как полученные в примере 1.
Пример 3
Получают состав лекарственного средства из: 27,8 кг форсайтии свисающей, 29,4 кг жимолости японской, 28,5 кг вайды красильной, 5,5 кг ревеня лекарственного, 9,5 кг пачули, 29 кг высушенных корневищ щитовника, 8,7 кг родиолы розовой, 0,85 кг ментола, 8,8 кг эфедры китайской, 8 кг горького миндаля, 28,4 кг гуттуинии сердцелистной, 9,5 кг корня солодки, 27,7 кг гипса и выполняют выделение в соответствии со следующим способом:
(1) взвешивают лекарственные средства китайской медицины в соответствии с весовым соотношением сырья, тщательно промывают их и измельчают их соответствующим образом;
(2) измельчают пачули, добавляют 10-кратное количество воды с извлечением эфирного масла, время экстракции масла составляет 8 часов, собирают эфирное масло и хранят, после фильтрации экстракта остаток удаляют и применяют фильтрат;
(3) форсайтию свисающую, эфедру китайскую, гуттуинию сердцелистную, ревень лекарственный 3 раза экстрагируют 12-кратным количеством 70% этанола, каждый раз в течение 2,5 часа, экстракты объединяют и фильтруют, этанол удаляют и применяют фильтрат;
(4) жимолость японскую, гипс, вайду красильную, высушенные корневища щитовника, корень солодки, родиолу розовую добавляют в 12-кратное количество воды и нагревают до кипения, добавляют горький миндаль и 2 раза нагревают, каждый раз в течение 1 часа, экстракты объединяют и фильтруют, фильтрат объединяют с фильтратом, полученным после экстракции масла пачули на этапе (2), концентрируют до прозрачной пасты с относительной плотностью 1,13, измеренной при 60°C, добавляют этанол с доведением концентрации спирта до 70%, помещают в холодильник, фильтруют и удаляют этанол до исчезновения запаха спирта, получают прозрачную пасту, подлежащую применению;
(5) объединяют экстракт, полученный на этапе (4), со спиртовым экстрактом, полученным на этапе (3), концентрируют до экстракта с относительной плотностью 1,18, измеренной при 60°С, и высушивают с получением общего экстракта, подлежащего применению.
1. Инструменты и материалы такие же, как в Примере 1.
2. Извлечение и выделение
Берут 5 кг общего экстракта композиции на основе лекарственных средств китайской медицины согласно настоящему решению, адсорбируют на макропористую смолу HPD-100; затем элюируют водой, 10% этанолом, 30% этанолом, 50% этанолом и, соответственно, собирают элюат каждой части и после концентрирования получают экстракт каждой части; другие стадии выполняют как в примере 1.
3. Оценка результатов
Оценка результатов такая же, как в примере 1, восемь выделенных соединений представляют собой точно такие же, как полученные в примере 1.
Выше приведены только предпочтительные варианты осуществления согласно настоящему решению, и они не предназначены для ограничения настоящего решения. Любая модификация, эквивалентная замена или улучшение, осуществленные в соответствии с идеями и принципами настоящего решения, включены в объем защиты настоящего решения.

Claims (26)

1. Способ выделения восьми соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины, состоящей из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях: форсайтии свисающей 200-300, эфедры китайской 60-100, ревеня лекарственного 40-60, гуттуинии сердцелистной 200-300, жимолости японской 200-300, вайды красильной 200-300, пачули 60-100, высушенных корневищ щитовника 200-300, родиолы розовой 60-100, ментола 5-9, горького миндаля 60-100, корня солодки 60-100 и гипса 200-300; при этом способ выделения включает следующие этапы: (1) общий экстракт композиции на основе лекарственных средств китайской медицины адсорбируют на макропористую смолу AB-8; затем элюируют водой, 10% этанолом, 30% этанолом и 50% этанолом, соответственно, собирают элюат каждой части и после концентрирования получают экстракт каждой части;
(2) берут экстракт элюированной 50% этанолом части, полученный на этапе (1), добавляют в обращенно-фазовый силикагель ODS-AQ-HG, после высыхания перемешанного образца загружают образец и выполняют разделение с помощью полой обращенно-фазовой колонки ODS-AQ-HG; последовательно элюируют раствором метанол-вода при соотношениях 20:80, 40:60, 60:40, 80:20 и 100% метанолом с получением в результате Fr.A - Fr.E;
(3) берут образец Fr.A, полученный на этапе (2), добавляют в обращенно-фазовый силикагель ODS-AQ-HG, после высыхания перемешанного образца загружают образец с ODS в колонку, получают жидкую фазу для разделения под средним давлением и выполняют градиентное разделение под средним давлением с помощью полученной жидкой фазы, объемное соотношение метанола-воды: 25:75-60:40, скорость потока: 25 мл/мин, в конической колбе получают фракции одинакового объема 500 мл и концентрируют при пониженном давлении, объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1 – Fr.A-7;
(4) берут образец Fr.A-2, полученный на этапе (3), и смешивают его с силикагелем, затем загружают в колонку с силикагелем и разделяют в изократическом режиме при объемном соотношении дихлорметана-метанола 8:1, получают фракции одинакового объема 50 мл при объеме элюирования 800 мл, и объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии, и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1-1 – Fr.A-1-4;
(5) берут образец Fr.A-1-2, полученный на этапе (4), и растворяют его в метаноле, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 50:50, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм; соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 6-8 мин, 9-10 мин и 12-13 мин, растворитель удаляют при пониженном давлении, выполняют следующие разделения:
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 6-8 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 8-9 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 2, представляющего собой алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозид;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 9-10 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 45:55, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 21-23 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 3, представляющего собой кверцетин;
фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-12 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 9-10 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 4, представляющего собой матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозид;
(6) берут образец Fr.A-1-3, полученный на этапе (4), и растворяют его в метаноле, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со временем удерживания 10-11 мин, 17-19 мин и 21-24 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении; при этом время удерживания 17-19 мин соответствует соединению 6, представляющему собой эпивогелозид; 21-24 мин - соединению 7, представляющему собой вогелозид; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-11 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 15:85, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 14-16 мин, и после удаления растворителя при пониженном давлении получают соединение 5, представляющее собой ликвиритин-апиозид;
(7) берут образец Fr.A-3, полученный на этапе (3), и растворяют его в метаноле, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 60:40, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 14-15 мин и 19-21 мин соответственно, и удаляют растворитель при пониженном давлении, собранную жидкость, соответствующую хроматографическому пику при 19-21 мин, осаждают с образованием белого осадка с помощью раствора метиленхлорида-метанола с объемным соотношением 2:1 с получением соединения 8, которое представляет собой этилофеат; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 14-15 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, колонка для хроматографии: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 18-20 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 1, представляющего собой 10-O-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовую кислоту.
2. Способ по п. 1, при этом способ выделения включает следующие этапы: (1) 5 кг общего экстракта композиции на основе лекарственных средств китайской медицины адсорбируют на макропористую смолу AB-8; затем элюируют с помощью 150 л воды, 87,5 л 10% этанола, 225 л 30% этанола и 250 л 50% этанола;
(2) берут 200 г экстракта элюированной 50% этанолом части, полученного на этапе (1), добавляют к 200 г обращенно-фазового силикагеля ODS-AQ-HG S-50 мкм, после высыхания перемешанного образца загружают образец и выполняют разделение с помощью полой обращенно-фазовой колонки ODS-AQ-HG, S-50 мкм с соотношением высоты слоя 1:4, при пониженном давлении последовательно элюируют с помощью 6 л раствора метанол-вода с соотношением 20:80, с помощью 7 л раствора с соотношением 40:60, с помощью 7 л раствора с соотношением 60:40, с помощью 5 л раствора с соотношением 80:20 и с помощью 3 л 100% метанола с получением в результате Fr.A – Fr.E;
(3) берут 50,0 г образца Fr.A, полученного на этапе (2), добавляют к 50 г обращенно-фазового силикагеля ODS-AQ-HG, после высыхания перемешанного образца загружают образец с ODS в колонку, получают жидкую фазу для разделения под средним давлением и выполняют градиентное разделение под средним давлением с помощью полученной жидкой фазы, объемное соотношение метанола-воды: 25:75-60:40, скорость потока: 25 мл/мин, в конической колбе получают фракции одинакового объема 500 мл и концентрируют при пониженном давлении, объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии и снова концентрируют при пониженном давлении, получают Fr.A-1 – Fr.A-7;
(4) берут 3,2 г образца Fr.A-2, полученного на этапе (3), и смешивают его с 6,4 г силикагеля, 200-300 меш, помещают в колонку с силикагелем, соотношение высоты слоя 1:50, разделяют в изократическом режиме с объемным соотношением дихлорметана-метанола 8:1, получают фракции одинакового объема 50 мл при объеме элюирования 800 мл, и объединенные фракции идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии, и снова концентрируют при пониженном давлении с получением Fr.A-1-1 – Fr.A-1-4;
(5) берут образец Fr.A-1-2, полученный на этапе (4), растворяют в метаноле, раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 50:50, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм; соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 6-8 мин, 9-10 мин, 12-13 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении, и выполняют следующие разделения: фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 6-8 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 8-9 мин, и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 2, представляющего собой алоэ-эмодин-8-O-β-D-глюкопиранозид; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 9-10 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 45:55, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 21-23 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 3, представляющим собой кверцетин; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-12 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 25:75, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 9-10 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 4, представляющего собой матаирезинол-4'-O-β-D-полиглюкозид;
(6) берут образец Fr.A-1-3, полученный на этапе (4), растворяют его в метаноле, раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, объемное соотношение метанола-воды в подвижной фазе составляет 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, соответственно, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 10-11 мин, 17-19 мин, 21-24 мин соответственно, и растворитель удаляют при пониженном давлении, при этом время удерживания 17-19 мин соответствует соединению 6, представляющему собой эпивогелозид, время удерживания 21-24 мин - соединению 7, представляющему собой вогелозид, фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 10-11 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 15:85, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 14-16 мин, после удаления растворителя при пониженном давлении получают соединение 5, представляющее собой ликвиритин-апиозид;
(7) берут образец Fr.A-3, полученный на этапе (3), и растворяют его в метаноле, и раствор пропускают через микропористую мембрану с размером пор 0,45 мкм, проводят предварительное разделение с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: метанол-вода с объемным соотношением 60:40, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, собирают фракции, соответствующие хроматографическим пикам со значениями времени удерживания 14-15 мин и 19-21 мин, растворитель удаляют при пониженном давлении и собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 19-21 мин, в растворе дихлорметана-метанола с объемным соотношением 2:1 осаждают белый осадок с получением соединения 8, которое представляет собой этилкофеат; фракцию, соответствующую хроматографическому пику при 14-15 мин, дополнительно очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, подвижная фаза: ацетонитрил-вода с объемным соотношением 30:70, скорость потока: 12 мл/мин, длина волны детектирования: 210 нм, хроматографическая колонка: YMC-Pack R&D ODS-A, 250 × 20 мм, S-10 мкм, при этих условиях собирают фракцию, соответствующую хроматографическому пику со временем удерживания 18-20 мин, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением соединения 1, представляющего собой 10-О-(п-гидроксициннамоил)-адоксозидовую кислоту.
3. Способ по любому из пп. 1, 2, отличающийся тем, что композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях: форсайтии свисающей 200, жимолости японской 300, вайды красильной 200, ревеня лекарственного 40, пачули 60, высушенных корневищ щитовника 300, родиолы розовой 100, ментола 9, эфедры китайской 60, горького миндаля 100, гуттуинии сердцелистной 200, корня солодки 100 и гипса 200.
4. Способ по любому из пп. 1, 2, отличающийся тем, что композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях: форсайтии свисающей 300, жимолости японской 200, вайды красильной 300, ревеня лекарственного 60, пачули 100, высушенных корневищ щитовника 200, родиолы розовой 60, ментола 5, эфедры китайской 100, горького миндаля 60, гуттуинии сердцелистной 300, корня солодки 60 и гипса 300.
5. Способ по любому из пп. 1, 2, отличающийся тем, что композиция на основе лекарственных средств китайской медицины состоит из следующих фармацевтических ингредиентов в массовых долях: форсайтии свисающей 278, жимолости японской 294, вайды красильной 285, ревеня лекарственного 55, пачули 95, высушенных корневищ щитовника 290, родиолы розовой 87, ментола 8,5, эфедры китайской 88, горького миндаля 80, гуттуинии сердцелистной 284, корня солодки 95 и гипса 277.
6. Способ по любому из пп. 1, 2, отличающийся тем, что общий экстракт композиции на основе лекарственных средств китайской медицины получают с помощью следующих этапов:
(1) взвешивают лекарственные средства китайской медицины в соответствии с весовым соотношением сырья, тщательно промывают их и измельчают их соответствующим образом;
(2) измельчают пачули, добавляют 10-кратное количество воды с извлечением эфирного масла, время экстракции масла составляет 8 часов, собирают эфирное масло и хранят, после фильтрации экстракта остаток удаляют и применяют фильтрат;
(3) форсайтию свисающую, эфедру китайскую, гуттуинию сердцелистную, ревень лекарственный 3 раза экстрагируют 12-кратным количеством 70% этанола, каждый раз в течение 2,5 часа, экстракты объединяют и фильтруют, этанол удаляют и применяют фильтрат;
(4) жимолость японскую, гипс, вайду красильную, высушенные корневища щитовника, корень солодки, родиолу розовую добавляют в 12-кратное количество воды и нагревают до кипения, добавляют горький миндаль и 2 раза нагревают, каждый раз в течение 1 часа, экстракты объединяют и фильтруют, фильтрат объединяют с фильтратом, полученным после экстракции масла пачули на этапе (2), концентрируют до прозрачной пасты с относительной плотностью от 1,10 до 1,15, измеренной при 60°C, добавляют этанол с доведением концентрации спирта до 70%, помещают в холодильник, фильтруют и удаляют этанол до исчезновения запаха спирта, получают прозрачную пасту, подлежащую применению;
(5) объединяют экстракт, полученный на этапе (4), со спиртовым экстрактом, полученным на этапе (3), концентрируют до получения экстракта с относительной плотностью от 1,15 до 1,20, измеренной при 60°С, и высушивают с получением общего экстракта, подлежащего применению.
RU2020118878A 2017-11-10 2018-10-25 Способ выделения восьми соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины RU2769512C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711103420.2 2017-11-10
CN201711103420.2A CN109776635B (zh) 2017-11-10 2017-11-10 一种中药组合物中八种成分的分离方法
PCT/CN2018/111846 WO2019091287A1 (zh) 2017-11-10 2018-10-25 一种中药组合物中八种成分的分离方法

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2020118878A3 RU2020118878A3 (ru) 2021-12-10
RU2020118878A RU2020118878A (ru) 2021-12-10
RU2769512C2 true RU2769512C2 (ru) 2022-04-01

Family

ID=66437593

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020118878A RU2769512C2 (ru) 2017-11-10 2018-10-25 Способ выделения восьми соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины

Country Status (9)

Country Link
US (1) US11564966B2 (ru)
EP (1) EP3705130A4 (ru)
JP (1) JP6976429B2 (ru)
KR (1) KR102532345B1 (ru)
CN (1) CN109776635B (ru)
CA (1) CA3081627C (ru)
RU (1) RU2769512C2 (ru)
SG (1) SG11202004370WA (ru)
WO (1) WO2019091287A1 (ru)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110849998B (zh) * 2019-12-05 2022-11-22 康龙化成(北京)新药技术股份有限公司 一种分离表断马钱子苷半缩醛内酯和断马钱子苷半缩醛内酯的液相色谱方法
CN112946094B (zh) * 2020-11-27 2023-03-31 吉林修正药业新药开发有限公司 一种养心安眠胶囊hplc特征图谱构建方法
CN113105388B (zh) * 2021-04-07 2023-02-28 沈阳药科大学 一种千金二萜烷化合物及其提取方法和应用
CN113244791B (zh) * 2021-05-12 2022-06-17 佳木斯大学 一种共混大黄素的酚酞聚醚砜超滤膜的制备方法
CN113624881B (zh) * 2021-08-14 2022-09-27 昆明理工大学 一种同时检测三乌胶丸中六种成分含量的方法
CN114264737B (zh) * 2021-12-08 2023-04-28 中国中医科学院中药研究所 一种苦参子中的水溶性化合物的分离方法
CN114184719B (zh) * 2021-12-13 2023-05-09 江西和盈药业有限公司 一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法及其标准指纹图谱
CN114516893B (zh) * 2022-03-09 2022-07-26 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 罗汉果新黄酮类化合物、其制备方法及在蜜蜂引诱剂中的应用
CN114634534B (zh) * 2022-04-07 2024-03-19 陕西富捷药业有限公司 一种从甘草酸单铵盐母液中分离甘草酸单铵盐及甘草苷的方法
CN114965748A (zh) * 2022-04-28 2022-08-30 陕西科技大学 一种同时检测新复方芦荟胶囊中芦荟苷、芦荟大黄素以及靛玉红的方法
CN115480011A (zh) * 2022-09-20 2022-12-16 广州白云山潘高寿药业股份有限公司 一种检测黄芪桂枝五物汤物质基准中六种成分含量的方法
CN116124945B (zh) * 2023-01-18 2024-01-30 广州白云山明兴制药有限公司 一种基于uplc-q-tof-ms技术分析及鉴定中药制剂中化学成分的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2267115C2 (ru) * 2003-06-23 2005-12-27 ОАО "Фармстандарт-Лексредства" Способ количественного определения состава многокомпонентных лекарственных препаратов жаропонижающего, аналгезирующего, противопростудного действия
WO2017148418A1 (zh) * 2016-03-03 2017-09-08 石家庄以岭药业股份有限公司 一种中药组合物的含量测定方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1970000A (zh) 2005-11-24 2007-05-30 北京奇源益德药物研究所 抗病毒中药制剂及其制备方法、质控方法和应用
CN101862391B (zh) * 2009-04-17 2014-12-17 北京以岭药业有限公司 一种中药组合物在制备治疗人禽流感药物中的应用
CN102040641B (zh) 2009-10-13 2014-10-29 河北以岭医药研究院有限公司 一种中药组合物中一个孕甾糖苷的提取分离方法
CN104367688B (zh) * 2013-08-12 2019-12-24 河北以岭医药研究院有限公司 一种中药组合物在制备破坏肺炎克雷伯菌生物膜的药物中的应用
CN104547209A (zh) * 2013-10-25 2015-04-29 石家庄以岭药业股份有限公司 一种中药组合物的制备方法
CN105079227B (zh) * 2014-05-22 2020-07-21 北京以岭药业有限公司 一种中药组合物在制备治疗放射性肺损伤药物中的应用
CN105287610B (zh) * 2014-06-27 2021-11-16 石家庄以岭药业股份有限公司 连翘酯苷i的应用及其制备方法
CN107153098B (zh) 2016-03-03 2021-05-04 石家庄以岭药业股份有限公司 一种中药组合物的指纹图谱的测定方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2267115C2 (ru) * 2003-06-23 2005-12-27 ОАО "Фармстандарт-Лексредства" Способ количественного определения состава многокомпонентных лекарственных препаратов жаропонижающего, аналгезирующего, противопростудного действия
WO2017148418A1 (zh) * 2016-03-03 2017-09-08 石家庄以岭药业股份有限公司 一种中药组合物的含量测定方法

Also Published As

Publication number Publication date
US11564966B2 (en) 2023-01-31
CN109776635B (zh) 2021-08-17
CA3081627A1 (en) 2019-05-16
KR102532345B1 (ko) 2023-05-16
US20200390840A1 (en) 2020-12-17
JP2021500578A (ja) 2021-01-07
KR20200074976A (ko) 2020-06-25
SG11202004370WA (en) 2020-06-29
RU2020118878A3 (ru) 2021-12-10
JP6976429B2 (ja) 2021-12-08
EP3705130A4 (en) 2021-07-28
WO2019091287A1 (zh) 2019-05-16
RU2020118878A (ru) 2021-12-10
EP3705130A1 (en) 2020-09-09
CN109776635A (zh) 2019-05-21
CA3081627C (en) 2024-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2769512C2 (ru) Способ выделения восьми соединений из композиции на основе лекарственных средств китайской медицины
Csupor‐Löffler et al. Antiproliferative effect of flavonoids and sesquiterpenoids from Achillea millefolium sl on cultured human tumour cell lines
CN1307192C (zh) 一种用栀子果实制备高纯度栀子苷的方法
Maas et al. An unusual dimeric guaianolide with antiprotozoal activity and further sesquiterpene lactones from Eupatorium perfoliatum
CN108395464B (zh) 一种从积雪草出发制备积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷b的方法
Jiang et al. Obscurumines H–P, new Lycopodium alkaloids from the club moss Lycopodium obscurum
CN109320571B (zh) 提取木犀草素类化合物和菜蓟苦素的方法
Xing-Fen et al. Triterpenes from the stem bark of Mitragyna diversifolia and their cytotoxic activity
Ran et al. Three new secoiridoid glycosides from the flower buds of Lonicera japonica
US5473057A (en) Eleutherobin and analogs thereof
Capistrano et al. Phytochemical characterisation of a cytotoxic stem bark extract of Steganotaenia araliacea and identification of a protoflavanone by LC–SPE–NMR
CN109180622B (zh) 从朝鲜蓟中提取愈创木烷型倍半萜化合物的方法
CN106243078B (zh) 伏康树中化合物的制备方法和用途
CN111548327B (zh) 降碳贝壳杉烷型二萜及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的用途
CN111574573A (zh) 十五种苯乙醇苷类化合物及其分离纯化方法与应用
Shul'ts et al. Flavonoids of roots of Glycyrrhiza uralensis growing in Siberia
CN104650053B (zh) 一种黄酮类化合物及其制备方法和用途
CN109369585B (zh) 提取愈创木烷型倍半萜化合物的方法
CN109485626B (zh) 从朝鲜蓟中提取愈创木烷型倍半萜的方法
CN109265420B (zh) 制备愈创木烷型倍半萜化合物的方法
CN115304616B (zh) 一种天麻活性化合物及其制备方法和应用
Topcu et al. Studies on zoapatle VIII: Novel cytotoxic sesquiterpene lactones from Montanoa tomentosa ssp. microcephala
CN117050122A (zh) 一种来源于矮陀陀的柠檬苦素类化合物及其制备方法
Allaoui et al. Isoflavone and flavone derivatives from aerial part of Limoniastrum feei
CN114539242A (zh) 一种原小檗碱-尖防己型生物碱二聚体及其应用和制备