RU2013156669A

RU2013156669A - Промывочный раствор и способ аффинной хроматографии

Info

Publication number: RU2013156669A
Application number: RU2013156669/10A
Authority: RU
Inventors: Ахим ФРАУЕНШУХ
Original assignee: Новартис Аг
Priority date: 2011-06-01
Filing date: 2012-05-31
Publication date: 2015-07-20
Also published as: BR112013030628B1; DK2714714T3; CA2834300A1; EP2714714B1; EP2714714A1; KR101953405B1; US20140094593A1; CN103596968B; PL2714714T3; ES2688348T3; EP3428176A1; AU2012264626A1; JP6366502B2; US9663552B2; BR112013030628A2; CA2834300C; MX2013014032A; JP2014515389A; JP2017160215A; SG194460A1

Abstract

1. Способ получения очищенного белка, представляющего интерес, с использованием матрицы для аффинной хроматографии (АС), с которой связывается белок, представляющий интерес, где способ включает промывку матрицы АС промывочным раствором, содержащим аргинин или производное аргинина, со значением рН выше 8,0, где указанную промывку осуществляют без присутствия незабуферивающей соли.2. Способ по п. 1, где способ включает:a) загрузку смеси, содержащей белок, представляющий интерес, на матрицу АС;b) промывку матрицы АС промывочным раствором, содержащим аргинин или производное аргинина, при значении рН выше 8,0; иc) элюирование белка, представляющего интерес, с матрицы АС, где указанную промывку осуществляют без присутствия незабуферивающей соли.3. Способ по п. 1 или 2, где белок, представляющий интерес, представляет собой антитело, фрагмент антитела или Fc-слитый белок.4. Способ по п. 3, где матрица АС представляет собой колонку, содержащую белок А.5. Способ получения очищенного антитела, фрагмента антитела или Fc-слитого белка с использованием колонки, содержащей белок А, где способ включает:a. загрузку смеси, содержащей антитело, фрагмент антитела или Fc-слитый белок, на колонку, содержащую белок А;b. промывку указанной колонки, содержащей белок А, промывочным раствором, содержащим аргинин или производное аргинина, со значением рН выше 8,0; ис. элюирование антитела, фрагмента антитела или Fc-слитого белка с колонки, содержащей белок А, где указанную промывку осуществляют без присутствия незабуферивающей соли.6. Способ по п. 5, дополнительно включающий уравновешивание колонки, содержащей белок А, уравновешивающим буфером перед загрузк�

Claims

1. Способ получения очищенного белка, представляющего интерес, с использованием матрицы для аффинной хроматографии (АС), с которой связывается белок, представляющий интерес, где способ включает промывку матрицы АС промывочным раствором, содержащим аргинин или производное аргинина, со значением рН выше 8,0, где указанную промывку осуществляют без присутствия незабуферивающей соли.

2. Способ по п. 1, где способ включает:

a) загрузку смеси, содержащей белок, представляющий интерес, на матрицу АС;

b) промывку матрицы АС промывочным раствором, содержащим аргинин или производное аргинина, при значении рН выше 8,0; и

c) элюирование белка, представляющего интерес, с матрицы АС, где указанную промывку осуществляют без присутствия незабуферивающей соли.

3. Способ по п. 1 или 2, где белок, представляющий интерес, представляет собой антитело, фрагмент антитела или Fc-слитый белок.

4. Способ по п. 3, где матрица АС представляет собой колонку, содержащую белок А.

5. Способ получения очищенного антитела, фрагмента антитела или Fc-слитого белка с использованием колонки, содержащей белок А, где способ включает:

a. загрузку смеси, содержащей антитело, фрагмент антитела или Fc-слитый белок, на колонку, содержащую белок А;

b. промывку указанной колонки, содержащей белок А, промывочным раствором, содержащим аргинин или производное аргинина, со значением рН выше 8,0; и

с. элюирование антитела, фрагмента антитела или Fc-слитого белка с колонки, содержащей белок А, где указанную промывку осуществляют без присутствия незабуферивающей соли.

6. Способ по п. 5, дополнительно включающий уравновешивание колонки, содержащей белок А, уравновешивающим буфером перед загрузкой и/или элюированием антитела, фрагмента антитела или Fc-слитого белка с колонки, содержащей белок А.

7. Способ по п. 1, где значение рН выше 8,5.

8. Способ по п. 1, где значение рН составляет приблизительно 8,5-9,5.

9. Способ по п. 1, где значение рН составляет приблизительно 8,9-9,0.

10. Способ по п. 1, где рН составляет 9,0 или приблизительно 9,0.

11. Способ по п. 1, где производное аргинина выбрано из группы, состоящей из ацетиларгинина, агматина, аргининовой кислоты, N-альфа-бутироил-L-аргинина и N-альфа-пивалоил-аргинина.

12. Способ по п. 1, где аргинин присутствует в концентрации в диапазоне 0,1-0,5 М.

13. Способ по п. 12, где аргинин присутствует в концентрации 0,25 М или приблизительно 0,25 М.

14. Способ по п. 1, где промывочный раствор содержит аргинин-НС1.

15. Способ по п. 1, где промывочный раствор удаляет примеси, выбранные из группы, состоящей из высокомолекулярных соединений (HMW), белков клетки-хозяина (НСР) и низкомолекулярных соединений (LMW).

16. Способ по п. 1, где промывочный раствор содержит одну или более буферообразующих солей.