RO120951B1 - Compus pentru tratamentul bolilor tumorale şi inflamatoare - Google Patents

Compus pentru tratamentul bolilor tumorale şi inflamatoare Download PDF

Info

Publication number
RO120951B1
RO120951B1 RO97-00402A RO9700402A RO120951B1 RO 120951 B1 RO120951 B1 RO 120951B1 RO 9700402 A RO9700402 A RO 9700402A RO 120951 B1 RO120951 B1 RO 120951B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
compound
formula
amino
alkyl
radical
Prior art date
Application number
RO97-00402A
Other languages
English (en)
Inventor
Klaus Bosslet
Jorg Czech
Manfred Gerken
Rainer Straub
Claude Monneret
Jean Claude Florent
Frederic Schmidt
Original Assignee
Hoechst Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8222555&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RO120951(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Hoechst Aktiengesellschaft filed Critical Hoechst Aktiengesellschaft
Publication of RO120951B1 publication Critical patent/RO120951B1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives

Abstract

Prezenta invenţie se referă la un compus cu activitate antitumorală şi antiinflamatoare, la un procedeu pentru producerea acestui compus, la o compoziţie farmaceutică şi la utilizarea acestui compus pentru fabricarea unui medicament pentru profilaxia şi tratamentul bolilor carcinomatoase, bolilor autoimune şi al bolilor inflamatoare cronice.

Description

Prezenta invenție se referă la un compus cu activitate antitumorală și antiinflamatorie, la un procedeu pentru producerea acestui compus, la o compoziție farmaceutică cu acest compus utilizat pentru fabricarea unui medicament pentru profilaxia și tratamentul bolilor carcinomatoase, bolilor autoimune și al bolilor inflamatorii cronice.
Este cunoscut faptul că efectul medicamentelor Pharmaka (droguri) constă, foarte adesea, în aceea că, la anumite îmbolnăviri, se inhibă enzime, citokine sau alți factori supraexprimați patologic în activitatea lor de stimulare a bolii, firește că acțiunea de inhibare a drogurilor se întinde nu numai asupra structurilor factorilor care constituie scopuri farmacologice (enzimă, citokină, factor) din țesutul bolnav, dar inhibă și activitățile care au loc în țesuturi sănătoase. Din aceasta rezultă, la multe droguri, efecte secundare nedorite, observate. Pentru a atenua efectele secundare ale drogurilor, s-au elaborat sisteme experimentale, care permit o punere în libertate, mai selectivă, a drogurilor în țesutul bolnav. în cele ce urmează se descriu, pe scurt, astfel de sisteme.
Sistemul ADEPT (Antibodydirectedenzyme prodrug therapy, Bagshawe 1987, Br. J. Cancer. 56: 531-532) este un sistem în două etape, la care, în prima etapă, se injectează un conjugat anticorp-enzimă (AEK)iv. AEK se reține în tumoare, pe baza selectivității față de tumoare, dar în decursul a 2-7 zile, se elimină din țesuturile sănătoase. Prodrogul injectat în etapa a doua iv (o pre-treaptă netoxică de drog) se activează în tumoare prin activitatea enzimatică a AEK la drogul toxic. Drept consecință a acestei activări specific tumorale a prodrogului, se observă concentrații ridicate de drog în tumoare (de 5-50 ori) și concentrații mai scăzute de drog în țesutul sănătos, în comparație cu terapia standard. Acest lucru are o mai bună suportabilitate, precum și efecte terapeutice superioare, în modelele umane de tumorxenograft (Sharma, S.K.și colab. 1991, Disease Markers 9:225-231).
într-un mod asemănător cu sistemul ADEPT, lucrează conceptul FMPA (Fusion protein mediated prodrug activation), la care în locul AEK henogen și ca urmare imunogen, se folosește o proteină de fuziune umană neimunogenă pentru activarea prodrogului tumorselectiv (Bosslet și colab. 1994, Cancer Res 54: 2151-2159).
Și în sistemul VDEPT (Vector dependent enzyme prodrug therapy, Trinh și colab. Cancer Res. 55:4808-4812), o depunere gen terapeutică în două trepte, se activează prodroguri tumor-selective, după injectarea unui vector și expresia unei gene de structură, care codifică pentru o enzimă. O activare endogenă a prodrogurilor (Glucuronyl-SpacerAnthrazyclin, Jacquessy și colab. 1991, WO 92/19639), în tumori necrotice și procese inflamatoare legate cu efecte farmacologice puternice antitumorale și antiinflamatoare, s-a descris, pentru prima oară, de Bosslet și colab. 1994, Cancer Res. 54: 2151-2159 și 1995, Tumor Targeting 1. 45-50 ca PMT (Prodrug Monotherapie). La prelucrarea farmacologică a sistemului PMT s-a arătat că atât chimia Spacer-ului autoeliminatorie, cât și hidrofilia și citotoxicitatea molară a componentei de drog din prodrog sunt de o importanță hotărâtoare pentru eficiența in vivo.
Mai departe, o creștere a eficienței PMT s-a observatîn combinație cu substanțe care induc necroze (EP 0696456 A2). Mai ales utilizarea de conjugate de anticorpi, cu specificitate pentru complexul de receptori VEGF/VEGF, legat covalent cu proteine coagulatoare, ca de exemplu cu factorul de țesut prescurtat, arată în modele farmacologice in vivo în combinație cu prodroguri adecvate, o eficiență deosebit de bună.
în mod surprinzător, am reușit să sintetizăm prodroguri, care in vivo, după o activare enzimatică endogenă corespunzătoare, sunt mult mai active decât prodrogurile descrise în EP 0511917A1 și EP 0595133A2. Această eficacitate superioară este condiționată, pe de o parte, de felul nou și avantajos al chimiei Spacer-ului, pe de altă parte, însă, și de citotoxicitatea molară ridicată a componentei de drog utilizată. Chimia nouă, avantajoasă, a Spacerului se remarcă prin aceea că mai ales la substanțe active, care sunt legate la Spacer, printr-o grupă hidroxil, are loc o punere în libertate a substanței active, după scindarea
RO 120951 Β1 enzimatică a radicalului de glicosil, prin ciclizarea și scindarea Spacer-ului. Prin aceasta se 1 ajunge la o stabilitate îmbunătățită a prodrogului, la o posibilitate de scindare, în acelaș timp, enzimatică bună. Prodrogurile conform invenției sunt și mai stabile în condiții fiziologice decât 3 prodrogurile cunoscute, deoarece nu eliberează atât de repede substanța activă.
Prezenta invenție prezintă un compus antitumoral și antiinflamator, un procedeu pen- 5 tru producerea acestui compus, o compoziție farmaceutică sau un preparat farmaceutic, precum și utilizarea acestui compus pentru fabricarea unui medicament pentru profilaxia și 7 tratamentul bolilor carcinomatoase, bolilor autoimune și bolilor inflamatorii cronice, cum ar fi artrita reumatoidă. 9
Compusul antitumoral și antiinflamator, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că are formula I:11 glicozil-Y[-C(=Y)-X-]p-W(R)n-Z-C(=Y)-compus activ (I)13 și/sau sărurile acceptabile din punct de vedere fiziologic ale compusului cu formula I, în care 15 glicozil este o poli-, oligo- sau monozaharidă scindabilă enzimatic,
Weste17
1) un radical aromatic cu 5 până la 14 membri,
2) naftil,19
3) indenil,
4) antril,21
5) fenantril,
6) un radical heterociclic cu 5 până la 14 membri cu 1,2,3 sau 4 heteroatomi 23 selectați din grupul format din oxigen, azot și sulf,
7) alchil-țC^Cg),25
8) alchenil-(C2-C6),
9) cicloalchil-(C3-C6) sau27
10) fenil,
R este29
1) un atom de hidrogen,
2) alchil-țCrCJ,31
3) fenil,
4) metoxi,33
5) carboxil,
6) metiloxicarbonil,35
7)-CN,
8) -OH,37
9)-NO
10) halogen cum ar fi fluor, clor sau brom,39
11) sulfonil,
12) sulfonamidă sau41
13) sulfon-alchil-C^C^amidă, p este 0 sau 1,43 n este 0, 1, 2 sau 3,
X este45
1) un atom de oxigen,
2) -NH-47
3) metilenoxi,
RO 120951 Β1
4) metilenamino,
5) metilen-alchil-C^C^amino,
6) alchil-C^C^amino, sau
7) cicloalchil-C3-C6-amino,
Y este un atom de oxigen sau -NH-, Z este
1) alchil-C-t-C^-amino,
2) -N(CH3)-,
3) -C(CH3)2-NH-,
4) -CH(CH3)-NH-,
5) -C(CH3)2-N(R2)-, în care R2 este alchil-C-i-C,, sau
6) -NH-, dacă W este alchil-C^Ce și compus activ este un compus având activitate biologică, care este legat printr-un radical de oxigen, radical amino primar sau secundar sau un radical imino.
Procedeul pentru prepararea compusului cu formula I înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că, cuprinde punerea în reacție a unui compus cu formula (II):
glicozil-Y[-C(=Y)-X-]p-W(R)n-Z (II) în care radicalii glicozil, Y, X, p, W, R, n și Z au semnificațiile prezentate pentru formula I, în revendicarea 1, cu un compus activ care are un radical carboxil, amino sau imino activat, reacția având loc în prezența unui solvent selectat din grupul constând din acetonitril, dioxan, tetrahidrofuran, diclormetan, dimetilformamidă și acetonă și apoi se scindează grupele de protecție prin hidroliză.
Compoziția farmaceutică, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că aceasta conține o cantitate eficientă din cel puțin un compus cu formula I, definit în oricare din revendicările de la 1 la 3, și/sau o sare acceptabilă fiziologic a acestuia, împreună cu un excipient adecvat farmaceutic și tolerat, și/sau alte substanțe auxiliare și active.
Preparatul farmaceutic, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că acesta conține o cantitate eficientă din cel puțin un compus cu formula I, definit în oricare din revendicările de la 1 la 3, și un conjugat de anticorp-enzimă, care poate scinda enzimatic radicalul glicozil din compusul cu formula I.
Prin aplicarea invenției, se obțin următoarele avantaje:
- prodroguri cu eficiență mărită, după o activare enzimatică endogenă in vivo;
- stabilitate îmbunătățită în condiții fiziologice.
Invenția se referă la prodroguri cu formula I: Glicosil-Y/-C(=Y)-X-/p-W(R)n-Z-C(=Y)-substanță activă (I) și/sau săruri acceptabile fiziologic ale compusului cu formula I, în care glicosil înseamnă o mono-, poli- sau oligozaharidă, W reprezintă:
1) un radical aromatic cu 5 până la 15 membri,
2) naftil,
3) indenil,
4) antril,
5) fenantril,
6) un radical neterociclic cu 5 până la 14 membri cu 1, 2, 3 sau 4 heteroatomi din grupa oxigen, azot și sulf,
7) alchil-țC.-Ce),
8) alchenil-(C2-C6),
9) cicloalchil-(C3-C6) sau
10) fenil,
RO 120951 Β1
R reprezintă1
1) atom de hidrogen,
2) alchil-țC-j-CJ,3
3) fenil,
4) metoxi,5
5) carboxi,
6) metiloxicarbonil,7
7)-CN,
8) -OH,9
9)-NO
10) halogen cum ar fi fluor, clor sau brom,11
11) sulfonil,
12) sulfonamid sau13
13) sulfon-alchil-(C1-C4)amid, p reprezintă zero sau 1,15 n reprezintă zero, 1, 2 sau 3,
X reprezintă17
1) atom de oxigen,
2) -NH-,19
3) metilenoxi,
4) metilenamino,21
5) metilen-alchil- (C1-C4)-amino,
6) alchil-țC^CJ-amino sau reprezintă23
7) cicloalchil-C3_6-amino,
Y reprezintă un atom de oxigen sau -NH-,25
Z reprezintă
1) alchil-țC^C^-amino,27
2) -N(CH3)-,
3) -C(CH3)2-NH-,29
4) -CH(CH3)-NH-,
5) -C(CH3)2-N(R2)-, în care R2 înseamnă alchil-(CM), sau31
6) -NH-, când W reprezintă alchiKC^Cg) și substanța activă reprezintă un compus cu acțiune biologică, care este legată printr-un radical 33 de hidrogen, printr-un radical primar sau secundar, de gruparea amino, sau printr-un radical de imino.35
Dacă n este numărul întreg 2 sau 3, atunci radicalii R reprezintă, în mod independent unii de alții, semnificațiile prezentate la R1) până la R13). Prin noțiunea alchil sau alchenil, 37 se înțeleg radicalii al căror lanț de carbon poate fi drept, ramificat sau ciclic; legăturile duble pot să apară de mai multe ori. Radicalii de alchil ciclici sunt, de exemplu, monociclii cu 3 39 până la 6 membri cum arfi ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil sau ciclohexil. Noțiunea radical heterociclic cu 5 până la 14 membrii cu 1,2, 3 sau 4 heteroatomi din grupa oxigen, azot și 41 sulf cuprinde, de exemplu, radicali care derivă din pirol, azepină, pirolină, piridină, imidazol, pirimidină, triazină, furan, 1,2-diazepină, oxazol, pirazină, izoxazol, izoxazolină, tiazol, izo- 43 tiazol, izotiazolidin, îndoi, chinolin, izochinolin, benzimidazol, indazol, purin, pteridin, tiopiran sau tiofen. 45
Sărurile fiziologic adecvate, respectiv suportabile ale compusului cu formula I sunt, de exemplu, sărurile alcaline, alcalino-pământoase și de amoniu, inclusiv acele ale bazelor 47 organice de amoniu.
RO 120951 Β1
Sub denumirea de monozaharidă, se înțeleg radicali cum arfi D-glucuronil, L-iduronil, D-glucopiranozil, D-galactopiranozil, N-acetil-D-glucosaminil, N-acetil-D-galactozaminil, Dmanopiranozil sau L-fuco-piranozil, oligo- sau polizaharidele și care constau din 2 până la 20 monozaharide menționate mai sus, care sunt legate între ele alfa- sau beta-O-glicozidic. Legătura dintre monozaharidă și radicalul Y este alfa sau beta-glicozidică. Enzimele adecvate, care efectuează scindarea restului de glicozil de radicalul Y, sunt induronidaza, glucozidaza, galactozidaza N-acetil-D-glucozaminidaza, N-acetii-D-galactozaminidaza, manozidaza, fucozidaza sau glucoronidaza, de preferință beta-glucoronidaza.
Drept substanțe active, se pretează compuși cum ar fi antraciclina, de preferință doxorubicina, 4'-epi-doxorubicina, 4- sau 4'-dezoxi-doxorubicina sau un compus ales de preferință din grupa etoposida, N-b/s-(2-cloretil)-4-hidroxianilina, 4-hidroxiciclofosfamida, vindesin, vinblastin, vincristin, terfenadin, terbutamin, fenoterol, salbutamol, muscarin, oxifenobutazona, acid salicilic, acid p-aminosalicilic, 5-fluoroacil, 5-fluorocitidin, 5-fluorouridin, metotrexat, diclofenac, acid flufenaminic, 4-metilaminofenazonă, teofilină, nifedipin, mitomicină C, mitoxantron, camptotecin, m-AMSA, taxol, nocozadol, colchicin, ciclofosfamid, rachelmicină, cisplatin, melphalan, belomicin, gaz de muștar-azot, gaz de muștar-fosforamidă, quercetin, Genistein, erbstatin, tirfostin, derivat de Rohitukin( (-)-c/s-5,7-dihidroxi-2(2-clorfenil)-8-[4-(3-hidroxi-1-metil)-piperidinil]-4H-1-benzopiran-4-onă; (EPO 366061) acid retinolic, acid butiric, ester forbolic, aclacinomicină, progesteron, buserelin, tamoxifen, mifepristion, onapriston, N-(4-aminobutil)-5-cloro-2-naftalen-sulfonamidă, piridiniloxazol-2onă, chinoliloxazolon-2-onă, izochinoliloxazolon-2-onă, staurosporină, verapamil, forscolin, 1,9-dideoxiforscolină, chinină, chinidină, reserpină, 18-0-(3,5-dimetoxi-4-hidroxibenzoil)reserpat, ionidamin, butioninsulfoximin, dietilditiocarbamat, ciclosporin A, azatioprin, chlorambucil, N-(4-trifluormetil)-fenil-2-ciano-3-hidroxiamida acidului crotonic(WO 9117748) 15-deoxispergualin, FK 506, ibuprofen, indometacin, aspirină, sulfasalazină, penicilinamină, clorochină, dexametason, prednisolon, lidocain, propafenon, procaină, acid mefenaminic, paracetamol, 4-aminofenazonă, muskosin, orciprenalin, isoprenalin, amilorid, p-nitrofenilguanidinbenzoat sau derivatele lor substituite, în plus, printr-una sau mai multe grupe hidroxi, amino sau imino.
Sunt preferate prodrogurile în care substanța activă este un citostatic, este un antimetabolit, substanța activă este 5-fluoroacil, 5-fluorocitidin, 5-fluorouridin, citosinarabinosid sau metotrexat, substanța activă este o substanță care se intercalează în ADN, substanța activă este doxorubicin, daunomicin, idarubicin, epirubicin sau mitoxantron, substanța activă inhibă topoizomeraza I și II, substanța activă este camptotecină, etoposid sau m-AMSA, substanța activă este un inhibitor de tubulină, substanța activă este vincristin, vinblastin, vindesin, taxol, nocodazol sau colchicin, substanța activă este un alchilanz, substanța activă este o ciclofosfamidă, mitomicin C, rachelmicin, cisplatin, fosforamidă-gaz de muștar, melfalan, azot-gaz de muștar sau N-b/s-(2-cloretil)-4-hidroxianilină, substanța activă este neocarcinostatin, calicheamicin, dinemicin sau esperarmicin A, substanța activă este un compus care inactivează ribosomen, substanța activă este verrucarin A, substanța activă este un inhibitor de tirosinfosfokinază, substanța activă este quercetin, Genistein, erbstatin, tirfostin sau un derivat de Rohitukin, substanța activă este un inductor de diferențiere, substanța activă este un acid retinolic, acid butiric, forbolester sau aclacinomicină, substanța activă este un hormon, un agonist de hormon sau un antagonist de hormon, substanța activă este progesteron, buserelin, tamoxifen, mifepriston sau onapriston, substanța activă este o substanță care modifică rezistența pleiotropă față de citostatice, substanța activă este un inhibitor de calmodulin, substanța activă este un inhibitor de proteinchinază 0, substanța activă este un inhibitor de P-glicoproteină, substanța activă este un modulator al hexochinazei
RO 120951 Β1 legată mitochondrial, substanța activă este un inhibitor al γ-glutamilcisteinsintetazei sau al 1 glutation-S-transferazei, substanța activă este un inhibitor al superoxiddismutazei, substanța activă este un inhibitor al proteinei asociată cu proliferarea definită prin MAk Ki67 în nucleul 3 unei celule care se divide, substanța activă este o substanță care exercită efecte imunosupresive, substanța activă este un imunosupresiv standand, substanța activă este un ma- 5 crolid, substanța activă este ciclosporină A, rapamicină, FK 506, substanța activă este azatioprin, metotrexat, ciclofosfamidă sau clorambucil, substanța activă este o substanță 7 care are o acțiune anti-inflamatoare, substanța activă este o substanță nesteroidală antiinflamatoare, substanța activă este un slow acting antirheumatic drug, substanța activă re- 9 prezintă un steroid, substanța activă este o substanță care are un efect antiflogistic, analgetic sau antipiretic, substanța activă este un derivat al unui acid organic, substanța activă nu 11 reprezintă un analgetic/antiflogistic acid, substanța activă este oxifenbutazonă, substanța activă este un anestezic local, substanța activă este un antiaritmic, substanța activă este un 13 antagonist al Ca++, substanța activă este un antihistaminic, substanța activă este un simpatomimetic sau substanța activă este o substanță cu acțiune de inhibiție asupra urochinazei 15 umane și derivați ai substanțelor active indicate mai sus, substanța activă fiind legată de radicalul Y al compusului cu formula I, printr-un radical de oxigen, -NH- sau imino. Substanța 17 activă este, de preferință, compusul cu azot, chinină sau dipiridamol, menționate în exemple.
Sunt preferate prodroguri în care glicosil reprezintă un acid glucuronic scindabil 19 enzimatic,
W reprezintă fenil,21
R reprezintă un atom de hidrogen, CN, nitro, fluor, clor, brom, p reprezintă zero,23 n reprezintă un număr întreg zero, 1 sau 2,
Y reprezintă un atom de oxigen,25
Z reprezintă -N(CH3)-, -C(CH3)2-NH-, -CH(CH3)-NH-, -C(CH3)2-N-alchil-(C1-C4)-,
CH(CH3)-N-alchil-(C1-C4) și27 substanța activă este un compus biologic, legat printr-o grupă hidroxi, amino sau imino.
Deosebit de preferați sunt compușii:29 acid 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-b/s-(2-cloretil)amino)feniloxicarbonil]-amino]-4-nitrofenil-beta-Dglucoronic,31 acid 2-[N-metil-N-[(4-(n,N’-b/s-(2-iodoetil)amino)feniloxicarbonil]-amino]-4-nitrofenil-beta-Dglucoronic.33
RO 120951 Β1 sau
Invenția se mai referă la un procedeu pentru obținerea prodrogului cu formula I, care este caracterizat prin aceea că se aduce în reacție un compus cu formula II:
Glicosil-Y-/-C(=Y)-X-/p-W(R)n-Z (II) în care radicalii glicosil, Υ, X, p, W, R, n și Z au semnificațiile menționate la formula I, cu o substanță activă, care posedă un radical activat de carboxil, amino sau imino, reacția având loc în prezența unui solvent din grupa acetonitril, dioxan, tetrahidrofuran, diclormetan, dimetilformamidă, acetonă, și apoi grupele de protecție se scindează prin hidroliză.
Activarea substanței active are loc, de exemplu, conform H. J. Marley, Ghem. Soc. Chem. Communication (1987), pag. 112-113, sau conform Hagemann Angew. Chem., 93 (1981), pag. 813-814. Scindarea grupelor de protecție are loc, de exemplu, cu o leșie de hidroxid de sodiu, carbonat alcalin, cianură alcalină, oxid de bariu, piperidină sau morfolină, în prezență de metanol, etanol sau apă.
Invenția se referă și la medicamente caracterizate printr-un conținut eficient din cel puțin unul din compușii cu formula I și/sau al unei săruri suportabile din punct de vedere fiziologic ai compusului cu formula I, radicalii glicosil, Υ, X, p, W, R, η, Z și substanța activă fiind definiți ca mai sus, împreună cu o substanță de suport, adecvată farmacologic și suportabilă fiziologic, cu o substanță de adaus și/sau cu alte substanțe active și auxiliare.
Pe baza proprietăților farmacologice, compușii conform invenției se pretează în mod excepțional pentru profilaxia și terapia tuturor acelor îmbolnăviri și perturbări, în cursul cărora enzime intracelulare, care pot scinda radicalul glicozil, devin supra-exprimate și/sau puse în libertate, sau devin accesibile prin distrugerea celulelor. Aceste îmbolnăviri sunt cancerul, îmbolnăviri ale sistemului autoimunitarsau artritide sau artropatiile inflamatoare, condiționate imunologic sau prin schimb de substanțe, acute și cronice, mai ales formarea de tumori și artrita reumatoidă.
Invenția se mai referă la utilizarea compușilor cu formula I, pentru prepararea de medicamente pentru profilaxia și terapia cancerului, bolilor sistemului autoimunitarși bolilor inflamatoare, cum ar fi artrita reumatoidă.
Invenția se referă și la un procedeu pentru obținerea unui medicament, care este caracterizat prin aceea că se combină cel puțin un compus cu formula I, cu o substanță de suport, adecvată farmaceutic și acceptabilă fiziologic, și, eventual, cu alte substanțe adecvate active, de adaos sau auxiliare, într-o formă adecvată de administrare.
RO 120951 Β1
Forme adecvate de preparare sunt, de exemplu, soluții injectabile, la prepararea cărora se utilizează substanțe auxiliare obișnuite, cum arfi substanțe suport, substanțe de legătură, de gonflare sau de ungere și agenți de dispersie. Ca substanțe auxiliare, utilizate curent, se menționează carbonat de magneziu, bioxid de titan, lactoză, manitși altele, zahăr, talc, albumină din lapte, gelatină, amidon, celuloză și derivatele ei, uleiuri animale și vegetale cum arfi untura de pește, ulei de floarea soarelui, de arahide sau ulei de susan, polietilenglicol și solvenți cum ar fi apa sterilă și alcooli mono- sau polivalenți cum ar fi glicerina, se pot utiliza, ca substanțe purtătoare, și lipozomi sau proteine umane.
De preferință, se prepară preparatele farmaceutice în unități de dozare care se pot administra astfel, fiecare unitate conținând, ca component activ, o doză anumită de compus, conform invenției, cu formula I. La soluțiile de injectare, această doză poate fi până la 10 g, pentru un adult cu o greutate de 70 kg, de preferință însă cea de la 3 g la 5 g. în anumite cazuri, însă, se pot aplica, fiind adecvate, doze zilnice mai ridicate sau mai scăzute. Administrarea dozei zilnice poate fi atât sub forma unei singure unități de dozare sau mai multe unități de dozare mai mici, dar și sub forma unor dozări divizate, administrate de mai multe ori, la anumite intervale.
Prodrogurile conform invenției se pot folosi și la îmbolnăvirile neoncologice, la care apar macrofage, granulocite și trombocite, mai ales în stare activată. în stare activată, celulele mai sus menționate separă mai ales enzime intracelulare, care dau posibilitatea unei activări specifice locale a prodrogurilor conform invenției.
în cazurile oncologice, activarea prodrogurilorconform invenției are loc prin enzimele intracelulare puse în libertate din celulele tumorale care mor. Acest fenomen apare mai ales la tumori mai mari (cu diametrul mai mare decât 0,3 cm), dar și după deteriorarea tumorii prin tratare cu imunotoxine, citostatice, iradieri, proteine de fuziune sau conjugate de anticorpienzime.
Deoarece partea de glicosil a prodrogului conform invenției este astfel ales, încât acesta este scindabil numai de către enzimele eliberate local, în condiții patofiziologice, și drogul lipofil poate fi pus în libertate numai în țesutul în cauză și acolo își poate desfășura acțiunea sa citotoxică.
Acțiunea superioară a unui prodrog conform invenției se poate mări prin aceea că, componenta citotoxică a componentei drogului respectiv se combină cu o altă componentă citotoxică de drog. în acest caz, sunt avantajoase combinații de prodroguri, la care componentele citotoxice utilizate au un mecanism de acțiune diferit, corespunzător polichemoterapiei. Deosebit de adecvată apare folosirea de substanțe active, care provoacă, cu multă eficacitate, ruperi într-o linie individuală sau dublă în ADN, cum arfi Galicheamicina. De un avantaj deosebit sunt, totuși, combinațiile de prodroguri conform invenției, la care unul dintre droguri are un potențial citotoxic și celălalt drog blochează însă rezistența multidrog.
Invenția se mai referă la combinații farmaceutice, conținând un compus cu formula I și conjugate de anticorpi-enzime.
Sub denumirea de conjugate de anticorpi-enzimă se înțeleg compuși care se leagă prin partea de anticorp, în mod specific, la țesutul tumorii sau la țesutul inflamat și au o parte de enzimă care poate scinda radicalul de glicosil al compusului cu formula I.
RO 120951 Β1
Exemple de astfel de compuși sunt descrise în EP 0 501 215, EP 0 390 530 sau EP 0 623 352.
Exemplul 1. Prodrogul de derivat de azot (F 373; compusul 11), conform pag. 12 care urmează, a fost sintetizat după cum urmează:
Materialul inițial pentru sinteză a fost 2-amino-4-nitrofenol (compusul 1). Compusul 1 a fost mai întâi monometilat cu ajutorul iodurii de metil (compusul 2) și funcția amino a fost protejată cu un derivat BOC (compusul 3). Acidul glucoronic, protejat cu ajutorul legării de oxid de argint a compusului 3 și a bromurii (compusul 4), a fost introdus cu obținerea compusului 5. După scindarea grupei de protecție BOC cu HCI, s-a obținut amina (compusul 6). Compusul 7 a fost transformat în clorformiat (compusul 8) și condensat cu compusul 6, obținându-se compusul 9. După scindarea esterului părții de acid glucoronic a compusului 3, în două etape (MeONa/MeOH, apoi NaOH în soluție apoasă), s-a obținut prodrogul prin intermediul compusului 10 (compusul 11).
RO 120951 Β1
Compusul 2 1
2-(N-metilamino)-4-nitrofenol (2)
La o soluție de 2-amino-4-nitrofenol (1) (1,54 g, 10 mmol) și iodură de metil (1 ml, 3 16 mmol) în metanol (10 ml), s-a adăugat trietilamină (2 ml, 14,4 mmol). După 1 h, la40°C, s-au mai adăugat alte cantități de iodură de metil (1 ml) și trietilamină (1 ml) și s-au agitat 5 încă 2 h, la 40’C. Amestecul de reacție a fost concentrat la sec sub vid, s-a introdus în soluție apoasă de acetat de sodiu 2N și s-a extras cu ester acetic. Faza organică s-a uscat cu 7 sulfat de sodiu și s-a cromatografiat pe gel de silice (substanță mobilă diclormetan/metanol 95/5). Cantitatea obținută a fost 880 mg (52%). 9
C7HaN2O3.
Calculat: C: 50,02 H: 4,76 N: 16,7311
Găsit: C: 50,00 H: 4,80 N: 16,66
Punct de topire: 148’C (toluen)13 1H RMN(250 MHz, DMSO):
δ 7,44 (dd, Jorto= 9Hz, Jmeta = 3,0 Hz, 1H),15
7,13 (d,J = 3 Hz, 1H),
6,77 (d.J = 9Hz, 1H),17
2,76 (s, 3H).
IR (KBr): v(cm’1) 3363(OH), 1538, 1338(NO2), MS(DCI, NH3): m/z (M+H)+: 169.19
Compusul 3
2-(N-BOC, N-metilamino)-4-nitrofenol (3)21
La o soluție de 2-N-metilamino-4-nitrofenol (2) (4,18g, 24,9 mmoli în tetrahidrofuran (50 ml), s-au adăugat D/'-tert-butilcarbonat (14 g, 64,15 mmoli) carbonat de potasiu (17 g, 23 123 mmoli) și apă (50 ml) și s-au agitat peste noapte, la temperatura camerei. Amestecul de reacție a fost acidulat cu o soluție apoasă saturată de clorură de amoniu, s-a extras cu ester 25 acetic, s-a uscat cu sulfat de sodiu și s-a concentrat sub vid. Produsul brut s-a agitat 2 h, în metanol (100 ml) cu carbonat de potasiu (17 g, 123 mmoli), s-a acidulat cu o soluție apoasă 27 saturată de clorură de amoniu, s-a extras cu ester acetic, s-a uscat cu sulfat de sodiu și s-a concentrat sub vid. Produsul s-a cromatografiat (substanță mobilă diclormetan/metanol 29 97,5/2,5). Cantitatea obținută a fost 6,2 g (93%).
C12H16N2O5.31
Calculat: C: 53,72 H: 6,01 N: 10,44
Găsit: C: 53,64 H: 6,20 N: 10,3633
Punct de topire: 197°C (toluen/eter de petrol) 1H RMN (250 MHz, DMSO):35 δ 8,10-8,00 (2H),
7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H),37
3,04 (s, 3H),
1,40-1,30 (9H),39
IR (KBr): v(cm’1) 3129(0H), 1672(00), 1529,1339 (N02).
MS (DCI, NH3): m/z (M+H)+: 269,41 (M+H-C4H8)+: 213, (M+H-C4H8OCO)+: 169.43
Compusul 5:
Metilesterul acidului 2-(N-BOC, N-metilamino)-4-nitrofenil-2,3,4-tri-O-acetil-beta-D-45 glucoronic (5)
La o soluție de bromură de metilester de acid 2,3,4-tri-O-acetiil-alfa-D-glucoronic (4)47 (126 mg, 0,317 mmol) în acetonitril (5 ml), s-a adăugat oxid de argint (0,23 g, 0,992 mmol)
RO 120951 Β1 și 2-(N-BOC,N-metilamino)-4-nitrofenol (3). Amestecul de reacție s-a agitat 1 h, la temperatura camerei, s-a filtrat peste celită și s-a evaporat sub vid. Produsul s-a cromatografiat pe gel de silice (substanță mobilă diclormetan/metanol 97,5/2,5). Cantitatea obținută a fost 165 mg (89%).
θ25^32^2θ14Calculat:: C; 51,37 H; 5,52 N: 4,79
Găsit: C: 51,79 H: 5,72 N: 4,66
Punct de topire: 80°C (toluen/eter de petrol) [a]20 0 = -39° (c= 1,02înCHCI3).
1H RMN (250 MHz, CDCI3):
8,14 (dd, Jorto= 9Hz, Jmeta=2,5 Hz, 1H)
8.15- 8,05 (1H)
7,30-7,20 (1H),
5,45-5,30 (4H),
4,25 (d, J=9 Hz, 1H),
3,73 (s, 3H),
3,13 (s, 3H),
2.15- 2,05 (9H),
1,65-1,40 (9H).
IR(CDCI3): v(cm'1) 1760 (CO, ester), 1699 (CO, carbamat),
1529, 1349 (NO2).
MS (DCI, NH3)m/z /M+NH/: 602.
Compusul 6:
Metilesterul acidului 2-(N-metilamino)-4-nitrofenil-2,3,4-tri-O-acetil-beta-D-glucoronic (6)
O soluție de 2-metilester al acidului 2-(N-BOC, N-metilamino)-4-nitrofenil-2,3,4-fr/-Oacetil-beta-D-glucoronic (5) (3 g, 5,13 mmol) în acid clorhidric 2,12 M în ester acetic (60 ml), s-a agitat timp de 1 h, la temperatura camerei. Soluția s-a introdus în soluție de bicarbonat de sodiu apoasă, saturată în exces, și s-a extras cu ester acetic. Faza organică s-a uscat cu sulfat de sodiu și s-a concentrat, produsul s-a cromatografiat pe gel de silice (mediu mobil diclormetan/metanol 97,5/2,5). Cantitatea obținută a fost 2,14 g (88 %), substanță solidă galbenă.
θ20^24^2θ12·
Calculat: C: 49,59 H: 4,99 N: 5,78
Găsit: C: 49,81 H: 5,12 N: 4,80
Punct de topire: 120°C (toluen) [a]20 D = -58’(c=1,04 în CHCI3).
1H RMN (300 MHz, CDCI3):
7,53 (dd, Jorto=8,5 Hz, Jmeta= 2,5 Hz, 1H),
7,37 (d, J=2,5 Hz, 1H),
6,91 (d, J=8,5 Hz, 1H),
5,45-5,30 (1H),
5,16 (d, J=7Hz, b, 1H)
4,50 (d, J=5 Hz, 1H)
4,24 (d, J=9 Hz, 1H),
3,75 (s, 3H),
2,90 (d, J=5 Hz, 1H),
2,10-2,05 (9H).
IR(CDCI3): v(cm’1) 3443 (NH), 1758 (CO), 1553, 1346(N02).
MS (DCI, NH3): m/z (M+H)+: 485.
RO 120951 Β1
Compusul 8 1
Cloroformiat de 4-/N,N-bis(2-cloroetil)amino/fenil (8)
S-a adăugat fosgen în toluen (1,93M) (8 ml, 15,4 mmol), la o suspensie de clorhidrat 3 de 4-[N,N-0/s(2-cloroetil)amino]fenol (7) (1,85 mmoli) în tetrahidrofuran (30 ml) și s-a agitat 30 min, la 0°C. După un adaos de trietiilamină (1 ml, 7,17 mmol), s-a agitat încă o oră, la 0°C. 5
Apoi, suspensia s-a filtrat și s-a concentrat sub vid, la temperatura camerei. Cromatografia Flash pe gel de silice cu diclormetan ca agent mobil a dus la obținerea produsului sub formă 7 de lichid incolor, care a fost folosit, imediat, în reacția următoare. Randament 70%.
1H RMN (250 MHz, CDC1,)9 δ 7,10 (d, J=9 Hz, 2H),
6,66 (d, J=9 Hz, 2H),11
3,73 (t, J=6,5 Hz, 4H),
3,63 (t, J=6,5 Hz, 4H).13
IR (CDCI3): v (cm'1)1779(CO), 1514 (aromatic),
MS; (DCI, NH3): m/z (M+H)+: 296,15 (Μ+2+Hf: 298.
Compusul 917
Metilester al acidului 2-[N-metil-N-[4-(N,N'-bis-(2-cloretil)amino]-feniloxicarbonil] amino]-4-nitrofenil-2,3,4-tri-O-acetil-Beta-D-glucoronic (9)19
La o soluție de cloroformiat de 4-(N,N-6/s-(2-cloroetil)amino-)-fenil (8) (0,31 g, 1,04 mmol) în tetrahidrofuran (15 ml), diizopropiletilamină 0,25 ml, 1,44 mmol) s-a adăugat 21 metilester al acidului 2-(N-metilamino)-4-nitrofenil-2,3,4-fn-O-acetil-beta-D-glucoronic (6) 0,50 g, 1,03 mmoli) și s-a fiert 2 h, la reflux. După răcire la temperatura camerei, s-a concentrat. 23 Produsul a fost cromatografiat pe gel de silice (mediu mobil diclormetan/metanol 97,5/2,5). Cantitatea obținută a fost 487 mg (64%). 25
G31 h35n3014ci2.
Calculat: C: 50,00 H: 4,74 N: 5,64 CI: 9,5227
Găsit: C. 49,90 H: 4,82 N: 5,62 CI: 9,78
Punct de topire: 101”C (metanol)29 [a]20 D = -47° (C=1,10 în CHCI3).
1H RMN (300 MHz, CDCI3):31 δ 8,25-8,15 (2H),
7.45- 7,35 (IH),33
7,25-7,05 (IH),
6,70-6,55 (2H),35
5.45- 5,25 (4H),
4,28 (d, J=9Hz, 1H),37
3,80-3,55 (HH),
3,38 (s) 2 carbamați diastereomeri(40/60) 3H,39
3,27 (s),
2,20-2,00 (9H).41
IR (CDCI3): v(cm'1) 1760 (00, ester), 1722 (CO, carbamat), 1530, 1350(NO2).
MS (DCI, NH3): m/z(M+H+):744 ;(M+2+H)+: 746,43 (M+Na)+: 766; (M+2+Na)+: 768.
Compusul 1045
Metilesterul acidului 2-[N-metil-N-[(4-(N,N’-bis-(2-cloretil)amino)fenil-oxicarbonil] amino]-4-nitrofenil-beta-D-glucoronic (10)47
La o suspensie de metilester al acidului 2-[N-metil-N-[4-(N,N'-b/s-(2-cloroetil) amino) feniloxicarbonil]amino]-4-nitrofenil-2,3,4-fn-o-acetil-beta-D-glucoronic (9) (68 mg, 0,091549 mmoli) în metanol (5 ml) s-a adăugat, la 15°C, metilat de sodiu (2 mg, 0,037 mmoli) și s-a
RO 120951 Β1 agitat 6 h, la -15°C. După neutralizare cu schimbător de ioni (Amberlit IRC-50S) și filtrare, soluția a fost concentrată și s-a cromatografiat pe gel de silice cu ester acetic drept substanță mobilă. Cantitatea obținută a fost 50 mg (89%).
1H RMN (300 MHz, CDCI3 δ 8,22 (sl, 1H),
8,16 (d, J=8,5 Hz, 1H),
7,25 (d, 1H),
7,15-6,90 (2H),
6.80- 6,45 (2H),
5,06 (1H),
4,09 (1H),
4,20-3,15 (17H).
IR (CDCIj): v(cm'1) 3601, 3448 (OH), 1714 (CO), 1528, 1349 (NO2).
MS (ES) m/z (M+Na)+: 640, (M+2+Na)+: 642.
Compusul 11
Acid 2-(N-metil-N-((N,N'-bis-(2-cloroetil)amino)feniloxicarbonil)amino)-4-nitrofeniT beta-D-glucoronic (11)
La o soluție de compus 10 (50 mg, 0,0809 mmoli) în acetonă (4- ml), s-au adăugat la -15’C, 0,3 ml dintr-o soluție apoasă 1N de hidroxid de sodiu. Amestecul s-a agitat 2 h, la -15°C, s-a neutralizat cu soluție apoasă de acid clorhidric 1N și s-a concentrat sub vid (T< 40’C). Produsul a fost cromatografiat pe gel de silice cu acetonitril/apă (9/1). Cantitatea obținută a fost de 45 mg (89%).
θ24^27^3θ11θ'2 1H RMN (250 MHz, CD3OD):
δ 8,30(s1,1H),
8,24 (dd, Jorto=9Hz, Jmeta=2,5 Hz, 1H),
7,52 (d, J=9Hz, 1H),
6,99 (d, J=9Hz, 2H),
6,69 (d, J=9Hz, 2H),
5,23 (1H),
3.89 (d,J=9Hz, 1H),
3.80- 3,33(1 H).
IR (KR): v(cm’1) 3418 (OH), 1705 (00), 1516, 1349 (NO2).
MS(ES): m/z (M-H)+: 603 (M+2-H/Ț: 605.
Exemplul 2. Acidul 2-(N-metil-N-[(4-(N,N'-bis-(2-iodoetil)amino)feniloxicarbonil]amino]-4-nitrofenil-beta-D-glucoronic (12) (Compusul 12)
HO.
,0
RO 120951 Β1
Sinteza a avut loc în mod analog exemplului 1. 1
Exemplul 3. (Compusul 13): Prodrog cu chinină (F 391)
Sinteza a avut loc în mod analog cu exemplul 1.
Exemplul 4 (compusul 14) Prodrog cu dipiridamol (F 392) 17
Sinteza a avut loc în mod analog exemplului 1.
Exemplul 5. Scindarea enzimatică a F 373
Prodrogul F 373 (compusul 11) se scindează la incubația cu beta-glucoronidază, în mod enzimatic, obținându-se un derivat de azot (4-[N,N-P/s-(2-cloroetil)amino]fenol) (compusul 7), acidul glucoronic și Spacer-ul.
F 373 —> acid glucoronic +
ci +
Compusul 7
Spacer (compusul 15)
RO 120951 Β1
Prodrogul F 373 este stabil în DMSO anhidru în soluție. Pentru cercetarea capacității de scindare, s-au tratat 10 pl F 373 în soluție (5 mg/ml în DMSO) cu 180 μΙ 0,02 M tampon de fosfat, pH 7,2 și 10 μΙ beta-glucuronidază de E.coli (Sigma) (330 μg/ml) și s-a incubat la 37°C. O depunere de 25 μΙ s-a diluat cu 225 μΙ 0,1 M tampon de fosfat, pH 3,0 (85%) și acetonitril (15%) și s-a analizat imediat, cu ajutorul următorului sistem HPLC:
Sistemul HPLC:
Sistemul HPLC utilizat a contat dintr-o pompă de gradient (Gynkotek, model 480), dintr-un Autosampler (Abimed, Model 231/401), dintr-un detector UV (Beckman, model 166, lungimea de undă de detectare 212 nm) ș dintr-o unitate de evaluare (Beckmann, sistem Gold). Separările au avut loc pe o coloană RP (Zorbax SB-G 18,5 pm, 125+ 4,6 mm). Faza mobilă a fost formată din două componente, conform schemei următoare:
A-acetonitril
B-tampon de fosfat 0,02 M, pH 3.0 min: 15%, A, 85% B min: 75%, A, 25% B min: 75%, A, 25% B min: 15%, A, 85% B min: 15%, A, 85% B
S-au găsit următoarele suprafețe de vârf (Peak):
Timp min. F373 RT = 12,6 Compusul 7 RT = 10,7 Compusul Spacer 15 RT = 14,1
0 19,41 0 0
1 10,46 3,32 1,92
5 0,35 7,43 4,75
7 0 7,33 5,37
10 0 6,79 5,43
15 0 5,58 5,43
25 0 4,00 5,70
60 0 0,88 6,53
Exemplul 6. Citotoxicitatea lui F 373, 391, 392 la celule tumorale, în prezenta și în absența beta-glucoronidazei
Pe o placă de microtitrare cu 96 de godeuri, s-au însămânțat 2x10 celule LoVo per godeu în 100 μΙ MEM + 10% FKS. După 24 h, s-au adăugat substanțele de testare în 100 μΙ mediu în concentrația dorită și, eventual, în plus beta-glucoronidază (50 pg/ml concentrație finală; Sigma G-7896). Fiecare grupă a constat din 4 godeuri, martorul a fost incubat numai cu mediu. După 65 h, s-au adăugat 50 μΙ MTT (2,5 mg/ml în PBS) și, după 3 h, s-a îndepărtat supranatantul. Substanța colorată, formată de celulele vii, a fost dizolvată prin adaos de 100 μΙ DMSO/godeu. Extincția s-a măsurat pentru fiecare godeu, cu ajutorul unui Photometru Multiscan 340 CC (Fa. Flow) la 492 nm. Valorile celor 4 godeuri per grup au fost calculate în medie și din aceasta s-a calculat curba de eficiență pe doză, precum și IC50 cu Software GraFit 3.0.
RO 120951 Β1
Substanța (Prodrog) fără beta-glucoron IC50 în pmol cu beta-glucoron IC50 în pmol
F373 >500 6.3
F391 >400 113
F392 >400 49.5
Compusul toxic din prodrogul F 373 este compusul 7 (exemplul 1 și are singur o 7 valoare a IC50 de 5 pmol). Compusul toxic în prodrogul F 391 este chinina și are singur o valoare IC50 de 103 pmol. Compusul toxic în prodrogul F 393 este dipiridamol și are singur 9 o valoare IC50 de 43 pmol.

Claims (13)

  1. Revendicări
    1. Compus antitumoral și antiinflamator, cu formula I:
    15 glicozil-Y[-C(=Y)-X-]p-W(R)n-Z-C(=Y)-compus activ (I)
    17 și/sau sărurile acceptabile din punct de vedere fiziologic ale compusului cu formula I, în care glicozil este o poli-, oligo- sau monozaharidă scindabilă enzimatic,19
    W este
    1) un radical aromatic cu 5 până la 14 membri,21
  2. 2) naftil,
  3. 3) indenil,23
  4. 4) antril,
  5. 5) fenantril,25
  6. 6) un radical heterociclic cu 5 până la 14 membri cu 1,2, 3 sau 4 heteroatomi selectați din grupul format din oxigen, azot și sulf,27
  7. 7) alchil-fC^Cg),
  8. 8) alchenil-(C2-C6),29
  9. 9) cicloalchil-(C3-C6) sau
  10. 10) fenil,31
    R este
    1) un atom de hidrogen,33
    2) alchil-țC^C,),
    3) fenil,35
    4) metoxi,
    5) carboxil,37
    6) metiloxicarbonil,
    7) -CN,39
    8)-OH,
    9) -NO2,41
    10) halogen cum ar fi fluor, clor sau brom,
  11. 11) sulfonil,43
  12. 12) sulfonamidă sau
  13. 13) sulfon-alchil-C^C^amidă,45
    RO 120951 Β1 p este 0 sau 1, n este 0,1, 2 sau 3,
    X este
    1) un atom de oxigen,
    2) -NH-
    3) metilenoxi,
    4) metilenamino,
    5) metilen-alchil-C^C^amino,
    6) alchil-C.|-C4-amino, sau
    7) cicloalchil-C3-C6-amino,
    Y este un atom de oxigen sau -NH-,
    Z este
    1) alchil-C1-C4-amino,
    2) -N(CH3)-,
    3) -C(CH3)2-NH-,
    4) -CH(CH3)-NH-,
    5) -C(CH3)2-N(R2)-, în care R2 este alchil-C1-C4 sau
    6) -NH-, dacă W este alchil-C^Cg și compusul activ este un compus având activitate biologică, care este legat printr-un radical de oxigen, radical amino primar sau secundar sau un radical imino.
    2. Compus cu formula I, în conformitate cu revendicarea 1, în care glicozil este un acid glucuronic scindabil enzimatic,
    W este fenil,
    R este un atom de hidrogen, CN, nitro, fluor, clor, brom, p este zero, n este un număr întreg ales dintre 0, 1 sau 2,
    Y este un atom de oxigen,
    Z este -N(CH3)-, -C(CH3)2-NH-, -CH(CH3)-NH-, -C(CH3)2-N(alchil-C1-C4)-, -CH(CH3)N(alchil-C1-C4)-.
    3. Compus cu formula I, în conformitate cu revendicarea 1 sau 2, în care compusul cu formula I este:
    acid2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-b/s(2-cloroetil)amino)feniloxi-carbonil]amino]-4-nitrofenilbeta-D-glucuronic, acid 2-[N-metil-N-[(4-(N,N'-b/s(2-iodoetil)amino)feniloxi-carbonil]amino]-4-nitrofenilbeta-D-glucuronic,
    RO 120951 Β1 sau
    4. Procedeu pentru prepararea unui compus definit în revendicarea 1, care cuprinde 15 punerea în reacție a unui compus cu formula (II):
    17 glicozil-Y[-C(=Y)-X-]p-W(R)n-Z (II)
    19 în care radicalii glicozil, Y, X, p, W, R, n și Z au semnificațiile prezentate pentru formula I, în revendicarea 1, cu un compus activ care are un radical carboxil, amino sau imino activat, 21 reacția având loc în prezența unui solvent selectat din grupul constând din acetonitril, dioxan, tetrahidrofuran, diclormetan, dimetilformamidă și acetonă și apoi se scindează grupele de 23 protecție prin hidroliză.
    5. Compoziție farmaceutică, ce conține o cantitate eficientă din cel puțin un compus 25 cu formula I, definit în oricare din revendicările de la 1 la 3, și/sau o sare acceptabilă fiziologic a acestuia, împreună cu un excipient adecvat farmaceutic și tolerat și/sau alte 27 substanțe auxiliare și active.
    6. Preparat farmaceutic, ce conține o cantitate eficientă din cel puțin un compus cu 29 formula I, definit în oricare din revendicările de la 1 la 3, și un conjugat de anticorp-enzimă, care poate scinda enzimatic radicalul glicozil din compusul cu formula I. 31
    7. Utilizarea compusului cu formula I, definit în revendicarea 1, pentru fabricarea unui medicament pentru profilaxia și tratamentul bolilor carcinomatoase, bolilor autoimune și 33 bolilor inflamatorii cronice, cum arfi artrita reumatoidă.
RO97-00402A 1996-03-12 1997-03-03 Compus pentru tratamentul bolilor tumorale şi inflamatoare RO120951B1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP96103866 1996-03-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO120951B1 true RO120951B1 (ro) 2006-10-30

Family

ID=8222555

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO97-00402A RO120951B1 (ro) 1996-03-12 1997-03-03 Compus pentru tratamentul bolilor tumorale şi inflamatoare

Country Status (24)

Country Link
US (1) US5935995A (ro)
EP (1) EP0795334B1 (ro)
JP (1) JP4392065B2 (ro)
KR (1) KR100466467B1 (ro)
CN (1) CN1168733C (ro)
AT (1) ATE316799T1 (ro)
AU (1) AU708202B2 (ro)
BG (1) BG61900B1 (ro)
BR (1) BRPI9701248B1 (ro)
CA (1) CA2199664C (ro)
CZ (1) CZ297994B6 (ro)
DE (1) DE59712561D1 (ro)
DK (1) DK0795334T3 (ro)
ES (1) ES2257756T3 (ro)
HU (1) HU228764B1 (ro)
NO (1) NO320322B1 (ro)
NZ (1) NZ314368A (ro)
PL (1) PL189604B1 (ro)
RO (1) RO120951B1 (ro)
RU (1) RU2191021C2 (ro)
SG (1) SG50011A1 (ro)
SI (1) SI0795334T1 (ro)
TR (1) TR199700178A2 (ro)
UA (1) UA50719C2 (ro)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5525606A (en) 1994-08-01 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Substituted 06-benzylguanines and 6(4)-benzyloxypyrimidines
DE19720312A1 (de) * 1997-05-15 1998-11-19 Hoechst Ag Zubereitung mit erhöhter in vivo Verträglichkeit
JP4812167B2 (ja) 1999-02-12 2011-11-09 モレキュラー インサイト ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド 薬物輸送用マトリックス、ならびにその作成方法および使用方法
US6716452B1 (en) 2000-08-22 2004-04-06 New River Pharmaceuticals Inc. Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
AU777770C (en) 1999-05-04 2005-11-10 Strakan International Limited Androgen glycosides and androgenic activity thereof
US6191119B1 (en) * 1999-10-15 2001-02-20 Supergen, Inc. Combination therapy including 9-nitro-20(S)-camptothecin
US8394813B2 (en) 2000-11-14 2013-03-12 Shire Llc Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
DE10058596A1 (de) * 2000-11-25 2002-06-06 Aventis Pharma Gmbh Verfahren zum Screening von chemischen Verbindungen zur Modulierung der Wechselwirkung einer EVH1-Domäne oder eines Proteins mit einer EVH1-Domäne mit einer EVH1-Bindedomäne oder einem Protein mit einer EVH1-Bindedomäne sowie ein Verfahren zum Nachweis besagter Wechselwirkung
US7169752B2 (en) 2003-09-30 2007-01-30 New River Pharmaceuticals Inc. Compounds and compositions for prevention of overdose of oxycodone
US20060014697A1 (en) 2001-08-22 2006-01-19 Travis Mickle Pharmaceutical compositions for prevention of overdose or abuse
ATE439131T1 (de) 2001-08-30 2009-08-15 Chemocentryx Inc Bicyclische verbindungen als hemmer der chemokin- bindung an us28
AU2003244088A1 (en) * 2002-06-20 2004-01-06 Nippon Suisan Kaisha, Ltd. Produrg, medicinal utilization thereof and process for producing the same
US8133881B2 (en) 2003-01-13 2012-03-13 Shire Llc Carbohydrate conjugates to prevent abuse of controlled substances
US7160867B2 (en) * 2003-05-16 2007-01-09 Isotechnika, Inc. Rapamycin carbohydrate derivatives
JP2007530664A (ja) * 2004-03-30 2007-11-01 ペインセプター ファーマ コーポレーション ゲートイオンチャンネルを調節するための組成物及び方法
US7825096B2 (en) * 2004-09-08 2010-11-02 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase inactivators and beta-glucuronidase cleavable prodrugs
PT2155682E (pt) * 2007-04-06 2015-10-15 Ziopharm Oncology Inc Sais de mostarda de isofosforamida e análogos da mesma
GB0907551D0 (en) * 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions
EP2473509A4 (en) * 2009-09-02 2013-04-17 Auckland Uniservices Ltd KINASEHEMMER, PRODRUG-FORMS THEREOF AND ITS USE IN THERAPY
KR101253399B1 (ko) 2010-10-26 2013-04-11 영남대학교 산학협력단 아포지단백질 ａ－ｉ 및 그 변이체를 포함한 재조합 고밀도지단백질을 이용한 라파마이신 제형
KR101628872B1 (ko) * 2014-05-28 2016-06-09 주식회사 레고켐 바이오사이언스 자가-희생 기를 포함하는 화합물
KR20180079452A (ko) 2015-11-25 2018-07-10 주식회사 레고켐 바이오사이언스 자기-희생기를 포함하는 접합체 및 이의 제조방법
AU2016359234B2 (en) 2015-11-25 2022-09-08 Legochem Biosciences, Inc. Conjugates comprising peptide groups and methods related thereto
CN113599533A (zh) 2015-11-25 2021-11-05 乐高化学生物科学股份有限公司 包含分支接头的抗体-药物缀合物及其相关方法
AU2016363013B2 (en) 2015-12-04 2022-03-10 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
US11793880B2 (en) 2015-12-04 2023-10-24 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
AU2018246806B2 (en) 2017-03-29 2022-05-12 Legochem Biosciences, Inc. Pyrrolobenzodiazepine dimer precursor and ligand-linker conjugate compound thereof
AU2019216531A1 (en) 2018-02-02 2020-09-24 Maverix Oncology, Inc. Small molecule drug conjugates of gemcitabine monophosphate
JP7459063B2 (ja) 2018-05-09 2024-04-01 レゴケム バイオサイエンシズ， インク． 抗－ｃｄ１９抗体薬物複合体に関連する組成物および方法
KR20210028544A (ko) 2019-09-04 2021-03-12 주식회사 레고켐 바이오사이언스 인간 ror1에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 및 이의 용도

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5284856A (en) * 1988-10-28 1994-02-08 Hoechst Aktiengesellschaft Oncogene-encoded kinases inhibition using 4-H-1-benzopyran-4-one derivatives
DE3836676A1 (de) * 1988-10-28 1990-05-03 Hoechst Ag Die verwendung von 4h-1-benzopyran-4-on-derivaten, neue 4h-1-benzopyran-4-on-derivate und diese enthaltende arzneimittel
DE69019959T2 (de) * 1989-01-23 1995-10-05 Akzo Nobel Nv Ortspezifische in-vivo-aktivierung von therapeutischen arzneimitteln.
DE4106389A1 (de) * 1991-02-28 1992-09-03 Behringwerke Ag Fusionsproteine zur prodrug-aktivierung, ihre herstellung und verwendung
KR100188801B1 (ko) * 1990-05-18 1999-06-01 엥겔하르트 라피체 이속사졸-4카복스아미드 및 하이드록시알킬리덴 시아노아세트아미드 및 이들 화합물을 함유하는 약제학적 조성물
FR2676058B1 (fr) * 1991-04-30 1994-02-25 Hoechst Lab Prodrogues glycosylees, leur procede de preparation et leur utilisation dans le traitement des cancers.
EP0538799B1 (en) * 1991-10-25 1995-03-15 TUNGSRAM Részvénytársaság Single-capped low-pressure discharge lamp
DE4233152A1 (de) * 1992-10-02 1994-04-07 Behringwerke Ag Antikörper-Enzym-Konjugate zur Prodrug-Aktivierung
CA2081281A1 (en) * 1992-10-23 1994-04-24 Shing-Ming Wang Activation of glucuronide prodrugs by ligand-beta-glucuronidase conjugates for chemotherapy
DE4236237A1 (de) * 1992-10-27 1994-04-28 Behringwerke Ag Prodrugs, ihre Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
DE4314556A1 (de) * 1993-05-04 1994-11-10 Behringwerke Ag Modifizierte Antikörperenzymkonjugate und Fusionsproteine sowie ihre Anwendung zur tumorselektiven Therapie
EP0647450A1 (en) * 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
DE4417865A1 (de) * 1994-05-20 1995-11-23 Behringwerke Ag Kombination von Tumornekrose-induzierenden Substanzen mit Substanzen, die durch Nekrosen aktiviert werden, zur selektiven Tumortherapie

Also Published As

Publication number Publication date
AU708202B2 (en) 1999-07-29
KR970065550A (ko) 1997-10-13
SG50011A1 (en) 1998-06-15
DE59712561D1 (de) 2006-04-13
MX9701832A (es) 1998-07-31
BR9701248A (pt) 1999-10-13
EP0795334A3 (de) 1997-09-24
UA50719C2 (uk) 2002-11-15
BG101290A (en) 1997-09-30
NO320322B1 (no) 2005-11-21
NO971116L (no) 1997-09-15
BR9701248A8 (pt) 2013-06-18
AU1620597A (en) 1997-09-18
CN1168733C (zh) 2004-09-29
TR199700178A2 (tr) 1997-09-21
HUP9700579A3 (en) 1999-05-28
HU228764B1 (en) 2013-05-28
PL189604B1 (pl) 2005-08-31
US5935995A (en) 1999-08-10
JPH101495A (ja) 1998-01-06
CN1163895A (zh) 1997-11-05
CA2199664C (en) 2008-05-20
DK0795334T3 (da) 2006-06-06
SI0795334T1 (sl) 2006-06-30
RU2191021C2 (ru) 2002-10-20
CZ297994B6 (cs) 2007-05-16
BG61900B1 (bg) 1998-09-30
ES2257756T3 (es) 2006-08-01
KR100466467B1 (ko) 2005-06-29
CA2199664A1 (en) 1997-09-12
BRPI9701248B1 (pt) 2022-01-18
JP4392065B2 (ja) 2009-12-24
ATE316799T1 (de) 2006-02-15
PL318878A1 (en) 1997-09-15
HUP9700579A2 (en) 1997-12-29
HU9700579D0 (en) 1997-04-28
NO971116D0 (no) 1997-03-11
EP0795334A2 (de) 1997-09-17
CZ74297A3 (en) 1997-09-17
NZ314368A (en) 1998-10-28
EP0795334B1 (de) 2006-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO120951B1 (ro) Compus pentru tratamentul bolilor tumorale şi inflamatoare
US7714016B2 (en) Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
TWI807150B (zh) 苯并咪唑衍生物及其醫藥組合物及使用方法
US7968586B2 (en) Cytotoxic compounds and conjugates
US7517903B2 (en) Cytotoxic compounds and conjugates
CN106661027B (zh) 苯并咪唑衍生物作为erbb酪氨酸激酶抑制剂用于治疗癌症
SK17252002A3 (sk) Deriváty acylfenylmočoviny, spôsoby ich výroby a použitie ako liečivo
JP2008520719A (ja) チューブリン結合抗癌剤およびそれらのプロドラッグ
NZ250030A (en) Prodrugs: glycosyl-spacer-drug compounds and their use
KR20190126314A (ko) 암-선택적 표지화 및 표적화를 위한 트리거 활성화 가능한 당 접합체
JP2019196358A (ja) 血清半減期を延長するための、調節可能リンカーを介した薬学的活性剤とトランスサイレチンリガンドのコンジュゲーション
US10772881B2 (en) Quinolines that modulate SERCA and their use for treating disease
JP5558470B2 (ja) エピポドフィロトキシンの新規な（ポリ）アミノアルキルアミノアルキルアミド、アルキル−尿素またはアルキル−スルホンアミド誘導体、それらの製造方法、および治療における抗癌剤としてのそれらの応用
US20220041577A1 (en) Heterocyclic Compound as CDK-HDAC Double-Channel Inhibitor
US11827626B2 (en) Quinolines that modulate SERCA and their use for treating disease
Cardona-G et al. Chemistry and anticancer activity of hybrid molecules and derivatives based on 5-fluorouracil
CA3026434A1 (en) Polymer linkers and their uses
ES2256199T3 (es) Derivados de tetrahidrofuriloxi- y amino-sustituidos con actividad antitumoral.
US10266547B2 (en) Thieno[2,3-e]indole derivatives as new antitumor agents
MXPA97001832A (en) New profarmacos for inflamator tumors and disease therapy
SG192669A1 (en) Cathepsin c inhibitors
KR20220117805A (ko) 벤즈이미다졸 유도체를 유효 성분으로 포함하는 인터페론 유전자 자극제 조성물
NZ724372B2 (en) Benzimidazole derivatives as erbb tyrosine kinase inhibitors for the treatment of cancer