PL189604B1 - Nowe prekursory leków, sposób ich wytwarzania, środek farmaceutyczny i zastosowanie prekursorów leków - Google Patents

Nowe prekursory leków, sposób ich wytwarzania, środek farmaceutyczny i zastosowanie prekursorów leków

Info

Publication number
PL189604B1
PL189604B1 PL97318878A PL31887897A PL189604B1 PL 189604 B1 PL189604 B1 PL 189604B1 PL 97318878 A PL97318878 A PL 97318878A PL 31887897 A PL31887897 A PL 31887897A PL 189604 B1 PL189604 B1 PL 189604B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
glycosyl
general formula
compound
group
formula
Prior art date
Application number
PL97318878A
Other languages
English (en)
Other versions
PL318878A1 (en
Inventor
Klaus Bosslet
Jörg Czech
Manfred Gerken
Rainer Straub
Claude Monneret
Jean-Claude Florent
Fredoeric Schmidt
Original Assignee
Aventis Pharma Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8222555&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL189604(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Aventis Pharma Gmbh filed Critical Aventis Pharma Gmbh
Publication of PL318878A1 publication Critical patent/PL318878A1/xx
Publication of PL189604B1 publication Critical patent/PL189604B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

I. Nowe prekursory leków o ogólnym wzorze l Glikozyl-W(R)n -Z-C(=O)-sc w którym Glikozyl oznacza enzymatycznie odszczepialne ugrupowanie poli-, oligo- lub monosacharydu; W oznacza fenyl; R oznacza atom wodoru, grupe cyjanowa, grupe nitrowa, atom fluoru, atom chloru lub atom bromu; n oznacza 0, 1 lub 2; Z oznacza-N(CH3 )-, -C(CH3 )2 NH-, -CH(CH3 )-NH-, -C(CH3 )2 N(C1 -C4 -alkil)- lub -CH(CH3)- N(C1 -C4 -alkil)-; a sc oznacza ugrupowanie substancji czynnej wybrane z grupy obejmujacej (4-{N,N’ -bis(2-chlorowcoctyio)amino)fenyloksyl-, i/lub fizjologicznie dopuszczalne sole zwiazków o ogólnym wzorze l. 4. Sposób wytwarzania nowych prekursorów leków o ogólnym wzorze l, w którym Glikozyl, W, R. n, Z i sc maja znaczenie podane w zastrz. I. znamienny tym, ze zwiazek o ogólnym wzorze Glikozyl-W(R)n -Z w którym Glikozyl, W , R , n i Z maja znaczenie podane w zastrz. I, poddaje sie reakcji z substancja czynna, któ- rej ugrupowanie sc zdefiniowano w zastrz. I, o zaktywowanej grupie karboksylowej, przy czym reakcje prowadzi sie w obecnosci rozpuszczalnika wybranego z grupy obejmujacej acetonitryl, dioksan, tetrahydrofuran, dichlorometan, dimetyloformamid i aceton, a nastepnie odszczepia sie grupy zabezpieczajace droga hydrolizy 6. Zastosowanie prekursorów leków o ogólnym wzorze l okreslonych w zastrz. I i/lub ich soli do wytwarzania srodka farmaceutycznego do stosowania w terapii i profilaktyce chorób nowotworowych, chorób autoimmunologicz- nych i przewleklych chorób zapalnych, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku są nowe prekursory leków, sposób ich wytwarzania, środek farmaceutyczny i zastosowanie prekursorów leków Nowe prekursory leków są przeznaczone do stosowania w terapii nowotworów i stanów zapalnych.
Działanie farmaceutyków (leków) polega bardzo często na hamowaniu chorobotwórczej aktywności enzymów, cytokin i innych czynników, których patologiczna ekspresja zachodzi w stanie chorobowym. Hamujące działanie leków nie dotyczy jednak wyłącznie docelowych dla leków struktur (enzym, cytokina, czynnik) w chorych tkankach, gdyż hamowaniu ulega także aktywność w tkankach zdrowych, co jest przyczyną występujących w przypadku wielu leków niepożądanych działań ubocznych. W celu zmniejszenia ubocznego działania leków opracowano doświadczalne systemy umożliwiające selektywne uwalnianie leków w chorych tkankach. Krótki opis takich systemów zamieszczono poniżej.
System ADEPT (od Antibody directed enzyme prodrug therapy, Bagshawe, 1987, Br. J. Cancer. 56:531-532) to system dwuetapowy, zgodnie z którym w pierwszym etapie wstrzykuje się dożylnie koniugat przeciwciało-enzym (AEK). AEK ze względu na swe selektywne działanie względem nowotworu zostaje w nowotworze zatrzymany, natomiast po upływie 2-7 dni zostaje wydalony z tkanek zdrowych. W drugim etapie wstrzykuje się dożylnie prekursor leku (nietoksyczny „przedlek”), który w nowotworze pod wpływem enzymatycznego działania AEK ulega aktywacji z wytworzeniem toksycznego leku. Dzięki temu nowotworowo specyficznemu uaktywnieniu prekursora leku uzyskuje się znacznie wyższe stężenie leku w nowotworze (5 - 50-krotnie) i obniżone stężenie leku w zdrowych tkankach w porównaniu z osiąganymi w zwykłej terapii. W rezultacie uzyskuje się lepszą zgodność i przedłużone działanie terapeutyczne w modelach heteroprzeszczepow ludzkich nowotworów (Sharma, S. KL. i umi , 1991, Disease Markers 9 : 225-231).
Podobnie jak system ADEPT działa system FMPA (od Fusion protein mediated prodrug activation), w którym zamiast obcopochodnego, a zatem immunogennego AEK, stosuje się nieimmunogenne ludzkie białko fuzyjne dla uzyskania nowotworowo selektywnego zaktywowania prekursora leku (Bosslet i inni, 1994, Cancer Res. 54: 2151-2159).
Również w systemie VDEPT (od Vector dependent enzyme prodrug terapy, Trinh i inni, Cancer Res. 55: 4808-4812), w dwuetapowej terapii genowej nowotworowo selektywny prekursor leku ulega aktywacji po wstrzyknięciu wektorów i ekspresji genu strukturalnego kodującego enzym.
189 604
Endogenną aktywację prekursorów leków (glukuronyl-mostek-antracyklina, Jacquessy i inni, 1991, WO 92/19639) w martwiczych nowotworach i stanach zapalnych oraz związane z nią silne farmakologiczne działanie przeciwnowotworowe i przeciwzapalne opisali po raz pierwszy jako monoterapię prekursorami leków (PMT od Prodrug Monoterapie) Bosslet i inni, 1994, Cancer Res. 54: 2151- 2159 i 1995, Tumor Targeting 1, 45-50. Dzięki farmokologicznym modyfikacjom systemu PMT stwierdzono, że nie tylko chemia samoeliminujących się mostków, ale także hydrofilowość i cytotoksyczność składnika lekowego mają rozstrzygające znaczenie dla skuteczności prekursora leku in vivo.
Wzmocnienie działania PMT zaobserwowano przy włączeniu substancji wywołujących nekrozę (EP 0696456 A2). Szczególnie dobrą użyteczność w farmakologicznych modelach in vivo dało przede wszystkim zastosowanie wraz z odpowiednimi prekursorami leków koniugatów przeciwciał specyficznych dla kompleksów receptorowych VEGF/VEGF, wiążących się kowalencyjnie z białkami biorącymi udział w krzepnięciu krwi, np. z czynnikiem tkankowym.
W EP 0642799 A1 ujawniono nowe enzymatycznie rozszczepialne proleki o wzorze glikozyl-Z-substancja farmakologicznie czynna, w którym Z oznacza grupę mostkową o wzorze -Y[-C(=Y)-X-]p-V(R)n-X-C(=Y)-, w którym X oznacza O, -NH-, metylenoksyl, grupę metylenoaminowąlub grupę metyleno-(Ci-C4)alkiloaminową.
W eP 0595133 A2 ujawniono nowe proleki o wzorze glikozyl-Y[-C(=Y)-X-]p-W(R)n-X-C(=Y)-substancja farmakologicznie czynna, w którym X oznacza O, -NH-, metylenoksyl, grupę metylenoaminową lub grupę metyleno-(Ci-C4)alkiloaminową, ich wytwarzanie i zastosowanie jako leków.
Prekursory leków według wynalazku różnią się od powyższych proleków budową grupy mostkowej. Nowa i korzystna budowa grupy mostkowej zapewnia lepszą skuteczność prekursorów według wynalazku.
Nieoczekiwanie znakomite wyniki uzyskano dzięki zsyntetyzowaniu prekursorów leków, które po endogennej aktywacji enzymatycznej in vivo są znacznie skuteczniejsze od prekursorów leków opisanych w EP 0511917 Al i w EP 0595133 A2. Ta większa skuteczność wynika z nowej i korzystnej budowy chemicznej mostka oraz z wysokiej cytotoksyczności składnika lekowego. Ta nowa i korzystna budowa chemiczna mostka polega na tym, że w przypadku substancji czynnych związanych z mostkiem poprzez grupę hydroksylową uwalnianie substancji czynnej po enzymatycznym odszczepieniu reszty glikozylowej następuje poprzez cyklizację i odszczepienie mostka. Uzyskuje się dzięki temu polepszoną trwałość prekursora leku przy jednoczesnej dobrej podatności na odszczepienie enzymatyczne. Prekursory leków według wynalazku są ponadto trwalsze w warunkach fizjologicznych od znanych prekursorów leków i nie uwalniają tak szybko jak one substancji czynnej.
Tak więc wynalazek dotyczy nowych prekursorów leków o ogólnym wzorze 1 Glikozyl-W(R)n-Z-C(=0)-sc w którym Glikozyl oznacza enzymatycznie odszczepialne ugrupowanie poli-, oligo- lub monosacharydu; W oznacza fenyl; R oznacza atom wodoru, grupę cyjanową, grupę nitrową, atom fluoru, atom chloru lub atom bromu; n oznacza 0, 1 lub 2; Z oznacza -N(CH3)-, -C(CHa)2-NH-, -CH(CH3)-NH-, -C(CH3)2N(C1-C4-alkil)- lub -CH(CH3)-N(Ci-C4-alkil)-; a sc oznacza ugrupowanie substancji czynnej wybrane z grupy obejmującej (4-(N,N'-bis(2-chlorowcoetylo)amino)fenyloksyl-,
189 604 i/lub fizjologicznie dopuszczalne sole związków o ogólnym wzorze 1.
Korzystnymi prekursorami leków według wynalazku są związki o ogólnym wzorze 1, w którym Glikozyl oznacza enzymatycznie odszczepialną resztę kwasu glukuronowego. Szczególnie korzystnymi prekursorami leków według wynalazku są kwas 2-[N-metylo-N-[(4-(N,N'-bis(2-chloroetylo)amino)fenyloksykarbonylo)amino]-4-nitrofenylo-P-D-glukuronowy, kwas 2-[N-metylo-N-[(4-(N,N'-bis(2-jodoetylo)amino)fenyloksykarbonylo]amino]-4-nitrofenylo-p-D-glukuronowy, związek o wzorze 2
Szczególnie korzystnymi substancjami czynnymi są opisane w przykładach pochodna Stickstofflost (4-[N,N-bis(2-chloroetylo)amino]fenol), chinina i dipirydamol.
Odpowiednimi fizjologicznie zgodnymi solami związków o wzorze 1 są np. sole metali alkalicznych, metali ziem alkalicznych oraz sole amonowe i sole aminowych zasad organicznych.
Określenie „monosacharyd” oznacza taką resztę jak reszty D-glukuronylowa, L-iduronylowa, D-glukopiranozylowa, D-galaktopiranozylowa, N-acetylo-D-glukozaminylowa, N-acetylo-D-galaktozaminylowa, D-mannopiranozylowa i L-fukopiranozylowa. Oligolub polisacharydy składają się z od 2 do 20 takich reszt monosacharydowych połączonych ze sobą wiązaniami α- lub β-O-glikozydowymi. Pomiędzy ugrupowaniem monosacharydu i resztą prekursora znajduje się wiązanie α- lub β-glikozydowe.
Odpowiednimi enzymami o zdolności odszczepiania reszt glikozylowych są induronidaza, glukozydaza, galaktozydaza, N-acetylo-D-glukozaminidaza, N-acetylo-D-galaktozaminidaza, mannozydaza, fukozydaza lub glukuronidaza, a korzystnie β-glukuronidaza.
Ponadto substancjami czynnymi mogą być takie związki jak antracykliny, korzystnie doksorubicyna, 4'-epidoksorubicyna albo 4- lub 4'-deoksydoksorubicyna, względnie związek korzystnie wybrany z grupy obejmującej etopozyd, 4-hydroksycyklofosfamid, windezynę, winblastynę, winkrystynę, terfenadin, terbutalin, fenoterol, salbutamol, muskarynę, oksyfenbutazon,
189 604 kwas salicylowy, kwas p-aminosalicylowy, 5-fluorouracyl, 5-fluorocytydynę, 5-fluorourydynę, metotreksat, diklofenak, kwas flufenaminowy, 4-metyloaminofenazon, teofilinę, nifedypinę, mitomycynę C, mitoksantron, kamptotecynę, m-AMSA, taksol, nocodazol, kolchicynę, cyklofosfamid, rachelmycynę, cisplatynę, melfalan, belomycynę, Stickstoff-Senfgas PhosphoramidSenfgas, kwercetynę, genistein, erbstatynę, tyrfostynę, pochodną rohitukiny ((-)-cis-5,7-di-hydroksy-2-(2-chlorofenylo)-8-[4-(3-hydroksy-1-metylo)piperydynylo]-4H-1-benzopiran-4-on; EP 0366061), kwas retinolowy, kwas masłowy, ester forbolu, aklacynomycynę, progesteron, buserelinę, tamoksyfen, mifepriston, onapriston, N-(4-aminobutylo)-5-chloro-2-naftalenosulfonoamid, pirydynyloksazol-2-on, chinoliloksazolon-2-on, izochinoliloksazolon-2-on, staurosporynę, werapamil, forskolinę, 1,9-dideoksyforskolinę, chinidynę, rezerpinę, 18-0-(3,5-dimetoksy-4-hydroksybenzoilo)reserpat, lonidaminę, butioninsulfoximin, ditiokarbaminian dietylu, cyklosporynę A, azatioprin, chlorambucil, N-(4-trifluorometylofenylo)amid kwasu 2-cyjano-3-hydroksykrotonowego (WO 91 17748), 15-deoksyspergualinę, FK 506, ibuprofen, indometacynę, aspirynę, sulfasalazynę, penicylinoaminę, chloroquin, deksametazon, prednisolon, lidokainę, propafenon, prokainę, kwas mefenaminowy, paracetamol, 4-aminofenazon, muskozynę, orciprenalinę, izoprenalinę, amilorid, diaminometylenoamino-pochodną kwasu p-nitrofenylobenzoesowego, względnie ich pochodne dodatkowo podstawione jedną lub większą liczbą grup hydroksylowych, aminowych lub iminowych.
Korzystnymi prekursorami leków są prekursory, w których substancją czynną jest substancja cytostatyczna, w których substancją czynną jest antymetabolit, w których substancją czynną jest 5-fluorouracyl, 5-fluorocytydyna, 5-fluorourydyna, cytozynoarabinozyd lub metotreksat, w których substancją czynną jest substancja włączalna do DNA, w których substancją czynną jest doksorubicyna, daunomycyna, idarubicyna, epirubicyna lub mitoksantron, w których substancją czynną jest substancja hamująca topoizomerazę I i II, w których substancją czynną jest kamptotecyna, etopozyd lub m-AMSA, w których substancją czynną jest inhibitor tubuliny, w których substancją czynną jest winkrystyna, winblastyna, windezyna, taksol, nokodazol lub kolchicyna, w których substancją czynną jest alkylanz, w których substancją czynną jest cyklofosfamid, mitomycyna C, rachelmycyna, cisplatyna, Phosphoramid-Senfgas, melfalan, bleomycyna lub Stickstoff-Senfgas, w których substancją czynną jest neokarcynostatyna, kalicheamycyna, dynemycyna lub esperarmycyna A, w których substancją czynną jest związek dezaktywujący rybosomy, w których substancją czynną jest werrukaryna A, w których substancją czynną jest inhibitor tyrozynofosfokinazy, w których substancją czynną jest kwercetyna, genistein, erbstatyna, tyrfostyna lub pochodna rohitukiny, w których substancją czynną jest aktywator różnicowania, w których substancją czynną jest kwas retinolowy, kwas masłowy, ester forbolu lub aklacynomycyna, w których substancją czynną jest hormon, agonista hormonu lub antagonista hormonu, w których substancją czynną jest progesteron, buserelina, tamoksyfen, mifepriston lub onapriston, w których substancją czynną jest substancja wykazująca pleotropową oporność na cytostatyki, w których substancją czynną jest inhibitor kalmoduliny, w których substancją czynną jest inhibitor proteinokinazy C, w których substancją czynną jest inhibitor P-glikoproteiny, w których substancją czynną jest modulator heksokinazy mitochondrialnej, w których substancją czynną jest inhibitor γ-glutamylocysteinosyntetazy lub glutationo-S-transferazy, w których substancją czynną jest inhibitor superooksydodyzmutazy, w których substancją czynną jest inhibitor definiowanego przez MAk Ki67 związanego z proliferacją białka w jądrach komórkowych dzielących się komórek, w których substancją czynną jest substancja wywierająca działanie immunosupresyjne, w których substancją czynną jest typowy immunosupresor, w których substancją czynną jest makrolid, w których substancją czynną jest cyklosporyna A, rapamycyna lub FK 506, w których substancją czynną jest azatiopryna, metotreksat, cyklofosfamid lub chlorambucyl, w których substancją czynną jest substancja o działaniu przeciwzapalnym, w których substancją czynną jest niesteroidowa substancja o działaniu przeciwzapalnym, w których substancją czynną jest „wolno działający lek przeciwreumatyczny”, w których substancją czynną jest steroid, w których substancją czynną jest substancja o działaniu przeciwzapalnym, przeciwbólowym lub przeciwgorączkowym, w których substancją czynną jest pochodna kwasu organicznego, w których substancją czynną jest niekwasowa substancja przeciwbólowa/przeciwzapalna, w których substancją czynną jest oksyfenbutazon, w których substancją czynną jest substancja znieczulająca miej189 604 scowo, w których substancją czynną jest substancja działająca przeciw arytmii, w których substancją czynną jest antagonista Ca , w których substancją czynną jest substancja przeciwhistaminowa, w których substancją czynną jest substancja o działaniu sympatykomimetycznym, względnie w których substancją czynną jest inhibitor ludzkiej urokinazy; a także pochodne powyższych substancji czynnych, przy czym te substancje czynne są przyłączone do reszty proleku poprzez atom tlenu, -NH- lub grupę iminową.
Wynalazek dotyczy ponadto sposobu wytwarzania nowych prekursorów leków o ogólnym wzorze 1, w którym Glikozyl, W, R, n, Z i sc mają wyżej podane znaczenie, który polega na tym, że związek o ogólnym wzorze
Głikozyl-W(R)n-Z w którym Glikozyl, W, R, n i Z mają wyżej podane znaczenie, poddaje się reakcji z substancją czynną, której ugrupowanie sc zostało zdefiniowane powyżej, o zaktywowanej grupie karboksylowej, przy czym reakcję prowadzi się w obecności rozpuszczalnika wybranego z grupy obejmującej acetonitryl, dioksan, tetrahydrofuran, dichlorometan, dimetyloformamid i aceton, a następnie odszczepia się grupy zabezpieczające drogą hydrolizy.
Aktywowanie substancji czynnej można prowadzić np. metodami podanymi w H. J. Marley, Chem. Soc. Chem. Communication (1987) str. 112-113 lub w H. Hagemann, Angew. Chem., 93 (1981) str. 813-814. Odczepianie grup zabezpieczających można prowadzić np. z użyciem wodorotlenku, węglanu lub cyjanku metalu alkalicznego, tlenku baru, piperydyny lub morfoliny w obecności metanolu, etanolu lub wody.
Wynalazek dotyczy ponadto środka farmaceutycznego zawierającego skuteczną ilość składnika aktywnego oraz farmaceutycznie dopuszczalne i fizjologicznie zgodne nośniki i ewentualnie inne dodatkowe składniki aktywne i substancje pomocnicze, którego cechą jest to, że jako składnik aktywny zawiera co najmniej jeden związek o ogólnym wzorze 1, w którym Glikozyl, W, R, n, Z i sc mają wyżej podane znaczenie, i/lub jego fizjologicznie zgodną sól.
Ze względu na ich działanie farmakologiczne związki według wynalazku można stosować w terapii i profilaktyce wszelkich chorób i zaburzeń, w których przebiegu wewnątrzkomórkowy enzym zdolny do odszczepienia reszty glikozylowej jest eksprymowany i/lub jest uwalniany albo udostępniany na skutek zaburzeń w komórkach. Takimi chorobami są rak, choroby autoimmunologiczne oraz ostre i przewlekłe wysypki skórne w goścu i artropatie powstałe na tle zapalnym, immunologicznym lub przemiany materii, a zwłaszcza choroby nowotworowe i reumatoidalne zapalenie stawów.
Zatem zakresem wynalazku objęte jest także zastosowanie prekursorów leków o ogólnym wzorze 1 i/lub ich soli do wytwarzania środka farmaceutycznego do stosowania w terapii i profilaktyce chorób nowotworowych, chorób autoimmunologicznych i przewlekłych chorób zapalnych, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów.
Środki farmaceutyczne można wytwarzać na drodze łączenia co najmniej jednego związku o ogólnym wzorze 1, farmaceutycznie dopuszczalnego i fizjologicznie zgodnego nośnika i ewentualnie odpowiednich dodatkowych składników aktywnych, dodatków i substancji pomocniczych, z wytworzeniem postaci odpowiedniej do podawania.
Odpowiednimi preparatami środków farmaceutycznych według wynalazku są np. roztwory do wstrzyknięć, przy wytwarzaniu których stosuje się znane substancje pomocnicze, takie jak nośniki, środki wiążące, środki spęczniające lub środki poślizgowe i rozpuszczalniki. Często stosowanymi substancjami pomocniczymi są węglan magnezowy, ditlenek tytanu, laktoza, mannit i inne cukry, talk, białko z mleka, żelatyna, skrobia, celuloza i jej pochodne, oleje zwierzęce i roślinne, takie jak tran z wątroby dorsza, olej słonecznikowy, olej arachidowy lub olej sezamowy, poliglikol etylenowy i takie rozpuszczalniki jak jałowa woda i I-rzędowe lub wielowodorotienowe alkohole, np. gliceryna. Jako nośniki można także stosować liposomy i ludzkie białka.
Korzystnie preparatom farmaceutycznym nadaje się formę postaci dawkowanych zawierających odpowiednią dawkę związku o wzorze 1 jako składnika aktywnego. W przypadku roztworów do wstrzyknięć dawka przeznaczona dla pacjenta ważącego około 70 g wynosi do około 10 g, a korzystnie od około 3 g do 5 g. W razie potrzeby można jednak stosować także wyższe lub niższe dawki dzienne. Dawkę dzienną można podawać jednorazowo w formie
189 604 pojedynczej postaci dawkowanej, względnie z użyciem kilku postaci dawkowanych zawierających mniejsze ilości składnika aktywnego albo w kilku dawkach podzielonych w pewnych odstępach czasu.
Prekursory leków według wynalazku można stosować także we wszystkich chorobach nieonkologicznych, związanych z występowaniem makrofagów, granulocytów i trombocytów, zwłaszcza w stanie zaktywowanym. W stanie zaktywowanym te komórki wydzielają głównie enzymy wewnątrzkomórkowe umożliwiające regiospecyficzną aktywację prekursorów leków według wynalazku.
W chorobach onkologicznych aktywacja prekursorów leków według wynalazku następuje pod działaniem wewnątrzkomórkowych enzymów uwalnianych z obumierających komórek nowotworowych. To zjawisko występuje w przypadku wszystkich większych guzów (o średnicy ponad 0,3 cm), a także po uszkodzeniu nowotworu działaniem immunotoksyn, cytostatyków, naświetlania, białek wiążących lub koniugatów przeciwciało-enzym.
Gdy część glikozylowa prekursora leku według wynalazku ulegnie odszc/epieniu pod działaniem enzymów wyłącznie lokalnie uwolnionych w patofizjologicznych warunkach, lipofilowy lek może zostać uwolniony wyłącznie w tkance docelowej, gdzie może on wywrzeć swe działanie cytotoksyczne.
Zwiększyć korzystne działanie prekursorów leków według wynalazku zawierających cytotoksyczną substancję czynną można poprzez ich połączenie z prekursorami leków według wynalazku zawierającymi inny składnik cytotokryczny. Korzystne są połączenia prekursorów leków zawierających składniki cytotoksyczne o różnym mechanizmie działania, co daje takie same możliwości jak polichemioterapia.
Odpowiednie jest zwłaszcza stosowanie substancji czynnych wysoce skutecznie przerywających jednoniciowy i dwuniciowy DNA, takich jak kalicheamycyna. Szczególnie korzystne jednak jest stosowanie połączeń prekursorów leków, z których jeden zawiera cytotoksyczną substancję czynnią a drugi substancję znoszącą odporność wielolekową.
Środek farmaceutyczny może zawierać jako substancję czynną co najmniej jeden związek o ogólnym wzorze 1 i koniugat przeciwciało-enzym.
Określenie „koniugat przeciwciało-enzym” oznacza związki, które poprzez cześć odpowiadającą przeciwciału wiążą się specyficznie z tkanką nowotworową lub tkanką w stanie zapalnym, a ich część odpowiadająca enzymowi ma zdolność odszczepiania reszty glikozylowej związku o wzorze 1. Przykłady takich związków podano w EP 0501215, EP 0390530 lub eP 0623352.
Przykład 1. Wytwarzanie prekursora pochodnej Stickstofflost (F 373), związek o wzorze 4 według schematu
Związkiem wyjściowym w syntezie związku o wzorze 4 był 2-amino-4-nitrofenol o wzorze 5, który najpierw poddano monometylowaniu z użyciem jodku metylu, z wytworzeniem związku o wzorze 6. W związku o wzorze 6 funkcyjną grupę aminową zabezpieczono grupą BOC, z wytworzeniem kwasu glukuronowego o wzorze 7, który poddano sprzęganiu z bromkiem o wzorze 8 z użyciem tlenku srebra, z wytworzeniem związku o wzorze 9. Po odrzczepieniu grupy BOC działaniem HC1 otrzymano aminę o wzorze 10. Związek o wzorze 11 poddano reakcji z chloromrówczanem z wytworzeniem związku o wzorze 12, który z kolei poddano kondensacji ze związkiem o wzorze 10, z wytworzeniem związku o wzorze 13. Po dwuetapowym rozszczepieniu ugrupowań estrowych w ugrupowaniu kwasu glukuronowego (MeONa/MeOH, potem wodny roztwór NaOH) otrzymano kolejno związek o wzorze 14 i prekursor leku o wzorze 4.
189 604
Schemat
Wzór 6
Wzór 5
Wzór 12
189 604
Cl
Wzór 4
Wytwarzanie 2-(N-metyloamino)-4-nitrofenolu o wzorze 6
Do roztworu 2-amino-4-nitrofenolu o wzorze (1,54 g, 10 mmoli) i jodku metylu (1 ml, 16 mmoli) w metanolu (10 ml) dodano trietyloaminy (2 ml, 14,4 mmola). Po upływie 1 godziny w temperaturze 40°C dodano jeszcze jodku metylu (1 ml) i trietyloaminy (1 ml) i całość mieszano w temperaturze 40°C jeszcze przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono do sucha pod próżnią, pozostałość roztworzono w 2N roztworze octanu sodowego i wyekstrahowano octanem etylu. Fazę organiczną wysuszono nad MgSOą i poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem dichlormetanu/metanolu (95:5) jako eluentu. Otrzymano 880 mg (52%) żądanego związku.
C7H8N2O3:
Obliczono: C : 50,02 H: 4,76 N: 16,73
Stwierdzono: C : 50,00 H: 4,80 N: 16,66
Temperatura topnienia: 148°C (toluen) ‘H-NMR (250 MHz, DMSO): δ 7,44 (dd, Jort(3 = 9 Hz, Jmeta = 3,0 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 3Hz, 1H), 6,77 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,76 (s, 3H)
IR (KBr): v (cm’1) 3363 (OH), 1538, 1338 (NO2)
MS (DCI, NH3): m/z (M+H)+: 169
Wytwarzanie 2-(N-BOC-N-metyloamino)-4-nitrofenolu o wzorze 7
Do roztworu 2-N-metyloamino-4-nitrofenolu o wzorze 6 (4,18 g, 24,9 mmola) w tetrahydrofuranie (50 ml) dodano węglanu di-t-butylu (14 g, 64,15 mmola), węglanu potasowego (17 g, 123 mmole) i wody (50 ml) i całość mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną wyekstrahowano octanem etylu, wysuszono nad MgSO4 i zatężono pod próżnią. Surowy produkt mieszano przez 2 godziny w metanolu (100 ml) z węglanem potasowym (17 g, 123 mmole), zakwaszono nasyconym roztworem chlorku amonowego, wyekstrahowano octanem etylu, wysuszono nad MgSO4 i zatężono pod próżnią. Produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem dichlormetanu/metanolu (97,5:2,5) jako eluentu. Otrzymano 6,2 g (93%) żądanego związku.
C12H16N2O5:
Obliczono: C: 553*^^ H: 6,01 N : 10,44
Stwierdzono: C: 55364 H: 6,:20 N: 10336
Temperatura topnienia: 197°C (toluen/eter naftowy)
189 604 'H-NMR (250 MHz, DMSO): δ 8,10-8,00 (2H), 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 1,40-1,30 (9H).
IR (KBr): v (cm'1) 3129 (OH), 1672 (CO), 1529, 1339 (NO2)
MS (DCI, NH3): m/z [M+H] 269, [M+H-C4H8]+: 213, [M+H-C4H8OCO]+: 169
Wytwarzanie estru metylowego kwasu 2- (N-BOC-N-metyloamino)-4-nitrofenylo-2,3,4-tri-O-acetylo-P-D-glukuronowego o wzorze 9
Do roztworu bromku estru metylowego kwasu 2,3,4-tri-O-acetylo-a-D-glukuronowego o wzorze 8 (126 mg, 0,317 mmola) w acetonitrylu (5 ml) dodano tlenku srebra (0,23 g, 0,992 mmola) i 2-(N-BOC-N-metyloamino)-4-nitrofenolu o wzorze 7. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej, a potem przesączono ją przez Celite 1 zatężono pod próżnią. Produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem dichlormetanu/metanolu (97,5:2,5) jako eluentu.
Otrzymano 165 mg (89%) żądanego związku.
C25H32N2O14
Obliczono: C: 51,37 H: 5,52 N: 4,79
Stwierdzono: C: 51,79 H: 5,72 N: 4,66
Temperatura topnienia: 80°C (toluen\eter naftowy) [a]o = -39°C (c = 1,02 w CHCl3)
Ή-NMR (250 MHz, CDCh): δ 8,14 (dd, Jorto = 9Hz, Jmeta = 2,5 Hz, 1H), 8,15-8,05 (1H), 7,30-7,20 (1H), 5,45-5,30 (4H), 4,25 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,73 (S, 3H), 3,13 (s, 3H), 2,15-2,05 (9H), 1,,65-1,40 (9H)
IR (CDCI3): v (cm-1) 1760 (CO ester), 1699 (CO, karbaminian), 1529, 1349 (NO2).
MS (DCI, NH3): m/z (M+NH4) : 602
Wytwarzanie estru metylowego kwasu 2-(N-metyloamino)-4-nitrofenylo-2,3,4-tri-O-acetylo-p-D-glukuronowego o wzorze 10
Roztwór estru metylowego kwasu 2-(N-BOC-N-metyloammo)-4-nitrofenylo-2,3,4-tri-O-acetylo-P-D-glukuronowego o wzorze 9 (3 g, 5,13 mmola) w 2,12M roztworze chlorowodoru w octanie etylowym (60 ml) mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Roztwór roztworzono w nadmiarze wodnego nasyconego roztworu wodorowęglanu sodowego i całość wyekstrahowano octanem etylu. Fazę organiczną wysuszono nad MgSO4 i zatężono. Produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem dichlormetanu/metanolu (97,5:2,5) jako eluentu. Otrzymano 2,14 g (86%) żółtej substancji stałej.
C20H24N2O12
Obliczono: C: 49,59 H: 4,99 N: 5,78
Stwierdzono: C: 49,81 H: 5,12 N: 4,80
Temperatura topnienia: 120°C (toluen) [a]o = -58°C (c=1,04 w CHCfl)
Ή-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7,53 (dd, Jorto = 8,5 Hz, Jmeta = 2,5 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,45-5,30 (1H), 5,16 (d, J = 7 Hz, b, 1H), 4,50 (d, J = 5 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 2,90 (d, J = 5 Hz, 1H), 2,10-2,05 (9H).
IR (CDCh): v (cm’1) 3443 (NH) , 1758 (CO), 1553, 1346 (NO2)
MS (DCl, NH3): m/z (M+H)+: 485
Wytwarzanie chloromrówczanu 4-[N,N-bis(2-chloroetylo)amino]fenylu o wzorze 12
Fosgen w toluenie (1,93 M roztwór, 8 ml, 15,4 mmola) dodano do suspensji chlorowodorku 4-[N,N-bis(2-chloroetylo)amino]fenolu o wzorze 11 (1,85 mmola) w tetrahydrofuranie (30 ml) i całość mieszano przez 30 minut w temperaturze 0°C. Po dodaniu trietyloaminy (1 ml, 7,17 mmola) całość mieszano jeszcze przez 1 godzinę w temperaturze 0°C. Następnie otrzymaną suspensję przesączono i zatężono pod próżnią w temperaturze pokojowej. Pozostałość poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem dichlorometanu jako eluentu i otrzymano produkt w postaci bezbarwnej cieczy, którą bezpośrednio poddano dalszej reakcji. Wydajność 70%.
Ή-NMR (250 MHz, CDC13) δ 7,10 (d, J = 9 Hz, 2H), 6,66 (d, J = 9 Hz, 2H), 3,73 (t, J = 6,5 Hz, 4H), 3,63 (t, J = 6,5 Hz, 4H)
189 604
IR (CDCl·,): v (cm'1) 1779 (CO), 1514 (aromatyczny)
MS (DCI, NH,): m/z [M+H]+: 296, [M+2+H]+: 298
Wytwarzanie estru metylowego kwasu 2-[N-metylo-N-[4-(N,Nl-bis(2-chloroetylo)amino]fenyloksykarbonylo]ammo]-4-nitrofenylo-2,3,4-tri-O-acetylo-p-D-glukuronowego o wzorze 13
Do roztworu chloromrówczanu 4-[N,N-bis(2-chloroetylo)amino)fenylu o wzorze 12 (0,31 g, 1,04 mmola) w tetrahydrofuranie (15 ml) i diizopropyloetyloaminie (0,25 ml, 1,44 mmola) dodano estru metylowego kwasu 2-(N-metyloamino)-4-nitrofenylo-2,3,4-tri-O-acetylo-e-D-glukuronowego o wzorze 10 (0,50 g, 1,03 mmola) i całość mieszano przez 2 godziny w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin. Po ochłodzeniu mieszaniny reakcyjnej do temperatury pokojowej zatężono ją i produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem dichlormetanu/metanolu (97,5/2,5) jako eluentu. Otrzymano 487 mg (64%) żądanego produktu.
C3.H35N3O.4Cl2:
Obliczono: C: 50,00 H: 4,74 N: 5,64 Cl :9,52
Stwierdzono: C: 49,90 H: 4,82 N: 5,62 CE 9,78
Temperatura topnienia: 101°C (metanol) [α]ο = -47°C (c = 1,10 w CHCE)
Ή NMR (300 MHz, CDCE): δ 8,25-8,15 (2H), 7,45-7,35 (1H), 7,25-7,05 (1H), 6,956,85 (1H), 6,70-6,55 (2H), 5,45-5,25 (4H), 4,28 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,80-3,55 (11 H), 3,38 (s) dwa diastereoizomery karbaminianowe (40/60) 3H, 3,27 (s), 2,20-2,00 (9H).
IR (CDCE): v (cm’1) 1760 (CO, ester), 1722 (CO, karbaminian), 1530, 1350 (NO2).
MS (DCI, NH3): m/z [M+H]+: 744;
[M+2+H]+: 746 [M+Na]+: 766, [M+2+Na]+: 768
Wytwarzanie estru metylowego kwasu 2-[N-metylo-N-[(4-(N,Nl-bis(2-chloroetylo)amino)fenyloksykarbonylo]amino)-4-nitrofenylo-e-D-glukuronowego o wzorze 14
Do suspensji estru metylowego kwasu 2-[N-metylo-N-[4-(N,N'-bis(2-chloiOetylo)amino)fenyloksykarbonylo]amino-4-nitrofenylo-2,3,4-tri-O-acetylo-P-D-glukuronowego o wzorze 13 (68 mg, 0,0915 mmola) w metanolu (5 ml) dodano w temperaturze 15°C etanolanu sodowego (2 mg, 0,037 mmola) i całość mieszano w temperaturze -15°C przez 6 godzin. Po zobojętnieniu wymieniaczem jonowym (Amberlite IRC-50 S) i przesączeniu zatężono otrzymany roztwór i poddano go chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem octanu etylu jako eluentu. Otrzymano 50 mg (89%) żądanego produktu.
C25H29N3O11CI2:
‘H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 8,22 (sl, 1H), 8,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,15-6,90 (2H), 6,80-6,45 (2H), 5,06 (1H), 4,09 (1H), 4,20-3,15 (17H).
IR (CDC13): v (cm’1) 3601, 3448 (OH), 1714 (CO), 1528, 1349 (NO2)
MS (ES): m/z [M+Na]+: 640, [M+2+Na]+ : 642
Wytwarzanie kwasu 2-[N-rnetvlo-N-|(4-(N,N'-bis(2-chioroetylo)aininoffenyloksykarbonylo]amino]-4-nitrofenylo-p-D-glukuronowego o wzorze 4
Do roztworu związku o wzorze 14 (50 mg, 0,0809 mmola) w acetonie (4 ml) dodano w temperaturze -15°C 0,3 ml IN wodnego roztworu wodorotlenku sodowego. Mieszaninę mieszano przez 2 godziny w temperaturze -15°C, a potem zobojętniono IN wodnym roztworem kwasu solnego i zatężono pod próżnią w temperaturze poniżej 40°C. Produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym z użyciem acetonitrylu/wody (9/1) jako eluentu. Otrzymano 45 mg (89%) żądanego produktu.
C24H27N3O„C12:
'H-NMR (250 MHz, CD3OD): 5 8,30 (sl, 1H), 8,24 (dd, JortC) = 9 Hz, J^ta = 2,5 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 9 Hz, 2H), 6, 69 (d, J = 9 Hz, 2H), 5,23 (1H),3,89 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,80-3,33 (1H).
IR (KBr): v (cm-) 3418 (OH), 1705 (CO), 1516, 1349 (NO2)
MS (ES): m/z [M-H]+: 603,
189 604 [M+2-H]+: 605
Przykład 2. Wytwarzanie kwasu 2-[N-metylo-N-[(4-(N,N'-bis(2-jodoetylo)amino)fenyloksykarbonylooiamno]-4-nitrofenylo-e-D-glukuronowego o wzorze 15
Powyższy związek wytworzono sposobem analogicznym do opisanego w przykładzie 1. Przykład 3. Wytwarzanie prekursora chininy o wzorze 2 (F 391)
Prekursor chininy wytworzono sposobem analogicznym do opisanego w przykładzie 1. Przykład 4. Wytwarzanie prekursora dipirydamolu o wzorze 3 (F 392)
Prekursor dipirydamolu wytworzono sposobem analogicznym do opisanego w przykładzie 1.
Przykład 5. Enzymatyczne rozszczepienie związku F 373
Prekursor leku F 373 (związek o wzorze 4) poddano enzymatycznemu rozszczepieniu drogą inkubacji z β-glukmOnidazą z wytworzeniem aromatycznej pochodnej Stickstofflost (4-[N,N-bIs(2-chloroetylo)amino] fenolu o wzorze 11), kwasu glukuronowego i związku mostkowego o wzorze 16.
Prekursor leku F373
+
O2N
>=
Wzór 16
-89 604
Prekursor leku F 373 jest trwały w roztworze w bezwodnym DMSO. W celu uzyskania rozszczepienia do 10 pl roztworu F 373 (5 mg/ml w DMSO) dodano 180 jil 0,02 M buforu fosforanowego o pH 7,2 i 10 pl β-glukuronidazy z E. coli (Sigma) (330 pg/ml) i całość inkubowano w temperaturze 37°C. Próbkę o objętości 25 pl rozcieńczono 225 pl 0,1 M buforu fosforanowego o pH 3,0 (85%) i acetonitrylem (15%), a następnie poddano analizie z użyciem następującego układu HPLC.
Układ HPLC pracował z użyciem pompy gradientowej (Gynkotek, Model 480), autosamplera (Abimed, Model 231/401), detektora UV (Beckman, Model 166, detekcja przy długości fali 212 nm) i analizatora danych (Beckman, System Gold). Rozdzielanie prowadzono w kolumnie RP (Zorbax SB-C 18, 5 pm, 125 x 4,6 mm). Fazę ruchomą stanowiły dwa składniki stosowane według następującego schematu:
A - acetonitryl
B - 0,02 M bufor fosforanowy o pH 3,0 0 minut: 15% A, 85%) B minut: 75% A, 25% B minut: 75% A, 25% B minut: 15% A, 85% B minut: 15% A, 85% B
Wartości otrzymanych pików podano w tabeli 1.
Tabela 1
Czas (minuty) F 373 Związek o wzo- rze 11 Związek mostkowy o wzorze 16 RT=-4,1
RT=12,6 RT=-0,7
0 -9,41 0 0
- -0,46 3,32 1,92
5 0,35 7,43 4,75
7 0 7,33 5,37
-0 0 6,79 5,43
-5 0 5,58 5,43
25 0 4,00 5,70
60 0 0,88 6,53
Przykład 6. Cytotoksyczność F 373, F 391 i F 392 wobec komórek nowotworowych w obecności i pod nieobecność β-glukuronidazy
Na 96-studzienkowej płytce do mikromiareczkowania umieszczono 2 x 103 komórek LoVo w jednej studzience w 100 pl MEM + 10% FKS. Po upływie 24 godzin dodano badanych substancji w określonym stężeniu w 100 pl pożywki ewentualnie zawierającej dodatkowo β-glukuronidazę (stężenie końcowe 50 pg/ml; Sigma G 7896). Każda badana grupa składała się z 4 studzienek, a związki kontrolne inkubowano tylko z pożywką. Po upływie 65 godzin dodano 50 pi MTT (2,5 mg/ml w PBS), a po upływie dalszych 3 godzin usunięto supematant. Substancję barwną wytworzoną przez żyjące komórki rozpuszczono dodatkiem 100 pl DMSO/studzienkę. Dla każdej studzienki zmierzono ekstynkcję z użyciem fotometru Multiscan 340 CC (Fa. Flow) przy 492 nm. Uśredniono wartości uzyskane dla 4-studzienkowych grup i wyznaczono krzywą dawka-reakcja oraz wartości IC50 z użyciem programu komputerowego GraFit 3,0.
189 604
Wyniki próby podano w tabeli 2.
Tabela 2
Prekursor leku Bez β-glukuronidazy IC50 (gmole) W obecności β-glukuronidazy IC50 (gmole)
F 373 >500 6,3
F 391 >400 113
F 392 >400 49,5
Toksycznym związkiem w prekursorze leku F 373 jest związek o wzorze 11 (przykład 1), dla którego wartość IC50 wynosi 5 pmoli. Toksycznym związkiem w prekursorze leku F 391 jest chinina, dla której wartość IC50 wynosi 103 pmoli. Toksycznym związkiem w prekursorze leku F 392 jest dipirydamol, dla którego wartość IC50 wynosi 43 pmoli.
189 604
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 50 egz.
Cena 4,00 zł.

Claims (6)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Nowe leków o ogólnym wzorze 1
    Glikozyl-W(R)n-Z-C(=O)-sc w którym Glikozyl oznacza enzymatycznie odszczepialne ugrupowanie poli-, oligo- lub monosacharydu; W oznacza fenyl; R oznacza atom wodoru, grupę cyjanową, grupę nitrową, atom fluoru, atom chloru lub atom bromu; n oznacza 0, 1 lub 2; Z oznacza -N(CH3)-, -C(CH3)2-NH-, -CH(CH3)-NH-, -C(CH3)2N(C1-C4-alkil)- lub -CH(CH3)-N(C1-C4-alkil)-; a sc oznacza ugrupowanie substancji czynnej wybrane z grupy obejmującej (4-(N,N'-bis(2-chlorowcoetylo)amino)fenyloksyl-, i/lub fizjologicznie dopuszczalne sole związków o ogólnym wzorze 1.
  2. 2. Związek według zastrz. 1, w którym Glikozyl oznacza enzymatycznie odszczepialną resztę kwasu glukuronowego.
  3. 3. Związek według zastrz. 1 albo 2, wybrany z grupy obejmującej kwas 2-[N-metylo-N-[(4-(N,N'-bis(2-chloroetylo)amino)fenyloksykarbonylo]amino]-4-nitrofenylo-P-D-glukuronowy, kwas 2-[N-metylo-N-[(4-(N,N'-bis(2-jodoetylo)amino)fenyloksykarbonylo]amino]-4-nitrofenylo-P-D-glukuronowy, związek o wzorze 2 , oraz związek o wzorze 3
    189 604
  4. 4. Sposób wytwarzania nowych prekursorów leków o ogólnym wzorze 1, w którym Glikozyl, W, R, n, Z i sc mają znaczenie podane w zastrz. 1, znamienny tym, że związek o ogólnym wzorze
    Glikozyl-W(R)n-Z w którym Glikozyl, W, R, n i Z mają znaczenie podane w zastrz. 1, poddaje się reakcji z substancją czynną, której ugrupowanie sc zdefiniowano w zastrz. 1, o zaktywowanej grupie karboksylowej, przy czym reakcję prowadzi się w obecności rozpuszczalnika wybranego z grupy obejmującej acetonitryl, dioksan, tetrahydrofuran, dichlorometan, dimetyloformamid i aceton, a następnie odszczepia się grupy zabezpieczające drogą hydrolizy.
  5. 5. Środek farmaceutyczny zawierający skuteczną ilość składnika aktywnego oraz farmaceutycznie dopuszczalne i fizjologicznie zgodne nośniki i ewentualnie inne dodatkowe składniki aktywne i substancje pomocnicze, znamienny tym, że jako składnik aktywny zawiera co najmniej jeden związek o ogólnym wzorze 1, w którym Glikozyl, W, R, n Z i sc maja znaczenie podane w zastrz 1, i/lub jego fizjologicznie zgodną sól.
  6. 6. Zastosowanie prekursorów leków o ogólnym wzorze 1 określonych w zastrz. 1 i/lub ich soli do wytwarzania środka farmaceutycznego do stosowania w terapii i profilaktyce chorób nowotworowych, chorób autoimmunologicznych i przewlekłych chorób zapalnych, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów.
PL97318878A 1996-03-12 1997-03-10 Nowe prekursory leków, sposób ich wytwarzania, środek farmaceutyczny i zastosowanie prekursorów leków PL189604B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP96103866 1996-03-12

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL318878A1 PL318878A1 (en) 1997-09-15
PL189604B1 true PL189604B1 (pl) 2005-08-31

Family

ID=8222555

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL97318878A PL189604B1 (pl) 1996-03-12 1997-03-10 Nowe prekursory leków, sposób ich wytwarzania, środek farmaceutyczny i zastosowanie prekursorów leków

Country Status (24)

Country Link
US (1) US5935995A (pl)
EP (1) EP0795334B1 (pl)
JP (1) JP4392065B2 (pl)
KR (1) KR100466467B1 (pl)
CN (1) CN1168733C (pl)
AT (1) ATE316799T1 (pl)
AU (1) AU708202B2 (pl)
BG (1) BG61900B1 (pl)
BR (1) BRPI9701248B1 (pl)
CA (1) CA2199664C (pl)
CZ (1) CZ297994B6 (pl)
DE (1) DE59712561D1 (pl)
DK (1) DK0795334T3 (pl)
ES (1) ES2257756T3 (pl)
HU (1) HU228764B1 (pl)
NO (1) NO320322B1 (pl)
NZ (1) NZ314368A (pl)
PL (1) PL189604B1 (pl)
RO (1) RO120951B1 (pl)
RU (1) RU2191021C2 (pl)
SG (1) SG50011A1 (pl)
SI (1) SI0795334T1 (pl)
TR (1) TR199700178A2 (pl)
UA (1) UA50719C2 (pl)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5525606A (en) 1994-08-01 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Substituted 06-benzylguanines and 6(4)-benzyloxypyrimidines
DE19720312A1 (de) * 1997-05-15 1998-11-19 Hoechst Ag Zubereitung mit erhöhter in vivo Verträglichkeit
AU772153B2 (en) 1999-02-12 2004-04-08 Molecular Insight Pharmaceuticals, Inc. Matrices for drug delivery and methods for making and using the same
US6716452B1 (en) 2000-08-22 2004-04-06 New River Pharmaceuticals Inc. Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
JP5005127B2 (ja) 1999-05-04 2012-08-22 ストラカン・インターナショナル・リミテッド アンドロゲングリコシド及びそのアンドロゲン作用活性
US6191119B1 (en) * 1999-10-15 2001-02-20 Supergen, Inc. Combination therapy including 9-nitro-20(S)-camptothecin
US8394813B2 (en) 2000-11-14 2013-03-12 Shire Llc Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
DE10058596A1 (de) * 2000-11-25 2002-06-06 Aventis Pharma Gmbh Verfahren zum Screening von chemischen Verbindungen zur Modulierung der Wechselwirkung einer EVH1-Domäne oder eines Proteins mit einer EVH1-Domäne mit einer EVH1-Bindedomäne oder einem Protein mit einer EVH1-Bindedomäne sowie ein Verfahren zum Nachweis besagter Wechselwirkung
US20060014697A1 (en) 2001-08-22 2006-01-19 Travis Mickle Pharmaceutical compositions for prevention of overdose or abuse
US7169752B2 (en) 2003-09-30 2007-01-30 New River Pharmaceuticals Inc. Compounds and compositions for prevention of overdose of oxycodone
AU2002323570A1 (en) 2001-08-30 2003-03-10 Chemocentryx, Inc. Bicyclic compounds as inhibitors of chemokine binding to us28
CN1671724A (zh) * 2002-06-20 2005-09-21 日本水产株式会社 前药、其作为医药的应用及其制法
US8133881B2 (en) 2003-01-13 2012-03-13 Shire Llc Carbohydrate conjugates to prevent abuse of controlled substances
US7160867B2 (en) * 2003-05-16 2007-01-09 Isotechnika, Inc. Rapamycin carbohydrate derivatives
CA2561993A1 (en) * 2004-03-30 2006-04-13 Painceptor Pharma Corporation Compositions and methods for modulating gated ion channels
US7825096B2 (en) * 2004-09-08 2010-11-02 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase inactivators and beta-glucuronidase cleavable prodrugs
ES2389532T3 (es) * 2005-06-29 2012-10-29 Threshold Pharmaceuticals, Inc. Profármacos alquilantes de fosforamidato
AU2008236684B2 (en) * 2007-04-06 2013-04-18 Ziopharm Oncology, Inc. Salts of isophosphoramide mustard and analogs thereof
GB0907551D0 (en) * 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions
RU2568639C2 (ru) * 2009-09-02 2015-11-20 Окленд Юнисервисиз Лимитед Ингибиторы киназы, их пролекарственные формы и их применение в терапии
KR101253399B1 (ko) 2010-10-26 2013-04-11 영남대학교 산학협력단 아포지단백질 ａ－ｉ 및 그 변이체를 포함한 재조합 고밀도지단백질을 이용한 라파마이신 제형
KR101628872B1 (ko) 2014-05-28 2016-06-09 주식회사 레고켐 바이오사이언스 자가-희생 기를 포함하는 화합물
CN112451682A (zh) 2015-11-25 2021-03-09 乐高化学生物科学股份有限公司 包含自降解基团的缀合物及其相关方法
CA3006249A1 (en) 2015-11-25 2017-06-01 Legochem Biosciences, Inc. Antibody-drug conjugates comprising branched linkers and methods related thereto
CA3006247A1 (en) 2015-11-25 2017-06-01 Legochem Biosciences, Inc. Conjugates comprising peptide groups and methods related thereto
US11793880B2 (en) 2015-12-04 2023-10-24 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
US11229708B2 (en) 2015-12-04 2022-01-25 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
MX2019011655A (es) 2017-03-29 2019-12-19 Legochem Biosciences Inc Profarmaco de dimero de pirrolobenzodiazepina y compuesto conjugado ligando-conector de este.
AU2019216531A1 (en) 2018-02-02 2020-09-24 Maverix Oncology, Inc. Small molecule drug conjugates of gemcitabine monophosphate
CN112601555A (zh) 2018-05-09 2021-04-02 乐高化学生物科学股份有限公司 与抗cd19抗体药物结合物相关的组合物和方法
KR20210028544A (ko) 2019-09-04 2021-03-12 주식회사 레고켐 바이오사이언스 인간 ror1에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 및 이의 용도

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5284856A (en) * 1988-10-28 1994-02-08 Hoechst Aktiengesellschaft Oncogene-encoded kinases inhibition using 4-H-1-benzopyran-4-one derivatives
DE3836676A1 (de) * 1988-10-28 1990-05-03 Hoechst Ag Die verwendung von 4h-1-benzopyran-4-on-derivaten, neue 4h-1-benzopyran-4-on-derivate und diese enthaltende arzneimittel
AU648015B2 (en) * 1989-01-23 1994-04-14 Akzo N.V. Site specific in-vivo activation of therapeutic drugs
DE4106389A1 (de) * 1991-02-28 1992-09-03 Behringwerke Ag Fusionsproteine zur prodrug-aktivierung, ihre herstellung und verwendung
ES2102367T3 (es) * 1990-05-18 1997-08-01 Hoechst Ag Amidas de acidos isoxazol-4-carboxilicos y amidas de acidos hidroxialquiliden-cianoaceticos, medicamentos que contienen estos compuestos y su utilizacion.
FR2676058B1 (fr) * 1991-04-30 1994-02-25 Hoechst Lab Prodrogues glycosylees, leur procede de preparation et leur utilisation dans le traitement des cancers.
ES2069955T3 (es) * 1991-10-25 1995-05-16 Tungsram Reszvenytarsasag Lampara de descarga de baja presion con un solo casquillo.
DE4233152A1 (de) * 1992-10-02 1994-04-07 Behringwerke Ag Antikörper-Enzym-Konjugate zur Prodrug-Aktivierung
CA2081281A1 (en) * 1992-10-23 1994-04-24 Shing-Ming Wang Activation of glucuronide prodrugs by ligand-beta-glucuronidase conjugates for chemotherapy
DE4236237A1 (de) * 1992-10-27 1994-04-28 Behringwerke Ag Prodrugs, ihre Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
DE4314556A1 (de) * 1993-05-04 1994-11-10 Behringwerke Ag Modifizierte Antikörperenzymkonjugate und Fusionsproteine sowie ihre Anwendung zur tumorselektiven Therapie
EP0647450A1 (en) * 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
DE4417865A1 (de) * 1994-05-20 1995-11-23 Behringwerke Ag Kombination von Tumornekrose-induzierenden Substanzen mit Substanzen, die durch Nekrosen aktiviert werden, zur selektiven Tumortherapie

Also Published As

Publication number Publication date
DE59712561D1 (de) 2006-04-13
AU1620597A (en) 1997-09-18
TR199700178A2 (tr) 1997-09-21
BR9701248A8 (pt) 2013-06-18
BG61900B1 (bg) 1998-09-30
BG101290A (en) 1997-09-30
CZ74297A3 (en) 1997-09-17
AU708202B2 (en) 1999-07-29
KR100466467B1 (ko) 2005-06-29
BR9701248A (pt) 1999-10-13
CN1163895A (zh) 1997-11-05
EP0795334B1 (de) 2006-02-01
RU2191021C2 (ru) 2002-10-20
EP0795334A3 (de) 1997-09-24
HU228764B1 (en) 2013-05-28
BRPI9701248B1 (pt) 2022-01-18
MX9701832A (es) 1998-07-31
KR970065550A (ko) 1997-10-13
HUP9700579A2 (en) 1997-12-29
CZ297994B6 (cs) 2007-05-16
HUP9700579A3 (en) 1999-05-28
CN1168733C (zh) 2004-09-29
SG50011A1 (en) 1998-06-15
ES2257756T3 (es) 2006-08-01
CA2199664A1 (en) 1997-09-12
NO320322B1 (no) 2005-11-21
CA2199664C (en) 2008-05-20
ATE316799T1 (de) 2006-02-15
NO971116D0 (no) 1997-03-11
NZ314368A (en) 1998-10-28
RO120951B1 (ro) 2006-10-30
JPH101495A (ja) 1998-01-06
PL318878A1 (en) 1997-09-15
US5935995A (en) 1999-08-10
SI0795334T1 (sl) 2006-06-30
EP0795334A2 (de) 1997-09-17
JP4392065B2 (ja) 2009-12-24
DK0795334T3 (da) 2006-06-06
UA50719C2 (uk) 2002-11-15
HU9700579D0 (en) 1997-04-28
NO971116L (no) 1997-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL189604B1 (pl) Nowe prekursory leków, sposób ich wytwarzania, środek farmaceutyczny i zastosowanie prekursorów leków
JP3841311B2 (ja) プロドラッグ、その製造および医薬としての使用
RU2234322C2 (ru) Препарат с улучшенной переносимостью in vivo
JP2002517463A (ja) α−１Ａアドレナリン作動性レセプターを調節する新規の治療剤
WO2012090104A1 (en) Methods and compositions for designing novel conjugate therapeutics
HK1255308A1 (zh) 用於治疗由psma表达细胞引起的疾病的共轭物
CN102803228B (zh) 酸不稳定触发子单元
US8597631B2 (en) Linear self-eliminating oligomers
Cogan et al. Doxsaliform: A novel N-Mannich base prodrug of a doxorubicin formaldehyde conjugate
MXPA97001832A (en) New profarmacos for inflamator tumors and disease therapy
RU2809635C1 (ru) Конъюгаты монометил ауристатина е с лигандами асиалогликопротеинового рецептора для направленного транспорта в опухолевые клетки печени
ZA200004087B (en) Novel therapeutic agents that modulate alpha-1A adrenergic receptors.