PT861231E

PT861231E - Derivados da l-n6-(iminoetil)-lisina uteis como inibidores da sintase do oxido nitrico

Info

Publication number: PT861231E
Application number: PT96929765T
Authority: PT
Inventors: E Ann Hallinan; William M Moore
Original assignee: Searle & Co
Priority date: 1995-09-11
Filing date: 1996-09-09
Publication date: 2001-02-28
Also published as: EP0861231A1; CA2231768A1; WO1997010204A1; EP0861231B1; DE69610932T2; DE69610932D1; BR9610912A; AU6903796A; JPH11512428A; NZ316735A; DK0861231T3; AU720070B2; MX9801897A; ATE197449T1; GR3034944T3; ES2152558T3; US5830917A

Description

&Λ2.31 , ^ η , DESCRIÇÃO "DERIVADOS DA L-N6-(IMINOETIL)-LISINA, ÚTEIS COMO INIBIDORES DA SINTASE DO ÓXIDO NÍTRICO"

Antecedentes do Invento

Campo do Invento O presente invento diz respeito a novas aminoálcool-aminas, derivados da L-N6-(l-iminoetil)-lisina, às composições farmacêuticas contendo estes novos compostos, e a sua utilização terapêutica, em particular no seu uso como inibidores da sintase do óxido nítrico. Técnica Relacionada É conhecido, desde o início dos anos 80, que a relaxação vascular devido à acetilcolina está dependente da presença do endotélio e a sua actividade foi relacionada com um factor humoral lábil, que foi nomeado como o factor relaxante derivado do endotélio (FRDE). A actividade do óxido nítrico (NO) como vasodilatador é conhecida há mais de 100 anos e o NO é o componente activo do amilnitrito, gliceriltrinitrito e outros nitro-vasodilatadores. A recente identificação do FRDE como o NO coincidiu com a descoberta de um processo bioquímico pelo qual NO é sintetizado a partir do amino-acido L-arginina através da enzima sintase do NO. NO é o estimulador endógeno da ciclase do guanilato solúvel e está envolvida em outras acções biológicas em adição à relaxação dependente do endotélio, incluindo a citotoxicidade das células fagocitárias e comunicação célula a célula no sistema nervoso central (veja-se Moncada et al., Biochemical Pharmacology, 38. 1709-1715 (1989) e Moncada et al., Pharmacoíogy Reviews. 43, 109-142 (1991). Pensa-se actualmente que o excesso de produção de NO pode estar envolvida numa série de situações, particularmente situações envolvendo a hipotensão sistémica, tal como o choque tóxico e a terapia de certas citoquinas. A síntese de NO a partir de L-arginina pode ser inibida por um análogo da L-arginina, L-N-monometil-arginina (L-NMMA) e foi proposta a utilização terapêutica do L-NMMA para o tratamento do choque tóxico e outros tipos de hipotensão sistémica (WO 91/04024 e GB-A-2240041). O uso terapêutico de certos outros inibidores da sintase do NO para os mesmos fins, que não sejam a L-NMMA, foi proposto na WO 91/04024 e na EP-A-0446699.

Recentemente, tomou-se aparente que existem pelo menos três tipos de sintase do NO, como a seguir se descreve: (i) uma enzima constitutiva, dependente de Ca**/ calmodulina, localizada no endotélio, que liberta NO em resposta a receptores ou estimulação física. (ii) uma enzima constitutiva, dependente de Cacalmodulina, localizada no cérebro, que liberta NO em resposta a receptores ou estimulação física. (iii) uma enzima independente do Ca++ que é induzida pela endotoxina e citoquinas, depois da estimulação do músculo liso vascular, macrófagos, células endoteliais e uma quantidade de outras células. Depois de expresso, esta sintase do NO indutível, sintetiza o NO por períodos longos. -3-^ ^ O NO libertado por enzimas constitutivos actua por um mecanismo de transdução que está na base de várias respostas fisiológicas. O NO produzido pela enzima indutível é uma molécula citotóxica para células tumorais e microorganismos invasores. Parece que os efeitos adversos do excesso de produção de NO, em particular a vasodilatação patológica e estragos nos tecidos, pode resultar maioritariamente dos efeitos do NO sintetizado pela sintase do NO indutível.

Tem-se vindo a desenvolver um conjunto de evidências para que o NO esteja envolvido na degeneração das cartilagens que se dá em certas condições tais como a artrite e é também conhecido que a síntese de NO é aumentada na artrite reumatoide. Deste modo, outras situações em que há uma vantagem em inibir a produção de NO pela L-arginina, incluem as situações autoimunes e/ou situações inflamatórias afectando as juntas, por exemplo artrite, doença inflamatória da bexiga, isquemia cardiovascular, diabetes, hiperalgesia (alodinia), isquemia cerebral (quer a isquemia focal, a apoplexia trombótica e a isquemia global, paragens secundárias até cardíacas) e outros distúrbios do SNC mediadas pelo NO.

Outras situações em que existem vantagens em inibir a produção de NO a partir da L-arginina incluem a hipotensão sistémica associada com o choque séptico e/ou tóxico, induzido por uma variedade grande de agentes: a terapia com citoquinas tais como as TNF, IL-1 e IL-2; e como adjuvante de imunosupressão a curto prazo, na terapia de transplantes.

Alguns dos inibidores da sintase do NO propostos para uso terapêutico até agora, e em particular L-NMMA, são não selectivos já que -4- U**l inibem quer a sintase do NO constitutiva e a indutível. A utilização de tais inibidores não selectivos da sintase do NO requer um grande cuidado de modo a evitar consequências potencialmente sérias de sobre-inibição da sintase do NO constitutiva, que incluem hipertensão e possíveis tromboses e danos nos tecidos. Em particular, no caso do uso terapêutico de L-NMMA para o tratamento do choque tóxico, foi recomendado que o paciente deva ser sujeito a monitorização contínua da pressão sanguínea durante todo o tratamento. Assim, enquanto que os inibidores não selectivos da sintase do NO têm utilidade terapêutica desde que se tomem protecções adequadas, os inibidores da sintase do NO que são selectivos, no sentido em que inibem a sintase do NO em proporções consideravelmente superiores que as isoformas da sintase do NO constitutiva, seriam de maiores benefícios terapêuticos e mais fáceis de utilizar. W094/12165, WO94/14780, WO 93/13055, EP04466699A1, a Patente U.S. N° 5.132.453 e PCT/US95/02669 revelam compostos que inibem a síntese do óxido nítrico e preferencialmente inibem a isoforma da sintase do NO indutível. C.A. 110. 228216 / (1989) revela o composto

NH

OH

NH

Η,Ν N' 2 H CH I NH, -CH < ^CH ^•ch2\ ^H nh2 que é um derivado da guanidina e útil como um antibiótico contra o vírus herpes simplex. C.A. 105. 225818 (1986) revela o composto -5-

ΝΗ II Η,Ν Ν' Η η

CH- I NEL ψ-ch^nh-c. ΝΗ que é útil como um fungicida agrícola.

Sumário do Invento

De acordo com o presente invento, são apresentados nóveis aminoalcois-aminas derivados da L-Nó-(l-iminoetil)-lisina. Estes nóveis inibidores podem ser representados pela fórmula química seguinte. Um composto ou um seu sal, pro-fármaco ou éster farmaceuticamente aceitáveis tendo a fórmula (I):

NR,R2 Y é um hidrogénio, um radical alquilo de baixo peso molecular, radical alquenilo de baixo peso molecular, radical alquinilo de baixo peso molecular, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicí-clico, amino, radical heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que os referidos radicais podem ser opcionalmente substituídos com hidrogénio, ciano, alquilo de baixo peso molecular, nitro, amino, radicais de hidrocarbonetos alicíclicos, ou radicais de hidrocarbonetos aromáticos que podem ser opcionalmente substituídos com alquilos de baixo peso molecular; X é um radical de alquileno de baixo peso molecular, radical de .6- (*η ^ alquenileno de baixo peso molecular, radical de alquinileno de baixo peso molecular, radical de hidrocarboneto aromático, (CH2)mQ(CH2)n, em que m = 1-3, n = 1-3 e Q é enxofre, sulfínilo, sulfonilo ou oxigénio, C=0, radical alquinileno de baixo peso molecular, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico ou heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que todos os radicais referidos são substituídos opcionalmente com hidrogénio, halogénio e alquilo de baixo peso molecular; R1, R2, R3 e R4 são seleccionados independentemente do grupo constituído por hidrogénio ou um alquilo de baixo peso molecular; A é um radical de alquileno de baixo peso molecular, em que o referido radical é substituído opcionalmente com hidrogénio, alquilo de baixo peso molecular, hidroxilo, alcoxilo de baixo peso molecular, alcoxilcarbonilo, alquilariloxilo, tiol, tioalcoxilo de baixo peso molecular, tioalquilariloxilo, tioariloxilo, sulfmilalquilo, sulfmilalquilarilo, sulfinilarilo, sulfonilalquilo, sulfo-nilalquilarilo, sulfonilarilo, halogénio, radicais de hidrocarbonetos aromáticos ou radicais de hidrocarbonetos alicíclicos; ou A pode ser uma ligação directa com o resto da molécula. B" é CH2R5, em que R5 é amidina, guanidina, sulfonamida, amino que pode ser substituído opcionalmente com radicais alquilo, alquilarilo ou arilo, excepto nos compostos em que Y é amino, R5 é guanidino, R1, R2, R3 e R4 são hidrogénios, X é n-propilo e A é hidroxil-octilo ou X é n-pentilo e A é n-butilo.

Num outro aspecto geral, o presente invento é dirigido para a inibição da síntese do óxido nítrico, num paciente necessitando de tal tratamento, pela administração de um composto da Fórmula (I) incluindo os que foram -7-

excluídos, os quais inibem preferencialmente a isoforma indutível da sintase do oxido nítrico em relação à isoforma constitutiva da sintase do oxido nítrico, numa quantidade inibitória da síntese do óxido nítrico para o referido paciente. O invento está ainda relacionado com uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I), incluindo aquela em que Y é amino, R5 é guanidino, R1 até R4 são hidrogénios, Y é pentilo e A é n-butilo.

Os compostos e composições definidas acima tem utilidade como inibidores da sintase do óxido nítrico. Estes compostos inibem preferencialmente a forma indutível até três vezes mais que a forma constitutiva.

As situações em que é vantajoso inibir a produção de NO a partir da L-arginina incluem a hipotensão sistémica e/ou séptica e/ou o choque tóxico induzido por uma grande variedade de agentes; a terapia com citoquinas tais como TNF, IL-1 e IL-2; e como adjuvante para a imunosupressão de curto prazo na terapia dos transplantes. Outras condições em que há vantagens na inibição da produção de NO de L-arginina incluem doenças autoimunes e/ou condições inflamatórias tais como aquelas que afectam as juntas, por exemplo a artrite ou doença da bexiga inflamada, isquémia cardiovascular, diabetes, isqémia cerebral e outros distúrbios do CNS mediados pelo NO.

Um modelo de realização do presente invento é um composto da fórmula (I), em que: Y é hidrogénio ou alquilo de baixo peso molecular. X é um alquileno de 3 a 5 átomos A é um alquileno de 1 a 3 átomos substituído opcionalmente com hidroxilo ou uma ligação directa ao resto da molécula. -8-

Um, ^ ί^Ί É preferido que Y seja metilo, X é preferivelmente butileno, R1, R2, R3 eR4 são de preferência hidrogénios e A seja preferivelmente um alquileno de baixo peso molecular ou uma ligação directa ao resto da molécula. O presente invento inclui compostos da fórmula (I) na forma de sais, em particular sais de ácidos de adição. Os sais adequados incluem aqueles que sejam formados de ácidos orgânicos ou inorgânicos. Tais sais de ácidos de adição são normalmente aceitáveis farmaceuticamente, embora sais não aceitáveis farmaceuticamente sejam úteis na preparação e purificação do composto em questão. Assim, sais preferidos incluem aqueles formados de ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico, cítrico, tartárico, fosfórico, láctico, acético, succínico, fumárico, maleico, metanosulfónico, etanosulfónico, p-toluenos-sulfónico, benzenossulfónico e semelhantes. (Veja-se por exemplo, S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sei., 1977, 66, 1-19). Sais dos compostos da fórmula ((I) podem ser produzidos pela reacção entre o composto adequado na forma de base livre e o ácido apropriado.

Embora seja possível a administração dos compostos da fórmula (I) na sua forma crua, é preferível apresentá-los como uma formulação farmacêutica.

De acordo com este novo aspecto, o presente invento diz respeito a uma formulação farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitáveis, juntamente com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, um ou mais ingredientes terapêuticos. O(s) veículo(s) devem ser "aceitáveis" no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e não sendo perniciosos para o seus recipientes.

As formulações incluem aquelas adequadas para administração (incluindo administração subcutânea, intradermal, intramuscular, intravenosa e -9- Ιμ, ^ ί^~Ί intrarticular), rectal e tópica (incluindo dermal, bucal, sublingual e intraocular), embora a via mais adequada seja dependente, por exemplo, da condição e tipo de distúrbio do paciente. A formulação pode ser apresentada convenientemente numa forma de dosagem unitária e pode ser preparada por quaisquer métodos bem conhecidos na ciência farmacêutica. Todos os métodos incluem o passo de associar um composto da fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável (o ingrediente activo) com um veículo que é composto de um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas pela mistura uniforme e íntima do ingrediente activo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos, ou ambos e depois, se necessário, a moldagem do produto na formulação desejada.

As formulações do presente invento, adequadas à administração oral, podem ser apresentadas como unidades individuais, tais como cápsulas, pílulas ou comprimidos, contendo cada um deles uma quantidade predeterminada do ingrediente activo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida de óleo em água; ou como uma emulsão líquida de água em óleo. O ingrediente activo pode também ser distribuído como um bolus, electuário ou pasta.

Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos podem ser preparados por prensagem em maquinaria adequada do ingrediente activo, numa forma de fluxo contínuo, tal como pó ou grânulos, opcionalmente ligado a um agente ligante, lubrificante, diluente inerte, lubrificante, de superfície activa ou dispersante. Comprimidos moldáveis podem ser feitos pela moldagem, numa máquina adequada, de uma mistura do composto em pó com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem ser revestidos ou cortadas opcionalmente, de maneira a assegurar uma libertação controlada do seu ingrediente activo. - 10- (/Imj

As formulações para a administração parenteral incluem injecções estéreis aquosas e não aquosas que podem conter antioxidantes, tampões, agentes bacteriostáticos e solutos que tomem as formulações isotónicas com o sangue do paciente desejado; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes de espessamento. As formulações podem ser apresentadas em pacotes de doses unitárias ou de multidoses, por exemplo ampolas ou frascos selados e podem ser armazenadas depois de liofilizadas, necessitando só da adição de um veículo líquido estéril, por exemplo, uma solução salina, água própria para injecção, imediatamente antes de serem usadas. Soluções e suspensões de injecções extemporâneas podem ser preparadas de pós estéreis, grânulos e comprimidos de tipos previamente descritos.

As formulações para administração rectal podem ser apresentadas como supositórios com os veículos usuais, tais como manteiga de cacau ou polietilenoglicol.

As formulações para administração tópica na boca, por exemplo, bucal ou sublingual, incluem losangos, compreendendo o ingrediente activo numa base aromatizada tal como sacarose e acácia ou tragacanta, e pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia.

As formulações de dosagem unitária são aquelas contendo uma dose efectiva do ingrediente activo, tal como será abaixo descrito, ou uma sua fracção apropriada.

Deve ser percebido que em adição aos ingredientes mencionados acima, as formulações deste invento podem incluir outros agentes convencionais -11 - Ι/Λη nesta técnica que sejam adaptados às formulações em questão, por exemplo aquelas adequadas à administração oral podem incluir agentes aromatizantes.

Os compostos deste invento podem ser administrados oralmente ou através de injecções, em doses de 0,001 a 2500 mg / kg por dia. A gama de doses para humanos adultos é geralmente de 0,005 mg a 10 g/dia. Os comprimidos ou quaisquer outras formas de apresentação apresentados em unidades singulares, podem conter uma quantidade apropriada do composto do invento que seja efectiva em tal dosagem, ou uma quantidade múltipla da mesma, por exemplo, unidades contendo 5 mg a 500 mg, geralmente de 10 mg a 200 mg.

Os compostos da fórmula (I) são administrados preferencialmente oralmente ou em injecção (intravenosa ou subcutânea). A quantidade exacta do composto a ser administrado a um paciente será da responsabilidade do médico assistente. Contudo, a dose empregue irá depender de uma quantidade de factores, incluindo a idade e sexo dos pacientes, o distúrbio específico a ser tratado, e a sua gravidade. Também, a via de administração pode variar, dependendo do distúrbio e sua gravidade.

Como é aqui utilizado, o termo "alquilo de baixo peso molecular", sozinho ou em combinação, significa radical alquilo acíclico contendo de 1 a 10, preferivelmente de 1 a 8 átomos de carbono e mais preferivelmente de 1 a 6 átomos de carbono. Exemplos de tais radicais incluem o metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, tert-butilo, pentilo, iso-amilo, hexilo, octilo e semelhantes. O termo "alquenilo de baixo peso molecular" refere-se a um radical de hidrocarboneto acíclico insaturado, de tal maneira que contenha pelo menos uma ligação dupla. Tais radicais, contém de 2 a 10 átomos de carbono, -12-

preferivelmente de 2 a 8 átomos de carbono, e o mais preferivelmente de tudo de 2 a 6 átomos de carbono. Exemplos de radicais alquenilo adequados incluem o propenilo, 1-butenilo, isobutenilo, 1-pentenilo, 2-(2-metil-l-butenilo), 3-metil-l-butenilo, 1-hexenilo, 1-heptenilo, 1-octenilo e semelhantes. O termo "alquinilo de baixo peso molecular" refere-se a um radical de hidrocarboneto acíclico insaturado de tal maneira que contenha uma ou mais ligações triplas, contendo tais radicais de 2 a 10 átomos de carbono, preferivelmente de 2 a 8 átomos de carbono, e o mais preferivelmente de tudo de 2 a 6 átomos de carbono. Exemplos de radicais alquinilo adequados incluem os radicais de etinilo, propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 1-pentinilo, 2-pentinilo, 3-metil-l-butinilo, 1-hexinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, 3,3-dimetil-l-butinilo e semelhantes. O termo "hidrocarboneto alicíclico" ou "cicloalquilo" significa um radical alifático num anel com 3 a 10 átomos de carbono e preferencialmente de 3 a 6 átomos de carbono. Exemplos de radicais alicíclicos adequados incluem o ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo e semelhantes. O termo "radical de hidrocarboneto aromático" significa 4 a 16 átomos de carbono, preferivelmente de 6 a 12 átomos de carbono, e o mais preferivelmente de tudo de 6 a 10 átomos de carbono. Exemplos de radicais de hidrocarboneto aromático incluem o fenilo, naftilo e semelhantes. O termo "arilo" tal como é aqui utilizado significa radicais aromáticos de um só anel de 5- e 6-átomos, os quais podem incluir de zero a quatro heteroátomos. Arilos representativos incluem fenilo, tienilo, furanilo, piridinilo, (is) oxazolilo e semelhantes. - 13-

O termo DCM significa diclorometano. O termo DEAD significa azodicarboxilato de dietilo. O termo DIBAL-H significa hidreto de diisobutilalumínio O termo DMAP significa dimetilaminopiridina. O termo DMSO significa dimetilsulfóxido. O termo EDC significa hidrocloreto l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida. O termo "radical heterocíclico" significa um radical de hidrocarboneto cíclico, saturado ou insaturado, incluindo sistemas aromáticos com 4 a 10 átomos de carbono, de preferência de 5 a 6; em que 1 a 4 dos átomos são substituídos por azoto, oxigénio ou enxofre. O "radical heterocíclico" pode ser fundido com um radical de hidrocarboneto aromático. Exemplos adequados incluem o pirrolilo, piridinilo, pirazolilo, triazolilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, indolilo, tienilo, furanilo, tetrazolilo, 2-pirrolinilo, 3-pirrolindinilo, 1,3-dioxolanilo, 2-imidazolinilo, imidazolidinilo, 2-pirazolinilo, pirazolidinilo, isoazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, piperidinilo, 1,4-dioxanilo, morfolinilo, 1,4-ditianilo, tiomorfolinilo, pirazinilo, piperazinilo, triazinilo, 1,3,5-tritianilo, benzo (b)tiofenilo,benzimidazolilo, quinolinilo e semelhantes. O termo HOBT significa N-hidroxibenzotriazol. O termo "alcoxilo de baixo peso molecular", sozinho ou em combinação, significa um radical de alquiléter, em que o termo alquilo foi definido acima e Contém, o mais preferivelmente de tudo, entre 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos de radicais alquiléter de adequados, incluem o metoxilo, - 14-

etoxilo, n-propoxilo, isopropoxilo, n-butoxilo, iso-butoxilo, sec-butoxilo, tert-butoxilo e semelhantes. O termo "tioalcoxilo de baixo peso molecular", sozinho ou combinado, significa um radical alquiltioéter, em que o termo alquilo foi definido em cima e contém, o mais preferivelmente de tudo, entre 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos de radicais alquil-tioéter de adequados, incluem o tiometoxilo, tioetoxilo, tio-n-propoxilo, tio-i-propoxilo, tio-n-butoxilo, tio-iso-butoxilo, tio-sec-butoxilo, tio-tert-butoxilo e semelhantes. O termo alcoxicarbonilo, como utilizado aqui significa um grupo alcoxilo, como definido acima, contendo uma ligação a um grupo carbonilo (OO). 0 termo "halogénio" significa fluor, cloro, bromo ou iodo. O termo mcpba significa ácido m-cloroperbenzoico. O termo NMM significa N-metilmorfolino. O termo NMMO significa N-óxido de 4-metilmorfolino. O termo "pro-farmaco" refere-se a um composto que se toma mais activo in vivo. O termo sulfmilo significa SO. O termo sulfonilo significa S02. O termo TEA significa trietilamina. O termo TMSN3 significa azidotrimetilsilano.

Como utilizado aqui, a referência ao tratamento de um paciente inclui também a profilaxia da doença. - 15- ^ η

Todas as referências, patentes e aplicações, quer dos U.S.A. ou estrangeiras, citadas nesta aplicação são aqui incorporadas para referência.

Os compostos do presente invento podem existir em formas geométricas ou estereoisoméricas. O presente invento engloba todos esses compostos, incluindo os isómeros geométricos cis- e trans-, e os isómeros geométricos E- e Z-, enantiómeros R e S, diastereoisómeros, isómeros d, isómeros 1, como caindo no âmbito deste invento. São a seguir descritos os quatro processos gerais úteis na preparação dos compostos do presente invento.

BooHNfcH^QfcH,)? Esquema 1 a 1 NR,Z NPhth b nh2 BocHNfcH^Q-f-CH,]^ NR,Z NR,Z (a) ftalimida, Ph3P, DEAD; (b) NH2NH2, EtOH.

BocHN

nh2 NR,Z

Esquema 2

BocHN

fcH (a) 3,5-dimetilpirazole-l-carboxamidina, CS2CO3, DMF.

HN NH,

HN

NR.Z - 16- ^ ίΜ—η

Esquema 3

BocHN{-CH^QfcH2)J NH, a

NR,Z nh2

NR.Z R, = H ou alquilo de baixo peso molecular

NH b _ JL V='

NH -f-CH: :NH HN c

NHJL

NR.Z NHR.

^=NH HN (a) HC1 / dioxano, HOAc; (b) acetimidato de metilo, DMF, TEA; (C) H2, Pd, EtOH.

Julga-se que, sem mais estudos, um especialista na técnica consiga, servindo-se da descrição anterior, utilizar o presente invento no seu máximo rendimento. Deste modo, os seguintes modelos de realização preferidos, são para ser tomados em conta como meros exemplos ilustrativos, e não limitativos do resto da descrição feita seja de que maneira for.

Todas as experiências foram feitas sob azoto ou árgon secos. Todos os solventes e reagentes foram utilizados sem mais purificações, a não ser que tal -17- seja especificado. O trabalho de purificação dos produtos envolveu, a adição da mistura da reacção a uma mistura de um solvente orgânico com uma solução aquosa neutra, ou acídica, ou básica. A fase aquosa foi extraída n vezes (x) com o solvente orgânico indicado. Os extractos orgânicos combinados foram lavados n vezes (x) com as soluções aquosas indicadas, secas sobre Na2S04 anidro, filtradas, concentradas no vácuo, e purificadas como indicado. As separações por cromatografia em coluna foram conseguidas nas condições descritas por Still. (Still, W.C.; Kahn, M.; Mitra A. "Rapid Chromatographic Technique for Preparative Separation with Moderate Resolution. J. Org. Chem., 1978, 43, 2923-2925.) Os sais de hidrocloreto foram feitos a partir de HC1 IN, HC1 em etanol (EtOH), 2N em MeOH, ou HC1 6N em dioxano. O cromatogramas de camada fina foram desenvolvidos utilizando placas dé gel de sílica pré-revestida 60 F254. A cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) foi obtida em colunas de fase reversa C-8 ou C-18, que foram obtidas de firmas diversas. As amostras analíticas foram secas num dispositivo de Abderhalden a 56 °C ou a 78 °C. Os espectros de Ή RMN foram obtidos quer num espectrómetro General Electric QE-300 ou Varian VXR 400 MHz, utilizando tetrametilsilano como o padrão interno. 13C RMN foi obtido de um espectrómetro Varian a 125,8 MHz com tetrametilsilano como um padrão interno:

Exemplo 1

HO

H N-a-Boc-N-s-Z-L-Lis-Ome (la) la. A uma solução, em agitação, de carbonato de césio (32,6 g, -18-

0,10 mol) em 150 ml de DMF foi adicionado N-a-Boc-N-e-Z-Lis (68,3 g, 0,18 mol). Depois de 10 min., foi adicionado iodometano (51,1 g, 0,36 mol). Depois de 18 h, o solvente foi removido in vacuo. A goma resultante foi lavada com hexano e o hexano foi decantado. O produto foi dissolvido em 100 ml de DCM e filtrado através de um tampão de gel de sílica EM de 100 x 70 mm. A sílica foi lavada com 900 ml de DCM e 300 ml de EtOAc que foram combinados. O solvente foi removido in vacuo para originar 66,4 g (94 %) do produto.

lb, c. A uma solução, em agitação de la (7,9 g, 20 mmol) em 100 ml de tolueno seco, arrefecido a -70°C, foram adicionados 10 ml de DIBAL-H 1M em tolueno (40 ml, 40 mmol), gota a gota, durante 10 minutos. Depois de agitada durante mais 20 minutos, a reacção foi parada com 4 ml de MeOH. Depois da remoção do banho de gelo, foram adicionados à solução, 150 ml de uma solução saturada de sal de Rochelle. Depois de agitação durante 1 hora, as camadas são separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc. (2 x 150 ml). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com H20 (2 x 200 ml), secos, filtrados e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de "flash", de acordo com Still et ai, para originar 5,37 g (74%) de lb e 0,70 g (10%) de lc. Ambos os compostos lb e lc são sólidos brancos.

ZHN

ld - 19-

ld. A uma suspensão em agitação de brometo de metiltrifenil-fosfónio (2,18 g, 6,1 mmol) em 50 ml de Et20 foi adicionado gota a gota, hexa-metildisilazida de potássio em tolueno (12,2 ml, 6,1 mmol). Depois de agitado durante 1,5 h, foi adicionado lb (2,22 g, 6,1 mmol) em 50 ml de Et20. Depois de 16 horas, foi filtrado da reacção um sólido branco. O filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de "flash" para proporcionar 1,11 g (50%) de ld, como uma goma incolor. Análise Calculada para C2oH3oN204· 0,2 H20: C, 65,62; H, 8,37; N, 7,65. Encontrado: C, 65,65; H, 8,07; N, 7,59.

le. A uma solução, em agitação de ld (3,62 g, 10 mmol) em 25 ml de DCM foi adicionado ácido m-cloroperbenzoico (2,59 g, 15 mmol). Depois de 16 h, o solvente foi removido a vácuo. O resíduo resultante foi retomado em 100 ml de EtOAc e lavado com 3 x 100 ml duma solução saturada de KHC03. A camada orgânica foi seca, filtrada e removidoo solvente. O produto cru foi purificado por cromatografia de "flash" para dar 2.89 g (76%) de le.

lf. Foi adicionado n-BuLi a uma solução de carbamato de t-butilo em THF, com agitação e a -78 °C. Depois de 30 min., foi adicionado à reacção le em THF. Depois de agitada durante 16 h ao mesmo tempo que se deixava atingir a temperatura ambiente, a reacção foi processada da maneira usual.

lg. Foi removido de lf o grupo protector benziloxicarbonilo, por hidrogenação catalítica, utilizando o Pd negro como catalisador, no que resultou lg quantitativamente.

1. Foi adicionado acetimidato de metilo a uma solução em agitação de lg e TEA em DMF. Depois de 16 h, o TEA-HC1 foi filtrado da reacção e lavado com um mínimo de DMF. O filtrado foi ajustado a pH 3 com 1 N de HC1. O filtrado é concentrado sob alto vácuo. O resíduo é aplicado a uma coluna de fase reversa. O prooduto purificado é tratado com HC1 IN, durante 1 h à temperatura ambiente para originar 1.

Exemplo 2

2. Tri-hidrocloreto de N-{5S-amino-6-[(ammoetil)-amino]-hexil}- etanimidamida 2a. A uma solução com agitação, de lc (10,0 g, 27,2 mmol), -21 - trifenilfosfina (7,14 g, 27,2 mmol) e ftalimida (4,02 g, 27,2 mmol) em 30 ml de THF foi adicionado, gota a gota, azodicarboxilato de dietilo (4,28 ml 27 2 mmol). Depois de ter estado em agitação toda uma noite, à temperatura ambiente a mistura da reacção foi concentrada in vacuo e purificada subsequentemente por cromatografia em coluna para proporcionar 6,79 g (50 %) de 2a. 2b. A uma solução em agitação de 2a (4,06 g, 8,2 mmol) em 50 ml de EtOH-DCM (1:1) foi adicionada hidrazina (1,28 ml, 41 mmol). Depois de se ter mantido a agitação durante um fim de semana, a mistura da reacção foi triturada com DCM a quente e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. Este processo foi repetido. O produto apareceu como um sólido vidrado incolor e limpo. O rendimento de 2b foi de 2,34 g (81 %). 2c. A uma solução em agitação de 2b (1,76 g, 5,0 mmol) e carbonato de césio (0,90 g, 2,75 mmol) em 10 ml de DMF, foi adicionado nitrato de 3,5-dimetilpirazol-l-carboxamidina. Depois de 20 h, a reacção foi filtrada. Ao filtrado foi adicionado HOAc. Depois de se concentrar o filtrado a vácuo, o resíduo foi triturado com Et20 para originar 1,11 g (54 %) do produto 2d. O grupo protector benziloxicarbonilo foi removido de 2c por hidrogenação catalítica, utilizando Pd negro como catalisador, originando 2d qu antitati vamente.

2 O Exemplo 2 foi preparado da mesma maneira que foi descrita no Exemplo 1, começando-se com 2d (0,90 g, 2,4 mmol) para originar -22- Ι/Οη 0,44 g (47 %). Análise Calculada para C9H22N6' 3 HC1 2,5 h20- C 29,32; H,

Exemplo 3

3. Dihidrocloreto de N^{5S-amino-6-[(metilsulfoniI)-amino]-hexil}-etanamida. 3a. A uma solução em agitação de 2b (1,76 g, 5,0 mmol), TEA (0,83 ml, 6,0 mmol) e DMAP (0,06 g, 0,05 mmol) em 25 ml de DCM e 2 ml de DMF arrefecidos a 5 °C, foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (0,46 ml, 6,0 mmol). Depois de se proceder a agitação durante 72 h, deixando a mistura atingir a temperatura ambiente, foi o solvente removido a vácuo. Depois da separação das duas camadas, foi a camada orgânica lavada com 2 x 100 ml de KHS04 1M e 2 x 100 ml de H20. A fase orgânica foi trabalhada da maneira usual, para se obter 1,66 g (75 %) de um produto cristalino branco. 3b. O grupo protector benziloxicarbonilo foi removido de 3a (1,33 g, 3,0 mmol) por hidrogenação catalítica, utilizando Pd negro como catalisador, originando 3d quantitativamente. 3c. A uma solução em agitação de 3b (1,11 g, 3,0 mmol), e TEA (4,2 ml, 30 mmol, 3,0 mmol) em 5 ml de DMF, foi adicionado acetimidato de metilo (1,64 g, 15,0 mmol). Depois de 16 h, o TEA HC1 foi filtrado da reacção e lavado com um mínimo de DMF. O pH do filtrado foi ajustado a pH 3 com HC1 IN. O filtrado -23- foi concentrado a alto vácuo. O resíduo foi aplicado numa coluna de HPLC de fase reversa. O rendimento de 3c foi de 0,66 g (57 %). 3. A uma solução em agitação de 3c (0,65 g, 1,7 mmol) em 10 ml de HOAc, foram adicionados 10 ml de HC1 4N / dioxano. Depois de 15 min., o solvente foi removido a vácuo. O produto foi liofílizado de H20 para originar 0,53 g (98 %) de 3. Análise Calculada para C9H22N4O2S 2 HC1 0,7 H20 0,8 HOAc: C, 32,90; H,7,54; N, 14,75; Cl, 18,67. Encontrado: C, 33,23; 7,38; N, 14,51; Cl, 18,30.

Exemplo 4

4. O Exemplo 4 é preparado da mesma maneira que o descrito no Exemplo 1, partindo-se de le e benzilamina.

Exemplo 5

5a. O Exemplo 5a é preparado a partir de 2b. O grupo protector benziloxicarbonilo foi removido de 2b por hidrogenação catalítica, utilizando Pd negro como catalisador, originando 5a quantitativamente. 5. O Exemplo 5 é preparado da mesma maneira que no Exemplo 1, começando-se co 5a. -24-

6 O Exemplo 6 foi preparado da mesma maneira que foi descrita no Exemplo 1, começando-se com le e t-butilamina.

Exemplo 7

NH

7a. O Exemplo 7a foi preparado a partir de le ebenzilcarbamato, como descrito em lf. 7b. O grupo protector benziloxicarbonilo foi removido de 7a por hidrogenação catalítica, utilizando Pd negro como catalisador, 7. O Exemplo 7 foi preparado da mesma maneira que foi descrita no Exemplo 1, começando-se de 7b.

Dados Biológicos A actividade dos compostos acima citados como inibidores da sintase do NO, foi determinada nas seguintes análises: -25-

Análise da Citrulina para a Sintase do Oxido Nítrico A actividade da sintase do óxido nítrico foi medida pela monitorização da conversão de L-(2,3-3H)-arginina a L-(2,3-3H)-citrulina (1,2). O cADN para a SNO humana indutível (SNOhi) foi isolado duma biblioteca de λεΑϋΝ feita de ARN extraído de uma amostra de cólon de um paciente sofrendo de colite ulcerativa: a SNO humana constitutiva (SNOhc) foi isolado duma biblioteca de λοΑΏΝ feita de ARN extraído de células endoteliais da veia umbilical humana (CEVUH); e a SNO humana constitutiva neuronal (SNOhcn) foi isolado duma biblioteca de XcADN feita de ARN de cerebelo humano extraído de um cadáver. As enzimas recombinantes foram expressas de células de insectos, utilizando um vector de bacilovirus. A actividade enzimática foi isolada de extractos de células e purificada parcialmente por cromatografia em DEAE-celulose (2). As enzimas e os inibidores foram adicionados de modo a perfazer um volume de 50 μΐ em 50 mM Tris (pH 7,6) e a reacção foi iniciada pela adição de 50 μΐ duma solução contendo 50 mM de Tris (pH 7,6), 2,0 mg/ml de albumina do soro bovino, 2,0 mM DTT, 4,0 mM CaC^, 20 μΜ de FAD, 100 μΜ de tetrahidrobiopterina, 0,4 - 2,0 mM de NADPH e 60 μΜ de L-arginina contendo 0. 9 pCi de L-[2,3-3H]-arginina. Para o SNO constitutivo, é incluída calmudolina a uma concentração final de 40-100 nM. A seguir a uma incubação a 37 °C durante 15 min., a reacção é terminada pela adição de 300 μΐ de tampão frio contendo 10 mM de EGTA, 100 mM de HEPES (pH 5,5) e 1,0 mM de L-citrulina. A [3H]-citrulina foi separada por cromatografia em resina de troca iónica Dowex 50W X-8 e quantificada radioactivamente num contador de cintilações líquido. 1. Bredt, D. S. e Snyder, S. H. (1990), Proc. Natl. Acad. Sei., U.S.A. 87, 682- « 685. -26- 2. Misko, T. P., Moore, W M., Kasten, T. P., Nickols, G. A., Corbett, J. A., Tilton, R. G., McDaniel, M. L., Williamson, J. R. E Currie, M. G. (1993) Eur. J. Pharm. 233, 119-125.

Os exemplos seguintes foram analisados, com os seguintes resultados.

Dados da Análise Enzimática

Exemplo SNOhi SNOhce SNOhcn N° IC50 IC50 IC50 (μΜ) (μΜ) (μΜ) 2 22 479 35 3 106 6620 837

Lisboa, 17 de Novembro de 2000

LUIS SILVA CARVALHO Agente Ofkãal da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 USBOA

Claims

- 1 - REIVINDICAÇÕES 1. Um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável tendo a fórmula (I):

NRjRj Y é um hidrogénio, um radical alquilo de CpCio, radical alquenilo de C2-Cio, radical alquinilo de C2-Ci0, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico, amino, radical heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que os referidos radicais podem ser opcionalmente substituídos com hidrogénio, ciano, alquilo de CpCio, nitro, amino, radicais de hidrocarbonetos alicíclicos, ou radicais de hidrocarbonetos aromáticos que podem ser opcionalmente substituídos com alquilos de Q-Qo; X é um radical de alquileno de C1-C10, radical de alquenileno de C2-C10, radical de alquinileno de C2-C]0, radical de hidrocarboneto aromático, (CH2)mQ(CH2)n, em que m = 1-3, n = 1-3 e Q é enxofre, sulfinilo, sulfonilo ou oxigénio, C=0, radical alquinileno de C2-Cio, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico ou heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que todos os radicais referidos são substituídos opcionalmente com hidrogénio, halogénio e alquilo de Ci-Cioí R1, R2, R3 e R4 são seleccionados independentemente do grupo constituído por hidrogénio ou um alquilo de Ci-Ci0; -2-

A é um radical de alquileno de CpCio, em que o referido radical é substituído opcionalmente com hidrogénio, alquilo de C]-C]o, hidroxilo, alcoxilo de C|-Cio, alcoxilcarbonilo, alquilariloxilo, tiol, tioalcoxilo de Q-Cio, tioalquil-ariloxilo, tioariloxilo, sulfinilalquilo, sulfinilalquilarilo, sulfínilarilo, sulfonilal-quilo, sulfonilalquilarilo, sulfonilarilo, halogénio, radicais de hidrocarbonetos aromáticos ou radicais de hidrocarbonetos alicíclicos; ou A pode ser uma ligação directa com o resto da molécula. B é CH2R5, em que R5 é amidina, guanidina, sulfonamida, amino que pode ser substituído opcionalmente com radicais alquilo, alquilarilo ou arilo; excepto nos compostos em que Y é amino, R5 é guanidino, R1, R2, R3 e R1 são hidrogénios, X é n-propilo e A é hidroxil-octilo ou X é n-pentilo e A é n-butilo.
2. O composto como descrito na Reivindicação 1, em que: Y é hidrogénio ou alquilo de Ci-CioJ X é alquenilo de C3-C5 átomos; A é alquenilo de C1-C3 átomos substituídos opcionalmente com hidroxilo ou uma ligação directa ao resto da molécula.
3. O composto como descrito na Reivindicação 1, em que: Y é metilo; X é butileno; R',R2, R3eR1 são hidrogénios; e A é alquenilo de C1-C3 átomos substituídos opcionalmente com hidroxilo. 1 O composto como descrito na Reivindicação 1, em que 0 composto é seleccionado de um grupo consistindo de: -3 -

Tri-hidrocloreto de N-{5S-amino-6-[(aminoetil)-amino]-hexil}-etanimida- mida; Di-hídrocloreto de N-{5S-amino-6-[(aminoetil)-amino]-hexil} -etanimida- mida;
5. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto, ou um seu sal, farmaceuticamente aceitáveis tendo a fórmula:

NRjRj Y é um hidrogénio, um radical alquilo de Q-Cio, radical alquenilo de C2-Cio, radical alquinilo de C2-C10, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico, amino, radical heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que os referidos radicais podem ser opcionalmente substituídos com hidrogénio, ciano, alquilo de CrCio, nitro, amino, radicais de hidrocarbonetos alicíclicos, ou radicais de hidrocarbonetos aromáticos que podem ser opcionalmente substituídos com alquilos de Ci-C]0; X é um radical de alquileno de CpCio, radical de alquenileno de C2-C10, radical de alquinileno de C2-C10, radical de hidrocarboneto aromático, (CH2)mQ(CH2)n, em que m = 1-3, n = 1-3 e Q é enxofre, sulfinilo, sulfonilo ou oxigénio, C=0, radical alquinileno de C2-C10, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico ou heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que todos os radicais referidos são substituídos opcionalmente com hidrogénio, halogénio e alquilo de Cj-Cio; R1, R2, R3 e R4 são seleccionados independentemente do grupo constituído por hidrogénio ou um alquilo de CpCio; A é um radical de alquileno de C1-C10, em que o referido radical é substituído opcionalmente com hidrogénio, alquilo de CpCjo, hidroxilo, alcoxilo de CpCio, alcoxilcarbonilo, alquilariloxilo, tiol, tioalcoxilo de CpCio, tioal-quilariloxilo, tioariloxilo, sulfinilalquilo, sulfmilalquilarilo, sulfínilarilo, sulfo-nilalquilo, sulfonilalquilarilo, sulfonilarilo, halogénio, radicais de hidrocar-bonetos aromáticos ou radicais de hidrocarbonetos alicíclicos; ou A pode ser uma ligação directa com o resto da molécula; e B é CH2R5, em que R5 é amidina, guanidina, sulfonamida, amino que pode ser substituído opcionalmente com radicais alquilo, alquilarilo ou arilo; excepto nos compostos em que Y é amino, R5 é guanidino, R1, R2, R3 e R4 são hidrogénios, X é n-propilo e A é hidroxil-octilo , junntamente com um veículo farmaceuticamente aceitável.
6. Uma composição farmacêutica da Reivindicação 5, em que: Y é hidrogénio ou alquilo de CrC10; X é alquenilo de C3-C5 átomos; A é alquenilo de C1-C3 átomos substituídos opcionalmente com hidroxilo ou uma ligação directa ao resto da molécula.
7. Uma composição farmacêutica da Reivindicação 6, em que: Y é metilo; X é butileno; R1, R2, R3 e R4 são hidrogénios; e A é alquenilo de C1-C3 átomos substituídos opcionalmente com hidroxilo. -5-
8. A composição farmacêutica da Reivindicação 5, em que o composto é seleccionado de um grupo consistindo de: Tri-hidrocloreto de N- {5S-amino-6-[(aminoetil)-amino]-hexil} -etani- midamida; Di-hidrocloreto de N- {5S-amino-6-[(aminoetil)-amino]-hexil} -etanimi-damida;
9. Utilização de um composto ou um seu sal farmaceutica-mente aceitável, com a fórmula:

NR^ Y é um hidrogénio, um radical alquilo de Ci-Qo, radical alquenilo de C2-C10, radical alquinilo de C2-C10, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico, amino, radical heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, em que os referidos radicais podem ser opcionalmente substituídos com hidrogénio, ciano, alquilo de CpCio, nitro, amino, radicais de hidrocarbonetos alicíclicos, ou radicais de hidrocarbonetos aromáticos que podem ser opcionalmente substituídos com alquilos de CpCio; X é um radical de alquileno de CrCio, radical de alquenileno de C2-Cio, radical de alquinileno de C2-C10, radical de hidrocarboneto aromático, (CH2)mQ(CH2)n, em que m = 1-3, n = 1-3 eQé enxofre, sulfínilo, sulfonilo ou oxigénio, C=0, radical alquinileno de C2-Cio, radical de hidrocarboneto aromático, radical de hidrocarboneto alicíclico ou heterocíclico no qual 1 a 4 heteroátomos são seleccionados independentemente de oxigénio, azoto e enxofre, -6- -6-

ί>^7 em que todos os radicais referidos são substituídos opcionalmente com hidrogénio, halogénio e alquilo de CpCio; R1, R2, R3 e R4 são seleccionados independentemente do grupo constituído por hidrogénio ou um alquilo de Ci-Cl0; A é um radical de alquileno de CrCio, em que o referido radical é substituído opcionalmente com hidrogénio, alquilo de CpCio, hidroxilo, alcoxilo de CpCio, alcoxilcarbonilo, alquilariloxilo, tiol, tioalcoxilo de CpCio, tioalquil-ariloxilo, tioariloxilo, sulflnilalquilo, sulfinilalquilarilo, sulfinilarilo, sulfonilal-quilo, sulfonilalquilarilo, sulfonilarilo, halogénio, radicais de hidrocarbonetos aromáticos ou radicais de hidrocarbonetos alicíclicos; ou A pode ser uma ligação directa com o resto da molécula. B é CH2R5, em que R5 é amidina, guanidina, sulfonamida, amino que pode ser substituído opcionalmente com radicais alquilo, alquilarilo ou arilo; para a preparação de um medicamento para a inibição da síntese de óxido nítrico num paciente necessitando de tal inibição.
10. Utilização como descrito na Reivindicação 9, em que: Y é hidrogénio ou alquilo de Ci-Ci0; X é alquenilo de C3-C5 átomos; A é alquenilo de C1-C3 átomos substituídos opcionalmente com hidroxilo ou uma ligação directa ao resto da molécula.
11. Utilização como descrito na Reivindicação 10, em que: Y é metilo; X é butileno; R1, R2, R3 e R4 são hidrogénios; e -Ί Α é alquenilo de C(-C3 átomos substituídos opcionalmente com hidroxilo.
12. Utilização como descrito na Reivindicação 9, em que o composto é seleccionado de um grupo consistindo de: Trihidrocloreto de N- {5S-amino-6-[(aminoetil)-amino]-hexil} -etanimida-mida e Dihidrocloreto de N-{5S-amino-6-[(aminoetil)-amino]-hexil}-etanimi-damida; Lisboa, 17 de Novembro de 2000

LUIS SILVA CARVALHO Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBÒA