PT749418E - Derivados de l-n6-(1-iminoetil)lisina uteis como inibidores de oxido nitrico sintetase - Google Patents

Derivados de l-n6-(1-iminoetil)lisina uteis como inibidores de oxido nitrico sintetase Download PDF

Info

Publication number
PT749418E
PT749418E PT95913969T PT95913969T PT749418E PT 749418 E PT749418 E PT 749418E PT 95913969 T PT95913969 T PT 95913969T PT 95913969 T PT95913969 T PT 95913969T PT 749418 E PT749418 E PT 749418E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
amino
mmol
solution
give
ethanimidamide
Prior art date
Application number
PT95913969T
Other languages
English (en)
Inventor
Mihaly Vadkerti Toth
E Ann Hallinan
Barnett Sylvain Pitzele
Kam F Fok
Foe S Tjoeng
Timothy J Hagen
Sofya Tsymbalov
Original Assignee
Searle & Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Searle & Co filed Critical Searle & Co
Publication of PT749418E publication Critical patent/PT749418E/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/64—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms, e.g. histidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/14—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C259/00—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C259/04—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups without replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group, e.g. hydroxamic acids
    • C07C259/06—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups without replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group, e.g. hydroxamic acids having carbon atoms of hydroxamic groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/18—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/26—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/32—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton with sulfone or sulfoxide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C317/34—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton with sulfone or sulfoxide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton having sulfone or sulfoxide groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of the same non-condensed ring or of a condensed ring system containing that ring
    • C07C317/38—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton with sulfone or sulfoxide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton having sulfone or sulfoxide groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of the same non-condensed ring or of a condensed ring system containing that ring with the nitrogen atom of at least one amino group being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. N-acylaminosulfones
    • C07C317/40—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/39—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton at least one of the nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C07C323/40—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C07C323/41—Y being a hydrogen or an acyclic carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/30—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/14—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/14—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D317/28—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D317/34—Oxygen atoms
    • C07D317/36—Alkylene carbonates; Substituted alkylene carbonates
    • C07D317/38—Ethylene carbonate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/10—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes
    • C07D319/12—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/22—Radicals substituted by doubly bound hetero atoms, or by two hetero atoms other than halogen singly bound to the same carbon atom

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

T 4Q A \8 - 1 - l/Uy DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE L-N6-(l-IMINOETIL)LISINA ÚTEIS COMO INIBIDORES DE ÓXIDO NÍTRICO SINTETASE" A presente invenção relaciona-se com os novos derivados amino glicol de L-N6-(l-iminoetil)lisina, com composições farmacêuticas contendo estes novos compostos, e com as suas utilizações terapêuticas, em particular a sua utilização como inibidores se óxido nítrico sintetase.
Desde o princípio dos anos 80 que se sabe que a relaxação vascular induzida por aceticolina é dependente da presença do endotélio e esta actividade foi atribuída a um factor humoral lábil designado por factor de relaxação derivado do endotélio (EDRF). A actividade do óxido nítrico (NO) como vasodilatador é conhecida há mais de 100 anos e NO é o componente activo do amilnitrito, do gliceriltrinitrito e de outros nitrovasodilatadores. A recente identificação do EDRF como NO coincidiu com a descoberta de uma via bioquímica pela qual NO é sintetizado a partir do aminoácido L-arginina pela enzima NO sintetase. NO é o estimulador endógeno da guanilate ciclase solúvel e está envolvida em várias de acções biológicas para além da relaxação dependente do endotélio incluindo citotoxicidade de células fagocíticas e comunicação célula-a-célula no sistema nervoso central (ver Moncada et al., Biochemical Pharmacology, 38, 1709-1715 (1989) e Moncada et al., Pharmacalogical Reviews, 43, 109-142 (1991). Actualmente pensa-se que o excesso de produção de NO pode estar envolvida em várias patologias, em particular patologias que -2- (Μη envolvem hipotensão sistémica tal como choque tóxico e terapia com algumas citocininas. A síntese de NO a partir de L-arginina pode ser inibida por análogo de L-arginina, L-N-monometil-arginina (L-NMMA) e foi proposta a utilização terapêutica de L-NMMA para o tratamento do choque tóxico e outros tipos de hipotensão sistémica (WO 91/04024 e GB-A-2240041). A utilização terapêutica de outros inibidores de NO sintetase além do L-NMMA para o mesmo fim, foi também proposta em WO 91/04024 e em EP-A-0446699.
Recentementetomou-se evidente que há pelo menos três tipos de NO sintetase como se segue: (i) uma enzima constitutiva, dependente de Ca^/calmodulin, localizada no endotélio, que liberta NO em resposta ao receptor ou a estimulação física. (ii) uma enzima constitutiva, dependente de Ca^/calmodulin, localizada no cérebro, que liberta NO em resposta ao receptor ou a estimulação física. (iii) uma enzima independente de Ca** que é induzida após a activação de músculo vascular macio, macrófagos, células endoteliais, e um número de outros células por endotoxinas e citocininas. Uma vez expressa esta NO sintetase induzida sintetiza NO durante períodos longos. O NO libertado pelas enzimas constitutivas actua como um mecanismo de transducção subjacente a várias respostas psicológicas. O NO produzido pela enzima induzida é um citotóxico molecular para células tumorais e microorganismos invasores. É também evidente que os efeitos nocivo do excesso de produção de NO, em particular vasodilatação patológica e alteração de tecido, pode resultar em grande parte dos efeitos do NO sintetizado pela NO sintetase induzida. -3- Há também uma evidência crescente de que o NO pode estar envolvido na degradação da cartilagem que tem lugar em certas patologias tal como artrite e é também sabido que a sintese de NO aumenta na artrite reumatóide. Consequentemente, outras patologias em que há vantagem na inibição da produção de NO a partir de L-arginina incluem patologias autoimunes e/ou inflamatórias afectando as articulações, por exemplo artite, doença óssea inflamatória, isquémia cardiovascular, diabetes, hiperalgesia (alodinía), isquémia cerebral (ambas isquémia focal, trombose e isquémia global, na sequência de ataque cardíaco), e outras perturbações CNS mediadas por NO.
Outras patologias em que há uma vantagem em inibir a produção de NO a partir de L-arginina incluem hipotensão sistémica associada ao choque séptico e/ou tóxico induzida por uma grande variedade de agentes; terapia com citocininas tal como TNF, IL-1 e IL-2; e como adjuvante de imunossupressão de curta duração em transplantes terapêuticos.
Alguns dos inibidores de NO sintetase propostos aé agora para utilizações terapêuticas, e em particular L-NMMA, são não-selectivos uma vez que inibem ambas a NO sintetase constitutiva e induzida. A utilização de tal inibidor de NO sintetase não selectivo requer que sejam tomadas precauções extremas de modo a evitar as consequências potencialmente graves da inibição excessiva da NO-sintetase constitutiva incluindo hipertensão e possível trombose e alterações de tecidos. Em particular, no caso da utilização terapêutica de L-NMMA para o tratamento de choque tóxico foi recomendado que o doente deve ser submetido a monitorização contínua da pressão sanguínea durante o tratamento. Assim, enquanto inibidores não selectivos de NO sintetase têm utilidade terapêutica desde que se tomem as precauções adequadas, os inibidores de NO sintetase que são selectivos no sentido em que inibem a NO sintetase -4- Ι/ϋη induzida numa extensão consideravelmente superior à das isoformas constitutivas da NO sintetase, apresentarão maiores vantagens terapêuticas e maior facilidade de utilização. W094/12165, WO94/14780, WO93/13055, EP0446699A1 e Patente U.S. N° 5.132.453 descrevem compostos que inibem a síntese de óxido nítrico e preferencialmente inibem as isoformas indutíveis de óxido nítrico sintetase. As descrições dos quais são aqui incorporadas por referência na sua totalidade como se fossem aqui escritos. W093/24126 relaciona-se com argininas substituídas e homoargininas substituídas e a sua utilização como novos inibidores de formação de óxido nítrico biológico. W093/13055 relaciona-se com derivados amidino e as suas utilizações como inibidores de óxido nítrico sintetase.
De acordo com a presente invenção são estabelecidos novos derivados amino glicol de L-N6-(l-iminoetil)isina. Estes novos compostos inibidores podem ser representados pela seguinte fórmula química. Um composto ou um seu sal, pró-fármaco ou éster farmaceuticamente aceitável tendo a fórmula: R4
L· Ύ NR1R2 em que -5-
Um Y é um radical CpCjo alquilo; X é um radical Ci-C10 alcileno, radical C2-C10 alcenileno, radical C2-Cio alcinileno, radical hidrocarboneto aromático, (CH2)mQ(CH2)n, em que m = 1-3, n = 1-3, e Q é enxofre, sulfínilo, sulfonilo ou oxigénio; C=0, radical C2-Ci0 alcinileno, radical hidrocarboneto aromático, radical hidrocarboneto alicíclico ou radicais heterocíclico em que 1 até 4 heteroátomos são independentemente seleccionados de oxigénio, azoto ou enxofre, em que todos os referidos radicais são opcionalmente substituídos com hidrogénio, halogéneo e CrCio alquilo; R1, R2, R3 e R4 são independentemente seleccionados do grupo constituído por hidrogénio e Q-Qo alquilo; A é um radical CpCio alcileno opcionalmente substituído com hidrogénio, Q-Qo alquilo ou hidroxilo; B pode ser hidrogénio, hidroxilo, um radical CrCi0 alquilo ou C(=0)0H.
Numa outra prespectiva geral, a presente invenção é direccionada para a utilização do composto anteriore para a preparação de um medicamento para a inibição da síntese de óxido nítrico num doente que necessite de tal inibição. A invenção também se relaciona com uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula (I).
Compostos e composições definidos anteriormente apresentam utilidade como inibidores de óxido nítrico sintetase. A inibição preferencial por estes compostos da forma induzida é pelo menos três vezes superior à inibição da forma constitutiva.
Estados em que há uma vantagem na inibição da produção de NO a partir da L-arginina incluem hipotensão sistémica associada com choque séptico e/ou choque tóxico induzido por uma grande variedade de agentes; terapia com citocininas tal como TNF, IL-1 e IL-2; e como adjuvante em imunossupressão de curta duração em terapia de transplante. Outras patologias em que há uma vantagem em inibir a produção de NO por L-arginina incluem doenças auto-imune e/ou patologias inflamatórias tais como as que afectam as articulações, por exemplo artrite ou doença óssea inflamatória, isquémia cardiovascular, diabetes, isquémia cerebral e outras patologias CNS mediadas por NO.
Uma forma de realização preferida da presente invenção é um composto de fórmula (I) em que Y é um Ci-Cjo alquilo X é um alcileno de 3-5 carbonos R1, R2, R3 e R4 são independentemente seleccionados do grupo constituído por hidrogénio ou Ci-Ci0 alquilo; A é um alcileno de 2-4 carbonos substituído com hidroxilo B é hidroxilo. r E preferido que Y seja metilo, que X seja preferencialmente butileno, R1, R2, R3 e R4 sejam preferencialmente hidrogénio, A seja preferencialmente etileno ou isopropileno substituído com hidroxilo e B seja preferencialmente hidroxilo (OH). A presente invenção incluí compostos de fórmula (I) na forma de sais, em particular sais de adição ácida. Sais adequados incluem os formados tanto com ácidos orgânicos como com ácidos inorgânicos. Tais sais de adição ácida serão normalmente farmaceuticamente aceitáveis embora sais não -7- l/Mf aceitáveis farmaceuticamente possam úteis na preparação e purificação dos compostos em questão. Portanto, sais preferidos incluem os formados a partir de clorídrico, brómico, sulfurico, cítrico, tartárico, fosfórico, láctico, acético, succínico, fumárico, maleico, metanossulfónico, etanossulfónico, p-toluenos-sulfónico, benzenossulfónico e outros semelhantes. (Ver, por exemplo, S.M. Berge et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sei., 1977, 66, 1-19). Sais dos compostos de fórmula (I) podem ser preparados por reacção do composto apropriado na forma de uma base livre com o ácido apropriado.
Embora seja possível a administração dos compostos de fórmula (I) na forma de químico bruto, é preferível que sejam apresentados como formulações farmacêuticas. De acordo com outro aspecto, a presente invenção fornece uma formulação farmacêutica compreendendo um composto (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, em conjunto com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis e opcionalmente um ou mais ingredientes terapêuticos. O(s) veículo(s) devem ser "aceitáveis" no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e não nocivos ao próprio recipiente.
As formulações incluem as adequadas para administração oral, parentérica (incluindo subcutânea, intradérmica, intramuscular, intravenosa e intra-articular), rectal e tópica (incluindo dérmica, bucal, sublingual e intra-ocular) embora a via de administração mais adequada possa depender por exemplo das condições e da patologia do receptor. As formulações podem convenientemente ser apresentadas na forma de uma dosagem única e podem ser preparadas por qualquer dos métodos bem conhecidos dos peritos na arte de farmácia. Todos os métodos incluem o passo de leva à associação de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável ("ingrediente activo") com o veículo que constituí um ou mais ingredientes I/Mf acessórios. De um modo geral, as formulações são preparadas uniformizando e fazendo a associação íntima do ingrediente activo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente dividos ou ambos e em seguida, se necessário, dando forma ao produto na formulação desejada.
Formulações da presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas tais como cápsulas, saquetas, ou comprimidos contendo cada um uma quantidade pré-determinada do ingrediente activo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou num líquido não-aquoso; ou como uma emulsão líquida óleo-em-água ou uma emulsão líquida água-em-óleo. O ingrediente activo pode também ser apresentado como uma pílula volumosa, electuário ou pasta.
Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos feitos por compressão podem ser preparados comprimindo numa máquina adequada o ingrediente activo numa forma não aglomerada tal como um pó ou grânulos, opcionalmente misturados com um ligante, lubrificante, activador superficial ou agente dispersante. Comprimidos moldados podem ser preparados por moldagem numa máquina adequada de uma mistura dos compostos na forma de pó misturados com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou cobertos em camadas ("scored") e podem ser formulados de modo a prover a libertação lenta ou controlada do ingrediente activo.
Formulações para administração parentética incluem soluções injectáveis estérieis aquosas e não-aquosas que podem conter anti-oxidantes, tampões, bacteriostatos e solutos que tomam as formulações isotónicas com o , _ÍAMf ^ sangue do receptor considerado; e suspensões estéreis aquosas e não-aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As formulações podem ser apresentadas em embalagens de dose única ou de multi-doses, por exemplo ampolas seladas e pequenos frascos, e podem ser armazenadas congeladas e secas (liofilizadas) necessitando unicamente da adição de um veículo líquido estéril, por exemplo, solução salina, água-para-injecção, imediatamente antes da utilização. Soluções e suspensões injectáveis extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e comprimidos do tipo descrito anteriormente.
Formulações para administração rectal podem ser apresentadas como um supositório com os veículos usuais tal como manteiga de cacau ou polietileno glicol.
Formulações para administração tópica na boca, por exemplo de um modo bucal ou sublingual, incluem losangos compreendendo o ingrediente activo numa base aromatizada tal como sacarose e acácia ou tragacanta, e pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia.
Formulações preferidas de dosagem unitária são as que contêm uma dose eficaz, como enumerado de seguida, ou uma sua fracção apropriada, do ingrediente activo.
Deve ser entendido que para além dos ingredientes particulares mencionados acima, as formulações desta invenção podem incluir outros agentes convencionais na arte dependendo do tipo de formulação em questão, por exemplo os adequados para administração oral podem incluir agentes aromatizantes. - 10-
Os compostos da invenção podem ser administrados oralmente ou por injecção numa dosagem desde 0,001 até 2500 mg/kg por dia. A variação da dosagem para adultos humanos é geralmente desde 0,005 mg até 10 g/dia. Comprimidos ou outra forma de apresentação fornecida em unidades discretas podem convencionalmente conter uma quantidade de composto da invenção que é eficaz em tal dosagem ou como um múltiplo do mesmo, por exemplo, unidades contendo desde 5 mg até 500 mg, usualmente cerca de 10 mg até 200 mg.
Os compostos de fórmula (I) são preferencialmente administrados oralmente ou por injecção (intravenosa ou sub-cutânea). A quantidade precisa de composto administrado a um doente serão da responsabilidade do médico assistente. No entanto, a dose utilizada dependerá de um número de factores, incluindo a idade e o sexo do doente, a doença concreta a ser tratada, e a sua gravidade. Também a via de administração pode variar dependendo da doença e da sua gravidade.
Como é aqui utilizado, o termo "Ci-C10 alquilo", individualmente ou em combinação, significa um radical alquilo acíclico contendo desde 1 até 10 átomos de carbono, preferencialmente desde 1 até 8 átomos de carbono e mais preferencialmente desde 1 até 6 átomos de carbono. Exemplos de tais radicais incluem metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, iso-amilo, hexilo, octilo e outros semelhantes. O termo "C2-C10 alcenilo" refere-se a um radical hidrocarboneto acíclico insaturado tanto quanto contem pelo menos uma ligações dupla, preferencialmente contendo desde 2 até 8 átomos de carbono e mais preferencialmente desde 2 até 6 átomos de carbono. Exemplos de radicais alcenilo adequados incluem propilenil, buten-l-il, isobutenil, pentenilen-l-il, 2- -11 -
Uuj metilbuten-l-il, 3-metilbuten-l-il, hexen-l-il, hepten-l-il, e octen-l-il, e outros semelhantes. O termo "C2-Ci0 alcinilo" refere-se a um radical hidrocarboneto acíclico insaturado tanto quanto contem uma ou mais ligações triplas, preferencialmente tendo desde 2 até 8 átomos de carbono e mais preferencialmente tendo 2 até 6 átomos de carbono. Exemplos de radicais alcinilo adequados incluem radicais etinil, propinil, butin-l-il, butin-2-il, pentin-l-il, pentil-2-il, 3-metilbutin-l-il, hexin-l-il, hexin-2-il, hexin-3-il, 3,3-dimetilbutin-l-il e outros semelhantes. O termo "hidrocarboneto alicíclico" ou "cicloalquilo" significa um radical alifático num anel com 3 até 10 átomos de carbono, e preferencialmente desde 3 até 6 átomos de carbono. Exemplos de radicais alicíclicos adequados incluem ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, ciclohexil, ciclohexenil e outros semelhantes. O termo "radical hidrocarboneto aromático" significa 4 até 16 átomos de carbono, preferencialmente 6 até 12 átomos de carbono, mais preferencialmente 6 até 10 átomos de carbono. Exemplos de radicais hidrocarboneto aromáticos incluem fenil, naftil, e outros semelhantes. O termo "arilo" como é aqui utilizado significa radicais aromático de um único anel de 5- e 6-membros que pode incluir desde zero até quatro heteroátomos. Arilos representativos incluem fenilo, tienilo, furanilo, piridinilo, (is)oxazoilo e outros semelhantes. O termo DCM significa diclorometano. -12-
Ο termo DEAD significa azodicarboxilato de dietilo. O termo DIBAL-H significa hidreto de diisobutilalumínio. O termo DMAP significa dimetilaminopiridina. O termo DMSO significa sulfóxido de dimetilo. O termo EDC significa cloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida. O termo "radical heterocíclico" significa um radical hidrocarboneto cíclico saturado ou não saturado incluindo sistemas aromáticos com 4 até 10 átomos de carbono, preferencialmente 5 até 6; em que 1 até 4 átomos de carbono são substituídos por azoto, oxigénio ou enxofre. O "radical heterocíclo" pode estar fundido a um radical hidrocarboneto aromático. Exemplos adequados incluem pirrolilo, piridinilo, pirazolilo, triazolilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, indolilo, tienilo, furanilo, tetrazolilo, 2-pirrolinilo, 3-pirrolinilo, pirrolindinilo, 1,3-dioxolanilo, 2-imidazolinilo, imidazolidinilo, 2-pirazolinilo, pirazolidinilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, piperidinilo, 1,4-dioxanilo, morfolinilo, 1,4-ditianilo, tiomorfolinilo, pirazinilo, piperazinilo, triazinilo, 1,3,5-tritianilo, benzo(b)tiofenilo, benzimidazolilo, quinolilo, e outros semelhantes. O termo HOBT significa N-hidroxibenzotriazole. O termo "halogéneo" significa flúor, cloro, bromo ou iodo. -13-
O termo mcpba significa ácido m-cloroperbenzóico. O termo NMM significa N-metilmorfolina. O termo NMMO significa óxido-N 4-metilmorfolina. O termo "pró-fármaco" refere-se a um compostos que se toma mais activo in vivo. O termo sulfinilo significa SO. O termo sulfonilo significa S02. O termo TEA significa trietilamina. O termo TMSN3 significa azidotrimetilsilano.
Como é aqui utilizado, pretende-se que a referência à utilização para "tratamento" de um doente inclua a utilização para profilaxia.
Todas as referências, patentes ou aplicações, U.S. ou estrangeiras, citadas na aplicação são aqui incorporadas para referência como se fossem aqui escritas.
Compostos da presente invenção podem existir na forma de isómeros geométricos ou de estereoisómeros. A presente invenção contempla todos estes compostos, incluindo os isómeros geométricos-cis e -trans, isómeros - 14- l/LMj geométricos-E e -Z, enantiómeros-R e -S, diastereómeros, isómeros-d, isómeros-1, as suas misturas racémicas e outras suas misturas, que caiam dentro dos objectivos da invenção. São revelados vinte e oito processos gerais de síntese úteis na preparação dos compostos da presente invenção.
Esquema 1
BocHN-(CH2)m-X-(CH2)n^ /C00H a
ZNH
v t-u . COCHN2 BocHN-ÇCHám-X-lCH^rv^ ZNH
BocHN-(CH2)m-X-(CH2) CH2COORs nh2 (a) (i) cloroformato de i-butilo, NMM, THF; (ii) CH2N2; (b) benzoato de Ag, R OH, TEA.
Esquema 2
BocHN.(OH2)m.X-(CH2)^COOH_a__ BocH^CH^-X-fCNd^00"'0^' ZNR1 ZNR1
BocHN-(CH2)m-X-(CH2) ZNR1
COB (a) Ν,Ο-Dimetilhidroxilamina HC1, EDC, HOBT, TEA, DMF; (b) B*U tHR ver reivindicações genéricas para B = alquilo, arilo, heteroarilo. ____—
Uu, ^ ^~η - 15-
-16-
Esquema 6 ^ B0C^WNH2 Boc'WNHí AO Α (a) dicarbonato de di-t-butilo, DMAP, THF; (b) LiOH; (c) cloroformato de i-butilo, amoníaco (d) anidrido trífluoroacético, Et3N (e) H2/Pd.__ Esquema 7 Br 1 PO(OR5)2 BocHN-(CH2)m-Q-(CH2)oSsJ *..... BoeHN-(CH2)m-Q-(CH2)nsi NR1Z NRTZ (a) P(OR5)3.
Esquema 8 ΟΜθ ) Va*
BocHN-(CH2)m-Q-(CH2) ^=0 NR1Z
BocHN-(CH2)m-Q-(CH2)
OHV NR^
BrV
BocHN-(CH2)m-Q>(CH2jAv J c NR’2 NPhth
BocHN-(CH2)m-Q-(CH2) V NR^
BocHN-(CH2)m-Q-(CH2)
NH2V ΝΗ’Ζ (a) DIBAL-H, tolueno, -70°C, lh; (b) Ph3PBr2, DMAc, 16 horas; (c) K^NPhth, THF; (d) NH2NH2, EtOH. _____ ·17-^ ^ (a) OC=NR6, DCM.
BocHN-(CH2)m-Q-(CH2)
Esquema 9 a ΝΝ BocHN-(CH2)m-Q-(CH2)
BocHN-(CH2)m-Q*(CH2)
Esquema 10 a NOBzIR6 NH BocHN*(CH2)m-Q-(CH2)
(a) carbonildiimidazol, NHQBzIR6, DCM.
Esquema 11
B
a
BocHN-(CH2)m—ΞΞΞΞ
(CH2)rL^NR1Z (a) n-BuLi, THF, BocNH(CH2)mBr. -18- Esquema 12 B \ HS-íCH^i^^A _ J__► BocHN-íCH^m-S-tCH^rv^A NR’Z NR*Z (a) NaOMe, THF, BocNH(CH2)mBr. Esquema 13
SerOMe BocHN-(CH2)m-Q-{CH2)fVY^==0 NHZ Ο—λI vs. .o
BocHN-(CH2)m-Q-(CH2)
NHZ OEt (a) (i) Ph3P, CBr4; (ii) CuBr2.
Esquema 14
B
B
\ ZHN-(CH2)m-Q-(CH2)n^ a HOAeH2N-(CH2)m-Q-(CH2)r A
BocNR1
BocNR NHAn -(
B
\ A H2N OHN-íCH^in-Q-íCH^rw HC1 NR1Boc NHΛν-(
B
H2N^N-(CH2)m-Q-(CH2)nv<,'' HCI NR1H
HCI (a) H2, negro de Pd, EtOH/HOAc; (b) (i) nitrato de 3,5-dimetilpirazol-l-carboxamidina, NaOH; (ii) HCI IN; (c) HCl/dioxano, HOAc.___
- 19- NH B \
BocHN-(CH2)m-Q-{CH2)
B NHíCH^m-Q-fC^) HCI
Esquema 15
HCIH2N-(CH2)m-Q-(CH2)
c
NH NH(CH2)m-Q-(CH2) HCI
HNR HCI 1 (a) HCl/dioxano, HOAc; (b) (i) acetimidato de metilo, NaOH; (ii) HCI IN; (c) H2, negro de Pd, EtOH, HOAc.
Esquema 16
NH
^^NHíCHzJm-Q-íCHá HCI CH2COOMe HNR1
NH
<'^NH(CH2)m-Q-(CH2) HCI ch2cooh
HNR1 HCI (a) HCI 2N, Δ. -20
-21 -(Μη
Iam» ^
22 “ » -23-
Esquema 25
BocHN-(CH2)m-X-(CH2) R = H, alquilo, arilo (a) CF3I, Zn, DMF, -20oC.
COR
ZNH
BocHN-(CH2)m-X-(CH2)
R .CF3 OH
2NH -24- -24-
-25-
Uu, ^
Sem elaboração adicional, crê-se que um perito na arte pode, utilizando a descrição precedente, utilizar a presente invenção em toda a sua extensão. Portanto as formas de realização específicas preferidas que se seguem são para ser interpretadas como meramente ilustrativas e não limitativas da restante descrição seja de que forma fôr.
Todas as experiências tiveram lugar sob atmosfera de azoto seco ou argon. Todos os solventes e reagentes foram utilizados sem qualquer outra purificação a não ser no caso de referência em contrário. O tratamento de rotina das reacções envolve a adição das misturas reaccionais a uma mistura de soluções aquosas neutras, ou ácidas, ou básicas e solvente orgânico. A fase aquosa foi extraída n vezes (x) com o solvente orgânico indicado. Os extratos orgânicos combinados foram lavados n vezes (x) com as soluções aquosas indicadas, secos sobre Na2S04 anidro, filtrados, concentrados sob vácuo, e purificados como indicado. Separações por cromatografia em coluna foram levadas a cabo nas condições descritas por Still. (Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. Rapid Chromatographic Technique for Preparative Separation with Moderate Resolution. J. Org. Chem., 1978, 43, 2923-2925). Os sais cloridratos foram preparados a partir de HC1 IN, HC1 em etanol (EtOH), 2N em MeOH, ou HC1 6N em dioxano. Cromatografia em camada fina foi realizada em placas de 0,25 mm EM pré-cobertas de sílica gel 60 F254. Cromatogramas líquidos de alta resolução (HPLC) foram obtidos em colunas C-8 ou C-18 de fase reversa que foram adquiridas a vários vendedores. Amostras analíticas foram secas num aparelho de Abderhalden a 56°C ou a 78°C. Espectros de RMN de ’H foram obtidos num espectrómetro General Electric QE-300 ou Varian VXR 400 MHz com tetrametilsilano como padrão interno. RMN de 13C foram obtidos num espectrómetro Varian a 125,8 MHz com tetrametilsilano como padrão interno. -26- [/ÍMq
Exemplo 1 Ácido 3S-ammo-7-[(l-iminoetil)amino]heptanóico
OH
la. Fez-se reagir Boc-L-Lis(Z)-OH em 50 mL de THF (3,8 g, 10 mmol) com cloroformato de isobutilo (1,4 mL, 10 mmol) na presença de NMM (1,1 mL, 10 mmol). O sal foi filtrado e fez-se reagir a mistura de anidrido com 25 mmol de diazometado em 100 mL de Et20 durante 12 horas. O solvente foi evaporado para dar um óleo. Esta estruturas e as estruturas subsequentes foram caracterizadas por RMN de !H.
lb. Tratou-se la dissolvido em 50 mL de EtOH com benzoato de Ag (0,5 g) na presença de TEA (5mL) durante 2 horas. Após filtração, o éster do -27-
β-aminoácido foi purificado por cromatografia em coluna para dar 0,84 produto.
g do lc. Reduziu-se lb (0,84 g, 12 mmol) dissolvido em 30 mL de MeOH na presença de 1 g de formato de amónio e 0,2 g de negro de Pd durante 60 min. Após filtração e evaporação, o produto foi recuperado.
3S-amino-7-[(l-immoetil)amino]heptanoato de etilo ld. Tratou-se lc em 10 mL de DMF com acetimidato de metilo (0,692 g, 6 mmol) e N,N-diisopropiletilamina (1,05 mL, 6 mmol) de um dia para o outro. Removeu-se o solvente in vacuo e o resíduo foi tratado com TF A (10 mL) durante 30 min. A mistura reaccional foi diluída com H20 e purificada por HPLC para dar 0,16 g (35,1%) de um óleo. FAB MS: MH+=230,2. 1. Dissolveu-se ld (0,12 g, 0,52 mmol) em 20 mL de HC1 2N foi mantido ao refluxo durante 60 minutos. A mistura reaccional foi diluída com H20 e liofilizada para dar 0,107 g (100 %) de um óleo. FAB MS: MH+=202,3. -28- Ιμ·η
Exemplo 2 Ácido 3S-amino-6-[(l-iminoetil)amino]hexanóico
2. O exemplo 2 foi preparado do mesmo modo descrito para o exemplo 1 partindo de Boc-Om(Z)-OH (3,6 g, 10 mmol) para dar 0,123 g (33 %) de um óleo. FAB MS: MH+=2188,0.
Exemplo 3
Diclorohidrato de N-(5S-amino-6,7-dihidroxiheptil)etanimidamida
A estereoquímica absoluta do grupo hidroxilo na posição C-6 não foi determinada. Os diastereómeros foram separados como se descreve a seguir. Observa-se uma diferença na actividade biológica dos dois diastereoisómeros. -29- Ιμ, ^ έ^Ί 3 Ν-α-Boc-N-s-Z-L-Lys-OMe (3a) 3a. A uma solução de carbonato de césio (32,6 g, 0,10 mol) em 150 mL de DMF adicionou-se com agitação N-a-Boc-N-8-Z-L-Lys (68,3 g, 0,18 mol). Após 10 min, adicionou-se iodometano (51,1 g, 0,36 mol). Após 18 horas, o solvente foi removido in vacuo. A goma resultante foi lavada com hexano e o hexano decantado. O produto foi dissolvido em 100 mL de DCM e filtrado através de uma camada de 100 x 70 mm de sílica gel EM. A sílica foi lavada com 900 mL de DMC e 300 mL de EtOAc que foram combinados. O solvente foi removido in vacuo para originar 66,4 g (94 %) do produto.
3b, c. A uma solução de 3a (7,9 g, 20 mmol) em 100 mL de tolueno seco arrefecida a -70°C adicionou-se com agitação DIBAL-H 1M em tolueno (40 mL, 40 mmol) gota a gota durante 10 min. Após agitar durante mais 20 minutos, a reacção foi tratada com 4 mL de MeOH. Após a remoção do banho gelado, adicionou-se à mistura reaccional 150 mL de uma solução saturada de sal de Rochelle. Após agitar durante 1 h, separaram-se as fases. A fase aquosa foi extraída com 2 x 150 mL de EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com 2 x 100 mL de H20, secas, filtradas, e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash de acordo com Still et al. para dar 5,37 g (74%) de 3b e 0,70 g (10 %) de 3c. Ambos 3b e 3c eram sólidos brancos. -30-
3d. A uma suspensão de brometo de metiltrifenilfosfónio (2 18 g, 6,1 mmol) em 50 mL de Et20 adicionou-se gota a gota com agitação hexametildisilazida de potássio 0,5M em tolueno (12,2 mL, 6,1 mmol). Após agitar durante 1,5 h, adicionou-se 3b (2,22 g, 6,1 mmol) em 50 mL de Et20. Após 16 h, filtrou-se um sólido branco da mistura reaccional. O filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash para dar 1,11 g (50 %) de 3d, uma goma incolor transparente. Anál. calc. para C2oH30N204 0,2 H20: C, 65,62; H, 8,37; N, 7,65. Encontrada: C, 65,65; H, 8,07; N, 7,59.
3e. A uma solução de 3d (1,20 g, 3,3 mmol) em 80 mL de acetona:H20 (3:1) adicionou-se com agitação N-óxido de 4-metilmorfolina (0,64 g, 4,8 mmol) e 2,5 % de Os04 em t-BuOH (3,4 mL, 3,4 mmol). Após 18 h, 120 mL de H20, 8 g de celite, e 1,6 g de Na2S204 foram adicionados à reacção. A reacção foi filtrada através de uma camada de celite húmida. Ao filtrado adicionou-se 200 mL de KH2S204 1M. O filtrado foi extraído com 3 x 200 mL de EtOAc. As fase orgânicas combinadas foram secas, filtradas, e removidas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash para dar 0,93 g (71 %) de 3e. Anál. -31 - ÍU, W ί^~1 calc. para C20H32N2O6O,25 H20: C, 59,91; H, 8,17; N, 6,99. Encontrada: C, 59,57; H, 8,42; N, 76,77.
3f. O grupo protector benziloxicarbonilo foi removido de 3e (1,38 g, 3,5 mmol) por hidrogenação catalítica utilizando negro de Pd como catalisador originando 3f quantitativamente. 3 3A, 3B. A uma solução de 3f (3,90 g, 14,9 mmol) e TEA (3,3 mL, 24 mmol) em 10 mL de DMF adicionou-se com agitação acetimidato de metilo (2,44 g, 22,2 mmol). Após 16 h, TEA.HC1 foi filtrado da mistura reaccional e lavado com um mínimo de DMF. O filtrado foi ajustado a pH 3 com HC1 IN. O filtrado foi concentrado sob alto vácuo. O resíduo foi aplicado numa coluna de fase reversa (YMC AQ-363-10P, ODS) utilizando um gradiente de 20% CH3CN/0,025% HOAc até 50% CH3CN/0,025% HOAc. Os dois diastereómeros foram separados. O primeiro isómero eluido foi tratado com HC1 IN durante 1 h à temperatura ambiente. A solução aquosa foi liofilizada. O rendimento foi de 0,51 g de 3A. O segundo isómero eluido foi tratado do mesmo modo para dar 0,40 g de 3B. Anál. calc. para C9H2iN302 l,75 HCl'0,75 H20: C, 38,52 ; H,8,71; N, 14,97. Encontrada: C, 38,60 ; H,8,73; N, 13,34. -32- [/1/1r*j
Exemplo 4
Diclorato de Nl-(l-iminoetil)-l,4-pentanodiamina
H
H .N.
N H
NH
4 &0
I
Boc 4 a 4a. Uma solução de 5-metil-2-pirrolidinona (50 g, 0,5 mol), dicarbonato de di-t-butilo (165 g, 0,76 mol), DMAP (62 g, 0,5 mol) e Et3N (250 mL) em CH2CI2 foi agitada à temperatura ambiente durante 24 h. O solvente foi concentrado in vacuo e foi feita uma suspensão do sólido vermelho oleoso resultante em Et20 e foi filtrado. A solução de Et20 foi passada através de uma camada de sílica gel. O solvente foi removido para dar um líquido cor de laranja. O produto foi cromatografado para dar 82 g (83%) de um líquido amarelo. Η o
Boc' Nv|x-Ss^kO H 4 b 4b. Adicionou-se com agitação hidróxido de sódio (2,24 g, 56 mmol) a uma solução de 4a (4,0 g, 20 mmol) em THF:H20 (175 mL:75 mL). A solução rsultante foi agitada durante 2 h. O solvente foi concentrado in vacuo até 75 mL. A solução foi acidificada com ácido cítrico (1 M, 75 mL), extraída com -33-
EtOAc (200 mL), seca, e concentrada in vacuo para dar 5,36 g de um óleo. O produto foi cristalizado de Et20/hexano para dar 4,24 g (98%) de um sólido branco.
Boc
NH2 4c 4c. A uma solução de 4b. (4,0 g, 18 mmol) e TEA (2,6 mL, 18 mmol) em THF (50 mL) a -10°C adicionou-se gota a gota com agitação cloroformato de isobutilo (2,39 mL, 18 mmol) e a solução foi agitada durante 20 min. Adicionou-se hidróxido de amónio (3,9 mL, 28%) e a solução resultante foi agitada durante 18 horas deixando aquecer até à temperatura ambiente. A solução foi concentrada in vacuo e fez-se uma suspensão do resíduo em EtOAc (80 mL) em ebulição e filtrou-se. Este processo foi repetido. O filtrado foi concentrado até 30 mL e o sóido recolhido para dar 3,82 g.
H
Boc^V^^N 4 d 4d. A uma solução de 4c. (3,5 g, 16 mmol) em THF (20 mL) adicionou-se com agitação TFAA (2,5 mL, 17,7 mmol) a 0°C gota a gota e a solução foi agitada durante 20 min. A solução foi vertida sobre Et20 (125 mL) e NaHCOs (satur., 25 mL), as fases separadas e a solução orgânica foi extraída com NaHC03 (satur.) e uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca, filtrada, e concentrada in vacuo para dar 2,88 g de um óleo. O produto foi destilado em vácuo (p.e. 130°C @ 0,6 mm Hg) para dar 2,2 g (69%) de um líquido amarelo.
Boc
H -N, -34- l/ÍM^ NH2 4 e 4e. Tratou-se uma solução de 4d. (1,7 g, 8,6 mmol) em EtOH com H2 (300 psi) sobre níquel Raney a 50 °C durante 8 h. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada in vacuo para dar 1,25 g (73 %) de um óleo incolor
H
Boc
4f 4f. Uma solução de 4e (1,0 g, 4,9 mmol) e cloridrato de acetimidato de etilo (0,62 g, 5 mmol) em EtOH anid. (25 mL) foi agitada durante 18 horas. A solução reaccional foi concentrada in vacuo para dar 1,46 g de uma espuma branca. Este material foi utilizado no passo seguinte sem mais purificação.
Η NH 4 4. Uma solução de 4f (1,46 g, 4,9 mmol) em acetona (25 mL) foi tratada com HC1 (10 mL, 2 M em MeOH), e agitada durante 10 min. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e triturada com etanol e THF para dar um óleo. A cristalização do óleo foi conseguida de i-propanol. A solução foi concentrada in vacuo para se obter 0,42 g (39%) de uma espuma que foi seca. -35-
Anál. cál. para C7H17N3'2 HC10,15 H2O0,15 i-PrOH: C, 39,27. 18,44; Cl, 31,12. Encontrada: C, 39,25; H, 9,53; N, 18,04; Cl, 31,52
N,
Exemplo §
Nl-(l-iminoetil)-l,5-heptanodiamina
H I Boc‘
H 5a
H 5a. Uma solução de 3a (500 mg, 1,38 mmol) em AcOH/EtOH foi tratada com H2 (5 psi) sobre negro de Pd durante 21 h. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em CH2C12 (125 mL) e extraído com NaOH (1 M), seco sobre Na2SC>4, filtrado, e concentrado in vacuo para dar 0,32 g de uma goma branca.
5b. Uma solução de 5a (0,29 g, 1,26 mmol) e cloridrato de acetimidato de etilo (0,156 g, 1,3 mmol) em EtOH (15 mL) foi agitada durante 18 -36- h. A solução reaccional foi concentrada in vacuo para dar 0,40 g de uma goma branca. Este material foi utilizado no passo seguinte sem mais purificação. 5 5. A uma solução de 5b (0,40 g, 1,26 mmol) em AcOH (glacial, 10 mL) adicionou-se com agitação HC1 (6,95 M em dioxano, 14 mmol). A solução resultante foi agitada durante 2 horas. Concentrou-se a solução em in vacuo para dar 0,41 g de uma goma. Este material foi purificado por HPLC de fase reversa num suporte C-18 (7:3 CH3CN:H20) para dar 95 mg de um produto transparente na forma de um vidro. HRMS para C9H22N3: 172,1814. Encontrado: 172,1809.
Exemplo Referência 6
Nl-(l-iminoetil)-5-fenil-l,5-pentanodiamina
6
Boc 6a 6a. Repetiu-se a reacção do exemplo 4a numa escala de 0,4 mol com valerolactama. O rendimento da reacção foi quantitativo. -37-
6b. Tratou-se uma solução de 6a (5 g, 25 mmol) em THF (125 mL) a -78°C com brometo de fenilmagnésio (9,5 mL, 3,0 Μ). A solução resultante foi agitada a -72°C durante 35 min em seguida vertida sobre uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e extraída com Et20. A solução orgânica foi seca, filtrada, e concentrada e in vacuo para dar 6,42 g de um óleo. O produto foi cromatografado e recristalizado de hexano para dar 3,78 g (55%) de um sólido branco. Anál. calc. para C16H23N03: C, 69,28; H, 8,36; N, 5,05. Encontrada: C, 69,30; H, 8,84; N, 4,95.
6c. Tratou agitando uma suspensão de 6b (0,50 g, 1,8 mmol) em EtOH (3 mL) com uma solução de cloridrato de hidroxilamina (0,25 g, 3,6 mmo), acetato de sódio (0,25 g, 3,8 mmol) em H20 (3 mL). A solução foi mantida ao refluxo durante 4,5 h, tempo ao fim do qual se formou uma solução. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente adicionou-se H20 (50 mL) e extraíu-se a mistura com CHC13 (3 x 30 mL). Os extratos de CHC13 foram combinados, secos, filtrados, e concentrados in vacuo para dar 420 mg (80%) de um sólido branco. Anál. cal. para Ci6H24N203: C, 65,73; H, 8,27; N, 9,50. Encontrada: C, 65,79; H, 8,79; N, 9,53.
NH2 6d -38-
6d. Tratou-se uma solução de 6c (3,54 g, 24 mmol) em EtOH com H2 (5 psi) sobre Pd/C 10% durante 24 h. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada in vacuo para dar 2,61 g (77%) de um óleo incolor. Anál. cal. para C16H26N2O20,4 EtOH: C, 67,98; H, 9,64; N, 9,44. Encontrada: C, 68,19; H, 9,38; N, 9,11.
H'N'Cbz 6e
Boc' 6e. Numa ampola de decantação adicionou-se a uma solução de 6d (2,1 g, 7,54 mmol) em EtOAc (100 mL) NaOH (1 M, 60 mL) e cloroformato de benzilo (1,93 g, 11,31 mmol). A mistura foi agitada durante vários minutos e as fases separadas. A solução de EtOAc foi extraída com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca, filtrada, e concentrada in vacuo para dar um óleo. O óleo foi cromatografado para dar 2,34 g (75 %) de um sólido branco.
6f. Tratou-se uma solução de 6e (2,0 g, 4,85 mmol) em CH2C12 (25 mL) a 0°C com TFA (20 mL) e deixou-se a temperatura subir até à temperatura ambiente durante 1,5 h. A solução foi concentrada in vacuo para dar um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em CHCI3 e extraído com NaOH (1M) e uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco sobre Na2S04, filtrado, e concentrado in vacuo para dar 1,35 g (89%) de uma goma. -39-
6g 6g- Uma solução de 6f (1,3 g, 4,16 mmol) e cloridrato de acetimidato de etilo (0,533 g, 4,2 mmol) em EtOH (20 mL) foi agitada durante 18 h. A solução reaccional foi concentrada in vacuo para dar 1,65 g de uma espuma branca. Este material foi purificado por HPLC de fase reversa para dar 1,09 g de uma espuma. Anál. cal. para C21H27N3O21 HCl'0,75 H20: C, 62,52; H, 7,37; N, 10,42. Encontrado: C, 62,82; H, 7,05; N, 10,12. 6 6. Uma solução de 6g (0,94 g, 2,41 mmol) em AcOH foi tratada com H2 (5 psi) sobre negro de Pd durante 20 h. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em EtOH (10 mL) e adicionou-se HCl/Dioxano (1 mL, 5,8 M) e concentrou-se in vacuo para dar 0,52 g (74%) de um pó branco. Anál. cal. para Q3H21N2O2 2 HCl'0,75 H20 0,2 EtOH: C, 51,10; H, 8,22; N, 13,34; Cl, 22,51. Encontrado: C, 50,98; H, 7,82; N, 13,66, HC1,22,20.
Exemplo de Referência 7 N-[5-amino-5-(2-hidroxifenil)pentil]etanimidamida
BOC*
7a -40- -40-
η la. Repetiu-se a reacção do exemplo 6b numa escala de 25 mmol com 2-(tetrahidropiran-2-iloxi)fenilo de lítio. O 2-(tetrahidropiran-2-iloxi)fenilo de lítio foi preparado a partir de 2-(tetrahidropiran-2-iloxi)fenilo de bromo e n-BuLi em THF a -78°C. O produto bruto foi cromatografado para dar 4,07 g (43%) de um óleo amarelo. 7 7. O exemplo 7 foi preparado do mesmo modo que o descrito para o exemplo 6.
Exemplo Referência 8 N-[5-ammo-5-(4-hidroxifenil)pentil]etanimidamida
8. O exemplo 8 é preparado do mesmo modo que o descrito para o exemplo 6 partindo de 4-(tetrahidropiran-2-iloxi)fenilo de lítio.
Exemplo 9 N-(5-aminononil)etanimidamida H a
NH NH2 9 .41 - Α mesmo modo que ο descrito 9. Ο exemplo 9 é prePar para o exemplo 6 partindo de n-butil de
Exemp*0 ^ ácido p-amino-4-[(l- { Hidrato do cloridrato do «/inropanoico
H
NH
OH
O
NH2 o 10a
10a. Aqueceu-se uma mistura de 4-nitrobenzaldeido (39 g, 0,26 mol), ácido malónico (30,5 g, 0,29 mol) e acetato de amónio (49 g, 0,64 mol) em AcOH a 100°C durante 5 h, adicionando-se em seguida HCL (25%, 200 mL) e continuou-se o aquecimento a 100°C durante mais 5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente e adicionou-se H2O (300 mL), filtrou-se o precipitado resultante e lavou-se com H20 (100 mL). O filtrado e a lavagem foram combinados e concentrados in vacuo, seguindo-se a adição de H20 (300 mL). A mistura resultante foi aquecida num banho de vapor, descorada com carvão e filtrada através de celite. O pH da solução foi ajustado a 7 com NH4OH -42- [/ϋυη (conc.) e ο precipitado resultante recolhido. O sólido foi lavado com H20 (100 mL), metanol:H20 (1:1, 100 mL), metanol:Et20 (1:1, 100 mL) e Et20 (100 mL) O sólido foi seco em vacuo para dar 29,8 g de um sólido amarelo.
10b 10b. Agitou-se uma solução de 10a (5,0 g, 24 mmol), dicarbonato de di-t-butilo (5,7 g, 26 mmol) em NaOH (1 M, 50 mL) e dioxano (50 mL) durante 4 h. O solvente foi concentrado até 50 mL ao qual foi adicionado EtOAc (400 mL) e KHSO4 (1 M, 75 mL). As fases foram separadas e a fase orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca. filtrada, e concentrada in vacuo para dar 8,5 g de uma espuma amarela.
O
10c 10c. O exemplo 10c foi preparado do mesmo modo que o 3a. H t
lOd -43-
Ia*, ^ 10d. Uma solução de 10c (8 mmol) em EtOH foi tratada com H2 (5 psi) sobre Pd/C durante 18 h. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada in vacuo para dar o produto.
OCH3 10e
H
lOe. A reacção do exemplo 6g foi repetida utilizando lOd numa escala de 5 mmol.
H
Vy>
NH H'N*H ° lOf lOf. Uma solução de lOe (890 mg, 2,4 mmol) em CH2Cl2:TFA (1:1, 50 mL) foi agitada a 0°C durante 15 min. O solvente foi removido em vácuo e o resíduo dissolvido em água (100 mL) e o extracto com EA. O pH da solução aquosa foi ajustado a 11 com K2C03 e extraída com CH2C12. Os extratos de CH2C12 foram secos (Na2S04) e concentrados. O resíduo foi cromatografada sobre sílica gel (9:1:1; ACN:H20:AcOH) para dar 50 mg de lOf (5 %) como uma espuma. Anál. calc. para Ci2H]7N3023 AcOH 1 H20: C, 49,87; H, 7,21; N, 9,69. Encontrada: C, 49,61; H. 6,96; N, 9,78. HRMS calc.: 235,1320. Encontrada: 235,1230. 10 10. Uma solução de lOf (20 mg, 5 mmol) em HC1 (2N, 5mL) foi refluxada durante 1 h. Removeu-se o solvente por liofilização para dar -44-
Uu, ^ ΐΜ~~η 24 g de 10 como uma espuma. Anál. calc. para CnH15N302 2,3 HCL0,6 H20: C, 41,82; H, 5,90; N, 13,30.
Exemplo Referência 11 Dihidrato do cloridrato de a-[l-amino-5-[(l-iminoetil)amino] pentil] benzenometanol
N-a-Z-N-8-Boc-L-Lis-N(OMe)Me (11a) lla. A uma solução de Ν-α-Ζ-Ν-ε-Boc-L-Lis (5 g, 13,8 mmol), Ν,Ο-dimetilhidroxilamina HC1 (3,9 g, 39,5 mmol), hidrato de 1-hidroxibenzotriazole (2 g, 14,5 mmol), e trietilamina (13,2 g, 17 mL, 130 mmol) em 75 mL de dimetilformamida (DMF) arrefecida num banho gelado adicionou-se, com agitação, EDC (2,8 g, 14,5 mmol). Após agitar durante 55 h à temperatura ambiente, filtrou-se o cloridrato de trietilamina da mistura reaccional e o filtrado foi concentrado em vácuo. Foi feita a partição do resíduo entre 150 mL de acetato de etilo (EtOAc) e 75 mL de uma solução de KHS04 1M. As fases foram separadas. A fase orgânica foi lavada com 1 x 75 mL de uma solução saturada de KHCO3 e 1 x 75 mL de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e foi tratada do modo habitual dando 5,3 g de 11a (95%). llb. Com agitação adicionou-se a uma solução de 11a (1,8 g, 4,26 mmol) e Ν,Ν,Ν,Ν-tetrametiletilenodiamina (1,63 g, 2,12 mL, 14,06 mmol) -45- em 50 mL de THF seco a -72°C uma solução 1,8 M de fenil lítio em ciclohexano (1,18 g, 7,8 mL, 14,06 mmol). Após agitação à mesma temperatura durante 2,5 h, a mistura reaccional foi adicionada a 50 mL de uma solução 1M de KHSO4 e 50 mL de EtOAc. As fases foram separadas, a fase orgânica foi lavada com 1 x 30 mL de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e tratada do modo usual dando 2,8 g de um produto bruto que foi purificado utilizando cromatografía em coluna. O rendimento de 11b foi de 1,3 g (69,5 %) llc. Adicionou-se ao exemplo 11b (1,3 g, 2,96 mmol) dissolvido em 30 mL de ácido acético 3 mL de HCl/dioxano 5N. A reacção foi agitada durante 20 min. à temperatura ambiente concentrada sob vácuo. O resíduo foi seco, tratado com Et20, lavado com hexano, e seco dando 1,0 g (90,9%) de 11c. Anál. cale. para C20H24N2O3 HCL 0,4 H20: C, 62,54; H, 6,77; N, 7,29; Cl, 9,23. Encontrada: C, 62,88; H, 6,80; N, 7,22; Cl, 9,18. lld. Neutralizou-se 0,5 g de 11c dissolvido em 10 mL de água com Na2CC>3 (pH 9-10), o óleo foi extraído com 3x15 mL de EtOAc e a solução orgânica foi tratada do modo usual dando 0,45 g de lld. lie. O pH de uma solução de lld (0,45 g,l,32 mmol) e cloridrato de acetimidato de etilo (0,2 g, 1,455 mmol) em 15 mL de etanol foi ajustado a 9-10 utilizando uma solução de NaOH/etanol. Após agitar durante lh à temperatura ambiente, a reacção foi acidificada a pH 2 com HCl/dioxano 5N. A mistura reaccional foi filtrada do NaCl e concentrada em vácuo. O produto bruto (0,5 g) foi purificado utilizando separação em fase reversa, dando 0,225 g de lie (40,91 %). Anál. calc. para C22H27N303 HC1O,5 H20: C, 61,89; H, 6,85; N, 9,84; Cl, 8,30. Encontrada: C, 61,68; H, 6,50; N, 9,88; Cl, 8,18. 11 A, 11B. O exemplo lie (0,36 g, 0,86 mmol) foi reduzido em -46- condições de hidrogenação catalítica utilizando negro de Pd a 60 psi de 1¾ numa solução de EtOH/AcOH a 50% durante 24 h. O rendimento do produto bruto produzido foi de 0,35 g. Após separação em fase reversa foram isolados dois produtos: o isómero de eluição mais rápida (11 A) 0,085 g e o isómero que eluíu mais lentamente (11B) 0,1 g. Análise do isómero que eluíu mais rápidamente: anál. calc. para C14H23N3O 1,5 HC10,4 AcOH2 H20: C, 48,82; H, 8,33; N, 11,54. Encontrada: C, 48,56; H, 7,79; N, 11,95.
Exemplo Referência 12
Hidrato de N-[5S-amino-6-oxo-6-(2-tienil)hexil]etanimidamida
12 12a. 12a foi preparado numa escala de 2,84 mmol do mesmo modo que o descrito par 11b utilizando 11a e 2-tiofenolítio para dar 0,6 g (47,2%) de 12a após cromatografía. Anál. calc. para C23H30N2O5S: C, 61,86; H, 6,77; N, 6,27. Encontrada: C, 61,53; H, 6,91; N, 6,12. 12b. 12b foi preparado a partir de 12a (0,6 g, 1,34 mmol) do mesmo modo que 11c originando 0,4 g (85,1 %). 12c. 12c foi preparado a partir de 12b (0,4 g, 1,16 mmol) do mesmo modo que lie para dar 0,44 g do produto bruto. 12. A uma solução de 12c (0,44 g, 1,14 mmol) e tioanisole (0,51 g, 0,44 mL, 2,28 mmol) em 10 mL de TFA a 0°C adicionou-se -47-
trifluorometanossulfonato de trimetilsilil (TMSOTf) (0,28 g, 0,27 mL, 2,28 mmol). Após misturar à mesma temperatura durante 1 h, adicionou-se Et20. O produto 12 bruto é filtrado e é lavado com Et20.
Exemplo Referência 13 N-[5S-amino-6-hidroxi-6-(tetrahidrofuran-2-il)hexil]etanimidamida
13. O exemplo 13 foi preparado do mesmo modo que o exemplo 11 numa escala de 9,2 mmol partindo de 2-bromofurano.
Exemplo Referência 14
Cloridrato de N-(5S-amino-6-oxoheptil)etanimidamida
14 14a. A uma solução de 11a (1,0 g, 2,4 mmol) e Ν,Ν,Ν,Ν-tetrametiletilenodiamina (0,96 g, 1,25 mL, 8,3 mmol) em 30 mL de THF seco a -72°C adicionou-se, com agitação, metil lítio, solução 1,4 M em Et20, (5,9 mL, 8,3 mmol). Após agitar à mesma temperatura durante 3 h, a mistura reaccional foi adicionada a 50 mL de uma solução 1 M de KHS04 e 50 mL de EtOAc a 0°C. As fases foram separadas, a fase orgânica foi lavada com 1 x 30 mL de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e tratada do modo usual dando 2,8 g -48- ím,^ ι^~η de um produto bruto que foi purificado utilizando cromatografia em coluna. O rendimento de 14a foi de 0,9 g (55%9. 14b. Ao exemplo 14a (0,5 g, 1,2 mmol) em 10 mL de ácido acético adicionou-se 2 mL de HCl/dioxano 6N. A reacção foi agitada durante 20 min à temperatura ambiente em seguida concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em H20 e liofilizado para dar 0,4 g (105%) de 14b. 14c. A uma solução de 14b (0,4 g, 1,2 mmol) e TEA (0,56 mL, 3,9 mmol) em 10 mL de DMF adicionou-se cloridrato de acetimidato de metilo (0,43 g, 3,9 mmol). Após agitar durante 16 h à temperatura ambiente, a reacção foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. Foi feita a partição da mistura reaccional entre 15 mL de HC1 IN e 20 mL de DCM. O produto bruto após separação do HC1 aquoso foi purificado utilizando separação em fase reversa, dando 0,26 g de 14c (60,5%). 14. Fez-se a redução de 14c (0,26 g, 0,73 mmol) em condições de hidrogenação catalítica utilizando Pd/C em H2 a 5 psi numa solução de MeOH/HCl 50% durante 3 h. O rendimento do produto foi de 0,18 g (94,7 %).
Análise cal. para C9H19N302 HC1H20: C, 39,14; H, 8,39; N, 15,21. Encontrada: C, 39,24; H, 8,32; N, 14,99.
Exemplo 15
Cloridrato do dihidrato de N-(5S-amino-6,7-dihidroxi-6-metilheptil)etanimidamida
NH2
-49- 1/ί4η A estereoquímica absoluta do grupo hidroxilo na posição C-6 não foi ainda determinada. Os diastereómeros foram separados como descrito a seguir. Verifica-se a existência de uma diferença na actividade biológica dos dois diastereómeros. 15 15a. A uma suspensão de brometo de metiltrifenilfosfónio (6,21 g, 17,4 mmol) em 150 mL de tolueno adicionou-se gota a gota com agitação 0,5 M de hexametildidilazida de potássio em tolueno (35,6 mL, 17,4 mmol). Após agitar durante 1,5 h, adicionou-se 14a (6,85 g, 17,4 mmol) em 50 mL de tolueno à suspensão em agitação arrefecida a -20°C. Após 5 h, a reacção foi aquecida a 0°C, lavada com 2 x 100 mL de KHS04, 1 x 100 mL de uma solução saturada de cloreto de sódio, seca, filtrada, e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografiaflash para dar 5,3 g (80%) de 15a, um sólido branco. 15b. A uma solução de 15a (3,3 g, 8,8 mmol) em 150 mL de acetona:H20 (3:1) adiconou-se com agitação N-óxido de N-metilmorfolina (2„05 g, 17,5 mmol) e Os04 2,5% em t-BuOH (9,5 mL, 0,9 mmol). Após 18 h, adicionou-se à reacção 100 mL de H20, 25 g de celite, e 6 g de Na2S204. A reacção foi filtrada através de uma camada húmida de celite. Ao filtrado adicionou-se 180 mL de KHS04 1M. O filtrado foi extraído com 3 x 250 mL de EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas, filtradas, e separadas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash para dar 3,5 g (97%) de 15b. 15c. A uma solução de 15b (1,6 g, 3,9 mmol) em 25 mL de HOAc adicionou-se, com agitação, 2,5 mL de HCl/dioxano 4 N. Após 30 min, o solvente foi removido em vácuo para recuperar 15c quantitativamente. -50- (/Μ. <7*^ X5d. O exemplo 15d foi preparado do mesmo modo que o descrito para o exemplo 14c partindo de 15c (1,36 g, 3,9 mmol). O resíduo foi aplicado numa coluna de fase reversa (YMC AQ-363-10P, ODS) utilizando um gradiente de CH3CN/0,025 % HOAc. O primeiro isómero eluído, 15d-l, pesava 0,11 g; o segundo isómero eluído, 15d-2, pesava 0,28 g; a mistura dos dois pesava 0,18 g. 15A. O exemplo 15A foi preparado do mesmo modo que o descrito no exemplo 14 partindo de 15d-l (1,1 g, 2,6 mmol). Após liofílização, recuperou-se 0,82 g de 15A. Anál. cal. para CioH23N3022 HC11,75 H20: C, 37,33; H, 8,93; N, 13,06. Encontrada: C, 37,25; H, 8,70; N, 12,95. 15B. O exemplo 15B foi preparado do mesmo modo que o descrito no exemplo 14 partindo de 15d-2 (0,28 g, mmol). Após liofílização, recuperou-se 0,21 g de 15B. Anál. cal. para Ci0H23N3O22 HC12,2 H20: C, 36,41; H, 8,98; N, 12,74. Encontrada: C, 36,31; H, 8,97; N, 12,34.
Exemplo 16
Dicloridrato do hidrato de N-(5S-amino-8,7-dihidroxioctil)etanimidamida
16A,
16A, 16B. Os exemplos 16A e 16B foram preparados do mesmo modo que o descrito para os exemplos 3A e 3B partindo de 3b e brometo de etiltrifenilfosfónio. 16B. Anál. cal. para Ci0H23N3O2 2 HC11,8 H20: C, 37,22; H, 8,93; N, 13,02. Encontrada: C, 37,47; H, 9,05; N, 12,93. -51 -
Exemplo 17 Ácido 4S-ammo-2,3-dihidroxi-8-[(l-iminoetil)amino] octanóico nh2 oh
COOH 17a. O exemplo 17a foi preparado partindo de 3b e brometo de (carbometoximetil)trifenilfosfónio. 17b. A uma solução de 17a (3,3 mmol) em 80 mL de acetona:H20 adicionou-se com agitação N-óxido de N-metilmorfolina (0,64 g, 4,8 mmol) e OsC>4 2,5% em t-BuOH (3,4 mL, 0,34 mmol). Após 18 h, adicionou-se à reacção 120 mL de H20, 8 g de celite, e 1,6 g de Na2S204. A reacção foi filtrada através de uma camada húmida de celite. Ao filtrado é adicionado 200 mL de KHSO4. O filtrado é extraído com 3 x 200 mL de EtOAc. As fases orgânicas combinadas são secas, filtradas, e separadas. 17c. O grupo protector benziloxicarbonilo é removido de 17b por hidrogenação catalítica utilizando negro de Pd como catalisador originando 17c quantitivamente. 17d. A uma solução de 17c (14,9 mmol) e TEA (3,3 mL, 24 mmol) em 10 mL de DMF adicionou-se com agitação acetimidato de metilo (2,44 g, 22,2 mmol). Após 16 h, o TEA.HC1 é filtrado da reacção e é lavado com o mínimo de DMF. O pH do filtrado é ajustado a 3 com HC1 IN. O filtrado é concentrado sob alto vácuo. O resíduo é aplicado numa coluna de fase reversa «-tu, ^ (YMC AQ-363-10P, ODS) utilizando um gradiente de 20% CH3CN/0,025% HOAc até 50% CH3CN/0,025% HOAc. 17e. O exemplo 17d é tratado com HC1 IN durante 1 h à temperatura ambiente. A solução aquosa é liofilizada para dar 17e.
17. Refluxou-se 17d dissolvido em 20 mL de HC1 2 N durante 60 min. A mistura reaccional é diluída com H2O e liofolizada.
Exemplo Referência 18
Cloridrato do monohidrato de N-(6,7-diacetiIoxi-5S-aminoheptil)etanimidamida NH NH2 X ^ ^ X ^ H OAc 18a. A uma solução de 3e (0,90 g, 2,3 mmol) e DMAP (0,61 g, 5,0 mmol) em DCM adicionou-se, com agitação, anidrido acético (2,1 mL, 23 mmol). Após 18 h, o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi misturado com 50 mL de EtOAc que foi lavado com 3 x 50 mL de solução saturada de KHC03, 1 x 50 mL de KHSO4 1 M, e 1 x50 mL de H2O. A fase orgânica foi seca sobre Na2S04 anidro, filtrado, e concentrado para dar 0,99 g (89%) de 18a, um vidro amarelo pálido. Anál. cál. para C24H36N208O,2 H20: C, 59,54; H, 7,58; N, 5,79. Encontrada: C, 59,75; H, 8,42; N, 6,77. 18b. O exemplo 18b (0,90 g, 1,9 mmol) foi preparado do mesmo modo que 3f para dar 0,64 g (1,8 mmol) de 18b. -53- 18c. A uma solução de 18b (0,64 g, 1,8 mmol) em 10 mL de DMF adicionou-se com agitação 2 mL de uma solução de acetimidato de metilo (0,10 g, 0,9 mmol) que foi neutralizada com TEA (0,12 g, 0,9 mmol) e filtrada através de lã de vidro para remover o TEA.HC1. Isto foi repetido 4 x durante duas horas. Após agitar durante mais 2 h, o pH da reacção foi ajustado a 3 com HC1 IN. Após remover o solvente sob vácuo, o produto bruto foi purificado por cromatografia em fase reversa. Obteve-se não só produto desejado 18c (0,38 g, 51%) como o composto monoacetoxi, 19a (0,11 g). 18. O exemplo 18 foi preparado a partir de 18c (0,38 g, 0,9 mmol) dissolvido em 2 mL de HOAc ao qual se adicionou 1 mL de HCl/dioxano 4 N. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em H20 e liofilizado para dar 18 (0,26 g, 81%). Anál. cál. para C13H25N3O41,75 HC11 H20: C, 542,29; H, 7,85; N, 11,38. Encontrada: C, 42,41; H, 7,57; N, 10,68.
Exemplo Referência 19
Cloridrato do monohidrato de N-(5S-amino-6-hidroxi-7 acetoxiheptil)etanimidamida
19. Dissolveu-se o exemplo 19a (0,11 g, 0,29 mmol) em 1 mL de HOAc. (ver exemplo 18c para isolar 19a). Adicionou-se à solução anterior 1 mL de HCl/dioxano 4 N. Após 5 min, o solvente foi removido em vácuo e o resíduo recolhido em H20 e liofilizado. Anál. cál. para CnH23N303 2 -54-
HC11,2 H20: C, 38,87; H, 8,13; N, 12,36. Encontrada: C, 38,81; H, 8,01; N, 12,07.
Exemplo 20 N-(5S-amino-6,7,8-trihidroxioctil)etanimidamida
OH H OH 20a. 17b dissolvido em THF foi tratado com LiBH4 para remover o grupo benzoxicarbonilo e reduzir o éster ao álcool correspondente. 20b. A uma solução de 20a (14,9 mmol) e TEA (3,3 mL, 24 mmol) em 10 mL de DMF adicionou-se acetimidato de metilo (2,44 g, 22,2 mmol) com agitação. Após 16 h, filtrou-se o TEA.HC1 da mistura reaccional e lavou-se com o mínimo de DMF. O pH do filtrado foi ajustado a 3 com HC1 IN. O filtrado foi concentrado sob alto vácuo. O produto bruto é purificado por cromatografia em fase reversa. 20. O exemplo 20b é tratado com HC1 1 N durante 1 h à temperatura ambiente. A solução aquosa é liofilizada para dar 20.
Exemplo 21 N-(5S-amino-7,8-dihidroxioctil)etanimidamida
H -55- Ιΐη 21. Ο exemplo 21 é preparado do mesmo modo que 3A, 3B partindo de lb.
Exemplo 22 N-[5S-amino-5-d(4-metil-2-oxo-l,3-dioxolan-4-il)penti]]etanimidamida
22. 15b é tratado com fosgénio para gerar um carbonato cíclico. O exemplo 22 é sintetizado por métodos descritos no exemplo 15.
Exemplo Referência 23 N-(5S-amino-6-hidroxi-7-metoxiheptil)etanimidamida
OMe 23a. A uma solução de 3d (3,62 g, 10 mmol) em 25 mL de DCM adicionou-se ácido m-cloroperbenzóico (2,59 g, 15 mmol) com agitação. Após 16 horas, o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo resultante foi recolhido em 100 mL de EtOAc e lavado com 3 x 100 mL de solução de KHCO3 saturada. A fase orgânica foi seca, filtrada, e concentrado. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash para dar 2,89 g (76%) de 23a. -56-
Uuj 23b. O exemplo 23b é preparado do modo descrito em Tetrahedron Lett, 1994, 35, 8977-80. A uma suspensão de NaOMe em 15 mL de tolueno-THF (2:1) arrefecida a -78°C adicionou-se com agitação Et2AlCl (3,6 mL, 3,6 mmol [solução 1 Mj). Após 30 min, adicionou-se gota a gota 10 mL de uma solução de 23a em tolueno (0,63 g, 1,7 mmol) à suspensão de NaOMe. A reacção é tratada 1,5 h depois com Na2SO4'10 H20 (5 g) e Na2C03 (0,3 g). Após a remoção do baanho gelado, a suspensão é agitada durante 1 h. Os sais são filtrados da mistura reaccional e o filtrado é concentrado para dar 23b. 23. Exemplo 23 é preparado a partir de 23b do mesmo modo como descrito para 3f e 3.
Exemplo Referência 24
N[5S-amino-6-hidroxi-7-(etiltio)heptil]etanimidamida NH
A i
H 24a. Adicionou-se a etanotiol (0,19 mL, 2,5 mmol) fluoreto de tetra-n-butilamónio com agitação. Após 15 min, adicionou-se 23a (0,79 g, 2,1 mmol) em 15 mL de CH3CCN. Após 16 h, removeu-se o solvente. O produto bruto é purificado por cromatografia flash. 24b. O exemplo 24a é tratado com LiAlH4 para remover o grupo protector benziloxicarbonilo. 24. O exemplo 24 é preparado a partir de 24b utilizando as condições descritas no exemplo 3. -57- (Μη
Exemplo Referência 25
N-[5S-amino-6-hidroxi-7-(metilsulfínil)heptil]etanimidamida NH
A i
H 25. O exemplo 25 é preparado a partir de 24 por tratamento com H202 30% e ácido acético à temperatura ambiente durante 1 h.
Exemplo Referência 26 N-[5S-amino-6-hidroxi-7-(metilsulfonil)heptil]etanimidamida
26. O exemplo 26 é preparado a partir de 24 por tratamento com H202 30% e ácido acético à temperatura ambiente durante 4 h.
Exemplo Referência 27 N-[5S-amino-6-hidroxi-7- [(fenilmetil)tio] heptil] etanimidamida
27. O exemplo 27 é preparado a partir de 23a e mercaptano de benzilo do mesmo modo que 24. -58-
Exemplo Referência 28 N-[5S-amino-6-hidroxi-7-[(fenilmetil)sulfinil]heptiI]etanimidamida
nh2
28. O exemplo 28 é preparado do mesmo modo que 25 partindo de 27.
Exemplo Referência 29 N-[5S-amino-6-hidroxi-7-[(fenilmetil)sulfoniI]heptiI]etanimidamida
29. O exemplo 29 é preparado do mesmo modo que 26 partindo de 27.
Exemplo Referência 30 w
Acido 4S-amino-2,2-difluoro-3-hidroxi-8-[(l-iminoetil)amino]-3- metiloctanóico
-59- 30a. A uma suspensão de Zn (2 mg-atm) e brometo de difluoroacetato de etilo (2 mmol) em 10 mL em refluxo adicionou-se gota a gota uma solução de 14a (1 mmol) em 2 mL de THF. Após 1 h, a reacção é arrefecida à temperatura ambiente. Adiciona-se à reacção 20 mL de EtOAc e 20 mL de KHS04 1M. As fases são separadas e a fase orgânica é tratada do modo usual para dar 30a. 30b. As condições descritas no exemplo 14 são utilizadas para preparar 30b partindo de 30a. 30.
Para separar o éster etílico de 30b, utilizou-se as condições descritas no exemplo 1.
Exemplo Referência 31 N-(5S-amino-6-fluoro-7-hidroxi-6-metilheptil)etanimidamida
31a. A uma solução de 15b (1,5 mmol) em 10 mL de piridina adiciona-se com agitação Ph3CCl (1,5 mmol). Após 16 h, a reacção é concentrada sob vácuo. O resíduo é recolhido em 20 mL de EtOAc e é lavado com 3 x 20 mL de KHSO4 1M, 2 x 20 mL de KHCO3 saturado, e 1 x 20 mL de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica é tratada do modo usual para obter 31a. 31b. A uma solução de 31a em dioxano adiciona-se com agitação
Et2NSF3. Após 40 h, a reacção é concentrada em vácuo e cromatografda para obter 31b. -60-
Ou. ^ 31. Utilizando a metologia descrita para o exemplo 15, o exemplo 31 é sintetizado a partir de 31b.
Exemplo Referência 32
Dicloridrato de N-[5S-amino-6,7-dihidroxi-7-(2-tienil)heptil]etanimidamida
K*NBOC
32. Uma mistura de acetato de paládio (Johnson Matthey, 0,29 mmol), tri-o-tolilfosfina (0,6 mmol), 2-bromotiofeno (16,0 mmol), e trietilamina (16 mmol) é mantida ao refluxo sob azoto durante 30 min. A mistura é arrefecida até à temperatura ambiente, e adiciona-se 3d (14,4 mmol) em 6 mL de acetonitrilo. A reacção é mantida ao refluxo durante 24 h, arrefecida até à temperatura ambiente, e todos os solventes são evaporados a pressão reduzida. É feita a partição do resíduo entre NaHCC>3 saturado e EtOAc e a fase orgânica é seca (MgSC^), filtrada, e separada. O resíduo é cromatografado em sílica gel para dar 32a.
32b -61 - Ι/Αη 32b. Faz-se reagir tetróxido de ósmio com 32a pelo método utilizado na preparação de 3e, para dar 32b.
32c. Trata-se uma solução de 32b em AcOH com H2 (5 psi) sobre negro de Pd durante 20 h. A mistura reaccional controlada por cromatografia em camada fina para detectar a extensão da reacção. Se necessário, adiciona-se mais negro de Pd e a reacção continua. Este processo repete-se até que a reacção esteja completa. A mistura reaccional é filtrada e concentrada em vácuo para dar 32c.
32d. Agita-se uma solução equimolar de 32c e cloridrato de acetimidato de etilo em EtOH durante 18 h. A solução reaccional é concentrada em vácuo para dar uma espuma branca. Este material é purificado por HPLC de fase reversa para dar 32d. 32. A uma solução de 32d em AcOH (glacial) adiciona- se com agitação HC1 (6,95 M em dioxano). A solução é concentrada em vácuo e triturada em éter dietílico para dar 32. -62-
Exemplo Referência 33
Tricloridrato de N-[5S-amino-6,7-dihidroxi-7-(lH~imidazol-5-il)heptil] etanimidamida
33 h^nboc
33a 33a. Tratou-se 4-bromoimidazole (K&K Laboratories) como se descreve na preparação de 32a, substituindo o 2-bromotiofeno nessa preparação. O produto é 33a.
33b 33b. Pelo método do Exemplo 3e, faz-se reagir tetróxido de ósmio com 33a para dar 33b. -63-
33c 33c. Trata-se uma solução de 33b em AcOH com H2 (5 psi) sobre negro de Pd durante 20 h. A mistura reaccional é filtrada e concentrada em vácuo para dar 33c.
33d 33d. Agita-se uma solução equimolar de 33c e cloridrato de acetimidato de etilo em EtOH durante 18 h. A solução reaccional é concentrada em vácuo para dar uma espuma branca. Este material é purificado por HPLC de fase reversa para dar 33d. 33. A uma solução de 33d em AcOH (glacial) adicionou- se com agitação HC1 (6,95 M em dioxano)..A solução resultante é agitada durante 2 h. A solução é concentrada em vácuo e triturada com éter dietílico para dar 33.
Exemplo Referência 34
Dicloridrato de N-[5S-amino-5-(2,2-dimetil-l,3-dioxolan-4-il)pentil]etanimidamida
34 -64- 34. Dissolve-se 3Β (10 mmol) em DMF e adiciona-se 2,2-dimetoxipropano.(20 mmol), assim como HC1 6N em dioxano (2 mmol). A mistura é protegida da humidade e agitada de um dia para o outro. É em seguida evaporado o resíduo num evaporador rotativo utilizando uma bomba de óleo como fonte de vácuo. É feita uma suspensão do resíduo em acetona seca, agita-se durante 30 min, e separa-se outra vez. O resíduo resultante é dissolvido em água fria, comprimido, e liofilizado para dar 34.
Exemplo Referência 35
Di(4-sulfonato de metilbenzeno) de N-[5S-amino-5-(2-feniI-l,3-dioxolan-4- il)pentil]etanimidamida
35. Coloca-se 3B (27,7 mmol), 1,1,1-tricloroetano (350 mL), benzaldeído (55,4 mmol), e ácido toluenossulfónico monohidratado (55,4 mmol) num balão de 500 mL de fundo redondo de uma tobuladura adaptado com um extractor Sochlet cujo terminal é preenchido com peneiros moleculares 5A (8-12 orifícios da malha). O balão é imerso num banho de óleo (temperatura do banho 120°C) e a mistura é refluxada com agitação vigorosa durante 16 h. A reacção é então arrefecida e a mistura é convertida a um resíduo no evaporador rotativo utilizando uma bomba de óleo para produzir o vácuo. O resíduo é dissolvido em água fria, comprimido, e liofilizado para dar 35. -65-
Exemplo Referência 36 Dicloridrato de 2-[[3S-amino-2-hidroxi-7-[(l-iminoetil)ammo]heptil]oxi]propanoato -65-
NH30C Me Z XN I H
O
OMe O 36a. Lava-se hidreto de sódio (50% em óleo mineral, 10,5 mmol) duas vezes com hexano e faz-se uma suspensão em DMF. Dissolve-se lactato de metilo (10 mmol) em DMF e adiciona-se cuidadosamente à suspensão de NaH com agitação. A mistura é agitada durante 30 min, e adiciona-se uma solução de 23a (9 mmol) e cloreto de zinco anidro (9 mmol) em THF. Esta mistura é mergulhada num banho de óleo a 60°C e agitada durante uma noite. É então tratada para dar 36a. NHBOC Me
36b. Tratou-se uma solução de 36a em AcOH com H2 (5 psi) -66-
<~2aÀ^1-' sobre negro de Pd durante 20 h. A mistura reaccional é filtrada e concentrada em vácuo para dar 36b.
36c. Durante 18 h agita-se uma solução equimolar de 36b e cloridrato de acetimidato de etilo em EtOH. A solução reaccional é concentrada em vácuo para dar uma espuma branca. Este material é purificado por HPLC de fase reversa para dar 36c. 36. A uma solução de 36c em AcOH (glacial) adiciona-se com agitação HC1 (6,95 M em dioxano). A solução resultante é agitada durante 2 h. A solução é concentrada em vácuo e triturada com éter dietílico para dar 36.
Exemplo Referência 37
Dicloridrato de N-[5S-amino-5-(2-metil-3-oxo-l,4-dioxano-5-il)pentil)etanimidamida
37. Durante duas horas mantem-se ao refluxo uma solução de 36 em HC1 aquoso 1M. A reacção concentrada a volume reduzido, comprimida, e liofilizada para dar o composto em epígrafe. -67- U»t ‘^
Exemplo Referência 38 Dicloridrato de N-[5S-amino-6-hidroxi-7-(2-hidroxifenil)heptil)etanimidamida
38a. 2-Tetrahidropiran-2-iloxi)fenilítio é preparado a partir de brometo de 2-(tetrahidropiran-2-iloxi)fenilo e n-BuLi em THF a -78°C. Faz-se em seguida reagir com 23a em THF a -78°C, deixando a temperatura subir até à temperatura ambiente. A mistura reaccional é tratada do modo usual para dar 38a.
38b. Trata-se uma solução de 38a em AcOH com H2 (5 psi) sobre negro de Pd durante 20 h. A mistura reaccional é filtrada e concentrada em vácuo para dar 38b. -68-
Ι/MJ
38c. Uma solução equimolar de 38b e cloridrato de acetimidato de etilo em EtOH é agitada durante 18h. A solução reaccional é concentrada em vácuo para dar uma espuma branca. Este material é purificado por HPLC de fase reversa para dar 38c. 38. A uma solução de 38c em AcOH (glacial) adiciona-se HC1 (6,95 M em dioxano). A mistura resultante é agitada durante 2 h. A solução é concentrada in vacuo e triturada com éter dietílico para dar 38.
Exemplo Referência 39 N-(5S-amino-7,7,7-trifluoro-6-hidroxi-6-metilfenil)etanimidamida NH NH2
A i
H 39a. A uma solução de CF3I (10 mmol) em 5 mL de DMF a -40°C adiciona-se com agitação Zn (10 mG-atm) e 14a (0,5 mmol) em 10 mL de DMF. Após agitar durante 1 h a -20°C, a reacção é aquecida até à temperatura ambiente e feita a sua partição entre H20 e EtOAc. A fase orgânica é tratada do modo usual para obter o álcool trifluorometilo desejado. 39. Utilizando as condições descritas no exemplo 3, obtem-se o composto desejado. 69.(Μη ^
Exemplo 40
Dicloridrato de dihidrato de N-(5S-amino-6-hidroxiheptil)etanimidamida
40a. A 50 mL de uma solução de 14a (1,5 g, 4,0 mmol) em EtOH adicionou-se NaBH4. O resíduo foi recolhido em 50 mL de EtOAc e 30 mL de H2O. O orgânico foi tratado do modo habitual para obter 1,5 g de 40a. 40A,40B. Os exemplos 40A, 40B foram preparados do mesmo modo como descrito no exemplo 15. As primeiras fracções eluídas da purificação final por cromatografia em fase reversa eram constituídas por um único isómero (40A). As segundas fracções eluídas eram uma mistura de dois isómeros (40B). 40A Análise calc. para C9H21N302 HC12 H20: C, 36,49; H, 9,19; N, 14,18. Encontrada: C, 36,73; H, 8,93; N, 14,13. 40B Análise calc. para C9H21N303 HC1'2 H20: C, 32,49; H, 8,48; N, 12,63. Encontrada: C, 32,37; H, 8,08; N, 12,04.
Exemplo Referência 41
Dicloridrato de N-[5S-amino-5-(lH-tetrazol-5-il)pentil]etanimidamida
-70-
{/MJ 41a. A uma solução de Ν-α-ΒοοΝ-ε-Ζ-L-Lis (3,8 g, 10 mmol), fumarato de 2-aminopropionitrilo (1,9 g, 10 mmol), 1-hidrato de hidroxibenzotriaxole (4,4 g, 10 mmol), e NMM (3,3 mL, 30 mL) em 50 mL de DMF arrefecido num banho gelado adicionou-se hexafluorofosfato de (1H-1,2,3-benzotriazol-l-iloxi)-tris(dimetilamino)fosfónio (BOP) (4,4 g, 10 mmol). Após agitar 18 h à temperatura ambiente, o filtrado foi concnetrado sob vácuo. O resíduo foi distribuído entre 100 mL de EtOAc e 50 mL de uma solução de KHS04 1M. As fases foram separadas. A fase orgânica foi lavada com lx 50 mL de uma solução de KHCO3 e lx 50 mL de uma solução aquosa saturada de cloreto se sódio e foi tratada do modo habitual dando 3,9 g de 41a. 41b. A uma solução de 41a (3,9 g, 9 mmol) em 90 mL de THF adicionou-se com agitação PPh3, DEAD, TMSN3. Após agitar durante 24 h à temperatura ambiente, a reacção foi arrefecida a 0°C temperatura à qual se adicionou lentamente 300 mL de Ce(NH4)2(N03)ô a 6%. Adicionou-se mais Ce(NH4)2(N03)6 até cessar a evolução de N2. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com 2x 250 mL de DCM. As fases orgânicas combinadas foram tratadas do modo habitual para dar 3,1 g de 41b. 41c. A uma solução de 41b (2,7 g, 5,9 mmol) em 60 mL de THF adicionou-se com agitação 7 mL de NaOH IN. Após 18 h, a reacção foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi recolhido em 50 mL de EtOAc e 50 mL de NaOH 0,5N. As fases foram separadas e a fase aquosa foi lavada com 2x 50 mL de EtOAc. As segundas extracções orgânicas foram tratadas do modo habitual para obter 0,3 g de 41c. Os primeiros extractos orgânicos foram tratados do modo habitual e também continham o produto (2 g). 41. Para obter o exemplo 41, utilizaram-se as condições descritas no exemplo 3. 71_ ^
Exemplo de Referência 42 (A) heptanoato 3S-amino-2S-hidroxi-7-[(l-iminoetil)amino] de metilo (B) heptanoato 3S-amino-2R-hidroxi-7-[(l-iminoetil)amino] de metilo
42a 42a. A uma solução de N-a-Z-N-8-Boc-L-Lis-N(OMe)Me 11a em éter a 0°C adicionou-se com agitação LíA1H4 (1,2 equiv.) em porções. A solução resultante é agitada durante lh a 0°C, em seguida cuidadosamente tratada com KHSO4 (1 M). As fases foram separadas e a aquosa foi extraída com éter. As soluções orgânicas combinadas forma extraídas com KHS04 (1 M) e NaHCOs (satr.) secas (Na2SC>4) e evaporadas para dar 0 aldeído 42a, que é utilizado directamente no passo seguinte.
NH Z V Boc NH
OH 42b
CN 42b. Uma mistura de aldeído 42a em EtOAc e KCN (1 equiv.) em água, a 0°C, é tratada com agitação com uma solução aquosa de NaHSC>3 (satr.). -72-
Isu*! ^ A solução é agitada durante 1 hora, e as fases separadas. A solução orgânica é seca sobre Na2SC>4 anidro e concentrado para dar a cianohidrina 42b resultante.
ZNH o OH 42c 42c. A cianohidrina 42b é tratada com HCL/metanólico para dar o éster de metilo 42c. 42A, 42B. A amina 42c é tratada com acetimidato de metilo de acordo com o processo para lie. O produto é então tratado com negro de Pd de acordo com o processo para 11, e os isómeros são separados em HPLC de fase reversa para dar 42A e 42B.
Exemplo 43 (A) Ácido 3S-amino-2S-hídroxi-7-[(l-iminoetil)amino]heptanodióico (B) Acido 3S-amino-2R-hidroxi-7-[(l-iminoetil)amino] heptanodióico
NH NH2 O
43A,43B ZNH o
OH 43a -73- 1*η
43a. A cianohidrina 42b é tratada com HC1 concentrado a 0°C durante 12 h. A solução é concentrada em vácuo e o cloreto de amónio é removido por filtração. O resíduo é então seco para dar o hidroxiácido 43a. 43A, 43B. A amina 43a é tratada com acetimidato de metilo de acordo com o processo para lie. O produto é então tratado com negro de Pd de acordo com o processo para 11, e os isómeros separados em HPLC de fase reversa para dar 43A e 43B.
Exemplo de referência 44
Oxoheptanoato de 3S-amino-7-[(l-iminoetil)amino]-2 de metilo
NH NH2 O
44. Uma solução de 42A e 42B em água é tratada com MnC>2. A solução é filtrada e concentrada para dar 44.
Exemplo 45 3-amino-4-[3-[(aminoiminoetil)amino]fenil]butanoato de metilo
H 45
45a -74- 45a. A uma solução de cloreto de oxalilo (1,1 equiv.) em CH2CI2 seco é adicionada a -60°C uma solução de DMSO seco em CH2CI2 lentamente com agitação. Após agitação da solução durante 5 min adiciona-se uma solução de álcool 3-nitrofenetilo (1 equiv.) em CH2CI2 seco. A solução é agitada durante mais 15 min e subsquentemente adiciona-se TEA. Após agitar durante 5 min remove-se o banho de arrefecimento e deixa-se a solução atingir a temperatura ambiente. A reacção é tratada com água. A fase orgânica é removida e a fase aquosa é extraída com CH2CI2 adicional. Os extratos orgânicos combinados são lavados com uma solução concentrada de cloreto de sódio aquoso e água, secos (Na2S04) e evaporados para dar o aldeído. O aldeído é tratado com brometo de trifenilfosfónio de carbometoximetilo pelo método de 17a, para dar o éster 45a. NHBoc CO2CH3 NHBc 45b 45b. Uma solução de 45a e cloreto de amónio (3 equiv.) em ácido acético glacial é refluxada durante 3 h. O solvente é removido em vácuo e o resíduo é fraccionado entre EtOAc e Na2C03 aquoso. As fases são separadas e a fase orgânica é seca (Na2SC>4) e evaporada para dar a amina. O resíduo é recolhido em THF e tratado com dicarbonato de di-t-butilo (1,5 equiv.) e trietilamina (1,1 equiv.). A solução resultante é refluxada durante 2 h, concentrada em vácuo e purificado por cromatografia por coluna flash para dar 45b. NHBc NHBOC C02CH3 4 5 c 45c. Uma solução de 45b em metanol é hidrogenada na presença de Pd/C 10% para dar 45c. -75-
Uuj ^ 45. Adiciona-se ácido aminoiminometanossulfónico (1,1 equiv.) a uma solução de 45c em metanol. A solução é agitada durante 24 h. O solvente é removido e o resíduo é dissolvido em água. O pH é ajustado a um valor superior a 7 com NaOH. A mistura é extraída com EtOAc, seca (Na2S04) e concentrada em vácuo. O resíduo é então tratado com metanol/HCl para dar 45.
Exemplo 46 Ácido 3-amino-4-[3-[(aminoiminometil)amino]fenil]butanóico
H 46 46. Dissolve-se 45 em HC1 2N e refluxa-se durante 1 h. A reacção é diluída com água e liofílizada para dar 46.
Exemplo de referência 47 N-[5S-amino-6-hidroxi-6-(2-hidroxifenil)hexil]etanimidamida
47a 2 -76- 47a. 2-(Tetrahidropiran-2-iloxi)fenil de lítio é preparado a partir de 2-(tetrahidropiran-2-iloxil)fenil de bromo e n-BuLi em THF a -78°C. Reage em seguida com 3b em THF a -78 °C, deixando a temperatura subir até à temperatura ambiente. A mistura reaccional é tratada do modo usual para dar 47a.
47b. Uma solução de 47a em AcOH é tratada com H2 (5 psi) sobre negro de Pd durante 20 h. A mistura reaccional é filtrada e concentrada em vácuo para dar 47b.
47c. Uma solução equimolar de 47b e cloridrato de acetimidato de etilo em EtOH é agitada durante 18 h. A solução reaccional é concentrada in vacuo para dar uma espuma branca. Este material é purificado por HPLC de fase reversa para dar 47c. 47. A uma solução de 47c em AcOH (glacial) adiciona-se com agitação HC1 (6,95 M em dioxano). A solução resultante é agitada durante 2 h. A solução é concentrada in vacuo e triturada com éter dietílico para dar 47. -77-
l/A*J
Exemplo 48 N-(5S-amino-6-hidroxihexil)etanimidamida
48. O exemplo 48 foi preparado utilizando os métodos descritos no exemplo 3 partindo de 3c. e.m.a.r. C8H19N3O: 174,16.
Exemplo de Referência 49
Hidrato do cloridrato de N-[5-amino-(5-metiloxazol-2-il)pentil]etanimidamida
NH Boc
49a A uma solução arrefecida (0°C) de N-a-Boc-N-s-Z-L-Lys (3,8 g, 10 mmol), propargilamina (550 mg, 10 mmol) e Et3N (1 g, 10 mmol) em DMF adicionou-se HOBT (1,35 g, 10 mmol) e EDC (1,92 g, 10 mmol). Deixou-se a solução aquecer gradualmente até TA durante 16 h. Adicionou-se EtOAc (50 -78- l/LMj mL) à solução reaccional em seguida extraíu-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio (4 x 100 mL), secou-se (Na2SC>4) concentrou-se para dar um óleo. O produto foi critalizado de éter/hexano para dar 49a (4,3 g) como um sólido branco. Anal. Cale. para C22H31N3O2: C, 63,29; H, 7,48; N, 10,06. Encontrada: C, 63,04; H, 7,41; N, 9,94. NH Boc
Uma solução de 49a (1,8 g, 4,3 mmol) e acetato de mercúrio (240 mg, 8 mmol) em AcOH (80 mL) foi refluxada durante 2 h. A solução foi agitada à TA durante 2 h. O solvente foi removido e o resíduo foi recolhido em CHCI3 (250 mL) e lavado com NaOH (1M, 1 x 100 mL) e uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL), seco (Na2S04) e evaporado para dar um óleo. O produto foi purificado por cromatografia flash para dar 49b. Anal. Cale. para C22H31N3O2.2 H20: C, 62,75; H, 7,52; N, 9,98. Encontrada: C, 62,40; H, 7,40; N, 9,61. NH Boc
Uma solução de 49b (2,0 g, 4,75 mmol) em etanol foi tratada com H2 (5 psi) sobre Pd/C (10 %) durante 3 h. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada in vacuo para dar 49c. -79-
4 9 d
Uma solução equimolar de 49c (1,0 g, 3,5 mmol) e cloridrato de acetimidato de etilo em EtOH foi agitada durante 18 h. A solução reaccional é concentrada in vacuo para dar uma espuma branca (1,2 g). 49. A uma soução de 49d (1,2 g, 3,3 mmol) em AcOH (glacial, 25 mL) adicionou-se com agitação HC1 (5,8 M em dioxano, 3 mL). A solução resultante foi agitada durante 1 h. A solução é concentrada in vacuo e purificada por HPLC de fase reversa para dar 49. Anal. Cale. para CiiH2oN40.2,1 HCl.1,6 H20: C, 40,07; H, 7,74; N, 16,99; Cl, 22,58. Encontrada: C, 40,33; H, 8,00; N, 16,68, Cl; 22,75.
Exemplo de Referência 50
Cloridrato de 2S-amino-N-hidroxi-6-[(l-iminoetil)amino]hexanamida
NH
A i
H 50a. Partindo de Ν-α-ζ-Ν-ε-Boc-Lys e cloridrato de O-benzilhidroxilamina o exemplo 50 foi sintetizado utilizando as condições descritas nos exemplos 11a, llc-e, 11. Anal. Cale. para C8Hi8N402.1,5 HCl.0,25 HOAc.H20: C, 35,21; H, 7,82; N, 19,32. Encontrada: C, 35,32; H, 7,81; N, 19,75. -80- {/Mj ^
Dados Biológicos A actividade dos compostos listados anteriormente como inibidores de sintetase de NO foi determinada nos seguintes ensaios.
Ensaio de Citrolina como Sintetase de Óxido Nítrico A actividade de sintetase do óxido nítrico foi determinada monitorizando a conversão de L-[2,3-3H]-arginina a L-[2,3-3H]-citrolina (1,2). NOS inductíveis humanos (hiNOS), NOS constitutivas endoteliais humanas (hecNOS) e NOS constitutivas neuronais humanas (hncNOS) foram individualmente clonadas a partir de RNA extraído de tecidos humanos. As enzimas recombinantes foram expressas em células de insectos utilizando um vector baculovirus. A actividade enzimática foi isolada de extractos de células e parcialmente purificada por cromatografia DEAE-Sepharose (2). NOS inductíveis de ratos (miNOS) foram preparadas a partir de um extracto de células RAW 264,7 de ratos tratadas por LPS e NOS constitutivas de cérebros de rato (rcNOS) foram preparadas a partir de extracto de cerebelo de rato. Ambas as preparações foram parcialmente purificadas por cromatografia DEAE-Sepharose (2). Enzimas e inibidores foram adicionados para obter um volume de 50 pL em Tris 50nM (pH 7,6) e a reacção foi inicializada por adição de 50 pL de uma solução contendo Tris 50nM (pH 7,6), 2,0 mg/mL de albumina de soro bovino, DTT 2,0 nM, CaCl2 4,0 hN, FAD 20 pL, tetrahidrobipterin 100 pM, NADPH 0,4-2,0 nM e L-arginina 60 pM contendo 0,9 pCi de L-[2,3,3H]-arginina. Para a NOS constitutiva, incluiu-se calmodulina com uma concentração final de 40-100 nM. A seguir a incubação a 37°C durante 15 minutos, a reacção foi terminada por adição de 300 pL de tampão frio contendo EGTA 10 nM, HEPES 100 nM (pH 5,5) e L-citrulina 1,0 nM. A [3H]-citrolina foi separada por cromatografia em -81 -
Uuj resina catiónica Dowex 50W X-8 e a radioactividade foi quantificada com um contador de cintilação líquida. 1. Bret, D. S. e Snyder, S. H. (1990) Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 87,682-685. 2. Misko, T. P., Moor, W. M., Kasten, T. P., Nickols, G. A., Corbett, J. A., Tilton, R. G., McDaniel, M. L., Williamson, J. R. e Currie, M. G. (1993) Eur. J. Pharm. 233,119-125.
Ensaio de Nitrilo de Células RAW Células RAW 264,7 são colocadas para análise de confluência numa placa de cultura de tecido de 96-cavidades crescem durante uma noite (17 h) na presença de LPS para induzir NOS. Uma linha de 3-6 orifícios é deixada sem tratamento e é utilizada como controle para subtraeção de ruído de fundo não específico. O meio é removido de cada orifício e as células são lavadas duas vezes com Krebs-Ringers-Hepes (25 nM, pH 7,4) com 2 mg/mL de glucose. As células são em seguida colocadas em gelo e incubadas com 50 pL de tampão contendo +/- inibidores de L-arginina (30 pL) durante 1 h. O ensaio é iniciado por aquecimento da placa a 37 °C em banho de água durante 1 h. A produção de nitrito por iNOS intracelular varia linearmente com o tempo. Para terminar o ensaio celular, a placa de células é colocada em gelo e o tampão contendo-nitrilo é removido e feita a análise e nitritos utilizando o método de determinação de nitrilos por fluorescência préviamente publicado. Todos os valores são a média média de orifícios triplicados e são comparados com um conjuntos de células com subtraeção de ruído de fundo induzida (valor de 100%).
Os exemplos que se seguem foram testados com os seguintes resultados. -82- Número do hiNOS heNOS hncNOS Células % inibição exemplo ic50 IC5o IC5o RAWi- iNOS a 100 (μΜ) (μΜ) (μΜ) NOS IC50 μΜ 1 61 1990 898 300 2 * ld 35 4 33 2d 5 3B 12,3 8420 150 80 15A 9,3 2350 99,6 57,3 15B 187 6590 441 16B 76,8 5430 670 >100 3A 53,4 48 40,6 40A 32,6 49 19,4 40B 14,5 lOf 7,7 10 3,4 5 27 * Para doses de 100 μΜ, não se observa resposta, A partir da descrição anterior, um perito na arte pode facilmente verificar as caracteristicas essenciais desta invenção, e sem se afastar do seu espírito e objectivo, pode fazer várias alterações e modificações da invenção para a adaptar a várias utilizações e condições.
Lisboa, 27 de Outubro de 2000 LUÍS SILVA CARVALHO (
Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VÍCTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims (7)

  1. - 1 7 l/tM^ / REIVINDICAÇÕES 1. Composto ou um seu sal, pró-fármaco ou éster farmaceu ticamente aceitável: R4 N \
    A R3 NRtR2 em que Y é um radical Ci-C(o alquilo; X é um radical Cj-Cio alcileno, radical C2-Ci0 alcenileno, radical C2-Cio alcinileno, radical hidrocarboneto aromático, (CH2)mQ(CH2)n, em que m=l-3, n=l-3, e Q é enxofre, sulfinilo, sulfonilo ou oxigénio; C=0, radical C2-C10 alcinileno, radical hidrocarboneto aromático, radical hidrocarboneto alicíclico ou radicais heterocíclico em que 1 até 4 heteroátomos são independentemente seleccionados entre oxigénio, azoto ou enxofre, em que todos os referidos radicais são opcionalmente substituídos com hidrogénio, halogéneo e Q-Cio alquilo; R1, R2, R3 e R4 são independentemente seleccionados do grupo constituído por hidrogénio e CpCio alquilo; A é um radical Q-Cio alcileno opcionalmente substituído com hidrogénio, CrCi0 alquilo ou hidroxilo; -2- (/MJ B pode ser hidrogénio, hidroxilo, um radical CpC10 alquilo ou C(=0)0H.
  2. 2. Composto como referido na reivindicação 1, em que Y é um radical Ci-Cio alquilo; X é um radical C3-C5 alcileno; A é um radical C2-C4 alcileno opcionalmente substituído com hidroxilo; B é hidroxilo.
  3. 3. Composto como referido na reivindicação 1, em que Y é metilo; X é butileno; R1, R2, R3 e R4 são hidrogénio; A é etileno ou isopropileno opcionalmente substituído com hidroxilo e; B é hidroxilo.
  4. 4. Composto como descrito na reivindicação 1, em que o composto é seleccionado do grupo constituído por ácido 3S-amino-6-[(l-iminoetil)amino]heptanóico; N1 -(1 -iminoetil)-1,4-pentanodiamina; NI -(1 - -3- iminoetil)l,5-heptanodiamina; N-(5-aminononil)etammidamida; hidrato do cloridrato do ácido P-amino-4-[( 1 -iminoetil)amino]benzenopropanóico; cloridra-to do dihidrato de N-(5S-amino-6,7-dihidroxi-6-metilheptil)etanimidamida; cloridrato do hidrato de N-(5S-amino-6,7-dihidroxioctil)etanimidamida; ácido 4S-amino-2,3-dihidroxi-8-[( 1 -iminoetil)amino]octanóico; N-(5S-amino-6,7,8-trihidroxioctil)etanimidamida; N-(5S-amino-7,8-dihidroxioctil)etanimidamida; dicloridrato de dihidrato de N-(5S-amino-6-hidroxiheptil)etanimidamida; (A) ácido 3S-amino-2S-hidroxi-7-[(l-iminoetil)amino]heptanóico; (B) ácido 3S-amino-2R-hidroxi-7-[(l-iminoetil)amino]heptanóico; ácido 3-amino-4-[3-[(aminoiminometil)amino]fenil]butanóico; N-(5S-amino-6-hidroxihexil)etanimi-damida.
  5. 5. Composto como descrito na reivindicação 1, em que o composto é ácido 3S-amino-7-[(l-iminoetil)amino]heptanóico; dihidrato de N-(5S-amino-6,7-dihidroxiheptil)etanimidamida; e cloridrato do dihidrato de N-(5S-amino-6,7-dihidroxi-6-metil-heptil)etanimidamida.
  6. 6. Composição compreendendo um composto como descrito nas reivindicações 1 a 5 em conjunto com um veículo farmaceuticamente aceitável.
  7. 7. Utilização do composto como descrito nas reivindicações 1 a 5 para a preparação de um medicamento para inibir a síntese de óxido nítrico num paciente que necessite de tal inibição. Lisboa, 27 de Outubro de 2000
    Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA
PT95913969T 1994-03-10 1995-03-08 Derivados de l-n6-(1-iminoetil)lisina uteis como inibidores de oxido nitrico sintetase PT749418E (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US20909494A 1994-03-10 1994-03-10

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT749418E true PT749418E (pt) 2001-01-31

Family

ID=22777311

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT95913969T PT749418E (pt) 1994-03-10 1995-03-08 Derivados de l-n6-(1-iminoetil)lisina uteis como inibidores de oxido nitrico sintetase

Country Status (9)

Country Link
US (1) US6143790A (pt)
EP (1) EP0749418B1 (pt)
AT (1) ATE195933T1 (pt)
AU (1) AU2115695A (pt)
DE (1) DE69518631T2 (pt)
ES (1) ES2151055T3 (pt)
GR (1) GR3034576T3 (pt)
PT (1) PT749418E (pt)
WO (1) WO1995024382A1 (pt)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5981511A (en) * 1996-03-06 1999-11-09 G.D. Searle & Co. Hydroxyamidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
US5945408A (en) * 1996-03-06 1999-08-31 G.D. Searle & Co. Hydroxyanidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
WO1997046515A1 (fr) * 1996-06-04 1997-12-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Benzenes substitues ne presentant pas d'effets inhibiteurs
CA2272941A1 (en) * 1997-01-09 1998-07-16 Daniela Salvemini Attenuation of opioid tolerance by inhibiting inducible nitric oxide synthase pathways in the treatment of pain
GB9723407D0 (en) 1997-11-05 1998-01-07 Ciba Geigy Ag Organic compounds
US6552052B2 (en) 1998-06-10 2003-04-22 Monsanto/G.D. Searle Pyrrolo[2,1-c][1,2,4] thiadiazoles and Pyrollo[2,1-c][1,12,4]oxadiazoles useful as nitric oxide synthase inhibitors
WO2000026195A1 (en) * 1998-10-30 2000-05-11 G.D. Searle & Co. Novel amino acid heterocyclic amide derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
WO2000044731A1 (en) * 1999-01-27 2000-08-03 G.D. Searle & Co. Novel hydroxyamidino carboxylate derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
CA2360740A1 (en) 1999-03-02 2000-09-08 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as reversible inhibitors of cathepsin s
DK1178958T3 (da) 1999-03-15 2004-06-21 Axys Pharm Inc N-cyanomethylamider som proteaseinhibitorer
US6420364B1 (en) 1999-09-13 2002-07-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
GB0003111D0 (en) 2000-02-10 2000-03-29 Novartis Ag Organic compounds
AR032318A1 (es) * 2000-04-13 2003-11-05 Pharmacia Corp Compuesto derivado halogenado del acido 2-amino-5,6 heptenoico; composicion farmaceutica que lo comprende y su uso en la fabricacion de un medicamento util como inhibidor de la oxido nitrico sintetasa
AR034120A1 (es) * 2000-04-13 2004-02-04 Pharmacia Corp Compuesto derivado halogenado del acido 2-amino-4,5 heptenoico, composicion farmaceutica que lo comprende y el uso de dicho compuesto y dicha composicion en la fabricacion de un medicamento para inhibir o modular la sintesis de acido nitrico
US7030116B2 (en) 2000-12-22 2006-04-18 Aventis Pharmaceuticals Inc. Compounds and compositions as cathepsin inhibitors
EP1383748A2 (en) 2000-12-22 2004-01-28 Axys Pharmaceuticals, Inc. Novel compounds and compositions as cathepsin inhibitors
US7012098B2 (en) 2001-03-23 2006-03-14 Pharmacia Corporation Inhibitors of inducible nitric oxide synthase for chemoprevention and treatment of cancers
JP4109123B2 (ja) * 2001-05-09 2008-07-02 セルメド オンコロジー （ユーエスエイ）， インコーポレイテッド ペプチドデホルミラーゼ活性化プロドラッグ
JP2005504078A (ja) 2001-09-14 2005-02-10 アベンティス・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテツド カテプシン阻害剤としての新規化合物および組成物
EP1446392A1 (en) 2001-11-14 2004-08-18 Aventis Pharmaceuticals, Inc. Oligopeptides and compositions containing them as cathepsin s inhibitors
CN1662238A (zh) * 2002-04-18 2005-08-31 塞米得肿瘤学美国公司 肽去甲酰酶活化的前体药物
WO2004043400A2 (en) * 2002-11-14 2004-05-27 Celmed Oncology (Usa), Inc. Peptide deformylase activated prodrugs
US20080260861A1 (en) * 2004-04-07 2008-10-23 The General Hospital Corporation Modulating Lymphatic Function
JP6367204B2 (ja) * 2012-10-12 2018-08-01 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ 結合用のピロロベンゾジアゼピン誘導体の合成および中間体
CN116217440A (zh) * 2022-12-30 2023-06-06 浙江永太手心医药科技有限公司 一种西他列汀关键中间体的制备方法

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB972888A (en) * 1961-11-23 1964-10-21 Farmaceutici Italia New 2-amino-(mono- or di-substituted)-ethyl-guanidines
US3202710A (en) * 1962-12-06 1965-08-24 Rexall Drug Chemical 1-(2-cycloalkyl-2-dilower alkylamino-ethyl) guanidines
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
US5196450A (en) * 1985-12-19 1993-03-23 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting protozoal growth
IT1219846B (it) * 1988-02-24 1990-05-24 Consiglio Nazionale Ricerche Nuovi derivati guandinici ad attivita' ipotensia,composizione che li contengono e relativo procedimento di estrazione e purificazione da materiale botanico
ZA898440B (en) * 1988-11-10 1990-07-25 Merrell Dow Pharma Lactamimides in the treatment of drug-resistant protozoal infections
JPH0778038B2 (ja) * 1989-01-18 1995-08-23 日東紡績株式会社 Ｌ―アルギニナールジ低級アルキルアセタールの製造法
US5059712A (en) * 1989-09-13 1991-10-22 Cornell Research Foundation, Inc. Isolating aminoarginine and use to block nitric oxide formation in body
US5028627A (en) * 1989-09-13 1991-07-02 Cornell Research Foundation, Inc. Method of using arginine derivatives to inhibit systemic hypotension associated with nitric oxide production or endothelial derived relaxing factor
GB8929076D0 (en) * 1989-12-22 1990-02-28 Scras Treatment of shock by blocking agents of edrf effect or formation
CA2036770C (en) * 1990-02-26 2003-09-09 Jeffrey P. Whitten Inhibitors of nitric oxide biosynthesis
US5132453A (en) * 1991-03-22 1992-07-21 Cornell Research Foundation, Inc. N6 -(hydrazinoiminomethyl)lysine and method of inhibiting nitric oxide formation in body
US5273875A (en) * 1991-03-22 1993-12-28 Cornell Research Foundation, Inc. N6 -(hydrazinoiminomethyl)lysine and method of inhibiting nitric oxide formation in body
GB9127376D0 (en) * 1991-12-24 1992-02-19 Wellcome Found Amidino derivatives
US5296466A (en) * 1992-02-19 1994-03-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibition of nitric oxide-mediated hypotension and septic shock with iron-containing hemoprotein
US5281627A (en) * 1992-05-28 1994-01-25 Cornell Research Foundation, Inc. Substituted arginines and substituted homoarginines and use thereof
WO1994014780A1 (en) * 1992-12-18 1994-07-07 The Wellcome Foundation Limited Pyrimidine, pyridine, pteridinone and indazole derivatives as enzyme inhibitors
GB9312761D0 (en) * 1993-06-21 1993-08-04 Wellcome Found Amino acid derivatives
US5424447A (en) * 1993-07-07 1995-06-13 The Medical College Of Wisconsin Research Foundation, Inc. Heme binding compounds and use thereof
US5821267A (en) * 1993-10-21 1998-10-13 G.D. Searle & Co. Amidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
US5364881A (en) * 1993-11-15 1994-11-15 The Medical College Of Wisconsin Research Foundation, Inc. S-alkyl-isothioureido-amino acids and use thereof
US5362744A (en) * 1993-11-22 1994-11-08 Warner-Lambert Company Tetrazole-substituted urea acat inhibitors
EP0776886A4 (en) * 1994-08-18 1999-05-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd AMINO ACID DERIVATIVE WITH NITROGEN MONOXIDE SYNTHETASE INHIBITING ACTIVITY

Also Published As

Publication number Publication date
DE69518631T2 (de) 2001-01-11
ATE195933T1 (de) 2000-09-15
EP0749418A1 (en) 1996-12-27
AU2115695A (en) 1995-09-25
DE69518631D1 (de) 2000-10-05
EP0749418B1 (en) 2000-08-30
GR3034576T3 (en) 2001-01-31
ES2151055T3 (es) 2000-12-16
WO1995024382A1 (en) 1995-09-14
US6143790A (en) 2000-11-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PT749418E (pt) Derivados de l-n6-(1-iminoetil)lisina uteis como inibidores de oxido nitrico sintetase
EP0445796B1 (de) Peptidbindungen enthaltende Essigsäurederivate
CA2817784C (en) Method of treating contrast-induced nephropathy
DK171888B1 (da) Benzoe- og phenyleddikesyreamidderivater, farmaceutiske præparater indeholdende forbindelserne, anvendelse af forbindelserne, samt mellemprodukter
US7166590B2 (en) Amino acid derivatives
US5273982A (en) Acetic acid derivatives
EP0821674B1 (en) Cyclic amidino agents useful as nitric oxide synthase inhibitors
US6344483B1 (en) Halogenated amidino amino acid deviratives useful as nitric oxide synthase inhibitors
CZ298080B6 (cs) Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem
JP2000515493A (ja) パラ―置換フェニレン誘導体
EP0885188B1 (en) Hydroxyamidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
AU2004260830A1 (en) Nitrooxy derivatives of losartan, valsatan, candesartan, telmisartan, eprosartan and olmesartan as angiotensin-II receptor blockers for the treatment of cardiovascular diseases
PT790987E (pt) Derivados de aminoterazole uteis como inibidores da sintase do oxido nitrico
AU759488B2 (en) Amino acid derivatives and drugs containing the same as the active ingredient
US6207708B1 (en) Hydroxyamidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
WO1997032844A9 (en) Hydroxyamidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
EP0824523A1 (en) Nitric oxide synthase inhibitors derived from cyclic amidines
CA2297166A1 (en) 1,3-diaza- heterocycles and their use as nitric oxide synthase inhibitors
US6576780B1 (en) Hydroxyamidino derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
CA2184691C (en) L-n6-(1-iminoethyl)lysine derivatives useful as nitric oxide synthase inhibitors
WO1998022443A1 (fr) Derives de n-(imidazolylbutyle) benzenesulfonamide ayant une activite antithrombotique
WO1998042700A1 (fr) Derives de n-(arginyl)benzenesulfonamide et leur utilisation comme agents antithrombotiques
FR2765220A1 (fr) Derives de 1-oxo-2-(phenylsulfonyl)aminopentyle, leur preparation et leur application en therapeutique
AU2004200091A1 (en) Nitrosated and nitrosylated nonsteroidal antiinflammatory compounds, compositions and methods of use