PT85463B - Processo para a producao de antibioticos de eter policiclico - Google Patents

Description

PROCaXO IAuà ík PRODUÇÃO Da À‘u7I->IC/1003 DA pOLICIO^I00” ou de u. seu sal catiónico farmacêuticamente aceitável. C antibiótico e os seus sais catiónicos são activos contra uma variedade de microorganismos e são eficazes no controlo da coccidiose, enterite e desinteria suína, bem como na promoção do crescimento e/ou melhoramento da eficiência da utili zação de rações en suinos e ruminantes.

processo de preparação consiste em se proceder à hidrólise controlada de um compoato de fórmula II

e, se necessário, à conversão sal catiónico farmaceuticamente da forma ácido livro num seu aceitável.

/díHBXÕflOC Jh

õ presente invento diz respeito a um novo membro do grupo de antibióticos do éter policiclico acldico, uma classe de compostos caracterizada biológicanente pelo seu efeito no transporte de catiSes através das membranas das células· iista família de antibióticos inclui agentes bem conhecidos tal como monensina, nigericina, prisorixina, dianemicina, mecluramicina, narasina, salinomicina, lasalocida, mutalomicina, ionomicina, e leuseramicina. 0 assunto foi -avisto por uestley, ”lOlyether Antibioties”, Adv. Appl. xxicrobiol.· 22, 177, 1977·

Os antibióticos de éter policiclico listaios acima são aetivos contra bactérias de Gram-positivo, fungos e protozoários, lim particular estes antibióticos exibem potente actividade anti-cocidial. Ales têm portanto sido empregados com vários graus de sucesso no tratamento de uma variedade de infecçÕes animais.

A bem conhecida doença protozoária, cocidiose, continua a ser um problema sério, e o seu control é de importância económica para a ciência ceterinária, especialmente para a indústria dos aviários. A cocidiose é provocada pela infecção de uma ou mai espécies de dirieria ou Isospora (para um resumo ver, lund and i'arr em Diseases of Poultry”, 5thed·, Biester and óchwarte, Ads», lowa Ãtate University Press, Ames, Ta·, 1965, PP· 1056-1096). Ha seis espécies de cocidia as quais produzem morbidade fácilmente discernlvel em galinhas susceptlveis· Gimeria tenella. E. necatrix, A. brunetti· H. acervulina. maxima e

E, mivati produzem dano quer directamente através da destrui ç*o de células epiteliais do aparelho digestivo ou iniirectamente através da produção de toxinas. Três outras espécies de protozoários pertencentes ao raesuo género são consideradas como sendo relativanente inócuas; no entanto, E. nitis E. hagani e E. praecox são capazes de reduzir o ganho de peso, baixando a eficiência da alimentação e afetando adversamente a produção de ovos.

Devido às grandes perdas económicas provocadas pela cocidiose, a investigação de novos agentes anti-cocidiais continua.

i enterite ó outra doença que pode provocar perdas económicas severas aos produtores de animais. A enterite ocorre em galinhas, porcos, vacas e ovelhas e ó atribuída principalmente a bactérias anaeróbicas, particularmente Clostridium perfringens. e vírus. A enterotoxemia em vuminantes, um exemplo da qual e a doença de sobre reacçâb era ovelhas, é uma condição originada por infecção (3. per1ringens.

A desinteria nos suínos g una das mais comuns dienças nestes animais diagnosticada, nos Estados Unidos. Aiicionalmente a doença é prevalento em muitos outros países e ic ;.siona anualmente perdas consideráveis era ani mais aos criadores de suínos em todo o bundo. ?oi recentemen te descoberto que uma grande espiroqueta e o organ/srao causador da doença. Este organismo, freponema hyodysenteriae. foi agora isolado e mostra ser capaz de produzir a doença /T^arris, D.L. et al. -awine Dy.;entery-1, Inoculation of Pigs wish Treponema hyodysonteriae (new species) and Iteproduc tion of the Disease”, Vet. med/AAU. 37. 61-34, 1972J7.

Os dados de teste recitados a seguir dizem respeito a testes efectuados com este organismo· Deve notar-se que não se sabe se a T. hyodysenteriae è o único organismo causador ia desinteria dos suinos. A partir dos dados disponíveis”, no entanto, podemos concluir que é uma fonte primaria da infecção.

Axelhoranento do comportamento (ritmo de crescimento aumentado e/ou au ento da eficiência da utilização da alimentação en ruminantes tal como vacas, e em animais monogástricos tal como suinos, ê outro objectivo economicamente desejável da ciência veterinária. De particular interesse á o comporta-.ento melhorado conseguido pelo aumento da eficiência ia utilização da aliment ..ção· O mecanismo para utilização da porção nutritiva principal das rações para os ruminantes é bem conhecido.

Os nicroorpanisuos no númer.O do animal degradam os carbohi ..ratos para produzir nonosacarideos e a seguir convertem estes monosucarideos em compostos piruvato. Os piruvatos são metabolisados por processos microbiologicos para formar acetatos, butiratos ou propionatos, colec tivamente conhecidos como ácidos gordos voláteis. Iara uma discussão mais detalhada, ver Leng em lliysiRlopy of Di.?;estion and hetabolism in the Ruminant, dhillipson et al.» tíds., Oriel Press. Newcustle-upon-íyne, Jinpland, 1970, pp· 408-410.

A eficiência .relativa da utilização de ácidos gordos voláteis é discutida por hc Uullough em “Feedstuffs”, June 19, 1971, página 19í Eskeland et al·, in J. An. Sei» 33. 282, 1971; e Church et al., em

Digestive Physiology and Kutrition of suminants”, 7ol.2,

1971, PP· Ô22 e 625* Embora os acetatos e butiratos sejam utilizados os propionatos são utilizados co cia. Alem disso, quando há pouco propionato disponível, os animais podem desenvolver cetosis. Um composto benéfico, portanto, estimula os animais a produzir uma maior proporção de propionatos a partir do carbohilratos, to a eficiência de utilização do carbohidra zem a incidência da cetosis.

aumentando portanto e também re.iu0 premente invento diz respeito a uri novo antibiótico de óter policiclico acídico· divulra a _: antibiótico de eter poliacídico acíaico designado por UK-58852 tendo a fóriiula

•1 caracterizada pelo facto de R e R serem ambos Η, o iual e produzido pela propagação acróbica submersa em meio nutriente a_tuoso do nicroorpauicL-.o. Actinomadura roseorufa Huanr sp nov_M ATCC 59697 isolada a partir de uma amostra de solo do Japão. Observari-se agora que a hidróli-se de (JK-53852> sob condições cuidadosa, lente controladas conduz à clivagem de um dos anéis glicona ligados para produzir um novo cop;osto é tot Irnente eficaz como u ’ espectro amplo anti-cocidial e o qual tem vantagens sobre o composto UK-.5B 852 por causa do seu perfil de toxicidade melhorada.

Assim de acordo com o presente invento fornece-se un composto designado por UK-61639 de fórmula:

catiónicos farracênticamente acoitáveis· .Exemplos de tais sais são sódio q potássio·

Tacibém le acordo com o presente invento fornecem-se processos para a preparação do antibiótico UK-61689 ou um seu sal catiónico o qual compreende a hidrólise controlada do composto 'UK-53352 ou um seu sal catiónico.

k hidrólise de UK-58 >52 ê de preferência efectuada usando ácido para-tolueno sulfónico mm. solvente acetonitrilo/árua·

A composição preferida acetonitrilo/ água contem entre 5 e O,5A de á-jua· De preferência usa-se uma rei ção de 1,1 equivalentes molar de ácido para-tolueno sulfónico para um equivalente do sal de sódio de UK 58 852·

Outros sistemas solvente que podem ser usados incluem acetonitrilo simples ou t-butanol/ápua ou acetona/água. 'eidos alternativos incluem ácidos minerais tal como ácido clorídrico, ácido acético ou uma resina de

ácido forte. Geraluente a reacção e efoctuada à te/.peratura ambiente e e vigiada por cromatografia de camada fina até o rendimento do produto ae-ejado parecer ser *oetimo. 0 tempo de reacção é geralmente de cerca de uma a três horas para o ácido para-tolueno sulfonico num sistema de hidrólise acetonitrilo/água mas variará dependendo do ácido e sistema solvente usado· Após a reacção se ter tornado substancialmente completa, a mistura roavente $ neutralizada cor- excesso de bicarbonato de sódio, concentrada e extraída com éter dietílico ou diclorometano e a seguir purificada usando técnicas pairão de cromatografia sobre sílica gel· 0 produto final pode a seguir ser recristalisado na forma de ácido livre ou sal catiónico apropriado.

Álternativamente, o Antibiótico UK-61689 pode ser gerado a partir de sxtractos de fermentação em bruto contendo UK-53852. Assim, um extracto de fermentação de metil isobutilcetona (AIEK) e concentrado e preferível vente dissolvido em acetonitrilo/água e tratado com acido para-tolueno sulfonico·

A co.¹.posição preferida àe acetonitrilo e água contem 5% do água, e a relação de óleo ie fermentação em bruto e ácido para-tolueno sulfonico é cerca de 9:1;

estes cocientes são aproximuios podem variar de acordo com a composição do extrseto de fermentação. Outros sistemas sol ventes que podem ser usados incluem metanol/água, mas a hidrólise pode também ser efectuada por tratamento do extracto rllBK em bruto com ácido para-tolueno sulfonico na ausência de solvente adiciona .lo· ácidos alternativos incluem ácidos minerais tal como ácido clorídrico.

antibiótico UK-61 639 exibe acção inibidora contra o crescimento de um número de microorganismos de Gram-positivo na Tabela I, a seguir, os resultados dos testes in vitro são resumidos· rara este teste, cada organismo e inoculado numa sére de tubos de ensaio contendo

- 9 meio nutriente e concentrações variáveis le Antitiotico UZ-61589 para d ;terninar a concentração minima do composto em jAg/ml o que inibe o crescimento lo organismo durante um período de 24 horas (iIC).

	I
AJflVli	.η.ώ hh J13. tiy.Amíxjahi.
Organismo v	'arielaie A 9	mIO >Wml
Olostridium perfringens	1OA006	25
	107x009	5.12
Ãctinomyces pyogenes	14J0C2	0.59
	140008	0.39
	14JO11	0.39
Treponema hyodysenteriae	94À001	6.25
	94À002	5.25
	94A007	5.12
	94A008	3.12
0	s dados da eficiência	do Antibiótico
UK-61689 e seus sais contra infecções cocidial	eu galinhas,
foram obtidos da maneira	seguinte: grupos de	3-5 frangos le-

ghorn cockerel brancos sem patogéneo com dez dias de idade foram alimentados com uma dieta de fanelada contendo Antibiótico UK-61639 ou o seu sal -le sódio e/ou potássio nela uniformemente disperso» Após estar nesta ração -durante 24 horas cada frango foi inoculado per os com oocistos -las espécies particulares da Eimeria a ser testada.

- 10 Gutroa grupos de 5-5 frangos com dez dias de idade foram alimentados com ui;.a dieta de fanelada análoga sem Antibiótico UK-31639 ou seus sais. Eles foram também infectados após 24 horas e serviram como infectados de control· Ainda outro grupo de 5-5 frangos com dez dias de idade foram alimentados com a mesma dieta de farelada sem Antibiótico UK-61689 e não foram infectados com coccidia. Estes serviram como de control normal· Os resultados do tratamento foram avaliados após cinco dias no caso de acervuli na, e seis dias para todos, os outros desafios· critério us do para nedir a actividade anticoccidial consistiu em marcas de lesões de 0 a 4 para E.tenella segundo J.E· lynch, _Λ Lew *-ethod for the 1-rim.ary Evaluation of Anticoccidial Activity, Am. J. Vet. des.< 22, 524-326, 1961; e 0 a 5 para as outras espécies com base na modificação do sistema de marcação inventado por J. Johnson e W.H. Eeid, ‘'Anticoccidial drugs. Lession Ecoring Techiniques in Baterry and Eloor íen Experiments in cluicks, Exp. Parasit., 23, JO-56, 197°· Numa relação constante foi estabelecida por divisão da mancha de lesão de cada grupo tratado pela mancha de lesão do control infectado·

Observou-se que o Antibiótico UK-61689 e os seus sais catiónicos exibem actividade elementar contra infecções coccidiais na criação· Quando incorporado na dieta das galinhas em níveis de 15 a 120 ppm, estes compostos são eficazes no control de infecções devido a Eimeria tenella, £· acervalina, E· maxima, E. brunetti e £. ne catrix, valor das rações animais tem sido geralmente determinado através de alimentação directa do animal. A especificação da patente Britânica Π2 1197325 detalha uma técnica rumen in vitro onde as mudanças que ocorrem na

- 11 alimentação ocasionadas jjor nicroorganisaos são medidas mais rapidamente e com grande precisão na avaliação das rações animais, Esta técnica envolve o uso do um aparelho no qual os processos digestivos dos animais são conduzidos e estudados in vitro. As rações dos animais, inoculum rumen e vários promotores de crescimento são introduzidos em e retirados de uma unidade laboratorial sob condições cuidadosamante controladas e as mudanças que tomam lugar são criticamente e progressivamente estudadas durante o consumo da ração pelos microorganismos. Um aumento no teor de ãcido propiónico do fluido do rumen indica que numa resposta desejável no comportamento ruminante global foi cons guida pelo crescimento do promotor na composição da ração. A variação no teor de ácido propiónico e expressa como una percentagem do teor de ácido propiónico observado no fluido rumen de control. Os e tudos de alimentação in vivo de longo prazo são usados para mostrar uma correlação de confiança entre o aumento de ácido proriónicc no fluido ruminador e a melhoria de comportamento do animal.

flui.do ruminacLor é recolhido a partir de uma vaca fistulada a qual & alimentada com una ração de engorda comercial mais feno. 0 fluido ruminador e imediatamente filtrado através de pano de queijo» e juntamos 10 ml a uia frasco cónico de 50 ml contendo 400 mg de substrato padrão (68% do amido de milho +17% de celulose +15% de farinha de extracto de soja), 10 ml de um tampão de pII6,8 e o compos; to de teste.

Os frascos são gasificados com oxigénio sem azoto durante cerca de dois minutos, e incubados num banho de água agitada a durante cerca de 16 horas. Todos os testes são efectuados eu triplicado.

i

Apôs incubação, ρ κΐ da amostra são misturados com 1 ml de ácido metafosfórico a 25%· Apôs 10 minutos juntamos 0,25 al de ácido fôrnico e a mistura é contrifugada a 1500 rpm durante 10 minutos· As amostras foram a seguir analisadas por cromatografia gás-líquido pelo método de ΰ·0. Kellog, J. Dairy ocience. 52. 1690, 1959· As alturas dos picos para os ácidos acético, propiônico e butirico são determinados para as amostras a partir de frascos de incubação tratados e não tratados· guando tostado por este processo in vitro, o Antibiótico XJK-51639 com. o nível de 20 microgramas por mililitro origina um ausento do cerca de 80% na prosução de ácido propiônico sobre o produzido na solução de control sem Anti/.iôtico b7-61689 adicionado· Os compostos que estimulam a produção de iWA (ácido rumen propiônico) são conhecidos por melhorarem a utilização da ração por ruminantes tal como vacas e ovelhas, e podem também ter um efeito similar sobre animais monogástricos como porcos· 0 Antibiótico UK-61639 pode ser administrado ao aniual por incorporação nas coí posições das rações, quer na forma de ácido livre ou eomo num sal, e.g·, o sal de sódio ou potássio, ou uma sua mistura.

Alternativamente, numa forma em bruto ou um líquido de fermentação seco contendo o antibiótico UK-61689 pode ser incorporado bem na composição da ração com as concentrações de potência desejadas. 0 antibiótico UK-61689 pode também ser administrado com. a dosagem desejada usando um meio de libertação sustida apropriado, projectado para medir níveis de droga constantes· fara uso no tratamento de coccidioses na criação o cosiposto de te invento é administrado oralmente num suporte apropriado. Gonvenientemonte, a medicação é

simplesmente efectuada na água de beber ou na ração dos frangos, de tal modo que a dosagem terapêutica do agente e ingerida com a água diária ou a ração dos frangos· agente podo ser directamente medido na água de beber, de preferência na forma de um líquido concentrado solúvel em agua (tal como solução aquosa de um sal solúvel em água) ou adicionado directamente à ração, tal qual, ou na forma de um x^renix ou concentrado· Um prenix ou concentrado de agente terapêutico num suporte é vulgarmente empregado para a inclusão do agente na ração· Suportes apropriados são líquidos ou sólidos, conforme desejado, tal como água, e várias farinhas5 por exemplo, farinha do óleo de soja, farinha de óleo de linhaça, farinha de carolo de milho, e misturas de minerais tal qual são vulgarmente empregadas nas rações da criação·

Um suporte particularmente eficaz e a proopria ração dos frangos; isto é, uma pequena porção da ração dos frangos, 0 suporte facilita a distribuição uniforme dos materiais activos, na ração acabada com a qual 0 nremix se mistura· Isto ê importante porque somente pequenas proporções dos presente potentes agentes são necessários·

Ê importante que 0 CO;..posto seja vigores mente agitado no premix e, subsequentemente, na ração, Neste aspecto, o agente pode ser disperso ou dissolvido num veiculo oleoso apropriado tal como óleo do soja, óleo de milho, óleo de semente de algodão, e análogos, ou nui¹ solvente orgânco volátil e a seguir misturado com o suporte. Será apreciado, que as proporções do material activo no concentrado sejam capazes de uma grande variação uma vez que a quantidade do agente na ração acabada pode ser ajustada por mistura da proporção apropriada de peraix com a ração i?ara obtermos 0 nível desejado de agente terapêutico·

Concentrados de potência elevada podem ser misturados pelo fabricante das rações com suporte proteináceo tal coso farinha do óleo de soja ou outras farinhas, como acima descrito, para produzir suplementos concentrados os quais são apropriados para alise.-.-t ação directa da criação. Nalguns casos, a criação 5 permitido consumir a dieta usual. Alternativamente, tais suplementos concentrados podem ser adicionados iirectaaiente â ração da criação para produzir uma ração acabada, nutrieionalmente balanceada, contendo um nível terapêuticamente cfectivo do composto deste invento. As misturas sao vigorosariente agitadas por processos padrão, tal como num misturador gémeo de casca, para assegurar homogeneidade·

Será, claro está, óbvio para os especialistas da arte que o uso de níveis do eosiposto descritos aqui variará sob circun tâncias diferentes· A medicação continua de baixo teor, durante o período de crescimento, isto e, durante as primeiras 6 a 12 semanas para as galinhas, e uma medida profiláctica eficaz· No tratamento de infecçÕes ostabalecidas, níveis maiores podem sor necessários para combater a infecção· 0 nível de uso na alimentação será geralrente na gama de 15 a 120 ppm. Quando administrado na água de beber, o nível que provocará a mesma dose diária de medicação, i.e. 15 a 120 ppm, miltiplieada pela relação ponderai entre consumo nédio diário de ração s o consumo médio diá rio de água.

presente invento é ilustrado pelos exemplos seguintes, no entanto, deverá compreender-se que o invento não está licitado aos detalhes específicos destes exemplos.

A usa solução cie 15,0 S (0,0147 moles) de antibiótico puro UE-58 352 (preparado como descrito na 3PA 0169011) em acetoni trilo/água (95 í5) (400 nl) juntamos 5,0? g (0,0161 moles) de ácido p-toluenosulfónico· A reacção foi viji ada por crontagrafia de camada fina ate o rendimento do produto desejado parecer ser óptimo (cerca de 3 horas). A mistura reagente foi tratada com excesso de bicarbonato de sódio sólido ou aquoso, e concentrada à secura sob vácuo. 0 sólido resultante foi dissolvido en éter dietllico e lavado com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, as lavagens de bicarbonato foraia extraídas com éter dietllico e juntamos todas as camadas etéreas o lavaram-se sucessivamente com água e cloreto de sódio saturado. A solução etérea foi soca sob sulfato de sódio anidro e evaporada à secura sob vácuo. 0 jzroduto dLe reacção em bruto resultante continha UE-61689 como produto predominante, mas foi contaminado com quantidades variáveis de do material de partida OK-53 852, e outros sub-produtos· 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia sobre sílica gel, seguida por reoristalisação a partir de éter, isopropilico para obtermos 4,2 g de

UK-61639 na forma do seJ	de sod	io, n.p	. 175-17520i zpçp’ -
+19,32	(0 * G,5%Í HeOH)	5 0-13	liEii (03	31,): 179,15 PPU,
107,45	, 10J.18	, 97.74,	96*96	, 86*92	, 84 *60	, 34.2C
82.27,	82.01,	80*88,	80.2G,	79.86,	74.80,	74.55,	73.07,
70.06,	67.7I,	66.89,	59*11,	5'0*81,	45.40,	39.82,	38.93,
36 *46,	33*81,	33.71,	33·54,	33.42,	33*13,	32.44,	32.26,
30*56,	27·58,	26.90,	26.34,	1 T £Ζ.\λ · ΧΛ 9	23.23,	13.40,	17.53,
16.99,	12.13,	11*04,	10.42,«

Uh extrato lo fermentação em bruto (HIBK) (1 1.) contendo 0 antibiótico UK-58852 (estimadas 25β) foi concentrado sob vácuo a 630g. 0 óloo escuro espesso foi adicionado a acetonitrilo/água (95*5) (5,6 1·), θ a emulsão leitosa resultante .foi tratada co;.· ácido p-toluenosulfónico (78,2g) numa porção· Coei o prosseguir da reacção, a emulsão gradualnente separou-se em duas camadas distintas as quais fo ram vigoros..-mente agitadas durante um total de 1,25 horas· A mistura reagente foi deitada num funil separado, e a camada oleosa do fundo foi removida e empapada com mais acetonitrilo/água (95:?)· Juntamos as camadas de acetonitrilo/água e tratamos com bicarbonato de sódio aquoso saturado (400 ml)·

A mistura foi a s-eguir concentrada até um xarope espesso sob vácuo, dissolvida en éter dietllico/acetato de etil (5:1) (2 1.) e lavada con bicarbonato de sódio aquoso saturado· A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e concentrada ate uri óleo castanho espesso (4,. 2 g)·

Λ purificação foi mais convonientenente conseguida usando técnicas de extracção ea contra-corrente· A extracção empregou lioxano: acetato de etil(l:l) como a fase não polar e motanolíágua (5:2) como a fase aquosa polar. A evaporação dos extractos orgânicos originou um sesi-sólido 0 qual foi dig •rido con * ter isopropilico para obtermos UK-61689 na forna de sal de sódio, 10 g, m.p· 169-17020. liste material era idêntico ao composto Au-61$39 produzido pelo método do Exemplo 1, por comparações SLC e ÍIE2.

Claims (9)

1. ia. - Processo para produção de um antibiótico de fórmula ou de um seu sal catiónico farinaeeuti comente aceitável, caracterizado por se efectuar a hidrólise controlada de um composto de fórmula e se necessário a conversão da forma ácido livre num. seu sal catiónico farmaceuticamente aceitável·
2. 2^. - Processo de acordo com a reivin dicação 1, caracterizado pelo facto da hidrólise sor efectua da usando ácido para-tolueno-sulfónico nu:a solvente acetonitrilo/água.

   5a. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto da composição acetonibrilo/água conter entre 5 ® 0,5% de água·
3. 4&. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores caracterizado pelo facto de se usarem 1,1 equivalentes molares de ácido para-tolueno-sulfónico para um equivalente do sal de sódio do composto de fórmula II.
4. 5&. - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo facto do antibiótico assim produzido ser misturado com uma alimentação de nutrição animal.
5. 6Λ. - Processo para a preparação de uma composição nutriente para alimentação de vacas ou porcos, caracterizado pelo facto de se incluir na referida alimentação um antibiótico obtido de acordo com a reivindicação 1, numa quantidade eficaz para promover o crescimento e/ou melhorar a utilização da alimentação das referidas vacas ou suínos.
6. 7· - método para promoção de crescimento e/ou aumento da eficiência da utilização da alimentação em porcos ou vacas, caracterizado pelo facto de compreender a administração aos referidos porcos ou vacas de um promotor de crescimento ou de uma quantidade, promotora da eficiência *«· i le utilização da alimentação, de um antibiótico de acordo com a reivindicação 1, estando a gana de dosagem do antibiótico situada entre 15 e 120 ppm relativamente ao peso da alimentação ·
7. 8&· - método de acordo com a reivindicação 7» caracterizado pelo facto do referido antibiótico ser administrado aos referidos porcos ou vacas por adição do referido antibiótico à alimentação ingerida por porcos ou vacas·
8. 9&· - Processo para a preparação de una composição nutriente para alimentação destinada a aves de capoeira caracteizalo pelo facto de se incluir na referida alimentação, um composto antibiótico obtido de acordo com a i’oivindicação 1, numa quantidade eficaz para o controlo de infecções coccídicas nas referidas aves de capoeira·
9. 10è·· - EétocLo para controlar infecções cocc*dicas em aves de capoeira, caracterizado pelo facto de compreender a administração às r-eferidas aves de capoei. ra de uma quantidade anti-coccidicamente eficaz de um composto antibiótico de acordo com a reivindicação 1, estando a gama do dosagem do antibiótico situada entre 15 e 120 ppm relativamente ao peso da alimentação· í« i

   - 20 Ιΐδ. - iiétodo de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo facto do referido antibiótico ser administrado às referidas aves de capoeira por adição do referido antibiótico à alimentação ingerida pelas aves de capoeira·

   Lisboa, 50 de Julho de 1987