FI86188B - Foerfarande foer framstaellning av ett polycykliskt eterantibiotikum som kan anvaendas saosom laekemedel. - Google Patents

Description

1 86188

Menetelmä lääkeaineena käyttökelpoisen polysyklisen eette-riantibiootin valmistamiseksi

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uuden lää-5 keaineena käyttökelpoisen antibiootin valmistamiseksi. Tämä antibiootti kuuluu polysyklisten eetteriantibioottien ryhmään, jonka yndisteille on biologisesti luonteenomaista, että ne vaikuttavat kationinsiirtoon solumembraanien välillä. Tähän antibioottien ryhmään kuuluu hyvin tunnet-10 tuja aineita, kuten monensiini, nigerisiini, grisoriksii-ni, dianemysiini, meduramysiini, narasiini, salinomysiini, lasalosiidi, mutalomysiini, ionomysiini ja leuseramysiini. Aihetta on käsitelty julkaisussa Westley, "Polyether Antibiotics", Adv. Appi. Microbiol., 22, 177, 1977.

15 Tämän keksinnön kohteena on menetelmä uuden poly syklisen eetteriantibiootin valmistamiseksi, jolla on kaava: OCH^j 20 PH OH Λθ CH3 ch3 0 _ CH^

> / / V—1 \—r»'Mi CH

I OH H * H °"i KjM ; ο'ϊ, 1 °A 25 COOH CH3· CH3 H CH3 H H H OH

/ ---(I) tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän kationisuolan valmistamiseksi. Kaavan I mukaista yhdistettä ja sen suoloja 30 valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että hydrolysoidaan yhdiste, jolla on kaava: 2 86188 (^'''Vun'OCH, λα, ' rt”00"3 o ' OH 3 rSo/Yr0 \ l_/ \ 1 \-L JlMMI CH- OH H i H ° g CT 1 i °*

COOK CH CH H CH. H H H 0H

10 J 3 J

---(II) ja tarvittaessa vapaa happomuoto muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi yhdisteen kationisuolaksi.

Edellä luetellut tunnetut eetteriantibiootit vai-15 kuttavat gram-positiivisiin bakteereihin, sieniin ja alku-eläimiin. Erityisesti näissä antibiooteissa esiintyy tehokasta kokkidiaalista vaikutusta. Siitä syystä niitä on käytetty vaihtelevalla menestyksellä hoidettaessa erilaisia eläininfektioita.

20 Hyvin tunnettu alkueläinsairaus, kokkidioosi, on edelleen vakava ongelma, ja sen hillitseminen on taloudellisesti tärkeää eläinlääketieteelle, erityisesti siipikar-jateollisuudelle. Kokkidioosin aiheuttaa yksi tai useampi Eimeria- tai Isospora-laji (ks. yhteenveto, Lund ja Farr 25 "Diseases of Poultry", 5. painos, Biester ja Schwarte, toim., Iowa State University Press, Ames, Ia., 1965, s. 1056 - 1096).

On olemassa kuusi kokkidia-lajia, jotka aiheuttavat helposti havaittavia tauteja herkästi taudeille altistu-30 ville kanoille. Eimeria tenella, E. necatrix, E. brunetti, E. acervulina, E. maxima ja E. mivati aiheuttavat vahin-. . koa joko suoraan tuhoamalla ruoansulatuskanavan epiteeli- soluja tai epäsuorasti tuottamalla toksiineja. Kolmea muu-’·’ ta samaan sukuun kuuluvaa alkueläintä pidetään suhteelli- : 35 sen vaarattomina; kuitenkin E. mitis, E. hagani ja ii 3 86188 E. praecox voivat vähentää painonnousua alentamalla ravinnon tehokkuutta ja vaikuttaen haitallisesti munantuo-tantoon.

Koska kokkidioosi aiheuttaa suuria taloudellisia 5 menetyksiä, etsintä uusien antikokkidiaalisten aineiden löytämiseksi jatkuu.

Suolitulehdus on toinen sairaus, joka voi aiheuttaa suuria taloudellisia menetyksiä karjankasvattajille. Suolitulehdusta esiintyy kanoissa, sioissa, nautakarjassa 10 ja lampaissa, ja sen aiheuttaa pääasiallisesti anaerobiset bakteerit, erityisesti Clostridium perfringens, ja virukset. Suolisyntyinen myrkytys märehtijöissä, jollaisesta on esimerkkinä lampaissa esiintyvä "ylensyöntisairaus", on C. perfringens -infektion aiheuttama tila.

15 Sikojen punatauti on yksi yleisimmistä Yhdysval loissa määritetyistä sioissa esiintyvistä sairauksista. Lisäksi tauti on levinnyt myös moniin muihin maihin ja aiheuttaa vuosittain huomattavia menetyksiä siankasvattajille ympäri maailmaa. Äskettäin on havaittu, että suuri 20 spirokeetta on taudin aiheuttava eliö. Tämä eliö,

Treponema hyodysenteriae, on nyt eristetty ja on osoitettu, että se voi aiheuttaa mainitun sairauduen [Harris, D.

L. et ai. "Swine Dysentery-1, Inoculation of Pigs with Treponema hyodysenteriae (New Species) and Reproduction of 25 the Disease", Vet. Med/SAC, 67, 61 - 64, 1972]. Tässä edempänä luetellut koetulokset koskevat tällä eliöllä suoritettuja kokeita. On otettava huomioon, että ei tiedetä, onko T. hyodysenteriae ainoa sian punataudin aiheuttava eliö. Saatavilla olevista tiedoista voidaan kuitenkin pää-30 teliä, että se on ensisijainen infektion lähde.

Mikroeliöt eläimen pötsissä hajottavat hiilihyd-. . raatteja monosakkaridien valmistamiseksi, ja sitten ne muuttavat nämä monosakkaridit pyruvaattiyhdisteiksi. Mikrobiologisissa prosesseissa pyruvaatit muutetaan aineen-35 vaihdunnan kautta asetaateiksi, butyraateiksi tai propio- O 86188 naateiksi, jotka tunnetaan haihtuvina rasvahappoina. Yksityiskohtaisempaa tarkastelua varten, ks. julkaisut: Leng, "Physiology of Digestion and Metabolism in the Ruminant", Phillipson et ai., toim., Oriel Press, Newcastle-upon-5 Tyne, Englanti, 1970, s. 408 - 410.

Kun saatavilla on liian vähän propionaatteja, eläimissä voi kehittyä ketoosi. Siten suotuisa yhdiste saa eläimet tuottamaan hiilihydraateista suuremman osuuden propionaatteja, jolloin ketoosin ilmenemismahdollisuus 10 pienenee.

Keksinnön mukaisen menetelmän lähtöaineena käytettävä kaavan II mukainen yhdiste on kuvattu EP-hakemusjulkaisussa 0169011. Se on nimetty UK-58852:ksi, ja sitä valmistetaan aerobisen upotuslisääntymisen avulla, joka tapa-15 htuu vesipitoisessa ravintoliuoksessa, jossa on mikro-organismia Actinomadura roseorufa Huang sp. nov., ATCC 39697, joka on eristetty Japanin maaperästä otetusta näytteestä. Nyt on todettu, että UK-58852:n hydrolysoiminen tarkoin valvotuissa olosuhteissa johtaa yhden molekyylissä 20 olevan glykoni-renkaan lohkeamiseen, jolloin syntyy edellä mainittu kaavan I mukainen uusi yhdiste, joka on täysin tehokas laajaspektrinen anti-kokkidiaali ja joka on parempi kuin UK-58852 -yhdiste vähäisemmän myrkyllisyytensä vuoksi. Tämä keksinnön mukaisesti valmistettu kaavan I 25 mukainen yhdiste on nimetty UK-61689 -antibiootiksi.

Esimerkkejä kaavan I mukaisen yhdisteen farmaseuttisesti hyväksyttävistä kationisuoloista ovat natrium- ja kaliumsuolat.

Kaavan II mukaisen yhdisteen eli yhdisteen UK-58852 ·. 30 hydrolyysi kaavan I mukaisen yhdisteen (UK-61689) valmistamiseksi suoritetaan edullisesti käyttäen para-tolueeni-. . sulfonihappoa, joka on asetonitriili/vesi -liuottimessa.

Edullisessa asetonitriili/vesi -koostumuksessa on 5 - 0,5 % vettä. Para-tolueenisulfonihappoa käytetään edullisesti r** : 35 1,1 mooliekvivalenttia UK-58852:n natriumsuolan yhtä moo- liekvivalenttia kohden.

il 5 86188

Muita käyttökelpoisia liuotinsysteemejä ovat pelkkä asetonitriili tai t-butanoli/vesi tai asetoni/vesi. Vaihtoehtoisiin happoihin kuuluvat mineraalihapot, kuten kloo-rivetynappo, etikkahappo tai vahvasti hapan hartsi. Yleen-5 sä reaktio suoritetaan huoneen lämpötilassa, ja sitä seurataan ohutkerroskromatografialla, kunnes halutun tuotteen saanto on optimaalinen. Reaktioaika on yleensä noin tunnista kolmeen tuntiin asetonitriilissä/vedessä olevalle para-tolueenisulfonihappo-hydrolyysisysteemille, mutta se 10 voi vaihdella käytettävän hapon ja liuotinsysteemin mukaan. Kun reaktio on kulkenut suurin piirtein loppuun, reaktioseos tehdään neutraaliksi ylimäärällä natriumbikarbonaattia, väkevöidään ja uutetaan dietyylieetterillä tai dikloorimetaanilla ja sitten puhdistetaan käyttäen silika-15 geelikromatografian standardimenetelmiä. Lopullinen tuote voidaan sitten uudelleen kiteyttää vapaana happona tai sopivana kationisuolana.

Vaihtoehtoisesti UK-61689 -antibiootti voidaan valmistaa käsittelemättömistä fermentaatiouutteista, jotka 20 sisältävät UK-58852:ta. Tällöin metyyli-isobutyyliketoni (MIBK) -fermentaatiouute väkevöidään ja liuotetaan edullisesti asetonitriiliin/veteen ja käsitellään para-tolueeni-sulfonihapolla. Edullinen asetonitriilivesikoostumus sisältää 5 % vettä, ja käsittelemättömän fermentointiöljyn 25 suhde para-tolueenisulfonihappoon on noin 9:1; nämä suhteet ovat keskiarvoja ja ne voivat vaihdella fermentointi-uutteen mukaan. Toinen liuotinsysteemi, jota voidaan käyttää, on metanoli/vesi, mutta hydrolyysi voidaan suorittaa myös käsittelemällä puhdistamatonta MIBK -uutetta para-30 tolueenisulfonihapolla siten, ettei lisättyä liuotinta ole mukana. Vaihtoehtoisiin happoihin kuuluvat mineraalihapot, kuten kloorivetyhappo.

UK-61689 -antibiootilla on inhibiittorivaikutusta useiden gram-positiivisten mikroeliöiden kasvua vastaan. 35 Alla olevaan taulukkoon I on koottu in vitro -kokeiden tu- 6 86188 lokset. Tätä koetta varten kukin eliö istutetaan sarjaan koeputkia, joissa on ravintoliuosta ja UK-61689 -antibioottia eri väkevyyksinä, ja määritetään yksikkönä pg/ml yhdisteen pienin konsentraatio, joka estää eliön kasvun 24 5 tunnin aikana (MIC).

Taulukko I

Bakteerinvastainen vaikutus Eliö Kanta nro MIC pg/ml

Clostridium perfringens 10A006 25 10 10A009 3,12

Actinomyces pyogenes 14D002 0,39 14D008 0,39 14D011 0,39 15

Treponema hyodysenteriae 94A001 6,25 94A002 6,25 94A007 3,12 94A008 3,12 20

Antibiootin UK-61689 ja sen suolojen tehokkuustie-dot kokkidiaali-infektioita vastaan kanoissa saatiin seu-raavalla tavalla. Ryhmiä, joissa oli 3-5 kymmenen päivän ikäistä, tervettä, valkoista leghorn-kukonpoikaa, ruo-• : 25 kittiin muhennoksella, joka sisälsi antibioottia UK-61689 tai sen natrium- ja/tai kaliumsuolaa tasaisesti sekoitettuna muhennokseen. Oltuaan tällä ruokinnalla 24 tuntia, kuhunkin kananpoikaan istutettiin per os testattavien tiettyjen Eimeria-lajien itiörakkuloita. Muita ryhmiä, . . 30 joissa oli 3-5 kymmenen päivän ikäistä kananpoikaa, ruokittiin samanlaisella muhennoksella, jossa ei ollut UK-61689 -antibioottia tai sen suoloja. Myös ne infektoitiin 24 tunnin kuluttua, ja niitä käytettiin infektoituina ver-tailueläiminä. Vielä yhtä ryhmää, jossa oli 3-5 kymmenen 35 päivän ikäistä kananpoikaa, ruokittiin samanlaisella ruo- li 7 86188 alla, jossa ei ollut UK-61689 -antibioottia, eikä niitä infektoitu kokkidialla. Näitä käytettiin normaaleina ver-tailueläiminä. Käsittelyllä saadut tulokset tarkastettiin viiden päivän kuluttua E. acervulinan tapauksessa ja kuu-5 den päivän kuluttua kaikissa muissa tapauksissa.

Kriteerit, joita käytettin antikokkidiaalisen vaikutuksen mittaamiseen, käsittivät pisteytyksen, jossa vaurio arvioitiin asteikolla 0 - 4 E. tenellalle julkaisussa J. E. Lynch, "A New Method for the Primary Evaluation of 10 Anticoccidial Activity", Am. J. Vet. Res., 22, 324 - 326, 1961 kuvatun menetelmän mukaisesti, ja asteikolla 0-3 muille lajeille, perustuen muunneltuun pisteytysmenetel-mään, jonka ovat kehittäneet J. Johnson ja W. H. Reid, "Anticoccidial Drugs. Lesion Scoring Techniques in Battery 15 and Floor Pen Experiments in Chicks", Exp. Parasit., 28, 30 - 36, 1970. Vakiosuhde saatiin jakamalla kunkin käsitellyn ryhmän vauriopistemäärä infektoitujen vertailu-eläinten ryhmän vauriopistemäärällä.

Todettiin, että UK-61689 -antibiootilla ja sen ka-20 tionisuoloilla on erinoimainen vaikutus siipikarjan kokki-diaalisia infektioita vastaan. Sekoitettaessa näitä yhdisteitä kanojen ravintoon määränä, joka vastaa pitoisuutta 15 - 120 ppm, yhdisteet ovat tehokkaita vastustettaessa Eimeria tenellan, E. acervulinan, E. maximan, E. brunettin 25 E. necatrixin aiheuttamia infektioita.

Keksinnön mukaisesti valmistettu kaavan I mukainen yhdiste (UK-61689) on lähtöaineena käytettyyn kaavan II mukaiseen tunnettuun yhdisteeseen (UK-58852) verrattuna yllättävän edullinen sikäli, että sillä on paljon pienempi 30 toksisuus. Tämä ilmenee suoritettujen toksisuuskokeiden tuloksista. 14 tai 15 vuorokautta kestäneen seurantajakson jälkeen hiirillä ja rotilla suoritetut toksisuuskokeet osoittivat, että LD50-arvot ilmoitettuna yksikköinä mg an-tibioottia/kg kehonpainoa olivat seuraavat: 8 86188 UK 61689 Oraalisesti Vatsaontelonsis.

Uroshiiret 25 - 50 15 - 30

Naarashiiret 25 - 50 -----

Urosrotat 50 - 100 Yli 10 5 Naarasrotat 5-20 ----- UK 58852 Oraalisesti Vatsaontelonsis.

Uroshiiret 2-5 2-5

Naarashiiret 2-5 ----- 10 Urosrotat 1-2 0,2-1

Naarasrotat 5-20 ----- Käytettäessä tämän keksinnön mukaisesti valmistettua yhdistettä siipikarjassa esiintyvään kokkidioosin hoi-15 toon, yhdiste annetaan sopivaan kantaja-aineeseen sekoitettuna suun kautta. Vaivattomimmin lääkitys laitetaan yksinkertaisesti juomaveteen tai siipikarjan rehuun siten, että terapeuttinen annos ainetta nautitaan päivittäisen veden tai rehun kanssa. Aine voidaan suoraan mitata juoma-20 veteen, edullisesti nestemäisen, veteen liukenevan tiivisteen muodossa (kuten veteen liukenevan suolan vesiliuoksen muodossa), tai se voidaan suoraan lisätä rehuun joko sellaisenaan tai valmiiksi sekoitetun seoksen tai tiivisteen muodossa. Terapeuttisen aineen valmiiksi sekoitettua seos-25 ta tai tiivistettä, jotka ovat kantaja-aineessa, käytetään yleisesti rehuun lisättynä. Sopivat kantaja-aineet ovat nestemäisiä tai kiinteitä, valinnan mukaan, kuten vesi, erilaiset jauhot, esimerkiksi soijaöljyjauho, pellavansie-menöljyjauho, maissintähkäjauho ja mineraaliseokset, kuten 30 sellaiset, joita käytetään yleisesti siipikarjan rehussa. Erittäin tehokas kantaja-aine on siipikarjan rehu itse; se on pieni annos siipikarjan rehua. Kantaja-aine helpottaa aktiivisten aineiden yhdenmukaista jakautumista rehussa, johon ennalta sekoitettu seos on yhdistetty. Tämä on tär-35 keää, koska tarvitaan vain pieniä esillä olevien vaikutta- 9 86188 vien aineiden osuuksia. On tärkeää, että yhdiste on perusteellisesti sekoittunut ennalta sekoitettuun seokseen ja myöhemmin rehuun. Tässä suhteessa aine voi olla dispergoi-tuneena tai liuenneena sopivaan öljyiseen apuaineeseen, 5 kuten soijaöljyyn, maissiöljyyn, puuvillansiemenöljyyn ja vastaaviin, tai haihtuvaan orgaaniseen liuottimeen, ja sitten se on sekoitettuna kantaja-aineen kanssa. On toivottavaa, että aktiivisen aineen osuudet tiivisteessä voivat vaihdella laajasti, jolloin aineen määrä lopullisessa 10 rehussa voidaan säätää sekoittamalla sopiva osa valmiiksi sekoitettua seosta rehun kanssa, jotta saataisiin terapeuttisen aineen pitoisuus halutulle tasolle.

Rehun valmistajat voivat sekoittaa erittäin väkevät tiivisteet proteiinipitoiseen kantaja-aineeseen, kuten 15 soijaöljyjauhoihin ja muihin edellä kuvattuihin jauhoihin, ja näin valmistetaan väkevöityjä lisäysaineita, jotka ovat sopivia siipikarjan suoraan ruokintaan. Tällaisissa tapauksissa siipikarjan annetaan noudattaa tavallista ruokavaliota. Vaihtohetoisesti tällaiset väkevöidyt lisäysai-20 neet voidaan lisätä suoraan siipikarjan rehuun, jolloin saadaan ravinnollisesti tasapainoitettuja lopullisia rehuja, jotka sisältävät terapeuttisesti tehokkaan määrän tämän keksinnön yhdistettä. Seokset sekoitetaan perusteellisesti standardimenetelmillä, kuten sekoittajalla, jossa on ' 25 kaksoisseinämä homogeenisuuden varmistamiseksi.

Alan asiantuntijoille on luonnollisesti selvää, että käytettävän, tässä kuvatun yhdisteen pitoisuudet vaihtelevat eri olosuhteissa. Jatkuva matalapitoisuuksinen lääkitys, joka annetaan kanoille kasvuaikana; se on ensim-30 mäiset 6-12 viikkoa, on tehokas ehkäisevä määrä. Hoidettaessa puhjenneita infektioita, korkeammat pitoisuudet . . voivat olla tarpeellisia infektion taltuttamiseksi. Käy tetty pitoisuus rehussa on yleensä välillä 15 - 120 ppm. Annettaessa juomaveden mukana, pitoisuus on sellainen, : 35 että sen avulla saadaan sama päivittäinen lääkitysannos.

10 861 88 se on 15 - 120 ppm, joka muodostuu keskimääräisestä päivittäisestä rehun kulutuksen painon suhteesta keskimääräiseen päivittäiseen veden kulutukseen.

Esillä olevaa keksintöä valaistaan seuraavilla esi-5 merkeillä.

Esimerkki 1

Liuokseen, jossa oli 15,0 g (0,0147 mol) puhdasta UK-58 852 -antibioottia (valmistettu EPÄ 0169011:ssa kuvatulla tavalla) asetonitriili/vedessä (95:5), lisättiin 10 3,07 g (0,0161 mol) p-tolueenisulfonihappoa. Reaktiota seurattiin ohutkerroskromatografiällä, kunnes halutun tuotteen saanto oli optimaalinen (noin kolmen tunnin ajan). Reaktioseosta käsiteltiin kiinteällä bikarbonaatil-la tai sen vesiliuoksella, joita oli ylimäärin, ja väke-15 vöitiin kuiviin tyhjössä. Syntynyt kiinteä aine liuotet tiin dietyylieetteriin ja pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, bikarbonaattipesuvedet uutettiin dietyylieetterillä ja kaikki eetterikerrokset yhdistettiin ja pestiin peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä nat-20 riumkloridilla. Eetteriliuos kuivattiin vedettömällä nat- riumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin tynjössä. Synty nyt käsittelemätön reaktiotuote sisälsi UK-61689 -antibioottia, joka oli vallitsevana tuotteena, mutta jossa oli mukana vaihtelevia määriä lähtöainetta, UK 58852, ja mui-25 ta sivutuotteita. Käsittelemätön tuote puhdistettiin sili-kageelikolonnikromatografiällä, minkä jälkeen se uudelleen kiteytettiin isopropyylieetterillä, ja näin saatiin 4,2 g (32 %) UK-61689:ä natriumsuolana, s.p. 175 - 176 °C; [a] = +19,3 (c=0:5, MeOH); C-13 NMR (CDC13): . 30 179,15 ppm, 107,45, 103,18, 97,74, 96,96, 86,92, 84,60, 84,20, 82,27, 82,01, 80,88, 80,20, 79,86, 74,80, 74,55, 73,07, 70,06, 67,71, 66,89, 59,11, 56,81, 45,40, 39,82, 38,93, 36,46, 33,81, 33,71, 33,54, 33,42, 33,13, 32,44, 32,26, 30,56, 27,58, 26,90, 26,84, 26,11, 23,23, 18,40, ;35 17,53, 16,9 9, 12,13, 11,04, 10,42.

li li 86188

Esimerkki 2 Käsittelemätön fermentointiuute (MIBK) (1 1), joka sisälsi UK-58852 -antibioottia (arviolta 25 g), väkevöi-tiin tyhjössä 680 g:ksi. Paksu, tumma öljy lisättiin ase-5 tonitriili/veteen (95:5) (5,6 1), ja syntynyttä maitomaista emulsiota käsiteltiin p-tolueenisulfonihapolla (78,2 g) yhtenä annoksena. Reaktion edetessä, emulsio erottui vähitellen kahdeksi eri kerrokseksi, joita sekoitettiin voimakkaasti kaikkiaan 1,25 tunnin ajan. Reaktioseos kaadet-10 tiin erotussuppiloon, ja öljyinen pohjakerros poistettiin ja suspendoitiin lisäämällä asetonitriili/vettä (95:5). Asetonitriili/vesi -kerrokset yhdistettiin ja niitä käsiteltiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella (400 ml). Sitten seos väkevöitiin tyhjössä paksuksi sii-15 rapiksi, liuotettiin dietyylieetteri/etyyliasetaattiin (3:1) (2 1) ja pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsul-faatilla ja väkevöitiin paksuksi ruskeaksi öljyksi (432 g). Puhdistaminen suoritettiin vaivattomimmin käyttäen 20 vastavirtauuttomenetelmiä. Uutossa käytettiin heksaani: etyyliasetaattia (1:1) polaarittomana faasina ja metanoli: vettä (3:2) polaarisena vesifaasina. Haihduttamalla orgaaniset uutteet, saatiin puolikiinteää ainetta, joka jauhettiin kuivaksi isopropyylieetterissä, ja näin saatiin UK-25 61689:ä natriumsuolana, 10 g, s.p. 169 - 170 °C. Tämä aine vastasi esimerkin 1 menetelmällä valmistettua UK-61689 -yhdistettä TLC- ja NMR-tuloksia verrattaessa.

Esimerkki 3 5,11 g antibioottia UK 58852 liuotettiin asetoni-30 triili/vesiseokseen (99:1) (127,7 ml) ja liuokseen lisättiin 5,50 ml 1,00 N suolahappoa. Reaktiota seurattiin ohutkerroskromatografiällä, kunnes halutun tuotteen saanto osoittautui optimaaliseksi (2 tuntia 45 minuuttia). Reak-tioseosta käsiteltiin ylimäärällä natriumkarbonaatin kyl-35 lästettyä vesiliuosta ja se haihdutettiin kuiviin tyhjös- 12 861 88 sä. Saatua kiinteää ainetta uutettiin kahdesti dietyyli-eetterillä, yhdistetyt eetterikerrokset pestiin kahdesti natriumvetykarbonaatin kyllästetyllä vesiliuoksella, kahdesti vedellä ja kerran natriumkloridin kyllästetyllä ve-5 siliuoksella. Eetteriliuos kuivattiin vedettömällä natri-umsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Saatu raakatuote puhdistettiin silikageelikromatografialla, jota seurasi kiteytys isopropyylieetteristä. Näin saatiin 865 mg yhdistettä UK 61689. 1

Claims (2)

13 86188 Patenttivaatimus Menetelmä lääkeaineena käyttökelpoisen polysyklisen eetteriantibiootin valmistamiseksi, jolla on kaava: ^ OCH^ PH OH CH3 ch3 o_ 10 / / \ / \ [ 1 Il lii J_/ V—;L Λ—mm CH I OH H 1 H TN7! f^o^l 1V1 3 COOH CH3. ch3 h ch3 h h H oh — (I) 15 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän kationisuolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että hydrolysoidaan yhdiste, jolla on kaava: OCH, M„, · 0:“’ β0 OH 3 /° CH3 f_/ \_Z \JlMMI CH

25. Sk ί I^'ι^/ίΡ'ο'ΤΤ0'! 3 COOH ch3 ch3 h ch3 h h h oh ---(II) ja tarvittaessa vapaa happomuoto muutetaan farmaseuttises-30 ti hyväksyttäväksi yhdisteen kationisuolaksi. i4 86188 Förfarande för framställning av ett polycykliskt eterantibiotikum som kan användas säsom läkemedel och som 5 har formeln: OCH^ pH oh y'o ch3 “j "(C», ,a! J / V—/ y\—L j.n,„ CH3 OH h A H 0 jj fN}^f ; θ' k 1 °A COOH CH3. CH^ h CHj H H H oh 15 (I) eller ett farmaceutiskt godtagbart katjonsalt därav, kännetecknat därav, att man hydrolyserar en förening med formeln: 20 Ap pc - J3 OH 3 y° CH3 'NvT/,<iS*0^V / / \ Υ \r—L CK OH H 1 H °ϊΝ^Γί 0 il * COOH CH3 CK3 H CHj h h h — (II) 30 och vid behov omvandlar den fria syraformen tili ett farmaceutiskt godtagbart katjonsalt av föreningen. I.