PT2350080E - Dímeros de pirrolobenzodiazepina assimétricos para o tratamento de doenças proliferativas - Google Patents

Description

DESCRIQÄO

DíMEROS DE PIRROLOBENZODIAZEPINA ASSIMETRICOS PARA O TRATAMENTO DE DOENQAS PROLIFERATIVAS A presente invengäo refere-se äs pirrolobenzodiazepinas (PBDs), em particular aos dimeros de pirrolobenzodiazepina tendo uma ligagäo dupla C2-C3 e um grupo arilo na posigäo C2 em cada unidade de monómero. Antecedentes da invengäo

Algumas pirrolobenzodiazepinas (PBDs) tém a capacidade de reconhecer e ligar-se a sequéncias especificas de ADN; a sequéncia preferida é PuGPu. 0 primeiro antibiótico antitumor de PBD, a antramicina, foi descoberto em 1965 (Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc. , 87, 5793-5795 (1965); Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5791- 5793 (1965)). Desde entäo, foram descritas diversas PBDs de ocorréncia natural, e mais de 10 vias sintéticas foram desenvolvidas para uma variedade de análogos (Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994)). Os membros da familia incluem a abeimicina (Hochlowski, et al., J.

Antibiotics, 40, 145-148 (1987)), a quicamicina (Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)), o DC-81 (Patente Japonesa 58-180 487; Thurston, et al., Chem.

Brit., 26, 767-772 (1990); Bose, et al., Tetrahedron, 48, 751-758 (1992)), a mazetramicina (Kuminoto, et al., J.

Antibiotics, 33, 665-667 (1980)), as neotramicinas A e B (Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976)), a porotramicina (Tsunakawa, et al., J. Antibiotics, 41, 1366-1373 (1988)), a protracarcina (Shimizu, et al, J.

Antibiotics, 29, 2492-2503 (1982); Langley e Thurston, J.

Org. Chem., 52, 91-97 (1987)), a sibanomicina (DC-102) (Hara, et al., J. Antibiotics, 41, 702-704 (1988); Itoh, et al. , J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988)), a sibiromicina (Leber, et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993 (1988)) e a tomamicina (Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972) ) . As PBDs säo da estrutura geral:

Elas diferem no número, tipo e posigäo dos substituintes, tanto nos seus anéis A aromáticos como nos anéis C de pirrólo, e no grau de saturagäo do anel C. No anel B há urna imina (N=C) , ou urna carbinolamina (NH-CH (OH)), ou um éter carbinolamina metílico (NH-CH(OMe)) na posigäo N10-C11, que é o centro eletrofilico responsável por alquilar o ADN. Todos os produtos naturais conhecidos tém urna configuragäo (S) na posigäo Olla quiral, o que lúes fornece urna rotagäo da esquerda para a direita quando visto a partir do anel C para o anel A. Isto dá-lhes o formato tridimensional apropriado para a isohelicidade com o sulco secundário do ADN de forma B, resultando num encaixe ajustado no local de ligagäo (Kohn, Em Antibiotics III. Springer-Verlag, Nova York, págs. 3-11 (1975); Hurley e

Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986)) . A sua capacidade de formar um aduto no sulco secundário permite-lhes interferir com o processamento do ADN, daí a sua utilizagáo como agentes antitumor.

Foi anteriormente divulgado que a atividade biológica destas moléculas pode ser potencializada unindo duas unidades de PBD através das suas funcionalidades hidroxilo em C8/C por meio de um ligador de alquileno flexível (Bose, D.S., et al., J. Am. Chem. Soc. , 114, 4939-4941 (1992); Thurston, D.E.,et al., J. Org. Chem., 61, 8141-8147 (1996)) . Acredita-se que os dímeros de PBD formem lesóes no ADN seletivas para a sequéncia, tais como a reticulagáo entre cadeias 5'-Pu-GATC-Py-3' palindrómica (Smellie, M., et al., Biochemistry, 42, 8232-8239 (2003); Martin, C., et al. , Biochemistry, 44, 4135-4147), a qual se acredita ser principalmente responsável pela sua atividade biológica. Um exemplo é divulgado no documento EP1413582 como PBD, o SG2000 (SJG-136):

recentemente completou os ensaios clínicos de Fase I na área de oncología e está prestes a entrar na Fase II (Gregson, S., et al., J. Med. Chem. , 44, 737-748 (2001); Alley, M.C., et al., Cancer Research, 64, 6700-6706 (2004); Hartley, J.A., et al., Cancer Research, 64, 6693-6699 (2004) ) .

Mais recentemente, os presentes inventores divulgaram anteriormente no documento WO 2005/085251, os compostos de PBD diméricos tendo substituintes de arilo em C2, tais como o SG2202 (ZC-207):

e no documento W02006/111759, bissulfitos de tais compostos de PBD, por exemplo, o SG2285

(ZC-423):

Estes compostos mostraram ser agentes citotoxicos altamente úteis (Howard, P.W., et al., Bioorg. Med. Chem. (2009), doi: 10.1016/j.bmcl.2009.09.012).

Devido ä maneira na qual estes compostos altamente potentes atuam na reticulagäo do ADN, estas moléculas tém sido preparadas simétricamente. Isto proporciona urna síntese direta, por construgäo das fragöes de PBD simultáneamente tendo já formado a ligagäo do dímero, ou por reagao das fragöes de PBD já construidas com o grupo de ligagäo de dimero.

Divulgagäo da Invengäo

Os presentes inventores desenvolveram um composto de PBD dimérico assimétrico contendo grupos arilo na posigáo C2 de cada monómero, onde um destes grupos carrega um substituinte concebido para proporcionar urna ancora para a ligagäo do composto a urna outra fragáo. A presente invengäo compreende um composto com a fórmula I:

em que: R2 é da fórmula II:

onde A é um grupo arilo C5-7, X é selecionado a partir do grupo que compreende: OH, SH, CO2H, COH, N=C=0, NHRn, onde Rn é selecionado a partir do grupo que compreende H e alquilo de C2-4, e (OC2H4) mOCH3, onde m é 1 a 3, e: (i) Q1 é urna ligagäo simples, e Q2 é selecionado a partir de urna ligagäo simples e -Z- (CH2) n_, onde Z é selecionado a partir de urna ligagäo simples, 0, S e NH e n é a partir de 1 até 3; ou (ii) Q1 é -CH=CH-, e Q2 é urna ligagäo simples; R12 é um grupo arilo C5-i0, opcionalmente substituido por urn ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que compreende: halo, nitro, ciano, alcoxi C2_7, ariloxi C5-20/· heterocicliloxi C3-20, alquilo Ci_7 , heterociclilo C3-7 e bis-oxi-alquileno C1-3; em que o grupo alcoxi C1-7 pode ser substituido por um grupo amino e se o grupo heterocicclilo C3-7 é um azoto contendo heterociclilo pode ser substituido por um grupo alquilo Ci-4; R6 e R9 sao independentemente selecionados a partir de H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; onde R e R' sao independentemente selecionados a partir de grupos alquilo Ci-i2, heterociclilo C3-20 e arilo C5-20 opcionalmente substituidos; R7 é selecionado a partir de H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NHRR', nitro, Me3Sn e halo; ou: (a) R10 é H, e R11 é OH, 0RA, onde RA é alquilo C1-4; (b) R10 e R11 formam urna ligagáo dupla azoto-carbono entre os átomos de azoto e carbono aos quais estáo ligados; ou (c) R10 é H e R11 é SOzM, onde zé2ou3eMé um catiáo monovalente farmacéuticamente aceitável; R" é um grupo alquileno C3-i2, cuja cadeia pode ser interrompida por um ou mais heteroátomos, por exemplo, 0, S, NRn2 (onde RN2 é H ou alquilo C1-4) , e/ou anéis aromáticos, por exemplo, benzeno ou piridina; Y e Y' sao selecionados a partir de 0, S, ou NH; R5 , R7 , R9 sao selecionados a partir dos mesmos grupos que R6, R7 e R9, respetivamente, e R10' e R11' sao os mesmos que R10 e R11, onde se R11 e R11' forem S0ZM, M pode representar um catiáo divalente farmacéuticamente aceitável.

Um segundo aspeto da presente invengáo proporciona a utilizagäo de um composto do primeiro aspeto da invengáo no fabrico de um medicamento para o tratamento de urna doenga proliferativa. 0 segundo aspeto também proporciona um composto do primeiro aspeto da invengáo para utilizagáo no tratamento de urna doenga proliferativa.

Um perito na especialidade está prontamente apto a determinar se um conjugado candidato trata ou nao urna condigao proliferativa para qualquer tipo particular de célula. Por exemplo, os ensaios que podem ser convenientemente utilizados para avaliar a atividade oferecida por um composto particular sao descritos nos exemplos abaixo. 0 termo "doenga proliferativa" diz respeito a urna proliferagáo celular indesejada ou incontrolada de células excessivas ou anormais que é indesejada, tal como, o crescimento neoplástico ou hiperplástico, quer seja in vitro ou in vivo.

Os exemplos de condigóes proliferativas incluem, mas näo estáo imitados ä proliferagáo celular benigna, pré-maligna, e maligna, incluindo, mas nao limitada aos neoplasmas e tumores (por exemplo, histiocitoma, glioma, astrocitoma, osteoma), cancros (por exemplo, cancro do pulmáo, cancro do pulmáo de células pequeñas, cancro gastrointestinal, cancro do intestino, cancro do colon, carcinoma da mama, carcinoma ovárico, cancro da próstata, cancro testicular, cancro do figado, cancro do rim, cancro da bexiga, cancro do páncreas, cancro do cérebro, sarcoma, osteossarcoma, sarcoma de Kaposi, melanoma), leucemias, psoriase, doengas ósseas, distúrbios fibroproliferativos (por exemplo, do tecido conjuntivo), e aterosclerose. Os cancros de interesse particular incluem, mas nao estáo limitados äs leucemias e cancros ováricos.

Qualquer tipo de célula pode ser tratado, incluindo, mas náo limitado ao de pulmáo, gastrointestinal (incluindo, por exemplo, intestino, colon) mama (mamário), ovárico, próstata, figado (hepático), rim (renal), bexiga, páncreas, cérebro e pele.

Um terceiro aspeto da presente invengáo compreende um composto de fórmula III:

em que : R2, R12, R5, R9, R7, R", Y, Y', R5, R7', R9' sao como definidos no primeiro aspeto da invengäo e ou: (a) R10 é selecionado a partir de carbamato de 2-trimetilsililetilo (Teoc), fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) e 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo (Troc) , e R11 é 0-Prot°, em que Prot° é terc-butildimetilsililo (TBS) ou tetrahidropiranilo (THP); (b) R10 é selecionado a partir de metoximetilo (MOM), benziloxi metilo (BOM) e 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEM) e Rn é urn grupo oxo; onde R10’ e R11’ sao o mesmo que R10 e R11.

Urn quarto aspeto da presente invengäo compreende urn método de preparar urn composto de fórmula I a partir de um composto de fórmula III por desprotegäo da ligagäo de imina.

Os compostos de PBD diméricos assimétricos da presente invengäo säo preparados por estratégias diferentes daquelas anteriormente empregues na preparagáo de compostos de PBD diméricos simétricos. Em particular, os presentes inventores desenvolveram um método que envolve adicionar cada substituinte de arilo em C2 a um núcleo de dimero de PBD simétrico em etapas separadas do método. Deste modo, um quinto aspeto da presente invengäo proporciona um método de preparar um composto do primeiro ou do terceiro aspeto da invengäo, compreendendo pelo menos urna das etapas do método especificadas abaixo.

Definigóes

Catiöes farmacéuticamente aceitáveis

Os exemplos de catiöes monovalentes e divalentes farmacéuticamente aceitáveis sao discutidos em Berge, et al., J. Pharm. Sei., 66, 1-19 (1977) . 0 catiäo farmacéuticamente aceitável pode ser inorgánico ou orgánico.

Os exemplos de catiöes inorgánicos monovalentes farmacéuticamente aceitáveis incluem, mas náo estáo imitados aos iöes de metáis alcalinos, tais como Na+e K+. Os exemplos de catiöes inorgánicos divalentes farmacéuticamente aceitáveis incluem, mas náo estáo limitados aos catiöes alcalinos terrosos, tais como Ca2+ e Mg2+. Os exemplos de catiöes orgánicos farmacéuticamente aceitáveis incluem, mas náo estáo limitados ao iáo amonio (ou seja, NH4+) e iöes amonio substituidos (por exemplo, NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR4+) . Os exemplos de alguns iöes amonio substituidos adeguados sáo agüeles derivados de: etilomina, dietilamina, dicicloexilamina, trietilamina, butilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, colina, meglumina e trometamina, bem como aminoácidos, tais como Usina e arginina. Um exemplo de um iáo amonio guaternário comum é o N(CH3) 4+.

Substituintes A expressáo "opcionalmente substituido", como utilizada neste documento, diz respeito a um grupo parental gue pode ser náo substituido ou gue pode ser substituido.

Salvo indicagáo em contrário, o termo "substituido", como utilizado neste documento, diz respeito a um grupo parental gue contém um ou mais substituintes. 0 termo "substituinte" é utilizado neste documento no sentido convencional e refere-se a urna fragao química que está covalentemente ligada a, ou se apropriado, fundida a, um grupo parental. Conhece-se bem urna ampia variedade de substituintes, e os métodos para a sua formagáo e introdugáo numa variedade de grupos parentais sáo também bastante conhecidos.

Exemplos de substituintes sao descritos em maior detalhe abaixo.

Alquilo Ci-12: 0 termo "alquilo Ci-42", como utilizado neste documento, diz respeito a urna fragáo monovalente obtida por remogäo de um átomo de hidrogénio de um átomo de carbono de um composto de hidrocarboneto tendo de 1 a 12 átomos de carbono, que pode ser alifática ou aliciclica, e que pode ser saturada ou insaturada (por exemplo, parcialmente insaturada, totalmente insaturada). Assim, o termo "alquilo" inclui as subclasses alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, etc., discutidas abaixo.

Os exemplos de grupos alquilo saturados incluem, mas náo estáo limitados á metilo (Ci) , etilo (C2) , propilo (C3) , butilo (C4) , pentilo (C5) , hexilo (C6) e heptilo (C7) .

Os exemplos de grupos alquilo lineares saturados incluem, mas náo estáo limitados á metilo (Ci) , etilo (C2) , n-propilo (C3) , n-butilo (C4) , n-pentilo (amilo) (C5) , n-hexilo (C6) e n-heptilo (C7) .

Os exemplos de grupos alquilo ramificados saturados incluem iso-propilo (C3) , iso-butilo (C4) , sec-butilo (C4) , tere-butilo (C4) , iso-pentilo (C5) e neo-pentilo (C5) .

Alquenilo C2-42: 0 termo "alquenilo C2-42", conforme utilizado neste documento, diz respeito a um grupo alquilo tendo urna ou mais ligagöes duplas carbono-carbono.

Os exemplos de grupos alquenilo insaturados incluem, mas náo estáo limitados á etenilo (vinilo, -CH=CH2) , 1- propenilo (-CH=CH-CH3) , 2-propenilo (alilo, -CH-CH=CH2) , isopropenilo (1-metilvinilo, -C (CH3) =CH2) , butenilo (C4) , pentenilo (C5) e hexenilo (C6) .

Alquinilo 02-42 : 0 termo "alquinilo 02-42", conforme utilizado neste documento, diz respeito a um grupo alquilo tendo urna ou mais ligagöes triplas carbono-carbono.

Os exemplos de grupos alquinilo insaturados incluem, mas náo estáo limitados á etinilo (-C^CH) e 2-propinilo (propargilo, -CH2-C=CH).

Cicloalquilo C3-i2: 0 termo "cicloalquilo C3-42", conforme utilizado neste documento, diz respeito a urn grupo alquilo que é também um grupo ciclilo; ou seja, urna fragáo monovalente obtida por remogäo de um átomo de hidrogénio de um átomo do anel alicicico de um composto de hidrocarboneto cíclico (carbocíclico), fragáo esta que tem de 3 a 7 átomos de carbono, incluindo de 3 a 7 átomos no anel.

Os exemplos de grupos cicloalquilo incluem, mas nao estáo limitados áqueles derivados de: compostos de hidrocarbonetos monocíclicos saturados: ciclopropano (C3) , ciclobutano (C4) , ciclopentano (C5) , ciclohexano (C6) , cicloheptano (C7) , metilciclopropano (C4) , dimetilciclopropano (C5) , metilciclobutano (C5) , dimetilciclobutano (C6) , metilciclopentano (C6) , dimetilciclopentano (C7) e metilcicloexano (C7) ; compostos de hidrocarbonetos monocíclicos insaturados: ciclopropeno (C3) , ciclobuteno (C4) , ciclopenteno (C5) , cicloexeno (C6) , metilciclopropeno (C4) , dimetilciclopropeno (C5) , metilciclobuteno (C5), dimetilciclobuteno (C6) , metilciclopenteno (C6) , dimetilciclopenteno (C7) e metilcicloexeno (C7) ; e compostos de hidrocarbonetos policíclicos saturados: norcarano (C7) , norpinano (C7) , norbornano (C7) .

Heterociclilo C3-20: 0 termo "heterociclilo C3-20", conforme utilizado neste documento, diz respeito a urna fragáo monovalente obtida por remogäo de um átomo de hidrogénio de um átomo do anel de um composto heterocíclico, porgáo esta que tem de 3 a 20 átomos no anel, dos quais 1 a 10 sao heteroátomos do anel. De preferencia, cada anel tem de 3 a 7 átomos no anel, dos quais de 1 a 4 sao heteroátomos do anel.

Neste contexto, os sufixos (por exemplo, C3-20, C3_7, C5_ 6, etc.) significam o número de átomos no anel, ou o intervalo do número de átomos no anel, quer sejam átomos de carbono, quer se jam heteroátomos. Por exemplo, o termo "heterociclilo C5-6", conforme utilizado neste documento, diz respeito a um grupo heterociclilo tendo 5 ou 6 átomos no anel.

Os exemplos de grupos heterociclilo monociclicos incluem, mas nao estao limitados aqueles derivados de:

Ni: aziridina (C3) , azetidina (C4) , pirrolidina (tetrahidropirrol) (C5) , pirrolina (por exemplo, 3-pirrolina, 2,5-dihidropirrol) (Cs) , 2H-pirrol ou 3H-pirrol (isopirrol, isoazol) (C5) , piperidina (C6) , dihidropiridina (C6) , tetrahidropiridina (C6) , azepina (C7) ; Oí: oxirano (C3) , oxetano (C4) , oxolano (tetrahidrofurano) (C5) , oxol (dihidrofurano) (C5) , oxano (tetrahidropirano) (C6) , dihidropirano (C6) , pirano (C6) , oxepina (C7) ; S4: tihirano (C3) , tietano (C4) , tiolano (tetrahidrotiofeno) (C5) , tiano (tetrahidrotiopirano) (C6) , tiepano (C7) ; 02: dioxolano (C5) , dioxano (C6) e dioxepano (C7) ; 03: trioxano (C6) ; N2: imidazolidina (C5) , pirazolidina (diazolidina) (C5) , imidazolina (C5) , pirazolina (dihidropirazol) (C5) , piperazina (C5) ; N404 : tetrahidroxazol (C5) , dihidroxazol (C5) , tetrahidroisoxazol (C5) , dihidroisoxazol (C5) , morfolina (Ce) , tetrahidroxazina (Ce) , dihidroxazina (Ce) , oxazina (C6) ; N4S4: tiazolina (C5) , tiazolidina (C5) , tiomorfolina (C6) ; N204 : oxadiazina (C6) ;

OiS4: oxatiol (C5) e oxatiano (tioxano) (C6) ; e, N1O1S1: oxatiazina (C6) .

Os exemplos de grupos heterociclilo monociclicos substituidos incluem aqueles derivados de sacarideos, na forma cíclica, por exemplo, furanoses (C5) , tais como arabinofuranose, lixofuranose, ribofuranose, e xilofuranose, e piranoses (C6) , tais como alopiranose, altropiranose, glicopiranose, manopiranose, gulopiranose, idopiranose, galactopiranose e talopiranose.

Arilo C5-20: 0 termo "arilo C5-20"/· conforme utilizado neste documento, diz respeito a urna fragäo monovalente obtida por remogäo de um átomo de hidrogénio de um átomo do anel aromático de um composto aromático, fragäo esta que tem de 3 a 20 átomos no anel. De preferencia, cada anel tem de 5 a 7 átomos no anel.

Neste contexto, os sufixos (por exemplo, C3-2or C5-7, C5-6, etc.) significam o número de átomos no anel, ou o intervalo do número de átomos no anel, quer sejam átomos de carbono, quer sejam heteroátomos. Por exemplo, o termo "arilo C5-6", conforme utilizado neste documento, diz respeito a um grupo arilo tendo 5 ou 6 átomos no anel.

Os átomos do anel podem ser todos átomos de carbono, como nos "grupos carboarilo".

Os exemplos de grupos carboarilo incluem, mas nao estáo limitados áqueles derivados de benzeno (ou seja, fenilo) (C6) , naftaleno (Cío) , azuleno (Cío) , antraceno (C14) , fenantreno (C14) , naftaceno (Ci8) e pireno (Ci6) .

Os exemplos de grupos arilo que compreendem anéis fundidos, pelo menos um dos quais é um anel aromático, incluem, mas nao estáo limitados aos grupos derivados de indano (por exemplo, 2,3-diidro-lH-indeno) (C9) , indeno (C9) , isoindeno (C9) , tetralina (1,2,3,4-tetrahidronaftaleno (Ci0) , acenafteno (Ci2) , fluoreno (Ci3) , fenaleno (Ci3) , acefenantreno (Ci5) e aceantreno (Ci6) .

Alternativamente, os átomos do anel podem incluir um ou mais heteroátomos, como nos "grupos heteroarilo". Os exemplos de grupos heteroarilo monociclicos incluem, mas nao estáo limitados áqueles derivados de:

Ni: pirrol (azol) (C5) , piridina (azina) (C6) ; Oí: furano (oxol) (C5) ;

Si: tiofeno (tiol) (C5) ;

NiOi: oxazol (C5) , isoxazol (C5) , isoxazina (C6) ; N20i : oxadiazol (furazano) (C5) ; N30i : oxatriazol (C5) ; N1S1: tiazol (C5) , isotiazol (C5) ; N2: imidazol (1,3-diazol) (C5) , pirazol (1,2-diazol) (C5) , piridazina (1,2-diazina) (C6) , pirimidina (1,3-diazina) (C6) (por exemplo, citosina, timina, uracilo), pirazina (1,4-diazina) (C6) ; N3: triazol (C5) , triazina (C6) ; e, N4: tetrazol (C5) .

Os exemplos de heteroarilo que compreendem anéis fundidos incluem, mas näo estäo limitados a:

Cg (com 2 anéis fundidos) derivados de benzofurano (02), isobenzofurano (02) , indol (Ni) , isoindol (Ni) , indolizina (Ni) , indolina (Ni) , isoindolina (Ni) , purina (N4) (por exemplo, adenina, guanina), benzimidazol (N2) , indazol (N2) , benzoxazol (N404) , benzisoxazol (N404) , benzodioxol (02) , benzofurazano (N204) , benzotriazol (N3) , benzotiofurano (Si) , benzotiazol (N1S1) , benzotiadiazol (N2S) ; Cío (com 2 anéis fundidos) derivados de cromeno (Oí) , isocromeno (Oí) , cromano (Oí) , isocromano (Oí) , benzodioxano (02) , quinolina (Ni) , isoquinolina (Ni) , quinolizina (Ni) , benzoxazina (N1O1) , benzodiazina (N2) , piridopiridina (N2) , quinoxalina (N2) , quinazolina (N2) , cinolina (N2) , ftalazina (N2) , naftiridina (N2) , pteridina (N4) Cu (com 2 anéis fundidos) derivados de benzodiazepina (N2);Ci3 (com 3 anéis fundidos) derivados de carbazol (Ni) , dibenzofurano (Oí) , dibenzotiofeno (Si) , carbolina (N2) , perimidina (N2) , piridoindol (N2) ; e,

Ci4 (com 3 anéis fundidos) derivados de acridina (Ni) , xanteno (Oí) , tioxanteno (Si) , oxantreno (02) , fenoxatiina (O1S1) , fenazina (N2) , fenoxazina (N1O1) , fenotiazina (N1S1) , tiantreno (S2) , fenantridina (Ni) , fenantrolina (N2) , fenazina (N2) .

Halo: -F, -Cl, -Br e -I.

Hidroxi: -OH. Éter: -OR, em que R é um substituinte de éter, por exemplo, um grupo alquilo C1-7 (também referido como um grupo alcoxi de C3-7, discutido abaixo) , um grupo heterociclilo C3-20 (também referido como um grupo heterocicliloxi de C3-20) , ou um grupo arilo C5-20 (também referido como um grupo ariloxi Cs-2o) , preferentemente um grupo alquilo C1-7.

Alcoxi: -OR, em que R é um grupo alquilo, por exemplo, um grupo alquilo de C2-7. Os exemplos de grupos alcoxi C2-7 incluem, mas näo estäo limitados ao -OMe (metoxi) , -OEt (etoxi), -0 (nPr) (n-propoxi), -O(iPr) (isopropoxi), -0 (nBu) (n-butoxi), -O(sBu) (sec-butoxi), -O(iBu) (isobutoxi), e -0 (tBu) (terc-butoxi) .

Acetal: -CH(0R2) (OR2), em que R1 e R2 sao independentemente substituintes de acetal, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o, ou um grupo arilo C5-2o, preferentemente um grupo alquilo C1-7, ou, no caso de um grupo acetal "cíclico", R1 e R2, considerados juntos com os dois átomos de oxigénio aos quais eles estäo unidos, e os átomos de carbono aos quais eles estäo unidos, formam um anel heterocíclico tendo de 4 a 8 átomos no anel. Os exemplos de grupos acetal incluem, mas näo estäo limitados ao -CH(0Me)2, -CH(0Et)2, e -CH (OMe) (OEt) .

Hemiacetal: -CH(OH) (OR1), em que R1 é um substituinte de hemiacetal, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos hemiacetal incluem, mas näo estäo limitados ao -CH(OH) (OMe) e CH(OH)(OEt).

Cetal: -CR(0R2) (OR2), em que R1 e R2 säo como definidos para os acetáis, e R é um substituinte de cetal que näo o hidrogénio, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou urn grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos cetal incluem, mas näo estäo limitados ao -C(Me) (OMe)2, -C(Me) (OEt)2, -C(Me) (OMe) (OEt), -C (Et) (OMe)2, -C (Et) (OEt)2, e -C(Et) (OMe) (OEt) .

Hemicetal: -CR(OH) (OR1), em que R1 é como definido para os hemiacetais, e R é um substituinte de hemicetal que näo o hidrogénio, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-2o, ou um grupo arilo Cs-2o, preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos hemicetal incluem, mas näo estäo limitados ao -C(Me) (OH) (OMe), -C(Et) (OH) (OMe), -C(Me) (OH) (OEt), e -C(Et) (OH) (OEt) .

Oxo (ceto, -ona): =0.

Tiona (tiocetona): =S.

Imino (imina) : =NR, em que R é um substituinte de imino, por exemplo, hidrogénio, grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente hidrogénio ou um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos éster incluem, mas näo estäo limitados ao =NH, =NMe, =NEt, e =NPh.

Formilo (carbaldeído, carboxaldeído): -C(=0)H.

Acilo (ceto) : -C(=0)R, em que R é um substituinte de acilo, por exemplo, um grupo alquilo C1-7 (também referido como alquiladlo C1-7 ou alcanoílo C1-7) , um grupo heterociclilo C3-2o (também referido como heterociclilacilo 03-2o) , ou um grupo arilo C5-20 (também referido como arilacilo C5-20) , preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos acilo incluem, mas näo estäo limitados a -C (=0)CH3 (acetilo), -C(=0)CH2CH3 (propionilo), -C (=0) C (CH3) 3 (t-butirilo) e -C(=0)Ph (benzoílo, fenona) .

Carboxi (ácido carboxílico): -C(=0)0H.

Tiocarboxi (ácido tiocarboxílico): -C(=S)SH.

Tiolocarboxi (ácido tiolocarboxílico): -C(=0)SH.

Tionocarboxi (ácido tionocarboxílico): -C(=S)0H. Ácido imídico: -C(=NH)OH. Ácido hidroxámico: -C(=NOH)OH.

Ester (carboxilato, éster do ácido carboxilico, oxicarbonilo); -C (=0)OR, onde R é um substituinte de éster, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20/· ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos éster incluem, porém nao estáo limitados a -C(=0)0CH3, -C (=0) OCH2CH3, -C (=0) OC (CH3) 3, e -C(=0)0Ph.

Aciloxi (éster invertido): -0C(=0)R, em que R é um substituinte de aciloxi, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos aciloxi incluem, mas náo estáo limitados a -OC(=0)CH3 (acetoxi) , -OC (=0) CH2CH3, -OC (=0) C (CH3) 3, -OC (=0) Ph e -OC (=0) CH2Ph.

Oxicarboiloxi: -OC(=0)OR, em que R é um substituinte de éster, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos éster incluem, mas náo estáo limitados ao -0C(=0)0CH3, -OC (=0) OCH2CH3, -OC (=0) OC (CH3) 3 e -OC (=0) OPh.

Amino: -NR1R2, em que R1 e R2 sáo independentemente substituintes de amino, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo C2-7 (também referido como alquilamino C2-7 ou di-alquilomino C1-7) , um grupo heterociclilo C3-2o, ou um grupo arilo C5-2o, preferentemente H ou um grupo alquilo Ci_7, ou, no caso de um grupo amino "cíclico", R1 e R2, considerados juntos com o átomo de azoto ao qual estáo unidos, formam um anel heterocíclico tendo de 4 a 8 átomos no anel. Os grupos amino podem ser primários (-NH2) , secundários (-NHR1) , ou terciários (-NHR2R2) , e na forma catiónica, podem ser quaternários (-+NR2R2R3) . Os exemplos de grupos amino incluem, mas náo estáo limitados ao -NH2, -NHCH3, -NHC(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2, e -NHPh. Os exemplos de grupos amino cíclicos incluem, mas näo estäo limitados ao aziridino, azetidino, pirrolidino, piperidino, piperazino, morfolino, e tiomorfolino.

Amido (carbamoílo, carbamilo, aminocarbonilo, carboxamida) ; -C(=0)NR1R2, em que R1 e R2 sao independentemente substituintes de amino, como definidos para os grupos amino. Os exemplos de grupos amido incluem, mas näo estäo limitados ao -C(=0)NH2, -C(=0)NHCH3, -C (=0)N(CH3) 2, -c (=0)NHCH2CH3, e -c (=0) N (CH2CH3) 2, bem como grupos amido nos quais R1 e R2, juntos com o átomo de azoto ao quäl eles estäo unidos, formam urna estrutura heterocíclica, como em, por exemplo, piperidinocarbonilo, morfolinocarbonilo, tiomorfolinocarbonilo e piperazinocarbonilo.

Tioamido (tiocarbamilo) : -C( = S)NR2R2, em que R1 e R2 säo independentemente substituintes de amino, como definidos para os grupos amino. Os exemplos de grupos amido incluem, mas näo estäo limitados ao -C(=S)NH2, -C( = S)NHCH3, -C ( = S) N (CH3) 2, e -C ( = S) NHCH2CH3.

Acilamido (acilamino) : -NR1C(=0)R2, em que R1 é um substituinte de amida, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente hidrogénio ou um grupo alquilo Ci_7, e R2 é um substituinte de acilo, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-2o, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-7. Os exemplos de grupos acilamida incluem, mas näo estäo limitados a -NHC(=0)CH3 , -NHC (=0) CH2CH3, e -NHC(=0)Ph. R1 e R2 podem, juntos, formar urna estrutura cíclica, como em, por exemplo, succinimidilo, maleimidilo e ftalimidilo:

Aminocarboniloxi: -OC (=0) NR1R2, em que R1 e R2 säo independentemente substituintes de amino, como definidos para os grupos amino. Os exemplos de grupos aminocarboniloxi incluem, mas näo estäo limitados a 0C(=0)NH2, -0C(=0)NHMe, -0C(=0)NMe2 e -0C(=0)NEt2.

Ureido: -N (R1) CONR2R3, em que R2 e R3 säo independentemente substituintes de amino, como definidos para os grupos amino e R1 é um substituinte de ureido, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente hidrogénio ou um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos ureido incluem, mas näo estäo limitados a -NHC0NH2, NHCONHMe, -NHCONHEt, -NHC0NMe2, -NHC0NEt2, -NMeC0NH2, NMeCONHMe, -NMeCONHEt, -NMeC0NMe2, e -NMeC0NEt2.

Guanidino: -NH-C(=NH)NH2.

Tetrazolilo: um anel aromático de cinco elementos tendo quatro átomos de azoto e um átomo de carbono,

Imino: =NR, em que R é um substituinte de imino, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente H ou um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos imino incluem, mas näo estäo limitados a =NH, =NMe, e =NEt.

Amidina (amidino) : -C(=NR)NR2, em que cada R é um substituinte de amidina, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente H ou um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos amidina incluem, mas näo estäo limitados a -C(=NH)NH2, -C(=NH)NMe2, e -C (=NMe) NMe2.

Nitro: -N02.

Nitroso: -NO.

Azido: —N3 .

Ciano (nitrilo, carbonitrilo): -CN.

Isociano: -NC.

Cianato: -OCN.

Isocianato: -NCO.

Tiociano (tiocianato): -SCN.

Isotiociano (isotiocianato): -NCS.

Sulfidrilo (tiol, mercapto): -SH.

Tioéter (sulfeto): -SR, em que R é um substituinte de tioéter, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7 (também referido como um grupo alquiltio C1-7) , um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo Cs-2o, preferentemente um grupo alquilo C3-7. Os exemplos de grupos alquiltio C1-7 incluem, mas nao estäo limitados a -SCH3 e -SCH2CH3.

Dissulfeto: -SS-R, em que R é um substituinte de dissulfeto, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo C1-7 (também referido neste documento como dissulfeto de alquilo Ci_7) . Os exemplos de grupos dissulfeto de alquilo 02-7 incluem, mas näo estäo limitados a -SSCH3 e -SSCH2CH3.

Sulfina (sulfinilo, sulfoxido): -S(=0)R, em que R é um substituinte de sulfina, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos sulfina incluem, mas näo estäo limitados a -S(=0)CH3 e -S(=0)CH2CH3.

Sulfona (sulfonilo) : -S (=0) 2R, em que R é um substituinte de sulfona, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo C1-7. incluindo, por exemplo, um grupo alquilo C1-7 fluorado ou perfluorado. Os exemplos de grupos sulfona incluem, mas näo estäo limitados a -S (=0)2CH3 (metanossulfonilo, mesilo), -S (=0)2CF3 (triflilo) , -S (=0) 2CH2CH3 (esilo) , -S (=0) 2C4F9 (nonaflilo) , -S (=0) 2CH2CF3 (tresilo) , -S (=0) 2CH2CH2NH2 (taurilo) , -S(=0) 2Ph (fenilsulfonilo, besilo), 4-metilfenilsulfonilo (tosilo), 4-clorofenilsulfonilo (closilo), 4-bromofenilsulfonilo (brosilo), 4-nitrofenil (nosilo), 2-naftalenossulfonato (nafsilo) e sulfonato de 5-dimetilamino-naftalen-l-ilo (dansilo). Ácido sulfinico (sulfino) : -S (=0)OH, -SO2H. Ácido sulfónico (sulfo): -S(=0)20H, -S03H.

Sulfinato (éster do ácido sulfinico): -S(=0)OR; em que R é um substituinte de sulfinato, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20/· ou um grupo arilo C5-20/· preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos sulfinato incluem, mas näo estäo limitados a -S (=0)0CH3 (metoxissulfinilo; sulfinato de metilo) e -S(=0) OCH2CH3 (etoxissulfinilo; sulfinato de etilo).

Sulfonato (éster do ácido sulfónico) : -S (=0)20R, em que R é um substituinte de sulfonato, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20/· ou um grupo arilo C5-20/· preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos sulfonato incluem, mas näo estäo limitados a -S (=0) 2OCH3 (metoxissulfonilo; sulfonato de metilo) e -S (=0)2OCH2CH3 (etoxissulfonilo; sulfonato de etilo).

Sulfiniloxi: -0S(=0)R, em que R é um substituinte de sulfiniloxi, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-2or ou um grupo arilo C5-2or preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos sulfiniloxi incluem, mas näo estäo limitados a -OS(=0)CH3 e -OS (=0) CH2CH3.

Sulfoniloxi: -OS (=0) 2R, em que R é um substituinte de sulfoniloxi, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-2or ou um grupo arilo C5-2or preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos sulfoniloxi incluem, mas näo estäo limitados a -0S(=0)2CH3 (mesilato) e -OS (=0) 2CH2CH3 (esilato) .

Sulfato: -OS (=0) 20R; em que R é um substituinte de sulfato, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-20, preferentemente um grupo alquilo Ci_7. Os exemplos de grupos sulfato incluem, mas näo estäo limitados a -OS(=0)2OCH3 e -SO(=0)20CH2CH3.

Sulfamilo (sulfamoílo; amida de ácido sulfínico; sulfinamida) : -S(=0)NR1R2, em que R1 e R2 sao independentemente substituintes de amino, como definidos para os grupos amino. Os exemplos de grupos sulfamilo incluem, mas näo estäo limitados a -S(=0)NH2, -S (=0)NH(CH3) , -S(=0)N(CH3)2, -s (=0)NH (CH2CH3) , -s (=0) N (CH2CH3) 2, e -S (=0) NHPh .

Sulfonamido (sulfinamoílo; amida do ácido sulfónico; sulfonamida) : -S (=0) 2NR2R2, em que R1 e R2 sáo independentemente substituintes de amino, como definidos para os grupos amino. Os exemplos de grupos sulfonamido incluem, mas näo estäo limitados a -S(=0)2NH2, -S (=0) 2NH (CH3) , -S (=0) 2N (CH3) 2, -S (=0) 2NH (CH2CH3) , -s (=0)2N(CH2CH3)2, e -S (=0) 2NHPh .

Sulf amino: -NR2S (=0) 20H, em que R1 é um substituinte de amino, como definido para os grupos amino. Os exemplos de grupos sulfamino incluem, mas näo estäo limitados a -NHS(=0)20H e -N (CH3) S (=0) 20H.

Sulfonamino: -NR2S (=0) 2R, em que R1 é um substituinte de amino, como definido para os grupos amino, e R é um substituinte de sulfonamino, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o, ou um grupo arilo Cs-2o, preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos sulfonamino incluem, mas näo estäo limitados a -NHS(=0) 2CH3 e -N(CH3) S (=0)2C6H5.

Sulfinamino: -NR2S(=0)R, em que R1 é um substituinte de amino, como definido para os grupos amino, e R é um substituinte de sulfinamino, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-20, ou um grupo arilo C5-2o, preferentemente um grupo alquilo C1-7. Os exemplos de grupos sulfinamino incluem, mas näo estäo limitados ao , -NHS(=0)CH3 e -N (CH3) S (=0) C6H5.

Fosfino (fosfina) : -PR2, em que R é um substituinte de fosfino, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3_2or ou um grupo arilo C5-2o, preferentemente -H, um grupo alquilo C1-7, ou um grupo arilo C5-20· Os exemplos de grupos fosfino incluem, mas näo estäo limitados a -PH2, -P(CH3)2, -P(CH2CH3)2, -P (t-Bu) 2, e -P(Ph)2.

Fosfo: -P (=0)2 ·

Fosfinilo (oxido de fosfina) : -P(=0)R2, em que R é um substituinte de fosfinilo, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20r ou um grupo arilo C5-20/· preferentemente um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-20· Os exemplos de grupos fosfinilo incluem, mas näo estäo limitados a -P (=0) (CH3) 2, -P (=0) (CH2CH3) 2, -P (=0) (t-Bu) 2 e -P(=0) (Ph)2. Ácido fosfónico (fosfono) : -P (=0) (0H)2.

Fosfonato (éster de fosfono) : -P (=0) (OR)2, em que R é um substituinte de fosfonato, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20r ou um grupo arilo C5-2o, preferentemente -H, um grupo alquilo C1-7, ou um grupo arilo C5-20· Os exemplos de grupos fosfonato incluem, mas näo estäo limitados a -P (=0) (OCH3)2, -P (=0) (OCH2CH3)2, -P (=0) (O-t-Bu)2, e -P(=0) (OPh)2. Ácido fosfórico (fosfono): -0P(=0) (0H)2.

Fosfato (éster de fosfono) : -0P (=0) (0R)2, em que R é um substituinte de fosfato, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2cu ou um grupo arilo C5-2or preferentemente -H, um grupo alquilo C1-7, ou um grupo arilo C5-20· Os exemplos de grupos fosfato incluem, mas näo estäo limitados a -0P (=0) (OCH3)2, -0P (=0) (OCH2CH3)2, -0P(=0)(O-t-Bu)2, e -0P(=0)(OPh)2. Ácido fosforoso: -OP(OH)2.

Fosfito: -OP (OR) 2r em que R é um substituinte de fosfito, por exemplo, -H, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-20/· ou um grupo arilo C5-2or preferentemente -H, um grupo alquilo C1-7, ou um grupo arilo C5-20· Os exemplos de grupos fosfito incluem, mas nao estao limitados ao -OP(OCH3)2, -OP (OCH2CH3) 2, -0P (O-t-Bu) 2, e -OP(OPh)2.

Fosf oramidita: -OP (OR1) -NR22, em que R1 e R2 sao substituintes de fosforamidita, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7 (opcionalmente substituido) , um grupo heterociclilo C3-2or ou um grupo arilo C5-2or preferentemente -H, um grupo alquilo Ci_7, ou um grupo arilo C5-2o· Os exemplos de grupos fosforamidita incluem, mas nao estao limitados a -0P (OCH2CH3) -N (CH3) 2, -OP (OCH2CH3) -N (i-Pr) 2, e -OP (OCH2CH2CN) -N (i-Pr) 2 ·

Fosf oramidato: -OP (=0) (OR1)-NR22, em que R1 e R2 sao substituintes de fosforamidato, por exemplo, -H, um grupo alquilo Ci_7 (opcionalmente substituido) , um grupo heterociclilo C3-2or ou um grupo arilo C5-20/· preferentemente -H, um grupo alquilo C1-7, ou um grupo arilo C5-20· Os exemplos de grupos fosforamidato incluem, mas nao estao limitados a -0P (=0) (OCH2CH3)-N (CH3) 2, -0P (=0) (0CH2CH3) -N (i-

Pr) 2, e -0P (=0) (OCH2CH2CN)-N(i-Pr) 2.

Alquileno

Alquileno C3-12: 0 termo "alquileno C3-12", como utilizado neste documento, diz respeito a urna fragáo bidentada obtida por remogáo de dois átomos de hidrogénio, ambos a partir do mesmo átomo de carbono, ou urn a partir de cada um de dois átomos de carbono diferentes, de um composto de hidrocarboneto tendo de 3 a 12 átomos de carbono (salvo indicagáo em contrário), que pode ser alifática ou aliciclica, e que pode ser saturada, parcialmente insaturada, ou totalmente insaturada. Assim, o termo "alquileno" incluí as subclasses alquenileno, alquinileno, cicloalquileno, etc., discutidas abaixo.

Os exemplos de grupos alquileno C3-i2 saturados lineares incluem, mas näo estäo limitados a -(CH2) n-, onde n é um número inteiro de 3 a 12, por exemplo, -CH2CH2CH2- (propileno) , -CH2CH2CH2CH2- (butileno) , -CH2CH2CH2CH2CH2-(pentileno) e -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2- (heptileno) .

Os exemplos de grupos alquileno C3-22 saturados ramificados incluem, mas näo estäo limitados a -CH (CH3) CH2-, -CH (CH3) CH2CH2-, -CH (CH3) ch2ch2ch2-, -ch2ch (CH3) ch2-, -ch2ch (CH3) ch2ch2-, -CH (CH2CH3)-, -CH (CH2CH3) ch2-, e -ch2ch (CH2CH3) ch2-.

Os exemplos de grupos alquileno C3-22 parcialmente insaturados lineares (grupos alquenileno, e alquinileno, C3_i2) incluem, mas näo estäo limitados a -CH=CH-CH2-, -CH2- ch=ch2-, -ch=ch-ch2-ch2-, -ch=ch-ch2-ch2-ch2-, -ch=ch-ch=ch-, -ch=ch-ch=ch-ch2-, -ch=ch-ch=ch-ch2-ch2-, -ch=ch-ch2-ch=ch-, -ch=ch-ch2-ch2-ch=ch-, e -CH2-C=C-CH2-.

Os exemplos de grupos alquileno C3-22 parcialmente insaturados ramificados (grupos alquenileno e alquinileno C3-i2) incluem, mas näo estäo limitados a -C(CH3)=CH-, -C (CH3) =ch-ch2-, -CH=CH-CH (CH3) - e -C^C-CH (CH3)-.

Os exemplos de grupos alquileno C3-22 saturados alicíclicos (cicloalquilenos C3-22) incluem, mas näo estäo limitados a ciclopentileno (por exemplo, ciclopent-1,3-ileno), e cicloexileno (por exemplo, cicloex-1,4-ileno).

Os exemplos de grupos alquileno C3-22 parcialmente insaturados alicíclicos (cicloalquilenos C3-22) incluem, mas näo estäo limitados a ciclopentenileno (por exemplo, 4-ciclopenten-1,3-ileno) , cicloexenileno (por exemplo, 2-cicloexen-l,4-ileno; 3-cicloexen-l,2-ileño; 2,5-cicloexadien-l,4-ileno).

Grupo protetor de oxigénio: o termo "grupo protetor de oxigénio" refere-se a urna fragäo que mascara um grupo hidroxi, e estes säo bastante conhecidos na técnica. Um grande número de grupos adequados é descrito ñas páginas 23 a 200 de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in

Organic Synthesis, 3a Edigäo, John Wiley & Sons, Inc., 1999. As classes de interesse particular incluem os éteres sililicos (por exemplo, TMS, TBDMS), os éteres metílicos substituidos (por exemplo, THP) e os ásteres (por exemplo, acetato).

Grupo protetor de azoto de carbamato: o termo "grupo protetor de azoto de carbamato" diz respeito a urna fragáo que mascara o azoto na ligagáo de imina, e estes sao bastante conhecidos na técnica. Estes grupos tém a seguinte estrutura:

em que R'10 é R como definido acima. Um grande número de grupos adequados é descrito ñas páginas 503 a 549 de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3- Edigäo, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

Grupo protetor de azoto hemiaminal: o termo "grupo protetor de azoto hemiaminal" diz respeito a urn grupo tendo a seguinte estrutura:

em que R'10 é R como definido acima. Urn grande número de grupos adequados é descrito ñas páginas 633 a 647 como grupos protetores de amida de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3- Edigäo, John Wiley & Sons, Inc., 1999. Métodos de Tratamento

Os compostos da presente invengäo podem ser utilizados num método de terapéutica. O termo "quantidade terapéuticamente eficaz" é urna quantidade suficiente para mostrar beneficio para um paciente. Tal beneficio pode ser pelo menos a melhoria de pelo menos um síntoma. A quantidade real administrada, e a taxa e o curso de tempo de administragáo, dependeráo da natureza e da gravidade do que está a ser tratado. A prescrigáo do tratamento, por exemplo, as decisöes sobre a dosagem, está dentro da responsabilidade dos profissionais gerais e de outros médicos.

Um composto pode ser administrado sozinho ou em combinagäo com outros tratamentos, simultanea ou sequencialmente, dependendo da condigäo a ser tratada. Os exemplos de tratamentos e terapéuticas incluem, mas nao estáo limitados a quimioterapia (a administragáo de agentes ativos, incluindo, por exemplo, fármacos; cirurgia; e radioterapia.

As composigöes farmacéuticas de acordo com a presente invengáo, e para utilizagáo de acordo com a presente invengáo, podem compreender, além do ingrediente ativo, ou seja, um composto de fórmula I, um excipiente, veiculo, tampáo, estabilizador ou outros materials bem conhecidos para os peritos na especialidade, farmacéuticamente aceitáveis. Tais materials devem ser nao tóxicos e nao devem interferir com a eficácia do ingrediente ativo. A natureza exata do veiculo ou de outro material dependerá da via de administragáo, que pode ser oral, ou por injegáo, por exemplo, cutánea, subcutánea ou intravenosa.

As composigöes farmacéuticas para a administragáo oral podem estar na forma de comprimidos, cápsulas, pós ou líquidos. Um comprimido pode compreender um veiculo sólido ou um adjuvante. As composigöes farmacéuticas líquidas geralmente compreendem um veiculo líquido, tal como a água, o petróleo, os óleos animáis ou vegetáis, o óleo mineral ou o óleo sintético. A solugáo salina fisiológica, a dextrose ou outra solugáo de sacarídeo ou os glicóis, tais como o etileno glicol, o propilenoglicol ou o polietilenoglicol, podem ser incluidos. Urna cápsula pode compreender um veiculo sólido, tal como urna gelatina.

Para a injegáo intravenosa, cutánea ou subcutánea, ou a injegáo no local da afegáo, o ingrediente ativo estará na forma de urna solugáo aguosa parentericamente aceitável, a qual é isenta de agentes pirogénicos e tem pH, isotonicidade e estabilidade adequados. Aqueles peritos na especialidade säo bastante capazes de preparar solugóes adequadas utilizando, por exemplo, veículos isotónicos, tais como a Injegáo de Cloreto de Sodio, a Injegáo de Ringer, a Injegáo de Lactato de Ringer. Os conservantes, os estabilizadores, os tampöes, os antioxidantes e/ou outros aditivos podem ser incluidos, conforme necessário.

Incluí Outras Formas

Salvo indicagáo em contrário, estáo incluidas no acima descrito as formas iónicas, de sal, de solvato, e protegidas, bem conhecidas, destes substituintes. Por exemplo, urna referencia ao ácido carboxílico (-COOH) também incluí a forma aniónica (carboxilato) (-C00-) , um sal ou solvato da mesma, bem como as formas protegidas convencionais. De forma semelhante, urna referencia a um grupo amino incluí a forma protonada (-N+HR1R2) , um sal ou solvato do grupo amino, por exemplo, um sal de cloridrato, bem como as formas protegidas convencionais de um grupo amino. De forma semelhante, urna referencia a um grupo hidroxilo também incluí a forma aniónica (-0-) , um sal ou solvato da mesma, bem como as formas convencionais protegidas.

Sais

Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar, e/ou manusear um sal correspondente do composto ativo, por exemplo, um sal farmacéuticamente aceitável. Os exemplos de sais farmacéuticamente aceitáveis säo discutidos em Berg, et al., J. Pharm. Sei., 66, 1-19 (1977) .

Por exemplo, se o composto for aniónico, ou tiver um grupo funcional que possa ser aniónico (por exemplo, o -COOH pode ser -C00~) , entáo pode ser formado urn sal com um catiäo adequado. Os exemplos de catióes inorgánicos adequados incluem, mas náo estáo limitados aos ióes de metáis alcalinos, tais como Na+ e K+, catióes alcalinos terrosos, tais como Ca2+ e Mg2+, e outros catites, tais como Al+3. Os exemplos de catiöes orgánicos adequados incluem, mas nao estáo limitados ao iáo amonio (ou seja, NH4+) e ides amonio substituidos (por exemplo, NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR4+). Os exemplos de alguns ides amonio adequados substituidos sao aqueles derivados de: etilamina, dietilamina, dicicloexilamina, trietilamina, butilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, colina, meglumina, e trometamina, bem como aminoácidos, tais como Usina e arginina. Um exemplo de um iáo amonio quaternário comum é N(CH3) 4+.

Se o composto for catiónico, ou tiver um grupo funcional que possa ser catiónico (por exemplo, o -NH2 pode ser -NH3+) , entáo pode ser formado urn sal com um aniäo adequado. Os exemplos de anides inorgánicos adequados incluem, mas nao estáo limitados aqueles derivados dos seguintes ácidos inorgánicos: cloridrico, bromidrico, iodidrico, sulfúrico, sulfuroso, nítrico, nitroso, fosfórico e fosforoso.

Os exemplos de anides orgánicos adequados incluem, mas náo estáo limitados áqueles derivados a partir dos seguintes ácidos orgánicos: 2-acetioxibenzoico, acético, ascórbico, aspártico, benzoico, canforassulfonico, cinámico, cítrico, edético, etanodissulfónico, etanossulfónico, fumárico, gliceptónico, glicónico, glutámico, glicólico, hidroximaleico, hidroxinaftaleno carboxilico, isetiónico, láctico, lactobiónico, láurico, maleico, málico, metanossulfónico, múcico, oleico, oxálico, palmítico, pamoico, pantoténico, fenilacético, fenilssulfónico, propiónico, pirúvico, salicilico, esteárico, succínico, sulfanílico, tartárico, toluenossulfónico e valérico. Os exemplos de anides orgánicos poliméricos adequados incluem, mas náo estáo limitados áqueles derivados a partir dos seguintes ácidos poliméricos: ácido tánico, carboximetil celulose.

Solvatos

Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar, e/ou manusear um solvato correspondente do composto ativo. 0 termo "solvato" é utilizado neste documento no sentido convencional para referir-se a um complexo de soluto (por exemplo, composto ativo, sal de composto ativo) e solvente. Se o solvente for a água, o solvato pode ser convenientemente referido como um hidrato, por exemplo, um mono-hidrato, um di-hidrato, um tri-hidrato, etc.

Carbinolamíñas A invengáo incluí os compostos onde um solvente se junta através da ligagáo de imina da porgäo de PBD, que é ilustrado abaixo onde o solvente é a água ou um álcool (RaOH, onde RA é alquilo C1-4) :

Estas formas podem ser chamadas as formas de carbinolamina e éter de carbinolamina da PBD. 0 balango destes equilibrios depende das condigóes ñas quais os compostos sao encontrados, bem como da natureza da fragáo propriamente dita. Estes compostos particulares podem ser isolados na forma sólida, por exemplo, por liofilizagáo. Isómeros

Certos compostos podem existir numa ou mais formas geométricas, óticas, enantioméricas, diastereoisoméricas, epiméricas, atrópicas, estereoisoméricas, tautoméricas, conformacionais, ou anoméricas, incluindo, mas nao limitadas as formas cis e trans; formas E e Z; formas c, t e r; formas endo e exo; formas R, S, e meso; formas D e L; formas del; formas ( + ) e (-) ; formas ceto, enol, e enolato; formas sin e anti; formas sinclinais e anticlinais; formas a e ß; formas axiais e equatoriais; formas de barco, cadeira, espiral, envelope, e meia cadeira; e combinagöes das mesmas, doravante coletivamente referidas como "isómeros" (ou "formas isoméricas") .

Observar que, exceto conforme discutido abaixo para as formas tautoméricas, estäo específicamente excluidos do termo "isómeros", como utilizado neste documento, os isómeros estruturais (ou constitucionais) (ou seja, isómeros que diferem ñas ligagóes entre os átomos, em vez de meramente pela posigáo dos átomos no espago). Por exemplo, urna referencia a um grupo metoxi, -OCH3, nao deve ser interpretada como urna referencia ao seu isómero estrutural, um grupo hidroximetilo, -CH2OH. De forma semelhante, urna referencia a orto-clorofenilo nao deve ser interpretada como urna referencia ao seu isómero estrutural, meta-clorofenilo. No entanto, urna referencia a urna classe de estruturas pode incluir as formas estruturalmente isoméricas que incidam nesta classe (por exemplo, alquilo C1-7 incluí n-propilo e iso-propilo; butilo incluí n-, iso-, sec-, e tere-butilo; metoxifenilo incluí orto-, meta- e para-metoxifenilo). A exclusáo acima mencionada nao diz respeito ás formas tautoméricas, por exemplo, as formas ceto, enol, e enolato, como, por exemplo, nos seguintes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrado abaixo), imina/enamina, amida/imino álcool, amidina/amidina, nitroso/oxima, tiocetona/enetiol, N-nitroso/hidroxiazo e nitro/aci-nitro.

Observar que estäo específicamente incluidos no termo "isómero" compostos com urna ou mais substituigóes isotópicas. Por exemplo, H pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 2H, 2H (D) e 3H (T) ; C pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 12C, 13C e 14C; 0 pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 160 e 180; e semelhantes.

Salvo indicagáo em contrário, urna referencia a um composto particular incluí todas as tais formas isoméricas, incluindo racémicas (total ou parcialmente) e outras misturas das mesmas. Os métodos para a preparagao (por exemplo, a síntese assimétrica) e a separagáo (por exemplo, a cristalizagáo fracionária e os meios cromatográficos) de tais formas isoméricas sao conhecidos na técnica ou sao prontamente obtidos por adaptagáo dos métodos ensinados neste documento, ou de métodos conhecidos, de um modo conhecido. Vías sintéticas gerais A síntese dos compostos de PBD é extensivamente discutida ñas referencias a seguir: a) documento WO 00/12508 (páginas 14 a 30); b) documento WO 2005/023814 (páginas 3 a 10); c) documento WO 2004/043963 (páginas 28 a 29); e d) documento WO 2005/085251 (páginas 30 a 39) .

Via de síntese

Os compostos da presente invengáo, onde R10 e R11 formam urna ligagáo dupla azoto-carbono entre os átomos de azoto e carbono aos quais estáo ligados, podem ser sintetizados a partir de um composto de Fórmula 2:

onde R2, R6, R7, R9, R6', R7', R9', R12, X, X' e R" sao como definidos para os compostos de fórmula I, ProtN é um grupo protetor de azoto para a síntese e Prot° é um grupo de oxigénio protegido para a síntese ou um grupo oxo, por desprotegáo da ligagáo de imina por métodos padráo. O composto produzido pode estar na sua forma de carbinolamina ou éter de carbinolamina, dependendo dos solventes utilizados. Por exemplo, se ProtN for Alloc e Prot0 for um grupo protetor de oxigénio para a sintese, entäo a desprotegäo é conduzida utilizando o paládio para remover o grupo protetor de N10, seguida pela eliminagäo do grupo protetor de oxigénio para a sintese. Se ProtN for Troc e Prot0 for um grupo protetor de oxigénio para a sintese, entäo a desprotegäo é realizada utilizando urn par Cd/Pd para produzir o composto de fórmula (I). Se ProtN for SEM, ou um grupo análogo, e Prot0 for um grupo oxo, entäo o grupo oxo pode ser removido por redugäo, o que resulta num intermediário de carbinolamina protegido, o qual pode entäo ser tratado para remover o grupo protetor de SEM, seguida pela eliminagäo da água. A redugäo do composto de Fórmula 2 pode ser efetuada, por exemplo, através do tetraborohidreto de litio, enquanto que um meio adequado para remover o grupo protetor de SEM é o tratamento com gel de silica.

Os compostos de fórmula 2 podem ser sintetizados a partir de um composto de fórmula 3a:

onde R2, R6, R7, R9, R6', R7', R9', X, X' e R" säo como definidos para os compostos de fórmula 2, por acoplamento de um derivado organometálico compreendendo R12, tal como um derivado de organoboro. O derivado de organoboro pode ser um boronato ou o ácido borónico.

Os compostos de fórmula 2 podem ser sintetizados a partir de um composto de fórmula 3b:

onde R12, R6, R7, R9, R6', R7', R9', X, X' e R" sao como definidos para os compostos de fórmula 2, por acoplamento de um derivado organometálico compreendendo R2, tal como um derivado de organoboro. 0 derivado de organoboro pode ser um boronato ou o ácido borónico.

Os compostos de fórmulas 3a e 3b podem ser sintetizados a partir de um composto de fórmula 4:

onde R2, R6, R7, R9, R6', R7', R9', X, X' e R" sao como definidos para os compostos de fórmula 2, por acoplamento de aproximadamente um único equivalente (por exemplo, 0,9 ou 1 a 1,1 ou 1,2) de um derivado organometálico, tal como um derivado de oroganoboro, compreendendo R2 ou R12.

Os acoplamentos descritos acima sao normalmente realizados na presenga de um catalisador de paládio, por exemplo, Pd(PPh3)4, Pd(OCOCH3)2, PdCl2, Pd2(dba)3. O acoplamento pode ser realizado sob condigöes padráo, ou pode também ser realizado sob condigóes de micro-ondas.

As duas etapas de acoplamento sao normalmente realizadas de modo sequencial. Elas podem ser realizadas com ou sem a purificagáo entre as duas etapas. Se nao for realizada nenhuma purificagáo, entáo as duas etapas podem ser realizadas no mesmo recipiente de reagáo. A purificagáo é normalmente necessária após a segunda etapa de acoplamento. A purificagäo do composto a partir dos subprodutos indesejados pode ser realizada por cromatografía em coluna ou separagao por permuta iónica. A síntese dos compostos de fórmula 4, onde Prot0 é um grupo oxo e ProtN é SEM, é descrita em detalhe no documento WO 00/12508. Em particular, é feita referencia ao esquema 7 na página 24, onde o composto acima mencionado é designado como intermediário P. Este método de síntese é também descrito no documento W0 2004/043963. A síntese dos compostos de fórmula 4, onde Prot0 é um grupo de oxigénio protegido para a síntese, é descrita no documento WO 2005/085251.

Os compostos de fórmula I, onde R10 e R10' säo H e R11 e R11 säo SOzM, podem ser sintetizados a partir dos compostos de fórmula I, onde R10 e R11 formam urna ligagáo dupla azoto-carbono entre os átomos de azoto e carbono aos quais eles estáo ligados, pela adigáo do sal de bissulfito ou do sal de sulfinato apropriado, seguida por urna etapa de purificagáo apropriada. Sao descritos métodos adicionáis no documento GB 2 053 894.

Grupos protetores de azoto para síntese

Os grupos protetores de azoto para síntese sao bastante conhecidos na técnica. Na presente invengáo, os grupos protetores de interesse particular sao os grupos protetores de azoto de carbamato e os grupos protetores de azoto hemiaminais.

Os grupos protetores de azoto de carbamato tém a seguinte estrutura:

em que R'10 é R como definido acima. Um grande número de grupos adequados é descrito ñas páginas 503 a 549 de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3- Edigäo, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

Os grupos protetores particularmente preferidos incluem Troc, Teoc, Fmoc, BOC, Doc, Hoc, TcBOC, 1-Adoc e 2-Adoc .

Os outros grupos possíveis sao o nitrobenziloxicarbonilo (por exemplo, o 4- nitrobenziloxicarbonilo) e o 2- (fenilsulfonil)etoxicarbonilo.

Os grupos protetores que podem ser removidos com o catalisador de paládio näo säo preferidos, por exemplo, Alloc.

Os grupos protetores de azoto hemiaminais tém a seguinte estrutura:

em que R'10 é R como definido acima. Um grande número de grupos adequados é descrito ñas páginas 633 a 647 como grupos protetores de amida de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3- Edigäo, John Wiley & Sons, Inc., 1999. Os grupos divulgados neste documento podem ser aplicados aos compostos da presente invengäo. Tais grupos incluem, mas näo estáo limitados a SEM, MOM, MTM, MEM, BOM, nitro ou BOM substituido com metoxi, Cl3CCH2OCH2-.

Grupo de oxigénio protegido para síntese 0 grupo de oxigénio protegido para sintese é bem conhecido na técnica. Um grande número de grupos protetores de oxigénio adequados é descrito ñas páginas 23 a 200 de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3- Edigäo, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

As classes de particular interesse incluem os éteres sililicos, os éteres metílicos, os éteres alquílicos, os éteres benzílicos, os ásteres, os acetatos, os benzoatos, os carbonatos e os sulfonatos.

Os grupos protetores de oxigénio preferidos incluem os acetatos, o TBS e o THP.

Preferencias Adicionáis

As preferencias a seguir podem aplicar-se a todos os aspetos da invengáo como descrito acima, ou podem relacionar-se com urn único aspeto. As preferencias podem ser combinadas conjuntamente em qualquer combinagäo.

Em algumas formas de realizagäo, R6’, R7’, R9’, R10’, R11’ e Y' säo preferentemente os mesmos que R5, R7, R9, R10, R11 e Y, respetivamente.

Ligagäo do dimero Y e Y' säo preferentemente 0. R" é preferentemente um grupo alquileno C3-7 sem nenhum substituinte. Mais preferentemente, R" é um alquileno C3, C5 ou C7. R6 a R9 R9 é preferentemente Η. R6 é preferentemente selecionado a partir de H, OH, OR, SH, NH2, nitro e halo, e é mais preferentemente H ou halo, e mais preferentemente aínda é H. R7 é preferentemente selecionado a partir de H, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', e halo, e mais preferentemente independentemente selecionado a partir de H, OH e OR, onde R é preferentemente selecionado a partir de grupos alquilo C1-7 , heterociclilo C3-i0 e arilo C5-i0 opcionalmente substituidos. R pode ser mais preferentemente um grupo alquilo C1-4, que pode ou nao ser substituido. Um substituinte de interesse é um grupo arilo C5-6 (por exemplo, fenilo). Os substituintes particularmente preferidos ñas posigöes 7 säo OMe e 0CH2Ph.

Estas preferencias aplicam-se a R9’, R6’ e R7’, respetivamente. R2 A em R2 pode ser um grupo fenilo ou um grupo heteroarilo C5-7, por exemplo, furanilo, tiofenilo e piridilo. Em algumas formas de realizagäo, A é preferentemente fenilo. Em outras formas de realizagäo, A é preferentemente tiofenilo, por exemplo, tiofen-2-ilo e tiofen-3-ilo. X é um grupo selecionado a partir da lista que compreende: OH, SH, CO2H, COH, N=C=0 e NHRn, em que RN é selecionado a partir do grupo que compreende H e alquilo C1-4. X pode preferentemente ser: OH, SH, CO2H, -N=C=0 ou NH2, e pode mais preferentemente ser: OH, SH, ou NH2, e mais preferentemente é NH2. Q2-X pode estar sobre quaisquer dos átomos do anel disponíveis do grupo arilo C5-7, mas está preferentemente sobre um átomo do anel que nao está adjacente á ligagáo ao restante do composto, ou seja, ele está preferentemente ß ou y em relagáo á ligagáo ao restante do composto. Portanto, onde o grupo arilo C5-7 (A) for fenilo, o substituinte (Q2-X) está preferentemente ñas posigoes meta ou para, e mais preferentemente está na posigáo para.

Em algumas formas de realizagäo, Q1 é urna ligagáo simples. Nestas formas de realizagäo, Q2 é selecionado a partir de urna ligagáo simples e -Z-(Cñ2)n~r onde Z é selecionado a partir de urna ligagáo simples, 0, S e NH e é de 1 a 3. Em algumas destas formas de realizagäo, Q2 é urna ligagáo simples. Em outras formas de realizagäo, Q2 é -Z-(CH2) n—· Nestas formas de realizagäo, Z pode ser 0 ou S e n pode ser 1 ou n pode ser 2. Em outras destas formas de realizagäo, Z pode ser urna ligagáo simples e n pode ser 1.

Em outras formas de realizagäo, Q1 é -CH=CH-.

Em algumas formas de realizagäo, R2 pode ser -A-CH2-X e -A-X. Nestas formas de realizagäo, X pode ser OH, SH, C02H, COH e NH2. Ñas formas de realizagäo particularmente preferidas, X pode ser NH2. R12 R12 pode ser um grupo arilo C5-7. Um grupo arilo C5-7 pode ser um grupo fenilo ou um grupo heteroarilo C5-7, por exemplo, furanilo, tiofenilo e piridilo. Em algumas formas de realizagäo, R12 é preferentemente fenilo. Em outras formas de realizagäo, R12 é preferentemente tiofenilo, por exemplo, tiofen-2-ilo e tiofen-3-ilo. R12 pode ser um arilo Cg-ior por exemplo, um grupo quinolinilo ou isoquinolinilo. 0 grupo quinolinilo ou isoquinolinilo pode ser ligado ao núcleo da PBD através de qualquer posigäo do anel disponível. Por exemplo, quinolinilo pode ser quinolin-2-ilo, quinolin-3-ilo, quinolin-4-ilo, quinolin-5-ilo, quinolin-6-ilo, quinolin-7-ilo e quinolin-8-ilo. Destas, quinolin-3-ilo e quinolin-6-ilo podem ser preferidos. Isoquinolinilo pode ser isoquinolin-l-ilo, isoquinolin-3-ilo, isoquinolin-4-ilo, isoquinolin-5-ilo, isoquinolin-6-ilo, isoquinolin-7-ilo e isoquinolin-8-ilo. Destas, isoquinolin-3-ilo e isoquinolin-6-ilo podem ser preferidos. R12 pode confer qualquer número de grupos substituintes. Ele preferentemente contém de 1 a 3 grupos substituintes, com 1 e 2 sendo mais preferido, e os grupos individualmente substituidos sendo mais preferidos. Os substituintes podem estar em qualquer posigäo.

Onde R12 for um grupo arilo C5-7, um único substituinte está preferentemente sobre um átomo do anel que nao está adjacente ä ligagáo ao restante do composto, ou seja, está preferentemente ß ou y em relagäo a ligagáo do restante do composto. Portanto, onde o grupo arilo C5-7 for fenilo, o substituinte está preferentemente ñas posigdes meta ou para, e mais preferentemente está na posigäo para.

Onde R12 for um grupo arilo Cs-icv por exemplo, quinolinilo ou isoquinolinilo, ele pode confer qualquer número de substituintes em qualquer posigäo dos anéis de quinolina ou isoquinolina. Em algumas formas de realizagäo, ele contém um, dois ou tres subst ituintes, e estes podem estar sobre quaisquer dos anéis proximais e distais ou sobre ambos (se mais do que um substituinte).

Subst ituintes de R12

Se um substituinte sobre R12 for o halo, ele é preferentemente F ou Cl, mais preferentemente C1.

Se um substituinte sobre R12 for éter, ele pode em algumas formas de realizagäo ser um grupo alcoxi, por exemplo, um grupo alcoxi C1-7 (por exemplo, metoxi, etoxi) ou ele pode em algumas formas de realizagäo ser um grupo ariloxi C5-7 (por exemplo, fenoxi, piridiloxi, furaniloxi). 0 grupo alcoxi pode, ele próprio, ser adicionalmente substituido, por exemplo, por um grupo amino (por exemplo, dimetilamino).

Se um substituinte sobre R12 for alquilo C1-7, ele pode preferentemente ser um grupo alquilo C1-4 (por exemplo, metilo, etilo, propilo, butilo).

Se um substituinte sobre R12 for urna heterociclilo C3_ 7, ele pode, em algumas formas de realizagäo, ser um grupo heterociclilo contendo azoto Ce, por exemplo, morfolino, tiomorfolino, piperidinilo, piperazinilo. Estes grupos podem ser ligados ao restante da fragäo de PBD através do átomo de azoto. Estes grupos podem ser adicionalmente substituidos, por exemplo, por grupos alquilo C1-4. Se o grupo heterociclilo contendo azoto C6 for piperazinilo, o dito substituinte adicional pode estar sobre o segundo átomo de azoto do anel.

Se um substituinte sobre R12 for o bis-oxi-alquileno C1-3, este é preferentemente o bis-oxi-met ileno ou o bis-oxi-etileno.

Os substituintes particularmente preferidos para R12 incluem o metoxi, o etoxi, o flúor, o cloro, o ciano, o bis-oxi-metileno, o metil-piperazinilo, o morfolino e o metil-tiofenilo. Um outro substituinte particularmente preferido para R12 é o dimetilaminopropiloxi.

Grupos R12

Os grupos R12 substituidos particularmente preferidos incluem, mas näo estáo limitados a 4-metoxi-fenilo, 3-metoxifenilo, 4-etoxi-fenilo, 3-etoxi-fenilo, 4-flúor-fenilo, 4-cloro-fenilo, 3,4-bisoximetileno-fenilo, 4-metiltiofenilo, 4-cianofenilo, 4-fenoxifenilo, quinolin-3- ilo e quinolin-6-ilo, isoquinolin-3-ilo e isoquinolin-6-ilo, 2-tienilo, 2-furanilo, metoxinaftilo e naftilo. Um outro grupo R12 substituido possivel é o 4-nitrofenilo. M e z

Prefere-se que M e M' sejam catiöes monovalentes farmacéuticamente aceitáveis, e sejam mais preferentemente o Na+. z é preferentemente 3. 3° aspeto

As preferencias expressas acima para o primeiro aspecto podem-se aplicar aos compostos deste aspeto, quando apropriado. R10 pode ser preferentemente Troc.

Quando R11 for O-Prot0, Prot0 pode ser preferentemente TBS . R10 pode ser preferentemente SEM.

Exemplos Métodos Experimentáis Gerais

As rotagóes ópticas foram medidas sobre um polarimetro ADP 220 (Bellingham Stanley Ltd.) e as concentragóes (c) sao dadas em g/100 mi. Os pontos de fusáo foram medidos utilizando um aparelho digital de pontos de fusáo (Electrothermal). Os espectros de IV foram registados sobre um Espectrómetro de IV Spectrum 1000 FT da Perkin-Elmer. Os espectros de RMN 2H e 13C foram adquiridos a 300 K utilizando um espectrómetro de RMN Bruker Avance a 400 e 100 MHz, respetivamente. Os desvios químicos sao descritos em relagäo ao TMS (δ = 0,0 ppm), e os sinais sao especificados como s (singleto), d (dupleto), t (tripleto), dt (tripleto duplo), dd (dupleto de dupletos), ddd (duplete duplo de dupletes) ou m (multipleto) , com as constantes de acoplamento dadas em Hertz (Hz). Os dados de espectroscopia de massa (MS) foram recolhidos utilizando um instrumento Micromass ZQ da Waters acoplado a urna HPLC 2695 da Waters com um PDA 2996 da Waters. Os parámetros do Micromass ZQ da

Waters utilizados foram: Tubo Capilar (kV) 3,38; Cone (V), 35; Extrator (V), 3,0; Temperatura da tonte (°C), 100;

Temperatura de Dessolvatagäo (°C), 200; Taxa de fluxo cone (1/h) , 50: Taxa de fluxo de dessolvatagäo (1/h) , 250. Os dados de espectroscopia de massa de alta resolugäo (HRMS) foram registados sobre um Micromass QTQF Global da Waters no modo W positivo, utilizando pontas de vidro de borossilicato revestidas com metal para introduzir as amostras no instrumento. A Cromatografía em Camada Fina (TLC) foi efetuada sobre placas de aluminio de gel de silica (Merck 60, F254) , e a cromatografía flash utilizou o gel de silica (Merck 60, malha de 230-400 ASTM). Exceto pelo HOBt (NovaBiochem) e pelos reagentes suportados por sólido (Argonaut), todas as outras substancias químicas e solventes foram adquiridos da Sigma-Aldrich e foram utilizados como fornecidos, sem purificagáo adicional. Os solventes anidros foram preparados por destilagáo sob urna atmosfera de azoto seco, na presenga de um agente secante apropriado, e foram armazenados sobre peneiras moleculares de 4 A ou filamento de sodio. O éter de petróleo refere-se ä fragäo que ferve a 40-60 °C. O composto Ib foi sintetizado conforme descrito no documento WO 00/012508 (composto 210).

Condigöes gerais da LC/MS: A HPLC (Alliance 2695 da Waters) foi executada utilizando urna fase móvel de água (A) (ácido fórmico a 0,1%) e acetonitrilo (B) (ácido fórmico a 0,1%) . Gradiente: composigáo inicial 5% de B durante 1,0 min, entáo 5% de B a 95% de B dentro de 3 min. A composigáo foi mantida durante 0,5 min a 95% de B, e entáo retornou para 5% de B em 0,3 minuto. O tempo de corrida do gradiente total é igual a 5 min. Taxa de fluxo 3,0 ml/min, 400 μΐ foram divididos por meio de urna pega em T de volume morto zero que passa no espectrómetro de massa. Intervalo de detegáo do comprimento de onda: 220 a 400 nm. Tipo de fungáo: arranjo de diodo (535 varrimentos). Coluna:

Phenomenex® Onyx Monolithic C18 50 x 4,60 mm

Condigöes da LC/MS específicas para os compostos protegidos tanto por urn grupo Troc quanto um TBDMs: A separagäo cromatográfica dos compostos protegidos por Troc e TBDMS foi efetuada sobre um sistema de HPLC Alliance 2695 da Waters utiizando urna coluna de fase invertida Onyx Monolitic (partículas de 3 μιη, 50 x 4,6 mm) da Phenomenex Corp. A fase móvel A consistía em 5% de acetonitrilo - 95 % de água contendo 0,1% de ácido fórmico, e a fase móvel B consistía em 95% de acetonitrilo - 5% de água contendo 0,1% de ácido fórmico. Após 1 min a 5% de B, a proporgäo de B foi aumentada para 95% de B durante os 2,5 min seguintes e mantida a 95% de B por 1 min mais, antes de retornar para 95% de A em 10 s e re-equilibragáo durante 50 s adicionáis, dando um tempo de corrida total de 5,0 min. A taxa de fluxo foi mantida a 3,0 ml/min.

Condigöes da LC/MS especificas para o composto 33: A LC foi executada sobre um Administrador de amostra 2767 da Waters acoplado com um detetor de arranjo de fotodiodo 2996 da Waters e um Espectrómetro de massa de um único quadrupolo ZQ da Waters. A coluna usada foi Luna Phenyl-Hexyl 150 x 4, 60 mm, 5 pm, Pega n£ 00F-4257-E0 (Phenomenex). As fases movéis empregues foram:

Fase móvel A: 100% de água grau HPLC (0,05% de trietilamina), pH = 7

Fase móvel B: 20% de água grau HPLC e 80% de acetonitrilo grau HPLC (0,05% de trietilamina), pH = 7

Os gradientes utilizados foram:

Tempo (min) Taxa de fluxo (ml/min) % de A % de B

Inicial 1,50 90 10 1.0 1,50 90 10 16, 0 1,50 64 36 30.0 1,50 5 95 31.0 1,50 90 10 32.0 1,50 90 10 A Espectrometría de Massa foi realizada no modo de iäo positivo e SIR (monitor de iäo seletivo) e o iäo monitorizado foi m/z = 727,2.

Sintese dos intermediärios-chave

(a) !,!'-[[ (Propano-1,3-diil)dioxi]bis[(5-metoxi-2-nitro- 1, 4-fenileno)carbonil]]bis[(2S, 4R)-meti1-4-hidroxipirrolidina-2-carboxilato] (2a) Método A: Urna quantidade catalítica de DMF (2 gotas)

foi adicionada a urna solugäo agitada do nitro-ácido la (1,0 g, 2,15 mmoles) e cloreto de oxalilo (0,95 mi, 1,36 g, 10,7 mmoles) em THF seco (20 mi). A mistura de reagáo foi deixada a agitar durante 16 horas, ä temperatura ambiente, e o solvente foi removido por evaporagäo in vacuo. O residuo resultante foi dissolvido novamente em THF seco (20 ml) e a solugäo de cloreto de ácido foi adicionada, gota a gota, a urna mistura agitada de cloridrato de (2S,4R)-metil-4-hidroxipirrolidina-2-carboxilato (859 mg, 4,73 mmoles) e TEA (6,6 mi, 4,79 g, 47,3 mmoles) em THF (10 ml), a -30 °C (gelo seco/etilenoglicol) , sob urna atmosfera de azoto. A mistura de reagáo foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante 3 horas adicionáis, após cujo tempo a TLC (CHCl3/MeOH a 95:5 v/v) e a LC/MS (2,45 min (ES + ) m/z (intensidade relativa) 721 ( [M + H]+', 20)) revelaram a formagáo de produto. O THF em excesso foi removido por evaporagäo rotativa e o residuo resultante foi dissolvido em DCM (50 mi). A camada orgánica foi lavada com HCl a IN (2 x 15 ml) , NaHC03 saturado (2 x 15 ml) , H20 (20 ml), salmoura (30 ml) e seca (MgSCg) . A filtragäo e a evaporagäo do solvente deram o produto bruto como um óleo de cor escura. A purificagäo por cromatografía flash (eluigáo do gradiente: 100% CHC13 até CHCl3/MeOH a 96:4 v/v) isolou a amida 2a pura como um vidro de cor laranja (840 mg, 54%). Método B: O cloreto de oxalilo (9,75 mi, 14,2 g, 111 mmoles) foi adicionado a urna suspensáo agitada do nitro-ácido la (17,3 g, 37,1 mmoles) e DMF (2 mi) em DCM anidro (200 mi) . Após a efervescencia inicial, a suspensáo de reagáo tornou-se urna solugáo e a mistura foi deixada a agitar a temperatura ambiente durante 16 horas. A conversáo no cloreto de ácido foi confirmada por tratamento de urna amostra da mistura de reagáo com o MeOH e o éster bis- metílico resultante foi observado por LC/MS. A maior parte do solvente foi removida por evaporagäo in vacuo, a solugáo concentrada resultante foi dissolvida novamente numa quantidade mínima de DCM seco e triturada com éter dietílico. O precipitado amarelo resultante foi acumulado por filtragäo, lavado com éter dietilico gelado e seco durante 1 hora num forno a vácuo, a 40 °C. O cloreto de ácido sólido foi adicionado, em porgóes, durante um período de 25 minutos, a urna suspensáo agitada de cloridrato de (2S,AR)-metil-4-hidroxipirrolidina-2-carboxilato (15,2 g, 84,0 mmoles) e TEA (25,7 mi, 18,7 g, 185 mmoles) em DCM (150 ml), a -40 °C (gelo seco/CH3CN). Imediatamente, a reagáo estava completa, conforme avallado por LC/MS (2,47 min (ES+) m/z (intensidade relativa) 721 {[M + H]+', 100)). A mistura foi diluida com DCM (150 ml) e lavada com HCl a IN (300 ml), NaHCCt saturado (300 ml), salmoura (300 ml), filtrada (através de urn separador de fases) e o solvente evaporado in vacuo para dar o produto 2a puro como um sólido laranja (21,8 g, 82%).

Dados analíticos: [CC]22D = -4 6,1° (c = 0,47, CHC13) ; RMN 2H (400 MHz, CDC13) (rotameros) δ 7,63 (s, 2H) , 6,82 (s, 2H), 4,79-4,72 (m, 2H), 4,49-4,28 (m, 6H), 3,96 (s, 6H) , 3,79 (s, 6H) , 3,46-3,38 (m, 2H) , 3,02 (d, 2H, J =

11,1 Hz), 2,48-2,30 (m, 4H) , 2,29-2,04 (m, 4H) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13) (rotameros) δ 172,4, 166,7, 154,6, 148,4, 137,2, 127,0, 109,7, 108,2, 69,7, 65,1, 57,4, 57,0, 56,7, 52,4, 37,8, 29, 0; IV (ATR, CHC13) 3410 (1), 3010, 2953, 1741, 1622, 1577, 1519, 1455, 1429, 1334, 1274, 1211, 1177, 1072, 1050, 1008, 871 cm-1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 721 ( [M + H]+', 47), 388 (80); HRMS [M + H]+' C3iH36N40i6 teórico m/z 721,2199, encontrado (ES+) m/z 721,2227. (a) 1,1'-[[ (Pentano-1,5-diil)dioxi]bis[(5-metoxi-2-nitro~ 1, 4-fenileno)carbonil]]bis[(2S, 4R)-met i 1-4-hidroxipirrolidina-2-carboxilato] (2b) A preparagáo a partir de Ib de acordo com o Método B deu o produto puro como urna espuma laranja (75,5 g, 82%).

Dados Analíticos: (ES+) m/z (intensidade relativa) 749 ([M + H]+', 100) . (b) !,!'-[[ (Propano-1,3-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2- (hidroxi) - 7-metoxi-l ,2,3,10,11, lla-hexaidro-5H-pirrolo [2, Ιο] [1,4] -benzodiazepin-5,11 -diona] (3a) Método A: Urna suspensáo de Pd/C a 10% (7,5 g, 10% p/p) em DMF (40 mi) foi adicionada a urna solugäo do nitro-éster 2a (75 g, 104 mmoles) em DMF (360 mi) . A suspensáo foi hidrogenada num aparelho de hidrogenagáo Parr, durante 8 horas. O progresso da reagáo foi monitorizado por LC/MS (2,12 min (ES + ) m/z (intensidade relativa) 597 ( [M + H]+', 100), (ES-) m/z (intensidade relativa) 595 ([M + H]+', 100) após a absorgäo do hidrogénio ter parado. O Pd/C sólido foi removido por filtragäo e o filtrado foi concentrado por evaporagáo rotativa sob vácuo (abaixo de 1 kPa (10 mbar)), a 40 °C, para proporcionar um óleo escuro contendo vestigios de DMF e carváo vegetal residual. O residuo foi digerido em EtOH (500 ml) a 40 °C sobre um banho-maria (banho do evaporador rotativo) e a suspensáo resultante foi filtrada através de celite e lavada com etanol (500 mi) para dar um filtrado claro. O hidrato de hidrazina (10 mi, 321 mmoles) foi adicionado ä solugäo e a mistura de reagáo foi aquecida ao refluxo. Após 20 minutos, foi observada a formagäo de um precipitado branco e o refluxo foi deixado continuar durante 30 minutos adicionáis. A mistura foi deixada arrefecer até ä temperatura ambiente e o precipitado foi recuperado por filtragäo, lavado com éter dietilico (2*1 volume de precipitado) e seco num dessecador a vácuo para proporcionar 3a (50 g, 81%). Método B: Urna solugäo do nitro-éster 2a (6,80 g, 9,44 mmoles) em MeOH (300 mL) foi adicionada ao níquel Raney® (4 pontas da espátula grande de urna pasta fluida a -50% em H20) e gránulos anti-impacto, num frasco de fundo redondo de 3 gargalos. A mistura foi aquecida ao refluxo e entáo tratada, gota a gota, com urna solugäo de hidrato de hidrazina (5,88 mi, 6,05 g, 188 mmoles) em MeOH (50 mi), em cujo ponto observou-se urna efervescencia vigorosa. Quando a adigáo estava completa (~ 30 minutos) foi adicionado níquel Raney® adicional, cuidadosamente, até a efervescencia ter cessado e a cor amarela inicial da mistura de reagáo foi descarregada. A mistura foi aquecida ao refluxo durante 30 minutos adicionáis, em cujo ponto a reagáo foi considerada completa por TLC (CHCl3/MeOH a 90:10 v/v) e LC/MS (2,12 min (ES + ) m/z (intensidade relativa) 597 ( [M + H]+', 100)). A mistura de reagáo foi deixada arrefecer até aproximadamente 40 °C e entáo o níquel em excesso removido por filtragäo através de um funil de sinterizar, sem sucgao a vácuo. 0 filtrado foi reduzido no volume por evaporagäo in vacuo, em cujo ponto se formou um precipitado incolor, o qual foi acumulado por filtragáo e seco num dessecador a vácuo para proporcionar 3a (5,40 g, 96%).

Dados analíticos: [oc] 27D = +404° (c = 0,10, DMF) ; RMN 3Η (400 MHz, DMS0-d6) δ 10,2 (s, 2H, NH) , 7,26 (s, 2H) , 6,73 (s, 2H) , 5,11 (d, 2H, J= 3,98 Hz, OH), 4,32-4,27 (m, 2H) , 4,19-4,07 (m, 6H) , 3,78 (s, 6H) , 3,62 (dd, 2H, J = 12.1, 3,60 Hz), 3,43 (dd, 2H, J= 12,0, 4,72 Hz), 2,67-2,57 (m, 2H) , 2,26 (p, 2H, J= 5,90 Hz), 1, 99-1, 89 (m, 2H) ; RMN 13C (100 MHz, DMSO-de) δ 169, 1, 164, 0, 149, 9, 144,5, 129, 8, 117.1, 111,3, 104,5, 54,8, 54,4, 53,1, 33,5, 27,5; IV (ATR, puro) 3438, 1680, 1654, 1610, 1605, 1516, 1490, 1434, 1379, 1263, 1234, 1216, 1177, 1156, 1115, 1089, 1038, 1018, 952, 870 cm-1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 619 ( [M +

Na]+', 10), 597 ( [M + H]+-, 52), 445 (12), 326 (11); HRMS [M + H]+' C29H32N4O10 teórico m/z 597,2191, encontrado (ES+) m/z 597,2205. (b) 1,1' - [ [ (Pentano-1,5-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2-(hidroxi) -7-metoxi-l, 2, 3, 10, 11, 1 la-hexahidro~5H- pirrolo[2,1-c][1, 4]-benzodiazepin-5,11-diona] (3b) A preparagáo a partir de 2b de acordo com o Método A deu o produto como um sólido branco (22,1 g, 86%) .

Dados analíticos: MS (ES-) m/z (intensidade relativa) 623.3 ( [M - Η]-', 100) ; (c) 1, 1' - [ [ (Propano-1,3-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2- (tere but ildimetil sil iloxi )-7-metoxi-l,2,3,10,11,lla-hexaidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-diona] (4a) O TBSC1 (317 mg, 2,1 mmoles) e o imidazol (342 mg, 5.03 mmoles) foram adicionados a urna solugäo turva da tetralactam 3a (250 mg, 0,42 mmol) em DMF anidra (6 ml). A mistura foi deixada agitar sob urna atmosfera de azoto durante 3 horas, após cujo tempo a reagáo foi considerada completa, conforme avallado por LC/MS (3,90 min (ES+) m/z (intensidade relativa) 825 ([Μ + Η]+', 100)). A mistura de reagäo foi vertida sobre gelo (~ 25 ml) e deixada aquecer até a temperatura ambiente, com agitagäo. O precipitado branco resultante foi acumulado por filtragao a vácuo, lavado com H20, éter dietílico e seco no dessecador a vácuo para proporcionar 4a puro (252 mg, 73%).

Dados analíticos: [CC]23D = +234° (c = 0,41, CHC13) ; RMN 3H (400 MHz, CDC13) δ 8,65 (s, 2H, N H) , 7,44 (s, 2H) , 6,54 (s, 2H), 4,50 (p, 2H, J= 5,38 Hz), 4,21-4,10 (m, 6H), 3,87 (s, 6H) , 3,73-3, 63 (m, 4H) , 2,85-2,79 (m, 2H) , 2,36-2,29 (m, 2H) , 2,07-1, 99 (m, 2H) , 0,86 (s, 18H), 0,08 (s, 12H) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13) δ 170,4, 165,7, 151,4, 146, 6, 129,7, 118,9, 112,8, 105,3, 69,2, 65,4, 56,3, 55,7, 54,2, 35,2, 28,7, 25,7, 18, 0, -4,82 e -4,86; IV (ATR, CHC13) 3235, 2955, 2926, 2855, 1698, 1695, 1603, 1518, 1491, 1446, 1380, 1356, 1251, 1220, 1120, 1099, 1033 cm'1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 825 ([M + H]+', 62), 721 (14), 440 (38); HRMS [M + H]+' C4iH6oN4010SÍ2 teórico m/z 825,3921, encontrado (ES+) m/z 825,3948. (c) !,!'-[[ (Pentano-1,5-diil) dioxi]bis (1 laS, 2R) -2 - (terc- butildimetilsililoxi)-7-metoxi-l,2,3,10,11,1la-hexaidro~5H-pirrolo[2, 1-c][1, 4]-benzodiazepin-5,11-diona] (4b) A preparagáo a partir de 3b de acordo com o método descrito acima deu o produto como um sólido branco (27,3 g, 93%) .

Dados analíticos: MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 853, 8 {[M + H]+', 100), (ES') m/z (intensidade relativa) 851, 6 ( [M - Η]-', 100. (d) 1, 1' - [ [ (Propano-1,3-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2- (terc-butildimetilsililoxi)-7-metoxi-10- ( (2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-1,2,3,10,11,lla-hexahidro~5H-pirrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-diona] (5a)

Urna solugáo de n-BuLi (4,17 mL de urna solugáo a 1,6 M em hexano, 6,67 mmoles) em THF anidro (10 mi) foi adicionada, gota a gota, a urna suspensáo agitada da tetralactam 4a (2,20 g, 2,67 mmoles) em THF anidro (30 ml), a -30 °C (gelo seco/etilenoglicol), sob urna atmosfera de azoto. A mistura de reagäo foi deixada agitar nesta temperatura durante 1 hora (agora urna cor laranja avermelhada), em cujo ponto urna solugäo de SEMC1 (1,18 mi, 1,11 g, 6,67 mmoles) em THF anidro (10 mi) foi adicionada, gota a gota. A mistura de reagäo foi deixada aguecer lentamente até ä temperatura ambiente e foi agitada durante 16 horas, sob urna atmosfera de azoto. A reagäo foi considerada completa, conforme avallada por TLC (EtOAc) e LC/MS (4,77 min (ES + ) m/z (intensidade relativa) 1085 ( [M + H]+', 100)) . O THF foi removido por evaporagäo in vacuo e o residuo resultante dissolvido em EtOAc (60 mi), lavado com H20 (20 mL) , salmoura (20 mi) , seco (MgS04) , filtrado e evaporado in vacuo para proporcionar o produto bruto. A purificagäo por cromatografía flash (Hexano/EtOAc a 80:20 v/v) deu a tetralactam protegida com SEM em N10 5a como um óleo (2,37 g, 82%).

Dados analíticos: [CC]23D = +163° (c = 0,41, CHC13) ; RMN 3H (400 MHz, CDC13) δ 7,33 (s, 2H) , 7,22 (s, 2H) , 5,47 (d, 2H, J= 9,98 Hz), 4,68 (d, 2H, J= 9,99 Hz), 4,57 (p, 2H, J = 5,77 Hz), 4,29-4,19 (m, 6H), 3,89 (s, 6H), 3,79-3,51 (m, 8H), 2,87-2,81 (m, 2H), 2,41 (p, 2H, J = 5,81 Hz), 2,03-1,90 (m, 2H) , 1,02-0,81 (m, 22H) , 0,09 (s, 12H) , 0,01 (s, 18H) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13) δ 170, 0, 165,7, 151,2, 147,5, 133, 8, 121,8, 111, 6, 106, 9, 78, 1, 69, 6, 67, 1, 65,5, 56, 6, 56,3, 53,7, 35,6, 30,0, 25,8, 18,4, 18,1, -1,24, -4,73; IV (ATR, CHCI3) 2951, 1685, 1640, 1606, 1517, 1462, 1433, 1360, 1247, 1127, 1065 cm-1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 1113 ([M+Na]+', 48), 1085 ( [M + H]+', 100), 1009 (5), 813 (6); HRMS [M + H]+' C53H88N4O12SÍ4 teórico m/z 1085,5548, encontrado (ES+) m/z 1085,5542. (d) 1, 1' - [ [ (Pentano-1,5-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2- (terc- butildimetilsililoxi)-7-metoxi-10- ( (2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-1,2,3,10,11,1la-hexahidro~5H- pirrólo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-diona] (5b) A preparagáo a partir de 4b de acordo com o método descrito acima deu o produto como urna espuma laranja clara (46,9 g, 100%), utilizado sem purificagäo adicional.

Dados analíticos: MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 1114 ( [M + H]+', 90), (ES-) m/z (intensidade relativa) 1158 ( [M + 2Na]-·, 100) . (e) !,!'-[[ (Propano-1,3-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2-hidroxi- 7-metoxi-l0-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1,2,3,10,11, lla-hexahidro~5H-pirrolo [2, 1-c] [1,4]-benzodiazepin-5,11-diona] (6a)

Urna solugäo de TBAF (5,24 mi de urna solugäo a 1,0 M em THF, 5,24 mmoles) foi adicionada a urna solugäo agitada do éter bis-silílico 5a (2,58 g, 2,38 mmoles) em THF (40 mi), ä temperatura ambiente. Após agitar durante 3,5 horas, a análise da mistura de reagáo por TLC (CHCl3/MeOH a 95:5 v/v) revelou o término da reagáo. A mistura de reagáo foi vertida numa solugäo de NH4C1 saturado (100 mi) e extraída com EtOAc (3 x 30 mi) . As camadas orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 mi), secas (MgS04) , filtradas e evaporadas in vacuo para proporcionar o produto bruto. A purificagäo por cromatografía flash (eluigáo do gradiente: 100% CHC13 até CHCl3/MeOH a 96:4 v/v) deu a tetralactam 6a pura como urna espuma branca (1,78 g, 87%) .

Dados analíticos: [OC] 23D = +202° (c = 0,34, CHC13) ; RMN 3Η (400 MHz, CDC13) δ 7,28 (s, 2H) , 7,20 (s, 2H) , 5,44 (d, 2H, J= 10,0 Hz), 4,72 (d, 2H, J= 10,0 Hz), 4,61-4,58 (m, 2H) , 4,25 (t, 4H, J = 5,83 Hz), 4,20-4,16 (m, 2H) , 3,91-3,85 (m, 8H) , 3,77-3, 54 (m, 6H) , 3,01 (s 1, 2H, OH), 2,96-2,90 (m, 2H) , 2,38 (p, 2H, J= 5,77 Hz), 2,11-2,05 (m, 2H) , 1,00-0,91 (m, 4H) , 0,00 (s, 18H) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13) δ 169,5, 165, 9, 151,3, 147,4, 133,7, 121,5, 111, 6, 106, 9, 79,4, 69,3, 67,2, 65,2, 56,5, 56,2, 54,1, 35,2, 29,1, 18,4, -1,23; IV (ATR, CHC13) 2956, 1684, 1625, 1604, 1518, 1464, 1434, 1361, 1238, 1058, 1021 cm-1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 885 ( [Μ + 29]+', 70), 857 ([Μ + H]+', 100), 711 (8), 448 (17); H RMS [Μ + H]+' C4iH6oN4012SÍ2 teórico m/z 857,3819, encontrado (ES+) m/z 857,3826. (e) !,!'-[[ (Pentano-1,5-diil) dioxi]bis (llaS, 2R) -2- hidroxi-7-metoxi-l0-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1,2,3,10,11, 1 la-hexahidro~5H-pirrolo [2, 1-c] [1,4]-benzodiazepin-5,11-diona] (6b) A preparagáo a partir de 5b de acordo com o método descrito acima deu o produto como urna espuma branca (15,02 g) ·

Dados analíticos: MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 886 ([M + H ]+', 10), 739, 6 (100), (ES-) m/z (intensidade relativa) 884 ( [M - H]-', 40) . (f) !,!'-[[ (Propano-1,3-diil) dioxi ] bis [ (llaS)-ll-sulfo-7- metoxi-2-oxo-10- ( (2- (trimetilsilil)etoxi)metil)1,2,3,10,11,lla-hexahidro~5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5,11-diona]] (7a) Método A: Urna solugäo de hipoclorito de sodio a 0,37 M (142,5 ml, 52,71 mmoles, 2,4 eq) foi adicionada, gota a gota, a urna mistura vigorosamente agitada do diol 6a (18,8 g, 21,96 mmoles, 1 eq), TEMPO (0,069 g, 0,44 mmol, 0,02 eq) e solugäo a 0,5 M de brometo de potássio (8,9 mi, 4,4 mmoles, 0,2 eq) em DCM (115 ml), a 0 °C. A temperatura foi mantida entre 0 °C e 5 °C por ajuste da taxa de adigáo. A emulsáo amarela resultante foi agitada a 0 °C até 5 °C durante 1 hora. A TLC (EtOAc) e a LC/MS [3,53 min. (ES + ) m/z (intensidade relativa) 875 ( [M + Na]+', 50), (ES-) m/z (intensidade relativa) 852 ( [M - H]-', 100)] indicaram que a reagáo estava completa. A mistura de reagáo foi filtrada, a camada orgánica separada e a camada aquosa foi retrolavada com DCM (x 2) . As porgóes orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura (x 1), secadas (MgS04) e evaporadas para dar urna espuma amarela. A purificagáo por cromatografía em coluna flash (eluigáo do gradiente n-hexano/EtOAc a 35/65 v/v, n- hexano/EtOAc a 30/70 até 25/75 v/v) proporcionou a bis-cetona 7a como urna espuma branca (14,1 g, 75%).

Utilizou-se urna solugäo de hipoclorito de sodio, grau reagente, disponível em cloro 10-13%. Este foi assumido ser 10% (10 g de NaClO em 100 g) e calculado ser 1,34 M em

NaClO. Urna solugäo mae foi preparada a partir deste diluindo-o até 0,37 M com água. Isto deu urna solugäo de aproximadamente pH 14. O pH foi ajustado para 9,3 a 9,4 pela adigáo de NaHCCt sólido. Urna alíquota desta solug4ao mäe foi entáo utilizada de modo a dar 2,4 mol eq. para a reagáo. Na adigáo da solugäo de alvejante, foi observado um aumento inicial na temperatura. A taxa de adigáo foi controlada, para manter a temperatura entre 0 °C a 5 °C. A mistura de reagáo formou urna emulsáo de cor amarela limáo, espessa. A oxidagáo foi urna adaptagáo do procedimento descrito em Thomas Fey et al, J. Org. Chem., 2001, 66, 8154-8159. Método B: O TCCA sólido (10,6 g, 45,6 mmoles) foi adicionado, em porgóes, a urna solugäo agitada do álcool 6a

(18,05 g, 21,1 mmoles) e TEMPO (123 mg, 0,78 mmol) em DCM anidro (700 ml), a 0 °C (gelo/acetona). A mistura de reagáo foi agitada a 0 °C, sob urna atmosfera de azoto, durante 15 minutos, após cujo tempo a TLC (EtOAc) e a LC/MS [3,57 min (ES + ) m/z (intensidade relativa) 875 ( [M + Na]+', 50)] revelaram o término da reagáo. A mistura de reagáo foi filtrada através de celite e o filtrado foi lavado com NaHC03 aquoso saturado (400 mi) , salmoura (400 mi) , seco (MgS04) , filtrado e evaporado in vacuo para proporcionar o produto bruto. A purificagáo por cromatografía em coluna flash (EtOAc/Hexano a 80:20 v/v) proporcionou a bis-cetona 7a como urna espuma (11,7 g, 65%). Método C: Urna solugäo de DMSO anidro (0,72 mi, 0,84 g, 10,5 mmoles) em DCM seco (18 mi) foi adicionada, gota a gota, durante um período de 25 min, a urna solugäo agitada de cloreto de oxalilo (2,63 mi de urna solugäo a 2,0 M em

DCM, 5,26 moles), sob urna atmosfera de azoto, a -60 °C (N2 liq./CHCl3) . Após agitar a -55 °C durante 20 minutos, urna pasta fluida do substrato 6a (1,5 g, 1,75 mmol) em DCM seco (36 ml) foi adicionada, gota a gota, durante urn período de 30 min, ä mistura de reagäo. Após agitar por uns 50 minutos mais, a -55 °C, urna solugäo de TEA (3,42 mi, 2,49 g; 24,6 mmoles) em DCM seco (18 mi) foi adicionada, gota a gota, durante um período de 20 min, ä mistura de reagäo. A mistura de reagäo agitada foi deixada aguecer até a temperatura ambiente (—1,5 h) e entäo diluida com DCM (50 mi) . A solugäo orgánica foi lavada com HCl a 1 N (2 x 25 ml), H20 (30 ml), salmoura (30 ml) e seca (MgS04) . A filtragäo e a evaporagäo do solvente in vacuo proporcionaram o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografía em coluna flash (EtOAc/Hexano a 80:20 v/v) para proporcionar a bis-cetona 7a como urna espuma (835 mg, 56%)

Dados analíticos: [CC]20D = +291° (c = 0,26, CHC13) ; RMN 2H (400 MHz, CDC13) δ 7,32 (s, 2H) , 7,25 (s, 2H) , 5,50 (d, 2H, J= 10,1 Hz), 4,75 (d, 2H, J= 10,1 Hz), 4,60 (dd, 2H, J= 9,85, 3,07 Hz), 4,31-4,18 (m, 6H), 3,89-3,84 (m, 8H), 3,78-3,62 (m, 4H), 3,55 (dd, 2H, J = 19,2, 2,85 Hz), 2,76 (dd, 2H, J = 19,2, 9,90 Hz), 2,42 (p, 2H, J = 5,77 Hz), 0,98-0,91 (m, 4H) , 0,00 (s, 18H) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13) δ 206, 8, 168, 8, 165, 9, 151,8, 148, 0, 133, 9, 120, 9, 111, 6, 107,2, 78,2, 67,3, 65, 6, 56,3, 54, 9, 52,4, 37,4, 29, 0, 18,4, -1,24; IV (ATR, CHC13) 2957, 1763, 1685, 1644, 1606, 1516, 1457, 1434, 1360, 1247, 1209, 1098, 1066, 1023 cirf1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 881 ( [M + 2 9]+', 38), 853 ( [M + H ]+', 100), 707 (8), 542 (12); HRMS [M + H]+' C4iH56N4Oi2Si2 teórico m/z 853,3506, encontrado (ES+) m/z 853,3502. (f) !,!'-[[ (Pentano-1,5-diil) dioxi]bis [ (llaS) -ll-sulfo-7- metoxi-2-oxo-10- ( (2- trimetilsilil)etoxi)metil)1,2,3,10,11,1la-hexahidro-5H- pirrólo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5,11-diona]] (7b) A preparagáo a partir de 6b de acordo com o Método C deu o produto como urna espuma branca (10,5 g, 76%).

Dados analíticos: MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 882 ( [M + H]+', 30), 735 (100), (ES-) m/z (intensidade relativa) 925 ([Μ+45Γ', 100), 880 ([M-H]-', 70). (g) !,!'-[[ (Propano-1,3-diil) dioxi]bis (llaS) - 7-metoxi-2- [[(trifluormetil)sulfonil]oxi]-10-((2- (trimetilsilil)etoxi) metil)-1,10,11,lla-tetrahidro~5H-pirrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-diona] (8a) A 2,6-lutidina anidra (5,15 mi, 4,74 g, 44,2 mmoles) foi injetada numa porgao a urna solugäo vigorosamente agitada de bis-cetona 7a (6,08 g, 7,1 mmoles) em DCM seco (180 ml), a -45 °C (banho de arrefecimento de gelo seco/acetonitrilo), sob urna atmosfera de azoto. O anidrido tríflico anidro, obtido a partir de urna ampola recentemente aberta (7,2 mi, 12,08 g, 42,8 mmoles), foi injetado rápidamente, gota a gota, ao mesmo tempo mantendo a temperatura a -40 °C ou abaixo. A mistura de reagáo foi deixada agitar a -45 °C durante 1 hora, em cujo ponto a TLC (n-hexano/EtOAc a 50/50 v/v) revelou o consumo completo do material de partida. A mistura de reagáo gelada foi imediatamente diluida com DCM (200 ml) e, com agitagáo vigorosa, lavada com água (1 x 100 ml), solugäo a 5% de ácido cítrico (1 x 200 mi), NaHCCb saturado (200 mi), salmoura (100 mi) e seca (MgSCh) . A filtragáo e a evaporagáo do solvente in vacuo proporcionarais o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografía em coluna flash (eluigáo do gradiente: n-hexano/EtOAc a 90:10 v/v até n-hexano/EtOAc a 70:30 v/v).

Dados analíticos: [CC]24D = +271° (c = 0,18, CHC13) ; RMN 4H (400 MHz, CDC13) δ 7,33 (s, 2H) , 7,26 (s, 2H) , 7,14 (t,

2H, J= 1,97 Hz), 5,51 (d, 2H, J= 10,1 Hz), 4,76 (d, 2H, J

= 10,1 Hz), 4,62 (dd, 2H, J= 11,0, 3,69 Hz), 4,32-4,23 (m, 4H), 3,94-3,90 (m, 8H), 3,81-3,64 (m, 4H), 3,16 (ddd, 2H, J = 16,3, 11,0, 2,36 Hz), 2,43 (p, 2H, J = 5,85 Hz), 1,23-0,92 (m, 4H) , 0,02 (s, 18H); RMN 13C (100 MHz, CDC13) δ 167,1, 162,7, 151,9, 148,0, 138,4, 133,6, 120,2, 118,8, 111, 9, 107,4, 78, 6, 67,5, 65, 6, 56,7, 56,3, 30,8, 29, 0, 18,4, -1,25; IV (ATR, CHC13) 2958, 1690, 1646, 1605, 1517, 1456, 1428, 1360, 1327, 1207, 1136, 1096, 1060, 1022, 938, 913 cm-1; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 1144 ( [M + 2 8 ]+', 100), 1117 ( [M + H]+', 48), 1041 (40), 578 (8); HRMS [M + H]+' C43H54N4O16SÍ2S2F6 teórico m/z 1117,2491, encontrado (ES+) m/z 1117,2465. (g) !,!'-[[ (Pentano-1,5-diil) di oxi]bis (llaS) -7-metoxi-2- [ [ (trifluormetil) sulfonil] oxi] -10 - ( (2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-1,10,11,lla-tetrahidro~5H-pirrolo[2, 1-c][1, 4]-benzodiazepin-5,11-diona] (8b) A preparagäo a partir de 7b de acordo com o método descrito acima deu o triflato de bis-enol como urna espuma amarela clara (6,14 g, 82%).

Dados analíticos: (ES+) m/z (intensidade relativa) 1146 ([M + H]+', 85) .

Exemplo 1

(a) (S)-2-(4-aminofenil)-7-metoxi-8-(3-((S)-7-metoxi-2- (trifluormetilsulfonil) -5, ll-dioxo-10- ((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-5,10,11,1 la-tetrahidro-lH-pirrolo [2, 1-c] [1, 4]benzodiazepin-8-iloxi)propoxi)-10-( (2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-lH-pirrolo[2,1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (9) O Pd(PPh3)4 sólido (20,18 mg, 17,46 mmoles) foi

adicionado a urna solugáo agitada do triflato 8a (975 mg, 0,87 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboralano-2-il) anilina (172 mg, 0,79 mmol) e Na2CC>3 (138 mg, 3,98 moles) em tolueno (13 ml), EtOH (6,5 mL) e H20 (6,5 ml). A solugáo escura foi deixada agitar sob urna atmosfera de azoto, durante 24 horas, após cujo tempo a análise por TLC (EtOAc) e LC/MS revelou a formagáo do produto monoacoplado e bem como a presenga de material de partida nao reagido. O solvente foi removido por evaporagáo rotativa, sob pressáo reduzida, e o residuo resultante dividido entre a H20 (100 mi) e o EtOAc (100 mi), após a separagáo final das camadas, a fase aquosa foi extraída novamente com EtOAc (2 x 25 mi). As camadas orgánicas combinadas foram lavadas com H20 (50 mi), salmoura (60 mi), secas (MgSCg) , filtradas e evaporadas in vacuo para proporcionar o produto de Suzuki bruto. O produto de Suzuki bruto foi submetido a cromatografía flash (40% de EtOAc/60% de Hexano -^70% de EtOAc, 30% de Hexano). A remogáo do eluente em excesso por evaporagao rotativa, sob pressáo reduzida, proporcionou o produto 9 desejado (399 mg) em 43% de rendimento. RMN-1H: (CDC13, 400 MHz) δ 7,40 (s, 1H) , 7,33 (s, 1H) , 7,27 (si, 3H) , 7,24 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,15 (t, 1H, J = 2,0 Hz), 6,66 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,52 (d, 2H, J = 10,0 Hz), 4,77 (d, 1H, J= 10,0 Hz), 4,76 (d, 1H, J= 10,0 Hz), 4,62 ( dd, 1H, J = 3,7, 11,0 Hz), 4,58 (dd, 1H, J = 3,4, 10,6

Hz), 4,29 (t, 4H, J = 5,6 Hz), 4, 00-3,85 (m, 8H) , 3,80 - 3,60 (m, 4H) , 3,16 (ddd, 1H, J= 2,4, 11,0, 16,3 Hz), 3,11 (ddd, 1H, J = 2,2, 10,5, 16,1 Hz), 2,43 (p, 2H, J = 5,9 Hz), 1,1-0,9 (m, 4H) , 0,2 (s, 18H), RMN-13C: (CDC13, 100 MHz) δ 169,8, 168,3, 164,0, 162,7, 153,3, 152,6, 149,28, 149, 0, 147, 6, 139, 6, 134,8, 134,5, 127, 9 (metina) , 127,5, 125,1, 123,21, 121,5, 120,5 (metina), 120,1 (metina), 116,4 (metina), 113,2 (metina), 108,7 (metina), 79,8 (metileno), 79,6 (metileno), 68,7 (metileno), 68,5 (metileno), 67,0 (metileno), 66,8 (metileno), 58,8 (metina), 58,0 (metina), 57,6 (metoxi), 32,8 (metileno), 32,0 (metileno), 30,3 (metileno), 19,7 (metileno), 0,25 (metilo). (b) (S) -2 - (4-amino fenil) - 7-metoxi-8- (3-( (S) - 7-metoxi-2- (4- metoxifenil)-5,11-dioxo-10-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil) -5,10,11,1la-tetraidro-lH-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-8-iloxi)propoxi)-10-( (2 - (trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo [2, 1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (10)

O Pd(PPh3)4 sólido (10 mg, 8,69 μΐΐΐοίθβ) foi adicionado a urna solugáo agitada do mono-trif lato 9 (230 mg, 0,22 mmol) em tolueno (3 ml), EtOH (10 ml), com ácido 4-metoxifenil borónico (43 mg, 0,28 mmol), Na2C03 (37 mg, 0,35 mmol), em H20 (1,5 ml), a temperatura ambiente. A mistura de reagäo foi deixada agitar sob urna atmosfera de azoto durante 20 h, em cujo ponto a reagäo foi considerada completa, conforme avallado por LC/MS e TLC (EtOAc). O solvente foi removido por evaporagáo rotativa, sob pressáo reduzida in vacuo, e o residuo resultante dividido entre o EtOAc (75 ml) e a H20 (75 mi) . A fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 30 mi) e as camadas orgánicas combinadas lavadas com H20 (30 mi) , salmoura (40 mi) , secas (MgS04) , filtradas e evaporadas para proporcionar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografía flash (60% de Hexano: 40% de EtOAc -► 80% de EtOAc: 20% de Hexano) para proporcionar o dímero puro como urna espuma laranja. A remogáo do eluente em excesso sob pressáo reduzida proporcionou o produto desejado 10 (434 mg) em rendimento de 74%. ΚΜΝ^Η: (CDC13, 400 MHz) δ 7,38 (s, 2H) , 7,34 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,30 (si, 1H), 7,26-7,24 (m, 3H), 7,22 (d, 2H, J= 8,5 Hz), 6,86 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,63 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,50 (d, 2H, J= 10,0 Hz), 4,75 (d, 1H, J= 10,0 Hz), 4,74 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,56 (td, 2 H, J = 3,3, 10,1

Hz), 4,27 (t, 2H, J = 5,7 Hz), 4, 00-3, 85 (m, 8H) , 3,80 (s,

3H), 3,77-3,60 (m, 4H), 3,20-3,00 (m, 2H), 2,42 ( p, 2H, J = 5,7 Hz), 0,96 (t, 4H, J = 8,3 Hz), 0,00 (s, 18H), RMN- 13C: (CDC13, 100 MHz) δ .169, 8, 169,7, 162, 9, 162,7, 160, 6, 152.7, 152, 6, 149, 0, 147,5, 134,8, 127,8 (metina) , 127,4, 126.8, 125,1, 123,1, 123,0, 121,5 (metina), 120,4 (metina), 116,4 (metina), 115,5 (metina), 113,1 (metina), 108,6 (metina), 79,6 (metileno) , 68,5 (metileno) , 66,9 (metileno), 58,8 (metina), 57,6 (metoxi), 56,7 (metoxi), 32,8 (metileno), 30,3 (metileno), 19,7 (metileno), 0,0 (metilo). (c) (S) -2 - (4-aminofenil) - 7-metoxi-8- (3- ( (S) - 7-metoxi-2- (4- metoxifenil)-5-oxo-5,lla-dihidro-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-8-iloxi)propoxi)-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-5 (llaH) -ona (11) 0 LiBH4 recém produzido (183 mg, 8,42 mmoles) foi adicionado a urna solugäo agitada da SEM-dilactam 10 (428 mg, 0,42 mmol) em THF (5 ml) e EtOH (5 ml), ä temperatura ambiente. Após 10 minutos, foi observada urna efervescencia vigorosa com atraso, exigindo que o vaso de reagäo fosse colocado num banho de gelo. Após a remogáo do banho de gelo, a mistura foi deixada agitar ä temperatura ambiente durante 1 hora. A análise por LC/MS neste ponto revelou o consumo total de material de partida, com muito pouco produto mono-reduzido. A mistura de reagäo foi vertida sobre gelo (100 mi) e deixada aquecer até a temperatura ambiente, com agitagáo. A mistura aquosa foi extraída com DCM (3 x 30 mi) e as camadas orgánicas combinadas lavadas com H20 (20 mi) , salmoura (30 mi) e concentradas in vacuo. O residuo resultante foi tratado com DCM (5 mi), EtOH (14 mi) , H20 (7 ml) e gel de silica (10 g) . A mistura viscosa foi deixada agitar ä temperatura ambiente durante 3 dias. A mistura foi filtrada lentamente através de um funil de sinterizar e o residuo de silica lavado com 90% CHC13: 10% de MeOH (-250 mi) até a atividade de UV desaparecer completamente do eluente. A fase orgánica foi lavada com H20 (50 mL) , salmoura (60 mi), seca (MgSÜ4) , filtrada e

evaporada in vacuo para proporcionar o material bruto. 0 produto bruto foi purificado por cromatografía flash (97% CHC13 : 3% de MeOH) para proporcionar o dimero 11 de PBD com arilo em C2/C2' puro (185 mg), rendimento de 61%. RMN-^: (CDCI3, 400 MHz) δ 7,88 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 7,87 (d, 1H, J= 4,0 Hz), 7,52 (s, 2H) , 7,39 (si, 1H) , 7,37-7,28 (m, 3H) , 7,20 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 6,89 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,87 (s, 1H) , 6,86 (s, 1H) , 6,67 (d, 2H, J= 8,5 Hz), 4,40-4,20 (m, 6H) , 3,94 (s, 6H) , 3,82 (s, 3H) , 3,61-3,50 (m, 2H) , 3,40-3,30 (m, 2H) , 2,47-2,40 (m, 2H) , RMN-13C: (CDCI3, 100 MHz) δ (imina metina) , 161,3, 161,1, 159,3, 156.0, 151,1, 148,1, 146,2, 140,3, 126,2 (metina), 123,2, 122.0, 120,5 (metina), 119,4, 115,2 (metina), 114,3 (metina), 111,9 (metina), 111,2 (metina), 65,5 (metileno), 56,2 (metoxi), 55,4 (metoxi), 53,9 (metina), 35,6 (metileno), 28, 9 (metileno) .

(a) (S) -2 - (4-aminofenil) - 7-metoxi-8- (5- ( (S) - 7-metoxi-2- (4- metoxifenil)-5,11-dioxo-10-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-5,10,11,1la-tetrahidro-lH-pirrolo[2,1-c][1,4]henzodiazepin-8-iloxi)pentiloxi)-10-( (2 - (trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo [2, 1-c] [1,4]henzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (12) O Pd(PPh3)4 sólido (32 mg, 27,7 μΐΐΐοίθβ) foi adicionado a urna solugáo agitada do bis-triflato 8b (1,04 g, 0,91 mmol) em tolueno (10 ml) , EtOH (5 ml) , com ácido 4-metoxifenil borónico (0,202 g, 1,32 mmol), Na2CÜ3 (0,169 g, 1,6 mmol), em H20 (5 ml), a 30°C. A mistura de reagáo foi deixada agitar sob urna atmosfera de azoto durante 20 horas. 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboralan-2-il)anilina sólida adicional (0,203 g, 0,93 mmol) e Na2C03 (0,056 g, 0,53 mmol) foram adicionados, seguidos por Pd(PPh3)4 sólido (10 mg, 8,6 μιποίθε) . A mistura de reagáo foi deixada agitar sob urna atmosfera de azoto durante 20 horas adicionáis. A LC/MS indicou a formagáo do produto desejado. O EtOAc (100 ml) e a H20 (100 mi) foram adicionados, a fragáo aquosa foi separada e extraída com EtOAc (3 x 30 mi) . As camadas orgánicas combinadas foram lavadas com H20 (100 mi), salmoura (100 mi), secas (MgS04) , filtradas e evaporadas para proporcionar um óleo castanho escuro. O óleo foi dissolvido em DCM e carregado para um cartucho SCX-2 de 10 g, pré-equilibrado com DCM (1 vol) . O cartucho foi lavado com DCM (3 vol), MeOH (3 vol) e o produto bruto eluído com NH3 a 2 M em MeOH (2 vol). A cromatografía flash (50% de n-hexano: 50% de EtOAc -► 20% de n-hexano: 80% de EtOAc) proporcionou o dímero puro 12 como urna espuma amarela (0,16 g, 34%) .

Dados analíticos: [0C]23D = +388° (c = 0,22, CHC13) ; RMN-1H: (CDC13, 400 MHz) δ 7,39 (s, 2H) , 7,35 (d, 2H, J =

12,8 Hz), 7,32 (si, 1H), 7,26-7,23 (m, 5H), 6,89 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,66 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,55 (d, 2H, J = 10,0 Hz), 4,73 (d, 1H, J= 10,0 Hz), 4,72 (d, 1H, J= 10,0 Hz), 4,62 (td, 2 H, J = 3,2, 10,4 Hz), 4,15 - 4,05 (m, 4H) , 4, 00-3, 85 (m, 8H) , 3,82 (s, 3H) , 3,77-3, 63 (m, 4H) , 3,20- 3,05 (m, 2H) , 2,05 - 1, 95 ( m, 4H) , 1,75 - 1, 67 (m, 2H) 1,01 - 0,95 (m, 4H) , 0,03 (s, 18H) ; MS (ES+) m/z (intensidade relativa) 1047 ( [M + H]+', 45) . (b) (S) -2 - (4-aminofenil) - 7-metoxi-8- (5- ( (S) - 7-metoxi-2- (4- metoxifenil)-5~oxo~5,lla-dihidro-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-8-iloxi)pentiloxi)-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-5 (llaH) -ona (13) O LiBH4 recém produzido (66 mg, 3,04 mmoles) foi adicionado a urna solugáo agitada da SEM-dilactam 12 (428 mg, 0,42 mmol) em THF (3 mL) e EtOH (3 mL) , a 0 °C (banho de gelo) . 0 banho de gelo foi removido e a mistura de reagäo foi deixada atingir a temperatura ambiente (efervescencia vigorosa). Após 2 horas, a análise por LC/MS indicou o consumo completo do material de partida. A mistura de reagao foi vertida sobre gelo (50 mi) e deixada aquecer até a temperatura ambiente, com agitagáo. A mistura aquosa foi extraída com DCM (3 x 50 mi) e as camadas orgánicas combinadas lavadas com H20 (50 mi) , salmoura (50 mi), secas (MgSCg) e concentradas in vacuo. O residuo resultante foi tratado com DCM (2 mi), EtOH (5 mi), H20 (2,5 ml) e gel de silica (3,7 g) . A mistura viscosa foi deixada agitar ä temperatura ambiente durante 3 dias. A mistura foi filtrada através de um funil de sinterizar e o residuo de silica lavado com 90% CHCI3: 10% de MeOH (-250 mi) até a atividade de UV desaparecer completamente do eluente. A fase orgánica foi seca (MgS04) , filtrada e evaporada in vacuo para proporcionar o material bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografía flash (99,5% CHCI3 : 0,5% de MeOH até 97,5% CHC13 : 2,5% de MeOH, em incrementos de 0,5%) para proporcionar o dímero de PBD com arilo em C2/C2' 13 puro (59 mg, 52%) .

Dados analíticos: [CC]28D = +7 6 0° (c = 0,14, CHC13) ; RMN 2H (400 MHz, CDCI3) δ 7,89 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 7,87 (d, 1H, J= 4,0 Hz), 7,52 (s, 2H) , 7,39 (si, 1H) , 7,37-7,28 (m, 3H) , 7,22 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 6,91 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,815 (s, 1H) , 6,81 (s, 1H) , 6,68 (d, 2H, J= 8,4 Hz), 4,45 - 4,35 (m, 2H) , 4,2-4,0 (m, 4H) , 3,94 (s, 6H) , 3,85 - 3,7 (s, 3H) , 3, 65 - 3,50 (m, 2H) , 3,45 - 3,3 (m, 2H) , 2,05 -1,9 (m, 4H) , 1,75 - 1, 65 (m, 2H) ; MS (ES+) (intensidade relativa) 754, 6 ( [M + H]+', 100), (ES-) (intensidade relativa) 752,5 ( [M - H]-', 100).

Exemplo 3

(a) (S) -2- (tien-2-il) - 7-metoxi-8- (3- ((S) -7-metoxi-2-(trifluormetanossulfoniloxi) -5, ll-dioxo-10- ( (2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-5,10,11,lla-tetrahidro-lH-pirrolo [2,1-c] [1, 4]benzodiazepin-8-iloxi)propiloxi)-10-( (2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-lH-pirrolo[2, 1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (14) O Pd(PPh3)4 sólido (41 mg, 0,036 mmol) foi adicionado a uma solugáo agitada do bis-triflato 8a (1 g, 0,9 mmol) em tolueno (10 ml), EtOH (5 ml), com ácido tien-2-il borónico (149 mg, 1,16 mmol), Na2C03 (152 mg, 1,43 mmol), em H20 (5 ml). A mistura de reagáo foi deixada agitar sob uma atmosfera de azoto, durante a noite, ä temperatura ambiente. O solvente foi removido por evaporagäo in vacuo e o residuo resultante dividido entre a H20 (100 mi) e o

EtOAc (100 mi). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 mi) e as camadas orgánicas combinadas lavadas com H20 (50 mi), salmoura (50 mi) , secas (MgS04) , filtradas e evaporadas in vacuo para proporcionar o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografía flash (80 de hexano: 20 de EtOAc -► 50 de hexano: 50 de EtOAc) para proporcionar o dímero 14 (188 mg, 20 % de rendimento).

Dados analíticos: LC-MS TR 4,27 min, 1051 (M + H) ; ΚΜΝ^Η (400 MHZ, CDC13) δ 7,36 (s, 1H) , 7,31 (si, 1H) , 7,27 (si, 1H) , 7,26-7,23 (m, 2H) , 7,22-7,17 (m, 1H) , 7,12 (si, 1H), 7,02-6, 96 (m, 2H), 5,50 (d, J = 10,0 Hz, 2H) , 7,75 (d, J = 10,0 Hz, 2H) , 4, 65-4,55 (m, 2H) , 4,37-4,13 (m, 4H) , 4, 00-3, 85 (m, 8H) , 3,8-3,6 (m, 4H) , 3,20-3,10 (m, 2H) , 2,50-2,35 (m, 2H), 1,0-0,9 (m, 4H), 0 (s, 18H). (b) (S)-2- (tien-2-il) - 7-metoxi-8- (3-( (S) -7-metoxi-2- trifluormetañossulfoniloxi)-5,11-dioxo-10-((2-(trimetilsilil)etoxi) met 11)-5,10,11,lla-tetraidro-lH-pirrolo [2, 1-c] [1, 4]benzodiazepin-8-iloxi)pentiloxi)-10-( (2-(trimetilsilil)etoxi) met 11)-lH-pirrolo[2,1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (15) O Pd(PPh3)4 sólido (7,66 mg, 6,63 [irnoles) foi adicionado a urna solugäo turva, agitada, de 14 (174 mg, 0,17 mmol),

Na2C03 (28 mg, 0,22 mmol) e 4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaboralan-2-il)anilina (47 mg, 0,22 mmol) em tolueno (2-5 ml), EtOH (1,25 ml) e H20 (125 ml), ä temperatura ambiente. A mistura de reagäo foi deixada agitar sob urna atmosfera de N2 durante 24 horas, em cujo ponto a reagäo foi considerada completa pelo pico maior da LC/MS (a 3,97 min, FW = 1016, M+Na) e TLC (EtOAc) . O solvente foi removido por evaporagáo in vacuo e o residuo resultante dividido entre o EtOAc (60 ml) e a H20 (30 mi) . As camadas foram separadas e a fase orgánica foi lavada com H20 (20 mi) , salmoura (30 mi) , seca (MgS04) , filtrada e evaporada in vacuo para proporcionar o produto bruto, 123 mg, 75 % de rendimento.

Dados analíticos: LC-MS TR 3,98 min, 100 % de área, 994 (M + H) ; RMN-1H (400 MHZ, CDC13) δ 7,40 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,30 (t, J =1,70 Hz, 1H), 7,29-7,27 (m, 3H), 7,25 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,21 (dd, J= 1,4, 4,73 Hz, 1H) , 7,03-6,97 (m, 2H) , 6,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H) , 5,52 (d, J = 10,0 Hz, 2H) , 4,78 ( d, J = 10,0 Hz, 1H) , 4,77 (d, J= 10,0 Hz, 1H) , 4,62 (dd, J= 3,4, 10,5 Hz, 1H) , 4,59 (dd, J= 3,40, 10,6

Hz, 1H) , 4,30 (t, J = 5,85 Hz, 4H) , 3, 85-4,03 (m, 8H) , 3,84-3,64 (m, 6H), 3,18 (ddd, J= 2,2, 10,5, 16,0 Hz, 1H), 3,11 (ddd, J = 2,2, 10,5, 16,0 Hz, 1H) , 2,44 (p, J = 5,85

Hz, 2H), 0,98 (t, J= 1,5 Hz, 4H), 0 (s, 18H). (c) (S) -2- (tien-2-il) - 7-metoxi~8- (3-( (S) - 7-metox±-2- (4- aminofenil)-5-oxo-5,lla-dihidro-lH-pirrolo[2, 1-c] [1.4] benzodiazepina-8-iloxi)propiloxi)-lH-pirrolo[2, 1-c] [1.4] benzodiazepina-5 (llaH) -ona (16) 0 LiBH4 recém produzido (47 mg, 2,22 mmoles) foi adicionado a uma solugáo agitada da SEM-dilactam 15 (110 mg, 0,11 mmol) em THF seco (3 ml) e EtOH (3 ml), a 0 °C (banho de gelo) . O banho de gelo foi removido e a mistura de reagáo agitada sob uma atmosfera de N2, durante 1 hora. A análise da reagáo através de análise por LC/MS revelou uma formagáo significativa do produto desejado (Pico a 2,57 min) (1 = 69,32), FW= 702, M+H) e semi-imina. A mistura de reagáo foi deixada agitar durante 1 hora adicional, após cujo tempo náo foi observado nenhum progresso da reagáo adicional por LC/MS. A mistura de reagáo foi vertida sobre gelo, agitada e deixada aquecer até a temperatura ambiente. Após a divisáo entre o DCM (50 mi) e a água (50 mi), a fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 20 mi) . As camadas orgánicas combinadas foram lavadas com H20 (50 mi), salmoura (50 mi) e o solvente removido por evaporagäo in vacuo, sob pressáo reduzida. O residuo resultante foi dissolvido em DCM (5 mi), EtOH (15 ml) e H20 (7 mi), entáo tratado com gel de silica (5 g) . A reagáo foi deixada agitar á temperatura ambiente durante 48 h. A silica foi removida por filtragáo através de um funil de sinterizar e o residuo enxaguado com CHCI3: MeOH a 90:10 (100 mL) . A H20 (50 mi) foi adicionada ao filtrado e as camadas foram separadas (após agitagáo). A camada aquosa foi extraída com CHC13 (2 x 30 mi) e H20 (50 mi) , salmoura (50 mi) , seca (MgS04) , filtrada e evaporada in vacuo para proporcionar o produto bruto. A cromatografía flash (CHCI3 -► 98% CHC13: 2% de MeOH) proporcionou o produto (41 mg, 53%). Dados analíticos: LC-MS TR 2,55 min, 702 (M + H)

Exemplo 4

(a) (S) -2 - (4-metoxifenil) - 7-metoxi~8- (3-( (S) - 7-metoxi-2- (trifluormetilsulfonil) -5, ll-dioxo-10- ( (2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-5,10,11,lla-tetraidro-lH-pirrolo [2, 1-c] [1, 4]benzodiazepin-8-iloxi)propiloxi)-10-( (2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-lH-pirrolo[2, 1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (17) O ácido 4-metoxibenzenoborónico sólido (0,388 g, 2,55 mmoles) foi adicionado a uma solugäo do bis triflato protegido com SEM (8a) (3,0 g, 2,69 mmoles), carbonato de sodio (426 mg, 4,02 mmoles) e tetraquis trif enilf osf ina paládio (0,08 mmol) em tolueno (54,8 ml), etanol (27 ml) e água (27 ml) . A mistura de reagäo foi deixada agitar ä temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura de reagäo foi entäo dividida entre o acetato de etilo e a água. A camada orgánica foi lavada com água e salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. O solvente em excesso foi removido por evaporagao rotativa, sob pressao reduzida, e o residuo resultante foi submetido á cromatografía em coluna flash (gel de silica; eluigáo do gradiente EtOAc/hexano 30/70^35/65^40/60^45/55) para remover o bis-triflato nao reagido (0,6 g) . A remogáo do eluente em excesso das fragóes selecionadas proporcionou o produto acoplado com 4-metoxifenilo (1,27 g, 1,18 mmol, 41%). LC-MS TR 4,30 min, 1076 (M + H) ; RMN-1]! (400 MHZ, CDC13) δ 7,41 (s, 1H) , 7,39 (d, J= 8,8 Hz, 2H) , 7,35 (s, 1H) , 7,34 (si, 1H) , 7,29 (s, 1H) , 7,16 (t, J= 1,9 Hz, 1H) , 6,90 (d, J = 8,8 Hz, 2H) , 5,53 (d, J = 10,0 Hz, 2H) , 4,79 (d, J = 10,0 Hz, 1H) , 4,78 (d, J = 10,0 Hz, 1H) , 4, 66 - 4, 60 (m, 2H) , 4,30 (t, J= 5,7 Hz, 4H) , 4,0 - 3,94 (m, 2H) , 3,93 (s, 3H) , 3,92 (s, 3H) , 3,84 (s, 3H) , 3, 83 - 3, 60 (m, 4H) , 3,22 - 3,10 (m, 2H) , 2,45 (t, J = 5,9 Hz, 2H) , 1,05 - 0, 94 (m, 4H), 0 (s, 18H). (b) (S) -2- (3-amino fenil) - 7-metoxi~8- (3-( (S) - 7-metoxi-2- (4- metoxifenil)-5,11-dioxo-10-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil) -5,10,11,1la-tetrahidro-lH-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-8-iloxi)propiloxi)-10-( (2 - (trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo [2, 1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona (18) O ácido 3-aminobenzenoborónico sólido (0,143 g, 0,92 mmol) foi adicionado a urna solugäo do mono triflato (17) (0,619 g, 0,58 mmol), carbonato de sodio (195 mg, 1,84 mmol) e tetraquis trifenilfosfina paládio (26,6 mg, 0,023 mmol) em tolueno (10 ml), etanol (5 ml) e água (5 ml) . A mistura de reagäo foi deixada agitar ä temperatura ambiente durante a noite, a 30 °C. A mistura de reagäo foi entäo dividida entre o acetato de etilo e a água. A camada orgánica foi lavada com água e salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. O solvente em excesso foi removido por evaporagao rotativa, sob pressao reduzida, e o residuo resultante foi submetido á cromatografía em coluna flash (silica gel; eluigáo do gradiente EtOAc/hexano 70/30^85/15) . A remogäo do eluente em excesso das fragöes selecionadas proporcionou o produto desejado (0,502 g, 0,49 mmol, 85%). LC-MS TR 4,02 min, 1019 (M + H) ; RMN-1H (400 MHZ, CDC13) δ 7,38 - 7,35 (m, 4H) , 7,33 (si, 1H) , 7,30 (si, 1H) , 7,25 (s, 2H) , 7,10 (t, J = 7,8 Hz, 1H) , 6, 88 - 6, 80 (m, 3H) , 6,72 (si, 1H) , 6,57 (dd, J= 7,9, 1,8 Hz, 1H) , 5,50 (d, J= 10,0

Hz, 2H) , 4,75 (d, 10,0 Hz, 2H) , 4,58 (dd, J= 10,6, 3,3 Hz, 2H) , 4,27 (t, J = 5,8 Hz, 4H) , 3,95 - 3,91 (m, 2H) , 3,90 (s, 6H) , 3,80 (s, 3H) , 3,77 - 3, 60 (m, 6H) , 3,15 - 3,05 (m, 2H) , 2,41 (p, J = 5,8 Hz, 2H) , 0,95 (t, = 8,25 Hz, 4H) , 0 (s, 18H) . (c) (S) -2 - (3-amino fenil) - 7-metoxi-8- (3-( (S) - 7-metoxi-2- (4- metoxifenil)-5-oxo-5,lla-dihidro-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-8-iloxi)propiloxi)-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-5 (llaH) -ona (19)

Uma solugäo do super-hidreto (0,56 ml, 0,56 mmol, 1,0 M em THF) foi adicionada, gota a gota, a uma solugäo da SEM dilactam (18) (0,271 g, 0,27 mmol) em THF seco (10 ml), a - 78 °C, sob urna atmosfera de azoto. Após 1 h, uma alíquota adicional de solugäo de super-hidreto (0,13 mi, 0,13 mmol) foi adicionada e a mistura de reagäo foi deixada agitar por outra 0,5 h, em cujo tempo a LC-MS indicou que a redugäo estava completa. A mistura de reagäo foi diluida com água e deixada aquecer até ä temperatura ambiente. A mistura de reagäo foi dividida entre o clorofórmio e a água, as camadas foram separadas e a camada aquosa extraída com clorofórmio adicional (emulsóes). Finalmente, a fase orgánica combinada foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. O produto reduzido foi dissolvido em metanol, clorofórmio e água e deixado agitar na presenga de gel de silica durante 72 horas. O produto bruto foi submetido ä cromatografía em coluna flash (gradiente de metanol/clorofórmio) para proporcionar o produto de imina desejado (150 mg, 0,21 mmol, 77%) após a remogáo do eluente em excesso das fragóes selecionadas. LC-MS TR 2,63 min, 97 % de área, 726 (M + H) ; RMN-1H (400 MHZ, CDC13) δ 7,85 (d, J = 3,9 Hz, 1H) , 7,84 (d, J = 3,9 Hz, 1H) , 7,50 (s, 1H) , 7,49 (s, 1H) , 7,42 (s, 1H) , 7,36 (s, 1H) , 7,32 (d, J = 7,3 Hz, 2H) , 7,11 (t, (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 6, 90-6, 80 (m, 4H) , 6,77 (d, J= 7,9 Hz, 1H) , 4,40-4,20 (m, 6H) , 3,92 (s, 6H) , 3,80 (s, 3H) , 3, 60-3,27 (m, 6H) , 2,48-2,29 (m,2H)

Exemplo 5

(a) 11- (terc-butildimetilsililoxi) -8- (5- ( (IIS, llaS) -11- (terc-butildimetilsililoxi)-7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-5-oxo-1 0 - ((2,2, 2-tricloroetoxi) carbonil) -5,10,11,11a-tetrahidro-lH-pirrolo [2,1-c][1,4] benzodiazepin-8- iloxi)pentiloxi)-7-metoxi-5~oxo-2- (trifluormetilsulfoniloxi)-11,lla-dihidro-pirrolo[2,Ιο] [ 1, 4]benzodiazepina-1 0 (5H) -carboxilato de (HS,llaS)~ 2,2,2-tricloroetilo 21 0 ácido 4-metoxibenzenoborónico sólido (59 mg, 0,39 mmol) foi adicionado a urna solugäo do bis triflato protegido com Troc (Composto 44, docuemnto WO 2006/111759) (600 mg, 0,41 mmol), carbonato de sodio (65 mg, 0,61 mmol) e tetraquis trifenilfosfina paládio (0,012 mmol) em tolueno (10,8 ml), etanol (5,4 mL) e água (5,4 ml). A mistura de reagao foi deixada agitar ä temperatura ambiente, durante a noite. A mistura de reagäo foi entäo dividida entre o acetato de etilo e a água. A camada orgánica foi lavada com água e salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. O solvente em excesso foi removido por evaporagáo rotativa, sob pressáo reduzida, e o residuo resultante foi submetido á cromatografía em coluna flash (gel de silica; eluigáo do gradiente EtOAc/hexano 20/80^30/70^40/60^60/40) para remover o bis-triflato nao reagido. A remogáo do eluente em excesso das fragóes selecionadas proporcionou o produto acoplado com 4-metoxifenil (261 mg, 0,18 mmol, 46%). LC-MS TR 4,17 min, 1427 (M + H) ; RMN-1]! (400 MHZ, CDC13) δ 7,38 (s, 1H) , 7,33 (s, 1H) , 7,31 (s, 1H) , 7,30 (s, 1H) , 7,25 (s, 1H) , 7,20 (si, 1H) , 6,92 (d, J= 8,6 Hz, 2H) , 6,77 (d, J" = 8,7 Hz, 2H) , 6,0 - 5,90 (m, 2H) , 5,25 (d, J = 12,0

Hz, 1H) , 5,24 (d, J = 12,0 Hz, 1H) , 4,24 (d, J = 12,0 Hz, 1H) , 4,22 (d, J = 12,0 Hz, 1H) , 4,18-4,08 (m, 2H) , 4,07 - 3,89 (m, 10H) , 3,81 (s, 3H), 3,44 - 3,25 (m, 2H) , 2,85 (d, J= 16,6 Hz, 2H) , 2,05 - 1, 90 (m, 4H) , 1,76 - 1, 64 (m, 2H) , 0,93 (s, 9H) , 0,90 (s, 9H) , 0,30 (s, 6H) , 0,26 (s, 6H) . (b) 11- (terc-butildimetilsililoxi) -8- (5- ( (11S, llaS) -11- (terc-butildimetilsililoxi)-2-(4-hidroxifenil) -7-metoxi~5-oxo-1 0-( (2,2, 2-tricloroetoxi) carbonil) -5, 10, 11, 11a-tetrahidro-lH-pirrolo [2, 1-c] [1¿_4] benzodiazepin-8- iloxi)pentiloxi) -7-metoxi-2- (4-metoxifenil)-5-oxo-l1,11a-dihidro-lH-pirrolo[2, 1-c][1, 4]benzodiazepina-10(5H)-carboxilato de (IIS,llaS)-2,2,2-tricloroetilo 22 O procedimento de acoplamento de Suzuki descrito na etapa (a) foi aplicado ä sintese do Composto 21. O Composto 20 (62,5 mg, 0,044 mmol) foi tratado com 1 equivalente de ácido 4-hidroxibenzenoborónico (10 mg) , a 30 °C, durante a noite, para proporcionar o composto desejado após filtragáo através de urna almofada de gel de silica (40 mg, 0,029 mmol, 66% de rendimento) . O composto foi utilizado diretamente na etapa subsequente. LC-MS TR 4,27 min, 1371 (M + H) (c) (S) -2 - (4-hidroxifenil) - 7-metoxi-8- (5- ( (S) - 7-metoxi-2- (4-metoxifenil)-5-oxo-5,lla-dihidro- lH-pirrolo [2,Ιο] [1,4] benzodiazepindiazepina-8-iloxi)pentiloxi)-1H- pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepina-5(llaH)-ona 23

O par de cádmio/chumbo (100 mg, Q Dong et al. Tetrahedron Letters vol 36, edigäo 32, 5681-5682, 1995) foi adicionado a urna solugäo de 21 (40 mg, 0,029 mmol) em THF (1 ml) e acetato de amonio (1 N, 1 ml) e a mistura de reagäo foi deixada agitar durante 1 hora. A mistura de reagäo foi dividida entre o clorofórmio e a água, as fases separadas e a fase aquosa extraída com clorofórmio. As camadas orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de magnésio. A evaporagäo rotativa sob pressäo reduzida produziu o produto bruto, o qual foi submetido ä cromatografía em coluna (gel de silica ,0^4% de MeOH/CHCÍ3) . A remogáo do eluente em excesso por evaporagäo rotativa, sob pressäo reduzida, proporcionou o produto de imina desejado (17 mg, 0,023 mmol, 79%). LC-MS TR 2,20 min, 755 (M + H) ; RMN-^ (400 MHZ, CDC13) δ 7,89 (d, J= 3,94 Hz, 1H) , 7,89 (d, J= 4,00 Hz, 1H) , 7,53 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,38 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,28 (s, 1H) , 6,90 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,84 (d, J= 8,6 Hz, 2H) , 6,82 (s, 1H) , 6,81 (s, 1H) , 5,68 (si, 1H) , 4,50 - 4,30 (m, 2H) , 4,22 - 4, 00 (m, 4H) , 3,93 (s, 6H) , 3,82 (s, 3H) , 3, 69 - 3,45 (m, 2H) , 3,44 - 3,28 (m, 2H) , 2, 64 - 1, 88 (m, 4H) , 1,77 - 1, 62 (m, 2H) .

Exemplo 6

(a) 11- (terc-butildimetilsililoxi) -8- (5- ( (11S, llaS) -11- (terc-butildimetilsililoxi)-2-(4-formilfenil)-7-metoxi-5-oxo-1 0 - ((2,2, 2-tricloroetoxi) carbonil) -5,10,11,11a-tetrahidro-lH- pirrólo [2,1-c][1,4] benzodiazepin diazepin-8-iloxi)pentiloxi)-7-metoxi-2- (4-metoxifenil)-5-oxo-l1,1 la-di idro-lH-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina-10(5H)-carboxilato de (11S,llaS)-2,2,2-tricloroetilo 24 O procedimento de acoplamento de Suzuki descrito no Exemplo 5, etapa (a) , foi aplicado ä sintese do Composto 24. O Composto 21 (62,5 mg, 0,044 mmol) foi tratado com 1 equivalente de ácido 4-formilbenzenoborónico (10,5 mg) , a temperatura ambiente, durante a noite, para proporcionar o composto desejado após filtragáo através de urna almofada de gel de silica (45 mg, 0,033 mmol, 75% de rendimento) . O composto foi utilizado diretamente na etapa subsequente. LC-MS TR 4,42 min, 1383 (M + H) (b) 4- ( (S) - 7-metoxi-8- (5- ( (S) - 7-metoxi-2- (4-metoxifenil) -5-oxo-5,lla-dihidro-lH- pirrólo[2,1-c][1,4]benzodiazepina-8-iloxi)pentiloxi)-5-oxo-5,lla-dihidro-lH- pirrólo[2,Ι ο] [1,4]benzodiazepina-2-il)benzaldeído 25 O Composto 24 foi desprotegido pelo método descrito no Exemplo 5, etapa (c), para produzir o composto desejado (18 mg, 0,023 mmol, 79%). LC-MS TR 3,18 min, 768 (M + H) ; RMN-^ (400 MHZ, CDC13) δ 9,98 (s, 1H) , 7,91 (d, J = 3,90 Hz, 1H) , 7, 90 - 7, 80 (m, 3H) , 7,68 (s, 1H) , 7, 60 - 7,45 (m, 4H) , 7,39 (s, 1H) , 7,33 (d, J = 8,7 Hz, 1H) , 6,90 (d, J = 8,7 Hz, 2H) , 6,83 (s, 1H) , 6,82 (s, 1H) , 4,55 - 4,44 (m, 1H) , 4,43 - 4,36 (m, 1H) , 4,23 - 4, 00 (m, 4H) , 3,95 (s, 3H) , 3,94 (s, 3H) , 3,82 (s, 3H) , 3,66 - 3,51 (m, 2H) , 3,50 - 3,34 (m, 2H) , 2,05 - 1,87 (m, 4H) , 1,76 - 164 (m, 2H) .

Exemplo 7

(a) 2-(3-aminofenil)-11-(terc-butildimetilsililoxi)-8- (5- ((11S,llaS)-11-(terc-butildimetilsililoxi)-7-metoxi-5~oxo-10-((2,2, 2-tricloroetoxi)carbonil)-2-(trifluormetilsulfoniloxi)-5,10,11, lla-tetrahidro-lH-pirrolo [2,1-c][1,4] benzodiazepindiazepin-8- iloxi)pentiloxi)-7-metoxi-5-oxo-ll,lla-dihidro-lH-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepina-10(5H)-carboxilato de (IIS, llaS) -2,2, 2-tricloroetilo 26 0 procedimento de acoplamento de Suzuki descrito no Exemplo 5, etapa (a) , foi aplicado ä sintese do Composto 26, utilizando o ácido 3-aminobenzenoborónico para proporcionar o composto desejado em rendimento de 41% (230 mg, 0,163 mmol). LC-MS TR 4,28 min, 1411 (M + H) ; RMN-1]! (400 MHZ, CDC13) δ 7,44 (si, 1H) , 7,29 (s, 1H) , 7,25 (s, 1H) , 7,20 (s, 1H) , 7,16 (t, J = 7,9 Hz, 1H) , 6, 84 - 6,73 (m, 3H) , 6,70 (si, 1H) , 6,62 (dd, J = 7,9, 1,7 Hz, 1H) , 6, 66 - 6,58 (m, 2H) , 5,25 (d, J= 12,0 Hz, 1H) , 5,24 (d, J= 12,0 Hz, 1H) , 4,24 (d, J = 12,0 Hz, 1H) , 4,22 (d, J = 12,0 Hz, 1H) , 4,17 - 4,07 (m, 2H) , 4, 08 - 3, 89 (m, 10H) , 3,43 - 3,28 (m, 2H) , 2,85 (d, J= 1,65 Hz, 2H) , 2,07 - 1, 90 (m, 4H) , 1,78 - 1,63 (m, 2H) , 0,94 (s, 9H) , 0,90 (s, 9H) , 0,30 (s, 6H) , 0,27 (s, 6H) . (b) 2- (3-aminofenil)-11- (terc-butildimetilsililoxi)-8-(5- ((11S, llaS) -11- (terc-butildimetilsililoxi) -2- (4- (3-(dimetilamino)propoxi)fenil)-7-metoxi-5~oxo-l0-((2,2,2-tricloroetoxi)carbonil)-5,10,11,lla-tetrahidro-lH-pirrolo [2,1-c][1,4] benzodiazepindiazepin-8-iloxi) pentiloxi)-7- metoxi-5-oxo-ll,lla-dihidro-lH-pirrolo[2, Ιο] [ 1, 4]benzodiazepina-10 (5H) -carboxilato de (HS,llaS)~ 2,2,2-tricloroetilo 27 O pinacol éster do ácido 4 —[3 — (dimetilamino)propoxibenzenoborónico sólido (25 mg, 0,082 mmol) foi adicionado a urna solugáo de 26 (73 mg, 0,052 mmol), carbonato de sodio (18 mg, 0,17 mmol) e tetraquis trifenilfosfina paládio (3 mg) em tolueno (1 mi), etanol (0,5 mL) e água (0,5 mi). A mistura de reagáo foi deixada agitar á temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reagáo foi entáo dividida entre o acetato de etilo e a água. A camada orgánica foi lavada com água e salmoura e secada sobre sulfato de magnésio. 0 solvente em excesso foi removido por evaporadlo rotativa, sob pressao reduzida, e o residuo resultante foi eluido através de urna almofada de gel de silica com clorofórmio/etanol. A remogáo do eluente em excesso das fragóes selecionadas proporcionou o produto acoplado com 4-metoxifenilo (50 mg, 0,035 mmol, 67%). LC-MS TR 4,12 min, 1440 (M + H) (c) (S) -2-(3-aminofenil) -8- (5- ((S) -2-(4-(3- (dimeti lamino)propoxi)fenil)-7-metoxi-5-oxo~5, lla-dihidro-lH-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepina-8-iloxi)pentiloxi) - 7-metoxi-lH-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina-5 (llaH)-ona 28 O Composto 27 foi desprotegido pelo método descrito no Exemplo 5, etapa (c), para produzir o composto desejado. A mistura de reagáo foi dividida entre o DCM e o hidrógeno carbonato de sodio aquoso (emulsáo) e o produto bruto purificado por cromatografía em coluna com gradiente sobre gel de silica (5% de metanol clorofórmio —> 35% de metanol/clorofórmio) para proporcionar a PBD imina assimétrica desejada (50 mg, 0,018 mmol, 58%). LC-MS TR 2,55 min, 826 (M + H) ; RMN-1H (400 MHZ, CDC13) δ 7, 92 - 7,82 (m, 2H) , 7,52 (si, 2H) , 7,45 (si, 1H) , 7,39 (si, 1H) , 7,31 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,14 (t, J = 7,8 Hz, 1H) , 6,89 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 6,85 - 6,75 (m, 3H) , 6,72 (si, 1H) , 6,60 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 4,46 - 4,33 (m, 2H) , 4,21 - 3,98 (m, 6H) , 3,94 (s, 6H) , 3, 63 - 3,50 (m, 2H) , 3,43 - 3, 29 (m, 2H) , 2, 64 - 2,48 (m, 2H) , 2,34 (s, 6H) , 2,10 - 1,89 (m, 6H) , 1,57 (m, 2H) .

Exemplo 8

(a) 2- (3-aminofenil)-11- (terc-butildimetilsililoxi)-8-(5-((11S,llaS)-11-(terc-butildimetilsililoxi)-7-metoxi-2-(4- (4-metilpiperazin-l-il)fenil)-5-oxo-l0-((2,2,2-tricloroetoxi)carbonil)-5,10,11,lla-tetrahidro-lH- pirrolo [2,l-c][l,4] benzodiazepin diazepin-8-iloxi)pentiloxi)-7-metoxi-5-oxo-ll,lla-dihidro-lH-pirrolo[2, Ιο] [ 1, 4]benzodiazepina-1 0 (5H) -carboxilato de (llS,llaS)~ 2,2,2-tricloroetilo 29 O método do Exemplo 7, etapa (b) , foi efetuado para proporcionar o produto desejado (58 mg, 0,040 mmol, 78%) após filtragäo através de urna almofada gel silica (com metanol/clorofórmio a 1/3) e remogäo do solvente em excesso por evaporagao rotativa, sob pressäo reduzida. LC-MS TR 4,08 min, 1439 (Μ + Η) (b) (S) -2 - (3-amino fenil) - 7-metoxi-8- (5-( (S) - 7-metoxi-2- (4-(4-metilpiperazin-l-il)fenil)-5-oxo-5,lla-dihidro-lH- pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepina-8-iloxi)pentiloxi)-1H-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepina-5(llaH)-ona 30 O método do Exemplo 7, etapa (c) , foi utilizado para desproteger o composto 29. 0 produto bruto foi purificado por cromatografía com gradiente sobre gel de silica (2% de metanol clorofórmio —> 35% de metanol/clorofórmio) para proporcionar a PBD imina assimétrica desejada (18 mg, 0,022 mmol, 59%). LC-MS TR 2,52 min, 823 (M + H) ; RMN-^ (400 MHZ, CDC13) δ 7.80 (d, J= 3,8Hz, 2H) , 7,45 (s, 2H) , 7,38 (s, 1H) , 7,30 (s, 1H) , 7,23 (d, J= 8, 6Hz, 2H) , 7,07 (t, J= 7,8 Hz, 1H) , 6,83 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 6,79-6, 89 (m, 3H) , 6,65 (s, 1H) , 6,54 (d, J= 7,9 Hz, 1H) , 4,40-4,24 (m, 2H) , 4,15-3,93 (m, 4H) , 3,87 (s, 6H) , 3,56-3,42 (m, 2H) , 3,37-3,23 (m, 2H) , 3, 22-3, 08 (m, 4H) , 2,61-2,41 (m, 4H) , 2,29 (s, 3H) , 1,98- 1.80 (m, 4H) , 1, 67-1,54 (m, 2H) .

Exemplo 9

(a) (S) -2- (4- (aminometil) fértil) -7-metoxi-8- (3- ( (S)-7- metoxi-2- (4-metoxi fértil)-5,11 -dioxo-1 0 - ((2-(trimetilsilil) etoxi) metil)-5,10,11, 1 la-h-lH-benzo[e]pirrólo[1,2-a][1,4]diazepin-8-iloxi)propiloxi)-10-((2 - (trimetilsilil)etoxi)metil)-lH-pirrolo[2,1-c] [1,4]benzodiazepina-5, 11(1 OH, llaH) -diona 31 O cloridrato de ácido 4-aminometilbenzenoborónico sólido (0,111 g,0,59 mmol) foi adicionado a urna solugáo de 17 (0,394 g, 0,37 mmol), carbonato de sodio (175 mg, 1,654

mmol) e tetraquis trifenilfosfina paládio (28,0 mg, 0,024 mmol) em tolueno (10 ml), etanol (5 mi) e água (5 ml) . A

mistura de reagäo foi deixada agitar durante a noite, a 30 °C. No dia seguinte, a mistura de reagäo foi aquecida durante 3 horas adicionáis, a 70 °C. A mistura de reagäo foi entäo dividida entre o acetato de etilo e a água. A camada orgánica foi lavada com água e salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. O solvente em excesso foi removido por evaporagáo rotativa, sob pressáo reduzida, e o residuo resultante foi submetido á cromatografía em coluna flash (gel de silica; eluigáo do gradiente EtOAc/hexano 2/98 —> 15/85). A remogáo do eluente em excesso das fragöes selecionadas proporcionou o produto desejado (0,230 mg, 0,22 mmol, 61%). LC-MS TR 3,63 min, 1034 (M + 2H) ; RMN^H (400 MHz, DMSO d6) δ 11,7 (s, 2H) , 7,52 (d, J= 8,2 Hz, 2H) , 7,48 (d, J = 8,7 Hz, 2H) , 7,40 (s, 1H) , 7,50 (d, J = 8,1 Hz,

2H) ,7,38-7,19 (m, 5H) 6,93 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,40 (d, J = 2,13 Hz, 1H) , 5,38 (d, J = 2,12 Hz, 1H) , 5,32 (d, J = 10,6 Hz, 2H) , 5,25 (d, J= 10,6 Hz, 2H) , 4, 87-4,72 (m, 2H) , 4,35-4,15 (m, 4H) , 3,85 (s, 6H) , 3,79 (s, 3H) , 3,73-3,56 (m, 2H) , 3,55-3,39 (m, 4H) , 3,22-3, 02 (m, 2H) , 2,39-2,23 (m, 2H) , 0, 94-0, 67 (m, 4H) , -0,06 (s, 18H). (b) (S) -2- (4- (aminometil) fenil) -7-metoxi-8- (3- ( (S)-7- metoxi-2-(4-metoxifenil)-5-oxo-5,lla-dihidro-lH-pirrolo[2,1-c][1, 4]benzodiazepina-8-iloxi)proplloxl)-1H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina-5(llaH)-ona 32 O composto 31 foi desprotegido seguindo o método do Exemplo 1, etapa (c) . O produto bruto foi purificado por cromatografía em coluna com gradiente (MeOH/CHCl3 a 5/95^30/70) para proporcionar o produto como urna mistura de imina e éteres carbinolamina metílicos. LC-MS TR 2,58 min, 740 (M + H).

Exemplo 10

Sal sódico de (S) -2- (4-aminofenil)-7-metoxi-ll(S)-sulfo-8-(3- ( (S) - 7-metoxi-ll (S) -sulfo -2- (4-metoxifértil) -5-oxo- 5, 10, 11, lia -tetrahidro-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-8-iloxi)propiloxi)-lH-pirrolo[2,1-c] [1.4] benzodiazepina-5 (llaH) -ona 33 O bissulfito de sodio (8,5 mg, 3,1 eq) foi adicionado a urna suspensáo agitada de bis-imina 11 (20 mg, 0,036 mmol) em isopropanol (4 mi) e água (2 mi) . A mistura de reagäo foi deixada agitar vigorosamente e, no fim, tornou-se clara (cerca de 1 hora). A mistura de reagäo foi transferida para um funil e filtrada através de urna barreira de algodáo (e entáo lavada com 2 mi de água) . O filtrado foi congelado rápidamente (liquido e para o banho) e liofilizado para proporcionar o produto 33 desejado em rendimento quantitative. LC-MS TR 11,77 min, 727,2 (M + H) (Massa do composto principal, adutos de bissulfito instáveis no espectrómetro de massa); RMN-1]! (400 MHz, CDC13) δ 7, 66-7,55 (m, 5H) , 7,43 (s, 1H) , 7,39 (d, J= 8,66 Hz, 2H) , 7,06 (m, 2H) , 6,93 (d, J = 8,84 Hz, 2H) , 6,54 (m, 2H) , 5,29-5,21 (m, 2H) , 4,32-4,28 (m, 2H) , 4,14-4,20 (m, 4H) , 3, 96-3, 83 (m, 2H) , 3,77 (s, 3H) , 3,73 (m, 6H) , 3,52-3,43 (m, 2H) , 3,30-3,08 (m, 2H), 2,24-2,21 (m, 2H).

Exemplo 11: Determinaqäo da Citotoxicidade In Vitro

Ensaio com K562

As células de leucemia mielóide crónica humanas K562 foram mantidas em meio RPM1 1640 suplementado com 10% de soro de bezerro fetal e glutamina a 2 mM, a 37°C, numa atmosfera humidificada contendo 5% C02, e foram incubadas com urna dose especificada de fármaco durante 1 hora ou 96 horas a 37 °C, no escuro. A incubagáo foi terminada por centrifugagáo (5 min, 300 g) e as células foram lavadas urna vez com meio sem fármaco. Após o tratamento com fármaco apropriado, as células foram transferidas para placas de microtitulagáo com 96 pogos (104 células por pogo, 8 pogos por amostra). As placas foram entäo mantidas no escuro, a 37 °C, numa atmosfera humidificada contendo 5% C02. 0 ensaio é baseado na capacidade das células viáveis de reduzirem um sal de tetrazólio solúvel amarelo, o brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil-2B-tetrazólio (MTT, Aldrich-Sigma) , para um precipitado de formazan roxo insolúvel. Após a incubagäo das placas durante 4 dias (para permitir que as células de controlo aumentassem no número por aproximadamente 10 vezes) , 20 μΐ de solugäo de MTT (5 mg/ml em solugäo salina tamponada com fosfato) foram adicionados a cada pogo e as placas adicionalmente incubadas durante 5 h. As placas foram entäo centrifugadas durante 5 min a 300 g e a maior parte do meio pipetada a partir do sedimento celular, deixando 10-20 μΐ por pogo. O DMSO (200 μΐ) foi adicionado a cada pogo e as amostras agitadas para garantir a mistura completa. A densidade ótica foi entäo lida num comprimento de onda de 550 nm sobre um leitor de placas ELISA Titertek Multiscan, e urna curva de resposta ä dose foi construida. Para cada curva, um valor de CI50 foi lido como a dose requerida para reduzir a densidade ótica final para 50% do valor de controlo. O composto 13 tem urna CI50 de 30 pM neste ensaio.

Ensaio com A2780 A linha celular parental A2780 foi desenvolvida em Meio de Eagles Modificado por Dulbecco (DMEM) contendo -10% de Soro de Bezerro Fetal (FCS) e -1% de solugäo de L-Glutamina a 200 mM e desenvolvida em frascos de 75 cm2 Corning Cellbind. 190 μΐ de suspensäo celular foram adicionados (a 1 x 104) a cada pogo das colunas 2 a 11 de urna placa de 96 pogos (placa TC de fundo plano Nunc 96F) . 190 μΐ de meio foram adicionados a cada pogo das colunas 1 e 12. O meio era o Meio de Eagles Modificado por Dulbecco (DMEM) (que incluía -10% de Soro de Bezerro Fetal (FCS) e -1% de solugäo de L-Glutamina a 200 mM).

As placas foram incubadas durante a noite, a 37 °C, antes da adigäo do fármaco se as células fossem aderentes. 200 μΜ das solugöes de composto de teste (em 100% de DMSO) foram diluidos em série através de urna placa de 96 pogos. Cada ponto resultante foi entáo adicionalmente diluido 1/10 em água destilada estéril (SDW). O DMSO a 10% foi adicionado a 5% v/v aos brancos negativos de células e aos pogos de controlo negativos de compostos. As placas de ensaio foram incubadas durante os transcursos seguintes a 37 °C em 5% C02 numa incubadora humidificada, durante 72 horas. Após a incubagáo, a solugáo de MTT para urna concentragáo final de 1,5 μΜ foi adicionada a cada pogo. As placas foram entáo incubadas durante 4 horas adicionáis, a 37 °C, em 5% C02, numa incubadora humidificada. O meio foi entáo removido e o corante foi solubilizado em 200 μΐ de DMSO (99,99%).

As placas foram lidas em absorváncia a 540 nm utilizando um leitor de placa Envision. Os dados foram analisados utilizando Microsoft Excel e GraphPad Prism e os valores de CI50 obtidos. O composto 11 tem urna CI50 de 11,7 pM neste ensaio.

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIQAO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informagäo do leitor. Nao é parte integrante do documento de patente europeia. Nao obstante o cuidado na sua elaboragao, o IEP nao assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissöes.

Documentos de patente referidos na descrigáo • JP 58180487 A [0002] • EP 1413582 A [0004] • WO 2005085251 A [0005] [0141] [0150] • WO 2006111759 A [0005] [0258] • WO 0012508 A [0141] [0149] • WO 2005023814 A [0141] • WO 2004043963 A [0141] [0149] • GB 2053894 A [0151] • WO 00012508 A [0194]

Documentos de nao patente citados na descrigáo • LEIMGRUBER et al. J. Am. Chem. Soc., 1965, vol. 87, 5793-5795 [0002] • LEIMGRUBER et al. J. Am. Chem. Soc., 1965, vol. 87, 5791-5793 [0002] • THURSTON et al. Chem. Rev., 1994, vol. 1994, 433-465 [0002] • HOCHLOWSKI et al. J. Antibiotics, 1987, vol. 40, 145-148 [0002] • KONISHI et al. J. Antibiotics, 1984, vol. 37, 200-206 [0002] • THURSTON et al. Chem. Brit., 1990, vol. 26, 767-772 [0002] • BOSE et al. Tetrahedron, 1992, vol. 48, 751-758 [0002] • KUMINOTO et al. J. Antibiotics, 1980, vol. 33, 665-667 [0002] • TAKEUCHI et al. J. Antibiotics, 1976, vol. 29, 93-96 [0002] • TSUNAKAWA et al. J. Antibiotics, 1988, vol. 41, 1366-1373 [0002] • SHIMIZU et al. J. Antibiotics, 1982, vol. 29, 2492-2503 [0002] • LANGLEY ; THURSTON. J. Org. Chem., 1987, vol. 52, 91-97 [0002] • HARA et al. J. Antibiotics, 1988, vol. 41, 702-704 [0002] • ITOH et al. J. Antibiotics, 1988, vol. 41, 1281-1284 [0002] • LEBER et al. J. Am. Chem. Soc., 1988, vol. 110, 2992-2993 [0002] • ARIMA et al. J. Antibiotics, 1972, vol. 25, 437-444 [0002] • KOHN. Antibiotics III. Springer-Verlag, 1975, 3-11 [0003] • HURLEY ; NEEDHAM-VANDEVANTER. Acc. Chem. Res., 1986, vol. 19, 230-237 [0003] • BOSE, D.S. et al. J. Am. Chem. Soc., 1992, vol. 114, 4939-4941 [0004] • THURSTON, D.E. et al. J. Org. Chem., 1996, vol. 61, 8141-8147 [0004] • SMELLIE, M. et al. Biochemistry, 2003, vol. 42, 8232-8239 [0004] • MARTIN, C. et al. Biochemistry, vol. 44, 4135-4147 [0004] • GREGSON, S. et al. J. Med. Chem., 2001, vol. 44, 737-748 [0004] • ALLEY, M.C. et al. Cancer Research, 2004, vol. 64, 6700- 6706 [0004] • HARTLEY, J.A. et al. Cancer Research, 2004, vol. 64, 6693-6699 [0004] • HOWARD, P.W. et al. Bioorg. Med. Chem., 2009 [0006] • BERGE et al. J. Pharm. Sei., 1977, vol. 66, 1-19 [0018] [0128] • GREENE, T.W. ; WUTS, G.M. Protective Groups in Organic

Synthesis. John Wiley & Sons, Inc, 1999, 23-200 [0119] [0158] • GREENE, T.W. ; WUTS, G.M. Protective Groups in Organic

Synthesis. John Wiley & Sons, Inc, 2003, 503-549 [0120] • GREENE, T.W. ; WUTS, G.M. Protective Groups in Organic

Synthesis. John Wiley & Sons, Inc, 1999, 633-647 [0121] [0157] • GREENE, T.W. ; WUTS, G.M. Protective Groups in Organic

Synthesis. John Wiley & Sons, Inc, 1999, 503-549 [0153] • THOMAS FEY et al. J. Org. Chem., 2001, vol. 66, 8154-8159 [0226] • Q DONG et al. Tetrahedron Letters, 1995, vol. 36 (32), 5681-5682 [0260]

Lisboa, 21 de Dezembro de 2015

Claims (20)

1. REIVINDICALES 1. Um composto com a fórmula I:

   em que : R2 é da fórmula II:

   onde A é um grupo arilo C5-7, X é selecionado a partir do grupo que compreende: OH, SH, C02H, COH, N=C=0, NHRn, em que RN é selecionado a partir do grupo que compreende H e alquilo C1-4, e (OC2H4) mOCH3, onde m é 1 a 3, e ou: (i) Q1 é urna ligagäo simples, e Q2 é selecionado a partir de urna ligagäo simples e -Z-(CH2)n-, onde Z é selecionado a partir de urna ligagäo simples, 0, S e NH e é de 1 a 3; ou (ii) Q1 é -CH=CH-, e Q2 é urna ligagäo simples; R12 é um grupo arilo C5-10, opcionalmente substituido por urn ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que compreende: halo, nitro, ciano, alcoxi Ci_7, ariloxi C5-20, heterocicliloxi C3-20, alquilo Ci_7, heterociclilo C3-7 e bis-oxi-alquileno C2-3, em que o grupo alcoxi Ci-7 pode ser substituido por um grupo amino, e se o grupo heterociclilo C3-7 é um azoto C6 contendo o grupo heterociclilo, ele pode ser substituido por um grupo alquilo C1-4; R6 e R9 säo independentemente selecionados a partir de H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; onde R e R' säo independentemente selecionados a partir de grupos alquilo Ci-22, heterociclilo C3-2o e arilo C5-20 opcionalmente substituidos; R7 é selecionado a partir de H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NHRR', nitro, Me3Sn e halo; ou: (a) R10 é H, e R11 é OH, 0RA, onde RA é alquilo C1-4; (b) R10 e R11 formam urna ligagao dupla azoto-carbono entre os átomos de azoto e carbono aos quais eles estáo ligados; ou (c) R10 é H e R11 é SOzM, onde zé2ou3eMéum catiáo monovalente farmacéuticamente aceitável; R" é um grupo alquileno C3-32, cuja cadeia pode ser interrompida por um ou mais heteroátomos, e/ou anéis aromáticos; Y e Y sáo selecionados a partir de 0, S, ou NH; R6', R7', R9' sáo selecionados a partir dos mesmos grupos que R6, R7 e R9, respetivamente, e R10' e R11' sáo os mesmos que R10 e R11, em que se R11 e R11' forem S0ZM, M pode representar um catiáo divalente farmacéuticamente aceitável e em que o termo alquilo incluí alquenilo, alquinilo e cicloalquilo e o termo arilo incluí heteroarilo.
2. 2. Um composto, de acordo com qualquer reivindicagäo 1, em que R7 é selecionado a partir de H, OH e OR.
3. 3. Um composto, de acordo com a reivindicagäo 2, em que R7 é um grupo alquiloxi C1-4.
4. 4. Um composto, de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 3, em que Y e y’ sáo 0.
5. 5. Um composto, de acordo com qualquer urna das reivindicagöes anteriores, em que R" é alquileno C3_7.
6. 6. Um composto, de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 5, em que R9 é H e/ou R6 é selecionado a partir de H e halo.
7. 7. Um composto, de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 6, em que: (a) A é fenilo; e/ou (b) X é selecionado a partir de OH, SH ou NH2.
8. 8. Um composto, de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 7, em que Q1 é urna ligagáo simples, e Q2 é urna ligagáo simples ou Q2 é -Z-(CH2)n-, ZéOouSenél ou 2 .
9. 9. Um composto, de acordo com a reivindicagáo 8, em que R2 é A-NH2.
10. 10. Um composto de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 7, em que Q1 é -CH=CH-.
11. 11. Um composto de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 10, em que o grupo R12 é substituido por um grupo alcoxi Ci_7 que é, ele próprio, substituido por um grupo amino.
12. 12. Um composto de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 10, em que o grupo R12 é fenilo, com um único substituinte na posigao meta ou para.
13. 13. Um composto de acordo com qualquer urna das reivindicagöes 1 a 12, em que R6, R7’, R9’, R10’, R11’ e y’ sao o mesmo que R6, R7, R9, R10, R11 e Y respetivamente.
14. 14. Um composto de acordo com a reivindicagáo 1 tendo a estrutura:
15. 15. Um composto de acordo com a reivindicagäo 1 tendo a estrutura:
16. 16. A utilizagäo de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicagöes 1 a 15 no fabrico de um medicamento para o tratamento de uma doenga proliferativa.
17. 17. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicagöes 1 a 15 para utilizagäo no tratamento de uma doenga proliferativa.
18. 18. Um composto de fórmula III:

    em que R2, R12, R6, R9, R7, r", Y, y', R6', R7', R9' säo definidos como em qualquer das reivindicagöes 1 a 9; e ou: (a) R10 é selecionado a partir de carbamato de 2-trimetilsililetilo (Teoc), fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) e 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo (Troc), e R11 é O-Prot0, em que Prot0 é terc-butildimetilsililo (TBS) ou tetrahidropiranilo (THP); (b) R10 é selecionado a partir de metoximetilo (MOM), benziloxi metilo (BOM) e 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEM) e Rn é um grupo oxo; onde R10’ e R11’ säo o mesmo que R10 e R11.
19. 19. Um composto de acordo com a reivindicagäo 18, em que R10 é Troc e/ou R11 é OTBS.
20. 20. Um composto de acordo com a reivindicagäo 18, em que R11 é oxo e R10 é SEM. Lisboa, 21 de Dezembro de 2015 European Patent Office 80298 MUNICH GERMANY

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    *) See note.