PT1845978E - Pirazolo piridinas substituídas, composições que as contêm, processo de preparação e utilização - Google Patents

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DESCRIÇÃO "PIRAZOLO PIRIDINAS SUBSTITUÍDAS, COMPOSIÇÕES QUE AS CONTÊM, PROCESSO DE PREPARAÇÃO E UTILIZAÇÃO" A presente invenção refere-se especialmente a novos compostos químicos, particularmente a novas pirazolo piridinas substituídas, às composições que as contêm e à sua utilização como medicamentos.

Mais particularmente e de acordo com um primeiro aspecto, a invenção refere-se a novas pirazolo piridinas específicas apresentando uma actividade anticancerosa, através da modulação da actividade de proteínas, em particular de cinases.

Até ao momento, a maioria dos compostos comerciais utilizados em quimioterapia colocam problemas significativos de efeitos secundários e de tolerância pelos doentes. Estes efeitos poderão ser limitados na medida em que os medicamentos utilizados actuem selectivamente sobre as células cancerosas, excluindo as células saudáveis. Uma das soluções para limitar os efeitos indesejáveis de uma quimioterapia pode consistir, consequentemente, na utilização de medicamentos que actuem em vias metabólicas ou componentes destas vias, expressas principalmente nas células cancerosas e que não serão ou serão pouco expressas nas células saudáveis.

As proteínas cinases são uma família de enzimas que catalisam a fosforilação de grupos hidroxilo de resíduos específicos de proteína, tais como resíduos de tirosina, serina 1 ou treonina. Essas fosforilações podem modificar significativamente a função de proteínas; deste modo, as proteínas cinases desempenham um papel significativo na regulação de uma grande variedade de processos celulares, incluindo, nomeadamente, o metabolismo, a proliferação celular, a diferenciação celular, a migração celular ou a sobrevivência celular. De entre as diferentes funções celulares em que está envolvida a actividade de uma proteína cinase, alguns processos representam alvos atraentes para tratar as doenças cancerosas assim como outras doenças.

Deste modo, um dos objectivos da presente invenção consiste em propor composições tendo uma actividade anticancerosa, actuando, em particular, no que respeita a cinases. De entre as cinases em que é pretendida uma modulação da actividade, são preferidas as FAK, KDR e Tie2.

Estes produtos correspondem a fórmula (I) seguinte:

A

em que: 3) Um de X, Y e Z é seleccionado de entre N e 0 e dois outros de Z, Y e x são C(R5) e C(R6); 2

\

A f em que X2 é seleccionado de entre N, C-CH3, CF e CH.

Os substituintes R5 e R6 preferidos são seleccionados independentemente de entre H, halogéneo, OMe e metilo. R5 e R6 são seleccionados vantajosamente de entre H e F. R5 e R6 são, de um modo preferido, H.

Os substituintes L-A preferidos são seleccionados vantajosamente de entre NH-CO-NH-A e NH-S02-A.

Uma combinação L-A particularmente eficaz é obtida quando L-A é NHCONH-A. A é seleccionado de entre fenilo, pirazolilo e isoxazolilo; eventualmente substituído. 0 substituinte A é substituído muito vantajosamente com um substituinte seleccionado de um primeiro grupo constituído por alquilo(C1-C6), alquilo(C1-C6) halogenado, alquileno(C2-C6), alquinilo(C2-C6), arilo, halogéneo, heteroarilo, O-alquilo(C1-C6), O-Arilo, O-heteroarilo, S-alquilo(C1-C6), S-Arilo, S-heteroarilo, estando cada, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados de entre alquilo(C1-C3), halogéneo, O-alquilo(C1-C3). 3 0 substituinte A é, de um modo preferido, substituído com um substituinte seleccionado de um segundo grupo constituído por F, Cl, Br, I, OH, SH, S03M, COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), alquilo(C1-C3)-OH, alquilo(C1-C3)-N(R8)(R9), alquilo(C1-C3)-(RIO), alquilo(C1-C3)-COOH, N(R8)(R9); em que R8 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, alquilo(C1-C3), alquilo(C1-C3)OH, alquilo(C1-C3)NH2, alquilo (C1-C3) COOM, alquilo (C1-C3) S03M; em que, quando R8 e R9 são simultaneamente diferentes de H, estes podem ser ligados para formar um anel com 5 a 7 membros contendo 0 a 3 heteroátomos seleccionados de entre 0, N e S; em que M é H ou um catião de metal alcalino seleccionado de entre Li, Na e K; e em que RIO é H ou um heterociclo não-aromático eventualmente substituído, compreendendo 2 a 7 átomos de carbono e 1 a 3 heteroátomos seleccionados de entre N, 0 e S.

Os substituintes A particularmente preferidos são seleccionados de entre fenilo e isoxazolilo; podendo os referidos substituintes ser substituídos com halogéneo, alquilo(C1-C4), alquilo(C1-C3) halogenado, 0-alquilo(C1-C4), S-alquilo(C1-C4), 0-alquilo(C1-C4) halogenado e S-alquilo(C1-C4) halogenado. Quando A é dissubstituído, os dois substituintes de A podem formar um anel com 5 a 7 membros contendo 0 a 3 heteroátomos. A é substituído vantajosamente com um ou mais substituintes, idênticos ou diferentes, seleccionados independentemente do grupo constituído por F, Cl, Br, I, OH, SH, S03M, COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), alquilo(C1-C3)-OH, alquilo(C1-C3)-N(R8) (R9), alquilo(C1-C3)-(RIO) , alquilo(C1-C3)-COOH, N(R8)(R9), alquilo(C1-C6), alquileno(C2-C6), alcinilo(C2-C6), arilo, heteroarilo, 4 O-heteroarilo, O-alquilo(C1-C6), O-Arilo, O-heteroarilo, S-alquilo(C1-C6), S-Arilo, S-heteroarilo, estando cada um eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados de entre alquilo(C1-C3), halogéneo, O-alquilo(C1-C3); em que R8 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, alquilo(C1-C3), alquilo(C1-C3)0H, alquilo(C1-C3)NH2, alquilo(C1-C3)COOM, alquilo (C1-C3) S03M; em que quando R8 e R9 são simultaneamente diferentes de H, estes podem ser ligados para formar um anel com 5 a 7 membros compreendendo de 0 a 3 heteroátomos seleccionados de entre 0, N e S; em que M é H ou um catião de metal alcalino seleccionado de entre Li, Na e K; e em que RIO é H ou um heterociclo não-aromático eventualmente substituído, compreendendo 2 a 7 átomos de carbono e 1 a 3 heteroátomos seleccionados de entre N, 0 e S.

De acordo com um forma de realização preferida, A é vantajosamente 2-fluoro-5-trifluorometil-fenilo ou 2-metoxi-5-trifluorometil-fenilo.

Os produtos de acordo com a invenção podem ser seleccionados de entre: 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 5 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[ 3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metilcarbonilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia, Ácido 3 — {3— [4— (3-amino-lii-pirazolo [3, 4-b] piridin-4-il) -fenil]-ureido}-4-metoxi-benzóico, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-hidroxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3, 4-dimetil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terbutil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-meti1-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-ureia, 6 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[ 3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-etil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil-3-l,3-benzodioxol-5-il-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metoxi-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-cloro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-metil-fenil)-ureia, N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida.

Outros produtos de acordo com a invenção podem ser seleccionados de entre: 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(fenil)-ureia, 7 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il] -3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil-3-(2,4-dimetoxifenil)-ureia, N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terbutil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3, 4-dimetil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-meti1-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,5-difluoro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-ureia, 8 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metil-5-fluoro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-5-cloro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometilsulfanil-fenil)-ureia.

Outros produtos de acordo com a invenção podem ser seleccionados de entre: 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida.

Um produto de acordo com a invenção poderá apresentar-se sob a forma: não-quiral ou racémica ou enriquecida num estereoisómero ou enriquecido num enantiómero; 9 poderá estar eventualmente salificado, estar eventualmente hidratado e estar eventualmente solvatado.

Um produto de acordo com a invenção pode ser utilizado na preparação de um medicamento útil para tratar um estado patológico, em particular um cancro.

De acordo com um segundo aspecto, a invenção refere-se a um medicamento, compreendendo um produto de fórmula (I) de acordo com o seu primeiro aspecto ou um sal de adição deste composto com um ácido farmaceuticamente aceitável ou, ainda, um hidrato ou um solvato do produto de fórmula (I).

De acordo com um terceiro aspecto, a invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo um produto de acordo com o seu primeiro ou o seu segundo aspecto, em combinação com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

De acordo com um quarto aspecto, a invenção refere-se à utilização de um produto de acordo com um dos outros aspectos da invenção, como agente inibidor de uma reacção catalisada por uma cinase. De entre as cinases, são preferidas as FAK, KDR e Tie2. A presente invenção refere-se também a composições terapêuticas compreendendo um produto de acordo com a invenção, em combinação com um excipiente farmaceuticamente aceitável de acordo com o modo de administração seleccionado. A composição farmacêutica pode apresentar-se sob a forma sólida, liquida ou de lipossomas. 10

De entre as composições sólidas podem-se referir pós, cápsulas moles, comprimidos. Entre as formas orais podem-se também incluir as formas sólidas protegidas no que respeita ao meio ácido do estômago. Os suportes utilizados para as formas sólidas são constituídos, nomeadamente, por suportes minerais como fosfatos, carbonatos ou por suportes orgânicos como lactose, celuloses, amido ou polímeros. As formas líquidas são cosntituídas por soluções de suspensões ou dispersões. Estas contêm como suporte dispersivo quer água que um solvente orgânico (etanol, nmp ou outros) ou misturas de agentes tensioactivos e solventes ou agentes complexantes e solventes.

As formas líquidas irão ser, de um modo preferido, injectáveis e, por isso, terão uma formulação aceitável para essa utilização.

As vias aceitáveis de administração por injecção incluem as vias intravenosa, intra-peritoneal, intramuscular e sub-cutânea, sendo normalmente preferida a via intravenosa. A dose administrada dos compostos da invenção irá ser adaptada pelo especialista de acordo com a via de administração ao doente e do estado deste último.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados isoladamente ou em mistura com outros anticancerosos. De entre associações possíveis podem-se referir: os agentes alquilantes e, nomeadamente, ciclofosfamida, melfalano, ifosfamida, clorambucil, bussulfano, tiotepa, prednimustina, carmustina, lomustina, semustina, 11 esteptozotocina, decarbazina, temozolomida, procarbazina e hexametilmelamina os derivados da platina como, nomeadamente, cisplatina, carboplatina ou oxaliplatina os agentes antibióticos como, nomeadamente, bleomicina, mitomicina, dactinomicina os agentes antimicrotúbulos como, nomeadamente, vinblastina, vincristina, vindesina, vinorrelbina, taxóides (paclitaxel e docetaxel) os antraciclinas como, nomeadamente, doxorrubicina, daunorrubicina, idarrubicina, epirrubicina, mitoxantrona, losoxantrona os inibidores de topoisomerases dos grupos I e II, tais como etopósido, tenipósido, amsacrina, irinotecano, topotecano e tomudex as fluoropirimidinas, tais como 5-fluorouracilo, UFT, floxuridina os análogos da citidina, tais como 5-azacitidina, citarabina, gemcitabina, 6-mercaptomurina, 6-tioguanina análogos da adenosina, tais como pentostatina, citarabina ou fosfato de fludarabina o metotrexato e ácido folinico 12 as enzimas e diversos, compostos, tais como L-asparaginase, hidroxiureia, ácido trans-retinóico, suramina, dexrazoxano, amifostina, herceptina, assim como hormonas estrogénicas, androgénicas agentes antivasculares tais como os derivados da combretastatina ou da colchicina e os seus profármacos. É igualmente possível associar ao composto da presente invenção um tratamento por radiações. Estes tratamentos podem ser administrados simultaneamente, separadamente, sequencialmente. 0 tratamento irá ser adaptado pelo especialista de acordo com o doente a tratar.

Os produtos da invenção são úteis como agentes inibidores de uma reacção catalisada por uma cinase. FAK, KDR e Tie2 são cinases para as quais os produtos da invenção irão ser particularmente úteis como inibidores. São proporcionadas abaixo as razões pelas quais estas cinases são seleccionadas:

FAK A FAK é uma tirosina cinase citoplasmática que desempenha um papel importante na transdução do sinal transmitido pelas integrinas, a família de receptores heterodiméricos da adesão celular. A FAK e a integrinas estão colocalisadas em estruturas perimembranares designadas placas de adesão. Foi demonstrado em muitos tipos celulares que a activação da FAK, assim como a sua fosforilação nos resíduos de tirosina e, em particular, a sua 13

autofosforilação da tirosina 397, estavam dependentes de ligação de integrinas aos seus ligandos extracelulares e consequentemente induzidos durante a adesão celular [Kornberg L, et al. J. Biol. Chem. 267 (33): 23439-442. (1992)]. A autofosforilação da tirosina 397 da FAK representa um local de ligação de outra tirosina cinase, Src, através do seu domínio SH2 [Schaller et al. Mol. Cell. Biol. 14:1680-1688. 1994; Xing et al. Mol. Cell. Biol. 5:413-421. 1994]. A Src pode então

fosforilar a FAK na tirosina 925, recrutando deste modo a proteína adaptadora Grb2 e induzindo, em algumas células a activação da via ras e MAP cinase envolvida no controlo da proliferação celular [Schlaepfer et al., Nature; 372:786-791. 1994; Schlaepfer, et al. Prog. Blophy. Mol. Biol. 71:435-478. 1999; Schlaepfer e Hunter, J. Biol. Chem. 272:13189-13195. 1997] . A activação da FAK pode também induzir a via de sinalização da cinase do terminal NH2 de jun (JNK) e resultar na progressão das células na direcção da fase Gl do ciclo celular [Oktay et al., J. Cell Biol. 145:1461-1469. 1999]. A fosfatidilinositol-3-0H cinase (Pl3-cinase) liga-se também à FAK na tirosina 397 e esta interacção pode ser necessária à activação da Pl3-cinase [Chen e Guan, Proc. Nat. Acad. Sei. EUA. 91: 10148-10152. 1994; Ling, et al. J. Cell Biochem. 73:533-544. 1999]. O complexo FAK/Src fosforila vários substratos como a paxilina e pl30CAS em fibroblastos [Vuori, et al. Mol. Cell. Biol. 16: 2606-2613. 1996] .

Os resultados de numerosos estudos suportam a hipótese dos inibidores da FAK poderem ser úteis no tratamento do cancro. Os estudos sugeriram que a FAK possa desempenhar um papel significativo na proliferação celular e/ou na sobrevivência in vitro. Por exemplo, em células CHO, alguns autores demonstraram que a sobreexpressão de pl25FAK origina uma 14 aceleração da transição G1 a S, sugerindo que pl25FAK favoreçe a proliferação celular [Zhao J-H et al. J. Cell Biol. 143:1997-2008. 1998]. Outros autores mostraram que as células tumorais tratadas com oligonucleótidos anti-sentido da FAK perdem a sua adesão e entram em apoptose (Xu et al., Cell Growth Differ. 4:413-418. 1996) . Foi também demonstrado que a FAK promove a migração das células in vitro. Deste modo, os fibroblastos deficientes para a expressão da FAK (murganhos "knockout" para a FAK) têm uma morfologia arredondada, deficiências na migração celular em resposta a sinais quimiotáticos e estas deficiências são suprimidas por uma re-expressão da FAK [DJ. Sieg et al ., J. Cell Science. 112:2677-91. 1999 ]. A sobreexpressão do domínio C-terminal da FAK (frnk) bloqueia a expansão das células aderentes e reduz a migração celular in vitro [Richardson A. e Parsons J. T. Nature. 380:538-540. 1996]. A sobreexpressão da FAK em células CHO, COS ou em células do astrocitoma humano favorece a migração das células. O envolvimento da FAK na promoção da proliferação e da migração das células em muitos tipos celulares in vitro, sugere o papel potencial da FAK nos processos neoplásicos. Um estudo recente demonstrou efectivamente o aumento da proliferação das células tumorais in vivo após indução da expressão da FAK em células de astrocitoma humano [Cary L. A., et al. J. Cell Sei. 109:1787-94. 1996; Wang D, et al. J. Cell Sei. 113:4221-4230. 2000] . Além disso, os estudos imuno-histoquimicos das biópsias humanas demostraram que a FAK estava sobreexpressa em cancros da próstata, mama, tiróide, cólon, melanoma, cérebro e pulmão, estando o nível de expressão da FAK directamente correlacionado com os tumores apresentando o fenótipo mais agressivo [Weiner TM, et al. Lancet. 342 (8878):1024-1025. 1993; Owens et al. Câncer Research. 55:2752-2755. 1995; Maung K. et al. Oncogene. 15 18:6824-6828. 1999; Wang D, et al. J. Cell Sei. 113:4221-4230. 2000].

KDR O KDR (Receptor do Domínio de inserção de Cinase) também designado VEGF-R2 (Receptor do Factor de Crescimento Endotelial Vascular 2), é expresso apenas nas células endoteliais. Este receptor fixa-se ao promotor de crescimento angiogénico VEGF e serve, deste modo, como mediador a um sinal de transdução através da activação do seu domínio de cinase intracelular. A inibição directa da actividade da cinase de VEGF-R2 permite reduzir o fenómeno da angiogénese na presença de VEGF exógeno (Factor de Crescimento Endotelial Vascular: promotor de crescimento vascular endotelial) (Strawn et al., Câncer Research, 1996, volume 56, p. 3540-3545). Este processo foi demonstrado, nomeadamente, utilizando mutantes VEGF-R2 (Millauer et al., Câncer Research, 1996, volume 56, p.1615-1620). O receptor VEGF-R2 parece não ter qualquer outra função no adulto para além da relacionada com a actividade angiogénica do VEGF. Consequentemente, um inibidor selectivo da actividade cinase do VEGF-R2 deve apenas apresentar um pouco de toxicidade.

Além deste papel central no processo dinâmico angiogénico, os resultados recentes sugerem que a expressão da VEGF contribua para a sobrevivência das células tumorais após quimio e radioterapias, salientando a potencial sinergia de inibidores de KDR com outros agentes (Lee, et al. Câncer Research, 2000, volume 60, p.5565-5570) . 16

Tie2 A Tie-2 (TEK) é membro de uma família dos receptores da tirosina cinase, específica das células endoteliais. A Tie2 é o primeiro receptor com actividade tirosina cinase que se sabe ser simultaneamente agonista (angiopoietina 1 ou Angl) que estimula a autofosforilação do receptor e a sinalização celular [S. Davis et al. (1996) Cell 87, 161-1169] e antagonista (angiopoietina 2 ou Ang2) [P. C. Maisonpierre, et al. (1997) Science 277, 55-60]. A angiopoietina 1 pode sinergisar com o VEGF nas últimas etapas da neo-angiogénese [AsaharaT. Circ. Res. (1998) 233-240]. As experiências de knockout e manipulações transgénicas da expressão de Tie2 ou de Angl originam animais que apresentam defeitos na vascularização [D. J. Dumont et al. (1994) Genes Dev. 8, 1897-1909 e C. Suri (9996) Cell 87, 1171-1180]. A ligação de Angl ao seu receptor leva à autofosf orilação do domínio cinase de Tie2 que é essencial para a neovascularização assim como para o recrutamento e a interacção dos vasos com os pericitos e as células musculares lisas; estes fenómenos contribuem para a maturação e para a estabilidade dos vasos formados de novo [P. C. Maisonpierre et al. (1997) Science 277, 55-60]. Lin et al. (1997) J Clin. Invest. 100, 8: 2072-2078 e Lin P. (1998) PNAS 95, 8829-8834, mostraram uma inibição do crescimento e da vascularização tumoral, assim como uma redução das metástases do pulmão, durante infecções adenovirais ou injecções do domínio extracelular de Tie-2 (Tek) em modelos de xenoenxertos de tumor da mama e melanoma.

Os inibidores de Tie2 podem ser utilizados nas situações em que a neovascularização ocorre de uma forma inadequada (ou seja na retinopatia diabética, inflamação crónica, psoríase, sarcoma 17 de Kaposi, neovascularização crónica devida à degenerescência macular, artrite reumatóide, hemoangioma infantil e cancros).

Definições 0 termo "halogéneo" refere-se a um elemento seleccionado de entre F, Cl, Br e I. 0 termo "alquilo" refere-se a um substituinte hidrocarboneto saturado, linear ou ramificado, tendo de 1 a 12 átomos de carbono. Os substituintes metilo, etilo, propilo, 1- metiletilo, butilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo, 1.1- dimetiletilo, pentilo, 1-metilbutilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, 1,1-dimetilpropilo, 1,2-dimetilpropilo, 2.2- dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-metilpentilo, 2- metilpentilo, 1-etilbutilo, 2-etilbutilo, 3,3-dimetilbutilo, heptilo, 1-etilpentilo, octilo, nonilo, decilo, undecilo e dodecilo são exemplos de substituintes alquilo . 0 termo "alquileno" refere-se a um substituinte hidrocarboneto linear ou ramificado tendo uma ou mais insaturações, tendo de 2 a 12 átomos de carbono. Os substituintes etilenilo, 1-metiletilenilo, prop-l-enilo, prop-2-enilo, Z-l-metilprop-l-enilo, E-l-metilprop-l-enilo, Z-l,2-dimetil-prop-l-enilo, E-l,2-dimetilprop-l-enilo, but-1,3-dienilo, l-metilidenil-prop-2-enilo, Ζ-2-metilbut-l,3-dienilo, Ε-2-metilbut-l,3-dienilo, 2-metil-l-metilidenilprop-2-enilo, undec-l-enilo e undec-10-enilo são exemplos do substituinte alquileno. 18 0 termo "alcinilo" refere-se a um substituinte hidrocarboneto linear ou ramificado tendo, pelo menos, duas insaturações contidas num par de átomos de carbono vizinhos, tendo de 2 a 12 átomos de carbono. Os substituintes etinilo; prop-l-inilo; prop-2-inilo; e but-l-inilo são exemplos do substituinte alcinilo. 0 termo "arilo" refere-se a um substituinte aromático mono ou policiclico tendo de 6 a 14 átomos de carbono. Os substituintes fenilo, naft-l-ilo; naft-2-ilo; antracen-9-ilo; 1,2,3,4-tetra-hidronaft-5-ilo; e 1,2,3,4-tetra-hidronaft-6-ilo são exemplos do substituinte arilo. 0 termo "heteroarilo" refere-se a um substituinte hetroaromático mono ou policiclico tendo de 1 a 13 átomos de carbono e 1 a 4 heteroátomos. Os substituintes pirrol-l-ilo; pirrol2-ilo; pirrol3-ilo; furilo; tienilo; imidazolilo; oxazolilo; tiazolilo; isoxazolilo; isotiazolilo; 1,2,4-triazolilo; oxadiazolilo; tiadiazolilo; tetrazolilo; piridilo; pirimidilo; pirazinilo; 1,3,5-triazinilo; indolilo; benzo[b]furilo; benzo[b]tienilo; indazolilo; benzimidazolilo; azaindolilo; quinoleilo; isoquinoleilo; carbazolilo; e acridilo são exemplos do substituinte heteroarilo. 0 termo "heteroátomo" refere-se aqui a um átomo pelo menos divalente, diferente do carbono. N; 0; S; e se são exemplos de heteroátomo. 0 termo "cicloalquilo" refere-se a um substituinte hidrocarboneto ciclico saturado ou parcialmente insaturado tendo de 3 a 12 átomos de carbono. Os substituintes ciclopropilo; ciclobutilo; ciclopentilo; ciclopentenilo; ciclopentadienilo; 19 ciclo-hexenilo; ciclo-octilo; ciclo-hexilo; biciclo[2.2.1]heptilo; ciclo-heptilo; biciclo[2.2.2]octilo; adamantilo; e os per-hidronaftilo são exemplos do substituinte cicloalquilo. 0 termo "heterociclilo" refere-se a um substituinte hidrocarboneto ciclico saturado ou parcialmente insaturado tendo de 1 a 13 átomos de carbono e 1 a 4 heteroátomos. De um modo preferido, o substituinte hidrocarboneto ciclico saturado ou parcialmente insaturado irá ser monociclico e irá compreender 4 ou 5 átomos de carbono e 1 a 3 heteroátomos. 0 termo "substituído" refere-se a um ou mais substituintes diferentes de H, por exemplo halogéneo; alquilo; arilo; heteroarilo, cicloalquilo; heterociclilo; alquileno; alcinilo; OH; O-alquilo; O-alquileno; O-arilo; O-heteroarilo; NH2; NH-alquilo; NH-arilo; NH-heteroarilo; N-alquil-alquilo'; SH; S-alquilo; S-arilo; S(02)H; S (02)-alquilo; S(02)-arilo; SO3H; S03-alquilo; S03-arilo; CHO; C(O)-alquilo; C(0)-arilo; C(0)0H; C(0)O-alquilo; 0(0)O-arilo; OC(0)-alquilo; 0C(0)-arilo; C(0)NH2; C(0)NH-alquilo; C(0)NH-arilo; NHCHO; NHC(0)-alquilo; NHC(0)-arilo; NH-cicloalquilo; NH-heterociclilo, CONH-Heterociclilo, CO-Heteroarilo, CO-Heterociclilo NHCO-Heteroarilo, NHCO-Heterociclilo, NHCONH-alquilo. A presente invenção tem ainda, como objectivo, 0 método de preparação dos produtos de fórmula (I).

Os produtos de acordo com a invenção podem ser preparados a partir de métodos convencionais de química orgânica. 0 esquema 1 abaixo é ilustrativo do método utilizado para a preparação do exemplo 1 no que se refere às pirazolo[3,4—b]piridinas. Por essa 20 razão, este não pode constituir uma limitação do âmbito da invenção, no que se refere aos métodos de preparação dos compostos reivindicados.

Esquema 1:

21 0 esquema 2 abaixo é ilustrativo do método utilizado para a preparação dos exemplos no que se refere às pirazolo [4,3-c]piridinas. Por essa razão, este não pode constituir uma limitação do âmbito da invenção, no que refere aos métodos de preparação dos compostos reivindicados.

Esquema 2:

Esquema 3:

Processo de preparação de pirazolo[3,4-c]piridinas (não-limitativo)

22 0 esquema 4 abaixo é ilustrativo do método utilizado para a preparação dos exemplos no que se refere às cadeias de derivados boronados.

Esquema 4:

0 esquema 5 abaixo é ilustrativo do método utilizado para a preparação da 4-iodo-lH-pirazolo[3,4 —b]piridin-3-ilamina.

Esquema 5:

0 esquema 6 abaixo é ilustrativo do método utilizado para a preparação da derivados de ureia da 4-bromo-lH-pirazolo[4, Ιο] piridin-3-ilamina. 23

Esquema 6:

0 esquema 7 abaixo é ilustrativo do método alternativo utilizado para a preparação dos exemplos no que se refere às pirazolo[4,3-c]piridinas 24

Esquema 7:

0 esquema 8 abaixo é ilustrativo do método alternativo utilizado para a preparação de pirazolo[3,4-c]piridinas.

Esquema 8: Ιβο-Ο-»

HH. '•CO.ffiU 25 É entendido pelo especialista na técnica que, para a realização dos processos de acordo com a invenção descritos anteriormente, pode ser necessário introduzir grupos protectores das funções amino, carboxilo e álcool para evitar reacções secundárias. Estes grupos são os que permitem ser eliminados sem interferir com o resto da molécula. Como exemplos de grupos protectores da função amino, pode-se referir o carbamato de terc-butilo que pode ser regenerado utilizando ácido trifluoroacético ou iodotrimetilsilano, o acetilo que pode ser regenerado em meio ácido (ácido clorídrico por exemplo). Como grupos protectores da função carboxilo, podem-se referir o ésteres (por exemplo, éster metoximetilico, éster benzilico). Como grupos protectores do da função álcool, podem-se referir os ésteres (por exemplo, éster benzoilico) que podem ser regenerados em meio ácido ou por hidrogenação catalítica. Outros grupos protectores utilizáveis são descritos por T. W. GREENE et al. em Protective groups in Organic Synthesis, terceira edição, 1999, Wiley-Interscience.

Um outro objectivo da presente invenção refere-se a compostos de fórmula geral (II):

(II) em que X, Y, Z são tais como anteriormente definidos e G é um átomo de halogéneo adequado na reacção de ligação de Suzuki, como produtos intermediários para a preparação dos produtos de fórmula geral (I), tais como definidos na reivindicação 1. 26

Um outro objectivo da presente invenção refere-se a compostos de fórmula geral (111) :

em que: X, Y, Z são tais como anteriormente definidos, X3 é Ar-L-A em que Ar, L e A são tais como anteriormente definidos ou Ar-L em que Ar é tal como definido anteriormente e L é NH2 ou N02,

Xi e X2 são diferentes e são seleccionados independentemente de entre CN, Cl, -NH-NH2, -N(Boc)-NH(Boc), -N(Boc)-N(Boc)2, como produtos intermediários para a preparação dos produtos de fórmula geral (I), tais como definidos na reivindicação 1.

Os compostos de fórmula (I) são isolados e podem ser purificados por métodos conhecidos normais, por exemplo, por cristalização, cromatografia ou extracção.

Os enantiómeros, diastereoisómeros dos compostos de fórmula (I) fazem igualmente parte da invenção.

Os compostos de fórmula (I) contendo um resto básico podem ser eventualmente transformados em sais de adição com um ácido mineral ou orgânico, por acção desse ácido dentro de um 27 solvente, por exemplo orgânico, tal como álcool, cetona, éter ou solvente clorado.

Os compostos de fórmula (I) contendo um resto ácido podem ser eventualmente transformados em sais metálicos ou em sais de adição com bases azotadas de acordo com os métodos por si conhecidos. Estes sais podem ser obtidos por acção de uma base metálica (alcalina ou alcalinoterrosa por exemplo), amónia, amina ou sal de amina sobre um composto de fórmula (I), num solvente. 0 sal formado é separado pelos métodos normais.

Estes sais fazem igualmente parte da invenção.

Quando um produto de acordo com a invenção apresenta, pelo menos, uma função básica livre, os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados por reacção entre o referido produto e um ácido mineral ou orgânico. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem cloretos, nitratos, sulfato, hidrogenossulfatos, pirossulfatos, bissulfatos, sulfitos, bissulfitos, fosfatos, mono-hidrogenofosfatos, di-hidrogenofosfatos, metafosfatos, pirofosfatos, acetatos, propionatos, acrilatos, 4-hidroxibutiratos, caprilatos, caproatos, decanoatos, oxalatos, malonatos, succinatos, glutaratos, adipatos, pimelatos, maleatos, fumaratos, citratos, tartratos, lactatos, fenilacetatos, mandelatos, sebacatos, suberatos, benzoatos, ftalatos, metanossulfonatos, p-tolueno sulfonato, propanossulfonatos, xilenossulfonatos, salicilatos, cinamatos, glutamatos, aspartatos, glucuronatos, galacturonatos.

Quando um produto de acordo com a invenção apresenta, pelo menos, uma função ácida livre, os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados por reacção entre o referido 28 produto e uma base mineral ou orgânica. As bases farmaceuticamente aceitáveis incluem hidróxidos de catiões de metais alcalinos ou alcalino terrosos, tais como Li, Na, K, Mg, Ca, de compostos aminados básicos, tais como amónia, arginina, histidina, piperidina, morfolina, piperazina, trietilamina. A invenção é igualmente descrita pelos exemplos seguintes, proporcionados a titulo de ilustração da invenção.

Foram realizadas análises lc/ms num equipamento MicroMass modelo LCT ligado a um equipamento HP 1100. Foi medida a abundância dos produtos utilizando um detector de barra de diodos HP G1315A numa gama de onda de 200-600 nm e um detector de dispersão de luz Sedex 65. A aquisição dos espectros de massa Mass spectra foi realizada numa gama de 180 a 800. Os dados foram analisados utilizando o programa informático Micromass MassLynx. A separação foi realizada numa coluna Hypersil BDS C18, 3 pm (50 x 4,6 mm), eluindo com um gradiente linear de acetonitrilo 5 a 90% contendo ácido trifluoroacético (TFA) 0,05% (v/v) em água contendo TFA 0,05% (v/v) durante 3,5 min com um fluxo de 1 mL/min. O tempo total da análise, incluindo o período de reequilibração da coluna, é de 7 min.

Os espectros MS foram realizados em electrovaporização (ES +) num equipamento Plataform II (Micromass). São descritos os principais iões observados.

Foram medidos os pontos de fusão em capilar, num equipamento Mettler fp62, gama 30 °C a 300 °C, subindo 2 °C por min. 29

Purificação por LC/MS:

Os produtos podem ser purificados por LC/MS utilizando um sistema Waters FractionsLynx constituído por uma bomba de gradiente Waters modelo 600, uma bomba de regeneração Waters modelo 515, uma bomba de diluição Waters Reagent Manager, um auto-injector Waters modelo 2700, duas válvulas Rheodyne modelo LabPro, um detector de barra de díodos Waters modelo 996, um espectrómetro de massa Waters modelo ZMD e um colector de fracções Gilson modelo 204. O sistema foi controlado pelo programa informático Waters FractionLynx. A separação foi realizada alternativamente em duas colunas Waters Symetry (Cl8, 5 μΜ, 19 x 50 mm, referência de catálogo 186000210), estando a decorrer uma regeneração com uma mistura água/acetonitrilo 95/5 (v/v), contendo ácido trifluoroacético 0,07% (v/v) numa coluna, enquanto estava a decorrer uma separação na outra coluna. A eluição das colunas foi realizada utilizando um gradiente linear de acetonitrilo de 5 a 95% contendo ácido trifluoroacético a 0,07% (v/v) em água contendo ácido trifluoroacético a 0,07% (v/v), com um fluxo de 10 mL/min. É separado um milésimo do efluente à saída da coluna de separação, com um LC Packing Accurate, diluído com álcool metílico com um fluxo de 0,5 mL/min é enviado para os detectores, numa proporção de 75% para o detector de barra de díodos e os restantes 25% para o espectrómetro de massa. O restante efluente (999/1000) é enviado para o colector de fracções onde o fluxo é eliminado quando a massa do produto esperado não é detectada pelo programa informático FractionLynx. As fórmulas moleculares dos produtos esperados são fornecidas ao programa informático FractionLynx que inicia a recolha do produto quando o sinal de massa detectado corresponde ao ião [M+H]+ e/ou ao [M+Na]+. Em alguns casos, dependendo dos resultados de LC/MS analítica, quando era 30 era detectado um ião intenso correspondente a [M+2H]++, igualmente detectado o valor correspondente à metade da massa molecular calculada (MW/2) ao programa informático FractionLynx. Nestes condições, a recolha é igualmente desencadeada quando são detectados os sinais de massa dos iões [M+2H]++ e/ou [M+Na+H]++. Os produtos foram recolhidos em tubos de vidro tarados. Após a recolha, os solventes foram evaporados, num evaporador centrífugo Savant AES 2000 ou Genevac HT8 e as massas dos produtos foram determinadas por pesagem dos tubos após a evaporação dos solventes.

Exemplo 1 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia

2-fluom-3-iodo-piridina São adicionadas 10 g de 2-fluoropiridina em 50 mL de THF a uma solução de 0,103 mol de lda em 200 mL de THF a -75 °C. A solução amarela é agitada durante 3 horas a -75 °C, depois são adicionadas 26,2 g de iodo em 80 mL de THF. A mistura de reacção é agitada durante 1,5 horas a -75 °C, depois são adicionados 50 mL de água a esta temperatura. Deixa-se subir a temperatura, 31

depois são adicionados 100 mL de água adicional a 0 °C. A suspensão é descorada por adição de tiossulfato de sódio. A mistura é extraida com éter dietilico. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio depois é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo oleoso é purificado em silica Si60 (40-63 pm) (ciclo-hexano/éter dietilico, 95:5). O produto obtido é retomado com éter dietilico e é eliminado um insolúvel bege por enxugamento. Após secagem sob vácuo, são obtidas 10,21 g de pó branco de 2-fluoro-3-iodopiridina.

Espectro MS (ES+): m/z = 224 [MH+] 2-Fluoro-4-iodo-nicotinonitrilo São adicionadas 4,8 g de 2-fluoro-3-iodopiridina em 20 mL de THF a uma solução de 21,5 mmol de LDA em 20 mL de THF a -75 °C. A solução amarela é agitada durante 1 h 10 a -75 °C, são então adicionadas 3,9 g de cianeto de para-tolueno sulfonilo em 20 mL de THF, a esta temperatura. A mistura de reacção é agitada durante 2 horas a -75 °C, depois são adicionadas 20 mL de água a esta temperatura. Deixa-se subir a temperatura, depois são adicionados 40 mL de água adicional a 0 °C. A mistura é extraida com éter dietilico. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio depois é concentrada sob pressão reduzida. A resina castanha obtida é purificada em sílica Si60 (40,63 pm) (ciclo-hexano/éter dietilico, 8:2). Obtém-se uma fracção de 667 mg de um pó amarelo de 2-Fluoro-4-iodo-nicotinonitrilo e uma segunda fracção de 2,1 g um pó amarelo pálido de 2-Fluoro-3-iodo-isonicotinonitrilo.

Espectro MS (ES+): m/z = 249 [MH+] 32 2-Hidrazino-4-iodo-nicotinonitrilo São adicionadas 2,4 mL de hidrato de hidrazina a uma solução de 1,2 g de 2-fluoro-4-iodo-nicotinonitrilo em 20 mL de MeOH a 20 °C. A suspensão amarela é agitada durante 20 min a 20 °C, depois é filtrada. O precipitado é lavado com metanol para originar após secagem sob vácuo 947 mg de pó branco de 2-Hidrazino-4-iodo-nicotinonitrilo.

Espectro MS (ES+): m/z = 261 [MH+] (3-Ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo e N,N',N'-(3-Ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo São adicionadas 492 mg de dicarbonato de di-terbutilo em 5 mL de diclorometano a uma mistura de 234 mg de 2-Hidrazino-4-iodo-nicotinonitrilo, 27,5 mg de N,N-dimetiaminopiridina e 0,316 mL de trietilamina em 11 mL de diclorometano a 4 °C. A reacção é agitada durante 30 min a 4 °C. Depois deixa-se subir a temperatura até 20 °C e agita-se durante 5 h. É adicionada água e esta mistura é extraida com acetato de etilo. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio depois é concentrada sob pressão reduzida. O residuo oleoso amarelo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á S1O2 32-63 pm pré-empacotada (eluente: diclorometano/metanol, 99,5:0,5, depois, 99:1) originando 2 fracções maioritárias, uma primeira fracção com 110 mg de um pó amarelo de N, N', N' -(3-Ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo (Espectro MS (ES+) : m/z = 561 [MH+] ) e uma segunda fracção com 202 mg de um óleo amarelo pálido contendo (3-Ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina- 33 dicarboxilato de di-terc-butilo. Este óleo amarelo é re-purifiçado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Ã Si02 32-63 pm pré-empacotada (eluente: ciclo-hexano/acetato de etilo, 95:5 depois 9:1) originando 114 mg de um pó bege de (3-Ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-dicarboxilato de di-terc-butilo, Espectro MS (ES+): m/z = 461 [MH+] N,N',N'~(3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo São adicionadas 3,9 g de di-terbutildicarbonato (Boc20) em 20 mL de diclorometano a uma mistura de 925 mg de 2-Hidrazino-4-iodo-nicotinonitrilo, 109 mg de N,N-dimetiaminopiridina e 2,6 mL de trietilamina em 45 mL de diclorometano a 4 °C. A reacção é agitada durante 30 min a 4 °C, depois deixa-se subir a temperatura até 20 °C. É adicionada água e a mistura é extraída com acetato de etilo depois é seca sobre sulfato de magnésio e é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo oleoso castanho é purificado em sílica Si60 (40-63 pm) (diclorometano/metanol, 98:2) para obter 1,2 g de um pó amarelo de N,N',N'-(3-Ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo. PF = 138 °C (Kõfler) .

Espectro MS (ES+): m/z = 561 [MH+]

Ligação de Suzuki (X = C) com um derivado di-boc São adicionadas 5 7 mg de NaHC03 em 1,7 mL de água a uma solução de 110 mg de (3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina 34 dicarboxilato de di-terc-butilo e 122 mg de 1-(2-Fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia em dioxano 5,5 mL. Depois, são adicionadas 26 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio e a reacção é aquecida em refluxo a 100 °C. Após 2,5 h a solução amarela clara é arrefecida até 20 °C e são adicionados 10 mL de acetato de etilo. A fase orgânica é lavada 2 vezes com 8 mL de água depois com 8 mL de solução salina. Após secagem sobre sulfato de magnésio e concentração sob pressão reduzida, o óleo amarelo residual é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Ã Si02 32-63 pm pré-empacotada (ciclo-hexano/acetato de etilo, 9:1). Obtêm-se 114 mg de (3-Ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo.

Espectro MS (ES+): m/z = 631 [MH+]

Ligação de Suzuki (X = C) com um derivado tri-boc São adicionadas 45,4 mg de NaHC03 em 1,4 mL de água a uma solução de 108 mg de N,N',N'-(3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo e 98 mg de 1-(2-Fluoro-5-tilfluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia em 4,5 mL de dioxano. Depois, são adicionadas 20,3 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio e a reacção é aquecida em refluxo a 100 °C. Após 2,5 h a solução amarela clara é arrefecida até 20 °C e são adicionados 10 mL de acetato de etilo. A fase orgânica é lavada 2 vezes com 8 mL de água depois com 8 mL de solução salina. Após secagem sobre sulfato de magnésio e concentração sob pressão reduzida, o óleo amarelo 35 residual é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 pm pré-empacotada (ciclo-hexano/acetato de etilo, 9:1 então 7:3). Obtém-se uma fracção de 86 mg de N,N',N'-(3-Ciano-4-{4-[3-(2—fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo e uma fracção de 31 mg de (3-ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazinadicarboxilato de di-terc-butilo.

Espectro MS (ES+): m/z = 731 [MH+] 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4—b]piridin-4-il)-fenil]-3- (2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia (a partir do derivado dibocado) São adicionados 0,3 mL de ácido trifluoroacético contendo de anisole a 10% a uma solução de 111 mg de (3-ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il) -hidrazinadicarboxilato de di-terc-butilo em 4 mL de diclorometano a 20 °C e a reacção é agitada durante 4 h. O meio de reacção é concentrado sob pressão reduzida originando um sólido vermelho alaranjado. Este resíduo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32,63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 95:5 a 90:10; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 56 mg de um pó bege de 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, cujas características são as seguintes:

Espectro IR (KBr): 3370; 3300; 1717; 1604; 1541; 1443; 1317; 1310; 1205; 1184; 1122; 1114; 1069 e 818 αιΓ1 36

Espectro de R.M.N. de (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,58 (s largo, 2H); 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,41 (dm, J = 9,0 Hz, 1H); 7,52 (t largo, J = 9,0 Hz, 1H); 7,56 (d largo, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,68 (d largo, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,62 (dd largo, J = 2,5 e 7,5 Hz, 1H) ; 9,13 (m estendido 1H); 9,57 (m estendido 1H); 12,25 (s largo, 1H) PF = 175 °C dec (Kõfler).

De um modo semelhante, a 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia pode ser obtida a partir de um derivado tribocado como se segue: São adicionados 0,2 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a uma solução de 81 mg de derivado N,N',Ν' -(3-ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo em 3 mL de diclorometano a 20 °C e a reacção é agitada durante uma noite. O meio de reacção é concentrado sob pressão reduzida originando um sólido vermelho alaranjado. Este residuo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 À Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 95:5 depois 90:10; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2).

Obtêm-se 27 mg de um pó de bege de 1-[4-(3-amino-lH- pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia 37

Exemplo 2 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il] -3-(2—fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia

Ligação de Suzuki (X = N) São adicionadas 63 mg de NaHC03 em 1,9 mL de água a uma solução de 150 mg de N,N',N'-(3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo e 136 mg de 1-(2-Fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureia em 6,2 mL de dioxano. Depois, são adicionadas 29 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio e a reacção é aquecida em refluxo a 100 °C. Após 2,5 h, a solução amarela é arrefecida até 20 °C e são adicionados 10 mL de acetato de etilo. A fase orgânica é lavada 2 vezes com 8 mL de água depois com 8 mL de solução salina. Após secagem sobre sulfato de magnésio e concentração sob pressão reduzida o óleo amarelo residual é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 98:2 a 95:5; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 67 mg de N,Ν',N'-{3'-ciano-6-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil- fenil) -ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo (Espectro MS (ES+) : m/z = 732 [MH+] ) e 55 mg 38 de {3'-ciano-6-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil}-ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo (Espectro MS (ES+): m/z = 632 [MH+]). 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2—£luoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia São adicionadas 0,15 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a uma solução de 55 mg de {3'-ciano-6-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo em 2 mL de diclorometano a 20 °C e a reacção é agitada durante 2 h.

Separadamente, são adicionados 0,16 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a uma solução de 67 mg de derivado, N,Ν',N'-{3'-ciano-6-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil) -ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo em 3 mL de diclorometano a 20 °C e a reacção é agitada durante 2 h.

Os meios de reacção vermelhos acastanhados são reunidos e são concentrados sob pressão reduzida originando um sólido vermelho alaranjado. Este resíduo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Ã Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 95:5 a 90:10 depois 70:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtém-se um produto que se retoma com acetato de etilo e que se lava com água para eliminar o trifluoroacetato de amónio. Após secagem sobre sulfato de magnésio e concentração sob pressão reduzida, obtêm-se 58 mg de um pó amarelo bege 1-[5-(3-amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5- 39 trifluorometil-fenil)-ureia, cujas características são as seguintes:

Espectro IR (KBr): 3209; 1708; 1610; 1571; 1441; 1376; 1302; 1250; 1168; 1119; 1071; 822 e 616 cnT1

Espectro de R.M.N. de 1h (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,70 (s largo, 2H) ; 7,00 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,45 (dm, J = 9,0 Hz, 1H); 7 ,55 (t largo, J = 9,0 Hz, 1H); 7, 65 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H) ; 8,06 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H) ; 8,41 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,54 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 8,67 (dd, J = 2,5 e 7,5 Hz, 1H); 10,15 (s largo, 1H); 11, 15 (m muito estendido, 1H) ; 12,35 (m estendido 1H) PF => 260 0 C (Kõfler).

Exemplo 3 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo[4,3 — c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia

3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-ol É levada uma mistura de 1,2 g de 2-hidroxi-4-metoxi-nicotinonitrilo e 30 mL de hidrato de hidrazina a 140 °C durante 18 h numa bomba. O meio de reacção é, de seguida, evaporado até 40 à secura. 0 resíduo é retomado com éter etílico e a suspensão resultante é filtrada. Obtêm-se 1,1 g de 3-amino-lH-pirazolo[4,3—c]piridin-4-ol com o aspecto de um sólido cinzento. SM: 150+ = M+0; PF = 240 °C dec (Kõfler). 4-Bromo-lH-pirazolo[4,3—c]piridin-3-ilamina

Adicionam-se 0,4 g de 3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-ol a 3,5 g de POBr3 fundido a 45 °C, depois a suspensão é levada a 70 °C durante 4 h. Deixa-se arrefecer e hidroliza-se, com precaução, com uma solução de bicarbonato de sódio. A mistura é extraída com acetato de etilo. A fase orgânica é isolada e é seca sobre sulfato de magnésio, é filtrada, depois é concentrada sob pressão reduzida. Obtêm-se 0,33 g de 4-bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina com um aspecto de um sólido creme. SM: 212+ = M+0; PF = 230 °C dec (Kõfler). 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3- (2-fluoro-5-trifluorometil-fenilo)-ureia

Adicionam-se 127 mg de 1-(2—fluoro-5-trifluorometil-fenil)- 3— [4—(4,4,5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia, 60 mg de bicarbonato de sódio em 1,8 mL de água e 30 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 53 mg de 4- bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina em 6 mL de dioxano. A reacção é aquecida num banho a 100 °C durante 2 h. Deixa-se arrefecer depois adiciona-se acetato de etilo. A mistura é 41 lavada com água. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo oleoso é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Ã Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 90:10 a 70:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 34 mg de 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[4, 3-c]piridin-4-il)-fenilo]-3-(2—fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia sólido de cor creme, cujas características são as seguintes: SM: 431+ = MH+

Espectro IR (KBr) : 3354; 1717; 1605; 1542; 1442; 1339; 1313; 1181; 1119; 816 e 615 cm"1

Espectro de R.M.N. de (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,72 (s largo, 2H) ; 7,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 7,41 (m largo, lH) ; 7,51 (t largo, J = 9,5 Hz, 1H) ; de 7,59 a 7,72 (m, 4H) ; 8,22 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 8,65 (d largo, J = 7,5 Hz, lH) ; 8,96 (s largo, 1H); 9,37 (s, 1H); 12,1 (s largo, 1H). 42

Exemplo 4 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4—il)-piridin-2-il]-3-(2—fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia

1-[5-(3-Amino-lh-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia

Adicionam-se 252 mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)- 3- [5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureia, 120 mg de bicarbonato de sódio em água 3 mL e 60 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 106 mg de 4- bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina em 10 mL de dioxano. A reacção é aquecida num banho a 100 °C durante 2 h. Deixa-se arrefecer depois adiciona-se acetato de etilo e a mistura é lavada com água. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, depois concentra-se sob pressão reduzida. O residuo oleoso é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á S1O2 32-63 μ pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 90:10 a 70:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 35 mg de um sólido amarelo de 1-[5-(3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5- trifluorometil-fenil)-ureia, cujas caracteristicas são as seguintes: SM: 432+ = MH+ 43

Espectro IR (KBr) : 3404; 3224; 1693; 1609; 1572; 1441; 1340; 1300; 1246; 1119; 819 e 615 cm-1

Espectro de R.M.N. de (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,88 (s largo, 2H) ; 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,44 (m largo, 1H) ; de 7,50 a 7,53 (m, 2H) ; 8,15 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H) ; 8,26 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,63 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,70 (d largo, J = 7,5 Hz, 1H) ; 10,15 (s largo, 1H) ; 11,3 (m muito estendido, 1H); 12,2 (s largo, 1H).

Exemplo 5 1-[4-(3-Amino-lh-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil] -3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

1-(2-Metoxi-4-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4, 4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia São adicionadas, a 20 °C, 1,28 g de 2-(4-isocianato-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano a uma solução de 1 g de 2-metoxi-4-(trifluorometil)anilina e 128 mg de 4-dimetilaminopiridina em 150 mL de tetra-hidrofurano e 1,5 mL de trietilamina. Após 4 h, a reacção é evaporada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo é retomado com uma mistura de 44 acetato de etilo e água. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada sob pressão reduzida. 0 óleo amarelo residual é purificado numa coluna biotage kp-sil de 60 á sio2 32-63 pm pré-empacotada (eluente: ciclo-hexano/acetato de etilo, 8: 2). Obtém-se um pó amarelo pálido que é retomado com metanol. Forma-se um insolúvel branco que é separado por filtração, depois o filtrado é evaporado até à secura sob pressão reduzida para originar 0,47 g de pó amarelo pálido de 1-(2-metoxi-4-tifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia. SM: 437+ = MH+

Espectro de R.M.N. de 1R (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 1,30 (S: 12H); 3,99 (s: 3H; 7,22 (d, J = 9 Hz: 1H; 7,34 (dd, J = 9 e 1 Hz: 1H; 7,50 (d, J = 9: 2H; 7,63 (d, J = 9 Hz: 2H; 8,56 (mt: 2H; 9,58 (s: 1H) .

Derivados di-boc e tri-boc de 1-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-triftuorometil-fenil)-ureia São adicionadas 273 mg de 1-(2-metoxi-4-trifluorometil-fenil) -3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil] -ureia a uma solução de 0,27 g de N,N',N'-(3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo em dioxano 14 mL, a 20 °C. Adicionam-se a esta solução uma solução de 114 mg de bicarbonato de sódio em 4 mL água, depois 51 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio. A reacção é aquecida em refluxo a 100 °C durante 2,5 h. A solução amarela clara é arrefecida, depois adiciona-se acetato de etilo . A mistura é lavada com água depois com solução salina. A fase orgânica é 45 seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada sob pressão reduzida. A resina amarela alaranjada obtida é purificada numa coluna biotage kp-sil 60 á Si02 32-63 pm pré-empacotada (eluente: ciclo-hexano/acetato de etilo, 7: 3, depois diclorometano/solução a, 9:1; solução a = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 0,33 g de pó amarelo de uma mistura de derivados di-boc e tri-boc de 1-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia. 1-[4-(3-Amino-lh-pirazolo[3.4—b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

Adicionam-se 0,62 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a uma solução de 272 mg de uma mistura de derivado di-boc e tri-boc de 1-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia em 7,7 mL de diclorometano a 20 °C. Após 3 h de agitação, o meio vermelho alaranjado é concentrado até à secura sob pressão reduzida. O óleo vermelho alaranjado residual é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Ã Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 90:10 a 70:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtém-se um pó amarelo bege que é retomado com acetato de etilo. A solução é lavada com água. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada sob pressão reduzida para originar 61 mg de um pó amarelo de 1-[4-(3-amino-lH- pirazolo [3 ,4-b]piridin- -4-il) -fenil]-3-(2- metoxi—5- trifluorometil-fenil)-ureia, cujas caracteristicas são as seguintes: MH+ SM: 443

Espectro IR (KBr) : 3380; 1706; 1675; 1600; 1539; 1314; 1269; 1134; 1117; 822 e 622 cnT1

Espectro de R.M.N. de :Η (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 3,99 (s, 3H); 4,59 (s largo, 2H); 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,34 (dd largo, J = 2,0 e 8,5 Hz, 1H); 7,55 (d largo, J = 8,5 Hz, 2H); 7,66 (d largo, J = 8,5 Hz, 2H); 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H); de 8,56 a 8,61 (m, 2H); 9,66 (s, 1H); 12,25 (s largo, 1H). PF => 260 0 C (Kõfler).

Exemplo 6 1-[5-(3-Amino-lh-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

F,C

1-(5-Bromo-piridin-2-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia São adicionadas 3,32 g de 2-metoxi-5-trifluorometil- fenilamina em 30 mL de tetra-hidrof urano, gota a gota, a uma 47 solução de 1,8 g de trifosgénio em 180 mL de tetra-hidrofurano a 0 °C. São, de seguida, introduzidos 4,95 mL de trietilamina e a reacção é agitada a essa temperatura durante 10 min. Deixa-se subir a temperatura até 20 °C e agita-se durante 1 h 15. Introduz-se, de seguida, gota a gota uma solução de 3 g de 2-amino-5-bromopiridina em 30 mL de THF. Após 16 h, filtra-se a suspensão, depois o filtrado é concentrado sob pressão reduzida. O residuo é retomado com uma mistura de acetato de etilo e água. Obtém-se um precipitado insolúvel branco que é filtrado, é lavado com acetato de etilo depois é seco sob vácuo. Obtêm-se 3,3 g de pó branco de 1-(5-bromo-piridin-2-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia. SM: 390+ = MH+ 1-(2-Metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5-(4, 4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureia São adicionadas 30 mg de bis(dibenzilidenoacetona)paládio a uma solução de 51 mg de triciclo-hexilf osf ina em 12 mL de dioxano a 20 °C. A solução castanha violácea é agitada durante 30 min, depois adicionam-se 500 mg de 1-(5-bromo-piridin-2-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia e 190 mg de acetato de potássio. A suspensão é aquecida em refluxo durante 3 h 15 depois a solução vermelha violácea é arrefecida até 20 °C e é concentrada até à secura sob pressão reduzida. Obtém-se um residuo cinzento esverdeado que é lavado numa mistura de acetato de etilo e água. A fase orgânica é filtrada e o filtrado amarelo é concentrado sob pressão reduzida. O residuo sólido obtido é retomado com metanol. É formado um precipitado que é filtrado e é lavado com metanol e acetato de etilo. Obtêm-se 244 mg de pó 48 amarelo pálido de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5- (4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il] -ureia. SM: 437+ = M+0

Espectro de R.M.N. de XH (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 1,32 (S: 12H) ; 4,03 (s: 3H; 7,25 (d, J = 9,5 Hz: 1H; 7,34 (d

largo, J = 9 Hz: 1H; 7,39 (dd, J = 9,5 e 1 Hz: 1H; 7, 96 (dd J = 9 e 2 Hz: 1H; 8,52 (d, J = 1 Hz: 1H; 8,63 (d, J = 2 Hz: 1H 10,20 (s: 1H; 11,50 (s largo: 1H).

Derivados di-boc e tri-boc da 1-(3'-ciano-2'-hidrazino-[3,4']bipiridinil-6-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)- ureia São adicionadas 234 mg de 1-(2-Metoxi-5-trifluorometil-fenil) -3— [ 5 — (4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureia a 20 °C a uma solução de 0,3 g de N,N',N'-(3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo em 16,5 mL de dioxano. Adiciona-se, de seguida, uma solução de 126 mg de bicarbonato de sódio em 4,5 mL de água, seguida de 57 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio. A suspensão amarela obtida é aquecida em refluxo a 100 °C durante 2,5 h. Após arrefecimento, adiciona-se acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com água depois com solução salina. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio depois é concentrada até à secura sob pressão reduzida. A resina amarela laranjada residual é purificada numa coluna biotage kp-sil 60 á Si02 32-63 pm pré-empacotada (eluente: ciclo-hexano/acetato de etilo, 7:3, depois diclorometano/solução A, 95:5; solução 49 A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 265 mg de uma mistura de derivados di-boc e tri-boc de 1-(3'-ciano-2'-hidrazino-[3,4']bipiridinil-6-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia sob a forma de um pó amarelo. 1-[5-(3-Amino-lh-pirazolo[3,4—b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia São adicionados 0,8 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a 20 °C a uma solução de 242 mg de uma mistura de derivado di-boc e tri-boc de 1-(3'-ciano-2'-hidrazino-[3,4'] bipiridinil-6-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia em 7 mL de diclorometano. Após 2,5 h de agitação, o meio de reacção a vermelho alaranjado é concentrado até à secura sob pressão reduzida. O óleo vermelho alaranjado residual é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente diclorometano/solução A, 90:10 a 70:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 130 mg de um pó amarelo bege de 1-[5-(3-amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, cujas caracteristicas são as seguintes: SM: 444+ = MH+

Espectro IR (KBr) : 3420; 3219; 1684; 1613; 1586; 1438; 1303; 1271; 1247; 1136; 834 e 622 cnf1

Espectro de R.M.N. de 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,02 (s, 3H); 4,72 (m muito estendido, 2H); 7,01 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,37 (dd largo, J = 2,0 e 8,5 Hz, 1H); 7,48 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H); 8,03 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 50 1Η) ; 8,41 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,59 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,64 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 10,2 (s, 1H); 11,5 (m muito estendido, 1H); 12,35 (s largo, 1H). PF => 260 0 C. (Kõfler).

Exemplo 7 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenilo]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia

1-[4-(5-cloro-4-ciano-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia: São adicionadas 462 mg de NaHC03 em 14,4 mL de água a uma solução de 346 mg de 3,5-dicloro-isonicotinonitrilo e 959 mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il )-fenil]-ureia em 24 mL de dioxano. Depois, são adicionadas 462 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio e a reacção é aquecida em refluxo durante 5 h, depois, é deixada durante uma noite a 20 ° C. De seguida, são adicionados 20 mL água e a mistura é extraída com 2 x 60 mL de acetato de etilo. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio depois é concentrada sob pressão reduzida. O óleo castanho é purificado com um cartucho Merck com 30 g de Si02 51 15-40 μιη pré-empacotado (diclorometano depois diclorometano/metanol, 99:1). Obtêm-se 290 mg de cristais amarelos de 1-[4-(5-cloro-4-ciano-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia.

Espectro MS (ES+): m/z = 435 [MH+]

Espectro de R.M.N. 1H a 400 MHz no espectrómetro BRUKER ADVANCE DRX-400 deslocamentos químicos (□ em ppm) - solvente: (DMSO-d6) referenciado a 2,50 ppm à temperatura de 303 K: 7,41 (m, 1H); 7,51 (dd, J = 8,5 e 10,5 Hz, 1H) ; 7,68 (s largo, 4H) ; 8,62 (dd, J = 2,0 e 7,0 Hz, 1H) ; 8,85 (s, 1H) ; 8,94 (s, 1H); 9,04 (m estendido 1H); 9,49 (m estendido 1H). 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia São adicionadas 0,05 mL de hidrato de hidrazina a uma solução de 145 mg de 1-[4-(5-cloro-4-ciano-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia em 2 mL de EtOH a 20 °C. A reacção é levada a refluxo durante 5 h 30. A reacção é incompleta e adicionam-se 1 mL de EtOH e 0,05 mL de hidrato de hidrazina e o refluxo é mantido durante mais 18 h 30. deixa-se regresssar a 20 °C e concentra-se sob corrente de azoto. O resíduo é purificado por cromatografia em silicagel: cartucho Merck de 30 g de Si02 15-40 pm pré-empacotado (diclorometano; depois diclorometano/metanol, 95:5; depois diclorometano/metanol, 1:1; depois diclorometano/metanol/NH4OH, 82:15:3). Recupera-se um óleo bege impuro que se submete 52 novamente a cromatografia nas mesmas condições. 0 produto continua impuro e é purificado por HPLC preparativa básica: condições: coluna: Nucleodur Gravity C18 5 pm (N° cat Macherey Nagel: 762101; série 4055902; lote 3044); fluxo: 20 mL/min; detecção 254 nm (UV118, Gilson); gradiente acetonitrilo de 10 a 95% em de água contendo formato de amónia 10 mM de acordo com o protocolo seguinte: (t(min).: acetonitrilo (%)): 0:10; 2:10; 25:95; 33:95; 34:10. Obtêm-se 19 mg de um pó amarelo de 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil] -3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia. PF = 196 °C (Koffler)

Espectro MS (ES+): m/z = 431 [MH+]

Espectro de R.M.N. 1R a 400 MHz no espectrómetro BRUKER ADVANCE DRX-400, deslocamentos quimicos (□ em ppm) - solvente (DMSO-d6) referenciado a 2,50 ppm a 303 K: 4,61 (s, 2H); 7,40 (m, 1H) ; 7,50 (m, 3H) ; 7,66 (d largo, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,94 (s, 1H) ; 8,63 (dd, J = 2,0 e 7,0 Hz, 1H) ; 8,74 (s, 1H) ; 9,10 (m estendido 1H); 9,51 (s, 1H); 12,3 (m estendido 1H). IR: (KBr): 1610; 1531; 1443; 1340; 1314; 1265; 1195; 1166; 1118; 1069; 820 e 615 ciT1 53

Exemplo δ 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il]-fenil] -3-fenil-ureia Preparada de acordo com o esquema 2

l-Fenil-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)- fenil]-ureia São adicionadas 198 mg de anilina a uma solução de 490 mg de 2-(4-isocianato-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2, - dioxaborolano e de 203 mg de trietilamina em 5 mL de tetra-hidrofurano. A solução é agitada durante 12 horas a 20 °C, sob árgon. São adicionados 10 mL de metanol à mistura de reacção. Depois, agita-se a 20 °C durante 15 minutos. Após concentração da mistura sob pressão reduzida, obtêm-se 630 mg de l-Fenil-3 - [4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia, cujas características são as seguintes: SM: 339 (+) = (M+H)(+) 337 (-) = (M-H)(-)

Espectro IR (KBr): 3332; 2976; 1656; 1593; 1543; 1400; 1361; 1143; 1092; 963; 860 e 655 cm"1 54

Espectro de R.M.N. de 1H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 1,29 (s, 12H; 6,98 (t largo, J = 7,5 Hz, 1H); 7,28 (t largo, J = 8,0 Hz, 2H); de 7,41 a 7,49 (m, 4H); 7,59 (d largo, J = 8,0 Hz, 2H) ; 8, 70 (s, 1H); 8,82 (s, 1H) . 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il]-fenil]-3-fenil-ureia São adicionadas 155 mg de l-fenil-3-[4-(4,4,5,5, -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia, 72 mg de hidrogenocarbonato de sódio em 1 mL de água e 53 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 65 mg de 4-bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina, preparada como descrito no exemplo 3, em 3 mL de dioxano. A suspensão é aquecida a 100 °C sob árgon durante 2 h. Após arrefecimento, a mistura de reacção é vertida em 50 mL de água e é extraída 3 vezes com acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e são concentradas sob pressão reduzida para originar 302 mg de produto bruto que são purificadas numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente de uma solução A em diclorometano de 5/95 a 30/70; solução A = diclorometano/metanol/amónia 38:17:2). Obtêm-se 23 mg de um pó amarelo de 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il]-fenil]-3-fenil-ureia, cujas características são as seguintes: SM: 344 (+) = M (+) (SM-EI)

Espectro IR (KBr): 3388; 1672; 1601; 1528; 1498; 1442; 1313; 1233; 1180; 1045; 752 e 693 cm1 55

Espectro de R.M.N. de XH (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 4,71 (s largo, 2H) ; 6,99 (t, J = 7,5 Hz, 1H) ; 7,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,30 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,48 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,62 (m, 4H) ; 8,21 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,73 (s, 1H) ; 8,89 (s, 1H) ; 12,1 (s largo, 1H). PF = 188 0 C (Koffler)

Exemplo 9 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

São adicionadas 215 mg de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolan-2-il) -piridin-2-il]-ureia, (preparada como descrito no exemplo 6) 77 mg de hidrogenocarbonato de sódio em 1 mL de água e 38 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 70 mg de 4-bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina em 3 mL de dioxano. A suspensão é aquecida a 80 °C sob árgon durante 2 h. Após arrefecimento, a reacção é vertida sobre 50 mL de água e a mistura é extraída 3 vezes com uma mistura de acetato de etile/metanol 90/10. As fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e são concentradas sob pressão reduzida. São purificadas 393 mg de produto bruto numa coluna Biotage KP-Sil 56 de 60 Á Si02 32-63 δΜ pré-empacotada (gradiente de uma solução A em diclorometano de 5/95 a 30/70; solução A = diclorometano/metanol/amónia 38/17/2). Obtêm-se 16 mg de um pó amarelo de 1-[5-(3-amino-lH-pirazolo[4, 3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, cujas características são as seguintes: LC-CM: 444 (+) = (M+H)(+)

Espectro IR (KBr): 3657; 3387; 3308; 3223; 2925; 1685; 1610; 1580; 1439; 1351; 1302; 1246; 1166; 1135; 1116; 1037; 807 e 542 cnT1

Espectro de R.M.N. de 1H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 4,02 (S, 3H) ; 4,89 (s largo, 2H); de 7,21 a 7,28 (m, 2H) ; 7,38 (d, J = 8, 5 Hz, 1H); 7,46 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H) ; 8,12 (dd, J = 2,0 e 8, 5 Hz, 1H) ; 8,27 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,63 (d, J = 2,0 Hz, 1H) ; 8,69 (d, J = 2, 0 Hz, 1H) ; 10,15 (S, 1H); 11,65 (m estendido \—1 12, 2 (s largo, 1H). PF = 228 0 C (Koffler) 57

Exemplo 10 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

São adicionadas 122,8 mg de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil) -3-[4-(4,4,5,5,-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia, 99,5 mg de carbonato de sódio em 1 mL de água e 54,24 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 50 mg de 4-bromo-lH-pirazolo [4,3-c] piridin-3-ilamina em 3 mL de dioxano. A suspensão é aquecida a 80 °C sob atmosfera de árgon durante 22 horas. Após arrefecimento, a mistura de reacção é diluída com acetato de etilo e é lavada 2 vezes com água. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio e é concentrada sob pressão reduzida. São purificadas 438 mg de produto bruto numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente de uma solução A em diclorometano de 5/95 a 30/70; solução A = diclorometano/metanol/amónia 38/17/2). Obtêm-se 32 mg de um pó amarelo de 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, cujas caracteristicas são as seguintes: LC-CM: 443 (+) = (M+H)(+)

Espectro IR (KBr): 3326; 1691; 1605; 1542; 1447; 1314; 1270; 1217; 1120; 1024; 812 e 623 cnT1 58

Espectro de R.M.N. de 1H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 3,99 (s, 3H); 4,73 (s largo, 2H) ; 7,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,33 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,64 (m, 4H) ; 8,21 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,59 (m, 2H) ; 9,63 (s, 1H) ; 12,1 (s, largo, 1H) PF = 200 0 C (Koffler)

Exemplo 11 N-(2—{3—[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

N—(2—{3[4-(4,4,5, 5-Tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparada de acordo com o esquema 4 São adicionadas, a 20 °C, 385 mg de 2-(4-isocianato-fenil)-4, 4,5, 5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano a uma solução de 343 mg de Nl-[2-amino-4-(trifluorometil)fenil]acetamida e 39 mg de 4-dimetilaminopiridina em 50 mL de tetra-hidrofurano e 0,45 mL de trietilamina. Após uma noite a 40 °C a reacção é evaporada até à secura sob pressão reduzida. O residuo é retomado com uma 59 mistura de diclorometano e água. A fase orgânica é lavada com HC1 1 N o precipitado branco é enxugado e é lavado com diclorometano, depois é seco sob vácuo para originar 356 mg de pó branco de N-(2 — {3—[4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, cujas características são as seguintes: SM-ES+: 464 (+) = (M+H)(+) SM-ES~: 462 (-) = (M-H)(-)

Espectro de R.M.N. de 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 1.28 (s, 12H; 2,15 (s largo, 3H) ; 7,37 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H); 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,54 (d parcialmente mascarado, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,16 (s largo, 1H) ; 8.28 (s largo, 1H); 9,43 (s largo, 1H); 9,79 (s largo, 1H). N-(2-{3-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3—c]piridin-4-il)-fenil] -ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida São ligados 4-bromo-lH-pirazolo[4,3—c]piridin-3-ilamina e N—(2—{3—[4—(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, por reacção de Suzuki de acordo com um protocolo semelhante à preparação do exemplo 10. Obtém-se um pó amarelo de N—(2—{3—[4—(3-amino-lH-pirazolo[4,3— c]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, cujas características são as seguintes: SM: 470 (+) = (M+H)(+) 468 (-) = (M-H)(-) 60 514 (-) = (Μ + ácido fórmico - H)(-)

Espectro IR (KBr): 3390; 1667; 1605; 1528; 1436; 1336; 1315; 1247; 1167; 1126; 1042; 813 e 684 cm-1

Espectro de R.M.N. de :Η (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 2,16 (S, 3H); 4,72 (s, 2H); 7,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7 ,37 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H); 7,56 (d, J = 8, 5 Hz, 1H); 7, 64 (m, 4H); 8,21 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,28 (m, 2H) ; 9,54 (s largo, 1H) ; 9,82 (s largo, 1H); 12,1 (s largo, 1H). PF = 182 0 C (Koffler) 61

Exemplo 12 N-(2-{3-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

I

Derivado N, N', N'tri-boc de N-(2—{3—[4-(3-Ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparado de acordo com o esquema 1 São adicionadas 282 mg de N-(2 — {3— [4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}4-trifluorometil-fenil)-acetamida a uma solução de 278 mg de N,N',N'-(3-ciano-4-iodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo (preparado de acordo com o exemplo 1) em 15 mL de dioxano, a 20 °C. Adiciona-se a esta solução uma solução de 117 mg de bicarbonato de sódio em 4,2 mL de água seguida por 53 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio. A reacção é aquecida em refluxo a 100 °C durante 2,5 h. A solução amarela clara é arrefecida, depois adiciona-se acetato de etilo. A mistura é lavada com água depois com solução salina. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada sob pressão reduzida. A resina amarela alaranjada obtida é purificada numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 μ pré-empacotada 62 (eluente: ciclo-hexano/acetato de etilo, 7:3, depois diclorometano/solução A, 9:1; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 239 mg de pó amarelo de uma mistura de derivados di-boc e tri-boc de N-(2—{3—[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida. N-(2-{3-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4 —b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparada de acordo com o esquema 1

Os derivados di-boc e tri-boc de N-(2—{3—[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida são transformados de acordo com o processo de preparação do exemplo 6. 0 produto obtido é um pó amarelo claro cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 470 ( + ) = (M+H) ( + )

Espectro IR (KBr) : 3363; 1672; 1596; 1525; 1435; 1336; 1316; 1126; 1078 e 825 cm-1

Espectro de R.M.N. de ΧΗ (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,16 (s largo, 3H); 4,58 (s, 2H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,39 (d largo, J = 9,0 Hz, 1H); de 7,52 a 7, 58 (m, 3H) ; 7, 67 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,21 (s largo, 1H) ; 8, 29 (s largo , 1H); 8, 37 (d, J = 5, 0 Hz, 1H); 9,52 (s largo, 1H) ; 9,84 (s largo, 1H); 12,25 (s largo, 1H). 63

Exemplo 13 N-(2—{3—[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin -2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

N-(2-{3-[5-(4,4,5,5-Tetrametil-l,3, 2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparado de acordo com o esquema 4 São adicionadas 6 mg de bis(dibenzilidenoacetona)paládio a uma solução de 10 mg de triciclo-hexilf osf ina em 2,5 mL de dioxano a 20 °C. A solução castanha violácea é agitada durante 30 min. Adicionam-se, de seguida, 100 mg de N-{2-[3-(5-bromo-piridin-2-il)-ureido]-4-trifluorometil-fenil}-acetamida e 36 mg de acetato de potássio e 84 mg de bis-(pinacolato)-diboro. A suspensão é aquecida em refluxo durante 3 h 15 depois a suspensão é arrefecida até 20 °C e é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo cinzento esverdeado é retomado com acetato de etilo e o insolúvel é eliminado por filtração. O filtrado amarelo é lavado com água depois é seco sobre sulfato de magnésio e é concentrado sob pressão reduzida. Obtêm-se 88 mg de pó amarelo esbranquiçado de N-(2—{3—[5-(4,4,5,5-tetrametil- 64 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, cujas características são as seguintes: SM-ES+: 465 ( + ) = (M+H) ( + ) 4-Iodo-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina

Preparada de acordo com o esquema 5 São adicionados 2,5 mL de hidrato de hidrazina a uma solução de 1,145 g de 2-fluoro-4-iodo-nicotinonitrilo em 27 mL de etanol. Após a introdução de hidrato de hidrazina, forma-se um precipitado branco. A suspensão é agitada a 20 °C durante 20 minutos. O precipitado é filtrado e é lavado com etanol. Obtêm-se 882 mg de pó bege de 2-hidrazino-4-iodo- nicotinonitrilo. Este intermediário é retomado com 35 mL de diclorometano. São adicionados 5,8 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a esta suspensão branca. A solução amarela alaranjada obtida é agitada a 20 °C durante 30 minutos. A mistura de reacção é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O pó vermelho obtido é retomado com água com amónia a 28% (em quantidade suficiente para ter pH básico): a suspensão fica amarelo pálido. O insolúvel é filtrado e é seco para originar 862 mg de 4-iodo-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina. 65 Ν-(2—{3—[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin 2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparado de acordo com o esquema 1 São adicionadas 246 mg de N-(2—{3—[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida a uma solução de 70 mg de 4-iodo-lH- pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina em 5,5 mL de dioxano, a 20 °C. Adiciona-se uma solução de 64 mg de bicarbonato de sódio em 1 mL de água, seguida de 32 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a esta suspensão. A reacção é aquecida em refluxo a 85 °C durante 3,5 h. A solução amarela clara é arrefecida, depois adiciona-se acetato de etilo. A mistura é lavada com água. É isolado um insolúvel por filtração depois o filtrado é lavado com solução salina. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio e é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo amarelo deste modo obtido e o insolúvel anterior são purificados numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á S1O2 32-63 μ pré-empacotada (eluente: diclorometano/solução A, 9:1 depois 8:2 depois 7:3; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 52 mg de pó amarelo de N-(2 — {3—[5-(3-amino-lH-pirazolo [3,4-b] piridin-4-il)-piridin-2-il]-ureido}-4 trifluorometil-fenil)-acetamida, cujas características são as seguintes: SM-ES+: 471(+) = (M+H)(+) SM-ES~: 469(-) = (M-H) (-)

Espectro de R.M.N. de ΧΗ (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,16 (s, 3H); 4,70 (s, 2H); 6,97 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,40 (d, J = 9,0 Hz, 1H); de 7,47 a 7,54 (m, 2H); 8,04 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 66 8,41 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,48 a 8,54 (m, 2H) ; 9,86 (s, 1H) ; 10,15 (m estendido 1H); 10,85 (m estendido 1H); 12,35 (s, 1H).

Espectro IR (KBr): 3440; 3213; 3043; 2925; 1706; 1609; 1515; 1432; 1332; 1249; 1164; 1108; 1080 e 822 cm-1

Exemplo 14 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-t>]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

A 2-etoxi-5-trifluorometil-fenilamina foi preparada de acordo com: European Journal of Pharmaceutical Sciences 22 (2004) pl53-164 1-(2-Etoxi-5-trifluorometil-fenil)—3—[4 — (4,4,5,5 — tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia A 2-etoxi-5-trifluorometil-fenilamina é colocada em reacção com 2- (4-isocianato-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano de acordo com a preparação de 1-(2-metoxi-4- 67 trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia descrita no exemplo 5. Obtém-se, após purificação, um pó bege de 1-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil) -3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil] -de ureia cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 451(+) = (M+H)(+) SM-ES': 449(-) = (M-H)(-)

Espectro de R.M.N. de (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 1,28 (s, 12H; 1,45 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 4,25 (q, J = 7,0

Hz, 2H) ; 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,30 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H) ; 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,37 (s, 1H); 8,55 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 9,66 (s, 1H). 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-b]piridin-4-il)-fenil] -3-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia A 1-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia é ligada, por reacção de Suzuki, com 4-iodo-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina de acordo com a preparação do exemplo 6. Obtém-se um pó amarelo de 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 457(+) = (M+H)(+) 68

Espectro IR (KBr) : 3369; 1672; 1601; 1542; 1445; 1315; 1271; 1210; 1134; 1043 e 822 cnT1

Espectro de R.M.N. de 1R (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 1,47 (t, J = 7,0 Hz, 3H); 4,27 (q, J = 7,0 Hz, 2H) ; 4,59 (s largo, 2H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,21 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,31 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,55 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,44 (s, 1H) ; 8,58 (s largo, 1H); 9,78 (s, 1H); 12,25 (s, 1H) .

Exemplo 15 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia

1-(2-Fluoro-5-metil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia

Adiciona-se 1 g de 1-fluoro-2-isocianato-4-metil-benzeno a uma solução de 1,45 g de 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioxaborolan-2-il)-fenilamina, 1,86 mL de trietilamina e 162 mg de 4-dimetlamino piridina em 150 mL de tetra-hidrofurano a 20 °C. A reacção é agitada durante 3,5 h a 60 °C, depois é concentrada 69 até à secura sob pressão reduzida. 0 resíduo é retomado com uma mistura de água e diclorometano. A fase orgânica é lavada com uma solução de HC1 1 N depois é seca sobre sulfato de magnésio e é concentrada até à secura sob pressão reduzida. Obtêm-se 2,13 g de pó branco de 1-(2-Fluoro-5-metil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia, cujas características são as seguintes: SM-EI: 370 (+) = (M)(+); 125(+) = (C7H8NF)(+) pico de base

Espectro de R.M.N. de 1h (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : I, 28 (s, 12H; 2,27 (s, 3H) ; 6,81 (m, 1H) ; 7,10 (dd, J = 8,5 e II, 5 Hz, 1H); 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,98 (dd, J = 2,0 e 8,0 Hz, 1H); 8,51 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 9,21 (s, 1H). 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3, 4-b]piridin-4-il)-fenil] -3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia A 1-(2—fluoro-5-metil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureia é ligada, por reacção de Suzuki, a 4-bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina de acordo com um protocolo semelhante à preparação do exemplo 3. Obtém-se um pó amarelo de 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[3, 4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2—fluoro-5-metil-fenil)-ureia, cujas características são as seguintes: SM-ES+: 377(+) = (M+H)(+) SM-ES”: 375(-) = (M-H)(-) 70

Espectro de R.M.N. de XH (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,28 (s, 3H); 4,57 (s, 2H) ; 6,82 (m, 1H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,11 (dd, J = 8,5 e 11,5 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,99 (d largo, J = 7,5 Hz, 1H) ; 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,56 (s largo, 1H); 9,29 (s, 1H); 12,25 (s, 1H) .

Espectro IR (KBr) : 3368; 1709; 1602; 1537; 1314; 1217; 1184; 1116 e 817 cm"1

Exemplo 16 1- [4- (3-Amino-lfí-pirazolo [3, 4-b]piridin-4-il) -fenil] -3-(3,4-dimetil-fenil)-ureia

4-(4-Amino-fenil)-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina

Preparada de acordo com o esquema 6 É adicionada uma solução de 215 mg de bicarbonato de sódio em 5 mL de água, depois 103 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 190 mg de 4-bromo-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina e 236 mg de 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenilamina em

dioxano 20 mL. A reacção é aquecida a 85 °C durante 3,5 h. A 71 solução amarela escura é arrefecida à temperatura ambiente e adicionam-se 30 mL de acetato de etilo, depois lava-se a mistura com água e solução salina. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio e é evaporada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo sólido amarelo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á S1O2 32-63 μ pré-empacotada (eluente: diclorometano/solução A, de 95:5, depois 90:10, depois 80:20; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 93 mg de pó amarelo de 4-(4-amino-fenil)-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina, cujas caracteristicas são as seguintes: SM-EI: 225(+) = (M)(+) pico de base

Espectro de R.M.N. de :Η (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,57 (s largo, 2H) ; 5,47 (s largo, 2H) ; 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 6,80 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,28 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,28 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 12,1 (s largo, 1H) 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-ureia

Preparada de acordo com o esquema 6

Adicionam-se 66 mg de 3,4-dimetilfenil isocianato a uma solução de 100 mg de 4-(4-amino-fenil)-lH-pirazolo [3,4-b] piridin-3-ilamina, de 125 pL de trietilamina e 10 mg de 4-dimetlamino piridina em 17 mL de tetra-hidrofurano a 20 °C. A reacção é agitada durante 6 h a 80 °C, depois é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo é retomado com uma mistura de água e acetato de etilo. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada até à secura sob 72 pressão reduzida. 0 resíduo amarelo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Â Si02 32-63 μ pré-empacotada (eluente: diclorometano/solução A, de 95:5, depois 90:10, depois 80:20; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 29 mg de pó amarelo de 1-[4-(3-amino-l#-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-ureia, cujas características são as seguintes: LC-MS: tr = 3,44 min: m/z 373: [M+H]+, m/z 371: [M-H]“, m/z

417: [Μ-ΗΓ +HC02H, m/z 224: [M-H] “ -C9H10NO SM-IE: m/z 372: [M+], m/z 121: C8H10N+ (pico de base).

Espectro de R.M.N. de 1R (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,16 (s, 3H); 2,20 (s, 3H) ; 4,59 (s, 2H) ; 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,20 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H) ; 7,26 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,52 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,36 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 8,68 (s, 1H) ; 8,97 (s, 1H); 12,25 (s, 1H)

Os produtos abaixo foram preparados de acordo com o exemplo 16 (esquema 6): 73

Exemplo 17 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [3,4 — jb] piridin-4-il )-fenil]-3-(5-terc-butil-2-metoxi-fenil)-ureia

LC-MS em ZQ: tr = 3,74 min: m/z 431: [M+H]+, m/z 429: [M-H] 1,28 1H) ; 7,53 2H) ; PF =

Espectro de R.M.N. de 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : (s, 9H) ; 3,8 7 (s, 3H) ; 4,59 (s, 2H) ; 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 6,97 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H); (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,28 (m, 8,37 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,58 (s, 1H); 12,25 (s largo, 1H) 220 °C (Koffler) 74

Exemplo 18 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-B]piridin-4-il)-fenil]-3-(4-metil-3-trifluorometil-fenil)-ureia

LC-MS: tr = 8,84 min: m/z 427: [M+H]+, m/z 425: [M-H]

Espectro de R.M.N. de :H (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,38 (s, 3H) ; 4,58 (s largo , 2H); 6,90 (d, J = = 5,5 Hz, 1H) ; 7,35 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,53 (m, 3H) ; 7, 68 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7, 96 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 9, 06 (s, 1H) ; 9, 09 (s, 1H) • 12 f f 25 (s largo, 1H) . PF = 166 °C (Koffler) 75

Exemplo 19 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-B]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-ureia

LCMS: tr = 3,30 min: m/z 393: [M+H]+ (pico de base), m/z 391: [Μ-ΗΓ

m/z 437: [M-H]” +HC02H, m/z 224: [M-H]” - C8H7CINO

Espectro de R.M.N. de (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,28 (s, 3H) ; 4,58 (s largo, 2H) ; 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; de 7,18 a 7,29 (m, 2H); 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,72 (s largo, 1H) ; 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 8,92 (s, 1H); 9,02 (s, 1H); 12,25 (s largo, 1H) PF = 206 °C (Koffler) 76 -(3-

Exemplo 20 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [ 3, 4—Jo ] piridin-4-il )-fenil]-3 etil-fenil)-ureia

LC-MS-DAD-ELSD: 373 (+) = (M+H)(+) 371 (-) = (M-H)(-)

Espectro IR (KBr): 3372; 3266; 1688; 1591; 1539; 1435; 1317; 1215; 1020; 822; 695 e 598 cm-1

Espectro de R.M.N. de XH (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) 1524; : 1,19 largo, , 1H); ; 7,35 ,5 Hz, r 1H) ; (t, J = 7 ,5 Hz, 3H) ; 2, 58 (q, J = 7, 5 Hz, 2H) ; 4, .59 (s, 2H) f 6,84 (d largo, j = 8, 0 Hz, 1H) ; 6,90 (d, : r = = 5,0 Hz 7,19 (t, J = 8,0 Hz , 1H); 7,28 (d largo, J = 8, . 0 Hz, 1H) (s largo, 1H) ; 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7, 65 (d , J = 8 2H) r 8,36 (d, J = 5, 0 Hz , 1H) ; (8, 74 (s , 1H) r 8,94 (s, 12. 25 (s, 1H) , . PF = 162 °C (Koffler) 77

Exemplo 21 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4—Jo ]piridin-4-il)-fenil]-3-l,3-benzodioxol-5-il-ureia

A

LC-MS-DAD-ELSD: 389(+) = (M+H)(+) 387 (-) = (M-H)(-) 433 (-) = (M+Ac Form-H)(-)

Espectro IR (KBr): 3301; 1639; 1585; 1503; 1490; 1246 ; 1209; 1035; 929; 838 e 816 cnT1

Espectro de R.M.N. de (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 4,58 (s largo, 2H) ; 5,98 (s, 2H) ; 6,79 (dd, J = 2,0 e 8,5 Hz, 1H) ; 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 6,90 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 7,52 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,69 (s, 1H); 8,99 (s, 1H) ; 12,25 (S, 1H) PF = 242 °C (Koffler) 78 -(3-

Exemplo 22 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [ 3, 4—Jo] piridin-4-il)-fenil]-cloro-4-metoxi-fenil)-ureia

LC-MS-DAD-ELSD: 409(+) = (M+H)(+) 407(-) = (M-H)(-) 1539;

Espectro IR (KBr): 3370; 3301; 1711; 1680; 1594; 1524; 1502; 1396; 1319; 1280; 1218; 1060 e 822 cnT1 (s, 3H); 4,58 (s largo, 2H); 6,90 (d, J = 5, 0 Hz, 1H) ; 7, J = 9,0 Hz, 1H) ; 7,30 (dd, J = 2, 5 e í ),0 Hz, 1H); 7, J = 9,0 Hz, 2H); 7,64 ( d, J = 9,0 Hz, 2H) , ; 7,68 (d, J = 1 : 3,82 10 (d, 53 (d, ],5 Hz, : 12,25

Espectro R.M.N. de :H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) 1H); 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,80 (s, 1H); 8,98 (s, 1H) (s, 1H). PF = 261 °C (Koffler) 79

Exemplo 23 fenil]-3-(5- 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [ 3, 4—Jo] piridin-4-il) cloro-2-metoxi-fenil)-ureia

LC-MS-DAD-ELSD: 409(+) = (M+H)(+) 407(-) = (M-H)(-)

Espectro IR (KBr): 3365; 1707; 1596; 1522 1213; 1175; 1131; 1025 e 820 cnT1

Espectro R.M.N. de :H (400 MHz, (CD3)2SO, δ (s, 3H); 4,59 (s largo, 2H); 6,91 (d, J = 5,0 Hz, J = 2,5 e 9,0 Hz, 1H); 7,05 (d, J = 9,0 Hz, J = 9,0 Hz, 2H); 7,65 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,26 ( 1H); 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,49 (s, 1H) ; 9,64 (s, 1H) PF = 171 °C (Koffler) ; 1417; 1316; em ppm): 3,91 1H); 7,00 (dd, 1H); 7,55 (d, 1, J = 2,5 Hz, (s, 1H); 12,25 80

Exemplo 24 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [ 3, 4—Jo ] piridin-4-il )-fenil]-3-(2-etoxi-fenil)-ureia

LC-MS-DAD-ELSD: 389 (+) = (M+H)(+) 387(-) = (M-H)(-)

Espectro IR (KBr): 2924; 2854; 1618; 1437; 1384; 1121; 1005; 826; 722; 695 e 544 cnf1

Espectro de R.M.N. de :H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 1,43 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 4,16 (q, J = 7,0 Hz, 2H) ; 4,59 (s largo, 2H) ; de 6,85 a 6,97 (m, 3H) ; 7,02 (dd, J = 2,0 e 8,0 Hz, 1H) ; 7,54 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,67 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,14 (dd, J = 2,0 e 8,0 Hz, 1H); 8,18 (s, 1H) ; 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 9,65 (s, 1H); 12,25 (s, 1H) PF = 152 °C (Koffler) 81

Exemplo 25 1- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [ 3, 4—Jo ] piridin-4-il )-fenil]-3-(2-metoxi-5-metil-fenil)-ureia

LC-MS-DAD-ELSD: 389(+) = (M+H)(+) 387(-) = (M-H)(-)

Espectro IR (KBr): 3346; 1673; 1594; 1538; 1316; 1279; 1211; 1181; 1135; 1028 e 823 cnT1

Espectro de R.M.N. de (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 2,24 (s, 3H) ; 3,85 (s, 3H) ; 4,59 (s largo, 2H) ; 6,76 (dd, J = 2,0 e 8,0 Hz, 1H) ; de 6,89 a 6,93 (m, 2H) ; 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,01 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,26 (s, 1H) ; 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 9,56 (s, 1H) ; 12,25 (s, 1H) PE = 170 °C (Koffler). 82

Exemplo 26 N- [ 4 - (3-Amino-lH-pirazolo [ 3, 4—Jo ] piridin-4-il )-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida N,

CI Cl SM-ES+: 434 (MH+)

Tempo de retenção DAD-TIC: 3,31 min Exemplo 27 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia

,N

2,4-Dicloro-nicotinonitrilo É aquecida uma solução de 5,0 g de 4-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-piridina-3-carbonitrilo comercial em 50 mL de oxicloreto 83 de fósforo em refluxo durante 19 h. Após arrefecimento, o meio de reacção é vertido numa mistura de água e gelo. 0 precipitado formado é filtrado e o filtrado é extraído 2 vezes com uma solução de acetato de etilo/metanol 90/10. As fases orgânicas reunidas e o precipitado são secos sobre sulfato de magnésio depois são concentrados sob pressão reduzida para originar 6,76 g de pó amarelado. O produto bruto é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Â Si02 pré-empacotada 32-63 μΜ (gradiente de acetato de etilo em ciclo-hexano de 5/95 a 10/90) para originar 2,08 g de um pó branco de 2,4-dicloro-nicotinonitrilo. SM-IE: 172 = [M+] (pico de base), 137 = [M+] - Cl

Espectro IR (KBr) : 3072; 2236; 1559; 1539; 1445; 1368; 1220; 1197; 1069; 859; 818; 791 e 416 cm-1

Espectro de R.M.N. de 1H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 7,92 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,67 (d, J = 5,5 Hz, 1H)

Ester terc-butílico do ácido [4-(4-Cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-carbâmico São adicionadas 782 mg de ácido (4-boc-aminofenil)borónico, 693 mg de bicarbonato de sódio em 8,5 mL de água e 347 mg de tetraquis(trifenilfosfina)paládio a uma solução de 519 mg de 2,4-dicloro-nicotinonitrilo em 25,5 mL de dioxano. A suspensão é agitada a 100 °C durante 2 horas, sob árgon. Após arrefecimento, a mistura de reacção é vertida em água e é extraída 3 vezes com uma solução de acetato de etilo/metanol 90/10. As fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e são concentradas sob pressão reduzida. São submetidas a 84 cromatografia 1,58 g do produto bruto numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Ã Si02 32-63 pm pré-empacotada (gradiente de uma solução A em diclorometano de 0,5/99,5 a 1/99; solução A = diclorometanolmetanol/amónia 38/17/2). Obtêm-se 797 mg de éster terc-butílico do ácido [4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-carbâmico, cujas características são as seguintes: SM-EI: 329(+)

Espectro IR (CC14): 3343; 2981; 2230; 1741; 1524; 1501; 1411; 1392; 1368; 1316; 1220; 1155; 1050 e 844 ατΓ1

Espectro de R.M.N. de ΧΗ (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 1,50 (s, 9H) ; 7,62 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; de 7,78 a 7,84 (m, 3H) ; 8,83 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,67 (s, 1H). 2-(4-Amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo São adicionados 5,5 mL de ácido trifluoroacético a uma solução de 3,40 g de éster terc-butílico do ácido [4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-carbâmico em 20 mL de diclorometano. A solução é agitada a 20 °C durante 26 horas. A solução é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo é retomado numa solução aquosa de bicarbonato de sódio e é extraída 3 vezes com diclorometano. As fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e são concentradas sob pressão reduzida. O resíduo é lavado com éter dietílico. Obtêm-se 1,678 g de um pó amarelo de 2-(4-amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo, cujas características são as seguintes: SM-ES+: 230(+) = (M+H)(+) 85

Espectro IR (KBr) : 3402; 3339; 3230; 2223; 1608; 1555; 1538; 1520; 1432; 1388; 1180; 1066; 825 e 607 crtf1

Espectro de R.M.N. de (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 5,76 (s largo, 2H) ; 6,67 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,63 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,73 (d, J = 5,5 Hz, 1H). 1-[4-(4-Cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2—fluoro-5-metil-fenil)-ureia Preparada de acordo com o esquema 7 A uma solução de 115 mg de 2-(4-amino-fenil)-4-cloro- nicotinonitrilo e 70 pL de trietilamina em 5 mL de tetra-hidrofurano a 20 °C. Após 3 h a 20 °C adiciona-se água e extrai-se a mistura com acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com água depois com solução salina e é seca sobre sulfato de magnésio, depois é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo é retomado com éter etilico e o insolúvel é isolado por filtração para originar 118 mg de um pó branco de 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2—fluoro-5-metil-fenil)-ureia, cujas caracteristicas são as seguintes: SM-EI: 380(+) = (M)(+); 125(+) = (C7H8NF)(+) pico de base

Espectro IR (KBr): 3379; 2231; 1687; 1598; 1550; 1413; 1315; 1219; 1185; 1116 e 810 cm-1

Espectro de R.M.N. de XH (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm): 2,28 (s, 3H) ; 6,82 (m, 1H) ; 7,12 (dd, J = 8,5 e 11,5 Hz, lH) ; 7,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,81 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,99 (d largo, J = 8,0 Hz, 1H); 8,60 (s largo, 1H); 8,84 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,38 (s, 1H). 86 1-[4-(3-Ciano-4-hidrazino-piridin-2-il)-fenil]-3-(2—fluoro-5-metil-fenil)-ureia

Preparado de acordo com o esquema 7

Adicionam-se 45 pL de hidrato de hidrazina a uma mistura de 50 mg de 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia em 0,5 mL de etanol a 20 °C. A suspensão branca é agitada durante 2 h a 20 °C, depois é aquecida a 80 °C durante 4 h. Deixa-se regresssar a 20 °C. O insolúvel é isolado por filtração e é lavado com éter etílico para originar 33 mg de um sólido bege de 1-[4-(3-ciano-4-hidrazino-piridin-2-il)-fenil]-3-(2—fluoro-5-metil-fenil)-ureia cujas características são as seguintes: SM-ES+: 377(+) = (M+H)(+) SM-ES”: 375(-) = (M-H)(-)

Espectro IR (KBr): 3379; 2212; 1700; 1599; 1551; 1440; 1314; 1257; 1221; 1187 e 816 cm-1

Espectro de R.M.N. de 1h (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,28 (s, 3H); 4,52 (s, 2H) ; 6,81 (m, 1H) ; 7,06 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 7,11 (dd, J = 8,5 e 11,5 Hz, 1H); 7,57 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,00 (d largo, J = 8,0 Hz, 1H) ; 8,24 (s largo, 1H) ; 8,27 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 8,57 (s largo, 1H) ; 9,32 (s, 1H). 87 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2- fluoro-5-metil-fenil)-ureia

Preparada de acordo com o esquema 7 São adicionados 0,25 mL de ácido trifluoroacético contendo anisole a 10% a uma solução de 55 mg de 1-[4-(3-ciano-4-hidrazino-piridin-2-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia em 2,2 mL de diclorometano a 20 °C. Após 40 min a solução é evaporada até à secura sob pressão reduzida. O residuo é retomado com água e o meio é tornado alcalino. O precipitado formado é isolado por filtração. Este sólido bege é submetido a cromatografia num cartucho AIT de 2 g de sílica 15-40 pm após depósito sólido (eluindo com um gradiente de CH2C12 a 100% a CH2C12 a 60%/ (CH2C2 38/MeOH 17/NH4OH3) a 40%. Obtêm-se 26 mg de um sólido bege de 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia cujas características são as seguintes:

PF: 195 0 C SM-ES+: 377(+) = (M+H)(+)

Espectro IR (KBr): 3351; 1696; 1605; 1544; 1313; 1257; 1221; 1181; 1045 e 808 cm-1

Espectro de R.M.N . de XH (300 MHz , (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,28 (s, 3H); 4,73 (s, 2H); 6,82 (m, 1H) ; 7,12 (dd, J = 8,5 e 11,5 Hz, 1H); 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; de 7,59 a 7,67 (m, 4H) ; 8,01 (dd, J = 2,5 e 8, 0 Hz, 1H); 8,21 (d, J = 6, 0 Hz, 1H); 8, 55 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 9,26 (s, 1H); 12,1 (s largo, 1H). 88

Os produtos abaixo foram preparados de acordo com um protocolo semelhante ao do exemplo 27, (esquema 7)

Exemplo 28 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxifenil)-ureia N,

—O 1-[4-(4-Cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-ureia Preparada de acordo com o esquema 7 É colocado 2-(4-amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo em reacção com isocianato de 2-, 4 dimetoxifenilo em condições semelhantes às descritas no exemplo 27. Obtém-se 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-ureia sob a forma de um sólido branco cujas características são as seguintes: SM-ES+: 409(+) = (M+H)(+)

Espectro de R.M.N. de (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 3,74 (s, 3H); 3,88 (s, 3H) ; 6,50 (dd, J = 2,5 e 9,0 Hz, 1H) ; 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,62 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,80 (d, 89 J = 5,5 Hz, 1H); 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,94 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 8,12 (s, 1H); 8,84 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9, 49 (s, 1H). 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil] -3-(2,4-dimetoxifenil)-ureia

Preparado de acordo com o esquema 7 É tratada 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-ureia com hidrato de hidrazina, depois com ácido trifluoroacético em condições semelhantes às descritas no exemplo 27. Obtém-se 1-[4-(3-amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-ureia sob a forma de um sólido bege, cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 405(+) = (M+H)(+) PF = 196 0 C (Koffler)

Espectro IR (KBr): 1603; 1526; 1452; 1210; 1180; 1157; 1035 e 824 crrf1

Espectro de R.M.N. de XH (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 3,74 (s, 3H) ; 3,87 (s, 3H) ; 4,74 (s largo, 2H) ; 6,50 (dd, J = 2,5 e 9,0 Hz, 1H); 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 7,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,61 (s largo, 4H) ; 7,95 (d, J = 9,0 Hz, 1H) ; 8,09 (s, 1H); 8,20 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 9,39 (s largo, 1H); 12,1 (m estendido 1H). 90

Exemplo 29 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-terc-butil-2-metoxi-fenil)-ureia JK33913-110-1

0 produto é um sólido amarelo cujas caracteristicas são as seguintes: LC-MS: 431(+) = (M+H)(+) PF = 181 0 C (Koffler)

Espectro IR (KBr): : 3333; 2958; 1678; 1604 ; 1525; 1487; 1421 ; 1315; 1249; 1216; 1177; 1143; 1042; 842 e 807 cm L Espectro de R.M.N . de XH (300 MHz, (CD3) 2so d6, δ em ppm) :1,27 (s, 9H) ; 3,87 (s, 3H) ; 4,73 (s largo, 2H) ; 6, 92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 6,97 (dd, J = 2,0 e 8,5 Hz, 1H) ; 7, 19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7, 63 (s, 4H); 8,21 (d, J = = 6,0 Hz, 1H) ; 8,25 (s, 1H); 8,29 (d, J = 2 ,5 Hz, 1H); 9,51 (s, 1H) ; 12,1 (s largo, 1H) . 91

Exemplo 30 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-ureia

O produto é um sólido amarelo cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 373: [M+H]+ PF = 182 0 C (Koffler)

Espectro IR (KBr): 3413; 1679; 1621; 1549; 1210; 1136; 842; 803 e 724 crrf1 contém ácido trifluoroacético

Espectro de R.M.N. de (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,16 (s, 3H); 2,20 (s, 3H); 4,74 (s largo, 2H); 7,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H) ; 7,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,20 (dd parcialmente mascarado, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H); 7,26 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 7,62 (s, 4H) ; 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 8,60 (s, 1H) ; 8,87 (s, 1H) ; 12,15 (s, 1H) 92

Exemplo 31 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(4-metil-3-trifluorometil-fenil)-ureia

0 produto é um sólido amarelo cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 427: [M+H]+ PF = 191 0 C (Koffler) 3226; 3112; 1678; 1621; 1134; 1054; 839; 802 e

Espectro IR (KBr) : 3393; 3319; 1552; 1529; 1505; 1319; 1206; 1186; 723 crrf1 contém ácido trifluoroacético

Espectro de R.M.N. de XH (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,38 (q, J = 2,0 Hz, 3H) ; 4,74 (s largo, 2H); 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,35 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,53 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H) ; 7,64 (s, 4H) ; 7,96 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,96 (s, 1H); 9,00 (s, 1H); 12,15 (s, 1H) 93

Exemplo 32 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,5-difluoro-fenil)-ureia

0 produto é um sólido amarelo cujas caracteristicas são as seguintes: LC-MS: 381(+) = (M+H)(+) PF = 187 0 C (Koffler)

Espectro IR (KBr): 3372; 1718; 1606; 1534; 1442; 1313; 1208; 1179; 862; 796 e 727 cnf1

Espectro de R.M.N. de 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,74 (s largo, 2H); 6,84 (m, 1H); 7,20 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 7,31 (ddd, J = 5,5 - 9,0 e 11,0 Hz, 1H); de 7,61 a 7,68 (m, 4H); 8,07 (ddd, J = 3,0 - 6,5 e 11,0 Hz, 1H) ; 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 8,87 (s largo, 1H); 9,36 (s, 1H); 12,15 (s largo, 1H). 94

Exemplo 33 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-ureia

0 produto é um sólido pálido amarelo cujas caracteristicas são as seguintes: SM-ES+: 393 [M+H]+ PF = 196 0 C (Koffler)

Espectro IR (KBr):3406; 3323; 3110; 1675; 1621; 1592; 1528; 1498; 1210; 1185; 1139; 839; 803 e 724 cm-1 contém ácido trifluoroacético

Espectro de R.M.N. de 1R (400 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,27 (s, 3H); 4,74 (s largo, 2H); 7,19 (d, J = 5,5 Hz, lH); 7,21 (dd, J = 2,0 e 8,5 Hz, 1H) ; 7,25 (d, J = 2,0 Hz, 1H) ; 7,63 (s, 4H) ; 7,72 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,21 (d, J = 5,5 Hz, lH) ; 8,88 (s, 1H); 8,96 (s, 1H); 12,15 (s, 1H). 95

Exemplo 34 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-fluoro-2-metil-fenil)-ureia

0 produto é um sólido amarelo cujas características são as seguintes: LC-MS: 377(+) = (M+H)(+) PF => 265 0 C (Koffler)

Espectro IR (KBr): 3287; 1639; 1604; 1539; 1452; 1312; 1217; 1156; 1109; 1046; 846 e 809 cm-1

Espectro de R.M.N. de XH (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 2,24 (s, 3H) ; 4,74 (s largo, 2H) ; 6,76 dt, J = 3,0 e 8,5 Hz, 1H) ; 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,20 (m parcialmente mascarado, 1H); 7,64 (s, 4H) ; 7,86 (dd, J = 3,0 e 12,0 Hz, 1H) ; 8,15 (s largo, 1H); 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 9,40 (s largo, 1H); 12,15 (s largo, 1H) . 96

Exemplo 35 N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

SM-ES+: 434 (MH+)

Exemplo 36 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-cloro-2, 4-dimetoxi-fenil)-ureia

0 Cl Q

SM-ES+: 439 (MH+) 97

Exemplo 37 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometilsulfanil-fenil)-ureia F—

F SM-ES+: 445 (MH+) 98

Exemplo 38 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-ureia

3-Cloro-5-(4-nitrofenil)-isonicotinonitrilo

Preparado de acordo com o esquema 8 São adicionadas 2,74 g de 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-nitrofenil)-1,3,2-dioxaborolano, 2,31 g de bicarbonato de sódio em 70 mL de água e 1,16 g de tetraquis (trifenilfosfina)paládio (0) a uma solução de 1,73 g de 3,5-dicloro-isonicotinonitrilo comercial em 120 mL de dioxano. A suspensão é aquecida a 100 °C durante 1 h 30. Após arrefecimento a mistura de reacção é vertida em 40 mL de água e é extraída com 3 vezes 100 mL de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 50 mL de água, 50 mL de solução salina, são secas sobre sulfato de magnésio e são concentradoas até à secura sob pressão reduzida. A goma castanha residual é purificada por cromatografia em cartucho Merck pré-empacotado de 70 g de silica 15-40 μΜ eluindo com diclorometano. Obtêm-se 1,58 g de sólido amarelo de 3-cloro-5-(4-nitro-fenil)-isonicofinonitrilo, cujas caracteristicas são as seguintes: 99 SM-EI: 259(+)

Espectro de R.M.N. de 1h (400MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 8,02 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,43 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,91 (s, 1H) ; 9,09 (s, 1H)

Derivado N,N' di-BOC de 3-Hidrazino-5-(4-nitro-fenil)-isonicotinonitrilo

Preparado de acordo com o esquema 8 São adicionadas 2,62 g de carbonato de potássio e 990 mg de 3-cloro-5-(4-nitrofenil)-isonicotinonitrilo a uma solução de 4,43 g de hidrazinodif ormato de di-terc-butilo em 19 mL de dimetilformamida. A suspensão é aquecida a 75 °C durante 6 horas depois é agitada durante 18 horas a 20 °C. A mistura de reacção é extraída com 3 vezes 80 mL de acetato de etilo. As fases orgânicas são lavadas com 2 vezes 50 mL de água depois com 50 mL de solução salina. As fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e são concentradas sob pressão reduzida. O resíduo castanho é purificado por cromatografia com um cartucho Merck de 25 g de sílica pré-empacotada 15-40 μΜ (gradiente de eluição: ciclo-hexano/acetato de etilo 9/1 a 7/3). Obtêm-se 2,38 g de sólido amarelo de derivado Ν,Ν'-di-boc de 3-hidrazino-5-(4-nitrofenil)-isonicotinonitrilo, isolado impuro e utilizado como tal. LC-MS: 456(+) = (M+H)(+) 454(-) = (M-H)(-) 100

Derivado N,N'-di-Boc de 3-(4-amino-fenil)-5-hidrazino isonicotinonitrilo

Preparado de acordo com o esquema 8 São adicionados 3 mL de ciclo-hexeno e 200 mg de hidróxido de paládio a uma solução de 1,74 g de derivado N,N'-di-boc de 3-hidrazino-5-(4-nitro-fenil)-isonicotinonitrilo em 8 mL de etanol. A suspensão é agitada em refluxo durante 2 h 15, é filtrada a quente em celite e é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O residuo bege é purificado por cromatografia em cartucho Merck de 70 g de silica 15-40 μΜ eluindo com uma solução de acetato de etilo/diclorometano 8/2. Obtêm-se 309 mg de sólido amarelo de derivado Ν,Ν'-di-boc de 3.(4-Amino-fenil)-5-hidrazino-isonicotinonitrilo, cujas características são as seguintes: LC-MS: 426 (+) = (Μ + H)(+)

Espectro de R.M.N. de (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 1,45 (s largo, 18H); 5,61 (s, 2H); 6,71 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,31 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,55 (s largo, 1H); 8,64 (s, 1H); 10,05 (m estendido 1H)

Derivado N,N'di-BOC de 1-[4-(4-Ciano-5-hidrazino-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-ureia

Preparado de acordo com o esquema 8 São adicionadas a 0 °C, sob árgon, 78 mg de 2-metoxi-5- trifluorometil anilina em 2 mL de tetra-hidrofurano e 110 yL de 101 trietilamina a uma solução de 41 mg de trifosgénio em 4 mL de tetra-hidrofurano. A suspensão é agitada a 0 °C durante 10 minutos depois a 20 °C durante 1 h 15. É então adicionada uma solução de 174 mg de derivado Ν,Ν'-di-boc de 3-(4-amino-fenil)-5-hidrazino-isonicotinonitrilo em 2 mL de tetra-hidrofurano. A mistura de reacção é aquecida em refluxo durante 8 horas depois é concentrada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por cromatografia num cartucho Analogix de 12 g de sílica 50 μΜ (gradiente de eluição de acetato de etilo em ciclo-hexano de 1/9 a 5/5) . Obtêm-se 195 mg de sólido amarelo de derivado Ν,Ν'-di-boc de 1-[4-(4-ciano-5-hidrazino-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-ureia, cujas características são as seguintes: LC-MS: 643(+) = (M+H)(+)

Espectro de R.M.N. de 1H (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : de 1,4 a 1,55 (s largo, 18H) ; 3,99 (s, 3H) ; 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,34 (dd, J = 2,0 e 8,5 Hz, 1H); 7,58 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,69 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,57 (d, J = 2,0 Hz, 1H) ; 8,65 (s, 1H) ; 8,69 (s largo, 1H) ; 8,72 (s, 1H) ; 9,78 (s, 1H) ; 10,08 (m estendido 1H) 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-ureia

Preparado de acordo com o esquema 8 É aquecida uma solução de 282 mg de derivado Ν,Ν'-di-boc de 1-[4-(4-ciano-5-hidrazino-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-ureia e 600 pL de ácido trifluoroacético 102 com anisole a 10%, em 8 mL de diclorometano em refluxo durante 2 h 30. Após arrefecimento a mistura de reacção é vertida sobre uma solução saturada de bicarbonato com sódio e é extraída com 40 mL de acetato de etilo. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio seco e é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo amarelo é empastado em éter etílico. Após filtração sob vácuo e secagem do insolúvel obtêm-se 103 mg de sólido amarelo de 1— [4— (3-amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-ureia, cujas características são as seguintes: LC-MS: tr = 2,83 min: 443 = [M+H]+; 441 = [M-H]'; 487 = [Μ-ΗΓ + HC02H SM-EI: 176 (pico de base) = C8H6F30+; 442 = [M+]

Espectro IR (KBr) : 3342; 1696; 1609; 1538; 1491; 1447; 1314; 1270; 1215; 1177; 1135; 1024; 837 e 622 cm'1

Espectro de R.M.N. de 1h (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 3,99 (s, 3H); 4,61 (s, 2H) ; 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,33 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,93 (s, 1H) ; 8,58 (s largo, 2H) ; 8,74 (s, 1H) ; 9,61 (s, 1H); 12,25 (s, 1H) PF = 210 0 C (Koffler) 103

Exemplo 39 N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida

Preparada de acordo com os esquemas 6 e 8

SM-ES+ = 434 (MH+)

Exemplo 40 Ácido 3—{3—[4-(3-amino-lH-pirazolo[3,4-B]piridin-4-il)- fenil]-ureido}-4-metoxi-benzóico

Adicionam-se, gota a gota, 1,6 mL de uma solução de tribrometo de boro 1 M a uma solução de 100 mg 1-[4-(3-amino-lH-pirazoto[3,4 —b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, descrita no exemplo 5, em 5 mL de 104 diclorometano a -40 °C e deixa-se subir até 20 °C. Concentra-se até à secura sob corrente de árgon durante uma noite. O residuo é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32 — 63N pré-empacotada (eluente: diclorometano/solução A, de 95:5 depois 90:10 depois 80:20 depois 73:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 41 mg de pó amarelo de ácido 3 — {3—[4-(3-amino-lH-pirazolo[3,4-B]piridin-il)-fenil]-ureido}-metoxi-benzóico, cujas caracteristicas são as seguintes: LCMS em Quattro Premier: tr = 5,04 min m/z 419: [M+H]+

Espectro IR (KBr):3354; 1697; 1597; 1542; 1431; 1319; 1279; 1205; 1122; 821 e 767 cm-1

Espectro de R.M.N. de XH (400 MHz, (CD3)2SO, δ em ppm) : 3,80 (s, 3H); 4,59 (s, 2H) ; 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,51 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,40 (s, 1H) ; 8,79 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 9,60 (s, 1H) ; 10,6 (m muito estendido, 1H) ; 12,25 (s largo, 1H). 105

Exemplo 41 1- [4- (3-Amino-lf7-pirazolo [3, 4-b]piridin-4-il) -fenil] -3- (2-hidroxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia

Adicionam-se, gota a gota, 1,6 mL de uma solução 1 M de tribrometo de boro a uma solução de 1-[4-(3-amino-lH- pirazolo[3,4—b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil -fenil)-ureia, descrita no exemplo 5, em 6 mL de diclorometano a -40 °C e deixa-se subir até 20 °C. Após 30 min, a reacção é arrefecida num banho de água gelada depois adiciona-se água. Após 15 min de agitação a mistura é filtrada e o insolúvel laranja é lavado com água e diclorometano. O sólido é purificado numa coluna Biotage KP-Sil de 60 Á Si02 32-63 μ pré-empacotada (eluente: diclorometano/solução A, de 95:5, depois 90:10, depois 80:20 depois 73:30; solução A = diclorometano/metanol/amónia, 38:17:2). Obtêm-se 29 mg de pó amarelo de 1-[4-(3-Amino-lfí-pirazolo[3,4 —b]piridin-4-il)-fenil] -3-(2-hidroxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, cujas características são as seguintes: LCMS em ZQ:tr = 3,22 min m/z 429 [M+H]+ (pico de base) 106

Espectro de R.M.N. de 1R (300 MHz, (CD3)2SO d6, δ em ppm) : 4,59 (s, 2H) ; 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 7,00 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,18 (dd, J = 2,5 e 8,5 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,37 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 8,51 (m, 2H) ; 9,64 (s, 1H) ; 10,7 (m muito estendido, 1H) ; 12, 25 (s largo, 1H).

Determinação da actividade dos compostos - Protocolos experimentais

1. FAK A actividade inibidora dos compostos sobre FAK é determinada por uma medição da inibição da autofosforilação da enzima utilizando um teste de fluorescência resolvida no tempo (HTRF).

Foi clonado o ADNc completo da FAK humana, cuja extremidade do terminal N foi marcada com histidina, num vector de expressão de baculovirus pFastBac HTc. A proteína foi expressa e foi purificada até uma homogeneidade de cerca de 70%. A actividade de cinase é determinada incubando a enzima (6,6 pg/mL) com várias concentrações do composto a testar em tampão Hepes 50 mM pH = 7,2, MgCl2 10 mM, Na3V04 100 μΜ, ATP 15 μΜ durante 1 hora a 37 °C. A reacção enzimática é inactivada por adição de tampão Hepes pH = 7,0 contendo KF 0,4 mM de, edta 133 mM, BSA a 0,1% e a marcação é realizada durante 1 a 2 horas à temperatura ambiente, por adição neste tampão de um anticorpo anti-Histidina marcado com XL665 e de um anticorpo monoclonal fosfoespecífico para a tirosina combinado 107 com criptato de európio (Eu-K). As características dos dois fluoróforos estão disponíveis em G. Mathis et al., Anticancer Research, 1997, 17, páginas 3011-3014. A transferência de energia do criptato de európio excitado para o aceitador XL665 é proporcional ao grau da autofosf orilação da FAK. O sinal de longa duração específico de xl-665 é medido com um contador de placas Packard Discovery. Todos ensaios são realizados em duplicado e é calculada a média dos dois ensaios. A inibição da actividade da autofosforilação da FAK com compostos da invenção é expressa em percentagem de inibição em comparação com um controlo cuja actividade é medida na ausência do composto de teste. Para o cálculo da % de inibição, é considerada a proporção [sinal a 665 nm/sinal a 620 nm] .

2. KDR 0 efeito inibidor dos compostos é determinado num teste de fosforilação do substrato pela enzima KDR in vitro através de uma técnica da cintilação (placa 96 poços, NEN). 0 domínio citoplasmático da enzima humana KDR foi clonado sob a forma de fusão GST no vector da expressão de baculovírus pFastBac. A proteína foi expressa em células SF21 e foi purificada até uma homogeneidade de cerca de 60%. A actividade de cinase da KDR é medida em MOPS 20 mM, MgCl2 10 mM, MnCl2 10 mM, DTT 1 mM, EGTA 2,5 mM, b-glicerofosfato 10 mM, pH = 7,2, na presença de MgCl2 10 mM, Na2V04 100 μΜ, NaF 1 mM. São adicionados 10 pL do composto a 70 pL de tampão cinase contendo 100 ng de enzima KDR a 4 °C. A reacção é iniciada adicionando 20 pL de solução contendo 2 pg de substrato 108 (fragmento SH2-SH3 da PLCy exprsso sob a forma de proteína da fusão GST), 2 pCi γ33Ρ [ATP] e ATP 2 μΜ frio. Após 1 hora de incubação a 37 °C, a reacção é inactivada adicionando 1 volume (100 pL) de EDTA 200 mM. O tampão de incubação é retirado e os poços são lavados três vezes com 300 pL de PBS. A radioactividade é medida em cada poço utilizando um contador de radioactividade Top Count NXT (Packard). O ruído de fundo é determinado pela medição da radioactividade em quatro poços diferentes contendo o ATP radioactivo e apenas o substrato. É medido um controlo da actividade total em quatro poços diferentes contendo todos os reagentes (γ33Ρ-[ΑΤΡ], KDR e substrato PLCy) mas na ausência de composto. A inibição da actividade KDR com o composto da invenção é expressa em percentagem de inibição da actividade de controlo determinada na ausência de composto. O composto SU5614 (Calbiochem) (1 pM) é incluído em cada placa como controlo da inibição. 3. Tie2

Foi produzida a sequência codificante de Tie2 humano correspondente aos aminoácidos do domínio intracelular 776-1124 por PCR utilizando ADN isolado de placenta humana como modelo. Esta sequência foi introduzida num vector da expressão baculovirus pFastBacGT sob a forma de proteína de fusão GST. 109 0 efeito inibidor das moléculas é determinado num teste de fosforilação de PLC por Tie2 na presença de GST-Tie2 purificada até uma homogeneidade de cerca de 80%. O substrato é contituido por fragmentos SH2-SH3 da PLC expressos sob a forma de proteina da fusão GST. A actividade de cinase de Tie2 é medida em tampão MOPS 20 mM pH 7,2, contendo MgCl2 10 mM, MnCl2 10 mM, DTT 1 mM, glicerofosfato 10 mM. Aplica-se uma mistura de reacção constituída por 70 pL de tampão cinase contendo 100 ng de enzima GST-Tie2 por poço numa placa de 96 poços FlashPlate mantida sobre gelo., de seguida, são adicionados 10 pL da molécula a ser testada diluídos em DMSO a uma concentração de 10% do máximo. Para uma determinada concentração, cada medição é realizada em quatro réplicas. A reacção é iniciada adicionando 20 pL solução contendo 2 pg de GST-PLC, ATP 2 pM frio e 1 pCi de 33P[ATP]. Após 1 hora de incubação a 37 °C, a reacção é inactivada adicionando 1 volume (100 pL) de EDTA a 200 mM. Após eliminação do tampão de incubação, os poços são lavados três vezes com 300 pL de PBS. A radioactividade é medida num MicroBetal450 Wallac. A inibição da actividade de Tie2 é calculada e é expressa em percentagem de inibição em comparação com a actividade de controlo determinada na ausência de composto. 110

Resultados: Tabela 1:

Estrutura exemplo FAK KDR TIE2 IC 50 (nM IC 50 (nM) IC 50 (nM) zCfXI^2y-.i 1 264 50 8 pyOCNH Λ X O^NH Γ M V nh2 C í j* N N 2 150 940 23 111 (continuação)

Estrutura exemplo FAK KDR TIE2 IC 50 (nM IC 50 (nM) IC 50 (nM) X F F hn^Sd X Γ* lYk 3 73 33 5 Γ' <Ah \\ Y nh2 n tAi Ογ 4 80 218 4 112 (continuação)

Estrutura exemplo FAK KDR TIE2 IC 50 (nM IC 50 (nM) IC 50 (nM) Λ HN^O NH! Cd* v1! 5 286 49 15 λ^.ΟΜθ ’γ0(.. " ,Α. f|N I ,NH* rí'^V^ w 6 190 1855 27 L ΗΝ'Ή) X Γ2 ίΎΛ 7 - 36 9 113 (continuação)

Estrutura exemplo FAK KDR TIE2 IC 50 (nM IC 50 (nM) IC 50 (nM) O^NH F 10 - 60 10 líV Λ * yW* Γ Jl N H 14 - 24 21

Lisboa, 18 de Novembro de 2010 114

Claims (16)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Produto correspondente à fórmula (I) seguinte:

   em que: 1) Ar-L-A é A M em que X2 é seleccionado de entre N, C-CH3, CF e CH. 2) A é é seleccionado de entre fenilo, pirazolilo e isoxazolilo; eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados de entre halogéneo; alquilo(C1-C12); arilo(C6-C14); heteroarilo(C1-C13) com 1 a 4 heteroátomos, cicloalquilo(C3-C12); heterociclilo(C1-C13) com 1 a 4 heteroátomos; alquileno(C2-C12); alcinilo(C2-C12); OH; O-alquilo(C1-C12); O-alquilo(C2-C12); O-arilo(C6-C14); O-heteroarilo(C1-C13) com 1 a 4 heteroátomos; NH2; 1 NH-alquilo(C1-C12) ; NH-heteroarilo(C1-C13) ; N-alquilo(C1-C12)-alquilo(C1-C12)' ; S-alquilo(C1-C12); S-arilo(C6-C14) ; S(02)H; S(02) -arilo(C6-C14); S03H; S03-arilo(C6-C14) ; CHO; C(0)-arilo(C6-C14); C(0)0H; C(0)O-arilo(C6-C14) ; NH-arilo(C6-C14); SH; S(02) -alquilo(C1-C12); S03-alquilo(C1-C12); C(0)-alquilo(Cl-Cl2); C(0)0-alquilo(C1-C12); 0C(0)-alquilo(C1-C12); OC(0)-arilo(C6-C14); C(0)NH2; C(0)NH-alquilo(C1-C12); NHCHO; NHC(0)-alquilo(C1-C12); NH-cicloalquilo(C3-C12); heteroátomos, C(O)NH-arilo(C6-C14); NHC(0)-arilo(C6-C14); heteroátomos, heteroátomos, heteroátomos, heteroátomos, heteroátomos, NH-heterociclilo(C1-C13) com 1 a 4 CONH-Heterociclilo(C1-C13) com 1 a 4 CO-Heteroarilo(C1-C13) com 1 a 4 CO-Heterociclilo(C1-C13) com 1 a 4 NHCO-Heteroarilo(C1-C13) com 1 a 4 NHCO-Heterociclilo(C1-C13) com 1 a 4 NHCONH-alquilo(C1-C12). 3) L é seleccionado do grupo constituído por: NH-S02, -NH-CO-NH; 4) Um de X, Y e Z é seleccionado de entre N e NO e outros dois de Z, Y e X são C(R5) e C(R6); 5) R5 e R6 são seleccionados de entre H e F.
2. 2. Produto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Ar-L-A ser: 2

   L \ A em que X2 é N.
3. 3. Produto de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por L-A ser NH-CO-NH-A.
4. 4. Produto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por A ser fenilo ou isoxazolilo substituído com halogéneo, alquilo(C1-C4), alquilo(C1-C3) halogenado, O-alquilo(C1-C4), S-alquilo(C1-C4), O-alquilo(C1-C4) halogenado, S-alquilo(C1-C4) halogenado e quando A é dissubstituido, os dois substituintes de A podem formar um anel com 5 a 7 membros contendo de 0 a 3 heteroátomos.
5. 5. Produto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por A ser substituído com um ou mais substituintes, idênticos ou diferentes, seleccionados independentemente do grupo constituído por F, Ci, Br, I, OH, SH, S03M, COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), alquilo(C1-C3)-OH, alquilo(C1-C3)-N(R8)(R9), alquilo(Cl—C3)—(RIO), alquilo(C1-C3)-COOH, N(R8)(R9), alquilo(C1-C6), alquileno(C2-C6), alcinilo(C2-C6), arilo, heteroarilo, O-alquilo(C1-C6), O-Arilo, O-heteroarilo, S-alquilo(C1-C6), S-Arilo, S-heteroarilo, estando cada, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados de entre alquilo(C1-C3), halogéneo, O-alquilo (C1-C3) ; em que R8 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, alquilo(C1-C3), 3 alquilo(C1-C3)OH, alquilo(C1-C3)NH2, alquilo(C1-C3)COOM, alquilo (C1-C3) S03M; em que quando R8 e R9 são simultaneamente diferentes de H, estes podem ser ligados para formar um anel com 5 a 7 membros compreendendo de 0 a 3 heteroátomos seleccionados de entre 0, N e S; em que M é H ou um catião de metal alcalino seleccionado de entre Li, Na e K; e em que RIO é H ou um heterociclo não-aromático eventualmente substituído, compreendendo 2 a 7 átomos de carbono e 1 a 3 heteroátomos seleccionados de entre N, 0 e S.
6. 6. Produto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por A ser 2-fluoro-5-trifluorometil-fenilo ou 2-metoxi-5- trifluorometil-fenilo.
7. 7. Produto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser seleccionado de entre: 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 4 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metilcarbonilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia, Ácido 3—{3— [4— (3-amino-líí-pirazolo [3,4-£>]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-metoxi-benzóico, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-hidroxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terbutil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-metil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4—b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-etil-fenil)-ureia, 5 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-yi)-fenil]-3- 1.3- benzodioxol-5-il-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metoxi-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-cloro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-metil-fenil)-ureia, N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]- 2.3- dicloro-benzenossulfonamida.
8. 8. Produto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser seleccionado de entre: 1- [ 4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(fenil)-ureia, 6 1-[5-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-ureia, N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terbutil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenill-3- (3,4-dimetil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-metil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,5-difluoro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-ureia, 7 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metil-5-fluoro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-5-cloro-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometilsulfanil-fenil)-ureia.
9. 9. Produto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser seleccionado de entre: 1- [ 4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureia, 1-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-ureia, N-[4-(3-Amino-lH-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro-benzenossulfonamida.
10. 10. Produto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado por este estar sob a forma: a. não-quiral ou b. racémica ou b. enriquecida num estereoisómero ou d. enriquecida num enantiómero; por este estar eventualmente salifiçado. 8
11. 11. Medicamento, caracterizado por este compreender um produto de fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 9 ou um sal de adição deste composto com um ácido farmaceuticamente aceitável ou, ainda, um hidrato ou um solvato do produto de fórmula (I).
12. 12. Composição farmacêutica compreendendo um produto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em combinação com um excipiente farmaceuticamente aceitável.
13. 13. Utilização de um produto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 para a preparação de um medicamento como agente inibidor de uma reacção catalisada por uma cinase.
14. 14. Utilização de um produto de acordo com a reivindicação 13, caracterizada por a cinase ser seleccionada de entre FAK, KDR e Tie2.
15. 15. Utilização de um produto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, na preparação de um medicamento útil para tratar um estado patológico.
16. 16. Utilização de acordo com a reivindicação 15, caracterizada por o estado patológico ser o cancro. Lisboa, 18 de Novembro de 2010 9