ES2351160T3 - Pirazolo piridinas sustituidas, composiciones que las contienen, procedimiento de fabricación y utilización. - Google Patents

Abstract

Producto que responde a la fórmula (I) siguiente: **Fórmula** en la que : 1) Ar-L-A es **Fórmula** en la que X2 se elige entre N, C-CH3, CF y CH.

Description

La presente invención se refiere especialmente a nuevos compuestos químicos, particularmente nuevas pirazolo piridinas sustituidas, a las composiciones que las contienen y a su utilización como medicamentos.

De modo más particular, y según un primer aspecto, la invención se refiere a nuevas pirazolo piridinas específicas que presentan una actividad anticancerosa, a la vía de modulación de la actividad de las proteínas, en particular de las quinasas.

Hasta ahora, la mayoría de los compuestos comerciales utilizados en quimioterapia plantean problemas importantes de efectos secundarios y de tolerancia por los pacientes. Estos efectos podrían limitarse en la medida en que los medicamentos utilizados actúen selectivamente sobre las células cancerosas, con exclusión de las células sanas. Una de las soluciones para limitar los efectos indeseables de una quimioterapia puede consistir por lo tanto en la utilización de medicamentos que actúen sobre vías metabólicas o elementos constitutivos de estas vías, expresados mayoritariamente en las células cancerosas, y que no sean expresados o se expresen minoritariamente en las células sanas.

Las proteínas quinasas son una familia de enzimas que catalizan la fosforilación de los grupos hidroxi de restos específicos de proteínas, tales como restos tirosina, serina o treonina. Dichas fosforilaciones pueden modificar de forma importante la función de las proteínas; así, las proteínas quinasas juegan un papel importante en la regulación de una gran variedad de procesos celulares, incluyendo principalmente el metabolismo, la proliferación celular, la diferenciación celular, la migración celular o la supervivencia celular. Entre las diferentes funciones celulares en las que está implicada la actividad de una proteína quinasa, algunos procesos representan dianas atractivas para tratar las enfermedades cancerosas, así como otras enfermedades.

Así, uno de los objetivos de la presente invención es proponer composiciones que tienen una actividad anticancerígena, actuando en particular frente a las quinasas. Entre las quinasas para las cuales se investiga una modulación de su actividad, se prefieren FAK, KDR y Tie2.

Estos productos responden a la fórmula (I) siguiente: en la que :

imagen1

3) Uno de los X, Y y Z se elige entre N y O, y los otros dos de Z, Y y X son C(R5) y C(R6);

imagen2

5

en donde X2 se elige entre N, C-CH3, CF y CH.

Los sustituyentes R5 y R6 preferidos se seleccionan independientemente entre H, halógeno, OMe y metilo.

10 R5 y R6 se eligen ventajosamente entre H y F. R5 y R6 son preferentemente H. Los sustituyentes L-A preferidos, se eligen ventajosamente entre NH-CO-NH-A

y NH-SO2-A. Se obtiene una combinación L-A particularmente eficaz cuando L-A es

15 NHCONH-A. A se elige entre fenilo, pirazolilo e isoxazolilo ; sustituido eventualmente. De manera muy ventajosa, el sustituyente A está sustituido con un sustituyente

seleccionado de un primer grupo constituido por alquilo(C1-C6), alquilo(C1-C6) halogenado, alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), arilo, halógeno, heteroarilo, O

20 alquilo(C1-C6), O-arilo, O-heteroarilo, S-alquilo(C1-C6), S-arilo, S-heteroarilo, estando cada uno eventualmente sustituido con uno o varios sustituyentes elegidos entre alquilo(C1-C3), halógeno, O-alquilo(C1-C3).

El sustituyente A está sustituido preferentemente con un sustituyente seleccionado de un segundo grupo constituido por F, Cl, Br, I, OH, SH, SO3M, COOM, 25 CN, NO2, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), alquilo(C1-C3)-OH, alquilo(C1-C3)-N(R8)(R9), alquilo(C1-C3)-(R10), alquilo(C1-C3)-COOH, N(R8)(R9); en donde R8 y R9 se eligen independientemente entre H, alquilo(C1-C3), alquilo(C1-C3)OH, alquilo(C1-C3)NH2,

alquilo(C1-C3)COOM, alquilo(C1-C3)SO3M; en donde, cuando R8 y R9 son simultáneamente diferentes de H, pueden estar unidos entre sí para formar un ciclo de 5 a 7 miembros que contiene de 0 a 3 heteroátomos elegidos entre O, N y S; en el que M es H o un catión de metal alcalino elegido entre Li, Na y K ; y en el que R10 es H o un heterociclo no aromático eventualmente sustituido, que comprende 2 a 7 átomos de carbono y 1 a 3 heteroátomos elegidos entre N, O y S.

Los sustituyentes A particularmente preferidos se eligen entre fenilo e isoxazolilo; pudiendo estar sustituidos dichos sustituyentes A con halógeno, alquilo(C1-C4), alquilo(C1-C3) halogenado, O-alquilo(C1-C4), S-alquilo(C1-C4), O-alquilo(C1-C4) halogenado, y S-alquilo(C1-C4) halogenado. Cuando A está disustituido, los dos sustituyentes de A pueden formar un ciclo de 5 a 7 miembros que contiene de 0 a 3 heteroátomos.

A, ventajosamente, está sustituido con uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, independientemente seleccionados del grupo constituido por F, Cl, Br, I, OH, SH, SO3M, COOM, CN, NO2, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), alquilo(C1-C3)-OH, alquilo(C1-C3)-N(R8)(R9), alquilo(C1-C3)-(R10), alquilo(C1-C3)-COOH, N(R8)(R9), alquilo(C1-C6), alquileno(C2-C6), (C2-C6)alquinilo, arilo, heteroarilo, O-alquilo(C1-C6), O-arilo, O-heteroarilo, S-alquilo(C1-C6), S-arilo, S-heteroarilo, estando cada uno eventualmente sustituido con uno o varios sustituyentes elegidos entre alquilo(C1-C3), halógeno, O-alquilo(C1-C3); en donde R8 y R9 se eligen independientemente entre H, alquilo(C1-C3), alquilo(C1-C3)OH, alquilo(C1-C3)NH2, alquilo(C1-C3)COOM, alquilo(C1-C3)SO3M; en el que, cuando R8 y R9 son simultáneamente diferentes de H, pueden unirse para formar un ciclo de 5 a 7 eslabones que contiene de 0 a 3 heteroátomos elegidos entre O, N y S; en el que M es H o un catión de metal alcalino elegido entre Li, Na y K ; y en el que R10 es H o un heterociclo no aromático sustituido opcionalmente, que comprende 2 a 7 átomos de carbono y 1 a 3 heteroátomos elegidos entre N, O y S.

Según un modo de realización preferido, A, ventajosamente, es 2-fluoro-5trifluorometil-fenilo o 2-metoxi-5-trifluorometil-fenilo.

Los productos conformes a la invención se pueden elegir entre:

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-urea,

1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea,

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometilfenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5trifluorometil-fenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metilcarbonilamino5-trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil

fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea, Ácido 3-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-metoxi

benzoico, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-hidroxi-5-trifluorometil

fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terc-butil-fenil)

urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-metil

fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-etil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenill-3-1,3-benzodioxol-5-il-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metoxi-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-cloro-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-metil-fenil)-urea, N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro

bencenosulfonamida.

Otros productos conformes a la invención se pueden elegir entre: 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-urea,

1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5

trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(fenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5

trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometilfenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5

trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-urea, N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro

bencenosulfonamida, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terc-butil-fenil)

urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-metil

fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,5-difluoro-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metil-5-fluoro-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-5-cloro-fenil)

urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometilsulfanil-fenil)urea.

Otros productos conformes a la invención se pueden elegir entre: 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometilfenil)-urea, N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-diclorobencenosulfonamida.

Un producto conforme a la invención se podrá presentar en forma: no quiral, o

racémica, o

enriquecida en un estereoisómero, o

enriquecida en un enantiómero ;

podrá estar opcionalmente salificada, estar eventualmente hidratada, y estar eventualmente solvatada.

Un producto según la invención podrá utilizarse para la fabricación de un medicamento útil para tratar un estado patológico, en particular un cáncer.

Según un segundo aspecto, la invención se refiere a un medicamento, que comprende un producto de fórmula (I) según su primer aspecto, o una sal por adición de este compuesto a un ácido farmacéuticamente aceptable, o también un hidrato o un solvato del producto de fórmula (I).

Según un tercer aspecto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un producto según su primer o su segundo aspecto, en combinación con un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Según un cuarto aspecto, la invención se refiere a la utilización de un producto según uno de los demás aspectos de la invención, como agente inhibidor de una reacción catalizada por una quinasa. Entre las quinasas, se prefieren FAK, KDR y Tie2.

La presente invención se refiere también a las composiciones terapéuticas que comprenden un producto según la invención, en combinación con un excipiente farmacéuticamente aceptable según el modo de administración elegido. La composición farmacéutica se puede presentar en forma sólida, líquida o de liposomas.

Entre las composiciones sólidas se pueden citar los polvos, las cápsulas, los comprimidos. Entre las formas orales también se pueden incluir las formas sólidas protegidas frente al medio ácido del estómago. Los soportes utilizados para las formas sólidas están constituidos principalmente por soportes minerales como fosfatos, carbonatos o soportes orgánicos como lactosa, celulosas, almidón o polímeros. Las formas líquidas están constituidas por soluciones, suspensiones o dispersiones. Contienen como soporte dispersivo bien agua, bien un disolvente orgánico (etanol, NMP u otros) o mezclas de agentes tensioactivos y disolventes o de agentes complejantes y disolventes.

Las formas líquidas serán preferentemente inyectables y, debido a ello, tendrán una formulación aceptable para dicha utilización.

Las vías de administración por inyección aceptables incluyen las vías intravenosa, intraperitoneal, intramuscular y subcutánea, prefiriéndose habitualmente la vía intravenosa.

La dosis administrada de los compuestos de la invención será adaptada por el médico en función de la vía de administración al paciente y del estado de este último.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar solos o mezclados con otros compuestos anticancerosos. Entre las posibles asociaciones se pueden citar:

los agentes alquilantes y especialmente ciclofosfamida, melfalán,

ifosfamida, clorambucil, busulfán, tiotepa, prednimustina, carmustina,

lomustina, semustina, esteptozotocina, decarbazina, temozolomida,

procarbazina y hexametilmelamina

los derivados del platino como especialmente cisplatino, carboplatino u

oxaliplatino

los agentes antibióticos como, especialmente, bleomicina, mitomicina y

dactinomicina

los agentes antimicrotubulares como especialmente vinblastina,

vincristina, vindesina, vinorelbina, taxoides (paclitaxel y docetaxel)

las antraciclinas como especialmente doxorrubicina, daunorrubicina,

idarrubicina, epirrubicina, mitoxantrona, losoxantrona

los inhibidores de topoisomerasas de los grupos I y II tales como

etopósido, tenipósido, amsacrina, irinotecán, topotecán y tomudex

las fluoropirimidinas tales como 5-fluorouracilo, UFT, floxuridina

los análogos de citidina tales como la 5-azacitidina, la citarabina, la

gemcitabina, la 6-mercaptomurina, la 6-tloguanina, los análogos de adenosina

teles como la pentostatina, la catarabina o el fosfato de fludarabina

metotrexato y ácido folínico

las enzimas y compuestos diversos tales como la L-asparaginasa,

hidroxiurea, ácido trans-retinoico, suramina, dexrazoxano, amifostina,

herceptina, así como las hormonas estrógenas, andrógenas

los agentes antivasculares tales como los derivados de la

combretastatina o de la colchicina y sus profármacos.

Es posible igualmente asociar a los compuestos de la presente invención un tratamiento con radiaciones. Estos tratamientos se pueden administrar de manera simultánea, separada o secuencialmente. El médico adaptará el tratamiento en función de la enfermedad a tratar.

Los productos de la invención son útiles como agentes inhibidores de una reacción catalizada por una quinasa. FAK, KDR y Tie2 son quinasas para las cuales los productos de la invención serán particularmente útiles como inhibidores.

Las razones por las que se eligen estas quinasas son las siguientes :

FAK

FAK es una tirosina quinasa citoplasmática que juega un papel importante en la transducción de la señal transmitida por las integrinas, familia de receptores heterodiméricos de la adhesión celular. FAK y las integrinas se colocalizan en estructuras de la perimembrana denominadas placas de adherencia. Se ha mostrado en numerosos tipos celulares que la activación de FAK así como su fosforilación en restos tirosina y en particular su autofosforilación en la tirosina 397, eran dependientes de la unión de las integrinas a sus ligandos extracelulares y, por lo tanto, inducidas durante la adhesión celular [Kornberg L, et al. J. Biol. Chem. 267(33): 23439-442, (1992)]. La autofosforilación en la tirosina 397 de FAK representa un lugar de unión para otra tirosina quinasa, Src, mediante su dominio SH2 [Schaller et al. Mol. Cell. Biol. 14:1680-1688. 1994; Xing et al. Mol. Cell. Biol. 5 :413-421. 1994]. Src puede entonces fosforilar FAK en la tirosina 925, incorporando así la proteína adaptadora Grb2 e induciendo en determinadas células la activación de la vía ras y MAP Quinasa implicada en el control de la proliferación celular [Schlaepfer et al. Nature; 372: 786

791. 1994; Schlaepfer et al. Prog. Biophy. Mol. Biol. 71:435-478. 1999; Schlaepfer y Hunter, J. Biol. Chem. 272:13189-13195. 1997]. La activación de FAK también puede inducir la vía de señalización jun quinasa NH2-terminal (JNK) y resultar en la progresión de las células hacia la fase G1 del ciclo celular [Oktay et al., J. Cell. Biol.145 :1461-1469. 1999]. La fosfatidilinositol-3-OH quinasa (P13-quinasa) también se une a FAK en la tirosina 397 y esta interacción podría ser necesaria para la activación de la P13-quinasa [Chen y Guan, Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 91: 1014810152, 1994; Ling et al. J. Cell. Biochem. 73 :533-544. 1999]. El complejo FAK/Src fosforila diferentes sustratos como la paxilina y p130CAS en los fibroblastos [Vuori et al. Mol. Cell. Biol. 16: 2606-2613, 1996].

Los resultados de numerosos estudios sostienen la hipótesis de que los inhibidores de FAK podrían ser útiles en el tratamiento del cáncer. Los estudios han sugerido que la FAK podría tener un papel importante en la proliferación y/o en la supervivencia celular in vitro. Por ejemplo, en las células CHO, algunos autores han demostrado que la sobreexpresión de p125FAK da lugar a una aceleración de la transición G1 a S, sugiriendo que p125FAK favorece la proliferación celular [Zhao J.-H et al. J. Cell Biol.143:1997-2008. 1998]. Otros autores han mostrado que las células tumorales tratadas con oligonucleótidos anti-sentido de FAK pierden su adhesión y entran en apóptosis (Xu et al, Cell Growth Differ. 4:413-418. 1996). Igualmente se ha demostrado que la FAK promueve la migración de las células in vitro. Así, los fibroblastos deficientes en la expresión de FAK (ratón con inactivación génica para FAK) presentan una morfología redondeada y deficiencias en la migración celular en respuesta a señales quimiotácticas y estos defectos se suprimen mediante una reexpresión de FAK [D. J. Sieg et al., J. Cell Science. 112: 2677-91. 1999]. La sobreexpresión del dominio C-terminal de FAK (FRNK) bloquea el estiramiento de las células adherentes y reduce la migración celular in vitro [Richardson A. y Parsons J. T. Nature. 380: 538-540. 1996]. La sobreexpresión de FAK en las células CHO, COS o en células de astrocitoma humano favorece la migración de las células. La implicación de FAK en la promoción de la proliferación y de la migración de las células en numerosos tipos celulares in vitro, sugiere el papel potencial de FAK en los procesos neoplásicos. Un estudio reciente ha demostrado efectivamente el aumento de la proliferación de las células tumorales in vivo después de la inducción de la expresión de FAK en células de astrocitoma humano [Cary L. A. et al. J. Cell Sci. 109:1787-94. 1996; Wang D et al. J. Cell Sci. 113:4221-4230. 2000]. Además, estudios inmunohistoquímicos de biopsias humanas han demostrado que FAK estaba sobreexpresada en los cánceres de próstata, mama, tiroides, colon, melanoma, cerebro y pulmón, estando el nivel de expresión de FAK directamente correlacionado con los tumores que presentan el fenotipo más agresivo [Weiner T. M. et al. Lancet. 342(8878):1024-1025. 1993; Owens et al. Cancer Research. 55: 2752-2755. 1995; Maung K. et al. Oncogene. 18: 6824-6828. 1999; Wang D et al. J. Cell Sci. 113:42214230. 2000].

KDR

KDR (Kinase Insert Domain Receptor), también llamado VEGF-R2 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2), se expresa únicamente en las células endoteliales. Este receptor se fija al factor de crecimiento angiogénico VEGF, y ejerce así de mediador de una señal transduccional a través de la activación de su dominio quinasa intracelular. La inhibición directa de la actividad quinasa de VEGF-R2 permite reducir el fenómeno de angiogénesis en presencia de VEGF exógeno (Vascular Endothelial Growth Factor : factor de crecimiento vascular endotelial) (Strawn et al., Cancer Research, 1996, vol. 56, p.3540-3545). Este proceso se ha demostrado principalmente mediante mutantes VEGF-R2 (Millauer et al., Cancer Research, 1996, vol. 56, p.1615-1620). El receptor VEGF-R2 no parece tener ninguna otra función en adultos aparte de la vinculada a la actividad angiogénica de VEGF. Consecuentemente, un inhibidor selectivo de la actividad quinasa de VEGF-R2 debería demostrar poca toxicidad.

Además de este papel fundamental en el proceso dinámico angiogénico, los resultados recientes sugieren que la expresión de VEGF contribuye a la supervivencia de las células tumorales después de la quimioterapia y de la radioterapia, subrayando la sinergia potencial de los inhibidores de KDR con otros agentes (Lee et al. Cancer Research, 2000, vol. 60, p.5565-5570).

Tie2

Tie-2 (TEK) es un miembro de una familia de receptores con tirosina quinasa, específico de las células endoteliales. Tie2 es el primer receptor con actividad tirosina quinasa del que se conoce a la vez el agonista (angiopoyetina 1 o Ang1) que estimula la autofosforilación del receptor y la señalización celular [S. Davis et al (1996) Cell 87, 161-1169] y el antagonista (angiopoyetina 2 o Ang2) [P.C. Maisonpierre et al. (1997) Science 277, 55-60]. La angiopoyetina 1 puede tener un efecto sinérgico con VEGF en los últimos estadios de la neo-angiogénesis [AsaharaT. Circ. Res.(1998) 233-240]. Los experimentos de inactivación génica y las manipulaciones transgénicas de la expresión de Tie2 o de Ang1 dan lugar a animales que presentan defectos en la vascularización [D.J. Dumont et al (1994) Genes Dev. 8, 1897-1909 y C. Suri (9996) Cell 87, 1171-1180]. La unión de Ang1 a su receptor da lugar a la autofosforilación del dominio quinasa de Tie2 que es esencial para la neovascularización así como para el reclutamiento y la interacción de los vasos con los pericitos y las células musculares lisas ; estos fenómenos contribuyen a la maduración y a la estabilidad de los vasos recién formados [P.C. Maisonpierre et al (1997) Science 277, 55-60]. Lin et al (1997)

J. Clin. Invest. 100, 8: 2072-2078 y Lin P. (1998) PNAS 95, 8829-8834, han mostrado una inhibición del crecimiento y de la vascularización tumoral, así como una disminución de las metástasis de pulmón, durante las infecciones adenovirales o inyecciones del dominio extracelular de Tie-2 (Tek) en modelos de xenoinjertos de tumor de mama y melanoma.

Los inhibidores de Tie2 pueden utilizarse en las situaciones en las que se produce una neovascularización de manera inapropiada (es decir, en la retinopatía diabética, inflamación crónica, psoriasis, sarcoma de Kaposi, neovascularización crónica debida a degeneración macular, artritis reumatoide, hemoangioma infantil y cánceres).

Definiciones

El término « halógeno » hace referencia a un elemento elegido entre F, Cl, Br e

I.

El término « alquilo » hace referencia a un sustituyente hidrocarbonado saturado, lineal o ramificado, que tiene de 1 a 12 átomos de carbono. Los sustituyentes metilo, etilo, propilo, 1-metiletilo, butilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo, 1,1dimetiletilo, pentilo, 1-metilbutilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, 1,1-dimetilpropilo, 1,2dimetilpropilo, 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1etilbutilo, 2-etilbutilo, 3,3-dimetilbutilo, heptilo, 1-etilpentilo, octilo, nonilo, decilo, undecilo y dodecilo son ejemplos de sustituyente alquilo.

El término « alquileno » hace referencia a un sustituyente hidrocarbonado lineal

o ramificado que tiene una o varias insaturaciones, que tiene de 2 a 12 átomos de carbono. Los sustituyentes etilenilo, 1-metiletilenilo, prop-1-enilo, prop-2-enilo, Z-1metilprop-1-enilo, E-1-metilprop-1-enilo, Z-1,2-dimetil-prop-1-enilo, E-1,2-dimetilprop-1enilo, but-1,3-dienilo, 1-metilidenil-prop-2-enilo, Z-2-metilbut-1,3-dienilo, E-2-metilbut1,3-dienilo, 2-metil-1-metilidenilprop-2-enilo, undec-1-enilo y undec-10-enilo son ejemplos de sustituyente alquileno.

El término « alquinilo » hace referencia a un sustituyente hidrocarbonado lineal

o ramificado que tiene al menos dos insaturaciones que están presentes en un par de átomos de carbono vecinos, que tiene de 2 a 12 átomos de carbono. Los sustituyentes etinilo; prop-1-inilo; prop-2-inilo y but-1-inilo son ejemplos de sustituyente alquinilo.

El término « arilo » hace referencia a un sustituyente aromático mono-o policíclico que tiene de 6 a 14 átomos de carbono. Los sustituyentes fenilo, naft-1-ilo; naft-2-ilo ; antracen-9-ilo ; 1,2,3,4-tetrahidronaft-5-ilo ; y 1,2,3,4-tetrahidronaft-6-ilo son ejemplos de sustituyente arilo.

El término « heteroarilo » hace referencia a un sustituyente heteroaromático mono-o policíclico que tiene de 1 a 13 átomos de carbono y de 1 a 4 heteroátomos. Los sustituyentes pirrol-1-ilo ; pirrol-2-ilo ; pirrol-3-ilo ; furilo ; tienilo ; imidazolilo ; oxazolilo ; tiazolilo ; isoxazolilo ; isotiazolilo ; 1,2,4-triazolilo ; oxadiazolilo ; tiadiazolilo ; tetrazolilo ; piridilo ; pirimidilo ; pirazinilo ; 1,3,5-triazinilo ; indolilo ; benzo[b]furilo ; benzo[b]tienilo ; indazolilo ; bencimidazolilo ; azaindolilo ; quinoleilo ; isoquinoleilo ; carbazolilo ; y acridilo son ejemplos de sustituyente heteroarilo.

El término « heteroátomo » hace referencia aquí a un átomo al menos divalente, diferente del carbono. N; O; S; y Se son ejemplos de heteroátomo.

El término « cicloalquilo » hace referencia a un sustituyente hidrocarbonado cíclico saturado o parcialmente insaturado que tiene de 3 a 12 átomos de carbono. Los sustituyentes ciclopropilo; ciclobutilo; ciclopentilo; ciclopentenilo; ciclopentadienilo; ciclohexilo; ciclohexenilo; cicloheptilo; biciclo[2.2.1]heptilo; ciclooctilo; biciclo[2.2.2]octilo ; adamantilo; y perhidronaftilo son ejemplos de sustituyente cicloalquilo.

El término « heterociclilo » hace referencia a un sustituyente hidrocarbonado cíclico saturado o parcialmente insaturado que tiene de 1 a 13 átomos de carbono y de 1 a 4 heteroátomos. Preferentemente, el sustituyente hidrocarbonado cíclico saturado

o parcialmente insaturado será monocíclico y comprenderá 4 ó 5 átomos de carbono y 1 a 3 heteroátomos.

El término «sustituido» hace referencia a uno o varios sustituyentes diferentes de H, por ejemplo halógeno; alquilo; arilo; heteroarilo, cicloalquilo ; heterociclilo; alquileno; alquinilo; OH ; O-alquilo; O-alquileno ; O-arilo; O-heteroarilo; NH2 ; NH-alquilo; NH-arilo; NH-heteroarilo; N-alquilo-alquilo' ; SH ; S-alquilo; S-arilo; S(O2)H ; S(O2)-alquilo; S(O2)-arilo; SO3H ; SO3-alquilo; SO3-arilo; CHO ; C(O)-alquilo; C(O)-arilo ; C(O)OH ; C(O)O-alquilo; C(O)O-arilo ; OC(O)-alquilo; OC(O)-arilo ; C(O)NH2 ; C(O)NH-alquilo; C(O)NH-arilo ; NHCHO ; NHC(O)-alquilo; NHC(O)-arilo ; NHcicloalquilo ; NH-heterociclilo, CONH-heterociclilo, CO-heteroarilo, CO-heterociclilo, NHCO-heteroarilo, NHCO-heterociclilo, NHCONH-alquilo.

La presente invención también tiene por objeto el procedimiento de preparación de los productos de la fórmula (I).

Los productos según la invención se pueden preparar a partir de métodos convencionales de química orgánica. El esquema 1 siguiente es ilustrativo del método utilizado para la preparación del ejemplo 1 concerniente a las pirazolo[3,4-b]piridinas.

A este respecto, no pretende constituir una limitación del alcance de la invención, en lo que concierne a los métodos de preparación de los compuestos reivindicados.

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El esquema 2 siguiente es ilustrativo del método utilizado para la preparación de los ejemplos concernientes a las pirazolo[4,3-c]piridinas. A este respecto, no pretende constituir una limitación del alcance de la invención, en lo que concierne a los métodos de preparación de los compuestos reivindicados.

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El esquema 4 siguiente es ilustrativo del método utilizado para la preparación de los ejemplos concernientes a las cadenas de derivados boronatos.

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El esquema 5 siguiente es ilustrativo del método utilizado para la preparación de 4-yodo-1H-pirazolo[3,4-b]-piridin-3-ilamina.

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El esquema 6 siguiente es ilustrativo del método utilizado para la preparación de derivados ureicos de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]-piridin-3-ilamina.

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El esquema 7 siguiente es ilustrativo del método alternativo utilizado para la 10 preparación de los ejemplos concernientes a las pirazolo[4,3-c]piridinas.

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El esquema 8 siguiente es ilustrativo del método alternativo utilizado para la preparación de las pirazolo[3,4-c]piridinas.

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5

El experto en la materia entenderá que, para poner en práctica los procedimientos según la invención que se han descrito anteriormente, puede ser necesario introducir grupos protectores de las funciones amino, carboxilo y alcohol con

10 el fin de evitar reacciones secundarias. Estos grupos son los que se pueden eliminar sin afectar al resto de la molécula. Como ejemplos de grupos protectores de la función amino, se pueden citar el carbamato de terc-butilo que se puede regenerar por medio de ácido trifluoroacético o de yodotrimetilsilano, el acetilo que se puede regenerar en medio ácido (por ejemplo, ácido clorhídrico). Como grupos protectores de la función carboxilo, se pueden citar los ésteres (por ejemplo, éster metoximetílico, éster bencílico). Como grupos protectores de la función alcohol, se pueden citar los ésteres (por ejemplo, éster benzoílico), que pueden regenerarse en medio ácido o por hidrogenación catalítica. Otros grupos protectores que pueden utilizarse están descritos por T. W. GREENE et al. en Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, 1999, Wiley-Interscience.

Otro objeto de la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula general (II):

imagen2

10 en la que X, Y, Z son tal como se definen anteriormente y G es un átomo de halógeno apropiado en la reacción de acoplamiento de Suzuki, como productos intermedios para la preparación de los productos de fórmula general (I) tal como se definen en la reivindicación 1.

15 Otro objeto de la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula general (III):

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en la que : X, Y, Z son tal como se han definido anteriormente, 20 X3 es Ar-L-A, en donde Ar, L y A son tal como se han definido anteriormente o Ar-L, en donde Ar es tal como se ha definido anteriormente y L es NH2 o NO2,

X1 y X2 son diferentes y se eligen independientemente entre CN, Cl, -NH-NH2, -N(Boc)-NH(Boc), -N(Boc)-N(Boc)2, como productos intermedios para la preparación de los productos de fórmula general (I) tal como se definen en la reivindicación 1.

25 Los compuestos de la fórmula (I) se aíslan y se pueden purificar por los métodos conocidos habituales, por ejemplo por cristalización, cromatografía o extracción. Los enantiómeros, diastereoisómeros de los compuestos de fórmula (I) forman

30 parte igualmente de la invención.

Los compuestos de fórmula (I) que contienen un resto básico se pueden transformar eventualmente en sales por adición de un ácido mineral u orgánico, por acción de dicho ácido en el seno de un disolvente, por ejemplo, un disolvente orgánico tal como un alcohol, una cetona, un éter o un disolvente clorado.

Los compuestos de fórmula (I) que contienen un resto ácido se pueden transformar eventualmente en sales metálicas o en sales por adición de bases nitrogenadas según métodos conocidos per se. Estas sales se pueden obtener por acción de una base metálica (por ejemplo, alcalina o alcalinotérrea), amoniaco, una amina o una sal de amina sobre un compuesto de fórmula (I), en un disolvente. La sal formada se separa por los métodos habituales.

Estas sales forman igualmente parte de la invención.

Cuando un producto según la invención presenta al menos una función básica libre, se pueden preparar sales farmacéuticamente aceptables por reacción de dicho producto y un ácido mineral u orgánico. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen los cloruros, nitratos, sulfatos, hidrogenosulfatos, pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, monohidrogenofosfatos, dihidrogenofosfatos, metafosfatos, pirofosfatos, acetatos, propionatos, acrilatos, 4-hidroxibutiratos, caprilatos, caproatos, decanoatos, oxalatos, malonatos, succinatos, glutaratos, adipatos, pimelatos, maleatos, fumaratos, citratos, tartratos, lactatos, fenilacetatos, mandelatos, sebacatos, suberatos, benzoatos, ftalatos, metanosulfonatos, p-toluenosulfonato, propanosulfonatos, xilenosulfonatos, salicilatos, cinamatos, glutamatos, aspartatos, glucuronatos, galacturonatos.

Cuando un producto según la invención presenta al menos una función ácido libre, se pueden preparar sales farmacéuticamente aceptables por reacción de dicho producto y una base mineral u orgánica. Las bases farmacéuticamente aceptables incluyen hidróxidos de cationes de metales alcalinos o alcalinotérreos tales como Li, Na, K, Mg, Ca, compuestos aminados básicos tales como amoníaco, arginina, histidina, piperidina, morfolina, piperazina, trietilamina.

La invención se describe igualmente por los ejemplos siguientes, que se proporcionan para ilustrar la invención.

Los análisis LC/MS se realizaron utilizando un instrumento Micromass modelo LCT conectado a un instrumento HP 1100. La abundancia de los productos se midió mediante un detector de red de diodos HP G1315A en un intervalo de longitud de onda de 200-600 nm y un detector para la dispersión de la luz Sedex 65. La obtención de los espectros de masas se realizó en un intervalo de 180 a 800. Los datos se analizaron utilizando el programa Micromass MassLynx. La separación se efectuó en una columna Hypersil BDS C18, 3 µm (50 x 4,6 mm), eluyendo con un gradiente lineal de 5 a 90 % de acetonitrilo que contiene 0,05 % (v/v) de ácido trifluoroacético (TFA) en agua que contiene 0,05% (v/v) de TFA, en 3,5 min con un caudal de 1 mL/min. El tiempo total de análisis, incluyendo el periodo de reequilibrio de la columna, es de 7 min.

Los espectros de MS se han realizado en electropulverización (ES+) empleando un instrumento Platform II (Micromass). Se describen los principales iones observados.

Los puntos de fusión se midieron por capilaridad, en un aparato Mettler FP62, intervalo 30ºC a 300ºC, elevando 2ºC por minuto.

Purificación por LC/MS:

Los productos se pueden purificar por LC/MS utilizando un sistema Waters FractionsLynx compuesto por una bomba de gradiente Waters modelo 600, una bomba de regeneración Waters modelo 515, una bomba de dilución Waters Reagent Manager, un inyector automático Waters modelo 2700, dos válvulas Rheodyne modelo LabPro, un detector de red de diodos Waters modelo 996, un espectrómetro de masas Waters modelo ZMD y un colector de fracciones Gilson modelo 204. El sistema estaba controlado por el programa Waters FractionLynx. La separación se ha efectuado alternativamente sobre dos columnas Waters Symmetry (C18, 5 µM, 19 x 50 mm, referencia del catálogo 186000210), estando una columna en curso de regeneración mediante una mezcla de agua/acetonitrilo 95/5 (v/v) que contiene 0,07 % (v/v) de ácido trifluoroacético, mientras que la otra columna estaba en curso de separación. La elución de las columnas se ha efectuado utilizando un gradiente lineal de 5 a 95 % de acetonitrilo que contiene 0,07 % (v/v) de ácido trifluoroacético en agua que contiene 0,07 % (v/v) de ácido trifluoroacético, a un caudal de 10 ml/min. A la salida de la columna de separación, se separa una milésima del efluente por un LC Packing Accurate, se diluye con alcohol metílico a un caudal de 0,5 mL/min y se envía hacia los detectores, a razón de 75% hacia el detector de red de diodos, y el 25% restante hacia el espectrómetro de masas. El resto del efluente (999/1.000) se envía hacia el colector de fracciones donde se elimina el flujo mientras que la masa del producto esperado no se detecte por el programa FractionLynx. Las fórmulas moleculares de los productos esperados se proporcionan al programa FractionLynx, que pone en marcha la recogida

del producto cuando la señal de masa detectada corresponde al ion [M+H]+ y/o al [M+Na]+. En ciertos casos, dependiendo de los resultados analíticos por LC/MS, cuando se ha detectado un ión intenso correspondiente a [M+2H]++, se proporciona también al programa FractionLynx el valor correspondiente a la mitad de la masa 5 molecular calculada (PM/2). En estas condiciones, también se pone en marcha la recogida cuando se detectan la señal de masa del ión [M+2H]++ y/o [M+Na+H]++. Los productos se recogieron en tubos de vidrio tarados. Tras ser recogidos, se evaporaron los disolventes en un evaporador centrífugo Savant AES 2000 o Genevac HT8 y se determinaron las masas de los productos pesando los tubos tras la evaporación de los

10 disolventes.

Ejemplo 1 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

15

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2-fluoro-3-yodo-piridina

20 A una solución de 0,103mol de LDA en 200mL de THF a -75ºC se añaden 10g de 2-fluoropiridina en 50mL de THF. La solución amarilla se agita durante 3 horas a 75ºC y, después, se añaden 26,2g de yodo en 80mL de THF. La mezcla de reacción se agita durante 1,5 horas a -75ºC y, después, se añaden 50mL de agua a esta temperatura. Se deja remontar la temperatura, y después a 0ºC se añaden 100mL de

25 agua como suplemento. La suspensión se decolora por adición de tiosulfato de sodio. La mezcla se extrae con éter dietílico. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra bajo presión reducida. El residuo oleoso se purifica sobre sílice Si60 (40-63µm) (ciclohexano / éter dietílico, 95:5). El producto obtenido se recoge en éter dietílico y se separa por filtración un material insoluble beige. Después

30 de secar a vacío, se obtienen 10,21g de polvo blanco de 2-fluoro-3-yodopiridina. Espectro de masas (ES+): m/z = 224 [MH+]

2-fluoro-4-yodo-nicotinonitrilo

A una solución de 21,5mmol de LDA en 20mL de THF a -75ºC se añaden 4,8g de 2-fluoro-3-yodopiridina en 20mL de THF. La solución amarilla se agita durante 1h10 a -75ºC y, después, a esta temperatura se añaden 3,9g de cianuro de para-tolueno sulfonilo en 20mL de THF. La mezcla de reacción se agita durante 2 horas a -75ºC, y después se añaden 20mL de agua a esta temperatura. Se deja remontar la temperatura, y después a 0ºC se añaden 40 mL de agua como suplemento. La mezcla se extrae con éter dietílico. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra bajo presión reducida. La resina marrón obtenida se purifica sobre sílice Si60 (40,63 µm) (ciclohexano / éter dietílico, 8:2). Se obtiene una fracción de 667mg de un polvo amarillo de 2-fluoro-4-yodo-nicotinonitrilo y una segunda fracción de 2,1g de un polvo amarillo pálido de 2-fluoro-3-yodo-isonicotinonitrilo.

Espectro de masas (ES+): m/z = 249 [MH+]

2-hidrazino-4-yodo-nicotinonitrilo

A una solución de 1,2g de 2-fluoro-4-yodo-nicotinonitrilo en 20 mL de MeOH a 20ºC se añaden 2,4 mL de hidrato de hidrazina. La suspensión amarilla se agita 20min a 20ºC y después se filtra. El precipitado se lava con metanol para dar después de secar a vacío 947mg de polvo blanco de 2-hidrazino-4-yodo-nicotinonitrilo.

Espectro de masas (ES+): m/z = 261 [MH+]

(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo y N,N',N’-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo

A una mezcla de 234mg de 2-hidrazino-4-yodo-nicotinonitrilo, 27,5 mg de N,Ndimetilaminopiridina y 0,316 mL de trietilamina en 11 mL de diclorometano a 4ºC se añaden 492 mg de dicarbonato de di-terc-butilo en 5 mL de diclorometano. La reacción se agita 30min a 4ºC y después se deja remontar la temperatura a 20ºC y se agita durante 5h. Se añade agua y la mezcla se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra bajo presión reducida. El residuo oleoso amarillo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 3263µm precargada (eluyente: diclorometano / metanol, 99,5:0,5 y después 99:1) dando 2 fracciones mayoritarias, una primera fracción de 110 mg de un polvo amarillo de N,N’,N’-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo (espectro MS (ES+): m/z = 561 [MH+]) y una segunda fracción de 202 mg de un aceite amarillo pálido que contiene (3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina-dicarboxilato de di-tercbutilo. Este residuo oleoso amarillo se purifica de nuevo sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: ciclohexano / acetato de etilo, 95:5 y después 9:1) dando 114 mg de un polvo beige de (3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)hidrazina-dicarboxilato de di-terc-butilo, espectro MS (ES+): m/z = 461 [MH+]

N,N’,N’-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-tercbutilo

A una mezcla de 925 mg de 2-hidrazino-4-yodo-nicotinonitrilo, 109 mg de N,Ndimetilaminopiridina y 2,6 mL de trietilamina en 45 mL de diclorometano a 4ºC se añaden 3,9 g de dicarbonato de di-terc-butilo (Boc2O) en 20mL de diclorometano. La reacción se agita 30 min a 4ºC y después se deja remontar la temperatura a 20ºC. Se añade agua y la mezcla se extrae con acetato de etilo y después se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a presión reducida. El residuo oleoso pardo se purifica sobre sílice Si60 (40-63µm) (diclorometano / metanol, 98:2) para obtener 1,2g de un polvo amarillo de N,N’,N’-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-tercbutilo.

PF= 138ºC (Köfler)

Espectro de masas (ES+): m/z = 561 [MH+]

Acoplamiento de Suzuki (X = C) con un derivado di-boc

A una solución de 110 mg de (3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo y 122mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea en 5,5 mL de dioxano se añaden 57 mg de NaHCO3 en 1,7 mL de agua. A continuación, se añaden 26 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio y la reacción se calienta a reflujo a 100ºC. Después de 2,5 h la solución amarillo clara se enfría a 20ºC y se añaden 10 mL de acetato de etilo. La fase orgánica se lava 2 veces con 8 mL de agua y después 8 mL de salmuera. Después de secar sobre sulfato de magnesio y concentrar a presión reducida, el aceite amarillo residual se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63 µm precargada (ciclohexano / acetato de etilo, 9 :1). Se obtienen 114mg de (3-ciano-4-{4[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo.

Espectro de masas (ES+): m/z = 631 [MH+]

Acoplamiento de Suzuki (X = C) con un derivado tri-boc

A una solución de 108 mg de N,N',N'-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo y 98 mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea en 4,5 mL de dioxano se añaden 45,4 mg de NaHCO3 en 1,4 mL de agua. A continuación, se añaden 20,3 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio y la reacción se calienta a reflujo a 100ºC. Después de 2,5h la solución amarillo clara se enfría a 20ºC y se añaden 10 mL de acetato de etilo. La fase orgánica se lava 2 veces con 8 mL de agua y después con 8 mL de salmuera. Después de secar sobre sulfato de magnesio y concentrar a presión reducida, el aceite amarillo residual se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63 µm precargada (ciclohexano / acetato de etilo, 9:1 y después 7:3). Se obtiene una fracción de 86 mg de N,N’,N’-(3-ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo y una fracción de 31 mg de (3-ciano4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo.

Espectro de masas (ES+): m/z = 731 [MH+]

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea, (a partir del derivado di-boc)

A una solución de 111 mg de (3-ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo en 4 mL de diclorometano a 20ºC se añaden 0,3 mL de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol y la reacción se agita 4h. El medio de reacción se concentra a presión reducida dando un sólido rojo-anaranjado. Este residuo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32,63 µm precargada (gradiente diclorometano / disolución A, 95:5 a 90:10; disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 56 mg de un polvo beige de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes:

Espectro IR (KBr) : 3370; 3300; 1717; 1604; 1541; 1443; 1317; 1310; 1205; 1184; 1122; 1114; 1069 y 818 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,58 (s ancho, 2H); 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,41 (dm, J = 9,0 Hz, 1H); 7,52 (t ancho, J = 9,0 Hz, 1H) ; 7,56

5 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,68 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,62 (dd ancho, J = 2,5 y 7,5 Hz, 1H); 9,13 (m extendido, 1H); 9,57 (m extendido, 1H); 12,25 (s ancho, 1H)

PF= 175ºC dec. (Köfler). De manera análoga, se puede obtener 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin10 4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-urea a partir de un derivado tri-boc, como sigue:

A una solución de 81 mg de derivado N,N’,N’-(3-ciano-4-{4-[3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-piridin-2-il)-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo en 3 mL de diclorometano a 20ºC se añaden 0,2 mL de ácido trifluoroacético que contiene

15 10% de anisol y la reacción se agita una noche. El medio de reacción se concentra a presión reducida dando un sólido rojo-anaranjado. Este residuo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (gradiente diclorometano / disolución A, 95:5 y después 90:10; disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 27 mg de un polvo beige de 1-[4-(3-amino-1H

20 pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-urea

Ejemplo 2 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

25

imagen2

Acoplamiento de Suzuki (X = N)

30 A una solución de 150 mg de N,N',N'-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo y 136 mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[5(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-urea en 6,2 mL de dioxano se añaden 63 mg de NaHCO3 en 1,9 mL de agua. A continuación, se añaden 29 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio y la reacción se calienta a reflujo a 100ºC. Después de 2,5 h la disolución amarillo clara se enfría a 20ºC y se añaden 10 mL de acetato de etilo. La fase orgánica se lava 2 veces con 8 mL de agua y después 8 mL de salmuera. Después de secar sobre sulfato de magnesio y concentrar a presión reducida, el aceite amarillo residual se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (gradiente diclorometano / disolución A, 98:2 a 95:5. disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 67mg de N,N’,N’-{3'-ciano6-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo (espectro MS (ES+): m/z = 732 [MH+] ) y 55 mg de {3'-ciano-6-[3-(2fluoro-5-trifluorometil-fenil-ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina dicarboxilato de di-tercbutilo (espectro MS (ES+): m/z = 632 [MH+] ).

1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

A una solución de 55 mg de {3'-ciano-6-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)ureido]-[3,4’]bipiridinil-2’-il}-hidrazina dicarboxilato de di-terc-butilo en 2 mL de diclorometano a 20ºC se añaden 0,15 mL de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol y la reacción se agita 2h.

Aparte, a una solución de 67 mg de derivado N,N’,N’-{3'-ciano-6-[3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-ureido]-[3,4']bipiridinil-2'-il}-hidrazina tricarboxilato de tri-terc-butilo en 3 mL de diclorometano a 20ºC se añaden 0,16 mL de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol y la reacción se agita 2h.

Los medios de reacción de color rojo-pardo se reúnen y concentran a presión reducida dando un sólido rojo-anaranjado. Este residuo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (gradiente diclorometano / solución A, 95:5 a 90:10 y después 70:30; disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtiene un producto que se recoge en acetato de etilo y se lava con agua para eliminar el trifluoroacetato de amonio. Después de secar sobre sulfato de magnesio y concentrar a presión reducida, se obtienen 58 mg de un polvo amarillo beige de 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes:

Espectro IR (KBr) : 3209; 1708; 1610; 1571; 1441; 1376; 1302; 1250; 1168; 1119; 1071; 822 y 616 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,70 (s ancho, 2H) ; 7,00 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,45 (dm, J = 9,0 Hz, 1H); 7,55 (t ancho, J = 9,0 Hz, 1H) ;

5 7,65 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 8,06 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H) ; 8,41 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,54 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,67 (dd, J = 2,5 y 7,5 Hz, 1H); 10,15 (s ancho, 1H); 11,15 (m muy extendido, 1H); 12,35 (m extendido, 1H) PF = >260ºC (Köfler).

Ejemplo 3 10 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

15 3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-ol Una mezcla de 1,2 g de 2-hidroxi-4-metoxi-nicotinonitrilo y 30 mL de hidrato de hidrazina se lleva a 140ºC durante 18h en una bomba. A continuación, el medio de reacción se evapora a sequedad. El residuo se recoge en éter etílico, y la suspensión resultante se filtra. Se obtienen 1,1g de 3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-ol con el

20 aspecto de un sólido gris. SM: 150+ = M+º; PF= 240ºC dec. (Köfler).

4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina

A 3,5 g de POBr3 fundido a 45ºC, se añaden 0,4 g de 3-amino-1H-pirazolo[4,3

25 c]piridin-4-ol y, después, la suspensión se pone a 70ºC durante 4h. Se deja enfriar y se hidroliza, con precaución, con una solución de bicarbonato de sodio. La mezcla se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se aísla y se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra, y después se concentra a presión reducida. Se obtienen 0,33 g de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina con el aspecto de un sólido crema.

30 SM: 212+ = M+º; PF= 230ºC dec. (Köfler).

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

A una solución de 53 mg de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina en 6mL

5 de dioxano, se añaden 127mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea, 60mg de bicarbonato de sodio en 1,8mL de agua y 30mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La reacción se calienta en un baño a 100ºC durante 2h. Se deja enfriar y después se añade acetato de etilo. La mezcla se lava con agua. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y después se

10 concentra a presión reducida. El residuo oleoso se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (gradiente diclorometano / solución A, 90:10 a 70:30; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 34mg de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenilo]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)urea sólida de color crema, cuyas características son las siguientes:

15 SM: 431+ = MH+ Espectro IR (KBr) : 3354; 1717; 1605; 1542; 1442; 1339; 1313; 1181; 1119; 816 y 615 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,72 (s ancho, 2H) ; 7,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 7,41 (m ancho, 1H) ; 7,51 (t ancho, J = 9,5 Hz, 1H) ; de 7,59 20 a 7,72 (m, 4H); 8,22 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 8,65 (d ancho, J = 7,5 Hz, 1H); 8,96 (s ancho,

1H); 9,37 (s, 1H); 12,1 (s ancho, 1H).

Ejemplo 4 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5

25 trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

A una solución de 106 mg de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina en 10mL de dioxano, se añaden 252mg de 1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-3-[5-(4,4,5,5

tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-priridin-2-il]-urea, 120mg de bicarbonato de sodio en 3mL de agua y 60mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La reacción se calienta en un baño a 100ºC durante 2h. Se deja enfriar y después se añade acetato de etilo y la mezcla se lava con agua. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y 5 después se concentra a presión reducida. El residuo oleoso se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µ precargada (gradiente diclorometano / solución A, 90:10 a 70:30; disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 35mg de un sólido amarillo de 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son

10 las siguientes: SM: 432+ = MH+ Espectro IR (KBr) : 3404; 3224; 1693; 1609; 1572; 1441; 1340; 1300; 1246;

1119; 819 y 615 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,88 (s ancho, 2H);

15 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,44 (m ancho, 1H) ; de 7,50 a 7,53 (m, 2H); 8,15 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 8,26 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 8,63 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,70 (d ancho, J = 7,5 Hz, 1H) ; 10,15 (s ancho, 1H); 11,3 (m muy extendido, 1H); 12,2 (s ancho, 1H).

Ejemplo 5 20 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

25 1-(2-metoxi-4-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea

A una solución de 1g de 2-metoxi-4-(trifluorometil)anilina y 128mg de 4dimetilaminopiridina en 150mL de tetrahidrofurano y 1,5mL de trietilamina se añaden, a 20ºC, 1,28g de 2-(4-isocianato-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano. Después 30 de 4h, la reacción se evapora a sequedad a presión reducida. El residuo se recoge en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase orgánica se seca sobre sulfato de

magnesio, y después se concentra a presión reducida. El aceite amarillo residual se purifica sobre una columna Biotage kp-sil de 60å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: ciclohexano / acetato de etilo, 8: 2). Se obtiene une polvo amarillo pálido que se recoge en metanol. Se forma una materia insoluble blanca que se separa por filtración, y después el filtrado se evapora a sequedad a presión reducida para dar 0,47g de polvo amarillo pálido de 1-(2-metoxi-4-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea.

SM: 437+ = MH+

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 1,30 (s: 12H); 3,99

(s: 3H); 7,22 (d, J = 9 Hz: 1H); 7,34 (dd, J = 9 y 1 Hz: 1H); 7,50 (d, J = 9 Hz: 2H); 7,63 (d, J = 9 Hz: 2H); 8,56 (mt: 2H); 9,58 (s: 1H).

Derivados di-boc y tri-boc de 1-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-3(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea

A una solución de 0,27g de N,N’,N’-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo en 14mL de dioxano, a 20ºC, se añaden 273mg de 1-(2metoxi-4-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea. A esta solución se añade una solución de 114mg de bicarbonato de sodio en 4mL de agua, y después 51mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La reacción se calienta a reflujo a 100ºC durante 2,5h. La solución amarilla clara se enfría, y después se añade acetato de etilo. La mezcla se lava con agua y después con salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y después se concentra a presión reducida. La resina amarilla anaranjada obtenida se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: ciclohexano / acetato de etilo, 7: 3, y después diclorometano / solución A, 9:1; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 0,33g de polvo amarillo de una mezcla de derivados di-boc y tri-boc de 1-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea.

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3.4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea

A una solución de 272mg de una mezcla de derivados di-boc y tri-boc de 1-[4(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea en 7,7mL de diclorometano a 20ºC, se añaden 0,62mL de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol. Después de 3h de agitación, el medio rojo-anaranjado se concentra a sequedad a presión reducida. El aceite rojo-anaranjado residual se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (gradiente diclorometano / solución A, 90:10 a 70:30; disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtiene une polvo amarillo beige que se recoge en acetato de etilo. La

5 solución se lava con agua. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, y después se concentra a presión reducida para dar 61mg de un polvo amarillo de 1-[4(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes:

SM: 443+ = MH+ 10 Espectro IR (KBr) : 3380; 1706; 1675; 1600; 1539; 1314; 1269; 1134; 1117; 822 y 622 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 3,99 (s, 3H); 4,59 (s ancho, 2H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,34 (dd ancho, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 7,55 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 7,66 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,37 (d, J

15 = 5,0 Hz, 1H); de 8,56 a 8,61 (m, 2H) ; 9,66 (s, 1H); 12,25 (s ancho, 1H). PF = >260ºC. (Köfler).

Ejemplo 6 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5

20 trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

1-(5-bromo-piridin-2-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea

25 3,32g de 2-metoxi-5-trifluorometil-fenilamina en 30mL de tetrahidrofurano se añaden gota a gota a una solución de 1,8g de trifosgeno en 180mL de tetrahidrofurano a 0ºC. A continuación, se introducen 4,95mL de trietilamina y la reacción se agita a esta temperatura durante 10min. Se deja remontar la temperatura a 20ºC y se agita durante 1h15. A continuación, se introduce gota a gota una solución de 3g de 2-amino

30 5-bromopiridina en 30mL de THF. Después de 16h, se filtra la suspensión y, después, el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo se recoge en una mezcla de agua y acetato de etilo. Se obtiene un precipitado insoluble blanco que se filtra, se lava con acetato de etilo y después se seca a vacío. Se obtienen 3,3g de polvo blanco de 1-(5-bromo-piridin-2-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea.

SM: 390+ = MH+

1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-urea

A una solución de 51mg de triciclohexilfosfina en 12mL de dioxano a 20ºC se añaden 30mg de bis(dibencilidenacetona)paladio. La solución parda-violácea se agita durante 30min, y después, se añaden 500mg de 1-(5-bromo-piridin-2-il)-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea y 190mg de acetato de potasio. La suspensión se calienta a reflujo durante 3h15 y después la disolución roja-violácea se enfría a 20ºC y se concentra a sequedad a presión reducida. Se obtiene un residuo gris-verdoso que se lava en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase orgánica se filtra, y el filtrado amarillo se concentra a presión reducida. El residuo sólido obtenido se recoge en metanol. Se forme un precipitado que se filtra y lava con metanol y acetato de etilo. Se obtienen 244mg de polvo amarillo pálido de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-urea.

SM: 437+ = M+º;

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 1,32 (s: 12H); 4,03

(s: 3H); 7,25 (d, J = 9,5 Hz: 1H); 7,34 (d ancho, J = 9 Hz: 1H); 7,39 (dd, J = 9,5 y 1 Hz: 1H); 7,96 (dd, J = 9 y 2 Hz: 1H); 8,52 (d, J = 1 Hz: 1H); 8,63 (d, J = 2 Hz: 1H); 10,20 (s: 1H); 11,50 (s ancho: 1H).

Derivados di-boc y tri-boc de 1-(3'-ciano-2'-hidrazino-[3,4']bipiridinil-6-il)3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea

234mg de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-urea se añaden a 20ºC a una solución de 0,3g de N,N',N'-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazina-tricarboxilato de tri-terc-butilo en 16,5mL de dioxano. A continuación, se añade una solución de 126mg de bicarbonato de sodio en 4,5mL de agua, seguida de 57mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La suspensión amarilla obtenida se calienta a reflujo a 100ºC durante 2,5h. Después de enfriar, se añade acetato de etilo. La fase orgánica se lava con agua y después con salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y después se concentra a sequedad bajo presión reducida. La resina amarilla anaranjada residual se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: ciclohexano / acetato de etilo, 7: 3, y después diclorometano / solución A, 95:5; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 265mg de una mezcla de derivados di-boc y tri-boc de 1-(3'-ciano-2'-hidrazino-[3,4']bipiridinil-6-il)-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea en forma de un polvo amarillo.

1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea

0,8mL de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol se añaden a 20ºC a una solución de 242mg de una mezcla de derivados di-boc y tri-boc de 1-(3'-ciano-2'hidrazino-[3,4']bipiridinil-6-il)-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea en 7mL de diclorometano. Después de 2,5h de agitación, el medio de reacción rojo-anaranjado se concentra a sequedad a presión reducida. El aceite rojo-anaranjado residual se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (gradiente diclorometano / solución A, 90:10 a 70:30; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 130mg de un polvo amarillo beige de 1-[5(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)urea, cuyas características son las siguientes:

SM: 444+ = MH+

Espectro IR (KBr) : 3420; 3219; 1684; 1613; 1586; 1438; 1303; 1271; 1247; 1136; 834 y 622 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,02 (s, 3H); 4,72 (m muy extendido, 2H); 7,01 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,37 (dd ancho, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 7,48 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 8,03 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 8,41 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,59 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 8,64 (d, J = 2,0 Hz, 1H) ; 10,2 (s, 1H) ; 11,5 (m muy extendido, 1H); 12,35 (s ancho, 1H).

PF = >260ºC. (Köfler).

Ejemplo 7

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

1-[4-(5-cloro-4-ciano-piridin-3-il)-fenilo]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)urea:

A una solución de 346mg de 3,5-dicloro-isonicotinonitrilo y de 959mg de 1-(2fluoro-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea en 24mL de dioxano se añaden 462mg de NaHCO3 en 14,4mL de agua. A continuación, se añaden 462mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio y la reacción se calienta a reflujo 5h y después se deja reposar una noche a 20ºC. A continuación, se añaden 20mL de agua y la mezcla se extrae con 2X60mL de acetato de etilo. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra bajo presión reducida. El aceite marrón se purifica sobre un cartucho Merck de 30g de SiO2 15-40µm precargado (diclorometano y después diclorometano / metanol, 99:1). Se obtienen 290mg de cristales amarillos de 1-[4-(5-cloro-4-ciano-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea.

Espectro de masas (ES+): m/z = 435 [MH+]

Espectro RMN 1H a 400 MHz en espectrómetro BRUKER AVANCE DRX-400 desplazamientos químicos (d en ppm) -disolvente: (DMSO-d6) referenciado a 2,50 ppm a la temperatura de 303K :

7,41 (m, 1H) ; 7,51 (dd, J = 8,5 y 10,5 Hz, 1H); 7,68 (s ancho, 4H); 8,62 (dd, J = 2,0 y 7,0 Hz, 1H); 8,85 (s, 1H) ; 8,94 (s, 1H) ; 9,04 (m extendido, 1H); 9,49 (m extendido, 1H).

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea

A una solución de 145mg de 1-[4-(5-cloro-4-ciano-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-fluoro5-trifluorometil-fenil)-urea en 2mL de EtOH a 20ºC se añaden 0,05mL de hidrato de hidrazina. La reacción se pone a reflujo durante 5h30. La reacción es incompleta y se añade 1mL de EtOH y 0,05mL de hidrato de hidrazina y se mantiene el reflujo 18h30 adicionales. Se deja enfriar a 20ºC y se concentra bajo una corriente de nitrógeno. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice: cartucho Merck de 30g de

SiO2 15-40µm precargado (diclorometano; y después diclorometano / metanol, 95:5; y después diclorometano / metanol, 1:1; y después diclorometano / metanol / NH4OH, 82:15:3). Se recupera un aceite beige impuro que se cromatografía nuevamente en las mismas condiciones. El producto es todavía impuro y se purifica por HPLC preparativa 5 básica: condiciones: columna: Nucleodur Gravity C18 5µm (Nº cat Macherey Nagel: 762101; serie 4055902; lote 3044); caudal: 20mUmin ; detección 254nm (UV118, Gilson); gradiente de 10 a 95% de acetonitrilo en agua que contiene formiato de amonio 10mM según el protocolo siguiente: (t (min.) acetonitrilo (%)): 0: 10; 2: 10; 25: 95; 33: 95; 34: 10. Se obtienen 19mg de un polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H

10 pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-urea. PF = 196ºC (Koffler) Espectro de masas (ES+): m/z = 431 [MH+] Espectro RMN 1H a 400 MHz en espectrómetro BRUKER AVANCE DRX-400,

desplazamientos químicos (d en ppm) -disolvente (DMSO-d6) referenciado a 2,50

15 ppm a 303K : 4,61 (s, 2H); 7,40 (m, 1H); 7,50 (m, 3H) ; 7,66 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 7,94 (s, 1H) ; 8,63 (dd, J = 2,0 y 7,0 Hz, 1H); 8,74 (s, 1H); 9,10 (m extendido, 1H); 9,51 (s, 1H); 12,3 (m extendido, 1H).

IR: (KBr): 1610; 1531; 1443; 1340; 1314; 1265; 1195; 1166; 1118; 1069; 820 y 615 cm-1

20

Ejemplo 8 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il]-fenil]-3-fenil-urea Preparado según el esquema 2

imagen2

25

1-fenil-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea

A una solución de 490 mg de 2-(4-isocianato-fenil)-4,4,5,5-tetrametil1,3,2,dioxaborolano y 203 mg de trietilamina en 5 ml de tetrahidrofurano se añaden 30 198 mg de anilina. La solución se agita 12 horas a 20ºC bajo argón. Se añaden 10 ml de metanol a la mezcla de reacción. A continuación, se agita a 20ºC durante 15 minutos. Después de concentrar la mezcla a presión reducida, se obtienen 630 mg de

1-fenil-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea, cuyas características

son las siguientes:

SM: 339(+)M+H)(+)

337 (-) = (M-H) (-)

Espectro IR (KBr) : 3332; 2976; 1656; 1593; 1543; 1400; 1361; 1143; 1092; 963; 860 y 655 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 1,29 (s, 12H); 6,98 (t ancho, J = 7,5 Hz, 1H) ; 7,28 (t ancho, J = 8,0 Hz, 2H) ; de 7,41 a 7,49 (m, 4H) ; 7,59 (d ancho, j = 8,0 Hz, 2H) ; 8,70 (s, 1H) ; 8,82 (s, 1H).

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il]-fenil]-3-fenil-urea

A una solución de 65 mg de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina, preparada como se ha descrito en el ejemplo 3, en 3 ml de dioxano se añaden 155 mg de 1-fenil-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea, 72 mg de hidrógenocarbonato de sodio en 1 ml de agua y 53 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La suspensión se calienta a 100ºC en argón durante 2h. Después de enfriar, la mezcla de reacción se vierte sobre 50 ml de agua y se extrae 3 veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a presión reducida para dar 302 mg de producto bruto que se purifican sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63 �M precargada (gradiente de una solución A en diclorometano de 5/95 a 30/70; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 23 mg de un polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il]-fenil]-3-fenil-urea, cuyas características son las siguientes:

SM: 344 (+) = M (+) (SM-EI)

Espectro IR (KBr) : 3388; 1672; 1601; 1528; 1498; 1442; 1313; 1233; 1180; 1045; 752 y 693 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 4,71 (s ancho, 2H); 6,99 (t, J = 7,5 Hz, 1H) ; 7,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,30 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,48 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; 7,62 (m, 4H); 8,21 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,73 (s, 1H); 8,89 (s, 1H); 12,1 (s ancho, 1H).

PF = 188ºC (Koffler)

Ejemplo 9 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

5 A una solución de 70 mg de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina en 3 ml de dioxano se añaden 215 mg de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[5-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-urea, (preparada como se ha descrito en el ejemplo 6), 77 mg de hidrógenocarbonato de sodio en 1 ml de agua y 38 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La suspensión se calienta a 80ºC en argón durante 2h.

10 Después de enfriar, la reacción se vierte sobre 50 ml de agua y la mezcla se extrae 3 veces con una mezcla de acetato de etilo/metanol 90/10. Las fases orgánicas reunidas se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a sequedad a presión reducida. Se purifican 393 mg de producto bruto sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63 �M precargada (gradiente de una solución A en diclorometano de 5/95

15 a 30/70; solución A = diclorometano/metanol/amoniaco 38/17/2). Se obtienen 16 mg de un polvo amarillo de 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes: LC-SM: 444 (+) = (M+H)(+) Espectro IR (KBr) : 3657; 3387; 3308; 3223; 2925; 1685; 1610; 1580; 1439;

20 1351; 1302; 1246; 1166; 1135; 1116; 1037; 807 y 542 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 4,02 (s, 3H); 4,89 (s ancho, 2H) ; de 7,21 a 7,28 (m, 2H) ; 7,38 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,46 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 8,12 (dd, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 8,27 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,63 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 8,69 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 10,15 (s, 1H); 11,65 (m extendido, 1H); 12,2 (s ancho,

25 1H). PF = 228ºC (Koffler)

Ejemplo 10 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5

30 trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

A una solución de 50 mg de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina en 3 ml de dioxano se añaden 122,8 mg de 1-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea, 99,5 mg de carbonato de sodio en 1 ml de agua y 54,24 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La suspensión se calienta a 80ºC en atmósfera de argón durante 22 horas. Después de enfriar, la mezcla de reacción se diluye con acetato de etilo y se lava 2 veces con agua. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a presión reducida. Se purifican 438 mg de producto bruto sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63 �M precargada (gradiente de una disolución A en diclorometano de 5/95 a 30/70; solución A = diclorometano/metanol/amoniaco 38/17/2). Se obtienen 32 mg de un polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes:

LC-SM: 443 (+) = (M+H) (+)

Espectro IR (KBr) : 3326; 1691; 1605; 1542; 1447; 1314; 1270; 1217; 1120; 1024; 812 y 623 cm-1

Espectro R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 3,99 (s, 3H); 4,73 (s ancho, 2H); 7,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,33 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,64 (m, 4H); 8,21 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,59 (m, 2H) ; 9,63 (s, 1H); 12,1 (s ancho, 1H).

PF = 200ºC (Koffler)

Ejemplo 11

N-(2-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida

imagen2

N-(2-{3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparada según el esquema 4

A una solución de 343mg de N1-[2-amino-4-(trifluorometil)fenil]acetamida y 39mg de 4-dimetilaminopiridina en 50mL de tetrahidrofurano y 0,45mL de trietilamina se añaden, a 20ºC, 385mg de 2-(4-isocianato-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolano. Después de una noche a 40ºC la reacción se evapora a sequedad a presión reducida. El residuo se recoge con una mezcla de diclorometano y agua. La fase orgánica se lava con HCl 1N, el precipitado blanco se seca con succión y se lava con diclorometano, y después se seca a vacío para dar 356mg de polvo blanco de N(2-{3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)acetamida, cuyas características son las siguientes:

SM-ES+: 464(+)=(M+H)(+)

SM-ES: 462(-)=(M-H)(-)

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 1,28 (s, 12H); 2,15 (s ancho, 3H); 7,37 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,54 (d parcialmente enmascarado, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,16 (s ancho, 1H); 8,28 (s ancho, 1H); 9,43 (s ancho, 1H); 9,79 (s ancho, 1H).

N-(2-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida

Se acoplan 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina y N-(2-{3-[4-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, por reacción de Suzuki según un protocolo similar a la preparación del ejemplo 10. Se obtiene una polvo amarillo de N-(2-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, cuyas características son las siguientes:

SM: 470 (+) = (M+H) (+)

468 (-) = (M-H) (-)

514 (-) = (M + ácido fórmico – H) (-)

Espectro IR (KBr) : 3390; 1667; 1605; 1528; 1436; 1336; 1315; 1247; 1167; 1126; 1042; 813 y 684 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 2,16 (s, 3H); 4,72 (s, 2H); 7,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,37 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,56 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,64 (m, 4H); 8,21 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,28 (m, 2H); 9,54 (s ancho, 1H); 9,82 (s ancho, 1H); 12,1 (s ancho, 1H).

PF = 182ºC (Koffler)

Ejemplo 12 N-(2-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida

imagen2

Derivado N,N’,N’-tri-boc de N-(2-{3-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)10 fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida Preparado según el esquema 1

A una solución de 278mg de N,N’,N’-(3-ciano-4-yodo-piridin-2-il)-hidrazinatricarboxilato de tri-terc-butilo (preparado según el ejemplo 1) en 15mL de dioxano, a 20ºC, se añaden 282mg de N-(2-{3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]

15 ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida. A esta disolución, se añade una solución de 117mg de bicarbonato de sodio en 4,2mL de agua, seguida de 53mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La reacción se calienta a reflujo a 100ºC durante 2,5h. La solución amarilla clara se enfría, y después se añade acetato de etilo. La mezcla se lava con agua y después con salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato de

20 magnesio y después se concentra a presión reducida. La resina amarilla anaranjada obtenida se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: ciclohexano / acetato de etilo, 7: 3, y después diclorometano / solución A, 9:1; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 239g de polvo amarillo de una mezcla de derivados di-boc y tri-boc de N-(2

25 {3-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)-fenil]ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida.

N-(2-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida Preparada según el esquema 1

Los derivados di-boc y tri-boc de N-(2-{3-[4-(3-ciano-2-hidrazino-piridin-4-il)fenil]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida se transforman según el procedimiento para la preparación del ejemplo 6. El producto obtenido es un polvo amarillo claro cuyas características son las siguientes:

5 SM-ES+: 470(+)=(M+H)(+) Espectro IR (KBr) : 3363; 1672; 1596; 1525; 1435; 1336; 1316; 1126; 1078 y

825 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,16 (s ancho, 3H) ; 4,58 (s, 2H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,39 (d ancho, J =

10 9,0 Hz, 1H) ; de 7,52 a 7,58 (m, 3H); 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,21 (s ancho, 1H); 8,29 (s ancho, 1H); 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 9,52 (s ancho, 1H); 9,84 (s ancho, 1H); 12,25 (s ancho, 1H).

Ejemplo 13 15 N-(2-{3-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida

imagen2

20 N-(2-{3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida Preparada según el esquema 4

A una solución de 10mg de triciclohexilfosfina en 2,5mL de dioxano a 20ºC se añaden 6mg de bis(dibencilidenacetona)paladio. La solución parda-violácea se agita 25 durante 30min. A continuación, se añaden 100mg de N-{2-[3-(5-bromo-piridin-2-il)ureido]-4-trifluorometil-fenil}-acetamida y 36mg de acetato de potasio y 84mg de bis(pinacolato)-diboro. La suspensión se calienta a reflujo durante 3h15 y después la suspensión se enfría a 20ºC y concentra a sequedad a presión reducida. El residuo gris-verdoso se recoge en acetato de etilo y la materia insoluble se elimina por 30 filtración. El filtrado amarillo se lava con agua y después se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a presión reducida.

Se obtienen 88mg de polvo amarillo-blanco de N-(2-{3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida, cuyas características son las siguientes:

SM-ES+: 465(+)=(M+H)(+)

4-Yodo-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina Preparada según el esquema 5

A una solución de 1,145g de 2-fluoro-4-yodo-nicotinonitrilo en 27mL de etanol se añaden 2,5mL de hidrato de hidrazina. Después de la introducción del hidrato de hidrazina, se forma un precipitado blanco. La suspensión se agita a 20ºC durante 20 minutos. El precipitado se filtra y se lava con etanol. Se obtienen 882 mg de polvo beige de 2-hidrazino-4-yodo-nicotinonitrilo. Este producto intermedio se recoge en 35 ml de diclorometano. A esta suspensión blanca, se añaden 5,8 ml de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol. La solución amarilla anaranjada obtenida se agita a 20ºC durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad bajo presión reducida. El polvo rojo obtenido se recoge en agua con amoniaco al 28% (en cantidad suficiente para hacer el pH básico): la suspensión adquiere un color amarillo pálido. La materia insoluble se filtra y se seca para dar 862 mg de 4-yodo-1Hpirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina.

N-(2-{3-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-ureido}-4trifluorometil-fenil)-acetamida

Preparada según el esquema 1

A una solución de 70mg de 4-yodo-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina en 5,5mL de dioxano, a 20ºC, se añaden 246mg de N-(2-{3-[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-piridin-2-il]-ureido}-4-trifluorometil-fenil)-acetamida. A esta suspensión se añade una solución de 64mg de bicarbonato de sodio en 1mL de agua, seguida de 32mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La reacción se calienta a reflujo a 85ºC durante 3,5h. La solución amarilla clara se enfría, y después se añade acetato de etilo. La mezcla se lava con agua. La materia insoluble se aísla por filtración y después el filtrado se lava con salmuera. Se seca la fase orgánica sobre sulfato de magnesio y se concentra a sequedad a presión reducida. El residuo amarillo así obtenido y la materia insoluble anterior se purifican sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µ precargada (eluyente: diclorometano /solución A, 9:1 y después 8:2 y después 7:3; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 52mg de polvo amarillo de N-(2-{3-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-ureido}4-trifluorometil-fenil)-acetamida, cuyas características son las siguientes:

SM-ES+: 471(+)=(M+H)(+) 5 SM-ES: 469(-)=(M-H)(-)

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,16 (s, 3H); 4,70 (s, 2H); 6,97 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,40 (d, J = 9,0 Hz, 1H) ; de 7,47 a 7,54 (m, 2H); 8,04 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 8,41 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,48 a 8,54 (m, 2H); 9,86 (s, 1H); 10,15 (m extendido, 1H). 10,85 (m extendido, 1H); 12,35 (s, 1H).

10 Espectro IR (KBr) : 3440; 3213; 3043; 2925; 1706; 1609; 1515; 1432; 1332; 1249; 1164; 1108; 1080 y 822 cm-1

Ejemplo 14 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-515 trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

La 2-etoxi-5-trifluorometil-fenilamina se ha preparado según: European Journal of Pharmaceutical Sciences 22 (2004) p153-164

20 1-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan2-il)-fenil]-urea Se hace reaccionar 2-etoxi-5-trifluorometil-fenilamina con 2-(4-isocianato-fenil)4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano según la preparación de 1-(2-metoxi-4

25 trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea, descrita en el ejemplo 5. Después de purificar se obtiene un polvo beige de 1-(2-etoxi-5trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-fenil]-urea cuyas características son las siguientes: SM-ES+: 451(+)=(M+H)(+)

30 SM-ES: 449(-)=(M-H)(-)

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm):

1,28 (s, 12H); 1,45 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 4,25 (q, J=7,0 Hz, 2H) ; 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,30 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,37 (s, 1H) ; 8,55 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 9,66 (s, 1H).

5

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5trifluorometil-fenil)-urea

La 1-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)-fenil]-urea está acoplada, por reacción de Suzuki, a la 4-yodo-1H-pirazolo[3,4

10 b]piridin-3-ilamina según la preparación del ejemplo 6. Se obtiene un polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes: SM-ES+: 457(+)=(M+H)(+) Espectro IR (KBr) : 3369; 1672; 1601; 1542; 1445; 1315; 1271; 1210; 1134;

15 1043 y 822 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 1,47 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 4,27 (q, J=7,0 Hz, 2H) ; 4,59 (s ancho, 2H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,21 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,31 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,55 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,44 (s, 1H); 8,58 (s ancho, 1H); 9,78 (s, 1H); 12,25

20 (s, 1H).

Ejemplo 15 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)urea

25

imagen2

1-(2-fluoro-5-metil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]-urea

30 A una solución de 1,45g de 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)fenilamina, 1,86mL de trietilamina y 162mg de 4-dimetilamino piridina en 150mL de tetrahidrofurano a 20ºC se añaden 1g de 1-fluoro-2-isocianato-4-metil-benceno. La reacción se agita durante 3,5h a 60ºC, y después concentra a sequedad a presión reducida. El residuo se recoge en una mezcla de agua y diclorometano. La fase orgánica se lava con una solución de HCl 1N y después se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a sequedad a presión reducida. Se obtienen 2,13g de polvo blanco de 1-(2-fluoro-5-metil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]-urea, cuyas características son las siguientes:

SM-EI: 370(+)=(MH)(+) 125(+)=(C7H8NF)(+) pico de base

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 1,28 (s, 12H); 2,27 (s, 3H); 6,81 (m, 1H); 7,10 (dd, J = 8,5 y 11,5 Hz, 1H); 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,98 (dd, J = 2,0 y 8,0 Hz, 1H); 8,51 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 9,21 (s, 1H).

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)urea

La 1-(2-fluoro-5-metil-fenil)-3-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]-urea se acopla, por reacción de Suzuki, con 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3ilamina según un protocolo similar a la preparación del ejemplo 3. Se obtiene un polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)urea, cuyas características son las siguientes:

SM-ES+: 377(+)=(M+H)(+)

SM-ES: 375(-)=(M-H)(-)

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,28 (s, 3H); 4,57 (s, 2H); 6,82 (m, 1H) ; 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,11 (dd, J = 8,5 y 11,5 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,99 (d ancho, J = 7,5 Hz, 1H) ; 8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 8,56 (s ancho, 1H); 9,29 (s, 1H) ; 12,25 (s, 1H).

Espectro IR (KBr) : 3368; 1709; 1602; 1537; 1314; 1217; 1184; 1116 y 817 cm-1

Ejemplo 16 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea

imagen2

4-(4-amino-fenil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-ilamina Preparada según el esquema 6

A una solución de 190mg de 4-bromo-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3-ilamina y 236mg de 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenilamina en 20mL de dioxano se añade una solución de 215mg de bicarbonato de sodio en 5mL de agua, y después 103mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La reacción se calienta a 85ºC durante 3,5h. La solución amarilla oscura se enfría a temperatura ambiente y se añaden 30mL de acetato de etilo y, después, se lava la mezcla con agua y salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se evapora a sequedad a presión reducida. El residuo sólido amarillo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 3263µm precargada (eluyente: diclorometano / solución A, 95:5 y después 90:10 y después 80:20; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 93mg de polvo amarillo de 4-(4-amino-fenil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3ilamina, cuyas características son las siguientes:

SM-EI: 225(+)=(M)(+)pico de base

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,57 (s ancho, 2H); 5,47 (s ancho, 2H) ; 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 6,80 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,28 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,28 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 12,1 (s ancho, 1H)

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea Preparada según el esquema 6

A una solución de 100mg de 4-(4-amino-fenil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3ilamina, 125µL de trietilamina y 10mg de 4-dimetilamino piridina en 17mL de tetrahidrofurano a 20ºC se añaden 66mg de isocianato de 3,4-dimetilfenilo. La reacción se agita durante 6h a 80ºC, y después concentra a sequedad a presión reducida. El residuo se recoge en una mezcla de agua y acetato de etilo. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y después se concentra a sequedad a presión reducida. El residuo amarillo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: diclorometano / solución A, 95:5 y después

90:10 y después 80:20; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 29mg de polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]3-(3,4-dimetil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes:

LC-MS: tr= 3,44min : m/z 373 [M+H]+, m/z 371 : [M-H]-, m/z 417: [M-H]+HCO2H , m/z 224: [M-H]--C9H10NO SM-IE: m/z 372 : [M+.], m/z 121 : C8H10N+(pico de base).

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,16 (s, 3H); 2,20 (s, 3H) ; 4,59 (s, 2H); 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,20 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 7,26 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,52 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,36 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,68 (s, 1H) ; 8,97 (s, 1H); 12,25 (s, 1H)

5 Los productos citados a continuación se prepararon de acuerdo con el ejemplo 16 (esquema 6):

Ejemplo 17 1-[4-(3-aAmino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-terc-butil-2-metoxi10 fenil)-urea

imagen2

LC-MS sobre ZQ: tr= 3,74min : m/z 431 : [M+H]+, m/z 429 : [M-H]Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 1,28 (s, 9H); 3,87

15 (s, 3H); 4,59 (s, 2H); 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 6,97 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,28 (m, 2H); 8,37 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,58 (s, 1H); 12,25 (s ancho, 1H) PF = 220ºC (Koffler)

Ejemplo 18 20 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(4-metil-3trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

LC-MS: tr= 8,84min : m/z 427: [M+H]+, m/z 425 : [M-H]

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,38 (s, 3H); 4,58 (s ancho, 2H); 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,35 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,53 (m, 3H); 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,96 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,06 (s, 1H); 9,09 (s, 1H); 12,25 (s ancho, 1H).

PF = 166ºC (Koffler)

Ejemplo 19 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)5 urea

imagen2

LCMS: tr= 3,30min : m/z 393 : [M+H]+(pico base), m/z 391: [M-H]m/z 437 : [M-H]-+HCO2H , m/z 224: [M-H]--C8H7CINO

10 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,28 (s, 3H); 4,58 (s ancho, 2H); 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H); de 7,18 a 7,29 (m, 2H); 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,72 (s ancho, 1H); 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,92 (s, 1H); 9,02 (s, 1H); 12,25 (s ancho, 1H)

15 PF = 206ºC (Koffler) Ejemplo 20 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-etil-fenil)-urea

imagen2

20 LC-MS-DAD-ELSD: 373 (+) = (M + H) (+)

371 (-) = (M-H) (-)

Espectro IR (KBr) : 3372; 3266; 1688; 1591; 1539; 1524; 1435; 1317; 1215;

1020; 822; 695 y 598 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 1,19 (t, J = 7,5 Hz, 3H) 25 ; 2,58 (q, J=7,5 Hz, 2H) ; 4,59 (s, ancho, 2H); 6,84 (d ancho, J = 8,0 Hz, 1H) ; 6,90 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,19 (t, J = 8,0 Hz, 1H) ; 7,28 (d ancho, J = 8,0 Hz, 1H) ; 7,35 (s ancho,

1H) ; 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,74 (s, 1H); 8,94 (s, 1H) ; 12,25 (s, 1H). PF = 162ºC (Koffler)

Ejemplo 21 1-[4-(3-aAmino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-1,3-benzodioxol-5-ilurea

imagen2

LC-MS-DAD-ELSD: 389 (+) = (M + H) (+)

10 387 (-) = (M-H) (-) 433 (-) = (M+Ac. fórmico-H) (-); Espectro IR (KBr) : 3301; 1639; 1585; 1503; 1490; 1246; 1209; 1035; 929; 838

y 816 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 4,58 (s ancho, 2H);

15 5,98 (s, 2H); 6,79 (dd, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 6,90 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H) ; 7,52 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,69 (s, 1H); 8,99 (s, 1H); 12,25 (s, 1H)

PF = 242ºC (Koffler)

20 Ejemplo 22 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metoxi-fenil)urea

imagen10

Espectro IR (KBr) : 3370; 3301; 1711; 1680; 1594; 1539; 1524; 1502; 1396; 1319; 1280; 1218; 1060 y 822 cm-1

Espectro R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 3,82 (s, 3H); 4,58 (s ancho, 2H); 6,90 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 7,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H) ; 7,30 (dd, J = 2,5 y 9,0 5 Hz, 1H); 7,53 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ;

8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,80 (s, 1H); 8,98 (s, 1H); 12,25 (s, 1H). PF = 261ºC (Koffler)

Ejemplo 23 10 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-cloro-2-metoxi-fenil)urea

imagen2

LC-MS-DAD-ELSD: 409 (+) = (M + H) (+) 15 407 (-) = (M-H) (-) Espectro IR (KBr) : 3365; 1707; 1596; 1522; 1417; 1316; 1213; 1175; 1131; 1025 y 820 cm-1

Espectro R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 3,91 (s, 3H); 4,59 (s ancho, 2H); 6,91 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 7,00 (dd, J = 2,5 y 9,0 Hz, 1H); 7,05 (d, J = 9,0 20 Hz, 1H) ; 7,55 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,26 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ;

8,37 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 8,49 (s, 1H) ; 9,64 (s, 1H); 12,25 (s, 1H) PF = 171ºC (Koffler)

Ejemplo 24 25 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-fenil)-urea

imagen11

Espectro IR (KBr) : 2924; 2854; 1618; 1437; 1384; 1121; 1005; 826; 722; 695 y 544 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 1,43 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 4,16 (q, J=7,0 Hz, 2H) ; 4,59 (s ancho, 2H) ; de 6,85 a 6,97 (m, 3H) ; 7,02 (dd, J = 2,0 5 y 8,0 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,14 (dd, J = 2,0 y 8,0

Hz, 1H); 8,18 (s, 1H) ; 8,36 (d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 9,65 (s, 1H) ; 12,25 (s, 1H) PF = 152ºC (Koffler)

Ejemplo 25 10 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-metil-fenil)urea

imagen2

LC-MS-DAD-ELSD: 389 (+) = (M + H) (+) 15 387 (-) = (M-H) (-) Espectro IR (KBr) : 3346; 1673; 1594; 1538; 1316; 1279; 1211; 1181; 1135; 1028 y 823 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 2,24 (s, 3H) ; 3,85 (s, 3H) ; 4,59 (s ancho, 2H); 6,76 (dd, J = 2,0 y 8,0 Hz, 1H); de 6,89 a 6,93 (m, 2H) ; 7,53 20 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,01 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 8,26 (s, 1H) ; 8,36

(d, J = 5,0 Hz, 1H) ; 9,56 (s, 1H); 12,25 (s, 1H) PF = 170ºC (Koffler)

Ejemplo 26 N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro25 bencenosulfonamida

imagen2

SM-ES+: 434 (MH+) Tiempo de retención DAD-TIC: 3,31min

Ejemplo 27 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)urea

imagen2

2,4-dicloro-nicotinonitrilo

Una solución de 5,0 g de 4-metoxi-2-oxo-1,2-dihidro-piridina-3-carbonitrilo comercial en 50 ml de oxicloruro de fósforo se calienta a reflujo durante 19H. Después 10 de enfriar, el medio de reacción se vierte sobre una mezcla de agua y hielo. El precipitado formado se filtra y el filtrado se extrae 2 veces con una solución de acetato de etilo / metanol 90/10. Las fases orgánicas reunidas y el precipitado se secan sobre sulfato de magnesio y después se concentran a presión reducida para dar 6,76 g de polvo amarillento. El producto bruto se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 15 60Å SiO2 32-63�M precargada (gradiente de acetato de etilo en ciclohexano de 5/95 a

10/90) para dar 2,08 g de un polvo blanco de 2,4-dicloro-nicotinonitrilo. SM-IE: 172 = [M+.] (pico de base), 137 = [M+.] -Cl Espectro IR (KBr) : 3072; 2236; 1559; 1539; 1445; 1368; 1220; 1197; 1069;

859; 818; 791 y 416 cm-1

20 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 7,92 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,67 (d, J = 5,5 Hz, 1H);

Éster terc-butílico de ácido [4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]carbámico

25 A una solución de 519 mg de 2,4-dicloro-nicotinonitrilo en 25,5 ml de dioxano se añaden 782 mg de ácido (4-boc-aminofenil)borónico, 693 mg de bicarbonato de sodio en 8,5 ml de agua y 347 mg de tetrakis(trifenilfosfina)paladio. La suspensión se calienta a 100ºC en argón durante 2 horas. Después de enfriar, la reacción se vierte sobre agua y se extrae 3 veces con una solución de acetato de etilo/metanol 90/10.

30 Las fases orgánicas reunidas se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a sequedad a presión reducida. Se cromatografían 1,58 g de producto bruto sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63 �M precargada (gradiente de una solución A en diclorometano de 0,5/99,5 a 1/99; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 797 mg de [éster terc-butílico de ácido 4-(4-cloro-3ciano-piridin-2-il)-fenil]-carbámico, cuyas características son las siguientes:

SM-EI: 329 (+)

Espectro IR (CCl4): 3343; 2981; 2230; 1741; 1524; 1501; 1411; 1392; 1368; 1316; 1220; 1155; 1050 y 844 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 1,50 (s, 9H); 7,62 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; de 7,78 a 7,84 (m, 3H) ; 8,83 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 9,67 (s, 1H).

2-(4-amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo

A una solución de 3,40 g de éster terc-butílico de ácido [4-(4-cloro-3-cianopiridin-2-il)-fenil]-carbámico en 20 ml de diclorometano se añaden 5,5 ml de ácido trifluoroacético. La solución se agita a 20ºC durante 26 horas. La disolución se concentra a sequedad bajo presión reducida. El residuo se recoge en una solución acuosa de bicarbonato de sodio y se extrae 3 veces con diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a presión reducida. El residuo se lava con éter dietílico. Se obtienen 1,678 g de un polvo amarillo de 2-(4-amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo, cuyas características son las siguientes:

SM-ES+ : 230 (+) = (M + H) (+)

Espectro IR (KBr) : 3402; 3339; 3230; 2223; 1608; 1555; 1538; 1520; 1432; 1388; 1180; 1066; 825 y 607 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 5,76 (s ancho, 2H); 6,67 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,63 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,73 (d, J = 5,5 Hz, 1H).

1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea Preparada según el esquema 7

A una solución de 115mg de 2-(4-amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo y 70µL de trietilamina en 5mL de tetrahidrofurano a 20ºC se añaden 65µL de isocianato de 2fluoro-5-metilfenilo. Después de 3h a 20ºC se añade agua y se extrae la mezcla con acetato de etilo. La fase orgánica se lava con agua y después con salmuera y se seca sobre sulfato de magnesio, después se concentra a sequedad a presión reducida. El residuo se recoge en éter etílico y la materia insoluble se aísla por filtración para dar 118mg de un polvo blanco de 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metilfenil)-urea, cuyas características son las siguientes:

SM-EI: 380(+)=(M)(+); 125(+)=(C7H8NF)(+) pico de base

Espectro IR (KBr) : 3379; 2231; 1687; 1598; 1550; 1413; 1315; 1219; 1185; 1116 y 810 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,28 (s, 3H); 6,82 (m, 1H) ; 7,12 (dd, J = 8,5 y 11,5 Hz, 1H) ; 7,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,81 (d, J = 5,5 Hz, 1H) ; 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,99 (d ancho, J = 8,0 Hz, 1H) ; 8,60 (s ancho, 1H) ; 8,84 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,38 (s, 1H).

1-[4-(3-ciano-4-hidrazino-piridin-2-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea Preparada según el esquema 7

A una mezcla de 50mg de 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5metil-fenil)-urea en 0,5mL de etanol a 20ºC se añaden 45µL de hidrato de hidrazina. La suspensión blanca se agita 2h a 20ºC y después se calienta a 80ºC durante 4h. Se deja enfriar a 20ºC. La materia insoluble se aísla por filtración y se lava con éter etílico para dar 33mg de un sólido beige de 1-[4-(3-ciano-4-hidrazino-piridin-2-il)-fenil]-3-(2fluoro-5-metil-fenil)-urea cuyas características son las siguientes:

SM-ES+: 377(+)=(M+H)(+)

SM-ES: 375(-)=(M-H)(-)

Espectro IR (KBr) : 3379; 2212; 1700; 1599; 1551; 1440; 1314; 1257; 1221; 1187 y 816 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,28 (s, 3H); 4,52 (s, 2H); 6,81 (m, 1H); 7,06 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 7,11 (dd, J = 8,5 y 11,5 Hz, 1H); 7,57 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,00 (d ancho, J = 8,0 Hz, 1H) ; 8,24 (s ancho, 1H) ; 8,27 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 8,57 (s ancho, 1H); 9,32 (s, 1H).

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)urea

Preparada según el esquema 7

A una solución de 55mg de 1-[4-(3-ciano-4-hidrazino-piridin-2-il)-fenil]-3-(2fluoro-5-metil-fenil)-urea en 2,2mL de diclorometano a 20ºC se añaden 0,25mL de ácido trifluoroacético que contiene 10% de anisol. Después de 40min la solución se evapora a sequedad a presión reducida. El residuo se recoge en agua y el medio se hace alcalino. El precipitado formado se aísla por filtración. Este sólido beige se cromatografía sobre un cartucho AIT de 2 g de sílice 15-40 µm después del depósito de sólido (eluyendo con un gradiente de 100% CH2Cl2 a 60% CH2Cl2 / 40% (CH2C2 38 / MeOH 17 / NH4OH 3). Se obtienen 26mg de un sólido beige de 1-[4-(3-amino-1Hpirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea cuyas características son

las siguientes: PF: 195ºC SM-ES+: 377(+)=(M+H)(+)

5 Espectro IR (KBr) : 3351; 1696; 1605; 1544; 1313; 1257; 1221; 1181; 1045 y 808 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,28 (s, 3H); 4,73 (s, 2H); 6,82 (m, 1H) ; 7,12 (dd, J = 8,5 y 11,5 Hz, 1H) ; 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; de 7,59 a 7,67 (m, 4H) ; 8,01 (dd, J = 2,5 y 8,0 Hz, 1H); 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,55 (d, J

10 = 2,5 Hz, 1H) ; 9,26 (s, 1H); 12,1 (s ancho, 1H). Los productos mencionados a continuación se prepararon según un protocolo similar al del ejemplo 27, (esquema 7)

Ejemplo 28 15 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetil-fenil)-urea

imagen2

1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-urea Preparada según el esquema 7

20 Se hace reaccionar 2-(4-amino-fenil)-4-cloro-nicotinonitrilo con isocianato de 2,4-dimetoxifenilo en condiciones similares a las descritas en el ejemplo 27. Se obtiene 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-urea en forma de un sólido blanco cuyas características son las siguientes: SM-ES+: 409(+)=(M+H)(+)

25 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 3,74 (s, 3H); 3,88 (s, 3H); 6,50 (dd, J = 2,5 y 9,0 Hz, 1H); 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,62 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,80 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,94 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 8,12 (s, 1H) ; 8,84 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 9,49 (s, 1H).

30 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxifenil)-urea Preparada según el esquema 7

La 1-[4-(4-cloro-3-ciano-piridin-2-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-urea se trata con hidrato de hidrazina y después con ácido trifluoroacético en condiciones similares a las descritas en el ejemplo 27. Se obtiene 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)

5 fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-urea en forma de un sólido beige, cuyas características son

las siguientes: SM-ES+: 405(+)=(M+H)(+) PF = 196ºC (Koffler) Espectro IR (KBr) : 1603; 1526; 1452; 1210; 1180; 1157; 1035 y 824 cm-1

10 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 3,74 (s, 3H); 3,87 (s, 3H); 4,74 (s ancho, 2H); 6,50 (dd, J = 2,5 y 9,0 Hz, 1H); 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 7,61 (s ancho, 4H); 7,95 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 8,09 (s, 1H) ; 8,20 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 9,39 (s ancho, 1H); 12,1 (m extendido, 1H).

15 Ejemplo 29 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-terc-butil-2-metoxifenil)-urea JK33913-110-1

imagen2

20

El producto es un sólido amarillo cuyas características son las siguientes: LC-MS: 431(+)=(M+H)(+) PF = 181ºC (Koffler) Espectro IR (KBr) : 3333; 2958; 1678; 1604; 1525; 1487; 1421; 1315; 1249;

25 1216; 1177; 1143; 1042; 842 y 807 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm):1,27 (s, 9H) ; 3,87 (s, 3H); 4,73 (s ancho, 2H); 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 6,97 (dd, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,63 (s, 4H); 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,25 (s, 1H) ; 8,29 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 9,51 (s, 1H); 12,1 (s ancho, 1H).

30

Ejemplo 30

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea

imagen2

El producto es un sólido amarillo cuyas características son las siguientes:

5 SM-ES+: 373: [M+H]+ PF = 182ºC (Koffler) Espectro IR (KBr) : 3413; 1679; 1621; 1549; 1210; 1136; 842; 803 y 724 cm-1

contiene ácido trifluoroacético Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,16 (s, 3H); 2,20

10 (s, 3H) ; 4,74 (s ancho, 2H); 7,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H); 7,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 7,20 (dd parcialmente enmascarado, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H) ; 7,26 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,62 (s, 4H); 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,60 (s, 1H); 8,87 (s, 1H); 12,15 (s, 1H)

Ejemplo 31 15 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(4-metil-3trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

20 El producto es un sólido amarillo cuyas características son las siguientes: SM-ES+: 427: [M+H]+ PF = 191ºC (Koffler) Espectro IR (KBr) : 3393; 3319; 3226; 3112; 1678; 1621; 1552; 1529; 1505;

1319; 1206; 1186; 1134; 1054; 839; 802 y 723 cm-1 contiene ácido trifluoroacético 25 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,38 (q, J=2,0 Hz, 3H) ; 4,74 (s ancho, 2H); 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,35 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,53 (dd, J

= 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 7,64 (s, 4H); 7,96 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,96 (s, 1H); 9,00 (s, 1H); 12,15 (s, 1H)

Ejemplo 32 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,5-difluoro-fenil)-urea

imagen2

El producto es un sólido amarillo cuyas características son las siguientes: LC-MS: 381(+)=(M+H)(+) 10 PF = 187ºC (Koffler) Espectro IR (KBr) : 3372; 1718; 1606; 1534; 1442; 1313; 1208; 1179; 862; 796 y 727 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,74 (s ancho, 2H); 6,84 (m, 1H); 7,20 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 7,31 (ddd, J = 5,5 – 9,0 y 11,0 Hz, 1H) ; de 7,61 15 a 7,68 (m, 4H); 8,07 (ddd, J = 3,0 – 6,5 y 11,0 Hz, 1H) ; 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 8,87

(s ancho, 1H); 9,36 (s, 1H); 12,15 (s ancho, 1H).

Ejemplo 33 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)20 urea

imagen2

El producto es un sólido amarillo pálido cuyas características son las

siguientes: SM-ES+ : 393 [M+H]+ PF = 196ºC (Koffler)

Espectro IR (KBr):3406; 3323; 3110; 1675; 1621; 1592; 1528; 1498; 1210; 1185; 1139; 839; 803 y 724 cm-1 contiene ácido trifluoroacético

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,27 (s, 3H); 4,74 (s ancho, 2H); 7,19 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,21 (dd, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 7,25 (d, J = 2,0 5 Hz, 1H); 7,63 (s, 4H); 7,72 (d, J = 2,5 Hz, 1H); 8,21 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,88 (s, 1H);

8,96 (s, 1H); 12,15 (s, 1H).

Ejemplo 34 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-fluoro-2-metil-fenil)10 urea

imagen2

El producto es un sólido amarillo cuyas características son las siguientes:

15 LC-MS: 377(+)=(M+H)(+) PF = >265ºC (Koffler) Espectro IR (KBr) : 3287; 1639; 1604; 1539; 1452; 1312; 1217; 1156; 1109;

1046; 846 y 809 cm-1 Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 2,24 (s, 3H) ; 4,74

20 (s ancho, 2H); 6,76 dt, J = 3,0 y 8,5 Hz, 1H) ; 7,19 (d, J = 6,0 Hz, 1H) ; 7,20 (m parcialmente enmascarado, 1H); 7,64 (s, 4H); 7,86 (dd, J = 3,0 y 12,0 Hz, 1H); 8,15 (s ancho, 1H); 8,21 (d, J = 6,0 Hz, 1H); 9,40 (s ancho, 1H); 12,15 (s ancho, 1H).

Ejemplo 35 25 N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-diclorobencenosulfonamida

imagen2

SM-ES+ : 434 (MH+)

Ejemplo 36 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(5-cloro-2,4-dimetoxifenil)-urea

imagen2

10 SM-ES+ : 439 (MH+)

Ejemplo 37 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometilsulfanilfenil)-urea

15

imagen2

SM-ES+ : 445 (MH+)

Ejemplo 38 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil]-urea

imagen2

3-cloro-5-(4-nitrofenil)-isonicotinonitrilo Preparada según el esquema 8

A una solución de 1,73 g de 3,5-dicloro-isonicotinonitrilo comercial en 120 ml de dioxano se añaden 2,74 g de 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-nitrofenil)-1,3,2-dioxaborolano, 2,31 g de bicarbonato de sodio en 70 ml de agua y 1,16 g de tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0). La suspensión se calienta a 100ºC durante 1h30. Después de enfriar, la mezcla de reacción se vierte sobre 40 ml de agua y se extrae 3 veces, cada vez con 100 ml de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 50 ml de agua, 50 ml de salmuera, se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a sequedad a presión reducida. La goma marrón residual se purifica por cromatografía sobre un cartucho Merck precargado con 70 g de sílice 15-40 �M eluyendo con diclorometano. Se obtienen 1,58 g de sólido amarillo de 3-cloro-5-(4nitro-fenil)-isonicotinonitrilo, cuyas características son las siguientes:

SM-EI: 259 (+)

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 8,02 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,43 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,91 (s, 1H); 9,09 (s, 1H)

Derivado N,N’-di-BOC de 3-hidrazino-5-(4-nitro-fenil)-isonicotinonitrilo Preparada según el esquema 8

A una disolución de 4,43 g de hidrazinodiformiato de di-terc-butilo en 19 ml de dimetilformamida se añaden 2,62 g de carbonato de potasio y 990 mg de 3-cloro-5-(4nitrofenil)-isonicotinonitrilo. La suspensión se calienta a 75ºC durante 6 horas y después se agita 18 horas a 20ºC. La mezcla de reacción se extrae con 3 veces 80 ml de acetato de etilo. Las fases orgánicas se lavan 2 veces 50 ml de agua y después con 50 ml de salmuera. Las fases orgánicas reunidas se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a presión reducida. El residuo marrón se purifica por cromatografía sobre un cartucho Merck de 25 g de sílice precargado 15-40 �M (gradiente de elución: ciclohexano/acetato de etilo 9/1 a 7/3). Se obtienen 2,38 g de sólido amarillo de derivado N,N’-di-boc de 3-hidrazino-5-(4-nitrofenil)-isonicotinonitrilo,

aislado impuro y se utiliza tal cual.

LC-MS: 456 (+) = (M + H) (+)

454 (-) = (M – H) (-)

Derivado N,N’-di-Boc de 3-(4-amino-fenil)-5-hidrazino-isonicotinonitrilo Preparada según el esquema 8

A una solución de 1,74 g de derivado N,N’-di-boc de 3-hidrazino-5-(4-nitrofenil)-isonicotinonitrilo en 8 ml de etanol se añaden 3 ml de ciclohexeno y 200 mg de hidróxido de paladio. La suspensión se agita a reflujo durante 2h15, se filtra en caliente sobre celite y se concentra a sequedad a presión reducida. El residuo beige se purifica por cromatografía sobre un cartucho Merck de 70 g de sílice 15-40 �M eluyendo con una solución de acetato de etilo / diclorometano 8/2. Se obtienen 309 mg de sólido amarillo de derivado N,N’-di-boc de 3-(4-amino-fenil)-5-hidrazino-isonicotinonitrilo, cuyas características son las siguientes:

LC-MS: 426 (+) = (M + H) (+)

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 1,45 (s ancho, 18H) ; 5,61 (s, 2H); 6,71 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,31 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,55 (s ancho, 1H) ; 8,64 (s, 1H) ; 10,05 (m extendido, 1H)

Derivado N,N’-di-BOC de 1-[4-(4-ciano-5-hidrazino-piridin-3-il)-fenil]-3-(2metoxi-5-trifluorometil-fenil]-urea

Preparada según el esquema 8

A una solución de 41 mg de trifosgeno en 4 ml de tetrahidrofurano se añaden a 0ºC bajo argón 78 mg de 2-metoxi-5-trifluorometil anilina en 2 ml de tetrahidrofurano y 110 �l de trietilamina. La suspensión se agita a 0ºC durante 10 minutos y después a 20ºC durante 1h15. Después se añade una solución de 174 mg de derivado N,N’-diboc de 3-(4-amino-fenil)-5-hidrazino-isonicotinonitrilo en 2ml de tetrahidrofurano. La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 8 horas y después se concentra a sequedad a presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía sobre un cartucho Analogix de 12 g de sílice 50 �M (gradiente de elución de acetato de etilo en ciclohexano de 1/9 a 5/5). Se obtienen 195 mg de sólido amarillo de derivado N,N’-diboc de 1-[4-(4-ciano-5-hidrazino-piridin-3-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]urea, cuyas características son las siguientes:

LC-MS: 643 (+) = (M + H) (+)

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): De 1,4 a 1,55 (s ancho, 18H); 3,99 (s, 3H); 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,34 (dd, J = 2,0 y 8,5 Hz, 1H); 7,58 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,69 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,57 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 8,65 (s, 1H); 8,69 (s ancho, 1H); 8,72 (s, 1H) ; 9,78 (s, 1H); 10,08 (m extendido, 1H)

1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil]-urea

Preparada según el esquema 8

Una solución de 282 mg de derivado N,N’-di-boc de 1-[4-(4-ciano-5-hidrazinopiridin-3-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-urea y de 600 �l de ácido trifluoroacético al 10% de anisol en 8 ml de diclorometano se calienta a reflujo durante 2h30. Después de enfriar la mezcla de reacción se vierte sobre una solución saturada de bicarbonato de sodio y se extrae con 40 ml de acetato de etilo. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a sequedad a presión reducida. El residuo amarillo se amasa en éter etílico. Después de filtrar y secar a vacío la materia insoluble, se obtienen 103 mg de sólido amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c] piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil]-urea, cuyas características son las siguientes:

LC-MS: tr= 2,83min : 443 = [M + H]+ ; 441 = [M – H]-; 487 = [M -H]-+ HCO2H SM-EI: 176 (pico de base) = C8H6F3O+ ; 442 = [M+]

Espectro IR (KBr) : 3342; 1696; 1609; 1538; 1491; 1447; 1314; 1270; 1215; 1177; 1135; 1024; 837 y 622 cm-1

Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm): 3,99 (s, 3H); 4,61 (s, 2H); 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,33 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H) ; 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,93 (s, 1H); 8,58 (s ancho, 2H) ; 8,74 (s, 1H); 9,61 (s, 1H); 12 ,25 (s, 1H)

PF = 210ºC (Koffler)

Ejemplo 39

N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-diclorobencenosulfonamida

Preparada según los esquemas 6 y 8

imagen2

SM-ES+ = 434 (MH+)

Ejemplo 40

Ácido 3-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4

metoxi-benzoico

imagen2

10 A una solución de 100mg de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]3-(2-metoxi-5-trifluorometil-fenil)-urea, descrita en el ejemplo 5, en 5mL de diclorometano a -40ºC se añaden gota a gota 1,6mL de un solución 1M de tribromuro de boro y se deja remontar la temperatura hasta 20ºC. Se concentra hasta sequedad

15 bajo una corriente de argón durante una noche. El residuo se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µm precargada (eluyente: diclorometano / solución A, de 95:5 y después 90:10 y después 80:20 y después 73:30; disolución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 41mg de polvo amarillo de ácido 3-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-metoxi-benzoico,

20 cuyas características son las siguientes: LCMS sobre Quattro Premier: tr= 5,04min m/z 419 : [M+H]+ Espectro IR (KBr):3354; 1697; 1597; 1542; 1431; 1319; 1279; 1205; 1122; 821 y 767 cm-1

25 Espectro de R.M.N. 1H (400 MHz, (CD3)2SO, � en ppm):3,80 (s, 3H); 4,59 (s, 2H); 6,90 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,51 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,40 (s, 1H); 8,79 (d, J = 2,5 Hz, 1H) ; 9,60 (s, 1H); 10,6 (m muy extendido, 1H); 12,25 (s ancho, 1H).

Ejemplo 41 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-hidroxi-5trifluorometil-fenil)-urea

imagen2

10 A una solución de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi5-trifluorometil-fenil)-urea, descrita en el ejemplo 5, en 6mL de diclorometano a -40ºC se añaden gota a gota 1,6mL de una solución 1M de tribromuro de boro y se deja remontar la temperatura hasta 20ºC. Después de 30min, la reacción se enfría en un baño de agua helada y después se añade agua. Después de 15min de agitación la

15 mezcla se filtra y la materia insoluble anaranjada se lava con agua y diclorometano. Le sólido se purifica sobre una columna Biotage KP-Sil de 60Å SiO2 32-63µ precargada (eluyente: diclorometano / solución A, de 95:5 y después 90:10 y después 80:20 y después 73:30; solución A = diclorometano / metanol / amoniaco, 38:17:2). Se obtienen 29mg de polvo amarillo de 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]

20 3-(2-hidroxi-5-trifluorometil-fenil)-urea, cuyas características son las siguientes: LCMS sobre ZQ: tr= 3,22mn m/z 429 [M+H]+(pico de base) Espectro de R.M.N. 1H (300 MHz, (CD3)2SO d6, � en ppm): 4,59 (s, 2H); 6,90

(d, J = 5,5 Hz, 1H); 7,00 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,18 (dd, J = 2,5 y 8,5 Hz, 1H); 7,54 (d, J = 25 8,5 Hz, 2H); 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,37 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 8,51 (m, 2H); 9,64 (s, 1H); 10,7 (m muy extendido, 1H); 12,25 (s ancho, 1H).

Determinación de la actividad de los compuestos -Protocolos experimentales

30

1. FAK

La actividad inhibidora de los compuestos sobre FAK se determina midiendo la inhibición de la autofosforilación de la enzima utilizando un ensayo de fluorescencia de resolución temporal (HTRF).

El ADNc completo de FAK humana, cuyo extremo N-terminal se ha marcado con histidina, se clonó en un vector de expresión baculovirus pFastBac HTc. La proteína se expresó y se purificó hasta aproximadamente 70% de homogeneidad.

La actividad quinasa se determina incubando la enzima (6,6 µg/ml) con diferentes concentraciones de compuesto de ensayo en un tampón Hepes 50 mM, pH = 7,2, MgCl2 10 mM, Na3VO4 100 µM, ATP 15 µM durante 1 hora a 37ºC. La reacción enzimática se detiene por adición de tampón Hepes pH = 7,0 que contiene KF 0,4 mM, EDTA 133 mM, 0,1 % de BSA y el marcaje se efectúa, durante 1 a 2 horas a temperatura ambiente, por adición en ese tampón de un anticuerpo anti-Histidina marcado con XL665 y de un anticuerpo monoclonal fosfoespecífico de tirosina conjugado con criptato de europio (Eu-K). Las características de los dos fluoróforos están disponibles en G. Mathis et al., Anticancer Research, 1997, 17, páginas 30113014. La transferencia de energía entre el criptato de europio excitado hacia el aceptor XL665 es proporcional al grado de autofosforilación de FAK. La señal de larga duración específica de XL-665 se mide en un contador de placas Packard Discovery. Todos los ensayos se efectúan por duplicado y se calcula la media de los dos ensayos. La inhibición de la actividad de autofosforilación de FAK con los compuestos de la invención se expresa en porcentaje de inhibición respecto de un control cuya actividad se mide en ausencia del compuesto de ensayo. Para el cálculo del % de inhibición, se considera la relación [señal a 665 nm/señal a 620 nm].

2. KDR

El efecto inhibidor de los compuestos se determina en un ensayo de fosforilación de sustrato por la enzima KDR in vitro mediante una técnica de centelleo (placa de 96 pocillos, NEN).

El dominio citoplasmático de la enzima KDR humana se clonó en forma de fusión GST en el vector de expresión baculovirus pFastBac. La proteína se expresó en las células SF21 y se purificó hasta aproximadamente 60 % de homogeneidad.

La actividad quinasa de KDR se mide en MOPS 20 mM, MgCl2 10 mM, MnCl2 10 mM, DTT 1 mM, EGTA 2,5 mM, b-glicerofosfato 10 mM, pH = 7,2, en presencia de MgCl2 10 mM, Na3VO4 100 µM y NaF 1 mM. Se añaden 10 µl del compuesto a 70 µl de tampón quinasa que contiene 100 ng de enzima KDR a 4ºC. La reacción se inicia añadiendo 20 µl de una solución que contiene 2 µg de sustrato (fragmento SH2-SH3 de la PLCy expresado en forma de proteína de fusión GST), 2 µCi �33P[ATP] y ATP 2 µM frío. Después de 1 hora de incubación a 37ºC, la reacción se detiene añadiendo 1 volumen (100 µl) de EDTA 200 mM. Se retira el tampón de incubación y los pocillos se lavan tres veces con 300 µl de PBS. La radiactividad se mide en cada pocillo utilizando un contador de radiactividad Top Count NXT (Packard).

El ruido de fondo se determina midiendo la radiactividad en cuatro pocillos diferentes que contienen ATP radiactivo y el sustrato solo.

Se mide un control de actividad total en cuatro pocillos diferentes que contienen todos los reactivos (�33P-[ATP], KDR y sustrato PLC�) pero en ausencia de compuesto.

La inhibición de la actividad KDR con el compuesto de la invención se expresa en porcentaje de inhibición de la actividad control determinada en ausencia de compuesto.

El compuesto SU5614 (Calbiochem) (1 µM) se incluye en cada placa como control de inhibición.

3. Tie2

La secuencia codificante de Tie2 humano que corresponde a los aminoácidos del dominio intracelular 776-1124 se generó por PCR utilizando el ADNc aislado de placenta humana como modelo. Esta secuencia se introdujo en un vector de expresión baculovirus pFastBacGT en forma de proteína de fusión GST.

El efecto inhibidor de las moléculas se determina en un ensayo de fosforilación de PLC por Tie2 en presencia de GST-Tie2 purificado hasta aproximadamente 80% de homogeneidad. El sustrato se compone de los fragmentos SH2-SH3 de la PLC expresada en forma de proteína de fusión GST.

La actividad quinasa de Tie2 se mide en un tampón MOPS 20mM pH 7,2, que contiene MgCl2 10 mM, MnCl2 10 mM, DTT 1 mM, glicerofosfato 10 mM. En una placa de 96 pocillos FlashPlate mantenida sobre hielo, se deposita una mezcla de reacción compuesta por 70 µl de tampón quinasa que contiene 100 ng de enzima GST-Tie2 por pocillo. A continuación, se añaden 10 µl de la molécula a ensayar diluida en DMSO a una concentración de 10 % como máximo. Para una concentración dada, cada medida se efectúa por cuadruplicado. La reacción se inicia añadiendo 20 µl de disolución que contiene 2 µg de GST-PLC, 2 µM de ATP frío y 1 µCi de 33P[ATP]. Después de 1 hora de incubación a 37ºC, la reacción se detiene añadiendo 1 volumen (100 µl) de EDTA a 200 mM. Después de eliminar el tampón de incubación, los pocillos se lavan tres veces con 300 µl de PBS. La radiactividad se mide en un MicroBeta1450 Wallac.

5 La inhibición de la actividad Tie2 se calcula y expresa en porcentaje de inhibición respecto de la actividad control determinada en ausencia de compuesto.

Resultados: Tabla 1 :

Estructura

Ejemplo FAK KDR Tie2

CI 50 (nM)

CI 50 (nM)

CI 50 (nM)

imagen2

1 264 50 8

imagen2

2 150 940 23

imagen2

3 73 33 5

Estructura

Ejemplo FAK KDR Tie2

CI 50 (nM)

CI 50 (nM)

CI 50 (nM)

imagen2

4 80 218 4

imagen2

5 286 49 15

imagen2

6 190 1855 27

imagen2

7 - 36 9

Estructura

Ejemplo FAK KDR Tie2

CI 50 (nM)

CI 50 (nM)

CI 50 (nM)

imagen2

10 - 60 10

imagen2

14 - 24 21

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES

   1. Producto que responde a la fórmula (I) siguiente:

   en la que : 1) Ar-L-A es

   imagen1

   en la que X2 se elige entre N, C-CH3, CF y CH.

   10 2) A se elige entre fenilo, pirazolilo e isoxazolilo ; eventualmente sustituido con uno o varios sustituyentes elegidos entre halógeno; alquilo(C1-C12); arilo(C6C14); heteroarilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos, cicloalquilo(C3-C12); heterociclilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos; alquileno(C2-C12); alquinilo(C2C12); OH ; O-alquilo(C1-C12); O-alquileno(C2-C12); O-arilo(C6-C14); O

   15 heteroarilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos; NH2 ; NH-alquilo(C1-C12); NHarilo(C6-C14); NH-heteroarilo(C1-C13); N-alquilo(C1-C12)-alquilo’(C1-C12); SH; S-alquilo(C1-C12); S-arilo(C6-C14); S(O2)H ; S(O2)-alquilo(C1-C12); S(O2)arilo(C6-C14); SO3H ; SO3-alquilo(C1-C12); SO3-arilo(C6-C14); CHO; C(O)alquilo(C1-C12); C(O)-arilo(C6-C14); C(O)OH ; C(O)O-alquilo(C1-C12); C(O)O

   20 arilo(C6-C14); OC(O)-alquilo(C1-C12); OC(O)-arilo(C6-C14); C(O)NH2 ; C(O)NH-alquilo(C1-C12); C(O)NH-arilo(C6-C14); NHCHO; NHC(O)-alquilo(C1C12); NHC(O)-arilo(C6-C14); NH-cicloalquilo(C3-C12); NH-heterociclilo(C1C13) con 1 a 4 heteroátomos, CONH-heterociclilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos, CO-heteroarilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos, CO

   25 heterociclilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos, NHCO-heteroarilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos, NHCO-heterociclilo(C1-C13) con 1 a 4 heteroátomos , NHCONH-alquilo(C1-C12).

   3) L se selecciona del grupo constituido por: NH-SO2, -NH-CO-NH,;

   4) Uno de X, Y y Z se elige entre N y NO, y los otros dos de Z, Y y X son C(R5) y C(R6); 5) R5 y R6 se eligen entre H y F.
2. 2. Producto según la reivindicación 1, caracterizado porque Ar-L-A es:

   imagen2

   10 en la cual X2 es N.
3. 3. Producto según la reivindicación 1, caracterizado porque L-A es NH-CONH-A.

   15 4. Producto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque A es fenilo o isoxazolilo sustituido con halógeno, alquilo(C1-C4), alquilo(C1C3) halogenado, O-alquilo(C1-C4), S-alquilo(C1-C4), O-alquilo(C1-C4) halogenado, S-alquilo(C1-C4) halogenado, y cuando A está disustituido, los dos sustituyentes de A pueden formar un ciclo de 5 a 7 miembros que contiene de 0 a 3 heteroátomos.

   20
4. 5. Producto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque A está sustituido con uno o varios sustituyentes, iguales o diferentes, independientemente seleccionados del grupo constituido por F, Cl, Br, I, OH, SH, SO3M, COOM, CN, NO2, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), alquilo(C1-C3)-OH, alquilo(C1

   25 C3)-N(R8)(R9), alquilo(C1-C3)-(R10), alquilo(C1-C3)-COOH, N(R8)(R9), alquilo(C1C6), alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), arilo, heteroarilo, O-alquilo(C1-C6), O-arilo, Oheteroarilo, S-alquilo(C1-C6), S-arilo, S-heteroarilo, estando cada uno eventualmente sustituido con uno o varios sustituyentes elegidos entre alquilo(C1-C3), halógeno, O-alquilo(C1-C3); en donde R8 y R9 se eligen independientemente entre H, alquilo(C1

   30 C3), alquilo(C1-C3)OH, alquilo(C1-C3)NH2, alquilo(C1-C3)COOM, alquilo(C1C3)SO3M; en el que, cuando R8 y R9 son simultáneamente diferentes de H, pueden unirse para formar un ciclo de 5 a 7 eslabones que contiene de 0 a 3 heteroátomos elegidos entre O, N y S; en el que M es H o un catión de metal alcalino elegido entre Li, Na y K ;

   y en donde R10 es H o un heterociclo no aromático eventualmente sustituido, que comprende 2 a 7 átomos de carbono, y 1 a 3 heteroátomos elegidos entre N, O y S
5. 6. Producto según la reivindicación 1, caracterizado porque A es 2-fluoro-5trifluorometil-fenilo o 2-metoxi-5-trifluorometil-fenilo.
6. 7. Producto según la reivindicación 1, caracterizado porque se elige entre: 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil

   fenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometilfenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5trifluorometil-fenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metilcarbonilamino5-trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-5-trifluorometil

   fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea, Ácido 3-{3-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-ureido}-4-metoxi

   benzoico, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-hidroxi-5-trifluorometil

   fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terc-butil-fenil)

   urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-metilfenil)-urea,

   1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-etil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-1,3-benzodioxol-5-il-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metoxi-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-cloro-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-etoxi-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-metil-fenil)-urea, N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro

   bencenosulfonamida.
7. 8. Producto según la reivindicación 1, caracterizado porque se elige entre: 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil

   fenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-fluoro-5

   trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(fenil)-urea, 1-[5-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-piridin-2-il]-3-(2-metoxi-5

   trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometil

   fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metilcarbonilamino-5

   trifluorometil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-fenil)-urea, N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-dicloro

   bencenosulfonamida, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-terc-butil-fenil)

   urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-4-metil

   fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,5-difluoro-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-cloro-4-metil-fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metil-5-fluoro-fenil)-urea,

   1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2,4-dimetoxi-5-cloro-fenil)urea,

   1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(3-trifluorometilsulfanil-fenil)urea.
8. 9. Producto según la reivindicación 1, caracterizado porque se elige entre: 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-fluoro-5-trifluorometil

   fenil)-urea, 1-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-3-(2-metoxi-5-trifluorometilfenil)-urea, N-[4-(3-amino-1H-pirazolo[3,4-c]piridin-4-il)-fenil]-2,3-diclorobencenosulfonamida.
9. 10. Producto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque está en forma:

   a.

   no quiral, o

   b.

   racémica, o

   c.

   enriquecido en un estereoisómero, o

   d.

   enriquecido en un enantiómero ; y porque está opcionalmente salificado.

10. 11. Medicamento, caracterizado porque comprende un producto de fórmula

    (I) según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal por adición de este compuesto a un ácido farmacéuticamente aceptable, o también un hidrato o un solvato del producto de fórmula (I).

11. 12.

    Composición farmacéutica que comprende un producto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en combinación con un excipiente farmacéuticamente aceptable.

12. 13.

    Utilización de un producto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para la preparación de un medicamento como agente inhibidor de una reacción catalizada por una quinasa.

13. 14.

    Utilización de un producto según la reivindicación 13, caracterizado porque la quinasa se elige entre FAK, KDR y Tie2.

14. 15.

    Utilización de un producto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para la fabricación de un medicamento útil para tratar un estado patológico.

15. 16.

    Utilización según la reivindicación 15, caracterizado porque el estado patológico es el cáncer.