CN101146534A

CN101146534A - 取代吡唑并吡啶，含有它们的组合物，制备方法与用途

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Publication number: CN101146534A
Application number: CNA2006800089292A
Authority: CN
Inventors: B·罗南; M·塔巴特; F·哈利; E·巴克奎; C·斯奥艾尔; A·尤戈利尼; F·维维阿尼
Original assignee: Aventis Pharma SA
Current assignee: Aventis Pharma SA
Priority date: 2005-01-19
Filing date: 2006-01-18
Publication date: 2008-03-19
Also published as: FR2880891A1; SV2006002384A; ES2351160T3; FR2880891B1; DOP2006000015A

Abstract

取代吡唑并吡啶，含有它们的组合物，以及它们作为药品的用途。本发明特别涉及取代吡唑并吡啶，含有它们的组合物的制备，它们的制备方法和它们作为药品，特别作为抗癌剂的用途。

Description

取代吡唑并吡啶，含有它们的组合物，制备方法与用途

本发明特别地涉及新的化学化合物，特别地新的取代吡唑并吡啶，含有它们的组合物，以及它们作为药品的用途。

更特别地，根据第一个方面，本发明涉及通过调节蛋白质活性，特别地蛋白激酶的活性而具有抗癌活性的新特效吡唑并吡啶。

迄今为止，化疗中使用的大多数商品化合物会产生副作用和病人耐受性的重要问题。如果使用的药品对癌细胞(正常细胞除外)选择性地起作用，则这些作用可受到限制。因此，限制化疗不利作用的其中一个解决办法可在于使用对代谢途径或这些途径的构成元素起作用的药品，它们主要在癌细胞中被表达，而在正常细胞中不表达或表达不多。

这些蛋白激酶是一组酶，它们催化蛋白质特定残基(如酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基)的羟基基团磷酸化。这样一些磷酸化作用能极大地改变蛋白质的功能；因而蛋白激酶在大量调节细胞过程中起到重要的作用，这些细胞过程特别地包括新陈代谢、细胞增殖、细胞分化、细胞迁移或细胞存活。在涉及蛋白激酶活性的这些不同细胞功能中，某些过程成为治疗这些癌症以及其它疾病的有吸引力的目标。

因此，本发明的其中一个目的是提出一些特别通过对某些激酶起作用而具有抗癌活性的组合物。在寻求调节活性的这些激酶中，FAK、KDR和Tie2是优选的。

这些产品符合下式(I)：

式(I)

式中：

1)A和Ar独自地选自：芳基、杂芳基、取代芳基、取代杂芳基、环烷基、取代环烷基、杂环基、取代杂环基；

2)L选自：键、CO、NH、CO-NH、NH-CO、NH-SO、NH-SO₂、SO₂NH、NH-CH₂、CH₂-NH、CH₂-CO-NH、NH-CO-CH₂、NH-CH₂-CO、CO-CH₂-NH、NH-CO-NH、NH-CS-NH、NH-CO-O、O-CO-NH；

3)X、Y和Z其中之一选自N和NO，且Z、Y和X的其它两个是C(R5)和C(R6)；

4)R5和R6独自地选自：H、卤素、R2、CN、O(R2)、OC(O)(R2)、OC(O)N(R2)(R3)、OS(O₂)(R2)、N(R2)(R3)、N＝C(R2)(R3)、N(R2)C(O)(R3)、N(R2)C(O)O(R3)、N(R4)C(O)N(R2)(R3)、N(R4)C(S)N(R2)(R3)、N(R2)S(O₂)(R3)、C(O)(R2)、C(O)O(R2)、C(O)N(R2)(R3)、C(＝N(R3))(R2)、C(＝N(OR3))(R2)、S(R2)、S(O)(R2)、S(O₂)(R2)、S(O₂)O(R2)、S(O₂)N(R2)(R3)；式中每个R2、R3、R4独自地选自H、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、取代烷基、取代烯基、取代炔基、取代芳基、取代杂芳基、取代环烷基、取代杂环基、烯基、取代烯基、取代炔基；式中R2和R3可以彼此连接构成4-8个链节的环，该环含有1-3个选自O、N和S的杂原子。

在式(I)产品中，Ar-L-A有利地是：

式中每个X1、X2、X3和X4独自地选自N和C-R11，其中R11具有与前面定义的R5相同的定义。Ar-L-A有利地是：

式中X2选自N、C-CH₃、CF和CH。

选自H、F、Cl、甲基、NH₂、OCF₃和CONH₂的取代基R11是优选的。

优选的取代基R5和R6独自地选自H、卤素、OMe和甲基。

R5和R6有利地选自H和F。

R5和R6优选地是H。

优选的取代基L-A有利地选自NH-CO-NH-A和NH-SO₂-A。

当L-A是NHCONH-A时，得到特别有效的组合L-A。

本发明产品优选地具有取代基A，它选自苯基、吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、异唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并唑基和苯并噻唑基；任选地A被取代。

更优选地，A选自苯基、吡唑基和异唑基；任选地A被取代。

非常有利地，取代基A被选自第一组的取代基取代，该第一组取代基由下列基团构成：(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、芳基、卤素、杂芳基、O-(C1-C6)烷基、O-芳基、O-杂芳基、S-(C1-C6)烷基、S-芳基、S-杂芳基，每个取代基任选地被一个或多个选自(C1-C3)烷基、卤素、O-(C1-C3)烷基的取代基取代。

取代基A优选地被选自第二组的取代基取代，该第二取代基由下列基团构成：F、Cl、Br、I、OH、SH、SO₃M、COOM、CN、NO₂、CON(R8)(R9)、N(R8)CO(R9)、(C1-C3)烷基-OH、(C1-C3)烷基-N(R8)(R9)、(C1-C3)烷基-(R10)、(C1-C3)烷基-COOH、N(R8)(R9)；式中R8和R9独自地选自H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基OH、(C1-C3)烷基NH₂、(C1-C3)烷基COOM、(C1-C3)烷基SO₃M；式中当R8和R9同时不是H时，它们可以连接构成5-7个链节的环，该环含有0-3个选自O、N和S的杂原子；式中M是H或选自Li、Na和K的碱金属阳离子；并且式中R10是H或任选取代的非芳族杂环，这个杂环含有2-7个碳原子和1-3个选自N、O和S的杂原子。

特别优选的取代基A选自苯基和异唑基；所述取代基A可以被卤素、(C1-C4)烷基、卤代(C1-C3)烷基、O-(C1-C4)烷基、S-(C1-C4)烷基、卤代O-(C1-C4)烷基和卤代S-(C1-C4)烷基取代。当A被二取代时，A的两个取代基可以构成5-7个链节的环，该环含有0-3个杂原子。

A有利地被一个或多个相同或不同的取代基取代，该取代基独自地选自F、Cl、Br、I、OH、SH、SO₃M、COOM、CN、NO₂、CON(R8)(R9)、N(R8)CO(R9)、(C1-C3)烷基-OH、(C1-C3)烷基-N(R8)(R9)、(C1-C3)烷基-(R10)、(C1-C3)烷基-COOH、N(R8)(R9)、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、芳基、杂芳基、O-(C1-C6)烷基、O-芳基、O-杂芳基、S-(C1-C6)烷基、S-芳基、S-杂芳基，每个取代基任选地被一个或多个选自(C1-C3)烷基、卤素、O-(C1-C3)烷基的取代基取代；式中R8和R9独自地选自H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基OH、(C1-C3)烷基NH₂、(C1-C3)烷基COOM、(C1-C3)烷基SO₃M；式中当R8和R9同时不是H时，它们可以连接构成5-7个链节的环，该环含有0-3个选自O、N和S的杂原子；式中M是H或选自Li、Na和K的碱金属阳离子；并且式中R10是H或任选取代的非芳族杂环，这个杂环含有2-7个碳原子和1-3个选自N、O和S的杂原子。

根据一种优选实施方式，A有利地是2-氟-5-三氟甲基-苯基或2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基。

本发明产品可以选自：

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲基羰基氨基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲基羰基氨基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲，

3-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-甲氧基-苯甲酸，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-羟基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3，4-二甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-叔丁基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-4-甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-乙基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-1，3-苯并间二氧杂环戊烯(benzodioxol)-5-基-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-氯-4-甲氧基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-氯-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-乙氧基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-甲基-苯基)-脲，

N-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-2，3-二氯-苯磺酰胺。

本发明的其它产品可以选自：

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(苯基)-脲，

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲基羰基氨基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲，

N-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-2，3-二氯-苯磺酰胺，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-叔丁基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3，4-二甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-4-甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，5-二氟-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲基-5-氟-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-5-氯苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基硫烷基-苯基)-脲。

本发明的其它产品可以选自：

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲，

N-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-2，3-二氯-苯磺酰胺。

本发明的产品可以呈下述形式：

非手性，或

外消旋，或

富含立体异构体，或

富含对映异构体；

并可任选地成盐，任选地进行水合，任选地进行溶剂化。

本发明的产物可以用于生产用于治疗病理状态，特别地癌症的药品

根据第二个方面，本发明涉及含有根据第一个方面的式(I)产品，或者这种化合物与在药物上可接受酸的加成盐，或者式(I)产品的水合物或溶剂化物的药物。

根据第三个方面，本发明涉及药物组合物，它含有根据第一或第二个方面的产品，以及并用的在药物上可接受的赋形剂。

根据第四个方面，本发明涉及根据本发明其它方面的一个方面的产品作为用激酶催化的反应的抑制剂。在这些激酶中，FAK、KDR和Tie2是优选的。

本发明还涉及治疗组合物，它们含有本发明产品，并结合有根据所选给药方式在药物上可接受的赋形剂。该药物组合物可以呈固体、液体形式或脂质体形式。

在这些固体组合物中，可以列举粉剂、胶囊和片剂。在口服剂型中，还可以包括防止胃酸性介质侵蚀的固体剂型。这些固体剂型使用的载体特别地是由无机载体(如磷酸盐、碳酸盐)或有机载体(如乳糖、纤维素、淀粉或聚合物)组成的。这些液体剂型是由溶液、悬液或分散体构成的。它们含有水或有机溶剂(乙醇、NMP等)或表面活性剂和溶剂或络合剂和溶剂的混合物作为分散载体。

这些液体剂型优选地是可注射的，因此，应有对这样一种应用可接受的配方。

可接受注射的给药途径包括静脉内、腹膜内、肌内和皮下途径，静脉内途径通常是优选的。

由医生根据病人的给药途径和所述病人的情况调节本发明化合物的给药剂量。

本发明的化合物可以单独给药或与其它抗癌剂混合给药。在这些可能的并用中，可以列举：

烷化剂，特别地环磷酰胺、马法兰、异环磷酰胺、苯丁酸氮芥、白消安、噻替哌、泼尼齐、卡氯芥、洛莫司汀、司莫司汀、链脲佐菌素、氮烯咪胺、替莫唑胺、甲基苄肼和六甲蜜胺

铂衍生物，特别地如顺铂、卡铂或或奥沙利铂

抗生素，特别地如博莱霉素、丝裂霉素、更生霉素

抗微管剂，特别地如长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞宾、紫杉烷类(紫杉醇和多西紫杉醇)

蒽环类药物，特别地如阿霉素、柔红霉素、去甲氧柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、洛索蒽醌(losoxantrone)

组I和II拓扑异构酶抑制剂，如足叶乙甙、替尼泊甙、安吖啶、伊立替康、拓普替康和托姆特斯(tomudex)

氟嘧啶类，如5-氟脲嘧啶、UFT、氟尿苷

胞苷类似物，如5-氮杂胞苷、阿糖胞苷、吉西他滨、6-巯基妙莲(mercaptomurine)或6-巯基鸟嘌呤

腺苷类似物，如喷司他丁、阿糖胞苷或磷酸氟达拉滨

氨甲喋呤和亚叶酸

各种各样的酶和化合物，如L-天门冬酰胺酶、羟基脲、反式维甲酸、苏拉明、右雷佐生、氨磷汀、赫赛汀以及雌激素和雄激素

血管生成抑制剂，如考布他丁的衍生物或秋水仙素的衍生物，和它们的药物前体。

放射疗法与本发明的化合物结合也是可以的。这些治疗可以同时、单独、顺序给药。医生根据待治疗疾病调整这些疗法。

本发明的产品可用作激酶催化反应的抑制剂。FAK、KDR和Tie2是本发明产品特别用作抑制剂的激酶。

选择下面这些激酶的理由如下：

FAK

FAK是一种细胞质酪氨酸激酶，它在由整合素传送的信号转导中起到重要的作用，是细胞粘附的异源二聚受体家族。FAK和整合素共存于称之粘着斑的膜部结构中。在许多细胞种类中已显示，FAK对酪氨酸残基的活化及其磷酸化作用，尤其是其对酪氨酸397的自磷酸化，取决于整合素与它们的细胞外配体连接，因此在细胞粘着时受到诱导[KornbergL，等人，《J.Biol.Chem.》，267(33)：23439-442.(1992)]。FAK在酪氨酸397上的自磷酸化说明了另一种酪氨酸激酶Src通过其SH2域的结合位点[Schaller等人，《Mol.Cell.Biol.》，14：1680-1688，1994；Xing等人，《Mol.Cell.Biol.》，5：413-421，1994]。然后Src能够使FAK在酪氨酸925上进行磷酸化，从而补充Grb2衔接蛋白，诱发在某些细胞中在细胞增殖控制下涉及ras和MAP激酶途径的激活[Schlaepfer等人，《自然》(Nature)；372：786-791，1994；Schlaepfer等人，《Prog.Biophy.Mol.Biol.》，71：435-478，1999；Schlaepfer和Hunter，《J.Biol.Chem.》，272：13189-13195，1997]。FAK激活还能引起jun NH₂-末端激酶(JNK)信号传导通路，导致细胞发展成细胞周期的G1期[Otkay等人，《J.Cell.Biol.》，145：1461-1469，1999]。磷脂酰肌醇-3-OH激酶(PI3-激酶)也在酪氨酸397上与FAK结合，对于PI3-激酶激活来说，这种相互作用是必要的[Chen和Guan，《Proc.Nat.Acad.Sci.USA》，91：10148-10152，1994；Ling等人，《J.Cell，Biochem.》，73：533-544，1999]。FAK/Src配合物使各种各样的基质(如桩蛋白和成纤维细胞中的p130CAS)发生磷酸化[Vuori等人，《Mol.Cell.Biol.》，16：2606-2613，1996]。

许多研究成果支持FAK抑制剂可用于治疗癌症的假说。研究表明，FAK可在活体外细胞增殖和/或存活中起到重要的作用。例如，某些作者已证明，在CHO细胞中p125FAK过表达导致加速G1到S的过渡，表明p125FAK促进细胞增殖[Zhao J.-H等人，《J.Cell.Biol.》，143：1997-2008，1998]。其它作者已指出用FAK反义寡核苷酸治疗的肿瘤细胞失去其附着力，开始凋亡(Xu等人，《Cell growth Differ.》，4：413-418，1996)。人们还证明FAK促进体外细胞迁移。因此，FAK表达的缺陷成纤维细胞(FAK“敲除”小鼠)具有圆形形态，和细胞迁移对趋化信号反应的缺陷，FAK再表达消除了这些缺陷[DJ.Sieg等人，J.Cell，Science.112：2677-91，1999]。FAK的C端域(FRNK)的过表达阻断了粘附细胞拉长，减少细胞体外迁移[Richardson A.和Parsons J.T.《自然》，380：538-540，1996]。FAK在细胞CHO、COS或在人星形细胞瘤细胞中过度表达促进细胞迁移。在活体外，在许多细胞种类中促进细胞增殖和迁移涉及FAK，表明FAK在肿瘤过程中具有潜在作用。最近的研究已有力地证明在人星形细胞瘤细胞中引入FAK表达后，体内肿瘤细胞增殖增加[Cary LA.等人，《J.Cell Sci.》，109：1787-94，1996；WangD等人，《J.Cell Sci.，113：4221-4230，2000]。此外，人活组织检查的免疫组织化学研究已证明，FAK在前列腺癌、乳腺癌、甲状腺癌、结肠癌、黑色素瘤癌、脑癌和肺癌中过度表达，FAK的表达水平与最具有侵袭表型的肿瘤直接相关[Weiner TM等人，《柳叶刀》(Lancet)342(8878)：1024-1025，1993；Owens等人，《癌症研究》(CancerResearch)55：2752-2755，1995；Maung K.等人，《癌基因》(Oncogene)18：6824-6828，1999；Wang D等人，J.Ce1l Sci.113：4221-4230，2000]。

KDR

KDR(激酶插入域受体)(也称之VEGF-R2(血管内皮生长因子受体2))基本上在内皮细胞中表达。这种受体固定血管生成因子VEGF，从而通过激活其细胞内激酶域起到转导信号媒介的作用。直接抑制VEGF-R2的激酶活性能够减少在外生VEGF(血管内皮生长因子)存在下的血管生成现象(Strawn等人，《癌症研究》(Cancer Research)，1996，第56期，第3540-3545页)。特别借助VEGF-R2突变体证明了这个过程(Millauer等人，《癌症研究》，1996，第56期，第1615-1620页)。VEGF-R2受体似乎对除了与VEGF血管生成活性有关的成人不起任何作用。因此，VEGF-R2的激酶活性的选择性抑制剂仅应该证明毒性不大。

除了在该动态血管生成过程中这个主要作用外，近来的结果表明，VEGF的表达有助于肿瘤细胞在化疗和放疗后的存活，因此强调了KDR抑制剂与其它剂的潜在协同效应(Lee等人，《癌症研究》，2000，第60期，第5565-5570页)。

Tie2

Tie-2(TEK)是内皮细胞特异的酪氨酸激酶受体族的一员。Tie2是第一种具有酪氨酸激酶活性的受体，人们同时知道其刺激受体自磷酸化和细胞信号的激动剂(血管生成素1或Angl)[S.Davis等人(1996)，《细胞》(Cell)87，1161-1169]与拮抗剂(血管生成素2或Ang2)[P.C.Maisonpierre等人(1997)，《科学》(Science)227，55-60]。血管生成素1与VEGF在新血管形成最终期内可以起协同作用[AsaharaT.，《Circ.Res.》，(1998)，233-240]。Tie2表达或Ang???表达的敲除实验和转基因操作得到具有血管形成缺陷的动物[D.J.Dumont等人(1994)，Genes Dev.8，1897-1909和C.Suri(1996)，《细胞》87，1171-1180]。Angl与其受体连接导致Tie2激酶区自磷酸化，这对于新血管形成以及对于血管与周细胞和平滑肌细胞的恢复和相互作用是必要的；这些现象有助于新形成血管的成熟和稳定[P.C.Maisonpierre等人(1997)，《科学》227，55-60]。Lin等人(1997)J.Clin.Invest.100，8：2072-2078和Lin P.(1998)PNAS95，8829-8834已证明，腺病毒感染或Tie-2细胞外域(Tek)注入乳腺肿瘤和黑色素瘤的干片摄影模型时，肿瘤生长和血管形成的抑制作用以及肺转移降低。

Tie2抑制剂可以用于不适当地发生新血管形成的情形中(即在糖尿病视网膜病、慢性炎症、牛皮癣、多发性出血性肉瘤、黄斑变性造成的慢性血管形成、类风湿关节炎、婴幼儿血管瘤和癌症中)。

定义

术语“卤素”系指选自F、Cl、Br和I的元素。

术语“烷基”系指有1-12个碳原子的直链或支链饱和烃取代基。烷基取代基实例是甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、3，3-二甲基丁基、庚基、1-乙基戊基、辛基、壬基、癸基、十一烷基和十二烷基取代基。

术语“烯基”系指有一个或多个不饱和性(insaturation)的、有2-12个碳原子的直链或支链烃取代基。这些取代基实例是乙烯基、1-甲基乙烯基、丙-1-烯基、丙-2-烯基、Z-1-甲基丙-1-烯基、E-1-甲基丙-1-烯基、Z-1，2-二甲基丙-1-烯基、E-1，2-二甲基丙-1-烯基、丁-1，3-二烯基、1-亚甲基(methylidènyl)-丙-2-烯基、Z-2-甲基-丁-1，3-二烯基、E-2-甲基丁-1，3-二烯基、2-甲基-1-亚甲基丙-2-烯基、十一碳-1-烯基和十一碳-10-烯基取代基。

术语“炔基”系指有2-12个碳原子的直链或支链烃取代基，它的一对相邻碳原子有至少两个不饱和性。炔基取代基的实例是乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、和丁-1-炔基取代基。

术语“芳基”系指有6-14个碳原子的单环或多环芳族取代基。苯基、萘-1-基、萘-2-基、蒽-9-基、1，2，3，4-四氢萘-5-基和1，2，3，4-四氢萘-6-基取代基是芳基取代基的实例。

术语“杂芳基”系指有1-13个碳原子和1-4个杂原子的单环或多环杂芳族取代基。吡咯-1-基、吡咯-2-基、吡咯-3-基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、噻唑基、异唑基、异噻唑基、1，2，4-三唑基、二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂吲哚基、喹啉基、异喹啉基、咔唑基和吖啶基取代基是杂芳基取代基的实例。

术语“杂原子”本文系指与碳不同的至少二价的原子。N、O、S、和Se是杂原子的实例。

术语“环烷基”系指有3-12个碳原子的饱和或部分不饱和环状烃取代基。环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环戊二烯基、环己基、环己烯基、环庚基、双环[2.2.1]庚基、环辛基、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基和全氢萘基取代基是环烷基取代基的实例。

术语“杂环基”系指有1-13个碳原子和1-4个杂原子的饱和或部分不饱和的环烃取代基。优选地，该饱和或部分不饱和的环状烃取代基应是单环的，含有4或5个碳原子和1-3个杂原子。

术语“取代的”系指与H不同的一个或多个取代基，例如卤素；烷基；芳基；杂芳基，环烷基；杂环基；烯基；炔基；OH；O-烷基；O-烯基；O-芳基；O-杂芳基；NH₂；NH-烷基；NH-芳基；NH-杂芳基；N-烷基-烷基′；SH；S-烷基；S-芳基；S(O₂)H；S(O₂)-烷基；S(O₂)-芳基；SO₃H；SO₃-烷基；SO₃-芳基；CHO；C(O)-烷基；C(O)-芳基；C(O)OH；C(O)O-烷基；C(O)O-芳基；OC(O)-烷基；OC(O)-芳基；C(O)NH₂；C(O)NH-烷基；C(O)NH-芳基；NHCHO；NHC(O)-烷基；NHC(O)-芳基；NH-环烷基；NH-杂环基、CONH-杂环基、CO-杂芳基、CO-杂环基、NHCO-杂芳基、NHCO-杂环基、NHCONH-烷基。

本发明还有一个目的是式(I)产品的制备方法。

可以采用有机化学的常规方法制备本发明的产品。下述流程图1说明了有关吡唑并[3，4-b]吡啶的实施例1制备所采用的方法。在这方面，它们不应构成本发明涉及要求保护化合物制备方法保护范围的限制。

流程图1

下述流程图2说明了有关吡唑并[4，3-c]吡啶的实施例制备采用的方法。在这方面，它们不应构成本发明涉及要求保护化合物制备方法的保护范围的限制。

流程图2：

流程图3：吡唑并[3，4-c]吡啶的制备方法(非限制性的)：

下述流程图4说明了涉及硼酸盐衍生物链的实施例制备采用的方法。

流程图4：

下述流程图5说明了制备4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺采用的方法。

流程图5：

下述流程图6说明了制备4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺的脲衍生物采用的方法。

流程图6：

下述流程图7说明了涉及吡唑并[4，3-c]吡啶的实施例制备采用的可选择的方法

流程图7

下述流程图8说明了制备吡唑并[3，4-c]吡啶采用的可选择的方法。

流程图8

本技术领域的技术人员应该理解，为了实施上述本发明的方法，可需要加入氨基、羧基和醇官能的保护基团，以避免副反应。这些基团是能除去而不影响分子剩余部分的基团。作为氨基官能的保护基团实例，可以列举氨基甲酸叔丁酯，它可以用三氟乙酸或碘三甲基硅烷再生，乙酰基可以在酸性介质(例如盐酸)中进行再生。作为羧基官能的保护基团，可以列举酯(例如甲氧基甲酯、苄酯)。作为醇官能的保护基团，可以列举能在酸性介质中再生或通过催化氢化再生的酯(例如苯甲酰基酯)。T.W.GREENE等人在《有机合成中的保护基团》(Protective Groupsin Organic Synthesis)第三版，1999，Wiley-Interscience中，描述了其它可用的保护基团。

本发明的另一个目的是式(II)化合物：

式中X、Y、Z是如前面所定义的，并且G是适合Suzuki偶联反应的卤素原子，在制备如权利要求1所限定的式(I)产品中作为中间产物。

本发明的另一个目的是式(III)化合物：

式中：

X、Y、Z是如前面所定义的，

X₃是Ar-L-A，其中Ar，L和A是如前面所定义的，或者Ar-L，其中Ar是如前面所定义的，并且L是NH₂或NO₂，

X₁和X₂不同，并且独自地选自CN、Cl、-NH-NH₂、-N(Boc)-NH(Boc)、-N(Boc)-N(Boc)₂，作为制备根据权利要求1所限定的式(I)产品的中间产物。

这些式(I)化合物可以采用通常的已知方法(例如结晶、色谱法或萃取)进行分离与纯化。

式(I)化合物的对映异构体和非对映异构体也是本发明的一部分。

在溶剂(例如有机溶剂，像醇、酮、醚或含氯溶剂)中，通过有机或无机酸的作用，可以将含有碱性残基的式(I)化合物任选地转化成与这样一些酸的加成盐。

根据本身已知的方法，含有酸性残基的式(I)化合物可以任选地转化成金属盐或与含氮碱的加成盐。在溶剂中，通过金属碱(例如碱金属或碱土金属碱)、氨、胺或胺盐与式(I)化合物的作用可以得到这些盐。采用通常的方法分离生成的盐。

这些盐也是本发明的一部分。

当本发明的产品有至少一个游离碱官能团时，可以让所述的产品与无机或有机酸进行反应制备在药物上可接受的盐。在药物上可接受的盐包括氯化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、焦硫酸盐、酸式硫酸盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丙烯酸盐、4-羟基丁酸盐、辛酸盐、己酸盐、癸酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、戊二酸盐、己二酸盐、庚二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、苯基乙酸盐、扁桃酸盐、癸二酸盐、辛二酸盐、苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、甲烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐、丙磺酸盐、二甲苯磺酸盐、水杨酸盐、肉桂酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐、葡糖醛酸盐、半乳糖醛酸盐。

当本发明产品具有至少一个游离酸官能团时，通过所述的产品与无机或有机碱的反应可以制备在药物上可接受的盐。在药物上可接受的碱包括碱金属或碱土金属阳离子(如Li、Na、K、Mg、Ca)氢氧化物，碱性胺化合物，例如氨、精氨酸、组氨酸、哌啶、吗啉、哌嗪、三乙胺。

通过作为说明本发明的下述实施例也描述了本发明。

使用联用的Micromass型LCT与HP1100设备进行LC/MS分析。使用波长范围200-600nm的HP G1315A二极管阵列检测器和Sedex65光分散检测器测定了产物丰度。采集了在范围180-800内的质谱。这些数据利用Micromass MassLynx软件进行分析。使用Hypersil BDS C18，3μm(50×4.6mm)柱进行分离，使用5-90％在含有0.05％(v/v)三氟乙酸(TFA)的水中乙腈溶液，该乙腈含有0.05％(v/v)三氟乙酸(TFA)，在3.5分钟内以1ml/min流量进行线性梯度洗脱。包括柱再平衡时间的总分析时间是7分钟。采用电喷雾技术(ES⁺)，使用Platform II设备(Micromass)测定MS谱。描述了观察到的主要离子。

采用毛细技术，使用Mettler FP62设备，以每分钟升温2℃在30-300℃范围内测定了这些熔点。

采用LC/MS纯化：

采用LC/MS，使用Waters FractionsLynx系统可以纯化这些产物，该系统由Waters600型梯度泵、Waters515型再生泵、Waters ReagentManager稀释泵、Waters2700型自动注射仪、两台Rheodyne LabPro型阀、Waters996型二极管阵列检测器、Waters ZMD型质谱仪和Gilson204型馏分收集器组成。该系统用Waters FractionLynx软件进行控制。使用两个Waters Symmetry柱(C₁₈，5μm，19×50mm，目录参考186000210)交替地进行分离，一个柱用于使用含有0.07％(v/v)三氟乙酸的水/乙腈混合物95/5(v/v)的再生过程，同时另一个柱用于分离过程。使用5-95％含有0.07％(v/v)三氟乙酸的乙腈水溶液的线性梯度，该乙腈含有0.07％(v/v)三氟乙酸，以流量10ml/min洗脱这些柱。在分离柱的出口处，使用LCPacking Accurate分离出千分之一的流出物，用甲醇以流量0.5ml/min稀释，再送到检测器，其中75％送到二极管阵列检测器，其余25％送到质谱仪。流出物的剩余部分(999/1000)送到馏分收集器，在收集器中FractionLynx软件没有检测到期望产物质量时，则弃去该流。把期望产物的分子式提供给FractionLynx软件，检测的质量信号相应于离子[M+H]⁺和/或[M+Na]⁺时，该软件启动收集该产物。在某些情况中，取决于LC/MS分析结果，检测到相应于[M+2H]⁺⁺的强离子时，相应于计算分子量一半(MW/2)的值也提供给FractionLynx软件。在这些条件下，检测到离子[M+2H]⁺⁺和/或[M+Na+H]⁺⁺的质量信号时，也启动收集。在已标皮重的玻璃管中收集这些产物。收集后，在Savant AES 2000或Genevac HT8离心蒸发器中蒸去这些溶剂，称量蒸去溶剂后的试管重量可以确定产物的质量。

实施例1

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲

2-氟-3-碘-吡啶

在-75℃下，往0.103mol LDA在200mL THF中的溶液里，添加10g2-氟吡啶在50mL THF中的溶液。该黄色溶液在-75℃下搅拌3小时，然后添加80mL THF中的26.2g碘。该反应混合物在-75℃下搅拌1.5小时，然后在该温度下添加50mL水。使其温度上升，然后在0℃下添加额外的100mL水。通过添加硫代硫酸钠使悬浮液脱色。该混合物用乙醚提取。有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。油状残留物用siliceSi60(40-63μm)(环己烷/乙醚，95∶5)纯化。得到的残留物溶于乙醚中，脱水除去浅灰褐色不溶物。真空干燥后，得到10.21g2-氟-3-碘吡啶白色粉末。

MS(ES+)：m/z＝224[MH+]

2-氟-4-碘-烟腈

在-75℃下，往21.5mmol LDA在20mL THF中的溶液里，添加在20mL THF中的4.8g2-氟-3-碘吡啶。该黄色溶液在-75℃下搅拌1h10，然后在该温度下加入在20mL THF中的3.9g对苯磺酰氰。该反应混合物在-75℃下搅拌2小时，然后在该温度下添加20mL水。使温度上升，然后在0℃下添加额外的40mL水。该混合物用乙醚提取。有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。得到的棕色树脂用silice Si60(40-63μm)(环己烷/乙醚，8：2)进行纯化。得到667mg2-氟-4-碘-烟腈黄色粉末，和第二部分2.1g2-氟-3-碘-异烟腈淡黄色粉末状。

MS(ES+)：m/z＝249[MH+]

2-肼基-4-碘-烟腈

在20℃下，往在20mL MeOH中的1.2g2-氟-4-碘-烟腈里的溶液中，添加2.4mL肼水合物。该黄色悬浮液在20℃下搅拌20min，然后过滤。沉淀用甲醇洗涤，真空干燥后得到947mg2-肼基-4-碘-烟腈白色粉末状。

MS(ES+)：m/z＝261[MH+]

(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼二羧酸二叔丁酯和N.N′，N′-(3-氰基-4-碘- 吡啶-2-基)-肼三羧酸三叔丁酯

在4℃下，往234mg 2-肼基-4-碘-烟腈、27.5mg N，N-二甲基氨基吡啶和0.316mL三乙胺在11mL二氯甲烷中的混合物里，添加在5mL二氯甲烷中的492mg二碳酸二叔丁酯。该反应物在4℃下搅拌30min，然后将温度升到20℃，并搅拌5h。添加水，该混合物用乙酸乙酯提取。有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。油状黄色残留物使用预装满BiotageKP-Silde60SiO₂32-63μm柱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，99.5∶0.5，然后99∶1)进行纯化，得到2个主要部分，其中第一个部分为110mgN，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯黄色粉末(光谱MS(ES+)：m/z＝561[MH+])，第二个部分为202mg(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-二羧酸二叔丁浅黄色油。该黄色油用预装满的Biotage KP-Silde60SiO₂32-63μm柱进行再纯化(洗脱剂：环己烷/乙酸乙酯，95∶5，然后9∶1)，得到114mg(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-二羧酸二叔丁酯浅灰褐色粉末。MS(ES+)：m/z＝461[MH+]

N，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)肼-三羧酸三叔丁酯

在4℃下，往925mg2-肼基-4-碘-烟腈、109mg N，N-二甲基氨基吡啶和2.6mL三乙胺在45mL二氯甲烷中的混合物里，添加在20mL二氯甲烷中的3.9g二碳酸二叔丁酯(Boc₂O)。该反应物在4℃下搅拌30min，然后将温度升到20℃。添加水，该混合物用乙酸乙酯提取，再用硫酸镁干燥，减压浓缩。褐色油状残留物采用silice Si60(40-63μm)(二氯甲烷/甲醇，98∶2)进行纯化，得到1.2g N，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯黄色粉末。

PF＝138℃(Kfler)。

MS(ES+)：m/z＝561[MH+]

Suzuki(X＝C)与二-boc衍生物的偶联

往110mg(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼二羧酸二叔丁酯和122mg1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲在5.5mL二烷中的溶液里，添加1.7mL水中的57mg NaHCO₃。然后添加26mg四(三苯基膦)钯，该反应物在100℃下加热回流。2.5h后，该澄清黄色溶液冷却到20℃，添加10mL乙酸乙酯。该有机相用水洗涤2次，每次8mL，再用8mL盐水洗涤。用硫酸镁干燥并减压浓缩后，残留的黄色油用预装满的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μm柱进行纯化(环己烷/乙酸乙酯，9∶1)。得到114mg(3-氰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-苯基}-吡啶-2-基)-肼二羧酸二叔丁酯。

MS(ES+)：m/z＝631[MH+]

Suzuki(X＝C)与三-boc衍生物的偶联反应

往108mg N，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯和98mg1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲在4.5mL二烷中的溶液里，添加在1.4mL水中的45.4mgNaHCO₃。然后添加20.3mg四(三苯基膦)钯，该反应物在100℃下进行加热回流。2.5h后，该澄清的黄色溶液冷却到20℃，添加10mL乙酸乙酯。有机相用水洗涤2次，每次8mL，再用8mL盐水洗涤。用硫酸镁干燥并减压浓缩后，残留的黄色油用预装满的Biotage KP-Sil de 60SiO₂32-63μm柱纯化(环己烷/乙酸乙酯，9∶1再7∶3)。得到86mg馏分N，N′，N′-(3-氰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-苯基}-吡啶-2-基)-肼三羧酸三叔丁酯，和31mg馏分(3-氰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-苯基}-吡啶-2-基)-肼二羧酸二叔丁酯。

MS(ES+)：m/z＝731[MH+]

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基- 苯基)-脲(使用diboqué衍生物)

在20℃下，往111mg(3-氰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-苯基}-吡啶-2-基)-肼二羧酸二叔丁酯在4mL二氯甲烷中的溶液里，添加0.3mL含有10％茴香醚的三氟乙酸，该反应搅拌4h。该反应介质进行减压浓缩，得到橙红色固体。该残留物用预装满的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，95∶5-90∶10；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到56mg1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲浅灰褐色粉末，其特征如下：

IR(KBr)：3370；3300；1717；1604；1541；1443；1317；1310；1205；1184；1122；1114；1069和818cm^-1

¹H NMR(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.58(宽s，2H)；6.91(d，J＝5.0Hz，1H)；7.41(dm，J＝9.0Hz，1H)；7.52(宽t，J＝9.0Hz，1H)；7.56(宽d，J＝8.5Hz，2H)；7.68(宽d，J＝8.5Hz，2H)；8.37(d，J＝5.0Hz，1H)；8.62(宽dd，J＝2.5et7.5Hz，1H)；9.13(展开的m，1H)；9.57(展开的m，1H)；12.25(宽s，1H)

PF＝175℃分解(Kfler)。

类似地，可以按照如下方法由triboqué衍生物得到1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲：

在20℃下，往81mg N，N′，N′-(3-氰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-苯基}-吡啶-2-基)-肼三羧酸三叔丁酯衍生物在3mL二氯甲烷中的溶液里，添加0.2mL含有10％茴香醚的三氟乙酸，该反应搅拌一夜。该反应介质进行减压浓缩，得到橙红色固体。该残留物用预装满的BiotageKP-Sil de60SiO₂32-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，先95∶5，然后90∶10；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到27mg1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲浅灰褐色粉末。

实施例2

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲

Suzuki偶联反应(X＝N)

往150mg N，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯和136mg1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲在6.2mL二烷中的溶液里，添加在1.9mL水中的63mg NaHCO₃。然后添加29mg四(三苯基膦)钯，该反应物在100℃下进行加热回流。2.5h后，该黄色溶液冷却到20℃，然后添加10mL乙酸乙酯。有机相用水洗涤2次，每次8mL，再用8mL盐水洗涤。用硫酸镁干燥并减压浓缩后，残留的黄色油用预装满的Biotage KP-Sil de60SiO232-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，98∶2-95∶5；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到67mg N，N′，N′-{3′-氰基-6-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-[3，4′]二吡啶基-2′-基}-肼三羧酸三叔丁酯(光谱MS(ES+)：m/z＝732[MH+])和55mg{3′-氰基-6-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-[3，4′]联吡啶-2′-基}-肼二羧酸二叔丁酯(光谱MS(ES+)：m/z＝632[MH+])。

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b)吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲

在20℃下，往55mg{3′-氰基-6-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-[3，4′]联吡啶-2′-基}-肼二羧酸二叔丁酯在2mL二氯甲烷中的溶液里，添加0.15mL含有10％茴香醚的三氟乙酸，该反应搅拌2h。

分别地，在20℃下，往67mg N，N′，N′-{3′-氰基-6-[3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲基]-[3，4′]联吡啶-2′-基}-肼三羧酸三叔丁酯衍生物在3mL二氯甲烷的溶液里，添加0.16mL含有10％茴香醚的三氟乙酸，该反应搅拌2h。

这些棕红色反应介质合并，减压浓缩得到橙红色固体。该残留物用预装满的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，95∶5-90∶10再70∶30；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到产物溶于乙酸乙酯中，用水洗涤，除去三氟乙酸铵。用硫酸镁干燥并减压浓缩后，得到58mg 1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲浅黄褐色粉末，其特征如下：

IR谱(KBr)：3209；1708；1610；1571；1441；1376；1302；1250；1168；1119；1071；822和616cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.70(宽s，2H)；7.00(d，J＝5.0Hz，1H)；7，45(dm，J＝9.0Hz，1H)；7.55(宽t，J＝9.0Hz，1H)；7.65(宽d，J＝8.5Hz，1H)；8.06(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；8.41(d，J＝5.0Hz，1H)；8.54(d，J＝2.5Hz，1H)；8.67(dd，J＝2.5和7.5Hz，1H)；10.15(宽s，1H)；11.15(非常展开的m，1H)；12.35(展开的m，1H)

PF＝>260℃(Kfler)。

实施例3

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲

3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-醇

1.2g2-羟基-4-甲氧基-烟腈和30mL肼水合物的混合物在高压瓶(bombe)中升温到140℃达18h。然后该反应介质蒸发至干。该残留物溶于乙醚中，得到的悬浮液进行过滤。得到1.1g 3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-醇，呈灰色固体状。

SM：150⁺＝M⁺°；PF＝240℃déc.(Kfler)。

4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺

往在45℃下熔化的3.5g POBr₃里，添加0.4g 3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-醇，然后该悬浮液升到70℃达4h。进行冷却，小心地用碳酸氢钠溶液进行水解。该混合物用乙酸乙酯提取。分离有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后减压浓缩。得到0.33g 4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺，呈奶油色固体状。

SM：212⁺＝M^+o；PF＝230℃ déc.(Kfler)。

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基- 苯基)-脲

往53mg 4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺在6mL二烷中的溶液里，添加127mg 1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲、在1.8mL水中的60mg碳酸氢钠和30mg四(三苯基膦)钯。该反应物在100℃浴中加热2h。进行冷却，再添加乙酸乙酯。该混合物用水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，再减压浓缩。油状残留物用预装满的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，90∶10-70∶30；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到34mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲奶油色固体状，其特征如下：

SM：431⁺＝MH⁺

IR谱(KBr)：3354；1717；1605；1542；1442；1339；1313；1181；1119；816和615cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.72(宽s，2H)；7.20(d，J＝5.5Hz，1H)；7.41(宽m，1H)；7.51(宽t，J＝9.5Hz，1H)；7.59-7.72(m，4H)；8.22(d，J＝5.5Hz，1H)；8.65(宽d，J＝7.5Hz，1H)；8.96(宽s，1H)；9.37(s，1H)；12，1(宽s，1H)。

实施例4

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲

往106mg4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺在10mL二烷中的溶液里，添加252mg 1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲、在3mL水中的120mg碳酸氢钠和60mg四(三苯基膦)钯。该反应物在100℃浴中加热2h。进行冷却，再添加乙酸乙酯，该混合物用水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，再减压浓缩。油状残留物用预装满的Biotage KP-Sil de 60SiO₂32-63μ柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，90∶10-70∶30；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到35mg 1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色固体，其特征如下：

SM：432⁺＝MH⁺

IR谱(KBr)：3404；3224；1693；1609；1572；1441；1340；1300；1246；1119；819和615cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.88(宽s，2H)；7.25(d，J＝6.0Hz，1H)；7.44(宽m，1H)；7.50-7.53(m，2H)；8.15(dd，J＝2.5et8.5Hz，1H)；8.26(d，J＝6.0Hz，1H)；8.63(d，J＝2.5Hz，1H)；8.70(宽d，J＝7.5Hz，1H)；10.15(宽s，1H)；11.3(非常展开的m，1H)；12.2(宽s，1H)。

实施例5

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

1-(2-甲氧基-4-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲

在20℃下，往1g 2-甲氧基-4-(三氟甲基)苯胺和128mg4-二甲基氨基吡啶在150mL四氢呋喃和1.5mL三乙胺中的溶液里，添加1.28g 2-(4-异氰酸根基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷。4h后，该反应减压蒸发至干。残留物用乙酸乙酯和水的混合物溶解。有机相用硫酸镁干燥，再减压浓缩，残留的黄色油用预装满的Biotage kp-sil 60SiO₂32-63μm柱纯化(洗脱剂：环己烷/乙酸乙酯，8∶2)。得到淡黄色粉末，将它溶于甲醇中。生成白色不溶物，采用过滤进行分离，然后滤液减压蒸发至干，得到0.47g 1-(2-甲氧基-4-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲淡黄色粉末。

SM∶437⁺=MH⁺

¹H NMR谱(300 MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.30(s∶12H)；3.99(s∶3H)；7.22(d,J=9Hz∶1H)；7.34(dd,J=9和1Hz∶1H)；7.50(d，J=9:2H)；7.63(d，J=9Hz：2H)；8.56(mt：2H)；9.58(s1H)。

1-[4-(3-氰基-2-肼基-吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲的二-boc和三-boc衍生物

在20℃下，往O.27g N,N’,N’-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯在14mL二烷中的溶液里，添加273mg 1-(2-甲氧基-4-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲。往该溶液里，添加114mg碳酸氢钠在4mL水中的溶液，再添加51mg四(三苯基膦)钯。该反应物在100℃下加热回流2.5h。澄清的黄色溶液进行冷却，再添加乙酸乙酯。该混合物用水洗涤，再用盐水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，再减压浓缩。得到的橙黄色树脂用预装满的biotage kp-sil

SiO₂32-63μm柱纯化(洗脱剂：环己烷/乙酸乙酯，7∶3，然后二氯甲烷/溶液a，9∶1；溶液a=二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到0.33g 1-[4-(3-氰基-2-肼基-吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲的-二-boc衍生物和三-boc衍生物混合物，呈黄色粉末状。

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3.4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

在20℃下，往272mg 1-[4-(3-氰基-2-肼基-吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲的二-boc衍生物和三-boc衍生物混合物在7.7mL二氯甲烷中的溶液里，添加0.62mL含有10％茴香醚的三氟乙酸。搅拌3h后，该橙红色介质减压浓缩至干。残留的橙红色油用预装满的Biotage KP-Sil de SiO₂ 32-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，90∶10-70∶30；溶液A=二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到浅黄褐色粉末，用乙酸乙酯收回。该溶液用水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，再减压浓缩，得到61mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

SM：443⁺＝MH⁺

IR谱(KBr)：3380；1706；1675；1600；1539；1314；1269；1134；1117；822和622cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：3.99(s，3H)；4.59(宽s，2H)；6.91(d，J＝5.0Hz，1H)；7.22(d，J＝8.5Hz，1H)；7.34(宽dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；7.55(宽d，J＝8.5Hz，2H)；7.66(宽d，J＝8.5Hz，2H)；8.37(d，J＝5.0Hz，1H)；8.56-8.61(m，2H)；9.66(s，1H)；12.25(宽s，1H)。

PF＝>260℃.(Kfler).

实施例6

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

1-(5-溴-吡啶-2-基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

在0℃下，把在30mL四氢呋喃中的3.32g2-甲氧基-5-三氟甲基-苯胺滴加到1.8g三光气在180mL四氢呋喃中的溶液里。然后加入4.95mL三乙胺，该反应物在该温度下搅拌10min。将该温度升高到20℃，搅拌1h15。再滴加3g2-氨基-5-溴吡啶在30mL THF中的溶液。16h后，悬浮液进行过滤，然后滤液减压浓缩。残留物溶于乙酸乙酯和水的混合物中。得到白色不溶沉淀，过滤，用乙酸乙酯洗涤，然后真空干燥。得到3.3g1-(5-溴-吡啶-2-基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲白色粉末。

SM：390⁺＝MH⁺

1-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲

在20℃下，往51mg三环己基膦在12mL二烷中的溶液里，添加30mg二(二亚苄基丙酮)钯。该紫棕色溶液搅拌30min，然后添加500mg1-(5-溴-吡啶-2-基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲和190mg乙酸钾。该悬浮液进行加热回流3h15，然后将该紫棕色溶液冷却到20℃，减压浓缩至干。得到灰绿色残留物，用乙酸乙酯和水混合物洗涤。过滤有机相，黄色滤液减压浓缩。得到的固体残留物溶于甲醇中。生成沉淀，过滤，用甲醇和乙酸乙酯洗涤。得到244mg 1-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲淡黄色粉末。

SM∶437⁺=M⁺

¹H NMR谱(300 MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1-32(s：12H)；4.03(s:3H)；7.25(d，J=9.5Hz：1H)；7.34(宽d,J=9Hz：lH)；7.39(dd,J=9.5和1Hz：1H)；7.96(dd,J=9和2Hz：1H)；8.52(d，J＝1Hz：1H)；8.63(d,J=2Hz：1H)；10.20(s：1H)；11.50(宽s：1H)。

1-(3′-氰基-2′-肼基-[3，4′]二吡啶基-6-y1)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲的-二-boc和三-boc衍生物

在20℃下，往0.3g N，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯在16.5mL二嚼烷中的溶液里，添加234mg 1-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲。再添加126mg碳酸氢钠在4.5mL水中的溶液，然后添加57mg四(三苯基膦)钯。得到的黄色悬浮液在100℃下加热回流2.5h。冷却后，添加乙酸乙酯。有机相用水洗涤，再用盐水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩至干。残留的橙黄色树脂用预装满的biotage kp-sil

SiO₂32-63μm柱纯化(洗脱剂：环己烷/乙酸乙酯，7∶3，然后二氯甲烷/溶液A，95∶5；溶液A=二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到265mg 1-(3′-氰基-2′-肼基-[3，4′]联吡啶-6-基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲的二-boc和三-boc衍生物混合物，呈黄色粉末状。

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5- 三氟甲基-苯基)-脲

在20℃下，往242mg 1-(3′-氰基-2′-肼基-[3，4′]二吡啶基-6-y1)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲的二-boc和三-boc衍生物混合物在7mL二氯甲烷中的溶液里，添加0.8mL含有10％茴香醚的三氟乙酸。搅拌2.5h后，橙黄色反应介质减压浓缩至干。残留的橙黄色油用预装满的BiotageKP-Sil de SiO₂ 32-63μm柱纯化(二氯甲烷/溶液A梯度，90∶10-70∶30；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到130mg 1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲浅黄褐色粉末，其特征如下：

SM：444⁺＝MH⁺

IR谱(KBr)：3420；3219；1684；1613；1586；1438；1303；1271；1247；1136；834和622cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.02(s，3H)；4.72(非常展开的m，2H)；7.01(d，J＝5.0Hz，1H)；7.24(d，J＝8.5Hz，1H)；7.37(宽dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；7.48(宽d，J＝8.5Hz，1H)；8.03(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；8.41(d，J＝5.0Hz，1H)；8.59(d，J＝2.5Hz，1H)；8.64(d，J＝2.0Hz，1H)；10.2(s，1H)；11.5(非常展开的m，1H)；12.35(宽s，1H)。

PF＝>260℃.(Kfler)。

实施例7

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基- 苯基)-脲

1-[4-(5-氯-4-氰基-吡啶-3-基)-苯基1-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲：

往346mg3，5-二氯-异烟腈和959mg1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲在24mL二烷中的溶液里，添加在14.4mL水中的462mg NaHCO₃。然后添加462m四(三苯基膦)钯，该反应加热回流5h，在20℃下放置一夜。然后添加20mL水，该混合物用2×60mL乙酸乙酯提取。有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。褐色油用预装满的cartouche Merck de30g SiO₂15-40μm柱纯化(二氯甲烷，然后二氯甲烷/甲醇，99∶1)。得到290mg1-[4-(5-氯-4-氰基-吡啶-3-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色晶体。

MS(ES⁺)：m/z＝435[MH⁺]

¹H NMR谱，400MHz，使用BRUKER AVANCE DRX-400谱仪，化学位移(ppm)，溶剂：在温度303K下，2.50ppm参比的(DMSO-d6)：

7.41(m，1H)；7.51(dd，J＝8.5和10.5Hz，1H)；7.68(宽s，4H)；8.62(dd，J＝2.0和7.0Hz，1H)；8.85(s，1H)；8.94(s，1H)；9.04(展开的m，1H)；9.49(展开的m，1H)。

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基- 苯基)-脲

在20℃下，往145mg 1-[4-(5-氯-4-氰基-吡啶-3-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲在2mL EtOH中的溶液里，添加0.05mL肼水合物。该反应加热回流5h30。该反应是不完全的，添加1mL EtOH和0.05mL肼水合物，再保持回流18h30。回到20℃，在氮气流下浓缩。该残留物采用硅胶色谱法纯化：预装满的30g SiO₂15-40μm Merck柱(二氯甲烷；再二氯甲烷/甲醇，95∶5；然后二氯甲烷/甲醇，1∶1；然后二氯甲烷/甲醇/NH₄OH，82∶15∶3)。回收不纯的浅灰褐色油，在完全相同的条件下再进行色谱法纯化。该产物依然不纯，采用基本制备HPLC进行纯化：条件：柱：Nucleodur Gravity C185μm(N°cat Macherey Nagel：762101；4055902系列；批号3044)；流速：20mL/min；探测254nm(UV118，Gilson)；根据下述方案，10-95％在含有10mM甲酸铵的水中的乙腈梯度：(t(min.)：乙腈(％))：0∶10；2∶10；25∶95；33∶95；34∶10。得到19mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-脲呈黄色粉末。

PF＝196℃(Kffler)

MS谱(ES⁺)：m/z＝431[MH⁺]

¹H NMR谱400MHz，使用BRUKER AVANCE DRX-400谱仪，化学位移(ppm)，溶剂：在温度303K下，2.50ppm参比(DMSO-d6)：

4.61(s，2H)；7.40(m，1H)；7.50(m，3H)；7.66(宽d，J＝8.5Hz，2H)；7.94(s，1H)；8.63(dd，J＝2.0和7.0Hz，1H)；8.74(s，1H)；9.10(展开的m，1H)；9.51(s，1H)；12.3(展开的m，1H)。

IR：(KBr)：1610；1531；1443；1340；1314；1265；1195；1166；1118；1069；820&615cm^-1

实施例8

根据流程图2制备1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基]-苯基]-3-苯基-脲

1-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1.3.2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲

往490mg2-(4-异氰酸根基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2，-二氧杂戊硼烷和203mg三乙胺在5ml四氢呋喃中的溶液里，添加198mg苯胺。在20℃与氩气下，该溶液搅拌12小时。往该反应混合物里添加10ml甲醇。然后在20℃下搅拌15分钟。混合物减压浓缩后，得到630mg 1-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲，其特征如下：

SM：339(+)＝(M+H)(+)

337(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：3332；2976；1656；1593；1543；1400；1361；1143；1092；963；860&655cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：1.29(s，12H)；6.98(宽t，J＝7.5Hz，1H)；7.28(宽t，J＝8.0Hz，2H)；7.41-7，49(m，4H)；7.59(宽d，j＝8.0Hz，2H)；8.70(s，1H)；8.82(s，1H)。

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4.3-c]吡啶-4-基]-苯基]-3-苯基-脲

往如实施例3所述制备的65mg4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺在3ml二烷中的溶液里，添加155mg 1-苯基-3-[4-(4，4，5，5，-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲、在1ml水中的72mg碳酸氢钠和53mg四(三苯基膦)钯。该悬浮液在100℃与氩气下加热2H。冷却后，把该反应混合物倒入50ml水中，再用乙酸乙酯提取3次。合并有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩，得到302mg粗制产物，用预充填的Biotage KP-Silde60SiO₂32-63μM柱纯化(溶液A在二氯甲烷中的梯度5/95-30/70；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨38∶17∶2)。得到23mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基]-苯基]-3-苯基-脲黄色粉末，其特征如下：

SM：344(+)＝M(+)(SM-EI)

IR谱(KBr)：3388；1672；1601；1528；1498；1442；1313；1233；1180；1045；752&693cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：4.71(宽s，2H)；6.99(t，J＝7.5Hz，1H)；7.19(d，J＝5.0Hz，1H)；7.30(t，J＝7.5Hz，2H)；7.48(d，J＝7.5Hz，2H)；7.62(m，4H)；8.21(d，J＝5.0Hz，1H)；8.73(s，1H)；8.89(s，1H)；12.1(宽s，1H)。

PF＝188℃(Kffler)

实施例9

1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

往70mg 4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺在3ml二烷中的溶液里，添加215mg 1-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲(如实施例6描述制备的)、在1ml水中的77mg碳酸氢钠和38mg四(三苯基膦)钯。该悬浮液在80℃与氩下加热2h。冷却后，把该反应物倒入50ml水中，该混合物用乙酸乙酯/甲醇90/10混合物提取3次。合并的有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩。393mg粗制产物用预充填的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μM柱纯化(溶液A在二氯甲烷中的梯度5/95-30/70；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨38/17/2)。得到16mg 1-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

LC-SM：444(+)＝(M+H)(+)

IR谱(KBr)：3657；3387；3308；3223；2925；1685；1610；1580；1439；1351；1302；1246；1166；1135；1116；1037；807&542cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：4.02(s，3H)；4.89(宽s，2H)；7.21-7.28(m，2H)；7.38(d，J＝8.5Hz，1H)；7.46(宽d，J＝8.5Hz，1H)；8.12(dd，J＝2，0和8.5Hz，1H)；8.27(d，J＝5.0Hz，1H)；8.63(d，J＝2.0Hz，1H)；8.69(d，J＝2.0Hz，1H)；10.15(s，1H)；11.65(展开的m，1H)；12.2(宽s，1H)。

PF＝228℃(Kffler)

实施例10

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

往50mg 4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺在3ml二烷中的溶液里，添加122.8mg 1-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲、在1ml水中的99.5mg碳酸钠和54.24mg四(三苯基膦)钯。该悬浮液在80℃与氩气氛下加热22小时。冷却后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，再用水洗涤2次。有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩。438mg粗制产物用预充填的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μM柱纯化(溶液A在二氯甲烷中的梯度5/95-30/70；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨38/17/2)。得到32mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

LC-SM：443(+)＝(M+H)(+)

IR谱(KBr)：3326；1691；1605；1542；1447；1314；1270；1217；1120；1024；812&623cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：3.99(s，3H)；4.73(宽s，2H)；7.19(d，J＝5.0Hz，1H)；7.22(d，J＝8.5Hz，1H)；7.33(宽d，J＝8.5Hz，1H)；7.64(m，4H)；8.21(d，J＝5.0Hz，1H)；8.59(m，2H)；9.63(s，1H)；12.1(宽s，1H)

PF＝200℃(Kffler)

实施例11

N-(2-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

根据流程图4制备的N-(2-{3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷 -2-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

在20℃下，往343mg N1-[2-氨基-4-(三氟甲基)苯基]乙酰胺和39mg4-二甲基氨基吡啶在50mL四氢呋喃与0.45mL三乙胺中的溶液里，添加385mg 2-(4-异氰酸根基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷。在40℃下一夜后，该反应物减压蒸发至干。残留物用二氯甲烷和水的混合物回收。有机相用1N HCl洗涤，白色沉淀进行脱水，用二氯甲烷洗涤，然后真空干燥，得到356mg N-(2-{3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺白色粉末，其特征如下：

SM-ES⁺：464(+)＝(M+H)(+)

SM-ES^-：462(-)＝(M-H)(-)

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.28(s，12H)；2.15(宽s，3H)；7.37(宽d，J＝8.5Hz，1H)；7.50(d，J＝8.5Hz，2H)；7.54(部分掩蔽的d，J＝8.5Hz，1H)；7.61(d，J＝8.5Hz，2H)；8.16(宽s，1H)；8.28(宽s，1H)；9.43(宽s，1H)；9.79(宽s，1H)。

根据与实施例10制备类似的方案，通过Suzuki反应使4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺与N-(2-{3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺偶联。得到N-(2-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺黄色粉末，其特征如下：

SM：470(+)＝(M+H)(+)

468(-)＝(M-H)(-)

514(-)＝(M+甲酸-H)(-)

IR谱(KBr)：3390；1667；1605；1528；1436；1336；1315；1247；1167；1126；1042；813&684cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：2.16(s，3H)；4.72(s，2H)；7.19(d，J＝5.0Hz，1H)；7.37(宽d，J＝8.5Hz，1H)；7.56(d，J＝8.5Hz，1H)；7.64(m，4H)；8.21(d，J＝5.0Hz，1H)；8.28(m，2H)；9.54(宽s，1H)；9.82(宽s，1H)；12.1(宽s，1H)。

PF＝182℃(Kffler)

实施例12

N-(2-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

根据流程图1制备N-(2-{3-[4-(3-氰基-2-肼基-吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺的N，N′，N′三-boc衍生物

在20℃下，往278mg N，N′，N′-(3-氰基-4-碘-吡啶-2-基)-肼-三羧酸三叔丁酯(根据实施例1制备的)在15mL二烷中的溶液里，添加282mgN-(2-{3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺。往该溶液里添加117mg碳酸氢钠在4.2mL水中的溶液，接着添加53mg四(三苯基膦)钯。该反应物在100℃加热回流2.5h。澄清的黄色溶液进行冷却，然后添加乙酸乙酯。该混合物用水洗涤，再用盐水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，再减压浓缩。得到的橙黄色残留物用预充填的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μ柱纯化(洗脱剂?环己烷/乙酸乙酯，7∶3，然后二氯甲烷/溶液A，9∶1；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到239mg N-(2-{3-[4-(3-氰基-2-肼基-吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺的二-boc和三-boc衍生物混合物，呈黄色粉末状。

根据流程图1制备N-(2-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)- 苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

根据实施例6的制备方法，转换N-(2-{3-[4-(3-氰基-2-肼基-吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺的二-boc和三-boc衍生物。得到的产物呈浅黄色粉末状。其特征如下：

SM-ES⁺：470(+)＝(M+H)(+)

IR谱(KBr)：3363；1672；1596；1525；1435；1336；1316；1126；1078&825cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.16(宽s，3H)；4.58(s，2H)；6.91(d，J＝5.0Hz，1H)；7.39(宽d，J＝9.0Hz，1H)；7.52-7.58(m，3H)；7.67(d，J＝8.5Hz，2H)；8.21(宽s，1H)；8.29(宽s，1H)；8.37(d，J＝5.0Hz，1H)；9.52(宽s，1H)；9.84(宽s，1H)；12.25(宽s，1H)。

实施例13

N-(2-{3-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

根据流程图4制备N-(2-{3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2- 基)-吡啶-2-基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

在20℃下，往10mg三环己基膦在2.5mL二烷中的溶液里，添加6mg二(二亚苄基丙酮)钯。该紫褐色溶液搅拌30min。然后添加100mgN-{2-[3-(5-溴-吡啶-2-基)-脲基]-4-三氟甲基-苯基}-乙酰胺和36mg乙酸钾和84mg双-(频哪酯基(pinacolato))-二硼。该悬浮液进行加热回流3h15，然后冷却到20℃，减压浓缩至干。灰绿色残留物溶于乙酸乙酯中，过滤除去不溶物。黄色滤液用水洗涤，再用硫酸镁干燥，减压浓缩。得到88mg N-(2-{3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺的黄白色粉末，其特征如下：

SM-ES⁺：465(+)＝(M+H)(+)

根据流程图5制备4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺

往1.145g2-氟-4-碘-烟腈在27ml乙醇中的溶液里，添加2.5ml肼水合物。加入肼水合物，生成白色沉淀。该悬浮物在20℃下搅拌20分钟。沉淀进行过滤，用乙醇洗涤。得到882mg2-肼基-4-碘-烟腈浅灰褐色粉末。该中间产物溶于35ml二氯甲烷中。往该白色悬浮液里添加5.8ml含有10％茴香醚的三氟乙酸。得到的橙黄色溶液在20℃下搅拌30分钟。该反应混合物减压浓缩至干。得到的红色粉末溶于水与28％氨水中(其量足以达到碱性pH)：该悬浮液变成淡黄色。不溶物进行过滤，干燥，得到862mg4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺。

根据流程图1制备N-(2-{3-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)- 吡啶-2-基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺

在20℃下，往70mg4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺在5.5mL二烷中的溶液里，添加246mg N-(2-{3-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-吡啶-2-基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺。往该悬浮液里添加64mg碳酸氢钠在1mL水中的溶液，接着添加32mg四(三苯基膦)钯。该反应物在85℃下加热回流3.5h。澄清的黄色溶液进行冷却，再添加乙酸乙酯。该混合物用水洗涤。不溶物采用过滤进行分离，滤液用盐水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩至干。这样得到的黄色残留物和前面的不溶物用预充填的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μ柱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/溶液A，先9∶1，然后8∶2，再7∶3；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到52mg N-(2-{3-[5-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-吡啶-2-基]-脲基}-4-三氟甲基-苯基)-乙酰胺黄色粉末，其特征如下：

SM-ES+：471(+)＝(M+H)(+)

SM-ES^-：469(-)＝(M-H)(-)

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.16(s，3H)；4.70(s，2H)；6.97(d，J＝5.0Hz，1H)；7.40(d，J＝9.0Hz，1H)；7.47-7.54(m，2H)；8.04(d，J＝9.0Hz，1H)；8.41(d，J＝5.0Hz，1H)；8.48-8.54(m，2H)；9.86(s，1H)；10.15(展开的m，1H)；10.85(展开的m，1H)；12.35(s，1H)。

IR谱(KBr)：3440；3213；3043；2925；1706；1609；1515；1432；1332；1249；1164；1108；1080&822cm^-1

实施例14

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲

根据《欧洲制药科学杂志》(European Journal of PharmaceuticalSciences)22(2004)第153-164页，制备2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基胺：

1-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1.3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲

根据实施例5所描述的1-(2-甲氧基-4-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲的制备方法，让2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基胺与2-(4-异氰酸根基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷进行反应。纯化后得到1-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲浅灰褐色粉末，其特征如下：

SM-ES⁺：451(+)＝(M+H)(+)

SM-ES^-：449(-)＝(M-H)(-)

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.28(s，12H)；1.45(t，J＝7.0Hz，3H)；4.25(q，J＝7.0Hz，2H)；7.18(d，J＝8.5Hz，1H)；7.30(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.50(d，J＝8.5Hz，2H)；7.61(d，J＝8.5Hz，2H)；8.37(s，1H)；8.55(d，J＝2.5Hz，1H)；9.66(s，1H)。

根据实施例6的制备方法，通过Suzuki反应，让1-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲与4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺进行偶联。得到1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

SM-ES⁺：457(+)＝(M+H)(+)

IR谱(KBr)：3369；1672；1601；1542；1445；1315；1271；1210；1134；1043&822cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.47(t，J＝7.0Hz，3H)；4.27(q，J＝7.0Hz，2H)；4.59(宽s，2H)；6.91(d，J＝5.0Hz，1H)；7.21(d，J＝8.5Hz，1H)；7.31(宽d，J＝8，5Hz，1H)；7.55(d，J＝8.5Hz，2H)；7.68(d，J＝8.5Hz，2H)；8.36(d，J＝5.0Hz，1H)；8.44(s，1H)；8.58(宽s，1H)；9.78(s，1H)；12.25(s，1H)。

实施例15

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲

1-(2-氟-5-甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2- 基)-苯基]-脲

在20℃下，往1.45g4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基胺、1.86mL三乙胺和162mg 4-二甲氨基吡啶在150mL四氢呋喃中的溶液里，添加1g1-氟-2-异氰酸根基-4-甲基-苯。该反应物在60℃下搅拌3.5h，然后减压浓缩至干。残留物溶于水与二氯甲烷的混合物中。有机相用1N HCl溶液洗涤，再用硫酸镁干燥，然后减压浓缩至干。得到2.13g 1-(2-氟-5-甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲白色粉末，其特征如下：

SM-EI：370(+)＝(M)(+)；125(+)＝(C₇H₈NF)(+)基本峰

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.28(s，12H)；2.27(s，3H)；6.81(m，1H)；7.10(dd，J＝8.5和11.5Hz，1H)；7.47(d，J＝8.5Hz，2H)；7.60(d，J＝8.5Hz，2H)；7.98(dd，J＝2.0和8.0Hz，1H)；8.51(d，J＝2.5Hz，1H)；9.21(s，1H)。

根据与实施例3的制备类似的方案，通过Suzuki反应，让1-(2-氟-5-甲基-苯基)-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基]-脲与4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺进行偶联。得到1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

SM-ES⁺：377(+)＝(M+H)(+)

SM-ES^-：375(-)＝(M-H)(-)

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.28(s，3H)；4.57(s，2H)；6.82(m，1H)；6.91(d，J＝5.0Hz，1H)；7.11(dd，J＝8.5和11.5Hz，1H)；7.54(d，J＝8.5Hz，2H)；7.65(d，J＝8.5Hz，2H)；7.99(宽d，J＝7.5Hz，1H)；8.37(d，J＝5.0Hz，1H)；8.56(宽s，1H)；9.29(s，1H)；12.25(s，1H)。

IR谱(KBr)：3368；1709；1602；1537；1314；1217；1184；1116&817cm-1

实施例16

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3，4-二甲基-苯基)-脲

根据流程图6制备4-(4-氨基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺

往190mg 4-溴-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-基胺和236mg4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂戊硼烷-2-基)-苯基胺在20mL二烷中的溶液里，添加215mg碳酸氢钠在5mL水中的溶液，然后添加103mg四(三苯基膦)钯。该反应物在85℃下加热3.5h。将这种深黄色溶液冷却到室温，添加30mL乙酸乙酯，再用水和盐水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，减压蒸发至干。黄色固体残留物用预充填的Biotage KP-Sil de 60SiO₂ 32-63μ柱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/溶液A，先95∶5，然后90∶10，再80∶20；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到93mg4-(4-氨基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺黄色粉末，其特征如下：

SM-EI：225(+)＝(M)(+)基本峰

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.57(宽s，2H)；5.47(宽s，2H)；6.71(d，J＝8.5Hz，2H)；6.80(d，J＝5.0Hz，1H)；7.28(d，J＝8.5Hz，2H)；8.28(d，J＝5.0Hz，1H)；12.1(宽s，1H)

根据流程图6制备1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基1- 3-(3，4-二甲基-苯基)-脲

在20℃下，往100mg 4-(4-氨基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基胺、125μL三乙胺和10mg 4-二甲氨基吡啶在17mL四氢呋喃中的溶液里，添加66mg 3，4-二甲基苯基异氰酸酯。该反应物在80℃下搅拌6h，减压浓缩至干。残留物溶于水与乙酸乙酯的混合物中。有机相用硫酸镁干燥，然后减压浓缩至干。黄色残留物用预充填的Biotage KP-Sil de60SiO₂32-63μ柱纯化(洗脱剂?二氯甲烷/溶液A，先95∶5，然后90∶10，再80∶20；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到29mg1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3，4-二甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

LC-MS：tr＝3.44mn：m/z373：[M+H]⁺，m/z371：[M-H]^-，m/z417：[M-H]-+HCO2H，m/z224：[M-H]-C9H10NO

SM-IE：m/z372：[M⁺]，m/z121：C8H10N⁺(基本峰)。

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.16(s，3H)；2.20(s，3H)；4.59(s，2H)；6.90(d，J＝5.5Hz，1H)；7.04(d，J＝8.5Hz，1H)；7.20(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.26(d，J＝2.5Hz，1H)；7.52(d，J＝8.5Hz，2H)；7.65(d，J＝8.5Hz，2H)；8.36(d，J＝5.5Hz，1H)；8.68(s，1H)；8.97(s，1H)；12.25(s，1H)

根据实施例16(流程图6)制备下述产品：

实施例17

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(5-叔-丁基-2-甲氧基-苯基)-脲

使用ZQ的LC-MS：tr＝3.74mn：m/z431：[M+H]⁺，m/z429：[M-H]^-

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.28(s，9H)；3.87(s，3H)；4.59(s，2H)；6.90(d，J＝5.5Hz，1H)；6.92(d，J＝8.5Hz，1H)；6.97(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.53(d，J＝8.5Hz，2H)；7.68(d，J＝8.5Hz，2H)；8.28(m，2H)；8.37(d，J＝5.5Hz，1H)；9.58(s，1H)；12.25(宽s，1H)

PF＝220℃(Kffler)

实施例18

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(4-甲基-3-三氟甲基-苯基)-脲

LC-MS：tr＝8.84mn：m/z427：[M+H]⁺，m/z425：[M-H]^-

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.38(s，3H)；4.58(宽s，2H)；6.90(d，J＝5.5Hz，1H)；7.35(d，J＝8.5Hz，1H)；7.53(m，3H)；7.68(d，J＝8.5Hz，2H)；7.96(d，J＝2.5Hz，1H)；8.38(d，J＝5.5Hz，1H)；9.06(s，1H)；9.09(s，1H)；12.25(宽s，1H)。

PF＝166℃(Kffler)

实施例19

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲

LCMS：tr＝3.30mn：m/z393：[M+H]⁺(基本峰)，m/z391：[M-H]^-m/z437：[M-H]^-+HCO2H，m/z224：[M-H]^--C8H7ClNO

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.28(s，3H)；4.58(宽s，2H)；6.90(d，J＝5.5Hz，1H)；7.18-7.29(m，2H)；7.53(d，J＝8.5Hz，2H)；7.66(d，J＝8.5Hz，2H)；7.72(宽s，1H)；8.38(d，J＝5.5Hz，1H)；8.92(s，1H)；9.02(s，1H)；12.25(宽s，1H)

PF＝206℃(Kffler)

实施例20

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-乙基-苯基)-脲

LC-MS-DAD-ELSD：373(+)＝(M+H)(+)

371(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：3372；3266；1688；1591；1539；1524；1435；1317；1215；1020；822；695&598cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：1.19(t，J＝7.5Hz，3H)；2.58(q，J＝7.5Hz，2H)；4.59(宽s，2H)；6.84(宽d，J＝8.0Hz，1H)；6.90(d，J＝5.0Hz，1H)；7.19(t，J＝8.0Hz，1H)；7.28(宽d，J＝8.0Hz，1H)；7.35(宽s，1H)；7.53(d，J＝8.5Hz，2H)；7.65(d，J＝8.5Hz，2H)；8.36(d，J＝5.0Hz，1H)；8.74(s，1H)；8.94(s，1H)；12.25(s，1H)。

PF＝162℃(Kffler)

实施例21

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基-脲

LC-MS-DAD-ELSD：389(+)＝(M+H)(+)

387(-)＝(M-H)(-)

433(-)＝(M+Ac Form-H)(-)

IR谱(KBr)：3301；1639；1585；1503；1490；1246；1209；1035；929；838&816cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：4.58(宽s，2H)；5.98(s，2H)；6.79(dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；6.84(d，J＝8.5Hz，1H)；6.90(d，J＝5.0Hz，1H)；7.23(d，J＝2.0Hz，1H)；7.52(d，J＝9.0Hz，2H)；7.63(d，J＝9.0Hz，2H)；8.36(d，J＝5.0Hz，1H)；8.69(s，1H)；8.99(s，1H)；12.25(s，1H)

PF＝242℃(Kffler)

实施例22

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-氯-4-甲氧基-苯基)-脲

LC-MS-DAD-ELSD：409(+)＝(M+H)(+)

407(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：3370；3301；1711；1680；1594；1539；1524；1502；1396；1319；1280；1218；1060&822cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：3.82(s，3H)；4.58(宽s，2H)；6.90(d，J＝5.0Hz，1H)；7.10(d，J＝9.0Hz，1H)；7.30(dd，J＝2.5和9.0Hz，1H)；7.53(d，J＝9.0Hz，2H)；7.64(d，J＝9.0Hz，2H)；7.68(d，J＝2.5Hz，1H)；8.36(d，J＝5.0Hz，1H)；8.80(s，1H)；8.98(s，1H)；12.25(s，1H)。

PF＝261℃(Kffler)

实施例23

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(5-氯-2-甲氧基-苯基)-脲

LC-MS-DAD-ELSD：409(+)＝(M+H)(+)

407(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：3365；1707；1596；1522；1417；1316；1213；1175；1131；1025&820cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：3.91(s，3H)；4.59(宽s，2H)；6.91(d，J＝5.0Hz，1H)；7.00(dd，J＝2.5和9.0Hz，1H)；7.05(d，J＝9.0Hz，1H)；7.55(d，J＝9.0Hz，2H)；7.65(d，J＝9.0Hz，2H)；8.26(d，J＝2.5Hz，1H)；8.37(d，J＝5.0Hz，1H)；8.49(s，1H)；9.64(s，1H)；12.25(s，1H)

PF＝171℃(Kffler)

实施例24

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-乙氧基-苯基)-脲

LC-MS-DAD-ELSD：389(+)＝(M+H)(+)

387(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：2924；2854；1618；1437；1384；1121；1005；826；722；695&544cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：1.43(t，J＝7.0Hz，3H)；4.16(q，J＝7.0Hz，2H)；4.59(宽s，2H)；6.85-6.97(m，3H)；7.02(dd，J＝2.0和8.0Hz，1H)；7.54(d，J＝9.0Hz，2H)；7.67(d，J＝9.0Hz，2H)；8.14(dd，J＝2.0和8.0Hz，1H)；8.18(s，1H)；8.36(d，J＝5.0Hz，1H)；9.65(s，1H)；12.25(s，1H)

PF＝152℃(Kffler)

实施例25

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-甲基-苯基)-脲

LC-MS-DAD-ELSD：389(+)＝(M+H)(+)

387(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：3346；1673；1594；1538；1316；1279；1211；1181；1135；1028&823cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：2.24(s，3H)；3.85(s，3H)；4.59(宽s，2H)；6.76(dd，J＝2.0和8.0Hz，1H)；6.89-6.93(m，2H)；7.53(d，J＝8.5Hz，2H)；7.65(d，J＝8.5Hz，2H)；8.01(d，J＝2.5Hz，1H)；8.26(s，1H)；8.36(d，J＝5.0Hz，1H)；9.56(s，1H)；12.25(s，1H)

PF＝170℃(Kffler)。

实施例26

N-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-2，3-二氯-苯磺酰胺

SM-ES⁺：434(MH⁺)

保留时间DAD-TIC：3.31min

实施例27

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲

2，4-二氯-烟腈

5.0g商品4-甲氧基-2-氧代-1，2-二氢-吡啶-3-腈在50ml氯氧化磷中的溶液进行加热回流19H。冷却后，把这种反应介质倒入水与冰的混合物中。生成的沉淀进行过滤，滤液用乙酸乙酯/甲醇90/10溶液提取2次。合并的有机相和沉淀用硫酸镁干燥，再减压浓缩，得到6.76g带黄色的粉末。粗制产物用预充填的Biotage KP-Sil de 60SiO₂ 32-63μM柱纯化(乙酸乙酯在环己烷中的梯度5/95-10/90)，得到2.08g 2，4-二氯-烟腈白色粉末。

SM-IE：172＝[M⁺](基本峰)，137＝[M⁺]-Cl

IR谱(KBr)：3072；2236；1559；1539；1445；1368；1220；1197；1069；859；818；791&416cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：7.92(d，J＝5.5Hz，1H)；8.67(d，J＝5.5Hz，1H)

[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯

往519mg2，4-二氯-烟腈在25.5ml二烷中的溶液里，添加782mg(4-boc-氨基苯基)硼酸、在8.5ml水中的693mg碳酸氢钠和347mg四(三苯基膦)钯。该悬浮液在100℃与氩气下搅拌2小时。冷却后，把该反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯/甲醇90/10溶液提取3次。合并有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩，1.58g粗制产物用预充填的Biotage KP-Sil de 60SiO₂32-63μM柱色谱纯化(溶液A在二氯甲烷中的梯度0.5/99.5-1/99；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨38/17/2)。得到797mg[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯，其特征如下：

SM-EI：329(+)

IR谱(CCI₄)：3343；2981；2230；1741；1524；1501；1411；1392；1368；1316；1220；1155；1050&844cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：1.50(s，9H)；7.62(d，J＝9.0Hz，2H)；7.78-7.84(m，3H)；8.83(d，J＝5.5Hz，1H)；9.67(s，1H)。

2-(4-氨基-苯基)-4-氯-烟腈

往3.40g[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯在20ml二氯甲烷中的溶液里，添加5.5ml三氟乙酸。该溶液在20℃下搅拌26小时。该溶液减压浓缩至干。残留物溶于碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷提取3次。合并的有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩。残留物用乙醚洗涤。得到1.678g 2-(4-氨基-苯基)-4-氯-烟腈黄色粉末，其特征如下：

SM-ES⁺：230(+)＝(M+H)(+)

IR谱(KBr)：3402；3339；3230；2223；1608；1555；1538；1520；1432；1388；1180；1066；825&607cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：5.76(宽s，2H)；6.67(d，J＝8.5Hz，2H)；7.63(d，J＝5.5Hz，1H)；7.68(d，J＝8.5Hz，2H)；8.73(d，J＝5.5Hz，1H)。

根据流程图7制备1-[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲

在20℃下，往115mg2-(4-氨基-苯基)-4-氯-烟腈和70μL三乙胺在5mL四氢呋喃中的溶液里，添加65μL 2-氟-5-甲苯基异氰酸酯。在20℃下3h后添加水，该混合物再用乙酸乙酯洗涤。有机相用水洗涤，再用盐水洗涤，然后用硫酸镁干燥，减压浓缩至干。残留物溶于乙醚中，过滤分离不溶物，得到118mg 1-[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲白色粉末，其特征如下：

SM-EI：380(+)＝(M)(+)；125(+)＝(C₇H₈NF)(+)基本峰

IR谱(KBr)：3379；2231；1687；1598；1550；1413；1315；1219；1185；1116&810cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.28(s，3H)；6.82(m，1H)；7.12(dd，J＝8.5和11.5Hz，1H)；7.64(d，J＝8.5Hz，2H)；7.81(d，J＝5.5Hz，1H)；7.87(d，J＝8.5Hz，2H)；7.99(宽d，J＝8.0Hz，1H)；8.60(宽s，1H)；8.84(d，J＝5.5Hz，1H)；9.38(s，1H)。

根据流程图7制备1-[4-(3-氰基-4-肼基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2-氟-5- 甲基-苯基)-脲

在20℃下，往50mg 1-[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲在0.5mL乙醇中的混合物里，添加45μL肼水合物。白色悬浮液在20℃下搅拌2h，然后在80℃下加热4h。让该温度回到20℃。过滤分离不溶物，用乙醚洗涤，得到33mg 1-[4-(3-氰基-4-肼基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲浅灰褐色固体，其特征如下：

SM-ES⁺：377(+)＝(M+H)(+)

SM-ES^-：375(-)＝(M-H)(-)

IR谱(KBr)：3379；2212；1700；1599；1551；1440；1314；1257；1221；1187&816cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.28(s，3H)；4.52(s，2H)；6.81(m，1H)；7.06(d，J＝6.0Hz，1H)；7.11(dd，J＝8.5和11.5Hz，1H)；7.57(d，J＝8.5Hz，2H)；7.71(d，J＝8.5Hz，2H)；8.00(宽d，J＝8.0Hz，1H)；8.24(宽s，1H)；8.27(d，J＝6.0Hz，1H)；8.57(宽s，1H)；9.32(s，1H)。

根据流程图7制备1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4.3-c]吡啶-4-基)-苯基]- 3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲

在20℃下，往55mg 1-[4-(3-氰基-4-肼基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲在2.2mL二氯甲烷中的溶液里，添加0.25mL含有10％茴香醚的三氟乙酸。40min后，该溶液减压蒸发至干。残留物溶于水中，介质变成碱性。过滤分离生成的沉淀。该浅灰褐色固体在固体沉淀后用2g二氧化硅15-40μm AIT柱进行色谱法纯化(洗脱剂用100％CH₂Cl₂-60％CH₂Cl₂/40％(CH₂Cl₂38/MeOH17/NH₄OH3))梯度。得到26mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-氟-5-甲基-苯基)-脲浅灰褐色固体，其特征如下：

PF：195℃

SM-ES+：377(+)＝(M+H)(+)

IR谱(KBr)：3351；1696；1605；1544；1313；1257；1221；1181；1045&808cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.28(s，3H)；4.73(s，2H)；6.82(m，1H)；7.12(dd，J＝8.5和11.5Hz，1H)；7.19(d，J＝6.0Hz，1H)；7.59-7.67(m，4H)；8.01(dd，J＝2.5和8.0Hz，1H)；8.21(d，J＝6.0Hz，1H)；8.55(d，J＝2.5Hz，1H)；9.26(s，1H)；12.1(宽s，1H)。

根据与实施例27(流程图7)类似的方案制备下述产品。

实施例28

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲

根据流程图7制备1-[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲

2-(4-氨基-苯基)-4-氯-烟腈与2，4-二甲氧基苯基异氰酸酯在实施例27所描述的类似条件下进行反应。得到1-[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲白色固体，其特征如下：

SM-ES⁺：409(+)＝(M+H)(+)

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：3.74(s，3H)；3.88(s，3H)；6.50(dd，J＝2.5和9.0Hz，1H)；6.63(d，J＝2.5Hz，1H)；7.62(d，J＝8.5Hz，2H)；7.80(d，J＝5.5Hz，1H)；7.85(d，J＝8.5Hz，2H)；7.94(d，J＝9.0Hz，1H)；8.12(s，1H)；8.84(d，J＝5.5Hz，1H)；9.49(s，1H)。

根据流程图7制备1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]- 3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲

在与实施例27所描述的类似条件下，1-[4-(4-氯-3-氰基-吡啶-2-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲用肼水合物处理，再用三氟乙酸处理。得到1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-苯基)-脲浅灰褐色固体，其特征如下：

SM-ES⁺：405(+)＝(M+H)(+)

PF＝196℃(Kffler)

IR谱(KBr)：1603；1526；1452；1210；1180；1157；1035&824cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：3.74(s，3H)；3.87(s，3H)；4.74(宽s，2H)；6.50(dd，J＝2.5和9.0Hz，1H)；6.63(d，J＝2.5Hz，1H)；7.18(d，J＝6.0Hz，1H)；7.61(宽s，4H)；7.95(d，J＝9.0Hz，1H)；8.09(s，1H)；8.20(d，J＝6.0Hz，1H)；9.39(宽s，1H)；12.1(展开的m，1H)。

实施例29

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(5-叔-丁基-2-甲氧基-苯基)-脲

JK33913-110-1

该产物是黄色固体，其特征如下：

LC-MS：431(+)＝(M+H)(+)

PF＝181℃(Kffler)

IR谱(KBr)：3333；2958；1678；1604；1525；1487；1421；1315；1249；1216；1177；1143；1042；842&807cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：1.27(s，9H)；3.87(s，3H)；4.73(宽s，2H)；6.92(d，J＝8.5Hz，1H)；6.97(dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；7.19(d，J＝6.0Hz，1H)；7.63(s，4H)；8.21(d，J＝6.0Hz，1H)；8.25(s，1H)；8.29(d，J＝2.5Hz，1H)；9.51(s，1H)；12.1(宽s，1H)。

实施例30

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3，4-二甲基-苯基)-脲

该产物是黄色固体，其特征如下：

SM-ES⁺：373：[M+H]⁺

PF＝182℃(Kffler)

IR谱(KBr)：3413；1679；1621；1549；1210；1136；842；803&724cm^-1

含有三氟乙酸

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.16(s，3H)；2.20(s，3H)；4.74(宽s，2H)；7.04(d，J＝8.0Hz，1H)；7.18(d，J＝6.0Hz，1H)；7.20(部分掩蔽的dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.26(d，J＝2.5Hz，1H)；7.62(s，4H)；8.21(d，J＝6.0Hz，1H)；8.60(s，1H)；8.87(s，1H)；12.15(s，1H)。

实施例31

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(4-甲基-3-三氟甲基-苯基)-脲

该产物是黄色固体，其特征如下：

SM-ES+：427：[M+H]⁺

PF＝191℃(Kffler)

IR谱(KBr)：3393；3319；3226；3112；1678；1621；1552；1529；1505；1319；1206；1186；1134；1054；839；802&723cm^-1含有三氟乙酸

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.38(q，J＝2.0Hz，3H)；4.74(宽s，2H)；7.19(d，J＝6.0Hz，1H)；7.35(d，J＝8.5Hz，1H)；7.53(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.64(s，4H)；7.96(d，J＝2.5Hz，1H)；8.21(d，J＝6.0Hz，1H)；8.96(s，1H)；9.00(s，1H)；12.15(s，1H)

实施例32

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，5-二氟-苯基)-脲

该产物是黄色固体，其特征如下：

LC-MS：381(+)＝(M+H)(+)

PF＝187℃(Kffler)

IR谱(KBr)：3372；1718；1606；1534；1442；1313；1208；1179；862；796&727cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.74(宽s，2H)；6.84(m，1H)；7.20(d，J＝6.0Hz，1H)；7.31(ddd，J＝5.5-9.0和11.0Hz，1H)；7.61-7.68(m，4H)；8.07(ddd，J＝3.0-6.5和11.0Hz，1H)；8.21(d，J＝6.0Hz，1H)；8.87(宽s，1H)；9.36(s，1H)；12.15(宽s，1H)。

实施例33

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲

该产物是淡黄色固体，其特征如下：

SM-ES⁺：393[M+H]⁺

PF＝196℃(Kffler)

IR谱(KBr)：3406；3323；3110；1675；1621；1592；1528；1498；1210；1185；1139；839；803&724cm^-1含有三氟乙酸

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.27(s，3H)；4.74(宽s，2H)；7.19(d，J＝5.5Hz，1H)；7.21(dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；7.25(d，J＝2.0Hz，1H)；7.63(s，4H)；7.72(d，J＝2.5Hz，1H)；8.21(d，J＝5.5Hz，1H)；8.88(s，1H)；8.96(s，1H)；12.15(s，1H)。

实施例34

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(5-氟-2-甲基-苯基)-脲

该产物是黄色固体，其特征如下：

LC-MS：377(+)＝(M+H)(+)

PF＝>265℃(Kffler)

IR谱(KBr)：3287；1639；1604；1539；1452；1312；1217；1156；1109；1046；846&809cm^-1

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：2.24(s，3H)；4.74(宽s，2H)；6.76(dt，J＝3.0和8.5Hz，1H)；7.19(d，J＝6.0Hz，1H)；7.20(部分掩蔽的m，1H)；7.64(s，4H)；7.86(dd，J＝3.0和12.0Hz，1H)；8.15(宽s，1H)；8.21(d，J＝6.0Hz，1H)；9.40(宽s，1H)；12.15(宽s，1H)。

实施例35

N-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-2，3-二氯-苯磺酰胺

SM-ES+：434(MH+)

实施例36

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(5-氯-2，4-二甲氧基-苯基)-脲

SM-ES⁺：439(MH+)

实施例37

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基硫基-苯基)-脲

SM-ES⁺：445(MH+)

实施例38

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基]-脲

根据流程图8制备3-氯-5-(4-硝苯基)-异烟腈

往1.73g商品3，5-二氯-异烟腈在120ml二烷中的溶液里，添加2.74g 4，4，5，5-四甲基-2-(4-硝苯基)-1，3，2-二氧杂戊硼烷、在70ml水中的2.31g碳酸氢钠和1.16g四(三苯基膦)钯(O)。该悬浮液在100℃下加热1h30。将反应混合物冷却后，倒入40ml中，用乙酸乙酯提取3次，每次100ml。合并的有机相用50ml水、50ml盐水洗涤，用硫酸镁干燥，减压浓缩至干。残留的褐色胶用预充填70g 15-40μM二氧化硅Merck柱进行色谱纯化，用二氯甲烷洗脱。得到1.58g 3-氯-5-(4-硝基-苯基)-异烟腈黄色固体，其特征如下：

SM-EI：259(+)

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：8.02(d，J＝9.0Hz，2H)；8.43(d，J＝9.0Hz，2H)；8.91(s，1H)；9.09(s，1H)

根据流程图8制备3-肼基-5-(4-硝基-苯基)-异烟腈的N.N′二-BOC衍生物

往4.43g肼基二甲酸二叔丁酯在19ml二甲基甲酰胺的溶液里，添加2.62g碳酸钾和990mg 3-氯-5-(4-硝基苯基)-异烟腈。该悬浮液在75℃下加热6小时，然后在20℃下搅拌18小时。反应混合物用乙酸乙酯提取3次，每次80ml。有机相用水洗涤2次，每次50ml，再用50ml盐水洗涤。合并的有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩。褐色残留物用预充填的25g15-40μM二氧化硅Merck柱进行色谱纯化(洗脱梯度：环己烷/乙酸乙酯9/1-7/3)。得到2.38g 3-肼基-5-(4-硝苯基)-异烟腈的N，N′-二-boc衍生物，呈黄色固体状，分离杂质并原样使用。

LC-MS：456(+)＝(M+H)(+)

454(-)＝(M-H)(-)

根据流程图8制备3-(4-氨基-苯基)-5-肼基-异烟腈的N，N′-二-Boc衍生物

往1.74g3-肼基-5-(4-硝基-苯基)-异烟腈的N，N′-二-boc衍生物在8ml乙醇中的溶液里，添加3ml环己烯和200mg氢氧化钯。该悬浮液在回流下搅拌2h15，用硅藻土趁热过滤，减压浓缩至干。浅灰褐色残留物使用70g15-40μM二氧化硅Merck柱进行色谱纯化，使用乙酸乙酯/二氯甲烷8/2溶液洗脱。得到309mg 3-(4-氨基-苯基)-5-肼基-异烟腈的N，N′-二-boc衍生物黄色固体，其特征如下：

LC-MS：426(+)＝(M+H)(+)

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：1.45(宽s，18H)；5.61(s，2H)；6.71(d，J＝9.0Hz，2H)；7.31(d，J＝9.0Hz，2H)；8.55(宽s，1H)；8.64(s，1H)；10.05(展开的m，1H)

根据流程图8制备1-[4-(4-氰基-5-肼基-吡啶-3-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基]-脲的N，N′二-BOC衍生物

在0℃与氩气下，往41mg三光气在4ml四氢呋喃中的溶液里，添加在2ml四氢呋喃和110μl三乙胺中的78mg 2-甲氧基-5-三氟甲基苯胺。该悬浮液在0℃下搅拌10分钟，然后在20℃下搅拌1h15。再添加174mg 3-(4-氨基-苯基)-5-肼基-异烟腈的N，N′-二-boc衍生物在2ml四氢呋喃中的溶液。该反应混合物加热回流8小时，再减压蒸发至干。残留物用12g二氧化硅50μM Analogix柱进行色谱纯化(乙酸乙酯在环己烷中的洗脱梯度1/9-5/5)。得到195mg 1-[4-(4-氰基-5-肼基-吡啶-3-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基]-脲的N，N′-二-boc衍生物黄色固体，其特征如下：

LC-MS：643(+)＝(M+H)(+)

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：14-1.55(宽s，18H)；3.99(s，3H)；7.22(d，J＝8.5Hz，1H)；7.34(dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；7.58(d，J＝9.0Hz，2H)；7.69(d，J＝9.0Hz，2H)；8.57(d，J＝2.0Hz，1H)；8.65(s，1H)；8.69(宽s，1H)；8.72(s，1H)；9.78(s，1H)；10.08(展开的m，1H)

根据流程图8制备1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[34-c[吡啶-4-基)-苯基]- 3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基]-脲

282mg 1-[4-(4-氰基-5-肼基-吡啶-3-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基]-脲的N，N′-二-boc衍生物和600μl含有10％茴香醚的三氟乙酸在8ml二氯甲烷中的溶液，进行加热回流2h30。冷却后，把该反应混合物倒在碳酸氢钠饱和溶液中，用40ml乙酸乙酯提取。有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩至干。黄色残留物在乙醚中研磨。过滤不溶物并真空干燥后，得到103mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基]-脲黄色固体，其特征如下：

LC-MS：tr＝2.83mn：443＝[M+H]⁺；441＝[M-H]^-；487＝[M-H]-+HCO₂H

SM-EI：176(基本峰)＝C₈H₆F₃O⁺；442＝[M⁺]

IR谱(KBr)：3342；1696；1609；1538；1491；1447；1314；1270；1215；1177；1135；1024；837&622cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：3.99(s，3H)；4.61(s，2H)；7.22(d，J＝8.5Hz，1H)；7.33(宽d，J＝8.5Hz，1H)；7.50(d，J＝8.5Hz，2H)；7.64(d，J＝8，5Hz，2H)；7.93(s，1H)；8.58(宽s，2H)；8.74(s，1H)；9.61(s，1H)；12.25(s，1H)

PF＝210℃(Kffler)

实施例39

根据流程图6和8制备N-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-4-基)-苯基]-2，3-二氯-苯磺酰胺

SM-ES⁺＝434(MH+)

实施例40

3-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-甲氧基-苯甲酸

如实施例5所描述的，在-40℃下，往100mg 1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲在5mL二氯甲烷中的溶液里，滴加1.6mL 1M三溴化硼溶液，并使温度回到20℃。在氩气氛下浓缩一夜至干。残留物用预充填的Biotage KP-Sil de 60SiO₂ 32-63μ柱纯化(洗脱剂?二氯甲烷/溶液A，95∶5，然后90∶10，再80∶20，再73∶30；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到41mg 3-{3-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-脲基}-4-甲氧基-苯甲酸黄色粉末，其特征如下：

使用Quattro Premier进行LCMS∶tr＝5.04mn

m/z419：[M+H]⁺

IR谱(KBr)：3354；1697；1597；1542；1431；1319；1279；1205；1122；821&767cm^-1

¹H NMR谱(400MHz，(CD₃)₂SO，δ(ppm))：3.80(s，3H)；4.59(s，2H)；6.90(d，J＝5.5Hz，1H)；6.92(d，J＝8.5Hz，1H)；7.51(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.54(d，J＝8.5Hz，2H)；7.67(d，J＝8.5Hz，2H)；8.38(d，J＝5.5Hz，1H)；8.40(s，1H)；8.79(d，J＝2.5Hz，1H)；9.60(s，1H)；10.6(非常展开的m，1H)；12.25(宽s，1H)。

实施例41

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-羟基-5-三氟甲基-苯基)-脲

如实施例5所描述的，在-40℃下，往1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-脲在6mL二氯甲烷中的溶液里，滴加1.6mL 1M三溴化硼溶液，并使温度回到20℃。30min后，该反应物用冷水浴冷却，再添加水。搅拌15min后，该混合物进行过滤，橙色不溶物用水和二氯甲烷洗涤。固体用预充填的Biotage KP-Silde60SiO₂32-63μ柱纯化(洗脱剂?二氯甲烷/溶液A，95∶5，再90?10，再80∶20，再73∶30；溶液A＝二氯甲烷/甲醇/氨，38∶17∶2)。得到29mg1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2-羟基-5-三氟甲基-苯基)-脲黄色粉末，其特征如下：

使用ZQ进行LCMS：tr＝3.22mn m/z429[M+H]⁺(基本峰)

¹H NMR谱(300MHz，(CD₃)₂SO d6，δ(ppm))：4.59(s，2H)；6.90(d，J＝5.5Hz，1H)；7.00(d，J＝8.5Hz，1H)；7.18(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.54(d，J＝8.5Hz，2H)；7.66(d，J＝8.5Hz，2H)；8.37(d，J＝5.5Hz，1H)；8.51(m，2H)；9.64(s，1H)；10.7(非常展开的m，1H)；12.25(宽s，1H)。

化合物活性的测定—实验方案

1、FAK

利用在当时确定的荧光试验(HTRF)，通过测定酶的自体磷酸化抑制作用，确定化合物对FAK的抑制活性。

其N-末端用组氨酸标记的人类FAK的完全DNAc，已在杆状病毒pFastBac HTc媒介中进行克隆。该蛋白已表达并纯化到约70％均匀性。

在50mM Hepes pH＝7.2、10mM MgCl₂、100μM Na₃VO₄、15μM ATP的缓冲溶液中，这种酶(6.6μg/ml)与不同浓度的待试验化合物在37℃培养1小时，测定激酶活性。通过添加含有0.4mM KF、133mM EDTA、0.1％BSA的缓冲液Hepes pH＝7.0，停止这个酶反应，并且往这种缓冲溶液中添加用XL665标记的抗组氨酸抗体，和与铕穴状化合物(Eu-K)共轭的酪氨酸磷特效单克隆抗体，在室温下进行标记1-2小时。在G.Mathis等人，《抗癌研究》(Anticancer Research)，1997，17，第3011-3014页中可获得两种荧光团的特征。从激发铕穴状化合物到XL665受体的能量转移与FAK的自体磷酸化程度成比例。使用Packard Discovery牌计数器测定XL665的特定长时间信号。所有这些试验进行两次，计算两次试验的平均值。以没有试验化合物时测定其活性的对照相比，以抑制百分数表示本发明化合物对FAK自体磷酸化活性的抑制作用。为了计算抑制％，考虑比[在665nm的信号/在620nm的信号]。

2、KDR

采用闪烁技术(96-孔板，NEN)，使用活体外KDR酶通过基质的磷酸化试验测定化合物的抑制作用。

在pFastBac杆状病毒表达的媒介中，以GST融合形式克隆了人KDR酶的细胞质域。在这些SF21细胞中表达了这种蛋白质，并纯化到约60％均匀度。

在10mM MgCl₂、100μM Na₃VO₄、1mM NaF的存在下，在20mMMOPS、10mM MgCl₂、10mM MnCl₂、1mM DTT、2.5mM EGTA、10mMb-甘油磷酸盐，pH＝7.2中测定KDR的激酶活性。在4℃下，往70μl含有100ng KDR酶的激酶缓冲液里添加10μl化合物。通过添加含有2μg基质(以GST融合蛋白质形式表达的PLCγ的SH2-SH3片段)、2μCiγ³³P[ATP]和2μM冷ATP的20μl溶液起动该反应。在37℃培养1小时后，通过添加1个体积(100μl)200mM EDTA使该反应停止。除去培养缓冲液，这些孔用PBS洗涤三次，每次300μl。使用Top Count NXT放射性计数器(Packard)测定每个孔中的放射性。

通过测定只是装有放射性ATP和基质的四个不同孔的放射性，测定背景噪音。

在装有所有这些反应物(γ³³P-[ATP]、KDR和PLCγ基质)但没有化合物的四个不同孔中测定了总活性对照。

以没有化合物时所测定对照活性抑制百分数表示本发明化合物抑制KDR活性的抑制作用。

每个板中包括化合物SU5614(Calbiochem)(1μM)作为抑制对照。

3、Tie2

使用由人胎盘分离的cDNA作为模型，采用PCR产生了相应于细胞内域氨基酸776-1124的人Tie2编码序列。该序列已加到呈GST融合蛋白质形式的杆状病毒pFastBacGT表达载体中。

在约80％均匀度的纯化GST-Tie2存在下，通过Tie2的PLC的磷酸化试验，确定了分子的抑制作用。该基质是由以GST融合蛋白质形式表达的PLC的SH2-SH3片段组成的。

在20mM MOPS缓冲液，pH7.2中测定Tie2的激酶活性，该缓冲液含有10mM MgCl₂、10mM MnCl₂、1mM DTT和10mM磷酸甘油。在放在冰上的96-孔FlashPlate板中，放入由每个孔70μl含有100ng GST-Tie2酶的激酶缓冲液组成的反应混合物。然后添加10μl稀释在DMSO中的待试验分子，其最大浓度为10％。对于一定的浓度，每次测定分四个样品进行。添加含有2μgGST-PLC、2μM冷ATP和1μCi³³P[ATP]的20μl溶液起动该反应。在37℃培养1小时后，添加1个体积(100μl)200mMEDTA停止该反应。除去培养缓冲液，这些孔用PBS洗涤三次，每次300μl。使用Wallac MicroBeta1450测定放射性。

计算Tie2活性的抑制，并以没有化合物时测定对照活性计以抑制百分数表示。

结果：表1：

Claims

1.符合下式(I)的产品：

式(I)

式中：

3)X、Y和Z的其中之一选自N和NO，且Z、Y和X的其它两个是C(R5)和C(R6)；

2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于Ar-L-A是：

式中每个X1、X2、X3和X4独自地选自N和C-R11，式中R11是如R5所定义的。

3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于Ar-L-A是：

式中X2选自N、C-CH₃、CF和CH。

4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于Ar-L-A是：

式中X2是N。

5.根据权利要求2或3所述的产品，其特征在于R11选自H、F、C1、甲基、NH₂、OCF₃和CONH₂。

6.根据权利要求2所述的产品，其特征在于X1、X2、X3和X4是C-R11，并且R11是H。

7.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于R5和R6独自地选自H、卤素、OMe和甲基。

8.根据权利要求5所述的产品，其特征在于R5和R6选自H和F。

9.根据权利要求1-6中任一项权利要求所述的产品，其特征在于L-A选自NH-CO-NH-A和NH-SO₂-A。

10.根据权利要求7所述的产品，其特征在于L-A是NH-CO-NH-A。

11.根据权利要求1-8中任一项权利要求所述的产品，其特征在于A是选自苯基、吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、异唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并唑基、和苯并噻唑基的取代基；A任选地被取代。

12.根据权利要求9所述的产品，其特征在于A选自苯基、吡唑基和异唑基；A任选地被取代。

13.根据权利要求7-10中任一项权利要求所述的产品，其特征在于A被选自第一组的取代基取代，第一组取代基选自(C1-C6)烷基、卤代(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、芳基、卤素、杂芳基、O-(C1-C6)烷基、O-芳基、O-杂芳基、S-(C1-C6)烷基、S-芳基、S-杂芳基，每个取代基任选地被一个或多个选自(C1-C3)烷基、卤素、O-(C1-C3)烷基的取代基取代。

14.根据权利要求7-11中任一项权利要求所述的产品，其特征在于A被选自第二组的取代基取代，该第二组取代基选自F、Cl、Br、I、OH、SH、SO₃M、COOM、CN、NO₂、CON(R8)(R9)、N(R8)CO(R9)、(C1-C3)烷基-OH、(C1-C3)烷基-N(R8)(R9)、(C1-C3)烷基-(R10)、(C1-C3)烷基-COOH、N(R8)(R9)；式中R8和R9独自地选自H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基OH、(C1-C3)烷基NH₂、(C1-C3)烷基COOM、(C1-C3)烷基SO₃M；式中当R8和R9同时不是H时，它们可连接构成5-7个链节的环，该环含有0-3个选自O、N和S的杂原子；式中M是H或选自Li、Na和K的碱金属阳离子；并且式中R10是H或任选取代的非芳族杂环，它含有2-7个碳原子和1-3个选自N、O和S的杂原子。

15.根据权利要求7-12中任一项权利要求所述的产品，其特征在于A是苯基或异唑基，它们被卤素、(C1-C4)烷基、卤代(C1-C3)烷基、O-(C1-C4)烷基、S-(C1-C4)烷基、卤代O-(C1-C4)烷基、卤代S-(C1-C4)烷基取代，当A被双取代时，A的两个取代基可以构成5-7个链节的环，该环含有0-3个杂原子。

16.根据权利要求7-15中任一项权利要求所述的产品，其特征在于A被一个或多个相同或不同的取代基取代，该取代基独自地选自F、Cl、Br、I、OH、SH、SO₃M、COOM、CN、NO₂、CON(R8)(R9)、N(R8)CO(R9)、(C1-C3)烷基-OH、(C1-C3)烷基-N(R8)(R9)、(C1-C3)烷基-(R10)、(C1-C3)烷基-COOH、N(R8)(R9)、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、芳基、杂芳基、O-(C1-C6)烷基、O-芳基、O-杂芳基、S-(C1-C6)烷基、S-芳基、S-杂芳基，每个取代基任选地被一个或多个选自(C1-C3)烷基、卤素、O-(C1-C3)烷基的取代基取代；式中R8和R9独自地选自H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基OH、(C1-C3)烷基NH₂、(C1-C3)烷基COOM、(C1-C3)烷基SO₃M；式中当R8和R9同时不是H时，它们可连接构成5-7个链节的环，该环含有0-3个选自O、N和S的杂原子；式中M是H或选自Li、Na和K的碱金属阳离子；并且式中R10是H或任选取代的非芳族杂环，该环含有2-7个碳原子和1-3个选自N、O和S的杂原子。

17.根据权利要求13所述的产品，其特征在于A是2-氟-5-三氟甲基-苯基或2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基。

18.根据权利要求1所述的产品，其特征在于它选自：

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-基)-苯基]-3-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基-脲，

19.根据权利要求1所述的产品，其特征在于它选自：

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(2，4-二甲氧基-5-氯-苯基)-脲，

1-[4-(3-氨基-1H-吡唑并[4，3-c]吡啶-4-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基硫基-苯基)-脲。

20.根据权利要求1所述的产品，其特征在于它选自：

21.根据前述权利要求中任一项权利要求所述的产品，其特征在于它可以呈下述形式：

1)非手性，或

2)外消旋，或

3)富含立体异构体，或

4)富含对映异构体；

并且其特征在于它任选地成盐。

22.药物，其特征在于它含有根据权利要求1-21中任一项权利要求所述的式(I)产品，或该化合物与在药物上可接受的酸的加成盐，或式(I)产品的水合物或溶剂化物。

23.含有上述权利要求中任一项权利要求所述的产品以及在药学上可接受赋形剂的药物组合物，。

24.根据权利要求1-21中任一项权利要求所述的产品作为激酶催化反应抑制剂的用途。

25.根据权利要求24所述的产品的用途，其特征在于该激酶选自FAK、KDR和Tie2。

26.根据权利要求1-21中任一项权利要求所述的产品在生产用于治疗病理状况的药物中的用途。

27.根据权利要求26所述的用途，其特征在于病理状况是癌。

28.作为中间产品的下式(II)的化合物：

式中X、Y、Z是如前所定义的，G是在Suzuki偶联反应中的适当卤素原子，该化合物用于制备如权利要求1所限定的式(I)的产品。

29.作为中间产品的式(III)的化合物：

式中：

-X、Y、Z是如前所定义的，

-X₃是Ar-L-A或Ar，L和A是如前面所定义的，或者Ar-L或Ar是如前面所定义的，并且L是NH₂或NO₂，

-X₁和X₂是不同的，并且独自地选自CN、Cl、-NH-NH₂、-N(Boc)-NH(Boc)、-N(Boc)-N(Boc)₂，该化合物用于制备如权利要求1所限定的式(I)的产品。