CN102203101B - 作为p38激酶抑制剂的吡咯并[2,3-c]吡啶衍生物 - Google Patents

Abstract

化学式（I）所述的化合物或其可药用盐：

Description

作为P38激酶抑制剂的吡咯并[2,3-C]吡啶衍生物

发明背景

本发明涉及抑制p38丝裂原活化蛋白激酶——参与细胞增殖、细胞对刺激的响应和细胞死亡的哺乳动物蛋白激酶——的作用的杂双环化合物。特别地，本发明涉及作为p38丝裂原活化蛋白激酶的选择性和强效抑制剂的杂双环化合物。本发明还涉及含有抑制p38丝裂原活化蛋白激酶的此类杂双环化合物的药物组合物。

相关背景

丝裂原活化蛋白（MAP）激酶是通过双重磷酸化作用活化并继而在苏氨酸-脯氨酸或丝氨酸-脯氨酸位点上使它们的底物磷酸化的一族脯氨酸定向的丝氨酸/苏氨酸激酶。

MAP激酶响应各种信号，包括营养性和渗透性应激、W光、生长因子、内毒素和炎性细胞因子而活化。MAP激酶的p38亚类（p38，也称作CSBP和RK）是各种同工型的MAP激酶族，其负责磷酸化多种底物，包括转录因子（例如ATF2、CHOP和MEF2C）、其它激酶（例如MAPKAP-2和MAPKAP-3）、肿瘤抑制物（例如p53）和转译调节物（例如3EBP、PRAK)。

大量的慢性和急性病症已被确认与炎症反应的干扰相关。大量细胞因子参与这种反应，包括IL-1、IL-6、IL-8和TNF。这些细胞因子在炎症调节中的表达、分泌和活性看似至少部分依赖于p38的活化。这种激酶是在受生理化学性应激刺激、用脂多糖或用促炎性细胞因子，如IL-1和TNF治疗后，通过双重磷酸化激活的。

TNF和白介素，如IL-1和IL-8影响多种细胞和组织并且是多种病状和病症的重要炎症介质。TNF-α是主要由活化的单核细胞和巨噬细胞生成的细胞因子。过度或未受调节的TNF生成已涉及介导许多疾病。最近的研究表明，TNF在类风湿性关节炎的发病机制中具有致病作用。另外的研究表明，TNF的抑制广泛用于治疗炎症、炎性肠病、多发性硬化和哮喘。TNF也涉及病毒感染，如HIV、流感病毒和疱疹病毒，包括1型单纯疱疹病毒（HSV-1）、2型单纯疱疹病毒（HSV-2）、巨细胞病毒（CMV）、水痘-带状疱疹病毒（VZV）、EB病毒、人疱疹病毒-6（HHV-6）、人疱疹病毒-7（HHV-7）、人疱疹病毒-8（HHV-8）、伪狂犬病毒和鼻气管炎病毒(rhinotracheitia)。I IL-8是由单核细胞成纤维细胞、内皮细胞和角化细胞生成并与病理状况，包括炎症相关的另一促炎细胞因子。

IL-1由活化的单核细胞和巨噬细胞产生并参与炎症反应。IL-1在许多病理生理学响应，包括类风湿性关节炎、发烧和骨吸收降低中起作用。

TNF、IL-1和IL-8影响多种细胞和组织并且是多种病状和病症的重要炎症介质。通过抑制p38激酶来抑制这些细胞因子有益于控制、减轻和缓和这些病状中的许多种。

在过去几年内，已表明p38包含一组MAP I激酶，命名为p38δ、p38γ、p38β、p38α。Jiang, Y.等人（A Biol Chem I (1996) 271:17920-17926）报道了将p38-β表征为与p38-α密切相关的372氨基酸蛋白质。在比较p38-α与p38-β的活性时，作者指出，尽管两者都被促炎性细胞因子和环境应激激活，但p38-β优先被MAP激酶激酶-6（MKK6）激活并优先激活转录因子2，由此表明单独的作用机制可能与这些形式相关。Kumar, S.等人（Biochem Biophys Res Comm (1997) 235:533-538）和Stein, B.等人（JBiol Chem (1997) 272: 19509-19517）报道了p38-β的第二种同工型——p38-β2，其含有364氨基酸，与p38α有73%相同。所有这些报道都表明，p38-β被促炎性细胞因子和环境应激激活，尽管第二种报道的p38-β同工型——p38-β2看似与p38-α的更普遍存在的组织表达相比优先在CNS、心脏和骨骼肌中表达。此外，据观察，与作为p38-α底物相比，活化的转录因子-2（ATF-2）作为p38-β2底物更佳，由此表明单独的作用机制可能与这些形式相关。后两个报道质疑了p38-β1的生理作用，因为其不能在人组织中找到并且没有对p38-α的底物表现出明显的激酶活性。

Li, Z.等人（Biochem Biophys Res Comm (1996)228:334-340）报道了p38-γ的识别，Wang, X.等人（JBiol Chem (1997) 272:23668-23674）和Kumar, S.等人（Biochem Biophys Res Comm (1997) 235:533-538）报道了p38-δ的识别。数据表明，基于它们的组织表达模式、底物利用、对直接和间接刺激的响应和对激酶抑制剂的敏感度，这两种p38同工型（γ和δ）代表MARK族的独特子集。上文引用的Jiang、Kumar和Stein以及EyerS, P. A.等人（Chem and Biol (1995)5:321-328）报道了p38-α和推定的p38-β1或p38-β2之间在对靶向p38族的药物的差别反应方面的各种结果。Wang, Y.等人的另一论文（JBiol Chem (1998)273:2161-2168）提出此类差别效应的显著性。如Wang等人指出，许多刺激，如心肌梗死、高血压、瓣膜疾病、病毒性心肌炎和扩张型心肌病导致心脏负荷提高和心肌细胞上的机械应激提高。

这些据说导致适应性肥大反应，其如果不受控制，则具有明确负面的后果。Wang等人引用之前的研究，它们表明在缺血再灌注治疗的心脏中，p38 MARK活性与肥大和程序性细胞死亡相关联地升高。Wang等人在引用的论文中表明，p38-β活性的活化造成肥大，而p38-α活性的活化造成肌细胞凋亡。

因此，与p38-β活性相比，p38-α活性的选择性抑制有益于治疗与心力衰竭相关的病症。这些病症I包括充血性心力衰竭、心肌病、心肌炎、血管炎、血管再狭窄、瓣膜疾病、与心肺分流术、冠状动脉搭桥术、移植物和血管移植物相关的病症。此外，在α-同工型在其它肌肉细胞类型中有毒的意义上，α-选择性抑制剂可用于与归因于TNF的恶病质相关的病症或其它病症，如癌症、感染或自体免疫病。

PCT申请WO98/06715、WO98/07425、WO98/28292和WO 96/40143描述了p38激酶抑制剂与各种病状的关系。如这些申请中提到，p38激酶抑制剂可用于治疗与慢性炎症相关的各种疾病。这些申请列举了类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎和其它关节炎病症、脓毒病、感染性休克、内毒素休克、革兰氏阴性脓毒病、中毒性休克综合征、哮喘、成人呼吸窘迫综合征、中风、再灌注损伤、CNS损伤如神经损伤和局部缺血、银屑病、再狭窄、脑I型疟疾、慢性肺部炎性疾病、硅肺、肺结节病、骨吸收疾病如骨质疏松症、移植物抗宿主反应、克罗恩病、溃疡性结肠炎，包括炎性肠病（IBD）和发热(pyresis)。

发明概述

化学式（A）所述的化合物或其可药用盐：

是p38的抑制剂并可用于治疗炎症，如用于治疗哮喘、COPD、ARDS、类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎和其它关节炎病症；发炎的关节、湿疹、银屑病或其它炎性皮肤病症如晒伤；炎性眼病，包括结膜炎；发热、疼痛和与炎症相关的其它病症。

发明详述

在一个实施方案中，本发明提供化学式（A）的p38抑制剂化合物：

或其可药用盐，其中：

L选自：

(a) –C(O) –、

(b) –CH(OH) –、

(c) –CH(NR³R⁴) –、

(d) –C(=NOR³) –、

(e) –CH₂–、 和

(f) –S(O)_n–，其中n是0、1或2；

Ar¹是任选单、二-或三-取代的6原子芳环或杂芳环，其中该杂芳环可含有1、2或3个选自N、S和O的杂原子，其中取代基独立地选自：

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基、

(c) –O-C_1-4烷基、

(d) –CF₃、

(e) –NH₂、

(f) –NH-CH₃、

(g) –CN、

(h) –C(O)NH₂，和

(i) –S(O)_n–CH₃；

Ar²是任选单、二-或三-取代的选自以下的稠合5,6双环杂环：

或其N-氧化物，其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基、

(c) –O-C_1-4烷基、

(d) –CF₃、

(e) –NH₂，和

(f) –NH₂-CH₃、

(g) –NH₂-CH₂CF₃、

(h) –C(O)-吗啉基、

(i) –C(O)-NR¹R²、

(j) –C(O)OH、

(k) –CN、

(l) 含有1、2或3个选自S、O和N的杂原子的5或6元杂芳环或杂环；

R¹、R²、R³和R⁴ 独立地选自

(a) 氢，和

(b) C_1-4烷基，

或R¹和R²或R³和R⁴可连接在一起形成5或6 元饱和环，所述环任选含有选自S、N和O的杂原子。

在该实施方案中存在这样一类，其中

L选自

(a) –C(O)–，和

(b) –CH₂–；

在该类中存在这样一亚类，其中

L是–C(O)–。

在该实施方案中存在这样一类，其中

Ar¹是任选单、二-或三-取代的6原子芳环或杂芳环，其中该杂芳环可含有1、2或3个选自N、S和O的杂原子，其中取代基独立地选自：

(a) 卤素，

(b) –C_1-4烷基，和

(c) –O-C_1-4烷基，

在该类中存在这样一亚类，其中

Ar¹是任选单、二-或三-取代的苯基或吡啶基，其中取代基独立地选自：

(a) 氟、

(b) 氯、和

(c) –CH₃。

在该实施方案中存在这样一类，其中在Ar²的选择（l）中，所述含有1、2或3个选自S、O和N的杂原子的5或6元杂芳环或杂环选自：

(a) 吡啶基、

(b) 哒嗪基、

(c) 嘧啶基、

(d) 吡嗪基、

(e) 噻唑基、

(f) 噻吩基(thiophenyl)、

(g) 吡咯基、

(h) 唑基、

(i) 吡咯烷基、

(j) 哌啶基、

(k) 哌嗪基，和

(l) 吗啉基。

在该实施方案中存在这样一类，其中

Ar²是任选单、二-或三-取代的选自以下的稠合5,6双环杂环：

或其N-氧化物，其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基、

(c) –O- C_1-4烷基、

(d) –CF₃、

(e) –C(O)-吗啉基、

(f) –C(O)-NR¹R²，和

(g) –C(O)OH。

在该类中存在这样一亚类，其中

Ar²是任选单、二-或三-取代的选自以下的稠合5,6双环杂环：

或其N-氧化物，其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –CH₃、

(c) –O-CH₃，和

(d) –CF₃。

在该实施方案中存在这样一类，其中

R¹、R²、R³和R⁴ 独立地选自

(a) 氢，和

(b) 甲基，

或R¹和R²或R³和R⁴可连接在一起形成5或6 元饱和环，所述环任选含有选自S、N和O的杂原子。

在该实施方案中存在这样一类式（I）的化合物

或其可药用盐，其中：

Ar¹是任选单、二-或三-取代的6原子芳环或杂芳环，其中 该杂芳环可含有1、2或3个选自N、S和O的杂原子，其中取代基独立地选自

(a) 卤素，

(b) –C_1-4烷基，和

(c) –O-C_1-4烷基；

Ar²是任选单、二-或三-取代的选自以下的稠合5,6双环杂环

或其N-氧化物，其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基、

(c) –O-C_1-4烷基、

(d) –CF₃、

(e) –C(O)-吗啉基、

(f) –C(O)-NR¹R²，和

(g) –C(O)OH；且

R¹和R²独立地选自

(a) 氢，和

(b) C_1-4烷基，

或R¹和R²可连接在一起形成5或6 元饱和环，所述环任选含有选自S、N和O的杂原子。

在该类中存在这样一亚类，其中

Ar¹是任选单、二-或三-取代的苯基或吡啶基，其中取代基独立地选自：

(a) 氟

(b) 氯，和

(c) –CH₃；

Ar²是任选单、二-或三-取代的选自以下的稠合5,6双环杂环

或其N-氧化物，其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –CH₃、

(c) –O-CH₃、

(d) –C(O)-NR¹R²，和

(e) –CF₃；且

R¹和R²独立地选自

(a) 氢，和

(b) 甲基，

或R¹和R²可连接在一起形成5或6 元饱和环，所述环任选含有选自S、N和O的杂原子。

如上所述，MAP激酶的p38亚类是各种同工型的MAP激酶族（包括p38δ、p38γ、p38β、p38α），其负责磷酸化多种下游底物。数据表明，基于它们的组织表达模式、底物利用、对直接和间接刺激的响应和对激酶抑制剂的敏感度，两种p38同工型（α和β）代表MARK族的独特子集。上文的Jiang、Kumar和Stein以及EyerS, P. A.等人[Chem and Biol (1995)5:321-328]报道了p38-α和推定的p38-β1或p38-β2或两者之间在对靶向p38族的药物的差别反应方面的各种结果。Wang, Y.等人的另一论文[J Biol Chem (1998)273:2161-2168]提出选择性抑制p38-α的此类差别效应的显著性。p38-α的典型抑制剂抑制下游底物，包括但不限于MK2、MK3、ATF2、Mnk2a、MSK1、TAB1、CREB和HSP27的磷酸化。基于这些数据，优先抑制这些下游底物的某一子集的磷酸化的p38-α抑制剂与典型p38抑制剂相比表现出提高的治疗指数。

因此，一方面，本发明涉及式I的化合物，其优先于p38-β和/或p38δ和/或p38γ选择性抑制p38-α。这方面中包括如通过体外激酶检测测得的那样优先于p38-β和/或p38δ和/或p38γ抑制p38-α的式I的化合物。

再一方面，本发明涉及强效抑制p38-α并选择性抑制MK2、MK3、ATF2、Mnk2a、MSK1和TAB1中的一种或多种的磷酸化（优先于这些中的其它种或其它下游底物）的式I的化合物。例如，一方面，本发明涉及优先于MSK1、ATF2或肽底物选择性抑制MK2和MK3的磷酸化的式I的化合物。这方面中包括作为p38-α的强效抑制剂并如如通过体外激酶检测测得的那样优先于肽底物选择性抑制MK2的磷酸化的式I的化合物。

术语“缩醛”是指含有键合到两个-OR基团上的CH的官能团或分子。因此“环状缩醛”是指含有缩醛基团的环状或环结构。

术语“烷基”是指不含双键或三键并可以是直链、支链或其组合的碳链。因此，C₁-C₆烷基被定义为是指该基团在直链、支链或其组合的排列中具有1、2、3、4、5或6个碳。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、正丙基、异丙基、丁基、仲-和叔丁基、戊基、己基、庚基等。术语“C₀-C₄烷基”包括含有4、3、2、1或0个碳原子的烷基。当该烷基是末端部分时，不含碳原子的烷基是氢原子取代基。当该烷基是桥连部分时，不含碳原子的烷基是直接键。

术语“链烯”是指具有所示碳原子数、具有至少一个碳-碳双键的直链或支链结构及其组合，其中氢可以被另外的碳-碳双键替代。C₂-C₆链烯例如包括乙烯、丙烯、1-甲基乙烯、丁烯等。

术语“炔基”是指具有所示碳原子数、具有至少一个碳-碳三键的直链或支链结构及其组合。因此，C₂-C₆炔基被定义为是指该基团在直链或支链排列中具有2、3、4、5或6个碳，以使C₂-C₆炔基具体包括 2-己炔基和2-戊炔基。

单独或结合地，本文所用的术语“烷氧基”包括连接到氧连接原子上的烷基。术语“烷氧基”还包括烷基醚基团，其中术语“烷基”如上定义，“醚”是指在它们之间存在氧原子的两个烷基。合适的烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、甲氧基甲烷（也称作“二甲基醚”）和甲氧基乙烷（也称作“乙基甲基醚”）。

除非明确地另行指明，术语“胺”包括伯、仲和叔胺。

除非明确地另行指明，术语“芳基”旨在表示各环中含有最多7员的任何稳定的单环碳环或稠合双环碳环，其中至少一个环是芳族的。此类芳基成分的实例包括苯基、萘基和甲苯基。

除非明确地另行指明，术语“芳氧基”包括经由氧连接原子连接到连接点上的多环体系以及单环体系，例如苯基或萘基。

术语“环烷基”是指不含杂原子的碳环，并包括单-、双-和三环饱和碳环，以及稠环体系。此类稠环可包括一个部分或完全不饱和的环，如苯环，以形成稠环体系，如苯并稠合碳环。环烷基包括如螺稠环体系之类的稠环体系。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、十氢化萘基、金刚烷基、茚满基、茚基、芴基、1,2,3,4-十氢化萘基等。类似地，“环烯基”是指不含杂原子并含有至少一个非芳族C-C双键的碳环，并包括单-、双-和三环的部分饱和碳环，以及苯并稠合环烯。环烯基的实例包括环己烯基、茚基等。

除非明确地另行指明，术语“环烷氧基”包括连接到氧基连接原子上的环烷基。

除非明确地另行指明，术语“杂”包括一个或多个O、S或N原子。例如，杂环烷基和杂芳基包括在环中含有一个或多个O、S或N原子的环体系，包括此类原子的混合物。该杂原子替代环碳原子。

杂环烷基的实例包括氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、四氢呋喃基、咪唑啉基、环状缩醛、环状缩酮、吡啶烷-2-酮、哌啶-2-酮和硫代吗啉基。本文所用的“杂环烷基”包括具有两个或更多个经由相邻或非相邻原子连接的杂环烷基的桥杂环烷基。

除非另行指明，本文所用的术语“杂芳基”旨在表示含有芳环的稳定的5-至7-元单环-或稳定的9-至10-元稠合双环杂环体系，其任意环可以是饱和的，如哌啶基，部分饱和或不饱和的，如吡啶基，并由碳原子和由1至4个选自N、O和S的杂原子构成，且其中氮和硫杂原子可任选被氧化，氮杂原子任选被季铵化，并包括其中的任何如上指定的杂环稠合到苯环上的任何双环基团。该杂环可以在任何杂原子或碳原子处连接，从而产生稳定结构。此类杂芳基的实例包括，但不限于，吡啶、嘧啶、吡嗪、噻吩、唑、噻唑、三唑、噻二唑、二唑、吡咯、1,2,4-二唑、1,3,4-二唑、1,2,4-噻二唑、1,3,4-噻二唑和1,2,4-三唑。

杂芳基的其它实例包括喹啉基、嘧啶基、异喹啉基、哒嗪基、喹喔啉基、呋喃基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吲哚基、吲唑基、异唑基、异噻唑基、咪唑基、苯并咪唑基、噻二唑基、四唑基。

除非明确地另行指明，术语“杂芳氧基”描述经由氧基连接原子连接到连接点上的杂芳基。

杂芳基(C_1-6)烷基的实例包括，例如，呋喃基甲基、呋喃基乙基、噻吩基甲基、噻吩基乙基、吡唑基甲基、唑基甲基、唑基乙基、异唑基甲基、噻唑基甲基、噻唑基乙基、咪唑基甲基、咪唑基乙基、苯并咪唑基甲基、二唑基甲基、二唑基乙基、噻二唑基甲基、噻二唑基乙基、三唑基甲基、三唑基乙基、四唑基甲基、四唑基乙基、吡啶基甲基、吡啶基乙基、哒嗪基甲基、嘧啶基甲基、吡嗪基甲基、喹啉基甲基、异喹啉基甲基和喹喔啉基甲基。

除非另行指明，术语“氨甲酰基”用于包括-NHC(O)OC₁-C₄烷基和–OC(O)NHC₁-C₄烷基。

术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘原子。

术语“缩酮”是指含有键合到两个-OR基团上的碳的官能团或分子。“环状缩酮”因此是指含有缩酮基的环状或环结构。

术语“任选取代”旨在包括取代和未取代。因此，例如，任选取代的芳基可代表五氟苯基或苯基环。此外，可以在任何基团处进行取代。例如，取代芳基(C_1-6)烷基包括在芳基上的取代以及在烷基上的取代。

术语杂芳基的“氧化物”以其普通公知化学含义使用并包括例如氮杂原子的N-氧化物。

本文所述的化合物含有一个或多个双键，并因此可产生顺式/反式异构体以及其它构型异构体。本发明包括所有这样的可能的异构体以及此类异构体的混合物。

除非明确地另行指明或如键符号（虚线或双划线）所示，与所示基团的连接点在所示的最右基团上。也就是说，例如，苯基烷基经由烷基连接到主结构上且苯基是该烷基上的取代基。

本发明的化合物可以以各种可药用盐形式使用。术语“可药用盐”是指药剂师显而易见的那些盐形式，即基本无毒并提供所需药物动力学性质、适口性、吸收、分布、代谢或排泄的那些。在选择中同样重要的、性质上更实际的其它因素是原材料的成本、所得原料药的易结晶性、收率、稳定性、吸湿性和流动性。便利地，可以由与可药用载体结合的活性成分制备药物组合物。

本文所述的化合物可含有一个或多个不对称中心并因此产生非对映体和旋光异构体。本发明包括所有这样的可能的非对映体以及它们的外消旋混合物、它们的基本纯的拆分对映体、所有可能的几何异构体及其可药用盐。在某些位置无限定立体化学的情况下显示上式I。本发明包括式I的所有立体异构体及其可药用盐。此外，还包括立体异构体的混合物以及离析的特定立体异构体。在用于制备此类化合物的合成程序过程中或在使用本领域技术人员已知的外消旋化或差向异构化程序时，此类程序的产物是立体异构体的混合物。

术语“可药用盐”是指由可药用的无毒碱或酸制成的盐。当本发明的化合物是酸性的时，可以便利地由可药用的无毒碱，包括无机碱和有机碱制备其相应的盐。衍生自此类无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜（二价铜和一价铜）、正铁、亚铁、锂、镁、锰（锰和亚锰）、钾、钠、锌和类似的盐。衍生自可药用有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺以及环胺和取代胺，如天然生成和合成取代的胺的盐。可用于形成盐的其它可药用有机无毒碱包括离子交换树脂，例如，精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'-二苄基亚乙基二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、亚乙基二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲基胺、三丙基胺、氨基丁三醇等。

当本发明的化合物是碱性的时，可以便利地由可药用的无毒酸，包括无机和有机酸制备其相应的盐。此类酸包括，例如，乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。可药用盐的实例包括，但不限于，碱性残基，如胺的无机或有机酸盐；酸性残基，如羧酸的碱金属或有机盐；等。可药用盐包括例如由无毒无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。例如，此类常规无毒盐包括衍生自无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐；和由有机酸，如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯基乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸等制成的盐。

本发明的可药用盐可通过常规化学方法合成。通常，通过在合适的溶剂或溶剂组合中使游离碱或酸与化学计算量或过量的形成所需盐的无机或有机酸或碱反应来制备盐。

本发明的化合物可具有不对称中心并以外消旋物、外消旋混合物和独立的非对映体的形式存在。所有这些异构体，包括旋光异构体都包含在本发明中。

本文所述的本发明还包括由式（I）所述的化合物或其可药用盐与可药用载体构成的药物组合物。

本文所述的本发明还包括由式（I）所述的化合物或其可药用盐与可药用载体构成的药物组合物。本发明的药物组合物包含作为活性成分的式（I）所示的化合物（或其可药用盐）、可药用载体和任选其它治疗成分或辅助剂。此类附加治疗成分包括，例如，i) 白三烯受体拮抗剂、ii) 白三烯生物合成抑制剂、iii) 皮质类固醇、iv) H1受体拮抗剂、v) β2肾上腺素受体激动剂、vi) COX-2选择性抑制剂、vii) 他汀类、viii) 非甾体抗炎药（“NSAID”）和ix) M2/M3拮抗剂。

本文所述的本发明还包括治疗关节炎的方法，包括以有效治疗关节炎的量给予需要这种治疗的哺乳动物患者式（I）所述的化合物或其可药用盐。本文所述的本发明还包括治疗关节炎的方法，包括以有效治疗关节炎的量给予需要这种治疗的哺乳动物患者式（I）所述的化合物或其可药用盐。本发明包括通过与COX-2抑制剂联合或共同给予需要这种治疗的哺乳动物患者式（I）所述的化合物或其可药用盐来治疗关节炎的方法。

本文所述的本发明还包括治疗哺乳动物的细胞因子介导疾病的方法，包括以有效治疗所述细胞因子介导疾病的量给予需要这种治疗的哺乳动物患者一定量的式（I）所述的化合物或其可药用盐。

特别有意义的是治疗需要这种治疗的哺乳动物患者的炎症的方法，包括给予所述患者抗炎有效量的式（I）所述的化合物或其可药用盐。

特别有意义的另一方法是治疗如本文所述的细胞因子介导疾病的方法，其中该疾病是骨质疏松症。

特别有意义的另一方法是治疗如本文所述的细胞因子介导疾病的方法，其中该疾病是非骨质疏松性骨吸收。

特别有意义的又一方法是治疗如本文所述的细胞因子介导疾病的方法，其中该疾病是克罗恩病。

本发明还涉及治疗需要这种治疗的哺乳动物的关节炎的方法，包括给予所述哺乳动物有效治疗关节炎的量的式I的化合物。这种方法包括治疗类风湿病和骨关节炎。

当为治疗关节炎而给予患者时，所用剂量可随关节炎的类型、患者的年龄和一般状况、给药的特定化合物、使用该药物时发生的毒性或副作用的存在或程度、和其它因素而变。合适的剂量范围的代表性实例是低至大约0.01 mg/kg至高达大约100 mg/kg。但是，给药剂量通常留给医生决定。

本发明还涉及在有需要的哺乳动物体内抑制p38的作用的方法，包括给予所述哺乳动物有效量的式（I）所述的化合物或其可药用盐，以将p38的所述作用抑制至正常水平，或在一些情况下，低于正常水平，从而改善、预防或治疗病状。

式1的化合物可用于由过度或未受调节的细胞因子，更具体为IL-1、IL-6、IL-8或TNF加剧或造成的哺乳动物病状的预防性或治疗性治疗。

由于式I的化合物通过抑制p38的作用来抑制细胞因子，如IL-1、IL-6、IL-8和TNF，该化合物可用于治疗涉及细胞因子的存在或活性的疾病，如疼痛、类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎和其它关节炎病症。

式（I）所述的化合物或其可药用盐也可用于由过度或未受调节的TNF生成或活性介导的其它病状。此类疾病包括，但不限于脓毒病、感染性休克、内毒素休克、革兰氏阴性脓毒病、中毒性休克综合征、成人呼吸窘迫综合征、脑型疟疾、慢性肺部炎性疾病、硅肺、肺结节病、骨吸收疾病如骨质疏松症、再灌注损伤、移植 v. 宿主排斥、同种异体移植物排斥、发烧、感染引起的肌痛、感染或恶性肿瘤继发的恶病质、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）继发的恶病质、AIDS、ARC（AIDS相关综合征）、瘢痕疙瘩形成、瘢痕组织形成、克罗恩病、溃疡性结肠炎、发热、AIDS和其它病毒感染，如巨细胞病毒（CMV）、流感病毒和疱疹科病毒，如带状疱疹或Simplex I和II。

式（I）所述的化合物或其可药用盐也可局部用于治疗炎症，如用于治疗类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎和其它关节炎病症；发炎的关节、湿疹、银屑病或其它炎性皮肤病症如晒伤；炎性眼病，包括结膜炎；发热、疼痛和与炎症相关的其它病症。

式（I）所述的化合物或其可药用盐也可用于治疗如下疾病：如慢性阻塞性肺病和以过度IL-8活性为特征的疾病。这些病症包括银屑病、炎性肠病、哮喘、心脏和肾脏再灌注损伤、成人呼吸窘迫综合征、血栓形成和肾小球性肾炎。

本发明因此包括治疗需要这种治疗的哺乳动物的银屑病、炎性肠病、哮喘、心脏和肾脏再灌注损伤、成人呼吸窘迫综合征、血栓形成和肾小球性肾炎的方法，包括以有效治疗所述疾病或病症的量给予所述哺乳动物式（I）所述的化合物或其可药用盐。

式（I）所述的化合物或其可药用盐也可用于治疗阿尔茨海默氏症。本发明因此包括治疗需要这种治疗的哺乳动物的阿尔茨海默氏症的方法，包括以有效治疗所述疾病或病症的量给予所述哺乳动物式（I）的化合物或其可药用盐。

当为治疗涉及细胞因子的疾病而给予患者时，所用剂量可随疾病的类型、患者的年龄和一般状况、给药的特定化合物、使用该药物时发生的毒性或副作用的存在或程度、和其它因素而变。合适的剂量范围的代表性实例是低至大约0.01 mg/kg至高达大约100 mg/kg。但是，给药剂量通常留给医生决定。

可通过肠道外给予式I的化合物来实施治疗方法。本文所用的术语“肠道外”包括静脉内、肌肉内或腹膜内给药。皮外和肌肉形式的肠道外给药通常有利。也可以通过皮下、鼻内、直肠内、经皮或阴道内给予式I的化合物来实施本发明。

也可以通过吸入给予式I的化合物。“吸入”是指鼻内和口腔吸入给药。可通过常规技术制备适于这种给药的剂型，如气雾剂或计量吸入器。

本发明还涉及包含式I的化合物和可药用载体的药物组合物。式I的化合物也可以与第二治疗活性化合物一起包含在药物组合物中。

所用药物载体可以是例如，固体、液体或气体。固态载体的实例包括乳糖、白土、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯树胶、硬脂酸镁、硬脂酸等。液态载体的实例是糖浆、花生油、橄榄油、水等。气态载体的实例包括二氧化碳和氮气。

类似地，该载体或稀释剂可包括本领域中公知的延时材料，如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，它们单独或与蜡一起使用。

可以使用多种药物剂型。如果固体剂型用于口服给药，该制品可以是片剂、硬明胶胶囊、锭剂或糖锭形式。固态载体的量广泛变动，但通常为大约0.025毫克至大约1克。当口服给药需要液体剂型时，该制品通常是糖浆、乳剂、软明胶胶囊、悬浮液或溶液形式。当要使用肠道外剂型时，该药物可以是固体或液体形式，并可以配制成直接给药或可适于重构。

也包括局部剂型。局部剂型的实例是固体、液体和半固体。固体包括粉剂、糊药等。液体包括溶液、悬浮液和乳状液。半固体包括霜、油膏、凝胶等。

局部使用的式I的化合物的量当然随所选化合物、病症的性质和严重程度而改变，并可根据医生的决定改变。式I的化合物的代表性的局部剂型为低至大约0.01毫克至高达大约2.0克，每天给药1至4次，或有利地，1至2次。

对局部给药而言，活性成分可构成大约0.001%至大约10% w/w。

本发明的滴剂可包含灭菌或未灭菌的水性或油性溶液或悬浮液，并可以通过将活性成分溶解在任选包括杀菌剂和/或杀真菌剂和/或任何其它合适的防腐剂并任选包括表面活性剂的合适的水溶液中来制备。可随后通过过滤澄清所得溶液，转移到合适的容器中，随后密封并通过压煮或在98-100℃下保持半小时来灭菌。或者，该溶液可通过过滤灭菌并无菌转移到容器中。适合包含在滴剂中的杀菌剂和杀真菌剂的实例是苯基硝酸汞或乙酸汞（0.002%）、苯扎氯铵（0.01%）和醋酸洗必泰（0.01%）。适用于制备油溶液的溶剂包括甘油、稀释醇和丙二醇。

本发明的洗液包括适合施用于皮肤或眼睛的那些。洗眼液可包含任选含杀菌剂的无菌水溶液并可以通过与滴剂制备类似的方法制备。施用于皮肤的洗液或擦剂也可包括加速干燥并使皮肤凉爽的试剂，如醇或丙酮和/或保湿剂，如甘油或油，如蓖麻油或花生油。

本发明的霜、油膏或糊剂是外用的活性成分半固体制剂。它们可通过混合细碎或粉末形式的活性成分（独自使用或溶解或悬浮在的水性或非水液体中）与油脂或非油脂基料来制造。该基料可包含烃，如硬石蜡、软石蜡或液体石蜡、甘油、蜂蜡、金属皂；胶水；天然来源的油，如杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油或橄榄油；羊毛脂或其衍生物、或脂肪酸，如硬脂酸或油酸，以及醇，如丙二醇或大粒凝胶。该制剂可包含任何合适的表面活性剂，如阴离子型、阳离子型或非离子型表面活性剂，如失水山梨糖醇酯或其聚氧乙烯衍生物。也可包括悬浮剂，如天然树胶、纤维素衍生物或无机材料，如二氧化硅，和其它成分，如羊毛脂。

对吸入制剂而言，每次给药的剂量通常低于口服制剂，如片剂或胶囊。例如，经由吸入制剂给药的活性化合物的日剂量可以为0.010毫克至10毫克，特别是0.010毫克至2.5毫克。每天可以使用单剂或多剂吸入剂量，但单剂吸入剂量是优选的。

为了吸入给药，本发明的化合物I的盐便利地以适合肺部给药的气雾剂形式给药。这些气雾剂剂型包括但不限于雾化溶液和悬浮液、计量吸入器或干粉吸入器。为了雾化，通常在水性赋形剂中配制活性成分并通过能够生成细气雾的喷射或电子装置给药。计量吸入器（MDI）在能够生成分散气雾剂的加压容器中使用推进剂，如氢氟碳化合物以溶解或悬浮该活性成分。对干粉吸入而言，借助能够将活性物质输送至肺部的给药装置单独或与赋形剂一起使用化合物I的盐。

在一个实施方案中，该药物制剂适合与在每次制动时释放计量药物的加压计量吸入器一起使用。pMDIs用的制剂可以是在卤化烃推进剂中的溶液或悬浮液形式。由于正逐渐停止使用氯氟烃（也称作Freons或CFCs），pMDIs中所用的推进剂的类型正转换成氢氟烷烃（HFAs），也称作氢氟烃（HFCs）。特别地，在几种目前出售的药物吸入产品中使用1,1,1,2-四氟乙烷（HFA 134a）和1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷（HFA 227）。该组合物可包括用于吸入的其它可药用赋形剂，如乙醇、油酸、聚乙烯基吡咯烷酮等。

加压MDIs通常具有两个部件。首先存在罐部件，药物粒子在压力下以悬浮液或溶液形式储存在其中。其次，存在用于抓握和制动该罐的插座部件。通常，罐容纳多剂制剂，尽管也可以有单剂罐。该罐部件通常包括阀出口，可从中排出该罐的内容物。通过在罐部件上施力以将其推入插座部件，由此打开阀出口和使药物粒子从阀出口传送经过插座部件并从插座出口排出，从该pMDI中分配气雾剂药物。在从该罐中排出时，药物粒子被“雾化”，从而形成气雾剂。希望患者配合雾化药物的排出进行吸入，以使药物粒子夹带在患者的吸气流中并传送至肺部。通常，pMDIs使用推进剂将该罐的内容物加压并从插座部件的出口推出药物粒子。在pMDIS中，制剂以液体或悬浮液形式提供并与推进剂一起位于容器内。该推进剂可呈各种形式，例如，该推进剂可包含加压气体或液化气体。

在另一实施方案中，该药物制剂适合与干粉吸入器一起使用。适用在DPIs中的吸入组合物通常包含活性成分粒子和可药用载体粒子。活性材料的粒度可以为大约0.1微米至大约10微米不等；但是，为了有效输送至远端肺部，至少95%的活性剂粒子为5微米或更小。各活性剂可以以0.01 - 99%的浓度存在。但是，通常，各活性剂以该组合物总重量的大约0.05至50%，更通常大约0.2 - 20%的浓度存在。

如上所述，除活性成分外，该可吸入粉剂优选包括可药用载体，其可以由可用于吸入的任何药理学惰性材料或材料组合构成。有利地，载体粒子由一种或多种结晶糖构成；载体粒子可以由一种或多种糖醇或多元醇构成。载体粒子优选是右旋糖或乳糖，尤其是乳糖的粒子。在采用常规干粉吸入器，如Rotohaler、Diskhaler和Turbohaler的本发明的实施方案中，该载体粒子的粒度可以为大约10微米至大约1000微米。在某些这些实施方案中，载体粒子的粒度可以为大约20微米至大约120微米。在某些其它实施方案中，至少90重量%的载体粒子的粒度小于1000微米，优选为60微米至1000微米。这些载体粒子的相对较大的粒度产生良好的流动和夹带特征。当存在时，载体粒子的量通常为粉末总重量的按重量计最多95%，例如最多90%，有利地最多80%，优选最多50%。如果存在，任何细赋形剂材料的量可以为粉末总重量的按重量计最多50%，有利地最多30%，尤其是最多20%。

本发明在一个实施方案中提供用在干粉吸入器中的组合物，其包含孟鲁司特酸(montelukast acid)和化合物X和作为载体的吸入用乳糖，其中所述组合物适合活性剂的同时、相继或单独给药。乳糖与孟鲁司特酸的重量比为大约1:1至大约30:1，与化合物X的重量比为大约20:1至大约30:1。在一种情况下，乳糖与孟鲁司特酸的重量比为大约2:1至大约25:1，与化合物X的重量比为大约20:1至大约25:1。

本发明在一个实施方案中提供用在干粉吸入器中的组合物，其包含孟鲁司特酸和吸入的皮质类固醇和作为载体的吸入用乳糖，其中所述组合物适合活性剂的同时、相继或单独给药。在此类组合物中，乳糖与孟鲁司特酸的重量比通常为大约1:1至大约30:1。在吸入的皮质类固醇是莫美他松糠酸酯的组合物中，乳糖与莫美他松糠酸酯的重量比为大约130:1至大约4:1，在一个实施方案中，该比率为大约124:1至大约60:1。在吸入的皮质类固醇是环索奈德的组合物中，乳糖与环索奈德的重量比为大约350:1至大约100:1。

该粉末还可含有赋形剂材料的细粒，其可以例如是如上文提到的适合用作载体材料的材料，尤其是结晶糖，如右旋糖或乳糖。当两者都存在时，该细赋形剂材料可以是与载体粒子相同或不同的材料。该细赋形剂材料的粒度通常不超过30微米，优选不超过20微米。在一些情况下，例如，当所存在的任何载体粒子和/或任何细赋形剂材料是本身能在口咽区中引发感觉的材料时，该载体粒子和/或细赋形剂材料可构成指示剂材料。例如，该载体粒子和/或任何细粒赋形剂可包含甘露醇。

本文所述的制剂还可以以按重量计大约0.1%至大约10%，优选大约0.15%至5%，最优选大约0.5%至大约2%的量包括一种或多种添加剂。添加剂可包括，例如，硬脂酸镁、亮氨酸、卵磷脂和十八烷基富马酸钠。当该添加剂是微粉化亮氨酸或卵磷脂时，其优选以按重量计大约0.1%至大约10%，优选大约0.5%至大约5%，优选大约2%微粉化亮氨酸的量提供。优选地，至少95重量%的微粉化亮氨酸具有小于150微米，优选小于100微米，最优选小于50微米的粒径。优选该微粉化亮氨酸的质量平均直径小于10微米。

如果使用硬脂酸镁或十八烷基富马酸钠作为添加剂，其优选以大约0.05%至大约5%，优选大约0.15%至大约2%，最优选大约0.25至大约0.5%的量提供。

当提到粉末粒子的粒度时，要理解的是，除非作出相反的指示，粒度为体积加权粒度。可以通过激光衍射法计算粒度。如果粒子在该粒子表面上还包括指示剂材料，涂布的粒子的粒度有利地也在为未涂布粒子指定的优选粒度范围内。

可以使用标准方法制备本发明的干粉药物组合物。可以使用任何合适的掺合装置，如转筒混合机密切混合该药物活性剂、载体粒子和其它赋形剂（如果有的话）。该制剂的特定组分可以以任何次序混合。特定组分的预混在某些情况下被认为有利。该粉末混合物随后用于填充胶囊、泡罩、储器或与干粉吸入器一起使用的其它储存装置。

在干粉吸入器中，要给药的药剂以未加压的干粉形式储存，在吸入器制动时，患者吸入粉末粒子。DPIs可以是粉末包含在独立胶囊中的单位剂量装置、使用多个胶囊或泡罩的多单位剂量装置、和粉末在给药时刻从储存容器中计量给药的储器装置。干粉吸入器可以是“被动”装置，其中利用患者的呼吸分散粉末以输送至肺部，或“主动”装置，其中利用呼吸制动外的机制分散粉末。“被动”干粉吸入器的实例包括Spinhaler、Handihaler、Rotahaler、Diskhaler、Diskus、Turbuhaler、Clickhaler等。主动吸入器的实例包括Nektar肺部吸入器 (Nektar Therapeutics)、Vectura Limited's Aspirair™装置、Microdose DPI (MicroDose)和Oriel DPI (Oriel)。但是，应该认识到，本发明的组合物可以用被动或主动吸入器给药。

检测法

蛋白质表达和提纯

在果蝇S2细胞中在铜可诱导的金属硫蛋白促进剂的转录控制下表达含有FLAG表位标签的鼠科p38。通过用1mM CuSO4处理转染细胞4小时，诱导重组p38的表达。为生成活性重组鼠科p38，在收获前10分钟用400mM NaCl、2mM Na3VO4和100μg/L大田软海绵酸刺激CuSO4-处理过的S2细胞。用磷酸盐缓冲盐水、2mM Na3VO4洗涤细胞团块，并在20mM Tris HCl, pH 7.5、120mM NaCl、1% Triton X-100、2mM EDTA、20mM NaF、4mM Na3VO4、2mM Prefabloc SC (Boehringer Mannheim)中裂解。将细胞裂解产物在13,000 x g下离心10分钟，并活化，通过柱色谱法经由已用裂解缓冲液平衡的抗-FLAG M2树脂（Kodak）从该裂解产物中免疫亲和提纯活化的重组鼠科p38。在加载提取物后，用10倍柱体积的裂解缓冲液、10倍柱体积的缓冲液A（10mM Tris HCl, pH 7.5, 500mM NaCl, 20%甘油）和10倍柱体积的缓冲液B（10mM Tris HCl pH 7.5, 150mM NaCl, 20%甘油）洗涤该树脂。在含有100μg/mL FLAG肽（Kodak）的缓冲液B中洗脱该融合蛋白。

在埃希氏大肠杆菌中用谷胱甘肽-S-移转酶表达ATF-2的N-末端115氨基酸作为融合蛋白。根据标准程序（Pharmacia）在谷胱甘肽琼脂糖上提纯该融合蛋白。

p38激酶检测法

在96孔板中在30°下在下列条件下在100微升反应体积中进行p38激酶检测45-1200分钟：25mM Hepes, pH 7.4, 10mMmgCl2, 20mM β-甘油磷酸酯, 2mM DTT, 5μM ATP, 10μCi [γ-33P]-ATP和~ 2μM GST-ATF2。在各反应中将化合物的连续稀释液添加到2微升DMSO中。在各反应板的最后一列中添加2微升DMSO作为各抑制剂滴定的无抑制剂对照。用含有100mM EDTA和15mM焦磷酸钠的等体积的终止溶液终止该反应。用甲醇预润湿PVDF滤板（MAIPNOB50, Millipore）并用终止溶液洗涤。将来自单反应的50微升等分试样在真空下施加到该过滤器中，该过滤器用75mM磷酸洗涤两次。在闪烁计数器（Top Count, Packard）中计数该滤板并测定在各化合物浓度下的抑制百分比。

或者，在384孔板中在30°下在下列条件下在70微升反应体积中进行p38激酶检测45-1220分钟：50 mM Hepes、pH 7.4, 10 mM MgCl2, 1mg/ml FA Free BSA, 1 mM DTT, 10μM ATP, 10μM p38肽[Caliper Life Sciences FL-Peptide 8 (5-FAM-IPTSPITTTYFFFKKK-COOH)]和5.7 nM p38-α (Millipore)或14.3 nM未活化MAPKAP激酶-2, 0.18 nM p38-α (Millipore)和2 uM RSK肽 [Caliper Life Sciences FL-Peptide 11 (5-FAM-KKLNRTLSVA-COOH)]。在各反应中将化合物的连续稀释液添加到700nL DMSO中。在反应板的对照孔中添加700nL DMSO作为各抑制剂滴定的无抑制剂对照。通过添加15微升的100mM EDTA，终止该反应。使用Caliper LabChip 3000分析产物形成。分离缓冲液含有100mM HEPES pH 7.5, 0.015% Brij-35, 2.5% Coating Reagent #3 (Caliper Life Sciences)和10 mM EDTA。使用Caliper Life Sciences提供的HTS Well Analyzer软件进行底物产物率的计算并测定在各化合物浓度下的抑制百分比。

TNF-α释放检测法

使用肝素钠作为抗凝血剂，通过静脉穿刺获取健康志愿者的血液。使用淋巴细胞分离液（ICN）根据制造商说明分离外周血单核细胞（PBMCs）。分离的PBMCs用HBSS洗涤3次并在RPMI + 5%自体人血清中稀释至2 x 106个细胞/毫升的密度。将50微升的抑制剂连续稀释液添加到96孔组织培养板的孔中，接着添加100微升PBMCs和随后50微升含400纳克/毫升LPS的RPMI完全培养基。在每次滴定中包括不含化合物但含LPS的对照孔（最大刺激对照）和不含化合物也不含LPS的对照孔（背景对照）。细胞在增湿培养器中在37℃，5%CO₂下培养16小时。然后收获上清液并使用商业试剂（R&D, Inc）通过免疫测定法定量TNF-α。

本发明的化合物在上述检测法中通过小于10μM的结果证实了效力（IC50）。更有利的化合物具有小于1μM的结果。再更有利的化合物具有小于0.1μM的结果。再更有利的化合物在检测法中具有小于0.01μM的结果。下面例举具体实施例表现出的效力。

化合物1-29的结构和化合物1-3、5-25和27-29的体外活性

除非另行指明，本文所用的缩写如下：

Bu 丁基

Bn 苄基

BOC 叔丁氧基羰基

BOP 苯并三唑-1-基氧基三/二甲基氨基-六氟磷酸鏻

DCC 二环己基碳二亚胺

DME 1,2-二甲氧基乙烷

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMAP 4-二甲基氨基吡啶

EDC 1-(3-二甲基氨基丙基_3-乙基碳二亚胺盐酸盐

EtOAc 乙酸乙酯

Eq. 当量

HOBt, HOBT 羟基苯并三唑

HPLC 高压液相色谱法

LAH 氢化铝锂

LCMS 液相色谱-质谱仪

LHMDS 双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂

MeOH 甲醇

MHz 兆赫

MS(ES) 质谱仪-电子喷雾

NMP N-甲基吡咯烷酮

Ph 苯基

Pr 丙基

TBAF 四丁基氟化铵

TEA 三乙胺

THF 四氢呋喃

TMEDA N,N,N’,N’-四甲基亚乙基二胺

TLC 薄层色谱法

Tetrakis 四(三苯基膦)钯

可以根据下面提供的通用流程图以及中间体和实施例中提供的程序制备本化合物。下列流程图、实施例和中间体进一步描述，但不限制，本发明的范围。除非另行指明或除非普通技术人员显而易见，取代基与上式中相同。

本文所述的用于合成化合物的程序可包括一个或多个保护基控制和提纯步骤，例如重结晶、蒸馏、柱色谱法、快速色谱法、薄层色谱法（TLC）、径向色谱法和高压色谱法（HPLC）。可以使用化学领域中公知的各种技术表征产物，包括质子和碳-13核磁共振（¹H和¹³C NMR）、红外和紫外线光谱法（IR和UV）、X-射线结晶学、元素分析和HPLC和质谱法（LC-MS）。保护基控制、提纯、结构识别和定量方法是化学合成领域技术人员公知的。

要理解的是，如果适当，可以使用本领域技术人员可获得的标准官能团转化技术进一步控制下列流程图中描述的化合物中存在的官能团，以提供本发明中所述的所需化合物。

本领域技术人员显而易见的其它变动或修改在本发明的范围和教导内。除如下列权利要求中阐述的外，不限制本发明。

流程图1

可以如流程图1、2和3中所述合成式I的化合物。可以通过本领域技术人员已知的方法由相应的酸或市售材料制备适当的酰氯1。容易由化合物1通过任何已知程序，如用吡咯-2-羧酸酯的Friedel-Craft酰化合成化合物2。

流程图2

可以由适当的氨基甲基杂环3使用本领域已知的方法，如还原性烷基化或置换反应制备化合物6。或者，也可以由适当的杂环醛4和卤化物5通过使用与上文类似的程序合成化合物6。

流程图3

在标准肽偶联反应条件下，可以将酸2和胺6转化成酰胺7。标准肽偶联反应条件是指在合适的溶剂，如二氯甲烷或DMF中在HOBt存在下使用酸活化剂，如EDC、DCC或BOP使羧酸与胺偶联。可以由中间体7通过使用酸条件，如甲磺酸、pTSA和硫酸获得式I的化合物。

流程图4

式I的化合物的酮基官能团可通过文献中公知的化学进一步转化成去酮基和羟基官能团。例如，可以通过硼氢化钠将酮基还原产生羟基部分。可以通过在甲醇中用催化量的碳载钯氢化来进一步除去羟基部分。或者，可以通过在酸条件中与烷基硅烷反应来一步制备脱酮基化合物8。

流程图5

式I的化合物的酮基官能团也可使用本领域已知的方法进一步转化成肟和胺部分。所得胺9可充当可用于进一步反应，如酰化、磺酰化和还原性烷基化的中间体。

流程图6

化合物3、4和5可购得或可根据本领域已知的程序合成。例如，化合物10可以与甘氨酸衍生物反应产生化合物11。可以使用本领域已知的方法除去保护基，例如可以在酸条件中除去BOC基团，并可以通过氢化除去苄基。可以由化合物12和二-卤丙酮根据本领域已知的程序获得化合物5。

流程图7

可以由中间体13通过使用各种反应条件，如使用市售杂环锡或杂环硼酸的标准Pd-介导的偶联获得化合物14。

流程图8

可以通过本领域技术人员已知的方法实现腈15的水解以产生相应的羧酸16。在标准肽偶联反应条件下，可以将酸16转化成酰胺或酯17。

中间体1

4-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

步骤A：2,4,6-三氟苯甲酰氯

向2,4,6-三氟苯甲酸（20克，0.11摩尔）和DMF（0.5毫升，6.46毫摩尔）的DCM 200毫升溶液中逐滴加入草酰氯（21.6克，0.17摩尔）。该反应混合物在室温下搅拌1小时并减压除去溶剂以产生粗产物形式的标题化合物（22克）。

步骤B：4-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

在N₂下在室温下向2,4,6-三氟苯甲酰氯（4.3克，0.022摩尔）的120毫升DCM溶液中加入AlCl₃（8.8克，0.066摩尔）。在搅拌15分钟后，经10分钟分小份加入1H-吡咯-2-甲酸（2.4克，0.022摩尔）。在室温下搅拌1小时后，逐滴添加冰水（20毫升）和1N HCl来处理反应混合物以将pH调节至1，再搅拌30分钟，用EtOAc（3×30毫升）萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩产生标题化合物（5.8克，97%收率）。¹H-NMR (500MHz、CDCl₃): δ 12.48 (br.s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.28-7.38 (m, 2H), 6.83 (s, 1H)。

根据中间体1，步骤A & B的程序使用适当取代的羧酸代替2,4,6-三氟苯甲酸制备下列中间体。

中间体2: 4-(2,6-二氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

中间体3: 4-(2,4-二氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

中间体4: 4-(3,5-二氟异烟酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

中间体5

4-(2,6-二氟-4-甲基苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

步骤A：1,3-二氟-5-甲基苯

将1-(溴甲基)-3,5-二氟苯（50克，0.24摩尔）、10% Pd/C（3克）和乙酸钠（140克，1.7摩尔）在无水醚（250毫升）中的混合物在氢下在大气压下搅拌24小时。过滤该混合物，滤液经无水Na₂SO₄干燥，过滤并直接用于下一步骤。¹H-NMR (500MHz、CDCl₃): δ 6.56 (d, 2H, J=6.0 Hz), 6.47 (t, 1H, J=9.0 Hz), 2.22 (s, 3H)。

步骤B：2,6-二氟-4-甲基苯甲醛

经20分钟向1,3-二氟-5-甲基苯（10.2克，80毫摩尔）在无水醚（80毫升）中的溶液中加入n-BuLi（在己烷中的2.5 M溶液，48毫升，120 毫摩尔），同时使内部温度保持在大约-50℃。在该温度下搅拌1.5小时后，经20分钟加入DMF（14.6克，200毫摩尔）。在该相同温度下再搅拌1.5小时后，将反应混合物缓慢倒入1N硫酸水溶液（300毫升）中并用醚萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，经无水MgSO₄干燥，过滤并浓缩产生标题化合物（11.2克，90%）。¹H-NMR (500MHz、CDCl₃): δ 10.25 (s, 1H), 6.75 (d, 2H, J=9.9 Hz), 2.39 (s, 3H)。

步骤C：2,6-二氟-4-甲基苯甲酸

将氧化银（43.8克，0.189摩尔）与水（200毫升）和氢氧化钠 (33.7克，0.842摩尔）一起装在烧瓶中。经30分钟分小份向其中加入2,6-二氟-4-甲基苯甲醛（29.23克，0.187摩尔）。在剧烈放热反应后，反应混合物的颜色从黑色变成灰色。将所得稠悬浮液搅拌1小时，经布氏漏斗过滤。用浓HCl将滤液酸化至pH 2以产生悬浮液。抽吸过滤收集沉淀物，溶解在醚中并经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩产生白色固体（17.0克，53%）。¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ13.7 ( br.s, 1H ), 7.02 ( d, 2H, J=9.3 Hz), 2.32 ( S, 3H )。

步骤D：4-(2,6-二氟-4-甲基苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸

根据中间体1，步骤A & B的程序，使用2,6-二氟-4-甲基苯甲酸代替2,4,6-三氟苯甲酸合成标题化合物。

¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 12.9 ( br. S, 1H ), 12.6 ( S, 1H ), 7.46 ( S, 1H ), 7.05 ( d, 2H, J=8.8 Hz), 6.95 (s, 1H ), 2.35 ( S, 3H )。

中间体6

1-(4,5-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲胺二-盐酸盐

步骤A：{2-[(2-氨基-3,4-二氟苯基)氨基]-2-氧代乙基}氨基甲酸叔丁酯

向[(叔丁氧基羰基)氨基]乙酸（14.1克，80.4毫摩尔）的130毫升DMF溶液中加入EDC (18.8克，96.2毫摩尔）、HOBt（13.1克，96.2毫摩尔）、3,4-二氟-苯-1,2-二胺（11.2克，77.7毫摩尔）和N,N-二异丙基乙胺（27.1毫升，156毫摩尔）。将该反应混合物在室温下搅拌6小时。过滤所得悬浮液，滤液用EtOAc稀释，用饱和氯化铵水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩产生粗固体产物形式的标题化合物（24克）。LC/MS: m/z 302(M+H)。

步骤B：[(4,5-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯

将步骤A中获得的粗产物溶解在冰乙酸（200毫升）中并在油浴中加热至100℃ 1小时，并冷却至室温。该混合物用EtOAc稀释并用水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。分离有机层，经无水Na₂SO₄干燥，过滤、浓缩并从2:1 EtOAc:己烷（200毫升）中重结晶产生标题化合物（22克）。LC/MS: m/z 284(M+H)。

步骤C：1-(4,5-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲胺二-盐酸盐

在室温下向步骤B中获得的产物（13.9克，48.9毫摩尔）的MeOH 144毫升溶液中加入乙酰氯（16.6克，212毫摩尔）。将反应混合物（溶液）在油浴中加热至55℃ 1小时，随后冷却至室温。在冰水浴中冷却所得悬浮液，通过抽吸过滤收集沉淀物并干燥产生标题化合物（12.5克）。LC/MS: m/z 184(M+H)。

中间体7

2-(氨基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯二-三氟乙酸盐

向2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯（710毫克，2.33毫摩尔）的DCM 5毫升溶液中加入三氟乙酸（5毫升）。在室温下搅拌3小时后，将该混合物浓缩并从DCM中重结晶产生标题化合物（730毫克）。LC/MS: m/z 206(M+H)。

中间体8

1-(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲胺

步骤A：2-(氯甲基)-6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪

以3-氯-6-甲基哒嗪为原料，根据文献程序制备标题化合物（Terme, T.；Galtier, C.；Maldonado, J.；Crozet, M. P.；Gueiffier, A.；Vanelle, P. J. Heterocyclic Chem. 2002, 39, 173）。

步骤B：1-(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲胺

将2-(氯甲基)-6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪（0.6克，3.3毫摩尔）和氢氧化铵（25%，30毫升）的混合物在密封管中加热至80℃ 1小时。将反应混合物减压浓缩以产生粗产物形式的标题化合物。该材料不经进一步提纯即用于下一步骤。

中间体9

1-(6-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲胺

以5-甲基-3-硝基吡啶-2-胺为原料，根据文献程序制备标题化合物（Priepke, H.；Pfau, R；Gerlach, K.；Gillard, J.；Bauer, E.；Wienen, E.；Wolfgang, H.；Sandra N. H. WO 2004056784, 2004）。

中间体10

2-(氨基甲基)-N-(2,2,2-三氟乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酰胺

步骤A：2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-3H -咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酸甲酯

向[(6-溴-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯（Priepke, H.；Pfau、R；Gerlach, K.；Gillard, J.；Bauer, E.；Wienen, E.；Wolfgang, H.；Sandra N. H. WO 2004056784, 2004.）（1.2克，3.66毫摩尔）的MeOH 25毫升溶液中加入Et₃N（1.11克，11毫摩尔）、Pd(dppf)Cl₂（263毫克，0.366毫摩尔）。将反应混合物在CO气氛（50 psi）下在80℃下搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并浓缩滤液，在硅胶上色谱分离，用DCM: MeOH: TEA（50:1:0.01, v/v/v）洗脱以产生标题化合物（0.9克，82%）。

步骤B：2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酸

向2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-3H-咪唑并[4,5- b]吡啶-6-甲酸甲酯（11.0克，37.6毫摩尔）的MeOH-H₂O（5 : 1）72毫升溶液中加入一水合氢氧化锂（7.5克，179毫摩尔）。在60℃下搅拌4小时后，将反应混合物冷却至0 ，用1N HCl酸化至pH 5，浓缩并通过Prep-HPLC提纯（77x250 mm, JT BAKER C-18 RP柱，10μ粒度，线性梯度，5% MeCN/H₂O+0.1% TFA至35% MeCN/H₂O+0.1% TFA @ 200mL/min）以产生标题化合物（7.5克，71%）。MS (ESI): m/z 293(M+H)。 ¹H-NMR (400MHz, d⁶-DMSO): δ 13.04 (br. S, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 4.39 (s, 2H), 1.35 (s, 9H)。

步骤C：[(6-{[(2,2,2-三氟乙基)氨基]羰基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶- 2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯

向2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酸（293毫克，1.0毫摩尔）的DMF 3毫升溶液中加入HOBt（162毫克，1.2毫摩尔）、2,2,2-三氟乙胺（130毫克，1.5毫摩尔）、DIPEA（388毫克，3.0毫摩尔）和EDC（288毫克，1.5毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌整夜并在EtOAc和水之间分相。有机层用盐水洗涤两次，经无水Na₂SO₄干燥，并减压浓缩。残留物通过制备TLC提纯（MeOH/CH₂Cl₂=1/10, v/v）以产生标题化合物（0.26克，70%）。

步骤D：2-(氨基甲基)- N-(2,2,2-三氟乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6- 甲酰胺

用在二氧杂环己烷中的4N HCl（30毫升）处理[(6-{[(2,2,2-三氟乙基)氨基]羰基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯（0.657克，1.76毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌整夜，减压浓缩并与EtOAc共蒸发两次以产生标题化合物。该粗产物不经进一步提纯即用于下一步骤。

中间体11

1-[6-(吗啉-4-基羰基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲胺

根据对中间体10描述的程序，使用吗啉代替2,2,2-三氟乙胺，制备中间体11。

根据公开的程序制备下列中间体（表A）。

表A

实施例1

6-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

步骤A：N-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-2,2-二甲氧基乙胺

向1-(1H-苯并咪唑-2-基)甲胺二盐酸盐（4.0克，18.2毫摩尔）的MeOH 150毫升悬浮液中加入二甲氧基乙醛（1.89克，18.2毫摩尔，在水中的60重量%溶液）、乙酸钠（7.45克，91毫摩尔）和氰基硼氢化钠（9.09毫升，9.09毫摩尔，1.0 M THF溶液）。将反应混合物在室温下搅拌整夜，减压浓缩并在DCM（150毫升）中重构。过滤所得悬浮液。浓缩滤液并在硅胶上用梯度溶剂混合物（5% MeOH-DCM至15% MeOH-DCM over 15 CV）色谱分离以产生油状标题化合物（3.1克）。LC/MS: m/z 205(M⁺-OMe)。 ¹H-NMR (CDCl₃, 500MHz) δ 3.02 (d, 1H), 3.36 (s, 6H), 4.40 (s, 2H), 4.52 (t, 1H), 7.28-7.32 (m, 2H), 7.58-7.62 (m, 2H), 8.78-8.92 (br.s, 1H)。

步骤B：N-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-4-(2,4,6- 三氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酰胺

向步骤A中获得的产物（693毫克，2.95毫摩尔）的DMF 5毫升溶液中加入4-(2,4,6-三氟-苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸 (793毫克，2.95毫摩尔）、EDC（678毫克，3.53毫摩尔）、HOBt（541毫克，3.53毫摩尔）和三乙胺（0.821毫升，5.89毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌整夜。过滤所得悬浮液并用EtOAc稀释。有机层用饱和氯化铵水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩产生油状标题化合物（930毫克）。LC/MS: m/z 487(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, CDCl₃): δ 3.39 (s, 6H), 3.86 (br.s, 2H), 4.69 (d, 1H), 5.21 (s, 2H), 6.74 (t, 2H), 7.01 (br.s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.45 (dd, 2H), 7.65 (dd, 2H), 11.23 (s, 1H)。

步骤C：6-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

将来自步骤B的产物（910毫克，1.87毫摩尔）的甲磺酸1.5毫升溶液在油浴中在95℃下搅拌25分钟。将反应混合物冷却至室温，用MeCN-H₂O（2:3）混合物（3毫升）稀释。所得溶液通过反相HPLC（C-18柱）提纯（洗脱剂：含0.5% TFA的乙腈-水的梯度混合物）以产生标题化合物（414毫克）。LC/MS: m/z 423(M+H)。 ¹H-NMR (d⁶-DMSO, 500MHz): δ 5.59 (s, 2H), 7.06 (d, 1H), 7.35-7.39 (m, 4H), 7.61-7.68 (m, 3H), 7.93 (d, 1H), 13.14 (s, 1H)。

根据实施例1的程序使用适当的Ar¹和Ar²（中间体1- 16和市售原材料）制备表1中的实施例。

表1

实施例2

6-[(4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 441(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ: 5.50 (s, 2H), 6.99-7.03 (m, 2H), 7.15 (m, 1H), 7.32-7.37 (m, 3H), 7.59 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 13.09 (s, 1H)。

实施例3

6-[(4,5-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 459(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁴-CD₃OD : d⁶-DMSO=3 : 1): δ 5.62 (s, 2H), 7.21-7.28 (m, 3H), 7.31-7.37 (m, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.88 (s, 1H)。

实施例4

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-1H-苯并咪唑-6-甲酸甲酯 LC/MS: m/z 481(M+H)。

实施例5

6-(咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 424(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO):δ 5.48 (s, 2H), 6.99 (t, 2H), 7.16 (dd, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.57(d, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.88(s, 1H), 8.27 (dd,1H)。

实施例6

6-(3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 424(M+H)。 ¹H-NMR (600 MHz, d⁶-DMSO): δ 5.55 (s, 2H), 7.01 (t, 2H), 7.22 (m, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.91 (dd, 1H), 8.31 (dd, 1H)。

实施例7

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-(3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 406(M+H)。 ¹H-NMR (600 MHz, d⁶-DMSO)：δ: 5.46 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 7.16 (dd, 1H), 7.24 (t, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.58 (m, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 8.26 (d, 1H)。

实施例8

6-[(6-溴-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 504(M+H)。 ¹H-NMR (600MHz, d⁶-DMSO)：δ 5.50 (s, 2H), 7.02 (d, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.61 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.36 (d, 1H)。

实施例9

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-[(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲基]-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (CDCl₃, 500MHz): δ 7.88 (br. S, 1H), 7.77 (d, 1H, J=9.4 Hz), 7.52 (s, 1H), 7.42 (m, 3H), 7.24 (d, 1H, J=7.1 Hz), 6.97 (m, 2H), 5.39 (s, 2H), 2.69 (s, 3H)。 LC/MS: m/z 420(M+H)。

实施例10

6-(1,3-苯并唑-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (CDCl₃, 500MHz): δ 7.68 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.50 (m, 1H) 7.32 (m, 4H), 6.78 (t, 2H), 5.52 (s, 2H)。 LC/MS: m/z 424(M+H)。

实施例11

6-[(6-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (d⁴-CD₃OD, 500MHz): δ 8.20 (s, 1H), 7.76 (m, 2H), 7.54 (d, 1H, J =7.3 Hz), 7.25 (d, 1H, J=7.1 Hz), 7.05(m, 2H), 5.55 (s, 2H), 2.46 (s, 3H)。 LC/MS: m/z 438(M+H)。

实施例12

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-[(6-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (d⁴-CD₃OD, 500MHz): δ 8.20 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.25 (d, 1H, J=7.0 Hz), 7.14(m, 2H), 5.56 (s, 2H), 2.46 (s, 3H)。 LC/MS: m/z 420(M+H)。

实施例13

3-(3,5-二氟异烟酰基)-6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (CDCl₃, 500MHz): δ 8.60 (s, 1H), 8.45 (m, 1H), 7.82 (m, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.20 (m, 2H), 6.82 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.49 (s, 2H)。

LC/MS: m/z 406(M+H)。

实施例14

3-(2,6-二氟-4-甲基苯甲酰基)-6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (d⁴-CD₃OD, 500MHz): δ 8.47 (m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.58 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.19 (m, 2H), 6.97 (m, 2H), 6.85 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 5.50 (s, 2H), 2.42 (s, 3H)。 LC/MS: m/z 419(M+H)。

实施例15

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-N-(2,2,2-三氟乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酰胺 ¹H-NMR (d⁴-CD₃OD, 500MHz): δ 8.86 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.58 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.05 (m, 2H), 5.60 (s, 2H), 4.23 (m, 2H)。 LC/MS: m/z 549(M+H)。

实施例16

6-{[6-(吗啉-4-基羰基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (d⁴-CD₃OD, 500MHz): δ 8.44 (d, 1H, J=1.8 Hz), 8.01 (d, 1H, J=1.8 Hz), 7.77 (s, 1H), 7.56 (d, 1H, J=7.3 Hz), 7.26 (d, 1H, J=7.1 Hz), 7.05 (m, 2H), 5.60 (s, 2H), 3.81-3.62 (m, 4H)。 LC/MS: m/z 537(M+H)。

实施例17

6-(3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO) δ: 5.50 (s, 2H), 6.90 (d, 1H), 7.36 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.87 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 8.80 (s, 1H)。 LC/MS: m/z 424(M+H)。

中间体17

2-(氯甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-腈盐酸盐

向2-氨基-氰基吡啶（5.0克，42毫摩尔）的乙醇50毫升溶液中加入1,3-二氯丙酮（6.93克，54.6毫摩尔）。将该混合物加热至回流1.5小时并冷却至室温以产生悬浮液。通过抽吸过滤收集沉淀物，用二氯甲烷洗涤并干燥产生标题化合物（7.2克）。LC/MS: m/z 192(M+H)。

中间体18

2-(氯甲基)-6-(三氟甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶

步骤A：3-硝基-5-(三氟甲基) 吡啶-2-胺

在室温下向溶解在硫酸（20毫升）中的5-(三氟甲基)吡啶-2-胺（1.1克，6.79毫摩尔）溶液中加入硝酸（0.475克，6.79毫摩尔）。加热至70℃ 1小时后，将反应混合物冷却至室温并用EtOAc和冰稀释。分离有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤，减压浓缩并在硅胶上色谱分离，用梯度溶剂混合物洗脱（5% MeOH-DCM至15% MeOH-DCM）以产生标题化合物（680毫克）。LC/MS: m/z 208(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz、CD₃OD): δ 8.60 (d, 1H), 8.67 (d, 1H)。

步骤B：5-(三氟甲基)吡啶-2,3-二胺

向3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺（680毫克，3.28毫摩尔）的甲醇5毫升溶液中加入阮内镍（240毫克以湿浆形式装入，用10毫升H₂O洗涤3次）。该混合物在Parr摇振器中在50 psi下在室温下摇振1小时，用N₂吹扫并经C盐垫过滤。用甲醇（5毫升x3）洗涤该C盐垫。将滤液减压浓缩以产生标题化合物（454毫克）。LC/MS: m/z 178(M+H)。

步骤C：2-(氯甲基)-6-(三氟甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶

向5-(三氟甲基)吡啶-2,3-二胺（454毫克，2.56毫摩尔）的DCM 2毫升悬浮液中加入2-氯-1,1,1-三乙氧基-乙烷（504毫克，2.56毫摩尔）。使用微波反应器将该混合物加热至100℃ 20分钟并将所得固体悬浮在1:1 DCM:己烷（5毫升）中并温和声处理。通过抽吸过滤收集沉淀物以产生标题化合物（324毫克）。LC/MS: m/z 236(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 4.98 (s, 2H), 8.42(d, 1H), 8.72 (d, 1H)。

中间体19

2-(氯甲基)-7-(三氟甲基)-咪唑并[1,2-a]吡啶

根据中间体17的程序，使用4-(三氟甲基)吡啶-2-胺代替2-氨基-氰基吡啶制备标题化合物。LC/MS: m/z 235(M+H)。

实施例18

3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-6-{[(7-三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

步骤A：1-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-{[7-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基]甲基}甲胺

向1-(1,3-二氧戊环-2-基)甲胺（814毫克，7.89毫摩尔）的DCM 5毫升溶液中加入2-(氯甲基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶（中间体19）（620毫克，2.63毫摩尔）。在加热至回流1.5小时后，将反应混合物（悬浮液）冷却至室温并减压浓缩。残留物在硅胶上色谱分离，用梯度溶剂混合物洗脱（5% MeOH-DCM至15% MeOH-DCM）以产生固体形式的标题化合物（450毫克）。LC/MS: m/z 302(M+H)。

步骤B：N-(1,3-二氧戊环-2-基甲基)-4-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-N-{[7-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酰胺

向1-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-{[7-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基]甲基}甲胺（1.13克，3.75毫摩尔）的DMF 10毫升溶液中加入4-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸（1.06克，3.94毫摩尔）、EDC（1.08克，5.63毫摩尔）、HOBt（862毫克，5.63毫摩尔）和三乙基 胺（1.57毫升，11.25毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌整夜。所得悬浮液用EtOAc稀释。有机相用饱和氯化铵水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩并在硅胶上色谱分离，用梯度溶剂混合物洗脱（100% DCM至5% MeOH-DCM）以产生泡沫状的标题化合物（744毫克）。LC/MS: m/z 533(M+H)。

步骤C：3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-6-{[7-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

将来自步骤B的产物（744毫克，1.40毫摩尔）溶解在甲磺酸（6.0毫升）中并加热至85℃ 50分钟。在冰水浴中冷却后，将反应混合物溶解在2:3 MeCN-H₂O（10毫升）中并通过反相HPLC（C-18柱）提纯产生标题化合物（430毫克）。LC/MS: m/z 491(M+H)。 ¹H-NMR (d⁶-DMSO, 500MHz): δ 5.40 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 7.20 (dd, 1H ), 7.33 (t, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 8.01 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.71 (d, 1H), 13.09 (s, 1H)。

根据实施例18的程序对Ar1和Ar2使用适当的中间体（中间体1、2、3、19和市售材料），制备表2中的实施例。

表2

实施例19

3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-6-{[6-(三氟甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 492(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ5.50 (s, 2H), 7.02 (d, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.60 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 8.32 (br.s, 1H), 8.66 (s, 1H), 13.05 (d, 1H)。

实施例20

3-(2,4-二氟苯甲酰基)-6-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 LC/MS: m/z 405(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 5.46 (s, 2H), 7.04 (d, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.82 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.74 (d, 1H), 12.98 (d, 1H)。

实施例21

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-{[6-(三氟甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 8.58 (d, 1H, J=1.6Hz), 8.21 (d, 1H. J=1.6Hz)；7.76 (s, 1H), 7.61 (app. pent. 1H), 7.58(d, 1H, J=7.1Hz), 7.26 (t, 2H, J=7.8Hz), 6.95 (d, 1H, J=7.1Hz), 5.51(s, 2H)。

实施例22

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺

步骤A：2-{[(1,3-二氧戊环-2-基甲基)-氨基]-甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-腈

向1-(1,3-二氧戊环-2-基)甲胺（799毫克，7.83毫摩尔）的DCM溶液中加入2-(氯甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-腈盐酸盐（中间体17）（500毫克，2.61毫摩尔）。加热至回流1小时后，将反应混合物冷却至室温，减压浓缩，在硅胶上色谱分离，用梯度溶剂混合物洗脱（5% MeOH-DCM至15% MeOH-DCM）以产生油状标题化合物（410毫克）。LC/MS: m/z 259(M+H)。

步骤B：N-[(7-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基]-N-(1,3-二氧戊环-2-基甲基)-4-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酰胺

向步骤A中获得的产物（410毫克，1.58毫摩尔）的DMF 3毫升溶液中加入4-(2,4,6-三氟-苯甲酰基)-1H-吡咯-2-甲酸（427毫克，1.58毫摩尔）、EDC（396毫克，2.06毫摩尔）、HOBt（316毫克，2.06毫摩尔）和三乙胺（0.443毫升，3.17毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌整夜。过滤所得悬浮液并用EtOAc稀释，用饱和氯化铵水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩产生泡沫状标题化合物（430毫克）。LC/MS: m/z 510(M+H)。

步骤C：2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺

将来自步骤B的产物（430毫克，0.884毫摩尔）溶解在甲磺酸（2.0毫升）中并在油浴中加热至95℃ 25分钟。在冰水浴中冷却后，反应混合物用2:3 MeCN-H₂O（3毫升）稀释并通过反相HPLC（C-18柱）提纯以产生标题化合物（174毫克）。LC/MS: m/z 467(M+H)。 ¹H-NMR (d⁶-DMSO, 500MHz): δ 5.46 (s, 2H), 7.01 (d, 1H), 7.33 (t, 2H ), 7.58-7.59 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.91 (d, 1H) 8.12 (d, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.72 (d, 1H), 13.12 (s, 1H)。

实施例23

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酸

向悬浮在H₂O（0.5毫升）中的实施例22中获得的产物（40毫克，0.083毫摩尔）中加入浓HCl（0.68毫升，8.31毫摩尔）。将该混合物置于微波反应器中并加热至100℃ 10分钟。所得悬浮液用3:1 MeCN:H₂O（2毫升）与DMSO（1毫升）稀释并通过反相HPLC（C-18柱）提纯以产生标题化合物（29毫克）。LC/MS: m/z 468(M+H)。 ¹H-NMR (600 MHz, d⁶-DMSO): δ 5.45 (s, 2H), 6.98 (d, 1H), 7.32 (t, 2H), 7.53 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.71 (d, 1H)。

实施例24

N,N-二甲基-2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺

向在DMF中的实施例23中获得的产物（4.7毫克，0.010毫摩尔）中加入EDC（2.51毫克，0.013毫摩尔）、HOBt（2.06毫克，0.013毫摩尔）和二甲基胺（3.83微升，0.030毫摩尔）。在室温下搅拌整夜后，反应混合物用3:2 MeCN:H₂O（2毫升）稀释并通过反相HPLC（C-18柱）提纯以产生标题化合物（3.1毫克）。LC/MS: m/z 494(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 2.92 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 5.43 (s, 2H), 6.99 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.33 (t, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.66 (d, 1H), 13.1 (d, 1H)。

实施例25

N-甲基-2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并-[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺

根据实施例24的程序，使用在乙醇中的甲基胺代替二甲基胺制备标题化合物。LC/MS: m/z 480(M+H)。 ¹H-NMR (600 MHz, d⁶-DMSO): δ 2.78 (d, 3H), 5.38 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 7.32 (t, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.68 (d, 1H)。

实施例26

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-1H-苯并咪唑-5-甲酸

在冰水浴中冷却后，向实施例4中获得的产物的甲磺酸溶液中加入H₂O（1毫升）。将该混合物在油浴中加热至70℃ 1.5小时。冷却至室温后，反应混合物用2:3 MeCN: H₂O（3毫升）稀释并通过反相HPLC（C-18柱）提纯以产生标题化合物。LC/MS: m/z 467(M+H)。

实施例27

N-甲基-2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-1H-苯并咪唑-5-甲酰胺

根据实施例24的程序，用甲基胺/乙醇代替乙胺处理实施例26中获得的产物以产生标题化合物。LC/MS: m/z 480(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 2.78 (d, 3H), 5.55 (s, 2H), 7.04 (d, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.58-7.62 (m, 2H), 7.75 (dd, 1H), 7.92 (d, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 13.1 (d, 1H)。

实施例28

3-[(2,4-二氟苯基)(羟基)甲基]-6-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

在室温下向实施例20中获得的产物（10毫克）的MeOH溶液中加入硼氢化钠（4毫克）。在搅拌30分钟后，该混合物用MeCN/水（3/2）稀释并通过反相HPLC（C-18柱）提纯以产生标题化合物（4毫克）。LC/MS: m/z 407(M+H)。

实施例29

6-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苄基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

向实施例6中获得的产物（115毫克，0.272毫摩尔）的TFA 2.5毫升溶液中加入三乙基硅烷（103毫克，0.68毫摩尔）。在油浴中加热至100℃ 整夜后，反应混合物冷却至室温，用3:2 MeCN:H₂O（4毫升）稀释并通过反相HPLC（C-18柱）提纯以产生标题化合物（13.4毫克）。LC/MS: m/z 410(M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 3.91 (s, 2H), 5.46 (s, 2H), 6.51 (d, 1H), 7.06 (d, 1H), 7.15 (t, 2H), 7.34 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 8.38 (br.s, 1H), 11.83 (s, 1H)。

根据实施例1-29中的程序使用实施例中描述的中间体、市售化合物或根据公开程序制成的化合物，制备化合物30-81。

化合物30-81的结构和质谱数据

实施例82

6-{[6-(1H-吡咯-2-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

在可微波的管瓶中加入6-[(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮（20毫克，0.04 毫摩尔）、[1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基]硼酸（12.6毫克，0.06 毫摩尔）、碳酸铯（39毫克，0.119 毫摩尔）、双(三苯基膦)氯化钯(II)（2.8毫克，3.98微摩尔）和乙腈/水（0.6/0.2毫升）。密封该管瓶，用3个冷冻-抽吸-解冻的周期吹扫。通过微波照射将所得悬浮液加热至135℃ 15分钟。LCMS表明原材料完全消耗并形成所需产物。反应混合物用乙腈稀释，经0.45微米膜过滤器过滤，随后在减压下浓缩至干。粗反应混合物在Xbridge（C18 5u粒度，30X75 mm）制备柱上通过HPLC提纯，用线性梯度的15-40%乙腈/水（0.01% NH4OH）以70毫升/分钟洗脱以产生标题化合物（1.6毫克，8%）。MS (ESI): m/z 489 (M+H)。 ¹H-NMR (500MHz, d⁶-DMSO): δ 11.35 (br. S, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.00 (d, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.54(s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.47 (s, 2H),

中间体20

[6-(3,5-二甲基-异唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯

向配有搅拌棒的干燥20毫升微波容器，合并1,1'-双(二苯基膦基) 二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物（125毫克，0.153 毫摩尔）和LiOH（110毫克，4.58 毫摩尔）。该容器配有隔片并用真空和氮气吹扫三次。将该混合物悬浮到脱气的10:1二氧杂环己烷:H2O（2.5毫升）中。向该悬浮液中加入(6-溴-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)- 氨基甲酸叔丁酯（500毫克，1.528 毫摩尔）、3,5-二甲基异唑-4-硼酸（323毫克，2.292 毫摩尔）和频哪醇（271毫克，2.292 毫摩尔）。反应混合物再用真空和氮气吹扫三次并使用微波波纹隔片密封。将该反应器置于微波反应器中并在120℃下加热2.5小时。基于LC/MS (M+1= 344)，反应完全。将所得棕色悬浮液减压浓缩至干并用20毫升10% MeOH-DCM重构。随后加入30克230-400目SiO₂，并剧烈搅拌所得浆料。减压除去溶剂并将吸收在二氧化硅上的化合物填充到40g SIM料筒中。使用SiO2快速色谱法（120 g ISCO料筒；230-400目SiO₂）提纯粗产物，用含有0.5%三乙胺的10% MeOH-DCM平衡，以产生360毫克琥珀油状的标题化合物（69%）。

中间体21

6-(3,5-二甲基-异唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基-三氟乙酸铵盐

在氮气氛中向[6-(3,5-二甲基-异唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯（360毫克，1.048 毫摩尔）的DCM溶液（4毫升）中加入三氟乙酸（4.0毫升，51.9 毫摩尔）。

该反应在室温下搅拌1小时并基于LC/MS (M+1= 244)测得完全。减压除去溶剂并在40% aq. MeCN中重构。经由RP C-18 HPLC（30x 100mm柱，5μ粒度）使用梯度条件提纯化合物：含有0.5% TFA的5-50% MeCN-H2O。冻干提供205毫克白色固体状的标题化合物（54%）

其它实施例

可以根据附加实施例82的程序使用适当的Ar¹和硼酸制备表I中的实施例83至89。可以根据实施例82，步骤A、B和C的程序，使用适当的Ar¹和硼酸制备表1中的实施例90至94。

实施例83 6-{[6-(3,5-二甲基异唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁴-CD3OD, 500 Mhz) δ 8.28 (m, 1H), 7.89 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.56 (d, 2H, J = 2.7 Hz), 7.26 (d, 1H, J = 3.7 Hz), 7.05 (m, 2H), 5.60 (s, 2H), 3.65 (s, 1H), 3.35 (s, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.25 (s, 3H)。

LC/MS；M+1= 518。

实施例84 6-{[6-(1H-吡咯-3-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁶-DMSO, 500 Mhz) δ 8.57 (s, 1/2H), 8.49 (s, 1/2H), 7.90 (m, 2H), 7.59 (m, 2H), 7.36 (m, 3H), 7.00 (t, 1H, J = 8.5 Hz), 6.79 (m, 1H), 6.48 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 5.47 (m, 3H)。

LC/MS；M+1= 489。

实施例85 6-[(6-甲基-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁶-DMSO, 500 Mhz) δ 13.15 (bs, 1H), 8.63 (m, 1/2H), 8.07 (m, 1/2H), 7.90 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.37(m, 3H), 7.01-6.67 (m, 3H), 6.19 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 1.06-1.01 (m, 27H)。

LC/MS；M+1= 646。

实施例86 6-{[6-(1H-吡咯-3-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁶-DMSO, 500 Mhz) δ 13.10 (m, 2H), 8.64 (s, 1/2H), 8.56 (s, 1/2H), 8.14 (s, 1/2H), 7.96 (s, 1/2H), 7.90 (s, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.20 (m, 1H), 7.01(m, 1H), 5.47 (m, 2H)。

LC/MS；M+1= 490。

实施例87 6-{[6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR(d⁶-DMSO, 500 Mhz) δ 8.58 (s, 1/2H), 8.51 (s, 1/2H), 8.21-7.90 (m, 3H), 7.60 (m, 1H), 7.37 (m, 3H), 7.01 (m, 1H), 5.48 (s, 2H), 3.85 (s, 3H)。

LC/MS；M+1= 504。

实施例88 6-{[6-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁶-DMSO, 500 Mhz) δ 8.28 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.26 (m, 1H), 7.01 (m, 1H), 5.50 (s, 2H), 2.174 (s, 3H), 2.165 (s, 3H)。

LC/MS；M+1= 518。

实施例89 3-(2,6-二氟-4-甲基-苯甲酰基)-6-[6-(3,5-二甲基-异唑-4-基)-3-H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-1,6-二氢-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮 ¹H NMR (500 Mhz, d⁶-DMSO) δ: 13.10 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.06 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.53 (s, 2H), 2.39 (br.s, 6H), 2.20 (s, 3H)。

LC/MS；M+1= 515。

实施例90 3-(2,6-二氟-苯甲酰基)-6-[6-(3,5-二甲基-异唑-4-基)-3-H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-1,6-二氢-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁶-DMSO, 500 Mhz) δ: 13.10 (S, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.58-7.64 (m, 2H), 7.26 (t, 2H), 6.98 (d,1H), 5.53 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.21 (s, 3H)。

LC/MS；M+1= 501。

实施例91 3-(2,6-二氟-4-甲基-苯甲酰基)-6-[6-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-1,6-二氢-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁴-CD3OD, 500 Mhz) δ: 8.49 (br.s, 1H), 8.19 (br.s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.26(d, 1H), 6.97 (d, 2H), 5.60 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.31 (s, 6H)。

LC/MS；M+1= 514。

实施例92 3-(2,6-二氟-苯甲酰基)-6-[6-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-1,6-二氢-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (d⁴-CD3OD, 500 Mhz) δ: 8.70 (br.s, 1H), 8.51 (br.s, 1H), 8.48 (br.s, 2H), 7.70 (s,1H), 7.55-7.61 (m, 2H), 7.27 (d, 1H), 7.13 (t, 2H), 5.67 (bs, 2H)。

LC/MS；M+1= 472。

实施例93 3-(2,6-二氟-4-甲基-苯甲酰基)-6-[6-(1-H-吡唑-4-基)-3-H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-1,6-二氢-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (500 Mhz, d⁴-CD₃OD) δ: 8.77 (br.s, 1H), 8.39 (br.s, 1H), 8.17 (br. S, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.96 (d, 2H), 5.66 (br.s, 2H), 2.44 (s, 3H)。

LC/MS；M+1= 486。

实施例94 3-(2,6-二氟-苯甲酰基)-6-[6-(1H-吡唑-3-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基]-1,6-二氢-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮

¹H NMR (500 Mhz, d⁶-DMSO) δ: 13.10 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.74 (br.s, 1H), 7.59-7.63 (m, 2H), 7.24 (t, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 5.50 (s, 2H)。 LC/MS；M+1= 472。

Claims (10)

1.化学式（A）所示的化合物

或其可药用盐，其中：

L选自：

(a) –C(O) –、

(b) –CH(OH) –、

(e) –CH₂–；

Ar¹是任选单、二-或三-取代的苯基或吡啶基，其中取代基独立地选自：

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基；

Ar²是任选单、二-或三-取代的

其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基、

(d) –CF₃、

(h) –C(O)-吗啉基、

(i) –C(O)-NR¹R²、

(j) –C(O)OH、

其中R¹和R²独立地选自

(a) 氢，和

(b) C_1-4烷基。

2.根据权利要求1的化合物，其中

L选自：

(a) –C(O)–，和

(b) –CH₂–。

3.根据权利要求2的化合物，其中

L是–C(O)–。

4.根据权利要求1的化合物，其中

Ar¹是任选单、二-或三-取代的苯基或吡啶基，其中取代基独立地选自

(a) 氟、

(b) 氯、和

(c) –CH₃。

5.根据权利要求1的化合物，其中

Ar²是任选单、二-或三-取代的：

其中取代基独立地选自：

(a) 卤素、

(b) –CH₃、和

(d) –CF₃。

6.根据权利要求1的化合物，其中

R¹和R²独立地选自

(a) 氢，和

(b) 甲基。

7.根据权利要求1的化合物，具有式（I）

或其可药用盐，其中：

Ar¹是任选单、二-或三-取代的苯基或吡啶基，其中取代基独立地选自：

(a) 卤素，

(b) –C_1-4烷基；

Ar²是任选单、二-或三-取代的

其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –C_1-4烷基、

(d) –CF₃、

(e) –C(O)-吗啉基、

(f) –C(O)-NR¹R²、和

(g) –C(O)OH；且

R¹和R²独立地选自

(a) 氢，和

(b) C_1-4烷基。

8.根据权利要求7的化合物，其中

Ar¹是任选单、二-或三-取代的苯基或吡啶基，其中取代基独立地选自

(a) 氟

(b) 氯，和

(c) –CH₃；

Ar²是任选单、二-或三-取代的：

其中取代基独立地选自

(a) 卤素、

(b) –CH₃、

(d) –C(O)-NR¹R²、和

(e) –CF₃；且

R¹和R²独立地选自

(a) 氢，和

(b) 甲基。

9.根据权利要求1的化合物，选自：

6-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-[(4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-[(4,5-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-(咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-(3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-(3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-[(6-溴-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-[(6-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲基]-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-(1,3-苯并唑-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-[(6-甲基-3H -咪唑并[4,5- b]吡啶-2-基)甲基]-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H -吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-[(6-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)甲基]-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(3,5-二氟异烟酰基)-6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,6-二氟-4-甲基苯甲酰基)-6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7 H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-N-(2,2,2-三氟乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-甲酰胺、

6-{[6-(吗啉-4-基羰基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

6-(3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-6-{[(7-三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-6-{[6-(三氟甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,4-二氟苯甲酰基)-6-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

3-(2,6-二氟苯甲酰基)-6-{[6-(三氟甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺、

2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酸、

N,N-二甲基-2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺、

N-甲基-2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并-[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-咪唑并[1,2-a]吡啶-7-甲酰胺、

N-甲基-2-{[7-氧代-3-(2,4,6-三氟苯甲酰基)-1,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-c]吡啶-6-基]甲基}-1H-苯并咪唑-5-甲酰胺、

3-[(2,4-二氟苯基)(羟基)甲基]-6-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、和

6-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲基)-3-(2,4,6-三氟苄基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮、

或其可药用盐。

10.包含惰性载体和有效量的根据权利要求1的化合物的药物组合物。