PL194509B1 - Antagonisty GnRH modyfikowane w pozycjach 5 i 6, zawierające je kompozycje farmaceutyczne oraz ich zastosowanie - Google Patents
Antagonisty GnRH modyfikowane w pozycjach 5 i 6, zawierające je kompozycje farmaceutyczne oraz ich zastosowanieInfo
- Publication number
- PL194509B1 PL194509B1 PL98336213A PL33621398A PL194509B1 PL 194509 B1 PL194509 B1 PL 194509B1 PL 98336213 A PL98336213 A PL 98336213A PL 33621398 A PL33621398 A PL 33621398A PL 194509 B1 PL194509 B1 PL 194509B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- 4aph
- xaa
- ala
- peptide
- hor
- Prior art date
Links
- 229940121381 gonadotrophin releasing hormone (gnrh) antagonists Drugs 0.000 title claims description 50
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 189
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract description 30
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 claims abstract description 22
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims abstract description 16
- BKMMTJMQCTUHRP-VKHMYHEASA-N (S)-2-aminopropan-1-ol Chemical compound C[C@H](N)CO BKMMTJMQCTUHRP-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 11
- HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N (2r)-2-aminopropanamide Chemical compound C[C@@H](N)C(N)=O HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N 0.000 claims abstract description 10
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 46
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 46
- -1 methylcarbamoyl Chemical group 0.000 claims description 40
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 33
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 29
- 239000002474 gonadorelin antagonist Substances 0.000 claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 14
- UFIVEPVSAGBUSI-UHFFFAOYSA-N dihydroorotic acid Chemical group OC(=O)C1CC(=O)NC(=O)N1 UFIVEPVSAGBUSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 6
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 claims description 5
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 claims description 5
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 claims description 5
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- GNVNKFUEUXUWDV-VIFPVBQESA-N (2s)-2-amino-3-[4-(aminomethyl)phenyl]propanoic acid Chemical compound NCC1=CC=C(C[C@H](N)C(O)=O)C=C1 GNVNKFUEUXUWDV-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- CMUHFUGDYMFHEI-QMMMGPOBSA-N 4-amino-L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N)C=C1 CMUHFUGDYMFHEI-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 3
- KZKRPYCBSZIQKN-UHFFFAOYSA-N 2-Imidazolidone-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CNC(=O)N1 KZKRPYCBSZIQKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JLLYLQLDYORLBB-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-n-methylthiophene-2-sulfonamide Chemical compound CNS(=O)(=O)C1=CC=C(Br)S1 JLLYLQLDYORLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 125000004063 butyryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 2
- 125000003774 valeryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M acrylate group Chemical group C(C=C)(=O)[O-] NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 abstract description 28
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 abstract description 21
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 18
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 abstract description 13
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 abstract description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000035558 fertility Effects 0.000 abstract description 4
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 abstract description 3
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N urea group Chemical group NC(=O)N XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 57
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 49
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 49
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 49
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- ZWNUQDJANZGVFO-YHSALVGYSA-N acyline Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(NC(C)=O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(NC(C)=O)C=C1 ZWNUQDJANZGVFO-YHSALVGYSA-N 0.000 description 42
- 108010070822 acyline Proteins 0.000 description 42
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 41
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 41
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 41
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 25
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 24
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 21
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 20
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 20
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 15
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 15
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- MGOLNIXAPIAKFM-UHFFFAOYSA-N 2-isocyanato-2-methylpropane Chemical compound CC(C)(C)N=C=O MGOLNIXAPIAKFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 11
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 11
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 11
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 11
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 10
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 9
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 8
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- UFIVEPVSAGBUSI-REOHCLBHSA-N (S)-dihydroorotic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CC(=O)NC(=O)N1 UFIVEPVSAGBUSI-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- 108700008462 cetrorelix Proteins 0.000 description 7
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- BKMMTJMQCTUHRP-GSVOUGTGSA-N (2r)-2-aminopropan-1-ol Chemical compound C[C@@H](N)CO BKMMTJMQCTUHRP-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 6
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 6
- SBNPWPIBESPSIF-MHWMIDJBSA-N cetrorelix Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 SBNPWPIBESPSIF-MHWMIDJBSA-N 0.000 description 6
- 229960003230 cetrorelix Drugs 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 6
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 6
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N dihydrogen phosphate;triethylazanium Chemical compound OP(O)(O)=O.CCN(CC)CC UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- HAMGRBXTJNITHG-UHFFFAOYSA-N methyl isocyanate Chemical compound CN=C=O HAMGRBXTJNITHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 5
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 5
- KZKRPYCBSZIQKN-REOHCLBHSA-N (4s)-2-oxoimidazolidine-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CNC(=O)N1 KZKRPYCBSZIQKN-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 4
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 230000002710 gonadal effect Effects 0.000 description 4
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KLSJWNVTNUYHDU-UHFFFAOYSA-N Amitrole Chemical compound NC1=NC=NN1 KLSJWNVTNUYHDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical class OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940127233 azaline B Drugs 0.000 description 3
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- NOENHWMKHNSHGX-IZOOSHNJSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-acetamido-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]-3-(4-chlorophenyl)propanoyl]amino]-3-pyridin-3-ylpropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-6-(ca Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CCCCNC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 NOENHWMKHNSHGX-IZOOSHNJSA-N 0.000 description 2
- HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 2-heptylcyclohex-2-en-1-one Chemical compound CCCCCCCC1=CCCCC1=O HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 229920001367 Merrifield resin Polymers 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010070670 antarelix Proteins 0.000 description 2
- 230000003517 anti-gonadal effect Effects 0.000 description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 238000005515 capillary zone electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGBSISYHAICWAH-UHFFFAOYSA-N dicyandiamide Chemical group NC(N)=NC#N QGBSISYHAICWAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 2
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 2
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 108010004034 stable plasma protein solution Proteins 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N urethane group Chemical group NC(=O)OCC JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DMBKPDOAQVGTST-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylmethoxypropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)COCC1=CC=CC=C1 DMBKPDOAQVGTST-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- AWHLZPUCOBVQKQ-VIFPVBQESA-N (2s)-2-amino-4-(4-aminophenyl)butanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC1=CC=C(N)C=C1 AWHLZPUCOBVQKQ-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- PPOYBSPBMCNZGI-NSHDSACASA-N (2s)-2-amino-6-(pyridin-3-ylmethylamino)hexanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNCC1=CC=CN=C1 PPOYBSPBMCNZGI-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- ZODMYTRQCNEOFM-QMMMGPOBSA-N (2s)-6-amino-2-(propan-2-ylamino)hexanoic acid Chemical compound CC(C)N[C@H](C(O)=O)CCCCN ZODMYTRQCNEOFM-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- XHCGTVHIQUXPRM-SSIREWOPSA-N (2s)-n-[(2r,4s,7r)-7-acetamido-2-amino-4-[[(2s)-2-amino-6-[(5-amino-1h-1,2,4-triazol-3-yl)amino]hexanoyl]-[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-6-[(5-amino-1h-1,2,4-triazol-3-yl)amino]hexanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]carbamoyl]-1-(4-chlorophenyl)-8-naphthalen-2-yl-3,6- Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N(C(=O)[C@@H](N)CCCCNC=1N=C(N)NN=1)C(=O)[C@@](CC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)(N(C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=NC=CC=1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCCNC(C)C)C(=O)[C@H](N)CC=1C=CC(Cl)=CC=1)CCCNC1=NNC(N)=N1 XHCGTVHIQUXPRM-SSIREWOPSA-N 0.000 description 1
- MAEDLSNGVQYGPK-UHFFFAOYSA-N 2,2-diaminoacetic acid Chemical compound NC(N)C(O)=O MAEDLSNGVQYGPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 3-(2-Naphthyl)-D-Alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLJQDHDVZJXNQL-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-n-(oxomethylidene)benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)N=C=O)C=C1 VLJQDHDVZJXNQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- HQMLIDZJXVVKCW-REOHCLBHSA-N L-alaninamide Chemical compound C[C@H](N)C(N)=O HQMLIDZJXVVKCW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DEFJQIDDEAULHB-IMJSIDKUSA-N L-alanyl-L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DEFJQIDDEAULHB-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 1
- 150000001294 alanine derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004198 anterior pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 108700022499 azaline Proteins 0.000 description 1
- 206010003883 azoospermia Diseases 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- OWIUPIRUAQMTTK-UHFFFAOYSA-N carbazic acid Chemical compound NNC(O)=O OWIUPIRUAQMTTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N glycinamide Chemical compound NCC(N)=O BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000006698 hydrazinolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- NIZHERJWXFHGGU-UHFFFAOYSA-N isocyanato(trimethyl)silane Chemical compound C[Si](C)(C)N=C=O NIZHERJWXFHGGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDNLNVZZTACNJX-UHFFFAOYSA-N isocyanatomethylbenzene Chemical compound O=C=NCC1=CC=CC=C1 YDNLNVZZTACNJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005928 isopropyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(OC(*)=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- PBMIETCUUSQZCG-UHFFFAOYSA-N n'-cyclohexylmethanediimine Chemical compound N=C=NC1CCCCC1 PBMIETCUUSQZCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UBLQIESZTDNNAO-UHFFFAOYSA-N n,n-diethylethanamine;phosphoric acid Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC UBLQIESZTDNNAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 238000006303 photolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015843 photosynthesis, light reaction Effects 0.000 description 1
- 125000000612 phthaloyl group Chemical group C(C=1C(C(=O)*)=CC=CC1)(=O)* 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 238000013222 sprague-dawley male rat Methods 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Chemical compound CC(N)=S YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007079 thiolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical group C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
- A61K38/09—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH], i.e. Gonadotropin-releasing hormone [GnRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/11—Gonadotropin; related peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
1. Antagonistyczny peptyd GnRH o wzorze: X-D-NaL-(A) D-Phe-D-Pal-Ser-Xaa 5 -Xaa 6 -Leu-Xaa 8 -Pro-Xaa 10 i jego sole dopuszczalne farmaceutycznie, w którym: X oznacza grup e acylow a zawieraj ac a nie wi ecej ni z 7 atomów w egla, lub metylokarbamoil; A oznacza 4Cl lub 4F; Xaa 5 oznacza Aph(Q 1 ) gdzie Aph oznacza 4-aminofenyloalanin e, Amf(Q 1 ) gdzie Amf oznacza 4-aminometylofenylo- alanin e, w których Q 1 oznacza Q b edacy -C(O)-NHR, albo Q 1 oznacza grupy o wzorach; w których Hor oznacza kwas hydroorotowy o wzorze C 4 N 2 H 5 (O) 2 COOH, Imz oznacza kwas 2-imidazolidono-4-karbo- ksylowy o wzorze C 3 N 2 H 5 (O)COOH; R oznacza atom wodoru lub C 1 -C 5 alkil Xaa 6 oznacza D-Aph(Q 2 ), D-Amf(Q 2 ), D-Cit, lub D-Pal, w których Q 2 oznacza Ac lub Q 1 ; Xaa 8 oznacza Lys(ipr); i Xaa 10 oznacza D-Ala-NH 2 , D-Ala-ol, Ala-ol, NHCH 2 CH 3 , Gly-NH 2 , lub Ala-NH 2 , z tym warunkiem, ze gdy Xaa 5 zawiera Q, to Xaa 6 tak ze zawiera Q. 14. Kompozycja farmaceutyczna do hamowania wydzielania gonadotropinu ssaków, znamienna tym, ze jako aktywny sk lad- nik zawiera skuteczn a ilo sc antagonisty GnRH okre slonego w zastrze zeniu 1, w po laczeniu z nietoksycznym rozcie nczalnikiem. 15. Zastosowanie antagonistycznego peptydu GnRH okre slonego w zastrze zeniu 1, do wytwarzania kompozycji prze- znaczonej do diagnozy in vivo lub in vitro stanu, gdy GnRH powoduje nadmierne wydzielanie hormonów lub wzrost guza. 5 PL PL PL PL PL PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są peptydy, które są antagonistami ludzkiego hormonu uwalniającego gonadotropinę (GnRH) i które mają korzystne właściwości fizyczne, chemiczne i biologiczne. Przedmiotowy peptyd określony jest wzorem X-D-NaL-(A)D-Phe-D-Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Xaa8-Pro-Xaa10. Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja zawierająca te peptydy, a także ich zastosowanie. W szczególności, przedmiotem niniejszego wynalazku są dekapeptydy, które hamują funkcję gonadalną i uwalniają steroidowe hormony, progesteron i testosteron, w ciągu dłuższych okresów czasu, oraz kompozycje farmaceutyczne przeznaczone szczególnie do kierowania warunkami wynikającymi z hipersekrecji steroidów gonadalnych.
Hormon folikulotropowy (FHG) i hormon luteinizujący (LH), nazywane czasem gonadotropinami lub hormonami gonadotropiny, są uwalniane przez przysadkę, która jest połączona szypułą z podwzgórzem.
Uwalnianie hormonu przez przedni płat przysadki zwykle wymaga uprzedniego uwolnienia hormonów wytwarzanych przez podwzgórze, takich jak dekapeptyd GnRH.
Podawanie analogów GnRH, które są antagonistami normalnej funkcji GnRH, stosowano do tłumienia wydzielania gonadotropiny ogólnie u ssaków i do tłumienia lub opóźniania owulacji.
1
Poszukiwanie lepszych antagonistów GnRH doprowadziło do otrzymania Antidu, to jest [Ac-D-2Nal , D-4ClPhe2, D-3Pal3, Lys(Nic)5, D-Lys(Nic)6, ILys8, D-Ala10]-GnRH; i Cetrorelixu, to jest [Ac-D-2Nal1, D-4ClPhe2, D-3Pal3, D-Cit6, D-Ala10]-GnRH. Opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,516,887 podaje antagonisty GnRH, które są bardziej skuteczne niż Antid w tłumieniu testosteronu plazmy, na przykład [Ac-D-2Nal1, D-4ClPhe2, D-3Pal3, D-N6-karbanylo Lys6, ILys8, D-Ala10]-GnRH, który nazwano Antarelixem.
Opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,296,468, wydany w dniu 22 marca 1994, ujawnia model i syntezę szeregu antagonistów GnRH, w których poddaje się reakcji łańcuchy boczne wybranych reszt w celu wytworzenia ugrupowań cyjanoguanidynowych, a niektóre z nich następnie ulegają samorzutnej konersji do pożądanego heterocyklu, na przykład do 3-amino-1,2,4-riazolu (atz). Takie cyjanoguanidynowe ugrupowania są zbudowane na grupie omega-aminowej w bocznym łańcuchu aminokwasu, takiego jak lizyna, ornityna, 4-aminofenyloalanina (4Aph) lub jej odmiana z rozciągniętym łańcuchem, taka jak 4-aminohomofenyloalanina (4Ahp). Antagonisty GnRH z takimi znacznie zmodyfikowanymi lub nienaturalnymi aminokwasami w pozycjach 5 i 6 wykazują dużą bioaktywność, a zbudowane na ApH są ogólnie uważane za korzystne. Szczególnie korzystna jest Acylina B, to jest [AC-D-2Na1, D-4ClPhe2, D-3Pal3, 4Aph(atz)5, D-4Aph(atz)6, ILys8, D-Ala10]-GnRH. Opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,506,207 ujawnia biologicznie aktywne antagonisty GnRH, w których podstawione grupą aminową boczne łańcuchy fenyloalaniny reszt w pozycjach 5 i 6 są acylowane; szczególnie silnym dekapeptydem jest Acylina, to jest [Ac-D-2Na1, D-4ClPhe2, D-3Pal3, 4Aph(Ac)5, D-4Aph(Ac)6, ILys8, D-Ala10]-GnRH.
Międzynarodowa publikacja WO 96/40757 ujawnia wzory i syntezy antagonistów GnRH gdzie na pozycji 6 znajdują się następujące podstawniki; D-Lys (Imdac), D-Lys (Ppic), D-Lys ( Dodac), D-Lys (pGlu), D-Lys (Otac) lub D-Lys (Onic), albo inne podstawniki wybrane z bardzo obszernej grupy D-Lys (Orotic). Publikacja nie wskazuje i nie sugeruje, aby jakikolwiek peptyd z tej grupy wykazywał własności długiego działania.
Mimo atrakcyjnych właściwości tej grupy antagonistów GnRH kontynuowano poszukiwanie bardziej ulepszonych antagonistów GnRH, szczególnie takich, które wykazują aktywność biologiczną. Często jest ważne, aby analog peptydowy wykazywał długotrwałą aktywność wydzielania LH, czyli właściwość, którą można wzmocnić przez odporność peptydu na degradację enzymem proteolitycznym w ciele w przypadku zarówno krótkotrwałego, jak i długotrwałego leczenia. Ponadto, dla ułatwienia podawania tych związków ssakom, szczególnie ludziom, bez znacznego żelowania, jest nadzwyczaj ważne, aby takie antagonistyczne GnRH dekapeptydy miały dobrą rozpuszczalność w wodzie przy zwykłym fizjologicznym pH, to jest przy pH od około 5 do około 7,4.
Obecnie stwierdzono, że pewne inne modyfikacje reszty w pozycji 5 lub reszt w pozycjach 5 i 6, w tej podklasie antagonistów GnRH, która zawiera Cetrorelix, Antarelix, Acylinę, Antid i inne, powodują nieoczekiwanie otrzymywanie związków, które przy podawaniu podskórnym wykazują szczególnie korzystną długotrwałą bioaktywność. Te modyfikacje są wykonywane na reszcie 4aminoPhe lub na jej równoważniku 4Ahp lub na 4-aminometylofenyloalaninie (4Amf), w której pierwszorzędowa grupa aminowa jest związana z grupą metylową w pozycji 4 czyli w pozycji para. W takich modyfikacjach
PL 194 509 B1 grupę aminową bocznego łańcucha poddaje się reakcji z izocyjanianem w celu wytworzenia grupy mocznikowej lub z heterocyklicznym kwasem karboksylowym zawierającym co najmniej 2 atomy węgla tworzące ugrupowanie mocznikowe. Korzystnymi odczynnikami heterocyklicznymi są kwasy D- lub L-hydroorotowy (Hor)(C4N2H5(O)2COOH lub kwas D- lub L-2-imidazolidono-4-karboksylowy (Imz) (C3N2H5(O)COOH.
Stwierdzono że antagonistyczne dekapeptydy GnRH o następującym wzorze i ich bliskie analogi i sole dopuszczalne farmaceutycznie według wynalazku, mają lepsze właściwości farmakologiczne, a szczególnie długotrwałą bioaktywność: X-D-NaL-(A)D-Phe-D-Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Xaa8-Pro-Xaa10, w którym:
X oznacza grupę acylową zawierającą nie więcej niż 7 atomów węgla, lub metylokarbamoil;
A oznacza 4Cl lub 4F;
Xaa5 oznacza Aph(Q1) gdzie Aph oznacza 4-aminofenyloalaninę, Amf(Q1) gdzie Amf oznacza 4-aminometylofenyloalaninę, w których Q1 oznacza Q będący -C(O)-NHR, albo Q1 oznacza grupy o wzorach;
w których Hor oznacza kwas hydroorotowy o wzorze C4N2H5(O)2COOH, Imz oznacza kwas 2-imidazolidono-4-karboksylowy o wzorze C3N2H5(O)COOH;
R oznacza atom wodoru lub C1-C5alkil
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2), D-Cit, lub D-Pal, w których Q2 oznacza Ac lub Q1;
Xaa8 oznacza Lys(ipr); i
Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol, Ala-ol, NHCH2CH3, Gly-NH2, lub Ala-NH2, z tym warunkiem, że gdy Xaa5 zawiera Q, to Xaa6 także zawiera Q.
Korzystny wariant obejmuje antagonistyczny peptyd GnRH o określonym wyżej wzorze, w którym X, A, Q1 i Xaa8 mają wyżej podane znaczenia, oraz
D-Pal oznacza D-3Pal;
Xaa5 oznacza 4Aph(Q1) lub 4Amf(Q1);
Q oznacza karbamoil lub metylokarbamoil;
Xaa6 oznacza D-4Aph(Q2), D-4Amf(Q2), w których Q2 oznacza Q albo D- lub L-Hor albo L- lub L-lmz; z tym warunkiem, że kiedy Q1 oznacza Q, to Q2 oznacza także Q.
Przedmiotowe związki mają zastosowanie do wytwarzania kompozycji stosowanej do diagnozy in vivo stanu, poprzez monitorowanie wydzielania hormonów lub proliferacji komórek guza, gdy GnRH powoduje nadmierne wydzielanie hormonów lub wzrost guza.
W jeszcze innej odmianie, przedmiotem niniejszego wynalazku jest związek pośredni do wytwarzania antagonistycznego peptydu GnRH o wzorze
X1-D-Nal-(A)D-Phe-D-Pal-Ser(X2)-Xaa5-Xaa6-Leu-Lys(ipr)(X4)-Pro-X5, w którym:
X1 oznacza grupę ochronną grupy a-aminowej;
A oznacza 4Cl lub 4F;
X2 oznacza H lub grupę ochronną hydroksylu;
Xaa5 oznacza Aph (Q1) lub Amf (Q1), w których Q1 oznacza
PL 194 509 B1
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2) lub D-Pal, w których
Q2 oznacza Ac, Q1, karbamoil lub metylokarbamoil;
X4 oznacza labilną na kwas grupę ochronną grupy aminowej; i
X5 oznacza żywiczny nośnik D-Ala, Gly lub Ala; żywiczny nośnik N(Et); amid D-Ala, Gly lub Ala; lub etyloamid.
Te antagonisty są szczególnie odpowiednie do tłumienia wydzielania gonadotropin i jako regulatory płodności u ludzi, ponieważ wykazują długotrwałą aktywność, to jest znacznie tłumią wydzielanie LH w ciągu co najmniej około 4 dni.
Mają one lepszą rozpuszczalność w wodnych buforach przy fizjologicznych pH i dają akceptowalne efekty uboczne stymulowania uwalniania histaminy, to jest lepsze niż superantagonisty GnRH, które obecnie stosuje się klinicznie; wykazują one także bardzo małe żelowanie w przypadku podskórnych (sc) zastrzyków przy skutecznych stężeniach. Te antagonisty GnRH wykazują także dobre działanie w próbie rzekomoanafilaktycznej i powodują stosunkowo małe bąble. Z tego powodu peptydy te znajdują szczególne zastosowanie do podawania ssakom, a zwłaszcza ludziom, jako regulatory płodności i w leczeniu takich stanów patologicznych, jak przedwczesne dojrzewanie, zależne od hormonów tworzenie nowotworów, bolesne miesiączkowanie, endometrioza, nowotwory zależne od steroidów i inne krótkotrwałe i długotrwałe, wymienione powyżej wskazania. Są one także przydatne w diagnostyce.
Ponieważ te antagonisty GnRH są łatwo rozpuszczalne w wodzie w fizjologicznym zakresie pH od około 5 do około 7,4, to mogą być one komponowane i podawane w postaci stężonej, szczególnie przy pH od około 5 do około 7. Z powodu polarnego charakteru są szczególnie przydatne w preparatach do wolnego uwalniania na podstawie znanych kopolimerów. Ponieważ antagonisty te wykazują skuteczne długotrwałe tłumienie LH i FSH, to są także szczególnie skuteczne w antykoncepcyjnym leczeniu samców ssaków (z ewentualnym podawaniem testosteronu) i w leczeniu guzów zależnych od steroidów.
Podczas ostatnich 10 do 12 lat dokładnie zbadano szczególne właściwości każdej z 10 reszt w sekwencji GnRH z punktu widzenia wytworzenia skutecznego antagonistu i stwierdzono w wyniku tych badań, że istnieją różne równoważne reszty, które można wybrać i że zastąpienie jednego z tych równoważników przez inny nie wpływa wyraźnie na bioaktywność antagonistycznego dekapeptydu GnRH. Takie równoważne zastąpienia mogą być wykonywane w antagonistach GnRH według niniejszego wynalazku.
Na przykład przyjęto ogólnie, że włączenie w pozycji 2 para-podstawionych D-Phe lub podstawionych 2,4-dichloro reszt D-Phe lub D-CaMe4ClPhe lub D-pentametylo(Me3)Phe znacznie zwiększa aktywność antagonistu GnRH; jednak specyficzna identyczność podstawnika w pierścieniu ma tylko stosunkowo mniejsze znaczenie, gdy podstawnik wybrano z następujących podstawników: chloro, fluoro, bromo, nitro, metylo i alkoksy. Dlatego takie reszty w pozycji 2 uważa się za równoważne do D-4ClPhe, który jest zwykle stosowany. Phe7 uważa się za równoważny do Leu7. Końcowy N jest korzystnie N-acylowany, korzystnie przez acetyl (Ac), ale także przez inne grupy acylowe zawierające do 7 atomów węgla, na przykład formyl (For), akrylil (Acr), n-propionyl (Pn), butyryl (By), waleryl (VI), winyloacetyl (Vac) i benzoil (Bz); alternatywnie może być modyfikowany przez podstawiony lub niepodstawiony karbamoil. Inne dłuższe grupy acylowe są uważane za równoważne, ale są mniej korzystne. Grupa α-metylowa na reszcie w pozycji 5 może być ewentualnie metylowana, jak ujawniono w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,110,904, w celu zwiększenia rozpuszczalności w wodzie, lecz taka modyfikacja może spowodować skrócenie okresu trwania tłumienia LH i większy potencjał uwalniania histaminy. Końcowym C jest korzystnie D-Ala-NH2, D-Ala-ol lub Ala-ol;
PL 194 509 B1 jednak zamiast nich można stosować Gly-NH2, NHCH2CH3, AzaGly-NH2, Ala-NH2, Agl-NH2, D-Agl-NH2, Agl(Me)-NH2 i D-Agl(Me)-NH2, ponieważ są uważane za znane równoważniki.
Jak stwierdzono powyżej, przedmiotem niniejszego wynalazku jest rodzina antagonistów GnRH przedstawiona przez następujący wzór:
X-D-Nal-(A)D-Phe-D-Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Xaa8-Pro-Xaa10 i ich dopuszczalne farmaceutycznie sole, w których:
X oznacza For, Ac, Acr, Pn, By, VI, Vac, Bz lub Q, w której Q oznacza -C(O)-NHR i R oznacza H lub niższy alkil;
A oznacza 4Cl, 4F, 4Br, 4NO2, 4CH3, 4OCH3, 3,4Ch lub CaMe4Cl;
Xaa5 oznacza Aph(Q1) lub Amf(Q1), w którym Q1 oznacza
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2), D-Lys(Nic), D-Cit, D-Hci lub D-Pal, w których Q2 oznacza For, Ac, 3-amino-1,2,4-triazol, Q lub Q1;
Xaa8 oznacza Lys(ipr), Arg, Har, Arg(Et2) lub Har(Et2); i Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol, NHCH2CH3, Gly-NH2, AzaGly-NH2, Ala-NH2, Agl-NH2, D-Agl-NH2, Agl(Me)-NH2 lub D-Agl(Me)-NH2, z zastrzeżeniem, że α-aminowa grupa Xaa5 może być ewentualnie metylowana.
W bardzo zbliżonej rodzinie antagonistów GnRH, Xaa5 może oznaczać Ac, For lub 3-amino-1,2,4-triazol jako Q1 i w tym przypadku Xaa6 zawiera Q2 w postaci D- lub L-Hor albo D- lub L-Imp.
W innej bardzo zbliżonej rodzinie antagonistów GnRH, w której Xaa6 zawiera Q, to Xaa5 także zawiera Q.
D-Nal oznacza D-izomer alaniny, który jest podstawiony naftylem na atomie β-węgla, co jest podawane także jako β-D-Nal lub 3-D-Nal. Korzystnie stosuje się D-2Nal, gdy przyłączenie do naftalenu jest w pozycji 2 na strukturze pierścienia; można jednak stosować także D-1Nal. D-Cpa oznacza chloro-D-Phe, i korzystne jest D-4ClPhe, to jest D-4Cpa. D-Pal oznacza D-izomer alaniny podstawiony przez pirydyl na atomie β-węgla; korzystnie wiązanie jest w pozycji 3 na pierścieniu pirydyny, to jest D-3Pal(e-3-pirydyl-D-Ala), chociaż zamiast można stosować D-2Pal(e-2-pirydyl-D-Ala). 4Aph oznacza 4NH2Phe, w którym podstawnik aminowy na pierścieniu fenylowym znajduje się w pozycji 4; 3NH2Phe (3Aph) uważa się za równoważny do tych analogów. Ponadto uważa się, że 2NH2Phe jest także równoważny pod względem bioaktywności. 4Amf oznacza 4NH2CH2Phe, w którym wiązanie metylenowe z grupą aminową jest w łańcuchu bocznym; 3NH2CH2Phe(3Amf) uważa się za równoważne. Hor lub L-Hor oznacza L-hydroorotyl, a Imz lub L-Imp oznacza L-2-imidazolidono-4-karbonyl oba mogą także być stosowane jako D-izomer lub jako mieszanina D/L. atz oznacza 3-amino-1,2,4-triazol. Aph(atz) znany jest także pod dokładniejszą nazwą chemiczną, jako 4-(3'-amino1H-1',2',4'-tiazolil-5'-ilo)-aminofenyloalanina Lys(Nic) oznacza N'-nikotynylolizynę, to jest grupa ε-aminowa Lys jest acylowana 3-karboksylopirydyną. D-Cit oznacza D-izomer cytruliny i D-Hci oznacza D-izomer homocytruliny, który jest także D-NE-karbamoilolizyną. ILys lub Lys(ipr) oznacza N-izopropylolizynę, w której grupa ε-aminowa Lys jest alkilowana, Ala-ol oznacza alaninol, to jest CH3CH(NH2)CH2OH, i AzaGly-NH2 oznacza NHNHCONH2. Har oznacza homoargininę. Agl oznacza α-aminoglicynę. Cbm oznacza karbamoil i MeCbm oznacza metylokarbamoil lub -CONHCH3. Niższy alkil oznacza C1 do C5, korzystnie C1 do C3 i korzystniej C1 lub C2, to jest metyl (Me) lub etyl (E).
Chociaż korzystne D-izomery do włączania w pozycję 6 tych antagonistów GnRH zostały specyficznie ujawnione, to w wyniku rozległych badań w tej dziedzinie w ciągu ostatnich 20 lat poznano wiele równoważnych D-izomerów. Takie podstawienia D-izomeru według stanu techniki mogą być kompatybilne i nie pogarszają bioaktywności uzyskiwanej przez specyficzne, ujawnione w niniejszym podstawniki w pozycji 5 i można je ewentualnie stosować.
PL 194 509 B1
Korzystny podrodzaj antagonistów GnRH ma wzór:
X-D-Nal-(A)D-Phe-D-Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Lys(ipr)-Pro-Xaa10 i ich dopuszczalne farmaceutycznie sole, w których:
X oznacza For, Ac, Acr, Pn, By, Vl, Vac, Bz lub Q, w której Q oznacza -C(O)-NHR i R oznacza H lub niższy alkil;
A oznacza 4Cl lub 4F;
Xaa5 oznacza Aph(Q1) lub Amf(Q1), w którym Q1 oznacza
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2), D-Lys(Nic) lub D-Pal, w których Q2 oznacza For, Ac, Q lub Q1; i Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol, NHCH2CH3 lub Gly-NH2.
Dodatkowy korzystny podrodzaj antagonistów GnRH ma wzór:
X-D-Nal-D-4Cpa-D-Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Lys(ipr)-Pro-Xaa10 i ich dopuszczalne farmaceutycznie sole, w których:
X oznacza Ac lub Q, w której Q oznacza -C(O)-NHR i R oznacza H lub metyl;
Xaa5 oznacza Aph(Q1) lub Amf(Q1), w którym Q1 oznacza
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2) lub D-Pal, w których Q2 oznacza Ac, Q lub Q1; i Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol, NHCH2CH3 lub Ala-ol.
Inny korzystny podrodzaj antagonistów GnRH ma wzór:
MeCbm-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-Xaa6-Leu-ILys-Pro-Xaa10 i ich dopuszczalne farmaceutycznie sole, w których:
D-Xaa6 oznacza D-4Amf(Q1), D-4Aph(Q1) lub D-3Pal, w której Q1 oznacza D-Hor lub -C(O)-NHR i
R oznacza H lub niższy alkil i korzystnie H lub metyl; i w którym Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol lub Ala-ol.
Związki według niniejszego wynalazku można otrzymywać klasycznym sposobem roztworowej syntezy peptydów i taka synteza jest korzystna w przypadku dużych ilości produktu. W celu otrzymywania mniejszych ilości, na przykład poniżej 1 kg, może być korzystna synteza w fazie stałej. Grupy ochronne łańcuchów bocznych są znane w technice i korzystnie są włączane jako część dowolnego aminokwasu, który ma szczególnie reaktywny lub labilny łańcuch boczny, gdy jest sprzęgany z łańcuchem zbudowanym na żywicy. W takiej syntezie otrzymuje się całkowicie ochronioną pośrednią peptydożywicę, taką jak X1-D-Nal-D-4Cpa-(D)Phe-D-Pal-Ser(X2)-Xaa5-Xaa6-Leu-Lys(ipr) (X4)-Pro-X5.
Jeden przykład chemicznego związku pośredniego, który mógłby być użyty do syntezy antagonistów GnRH z pożądaną resztą w pozycjach 5 i 6, zawierającego hydroorotyl lub podobne grupy,
PL 194 509 B1 przedstawiono wzorem: X1-D-Nal-D-4Cpa-D-Pal-Ser(X2)-Aph(X3)-D-Aph(X3)-Leu-ILys(X4)-Pro-X5. Do syntezy pośrednich związków peptydowych o tym wzorze i innych analogów można stosować grupy X1 do X5 określone poniżej.
X1 jest grupą ochronną grupy α-aminowej typu znanego jako przydatny w technice stopniowej syntezy polipeptydów i gdy X w pożądanej kompozycji peptydowej jest szczególną grupą acylową, to taka grupa może być użyta jako grupa ochronna. Do klas grup ochronnych grupy α-aminowej typu X1 należą (1) grupy ochronne typu acylowego, takie jak formyl (For), trifluoroacetyl, ftaloil, p-toluenosulfonyl (Tos), benzoil (Bz), benzensulfonyl, ditiasukcynoil (Dts), o-nitrofenylosulfenyl (Nps), tritylosulfenyl, o-nitrofenoksyacetyl, akrylil (Acr), chloroacetyl, acetyl (Ac) i γ-chlorobutyryl; (2) aromatyczne grupy ochronne typu uretanowego, na przykład benzyloksykarbonyl (Z), fluorenylometyloksykarbonyl (Fmoc) i podstawiony benzyloksykarbonyl, taki jak p-chlorobenzyloksykarbonyl (ClZ), p-nitrobenzyloksykarbonyl, p-bromobenzyloksykarbonyl i p-metoksybenzyloksykarbonyl; (3) alifatyczne uretanowe grupy ochronne, takie jak tert-butyloksykarbonyl (Bos), diizopropylometoksykarbonyl, izopropyloksykarbonyl, etoksykarbonyl i alliloksykarbonyl; (4) grupy ochronne typu cykloalkilouretanów, takie jak cyklopentyloksykarbonyl, adamantyloksykarbonyl i cykloheksyloksykarbonyl; (5) grupy ochronne typu tiouretanów, takie jak fenylotiokarbonyl; (6) grupy ochronne typu alkilu, takie jak allil (Aly), trifenylometyl (trityl) i benzyl (Bzl); (7) grupy trialkilosilanowe, takie jak trimetylosilan. Korzystną grupą ochronną grupy α-aminowej jest Boc.
X2 oznacza grupę ochronną bocznego łańcucha hydroksylowego Ser, na przykład Ac, Bz, trityl,
2,6-dichlorobenzyl (DCB) lub eter benzylowy (Bzl) i korzystnie oznacza Bzl.
X3 oznacza grupę ochronną bocznego łańcucha grupy aminowej, która nie jest usuwana, gdy usuwana jest grupa ochronna grupy α-aminowej lub inna grupa ochronna grupy aminowej. Przykładami takiej grupy są (1) grupy labilne na zasady, takie jak Fmoc, lub pewna grupa odporna na inne słabe kwasy, taka jak grupa ochronna typu aromatycznego uretanu; (2) grupy labilne na tiole, takie jak ditiasukcynoil (Dts), które mogą być usunięte lub odszczepione przez tiolizę; (3) grupy labilne na hydrazynę, takie jak ftalolil, które są odszczepiane przez hydrazynolizę; (4) grupy labilne na nukleofile, takie jak o-nitrofenylosulfenyl (Nps) i tym podobne, które są odszczepiane przez tioacetamid albo przez słabe kwasy lub ich sole; (5) grupy fotolabilne, które są odszczepiane przez fotolizę; i (6) grupy usuwalne selektywnie przez redukcję, takie jak Dts. Dla strategii SPPS Boc korzystny jest Fmoc.
X4 oznacza labilną na kwas grupę ochronną pierwszorzędowej lub drugorzędowej grupy aminowej w bocznym łańcuchu, taką jak Z lub 2ClZ.
X5 może oznaczać D-Ala-, Gly-, Ala-, Agl-, D-Agl-, Agl(Me)- lub D-Agl(Me)-NH-[nośnik żywiczny], lub N(Et)-[nośnik żywiczny]; X5 może także oznaczać amid Gly albo Ala albo D-Ala, amid podstawiony niższym alkilem związany bezpośrednio z Pro, AzaGlyNH2 lub -OH (wolny kwas). Gdy X5 oznacza wolny kwas, to związkiem pośrednim jest fragment nonapeptydowy zaprojektowany do sprzęgania z D- lub L-alaninolem z wytworzeniem dekapeptydu zawierającego alkohol przy końcowym C.
Kryterium wyboru grup ochronnych łańcucha bocznego od X2 do X4 jest, aby grupa ochronna była ogólnie odporna na każdym etapie syntezy na działanie odczynnika w warunkach reakcji wybranych do usunięcia grupy ochronnej grupy α-aminowej (korzystnie Boc). Te grupy ochronne ogólnie nie powinny być odszczepiane w warunkach sprzęgania, ale powinny być usuwalne po zakończeniu syntezy pożądanej sekwencji aminokwasu w takich warunkach reakcji, które nie zmieniają łańcucha peptydowego. Grupy ochronne zastosowane początkowo w pozycji 5 i 6 są korzystnie usuwane, a selektywne reakcje są wykonywane przed odszczepieniem końcowego peptydu od żywicy, jak objaśniono poniżej. Gdy otrzymuje się, jak objaśniono poniżej, pośredni dekapeptyd, to grupy ochronne X3 mogą być korzystnie usuwane osobno.
Gdy grupa X5 oznacza D-Ala-NH-[nośnik żywiczny], to wiązanie amidowe łączy D-Ala z żywicą BHA lub z żywicą MBHA; podobny przypadek ma miejsce, gdy stosuje się Agl lub D-Agl przy końcowym C. Gdy X5 oznacza N(Et)-[nośnik żywiczny], to wiązanie etyloamidowe łączy Pro z żywicą N-alkiloaminometylową (NAAM).
Gdy koniec N ma być na przykład acetylowany, to można zastosować acetyl jako grupę ochronną X1 α-aminowej grupy w β-D-Nal w pozycji 1 przez wprowadzenie jej do aminokwasu przed sprzęgnięciem jej z łańcuchem peptydowym; jednak reakcję wykonuje się korzystnie przy użyciu pośredniego peptydu na żywicy. Po odblokowaniu grupy α-aminowej i gdy jest pożądane, aby grupy łańcucha bocznego były nadal chronione, to acetylowanie wykonuje się korzystnie w reakcji z bezwodnikiem octowym; alternatywnie reakcję można wykonać z kwasem octowym, w obecności karbodiimidu diizopropylu (DIC) lub karbodiimidu cykloheksylu (DCC), lub inną znaną w technice odpowiednią reakcją
PL 194 509 B1 acylowania. Podobną procedurę stosuje się, gdy na końcowym N pożądana jest grupa karbamoilowa lub podstawiona grupa karbamoilowa. Jeśli grupy aminowe w łańcuchu bocznym po usunięciu ochrony są modyfikowane, gdy reszta jest częścią łańcucha peptydowego, to reakcję można wykonać przy użyciu odpowiedniego izocyjanianu w obecności odpowiedniej zasady, na przykład N,N-diizopropyloetyloaminy (DIEA), chociaż użycie takiej zasady jest do wyboru. Gdy w końcowym produkcie pożądana jest niepodstawiona grupa karbamoilowa, to boczny łańcuch aminowy można po usunięciu ochrony poddać reakcji z izocyjanianem benzylu, izocyjanianem p-tozylu, izocyjanianem trimetylosililu lub izocyjanianem tert-butylu, przy czym korzystny jest ten ostatni. Stosując taką strategię usuwa się grupę tert-butylową przez odszczepienie jej od żywicy i pozostawia grupę karbamoilową.
Przedmiotem wynalazku jest także nowy sposób wytwarzania takich antagonistów GnRH, które mają na przykład wzór Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-4Aph(Ac)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2, przy czym sposób ten obejmuje (a) wytwarzanie pośredniego peptydu o wzorze: Boc-D-4Aph(X3)-Leu-ILys (X4)-Pro-X5, w którym X3 oznacza labilną na zasadę, labilną na hydrazynę lub inaczej odpowiednio labilną grupę ochronną grupy aminowej; X4 oznacza labilną na kwas grupę ochronną bocznego łańcucha aminowego; i X5 oznacza D-Ala-NH-[nośnik żywiczny]; (b) usunięcie X3 z D-4Aph w celu usunięcia ochrony z pierwszorzędowej grupy aminowej tej reszty aminokwasu pośredniego peptydu; (c) poddanie reakcji z bezwodnikiem octowym tej pierwszorzędowej grupy aminowej z bocznego łańcucha po usunięciu ochrony; (d) zakończenie przedłużania łańcucha w celu wytworzenia związku pośredniego, X1-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser(X2)-4Apc(X3)-D-4Apc(Ac)-Leu-ILys(X4)-Pro-X5, w którym X1 oznacza wodór lub grupę ochronną grupy α-aminowej i X2 oznacza wodór lub grupę ochronną grupy hydroksylowej w Ser; (e) odblokowanie grupy α-aminowej na końcowym N i acetylowanie; (f) usunięcie X3 z 4Aph i poddanie reakcji z kwasem hydroortowym pierwszorzędowej grupy aminowej po usunięciu ochrony; i (g) odszczepienie ewentualnie pozostających grup ochronnych i/lub odszczepienie nośnika żywicznego zawartego w X5.
Końcowe oczyszczanie peptydu wykonuje się chromatograficznie, stosując korzystnie znaną w technice metodę RP-HPLC; patrz J. Rivier, et al., J. Chromatography, 288, 303-328 (1984) i C. Miller i J. Rivier, Biopolymers (Peptide Science), 40, 265-317 (1996).
Uważa się, że antagonisty GnRH według wynalazku są skuteczne w ilościach poniżej 100 pg na 1 kg wagi ciała przy podawaniu podskórnym około południa w dniu szczytu fazy estrogenowej poprzedzającego ruję, w celu zapobieżenia owulacji u samic szczurów. Dla przedłużonego tłumienia owulacji może być konieczne stosowanie dawek w zakresie od około 0,1 do około 2,5 miligramów na 1 kg wagi ciała. Antagonisty są także skuteczne w zatrzymywaniu tworzenia się plemników przy regularnym podawaniu samcom ssaków i dzięki temu mogą być stosowane jako środki antykoncepcyjne. Ponieważ związki te zmniejszają zawartości testosteronu, a więc i popęd płciowy (niepożądany skutek u normalnie aktywnych płciowo samców), to może być pożądane podawanie zastępczych dawek testosteronu razem z antagonistą GnRH w celu uzyskania azoospermii z zachowaniem popędu płciowego. Antagonisty te można także stosować w celu regulowania wytwarzania gonadotropin i steroidów płciowych i dla innych długotrwałych i krótkotrwałych wskazań, jak podano powyżej, oraz mogą być stosowane do zastosowań weterynaryjnych jako środki antykoncepcyjne dla zwierząt domowych.
Peptydy otrzymywane według wynalazku są dobrze rozpuszczalne przy fizjologicznych pH i mogą być wytwarzane jako stosunkowo stężone roztwory do podawania, szczególnie do zastrzyków podskórnych. Peptydy są dobrze tolerowane w ciele i nie mają tendencji do żelowania przy podawaniu podskórnym w skutecznych stężeniach. Ogólnie kompozycje farmaceutyczne zawierające takie peptydy i odpowiednią dopuszczalną farmaceutycznie zaróbkę mogą być podawane dożylnie, dootrzewnowo, podskórnie lub podobnie, w ilościach od około 0,001 mg do około 2,5 mg na 1 kg wagi ciała dziennie, przy czym zwykle wystarcza 0,5 mg/kg/dzień.
Właściwie chronione aminokwasy zawierające aminokwasy zawierające D- lub L-hydroorotyl, zawierające karbamoil i zawierające D- lub L-imidazolidonokarbonyl można otrzymywać i następnie stosować w syntezie peptydów z przedłużaniem łańcucha. Jednak równie ważną syntezę wykonuje się przez początkowe wprowadzenie odpowiednio chronionej reszty Aph, D-Aph, Amf lub D-Amf w pożądaną pozycję w pośrednim peptydzie, co może stanowić wybrany sposób laboratoryjny, gdy pożądane są początkowo tylko bardzo małe ilości. Strategię tę można wykonywać przez kolejne usuwanie ochrony poszczególnych reszt (albo natychmiast albo kolejno podczas syntezy) i przez następne poddanie reakcji niechronionych już grup aminowych w łańcuchu bocznym z pożądanym odczynnikiem.
PL 194 509 B1
Niniejszy wynalazek opisano ponadto w następujących przykładach.
P r z y k ł a d I.
Stwierdzono, że peptyd o wzorze: Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-Lys(Nic)-D-Lys(Nic)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2 (Antid) wykazuje bardzo dobre właściwości biologiczne jako antagonista GnRH; obecnie jest nazwany Acyliną i różni się od Antidu tylko w pozycjach 5 i 6. Obecnie stwierdzono, że stosując te cząsteczki jako punkt wyjściowy i wykonując inne podstawienia w pozycjach 5 i 6 lub w pozycji 5 dekapeptydu Acyliny, otrzymuje się antagonisty GnRH o lepszej trwałej bioaktywności in vivo. Jeśli chodzi o pozycje 1-4 i 7-10, to stwierdzono, że Antid, Acylina i Azalina są wszystkie dokładnie takie same.
Następujący dekapeptyd [4Aph(Hor)5, D-4Apc(Cbm)6]-Antid lub [Ac-D-2Nal1, D-4Cpa2, D-3Pal3, 4Aph(Hor)5, D-Aph(Cbm)6, ILys8, D-Ala10]-GnRH otrzymano sposobem syntezy w fazie stałej. Ten peptyd ma następujący wzór:
Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Aph(karbamoil)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2.
Początkowo stosowano 0,50 g (0,54 mmol/g) żywicy MBHA (Bachem) i D-Ala ochroniony Boc sprzęgano z żywicą w ciągu około 2 h w dimetyloformamidzie (DMF)/CH2Cl2 przy użyciu około 0,65 mmola pochodnej Boc oraz karbodiimidu diizopropylu (DIC) i bezwodnego 1-hydroksybenzotriazolu (HOBt) jako odczynników aktywujących i sprzęgających. Resztę DAla połączono wiązaniem amidowym z resztą MBHA.
Po sprzęgnięciu każdej reszty aminokwasu wykonywano przemycie, odblokowanie i sprzęganie następnej reszty aminokwasu zgodnie z następującym schematem w ilości od około 0,5 do około 1 g wyjściowej żywicy:
| Etap | Odczynniki i operacje | Czasy mieszania, minut |
| 1 | płukanie metanolem (MeOH), 15 ml, 2x | 1 |
| 2 | płukanie CH2Cl2 (DCM), 30 ml, 3x | 1 |
| 3 | 50% TFA plus 1% m-krezolu w DMC, 25 ml, 2x | 5, 20 |
| 4 | płukanie alkoholem izopropylowym, 20 ml, 2x | 1 |
| 5 | 10% trietyloamina w DCM, 20 ml, 2x | 2 |
| 6 | płukanie MeOH, 15 ml, 2x | 1 |
| 7 | płukanie DCM, 15 ml, 3x | 1 |
| 8 | 0,5 - 1,0 mmola aminokwasu Boc i 0,5 - 1,0 mmola HOBt w 10 - 20 ml dimetyloformamidu (DMF):DCM lub N-metylopirolidonu (NMP): DCM, w zależności od rozpuszczalności danego ochronionego aminokwasu, plus ),% -1,0 mmola DIC lub DCC w DCM | 1 - 17 h |
| 9 | płukanie MeOH, 15 ml, 2x | 1 |
| 10 | płukanie DCM, 20 ml, 3x | 1 |
Powyższy schemat stosowano po przyłączeniu pierwszego aminokwasu do sprzęgania każdego z aminokwasów peptydu według wynalazku. Stosowano ochronę NaBoc dla każdego aminokwasu sprzęganego podczas syntezy. NaBoc-3-D-2Nal otrzymywano sposobem według stanu techniki, na przykład jak podano szczegółowo w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4,234,571; jest on także produkowany przez firmę SyntheTech, Oregon, USA. Pierwszorzędowe grupy aminowe w łańcuchu bocznym w 4Aph w pozycji 5 i w D-4Aph w pozycji 6 ochroniono za pomocą Fmoc. Eter benzylowy (Bzl) stosowano korzystnie jako grupę ochronną w łańcuchu bocznym grupy hydroksylowej w Ser; jednak Ser można sprzęgać bez ochrony bocznego łańcucha. Dla reszty w pozycji 8 zastosowano NaBoc-Lys(ipr,Z).
Po wprowadzeniu D-4Aph w przypadku reszty w pozycji 6 jako NaBoc-D-4Aph(Fmoc) otrzymywano następujący związek przejściowy: Boc-D-4Aph(Fmoc)-Leu-Lys(ipr,Z)-Pro-D-Ala-NH-[nośnik żywiczny MBHA]. Następnie modyfikowano grupę aminową w łańcuchu bocznym po usunięciu naj10
PL 194 509 B1 pierw ochrony w łańcuchu bocznym. Grupę ochronną Fmoc usuwano przez kolejne 15 minutowe obróbki 25-proc. piperydyną w 10 ml DMF. Po przemyciu peptydożywicy za pomocą DMF nowo uwolnioną grupę aminową poddawano obróbce za pomocą 20-krotnego nadmiaru izocyjanianu tert-butylu w DMF w temperaturze pokojowej w ciągu około 12 h lub do zakończenia, co sprawdzano próbą ninhydrynową. Następnie peptydożywicę poddano standardowemu przemyciu i usunięto Boc w celu wprowadzenia następnej reszty.
Następnie wprowadzono resztę w pozycji 5 jako NaBoc-4Aph(Fmoc). Potem usunięto ochronę tego łańcucha bocznego, jak poprzednio, i wykonano reakcję z 0,10 g (0,66 mmola) kwasu L-hydroorotowego, 90 ml (0,66 mmola) HOBt i 0,66 mmola DIC w 3 ml DMF w temperaturze pokojowej w ciągu około 8 h lub do zakończenia, co sprawdzono standardową próbą ninhydrynową. Po przemyciu i usunięciu NaBoc zakończono syntezę dekapeptydu przez kolejne reakcje z NaBoc-Ser(Bzl), NaBoc-D-3Pal, NaBoc-4Cpa i NaBoc-D-2Nal.
Po odblokowaniu grupy α-aminowej na końcowym N za pomocą kwasu trifluorooctowego (TFA), wykonano acetylowanie przy użyciu dużego nadmiaru bezwodnika octowego w dichlorometanie (DCM) w ciągu około 30 minut. Alternatywnie, ochronnego Fmoc na 4Aph nie usuwano aż do wykonania acetylowania końcowego N i następnie wykonano reakcję z kwasem L-hydroorotowym.
Wysuszono peptydożywicę i następnie wprowadzono 0,5 ml anizolu w celu usunięcia resztek, odszczepiono peptyd od żywicy i usunięto ochronę bocznych łańcuchów Ser i Lys w temperaturze około 0°C za pomocą 15 ml HF w ciągu około 1,5 h, z usunięciem pozostałych ugrupowań tert-butylowych. Po usunięciu HF pod zmniejszonym ciśnieniem przemyto żywicę 2x przy użyciu po 100 ml eteru etylowego. Odszczepiony peptyd ekstrahowano za pomocą 0,2-proc. TFA w 25-proc.
CH3CN/H2O, powtarzając sposób i stosując za każdym razem 100 ml. Ekstrakty połączono i liofilizowano, otrzymując około 600 mg surowego proszkowego peptydu.
Następnie oczyszczono peptyd metodą preparatywnej wysokosprawnej chromatografii cieczowej z odwrotną fazą (RP-HPLC) według stanu techniki, jak opisał J. Rivier, et al., J. Chromatography, 288, 303-328 (1984). Pierwsza preparatywna RP-HPCL stosowała układ buforowy TEAP (fosforan trietyloamoniowy), a końcowe rozdzielenie wykonano w gradiencie 0,1-proc. TFA (kwasu trifluorooctowego), jak opisano szczegółowo w artykule w J. Chromatography.
Stwierdzono przy użyciu kapilarnej elektroforezy strefowej (CZE), że peptyd (około 30 mg) (nazwany peptydem nr 1) był zasadniczo jednorodny i oznaczono, że jego czystość wynosiła około 98%. Analiza aminokwasowa oczyszczonego peptydu była zgodna z wzorem wytworzonej struktury. Oznaczony metodą cieczowej spektrometrii masowej wtórnych jonów (LSIMS) ciężar cząsteczkowy tego peptydu wynosił 1631,9 Da, zgodnie z oczekiwaną masą 1631,8 Da dla tego peptydu.
Hydrofilowość zbadano przez pomiar czasu retencji przy użyciu RP-HPLC z gradientem od 40% Buforu A do 70% Buforu B w ciągu 30 minut, przy czym Buforem A był TEAP o pH 7,0, a Buforem B 70% CH3CN i 30% Buforu A. Peptyd nr 1 był bardziej hydrofilowy niż Acylina i eluował wcześniej niż Acylina. Jego rozpuszczalność w wodnych buforach przy pH od około 5 do około 7 i odporność na żelowanie in vivo, razem długotrwałą bioaktywnością tłumienia zawartości cyrkulującego LH, jak opisano poniżej, czynią go szczególnie odpowiednim do podawania w zastrzykach podskórnych w porównaniu do innych związków o ogólnie porównywalnej skuteczności biologicznej.
Peptyd analizowano in vivo w celu oznaczenia skuteczności tłumienia wydzielania LH na szczurach. Pomiar zawartości cyrkulującego LH u kastrowanych samców szczurów Sprague-Dawleya poddanych podskórnemu działaniu peptydu wykonano sposobem podanym przez C. Rivier et al., Biol. Reproduc., 1983, 29, 374-378. Peptydy najpierw rozpuszczano w stężeniu 1,0 lub 10 mg/ml w wodzie bakteriostatycznej i następnie rozcieńczano w 0,04 M buforze fosforanowym zawierającym 0,1% BSA. W buforze fosforanowym wykonano następne rozcieńczenia. Peptydy wstrzykiwano 5 szczurom i pobierano 300-pl próbki krwi po znieczuleniu metotanem. Podwójne próbki surowic po 50 pl zbadano na zawartości LH, stosując odczynniki dostarczone przez National Pituitary and Hormone Distribution Program of the NIDDK. Badanie wykazało, że dawka 50 pg peptydu na 1 szczura tłumi wydzielanie LH do zawartości znacznie poniżej 50% zawartości kontrolnych w ciągu całego 96-godzinnego okresu po zastrzyku. Ponadto, zawartości zmierzone po 96 h były równe jedynie 30% zawartości LH u szczurów, którym podobnie wstrzyknięto dawkę 50 pg Acyliny. Peptyd nr 1 uznano za peptyd o bardzo długotrwałym działaniu. Badanie szczurów wykazało, że peptyd był bardzo dobrze tolerowany bez wykrywalnego wyraźnego żelowania w miejscu zastrzyku.
PL 194 509 B1
Doświadczenie zebrane podczas badania dużej liczby antagonistów GnRH wykazało, że peptyd o takim długotrwałym tłumieniu LH będzie podczas badania na dojrzałych samicach szczurów Sprague-Dawleya blokował całkowicie owulację w dawkach 2,5 ąg.
P r z y k ł a d IA.
Powtórzono syntezę z przykładu I, zastępując NaBoc-D-4Amf(For) przez NaBoc-D-4Apc(Fmoc). Po usunięciu ochrony bocznego łańcucha D-4Amf wykonano reakcję z izocyjanianem tert-butylu, jak poprzednio. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Amf(karbamoil)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2 i stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1645,9 Da, co było korzystnie bliskie oczekiwanej masy 1645,8 Da. Z wyników HPLC widać, że peptyd ten był bardziej hydrofilowy niż Acylina.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo tłumienia zawartości LH na szczurach wykazała, że dawka 50 ąg była tak samo skuteczna, jak Acylina, w tłumieniu zawartości LH po 1,2 i 3 dniach. Po 96 h zawartości LH wynosiły tylko około 25% w porównaniu do zawartości na szczurach, którym wstrzyknięto Acylinę. Peptyd nr IA uznano za peptyd o bardzo długotrwałym działaniu.
P r z y k ł a d IB.
W celu utworzenia analogu [4Apc(Hor)5]-Acyliny powtórzono syntezę z przykładu I, zastępując bezwodnik octowy przez izocyjanian tert-butylu w reakcji w łańcuchu bocznym z usuniętą ochroną w pozycji 6. Odszczepienie dekapeptydu od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Aph(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1630,6 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1630,8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 4 dniach. Uznano, że peptyd wykazywał bardzo długotrwałe działanie w tłumieniu LH.
P r z y k ł a d IC.
Powtórzono syntezę z przykładu IB, zastępując kwas D/L-hydroorotylowy przez kwas L-hydroorotylowy w celu wytworzenia izomerycznych dekapeptydów. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D/L-hydroorotyl)-D-4Aph(acetyl) -Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on jednorodną mieszaniną dwóch związków bez innych zanieczyszczeń. Analiza MS dała masę 1630,6 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1630,8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 4 dniach. Uznano, że peptyd wykazywał bardzo długotrwałe działanie w tłumieniu LH.
P r z y k ł a d ID.
Powtórzono syntezę z przykładu IB, zastępując kwas D-hydroorotylowy przez kwas L-hydroorotylowy w celu wytworzenia izomerycznego dekapeptydu. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D-hydroorotyl)-D-4Aph(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 98%. Analiza MS dała masę 1630,8 Da, co było zgodne z obliczoną masą
1630.8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd wykazywał bardzo długotrwałą bioaktywność tłumienia LH i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 4 dniach.
P r z y k ł a d IE.
Powtórzono syntezę z przykładu IB, zastępując NaBoc-D-4FPhe przez NaBoc-D-ClPhe w celu wytworzenia dekapeptydu [D-4FPhe2, 4Aph(Hor)5]-Acylina. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Fpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Aph(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1615,1 Da, co było zgodne z obliczoną masą
1614.8 Da.
PL 194 509 B1
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 4 dniach. Uważano, że wykazywał on długotrwałą aktywność tłumienia LH.
P r z y k ł a d IF.
Powtórzono syntezę z przykładu IB, zastępując NaBoc-4Amf(Fmoc) przez NaBoc-4Aph(Fmoc) w celu wytworzenia dekapeptydu [4Amf(Hor)5-Acylina. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Amf(L-hydroorotyl)-D-4Aph(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 98%. Analiza MS dała masę 1644,7 Da, co było zgodne z obliczoną masą
1644.8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 4 dniach. Uważano, że wykazywał on długotrwałą aktywność tłumienia LH.
P r z y k ł a d IG.
Powtórzono syntezę z przykładu I, jednak zamiast reakcji bocznego łańcucha aminowego D-4Aph z izocyjanianem tert-butylu poddano go i resztę 4Aph jednoczesnej reakcji z kwasem hydroorotylowym w celu wytworzenia dekapeptydu [4Aph(Hor)5, D-4Aph(Hor)6]-Antid. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Aph(L-hydroorotyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1728,4 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1728,8 Da. Z wyników RP-HPLC widać, że peptyd ten był bardziej hydrofilowy niż Azalina B, która z kolei była bardziej hydrofilowa niż Acylina.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 4 dniach. Uważano się, że wykazywał on długotrwałą aktywność tłumienia LH.
Powtórzono syntezę, zastępując NaBoc-4Amf(Fmoc) przez NaBoc-4Aph(Fmoc) w celu wytworzenia dekapeptydu [4Amf(Hor)5, D-Amf(Hor)6]-Antid, który ogólnie wykazywał taką samą bioaktywność tłumienia wydzielania LH.
P r z y k ł a d IH.
Powtórzono syntezę z przykładu l, jednak zamiast reakcji bocznego łańcucha aminowego D-4Aph z izocyjanianem tert-butylu poddano go reakcji z kwasem D-hydroorotylowym w celu wytworzenia dekapeptydu [4Aph(Hor)5, D-4Aph(D-Hor)6]-Antid. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Aph(D-hydroorotyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 98%. Analiza MS dała masę 1728,4 Da, co było zgodne z obliczoną masą
1728.8 Da. Z wyników RP-HPLC widać, że peptyd ten był bardziej hydrofilowy niż Azalina B, która z kolei była bardziej hydrofilowa niż Acylina.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 3 dniach. Uważano, że był on zasadniczo bardziej skuteczny w czwartym dniu i że wykazywał długotrwałą aktywność tłumienia LH.
P r z y k ł a d IJ.
Wykonano syntezę dekapeptydu [MeObm-D-2Nal1, 4Aph(Hol)5]-Acylina ogólnie sposobem podanym w przykładzie IB; jednak zamiast usunięcia grupy ochronnej dla Fmoc natychmiast po wprowadzeniu NaBoc-4Aph(Fmoc) zakończono syntezę dekapeptydu na żywicy. Następnie, po odblokowaniu końcowego N zamiast reakcji z bezwodnikiem octowym wykonano reakcję z izocyjanianem metylu w celu wytworzenia metylokarbamoilu na końcowym N. Następnie usunięto Fmoc i boczny łańcuch aminowy 4Aph poddano reakcji z kwasem hydroorotylowym, jak w przykładzie IB. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd karbamoilo-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Aph(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1645,7 Da, co
PL 194 509 B1 było zgodne z obliczoną masą 1645,8 Da. Z wyników RP-HPLC widać, że peptyd ten był bardziej hydrofilowy niż Azalina B, która z kolei była bardziej hydrofilowa niż Acylina.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 3 dniach i bardziej skuteczny o prawie 50% po 96 h. Uważano, że wykazywał on bardzo długotrwałe tłumienie LH.
P r z y k ł a d IK.
Powtórzono syntezę z przykładu I, zastępując NaBoc-D-3Pal przez NaBoc-D-4Aph(Fmoc) i pomijając następną reakcję z tert-BuNCO w celu wytworzenia dekapeptydu [4Aph(Hor)5, D-3Pal6]-Antid. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Acetyl-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-3Pal-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1574,7 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1574,7 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, po 1 do 3 dniach; jednak po 96 h wykazywał tłumienie zawartości LH do wartości około 35% wartości dla Acyliny. Uważa się, że wykazywał on bardzo długotrwałe tłumienie LH.
P r z y k ł a d IL.
Powtórzono syntezę z przykładu IG, zastępując izocyjanian tert-butylu przez kwas hydroorotylowy w celu wytworzenia dekapeptydu [4Aph(Cbm)5, D-4Aph(Cbm)6]-Antid. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(karbamoil)-D-4Aph(karbamoil)-Leu-Lys-(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1534,9 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1534,7 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie l, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny, jak Acylina, w ciągu 4 dni. Uważano, że wykazywał on bardzo długotrwałe tłumienie LH.
P r z y k ł a d IM.
Powtórzono syntezę z przykładu IG, zastępując izocyjanian metylu przez kwas hydroorotylowy w celu wytworzenia dekapeptydu [4Aph(MeCbm)5, D-4Aph(MeCbm)6]-Antid. Odszczepienie od żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem wykonano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(metylokarbamoil)-D-4Aph(metylokarbamoil)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1562,8 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1562,8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd był bioaktywny i że był prawie tak samo skuteczny jak Acylina w ciągu 2 dni, a następnie zaczynał nieznacznie zmniejszać tłumienie LH.
P r z y k ł a d II.
Otrzymano peptyd [4Aph(Hor)5, D-Cit6]-Antid, analog peptydu Cetrorelixu o wzorze Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-Cit-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2, stosując sposób syntezy opisany ogólnie w przykładzie I. Zamiast NaBoc-D-4Aph sprzęgano z NaBoc-D-Cit w pozycji 6. Alternatywnie w pozycji 6 sprzęgano z NaBoc-D-Orn(Fmoc) i przejściowo zatrzymywano przedłużanie łańcucha po otrzymaniu następującego przejściowego peptydu: Boc-D-Orn(Fmoc)-Leu-Lys(ipr,Z)-Pro-D-Ala-NH-[nośnik żywiczny]. Następnie usuwano ochronę bocznego łańcucha na reszcie Orn przez usunięcie ochrony Fmoc, jak w przykładzie I i na związek pośredni działano nadmiarem izocyjanianu tert-butylu w DMF w ciągu około 6 h w temperaturze pokojowej w celu przereagowania z bocznym łańcuchem na reszcie Orn. Potem zakończono syntezę pośredniego dekapeptydu, jak w przykładzie I.
Następnie peptydożywicę przemyto, odszczepiono i usunięto ochronę, a potem oczyszczano, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-Cit-Leu-ILys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1583,7 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1582,8 Da dla tego peptydu.
PL 194 509 B1
Peptyd był bardziej hydrofilowy niż Cetrorelix i wykazywał tak dużą trwałość bioaktywności, jak Cetrorelix, podczas próby in vivo na tłumienie wydzielania LH, jak w przykładzie I. Wykazywał trochę lepsze tłumienie po 3 dniach i znacznie lepsze po 96 h.
P r z y k ł a d IIA.
Otrzymano analog peptydu Antid, to jest [4Aph(Hor)5]-Antid, stosując sposób syntezy opisany ogólnie w przykładzie l opisu patentowego Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,169,935. Po sprzęgnięciu z NaBoc-D-Lys)Fmoc) w pozycji poddano go działaniu nadmiaru kwasu nikotynowego w DMF po usunięciu ochrony. Następnie sprzęgano z NaBoc-Aph(Fmoc) w pozycji 5 i potem usuwano ochronę, jak w przykładzie I. Związek pośredni poddawano reakcji z kwasem hydroorotylowym w DMF i zakończono syntezę pośredniego dekapeptydu, jak w przykładzie I.
Następnie wykonano standardowe płukanie, odszczepienie od żywicy i oczyszczanie, jak opisano w przykładzie. Otrzymano po oczyszczaniu metodą LC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-Lys(Nic)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on bardziej hydrofilowy niż Cetrorelix i wykazywał tak długotrwałą bioaktywność w tłumieniu wydzielania LH, jak Cetrorelix.
P r z y k ł a d III.
Otrzymano analog [4Aph(D/L-Imz)5]-Acylinę, stosując sposób syntezy opisany ogólnie w przykładzie IB, lecz zastąpiono D/L-Imz przez L-Hor. Tak więc, po usunięciu ochrony 4Aph w pozycji 5 działano na związek pośredni nadmiarem kwasu D/L-2-imidazolidono-4-karboksylowego, około 90 mg HOBt i około 0,66 mmola DIC w roztworze DMF w ciągu około 6 h w temperaturze pokojowej. Następnie zakończono syntezę pośredniego dekapeptydu, jak w przykładzie I.
Wykonano płukanie, odszczepienie, usunięcie ochrony i oczyszczanie peptydożywicy, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D/L-2-imidazolidono-4-karbonyl)-D-4Aph(Ac)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on jednorodną mieszaniną dwóch związków, bez innych zanieczyszczeń. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1602,7 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1602,8 Da dla tego peptydu.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał długotrwałe tłumienie wydzielania LH. Ma on nieznacznie lepsze tłumienie po 3 dniach i po 96 h niż Acylina.
P r z y k ł a d IIIA.
Powtórzono syntezę z przykładu III, stosując nadmiar kwasu L-2-imidazolidono-4-karboksylowego zamiast D/L-Imz. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1602,5 Da, co było zgodne z obliczoną masą
1602,8 Da dla tego peptydu. Peptyd był lepiej rozpuszczalny w wodzie niż Acylina.
Wykonano analizę, jak w przykładzie I i w dawce 50 pg peptyd wykazywał długotrwałe tłumienie wydzielania LH, mniej więcej takie samo, jak Acylina po upływie po 96 h.
P r z y k ł a d IIIB.
Powtórzono syntezę z przykładu III, stosując nadmiar kwasu D-2-imidazolidono-4-karboksylowego zamiast D/L-Imz. Otrzymano peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D-imz)-4-D-4Aph(Ac)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1602,6 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1602,8 Da dla tego peptydu. Peptyd był lepiej rozpuszczalny w wodzie niż Acylina.
Wykonano analizę, jak w przykładzie I. Peptyd był bioaktywny i w dawce 50 pg wykazywał tłumienie wydzielania H.
P r z y k ł a d IIIC.
Otrzymano peptyd [4Aph(Imz)5, D-4Amf(Cbm)6]-Acylina stosując kombinację sposobów podanych w przykładzie IA (do wprowadzenia D-4Amf(Cbm)6 i w przykładzie IIIA (do wprowadzenia 4Aph(Imz)5). Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-lmz)-D-4Amf(karbamoil)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 98%. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1617,6 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1617,8 Da dla tego peptydu. Wykonano analizę peptydu, jak w przykładzie I i w dawce 50 pg wykazywał długotrwałe tłumienie wydzielania LH. Było ono zasadniczo samo, jak Acyliny po 3 dniach i trochę lepsze niż tłumienie po upływie po 96 h.
P r z y k ł a d IV.
Otrzymano peptyd [4Aph(Hor)5, D-4Amf (MeCbm)6]-Antid o wzorze Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Amf(MeCbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2, stosując sposób syntezy opisany ogólnie w przykładzie IA. Zamiast reakcji D-4Amf w pozycji 6 z nadmiarem izocyjanianu tert-butylu
PL 194 509 B1 w DMF poddano go reakcji z izocyjanianem metylu. Następnie zakończono syntezę pośredniego dekapeptydu, jak w przykładzie IA.
Wykonano płukanie, odszczepienie, usunięcie ochrony i oczyszczanie peptydożywicy, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Amf(MeCbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1659,8 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1659,8 Da dla tego peptydu.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach wykazała, że w dawce 50 ąg Peptyd nr 4 wykazywał lepsze tłumienie wydzielania LH niż Acylina i bardzo długotrwałą bioaktywność.
P r z y k ł a d IVA.
Powtórzono syntezę z przykładu IV, zastępując bezwodnik octowy przez izocyjanian metylu w celu wytworzenia peptydu [4Aph(Hor)5, D-4Aph(Me)6]-Antid. Po oczyszczaniu metodą RP-HPLC otrzymano peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-hydroorotyl)-D-4Amf(Ac)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała zmierzoną masę 1644,5 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1644,8 Da dla tego peptydu.
Zanalizowano ten peptyd, jak w przykładzie I i stwierdzono, że w dawce 50 ąg wykazywał długotrwałą bioaktywność. Wykazywał on tłumienie LH takie samo jak Acylina w ciągu 3 dni i nieznacznie lepsze po 94 h.
P r z y k ł a d IVB.
Wykonano modyfikację dekapeptydu otrzymanego i zbadanego w przykładzie IA, z D-alaninolem w końcówce C zamiast D-alanyloamidu. Najpierw otrzymano nonapeptydowy fragment z proliną jako wolnym kwasem w końcówce C, stosując syntezę, jak opisano ogólnie w przykładzie IA, lecz stosując żywicę Merrifield (usieciowany chlorometylowany polistyren) produkowany przez firmę Bachem, Inc. Po odszczepieniu, usunięciu ochrony i oczyszczaniu otrzymano następujący nonapeptyd: Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-4Amf(Cbm)-Leu-ILys-Pro-OH. 0,15 mmoli nonapeptydu z całkowicie usuniętą ochroną i oczyszczonego metodą HPLC rozpuszczono w 3 ml suchego DMF razem z 3,0 mmolami D-alaninolu firmy Lancaster Chemical. Następnie wprowadzono 0,60 mmola stałego PyBOP firmy Novabiochem, jako środka sprzęgającego i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej w ciągu 30 minut. Reakcję zgaszono przez wprowadzenie 200 ml wody, tworząc emulsję, którą zamieniono w klarowny roztwór przez nastawienie na pH 2,5 za pomocą lodowatego kwasu octowego.
Otrzymany dekapeptyd, Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-4Amf(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-ol oczyszczono metodą preparatywnej RP-HPLC, stosując jako bufor TEAP (pH 2,3), a następnie dodatkowo oczyszczono, stosując jako bufor 0,1 proc. TFA. Stwierdzono, że otrzymany peptyd był zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej około 99%. Analiza MS dała masę 1632,9 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1632,8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że ta bioaktywność trwa co najmniej 96 h. Uznano, że peptyd wykazywał bardzo długotrwałą aktywność.
P r z y k ł a d IVC.
Powtórzono syntezę z przykładu IVB, zastępując w mieszaninie reakcyjnej 3,0 mmole L-alaninonu firmy Aldridge Chemical przez D-alaninol. Otrzymany dekapeptyd oczyszczono metodą RP-HPLC, jak w przykładzie IVB i stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny o ocenionej czystości powyżej około 98%. Analiza MS dała masę 1632,9 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1632,8 Da.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 ąg peptyd był bioaktywny i że ta bioaktywność trwała w ciągu co najmniej 96 h. Uznano, że peptyd miał bardzo długotrwałą aktywność.
P r z y k ł a d IVD.
Wykonano modyfikację dekapeptydu otrzymanego i zbadanego w przykładzie I, z D-alaninolem w końcówce C zamiast D-alanyloamidu. Otrzymano nonapeptydowy fragment z proliną jako wolnym kwasem w końcówce C, stosując SPPS na żywicy Merrifield, ale poza tym postępowano tak, jak opisano ogólnie w przykładzie I. Po odszczepieniu, usunięciu ochrony i oczyszczeniu otrzymano następujący nonapeptyd: Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-OH. Następnie oczyszczony nonapeptyd poddano reakcji z D-alaninole, jak w przykładzie IVB i otrzymany
PL 194 509 B1 dekapeptyd, Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-ol oczyszczono metodą preparatywnej RP-HPLC, jak opisano w przykładzie IVB, lecz stosując TEAP o pH 6,5 zamiast TEAP o pH 2,3. Stwierdzono, że otrzymany peptyd był zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej około 99%. Analiza MS dała masę 1618,9 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1618,8 Da. Analiza tego peptydu in vivo wykazała, że był on bioaktywny.
P r z y k ł a d IVE.
Powtórzono syntezę opisaną w przykładzie IVD, zastępując L-alaninon przez D-alaninol. Otrzymany dekapeptyd: Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(Hor)-D-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-ol oczyszczono metodą RP-HPLC, jak opisano w przykładzie IVD i stwierdzono, że otrzymany peptyd był zasadniczo jednorodny o ocenionej czystości około 99%. Analiza MS dała masę 1618,9 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1618,8 Da. Analiza peptydu in vivo wykazała, że był on bioaktywny.
P r z y k ł a d V.
Otrzymano peptyd [4Aph(D-Hor)5, D-4Amf(Cbm)6]-Antid o wzorze Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D-hydroorotyl)-D-4Amf(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2, stosując sposób syntezy opisany ogólnie w przykładzie IA. Zamiast reakcji 4Aph w pozycji 5 z kwasem L-hydroorotylowym poddano łańcuch boczny reakcji z kwasem D-hydroorotylowym. Następnie zakończono syntezę pośredniego dekapeptydu, jak w przykładzie IA.
Wykonano standardowe płukanie, odszczepienie żywicy i usunięcie ochrony z następnym oczyszczaniem, jak opisano w przykładzie I. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D-hydroorotyl)-D-4Amf(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 98%. Analiza LSIMS dała zmierzoną masę 1645,8 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1645,8 Da dla tego peptydu.
Analiza tego peptydu standardową próbą in vivo na szczurach wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał bioaktywność tłumienie wydzielania LH w ciągu 2 dni tak długą, jak Acylina i trochę mniejsze tłumienie po 72 i 96 h.
P r z y k ł a d VA.
Powtórzono syntezę z przykładu V, jednak zamiast reakcji bocznego łańcucha aminowego 4Amf z usuniętą grupą ochronną z izocyjanianem tert-butylu poddano go reakcji z bezwodnikiem octowym. Otrzymano po oczyszczaniu metodą RP-HPLC peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(D-hydroorotyl)-D-4Amf(Ac)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH2.
Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała zmierzoną masę 16447 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1644,8 Da.
Analiza tego peptydu, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał tłumienie wydzielania LH zasadniczo takie samo, jak Acylina, w ciągu powyżej 3 dni; po 96 h wykazywał tłumienie LH trochę lepsze niż Acylina.
P r z y k ł a d VI.
Powtórzono syntezę, jak ogólnie opisano w przykładzie IF, ale w pozycji 6 zastosowano resztę NaBoc-D-4Amf(Fmoc) zamiast NaBoc-D-4Aph(Fmoc) w celu wytworzenia dekapeptydu [4Amf(Hor)5, D-4Amf(Hor)6]-Antid. Po oczyszczeniu metodą RP-HPLC otrzymano peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Amf(L-hydroorotyl)-D-4Amf(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała zmierzoną masę 1658,7 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1658,8 Da dla tego peptydu.
Analiza tego peptydu, jak w przykładzie l, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał długotrwałą bioaktywność tłumienie wydzielania LH prawie taką samą, jak Acylina, po pierwszych 2 dniach i wykazywał bioaktywność prawie taką samą, jak Acylina, po 3 i 4 dniach.
P r z y k ł a d VIA.
Powtórzono syntezę z przykładu VI, ale zamiast reakcji bocznego łańcucha D-4Amf po usunięciu ochrony z bezwodnikiem octowym poddano go reakcji z izocyjanianem tert-butylu, jak w przykładzie I, z wytworzeniem peptydu [4Amf (Hor)5, D-4Amf (Cbm)6]-Antid. Po oczyszczeniu metodą RP-HPLC otrzymano dekapeptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Amf(L-hydroorotyl)-D-4Aph(karbamoil)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była około 99%. Analiza MS dała masę 1659,6 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1659,6 Da.
Analiza tego peptydu, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał taką samą, jak Acylina, aktywność tłumienie wydzielania LH po 1 dniu i prawie taką samą po 2 dniach. Był on trochę mniej aktywny po 3 dniach, ale wykazywał prawie taką samą aktywność, jak Acylina, po 4 dniach.
PL 194 509 B1
P r z y k ł a d VIB
Powtórzono syntezę z przykładu VIA, ale reakcję wykonano z izocyjanianem metylu zamiast z izocyjanianem tert-butylu, z wytworzeniem peptydu [4Amf(Hor)5, D-4Amf(MeCbm)6]-Antid. Po oczyszczeniu metodą RP-HPLC otrzymano peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Amf(L-hydroorotyl)-D-4Aph(metylokarbamoil)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była około 99%. Analiza MS dała masę 1673,6 Da, co było zgodne z obliczoną masą 1673,8 Da.
Analiza tego peptydu, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał taką samą, jak Acylina, aktywność tłumienie wydzielania LH po 1 dniu i prawie taką samą po 2 dniach i był on znacznie mniej aktywny po 3 i 4 dniach w tłumieniu wydzielania LH.
P r z y k ł a d VIC.
Powtórzono syntezę z przykładu VI, ale kwas D-hydroorotylowy zastąpiono kwasem L-hydroorotylowym z wytworzeniem peptydu [4Amf(Hor)5, D-4Amf(Ac)6]-Antid. Po oczyszczeniu metodą RP-HPLC otrzymano peptyd Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Amf(D-hydroorotyl)-D-4Amf(acetyl)-Leu-Lys(izopropyl)-Pro-D-Ala-NH2. Stwierdzono, że był on zasadniczo jednorodny i oceniono, że jego czystość była powyżej 99%. Analiza MS dała masę 1658,7 Da, co było zgodne z obliczoną masą
1658,8 Da.
Analiza peptydu, jak w przykładzie I, wykazała, że w dawce 50 pg peptyd wykazywał zasadniczo taką samą aktywność, jak Acylina, po 1 i 2 dniach. Trzeciego dnia był on zasadniczo mniej aktywny niż Acylina i nadal wykazywał znaczny spadek bioaktywności.
P r z y k ł a d VII.
Stosując procedury opisane ogólnie w przykładach od I do V wytworzono także następujące antagonistyczne peptydy GnRH:
[4Aph(Hor)5, D-Amf(Cbm)6, Pro9NHCH2CH3]-Antid
[4Aph(Hor)5, D-Aph(Cbm)6, Pro9NHCH2CH3]-Antid
[Acr-D-2Nal1, 4FD-Phe2, 4Aph (Hor)5)-Acylina
[Bz-D-2Nal1, 4NO2D-Phe2, 4Aph (Hor)5, D-4AphHor)6]-Antid
[For-D-2Na1, 4OCH3D-Phe2, 4Amf(Hor)5, D-4Aph(D-Hor)6]-Antid
[Acr-D-2Nal1, 4BrD-Phe2, 4Aph(Imz)5, D-4Aph(Imz)6]-Antid
[Ph-D-2Nal1, 4CH3D-Phe2, 3Aph(D-lmz)5, D-4Aph(D-Hor)6]-Antid
[By-D-2Nal1, 3,4Cl2D-Phe2, 4Aph(Hor)5, D-4Aph(Hor)6]-Antid
[Vl-D-2Nal1, 4NO2-Phe2, 4Aph(Hor)5, D-3Aph(Cbm)6]-Antid
[Vac-D-2Nal1,CaMe4ClD-Phe2, 4Aph(Hor)5,Gly10]-Acylina
[Pn-D-2Nal1,3Aph(lmz)5,D-3Amf(D-Hor)6-Agl10]-Antid
[Acr-D-2Nal1, 4Aph(Hor)5,Arg (Et2)8,D-Agl(Me)10]-Acylina
[MeCbm-D-2Nal1, 4Aph (Hor)5,Arg8,Agl(Me)10]-Acylina
[Cbm-D-2Nal1, 3Amf(Imp)5, Ala10]-Acylina
[EtCbm-D-2Nal1, 4Amf(Hor)5, Pro9NHCH2CH3]-Acylina
[Acr-D-2Nal1, 4Aph(Imz)5,D-4Amf(Cbm)6,Arg8]-Antid
[Cbm-D-2Nal1,4Aph(MeCbm5), D-Amf(MeCbm)6, Arg(Et2)-Antid
[4Ahp (Hor)5, D-4Ahp(Imz)6, D-Agl10]-Antid
[Ac-D-1Nal1, 4Amf(Hor)5, D-4Amf(D-Hor)6,Arg8]-Antid
[PrCbm-D-2Nal1, 4Amp(Imz)5, D-4Ahp(EtCbm)6,Pro9NHCH2CH3]-Antid
[4Amf(Hor)5, D-Lys(Nic)6,AzaGly10]-Antid
[4Amf(Hor)5, D-Cit6, Har(Et2)8]-Antid
[4Aph(Hor)5, D-Lys (Nic)6, D-Agl10]-Antid
[4Aph(Hor)5, D-Hci6, Agl(Me)10]-Antid
[4Aph(Hor)5, D-3Pal6, Har8, Agl10]-Antid
[4Aph(Hor)5, D-4Aph(For)6, D-Agl(Me)10]-Antid
[4Aph(Hor)5, D-4Aph(atz)6, Har(Et2)8]-Antid
[4Aph (Hor)5, D-4Aph(iprCbm)6, D-Agl10]-Antid
[For-D-1Nal1, 4Amf (Hor)5, D-4Amf(atz)6,Gly10]-Antid
[4Aph (D-Hor)5, D-4Aph(Cbm)6,Ala10-ol]-Antid
Peptydy te są bioaktywne w hamowaniu wydzielania LH.
PL 194 509 B1
P r z y k ł a d VIII.
Stosując procedury opisane ogólnie w przykładach od l do V i w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,491,217 wytworzono także następujące antagonistyczne peptydy GnRH:
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Aph(Cbm)6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Amf(Cbm)6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5]-Acylina
[NaMe4Aph(D-Hor)5]-Acylina
[D-4FPhe2,NaMe4Aph(Hor)5]-Acylina
[NaMe4Amf(Hor)5]-Acylina
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Aph(Hor)6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Aph(D-Hor)5]-Antid
[MeCbm-D-2Nal1, [NaMe4Aph(Hor)5]-Acylina
[NaMe4Aph(Hor)5,D-3Pal6]-Antid
[NaMe4Aph(Cbm)5, D-4Aph(Cbm)6]-Antid
[NaMe4Aph(MeCBM)5, D-4Aph (MeCbm)6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Amf(Cbm)6, Ala10-ol]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Amf(Cbm)6, D-Ala10-ol]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Aph(Cbm)6, Ala10-ol]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-Cit6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-Lys(Nic)6]-Antid
[NaMe4Aph(D/L-Imz)5]-Acylina
[NaMe4Aph(L-Imz)5]-Acylina
[NaMe4Aph(D-lmz)5]-Acylina
[NaMe4Aph (L-Imz)5, D-4Amf(Cbm)6]-Acylina
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Amf(MeCbm)6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Amf (Ac)6]-Antid
[NaMe4Aph(Hor)5, D-4Amf(Cbm)6, D-Ala10-ol]-Antid
[NaMe4Aph(D-Hor)5, D-4Amf (Cbm)6]-Antid
[NaMe4Aph(D-Hor)5,D-4Amf(Ac)6]-Antid
[NaMe4Amf (Hor)5, D-4Amf(Ac)6]-Antid
[NaMe4Amf (Hor)5, D-4Amf(Cbm)6]-Antid
[NaMe4Amfh (Hor)5, D-4Amf(MeCbm)6]-Antid
[NaMe4Amf(Hor)5, D-4Amf(Ac)6]-Antid
Peptydy te są bioaktywne w hamowaniu wydzielania LH i mają bardzo dobrą rozpuszczalność w wodzie przy fizjologicznych pH.
Wymienione powyżej związki zbadano i wykazały one aktywność biologiczną w tłumieniu LH w zakresie co najmniej ogólnie porównywalnym z odpowiednim antagonistycznym peptydem GnRH znanym jako Antid, za którego analogi są uważane. W wyniku intensywnych badań w tym zakresie w ciągu ostatnich 10 lat, bioaktywność oznaczoną w tej szeroko akceptowanej metodzie pomiaru tłumienia LH przyjęto jako dowód, że związki te mają zdolność tłumienia wydzielania gonadotropiny i dzięki temu wykazują użyteczne antygonadalne efekty zapobiegania owulacji. Dzięki lepszej rozpuszczalności, odporności na żelowanie in vivo, długotrwałej bioaktywności i innym właściwościom związki te uważa się ogólnie za środki antygonadalne korzystne w tłumieniu wydzielania gonadotropin i hamowaniu uwalniania steroidów przez gonady, to jest za środki hamujące owulację.
Związki według wynalazku są często podawane w postaci dopuszczalnych farmaceutycznie, nietoksycznych soli, takich jak sole z przyłączenia kwasów lub kompleksowych związków metali; korzystnymi mogą być octan i pomoesan, czyli sól kwasu pomoesowego. Jeśli aktywny składnik ma być podawany w postaci tabletek, to tabletka może zawierać dopuszczalny farmaceutycznie, nietoksyczny rozcieńczalnik zawierający spoiwo, takie jak tragakanta, skrobia kukurydziana lub żelatyna; środek ułatwiający rozpadanie się, taki jak kwas alginowy; i środek smarny, taki jak stearynian magnezu. Można także stosować podawanie dożylne w izotonicznym roztworze soli buforu fosforanowego i tym podobnych.
Kompozycje farmaceutyczne zawierają zwykle skuteczną ilość peptydu razem ze zwykłym, dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem lub rozcieńczalnikiem. Dawka wynosi zwykle od około 10 pg do około 2,5 miligramów peptydu na 1 kg wagi ciała gospodarza przy podawaniu dożylnym. Charakter tych związków może pozwolić na ich skuteczne podawanie doustne, przy czym dawki doustne mogą
PL 194 509 B1 być większe. Ogólnie, leczenie osób tymi peptydami wykonuje się zwykle w taki sam sposób, jak leczenie kliniczne za pomocą innych antagonistów GnRH, z zastosowaniem odpowiedniego nośnika, w którym związek jest rozpuszczalny i podawania dawki wystarczającej do zmniejszania zawartości LH i FSH u chorego.
Może być także pożądane podawanie analogu GnRH w ciągu dłuższego czasu, na przykład w ciągu od jednego tygodnia do jednego roku w pojedynczym podawaniu i można go stosować w postaci dawek o wolnym lub przedłużonym działaniu lub dawek wszczepianych.
Związki te można podawać ssakom dożylnie, podskórnie, domięśniowo, doustnie, przezskórnie, wewnątrznosowo, śródpłucnie, doodbytniczo lub dopochwowo w celu uzyskania hamowania i/lub kontroli płodności, a także w zastosowaniach powodujących odwracalne tłumienie aktywności gonadalnej, takich jak postępowanie w przypadku przedwczesnego pokwitania lub w radio- lub chemioterapii. Są także przydatne w leczeniu guzów zależnych od steroidów. Skuteczne dawki zmieniają się w zależności od postaci podawania i od gatunku leczonego ssaka. Niektóre z tych związków mają rozpuszczalności dochodzące do 50 mg/ml i mogą być zwykle stosowane jako roztwory o stężeniu od 5 do 10 mg/ml przy pH 5,4. Przykładem typowej postaci dawkowania jest bakteriostatyczny roztwór wodny o pH około 6 zawierający peptyd, przy czym roztwór ten jest podawany pozajelitowo w dawce w zakresie od około 0,1 do około 2,5 mg dziennie na 1 kg wagi ciała. Uważa się, że związki te są dobrze tolerowane in vivo i że są odporne na żelowanie; tak więc szczególnie nadają się do podawania w postaci podskórnych zastrzyków w bakteriostatycznym roztworze wodnym zawierającym około 5% mannitolu przy pH około 4,9 w odpowiednich stężeniach, powyżej około 0,75 mg/ml i nawet powyżej 1,0 mg/ml, bez niebezpieczeństwa żelowania w miejscu zastrzyku.
Te antagonistyczne peptydy GnRH są także korzystne w diagnostyce, zarówno in vivo, jak również in vitro. Peptydy te można wstrzykiwać in vivo z następną oceną strumienia krwi chorego w celu oznaczenia zakresu zmniejszenia wydzielania hormonalnego, na przykład wydzielania LH. Można wykonywać oceny in vitro w celu zbadania, czy pewne komórki guza są wrażliwe na GnRH. W takich ocenach działa się na hodowle komórek guza antagonistycznymi peptydami GnRH i następnie monitoruje wydzielanie hormonalne i proliferację komórek.
Chociaż wynalazek opisano w odniesieniu do jego korzystnych odmian, to jest jasne, że są możliwe zmiany i modyfikacje oczywiste dla osoby o przeciętnych umiejętnościach w tej dziedzinie bez odchodzenia od zakresu niniejszego wynalazku określonego w załączonych zastrzeżeniach. Jakkolwiek końcówka N może być pozostawiona bez podstawnika lub można zastosować niepodstawione lub inne równoważne grupy acylujące, to korzystne są grupy acetylowe albo podstawione lub niepodstawione grupy karbamoilowe. W pozycji 5 i 6 zamiast Aph i lub D-Aph można zastosować Ahp lub D-Ahp. Zamiast na Aph(Ac) można działać na grupę aminoPhe alternatywnymi środkami acylującymi, ujawnionymi w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5,506,207, takimi jak kwas mrówkowy, e-Ala(atz) lub kwas γ-aminomasłowy (atz), co podobnie daje antagonisty GnRH o długotrwałym działaniu; tak więc, otrzymane reszty uważa się za równoważne D- i L-4Aph(Ac). Zarówno Lys(Bu), jak i Lys(Et2) uważa się za równoważne ILys; jednak ILys jest najkorzystniejsza. Można także stosować inne hydrofobowe reszty aminokwasów w pozycji 1 i w pozycji 6 (jak wspomniano powyżej), korzystnie w postaci D-izomeru i są one uważane za równoważne do wymienionych powyżej.
Claims (17)
1. Antagonistyczny peptyd GnRH o wzorze:
X-D-NaL-(A) D-Phe-D-Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Xaa8-Pro-Xaa10 i jego sole dopuszczalne farmaceutycznie, w którym:
X oznacza grupę acylową zawierającą nie więcej niż 7 atomów węgla, lub metylokarbamoil;
A oznacza 4Cl lub 4F;
Xaa5 oznacza Aph(Q1) gdzie Aph oznacza 4-aminofenyloalaninę, Amf(Q1) gdzie Amf oznacza 4-aminometylofenyloalaninę, w których Q1 oznacza Q będący -C(O)-NHR, albo Q1 oznacza grupy o wzorach;
PL 194 509 B1 w których Hor oznacza kwas hydroorotowy o wzorze
C4N2H5(O)2COOH, Imz oznacza kwas 2-imidazolidono-4-karboksylowy o wzorze C3N2H5(O)COOH;
R oznacza atom wodoru lub C1-C5alkil
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2), D-Cit, lub D-Pal, w których Q2 oznacza Ac lub Q1;
Xaa8 oznacza Lys(ipr); i
Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol, Ala-ol, NHCH2CH3, Gly-NH2, lub Ala-NH2, z tym warunkiem, że gdy Xaa5 zawiera Q, to Xaa6 także zawiera Q.
2. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że X, A, Q1 i Xaa8 mają znaczenia podane w zastrzeżeniu 1; a
D-Pal oznacza D-3Pal;
Xaa5 oznacza 4Aph(Q1) lub 4Amf(Q1);
Q oznacza karbamoil lub metylokarbamoil;
Xaa6 oznacza D-4Aph(Q2), D-4Amf(Q2), w których Q2 oznacza Q albo D- lub L-Hor albo L- lub L-lmz; z tym warunkiem, że kiedy Q1 oznacza Q, to Q2 oznacza także Q;
Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol lub Ala-ol.
3. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, że Q oznacza L-Hor lub D-Hor.
4. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że X oznacza Ac, a Xaa10 oznacza D-Ala-NH2.
5. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że Xaa5 oznacza 4Aph(Llub D-Hor) i Xaa6 oznacza D-4Aph(Ac), lub D-3Pal.
6. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że Xaa5 oznacza 4Aph(Llub D-Hor) i Q2 oznacza Q i R oznacza H lub metyl.
7. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że Xaa5 oznacza 4Aph(Llub D-Hor) i Xaa6 oznacza D-Cit.
8. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1 albo 2, albo 3, albo 4, znamienny tym, że Xaa6 oznacza D-4Aph(D-Hor).
9. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że:
X oznacza For, Ac, Acr, Pn, By, Vl, Vac, lub Bz; gdzie For oznacza formyl, Ac oznacza acyl, Acr oznacza akrylil, Pn oznacza n-propionyl, By oznacza butyryl, Vl oznacza waleryl, Vac oznacza winyloacetyl, oraz Bz oznacza benzoil;
D-Pal oznacza D-3Pal;
Xaa5 oznacza 4Aph(Q1) lub 4Amf(Q1), gdzie Q1 oznacza D-izomer, lub L-izomer Hor albo oznacza Imz;
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2), D-Cit, lub D-Pal, w których Q2 oznacza Ac, Q lub Q1;
10. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 9, znamienny tym, że Q1 oznacza Llub D-Hor i Xaa6 oznacza D-4Amf(Q), w którym R oznacza H lub metyl.
11. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 9, znamienny tym, że X oznacza Ac; R oznacza H lub metyl; Xaa6 oznacza D-4Aph(Q2), D-4Amf(Q2) lub D-3Pal, w których Q2 oznacza Ac, Q lub Q1; i Xaa10- oznacza D-Ala-NH2.
12. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 1, znamienny tym, że ma wzór: Ac-D-2Nal -D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-Hor)-Xaa6-Leu(ipr)-Pro-Xaa10, w którym Xaa6 oznacza D-4Aph(Ac), D-3Pal, D-4Aph(karbamoil), D-4Amf(karbamoil), D-4Amf(metylokarbamoil) lub D-4Aph(D-Hor) i Xaa10 oznacza D-Ala-NH2, D-Ala-ol lub Ala-ol.
PL 194 509 B1
13. Antagonistyczny peptyd GnRH według zastrz. 12, znamienny tym, że ma wzór: Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-Hor)-D-4Aph(karbamoil)-Leu-Lys(ipr)-Pro-D-Ala-NH2, lub jego farmaceutycznie akceptowalna sól.
14. Kompozycja farmaceutyczna do hamowania wydzielania gonadotropinu ssaków, znamienna tym, że jako aktywny składnik zawiera skuteczną ilość antagonisty GnRH określonego w zastrzeżeniu 1, w połączeniu z nietoksycznym rozcieńczalnikiem.
15. Zastosowanie antagonistycznego peptydu GnRH określonego w zastrzeżeniu 1, do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do diagnozy in vivo lub in vitro stanu, gdy GnRH powoduje nadmierne wydzielanie hormonów lub wzrost guza.
16. Zastosowanie antagonistycznego peptydu GnRH określonego w zastrzeżeniu 1, do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do hamowania wydzielania gonadotropin i zasadnicze zmniejszenie zawartości LH i FSH.
17. Związek pośredni do wytwarzania antagonistycznego peptydu GnRH o następującym wzorze:
X1-D-Nal-(A)D-Phe-D-Pal-Ser(X2)-Xaa5-Xaa6-Leu-Lys(ipr)(X4)-Pro-X5, w którym:
X1 oznacza grupę ochronną grupy a-aminowej;
A oznacza 4Cl lub 4F;
X2 oznacza H lub grupę ochronną hydroksylu;
Xaa5 oznacza Aph(Q1) lub Amf(Q1), w których Q1 oznacza
Xaa6 oznacza D-Aph(Q2), D-Amf(Q2) lub D-Pal, w których Q2 oznacza Ac, Q1, karbamoil lub metylokarbamoil;
X4 oznacza labilną na kwas grupę ochronną grupy aminowej; i
X5 oznacza żywiczny nośnik D-Ala, Gly lub Ala; żywiczny nośnik N(Et); amid D-Ala, Gly lub Ala; lub etyloamid.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/837,042 US5925730A (en) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | GnRH antagonists |
| PCT/US1998/007438 WO1998046634A1 (en) | 1997-04-11 | 1998-04-13 | GnRH ANTAGONISTS BEING MODIFIED IN POSITIONS 5 AND 6 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL336213A1 PL336213A1 (en) | 2000-06-05 |
| PL194509B1 true PL194509B1 (pl) | 2007-06-29 |
Family
ID=25273352
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL98336213A PL194509B1 (pl) | 1997-04-11 | 1998-04-13 | Antagonisty GnRH modyfikowane w pozycjach 5 i 6, zawierające je kompozycje farmaceutyczne oraz ich zastosowanie |
Country Status (37)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5925730A (pl) |
| EP (1) | EP1003774B1 (pl) |
| JP (2) | JP4249806B2 (pl) |
| KR (1) | KR100519421B1 (pl) |
| CN (1) | CN1230442C (pl) |
| AR (1) | AR011217A1 (pl) |
| AT (1) | ATE319736T1 (pl) |
| AU (1) | AU728642B2 (pl) |
| BR (1) | BR9808523B1 (pl) |
| CA (1) | CA2286190C (pl) |
| CY (2) | CY1108063T1 (pl) |
| CZ (1) | CZ299097B6 (pl) |
| DE (2) | DE122009000033I2 (pl) |
| DK (1) | DK1003774T3 (pl) |
| EE (1) | EE03974B1 (pl) |
| ES (1) | ES2260833T3 (pl) |
| FR (1) | FR09C0028I2 (pl) |
| HK (1) | HK1025104A1 (pl) |
| HR (1) | HRP980197B1 (pl) |
| HU (1) | HU224836B1 (pl) |
| IL (1) | IL132303A0 (pl) |
| LU (1) | LU91585I2 (pl) |
| MY (1) | MY114811A (pl) |
| NL (1) | NL300395I2 (pl) |
| NO (2) | NO324991B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ500142A (pl) |
| PL (1) | PL194509B1 (pl) |
| PT (1) | PT1003774E (pl) |
| RU (1) | RU2199549C2 (pl) |
| SI (1) | SI1003774T1 (pl) |
| SK (1) | SK285381B6 (pl) |
| TR (1) | TR199902956T2 (pl) |
| TW (1) | TW505658B (pl) |
| UA (1) | UA58547C2 (pl) |
| UY (1) | UY24958A1 (pl) |
| WO (1) | WO1998046634A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA983062B (pl) |
Families Citing this family (37)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6828415B2 (en) * | 1993-02-19 | 2004-12-07 | Zentaris Gmbh | Oligopeptide lyophilisate, their preparation and use |
| US5925730A (en) * | 1997-04-11 | 1999-07-20 | Ferring Bv | GnRH antagonists |
| AU1590699A (en) * | 1997-11-20 | 1999-06-15 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Liquid phase process for the preparation of gnrh peptides |
| US7658938B2 (en) | 1999-02-22 | 2010-02-09 | Merrion Reasearch III Limited | Solid oral dosage form containing an enhancer |
| US8119159B2 (en) * | 1999-02-22 | 2012-02-21 | Merrion Research Iii Limited | Solid oral dosage form containing an enhancer |
| US20070148228A1 (en) * | 1999-02-22 | 2007-06-28 | Merrion Research I Limited | Solid oral dosage form containing an enhancer |
| GB0117057D0 (en) * | 2001-07-12 | 2001-09-05 | Ferring Bv | Pharmaceutical composition |
| IL147138A0 (en) * | 2001-12-17 | 2002-08-14 | Yeda Res & Dev | Methods of and pharmaceutical compositions for modulating cell adhesion, migration and extravasation |
| DE20321887U1 (de) | 2003-11-10 | 2012-01-20 | Allergan, Inc. | Arzneimittel umfassend niedrige Dosierungen von Desmopressin |
| EP1689419A4 (en) | 2003-11-10 | 2009-01-14 | Reprise Biopharmaceutics Llc | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS WITH LOW DOSES OF DESMOPRESSIN |
| CN101037472B (zh) * | 2006-03-14 | 2013-03-27 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 具有低组胺释放作用的促黄体生成素释放激素拮抗剂 |
| ES2426445T3 (es) * | 2006-04-07 | 2013-10-23 | Merrion Research Iii Limited | Forma de dosificación oral sólida que contiene un potenciador |
| JOP20090061B1 (ar) | 2008-02-11 | 2021-08-17 | Ferring Int Center Sa | طريقة معالجة سرطان البروستاتا بمضادات الهرمونات التناسلية GnRH |
| US8999383B2 (en) * | 2008-05-07 | 2015-04-07 | Merrion Research Iii Limited | Compositions of GnRH related compounds and processes of preparation |
| CA2751854A1 (en) * | 2009-02-25 | 2010-09-02 | Merrion Research Iii Limited | Composition and drug delivery of bisphosphonates |
| US8828938B2 (en) * | 2009-04-24 | 2014-09-09 | Polypeptide Laboratories A/S | Method for the manufacture of degarelix |
| MX2011011431A (es) * | 2009-05-01 | 2012-02-23 | Ferring Bv | Composicion para el tratamiento de cancer de prostata. |
| TW201043221A (en) * | 2009-05-06 | 2010-12-16 | Ferring Int Ct Sa | Kit and method for preparation of a Degarelix solution |
| US20110039787A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-02-17 | Ferring International Center S.A. | Compositions, kits and methods for treating benign prostate hyperplasia |
| WO2011066386A1 (en) | 2009-11-25 | 2011-06-03 | Novetide, Ltd. | Process for production of degarelix |
| US20110182985A1 (en) * | 2010-01-28 | 2011-07-28 | Coughlan David C | Solid Pharmaceutical Composition with Enhancers and Methods of Preparing thereof |
| US9089484B2 (en) * | 2010-03-26 | 2015-07-28 | Merrion Research Iii Limited | Pharmaceutical compositions of selective factor Xa inhibitors for oral administration |
| EP2447276A1 (en) | 2010-10-27 | 2012-05-02 | Ferring B.V. | Process for the manufacture of Degarelix and its intermediates |
| ES2617336T3 (es) | 2010-10-27 | 2017-06-16 | Ferring B.V. | Procedimiento para la fabricación de degarelix y sus productos intermedios |
| ES2703499T3 (es) | 2010-12-22 | 2019-03-11 | Salk Inst Biological Studies | Péptidos antagonistas de CRF cíclicos |
| WO2012094598A2 (en) | 2011-01-07 | 2012-07-12 | Merrion Research Iii Limited | Pharmaceutical compositions of iron for oral administration |
| JO3755B1 (ar) | 2011-01-26 | 2021-01-31 | Ferring Bv | تركيبات تستوستيرون |
| WO2013104745A1 (en) | 2012-01-13 | 2013-07-18 | Ferring Bv | Pharmaceutical composition |
| WO2013178788A2 (en) | 2012-06-01 | 2013-12-05 | Ferring B.V. | Manufacture of degarelix |
| US10265384B2 (en) | 2015-01-29 | 2019-04-23 | Novo Nordisk A/S | Tablets comprising GLP-1 agonist and enteric coating |
| EP3981781A1 (en) | 2015-12-17 | 2022-04-13 | Fresenius Kabi iPSUM S.r.l. | Process for the manufacture of degarelix and its intermediates |
| CN107778355B (zh) * | 2016-08-25 | 2021-04-20 | 成都圣诺生物制药有限公司 | 一种合成西曲瑞克的方法 |
| WO2019110688A1 (en) | 2017-12-05 | 2019-06-13 | Ferring B.V. | A composition comprising degarelix for use in the treatment of breast cancer |
| US20220267347A1 (en) | 2019-07-29 | 2022-08-25 | Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. | Substituted pyrimidinedione compounds and uses thereof |
| US11332495B2 (en) | 2019-09-21 | 2022-05-17 | RK Pharma Solutions LLC | Process for the preparation of Degarelix acetate and Degarelix acetate-mannitol premix |
| CN114456236A (zh) * | 2020-11-09 | 2022-05-10 | 深圳市健翔生物制药有限公司 | 一种地加瑞克乙酰化杂质的制备方法 |
| CN118159541A (zh) | 2021-11-01 | 2024-06-07 | 山东绿叶制药有限公司 | 促性腺素释放激素拮抗剂及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4547370A (en) * | 1983-11-29 | 1985-10-15 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists |
| US4508921A (en) * | 1984-06-28 | 1985-04-02 | Merck & Co., Inc. | Process for preparation of alpha-alkyl amino acids |
| US5073624A (en) * | 1985-04-09 | 1991-12-17 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Therapeutic decapeptides |
| US4866160A (en) * | 1985-04-09 | 1989-09-12 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Therapeutic decapeptides |
| US4800191A (en) * | 1987-07-17 | 1989-01-24 | Schally Andrew Victor | LHRH antagonists |
| US4935491A (en) * | 1987-08-24 | 1990-06-19 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine |
| US5171835A (en) * | 1988-10-21 | 1992-12-15 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | LHRH antagonists |
| US5296468A (en) * | 1989-10-30 | 1994-03-22 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH analogs |
| JP2719233B2 (ja) * | 1991-04-25 | 1998-02-25 | デゲンギ，ロマノ | 黄体形成ホルモン放出ホルモン拮抗ペプチド |
| JP3568952B2 (ja) * | 1992-12-18 | 2004-09-22 | アボット・ラボラトリーズ | ５位及び６位に修飾アミノアシル残基を有するｌｈｒｈ拮抗薬 |
| IL108509A0 (en) * | 1993-02-22 | 1994-05-30 | Salk Inst For Biological Studi | GnRH antagonist peptides |
| US5506207A (en) * | 1994-03-18 | 1996-04-09 | The Salk Institute For Biological Studies | GNRH antagonists XIII |
| US5843901A (en) * | 1995-06-07 | 1998-12-01 | Advanced Research & Technology Institute | LHRH antagonist peptides |
| US5925730A (en) * | 1997-04-11 | 1999-07-20 | Ferring Bv | GnRH antagonists |
-
1997
- 1997-04-11 US US08/837,042 patent/US5925730A/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-04-08 AR ARP980101612A patent/AR011217A1/es active IP Right Grant
- 1998-04-09 MY MYPI98001566A patent/MY114811A/en unknown
- 1998-04-09 HR HR980197A patent/HRP980197B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-04-09 ZA ZA983062A patent/ZA983062B/xx unknown
- 1998-04-13 UA UA99105726A patent/UA58547C2/uk unknown
- 1998-04-13 PT PT98915539T patent/PT1003774E/pt unknown
- 1998-04-13 ES ES98915539T patent/ES2260833T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 AT AT98915539T patent/ATE319736T1/de active
- 1998-04-13 CA CA002286190A patent/CA2286190C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 BR BRPI9808523-9A patent/BR9808523B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-04-13 NZ NZ500142A patent/NZ500142A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-04-13 PL PL98336213A patent/PL194509B1/pl unknown
- 1998-04-13 DE DE200912000033 patent/DE122009000033I2/de active Active
- 1998-04-13 EE EEP199900479A patent/EE03974B1/xx active Protection Beyond IP Right Term
- 1998-04-13 CN CNB988060337A patent/CN1230442C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 KR KR10-1999-7009315A patent/KR100519421B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-04-13 UY UY24958A patent/UY24958A1/es not_active Application Discontinuation
- 1998-04-13 WO PCT/US1998/007438 patent/WO1998046634A1/en active IP Right Grant
- 1998-04-13 AU AU69698/98A patent/AU728642B2/en not_active Expired
- 1998-04-13 EP EP98915539A patent/EP1003774B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 JP JP54418398A patent/JP4249806B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 TR TR1999/02956T patent/TR199902956T2/xx unknown
- 1998-04-13 RU RU99123619/04A patent/RU2199549C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-04-13 HU HU0002704A patent/HU224836B1/hu active Protection Beyond IP Right Term
- 1998-04-13 DK DK98915539T patent/DK1003774T3/da active
- 1998-04-13 DE DE69833751T patent/DE69833751T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 US US09/402,698 patent/US6214798B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-13 IL IL13230398A patent/IL132303A0/xx active Protection Beyond IP Right Term
- 1998-04-13 CZ CZ0358699A patent/CZ299097B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-04-13 SI SI9830832T patent/SI1003774T1/sl unknown
- 1998-04-13 SK SK1396-99A patent/SK285381B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-05-06 TW TW087106980A patent/TW505658B/zh not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-10-08 NO NO19994906A patent/NO324991B1/no not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-07-13 HK HK00104333A patent/HK1025104A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-11-04 JP JP2004320615A patent/JP3645255B1/ja not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-06-07 CY CY20061100747T patent/CY1108063T1/el unknown
-
2009
- 2009-07-03 CY CY2009008C patent/CY2009008I2/el unknown
- 2009-07-15 FR FR09C0028C patent/FR09C0028I2/fr active Active
- 2009-07-17 NL NL300395C patent/NL300395I2/nl unknown
- 2009-07-17 LU LU91585C patent/LU91585I2/fr unknown
- 2009-07-23 NO NO2009016C patent/NO2009016I2/no unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL194509B1 (pl) | Antagonisty GnRH modyfikowane w pozycjach 5 i 6, zawierające je kompozycje farmaceutyczne oraz ich zastosowanie | |
| US5821230A (en) | GnRH antagonist decapeptides | |
| US5506207A (en) | GNRH antagonists XIII | |
| EP0500695B1 (en) | GnRH ANALOGS | |
| CA2101316C (en) | Gnrh analogs | |
| US5580957A (en) | GnRH analogs | |
| WO1994019370A1 (en) | Gnrh antagonists |