NO314547B1 - Nye inhibitorer for knokkelresorpsjon og vitronektinreseptorantagonister, anvendelse av forbindelsene samt farmasöytisk preparat - Google Patents

Nye inhibitorer for knokkelresorpsjon og vitronektinreseptorantagonister, anvendelse av forbindelsene samt farmasöytisk preparat Download PDF

Info

Publication number
NO314547B1
NO314547B1 NO19971268A NO971268A NO314547B1 NO 314547 B1 NO314547 B1 NO 314547B1 NO 19971268 A NO19971268 A NO 19971268A NO 971268 A NO971268 A NO 971268A NO 314547 B1 NO314547 B1 NO 314547B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
mmol
solution
dioxo
residue
under vacuum
Prior art date
Application number
NO19971268A
Other languages
English (en)
Other versions
NO971268D0 (no
NO971268L (no
Inventor
Volkmar Wehner
Jochen Knolle
Hans-Ulrich Stilz
Denis Carniato
Jean-Francois Gourvest
Tom Gadek
Robert Mcdowell
Original Assignee
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE1996126701 external-priority patent/DE19626701A1/de
Priority claimed from DE1996135522 external-priority patent/DE19635522A1/de
Application filed by Genentech Inc filed Critical Genentech Inc
Publication of NO971268D0 publication Critical patent/NO971268D0/no
Publication of NO971268L publication Critical patent/NO971268L/no
Publication of NO314547B1 publication Critical patent/NO314547B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/30—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D233/32—One oxygen atom
    • C07D233/36—One oxygen atom with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to ring nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A61P3/14—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis for calcium homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/44—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D233/52—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with hetero atoms directly attached to said nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/72—Two oxygen atoms, e.g. hydantoin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/96—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/30—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D239/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms directly attached in position 2
    • C07D239/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D239/18—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with hetero atoms attached to said nitrogen atoms, except nitro radicals, e.g. hydrazine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D249/14—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/80—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems

Description

Foreliggende oppfinnelse angår forbindelser med formel I så vel som deres fysiologisk akseptable salter og farmasøytiske tilberedninger inneholdende slike forbindelser, deres anvendelse for fremstilling av legemidler, spesielt som inhibitorer av knokkelresorpsjon av osteoklaster, som inhibitorer av tumorvekst og tumormetastasering, som betennelseshemmere, for behandling og profylakse av kardiovaskulære sykdommer som arteriosklerose eller restenose, for behandling eller profylakse av nefropatier og retinopatier, som f.eks. diabetisk retinopati, så vel som vitronektinreseptorantagonister for behandling og profylakse av sykdommer som berører vekselvirk-ningen mellom vitronektinreseptorer og deres ligander ved celle-celle- eller celle-matriks-interaksjonsprosesser.
Den humane knokkel går gjennom en konstant dynamisk ombyg-ningsprosess som omfatter knokkelresorpsjon og knokkeloppbyg-ging. Disse prosesser blir styrt av for dette spesialiserte celletyper. Knokkeloppbyggingen omfatter oppbygging av knokkelmatriksen av osteoblaster, knokkelresorpsjon angår ned-brytingen av knokkelmatriksen av osteoklaster. De fleste knokkelsykdommer skyldes en forstyrret likevekt mellom knokkel dannelsen og knokkelresorpsjonen.
Osteoporose er karakterisert ved et tap av knokkelmatriks. Aktiverte osteoklaster er flerkjernede celler med en diameter på opp til 400 um, som angriper knokkelmatriksen. Aktiverte osteoklaster legger seg på overflaten av knokkelmatriksen og utskiller proteolytiske enzymer og syrer i den såkalte "sealing zone", området mellom deres cellemembran og knokkelmatriksen. De sure omgivelser og proteasene bevirker nedbry-ting av knokkelen.
Oppfinnelsens forbindelse med formel I inhiberer knokkelresorpsjonen av osteoklasten. Knokkelsykdommer mot hvilke oppfinnelsens forbindelser kan bli anvendt, er først og fremst osteoporose, hyperkalsemi, osteopeni, f.eks. fremkalt ved metastaser, tannsykdommer, hyperparatyroidisme, periartikulær erosjon ved reumatoid artritt og Pagets sykdom.
Dessuten kan forbindelser med formel I bli benyttet for lind-ring, unngåelse eller terapi av knokkelsykdommer som blir fremkalt av en glykokortikoid-, steroid- eller kortikosteroid-terapi eller ved en mangel av kjønnshormon(er). Alle disse sykdommer er kjennetegnet ved knokkeltap som skyldes manglende likevekt mellom knokkeloppbyggingen og knokkelnedbryting.
Studier har vist at tilknytningen av osteoklaster til knokkelen blir styrt av integrinreseptorer på celleoverflaten til osteoklaster.
i
Integrin er en superfamilie av reseptorer til hvilken blant annet f ibrinogenreseptoren oiuh& 3 på blodplatene og vitronektinreseptoren ayG^ hører. Vitronektinreseptoren oty03 er et membrantilknyttet glykoprotein som blir uttrykt på celleoverflaten i en rekke celler som endotelceller, celler i den glatte karmuskulatur, osteoklaster og tumorceller. Vitronektinreseptoren ayPg som blir uttrykt på osteoklastmembranen, styrer prosessen ved tilknytning til knokkelen og knokkelresorpsjonen og bidrar således til osteoporose.
i
ayP3 bindes her til knokkelmatriksproteiner som osteopontin, knokkelprotein og trombospontin, som inneholder tripeptid-motivet Arg-Gly-Asp (eller RGD).
'Horton og medarbeider beskriver RGD-peptider og et anti-vitro-nektinreseptorantistoff (23C6), som hemmer tann-nedbyggingen av osteoklaster og vandringen av osteoklaster (Horton et al., Exp. Cell. Res. 1991, 195, 368). Sato et al. beskriver i J. Cell Biol. 1990, 111, 1713 ekistatin, et RGD-peptid fra a
slangegift som potent inhibitor av knokkelresorpsjonen i en vevskultur og som hemmer av osteoklastheftingen til knokkelen. Fischer et al. (Endocrinology, 1993, 132, 1411) kunne vise at i rotte hemmet ekistatin også knokkelresorpsjonen in vivo.
'Vitronektinreseptoren 0^3 fra humane celler i den glatte karmuskulatur fra aorta stimulerer vandringen av disse celler i neointima, som til sist fører til arteriosklerose og res-
tenose etter angioplasti (Brown et al., Cardiovascular Ses. 1994, 28, 1815).
Forbindelser med formel I kan dessuten tjene som bærer av virkestoffer for målrettet å transportere virkestoffet til virkestedet (= drug targeting, se f.eks. Targeted Drug Delivery, E.C. Juliano, Handbook of Experlmental Pharmacology, vol. 100, utg. Born, G.V.R. et al., Springer Verlag). Ved virkestoffer dreier det seg om slike som kan anvendes for behandling av de ovenfornevnte sykdommer.
o
Brooks et al. (Cell 1994, 79, 1157) viser at antistoffer mot ay&3 eller cxy03-antagonister kan bevirke en krymping av tumorer, ved at de induserer apoptosen til blodkarceller under angiogenesen. Chersh et al. (Science 1995, 270, 1500) beskriver <5>anti-ayP3-antistoffer eller ay<p>3-antagonister som inhiberer den bFGF-induserte angiogeneseprosess i rotteøyet, noe som kan være anvendelig terapeutisk ved behandling av retinopatier.
I EP-A 449 079, EP-A 530 505, EP-A 566 919, WO 93/18057 er det "beskrevet hydantoinderivater, i WO 95/14008 er det beskrevet substituerte 5-ring-heterocykler, som har trombosyttaggrege-ringshemmende virkning.
EP-A-530505, EP-A-449079 og WO 93/18057 viser hydantoinderiva-<5>ter med Ilbllla antagonistaktivitet (fibrinogenaktivitet) som skiller seg fra den foreliggende oppfinnelsen med hensyn til struktur og aktivitet. Ifølge læren av den kjente teknikken foreligger det, ved enden av den N-substituerte gruppen som tilsvarer E-F-G-gruppen av den krevde formel (I), ingen o
aminosyredel som -CH(COgR)-NH2 som i den foreliggende oppfinnelsen anses for å være et hovedtrekk for å oppnå den vitronektin-antagoniserende aktiviteten mot alfa-Vbeta3-reseptoren.
I patentpublikasjon WO 94/12181 blir det beskrevet substituerte aromatiske eller ikke-aromatlske ringsystemer, i WO 94/08577 substituerte heterocykler som fibrinogenreseptor-antagonister og nemmere av blodplateaggregeringen. Fra EP-A-518 586 og EP-A-528 587 er det kjent aminoalkyl- eller heterocyklylsubstituerte fenylalanlnderivater, fra WO 95/32710 arylderivater som hemmer knokkelresorpsjonen av osteoklaster. I WO 95/28426 blir det beskrevet RGD-peptider som inhibitorer av knokkelresorpsjon, anglogenese og restenose. WO 96/00574 beskriver benzodiazepin, WO 96/00730 beskriver fibrinogenreseptorantagonisttemplater, spesielt benzodiazepin, som er knyttet til en nitrogenbaerende 5-ring, som vitronektinreseptorantagonister.
Gjenstand for foreliggende oppfinnelse er forbindelser med den generelle formel I
hvor:
W står for R<1->A-B-D-C(E16), Ri-A-B-D-CH-C;
Y står for C=0,
A er -NH-, -CONH-, -CO-, -NH-NH-CO- eller en binding; B står for en direkte binding eller (C^-C^)-alkandiyl; D står for en direkte binding;
RI<6> står for E,
q står for 0 eller 1,
så vel som deres fysiologisk akseptable salter.
Fysiologisk akseptable salter av forbindelsene med den generelle formel I er spesielt farmasøytisk anvendbare eller ikke toksiske salter. Slike salter blir eksempelvis dannet av forbindelser med den generelle formel I, som inneholder sure grupper, f.eks. karboksy, med alkali- eller jordalkalimetaller, som f. eks. Na, K, Mg og Ca, så vel som med fysiologisk akseptable organiske aminer som f.eks. trietylamin, etanolamin eller tris-(2-hydroksy-etyl)-amin.
Forbindelser med den generelle formel I som inneholder basiske grupper, f.eks. en aminogruppe, en amidlnogruppe eller en guanidinogruppe, danner salter med uorganiske syrer, slik som f.eks. saltsyre, svovelsyre eller fosforsyre og med organiske karboksyl- og sulfonsyrer, som f.eks. eddiksyre, sitronsyre, benzoesyre, maleinsyre, fumarsyre, vinsyre, metansulfonsyre eller p-toluensulfonsyre.
Oppfinnelsens forbindelser med den generelle formel I kan inneholde optisk aktive karbonatomer som uavhengig av hverandre kan være i R- eller S-konfigurasjon, og således foreligge i form av rene enantiomerer eller rene dlastereomerer eller i form av enantiomerblandinger eller diastereomerblandinger. Så- vel rene enantiomerer og enantiomerblandinger som også diasteromerer og diastereomerblandinger, er gjenstand for foreliggende oppfinnelse.
Oppfinnelsens forbindelser med den generelle formel I kan dessuten inneholde bevegelige hydrogenatomer, altså foreligge i forskjellige tautomere former. Også disse tautomerer er gjenstand for foreliggende oppfinnelse.
Anvendte forkortelser:
Boe : t-butoksykarbonyl
DCC1 : dicykloheksylkarbodiimid
DMF : dimetylformamid
HOOBt : 3-hydroksy-4-okso-3,4-dihydro-1.2.3-benzotriazin
THF : tetrahydrofuran
HOBt : 1-hydroksy-benzotriazol
TOTC : 0-[cyan{etoksykarbonyl )metylenamino]-1,1,3,3-tetra-metyluronium-tetrafluorborat
DIPEA : diisopropyl-etylamin
ET : romtemperatur
Z : benzyloksykarbonyl
Forbindelsene med formel I lar seg generelt fremstille, eksempelvis i løpet av en konvergent syntese, ved sammenknytning av to eller flere fragmenter som retrosyntetisk lar seg avlede av den generelle formel I. Ved fremstilling av forbindelsene med formel I kan det generelt i løpet av syntesen være nødvendig temporært å blokkere funksjonelle grupper som i de enkelte syntesetrinn kunne ha ført til uønskede reaksjoner eller bireaksjoner, ved en til synteseproblemet tilpasset beskyt-telsesgruppestrategi, noe som er kjent av fagmannen. Fragment-sammenføynlngsmetodene er ikke begrenset til de etterfølgende eksempler, men er generelt anvendbare for syntesen av forbindelsene med formel I.
Forbindelser med formel I, hvor
står for en diokso- eller tiokso-okso-substituert imidazo-lldinrlng, hvor W kan stå for R<1->A-B-D-C(R<1>6), blir eksempelvis fremstilt ved: Reaksjon av a-aminosyrer eller N-substituerte cx-aminosyrer eller foretrukket deres estere, for eksempel metyl-, etyl-, ter-butyl- eller benzylester, eksempelvis en forbindelse med den generelle formel III med et lsocyanat eller isotiocyanat, eksempelvis ved den generelle formel TJ - E - F - G hvor U er lik lsocyanat, isotiocyanat eller triklormetylkarbonylamino, hvorved man oppnår urinstoff- eller tiourinstoffderivater med den generelle formel IV hvor V står for oksygen eller svovel, som ved oppvarming med syre under forsåpning av esterfunksjonen blir cyklisert til forbindelser med formel I av typen
En ytterligere metode for fremstilling av forbindelser med den generelle formel I hvor Y står for C=0 og W står for Ri-A-B-D-C(R<1>6), er eksempelvis omsetningen av forbindelser med formel V
med fosgen, tiofosgen eller tilsvarende ekvivalenter (analogt med S. Goldschmidt og M. Wick, Liebigs Ann. Chem. 575 (1952), 217-231 og C. Tropp, Chem. Ber. 61 (1928), 1431-1439).
Forbindelser med formel I, hvor
står for en heterocyklus av typen hvor Y står for C=0 eller C-S og W står for R<1->A-B-D-C(R<1>6)=C, <5>blir eksempelvis fremstilt etter det følgende skjema 1:
U står for -NCO eller -NCS; V står for 0.
<i>Omsetningen av forbindelser med formel VI til forbindelser med formel VII og av forbindelser med formel VII til forbindelser med formel VIII, kan eksempelvis bli gjennomført med S. Chung-gi et al., Tetrahedron Lett 1987, 28 (33), 3827 eller U. Schmidt et al., Angew. Chemie 1984, 53. En ytterligere mulighet 'for fremstilling av forbindelser med formel VIII, består I først å cyklisere forbindelser med formel VII under påvirkning av syrer, til forbindelser med formel XII
og deretter omsette forbindelser med formel XII i en Horner-Emmons-reaksjon med
til forbindelser med formel VIII.
I løpet av en konvergent syntese kan det i alle tilfeller være fordelaktig, alt etter betydningen av de enkelte substituenter fil, A, B, D, osv., først å bygge opp det heterocykliske ring-<5>system som kun bærer en del av substituentene, og deretter innføre de resterende substituenter, eksempelvis over en fragmenttilkopling. Som eksempler kan her syntesen i eksempel 1 nevnes: Dette generelle prinsipp er imidlertid ikke begrenset til dette ene eksempel, men er generelt anvendbart.
Forbindelser med formel I, hvor R<*->A står for
eller cyklisk guanylhydrazon av typen
i
blir eksempelvis fremstilt ved kondensering av
med ketoner eller aldehyder av typen 0-C(R<2>)- eller tilsvarende acetaler eller ketaler ifølge kjent fremgangsmåte, eksempelvis analogt med N. Desideri et al., Arch. Pharm. 325 (1992) 773-777 eller A. Alves et al., Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther. 21 (1986) 297-304.
Guanylhydrazonet ovenfor kan eventuelt dannes som E/Z-isomer-Jblanding som kan bli skilt ifølge kjente kromatografifremgangs-måter.
Forbindelser med formel I, hvor R^-A står for R<2->C(=NR<2>)NR<2->N-C(R<2>)- eller et system inneholdende en mono- eller poly-cyklus, av typen
kan bli fremstilt analogt.
Fremgangsmåter kjent fra litteraturen er for eksempel beskrevet i J. Maren, Advanced Organic Chemistry, tredje utgave (John Wiley & Sons, 1985).
For fremstilling av forbindelsene med formel I ifølge oppfinnelsen vises det videre til fremgangsmåtene som er i
illustrert i eksemplene.
Forbindelsene med den generelle formel I og deres fysiologisk akseptable salter kan gis til dyr, fortrinnsvis pattedyr og spesielt på mennesker, som legemiddel alene, i blanding med hverandre eller i form av farmasøytiske tilberedninger, tilpasset for en enteral eller parenteral anvendelse, og inneholder som den aktive bestanddel en virksom dose av minst en forbindelse med den generelle formel I eller et salt derav, ved siden av vanlige farmasøytisk anvendbare bærer- og tilsetningsstoffer. Tilberedningen inneholder normalt omkring 0,5 til 90 vekt?6 av den terapeutisk virksomme forbindelse.
Legemiddelet kan tilføyes oralt, for eksempel i form av piller,
tabletter, lakktabletter, drasjeer, granulater, hard- og mykgelatinkapsler, oppløsninger, siruper, emulsjoner, suspen-sjoner eller aerosolblandinger. Avleveringen kan også skje rektalt, for eksempel i form av stikkpiller eller parenteralt, f.eks. i form av injeksjons- eller infusjonsoppløsninger, mikrokapsler eller staver, eller perkutant, f.eks. i form av salver eller tinkturer, eller nasalt, f.eks. i form av nese-sprayer.
Fremstillingen av de farmasøytiske preparater skjer på i og for seg kjent måte, hvor farmasøytisk inerte, uorganiske eller organiske bærestoffer blir anvendt. For fremstillingen av piller, tabletter, drasjeer og harde gelatinkapsler kan man for eksempel anvende laktose, maisstivelse eller derivater derav, talkum, stearinsyre eller deres salter osv. Bærestoffer for myke gelatlnkapsler og stikkpiller er for eksempel fett, vokser, halvfaste og flytende polyoler, naturlige og herdede oljer osv. Egnet som bærestoff for fremstilling av oppløsninger og siruper er for eksempel vann, sakkarose, invertsukker, glukose, polyoler osv. Egnede som bærestoffer for fremstilling av injeksjonsoppløsninger er vann, alkohol, glyserin, polyol, planteoljer osv. Egnede som bærestoffer for mikrokapsler, implantater eller staver, er blandede polymerisater av glykolsyre og melkesyre.
i
De farmasøytiske preparater kan ved siden av virke- og bære-stoffene inneholde ytterligere tilsetningsstoffer som f.eks. fyllstoffer, tilsetnings-, spreng-, binde-, glide-, fuktings-, stabiliserings-, emulgerings-, søtnings-, farge-, smaks- eller aromatiserings-, fortyknings-, fortynningsmidler, buffer-stoffer, foruten oppløsningsmidler eller oppløsningsformidlere eller midler for oppnåelse av en depoteffekt, så vel som salter for forandring av det osmotiske trykk, overtrekksmidler eller antioksidanter. De kan også inneholde to eller flere forbindelser med formel I eller deres farmasøytisk akseptable salter; videre kan de ved siden av minst en forbindelse med formel I også inneholde ett eller flere andre terapeutisk virksomme stoffer.
Dosen kan varieres innen vide grenser og må i hvert tilfelle tilpasses de individuelle forhold.
Ved oral avlevering kan dagsdosen ligge mellom 0,01 til 50 mg/kg, fortrinnsvis 0,1-5 mg/kg, fortrinnsvis 0,3-0,5 mg/kg kroppsvekt for oppnåelse av virksomme resultater, ved intra-venøs applikasjon er dagsdosen generelt omkring 0,01 til 100 mg/kg, fortrinnsvis 0,05-10 mg/kg kroppsvekt. Dagsdosen kan, spesielt ved tilførsel av større mengder, bli oppdelt i flere, f.eks. to, tre eller fire, deldoser. Eventuelt kan det, alt 'etter individuelle forhold, være nødvendig å avvike fra de ovenfor angitte øvre og nedre dagsdoser.
Eksempler
Produktene er karakterisert ved hjelp av massespekter og/eller NMR-spekter.
Eksempel 1
( 2S )-benzoylkarbonylamino-3-[2-( (4S )-(3-(4 , 5-dihydro-lH-imidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylaminoj-propionsyre (1.8)
Syntesen skjedde Ifølge den følgende reaksjonssekvens:
la) (2S )-2-amino-5-benzyloksykarbonylamino-pentansyre-metylester-hydroklorld (1.2)
Under isavkjøling under argonatmosfære ble det til 240 ml tionylklorid dryppet til 300 ml absolutt metanol og deretter tilsatt 40 g (150 mmol) (2S)-2-aroino-5-benzyloksykarbonylamino-pentansyre (1.1) og dette ble reagert i tre timer ved romtemperatur og over natten ved 4°C. Oppløsningen ble hellet I metyl-tert-butyleter, oppløsningsmidlet ble dekantert av og resten ble finfordelt med dietyleter. Etter filtrering fikk man 29,14 g (61#) av (1.2) som fargeløst faststoff.
lb ) 5-benzyloksykarbonylamino-(2S)-(3-etoksykarbonylmetyl-urinstof f )pentansyre-metylester (1.3)
Ved 0<*>C dryppet man til en oppløsning av 9,41 g (29,7 mmol) av forbindelsen (1.2) I 150 ml diklormetan/tetrahydrofuran (2:1) under omrøring til 3,83 g (29,7 mmol) etylisocyanatoacetat og deretter 3 g (29,7 mmol) trietylamin. Etter 30 minutter ved 0°C ble isbadet fjernet og reaksjonsblåndingen ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 timer. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum ble resten kromatografert med eddikester over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og resten ble finfordelt med eter og filtrert. Man fikk 11,02 g ( 83K>) av (1.3) som fargeløst faststoff.
lc) [(4S )-( 3-amino-propyl)-2,5-diokso-imidazolin-l-yl]-eddiksyre-hydroklorid (1.4)
10,4 g (42,9 mmol) av (1.3) ble oppvarmet med 100 ml 6N saltsyre 45 minutter med tilbakeløpskjøling. Oppløsningen ble inndampet, resten tilsatt HgO og frysetørket. Man fikk 7,1 g ( bb¥>) av (1.4) som fargeløst faststoff.
Id) [(4S )-(3-(4 ,5-dlhydro-lH-imidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-dioksoimldazolidin-l-yl]-eddiksyre-hydroklorid (1.5) 400 mg (1,59 mmol) av (1.4) og 388 mg (1,59 mmol) 2-(metyl-merkapto)-2-imidazolin-hydroklorid ble oppløst 1 5 ml H2O. Blandingen ble innstilt til pH 9 med IN NaOH og oppvarmet I 2,5 timer til 6CC, mens pH-verdien i oppløsningen ble-holdt ved 9 ved tilsetning av IN NaOH (totalforbruk av IN NaOH: 3,4 ml). Reaksjonsblandingen ble satt i tre dager ved romtemperatur, innstilt til pH 1 med IN HC1, oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med MeOH/H20 = 9/1 over klselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og frysetørket. Man fikk 230 mg (4556) av (1.5) som fargeløst pulver.
le) ( 2S )-3-amino-2-benzyloksykarbonylaminopropionsyre-tert-butylester (1.6) 10 g (42 mmol) (2S)-3-amino-2-benzyloksykarbonylamino-propionsyre ble ristet med en blanding av 100 mg dioksan, 100 ml isobutylen og 8 ml konsentrert H2SO4 1 tre dager ved 20 atm. Ng-trykk i autoklav. Overskudd av isobutylen ble blåst av og til den gjenværende oppløsning ble det tilsatt 150 ml dietyleter, 150 ml mettet NaHC03-oppløsning. Fasene ble skilt og den vandige fase ble ekstrahert to ganger, hver med dletyleter. De sammenslåtte organiske faser ble vasket med 2x100 ml HgO og tørket over NagSO^j. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum fikk man 9,58 g (78£) av (1.6) som en blekgul olje.
lf) (2S )-benzoyloksykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (1.7)
200 mg (0,7 mmol) av (1.5) og 114 mg (0,7 mmol) HOOBt ble suspendert i 5 ml DMF og tilsatt 154 mg (0,7 mmol) DCC1 ved 0<*>C. Det ble omrørt i én time ved 0"C og i én time ved rt og deretter tilsatt 206 mg (0,7 mmol) av (1.6), omrørt i to timer ved rt og satt over natten ved rt. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med dlklormetan/metanol/iseddik/vann = 8/2/0,2/0,2 over klselgel. Etter inndamping og frysetørking fikk man 105 mg (27#) av (1.7) som fargeløst faststoff.
lg) (2S)-benzyloksykarbonylamin-3-[2-((4S)-(3-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidln-l-yl)-acetylamino]-proplonsyre (1.8)
105 mg (0,188 mmol) av (1.7) ble oppløst i en homogen oppløs-ning av 2 ml 90%- ig trifluoreddiksyre og 0,2 ml 1,2-dimerkaptoetan og satt i én time ved rt. Etter inndamping under vakuum ble resten skilt mellom dietyleter/vann og den vandige fase frysetørket. Etter kromatograf1 over Sephadex<5> LH 20 med HgO/n-butanol/EOAc = 43/4,3/3,5 og påfølgende frysetørking, fikk man 45 mg (48*) av (1.8) som fargeløst faststoff.
a
Eksempel 2
3-[2-( (4S)-(3-(5-amIno-2H-[l ,2 ,4] tr iazol-3-ylamino )-propyl )-2,5-diokso-imIdazolIdin-l-yl)-acetylamino]-(2S )-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (2.5)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
For syntesen av (1.4) og (1.6), se eksempel 1.
2a) [ ( 4S)-( 3-tert-butoksykarbonylamino-propyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre (2.1)
6 g (2 mmol) av (1.4) ble oppløst 1 350 ml THF/H20 = 2/1. Blandingen ble innstilt til pH 10,5 ved 0°C med IN NaOH, 'tilsatt 6,24 g (28,61 mmol) di-tert-butyldikarbonat, og pH-verdien i oppløsningen ble holdt mellom 9 og 10,5 ved tilsetning av IN NaOH. Det ble rørt i én time ved 0°C og blandingen ble satt ved 4'C over natten. pH ble innstilt med fosfatbuffer til pH 4 og oppløsningsmidlet fjernet under vakuum. Resten ble finfordelt med metanol, filtrert og filtratet inndampet. Etter kromatografi over kiselgel med diklormetan/MeOH/iseddik/vann - 7/3/0,3/0,3 fikk man 5,65 (753É) av en seig sirup av (2.1).
2b) (2S ) -benzy loksykarbony 1 amino-3- [2-((4S)-(3-tert-butoksykarbonyl-amino-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (2.2)
i
2,8 g (8,9 mmol) av (2.1) og 1,45 g (8,9 mmol) HOOBt ble oppløst i 50 ml DMF og ved 0°C tilsatt 1,95 g (8,9 mmol) DCC1. Etter én time ved 0"C og i én time ved rt ble det tilsatt 2,6 g (8,9 mmol) av (1.6), omrørt i to timer ved rt og reaksjonsblandingen ble satt over natten ved rt. Etter filtrering ble filtratet inndampet, resten skilt mellom HgO og eddikester, den organiske fase tørket over NagSC^, oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten kromatografert over kiselgel med eddikester /heptan 9/1 til 6/4. Man fikk 2,98 g (579É) av (2.2).
2c) 3-[2-( ( 4S )-(3-aminopropyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetyl amlno]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre
(2.3)
'2,9 g (4,9 mmol) av (2.2) ble oppløst i en blanding av 20 ml diklormetan, 9,8 ml trifluoreddiksyre og 2,35 ml trietylsllan. Etter 3,5 timer ved rt ble blandingen inndampet og deretter frysetørket. Resten ble finfordelt med dietyleter, tørket, krystallisert i litt metanol og finfordelt med eter. Man fikk <]>1,34 g (50SÉ) av (2.3) som fargeløst faststoff.
2d) 3-[2-((4S)-4-(3-(fenoksy-N-cyano-iminokarbonylamino)-propyl )-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (2.4)
400 mg (0,73 mmol) av (2.3) ble oppløst i 10 ml DMF. Det ble tilsatt 0,14 ml trietylamin og deretter 190,7 mg (0,8 mmol)
cyankarbamidsyredifenylester i 2 ml DMF. Etter to timer ved rt ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum, resten oppløst i 50 ml 5*-ig eddiksyreoppløsning og frysetørket. Etter kromatografi over kiselgel med metanol fikk man 260 mg (61*) av (2.4).
2e ) 3 - [2-( ( 4S )-( 3- ( 5-amino-2H-[1,2 ,4] triazol-3-ylamino )-propyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (2.5)
260 mg (0,45 mmol) av (2.4) ble suspendert 1 10 ml Isopropanol og tilsatt 62,4 pl (0,45 mmol) trietylamin. Man tilsatte 28,5 pl (0,585 mmol) hydrazin og oppvarmet i ti timer med tilbake-løpskjøling. Blandingen fikk stå ved rt over natten, bunnfallet filtrert av og vasket med butanol, THF og eter. Etter kromatografi over Sephadex<*> LH 20 med H20/n-butanol/HOAc = 43/4,3/3,5 og frysetørking, fikk man 80 mg (34*) av (2.5) som fargeløst faststoff.
Eksempel 3
( 2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(guanidinoacylamino-metyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre
(3.11)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
3a) (2S) ,3-diamlno-propionsyremetylester-dihydroklorid (3.2)
Det ble ved -15*C under argonatmosfære dryppet til 35 ml tlonylklorld til 60 ml absolutt metanol og deretter tilsatt 25 g (240 mmol) (2S),3-diamino-propionsyre-hydroklorid (3.1) og så 100 ml metanol. Etter 16 timers omrøring ved romtemperatur ble blandingen oppvarmet med tllbakeløpskjøllng i fire timer. Oppløsningen ble hellet i diisopropyleter, oppløsningsmidlet dekantert av, og resten kromatografert med metanol over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og resten finfordelt med 'diisopropyleter. Etter filtrering av bunnfallet og tørking over parafin fikk man 26,3 g (57*) av (3.2) som blekgult faststoff.
3b) (2S )-amino-3-tert-butoksykarbonylamino-propionsyremetylester-hydroklorid (3.3)
Til en suspensjon av 26 g (220 mmol) av (3.2) i 4,4 1 diklormetan tilsatte man ved -78<*>C 75,8 ml trietylamin og deretter dråpevis en oppløsning av 26,78 g (123 mmol) dl-tert-butyldikarbonat i 220 ml dlklormetan, lot blandingen oppvarme til 0°C og omrørt 1 1,5 time ved denne temperatur. Eeaksjonsblan-dlngen ble inndampet og kromatografert med eddikester/metanol - 20/1 over kiselgel. Man fikk 15,67 g (58*) av (3.3) som blekgul s i rup.
3c) ( 2S )-etyloksykarbonyImetyl-aminokarbonylamino-3-tert-butoksykarbonylamino-propionsyre-metylester (3.4)
Til en suspensjon av en oppløsning av 10 g (45,8 mmol) av forbindelsen (3.3) i 100 ml tetrahydrofuran dryppet man til 5,13 ml (45,8 mmol) etylisocyanatoacetat, lot det omrøre ved romtemperatur i tre timer, fjernet oppløsningsmidlet under vakuum og kromatograferte resten med eddikester/metanol = 20/1 over kiselgel. Man fikk 13,44 g (85*) av (3.4) som blekgul olje.
3d) 2 - [( 4S )-( amlnometyl )-2 , 5-dioksoimidazolldin] -eddiksyre-hydroklorid (3.5)
13,2 g (34 mmol) av (3.4) ble oppvarmet med 150 ml 6N saltsyre i 45 minutter med tllbakeløpskjøllng. Oppløsningen ble inndampet og resten frysetørket. Etter kromatografi over kiselgel med diklormetan/metanol = 7/3 og frysetørking av produktfraksjonene, fikk man 6,4 g (84*) av (3.5) som fargeløst faststoff.
3e) 2 - [ ( 4S)-(tert-butoksykarbonylamino-metyl)-2,5-diokso-imidazolidin]-eddiksyre (3.6)
Til en oppløsning av 4,4 g (19,7 mmol) av (3.5) i 300 ml tetrahydrofuran/vann - 2/1 ved 0"C tilsatte man IN NaOH til pH 10,5 ble oppnådd (forbruk: 26 ml), tilsatte 5,16 g (23,6 mmol) di-tert-butyldikarbonat og holdt ved tilsetningen av IN NaOH pH mellom 9,5 og 10,5. Etter én time ved 0<*>C og to timer ved romtemperatur lot man blandingen stå over natten ved 4<*>C, innstilte til pH 7 med IN HC1, og deretter med fosfatbuffer til pH 4,1. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, resten finfordelt med metanol, filtrert og filtratet ble inndampet og resten kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann - 8/2/0,2/0,2 over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og frysetørket. Utbytte av (3.6): 3,6 g (64*) fargeløst faststoff.
3f) 3-amino-(2S) -benzyl oksykarbony lam ino-propionsyre-me tyl -
ester-hydroklorid (3.7)
Til 50 ml absolutt metanol ved -15"C dryppet man til 7,4 ml (100,8 mmol) tionylklorid. Man tilsatte 1 g (50,4 mmol) 3-amino-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-hydroklorld og deretter 40 ml absolutt metanol. Etter 45 minutter omrøring ved -15* C og 20 timer ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen hellet på isopropyleter, bunnfallet filtrert fra og tørket under høyvakuum. Man fikk 14,18 g (98*) av (3.7) som fargeløst faststoff.
3g) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-( tert-butoksykarbonylamino-metyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre-metylester (3.8)
Til en oppløsning av 1,5 g (5,2 mmol) av (3.6)1 20 ml absolutt DMF ved 0°C tilsatte man 848 mg (5,2 mmol) HOOBt og deretter 1,144 g (5,2 mmol) DCC1. Etter én times omrøring ved 0'C og én time ved romtemperatur, tilsatte man 1,5 g (5,2 mm o-l) av (3.7) og 0,67 ml N-etylmorfolin og omrørte i tre timer ved romtemperatur. Bunnfallet ble filtrert, filtratet inndampet, resten tatt opp i eddikester og etter hverandre vasket med mettet NaHCC<3-oppløsning, KHSO^/KgSO^oppløsning og vann, og den organiske fase ble tørket over natriumsulfat. Etter filtrering og inndamping av oppløsningsmidlet under vakuum ble resten kromatografert med eddikester/heptan - 6/4 til eddikester over kiselgel, og man fikk 1,75 g (65*) av (3.8).
3h) 3[( ( 4S )-( aml no-metyl )-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propIonsyre-metylester-trifluoreddiksyresalt (3.9)
1,7 g (3,26 mmol) av (3.8) i 6,7 ml diklormetan, 3,3 ml trlfluoreddiksyre og 0,78 ml trietylsilan ble omrørt i fire timer ved romtemperatur. Oppløsningen ble hellet i dietyleter og bunnfallet filtrert. Man fikk 1,54 g (88*) av (3.9) som farge-løst faststoff.
3g) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(guanldlnoacylamino-metyl)-2,5-diokso-imidazolldin-l-yl)-acetylamlno]-propionsyre-metylester (3.10)
Til en oppløsning av 500 mg (0,93 mmol) av (3.9) i 10 ml absolutt DMF tilsatte man 0,129 ml trietylamin og deretter ved 0<*>C en oppløsning av 152 mg (0,93 mmol) karbonyldiimidazol i 10 absolutt DMF. Etter fire timers omrøring ved romtemperatur tilsatte man 89 mg (1,86 mmol) guanidin, lot det omrøre ved romtemperatur i to timer, fjernet oppløsningsmidlet under vakuum og kromatograferte resten med diklormetan/metanol/- eddiksyre/vann - 8,5/1,5/0,15/0,15 over kiselgel. Etter Inndamping av produkt fraksjonene og frysetørking fikk man 300 mg (64*) av (3.10) som fargeløst faststoff.
3h) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(guanldinoacylamino-metyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (3.11)
180 mg (0,32 mmol) av (3.10) ble oppløst i en blanding av dioksan/vann/trietylamin = 1/1/1. Etter 16 timer ved romtemperatur ble blandingen inndampet, tilsatt vann og frysetørket. Resten ble kromatografert over klselgel med diklormetan/- metanol/eddiksyre/vann = 8/2/0,2/0,2. Produktfraksjonene ble inndampet, tilsatt vann, frysetørket og resten ble deretter finfordelt med eddikester og dietyleter. Etter filtrering fikk man 62 mg (39*) av (3.11) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 493 (M + H)<+>
Eksempel 4
( 2S) -benzyl oksykarbonyl aml no-3- [ ((4S )-(3-(2-pyrimldylamino )-propyl) - 2 , 5-dioksoimidazol idin-l-yl)-acetylamino] -propionsyre
(4.2)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
4a) 2-[(4S)-(3-(2-pyrimidylamino)-propyl)-2,5-dioksoimidazolldin]-eddiksyre (4.1)
En blanding av 1 g (4 mmol) av 2-brompyrimidin og 2,04 ml (12 mmol) diisopropyletylamin (DIPEA) i 9 ml DMF ble oppvarmet til 80"C i 26 timer. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann = 8/2/0,2/0,2 over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og man fikk 144 mg (12*) av (4.1) som fargeløst faststoff.
i
4b ) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(2-pyrImidyl-amino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (4.2)
Til en oppløsning av 128 mg (0,44 mmol) av (4.1), 128 mg (0,44 mmol) av (1.6), 60 mg (0,44 mmol) HOBt og 0,035 ml N-etylmorfolin I 5 ml DMF tilsatte man 97 mg (0,44 mmol) DCC1. Etter én time ved 0°C og 16 timer ved romtemperatur ble oppløsnings-midlet fjernet under vakuum og resten kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann = 9,5/0,5/0,05/0,05 over kiselgel. Man fikk 180 mg (72*) av (4.2).
4c ) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(2-pyrimidyl-amino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (4.3)
170 mg (0,3 mmol) av (4.2) ble oppløst i en blanding av 2 ml °90*-ig trifluoreddiksyre og 0,2 ml 1,2-dimerkaptoetan. Etter én time ved romtemperatur ble blandingen tilsatt dietyleter, bunnfallet sentrifugert fra, igjen oppslemmet i dietyleter og på nytt sentrifugert. Etter oppløsning i vann og frysetørking ble resten kromatografert over vann/butanol/eddiksyre 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LH 20. Etter frysetørking fikk man 76 mg (49*) av (4.3) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 514 (M + H)<+>
"Eksempel 5
(2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S )-(3-(benzimidazolyl-2-amino )-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamlno]-propionsyre (5.5)
5Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
5a) 2-[ (4S)-(3-( 3-(2-nitrof enyl)-tiourinstoff )-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre (5.1)
Til en oppløsning av 4,5 g (17,88 mmol) av (1.4) i 100 ml DMF ved 0°C tilsatte man 4,96 ml (35,76 mmol) trietylamin og deretter 3,22 g (17,88 mmol) 2-nitrofenylisotiocyanat. Etter fire timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble skilt mellom diklormetan og 10*-ig eddiksyre. Den vandige fase ble to ganger ekstrahert med diklormetan og den organiske fase tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert over kiselgel. Produktfraksjonene ble Inndampet og man fikk 3,16 g (45*) av (5.1).
5b ) 2-[(4S )-(3-(3-(2-aminofenyl )-tiourInstoff )-propyl )-2,5-dlokso-Imldazolidin-l-yl]-eddiksyre (5.2)
4,6 g (11,6 mmol) av (5.1) i 40 ml absolutt etanol ble tilsatt 3,8 g 10* Pd/C. Det ble tilsatt 200 ml ammoniakkmettet etanol og hydrert i seks timer ved romtemperatur. Katalysatoren ble filtrert fra, filtratet inndampet og resten (1,85 g) direkte benyttet i syntesen av (5.4).
5c) 2-[ ( 4S)-(3-(benzimldazolyl-2-amlno )-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre (5.3)
1,85 g av (5.3) i 35 ml etanol ble oppvarmet med tilbakeløps-kjøling med 3 g kvikksølvoksid og 730 mg svovel i 16 timer. Det ble filtrert og resten ble fem ganger utkokt med vann. De sammenslåtte vannfaser ble frysetørket. Man fikk 814 mg (21* i forhold til (5.1)) av (5.3) som fargeløst faststoff.
5d) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino] -propionsyre-tert-butylester (5.4)
Syntesen av (5.4) skjedde gjennom reaksjon (5.3) med (1.6) som beskrevet i eksempel 4 ved fremstilling av (4.2) fra (4.1) og (1.6). Fra 205 mg (0,56 mmol) av (5.3) fikk man etter krornato-grafi av råproduktet over kiselgel med diklormetan/metanol/- eddiksyre/vann = 9/1/0,1/0,1 og 8/2/0,2/0,2 og påfølgende frysetørking av produktfraksjonene 255 mg (75*) av (5.4) som fargeløst faststoff.
5e) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amlno)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (5.5)
250 mg (0,41 mmol) av forbindelsen (5.4)ble omrørt i 3 ml 90*-ig trifluoreddiksyre i én time ved romtemperatur. Trifluor-eddlksyren ble fjernet under vakuum, resten tilsatt vann og frysetørket. Resten ble kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LH 20. Etter frysetørking fikk man 155 mg (66*) av (5.5) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 522 (M + H)<+>
Eksempel 6
( 2S )-benzyloksykarbonylamlno-3-[ ((4S )-(3-(cis-3a,4,5 ,6 ,7,7a-heksahydro-lH-benzimidazol-2-ylamIno )-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (6.4)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
6a) [(4S}-(3-(cis-3a,4,5,6,7,Va-heksahydro-lH-benzimidazol-a-ylamlno )-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre-hydroklorid (6.2)
En oppløsning av 298 mg (1 mmol) av (6.1) (fremstilt Ifølge G.D, Hartmann et al., WO 95/32710, s.115) og 251 mg (1 mmol) av (1.4) i 6 ml DMF ble tilsatt 0,51 ml DIPEA og 6 dråper vann og omrørt i 24 timer ved 100°C. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten kromatografert med diklormetan/metanol-/eddiksyre/vann = 9/1/0,1/0,1 over klselgel og deretter ble de sammenslått produktfraksjonene kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<5> LH 20. Produktfraksjonene ble slått sammen og frysetørket. Etter overføringen til hydroklorid fikk man 130 mg (35%) av (6.2) som fargeløst faststoff.
6b) (2S)-benzyloksykarbonylamino-[((4S)-(3-(cis-3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-lH-benzimidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino] -propionsyre-tert-butylester-eddiksyresalt (6.3)
Syntesen av (6.3) skjedde ved reaksjon av (6.2) med (1.6) som beskrevet i eksempel 4 ved fremstilling av (4.2) fra (4.1) og '(1.6). Fra 130 mg (0,35 mmol) av (6.2) fikk man etter kromatografi av råproduktet over kiselgel med diklormetan/metanol/- eddiksyre/vann = 8/2/0,2/0,2 og deretter 9/1/0,1/0,1 og på-følgende frysetørking av produktfraksjonene, 45 mg (19*) av (6.3) som fargeløst faststoff.
i
6c) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(cis-3a , 4 , 5 , 6 , 7 , 7a-hek sahydro-lH-benzimidazol-2-ylamlno )-pro py 1 )-2 , 5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (6.4)
o
40 mg (0,168 mmol) av (6.4) i 1 ml 90*-ig trlfluoreddiksyre ble omrørt ved romtemperatur i én time. Etter fjerning av trifluoreddiksyren under vakuum og rensing av råproduktet ved hjelp av preparativ HPLC over RP18 og påfølgende frysetørking 'av produktfraksjonene, fikk man 13 mg (14*) av (6.4) som farge-løst faststoff.
ES(+)-MS: 588 (M + H) +
Eksempel 7
(2S )-benzyloksykarbonylamlno-3-[2-( (4S )-(N' -(4 ,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl )-hydrazinokarbonylmetyl]-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (7.8)
'Syntesen skjedde Ifølge den følgende reaksjonssekvens:
7a) (4S)-karboksy-metyl-2,5-diokso-imidazolidin (7.1)
Til en suspensjon av 10 g (75 mmol) L-asparglnsyre i vann ved 80<*>C under omrøring tilsatte man 5,5 ml 11,7 N natronlut og 7,5 g (92,5 mmol) kallumcyanat. Man Innstilte under forløpet på én time ved porsjonsvis tilsetning av konsentrert HC1 ved 85°C, alltid inn en pH på 7 (forbruk: 1,5 ml). Deretter ble reaksjonsblandingen Innstilt til pH 3,5 med 5,5 ml konsentrert HC1. Deretter ble det tilsatt 9,5 ml konsentrert HC1, omrørt i 2,5 timer ved 85° C og reaksjonsblåndingen ble satt i 18 timer ved romtemperatur. Bunnfallet ble filtrert, vasket med litt kaldt vann og. tørket over P2°5« Man fikk 8,49 g (72*) av (7.1) som fargeløst faststoff.
7b) (4S)-metoksykarbonyl-metyl-2,5-diokso-imldazolidin (7.2)
Ved -15"C tilsatte man til 70 ml metanol 7,9 ml (107 mmol) tionylklorid, 8,47 g (53,5 mmol) av (7.1) og omrørte reaksjonsblandingen i 24 timer ved romtemperatur. Deretter ble oppløsningen hellet i dietyleter, bunnfallet filtrert fra og vasket med dietyleter. Etter tørking under høyvakuum fikk man 5,12 g (56*) av (7.2) som fargeløst faststoff. Inndamping av eterfasen og finfordeling av resten med dietyleter gav etter tørking under høyvakuum ytterligere 2,79 g (30*) av (7.2).
7c) [ ( 4S )-metoksykarbonyl-metyl-2,5-diokso-imidazolIdin]-eddiksyre-tert-butylester (7.3)
Under argonatmosfære tilsatte man til en suspensjon av 1,02 g !(23,2 mmol) natriumhydrid (55* i olje) i 20 ml absolutt DMF under isavkjøling, 4 g (23,2 mmol) av (7.2). Etterat hydrogen-utviklingen var avsluttet, ble det tilsatt 4,53 g (23,2 mmol) bromeddiksyre-tert-butylester. Etter én times omrøring ved 0°C, to timer ved romtemperatur og henstand over natten, ble opp-<D>løsningsmidlet fjernet og resten kromatografert med diklormetan/metanol = 40/1 over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og resten ble finfordelt med dietyleter. Man fikk 4,21 g (63*) av (7.3).
57d ) [ ( 4S )-metoksykarbonyl-metyl-2,5-diokso-imidazolidin]-eddiksyre (7.4)
4,2 g (14,67 mmol) av (7.3) ble oppløst i 50 ml 90*-ig trifluoreddiksyre. Etter én times omrøring ved romtemperatur ble o
trifluoreddiksyren fjernet under vakuum og resten ble fryse-tørket. Man fikk 3,17 g (94*) av (7.4).
7e) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-metoksykarbonyl-
metyl-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (7.5)
Syntesen av (7.5) skjedde ved reaksjon av (7.4) med (1.6) som beskrevet 1 eksempel 4 ved fremstilling av (4.2) fra (4.1) og (1.6). Fra 1 g (4,3 mmol) av (7.4) fikk man etter kromatografi av råproduktet over kiselgel med diklormetan/metanol - 20/1 og deretter 40/1, etter inndamplng av produktfraksjonene, 1,72 g (79*) av (7.5).
7f) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-karboksy-metyl-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (7.6)
D
En oppløsning av 700 mg (1,38 mmol) av (7.5) i vann/dioksan/trietylamin - 1/1/1 ble omrørt i seks timer ved 50<*>C. Etter henstand over natten ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen inndampet og resten ble kromatografert med 'diklormetan/metanol/eddiksyre/vann = 9/1/0,1/0,1 over kiselgel.
Etter inndamplng av produktfraksjonene fikk man 364 mg (54*) av (7.6).
7g) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[2-((4S)-(N'-(4,5-dihydro-<5> lH-imldazol-2-yl)-hydrazinokarbonylmetyl]-2,5-diokso-imidazol Idin-l-yl )-acetylamino] -proplonsyre-tert-butylester (7.7)
Til en oppløsning av 100 mg (0,2 mmol) av (7.6) og 33,1 mg (0,2 mmol) HOOBt i 5 ml DMF ved 0<*>C, tilsatte man 44,7 mg DCC1. Etter én time ved 0<*>C og én time ved romtemperatur tilsatte man 36,8 mg (0,2 mmol) 2-hydrazlno-2-imidazol-hydrobromld og omrørte i tre dager ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med diklormetan/metanol /eddiksyre/vann = 8/2/0,2/0,2 over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og frysetørket. Man fikk 60 mg (52*) av (7.7).
7h) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[2-((4S)-(N*-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl )-hydrazinokarbonylmetyl]-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (7.8) 55 mg (0,096 mmol) av (7.7) 1 1 ml 90*-ig trlfluoreddiksyre, ble omrørt 1 én time ved romtemperatur. Etter fjerning av trifluoreddiksyren under vakuum og rensing av råproduktet ved preparativ HPLC over RP18 og påfølgende frysetørking av produktf raks j onene , fikk man 10,6 mg (21*) av (7.8) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 519 (M+H)<+>
Eksempel 8
i
(2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[2-(2,5-diokso-(4S)- (N * -
(1,4,5 ,6-tetrahydro-pyrimidin-2-yl )-hydrazinokarbonylmetyl )-Imidazolin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (8.2)
Syntesen skjedde Ifølge den følgende reaksjonssekvens:
8a) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[2-(2 ,5-diokso-(4S)-(N'-(1,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-yl)-hydrazinokarbonyl-metyl)-imldazolin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (8.1)
Til en oppløsning av 130 mg (0,26 mmol) av (7.6) og 43 mg (0,26 mmol) HOOBt i 5 ml DMF ved 0<*>C tilsatte man 58 mg DCC1, omrørte i én time ved 0°C i én time ved romtemperatur og tilsatte deretter 0,034 ml N-etylmorfolln (NEM) og 52 mg (0,26 mmol) 2-hydrazino-l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-hydrobromid. Etter 28 timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsnings-midlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann = 8,5/1,5/0,15/0,15 over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og frysetørket. Man fikk 80 mg (52*) av (8.1)
8b) ( 2S )-benzyloksykarbonylamino-3- [2-(2 ,5-diokso-(4S)-(N'-(1,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-yl)-hydrazinokarbonyl-metyl)-imidazolin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (8.2)
En oppløsning av 80 mg (0,136 mmol) av (8.1) i 4 ml 90*-ig trifluoreddiksyre ble omrørt i én time ved romtemperatur, inndampet under vakuum og resten kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LH 20. Produktfraksjonene ble inndampet og renset ved preparativ HPLC over RP 18. Etter inndamplng av produktfraksjonene og fryse-tørking, fikk man 41,9 mg (59*) av (8.2) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 533 (M+H)<+>
Eksempel 9
2-benzyloksykarbonylamino-3-[2-( (4S)-(2-(N'-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)-hydrazinokarbonyl )-etyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (9.1)
Syntesen av (9.1) skjedde som beskrevet i eksempel 7 med utgangspunkt 1 L-glutaminsyre.
ES(+)-MS: 533 (M+H)<+>
Eksempel 10
3-[(2-( (4S )-(8( lH-benzlmldazol-2-ylmetyl )-karbamoyl )-metyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamlno-proplonsyre (10.2)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
10a) 3-[(2-((4S)-(8(lH-benzlmIdazol-2-ylmetyl )-karbamoyl)-metyl)-2,5-dlokso-lmidazolldln-l-yl)-acetylamlno] -(2S)-benzyloksykarbonylamlno-propionsyre-tert-butylester (10.1)
Til en oppløsning av 430 mg (0,87 mmol) av (7,6) og 142,5 mg (0,87 mmol) HOOBt i 10 ml DMF ved 0<*>C tilsatte man 192 mg DCC1. Etter én times omrøring ved 0°C og én time ved romtemperatur ble 231 mg (1,04 mmol) 2-(aminometyl)-benzImidazol og 0,5 ml diisopropyl-etylamin (DIPEA) tilsatt og blandingen ble videre omrørt i to timer ved romtemperatur. Etter henstand over natten ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann 9,5/0,5/0,05/0,05 over klselgel. Etter Inndamplng av produkt-fraks j onene fikk man 390 mg (72*) av (10.1).
10b ) 3 - [ ( 2-((4S )-(8(lH-benzimidazol-2-ylmetyl)-karbamoyl)-metyl)-2,5-diokso-imidazolidin-1-yl)-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (10.2)
360 mg (0,579 mmol) av (10.1) ble oppløst i 10 ml 95*-ig trifluoreddiksyre. Etter 30 minutter ved romtemperatur ble oppløsningen Inndampet under vakuum, resten ble skilt mellom eddiksyre og vann, vannfasen ekstrahert med eddikester og frysetørket. Besten ble kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LH 20. Produktfraksjonene ble inndampet og frysetørket. Man fikk 135 mg (40*) av (10.2) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 566 (M + H) +
Eksempel 11 ( 2S)-benzyloksykarbonylaml.no-3-[2-(( 4S)-(3-(3H-Imidazol[4,5-b]pyr1din-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (11.7)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
Ila) [4 - ( 3-amino-propyl) - 2 ,5-diokso-lmidazolldin-l-yl] -eddiksyre-metylester-hydroklorid (11.1)
Man tilsatte ved -15*C til 100 ml metanol, 12,5 ml (107 mmol) tionylklorid, 21,5 g (85,4 mmol) av (1.4) og omrørte reaksjonsblandingen i 24 timer ved romtemperatur. Deretter ble oppløs-ningen hellet i dietyleter, bunnfallet filtrert fra og vasket med dietyleter. Etter tørking under høyvakuum fikk man 20,52 g (90*) av en (11.1) som fargeløst faststoff.
11b [4-(3-isotiocyanato-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre-metylester (11.2)
Man tilsatte til en suspensjon av 2,65 g (10 mmol) av (11.1) i 30 ml diklormetan, 100 ml mettet natriumhydrogenkarbonatoppløs-ning. Etter ti minutters omrøring under isavkjøling tilsatte man 1,53 ml (20 mmol) tiofosgen til metylenklorldfasen. Det ble omrørt 1 ti minutter under isavkjøling, fasene skilt og vannfasen ekstrahert to ganger med diklormetan. De sammenslåtte organiske faser ble tørket over natriumsulfat. Etter filtrering og fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum fikk man 2,04 g (75*) av (11.2).
lic) [(4S )- ( 3- (3-(3-amino-pyridin-2-yl)-tiourinstoff)-propyl)-2,5-diokso-imidazolldIn-l-yl]-eddiksyre-metylester (11.3)
En oppløsning av 1,66 g (6,11 mmol) av (11.2) og 667 mg (6,11 mmol) 2,3-diaminopyridin i 18 ml absolutt etanol, ble det omrørt i 16 timer ved romtemperatur og deretter to timer med tilbakeløpskjøling. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann - 9/1/0,1/0,1. Etter Inndamplng av produktfraksjonene og frysetørking fikk man 1,67 g (72*) av (11.3).
Ild) [(4S)-(3-(3H-imIdazo[4 , 5]pyridln-2-ylamino )-propyl )-2,5-dlokso-iinidazolidin-l-yl]-eddiksyre-metylester (11.4)
Til en oppløsning av 1,43 g (3,75 mmol) av (11.3) i 80 ml etanol, tilsatte man 1,62 (7,51 mmol) kvikksølvoksld og 24 mg svovel og oppvarmet blandingen i én time med tilbakeløpskjø-ling. Etter filtrering og inndamplng av filtratet under vakuum, fikk man 1,15 g (89*) av (11.4).
Ile) [(4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-b]pyrIdin-2-ylamlno)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre-hydroklorid (11.5)
286 mg (0,83 mmol) av (11.4) i 10 ml konsentrert HC1 ble omrørt i fem timer ved 50<*>C. Etter filtrering ble filtratet fortynnet med vann og frysetørket. Man fikk 277 mg (91*) av (11.5) som fargeløst faststoff.
llf) ( 2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[2-((4S)-( 3-(3H-imidazo-[4 ,5-b]pyridin-2-ylamino )-propyl )-2 ,5-diokso-imidazol idin-l-yl ) - acetylamino] -propionsyre-tert-butylester (11.6)
Til en oppløsning av 267 mg (0,72 mmol) av (11.5) og 213 mg (0,72 mmol) av (1.6) i 10 ml DMF, tilsatte man 237 mg (0,72 mmol) 0-[cyan(etoksykarbonylJmetylenamino]-1,1,3,3-tetrametyl-uronium-tetrafluorborat (T0TTJ) og 0,245 ml diisopropyl-etylamln (DIPEA) og omrørte i én time ved romtemperatur. Oppløsningsmid-let ble fjernet under vakuum, resten oppløst i eddikester og eddikesterfasen to ganger ekstrahert med mettet NaHC03-oppløs-ning og to ganger med vann. Den organiske fase ble tørket over natriumsulfat. Etter filtrering og inndamping av filtratet under vakuum fikk man 425 mg (97*) av (11.6).
Hg) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3- [2-( (4S )-(3-(3H-imidazo-[4 ,5-b]pyridIn-2-ylamino ) -propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (11.7) 420 mg (0,69 mmol) av (11.6) ble oppløst 1 10 ml 95*-ig trifluoreddiksyre. Etter 15 minutter ved romtemperatur ble opp-løsningen inndampet under vakuum og resten kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LH 20. Produktfraks]onene ble inndampet og frysetørket. Man fikk 234 mg (62*) av (11.7) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 533 (M + H) +
Eksempel 12
( 2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[2-(4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (12.3)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
Utgangspunktet for syntesen av (12.3) er (11.2), som blir omsatt analogt med fremstillingen av (11.3) med 3,4-diamino-pyrldln til (12.1). Senere blir det så analogt med fremstillingen av (11.4) og (11.5) cyklisert med kvikksølvoksld og omsatt med konsentrert HC1 til (12.2). (12.2) blir omsatt med (1.6) som beskrevet ved fremstillingen av (11.6), og det således dannede koplingsprodukt overført til (12.3) under spalting av tert-butylesteren, som beskrevet for syntesen av '(11.7) fra (11.6).
ES(+)-MS: 553 (M + H) +
Eksempel 13
( 2S)-( adamantan-l-yl-metoksykarbonylamino )-3-[( (4S)-(3-(benz-imidazolyl-2-amino)-propyl)-5-okso-2-tiokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (13.7)
'syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
13a) 5 - benzy1oksykarbonyl-amino-(2S)-metoksykarbonyImetyl-aminotio-karbonylamino-5-pentansyre-metylester (13.1)
'Til en oppløsning av 6,32 g (20 mmol) H-0rn(Z)-0Me x HC1 (Bachem) 1 40 ml DMF ved 0°C tilsatte man 2,62 g (20 mmol) isotiocyanato-eddiksyremetylester og 2,3 g (20 mmol) N-etylmorfolin (NEM). Etter 20 timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum, resten tatt opp i diklormetan og diklormetanoppløsningen ekstrahert to ganger med vann. Etter tørking av den organiske fase over natriumsulfat, filtrering og fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum, fikk man (13.1) som ble direkte benyttet for syntesen av (13.2).
13b) [ (( 4S ) - ( 3-amino-propyl)) -5-okso-2-tiokso-imidazolidin-l-yl] -eddiksyre-hydroklorid (13.2)
En suspensjon av (13.1) i 150 ml 6N HC1 ble omrørt 1 fem timer ved 50°C. Oppløsningen ble inndampet, resten omrørt to ganger med dietyleter og deretter ble resten tørket under høyvakuum og deretter over KOH. Man fikk (13.2) som ble benyttet direkte for syntese av (13.3).
13c) 2-[(4S)-(3-(3-(2-nitrofenyl)-tiourlnstoff)-propyl)-5-okso-2-tiokso-imldazolidin-l-yl]-eddiksyre (13.3)
Til en oppløsning av (13.2) og 3,6 (20 mmol) 2-nitrofenylisotiocyanat i 50 ml DMF under isavkjøling dryppet man til 2,77 ml (20 mmol) trietylamin. Man lot oppløsningen omrøre over natten ved romtemperatur, tilsatte 360 mg (2 mmol) 2-nitrofenyl-isotiocyanat og 0,8 ml trietylamin og omrørte videre i fem timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, resten oppløst i eddikester og eddikesterfasen vasket to ganger med en vandig KgSO^oppløsning og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble eddikesteren fjernet under vakuum og resten kromatografert med diklormetan/metanol/eddiksyre/vann = 9/1/0,1/0,1 over kiselgel. Etter inndamping av produktf raks j onene fikk man 4,06 g (49* med hensyn på (13.1)) av (13.3).
13d) 2-[(4S)-(3-(3-(2-aminofenyl)-tiourinstoff)-propyl)-5-okso- .
2-tiokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre (13.4)
611 mg (1,48 mmol) av (13.4) i 50 ml mettet etanolisk ammoniakkoppløsning, ble det hydrert over 600 mg 10* Pd/C i tre timer ved romtemperatur. Etter filtrering og inndamping av filtratet under vakuum, fikk man 488 mg (87*) av (13.4).
13e) [(4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amlno)-propyl)-5-okso-2-tiokso-imidazolidln-l-yl]-eddiksyre (13.5)
Til en oppløsning av 485 mg (1,27 mmol) av (13.4) i 50 ml etanol ble det tilsatt 550 mg (2,54 mmol) kvlkksølvklorid og 8,1 mg svovel og blandingen ble oppvarmet i tre timer ved til-bakeløpskjøling. Etter filtrering og fjerning av oppløsnings-midlet under vakuum ble resten tatt opp i 10*-Ig eddiksyre og frysetørket. Man fikk 307 g (79*) av (13.5) som fargeløst faststoff.
13f) (2S)-(adamantan-l-yl-metoksykarbonylamino)-3-[((4S)-(3-(benzlmldazolyl-2-amino)-propyl)-5-okso-2-tIokso-imidazolidln-l-yl )-acetylamino] -propionsyre-tert-butyl-eater (13.6)
Til en oppløsning av 290 mg (0,834 mmol) av (13.5) og 297 mg (0,834 mmol) av (13.11) (syntese se 13h-k) i absolutt DMF ble det tilsatt 273 mg (0,834 mmol) TOTU og 0,28 ml diisopropyl-etylamin (DIPEA) og blandingen ble omrørt i 2,5 timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, resten tatt opp i eddikester og eddikesterfasen vasket to ganger med mettet natriumhydrogenkarbonatoppløsning og vann. Etter tørking over natriumsulfat ble eddikesteren fjernet under vakuum og resten kromatografert med diklormetan/metanol-/eddiksyre/vann = 9,5/0,5/0,05/0,05 over kiselgel. Etter inndamping av produktf r aksjonene fikk man 46,3 mg (8*) av (13.6).
13g) (2S)-(adamantan-1-yl-metoksykarbonylamino)-3-[( (4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amino )-propyl )-5-okso-2-tiokso-Imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (13.7)
38,1 mg (0,056 mmol) av (13.6) ble oppløst i 2 ml 95*-ig trifluoreddlksyre. Etter ti minutter ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet inndampet under vakuum og resten ble renset over preparativ HPLC (RP 18). Etter frysetørking av produkt-fraks j onene fikk man 11 mg (32*) av (13.7).
FAB-MS: 626 (M + H)<+>
Syntese av 3-amino-(2S)-(adamantan-l-yl-metoksykarbonylamino)-propionsyre-tert-butylester (13.11)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
13h) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-tert-butoksykarbonylamino-propionsyre-tert-butylester (13.8)
TH en oppløsning av 10 g (34 mmol) av (1.6) 1 600 ml tetrahydrofuran/vann = 2/1 ved 0'C tilsatte man 8,9 g (40,8)di-tert-butyl-dikarbonat og deretter porsjonsvis IN NaOH, slik at pH i oppløsningen lå mellom 9 og 10 (forbruk av IN NaOH: 32 ml). Etter tre timers omrøring ved romtemperatur tilsatte man 1 1 vann og ekstraherte tre ganger med dietyleter. Etter tørking over natriumsulfat, filtrering og fjerning av oppløs-ningsmidlet under vakuum ble resten kromatografert med diklormetan/metanol = 20/1 over kiselgel. Man fikk 13,19 g (98*) av (13.8).
131) ( 2S )-amino-3-tert-butoksykarbonylamino-propionsyre-tert-butylester-hydroklorid (13.9)
13,1 g (33,2 mmol) av (13.8) ble hydrert i metanol/HCl over 10* Pd/C. Etter 1,5 timer ble det filtrert, filtratet inndampet under vakuum og man fikk 9,77 g (99*) av (13.9) som fargeløst faststoff.
13 j ) (2S)-(adamantan-1-y1-metoksykarbony1 amino )-3-tert-butoksykarbonylamino-propionsyre-tert-butylester (13.10)
En oppløsning av 10,9 g (65,4 mmol) (1-hydroksymetyl)-adamantan og 10,6 g (65,4 mmol) karbonyldiimidazol i 60 ml THF ble omrørt i 1,5 timer ved 50°C. Man tilsatte 9,7 g (32,7 mmol) av (13.9) i 25 ml THF og 5,6 ml (32,7 mmol) diisopropyl-etylamin (DIPEA), omrørte fire timer ved 60<*>C og lot det stå over natten ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med heptan/eddikester = 7/3 over kiselgel. Man fikk 8,7 g (59*) av (13.10) som fargeløs olje.
13k) (2S)-(adamantan-l-yl-metoksykarbonylamino)-3-amino-proplonsyre-tert-butylester (13.11)
En oppløsning av 8,7 g (19,22 mmol) av (13.10) i 180 trifluoreddiksyre/diklormetan = 1/1 ble etter ett minutt hatt i 1,5 ml iskald NaHC03-oppløsning. Oppløsningen ble tre ganger ekstrahert med diklormetan og diklormetanfasen deretter tørket over natriumsulfat. Etter filtrering og fjerning av oppløs-ningsmidlet under vakuum fikk man 6,35 g (94*) av (13.11) som fargeløst faststoff.
Eksempel 14
3 - [2-( ( 4R , S )-( 3-( lH-benz imi dazol-2-y lamino )-propyl)-4 -me tyl - 2,5-diokso-Imidazolidin-l-yl)-acetylamIno]-(2S )-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (14.8)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
14a) 2-(4-okso-pentyl)-isoindol-l,3-dlon (14.1)
i
Til en oppløsning av 14,3 ral (124,4 mmol) 5-klor-2-pentanon i 100 ml DMF ble 24,59 g (132,8 mmol) kalium-ftalamld tilsatt, blandingen omrørt i tre timer ved romtemperatur og 30 timer ved 60<*>C. Etter filtrering ble filtratet skilt mellom vann og diklormetan. Fasene ble skilt og den organiske fase etter hverandre vasket med vann, to ganger med 0,2 N NaOH-oppløsnlng og vann og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløs-ningsmidlet fjernet under vakuum og resten kromatografert med heptan/eddikester - 6/4 over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene fikk man 9,8 g (34*) av (14.1).
14b) 5-amino-2-okso-pentan-hydroklorid (14.2)
13 g (56,2 mmol) av (14.1) ble oppløst 1 335 ml 20*-ig saltsyre og oppvarmet 1 seks timer med tilbakeløpskjøling. Etter henstand over natten ble blandingen filtrert ved romtemperatur og filtratet inndampet under vakuum. Man fikk en blekgul olje av rått (14.2) som ble direkte benyttet for syntesen av (14.3).
14c) 5-tert-butoksykarbonyl-amino-2-okso-pentan (14.3)
i
(14.2) (fra 14b) ble oppløst i 110 ml dioksan og 55 ml vann og oppløsningen innstilt til pH 8,5 ved tilsetning av 65 ml IN NaOH. Ved 0"C ble 13,5 g (60,8 mmol) tilsatt, og pH-verdien i oppløsningen ble innstilt til 8,5 ved gjentatte tilsetninger av IN NaOH. Etter 4,5 timers omrøring ved romtemperatur ble dioksan fjernet under vakuum, den gjenværende oppløsning innstilt pH 2-3 ved tilsetning av KHSO^oppløsning og ekstrahert tre ganger med eddikester. De sammenslåtte organiske faser ble vasket med mettet natrlumhydrogenkarbonatoppløsning og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering og fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum fikk man 11,1 g (99* med utgangspunkt i (14.1) av (14.3).
14d) (4R , S) - (3-tert-butoksykarbonyl-amino)-propyl-4-metyl-2,5-dlokso-imidazolidin (14.4)
Man tilsatte til en oppløsning av 10,06 g (50 mmol) av (14.3) i 130 ml etanol/vann = 1/1 41,96 g (439,2 mmol) ammoniumkarbonat og 4,2 g (65,1 mmol) kaliumcyanid og oppvarmet blandingen til 55-65°C. Etter 5,5 timer ved denne temperatur ble reaksjonsblandingen innstilt til pH 6,3 med 100 ml 6N HC1 og omrørt i to timer. Blandingen ble satt ved romtemperatur over natten, oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble skilt mellom vann og eddikester. Fasene ble skilt og vannfasen ble to ganger ekstrahert med eddikester. De sammenslåtte organiske faser ble tørket over natriumsulfat, tørkemidlet filtrert fra og oppløsningsmidlet fjernet under vakuum. Man fikk 12,42 g (92*) av (14.1) som fargeløse krystaller.
14e) [(4R , S ) - (3-tert-butoksykarbonylamino-propyl)-4-metyl-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre-etylester (14.5)
Under argonatmosfære tilsatte man til en blanding av 4 g (14,7 mmol) av (14.3) i 100 ml DMF under Isavkjøling, 388 mg (16,1 mmol) natriumhydrid og omrørte i 45 minutter ved romtemperatur. Man tilsatte 1,63 ml (14,7 mmol) bromeddlksyre-etylester, omrørte 1 tre timer ved romtemperatur og fjernet oppløsnings-midlet under vakuum. Reiten ble oppløst i eddikester og eddikesterfasen ble to ganger vasket med vann. Etter tørking over natriumsulfat og fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum fikk man 4,98 g (95*) av (14.5) som blekgul olje.
i
14f) [(4R , S )- ( 3-amino-propyl)-4-metyl-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl] -eddiksyre-hydroklorid (14.6)
4,98 g (13,9 mmol) av (14.5) ble suspendert i 50 ml 6N HC1 og oppvarmet med tilbakeløpskjøling i én time. Reaksjonsblandingen ble inndampet under vakuum, resten oppløst i vann og fryse-tørket. Man fikk (14.6) som råprodukt som ble direkte benyttet i syntesen av (14.7).
Syntesen av (14.7) med utgangspunkt i (14.6) og (14.8) med utgangspunkt i (14.7) skjedde analogt med syntesen av (5.5) med utgangspunkt i (1.4) (se eksempel 5).
(14.8): ES(+)-MS: 566 (M + H)<+>
i
Eksempel 15
(2S )-benzyloksykarbonylamino-3 - [ (( 4S )-(3-(6-metoksy-lH-benz-imldazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (15.3)
i
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
Utgangspunktet for syntesen av (15.3) er (11.2), som ble omsatt analogt med fremstillingen av (11.3) med 4-metoksy-orto-fenylendiamin ved romtemperatur til (15.1). Senere ble så analogt med fremstillingen av (11.4) og (11.5) cyklisert med kvikksølvoksid og omsatt med konsentrert HC1 til (15.2). (15.2) ble så omsatt med (1.6) som beskrevet ved fremstillingen av (11.6), og det således dannede koplingsprodukt overført til (15.3) under spalting av tert-butylesteren, som beskrevet ved syntesen av (11.7) fra (11.6).
ES(+)-MS: 582 (M + H)<+>
Eksempel 16
(2S)-benzyloksykarbonylamlno-3-[((4S)-(3-(5,6-dimetoksy-lH-benzlmidazol-2-ylamino )-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (16.1)
Syntesen av (16.1) skjedde som beskrevet ved fremstillingen av (15.3), ved at man istedenfor l-metoksy-3,4-diaminobenzen benyttet 1,2-dimetoksy-4,5-diaminobenzen som var blitt fremstilt fra 1,2-dimetoksy-4,5-dlnitrobenzen ved hydrering over 105É Pd/C i metanol.
ES(+)-MS: 612 (M+H)<+>
Eksempel 17
(2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(5,6-metylendioksy-2-y lami no) -propy 1) - 2 , 5 - di okso-imidazol Idin-l-yl)-acetylamino] - propionsyre (17.1)
Syntesen av (17.1) skjedde som beskrevet for fremstillingen av (15.3), ved at man i stedet for l-metoksy-3,4-dlaminobenzen benyttet 1,2-metylendioksy-4,5-diaminobenzen, som var blitt fremstilt fra 1,2-metylendioksy-4,5-dinitrobenzen ved hydrering aver 10* Pd/C i metanol. Den siste ble fremstilt fra 1,2-metylendioksy-4-nitrobenzen ved nitrering som beskrevet I D.S. Wulfman et al., Synthesis 1978, 924.
ES(+)-MS: 624 (M+H)<+>
Eksempel 18
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
18a) (2S)-aralno-4-( 2-benz imldazolyl )-butansyre-metylester
(18.1)
(18.1) ble fremstilt som beskrevet av Hans Lettre et al., Berichte 1951, 84, 719.
18b) ( 2S) -etyloksykarbonylmetyl -aminokarbonylamino-4-{ 2-( 1H-benzlmldazolyl)-butansyre-metylester (18.2 )
TH en oppløsning av 4,6 g (20 mmol) av (18.1) 1 absolutt DMF ved 0<e>C tilsatte man 3,4 ml (20 mmol) diisopropyl-etylamln (DIPEA) og 2,58 g (20 mmol) Isocyanatoeddlksyreetylester. Etter 16 timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum, resten tatt opp i eddikester og eddikesterfasen to ganger vasket med 10* sltronsyreoppløsnlng. Den vandige fase ble innstilt til pH 10 med 2N K0H og flere ganger ekstrahert med eddikester. De sammenslåtte organiske faser ble tørket over natriumsulfat, tørkemidlet ble filtrert fra og filtratet inndampet under vakuum. Man fikk 4,4 g (61*) av (18.2) .
18c) [ ( 4S )- ( 2-(lH-benzimidazol-2-yl)-etyl)-2,5-diokso-imldazolidin-l-yl]-eddiksyre (18.3)
En oppløsning av 200 mg (0,55 mmol) av (18.2) I 4 ml 4N HC1 ble omrørt i 16 timer ved romtemperatur. Etter inndamping av opp-løsningsmidlet under vakuum, ble resten tatt opp i vann og frysetørket. Man fikk 160 mg (53*) av (18.3) som fargeløst faststoff.
18d) 3-[2-((4S)-(2-(lH-benzimidazol-2-yl)-etyl)-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl)- acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbony1-amino-propionsyre-tert-butylester (18.4)
Til en oppløsning av 160 mg (0,53 mmol) av (18.3), 72 mg (0,53 mmol) HOBt og 156 mg (0,53 mmol) av (1.6) i 5 ml DMF ved 0°C ble tilsatt 0,09 ml (0,53 mmol) diisopropyl-etylamin (DIPEA) og 120 mg (0,58 mmol) DCC1. Det ble omrørt i 20 minutter ved CC og 16 timer ved romtemperatur. Bunnfallet ble filtrert av, i
filtratet inndampet, resten tatt opp i eddikester og eddikesterfasen vasket med 10* KHCC^-oppløsning og mettet NaCl-oppløsning og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten (18.4, råprodukt) direkte omsatt til (18.5).
18e) 3-[2-((4S)-(2-(lH-benzimidazol-2-yl)-etyl)-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl)- acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (18.5)
En oppløsning av ((18.4), råprodukt) i 5 ml 95*-ig trifluoreddiksyre ble omrørt i 20 minutter ved romtemperatur. Oppløs-ningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble oppløst i tert-butanol/vann - 1/1 og frysetørket. Man fikk 120 mg (44*, med utgangspunkt i (18.3)) av (18.5) som blekgult faststoff.
ES(+)-MS: 492 (M + H)<+>
Eksempel 19
( 2S )-benzyloksykarbonylamino-3- [2 - (( 4S)-(3-guanidino-3-okso-propyl )-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre
(19.3)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
19a) (2S)-benzyloksykarbonyl-amino-3-[({4S)-(2-(karboksy-etyl)-2 , 5-diokso-imidazolidln-l-yl )-acetylamino] -propionsyre-tert-butylester (19.1)
Syntesen av (19.1) skjedde med utgangspunkt 1 L-glutaminsyre analogt med syntesen av (7.6) med utgangspunkt fra L-asparglnsyre (se eksempel 7).
19b) (2S )-benzy loksykarbony lamino-3- [2-( (4S )-(3-guanidino-3-okso-propyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester (19.2)
Til en oppløsning av 170 mg (2,88 mmol) guanidin og 6,5 mg (0,09 mmol) imidazol i 2 ml DMF tilsatte man 12,8 mg (0,09 mmol) litiumjodid og en oppløsning av 500 mg (0,96 mmol) av (19.1) i 5 ml DMF og omrørte blandingen over natten ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, resten behandlet med eddikester, eddlkesterfasen vasket med KHCO3-oppløsning og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og man fikk 30 mg av (19.2, råprodukt), som direkte ble tilsatt for syntesen av (19.3).
19c) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[2-( (4S)-(3-guanidino-3-okso-propyl )-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-propionsyre (19.3)
En oppløsning av 30 mg av (19.2, råprodukt), i 1 ml 95*-ig trifluoreddiksyre ble omrørt i ti minutter ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble renset ved preparativ HPLC over RP 18. Etter inndamping av produktf raks j onene og frysetørking fikk man 9,5 mg (2*, med utgangspunkt i (19.1)) av (19.3) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 492 (M + H)<+>
Eksempel 20
(2S)-benzyloksykarbonylamlno-3-[2-(2,5-diokso-(4S)-(2-(l,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-ylkarbamoyl )-etyl)-lmidazolin-1-yl )-acetylamino]-propionsyre (20.2)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
20a) (2S)-benzyloksykarbonylamino-3-[2-(2,5-diokso-(4S)-(2-(1,4,5, 6-tetrahydro-pyrimidin-2-ylkarbamoyl )-etyl )-Imidazol in-l-yl)-acetylamino]-propionsyre-tert-butylester
(20.1)
Til en oppløsning av 506 mg (1 mmol) av (19.1) i 4 ml absolutt tetrahydrofuran under isavkjøling, tilsatte man 135 mg (1 mmol) HOBt, 206 mg (1,1 mmol) DCC1, og lot blandingen omrøre i 30 minutter. Denne oppløsning tilsatte man deretter til en oppløs-ning av 136 mg (1 mmol) 1,4,5 ,6-tetrahydro-pyrimidin-2-ylamin-hydroklorid og 112 mg kalium-tert-butylat, i DMF og lot blandingen omrøre ved romtemperatur i én time. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten finfordelt med dietyleter. Man fikk etter kromatografi over kiselgel med diklormetan/- metanol/eddiksyre/vann = 9/1/0,1/0,1, inndamping av produktfraksjonene og frysetørking, 90 mg (1556) av (20.1).
20b) (2S )-benzyloksykarbonylamino-3-[2-(2,5-diokso-4-(l,4,5,6-tetrahydro-pyrimidin-2-ylkarbamoyl )-etyl )-imidazolin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (20.2)
En oppløsning av 80 mg (0,136 mmol) av (20.1) i 10 ml 95*-ig trifluoreddiksyre, ble omrørt i 20 minutter ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, resten oppløst i vann og frysetørket. Man fikk 70 mg (97*) av (20.2) som farge-løst faststoff.
°ES( + )-MS: 532 (M + H)<+>
Eksempel 21: 4-[(4R,S)-(4-((lH-benzimidazol-2-ylamino)-metyl )-fenyl )-4-metyl-2 ,5-dlokso-imidazolidin-l-yl]-2-benzyloksykarbonylamlno-<5>butansyre (21.7)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
21a) 2-benzyloksykarbonylamino-4-[(4R,S)-(4-cyano-fenyl)-4-metyl-2,5-diokso-imidazolidln-l-yl]-butansyre (21.2 )
<5>T11 en oppløsning av 1,07 g (5 mmol) av (21.1) (syntese se WO 95/14008), 1,3 g (5 mmol) trifenylfosfin og 1,7 g (5 mmol) av (21.10) i absolutt tetrahydrofuran tilsatte man en oppløsning
av 870 mg (0,5 mmol) dietyl-azo-dikarboksylat (DEAD) 1 absolutt tetrahydrofuran. Etter 16 timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum, resten ble tatt opp i eddikester, eddikesterfasen vasket med 10* sitronsyreoppløsning og mettet NaHCC^-oppløsning og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med diklormetan/tert-butyl-metyleter - 1/1 over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene fikk man 1,2 g (44*) av (21.2).
21b) 4-[(R,S)-(4-aminometyl-fenyl)-4-metyl-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl] -2-benzyloksykarbonylamino-butansyre-benzylester-eddiksyresalt (21.3)
En oppløsning av 1,2 g (2,22 mmol) av (21.2) i eddiksyre, ble hydrert over 150 mg platinaoksld. Så snart hydrogenutskillingen var sluttet (etter ca. tre timer), ble katalysatoren filtrert fra, filtratet inndampet og resten renset med diklormetan/- metanol/eddikester/vann = 6/1/0,1/0,1 over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene fikk man 450 mg (34*) av (21.3).
21c) 2-benzyloksykarbonylamino-4-[(4R,S)-metyl-4-(4-(3-(2-ni tro-f enyl )-tiourinstoff-metyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl] -butansyre-benzylester (21.4)
Til en oppløsning av 410 mg (0,75 mmol) av (21.3) 1 5 ml DMF ble det tilsatt 135 mg (0,75 mmol) 2-nitrofenylisotiocyanat og 0,13 ml diisopropyl-etylamin (DIPEA). Etter 16 timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og i
resten ble kromatografert med tert-butylmetyleter over kiselgel. Man fikk 380 mg (70*) av (21.4).
21d) 4-[ (R ,S)-( 4-( 3-( 2-aminometyl-fenyl )-tiour instoff-metyl )-
f enyl )-4-metyl-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl] -2-benzyloksykarbonylamino-butansyre-benzylester (21.5)
Til en oppløsning av 360 mg (0,49 mmol) av (21.4) i 5 ml metanol tilsatte man 650 mg SnClg x 2 HgO (2,9 mmol) og 3 dråper eddiksyre og lot blandingen omrøre i 16 timer ved romtemperatur. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum, ble resten kromatografert over diklormetan/metanol = 20/1. Man fikk 280 mg (82*) av (21.5).
21e) 4-[(R,S)-(4-((lH-benzimidazol-2-ylamino)-metyl)-fenyl)-4-metyl-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl]-2-benzyloksykarbonylamino-butansyre-benzylester (21.6)
i
Man oppvarmet en blanding av 270 mg (0,38 mmol) av (21.5) kvikksølvoksld og 3 mg svovel 1 10 ml etanol i 12 timer med tilbakeløpskjøling. Etter filtrering og fjerning av oppløs-ningsmidlet under vakuum fikk man 180 mg av (21.6 råprodukt), som rødbrun sirup, som direkte ble omsatt til (21.7).
21f) 4-[(R,S)-(4-((lH-benzimidazol-2-ylamino)-metyl)-fenyl)-4-metyl-2 , 5-diokso-imidazolidin-l-yl]-2-benzyloksykarbonylamino-butansyre (21.7)
Til en oppløsning av 180 mg (ca. 0,27 mmol) av (21,6, råprodukt) i 4 ml dioksan, tilsatte man 0,27 ml av en IM LiOH-oppløsning og lot blandingen omrøre over natten ved romtemperatur. Det meste av dioksanet ble fjernet under vakuum, den vandige rest innstilt til pH 5 med sitronsyre og vannfasen ekstrahert med eddikester. Etter tørking over natriumsulfat, filtrering og inndamping av filtratet under vakuum ble resten kromatografert over dlklormetan/metanol/eddiksyre/vann 6/1/0,1/0,1 over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene og frysetørking fikk man 107 mg (49*, med utgangspunkt i (21.5) av (21.7) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 571 (M + H)<+>
21g) Syntese av 2-benzyloksykarbonylamino-4-hydroksy-butansyre-benzylester (21.10)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
Man omrørte en suspensjon av 10 g (42 mmol) av (21.8) i 420 ml 0,1 M NaOH i etanol i 16 timer ved romtemperatur. Reaksjons-oppløsningen ble inndampet, resten tilsatt toluen og oppløs-ningsmidlet fjernet under vakuum. Det ble tilsatt 130 ml DMF og 9,34 g (54,6 mmol) benzylbromid og blandingen ble omrørt i fire dager ved romtemperatur. Det ble tilsatt 2,1 1 IM NaHC03~ oppløsning og dette ekstrahert tre ganger med eddikester. De sammenslåtte eddikesterfaser ble vasket med IM NaHC03~oppløs-ning og mettet NaCl-oppløsning og tørket over magnesiumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten kromatografert med diklormetan/acetonltril i 20/1 til 20/6 over kiselgel. Produktfraksjonene ble inndampet og resten krystallisert med dietyleter/heksan. Man fikk 5,4 g (38*) av (21.10) som fargeløse krystaller.
Eksempel 22
3-[2-( ( 4S)-(3-(lH-benz Imidazol-2-y lamino )-propyl )-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino)-(2S)-(2-klor-benzyloksykarbonylamino]-propionsyre (22.4)
Syntesen skjedde analogt med den følgende reaksjonssekvens:
22a) 3 - [2-((4S )-(3-(1-tert-butoksykarbonyl-benzimidazol-2-ylamino)-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino]-{2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (22.1)
Til en oppløsning av 551 mg (1 mmol) av (5.5) i 4 ml dioksan/- vann - 1/1 tilsatte man 168 mg (2 mmol) NaHC03 og 437 mg (2 mmol) di-tert-butyldikarbonat og lot blandingen omrøre i 16 timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, resten tatt opp i eddikester, eddikesterfasen vasket med 2*-ig sitronsyreoppløsning og mettet NaCl-oppløsning og tørket over magnesiumsulfat. Etter filtrering ble oppløsnings-midlet fjernet under vakuum og man fikk 614 mg (94*) av (22.1) som fargeløse krystaller.
22b) (2S)-amino-3-[2-((4S)-(3-(1-tert-butoksykarbonyl-benz-imidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-(2S)-propionsyre (22.2)
En oppløsning av 600 (0,92 mmol) av (22.1) i metanol ble hydrert over palladiumhydroksid. Katalysatoren ble filtrert fra, filtratet inndampet og resten inndampet to ganger med toluen og deretter tørket under høyvakuum. Man fikk 385 mg (81*) av (22.2).
22c) 3-[2-((4S )-(3-(l-tert-butoksykarbonyl-benzimidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino-(2S)-( 2-kl or-benzyl oksykarbony lamino] -propionsyre
(22.3)
Til en oppløsning av 61,7 mg (0,12 mmol) av (22.2) i 2,5 DMF ved 0<*>C tilsatte man 0,017 ml diisopropyl-etylamin og deretter en oppløsning av 28,4 mg (0,1 mmol) N-(2-klorbenzyloksykarbon-yloksy)-suksinimid og lot reaksjonsblåndingen omrøre i 16 timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble skilt mellom eddikester og 2*-ig sitronsyre. Fasene ble skilt og den organiske fase tørket over natriumsulfat. Etter filtrering, inndamping av filtratet under vakuum og krystallisering av resten med dietyleter, fikk man 36,5 mg (45*) av (22.3) som fargeløse krystaller.
i
22d) 3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino )-propyl )-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino)-(2S)-(2-klor-benzyloksykarbonylamino]-propionsyre (22.4)
En oppløsning av 36,5 mg av (22.3) i 3 ml 95*-ig trifluoreddiksyre ble omrørt i én time ved romtemperatur. Trifluoreddiksyren ble fjernet under vakuum og resten ble inndampet to ganger med toluen. Resten ble oppløst i metanol og (22.4) utfelt med dietyleter. Etter sentrifugering ble resten tatt opp i 'fortynnet eddiksyre og frysetørket. Man fikk 24 mg (77*) av (22.4) som fargeløst faststoff.
ES(+)-MS: 586 (M + H) +
Eksempler 23-33
Fremstillingen av forbindelsene (23) til (33) skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
Eksempel 23
3-[2-( ( 4S )-( 3-{ lH-benz imidazol-2-yl amino )-propyl)-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-acetylamino)-(2S)-(3,4-dlmetoksy-benzyloksykarbonylamino)-propionsyre (23)
ES(+)-MS: 612 (M + H)<+>
Eksempel 24
3-[2-( ( 4S )-( 3-( lE-benzimidazol-2-ylamino)-propyl )-2 ,5-diokso-imidazol idin-1-yl ) -acetylamino)-(2S)-(3,4-metylendioksy-benzyloksykarbonyl)-propionsyre (24)
ES(+)-MS: 624 (M + H)<+>
Eksempel 25
3-[2-( (4S)-(3-{ lH-benzimidazol-2-ylamino )-propyl)-2 ,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino)-(2S)-(4-klor-benzyloksykarbon-ylaraino]-propionsyre (25)
ES(+)-MS: 586 (M + H)<+>
Eksempel 26
3-[2-( (4S )-(3-( lH-benz imidazol-2-y lamino )-propyl )-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino)-(2S)-(4-tert-butyloksykarbon-ylamino]-propionsyre (26)
'eS( + )-MS: 608 (M + H) +
Eksempel 27
3-[2-((4S)-(3-( lH-benzimidazol-2-ylamino )-propyl )-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino)-(2S)-(3-klor-benzyloksykarbon-'ylamino]-propionsyre (27)
ES(+)-MS: 586 (M + H)<+>
Eksempel 29
3-[2-((4S)-(3-( lH-benziraidazol-2-ylamino )-propyl)-2 ,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino)-(2S)-(4-trifluormetyl-benzyl-'oksykarbony lamino]-propionsyre (29)
ES(+)-MS: 620 (M + H)<+>
Eksempel 30
3-[2-( (4S)-( 3-( lH-benzimidazol-2-ylamIno )-propyl)-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl )-acetylamino]-(2S)-(4-fenyl-benzyloksykarbonylamino)-propionsyre (30)
ES(+)-MS: 628 (M + H)<+>
Eksempel 31
3-[2-( (4S )-{ 3-( lH-benz imidazol-2-ylamino)-propyl )-2 ,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-(2S)-(naftalin-1-ylmetoksy-karbonylamlno)-propionsyre (31)
ES(+)-MS: 602 (M + H) +
Eksempel 32
3-[2-( 4S)-( 3-( lH-benz imi dazol-2-yl amino )-propyl )-2 ,5-diokso-imidazol idin-1 -yl)-acetylamino] - ( 2S )-(naftalin-2-yl-metoksykarbonylamino)-propionsyre (32)
ES(+)-MS: 602 (M + H)<+>
Eksempel 33
(2S )-(benzofuran-3-ylmetoksykarbonylamino)-3-[2-( (4S)-(3-(lH-benz imidazol-2-ylamino)-propyl)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-propionsyre (33)
ES(+)-MS: 592 (M + H) +
a) Fremstilling av klormaursyreesterne (23.2) - (33.2)
Syntesen skjedde ifølge den følgende generelle fremstillings-f remgangsmåte: Til en oppløsning av 2,2 ekvivalenter bis-triklormetylkarbonat i absolutt diklormetan dryppet man ved 0°C til en oppløsning av 6 ekvivalenter den tilsvarende alkohol (HO-R) og 6 ekvi-i
valenter pyrldin i absolutt diklormetan. Deretter lot man blandingen omrøre i to timer ved romtemperatur, fjernet oppløs-ningsmidlet under vakuum, tok resten opp i eddikester og eter, lot blandingen stå ved romtemperatur 30 minutter og filtrerte fra det dannede bunnfall. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum ble resten tørket under høyvakuum og tilsatt direkte for syntese av (23.1) til (33.1).
b) Fremstilling av forbindelsene (23.1) til (33.1)
i
Syntesen skjedde ifølge den følgende generelle fremstillings-f remgangsmåte: Til en oppløsning av 1 ekvivalent N-hydroksysuksinimid i THF ved 0"C tilsatte man 1 ekvivalent av den tilsvarende klormaur-syreester (23.2) - (33.2), og 1 ekvivalent diisopropyl-etylamin (DIPEA). Man lot blandingen omrøre i 30 minutter ved 0"C og 45 minutter ved romtemperatur og tilsatte denne oppløsning til en oppløsning av 1 ekvivalent (22.2) i DMF. Man lot blandingen omrøre ved romtemperatur inntil reaksjonen var avsluttet og fjernet oppløsningsmidlet under vakuum. Resten ble tatt opp i eddikester og eddikesterfasen vasket to ganger med en mettet sitronsyreoppløsning (pH 3) og mettet NaCl-oppløsning. Etter tørking over natriumsulfat, filtrering og fjerning av oppløs-ningsmidlet under vakuum, ble resten kromatografert over kiselgel. Etter inndamplng av produktfraksjonene fikk man forbindelsene (23.1 )-(33.1).
"c) Fremstilling av forbindelsene (23)-(33)
Fremstillingen skjedde fra (23.1 )-(33.1) ved avspalting av tert-butoksykarbonylgruppen med 9556-ig trif luoreddiksyre som beskrevet ved fremstillingen av (22.4) fra (22.3).
Eksempel 34
3-[8-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)-propionyl)-2,4-diokso-1,3,8-triaza-spiro[4.5]-dek-3-yl]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (34.12)
o
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
34a) 2 ,4-diokso-l, 3 ,8-triaza-spiro[4 . 5]dekan-8-karboksylsyre-tert-butylester (34.2)
i
Til en oppløsning av 5 g (25,1 mmol) N-tert-butoksykarbonyl-4-piperldon (34.1) og 24,01 g (250 mmol) ammoniumkarbonat i 80 ml
EtOH/vann = 1/1 tilsatte man 2,12 g (32,6 mmol) kaliumcyanid og lot blandingen omrøre 1 fem timer ved 60<*>C. pH ble Innstilt til 6,3 ved tilsetning av 6N EC1 og blandingen ble videre omrørt i 1,5 timer ved 60<*>C. Bunnfallet ble filtrert fra og tørket under høyvakuum. Man fikk 3,45 g av (34.2) som fargeløst faststoff. Ved ekstrahering av filtratet med diklormetan, tørking av den organiske fase over natriumsulfat, filtrering og fjerning av oppløsningsmidlet ved hjelp av vakuum, fikk man ytterligere 1,0 g av (34.2). Totalutbytte av (34.2): 4,43 g (66*), fargeløst faststoff.
34b) N-trityl-L-serin-metylester (34.3)
Til en oppløsning av 6 g (38,56 mmol) L-serin-metylester-hydroklorid og 7,8 g (77,12 mmol) trietylamin i absolutt THF ved 0°C ble det tilsatt en oppløsning av 10,75 g (38,56 mmol) tritylklorid og oppløsningen ble omrørt i fire timer ved 0<*>C og i to dager ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten skilt mellom diklormetan og 10*-ig vandig sitronsyreoppløsning. Fasene ble skilt, den organiske fase ble vasket med vann og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med heptan/eddikester = 6/4 over kiselgel. Etter inndamping av produktf raks J onene fikk man 8 g (58*) av (34 .3).
34c) 3-[2-metoksykarbonyl-(2S)-(trityl-amino)-etyl]-2,4-diokso-1,3,8-triaza-spiro[4.5]dekan-8-karboksylsyre-tert-butylester (34.4)
Til en oppløsning av 3,72 g (10,3 mmol) av (34.3) og 3,5 g (13,34 mmol) trifenylfosfin i 20 ml absolutt THF, tilsatte man en oppløsning av 3,6 g (13,37 mmol) av (34.2) i 15 ml absolutt THF. Til denne oppløsning tilsatte man 2,11 ml (13,37 mmol) dietyl-azo-dikarboksylat (DEAD) og omrørte reaksjonsblandingen ved romtemperatur inntil reaksjonen var avsluttet. Opp-løsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten kromatografert med heptan/eddikester over kiselgel. Etter Inndamping av produktfraksjonene fikk man 6 g (95*) av (34.4).
34d) 3-( ( 2S )-amino-2-metoksykarbonyl-etyl )-2 ,4-diokso-l ,3,8-triaza-spiro[4.5]dekan-8-karboksylsyre-tert-butylester
(34.5)
En oppløsning av 4,6 g (7,5 mmol) av (34.4) i 180 ml diklormetan/metanol/trifluoreddiksyre - 95,5/3/1,5 ble omrørt i ti minutter ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble inndampet og resten ble kromatografert over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene fikk man 3,14 g (87*) av (34.5).
34e ) 3-{ ( 2S )-benzyloksykarbonylamino-2-metoksykarbonyl-etyl )-2 ,4-diokso-l ,3 ,8-triaza-spiro[4.5]dekan-8-karboksylsyre-tert-butylester (34.6)
Til en oppløsning av 3,14 g (8,48 mmol) av (34.5) og 2,11 g (8,48 mmol) N-benzyloksykarbonyloksy-suksinimid i 80 ml absolutt DMF, tilsatte man 2,08 g (16,1 mmol) diisopropyl-etylamin i 25 ml absolutt DMF og lot blandingen omrøre i tre timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med heptan/eddikester = 6/4 over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene fikk man (34.6).
34f) ( 2S)-benzyloksykarbonylamino-3-(2,4-diokso-l ,3,8-triaza-spiro[4.5]dec-3-yl)-propionsyre-metylester-hydroklorid
(34.7)
En oppløsning av 4,7 (9,3 mmol) av (34.6) i 100 ml 90*-ig trifluoreddiksyre, lot man omrøre i 45 minutter ved romtemperatur. Trifluoreddiksyren ble fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LH 20. Produktfraksjonene ble inndampet og fryse-tørket. Etter tilsetning av IN HC1 og fornyet frysetørking fikk man 1,99 g (53* med utgangspunkt i (34.5) av (34.7) som farge-løst faststoff.
34g) 3-[8-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)-propionyl)-2,4-diokso-1,3 ,8-triaza-spiro[4.5]dec-3-yl]-(2S)-benzyloksykarbony1-amino-propionsyre-metylester (34.11}
Syntesen av (34.11) skjedde ved kopling av (34.7) med (34.10) som beskrevet i eksempel 15 ved syntesen av (15.3) fra (15.2).
34h) 3-[8-(3-(lH-benzlmldazol-2-ylamlno)-proplonyl)-2,4-diokso-1,3 ,8-tr laza-spiro[4.5]dec-3-yl]-(2S)-benzyloksykarbonylamlno-propionsyre (34.12)
Syntesen av (34.12) skjedde ved esterspaltlng av (34.11) som beskrevet 1 eksempel 3 ved syntesen av (3.11) fra (3.10).
ES(+)-MS: 578 (M + H)<+>
341) Syntese av (34.10)
3-(lH-benzoImIdazol-2-ylamino)-proplonsyre (34.10 )
(34.10) ble fremstilt ifølge det følgende reaksjonsskjema:
a) 3-[3-(2-nitro-fenyl)-tiourinstoff]-propionsyre (34.8)
Til en oppløsning av 5 g (27,75 mmol) 2-nitrofenyl-Isotiocyanat
og 2,5 g (27,75 mmol) b-alanln I 80 ml DMF ble det tilsatt 3,8 ml (27,75 mmol) trietylamin og blandingen ble omrørt inntil reaksjonen var avsluttet. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble skilt mellom eddikester og KHSO4/K2SO4-oppløsning. Fasene ble skilt og den organiske fase ble tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert over kiselgel. Etter inndamping av produktfraksjonene fikk man 5,3 g (71*) av (34.8).
b) 3-[3-(2-amino-fenyl)-tiourinstoff]-propionsyre (34.9)
5,3 g (19,7 mmol) av (34.8) i 410 ml ammoniakkmettet EtOH, ble
hydrert over 6,44 g 10* Pd/C i tre timer ved romtemperatur. Katalysatoren ble filtrert fra, filtratet inndampet under vakuum og resten (1,9 g av (34.9, råprodukt) direkte tilsatt for syntese av (34.10).
c) 3-(lH-benzoimidazol-2-ylamlno)-propionsyre (34.10)
En blanding av (34.9), 3,44 g (14,79 mmol) kvlkksølvoksid og 50
mg svovel i 40 ml etanol ble oppvarmet i fem timer med tilbake-løpskjøllng. Etter filtrering ble filtratet inndampet og resten oppvarmet med tilbakeløpskjøllng med 6N HC1 i én time og deretter frysetørket. Man fikk fraksjonen 1 av (34.9). Filterresten ble flere ganger kokt ut med vann og de sammenslåtte vannfaser ble frysetørket. Man fikk fraksjon 2 av (34.9). Fraksjon 1 og 2 ble slått sammen og kromatografert med vann/butanol/eddiksyre = 43/4,3/3,5 over Sephadex<*> LE 20. Produktfraksjonene ble inndampet og frysetørket. Man fikk 340
mg (8*. med utgangspunkt i (34.8) av (34.10) som fargeløst faststoff.
Eksempel 35
3-[2-(4(E hhv. Z)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)-propyliden)-<5>2,5-diokso-lmidazolidin-l-yl)-acetylamlno]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (E-35.8) hhv. (Z-35.8)
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
35a) 3-amino-3-(dimetoksy-fosforyl)-propionsyre-metylester
(35.2)
10 g (30,19 mmol) Z-fosfonoglycln-trlmetylester (35.1) 1 300 ml metanol ble hydrert over 10* Pd/C. Etter én time ble katalysatoren filtrert fra og filtratet inndampet under vakuum. Man fikk 4,6 g av (35.2) som råprodukt, som ble direkte tilsatt for syntese av (35.3).
35b ) 3 - ( dimetoksy-fosforyl)-3-(3-etoksykarbonylmetyl-urinstoff )-propionsyre-metylester (35.3)
Til en oppløsning av (35.2) i 20 ml DMF tilsatte man 2,62 ml (23,4 mmol) isocyanato-eddiksyreetylester. Etter 16 timer ved romtemperatur ble det ytterligere tilsatt 0,262 ml (2,34 mmol) isocyanato-eddiksyreetylester og reaksjonsblandingen ble videre omrørt i to timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum og resten ble skilt mellom diklormetan og KHSO^Kg/SO^j-oppløsning. Fasene ble skilt og den organiske fase vasket med vann. Etter tørking av den organiske fase over natriumsulfat, filtrering og inndamping av filtratet under vakuum, fikk man 6,2 g [63* med utgangspunkt i (35.1)] av (35.3). )
35c) [4(E hhv. Z)-(3-tert-butoksykarbonylamlno-propyliden)-2,5-diokso-imldazolidin-l-yl]-eddiksyre-etylester (E-35.4 ) hhv. (Z-35.4)
Til en oppløsning av 451 mg (18,8 mmol) natrium i absolutt EtOH, ble det tilsatt en oppløsning av 5,8 g (17,84 mmol) av (35.3) i 30 ml absolutt EtOH. Til denne oppløsning tilsatte man en oppløsning av (35.9) fremstilt fra b-alanin analogt med O.P. Goel et al., Org. Synth. 1988, 67, 69. Etter tre timers omrøring ved romtemperatur ble oppløsningsmidlet fjernet under i
vakuum og resten ble skilt mellom vann og dietyleter. Fasene ble skilt og den organiske fase tørket over natriumsulfat. Etter filtrering ble resten kromatografert med diklormetan/- metanol = 99/1 over kiselgel. Man fikk 2,25 g av (E- eller Z-35.4) og 1,95 g av (Z- eller E-35.4). Totalutbytte: 4,2 g '(69*) av (35.4).
35d) [4(E hhv. Z)-(3-amino-propyliden)-2,5-diokso-Imidazolidin-1-yl]-eddiksyre-etylester-trifluoreddiksyresalt (E-35.5) hhv. (Z-35.5)
En oppløsning av 2,25 g (6,6 mmol) av (Z- eller E-35.4) i 25 ml 90*-ig trifluoreddiksyre ble omrørt i én time ved romtemperatur. Trifluoreddiksyren ble fjernet under vakuum, resten fortynnet med vann og frysetørket. Man fikk 2,2 g (94*) av (Z-eller E-35.5). Analogt fikk man fra 1,95 g (5,71 mmol) av (E-eller Z-35.4) 1,95 g (97*) av (E- eller Z-35.5).
35e) [4-{E hhv. Z)-(3-isotiocyanato-propyliden)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl] -eddiksyre-etylester (E-35.6) hhv. (Z-35.6)
Syntesen av (E-35.6) hhv. (Z-35.6) fra (E-35.5) hhv. (Z-35.5) Die gjennomført som beskrevet i eksempel 11 ved syntese av (11.2) fra (11.1).
35f) [4(E hhv. Z)-(3-(lH-benzoimidazol-2-ylamino)-propyliden)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl]-eddiksyre-hydroklorid (E-° 35.7) hhv. (Z-35.7)
Syntesen av (E-35.7) hhv. (Z-35.7) ble gjort som beskrevet i eksempel 15 ved syntese av (15.2) fra (11.2).
<!>35g) 3-[2-(4(E hhv. Z )-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)-pr opy liden )-2 ,5-di okso-Imidazol idin-l-yl)-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamlno-propionsyre (E-35.8) hhv. (Z-35.8)
Syntesen av (E-35.8) hhv. (Z-35.8) ble utført som beskrevet i eksempel 15 ved syntese av (15.3) fra (15.2).
(E-35.8) hhv. (Z-35.8): ES(+)-MS: 550 (M + H)<+>
'Eksempel 36
3-[2-(4(Z hhv. E)-[3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)-propyliden)-5-okso-2-tiokso-imidazolidin-l-yl)-acetylamino]-(2S)-benzyloksykarbonylamino-proplonsyre (Z-36) hhv. (E-36)
Syntesen av (Z-36) hhv. (E-36) ble utført som beskrevet 1 eksempel 35, hvor her (35.2) ble omsatt med lsotlocyanato-eddiksyremetylester Istedenfor isocyanato-eddiksyreetylester. Den videre syntese skjedde analogt med eksempel 35.
(Z-36) hhv. (E-36): ES(+)-MS: 566 (M + H)<+>
Eksempel 37
3-(4-E/Z-(4-guanidinokarbonylbenzyliden)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-(2S)-N-benzyloksykarbonyl-alanin (E/Z-37.5) o
Syntesen skjedde ifølge den følgende reaksjonssekvens:
37a) 2-isocyanato-Z-alanin-tert-butylester (37.1)
En oppløsning av 2,94 g (10 mmol) Z-Dap-0-t-Bu (1.6) i 80 ml metylenklorid ble avkjølt med 80 ml mettet natriumbikarbonat-oppløsning i Isbad under heftig omrøring ved ca. 0°C. Etter avslutning av omrøringen og skilling av fasene, tilsatte man 10,4 ml av en 1,93 molar oppløsning fosgen i toluen hurtig til den organiske fase og lot den på nytt reagere ut under kraftig i
omrøring og ekstern avkjøling. Etter ytterligere ti minutter ble fasene skilt, den vandige fase ble to ganger vasket med 40 ml metylenklorid. De sammenslåtte organiske ekstrakter ble tørket med vannfritt magnesiumsulfat, filtrert og befridd for oppløsnlngsmiddel under vakuum. Man fikk ca. 3,0 g av en fargeløs olje som ble anvendt for syntesen av (37.2) uten videre rensing.
37b) N'-(dimetoksy-fosforyl)-(metoksykarbonyl)-metyl-ureido-N-(2S)-benzyloksykarbonylamino-3-propionsyre (t)-butylester
(37.2)
Under argonbeskyttelsesatmosfære oppløste man den fra 37a) oppnådde mengde av (37.1) 1 ca. 30 ml diklormetan og tilsatte under omrøring ved romtemperatur 1,97 g (35.2) oppløst i ca. 50 ml diklormetan. Etter ca. to timer var reaksjonen avsluttet. Oppløsningen ble først vasket med 100 ml 2N kaliumhydrogensul-fatoppløsning, så med 100 ml vann, den organiske fase tørket med vannfritt magneslumsulfat og filtrert. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum ble det oppnådd ca. 4,6 g ren (37.2) (89*).
37c) E- hhv. Z-3-(4-(4-metoksykarbonyl-benzyliden)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-2-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-(t)-butylester (37.3)
1,55 g (3 mmol) av (37.2) ble oppløst i ca. 8 ml metanol og tilsatt 0,6 ml (ca. 3,3 mmol) av en 30*-ig natriummetanolat-i
oppløsning i metanol. Til dette dryppet man langsomt (under argonbeskyttelsesgass og omrøring ved romtemperatur), 8 ml av en metanolisk oppløsning som inneholdt 0,59 g (3,6 mmol) 4-formylbenzoesyremetylester. Etter ca. én time var reaksjonen avsluttet. Oppløsningen ble inndampet under vakuum, tatt opp i eddikester, vasket med vann, tørket, filtrert og inndampet. Man fikk 1,6 g av en E/Z-blanding av (37.3).
Ved kromatografi med eddikester/n-heptan (2:1) som eluerings-middel og klselgel som baeremateriale, ble diastereomerene adskilt: man oppnådde 0,85 g (Z-37.3) og 0,7 g (E-37.3).
37d) E- hhv. Z-3-(4-(4-guanidinokarbonylbenzyliden)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl )-(2S)-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-(t)-butylester (E- hhv. Z-37.4)
i
Man oppløste 0,262 g (0,5 mmol) av (Z-37.3) i 5 ml absolutt tetrahydrofuran, tilsatte 0,148 g (2,5 mmol) guanidin og oppvarmet blandingen i 20 minutter med tilbakeløpskjøling. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum ble resten kromatografert på kiselgel med metanol/metylenklorid (1:10). Man fikk 0,5 g (Z-37.4). Analogt omsatte man (E-37.3), hvor man som oppløsnlngsmiddel anvendte 1,2-dimetoksyetan. Man fikk 0,12 g (E-37.4).
37e) E- hhv. Z-3-(4-(4-guanidinokarbonylbenzyliden)-2,5-diokso-imidazol idin-l-yl)-(2S)-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-trifluoreddiksyresalt (E- hhv. Z-37.5)
0,12 g (E-37.4) ble oppløst i iskald 90*-ig trifluoreddiksyre (ca. 10 ml) og omrørt 1 1,5 timer under argonbeskyttelsesgass ved romtemperatur. Etter fjerning av oppløsningsmidlet under vakuum ble resten kromatografert med metanol/vann over RP 18. Produktfraksjonene ble inndampet og man fikk 0,06 g (E-37.5). Analogt fikk man fra 0,05 g (Z-37.4) 0,02 g (Z-37.5).
Eksempel 38
3-( 4-E/Z-( 4-( 3 , 4 , 5 ,6-tetrahydropyrimidin-2-yl )-aminokarbonyl-benzy liden )-2 , 5-di ok so-imidazol Idin-l-yl )-(2S )-N-benzyloksykarbonyl-alanin (E/Z-38.4)
Syntesen ble utført ifølge den nedenforstående reaksjonssekvens :
38a) E- hhv. Z-3-(4-((2-fenyltio}-etyloksykarbonylbenzyliden)-2 ,5-di ok so-imidazol idin-1 -yl)-(2S )-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-tert-butylester (E- hhv. Z-38.1)
Analogt med omsetningen i 37c) fikk man fra 0,259 g (0,5 mmol) av (37.2) 0,172 g formylbenzoesyre-(2-fenyltio)-etylester (0,6 mmol) 0,157 g (Z-38.1) og 0,153 g (E-38.1) (totalutbytte: ca. 91*), som enkeltvis kan isoleres ved kromatografi.
38b) E- hhv. Z-3-(4-(karboksybenzyliden)-2,5-diokso-imidazol idin- 1 -yl )-2-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-tert-butylester (E- hhv. Z-38.2)
0,155 g (0,24 mmol) av (Z-38.1) ble oppløst i 5 ml tørt metylenklorid og tilsatt 0,098 g (0,4 mmol) 65*-ig meta-klorperbenzoesyre. Etter 1,5 timer var reaksjonen avsluttet. Man vasket metylenkloridoppløsningen med natriumbisulfItt (ca. 10*) og deretter med vann. Etter tørking over magneslumsulfat, filtrering og fjerning av oppløsningsmidlet ble det oppnådd 0,15 g av fenylsulfonylesteren, som uten videre behandling ble tatt opp i en blanding av 8 ml dioksan, 1,4 ml metanol, så vel som 0,19 IN NaOH. Etter 16 timer ble oppløsningsmidlet fjernet under vakuum og resten ble kromatografert med metylenklorid/- metanol (95:5) over kiselgel. Utbytte: 0,033 g (Z-38.2). Analogt ble det fra 0,157 g (E-38.1) (0,24 mmol), oppnådd 0,051 g (E-38.2).
38c) 3-(4-E/Z-(4-(3,4,5,6-tetrahydropyrlmidin-2-yl)-amino-karbonylbenzyl iden )-2,5-diokso-imidazol idln-l-yl)-(2S )-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre-tert-butylester (E/Z-38.3)
Analogt med fremgangsmåten for syntesen av (11.6) (fremgangsmåte Hf), ble 0,05 g (E-38.2) (0,1 mmol) og 0,01 g (0,1 mmol) '2-amino-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin brakt til reaksjon med den ekvivalente mengde TOTU (0,033 g) i dimetylformamld i nærvær av diisopropyletylamin. Den vanlige opparbeiding gav 0,06 g (E-38.3), som ble omsatt videre uten rensing. På den samme måte fikk man fra 0,03 g (Z-38.2) 0,025 g av råproduktet av (Z-38.3).
38d) 3-(4-E/Z-(4-(3,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)-amino-karbonyl benzyliden)-2,5-diokso-imidazolidin-l-yl)-(2S)-N-benzyloksykarbonylamino-propionsyre (E/Z-38.4 )
0,055 g (E-38.3) ble omrørt i 2 ml 90*-ig trifluoreddiksyre to timer under isavkjøling. Fjerning av oppløsningsmidlet under
vakuum og frysetørking av resten gav 0,02 g av (E-38.4). Analogt fikk man fra 0,02 g av (Z-38.3), 0,012 g av (Z-38.4).
Hemming av knokkelresorpsjon ved hjelp av oppfinnelsens forbindelser kan eksempelvis bestemmes ved hjelp av en osteoklastre-sorpsjonstest ("PIT ASSAY"), eksempelvis analogt med ¥0 95/32710. Denne testmetode, etter hvilken den antagonistiske virkning til oppfinnelsens forbindelser på vitronektinreseptoren otve3 kan bi bestemt, er beskrevet nedenfor.
Testmetode 1:
Inhibering av bindingen av humant vitronektin (Vn) til humane vitronektinreseptorer (VnR) avP3 : ELISA-test.
(Testmetode 1 blir forkortet med opplistingen av testresultatene med Vn/VnR).
1. Rensing av humant vitronektin
Humant vitronektin ble isolert fra humant plasma og renset ved affinitetskromatografi ifølge metoden til Yatohyo et al., Cell Structure and Function, 1988, 23, 81-292.
2. Rensing av human vitronektinreseptor ocvP3
Human vitronektinreseptor ble utvunnet fra humant placenta ifølge metoden til Pytela et al. Human vitronektinreseptor avP3 kan også bli utvunnet fra enkelte cellelinjer (f.eks. fra 293-celler, en human embryonal nyrecellelinje), som er transfisert med DNA-sekvenser for begge subenhetene av og f*3 til vitronektinreseptoren. Urenhetene blir ekstrahert med oktylglykosid og deretter kromatografert over konkanavalln A, heparin-sepharose og S-300.
3. Monoklonale antistoffer
Murine monoklonale antistoffer, spesifikke for <p>3 sub-enheten til vitronektinreseptoren, ble fremstilt Ifølge fremgangsmåten til Newman et al., Blood, 1985, 227-232, eller ved en liknende fremgangsmåte. Kanin Fab 2 anti-mus Fc-konjugatet mot pepperrotperoksidase (anti-mus Fc HRP) ble anskaffet fra Pel Freeze (katalog nr. 715 305-1).
4. ELISA-test
Nunc-Maxisorb 96 brønners mikrotiterplater ble belagt med en oppløsning av human vitronektin (0,002 mg/ml, 0,05 ml/brønn) i PBS (fosfatbuffret koksaltoppløsning) over natten ved 4<*>C. Platene ble vasket to ganger med PBS/0,05* Tween 20 og blokkert ved inkubering (60 minutter) med bovint serumalbumin (BSA, 0,5*, RIA-kvalitetsklasse eller bedre) i tris-HCl (50 mmol), NaCl (100 mmol), MgCl2 (1 mmol), CaClg (1 mmol), MnCl2 (1 mmol), pH 7. Man frem-stilte oppløsninger av kjente inhibitorer og av teststof-fene 1 konsentrasjoner på 2xl0~<12> - 2xl0~<6> mol/l 1 analysebuffer [BSA (0,5*, RIA-kvalltetsklasse eller bedre) i tris-HCl (50 mmol/1), NaCl (100 mmol), MgCl2 (1 mmol), CaCl2 (1 mmol), MnCl2 (1 mmol), pH 7].
De blokkerte plater ble tømt og 1 hvert tilfelle 0,025 ml av oppløsningen som inneholdt den definerte konsentrasjon (2xl0~<12> til 2xl0-É>) enten av en kjent Inhibitor eller av et teststoff, ble tilsatt i hver brønn. 0,025 ml av en oppløsning av vitronektinreseptoren i testbuffer (0,03 mg/ml) ble pipettert i hver brønn på platen og platen ble inkubert på en rister i 60-180 minutter ved romtemperatur. I mellomtiden ble det fremstilt en oppløsning (6 ml/plate) av et for P3~subenhetene til vitronektinreseptoren spesifikt murint monoklonalt antistoff i analysebuffer (0,0015 mg/ml). Til denne oppløsning tilsatte man et annet kaninantistoff (0,001 ml stamoppløsning/6 ml av den murine monoklonale antl-P3-antistoffoppløsning), som er et anti-mus Fc HRP antistoffkonjugat, og denne blanding av murint anti-03-antistoff og kanin-anti-mus Fc HRP-antistoffkonjugat lot man inkubere i tiden for reseptor-inhibi-torinkubering.
Testplatene ble vasket fire ganger med PBS-oppløsnlng som inneholdt 0,05* Tween 20, og man pipetterte alltid 0,05 ml/brønn av antlstoffblandingen til hver brønn på platen og inkuberte i 60-180 minutter. Platene ble vasket fire ganger med PBS/0,05* Tween-20 og deretter fremkalt med 0,05 ml/brønn av en PBS-oppløsning som inneholdt 0,67 mg/ml o-fenylendiamin og 0,012* HgOg. Alternativt til dette kan det bli tilsatt en buffer (pH 5), som inneholder Na3P04 (50 mmol) og sitronsyre (0,22 mmol). Fargeutvik-1Ingen ble stoppet med IN E2SO4 (0,05 ml/brønn).
Absorpsjonen for hver brønn ble målt med 492-405 nm og dataene ble gitt verdier etter standardmetoder.
Testmetode 2:
Inhibering av bindingen av klstrin til human vitronektinreseptor (VnR) oiy<p>g : ELISA-test.
(Testmetode 2 blir forkortet i tabellen over testresultatene med kistrin/VnR).
1. Rensing av klstrin
Kistrin ble renset ifølge metoden beskrevet av Dennis et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1989, 87, 2471-2475 og PROTEINS: Strueture, Function and Genetics 1993, 15, 312-321.
2. Rensing av human vitronektinreseptor avP3
se testmetode 1.
3. Monoklonale antistoffer se testmetode 1.
4. ELISA-test
Stoffers evne til å inhibere bindingen av kistrin til vitronektinreseptoren, kan måles med en ELISA-test. For dette formål ble Nunc 96 brønners mikrotiterplater belagt med en oppløsning av kistrin (0,002 mg/ml) ifølge metoden til Dennis et al., som beskrevet I PROTEINS: Structure, Functions and Genetics 1993, 15, 312-321. Den videre eksperimentelle gjennomføringen av ELISA-testen skjedde som beskrevet i testmetode 1, pkt. 4.
Testresultater:

Claims (3)

1. Forbindelser, karakterisert ved formel I hvor W står for Ri-A-B-D-CfR16 ), R1-A-B-D-CH=C; Y står for C=0, A er -NH-, -CONH-, -CO-, -NH-NH-CO- eller en binding; B står for en direkte binding eller ( C^- C^)-alkandiyl; D står for en direkte binding; RI<6> står for H, q står for 0 eller 1, så vel som deres fysiologisk akseptable salter.
2. Anvendelse av forbindelsene med formel I ifølge krav 1, for fremstilling av inhibitorer for knokkelresorpsjon av osteoklaster, av inhibitorer av tumorvekst og tumormetastasedannelse, av betennelseshemmere, medikamenter for behandling eller profylakse av kardiovaskulære sykdommer så vel som medikamenter for behandling eller profylakse av nefropatier og retino-patler.
3. Farmasøytisk tilberedning, karakterisert ved at den omfatter minst én forbindelse med formel I ifølge krav 1, deres fysiologisk akseptable salter ved siden av farmasøytisk akseptable bære- og tilsetningsstoffer. i
NO19971268A 1996-03-20 1997-03-19 Nye inhibitorer for knokkelresorpsjon og vitronektinreseptorantagonister, anvendelse av forbindelsene samt farmasöytisk preparat NO314547B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19610919 1996-03-20
DE1996126701 DE19626701A1 (de) 1996-07-03 1996-07-03 Neue Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
DE1996135522 DE19635522A1 (de) 1996-09-02 1996-09-02 Neue Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO971268D0 NO971268D0 (no) 1997-03-19
NO971268L NO971268L (no) 1997-09-22
NO314547B1 true NO314547B1 (no) 2003-04-07

Family

ID=27216049

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19971268A NO314547B1 (no) 1996-03-20 1997-03-19 Nye inhibitorer for knokkelresorpsjon og vitronektinreseptorantagonister, anvendelse av forbindelsene samt farmasöytisk preparat

Country Status (25)

Country Link
US (3) US6218415B1 (no)
EP (1) EP0796855B1 (no)
JP (1) JP4546584B2 (no)
KR (1) KR970065523A (no)
CN (1) CN1072647C (no)
AR (1) AR006273A1 (no)
AT (1) ATE212990T1 (no)
AU (1) AU715729B2 (no)
BR (1) BR9701335A (no)
CA (1) CA2199923A1 (no)
CZ (1) CZ289696B6 (no)
DE (1) DE59706273D1 (no)
DK (1) DK0796855T3 (no)
ES (1) ES2171768T3 (no)
HK (1) HK1017346A1 (no)
HR (1) HRP970156A2 (no)
HU (1) HUP9700602A3 (no)
IL (1) IL120479A (no)
MX (1) MX9702070A (no)
NO (1) NO314547B1 (no)
NZ (1) NZ314433A (no)
PL (1) PL319071A1 (no)
PT (1) PT796855E (no)
SK (1) SK35097A3 (no)
TW (1) TW363064B (no)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0796855B1 (de) 1996-03-20 2002-02-06 Hoechst Aktiengesellschaft Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
US5981546A (en) * 1996-08-29 1999-11-09 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
US5919792A (en) * 1996-10-30 1999-07-06 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
US5952341A (en) * 1996-10-30 1999-09-14 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
DE19647380A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag 5-Ring-Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
PL323130A1 (en) 1996-11-15 1998-05-25 Hoechst Ag Application of heterocyclic compounds in production of a pharmaceutic agent, novel heterocyclic compounds and pharmaceutic agent as such
DE19647381A1 (de) 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Neue Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
US6218387B1 (en) 1996-12-20 2001-04-17 Hoechst Aktiengesellschaft Vitronectin receptor anatagonists, their preparation and their use
DE19653645A1 (de) * 1996-12-20 1998-06-25 Hoechst Ag Vitronectin - Rezeptorantagonisten, deren Herstellung sowie deren Verwendung
DE19653647A1 (de) 1996-12-20 1998-06-25 Hoechst Ag Vitronectin - Rezeptorantagonisten, deren Herstellung sowie deren Verwendung
US6482821B2 (en) 1996-12-20 2002-11-19 Hoechst Aktiengellschaft Vitronectin receptor antagonists, their preparation and their use
US6017925A (en) * 1997-01-17 2000-01-25 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
DE19741235A1 (de) 1997-09-18 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19741873A1 (de) * 1997-09-23 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19751251A1 (de) * 1997-11-19 1999-05-20 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmezeutische Präparate
US6211191B1 (en) 1997-12-17 2001-04-03 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
US6017926A (en) * 1997-12-17 2000-01-25 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
US6066648A (en) * 1997-12-17 2000-05-23 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
US6048861A (en) 1997-12-17 2000-04-11 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
WO1999030709A1 (en) * 1997-12-17 1999-06-24 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
ES2381591T3 (es) 1998-04-09 2012-05-29 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. Derivados de aminopiperidina como antagonistas de integrina alfa v beta 3
AU3561099A (en) * 1998-04-14 1999-11-01 American Home Products Corporation Acylresorcinol derivatives as selective vitronectin receptor inhibitors
DE19821483A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
AU748621B2 (en) * 1998-08-13 2002-06-06 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
IL143901A0 (en) 1998-12-23 2002-04-21 Searle & Co Use of cyclooxygenase-2- inhibitor, a matrix metallaproteinase inhibitor, an antineoplastic agent and optionally radiation as a combination treatment of neoplasia
EP1156803A4 (en) 1999-02-09 2004-03-17 Bristol Myers Squibb Co FXA LACTAM INHIBITORS AND METHOD
DE19922462A1 (de) 1999-05-17 2000-11-23 Aventis Pharma Gmbh Spiro-imidazolidinderivate, ihre Herstellung ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
WO2000072801A2 (en) 1999-06-02 2000-12-07 Merck & Co., Inc. Alpha v integrin receptor antagonists
EP1198231A1 (en) 1999-07-21 2002-04-24 American Home Products Corporation Bicyclic antagonists selective for the(alpha)v(beta)3 integrin
EP1209152A4 (en) 1999-08-05 2003-03-12 Meiji Seika Kaisha OMEGA-AMINO-ALPHA-HYDROXY-CARBONIC ACID DERIVATIVES WITH AN INTEGRIN ALPHA V BETA ANTAGONISM
EP1229910A4 (en) * 1999-10-04 2003-10-01 Merck & Co Inc integrin
CA2397194C (en) 2000-01-20 2011-05-17 Mark E. Duggan Alpha v integrin receptor antagonists
FR2806082B1 (fr) * 2000-03-07 2002-05-17 Adir Nouveaux composes bicycliques antagonistes des recepteurs de la vitronectine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US6511973B2 (en) 2000-08-02 2003-01-28 Bristol-Myers Squibb Co. Lactam inhibitors of FXa and method
DE10111877A1 (de) 2001-03-10 2002-09-12 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE10137595A1 (de) * 2001-08-01 2003-02-13 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
WO2004100873A2 (en) * 2003-05-07 2004-11-25 Cytokinetics, Inc. Compounds, compositions, and methods
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
BRPI0620756B1 (pt) * 2005-12-29 2021-06-01 Tersera Therapeutics Llc Derivados de aminoácido multicíclicos, formulação farmacêutica compreendendo os mesmos e seus usos para inibir a atividade de triptofano hidroxilase 1 (tph1)
US20080051335A1 (en) * 2006-05-02 2008-02-28 Kleiner Lothar W Methods, compositions and devices for treating lesioned sites using bioabsorbable carriers
EP2365969B1 (en) * 2008-11-20 2017-03-22 Yissum Research Development Company of The Hebrew University of Jerusalem Ltd. Novel anti-biofilm agents
KR20160147007A (ko) 2014-05-30 2016-12-21 화이자 인코포레이티드 선택적인 안드로겐 수용체 조절제로서의 카보니트릴 유도체
WO2017167622A1 (en) 2016-03-30 2017-10-05 Basf Se Process for the flash calcination of a zeolitic material
TW201823208A (zh) 2016-09-07 2018-07-01 美商普萊恩醫療公司 N－醯基胺基酸化合物及其使用方法
US11046685B2 (en) 2017-02-28 2021-06-29 Morphic Therapeutic, Inc. Inhibitors of (α-v)(β-6) integrin
US20180244648A1 (en) 2017-02-28 2018-08-30 Lazuli, Inc. Inhibitors of (alpha-v)(beta-6) integrin
CR20210109A (es) 2018-08-29 2021-06-24 Morphic Therapeutic Inc INHIBICIÓN DE LA INTEGRINA av ß6
US11478466B2 (en) 2019-04-01 2022-10-25 Cornell University Small molecule promoting osteoblast differentiation
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2937779A1 (de) 1979-09-19 1981-04-09 Hoechst Ag, 6000 Frankfurt Aminosaeurederivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE3044236A1 (de) 1980-11-25 1982-06-16 Hoechst Ag, 6000 Frankfurt Aminosaeurederivate und verfahren zu ihrer herstellung
FR2487829A2 (fr) 1979-12-07 1982-02-05 Science Union & Cie Nouveaux imino acides substitues, leurs procedes de preparation et leur emploi comme inhibiteur d'enzyme
FR2503155A2 (fr) 1980-10-02 1982-10-08 Science Union & Cie Nouveaux imino diacides substitues, leurs procedes de preparation et leur emploi comme inhibiteur d'enzyme
US4350704A (en) 1980-10-06 1982-09-21 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
EP0278530A3 (de) 1980-08-30 1989-08-02 Hoechst Aktiengesellschaft Aminosäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese enthaltende Mittel und deren Verwendung
US4344949A (en) 1980-10-03 1982-08-17 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acids
FR2492381A1 (fr) 1980-10-21 1982-04-23 Science Union & Cie Nouveaux acides aza bicyclo alcane carboxyliques substitues leurs procedes de preparation et leur emploi comme inhibiteur d'enzyme
EP0050800B2 (en) 1980-10-23 1995-06-07 Schering Corporation Carboxyalkyl dipeptides, processes for their production and pharmaceutical compositions containing them
US4374847A (en) 1980-10-27 1983-02-22 Ciba-Geigy Corporation 1-Carboxyalkanoylindoline-2-carboxylic acids
DE3226768A1 (de) 1981-11-05 1983-05-26 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(3.3.0)-octan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
CA1341296C (en) 1981-12-29 2001-09-25 Hansjorg Urbach 2-azabicycloalkane-3-carboxylic acid derivatives, processes for their preparation, agents containing these compounds and their use
DE3210496A1 (de) 1982-03-23 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate bicyclischer aminsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3211397A1 (de) 1982-03-27 1983-11-10 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Spiro (4.(3+n))-2-aza-3-carbonsaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3211676A1 (de) 1982-03-30 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate von cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3227055A1 (de) 1982-07-20 1984-01-26 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue derivate der 2-aza-bicyclo(2.2.2)octan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie 2-aza-bicyclo(2.2.2)octan-3-carbonsaeure als zwischenstufe und verfahren zu deren herstellung
DE3242151A1 (de) 1982-11-13 1984-05-17 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue derivate tricyclischer aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung, sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3246503A1 (de) 1982-12-16 1984-06-20 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(5.3.0)-decan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
DE3643012A1 (de) 1986-12-17 1988-06-30 Hoechst Ag 2,3-disubstituierte isoxazolidine, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3818850A1 (de) 1988-06-03 1989-12-07 Hoechst Ag Oligopeptide mit zyklischen prolin-analogen aminosaeuren
DE4009506A1 (de) 1990-03-24 1991-09-26 Hoechst Ag Hydantoinderivate
JPH04367367A (ja) 1991-06-11 1992-12-18 Nkk Corp ロータリノズル
DE4126277A1 (de) 1991-08-08 1993-02-11 Cassella Ag Hydantoinderivate
US5204350A (en) 1991-08-09 1993-04-20 Merck & Co., Inc. Method of inhibiting osteoclast-mediated bone resorption by administration of n-heterocyclicalkyl-substituted phenyl derivatives
US5217994A (en) * 1991-08-09 1993-06-08 Merck & Co., Inc. Method of inhibiting osteoclast-mediated bone resorption by administration of aminoalkyl-substituted phenyl derivatives
DE4207254A1 (de) 1992-03-07 1993-09-09 Cassella Ag 4-oxo-2-thioxoimidazolidin-derivate
DE4213634A1 (de) 1992-04-24 1993-10-28 Cassella Ag 2,4-Dioxo-imidazolidin-Derivate
DE4224414A1 (de) * 1992-07-24 1994-01-27 Cassella Ag Phenylimidazolidin-derivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4228717A1 (de) * 1992-08-28 1994-03-03 Cassella Ag Imidazolidin-Derivate
AU674553B2 (en) 1992-10-14 1997-01-02 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
WO1994012181A1 (en) 1992-12-01 1994-06-09 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
DE4301747A1 (de) * 1993-01-23 1994-07-28 Cassella Ag Substituierte Aminoverbindungen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4308034A1 (de) 1993-03-13 1994-09-15 Cassella Ag Neue Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4427979A1 (de) 1993-11-15 1996-02-15 Cassella Ag Substituierte 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
US5770565A (en) 1994-04-13 1998-06-23 La Jolla Cancer Research Center Peptides for reducing or inhibiting bone resorption
AU701776B2 (en) 1994-05-27 1999-02-04 Merck & Co., Inc. Compounds for inhibiting osteoclast-mediated bone resorption
PL318199A1 (en) 1994-06-29 1997-05-26 Smithkline Beecham Corp Antagonists of vitronectin receptors
JPH10504807A (ja) 1994-06-29 1998-05-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ビトロネクチン受容体拮抗剤
TW449590B (en) * 1995-04-14 2001-08-11 Boehringer Ingelheim Kg New arylglycinamide derivatives, processes for the manufacture thereof and pharmaceutical compositions containing these compounds
JP3895792B2 (ja) * 1995-12-08 2007-03-22 プロスケリア・エス・ア・エス 骨形成促進剤
EP0796855B1 (de) 1996-03-20 2002-02-06 Hoechst Aktiengesellschaft Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten

Also Published As

Publication number Publication date
EP0796855A1 (de) 1997-09-24
DK0796855T3 (da) 2002-05-27
IL120479A0 (en) 1997-07-13
CA2199923A1 (en) 1997-09-20
HU9700602D0 (en) 1997-05-28
PT796855E (pt) 2002-07-31
US6218415B1 (en) 2001-04-17
CZ289696B6 (cs) 2002-03-13
US20020119999A1 (en) 2002-08-29
JP4546584B2 (ja) 2010-09-15
HRP970156A2 (en) 1998-04-30
AU715729B2 (en) 2000-02-10
AR006273A1 (es) 1999-08-11
CN1072647C (zh) 2001-10-10
CZ82397A3 (en) 1997-12-17
KR970065523A (ko) 1997-10-13
EP0796855B1 (de) 2002-02-06
MX9702070A (es) 1998-03-31
DE59706273D1 (de) 2002-03-21
TW363064B (en) 1999-07-01
ES2171768T3 (es) 2002-09-16
CN1206005A (zh) 1999-01-27
US6620820B2 (en) 2003-09-16
HUP9700602A3 (en) 2000-04-28
IL120479A (en) 2001-03-19
PL319071A1 (en) 1997-09-29
HK1017346A1 (en) 1999-11-19
NO971268D0 (no) 1997-03-19
US20010021708A1 (en) 2001-09-13
BR9701335A (pt) 1998-08-18
HUP9700602A1 (hu) 1998-03-30
NO971268L (no) 1997-09-22
SK35097A3 (en) 1997-10-08
NZ314433A (en) 1999-03-29
AU1638097A (en) 1997-09-25
ATE212990T1 (de) 2002-02-15
JPH09255664A (ja) 1997-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO314547B1 (no) Nye inhibitorer for knokkelresorpsjon og vitronektinreseptorantagonister, anvendelse av forbindelsene samt farmasöytisk preparat
NO311719B1 (no) Nye iminoderivater, en fremgangsmåte for deres fremstilling samt anvendelse av de samme
NO311083B1 (no) Nye cykloalkylderivater, fremgangsmåte for fremstilling derav, farmasöytiske preparater inneholdende forbindelsene samtanvendelse av forbindelsene
NO311644B1 (no) Vitronektinreseptor-antagonister, farmasöytisk preparat inneholdende disse og anvendelse derav
SK9032000A3 (en) Novel acylguanidine derivatives as inhibitors of bone resorption and as vitronectin receptor antagonists
BG64558B1 (bg) Дизаместени бициклични хетероциклени съединения, тяхното получаване и приложението им като лекарствени средства
CZ287885B6 (cs) Deriváty 2,4-dioxoimidazolidinu, způsob jejich výroby, jejich použití a farmaceutický prostředek, tyto látky obsahující
CZ289297B6 (cs) Deriváty fenylimidazolidinu, způsob jejich výroby a jejich pouľití
CZ286327B6 (cs) Deriváty 4-oxo-2-thioxoimidazolidinu jako inhibitory agregace krevních destiček
AU768206B2 (en) Novel guanidine derivatives as inhibitors of cell adhesion
US7763621B2 (en) Vitronectin receptor antagonist derivatives, method for preparing same, use thereof as medicines and pharmaceutical compositions containing same
HUT71483A (en) Imidazopyridines
EP1196416B1 (en) Substituted purine derivatives as inhibitors of cell adhesion
KR100442223B1 (ko) 티엔에프-알파 억제제로서의 환형 히드라진 유도체
EP1240161B1 (en) Thienylalanine derivatives as inhibitors of cell adhesion
RU2195460C2 (ru) Новые ингибиторы рассасывания костей и антагонисты рецептора витронектина
MXPA97005586A (en) New derivatives of imino as inhibitors of the bone resortion and antagonists of vitronect receptors
MXPA97005585A (en) New cyclalacyl derivatives as inhibitors of bone resortion and vitronect receptor antagonists

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees