CZ289696B6 - Pětičlenné heterocykly a farmaceutické přípravky, které je obsahují - Google Patents

Pětičlenné heterocykly a farmaceutické přípravky, které je obsahují Download PDF

Info

Publication number
CZ289696B6
CZ289696B6 CZ1997823A CZ82397A CZ289696B6 CZ 289696 B6 CZ289696 B6 CZ 289696B6 CZ 1997823 A CZ1997823 A CZ 1997823A CZ 82397 A CZ82397 A CZ 82397A CZ 289696 B6 CZ289696 B6 CZ 289696B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
compound
carbon atoms
mmol
alkyl
Prior art date
Application number
CZ1997823A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ82397A3 (en
Inventor
Volkmar Dr. Wehner
Jochen Dr. Knolle
Hans Ulrich Dr. Stilz
Denis Dr. Carniato
Jean Francois Gourvest
Tom Dr. Gadek
Robert Dr. Mcdowell
Original Assignee
Hoechst Aktiengesellschaft
Genentech, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE1996126701 external-priority patent/DE19626701A1/de
Priority claimed from DE1996135522 external-priority patent/DE19635522A1/de
Application filed by Hoechst Aktiengesellschaft, Genentech, Inc. filed Critical Hoechst Aktiengesellschaft
Publication of CZ82397A3 publication Critical patent/CZ82397A3/cs
Publication of CZ289696B6 publication Critical patent/CZ289696B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/30—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D233/32—One oxygen atom
    • C07D233/36—One oxygen atom with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to ring nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A61P3/14—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis for calcium homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/44—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D233/52—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with hetero atoms directly attached to said nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/72—Two oxygen atoms, e.g. hydantoin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/96—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/30—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D239/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms directly attached in position 2
    • C07D239/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D239/18—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with hetero atoms attached to said nitrogen atoms, except nitro radicals, e.g. hydrazine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D249/14—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/80—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Popisuj se p ti lenn heterocykly obecn ho vzorce I, kde Y je C=O nebo C=S, Z je iminoskupina, E je p° m vazba nebo (C.sub.1.n.-C.sub.4.n.)-alkandiyl, F je p° m vazba, (C.sub.1.n.-C.sub.3.n.)-alkandiyl, fenylen, pop° pad substituovan iminoskupina, pop° pad substituovan karbonyliminoskupina nebo karbonylov skupina a symboly G a W jsou organick skupiny definovan v patentov²ch n roc ch a farmaceutick p° pravky, kter tyto slou eniny obsahuj . Tyto slou eniny se pou vaj jako antagonist receptoru vitronektinu a inhibitory resorpce kost .\

Description

Oblast techniky
Předmětem vynálezu jsou sloučeniny níže uvedeného obecného vzorce I, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli a farmaceutické přípravky, které takové sloučeniny obsahují. Tyto sloučeniny lze použít jako léčiva, zejména jako inhibitory resorpce kostí způsobované osteoklasty, jako inhibitory růstu nádorů a metastázování nádorů, jako protizánětlivá činidla, k léčení nebo profylaxi kardiovaskulárních onemocnění, jako je arterioskleróza nebo restenóza, k léčení nebo profylaxi nefropatií a retinopatií, jako je například diabetická retinopatie, jakož i jako antagonisty receptorů vitronektinu k léčení a profylaxi onemocnění, která jsou založena na vzájemném působení receptorů vitronektinu a jejich ligandů při interakčních procesech buňkabuňka nebo buňka-matrix. Vynález se dále týká použití sloučenin obecného vzorce I, jakož i jejich fyziologicky přijatelných solí, a farmaceutických přípravků, které tyto sloučeniny obsahují, jako léčiv pro zmírnění nebo léčení onemocnění, která jsou alespoň zčásti podmíněna nežádoucí přílišnou resorpcí kostí, angiogenezí nebo proliferací buněk hladkých svalů cév.
Dosavadní stav techniky
U lidských kostí probíhá neustálý dynamický proces jejich přestavování, který zahrnuje resorpci kostí a výstavbu kostí. Tyto procesy jsou řízeny typy buněk specializovanými pro daný účel. Výstavba kostí je založena na ukládání kostní matrix účinností osteoblastů, resorpce kostí je založena na odbourávání kostní matrix činností osteoklastů. Řada onemocnění kostí je způsobena narušením rovnováhy mezi výstavbou kostí a resorpcí kostí. Osteoporóza je charakterizována úbytkem kostní matrix. Aktivované osteoklasty se usazují na povrchu kostní matrix a vylučují proteolytické enzymy a kyseliny do takzvané „spojovací zóny“ („sealing zone“), oblasti mezi jejich buněčnou membránou a kostní matrix. Kyselé prostředí a proteázy způsobují odbourávání kosti.
Bylo zjištěno, že usazování osteoklastů na kostech je řízeno receptory integrinů na buněčném povrchu osteoklastů.
Integriny jsou skupinou receptorů, ke kterým patří mimo jiné receptor fibrinogenu α^β3 na krevních destičkách a receptor vitronektinu ανβ3. Receptor vitronektinu ανβ3 je glykoprotein umístěný v membráně, který je exprimován na buněčném povrchu řady buněk, jako jsou endothelové buňky, buňky hladkých svalů cév, osteoklasty a nádorové buňky. Receptor vitronektinu ανβ3, který je exprimován na membráně osteoklastů, řídí proces usazování na kostech a resorpce kostí, a přispívá tak k osteoporóze.
ανβ3 se přitom váže na proteiny kostní matrix, jako je osteopontin, kostní sialoprotein a trombospontin, které obsahují tripeptidový motiv Arg-Gly-Asp (neboli RGD).
Horton a kol. popisují RGD-peptidy a protilátku proti receptorů vitronektinu (23C6), které inhibují odbourávání zubů způsobované osteoklasty a přemisťování osteoklastů (Horton a kol., Exp. Cell. Res. 1991,195, 368). Sáto a kol. popisují v J. Cell Biol. 1990,111,1713, že echistatin, RGD-peptid z hadího jedu, působí jako silný inhibitor resorpce kostí v tkáňové kultuře a jako látka zabraňující přichycení osteoklastů na kost. Fischer a kol. (Endocrinology, 1993, 132,1411) prokázali na krysách, že echistatin zabraňuje resorpci kostí rovněž in vivo.
Receptor vitronektin ανβ3 na lidských buňkách hladkých svalů cév aorty stimuluje přemisťování těchto buněk do neointimy, což nakonec vede k arterioskleróze a restenóze po angioplastii (Brown a kol., Cardiovascular Res. 1994,28, 1815).
-1 CZ 289696 B6
Brooks a kol. (Cell 1994, 79, 1157) uvádějí, že protilátky proti ανβ3 nebo antagonisté Ονβ3 mohou způsobit scvrknutí nádorů tím, že indukují apoptosu buněk krevních cév během angiogeneze. Chersch a kol. (Science 1995, 270, 1500) popisují protilátky proti ανβ3 nebo antagonisty ανβ3, kteří inhibují angiogenetické procesy indukované bFGF v očích krys, což by mohlo být terapeuticky využitelné při léčení retinopatií.
VEP-A449 079, EP-A 530 505, EP-A566 919 a WO 93/18057 jsou popsány hydantoinové deriváty a ve WO 95/14008 substituované pětičlenné heterocykly, které zabraňují agregaci trombocytů.
V patentové přihlášce WO 94/12181 jsou popsány substituované aromatické nebo nearomatické kruhové systémy a ve WO 94/08577 substituované heterocykly, působící jako antagonisté receptorů fibrinogenu a inhibitory agregace destiček. ZEP-A-518 586 a EP-A-528 587 jsou známé aminoalkylem nebo heterocyklem substituované deriváty fenylalaninu a z WO 95/32710 arylové deriváty, působící jako látky zabraňující resorpci kostí způsobované osteoklasty. Ve WO 95/28426 jsou popsány RGD-peptidy jako inhibitory resorpce kostí, angiogeneze a restenózy. Ve WO 96/00574 jsou popsány benzodiazepiny a ve WO 96/00730 templáty antagonistů receptorů fibrinogenu, obzvláště benzodiazepiny, které jsou navázány na pětičlenný kruh nesoucí atom dusíku, působící jako antagonisté receptorů vitronektinu.
Podstata vynálezu
Sloučeniny níže uvedeného obecného vzorce I podle vynálezu inhibují resorpci kostí způsobovanou osteoklasty. Onemocněními kostí, proti kterým lze použít sloučeniny podle vynálezu, jsou především osteoporóza, hyperkalcinemie, osteopenie, například vyvolané metastázami, onemocnění zubů, hyperparathyroidismus, periartikulámí eroze při revmatické artritidě a Pagetova nemoc.
Dále lze sloučeniny obecného vzorce I použít ke zmírnění, profylaxi nebo terapii onemocnění kostí, která jsou vyvolána terapií používající glukokortikoidů, steroidů nebo kortikosteroidů, nebo nedostatkem sexuálního hormonu (nebo hormonů). Všechna tato onemocnění se vyznačují úbytkem kostí, který je způsoben nerovnováhou mezi výstavbou kostí a resorpci kostí.
Sloučeniny obecného vzorce I mohou dále sloužit jako nosiče účinných látek, které cíleně transportují účinnou látku na místo působení („drug targeting“, viz například Targeted Drug Delivery, R. C. Juliano, Handbook of Experimental Pharmacology svazek 100, Editor Bom, G. V. R. a kol., Springer Verlag). V případě těchto účinných látek se jedná o látky, které lze použít k ošetření výše uvedených onemocnění.
Předmětem vynálezu jsou pětičlenné heterocykly obecného vzorce I
O
II
W N-E-F-G I I
Z---Y <*> / kde
W představuje skupinu R‘-A-B-D-C(R16), R'-A-B-D-C(RI6)=C,
-2CZ 289696 B6
Λ nebo R—A—B—D—L---C kde kruhový systém obsahuje 1 heteroatom, kterým je atom dusíku, a je nasycený,
Y znamená skupinu C=O nebo C=S,
Z představuje skupinu N(R°),
A znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu -NRy- nebo -C(O)-,
B představuje přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -NR2-, -C(O)-, -NR2-C(O)- nebo -C(O)-NR2-,
D znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -NR2-, -CO-NR2- nebo -CO-,
E představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
F má význam definovaný v případě symbolu D,
G znamená skupinu
F R6
F í5 _r7_ n
P ,-.10 (CH2)q— R představuje atom dusíku,
R° znamená atom vodíku,
R1 představuje skupinu R2-C(=NR2)NR2-, R2R3N-C(=NR2)-, R2R3N-C(=NR2)-NR2, nebo skupinu
-3CZ 289696 B6 symboly R2 a R3 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu R8R8NR9, R8R8NC(O)R9 nebo R8R8N-C(=NR8)-NR8-, symboly R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě představují vždy atom vodíku nebo skupinu R8OC(O)N(R2)R9,
R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylalkylovou skupinu se 3 až 10 atomy uhlíku v cykloalkylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, arylalkylovou skupinu s 5 až 12 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části nebo skupinu
přičemž alkylové zbytky mohou být substituované halogenem nebo R8OR9,
R9 představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
R10 znamená skupinu C(O)Rn,
Rn představuje hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo benzyloxyskupinu, symboly R12 a R13 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, skupinu R8OR9 nebo aminoskupinu,
R16 představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, m má hodnotu 1 až 4, p má hodnotu 1, a q má hodnotu 0, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli, s výjimkou pětičlenných heterocyklů obecného vzorce I, ve kterých R’-A-B-D-C(R16) nebo R’-A-B-D-C(RI6)=C představuje skupinu R’-K-C(R16) popřípadě skupinu R’-K-CH=C, ve které R16 znamená atom vodíku, přičemž zde
R1 představuje skupinu X-NH-C(=NH)-(CH2)p, X’-NH-(CH2)p nebo 4-imidazolyl-CH2-, přičemž p znamená celé číslo od 0 do 3,
X znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylkarbonylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkylkarbonyloxyalkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 18 atomy uhlíku v alkylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, arylkarbonylovou skupinu s 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části, aryloxykarbonylovou skupinu s 6 až 14 atomy uhlíku v aryloxylové části, arylalkoxykarbonylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkoxyskupinu se 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo aminoskupinu, přičemž arylovými skupinami v substituentu X jsou uhlíkaté cykly, popřípadě jednou nebo vícekrát substituované stejnými nebo rozdílnými zbytky vybranými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 8 atomy uhlíku, alkoxy
-4CZ 289696 B6 skupiny s 1 až 8 atomy uhlíku, atomy halogenů, nitroskupinu, aminoskupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyskupinu, methylendioxyskupinu, kyanoskupinu, hydroxykarbonylovou skupinu, aminokarbonylovou skupinu, alkoxykarbonylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, fenylovou skupinu, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu, skupiny (R17O)2P(O) a (RI7O)2P(O)-O-, kde R17 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, arylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku nebo aiylalkylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku varylové části a 1 až 8 atomy uhlíku v alkylové části, a tetrazolylovou skupinu,
X1 představuje arylkarbonylovou skupinu se 4 až 14atomy uhlíku varylové části, aryloxykarbonylovou skupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v aryloxylové části, aiylalkoxykarbonylovou skupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, arylalkoxyskupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo skupinu R'-NH-C(=NR), přičemž symboly R' a R nezávisle na sobě mají významy symbolu X a přičemž arylovými skupinami v substituentu X1 jsou čistě uhlíkaté cykly, popřípadě jednou nebo vícekrát substituované jak je uvedeno pro arylové skupiny v substituentu X, a
K znamená alkandiylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkandiylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, fenylenalkandiylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkandiylové části, alkandiylfenylenovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkandiylové části, fenylenalkendiylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku v alkendiylové části nebo dvouvazný zbytek pěti- nebo šestičlenného nasyceného nebo nenasyceného kruhu, který může obsahovat 1 nebo 2 atomy dusíku a může být substituován jednou nebo dvakrát alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo kyslíkem nebo sírou, navázanými dvojnou vazbou.
Alkylové zbytky vyskytující se v substituentech mohou být přímé nebo rozvětvené, nasycené nebo jednou nebo vícekrát nenasycené. To platí odpovídajícím způsobem i pro zbytky od nich odvozené, jako jsou například alkoxylové zbytky. Cykloalkylové zbytky mohou být mono-, bi- nebo tricyklické.
Monocyklickými cykloalkylovými zbytky jsou zejména cyklopropylová, cyklobutylová, cyklopentylová, cyklohexylová, cykloheptylová a cyklooktylová skupina, které mohou však být rovněž substituovány například alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku. Jako příklady substituovaných cykloalkylových zbytků lze uvést 4-methylcyklohexylovou a 2,3-dimethylcyklopentylovou skupinu.
Bicyklické a tricyklické cykloalkylové zbytky mohou být nesubstituované nebo substituované v libovolných vhodných polohách jednou nebo několika oxoskupinami nebo/a jednou nebo několika stejnými nebo různými alkylovými skupinami s 1 až 4 atomy uhlíku, například methylovými nebo izopropylovými skupinami, výhodně methylovými skupinami. Volná vazba bicyklického nebo tricyklického zbytku se může nacházet v libovolné poloze molekuly, zbytek může být tedy navázán přes atom na styku kruhů nebo atom v můstku. Volná vazba se může rovněž nacházet v libovolné stereochemické poloze, například v exo- nebo endo-poloze.
Jako příklady základních těles bicyklických kruhových systémů lze uvést norboman (= bicyklo[2,2,l]heptan), bicyklo[2,2,2]oktan a bicyklo[3,2,l]oktan. Příkladem systému substituovaného oxoskupinou je kafr (= l,7,7-trimethyl-2-oxobicyklo[2,2,l]heptan).
Jako příklady základních těles tricyklických kruhových systémů lze uvést twistan (=tricyklo[4,4,0,03’8]dekan), adamantan (=tricyklo[3,3,l,l3’7]dekan), noradamantan (= tricyklo[3,3,l,l3’7]nonan), tricyklo[2,2,l,02’6]heptan, tricyklo[5,3,2,04’9]dodekan, tricyklo[5,4,0,02,9]undekan atricyklo[5,5,l,03,11]tridekan.
-5CZ 289696 B6
Arylovými skupinami jsou například fenylová, naftylová, bifenylylová, anthrylová nebo fluorenylová skupina, přičemž je výhodná 1-naftylová, 2-naftylová a zejména fenylová skupina. Arylové zbytky, zejména fenylové zbytky, mohou být jednou nebo vícekrát, výhodně jednou, dvakrát nebo třikrát, substituované stejnými nebo rozdílnými zbytky vybranými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 8 atomy uhlíku, zejména alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 8 atomy uhlíku, zejména alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, atomy halogenů, jako je fluor, chlor a brom, nitroskupinu, aminoskupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyskupinu, methylendioxyskupinu, ethylendioxyskupinu, skupinu -OC(CH2)2O-, kyanoskupinu, hydroxykarbonylovou skupinu, aminokarbonylovou skupinu, alkoxykarbonylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, fenylovou skupinu, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu, skupiny (R17O)2P(O) a (R17O)2P(O)-O-, kde R17 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 18 atomy uhlíku, arylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku nebo arylalkylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 8 atomy uhlíku v alkylové části, a tetrazolylovou skupinu.
V případě monosubstituovaných fenylových zbytků se substituent může nacházet v poloze 2, nebo 4, přičemž jsou výhodné polohy 3 a 4. Pokud je fenylová skupina dvakrát substituovaná, mohou být substituenty ve vzájemné poloze 1,2, 1,3 nebo 1,4. Výhodné jsou dvakrát substituované fenylové zbytky, které mají oba substituenty umístěné v poloze 3 a 4, vzhledem k místu navázání.
Arylovými skupinami mohou být dále mono- nebo polycyklické aromatické kruhové systémy, ve kterých může být 1 až 5 atomů uhlíku nahrazeno 1 až 5 heteroatomy, jako je například 2-pyridylová, 3-pyridylová, 4-pyridylová, pyrrolylová, furylová, thienylová, imidazolylová, pyrazolylová, oxazolylová, izoxazolylová, thiazolylová, izothiazolylová, tetrazolylová, pyridylová, pyrazinylová, pyrimidinylová, indolylová, izoindolylová, indazolylová, ftalazinylová, chinolylová, izochinolylová, chinoxalinylová, chinazolinylová, cinnolinylová nebo β-karbolinylová skupina, nebo benzoanelované, cyklopenta-, cyklohexa- nebo cykloheptaanelované deriváty těchto skupin.
Tyto heterocykly mohou být substituovány stejnými substituenty jako výše uvedené karbocyklické arylové systémy.
Z těchto arylových skupin jsou výhodné mono- nebo bicyklické aromatické kruhové systémy s 1 až 3 heteroatomy vybranými ze skupiny zahrnující dusík, kyslík a síru, které mohou být substituované 1 až 3 substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, atom fluoru, atom chloru, nitroskupinu, aminoskupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyskupinu, alkoxykarbonylové skupiny s 1 až atomy uhlíku v alkoxylové části, fenylovou skupinu, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu a benzylovou skupinu.
Obzvláště výhodné jsou zde mono- nebo bicyklické aromatické pěti- až desetičlenné kruhové systémy s 1 až 3 heteroatomy vybranými ze skupiny zahrnující dusík, kyslík a síru, které mohou být substituované 1 až 2 substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylovou skupinu, fenoxyskupinu, benzylovou skupinu a benzyloxyskupinu.
Co bylo uvedeno výše platí rovněž pro dvouvazné zbytky odvozené od alkylových, cykloalkylových a arylových skupin, jak jsou alkandiylové, alkendiylové, alkindiylové, cykloalkandiylové a arylenové skupiny.
Výhodné jsou rovněž sloučeniny obecného vzorce I, které nesou lipofilní zbytek R4, R5, R6 nebo R7, jako například benzyloxykarbonylaminoskupinu atd.
-6CZ 289696 B6
Fyziologicky přijatelnými solemi sloučenin obecného vzorce I jsou obzvláště farmaceuticky použitelné nebo netoxické soli. Takovéto soli mohou být například v případě sloučenin obecného vzorce I které obsahují kyselé skupiny, například karboxylovou skupinu, tvořeny s alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, jako například se sodíkem, draslíkem, hořčíkem a vápníkem, jakož i s fyziologicky přijatelnými organickými aminy, jako například triethylaminem, ethanolaminem nebo tris-(2-hydroxyethyl)aminem.
Sloučeniny obecného vzorce I které obsahují bazické skupiny, například aminoskupinu, amidinoskupinu nebo guanidinoskupinu, tvoří soli s anorganickými kyselinami, jako například s kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou sírovou nebo kyselinou fosforečnou, a s organickými karboxylovými nebo sulfonovými kyselinami, jako například s kyselinou octovou, kyselinou citrónovou, kyselinou benzoovou, kyselinou maleinovou, kyselinou filmařovou, kyselinou vinnou, kyselinou methansulfonovou nebo kyselinou p-toluensulfonovou.
Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu mohou obsahovat opticky aktivní atomy uhlíku, které mohou být nezávisle na sobě v R- nebo S-konfiguraci a tudíž se mohou vyskytovat ve formě čistých enantiomeru nebo čistých diastereomerů nebo ve formě směsí enantiomerů nebo směsí diastereomerů. Předmětem vynálezu jsou jak čisté enantiomery a směsi enantiomerů tak diastereomery a směsi diastereomerů.
Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu mohou kromě toho obsahovat pohyblivé atomy vodíku, a mohou se tedy vyskytovat v různých tautomemích formách. Takovéto tautomery jsou rovněž předmětem vynálezu.
Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu se mohou, pokud W znamená skupinu R’-A-BD-C(R16)=C, vyskytovat ve formě směsí E/Z-izomerů. Předmětem vynálezu jsou jak čisté E- popřípadě Z-izomery, tak rovněž směsi E/Z-izomerů. Diastereomery, včetně E/Z-izomerů, lze chromatograficky rozdělit na jednotlivé izomery. Racemáty lze rozdělit buďto chromatograficky na chirálních fázích nebo štěpením racemátu na oba enantiomery.
Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých
W představuje skupinu R-A-B-D-C(R16), R-A-B-D-C(R16)=C
Λ nebo R—A—B—D—L---C >
Y znamená skupinu C=O nebo C=S,
Z představuje skupinu N(R°),
B představuje přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, cykloalkandiylovou skupinu s 5 až 6 atomy uhlíku, skupinu -NR2-C(O)- nebo -C(O)-NR2-,
D znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -NR2- nebo -C(O)-,
E představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
F znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu -CO-NR2nebo —CO—,
G znamená skupinu
- (CH2)q—R
P
R1 představuje skupinu R2-C(=NR2)NR2-, R2R3N-C(=NR2ý-, nebo skupinu
symboly R2 a R3 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu R8R8NR9, RSNHC(O)R9 nebo H2N-C(=NH)-NH-, symboly R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě představují vždy atom vodíku nebo skupinu R8OC(O)NHR9,
R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylalkylovou skupinu se 6 až 10 atomy uhlíku v cykloalkylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části nebo arylalkylovou skupinu s 5 až 10 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž alkylové zbytky mohou být substituovány 1 až 6 atomy fluoru, m má hodnotu 3 nebo 4, a zbývající obecné symboly mají významy definované výše, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli.
Zvláště výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých
W představuje skupinu R’-A-B-D-C(R16) nebo R’-A-B-D-CH=C, Y znamená skupinu C=O nebo C=S,
-8CZ 289696 B6
Z představuje skupinu N(R°),
A znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo skupinu -NR2-,
B představuje přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -C(O)-NR2- nebo -NR2-C(O)-,
D znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu nebo skupinu -NR2-,
E představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
F znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo skupinu -CO-NR2-,
G znamená skupinu
F R6
F ?5 F /V -- n
P
R1 představuje skupinu R2R3N-(=NR2),
H
H
symboly R2 a R3 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu R8NHR9, R8R8NR9, R®NHC(O)R9 nebo H2N-C(=NH)-NH-, symboly R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě představují vždy atom vodíku nebo skupinu R8OC(O)NHR9,
R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylalkylovou skupinu s 10 atomy uhlíku v cykloalkylová části a 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo arylalkylovou skupinu s 5 až 10 atomy uhlíku varylové části a 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, a
-9CZ 289696 B6 zbývající obecné symboly mají významy definované výše, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli.
V tomto textu se používají následující zkratky:
Boc nebo BOC: terc.butoxykarbonyl,
DCCI nebo DCC: dicyklohexylkarbodiimid,
DMF: dimethylformamid,
HOOBt: 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l ,2,3-benzotriazin,
THF: tetrahydrofuran,
HOBt: 1-hydroxybenzotriazol,
TOTU: O-[kyan(ethoxykarbonyl)methylenamino]~l,l,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborát,
DIPEA: diizopropylethylamin,
NEM: N-ethylmorfolin,
DEAD: diethylazodikarboxylát,
HOSu: N-hydroxysukcinimid,
Z: benzyloxykarbonyl,
Me: methyl,
Et: ethyl,
Bu: butyl,
Ph: fenyl,
iPr: izopropyl,
Ac: acetyl,
tBu: terc.butyl,
Bn: benzyl.
Sloučeniny obecného vzorce I lze obecně, například v průběhu konvergentní syntézy, připravit spojením dvou nebo více fragmentů, které je možné retrosynteticky odvodit z obecného vzorce I. Při přípravě sloučenin obecného vzorce I může být obecně v průběhu syntézy nutné dočasně blokovat funkční skupiny, které by v daném stupni syntézy mohly vést k nežádoucím reakcím nebo vedlejším reakcím, pomocí chránících skupin přizpůsobených dané syntéze, jak je odborníkovi známo. Způsob spojování fragmentů není omezen na následující příklady, nýbrž je obecně použitelný pro syntézy sloučenin obecného vzorce I.
Sloučeniny obecného vzorce I typu
W Ν'-E — \ / Z—Y
C(O)NR^—G ve kterých F odpovídá skupině C(O)NR2, lze připravit například kondenzací sloučeniny obecného vzorce II
(II) ,
-10CZ 289696 B6 ve kterém M představuje hydroxykarbonylovou skupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo aktivovaný derivát karboxylové kyseliny, jako chlorid kyseliny, aktivní ester nebo směsný anhydrid, se sloučeninou HNR2-G.
Ke kondenzaci dvou fragmentů za vzniku amidické vazby se výhodně používají o sobě známé kondenzační postupy chemie peptidů (viz například Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, svazek 15/1 a 15/2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974). Přitom je zpravidla nutné, aby byly přítomné nereagující aminoskupiny chráněny během kondenzace pomocí reverzibilních chránících skupin. Totéž platí pro karboxylové skupiny nepodílející se na reakci, které se výhodně používají chráněné ve formě alkylesteru s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, benzylesteru nebo terc.butylesteru. Chránění aminoskupin je možné se vyhnout, pokud jsou aminoskupiny, které mají být vytvořeny, ještě přítomné jako nitro- nebo kyanoskupiny a vytvoří se teprve po kondenzaci pomocí hydrogenace. Po kondenzaci se přítomné chránící skupiny odštěpí vhodným způsobem. Nitroskupiny (v případě guanidinového chránění), benzyloxykarbonylové skupiny a benzylesterové skupiny lze například odstranit hydrogenací. Chrániči skupiny typu terc.butylové skupiny se odštěpují působením kyseliny, zatímco 9-fluorenylmethyloxykarbonylový zbytek se odstraňuje pomocí sekundárních aminů.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek
II c představuje dioxo- nebo thioxo-oxo-substituovaný imidazolidinový kruh, ve kterém W představuje skupinu R’-A-B-D-C(R16), lze získat například:
reakcí α-aminokyselin nebo N-substituovaných α-aminokyselin nebo výhodně jejich esteru, například methyl-, ethyl-, terc.butyl- nebo benzylesteru, například sloučeniny obecného vzorce III
R1 - A- B - D- C(R16) - COOMe
R°NH (III) s izokyanátem nebo izothiokyanátem, například obecného vzorce U-E-F-G, kde U znamená izokyanátoskupinu, izothiokyanátoskupinu nebo trichlormethylkarbonylaminoskupinu, čímž se získají deriváty močoviny nebo thiomočoviny obecného vzorce IV
R1 - A - B - D - C(R1 θ) - COOMe
R°N-C-N-E-F-
kde V představuje atom kyslíku nebo síry, které se zahřátím s kyselinou za zmýdelnění esterové funkce cyklizují na sloučeniny obecného vzorce I typu
-11 CZ 289696 B6
Dalším způsobem přípravy sloučenin obecného vzorce I, ve kterých Y představuje skupinu C=O nebo C=S a W znamená skupinu R’-A-B-D-C(R16), je například reakce sloučenin obecného vzorce V
N-E-F-G
I
H (V) sfosgenem, thiofosgenem nebo odpovídajícími ekvivalenty těchto sloučenin (analogicky k práčem, které publikovali S. Goldschmidt a M. Wick, Liebigs Ann. Chem. 575 (1952), 217 — 231 a C. Tropp, Chem. Ber. 61 (1928), 1431 - 1439).
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek
O
\ / Z—Y představuje heterocyklus typu
Λ
W N fA—X kde Y znamená skupinu C=O nebo C=S a W znamená skupinu R1-A-B-D-C(R16)=C, se připraví například podle následujícího schématu 1
-12CZ 289696 B6
Schéma 1
f^-^^N-E-F-G
H
V (VII)
(Vlil) kde U znamená skupinu -NCO nebo -NCS, a V představuje atom kyslíku nebo atom síry.
Reakce sloučenin obecného vzorce VI za vzniku sloučenin obecného vzorce VII, a sloučenin obecného vzorce VII za vzniku sloučenin obecného vzorce VIII, lze provádět například 10 analogicky k práčem, které publikovali S. Chung-gi a kol., Tetrahedron Lett 1987,28 (33), 3827, nebo U. Schmidt a kol., Angew. Chemie 1984, 53.
Další možnost přípravy sloučenin obecného vzorce VIII spočívá například v tom, že se nejprve cyklizují sloučeniny obecného vzorce VII působením kyseliny na sloučeniny obecného 15 vzorce XII
-13CZ 289696 B6 (XII)
a poté se sloučeniny obecného vzorce XII Homer-Emmonsovou reakcí zreagují se sloučeninami
R16
I
R1 - A - B - D - C = O za vzniku sloučenin obecného vzorce VIII.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek
O
A W N \ /
Z—Y představuje heterocyklus typu
, lze připravit například
-14CZ 289696 B6
Schéma 2
(IX)
Q-E-F-G
----------► báze
kde Q znamená nukleofílní substitucí nahraditelnou odštěpitelnou skupinu, jako například atom halogenu, mesylátovou skupinu, tosylátovou skupinu atd.
Reakci sloučenin obecného vzorce IX za vzniku sloučenin obecného vzorce X lze provádět například analogicky k práčem, které publikovali E. Marinez a kol., Helv. Chim. Acta 1983, ío 66(1), 338, nebo E. W. Logusch a kol., J. Org. Chem. 1988, 53(17), 4069.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek
O Λ W N \ / Z—Y znamená heterocyklus typu
O
W N
A 1 R°N—Y kde Y představuje skupinu C=O nebo C=S a W znamená skupinu
, lze připravit například podle následujícího schématu 3:
-15CZ 289696 B6
Schéma 3
kde U představuje skupinu -NCO nebo -NCS, a V znamená atom kyslíku nebo atom síry.
Jiná možnost přípravy sloučenin obecného vzorce XIII spočívá například v tom, že se sloučeniny obecného vzorce VII cyklizují působením kyseliny na sloučeniny obecného vzorce ΧΠ, a poté se sloučeniny obecného vzorce XII Homer-Emmonsovou reakcí zreagují se sloučeninami R1.A.B.D.l2X xo za vzniku sloučenin obecného vzorce ΧΠΙ.
Během konvergentní syntézy může být ovšem výhodné, vždy podle významu jednotlivých substituentů R1, A, B, D atd., nejprve vytvořit heterocyklický kruhový systém, který nese jen část substituentů a poté zavést zbývající substituenty například v průběhu spojování fragmentů. Jako příklad zde lze uvést syntézu z příkladu 1:
-16CZ 289696 B6
Schéma 4
HCI / H20
------------------».
OH
báze
1) HOOBt, DCCI
OtBu
CE.COOH
Tento obecný princip není ovšem omezen na tento jediný příklad, nýbrž je obecně použitelný.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R’-A představuje skupinu
R2R3N-C( = NR2)-N-C(O)I
R2 nebo cyklický acylguanidin typu
-17CZ 289696 B6
lze připravit například tak, že se sloučenina obecného vzorce I, kde W znamená skupinu Q(O)C-B-D-C(R16)-, Q(O)C-B-D-C(R16)=C nebo
nebo
a Q představuje snadno nukleofilní substitucí nahraditelnou odštěpitelnou skupinu, podrobí reakci s odpovídajícím guanidinem nebo jeho derivátem typu
R2R3N
NH
R2 nebo cyklickým guanidinem nebo jeho derivátem
Výše uvedené aktivované deriváty kyselin typu Q(O)C, kde Q představuje alkoxyskupinu, zvláště methoxyskupinu, fenoxyskupinu, fenylthioskupinu, methylthioskupinu, 2-pyridylthioskupinu nebo zbytek dusíkatého heterocyklu, zvláště 1-imidazolylovou skupinu, se získají výhodně o sobě známým způsobem z výchozích chloridů karboxylových kyselin, kde Q znamená atom chloru, které lze zase připravit o sobě známým způsobem z výchozích karboxylových kyselin, kde Q znamená hydroxyskupinu, například reakcí s thionylchloridem.
Kromě chloridů karboxylových kyselin (kde Q znamená atom chloru) lze z výchozích karboxylových kyselin (kde Q představuje hydroxyskupinu) o sobě známým způsobem přímo připravit rovněž další aktivované deriváty kyselin typu Q(O)C~, jako například methylester (Q znamená methoxyskupinu) reakcí s plynným chlorovodíkem v methanolu, imidazolid (Q představuje 1-imidazolylovou skupinu) reakcí s karbonyldiimidazolem (srov. Staab, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1, 351 -367 (1962)) či směsné anhydridy (Q znamená skupinu C2H5OC(O)O popřípadě tosyl-O) reakcí s C1-COOC2H5 popřípadě tosylchloridem za přítomnosti triethylaminu v inertním rozpouštědle. Aktivaci karboxylových kyselin lze provádět rovněž dicyklohexylkarbodiimidem (DCCI) nebo 0-[(kyan(ethoxykarbonyl)methylen)amino]-l,l,3,3-tetramethyluronium-tetrafluorborátem („TOTU“) (Weiss a Krommer, Chemiker Zeitung98, 817 (1974)) a pomocí dalších aktivačních činidel běžných v chemii peptidů. Řada vhodných způsobů přípravy aktivovaných derivátů karboxylových kyselin obecného vzorce lije popsána v odborné literatuře,
-18CZ 289696 B6 jejíž seznam je uveden v práci J. March, Advanced Organic Chemistry, třetí vydání (John Wiley and Sons, 1985), strana 350.
Reakce aktivovaného derivátu karboxylové kyseliny typu Q(O)C- s daným guanidinem nebo jeho derivátem se provádí o sobě známým způsobem v protickém nebo aprotickém polárním ale inertním organickém rozpouštědle. Při reakci methylesteru (Q představuje methoxyskupinu) s daným guanidinem se přitom účelně používá methanol, izopropanol nebo tetrahydrofuran při teplotě od 20 °C do teploty varu těchto rozpouštědle. Většina reakcí sloučenin typu Q(O)Cs guanidinem neobsahujícím soli se výhodně provádí v aprotických inertních rozpouštědlech, jako je tetrahydrofuran, dimethoxyethan nebo dioxan. Jako rozpouštědlo lze však při reakci sloučeniny typu Q(O)C- s guanidinem upotřebit rovněž vodu za použití báze, jako například hydroxidu sodného.
Pokud Q představuje atom chloru, pracuje se výhodně za přidání činidla vázajícího kyselinu, například ve formě nadbytečného guanidinu nebo jeho derivátu, pro vázání halogenovodíkové kyseliny.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek R*-A představuje skupinu
R2
R2-C(=NR2)-N-C(O)nebo mono- nebo polycyklus obsahující systém typu
lze získat analogicky.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých F představuje skupinu C(O)NR2, lze získat například reakcí sloučeniny
O
W N - E - C (O) Q \ /
Z—Y kde Q představuje snadno nukleofílní substitucí nahraditelnou odštěpitelnou skupinu, jako například hydroxyskupinu, atom chloru, methoxyskupinu atd., se sloučeninou HR2N-G, pomocí postupů popsaných v literatuře.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek R’-A zahrnuje mono- nebo polycyklus typu
-19CZ 289696 B6 lze připravit například tak, že se sloučenina obecného vzorce I, ve kterém W znamená skupinu HR2N-B-D-C(R16)- nebo HR2N-B-D-C(R16)=C nebo
podrobí reakci s mono- nebo polycyklem typu
kde X znamená nukleofílní substitucí nahraditelnou odštěpitelnou skupinu, jako je například atom halogenu, skupina SH, SCH3, SOCH3, SO2CH3, SO3H nebo HN-NO2, pomocí postupů známých z literatury (viz například A. F. Mckay a kol., J. Med. Chem. 6 (1963) 587, Μ. N. Buchman a kol., J. Am. Chem. Soc. 71 (1949), 766, F. Jung a kol., J. Med. Chem. 34 (1991) 1110 nebo G. Sorba a kol., Eur. J. Med. Chem. 21 (1986), 391).
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých zbytek R’A představuje bis-aminotriazolový zbytek, lze připravit například jak popsali P. J. Garrett a kol., Tetrahedron 49 (1993) 165, nebo R. Lee Webb a kol., J. Heterocyclic Chem. 24 (1987) 275, pomocí následující série reakcí:
Schéma 5
CN
OPh
G (Ph - fenyl)
-20CZ 289696 B6
Postupy přípravy známé z literatury jsou popsány například v práci J. March, Advanced Organic Chemistry, třetí vydání (John Wiley and Sons, 1985).
Sloučeniny obecného vzorce I a jejich fyziologicky přijatelné soli lze podávat jako léčiva zvířatům, zvláště savcům a obzvláště lidem, a to jako takové, v jejich vzájemných směsích nebo ve formě farmaceutických přípravků, které lze používat enterálně nebo parenterálně, a které obsahují jako účinnou složku účinnou dávku alespoň jedné sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, kromě obvyklých farmaceuticky nezávadných nosných a pomocných látek. Tyto přípravky obsahují obvykle zhruba 0,5 až 90 % hmotn. terapeuticky účinné sloučeniny.
Léčiva lze podávat orálně, například ve formě pilulek, tablet, potahovaných tablet, dražé, granulí, tvrdých a měkkých želatinových kapslí, roztoků, sirupů, emulzí, suspenzí nebo aerosolových směsí. Lze je však podávat rovněž rektálně, například ve formě čípků, parenterálně, například ve formě injekčních nebo infuzních roztoků, mikrokapslí nebo tyčinek, perkutánně, například ve formě mastí nebo tinktur, nebo nasálně, například ve formě nosních sprejů.
Příprava farmaceutických preparátů se provádí o sobě známým způsobem, přičemž se používají farmaceuticky inertní anorganické a organické nosné látky. Pro přípravu pilulek, tablet, dražé a tvrdých želatinových kapslí lze použít například laktózu, kukuřičný škrob nebo jeho deriváty, mastek, kyselinu stearovou nebo její soli atd. Nosnými látkami pro měkké želatinové kapsle a čípky jsou například tuky, vosky, polotuhé a tekuté polyoly, přírodní nebo ztužené oleje atd. Jako nosná látka pro přípravu roztoků a sirupů je vhodná například voda, sacharóza, invertní cukr, glukóza, polyoly atd. Jako nosná látka pro přípravu injekčních roztoků je vhodná voda, alkoholy, glycerin, polyoly, rostlinné oleje atd. Jako nosné látky pro mikrokapsle, implantáty nebo tyčinky jsou vhodné směsné polymerizáty kyseliny glykolové a kyseliny mléčné.
Farmaceutické preparáty mohou kromě účinných látek a nosných látek obsahovat ještě pomocné látky, jako například plnidla, nadouvadla, pojidla, mazadla, smáčedla, stabilizátory, emulgátory, konzervační činidla, sladidla, barviva, činidla upravující chuť nebo aromatická činidla, zahušťovadla, ředidla, pufrační látky, dále rozpouštědla nebo solubilizační přísady nebo činidla pro dosažení pozvolného uvolňování účinné látky, jakož i soli pro změnu osmotického tlaku, činidla tvořící povlaky nebo antioxidační činidla. Mohou rovněž obsahovat dvě nebo více sloučenin obecného vzorce I nebo jejich fyziologicky přijatelných solí, a dále kromě alespoň jedné sloučeniny obecného vzorce I ještě jednu nebo více dalších terapeuticky účinných látek.
Dávka se může pohybovat v širokém rozmezí a je ji třeba v každém jednotlivém případě přizpůsobit individuálním okolnostem.
Při orálním podání lze dosáhnout účinných výsledků denní dávkou mezi 0,01 až 50 mg/kg, zvláště 0,1 až 5 mg/kg, obzvláště 0,3 až 0,5 mg/kg tělesné hmotnosti, při intravenózní aplikaci činí denní dávka obecně zhruba 0,01 až 100 mg/kg, zejména 0,05 až 10 mg/kg tělesné hmotnosti. Denní dávku lze, zvláště při aplikaci větších množství, rozdělit na více částečných dávek, například na 2,3 nebo 4 částečné dávky. Popřípadě může být potřebné, vždy podle individuálního chování, odchýlit se od uvedených dávek směrem nahoru nebo dolů.
Příklady provedení vynálezu
Produkty jsou charakterizovány pomocí hmotových spekter nebo/a NMR-spekter.
Příklad 1 (2S)-benzoyIkarbonylamino-3-[2-((4S)-3-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-ylamino)propyl)-2,5dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 1.8)
-21 CZ 289696 B6
-22CZ 289696 B6
MeOřV
SOCI2
OCN^Y0^ 0 ------------>
NEÍ3 (1.1) (12)
1) HOOBt, DCCI, DMF
2) HCI/HjO
NaOH.HjO
la) Hydrochlorid methylesteru (2S)-2-amino-5-benzyloxykarbonylaminopentanové kyseliny (sloučenina 1.2)
Ke 300 ml absolutního methanolu se v atmosféře argonu za chlazení ledem přikape 240 ml thionylchloridu, poté se přidá 40 g (150 mmol) (2S)-2-amino-5-benzyloxykarbonylamino
-23CZ 289696 B6 pentanové kyseliny (sloučeniny 1.1) a směs se nechá reagovat po dobu 3 hodin při teplotě místnosti a přes noc při teplotě 4 °C. Roztok se vylije do methylterc.butyletheru, rozpouštědlo se oddekantuje a zbytek se rozetře s diethyletherem. Po odsátí se získá 29,14 g (61 %) sloučeniny 1.2 ve formě bezbarvé pevné látky.
b) Methylester 5-benzyloxykarbonylamino-(2S)-(3-ethoxykarbonylmethylureido)pentanové kyseliny (sloučenina 1.3)
K roztoku 9,41 g (29,7 mmol) sloučeniny 1.2 ve 150 ml směsi dichlormethanu a tetrahydrofuranu v poměru 2 : 1 se za míchání při teplotě 0 °C přikape 3,83 g (29,7 mmol) ethylizokyanátoacetátu a poté 3 g (29,7 mmol) triethylaminu. Po 30 minutách při teplotě 0 °C se ledová lázeň odstraní a reakční směs se dále míchá po dobu 1,5 hodiny při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek podrobí chromatografíi na silikagelu za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se zahustí, zbytek se rozetře s etherem a odsaje. Získá se 11,02 g (83 %) sloučeniny 1.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
lc) Hydrochlorid [(4S)-(3-aminopropyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 1.4)
10.4 g (42,9 mmol) sloučeniny 1.3 se po dobu 45 minut zahřívá k varu pod zpětným chladičem se 100 ml 6N kyseliny chlorovodíkové. Roztok se zahustí, ke zbytku se přidá voda a usuší se vymražením. Získá se 7,1 g (66 %) sloučeniny 1.4 ve formě bezbarvé pevné látky.
d) Hydrochlorid [(4S)-(3-(4,5-dihydro-l H-imidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)]octové kyseliny (sloučenina 1.5)
400 mg (1,59 mmol) sloučeniny 1.4 a 388 mg (1,59 mmol) 2-(methylmerkapto)-2-imidazolinhydrojodidu se rozpustí v 5 ml vody. Hodnota pH směsi se upraví IN hydroxidem sodným na 9,0 a směs se zahřívá po dobu 2,5 hodiny na teplotu 60 °C, přičemž se hodnota pH roztoku udržuje přidáváním IN hydroxidu sodného na 9 (celková spotřeba IN hydroxidu sodného činí
3.4 ml). Reakční směs se nechá stát po dobu 3 dnů při teplotě místnosti, hodnota pH se upraví IN kyselinou chlorovodíkovou na 1, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se chromatografícky zpracuje na silikagelu za použití směsi methanolu a vody v poměru 9 : 1 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se zahustí a vysuší vymražením. Získá se 230 mg (45 %) sloučeniny
1.5 ve formě bezbarvého prášku.
le) Terc.butylester (2S)-3-amino-2-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 1.6) g (42 mmol) (2S)-3-amino-2-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny se ve směsi se 100 ml dioxanu, 100 ml izobutylenu a 8 ml koncentrované kyseliny sírové třepe po dobu 3 dnů v autoklávu v atmosféře dusíku za tlaku 2 MPa. Nadbytečný izobutylen se vypustí a ke zbylému roztoku se přidá 150 ml diethyletheru a 150 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Fáze se oddělí a vodná fáze se dvakrát extrahuje vždy 100 ml diethyletheru. Smíchané organické fáze se promyjí dvakrát vždy 100 ml vody a vysuší nad síranem sodným. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá 9,58 g (78 %) sloučeniny 1.6 ve formě světle žlutého oleje.
f) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(4,5-dihydro-lH-imidazol2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 1.7)
200 mg (0,7 mmol) sloučeniny 1.5 a 114 mg (0,7 mmol) 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l,2,3benzotriazinu (HOOBt) se suspenduje v 5 ml dimethylformamidu a při teplotě 0 °C se přidá 154 mg (0,7 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti, poté se přidá 206 mg (0,7 mmol)
-24CZ 289696 B6 sloučeniny 1.6, směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti a nechá se stát přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8 : 2 : 0,2 : 0,2 jako elučního činidla. Po odpaření a vysušení vymražením se získá 105 mg (27 %) sloučeniny 1,7 ve formě bezbarvé pevné látky.
g) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(4,5-dihydro-l H-imidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 1.8)
105 mg (0,188 mmol) sloučeniny 1.7 se rozpustí v homogenním roztoku ze 2 ml 90% kyseliny trifluoroctové a 0,2 ml 1,2-dimerkaptoethanu a směs se nechá stát po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Po odpaření ve vakuu se zbytek rozdělí mezi diethylether a vodu a vodná fáze se vysuší vymražením. Chromatografickým zpracováním na koloně Sephadex LH20 za použití směsi vody, n-butanolu a kyseliny octové v poměru 43 :4,3 :3,5 jako elučního činidla a následným vysušením vymražením se získá 45 mg (48%) sloučeniny 1.8 ve formě bezbarvé pevné látky.
Příklad 2
3-[2-((4S)-(3-(5-amino-2H-[l,2,4]triazol-3-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 2.5)
O HNZ
H2N\^N ¥ N^, / H Η Ξ
N H HN^Z O O O
(2.5)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-25CZ 289696 B6
ΒοςΟ ——----1
INNaOH,
HjOHHF
CH
1) HOOBt, DCCI.
o-H (16)
(2.2)
CF3OOOH,
----------------1
EtjSiH
I4CN
—------->
DMF, NEt,
HjNNHj, >-OH,
--------------►
NE^, Δ
Syntéza sloučenin 1.4 a 1.6 viz příklad 1.
HNZ
O
OH (2.5)
-26CZ 289696 B6
2a) [(4S)-(3-terc.butoxykarbonylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 2.1) g (23,84 mmol) sloučeniny 1.4 se rozpustí ve 350 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 2:1. Hodnota pH se upraví při teplotě 0 °C IN hydroxidem sodným na 10,5, přidá se 6,24 g (28,61 mmol) diterc.butyldikarbonátu a hodnota pH roztoku se udržuje přidáváním IN hydroxidu sodného mezi 9 a 10,5. Směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a nechá se stát přes noc při teplotě 4 °C. Hodnota pH se upraví fosfátovým pufrem na 4 a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se rozetře v methanolu, zfiltruje se a filtrát se odpaří. Po chromatografickém zpracování na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 7:3: 0,3 : 0,3 jako elučního činidla se získá 5,65 g (75 %) sloučeniny 2.1 ve formě viskózního sirupu.
2b) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-terc.butoxykarbonylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 2.2)
2.8 g (8,9 mmol) sloučeniny 2.1 a 1,45 g (8,9 mmol) 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l,2,3benzotriazinu (HOOBt) se rozpustí v 50 ml dimethylformamidu a při teplotě 0 °C se přidá 1,95 g (8,9 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Po 1 hodině při teplotě 0 °C a 1 hodině při teplotě místnosti se přidá 2,6 g (8,9 mmol) sloučeniny 1.6, směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti a poté se reakční směs nechá stát přes noc při teplotě místnosti. Po zfiltrování se filtrát zahustí, zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát, organická fáze se vysuší nad síranem sodným, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a heptanu v poměru 9 : 1 až 6 : 4 jako elučního činidla. Získá se 2,98 g (57 %) sloučeniny 2.2.
2c) 3-[2-((4S)-(3-aminopropyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 2.3)
2.9 g (4,9 mmol) sloučeniny 2.2 se rozpustí ve směsi 20 ml dichlormethanu, 9,8 ml kyseliny trifluoroctové a 2,35 ml triethylsilanu. Po 3,5 hodině při teplotě místnosti se směs zahustí a poté se vysuší vymražením. Zbytek se rozetře v diethyletheru, vysuší se, vykrystaluje z malého množství methanolu a rozetře se s etherem. Získá se 1,34 g (50%) sloučeniny 2.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
2d) 3-[2-((4S)-4-(3-(fenoxy-N-kyaniminokarbonylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-lyl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 2.4)
400 mg (0,73 mmol) sloučeniny 2.3 se rozpustí v 10 ml dimethylformamidu. Přidá se 0,14 ml triethylaminu a poté 190,7 mg (0,8 mmol) difenylesteru kyankarbamidové kyseliny ve 2 ml dimethylformamidu. Po 2 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí v 50 ml 5% roztoku kyseliny octové a vysuší se vymražením. Po chromatografickém zpracování na silikagelu za použití methanolu jako elučního činidla se získá 260 mg (61 %) sloučeniny 2.4.
2e) 3-[2-((4S)-(3-(5-amino-2H-[l,2,4]triazol-3-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-lyl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 2.5)
260 mg (0,45 mmol) sloučeniny 2.4 se suspenduje v 10 ml izopropanolu a přidá se 62,4 μΐ (0,45 mmol) triethylaminu. Přidá se 28,5 μΐ (0,585 mmol) hydrazinu a směs se zahřívá po dobu 10 hodin k varu pod zpětným chladičem. Poté se směs nechá stát přes noc při teplotě místnosti, sraženina se odsaje a promyje se butanolem, tetrahydrofuranem a etherem. Chromatografickým zpracováním na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, n-butanolu
-27CZ 289696 B6 a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 :3,5 jako elučního činidla a následným vysušením vymražením se získá 80 mg (34 %) sloučeniny 2.5 ve formě bezbarvé pevné látky.
Příklad 3 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(guanidinoacylaminomethyl)~2,5-dioxoimidazolidinl-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 3.11)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
(3.5) (3.6)
-28CZ 289696 B6
HOOBt, DCCI,
DMF xHCI
1. Karbonyldiimidazol, HN A
NEt3. OMF η 2ΝΓ
2. Genamidin HN 0 II II
NEt3 /Dioxan/ H2lA^
h2o
3a) Dihydrochlorid methylesteru (2S),3-diaminopropionové kyseliny (sloučenina 3.2)
K 60 ml absolutního methanolu se při teplotě -15 °C v atmosféře argonu přikape 35 ml thionylchloridu a poté se přidá 25 g (240 mmol) hydrochloridu (2S),3-diaminopropionové kyseliny (sloučeniny 3.1) a dalších 100 ml methanolu. Po 16 hodinách míchání při teplotě místnosti se směs zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Roztok se vylije do diizopropyletheru, rozpouštědlo s oddekantuje a zbytek se podrobí chromatografií na silikagelu
-29CZ 289696 B6 za použití methanolu jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se zahustí a zbytek se rozetře s diizopropyletherem. Po odsátí sraženiny a vysušení nad parafínem se získá 26,3 g (57 %) sloučeniny 3.2 jako světle žluté pevné látky.
3b) Hydrochlorid methylesteru (2S)-amino-3-terc.butoxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 3.3)
K suspenzi 26 g (220 mmol) sloučeniny 3.2 ve 4,4 1 dichlormethanu se při teplotě -78 °C přidá 75,8 ml triethylaminu a poté po kapkách roztok 26,78 g (123 mmol) diterc.butyl-dikarbonátu ve 220 ml dichlormethanu, směs se nechá zahřát na teplotu 0 °C a míchá se při této teplotě po dobu 1,5 hodiny. Reakční směs se zahustí a podrobí se chromatografii na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a methanolu v poměru 20:1 jako elučního činidla. Získá se 15,67 g (58%) sloučeniny 3.3 ve formě světle žlutého sirupu.
3c) methylester (2S)-ethyloxykarbonylmethylaminokarbonylamino-3-terc.butoxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 3.4)
K suspenzi 10 g (45,8 mmol) sloučeniny 3.3 ve 100 ml tetrahydrofuranu se přikape 5,13 ml (45,8 mmol) ethylizokyanátoacetátu, směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se chromatografícky zpracuje na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a methanolu v poměru 20 : 1 jako elučního činidla. Získá se 13,44 g (85 %) sloučeniny 3.4 ve formě světle žlutého oleje.
3d) Hydrochlorid 2-[((4S)-(aminomethyl)-2,5-dioxoimidazolidin]octové kyseliny (sloučenina 3.5)
13,2 g (34 mmol) sloučeniny 3.4 se zahřívá kvaru pod zpětným chladičem se 150 ml 6N kyseliny chlorovodíkové po dobu 45 minut. Roztok se zahustí a zbytek se vysuší vymražením. Po chromatografickém zpracování na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 7 : 3 jako elučního činidla a vysušení frakcí obsahujících produkt vymražením se získá 6,4 g (84 %) sloučeniny 3.5 ve formě bezbarvé pevné látky.
3e) 2-[((4S)-(terc.butoxykarbonylaminomethyl)-2,5-dioxoimidazolidin]octová kyselina (sloučenina 3.6)
K roztoku 4,4 g (19,7 mmol) sloučeniny 3.5 ve 300 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 2 : 1 se při teplotě 0 °C přidává IN hydroxid sodný až do dosažení hodnoty pH 10,5 (spotřeba činí 26 ml), poté se přidá 5,16 g (23,6 mmol) diterc.butyldikarbonátu a hodnota pH směsi se udržuje mezi 9,5 a 10,5 přidáváním IN hydroxidu sodného. Po 1 hodině při teplotě 0 °C a 2 hodinách při teplotě místnosti se směs nechá stát přes noc při teplotě 4 CC. Hodnota pH se upraví na 7 pomocí IN kyseliny chlorovodíkové a poté fosfátovým pufrem na 4.1. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se rozetře s methanolem, zfiltruje se, filtrát se odpaří a zbytek se chromatografícky zpracuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8 : 2 : 0,2 : 0,2 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší vymražením. Výtěžek sloučeniny 3.6 činí 3,6 g (64 %). Získá se ve formě bezbarvé pevné látky.
3f) Hydrochlorid methylesteru 3-amino-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 3.7)
K 50 ml absolutního methanolu se při teplotě -15 °C přikape 7,4 ml (100,8 mmol) thionylchloridu. Přidá se 12 g (50,4 mmol) hydrochloridu 3-amino-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny a poté 40 ml absolutního methanolu. Po míchání po dobu 45 minut při teplotě -15 °C a 20 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs vylije do diizopropyletheru,
-30CZ 289696 B6 sraženina se odsaje a vysuší ve vysokém vakuu. Získá se 14,18 g (98 %) sloučeniny 3.7 ve formě bezbarvé pevné látky.
3g) Methylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(terc.butoxykarbonylaminomethyl)2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 3.8)
K roztoku 1,5 g (5,2 mmol) sloučeniny 3.6 ve 20 ml absolutního dimethylformamidu se při teplotě 0°C přidá 848 mg (5,2 mmol) 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l,2,3-benzotriazinu (HOOBt) a poté 1,144 g (5,2 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Po 1 hodině míchání při teplotě 0 °C a 1 hodině při teplotě místnosti se přidá 1,5 g (5,2 mmol) sloučeniny 3.7 a 0,67 ml N-ethylmorfolinu a směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Sraženina se odfiltruje, filtrát se zahustí, zbytek se vyjme ethylacetátem, postupně se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem směsi hydrogensíranu draselného a síranu draselného a vodou a organická fáze se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek podrobí chromatografíi na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a heptanu v poměru 6 : 4 až ethylacetátu jako elučního činidla, čímž se získá 1,75 g (65 %) sloučeniny 3.8.
3h) Sůl methylesteru 3-[((4S)-(aminomethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)benzyloxykarbonylamino-propionové kyseliny s kyselinou trifluoroctovou (sloučenina 3.9)
1,7 g (3,26 mmol) sloučeniny 3.8 v 6,7 ml dichlormethanu, 3,3 ml kyseliny trifluoroctové a 0,78 ml triethylsilanu se míchá po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Roztok se vylije do diethyletheru a sraženina se odfiltruje. Získá se 1,54 g (88 %) sloučeniny 3.9 ve formě bezbarvé pevné látky.
3g) Methylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(guanidinoacylaminomethyl)-2,5dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 3.10)
K roztoku 500 mg (0,93 mmol) sloučeniny 3.9 v 10 ml absolutního dimethylformamidu se přidá 0,129 ml triethylaminu a poté při teplotě 0 °C roztok 152 mg (0,93 mmol) karbonyldiimidazolu v 10 ml absolutního dimethylformamidu. Po 4 hodinách míchání při teplotě místnosti se přidá 89 mg (1,86 mmol) guanidinu, směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8,5 : 1,5 : 0,15 : 0,15 jako elučního činidla. Po zahuštění frakcí obsahujících produkt a vysušení vymražením se získá 300 mg (64 %) sloučeniny 3.10 ve formě bezbarvé pevné látky.
3h) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(guanidinoacylaminomethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 3.11)
180 mg (0,32 mmol) sloučeniny 3.10 se rozpustí ve směsi dioxanu, vody a triethylaminu v poměru 1 : 1 : 1. Po 16 hodinách při teplotě místnosti se směs odpaří na rotační odparce, přidá se voda a směs se vysuší vymražením. Zbytek se podrobí chromatografíi na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8 : 2 : 0,2 : 0,2 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří na rotační odparce, přidá se k nim voda, vysuší se vymražením a zbytek se poté rozetře s ethylacetátem a diethyletherem. Po odsátí se získá 62 mg (39 %) sloučeniny 3.11 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 493 (M+H)+
-31 CZ 289696 B6
Příklad 4 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S}-(3-(2-pyrimidylamino)propyl)-2,55 dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 4.3)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
(1-4)
DMF
cf3cooh
-32CZ 289696 B6
4a) (2-[((4S)-(3-(2-pyrimidylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin]octová kyselina (sloučenina 4.1)
Směs 1 g (4 mmol) sloučeniny 1.4, 632 mg (4 mmol) 2-brompyrimidinu a 2,04 ml (12 mmol) diizopropylethylaminu (DIPEA) v 9 ml dimethylformamidu se zahřívá po dobu 26 hodin na teplotu 80 °C. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografíi na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8 :2 : 0,2 : 0,2 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a získá se 144 mg (12 %) sloučeniny 4.1 ve formě bezbarvé pevné látky.
4b) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(2-pyrimidylamino)propyl)2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 4.2)
K roztoku 128 mg (0,44 mmol) sloučeniny 4.1, 128 mg (0,44 mmol) sloučeniny 1.6, 60 mg (0,44 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu a 0,035 ml N-ethylmorfolinu v 5 ml dimethylformamidu se přidá 97 mg (0,44 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Po 1 hodině při teplotě 0 °C a 16 hodinách při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografíi na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9,5 : 5 : 0,05 : 0,05 jako elučního činidla. Získá se 180 mg (72 %) sloučeniny 4.2.
4c) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(2-pyrimidylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 4.3)
170 mg (0,3 mmol) sloučeniny 4.2 se rozpustí ve směsi ze 2 ml 90% kyseliny trifluoroctové a 0,2 ml 1,2-dimerkaptoethanu. Po 1 hodině při teplotě místnosti se směs vylije do diethyletheru, sraženina se odcentrifuguje, znovu se suspenduje v diethyletheru a opět se centrifuguje. Po rozpuštění ve vodě a vysušení vymražením se zbytek podrobí chromatografíi na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 : 3,5 jako elučního činidla. Po vysušení vymražením se získá 76 mg (49 %) sloučeniny 4.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 514 (M+H)+
Příklad 5 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-benzimidazolyl-2-amino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 5.5)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-33 CZ 289696 B6
HjN
(1.4)
H2, Pd/C,
------------>
MeOH/NHg
h2o,s ------------------->.
EtOH, Δ
(5.3)
-34CZ 289696 B6
5a) (2S)-[(4S)-(3-(3-(2-nitrofenyl)thioureido)propyl)-2,5-dioxoimÍdazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 5.1)
K roztoku 4,5 g (17,88 mmol) sloučeniny 1.4 ve 100 ml dimethylformamidu se při teplotě 0 °C přidá 4,96 ml (35,76 mmol) triethylaminu a poté 3,22 g (17,88 mmol) 2-nitrofenylizothiokyanátu. Po 4 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a 10% kyselinu octovou. Vodná fáze se dvakrát extrahuje dichlormethanem a organická fáze se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografií na silikagelu. Frakce obsahující produkt se odpaří a získá se 3,16 g (45 %) sloučeniny 5.1.
5b) 2-[(4S)-(3-(3-(2-aminofenyl)thioureido)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 5.2)
Ke 4,6 g (11,6 mmol) sloučeniny 5.1 ve 40 ml absolutního ethanolu se přidá 3,8 g 10% palladia na uhlí. Přidá se 200 ml amoniakem nasyceného ethanolu a směs se hydrogenuje po dobu 6 hodin při teplotě místnosti. Katalyzátor se odfiltruje, filtrát se zahustí a zbytek (1,85 g) se použije přímo k syntéze sloučeniny 5.3.
5c) 2-[(4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 5.3)
1,85 g sloučeniny 5.2 ve 35 ml ethanolu se po dobu 16 hodin zahřívá kvaru pod zpětným chladičem se 3 g oxidu rtuťnatého a 730 mg síry. Směs se zfiltruje a zbytek se pětkrát vytváří s vodou. Spojené vodné fáze se vysuší vymražením. Získá se 814 mg (21 %, vztaženo na sloučeninu 5.1) sloučeniny 5.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
5d) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-benzimidazolyl-2-amino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 5.4)
Syntéza sloučeniny 5.4 se provádí reakcí sloučeniny 5.3 se sloučeninou 1.6 jak je popsáno v příkladu 4 při přípravě sloučeniny 4.2 ze sloučenin 4.1 a 1.6. Z 205 mg (0,56 mmol) sloučeniny
-35CZ 289696 B6
5.3 se získá po chromatografickém zpracování surového produktu na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9 : 1 : 0,1 : 0,1 a 8 : 2 : 0,2 : 0,2 jako elučního činidla a následujícím vysušení frakcí obsahujících produkt vymražením 255 mg (75 %) sloučeniny 5.4 ve formě bezbarvé pevné látky.
5e) (2S)-benzyloxykarbonylammo-3-[((4S)-(3-benzimidazolyl-2-amino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 5.5)
250 mg (0,41 mmol) sloučeniny 5.4 se po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti míchá ve 3 ml 90% kyseliny trifluoroctové. Kyselina trifluoroctová se odstraní ve vakuu, ke zbytku se přidá voda a vysuší se vymražením. Zbytek se podrobí chromatografií na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 : 3,5 jako elučního činidla. Po vysušení vymražením se získá 155 mg (66 %) sloučeniny 5.5 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 552 (M+H)+
Příklad 6 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(cis-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-lH-benzimidazol-2ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 6.4)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
HCI
(1.4) (6.1)
DIPEA,
(6-2)
HCI
-36CZ 289696 B6
DCCI, ΗΟΟΘΤ, OMF
6a) Hydrochlorid [(4S)-(3-(cis-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 6.2)
K roztoku 298 mg (1 mmol) sloučeniny 6.1 (připravené jak popsali G. D. Hartmann a kol., WO 95/32710, str. 115) a 215 mg (1 mmol) sloučeniny 1.4 v 6 ml dimethylformamidu se přidá 0,51 ml diizopropylethylaminu a 6 kapek vody a směs se míchá po dobu 24 hodin při teplotě 100 °C. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9: 1 : 0,1 : 0,1 jako elučního činidla a spojené frakce obsahující produkt se poté podrobí chromatografii na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 : 3,5 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se spojí a vysuší vymražením. Po převedení na hydrochlorid se získá 130 mg (35 %) sloučeniny 6.2 ve formě bezbarvé pevné látky.
6b) Sůl terc.butyletheru (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(cis-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny s kyselinou octovou (sloučenina 6.3)
Syntéza sloučeniny 6.3 se provádí reakcí sloučeniny 6.2 se sloučeninou 1.6 jak je popsáno v příkladu 4 při přípravě sloučeniny 4.2 ze sloučenin 4.1 a 1.6. Ze 130 mg (0,35 mmol) sloučeniny 6.2 se získá po chromatografíckém zpracování surového produktu na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8 : 2 : 0,2 : 0,2 a poté 9:1: 0,1 :0,1 jako elučního činidla a následujícím vysušení frakcí obsahujících produkt vymražením 45 mg (19 %) sloučeniny 6.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
6c) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(cis-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 6.4) mg (0,168 mmol) sloučeniny 6.3 se míchá v 1 ml 90% kyseliny trifluoroctové po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Po odstranění kyseliny trifluoroctové ve vakuu a vyčištění surového produktu pomocí preparativní vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na
-37CZ 289696 B6
RP18 a následujícího vysušení frakcí obsahujících produkt vymražením se získá 13 mg (14 %) sloučeniny 6.4 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 558 (M+H)+
Příklad 7 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(N'-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazino10 karbonylmethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 7.8)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
1. KOCN.
-----------------------------------------------------------------------------1
NaOH, H2o. δ
2. konc. HC1
(7.2)
(7.4)
-38CZ 289696 B6
7a) (4S)-karboxymethyl-2,5-dioxoimidazolidin (sloučenina 7.1)
K suspenzi 10 g (75 mmol) kyseliny L-asparagové ve vodě se při teplotě 80 °C za míchání přidá
5,5 ml 11,7N hydroxidu sodného a 7,5 g (92,5 mmol) kaliumkyanátu. V průběhu 1 hodiny se postupným přidáváním koncentrované kyseliny chlorovodíkové při teplotě 85 °C udržuje pH na hodnotě 7 (spotřeba činí 1,5 ml). Poté se hodnota pH reakční směsi upraví 5,5 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové na 3,5. Přidá se dalších 9,5 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové,
-39CZ 289696 B6 směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě 85 °C a reakční roztok se nechá stát po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Sraženina se odsaje, promyje se malým množstvím ledově chladné vody a vysuší se nad oxidem fosforečným. Získá se 8,49 g (72 %) sloučeniny 7.1 ve formě bezbarvé pevné látky.
7b) (4S)-methoxykarbonyl-2,5-dioxoimidazolidin (sloučenina 7.2)
K 70 ml methanolu se při teplotě -15 °C přidá 7,9 ml (107 mmol) thionylchloridu a 8,47 g (53,5 mmol) sloučeniny 7.1 a reakční směs se míchá po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Poté se roztok vylije do diethyletheru, sraženina se odsaje a promyje se diethyletherem. Po vysušení ve vysokém vakuu se získá 5,12 g (56%) sloučeniny 7.2 ve formě bezbarvé pevné látky. Odpařením etherické fáze a rozetřením zbytku s diethyletherem se získá po vysušení ve vysokém vakuu dalších 2,79 g (30 %) sloučeniny 7.2.
7c) Terc.butylester [(4S)-methoxykarbonylmethyl-2,5-dioxoimidazolidin]octové kyseliny (sloučenina 7.3)
Ksuspenzi 1,02 g (23,2mmol) natriumhydridu (55% voleji) ve 20ml absolutního dimethylformamidu se v atmosféře argonu za chlazení ledem přidají 4 g (23,2 mmol) sloučeniny 7.2. Poté co se přestane vyvíjet vodík se přidá 4,53 g (23,2 mmol) terc.butylesteru bromoctové kyseliny. Po 1 hodině míchání při teplotě 0 °C a 2 hodinách při teplotě místnosti a stání přes noc se rozpouštědlo odstraní a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 40 :1 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a zbytek se rozetře s diethyletherem. Získá se 4,21 g (63 %) sloučeniny 7.3.
7d) [(4S)-methoxykarbonylmethyl-2,5-dioxoimidazolidin]octová kyselina (sloučenina 7.4)
4,2 g (14,67 mmol) sloučeniny 7.3 se rozpustí v 50 ml 90% kyseliny trifluoroctové. Po 1 hodině míchání při teplotě místnosti se kyselina trifluoroctová odstraní ve vakuu a zbytek se vysuší vymražením. Získá se 3,17 g (94 %) sloučeniny 7.4.
7e) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-methoxykarbonylmethyl-2,5dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 7.5)
Syntéza sloučeniny 7.5 se provádí reakcí sloučeniny 7.4 se sloučeninou 1.6 jak je popsáno v příkladu 4 při přípravě sloučeniny 4.2 ze sloučenin 4.1 a 1.6. Z 1 g (4,3 mmol) sloučeniny 7.4 se získá po chromatografickém zpracování surového produktu na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 20 : 1 a poté 40 :1 jako elučního činidla a následujícím odpaření frakcí obsahujících produkt 1,72 g (79 %) sloučeniny 7.5.
7f) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-karboxymethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 7.6)
Roztok 700 mg (1,38 mmol) sloučeniny 7.5 ve směsi vody, dioxanu a triethylaminu v poměru 1 :1 :1 se míchá po dobu 6 hodin při teplotě 50 °C. Reakční směs se nechá stát přes noc při teplotě místnosti, poté se odpaří a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9: 1 :0,1 :0,1 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 364 mg (54 %) sloučeniny 7.6.
7g) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(N'-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazinokarbonylmethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 7.7)
K roztoku 100 mg (0,2 mmol) sloučeniny 7.6 a 33,1 mg (0,2 mmol) 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l,2,3-benzotriazinu (HOOBt) v 5 ml dimethylformamidu se při teplotě 0 °C přidá 44,7 mg
-40CZ 289696 B6 dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Po 1 hodině při teplotě 0 °C a 1 hodině při teplotě místnosti se přidá 36,8 mg (0,2 mmol) 2-hydrazino-2-imidazol-hydrobromidu a směs se míchá po dobu 3 dnů při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 8 : 2 : 0,2 : 0,2 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší vymražením. Získá se 60 mg (52 %) sloučeniny 7.7.
7h) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(N'-(4,5-dihydro-1 H-imidazol-2-yl)hydrazinokarbonylmethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 7.8) mg (0,096 mmol) sloučeniny 7.7 se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti v 1 ml 90% kyseliny trifluoroctové. Po odstranění kyseliny trifluoroctové ve vakuu a vyčištění surového produktu pomocí preparativní vysoceůčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na RP18 a následujícím vysušení frakcí obsahujících produkt vymražením se získá 10,6 mg (21 %) sloučeniny 7.8 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 519 (M+H)+
Příklad 8 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-(2,5-dioxo-(4S)-(N'-(l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)hydrazinokarbonylmethyl)imidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 8.2)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
O
Hi
O (7.6)
N---NH2 + HBr >
(8.1)
HOOBt. DCCI, NEM . DMF
-41 CZ 289696 B6
8a) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-(2,5-dioxo-(4S)-(N'-( 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)hydrazinokarbonylmethyl)imidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 8.1)
K roztoku 130 mg (0,26 mmol) sloučeniny 7.6 a 43 mg (0,26 mmol) 3-hydroxy-4-oxo-3,4dihydro-l,2,3-benzotriazinu (HOOBt) v 5 ml dimethylformamidu se při teplotě 0 °C přidá 58 mg dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI), směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti a poté se přidá 0,034 ml N-ethylmorfolinu (NEM) a ř2 mg (0,26 mmol) 2-hydrazino-I,4,5,6-tetrahydropyrimidin-hydrobromidu. Po 28 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru
8,5 : 1,5 :0,15 : 0,15 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší vymražením. Získá se 80 mg (52 %) sloučeniny 8.1.
8b) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-(2,5-dioxo-(4S)-(N'-( 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin2-yl)hydrazinokarbonylmethyl)imidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 8.2)
Roztok 80 mg (0,136 mmol) sloučeniny 8.1 ve 4 ml 90% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti, odpaří se ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografií na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 :4,3 :3,5 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vyčistí se pomocí preparativní vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na RP18. Po odpaření frakcí obsahujících produkt a vysušení vymražením se získá 41,9 mg (59 %) sloučeniny 8.2 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 533 (M+H)+
Příklad 9
2-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(N'-(4,5-dihydro-lH-imidazol-2-yl)hydrazinokarbonyl)ethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 9.1)
(9.1)
-42CZ 289696 B6
Syntéza sloučeniny 9.1 se provádí, vycházeje zL-glutamové kyseliny, jak je popsáno v příkladu 7.
Hmotová spektrometrie ES(+): 533 (M+H)+
Příklad 10
3-[(2-((4S)-(8-(10H-benzimidazol-2-ylmethyl)karbamoyl)methyl)-2,5-dioxoimidazolidin-lyl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 10.2)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
HOOBt, DCCI, DIPEA, DMF
90%CF3COOH —--------►
10a) Terc.butylester 3-[(2-((4S)-(8-(lH-benzimidazol-2-ylmethyl)karbamoyl)methyl)-2,5dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 10.1)
K roztoku 430 mg (0,87 mmol) sloučenin 7.6 a 142,5 mg (0,87 mmol) 3-hydroxy-4-oxo-3,4dihydro-l,2,3-benzotriazinu (HOOBt) v 10 ml dimethylformamidu se při teplotě 0°C přidá 192 mg dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Po 1 hodině míchání při teplotě 0 °C a 1 hodině při teplotě místnosti se přidá 231 mg (1,04 mmol) 2-(aminomethyl)benzimidazolu a 0,5 ml diizopropylethylaminu a směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Směs se nechá stát
-43CZ 289696 B6 přes noc, poté se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru
9,5 :0,5 : 0,05 :0,05 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 390 mg (72 %) sloučeniny 10.1.
10b) 3-[(2-((4S}-(8-(lH-benzimidazol-2-ylmethyl)karbamoyl)methyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 10.2)
360 mg (0,579 mmol) sloučeniny 10.1 se rozpustí v 10 ml 95% kyseliny trifluoroctové. Po 30 minutách při teplotě místnosti se roztok odpaří ve vakuu, zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu, vodná fáze se extrahuje ethylacetátem a vysuší se vymražením. Zbytek se podrobí chromatografii na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 :4,3 :3,5 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší se vymražením. Získá se 135 mg (40 %) sloučeniny 10.2 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 566 (M+H)+
Příklad 11 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-b]pyridin-2-ylamino)propyl)2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 11.7)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-44CZ 289696 B6
OH + HCI
SOCI2/ MeOH
------------>
,NaHCOj
CH2CI2
(11.2)
(11.3)
HgO, S
---------->
EtOH, Δ
-45CZ 289696 B6
TOTU, DIPEA, DMF
O+ 95% kyselina trifluoroctové
HNZ
O
(11.7) la) Hydrochlorid methylesteru [4-(3-aminopropyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 11.1)
Ke 100 ml methanolu se při teplotě -15 °C přidá 12,5 ml (107 mmol) thionylchloridu) a 21,5 g (85,4 mmol) sloučeniny 1.4 a reakční směs se míchá po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Poté se roztok vylije do diethyletheru, sraženina se odsaje a promyje se diethyletherem. Po vysušení ve vysokém vakuu se získá 20,52 g (90 %) sloučeniny 11.1 ve formě bezbarvé pevné látky.
-46CZ 289696 B6
I lb) Methylester [4-(3-izothiokyanatopropyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 11.2)
K suspenzi 2,65 g (10 mmol) sloučeniny 11.1 ve 30 ml dichlormethanu se přidá 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po 10 minutách míchání za chlazení ledem se k methylenchloridové fázi přidá 1,53 ml (20 mmol) thiofosgenu. Směs se míchá po dobu minut za chlazení ledem, fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje dvakrát dichlormethanem. Smíchané organické fáze se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá 2,04 g (75 %) sloučeniny 11.2.
lc) Methylester [(4S-(3-(3-(3-aminopyridin-2-yl)thioureido)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 11.3)
Roztok 1,66 g (6,11 mmol) sloučeniny 11.2 a 667 mg (6,11 mmol) 2,3-diaminopyridinu v 18 ml absolutního ethanolu se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a poté po dobu 2 hodin za varu pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9:1:0,1:0,1 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt a vysušení vymražením se získá 1,67 g (72 %) sloučeniny 11.3.
lid) Methylester [(4S)-(3-(3H-imidazo[4,5]pyridin-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 11.4)
K roztoku 1,43 g (3,75 mmol) sloučeniny 11.3 v 80 ml ethanolu se přidá 1,62 g (7,51 mmol) oxidu rtuťnatého a 24 mg síry a směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Po filtraci a odpaření filtrátu ve vakuu se získá 1,15 g (89 %) sloučeniny 11.4.
le) Hydrochlorid [(4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-b]pyridin-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 11.5)
286 mg (0,83 mmol) sloučeniny 11.4 v 10 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se míchá po dobu 5 hodin při teplotě 50 °C. Po filtraci se filtrát naředí vodou a vysuší se vymražením. Získá se 277 mg (91 %) sloučeniny 11.5 ve formě bezbarvé pevné látky.
f) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-b]- pyridin-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 11.6)
K roztoku 267 mg (0,72 mmol) sloučeniny 11.5 a 213 mg (0,72 mmol) sloučeniny 1.6 v 10 ml dimethylformamidu se přidá 237 mg (0,72 mmol) 0-[kyan(ethoxykarbonyl)methylenamino]1,1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluorborátu (TOTU) a 0,245 ml diizopropylethylaminu (DIPEA) a směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátová fáze se extrahuje dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát vodou. Organická fáze se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci a odpaření filtrátu ve vakuu se získá 425 mg (97 %) sloučeniny 11.6.
lig) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-b]pyridin-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 11.7)
420 mg (0,69 mmol) sloučeniny 11.6 se rozpustí v 10 ml 95% kyseliny trifluoroctové. Po 15 minutách při teplotě místnosti se roztok odpaří ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na koloně Sephadex LH20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 : 3,5 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší se vymražením. Získá se 234 mg (62 %) sloučeniny 11.7 ve formě bezbarvé pevné látky.
-47CZ 289696 B6
Hmotová spektrometrie ES(+): 553 (M+H)+
Příklad 12 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-(3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-ylamino)propyl)2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 12.3)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
OMe
1. HgO, S, EtOH
-------------►
Δ
2. konc. HC1
TOTU, DIPEA, DMF
2. 95%CF3COOH
(12.3)
-48CZ 289696 B6
Výchozí látkou pro syntézu sloučeniny 12.3 je sloučenina 11.2, která se analogicky jako při přípravě sloučeniny 11.3 podrobí reakci s 3,4-diaminopyridinem za vzniku sloučeniny 12.1. Posledně uvedená látka se poté analogicky jako při přípravě sloučenin 11.4 a 11.5 cyklizuje 5 oxidem rtuťnatým a podrobí reakci s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou za vzniku sloučeniny 12.2. Sloučenina 12.2 se podrobí reakci se sloučeninou 1.6, jako je popsáno v případě přípravy sloučeniny 11.6, a takto získaný produkt se rozštěpením terc.butylesteru převede na sloučeninu 12.3, jako je popsáno v případě syntézy sloučeniny 11.7 ze sloučeniny 11.6.
ío Hmotová spektrometrie ES(+): 553 (M+H)+
Příklad 13 (2S)-(adamantan-l-ylmethoxykarbonylamino)-3-[((4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amino)propyI)5-oxo-2-thioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 13.7)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-49CZ 289696 B6
-50CZ 289696 B6
(13.7)
13a) Methylester 5-benzyloxykarbonylamino-(2S)-methoxykarbonylmethylaminothiokarbonylamino-5-pentanové kyseliny (sloučenina 13.1)
K roztoku 6,32 g (20 mmol) H-Om(Z)-OMe x HCI (Bachem) ve 40 ml dimethylformamidu se při teplotě 0 °C přidá 2,62 g (20 mmol) methylesteru izothiokyanatooctové kyseliny a 2,3 g (20 mmol) N-ethylmorfolinu (NEM). Po 20 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, zbytek se vyjme dichlormethanem a dichlormethanový roztok se 10 dvakrát extrahuje vodou. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným, filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá sloučenina 13.1, která se použije přímo pro syntézu sloučeniny 13.2.
13b) Hydrochlorid [(4S)-(3-aminopropyl)-5-oxo-2-thioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny 15 (sloučenina 13.2)
Suspenze sloučeniny 13.1 ve 150 ml 6N kyseliny chlorovodíkové se míchá po dobu 5 hodin při teplotě 50 °C. Roztok se odpaří, zbytek se dvakrát rozmíchá s diethyletherem a poté se zbytek
-51 CZ 289696 B6 vysuší ve vysokém vakuu a nakonec nad hydroxidem draselným. Získá se sloučenina 13.2, která se použije přímo k syntéze sloučeniny 13.3.
13c) 2-[(4S)-(3-(3-(2-nitrofenyl)thioureido)propyl)-5-oxo-2-thioxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 13.3)
K roztoku sloučeniny 13.2 a 3,6 g (20 mmol) 2-nitrofenylizothiokyanátu v 50 ml dimethylformamidu se za chlazení ledem přikape 2,77 ml (20 mmol) triethylaminu. Roztok se míchá přes noc při teplotě místnosti, přidá se dalších 360 mg (2 mmol) 2-nitrofenylizothiokyanátu a 0,8 ml triethylaminu a směs se míchá po dobu dalších 5 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí v ethylacetátu, ethylacetátová fáze se dvakrát promyje vodným roztokem směsi hydrogensíranu draselného a síranu draselného a vysuší se nad síranem sodným. Po filtraci se ethylacetát odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografíi na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru : 1 :0,1 :0,1 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 4,06 g (49 %, vztaženo na sloučeninu 13.1) sloučeniny 13.3.
13d) 2-[(4S)-(3-(3-(2-aminofenyl)thioureido)propyl)-5-oxo-2-thiooxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 13.4)
611 mg (1,48 mmol) sloučeniny 13.3 v 50 ml nasyceného ethanolického roztoku amoniaku se hydrogenuje po dobu 3 hodin při teplotě místnosti za použití 600 mg 10% palladia na uhlí. Po filtraci a odpaření filtrátu ve vakuu se získá 488 mg (87 %) sloučeniny 13.4.
13e) [(4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amino)propyl)-5-oxo-2-thioxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 13.5)
K roztoku 485 mg (1,27 mmol) sloučeniny 13.4 v 50 ml ethanolu se přidá 550 mg (2,54 mmol) oxidu rtuťnatého a 8,1 mg síry a směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek vyjme 10% kyselinou octovou a vysuší se vymražením. Získá se 307 mg (79 %) sloučeniny 13.5 ve formě bezbarvé pevné látky.
13f) Terc.butylester (2S)-(adamantan-l-ylmethoxykarbonylamino)-3-[((4S)-(3-(benzimidazolyl-2-amino)propyl)-5-oxo-2-thiooxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 13.6)
K roztoku 290 mg (0,834 mmol) sloučenina 13.5 a 297 mg (0,834 mmol) sloučeniny 13.11 (syntéza viz příklad 13h-k) v absolutním dimethylformamidu se přidá 273 mg (0,834 mmol) O-[kyan(ethoxykarbonyl)methylenamino]-l, 1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluorborátu (TOTU) a 0,28 ml diizopropylethylaminu (DIPEA) a směs se míchá po dobu 2,5 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se vyjme ethylacetátem a ethylacetátová fáze se extrahuje dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Po vysušení nad síranem sodným se ethylacetát odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografíi na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9,5 : 0,5 :0,05 :0,05 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 46,3 mg (8 %) sloučeniny 13.6.
13g) (2S)-(adamantan-l-ylmethoxykarbonylamino)-3-[((4S)-(3-{benzimidazolyl-2-amino)propyl)-5-oxo-2-thioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 13.7)
38,1 mg (0,056 mmol) sloučeniny 13.6 se rozpustí ve 2 ml 95% kyseliny trifluoroctové. Po minutách při teplotě místnosti se roztok odpaří ve vakuu a zbytek se vyčistí pomocí preparativní vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na RP18. Po vysušení frakcí obsahujících produkt vymražením se získá 11 mg (32 %) sloučeniny 13.7.
-52CZ 289696 B6
Hmotová spektrometrie FAB: 626 (M+H)+
Syntéza terc.butylesteru 3-amino-(2S)-(adamantan-l -ylmethoxykarbonylamino)propionové kyseliny (sloučenina 13.11)
Syntéza probíhá podle následující reakčního postupu:
HNZ
BOC20,1N NaOH
-------------->
h2o/thf
Η2» 10 % Pd/C
--------->
MeOH/HCI
Karbonyldiimidazol, DIPEA.THF
(13.10)
O
13h) Terc.butylester (2S)-ben2yloxykarbonylamino-3-terc.butoxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 13.8)
K roztoku 10 g (34 mmol) sloučeniny 1.6 v 600 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 2 : 1 se při teplotě 0 °C přidá 8,9 g (40,8 mmol) diterc.butyldikarbonátu a poté se postupně přidává IN hydroxid sodný tak, že hodnota pH roztoku leží mezi 9 a 10 (spotřeba IN hydroxidu sodného činí 32 ml). Po 3 hodinách míchání při teplotě místnosti se přidá 11 vody a směs se extrahuje třikrát diethyletherem. Po vysušení nad síranem sodným, filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 20 : 1 jako elučního činidla. Získá se 13,19 g (98 %) sloučeniny 13.8.
-53CZ 289696 B6
13i) Hydrochlorid terc.butylesteru (2S)-amino-3-terc.butoxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 13.9)
13,1 g (33,2 mmol) sloučeniny 13.8 se hydrogenuje v methanolickém roztoku chlorovodíku za použití 10% palladia na uhlí. Po uplynutí 1,5 hodiny se směs zfíltruje a filtrát se odpaří ve vakuu, čímž se získá 9,77 g (99 %) sloučeniny 13.9 ve formě bezbarvé pevné látky.
13j) Terc.butylester (2S)-(adamantan-l-ylmethoxykarbonylamino)-3-terc,butoxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 13.10)
Roztok 10,9 g (65,4 mmol) (l-hydroxymethyl)adamantanu a 10,6 g (65,4 mmol) karbonyldiimidazolu v 60 ml tetrahydrofuranu se míchá po dobu 1,5 hodiny při teplotě 50 °C. Přidá se
9.7 g (32,7 mmol) sloučeniny 13.9 ve 25 ml tetrahydrofuranu a 5,6 ml (32,7 mmol) diizopropylethylaminu (DIPEA), směs se míchá po dobu 4 hodin při teplotě 60 °C a nechá se stát přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi heptanu a ethylacetátu v poměru 7 : 3 jako elučního činidla. Získá se
8.7 g (59 %) sloučeniny 13.10 ve formě bezbarvého oleje.
13k) Terc.butylester (2S)-(adamantan-l-ylmethoxykarbonylamino)-3-aminopropionové kyseliny (sloučenina 13.11)
Roztok 8,7 g (19,22 mmol) sloučeniny 13.10 ve 180 ml směsi kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu v poměru 1 : 1 se po 1 minutě přidá do 1,5 ml ledově chladného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Roztok se extrahuje třikrát dichlormethanem a dichlormethanová fáze se poté vysuší nad síranem sodným. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá 6,35 g (94 %) sloučeniny 13.11 ve formě bezbarvé pevné látky.
Příklad 14
3-[2-((4R,S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin-lyl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 14.8)
-54CZ 289696 B6
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
O
DMF
(U.3)
Dioxan IH2O
BoCjO.
6NHCI
-------►
Δ
-55CZ 289696 B6
NEt3 , DMF
analogicky jako v příkladu 5 —* -—► ----► ((5.1)-(55)]
14a) 2-(4-oxopentyl)izoindol-l,3-dion (sloučenina 14.1)
K roztoku 14,3 ml (124,4 mmol) 5-chlor-2-pentanonu ve 100 ml dimethylformamidu se přidá 24,59 g (132,8 mmol) kalium-ftalimidu a směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti a po dobu 30 hodin při teplotě 60 °C. Po filtraci se filtrát rozdělí mezi vodu a dichlormethan. Fáze se oddělí a organická fáze se postupně promyje vodou, dvakrát 0,2N roztokem hydroxidu sodného a vodou a poté se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi heptanu a ethylacetát v poměru 6 : 4 jako elučního činidla. Po zahuštění frakcí obsahujících produkt se získá 9,8 g (34 %) sloučeniny 14.1.
14b) 5-amino-2-Oxopentan-hydrochlorid (sloučenina 14.2) g (56,2 mmol) sloučeniny 14.1 se rozpustí ve 335 ml 20% kyseliny chlorovodíkové a směs se zahřívá po dobu 6 hodin k varu pod zpětným chladičem. Směs se nechá stát přes noc při teplotě místnosti, poté se zfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu. Získá se surová sloučenina 14.2 ve formě světle žlutého oleje, a použije se přímo k syntéze sloučeniny 14.3.
14c) 5-terc.butoxykarbonylamino-2-oxopentan (sloučenina 14.3)
Sloučenina 14.2 z příkladu 14b) se rozpustí ve 110 ml dioxanu a 55 ml vody a pH roztoku se přidáním 65 ml IN hydroxidu sodného upraví na hodnotu 8,5. Při teplotě 0 °C se přidá 13,25 g (60,8 mmol) diterc.butyldikarbonátu a hodnota pH roztoku se upraví opakovaným přidáním IN
-56CZ 289696 B6 hydroxidu sodného na 8,5. Po 4,5 hodinách míchání při teplotě místnosti se dioxan odstraní ve vakuu, pH zbylého roztoku se upraví na hodnotu 2-3 přidáním roztoku hydrogensíranu draselného a roztok se extrahuje třikrát ethylacetátem. Smíchané organické fáze se promyjí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší se nad síranem sodným. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá 11,1 g (99%, vztaženo na sloučeninu 14.1) sloučeniny 14.3.
14d) (4R,S)-(3-terc.butoxykarbonylamino)propyl-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin (sloučenina 14.4)
K roztoku 10,06 g (50 mmol) sloučeniny 14.3 ve 130 ml směsi ethanolu a vody v poměru 1 : 1 se přidá 41,96 g (439,2 mmol) uhličitanu amonného a 4,2 g (65,1 mmol) kyanidu draselného a směs se zahřívá na teplotu 55 - 65 °C. Po 5,5 hodinách při této teplotě se pH reakční směsi upraví 100 ml 6N kyseliny chlorovodíkové na hodnotu 6,3 a směs se poté míchá po dobu 2 hodin. Směs se nechá stát přes noc při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Fáze se od sebe oddělí a vodná fáze se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Smíchané organické fáze se vysuší nad síranem sodným, vysoušeči činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Získá se 12,42 g (92 %) sloučeniny 14.4 ve formě bezbarvých krystalů.
14e) Ethylester [(4R,S)-(3-terc.butoxykarbonylaminopropyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina 14.5)
K roztoku 4 g (14,7 mmol) sloučeniny 14.4 ve 100 ml dimethylformamidu se v atmosféře argonu za chlazení ledem přidá 388 mg (16,1 mmol) natriumhydridu a směs se míchá po dobu 45 minut při teplotě místnosti. Přidá se 1,63 ml (14,7 mmol) ethylesteru bromoctové kyseliny, směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátová fáze se dvakrát promyje vodou. Po vysušení nad síranem sodným a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá 4,98 g (95 %) sloučeniny 14.5 ve formě světle žlutého oleje.
14f) Hydrochlorid [(4R,S)-(3-aminopropyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)]octové kyseliny (sloučenina 14.6)
4,98 g (13,9 mmol) sloučeniny 14.5 se suspenduje v 50 ml 6N kyseliny chlorovodíkové a směs se zahřívá kvaru pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Reakční směs se odpaří ve vakuu, zbytek se rozpustí ve vodě a vysuší se vymražením. Získá se sloučenina 14.6 jako surový produkt, který se použije přímo k syntéze sloučeniny 14.7.
Syntéza sloučeniny 14.7, vycházející ze sloučeniny 14.6, a sloučeniny 14.8, vycházející ze sloučeniny 14.7, se provádí analogicky jako syntéza sloučeniny 5.5, vycházející ze sloučeniny 1.4 (viz příklad 5).
Hmotová spektrometrie pro sloučeninu 14.8 ES(+): 566 (M+H)+
Příklad 15 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(6-methoxy-lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 15.3)
-57CZ 289696 B6
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
HNZ
1. J (1-6)
TOTU. DIPEA. DMF
2. 95 % CFgCOOH
Výchozí látkou pro syntézu sloučeniny 15.3 je sloučenina 11.2, která se analogicky jako při přípravě sloučeniny 11.3 podrobí reakci se 4-methoxy-ortho-fenylendiaminem při teplotě místnosti za vzniku sloučeniny 15.1. Posledně uvedená látka se poté analogicky jako při přípravě sloučenin 11.4 a 11.5 cyklizuje oxidem rtuťnatým a podrobí reakci s koncentrovanou kyselinou 10 chlorovodíkovou za vzniku sloučeniny 15.2. Sloučenina 15.2 se poté podrobí reakci se sloučeninou 1.6, jako je popsáno v případě přípravy sloučeniny 11.6, a takto získaný produkt se rozštěpením terc.butylesteru převede na sloučeninu 15.3, jako je popsáno v případě syntézy sloučeniny 11.7 ze sloučeniny 11.6.
Hmotová spektrometrie ES(+): 582 (M+H)+
-58CZ 289696 B6
Příklad 16 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(5,6-dimethoxy-lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 16.1)
Syntéza sloučeniny 16.1 se provádí jako je popsáno v případě přípravy sloučeniny 15.3, přičemž se místo l-methoxy-3,4-diaminobenzenu použije l,2-dimethoxy-4,5-diaminobenzen, který se připraví z l,2-dimethoxy-4,5-dinitrobenzenu hydrogenací za použití 10% palladia na uhlí v methanolu.
Hmotová spektrometrie ES(+): 612 (M+H)+
Příklad 17 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(3-(5,6-methylendioxybenzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 17.1)
Syntéza sloučeniny 17.1 se provádí jako je popsáno v případě přípravy sloučeniny 15.3, přičemž se místo l-methoxy-3,4-diaminobenzenu použije l,2-methylendioxy-4,5-diaminobenzen, který se připraví z l,2-methylendioxy-4,5-dinitrobenzenu hydrogenací za použití 10% palladia na uhlí v methanolu. Posledně uvedená látka se připraví z l,2-methylendioxy-4-nitrobenzenu nitrací, jak popsali D. S. Wulfman a kol., Synthesis 1978, 924.
Hmotová spektrometrie ES(+): 624 (M+H)+
Příklad 18
3-[2-((4S)-(2-(lH-benzimidazol-2-yl)ethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 18.5)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-59CZ 289696 B6
% CF3COOH
-
OH
18a) Methylester (2S)-amino-4-(2-benzimidazolyl)butanové kyseliny (sloučenina 18.1)
Sloučenina 18.1 se připraví jak popsali Han Lettre a kol., Berichte 1951, 84,719.
18b) Methylester (2S)-ethyloxykarbonylmethylaminokarbonylamino-4-(2-( 1 H-benzimidazolyl)butanové kyseliny (sloučenina 18.2)
K roztoku 4,6 g (20 mmol) sloučeniny 18.1 v absolutním dimethylformamidu se při teplotě 0 °C přidá 3,4 ml (20 mmol) diizopropylethylaminu (DIPEA) a 2,58 g (20 mmol) ethylesteru izokyanatooctové kyseliny. Po 16 hodinách při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu,
-60CZ 289696 B6 zbytek se vyjme ethylacetátem a ethylacetátová fáze se dvakrát promyje 10% roztokem kyseliny citrónové. Hodnota pH vodné fáze se upraví 2N roztokem hydroxidu draselného na 10 a extrahuje se několikrát ethylacetátem. Smíchané organické fáze se vysuší nad síranem sodným, vysoušeči činidlo se odfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu. Získá se 4,4 g (61 %) sloučeniny 18.2.
18c) [((4S)-(2-(lH-benzimidazol-2-yl)ethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octová kyselina (sloučenina 18.3)
Roztok 200 mg (0,55 mmol) sloučeniny 18.2 ve 4 ml 4N kyseliny chlorovodíkové se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek vyjme vodou a vysuší se vymražením. Získá se 160 mg (53 %) sloučeniny 18.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
18d) Terc.butylester 3-[2-((4S)-(2-(lH-benzimidazol-2-yl)ethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-lyl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropÍonové kyseliny (sloučenina 18.4)
K roztoku 160 mg (0,53 mmol) sloučeniny 18.3, 72 mg (0,53 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu (HOBt) a 156 mg (0,53 mmol) sloučeniny 1.6 v 5 ml dimethylformamidu se při teplotě 0°C přidá 0,09 ml (0,53 mmol) diizopropylethylaminu (DIPEA) a 120 mg (0,58 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI). Směs se míchá po dobu 20 minut při teplotě 0 °C a po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Sraženina se odfiltruje, filtrát se odpaří, zbytek se vyjme ethylacetátem, ethylacetátová fáze se promyje 10% roztokem hydrogenuhličitanu draselného a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek (kterým je surová sloučenina 18.4) se použije přímo pro přípravu sloučeniny 18.5.
18e) 3-[2-((4S)-(2-(lH-benzimidazol-2-yl)ethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino](2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 18.5)
Roztok surové sloučeniny 18.4 v 5 ml 95% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 20 minut při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí ve směsi terc.butanolu a vody v poměru 1:1a vysuší se vymražením. Získá se 120 mg (44%, vztaženo na sloučeninu 18.3) sloučeniny 18.5 ve formě světle žluté pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 492 (M+H)+
Příklad 19 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-guanidino-3-oxopropyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 19.3)
-61 CZ 289696 B6
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
NH
Imidazot, LIJ, DMF
% CF3COOH
------------->
19a) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[((4S)-(2-karboxyethyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 19.1)
Syntéza sloučeniny 19.1, vycházející z kyseliny L-glutamové, se provádí analogicky jako syntéza sloučeniny 7.6, vycházející z kyseliny L-asparagové (viz příklad 7).
19b) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-guanidino-3-oxopropyl)2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 19.2)
K roztoku 170 mg (2,88 mmol) guanidinu a 6,5 mg (0,09 mmol) imidazolu ve 2 ml dimethylformamidu se přidá 12,8 mg (0,09 mmol) jodidu lithného a roztok 500 mg (0,96 mmol) sloučeniny 19.1 v 5ml dimethylformamidu a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se zpracuje ethylacetátem, ethylacetátová fáze se promyje roztokem hydrogenuhličitanu draselného a vysuší se nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a získá se 30 mg surové sloučeniny 19.2, která se použije přímo pro syntézu sloučeniny 19.3.
19c) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-((4S)-(3-guanidino-3-oxopropyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 19.3)
-62CZ 289696 B6
Roztok 30 mg surové sloučeniny 19.2 v 1 ml 95% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 10 minut při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se vyčistí pomocí preparativní vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na RP18. Po odpaření frakcí obsahujících produkt a vysušení vymražením se získá 9,5 mg (2 %, vztaženo na sloučeninu 19.1) sloučeniny 19.3 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 492 (M+H)+
Příklad 20 (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-(2,5-dioxo-(4S)-(2-(l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2ylkarbamoyl)ethyl)imidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 20.2)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
HOBt, DCCI. THF
20a) Terc.butylester (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-(2,5-dioxo-(4S)-(2-(l ,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylkarbamoyl)ethyl)imidazolidin-l-yl)acetylamino]propionové kyseliny (sloučenina 20.1)
K roztoku 506 mg (1 mmol) sloučeniny 19.1 ve 4 ml absolutního tetrahydrofuranu se za chlazení ledem přidá 135 mg (1 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu (HOBt), 206 mg (1,1 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI) a směs se míchá po dobu 30 minut. Tento roztok se poté přidá k roztoku 136 mg (1 mmol) l,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-ylamin-hydrochloridu a 112 mg
-63CZ 289696 B6 terc.butoxidu draselného v dimethylformamidu a směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozetře s diethyletherem. Chromatografickým zpracováním na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 9: 1 : 0,1 : 0,1 jako elučního činidla, odpařením frakcí obsahujících produkt a vysušením vymražením se získá 90 mg (15 %) sloučeniny 20.1.
20b) (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-[2-(2,5-dioxo-(4S)-(2-( 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin2-ylkarbamoyl)ethyl)imidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 20.2)
Roztok 80 mg (0,136 mmol) sloučeniny 20.1 v 10 ml 95% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 20 minut při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí ve vodě a vysuší se vymražením. Získá se 70 mg (97 %) sloučeniny 20.2 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotové spektrometrie ES(+): 532 (M+H)'
Příklad 21
4-[(4R,S)-(4-((lH-benzimidazol-2-ylamino)methyl)fenyl}-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidinl-yl]-2-benzyloxykarbonylaminobutanová kyselina (sloučenina 21.7)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
NCHNZ
PPh3, DEAD. THF (21.10) (Bn
NC·
HNZ
OBu (21.1) (21.2)
-64CZ 289696 B6
H2, Pto2
-------►
HOAc
x HOAc
OIPEA, DMF
SnCI2 x 2 H2O
MeOH, HOAc
HgO.S ——►
EtOH, Δ
LiOH
Dioxan
-65CZ 289696 B6
21a) 2-benzyloxykarbonylamino-4-[(4R,S)-(4-kyanfenyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidinl-yl]butanová kyselina (sloučenina 21.2)
K roztoku 1,07 g (5 mmol) sloučeniny 21.1 (syntéza viz WO 95/14008), 1,3 g (5 mmol) trifenylfosfinu a 1,7 g (5 mmol) sloučeniny 21.10 ve 20 ml absolutního tetrahydrofuranu se přidá roztok 870 mg (0,5 mmol) diethylazodikarboxylátu (DEAD) v absolutním tetrahydrofuranu. Po 16 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, zbytek se vyjme ethylacetátem, ethylacetátová fáze se promyje 10% roztokem kyseliny citrónové a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší se nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a terc.butylmethyletheru v poměru 1 : 1 jako elučního činidla. Odpařením frakcí obsahujících produkt se získá 1,2 g (44 %) sloučeniny 21.2.
21b) Sůl benzylesteru 4-[(4R,S)-(4-aminomethylfenyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin-lyl]-2-benzyloxykarbonyIaminobutanové kyseliny s kyselinou octovou (sloučenina 21.3)
Roztok 1,2 g (2,22 mmol) sloučeniny 21.2 v kyselině octové se hydrogenuje za použití 150 mg oxidu platiny. Jakmile přestane být odebírán vodík (přibližně po 3 hodinách), krystalizátor se odfiltruje, filtrát se odpaří a zbytek se vyčistí na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 6 : 1 : 0,1 : 0,1 jako elučního činidla. Odpařením frakcí obsahujících produkt se získá 450 mg (34 %) sloučeniny 21.3.
c) Benzylester 2-benzyloxykarbonylamino-4-[(4R, S)-methyl-4-(4-(3-(2-nitrofenyl)thioureidomethyl)fenyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]butanové kyseliny (sloučenina 21.4)
K roztoku 410 mg (0,75 mmol) sloučeniny 21,3 v 5 ml dimethylformamidu se přidá 135 mg (0,75 mmol) 2-nitrofenylizothiokyanátu a 0,13 ml diizopropylethylaminu (DIPEA). Po 16 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití terc.butylmethyletheru jako elučního činidla. Získá se 380 mg (70 %) sloučeniny 21.4.
d) Benzylester 4-[(4R,S)-(4-(3-(2-aminofenyl)thioureidomethyl)fenyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]-2-benzyloxykarbonylaminobutanové kyseliny (sloučenina 21.5)
K roztoku 360 mg (0,49 mmol) sloučeniny 21.4 v 5 ml methanolu se přidá 650 mg (2,9 mmol) dihydrátu chloridu cínatého a 3 kapky kyseliny octové a směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 20 :1 jako elučního činidla. Získá se 280 mg (82 %) sloučeniny 21.5.
e) Benzylester 4-[(4R,S)-(4-(( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)methyl)fenyl)-4-methyl-2,5dioxoimidazolidin-l-yl]-2-benzyloxykarbonylaminobutanové kyseliny (sloučenina 21.6)
Směs 270 mg (0,38 mmol) sloučeniny 21.5, 173 mg (0,8 mmol) oxidu rtuťnatého a 3 mg síry v 10 ml ethanolu se po dobu 12 hodin zahřívá kvaru pod zpětným chladičem. Po filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá 180 mg surové sloučeniny 21.6 ve formě červenohnědého sirupu, který se použije přímo k syntéze sloučeniny 21.7.
f) 4-[(4R,S)-(4-(( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)methyl)fenyl)-4-methyl-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]-2-benzyloxykarbonylaminobutanová kyselina (sloučenina 21.7)
K roztoku 180 mg (přibližně 0,27 mmol) surové sloučeniny 21.6 ve 4 ml dioxanu se přidá 0,27 ml 1M roztoku hydroxidu lithného a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Většina dioxanu se odstraní ve vakuu, pH vodného zbytku se upraví kyselinou citrónovou na hodnotu 5 a vodná fáze se extrahuje ethylacetátem. Po vysušení nad síranem sodným, filtraci a odpaření
-66CZ 289696 B6 filtrátu ve vakuu se zbytek chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methanolu, kyseliny octové a vody v poměru 6 : 1 : 0,1 : 0,1 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt a vysušení vymražením se získá 107 mg (49 %, vztaženo na sloučeninu 21.5) sloučeniny 21.7 ve formě bezbarvé pevné látky.
Hmotová spektrometrie ES(+): 571 (M+H)+
g) Syntéza benzylesteru 2-benzyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny (sloučeniny 21.10)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
(21.8)
NaOH
-------k
BnBr
----►
DMF
O8n (21.10)
Suspenze 10 g (42 mmol) sloučeniny 21.8 se míchá ve 420 ml 0,lM hydroxidu sodného v ethanolu po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Reakční roztok se zahustí, ke zbytku se přidá toluen a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Přidá se 130 ml dimethylformamidu a 9,34 g (54,6 mmol) benzylbromidu a směs se míchá po dobu 4 dnů při teplotě místnosti. Přidá se 2,1 1 1M roztoku hydrogenuhličitanu sodného a směs se třikrát extrahuje ethylacetátem. Smíchané ethylacetátové fáze se promyjí 1M roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se nad síranem hořečnatým. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se chromatografícky zpracuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a acetonitrilu v poměru 20 : 1 až 20 : 6 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a zbytek se vykrystaíuje ze směsi diethyletheru a hexanu. Získá se 5,4 g (38 %) sloučeniny 21.10 ve formě bezbarvých krystalů.
Příklad 22
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(2-chlorbenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 22.4)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
Boc^O, NaHCO-j
--------------->
Dioxan /
-67CZ 289696 B6
H2, Pd(OH)2
MeOH
*
DIPEA, DMF
(22.3) % CF3COOH
--------—>
-68CZ 289696 B6
22a) 3-[2-((4S)-(3-(l-terc.butoxykarbonylbenzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylammopropionová kyselina (sloučenina 22.1)
K roztoku 551 mg (1 mmol) sloučeniny 5.5 ve 4 ml směsi dioxanu a vody v poměru 1 :1 se přidá 168 mg (2 mmol) hydrogenuhličitanu sodného a 437 mg (2 mmol) diterc.butyldikarbonátu a směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se vyjme ethylacetátem, ethylacetátová fáze se promyje 2% roztokem kyseliny citrónové a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se nad síranem hořečnatým. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, čímž se získá 614 mg (94 %) sloučeniny 22.1 ve formě bezbarvých krystalů.
22b) (2S)-amino-3-[2-((4S)-(3-(l-terc.butoxykarbonylbenzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 22.2)
Roztok 600 mg (0,92 mmol) sloučeniny 22.1 v methanolu se hydrogenuje za použití hydroxidu palladia. Katalyzátor se odfiltruje, filtrát se zahustí, zbytek se dvakrát odpaří s toluenem na rotační odparce a poté se vysuší ve vysokém vakuu. Získá se 385 mg (81 %) sloučeniny 22.2.
22c) 3-[2-((4S)-(3-(l-terc.butoxykarbonylbenzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(2-chlorbenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 22.3)
K roztoku 61,7 mg (0,12 mmol) sloučeniny 22.2 ve 2,5 ml dimethylformamidu se při teplotě 0 °C přidá 0,017 ml diizopropylethylaminu a poté roztok 28,4 mg (0,1 mmol) N-(2-chlorbenzyloxykarbonyloxy)sukcinimidu a reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 2% kyselinu citrónovou. Fáze se od sebe oddělí a organická fáze se vysuší nad síranem hořečnatým. Filtrací, zahuštěním filtrátu ve vakuu a vykrystalováním zbytku z diethyletheru se získá 36,5 mg (45 %) sloučeniny 22.3 ve formě bezbarvých krystalů.
22d) 3—[2—((4S)-(3-( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(2-chlorben2yloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 22.4)
Roztok 36,5 mg sloučeniny 22.3 ve 3 ml 95% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Kyselina trifluoroctová se odstraní ve vakuu a zbytek se dvakrát odpaří s toluenem na rotační odparce. Zbytek se rozpustí v methanolu a sloučenina 22.4 se vysráží diethyletherem. Po centrifugaci se zbytek vyjme zředěnou kyselinou octovou a vysuší se vymražením. Získá se 24 mg (77 %) sloučeniny 22.4 ve formě bezbarvé pevné látky.
-69CZ 289696 B6
Hmotová spektrometrie ES(+): 586 (M+H)+
Příklad 23-33
Příprava sloučenin 23 až 33 se provádí podle následujícího reakčního postupu:
HOSu, NEU. DMF
% CF3COOH >
(23)-(33) io (popis syntézy je uveden za příkladem 33)
-70CZ 289696 B6
O
R
Příklad 23
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(3,4-dimethoxybenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 23)
Hmotová spektrometrie ES(+): 612 (M+l)+
Příklad 24
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(3,4-methylendioxybenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 24)
Hmotová spektrometrie ES(+): 624 (M+l)+
Příklad 25
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidm-l-yl)acetylamino]-(2S)-(4-chlorbenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 25)
Hmotová spektrometrie ES(+): 586 (M+l)+
-71 CZ 289696 B6
Příklad 26
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(4-terc.butylbenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 26)
Hmotová spektrometrie ES(+): 608 (M+l)+
Příklad 27
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(3-chlorbenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 27)
Hmotová spektrometrie ES(+): 586 (M+l)+
Příklad 29
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(4-trifluormethylben2yloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 29)
Hmotová spektrometrie ES(+): 620 (M+l)+
Příklad 30
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimida2olidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(4-fenylbenzyloxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 30)
Hmotová spektrometrie ES(+): 628 (M+l)+
-72CZ 289696 B6
Příklad 31
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzÍmidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(naftalen-l-ylmethoxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 31)
Hmotová spektrometrie ES(+): 602 (M+l)+
Příklad 32
3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-(naftalen-2-ylmethoxykarbonylamino)propionová kyselina (sloučenina 32)
Hmotová spektrometrie ES(+): 602 (M+l)+
Příklad 33
O (2S)-(benzofiiran-3-ylmethoxykarbonylamino)-3-[2-((4S)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyl)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]propionová kyselina (sloučenina 33)
Hmotová spektrometrie ES(+): 592 (M+l)+
a) Příprava esterů chlormravenčí kyseliny (sloučenin 23.2 až 33.2)
Syntéza se provádí podle následujícího obecného postupu přípravy:
K roztoku 2,2 ekvivalentu bistrichlormethylkarbonátu v absolutním dichlormethanu se při teplotě 0 °C přikape roztok 6 ekvivalentů odpovídajícího alkoholu (HO-R) a 6 ekvivalentů pyridinu v absolutním dichlormethanu. Poté se směs míchá po dobu 2 hodin při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se vyjme ethylacetátem nebo etherem, směs se nechá stát po dobu 30 minut při teplotě místnosti a případně vzniknuvší sraženina se odfiltruje. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek vysuší ve vysokém vakuu a použije se přímo k syntéze sloučeniny 23.1 až 33.1.
-73CZ 289696 B6
b) Příprava sloučenin 23.1 až 33.1
Syntéza se provádí podle následujícího obecného postupu přípravy:
K roztoku 1 ekvivalentu N-hydroxysukcinimidu v tetrahydrofuranu se při teplotě 0 °C přidá 1 ekvivalent odpovídajícího esteru chlormravenčí kyseliny (sloučeniny 23.2 až 33.2) a 1 ekvivalent diizopropylethylaminu (DIPEA). Směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě 0 °C a 45 minut při teplotě místnosti a poté se tento roztok přidá k roztoku 1 ekvivalentu sloučeniny 22.2 v dimethylformamidu. Směs se míchá při teplotě místnosti až do skončení reakce a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se vyjme ethylacetátem a ethylacetátová fáze se promyje dvakrát vodným roztokem kyseliny citrónové o pH 3 a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po vysušení nad síranem sodným, filtraci a odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek podrobí chromatografii na silikagelu. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získají sloučeniny 23.1 až 33.1.
c) Příprava sloučenin 23 až 33
Příprava se provádí vycházeje ze sloučenin 23.1 až 33.1 odštěpením terc.butoxykarbonylové skupiny pomocí 95% kyseliny trifluoroctové jak je popsáno v případě přípravy sloučeniny 22.4 ze sloučeniny 22.3.
Příklad 34
3-[8-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propionyl)-2,4-dioxo~l,3,8-triazaspiro[4,5]dec-3-yl](2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 34.12)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
(34.1)
1. KCN, (NH4)2CO3
-----—-->
EtOH, H2O
2. 6N HCI
-74CZ 289696 B6
HNTrt
HO^^s^OMe (34.3) O
------------------->
DEAD. PPh3, THF
(34.4)
(34.5)
(34.6)
1. ) 90 % CFgCOOH
2. ) zředěná HCI
x HCI (34.7)
(34.11)
(34.12)
-75CZ 289696 B6
34a) Terc.butylester 2,4-dioxo-l,3,8-triazaspiro[4,5]dekan-8-karboxylové kyseliny (sloučenina 34.2)
K roztoku 5g (25,1 mmol) N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidinu (sloučeniny 34.1) a 24,01 g (250 mmol) uhličitanu amonného v 80 ml směsi ethanolu a vody v poměru 1 : 1 se přidá 2,12 g (32,6 mmol) kyanidu draselného a směs se míchá po dobu 5 hodin při teplotě 60 °C. Hodnota pH se poté upraví přidáním 6N kyseliny chlorovodíkové na 6,3 a směs se míchá po dobu další 1,5 hodiny při teplotě 60 °C. Sraženina se odsaje a vysuší ve vysokém vakuu. Získá se 3,43 g sloučeniny 34.2 ve formě bezbarvé pevné látky. Extrakcí filtrátu dichlormethanem, vysušením organické fáze nad síranem sodným, filtrací a odstraněním rozpouštědla ve vakuu se získá dalších 1,0 g sloučeniny 34.2. Celkový výtěžek sloučeniny 34.2 ve formě bezbarvé pevné látky činí 4,43 g (66%).
34b) Methylester N-trityl-L-serinu (sloučenina 34.3)
K roztoku 6 g (38,56 mmol) hydrochloridu methylesteru L-serinu a 7,8 g (77,12 mmol) triethylaminu v absolutním tetrahydrofuranu se při teplotě 0 °C přidá roztok 10,75 g (38,56 mmol) tritylchloridu a roztok se míchá po dobu 4 hodin při teplotě 0 °C a poté po dobu 2 dnů při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a 10% vodný roztok kyseliny citrónové. Fáze se od sebe oddělí, organická fáze se promyje vodou a vysuší se nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi heptanu a ethylacetátu v poměru 6 : 4 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 8 g (58 %) sloučeniny 34.3.
34c) Terc.butylester 3-[2-methoxykarbonyl-(2S)-(tritylamino)ethyl]-2,4-dioxo-l ,3,8-triazaspiro[4,5]dekan-8-karboxylové kyseliny (sloučenina 34.4)
K roztoku 3,72 g (10,3 mmol) sloučeniny 34.3 a 3,5 g (13,34 mmol) trifenylfosfinu ve 20 ml absolutního tetrahydrofuranu se přidá roztok 3,6 g (13,37 mmol) sloučeniny 34.2 v 15 ml absolutního tetrahydrofuranu. K tomuto roztoku se přidá 2,11 ml (13,37 mmol) diethylazodikarboxylátu (DEAD) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti až do skončení reakce. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi heptanu a ethylacetátu jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 6 g (95 %) sloučeniny 34.4.
34d) Terc.butylester 3-((2S)-amino-2-methoxykarbonylethyl)-2,4-dioxo-l ,3,8-triazaspiro[4,5]dekan-8-karboxylové kyseliny (sloučenina 34.5)
Roztok 4,6 g (7,5 mmol) sloučeniny 34.4 ve 180 ml směsi dichlormethanu, methanolu a kyseliny trifluoroctové v poměru 95,5 : 3 : 1,5 se míchá po dobu 10 minut při teplotě místnosti. Reakční směs se odpaří a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 3,14 g (87 %) sloučeniny 34.5.
34e) Terc.butylester 3-((2S)-benzyloxykarbonylamino-2-methoxykarbonylethyl)-2,4-dioxol,3,8-triazaspiro[4,5]dekan-8-karboxylové kyseliny (sloučenina 34.6)
K roztoku 3,14 g (8,48 mmol) sloučeniny 34.5 a 2,11 g (8,48 mmol) N-benzyloxykarbonyloxysukcinimidu v 80 ml absolutního dimethylformamidu se přidá 2,08 g (16,1 mmol) diizopropylethylaminu ve 25 ml absolutního dimethylformamidu a směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi heptanu a ethylacetátu v poměru 6: 4 jako elučního činidla. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá sloučenina 34.6.
-76CZ 289696 B6
34f) Hydrochlorid methylesteru (2S)-benzyloxykarbonylamino-3-(2,4-dioxo-l,3,8-triazaspiro[4,5]dec-3-yl)propionové kyseliny (sloučenina 34.7)
Roztok 4,7 g (9,3 mmol) sloučeniny 34.6 ve 100 ml 90% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 45 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina se odstraní ve vakuu a zbytek se podrobí chromatografii na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 : 3,5 jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší se vymražením. Po přidání IN kyseliny chlorovodíkové a opětovném vysušení vymražením se získá 1,99 g (53 %, vztaženo na sloučeninu 34.5) sloučeniny 34.7 ve formě bezbarvé pevné látky.
34g) Methylester 3-[8-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propionyl)-2,4-dioxo-l,3,8-triazaspiro[4,5]dec-3-yl]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 34.11)
Syntéza sloučeniny 34.11 se provede kondenzací sloučeniny 34.7 se sloučeninou 34.10, jako je popsáno v příkladu 15 v případě syntézy sloučeniny 15.3 ze sloučeniny 15.2.
34h) 3-(8-(3-( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)propionyl)-2,4-dioxo-l ,3,8-triazaspiro[4,5]dec3-yl]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina 34.12)
Syntéza sloučeniny 34.12 rozštěpením esteru 34.11 se provede jak je popsáno v příkladu 3 v případě syntézy sloučeniny 3.11 ze sloučeniny 3.10.
Hmotová spektrometrie ES(+): 578 (M+H)+.
34i) Syntéza 3-( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)propionové kyseliny (sloučeniny 34.10)
Sloučenina 34.10 se připraví podle následujícího reakčního schématu:
(34.8)
-TICZ 289696 B6
a) 3-[3-(2-nitrofenyl)thioureido]propionová kyselina (sloučenina 34.8)
K roztoku 5 g (27,75 mmol) 2-nitrofenylizothiokyanátu a 2,5 g (27,75 mmol) b-alaninu v 80 ml dimethylformamidu se přidá 3,8 ml (27,75 mmol) triethylaminu a směs se míchá až do skončení reakce. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a roztok směsi hydrogensíranu draselného a síranu draselného. Fáze se od sebe oddělí a organická fáze se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se chromatograficky zpracuje na silikagelu. Po odpaření frakcí obsahujících produkt se získá 5,3 g (71 %) sloučeniny 34.8.
b) 3-[3-(2-aminofenyl)thioureido]propionová kyselina (sloučenina 34.9)
5,3 g (19,7 mmol) sloučeniny 34,8 ve 410 ml amoniakem nasyceného ethanolu se hydrogenuje po dobu 3 hodin při teplotě místnosti za použití 6,44 g 10% palladia na uhlí. Katalyzátor se odfiltruje, filtrát se zahustí ve vakuu a zbytek, kterým je 1,9 g surové sloučeniny 34.9, se použije přímo k syntéze sloučeniny 34.10.
c) 3-( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)propionová kyselina (sloučenina 34.10)
Směs sloučeniny 34.9, 3,44 g (14,79 mmol) oxidu rtuťnatého a 50 mg síry ve 40 ml ethanolu se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin. Po filtraci se filtrát odpaří a zbytek se zahřívá s 6N kyselinou chlorovodíkovou k varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny a poté se vysuší vymražením. Získá se 1. frakce sloučeniny 34.9. Zbytek se filtru se několikrát vyvaří s vodou a spojené vodné fáze se vysuší vymražením, čímž se získá 2. frakce sloučeniny 34.9. 1. a 2. frakce se smíchají a podrobí se chromatografii na koloně Sephadex LH 20 za použití směsi vody, butanolu a kyseliny octové v poměru 43 : 4,3 : 3,5 jako elučního Činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří a vysuší se vymražením. Získá se 340 mg (8 %, vztaženo na sloučeninu 34.8) sloučeniny 34.10 ve formě bezbarvé pevné látky.
Příklad 35
3-[2-(4(E popřípadě Z)-(3-( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)propyliden)-2,5-dioxoimidazolidinl-yl)acetylamino]-(2S)-ben2yloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina E-35.8 popřípadě Z-35.8)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-78CZ 289696 B6
MeOH
MeOMeO
H BocN
Ho 10 % Pd/C —-------k
(35.3)
X CFgCOOH % CF3COOH
MeO
MeO
Na, EtOH
(E-35.5), (Z-35.5)
-79CZ 289696 B6 thiofosgen
NaHCO
(E-35.6), (Z-35.6) (viz příklad
2.) 95 % CFgCOOH
3.)konc. HC1
HNZ
O
TOTU. DIDEA. DMF
(1.6)
----►
35a) Methylester 3-amino-3-(dimethoxyfosforyl)propionové kyseliny (sloučenina 35.2) g (30,19 mmol) trimethylesteru benzyloxykarbonylfosfonoglycinu (sloučeniny 35.1) ve 5 300 ml methanolu se hydrogenuje za použití 10% palladia na uhlí. Po 1 hodině se katalyzátor odfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu. Získá se 4,6 g surové sloučeniny 35.2, která se použije přímo k syntéze sloučeniny 35.3.
35b) Methylester 3-(dimethoxyfosforyl)-3-(3-ethoxykarbonylmethylureido)propionové io kyseliny (sloučenina 35.3)
K roztoku sloučeniny 35.2 ve 20 ml dimethylformamidu se přidá 2,62 ml (23,4 mmol) ethylesteru izokyanátooctové kyseliny. Po 16 hodinách při teplotě místnosti se přidá dalších 0,262 ml (2,34 mmol) ethylesteru izokyanátooctové kyseliny a reakční směs se míchá po dobu dalších 15 2 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a roztok směsi hydrogensíranu draselného a síranu draselného. Fáze se od sebe oddělí a organická fáze se promyje vodou. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným, filtraci a odpaření filtrátu ve vakuu se získá 6,2 g (63 %, vztaženo na sloučeninu 35.1) sloučeniny 35.3.
-80CZ 289696 B6
35c) Ethylester [(4(E popřípadě Z)-(3-terc.butoxykarbonylaminopropyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina E-35.4 popřípadě Z-35.4)
K roztoku 451 mg (18,8 mmol) sodíku v absolutním ethanolu se přidá roztok 5,8 g (17,84 mmol) sloučeniny 35.3 ve 30 ml absolutního ethanolu. K tomuto roztoku se přidá roztok sloučeniny 35.9, připravené zb-alaninu analogickým postupem jako popsali O. P. Goel a kol., Org. Synth. 1988, 67, 69. Po 3 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi vodu a diethylether. Fáze se od sebe oddělí a organická fáze se vysuší nad síranem sodným. Po filtraci se zbytek chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1 jako elučního činidla. Získá se 2,25 g sloučeniny E- nebo Z-35.4 a 1,95 g sloučeniny Z- nebo E-35.4. Celkový výtěžek sloučeniny 35.4 činí 4,2 g (69 %).
35d) Sůl ethylesteru [(4(E popřípadě Z)-(3-aminopropyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny s kyselinou trifluoroctovou (sloučenina E-35.5 popřípadě Z-35.5)
Roztok 2,25 g (6,6 mmol) sloučeniny Z- nebo E-35.4 ve 25 ml 90% kyseliny trifluoroctové se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Kyselina trifluoroctová se odstraní ve vakuu, zbytek se naředí vodou a vysuší se vymražením. Získá se 2,2 g (94 %) sloučeniny Z- nebo E-35.5. Analogicky se získá z 1,95 g (5,71 mmol) sloučeniny E- nebo Z-35.4 1,95 g (97 %) sloučeniny E- nebo Z-35.5.
35e) Ethylester [(4(E popřípadě Z)-(3-izothiokyanatopropyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-lyljoctové kyseliny (sloučenina E-35.6 popřípadě Z-35.6)
Syntéza sloučeniny E-35.6 popřípadě Z-35.6 ze sloučeniny E-35.5 popřípadě Z-35.5 se provádí jako je popsáno v příkladu 11 v případě syntézy sloučeniny 11.2 ze sloučeniny 11.1.
5f) Hydrochlorid [(4(E popřípadě Z)-(3-(1 H-benzimidazol-2-ylamino)propyliden)-2,5dioxoimidazolidin-l-yl]octové kyseliny (sloučenina E-35.7 popřípadě Z-35.7)
Syntéza sloučeniny E-35.7 popřípadě Z-35.7 ze sloučeniny E-35.6 popřípadě Z-35.6 se provádí jako je popsáno v příkladu 15 v případě syntézy sloučeniny 15.2 ze sloučeniny 15.1.
35g) 3-[2-(4(E popřípadě Z)-(3-(lH-benzimidazol-2-ylamino)propyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina E-35.8 popřípadě Z-35.8)
Syntéza sloučeniny E-35.8 popřípadě Z-35.8 ze sloučeniny E-35.7 popřípadě Z-35.7 se provádí jako je popsáno v příkladu 15 v případě syntézy sloučeniny 15.3 ze sloučeniny 15.2.
Hmotová spektrometrie pro sloučeninu E-35.8 popřípadě Z-35.8 ES(+): 550 (M+H)+
Příklad 36
3—[2—(4(Z popřípadě E)-(3-( 1 H-benzimidazol-2-ylamino)propyliden)-5-oxo-2-thioxoimidazolidin-l-yl)acetylamino]-(2S)-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina Z36 popřípadě E-36)
-81 CZ 289696 B6
Syntéza sloučeniny Z-36 popřípadě E-36 se provádí jak je popsáno v příkladu 35, přičemž se zde sloučenina 35.2 podrobí reakci s methylesterem izothiokyanátooctové kyseliny místo s ethyl5 esterem izokyanátooctové kyseliny. Další syntéza se provádí analogicky jako v příkladu 35.
Hmotová spektrometrie pro sloučeninu Z-36 popřípadě E-36 ES(+): 566 (M+H)+ ío Příklad 37
3-(4-E/Z-(4-guanidinokarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylalanin (sloučenina E/Z-37.5)
Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
-82CZ 289696 B6
(35.2)
-------------—►
NaOMe/MeOH (37.2)
Guanidin
Kyselina -------------—-> trifluoroctová
(E/Z-37.4)
3cooh
(E/Z-37.5)
-83CZ 289696 B6
37a) Terc.butylester 2-izokyanatobenzyloxykarbonylalaninu (sloučenina 37.1)
Roztok 2,94 (10 mmol) Z-Dap-O-tBu (sloučeniny 1.6) v 80 ml methylenchloridu se spolu s 80 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného za intenzivního míchání v ledové lázni ochladí na teplotu přibližně 0 °C. Po ukončení míchání a oddělení fází se do organické fáze rychle vnese 10,4 ml 1,93M roztoku fosgenu v toluenu a směs se nechá znovu reagovat za intenzivního míchání a vnějšího chlazení. Po dalších 10 minutách se fáze oddělí a vodná fáze se ještě dvakrát extrahuje vždy 40 ml methylenchloridu. Smíchané organické extrakty se vysuší pomocí bezvodého síranu hořečnatého, zfiltrují a ve vakuu se z nich odstraní rozpouštědlo. Získá se zhruba 3,0 g bezbarvého oleje, který se bez dalšího čištění použije k syntéze sloučeniny 37.2.
7b) Terc.butylester N'-(dimethoxyfosforyl)(methoxykarbonyl)methylureido-N-(2S)-benzyloxykarbonylamino-3-propionové kyseliny (sloučenina 37.2)
V ochranné atmosféře argonu se sloučenina 37.1 v množství získaném v příkladu 37a) rozpustí v přibližně 30 ml dichlormethanu a za míchání při teplotě místnosti se přidá 1,97 g sloučeniny 35.2, rozpuštěné v přibližně 50 ml dichlormethanu. Přibližně po 2 hodinách je reakce dokončená. Roztok se promyje nejprve 100 ml 2N roztoku hydrogensíranu draselného a poté 100 ml vody, organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a zfiltruje. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se získá přibližně 4,6 g čisté sloučeniny 37.2 (89 %).
37c) Terc.butylester E- popřípadě Z-3-(4-(4-methoxykarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)-2-N-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina 37.3)
1,55 g (3 mmol) sloučeniny 37.2 se rozpustí ve zhruba 8 ml methanolu a přidá se 0,6 ml (zhruba 3,3 mmol) 30% roztoku methoxidu sodného v methanolu. Poté se v ochranné atmosféře argonu za míchání při teplotě místnosti pomalu přikape 8 ml methanolického roztoku, který obsahuje 0,59 g (3,6 mmol) methylesteru 4-formylbenzoové kyseliny. Přibližně po 1 hodině je reakce dokončená. Roztok se zahustí ve vakuu, vyjme se ethylacetátem, promyje se vodou, vysuší, zfiltruje a zahustí. Získá se 1,6 g E/Z-směsi sloučeniny 37.3.
Diastereomery lze rozdělit pomocí chromatografíe za použití směsi ethylacetátu a N-heptanu v poměru 2 : 1 jako elučního činidla a silikagelu jako nosiče. Získá se 0,85 g sloučeniny Z-37.3 a 0,7 g sloučeniny E-37.3.
37d) Terc.butylester E- popřípadě Z-3-(4-(4-guanidinokarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina E- popřípadě Z-37.4)
0,262 g (0,5 mmol) sloučeniny Z-37.3 se rozpustí v 5 ml absolutního tetrahydrofuranu, přidá se 0,148 g (2,5 mmol) guanidinu a směs se zahřívá kvaru pod zpětným chladičem po dobu 20 hodin. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek chromatograficky zpracuje na silikagelu za použití směsi methanolu a methylenchloridu v poměru 1:10 jako elučního činidla. Získá se 0,05 g sloučeniny Z-37.4. Analogicky se podrobí reakci sloučenina E-37.3, přičemž se jako rozpouštědlo použije 1,2-dimethoxyethan. Získá se 0,12 g sloučeniny E-37.4.
37e) Sůl E- popřípadě Z-3-(4-(4-guanidinokarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-lyl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny s kyselinou trifluoroctovou (sloučenina E- popřípadě Z-37.5)
0,12 g sloučeniny E-37.4 se rozpustí ve zhruba 10 ml ledově chladné 90% kyseliny trifluoroctové a směs se míchá po dobu 1,5 hodiny při teplotě místnosti v ochranné atmosféře argonu. Po odstředění rozpouštědla ve vakuu se zbytek podrobí chromatografií na RP18 za použití směsi methanolu a vody jako elučního činidla. Frakce obsahující produkt se odpaří, čímž
-84CZ 289696 B6 se získá 0,06 g sloučeniny E-37.5. Analogicky se z 0,05 g sloučeniny Z-37.4 získá 0,02 g sloučeniny Z-37.5.
Příklad 38
3-(4-E/Z-(4-(3,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)aminokarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylalanin (sloučenina E/Z-38.4) io Syntéza probíhá podle následujícího reakčního postupu:
O
MeOJi
P COOCH3 nhz MeO ]
ΗΐΙ,Π Y o o
SCH2CH2O-11*
COO^Bu (37.2)
------------------------------------------------».
2.1 N NaOH
1. Kyselina meta-chlorperoxybenzoová
TOTU, DIPEA v JDMF
Μ M
-85CZ 289696 B6
38a) Terc.butylester E- popřípadě Z-3-(4-((2-fenylthio)ethyloxykarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidín-l~yl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina E- popřípadě Z-3 8.1)
Analogicky jako při reakci v příkladu 37c) se z 0,259 g (0,5 mmol) sloučeniny 37.2 a 0,172 g (0,6 mmol) (2-fenylthio)ethylesteru 4-formylbenzoové kyseliny získá 0,157 g sloučeniny Z-38.1 a 0,153 g sloučeniny E-38.1, které lze chromatografícky rozdělit. Celkový výtěžek činí zhruba 91 %.
38b) Terc.butylester E- popřípadě Z-3-(4-karboxybenzyliden)-2,5-dioxoÍmidazolidin-l-yl)2-N-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina E- popřípadě Z-38.2)
0,155 g (0,24 mmol) sloučeniny Z-3 8.1 se rozpustí v 5 ml suchého methylenchloridu a přidá se 0,098 g (0,4 mmol) 65% kyseliny meta-chlorperoxybenzoové. Po 1,5 hodině je reakce dokončená. Methylenchloridový roztok se promyje přibližně 10% roztokem hydrogensiřičitanu sodného a poté vodou. Po vysušení nad síranem hořečnatým, filtraci a odstranění rozpouštědla se získá 0,15 g fenylsulfonylethyletheru, který se bez dalšího zpracování přidá ke směsi 8 ml dioxanu, 1,4 ml methanolu a 0,19 ml IN hydroxidu sodného. Po 16 hodinách se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se chromatografícky zpracuje na silikagelu za použití směsi methylenchloridu a metanolu v poměru 95 : 5 jako elučního činidla. Výtěžek činí 0,033 g sloučeniny Z-38.2. Analogicky se z 0,157 g (0,24 mmol) sloučeniny E-38.1 získá 0,051 g sloučeniny E-38.2.
38c) Terc.butylester 3-(4-E/Z-(4-(3,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)aminokarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny (sloučenina E/Z-38.3)
Analogickým postupem jako v případě syntézy sloučeniny 11.6 (příklad llf) se 0,05 g (0,1 mmol) sloučeniny E-38.2 a 0,01 g (0,1 mmol) 2-amino-3,4,5,6-tetrahydropyrimidinu podrobí reakci s ekvivalentním množstvím (0,033 g) O-[kyan(ethoxykarbonyl)methylenamino]1,1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluorborátu (TOTU) v dimethylformamidu za přítomnosti diizopropylethylaminu. Obvyklým zpracováním se získá 0,06 g sloučeniny E-38.3, které se bez dalšího čištění podrobí následující reakci. Stejným způsobem se z 0,03 g sloučeniny Z-38.2 získá 0,025 g surové sloučeniny Z-3 8.3.
38d) 3-(4-E/Z-(4-(3,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)aminokarbonylbenzyliden)-2,5-dioxoimidazolidin-l-yl)-(2S)-N-benzyloxykarbonylaminopropionová kyselina (sloučenina E/Z-38.4)
0,055 g sloučeniny E-38.3 se za chlazení ledem po dobu 2 hodin míchá ve 2 ml 90% kyseliny trifluoroctové. Odstraněním rozpouštědla ve vakuu a vysušením zbytku vymražením se získá 0,02 g sloučeniny E-38.4. Analogicky se z 0,02 g sloučeniny Z-38.3 získá 0,012 g sloučeniny Z-38.4.
Inhibici resorpce kostí pomocí sloučenin podle vynálezu lze stanovit například pomocí testu osteoklastové resorpce („PIT-testu“), například analogicky WO 95/32710. Testovací metody, jimiž lze stanovit antagonistické působení sloučenin podle vynálezu na receptor vitronektinu ανβ3 jsou popsány níže.
-86CZ 289696 B6
Testovací metoda 1:
Inhibice vazby lidského vitronektinu (Vn) na lidský receptor vitronektinu (VnR) ανβ3: ELISAtest (testovací metoda 1 je v tabulce uvádějící výsledky testů zkrácena „Vn/VnR“)
1. Čištění lidského vitronektinu
Lidský vitronektin se izoluje z lidské plazmy a vyčistí se pomocí afínitní chromatografie způsobem, který popsali Yatohyo a kol., Cell Structure and Function, 1988,23,281 - 292.
2. Čištění lidského receptoru vitronektinu (ανβ3)
Lidský receptor vitronektinu se získá z lidské placenty způsobem, který popsali Pytela a kol., Methods Enzymol. 1987, 144, 475. Lidský receptor vitronektinu ανβ3 lze získat rovněž z některých buněčných linií (například z buněk 293, lidské embryonální linie ledvinových buněk), které byly kotransfektovány DNA-sekvencemi pro obě podjednotky av a β3 receptoru vitronektinu. Tyto podjednotky se extrahují oktylglykosidem a poté se podrobí chromatografií na Concanavalinu A, heparin-sefarose a S-300.
3. Monoklonální protilátky
Myší monoklonální protilátky specifické pro podjednotku β3 receptoru vitronektinu se připraví způsobem, který popsali Newman a kol., Blood, 1985, 227-232 nebo pomocí podobného postupu. Králičí konjugát Fab 2 protimyší Fc na křenové peroxidáze (protimyší Fc HRP) se získá od firmy Pel Freeze (katalogové číslo 715 305-1).
4. ELISA-test
Mikrotitrační desky Nunc Maxisorb s 96 jamkami se přes noc při teplotě 4°C potáhnou roztokem lidského vitronektinu (0,002 mg/ml, 0,05 ml na jamku) ve fosfátem pufrovaném roztoku chloridu sodného (PBS). Desky se dvakrát omyjí PBS s 0,05 % povrchově aktivního činidla Tween 20 a blokují inkubací po dobu 60 minut s albuminem hovězího séra (BSA, 0,5%, jakostní třída RIA nebo lepší) ve směsi obsahující 50mM tris(hydroxymethyl)aminomethan-hydrochlorid (Tris-HCl), lOOmM chlorid sodný, lmM chlorid hořečnatý, lmM chlorid vápenatý a lmM chlorid manganatý, o pH 7. Připraví se roztoky známých inhibitorů a testovaných látek v koncentracích 2x10-12 až 2xl0“6mol/l v testovacím pufru (který tvoří albumin hovězího séra (BSA, 0,5%, jakostní třída RIA nebo lepší) ve směsi obsahující 50mM tris(hydroxymethyl)aminomethan-hydrochlorid (Tris-HCl), lOOmM chlorid sodný, lmM chlorid hořečnatý, lmM chlorid vápenatý a lmM chlorid manganatý, pH7).
Blokované desky se vyprázdní a do každé jamky se přidá vždy 0,025 ml výše uvedeného roztoku, který obsahuje známý inhibitor nebo testovanou látku v definované koncentraci (2xl0-12 až ŽxlO”6 mol/1). Do každé jamky desky se pipetuje 0,025 ml roztoku receptoru vitronektinu v testovacím pufru o koncentraci 0,03 mg/ml a deska se inkubuje na třepačce po dobu 60-180 minut při teplotě místnosti. Mezitím se připraví roztok (6 ml na desku) myších monoklonálních protilátek specifických pro podjednotku β3 receptoru vitronektinu v testovacím pufru v koncentraci 0,0015 mg/ml. K tomuto roztoku se přidá druh králičí protilátka (0,001 ml zásobního roztoku na 6 ml roztoku myších monoklonálních protilátek proti β3), kterou je protimyší protilátkový konjugát Fc HRP, a tato směs myších protilátek proti β3 a protimyšího protilátkového konjugátu Fc HRP se nechá inkubovat po dobu inkubace receptoru s inhibitorem. Testovací desky se čtyřikrát omyjí roztokem PBS, který obsahuje 0,05 % povrchově aktivního činidla Tween 20 a do každé jamky desky se pipetuje
-87CZ 289696 B6 vždy 0,05 ml na jamku protilátkové směsi, a desky se nechají inkubovat po dobu 60-180 minut. Desky se čtyřikrát omyjí roztokem PBS, který obsahuje 0,05 % povrchově aktivního činidla Tween20 a poté se vyvinou přidáním roztoku PBS, který obsahuje 0,67 mg/ml o-fenylendiaminu a 0,012 % peroxidu vodíku, v množství 0,05 ml na jamku. Alternativně je zde možné použít o-fenylendiamin v pufru o pH 5, který obsahuje 50mM fosforečnan sodný a 0,22mM kyselinu citrónovou. Vyvíjení barvy se zastaví přidáním IN kyseliny sírové v množství 0,05 ml na jamku.
Změří se absorpce pro každou jamku při 492 - 405 nm a údaje se vyhodnotí standardními způsoby.
Testovací metoda 2:
Inhibice vazby kistrinu na lidský receptor vitronektinu (VnR) ανβ3: ELISA-test (testovací metoda 2 je v tabulce uvádějící výsledky testů zkrácena „Kistrin/VnR“)
1. Čištění kistrinu
Kistrin se vyčistí pomocí způsobů, které popsali Dennis a kol. v Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1989, 87, 2471 až 2475 a PROTEINS: Structure, Function and Genetics 1993, 15, 312-321.
2. Čištění lidského receptorů vitronektinu (ανβ3) - viz testovací metoda 1.
3. Monoklonální protilátky - viz testovací metoda 1.
4. ELISA-test
Schopnost látek inhibovat vazbu kistrinu na receptor vitronektinu lze zajistit pomocí ELISA-testu. Za tímto účelem se mikrotitrační desky Nunc s 96 jamkami potáhnout roztokem kistrinu o koncentraci 0,002 mg/ml, způsobem, který popsali Dennis a kol. v PROTEINS: Structure, Function and Genetics 1993, 15, 312 - 321. ELISA-test se dále experimentálně provádí jak je popsáno pod bodem 4 u testovací metody 1.
Výsledky testů:
sloučenina Vn/VnR IC50 (pmol) Kistrin/VnR IC50 (gmol)
1.8 (viz příklad 1) 0,008 0,02
3.11 (viz příklad 3 0,36
4.3 (viz příklad 4) 1,66
5.5 (viz příklad 5) 0,04
7.8 (viz příklad 7) 0,58
8.2 (viz příklad 8) 0,13
18.5 (viz příklad 18) 0,81
19.3 (viz příklad 19) 0,02
-88CZ 289696 B6

Claims (6)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Pětičlenné heterocykly obecného vzorce I XN-E-F-G I ve kterém
    W představuje skupinu R’-A-B-D-C(R16), R'-A-B-D-C(R16)=C,
    Λ nebo R—A—B—D—L---Ό kde kruhový systém obsahuje 1 heteroatom, kterým je atom dusíku, a je nasycený,
    Y znamená skupinu C=O nebo C=S,
    Z představuje skupinu N(R°),
    A znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu -NRy- nebo -C(O>-,
    B představuje přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -NR2-, -C(O)-, -NR2-C(O)- nebo -C(O)-NR2-,
    D znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -NR2-, -CO-NR2- nebo -CO-,
    E představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
    F má význam definovaný v případě symbolu D,
    G znamená skupinu
    R4 R6 F Ϊ5 I h—cn ________________I n
    P (CH2)q—R představuje atom dusíku,
    R° znamená atom vodíku,
    -89CZ 289696 B6
    R1 představuje skupinu R2-C(=NR2)NR2-, R2R3N-C(=NR2)-, R2R3N-C(=NR2)-NR2, nebo skupinu sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu R8R8NR9, R8R8NC(O)R9 nebo R8R*N-C(=NR8)-NR8-, symboly R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě představují vždy atom vodíku nebo skupinu R8OC(O)N(R2)R9,
    R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylalkylovou skupinu se 3 až 10 atomy uhlíku v cykloalkylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, aiylalkylovou skupinu s 5 až 12 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části nebo skupinu přičemž alkylové zbytky mohou být substituované halogenem nebo R8OR9, R9 představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, R10 znamená skupinu C(O)Rn,
    R11 představuje hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo benzyloxyskupinu, symboly R12 a R13 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, skupinu R8OR9 nebo aminoskupinu,
    R16 představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, m má hodnotu 1 až 4, p má hodnotu 1, a q má hodnotu 0, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli, s výjimkou pětičlenných heterocyklů obecného vzorce I, ve kterých R'-A-B-D-C(R16) nebo R^A-B-D-CÍR^^C představuje skupinu R'-K-C(R16) popřípadě skupinu R^K-CHK^, ve které R16 znamená atom vodíku, přičemž zde
    R1 představuje skupinu X-NH-C(=NH)-(CH2)p, X’-NH-(CH2)p nebo 4-imidazolyl-CH2přičemž p znamená celé číslo od 0 do 3,
    X znamená atom vodíku, alky lovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylkarbonylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkylkarbonyloxyalkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 18 atomy uhlíku v alkylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, arylkarbonylovou skupinu s 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části, aryloxykarbonylovou skupinu s 6 až 14 atomy uhlíku v aryloxylové části, arylalkoxykarbonylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkoxyskupinu se 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo aminoskupinu, přičemž arylovými skupinami v substituentu X jsou uhlíkaté cykly, popřípadě jednou nebo vícekrát substituované stejnými nebo rozdílnými zbytky vybranými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 8 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 8 atomy uhlíku, atomy halogenů, nitroskupinu, aminoskupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyskupinu, methylendioxyskupinu, kyanoskupinu, hydroxykarbonylovou skupinu, aminokarbonylovou skupinu, alkoxykarbonylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, fenylovou skupinu, fenoxyskupinu, benzyloxyskupinu, skupiny (R17O)2P(O) a (R17O)2P(O)-O-, kde R17 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, arylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku nebo arylalkylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 8 atomy uhlíku v alkylové části, a tetrazolylovou skupinu,
    XI představuje arylkarbonylovou skupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v arylové části, aryloxykarbonylovou skupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v aryloxylové části, arylalkoxykarbonylovou skupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, arylalkoxyskupinu se 4 až 14 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo skupinu R'-NH-C(=NR), přičemž symboly R' a R nezávisle na sobě mají významy symbolu X a přičemž arylovými skupinami v substituentu X1 jsou čistě uhlíkaté cykly, popřípadě jednou nebo vícekrát substituované jak je uvedeno pro arylové skupiny v substituentu X, a
    K znamená alkandiylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkandiylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, fenylenalkandiylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkandiylové části, alkandiylfenylenovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkandiylové části, fenylenalkendiylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku v alkendiylové části nebo dvouvazný zbytek pěti- nebo šestičlenného nasyceného nebo nenasyceného okruhu, který může obsahovat 1 nebo 2 atomy dusíku a může být substituován jednou nebo dvakrát alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo kyslíkem nebo sírou, navázanými dvojnou vazbou.
    -91 CZ 289696 B6
  2. 2. Pětičlenné heterocykly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém
    W představuje skupinu R’-A-B-D-C(R16), R'-A-B-D-C(R,6)=C „ , Λ nebo R-A—B—D—L---C
    Y znamená skupinu C=O nebo C=S,
    Z představuje skupinu N(R°),
    B představuje přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, cykloalkandiylovou skupinu s 5 až 6 atomy uhlíku, skupinu -NR2-C(O)- nebo 20 -C(O)-NR2-,
    D znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -NR2- nebo -C(O)-,
    25 E představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
    F znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu -CO-NR2nebo -CO-,
    30 G znamená skupinu
    R4 1 —73 σ> _____________________1 F Ϊ5 R7 n
    P (CH2)q—R
    R1 představuje skupinu R2-C(=NR2)NR2-, R2R3N-C(=NR2)-, nebo skupinu
    -92CZ 289696 B6 symboly R2 a R3 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu R8R8NR9, R8NHC(O)R9 nebo H2N-C(=NH)-NH-, symboly R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě představují vždy atom vodíku nebo skupinu R8OC(O)NHR9,
    R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylalkylovou skupinu se 6 až 10 atomy uhlíku v cykloalkylová části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části nebo arylalkylovou skupinu s 5 až 10 atomy uhlíku v arylové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž alkylové zbytky mohou být substituovány 1 až 6 atomy fluoru, m má hodnotu 3 nebo 4, a zbývající obecné symboly mají významy definované v nároku I, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli.
  3. 3. Pětičlenné heterocykly podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, ve kterém
    W představuje skupinu R'-A-B-D-C(R16) nebo R1-A-B-D-CH=C,
    Y znamená skupinu C=O nebo C=S,
    Z představuje skupinu N(R°),
    A znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo skupinu -NR -,
    B představuje přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu, skupinu -C(O)-NR2- nebo -NR2-C(O)-,
    D znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylenovou skupinu nebo skupinu -NR2-,
    E představuje přímou vazbu nebo alkandiylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,
    F znamená přímou vazbu, alkandiylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo skupinu
    -CO-NR2-,
    G znamená skupinu
    F F i6 F F Aí--- 1______________ n
    P (CH2)q—R
    R1 představuje skupinu R2R3N-C(=NR2),
    -93CZ 289696 B6
    Η
    Η symboly R2 a R3 nezávisle na sobě znamenají vždy atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 5 4 atomy uhlíku, skupinu R*NHR9, R8R8NR9, R8NHC(O)R9 nebo H2N-C(=NH)-NH-, symboly R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě představují vždy atom vodíku nebo skupinu R8OC(O)NHR9,
    10 R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylalkylovou skupinu s 10 atomy uhlíku v cykloalkylové části a 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo arylalkylovou skupinu s 5 až 10 atomy uhlíku varylové části a 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, a
    15 zbývající obecné symboly mají významy definované v nároku 1 nebo 2, jakož i jejich fyziologicky přijatelné soli.
  4. 4. Pětičlenné heterocykly obecného vzorce I podle nároků 1 až 3 pro použití jak léčivo.
  5. 5. Pětičlenné heterocykly obecného vzorce I podle nároků 1 až 3 pro použití jako inhibitory resorpce kostí způsobované osteoklasty, jako inhibitory růstu nádorů a metastázování nádorů, jako protizánětlivá činidla, k léčení nebo profylaxi kardiovaskulárních onemocnění, k léčení nebo profylaxi nefropatií a retinopatií, jakož i jako antagonisté receptoru vitronektinu k léčení
    25 a profylaxi onemocnění, která jsou založena na vzájemném působení receptorů vitronektinu a jejich ligandů při interakčních procesech buňka-buňka nebo buňka-matrix.
  6. 6. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden pětičlenný heterocyklus obecného vzorce I podle nároků 1 až 3 nebo jeho fyziologicky
    30 přijatelnou sůl, kromě farmaceuticky nezávadných nosných a pomocných látek.
CZ1997823A 1996-03-20 1997-03-18 Pětičlenné heterocykly a farmaceutické přípravky, které je obsahují CZ289696B6 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19610919 1996-03-20
DE1996126701 DE19626701A1 (de) 1996-07-03 1996-07-03 Neue Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
DE1996135522 DE19635522A1 (de) 1996-09-02 1996-09-02 Neue Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ82397A3 CZ82397A3 (en) 1997-12-17
CZ289696B6 true CZ289696B6 (cs) 2002-03-13

Family

ID=27216049

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ1997823A CZ289696B6 (cs) 1996-03-20 1997-03-18 Pětičlenné heterocykly a farmaceutické přípravky, které je obsahují

Country Status (25)

Country Link
US (3) US6218415B1 (cs)
EP (1) EP0796855B1 (cs)
JP (1) JP4546584B2 (cs)
KR (1) KR970065523A (cs)
CN (1) CN1072647C (cs)
AR (1) AR006273A1 (cs)
AT (1) ATE212990T1 (cs)
AU (1) AU715729B2 (cs)
BR (1) BR9701335A (cs)
CA (1) CA2199923A1 (cs)
CZ (1) CZ289696B6 (cs)
DE (1) DE59706273D1 (cs)
DK (1) DK0796855T3 (cs)
ES (1) ES2171768T3 (cs)
HK (1) HK1017346A1 (cs)
HR (1) HRP970156A2 (cs)
HU (1) HUP9700602A3 (cs)
IL (1) IL120479A (cs)
MX (1) MX9702070A (cs)
NO (1) NO314547B1 (cs)
NZ (1) NZ314433A (cs)
PL (1) PL319071A1 (cs)
PT (1) PT796855E (cs)
SK (1) SK35097A3 (cs)
TW (1) TW363064B (cs)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0796855B1 (de) 1996-03-20 2002-02-06 Hoechst Aktiengesellschaft Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
US5981546A (en) * 1996-08-29 1999-11-09 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
US5952341A (en) * 1996-10-30 1999-09-14 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
US5919792A (en) * 1996-10-30 1999-07-06 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
DE19647380A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag 5-Ring-Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
DE19647381A1 (de) 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Neue Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
PL323130A1 (en) 1996-11-15 1998-05-25 Hoechst Ag Application of heterocyclic compounds in production of a pharmaceutic agent, novel heterocyclic compounds and pharmaceutic agent as such
US6218387B1 (en) 1996-12-20 2001-04-17 Hoechst Aktiengesellschaft Vitronectin receptor anatagonists, their preparation and their use
US6482821B2 (en) 1996-12-20 2002-11-19 Hoechst Aktiengellschaft Vitronectin receptor antagonists, their preparation and their use
DE19653647A1 (de) * 1996-12-20 1998-06-25 Hoechst Ag Vitronectin - Rezeptorantagonisten, deren Herstellung sowie deren Verwendung
DE19653645A1 (de) * 1996-12-20 1998-06-25 Hoechst Ag Vitronectin - Rezeptorantagonisten, deren Herstellung sowie deren Verwendung
US6017925A (en) * 1997-01-17 2000-01-25 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
DE19741235A1 (de) 1997-09-18 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19741873A1 (de) * 1997-09-23 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19751251A1 (de) 1997-11-19 1999-05-20 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmezeutische Präparate
US6017926A (en) * 1997-12-17 2000-01-25 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
JP2002508323A (ja) * 1997-12-17 2002-03-19 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド インテグリン受容体拮抗薬
US6048861A (en) 1997-12-17 2000-04-11 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
US6211191B1 (en) 1997-12-17 2001-04-03 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
US6066648A (en) 1997-12-17 2000-05-23 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
CN1140511C (zh) 1998-04-09 2004-03-03 明治制果株式会社 作为整合素αvβ3拮抗剂的氨基哌啶衍生物
AU3561099A (en) * 1998-04-14 1999-11-01 American Home Products Corporation Acylresorcinol derivatives as selective vitronectin receptor inhibitors
DE19821483A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
EP1105389A4 (en) * 1998-08-13 2001-10-17 Merck & Co Inc INTEGRIN RECEPTOR ANTAGONISTS
WO2000038715A2 (en) 1998-12-23 2000-07-06 G.D. Searle & Co. Use of an integrin antagonist and radiation in the treatment of neoplasia
US6297233B1 (en) 1999-02-09 2001-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Lactam inhibitors of FXa and method
DE19922462A1 (de) 1999-05-17 2000-11-23 Aventis Pharma Gmbh Spiro-imidazolidinderivate, ihre Herstellung ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
AU749351B2 (en) 1999-06-02 2002-06-27 Merck & Co., Inc. Alpha V integrin receptor antagonists
US6429214B1 (en) 1999-07-21 2002-08-06 Wyeth Bicyclic antagonists selective for the αvβ3 integrin
WO2001010844A1 (en) 1999-08-05 2001-02-15 Meiji Seika Kaisha, Ltd. φ-AMINO-α-HYDROXYCARBOXYLIC ACID DERIVATIVES HAVING INTEGRIN αvβ3 ANTAGONISM
AU7743400A (en) * 1999-10-04 2001-05-10 Merck & Co., Inc. Integrin receptor antagonists
WO2001053297A1 (en) 2000-01-20 2001-07-26 Merck & Co., Inc. Alpha v integrin receptor antagonists
FR2806082B1 (fr) * 2000-03-07 2002-05-17 Adir Nouveaux composes bicycliques antagonistes des recepteurs de la vitronectine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US6511973B2 (en) 2000-08-02 2003-01-28 Bristol-Myers Squibb Co. Lactam inhibitors of FXa and method
DE10111877A1 (de) 2001-03-10 2002-09-12 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE10137595A1 (de) * 2001-08-01 2003-02-13 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
US20080021079A1 (en) * 2003-05-07 2008-01-24 Han-Jie Zhou Compounds, Compositions, and Methods
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
AU2006337137B2 (en) 2005-12-29 2012-06-14 Tersera Therapeutics Llc Multicyclic amino acid derivatives and methods of their use
US20080051335A1 (en) * 2006-05-02 2008-02-28 Kleiner Lothar W Methods, compositions and devices for treating lesioned sites using bioabsorbable carriers
WO2010058402A1 (en) * 2008-11-20 2010-05-27 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Novel anti-biofilm agents
US10328082B2 (en) 2014-05-30 2019-06-25 Pfizer Inc. Methods of use and combinations
CN108778997B (zh) 2016-03-30 2023-01-17 巴斯夫欧洲公司 快速煅烧沸石材料的方法
CN109996541A (zh) 2016-09-07 2019-07-09 普利安特治疗公司 N-酰基氨基酸化合物及其使用方法
RU2769702C2 (ru) 2017-02-28 2022-04-05 Морфик Терапьютик, Инк. Ингибиторы интегрина avb6
EP3589285A4 (en) 2017-02-28 2020-08-12 Morphic Therapeutic, Inc. INHIBITORS OF INTEGRIN (ALPHA-V) (BETA-6)
EP3617206A1 (en) 2018-08-29 2020-03-04 Morphic Therapeutic, Inc. Integrin inhibitors
WO2020205989A1 (en) * 2019-04-01 2020-10-08 Cornell University Small molecule promoting osteoblast differentiation
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2937779A1 (de) 1979-09-19 1981-04-09 Hoechst Ag, 6000 Frankfurt Aminosaeurederivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE3044236A1 (de) 1980-11-25 1982-06-16 Hoechst Ag, 6000 Frankfurt Aminosaeurederivate und verfahren zu ihrer herstellung
FR2487829A2 (fr) 1979-12-07 1982-02-05 Science Union & Cie Nouveaux imino acides substitues, leurs procedes de preparation et leur emploi comme inhibiteur d'enzyme
FR2503155A2 (fr) 1980-10-02 1982-10-08 Science Union & Cie Nouveaux imino diacides substitues, leurs procedes de preparation et leur emploi comme inhibiteur d'enzyme
US4350704A (en) 1980-10-06 1982-09-21 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
EP0046953B1 (de) 1980-08-30 1989-12-06 Hoechst Aktiengesellschaft Aminosäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese enthaltende Mittel und deren Verwendung
US4344949A (en) 1980-10-03 1982-08-17 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acids
FR2492381A1 (fr) 1980-10-21 1982-04-23 Science Union & Cie Nouveaux acides aza bicyclo alcane carboxyliques substitues leurs procedes de preparation et leur emploi comme inhibiteur d'enzyme
EP0050800B2 (en) 1980-10-23 1995-06-07 Schering Corporation Carboxyalkyl dipeptides, processes for their production and pharmaceutical compositions containing them
US4374847A (en) 1980-10-27 1983-02-22 Ciba-Geigy Corporation 1-Carboxyalkanoylindoline-2-carboxylic acids
DE3226768A1 (de) 1981-11-05 1983-05-26 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(3.3.0)-octan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
IE55867B1 (en) 1981-12-29 1991-02-14 Hoechst Ag New derivatives of bicyclic aminoacids,processes for their preparation,agents containing these compounds and their use,and new bicyclic aminoacids as intermediates and processes for their preparation
DE3210496A1 (de) 1982-03-23 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate bicyclischer aminsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3211397A1 (de) 1982-03-27 1983-11-10 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Spiro (4.(3+n))-2-aza-3-carbonsaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3211676A1 (de) 1982-03-30 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate von cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3227055A1 (de) 1982-07-20 1984-01-26 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue derivate der 2-aza-bicyclo(2.2.2)octan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie 2-aza-bicyclo(2.2.2)octan-3-carbonsaeure als zwischenstufe und verfahren zu deren herstellung
DE3242151A1 (de) 1982-11-13 1984-05-17 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue derivate tricyclischer aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung, sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3246503A1 (de) 1982-12-16 1984-06-20 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(5.3.0)-decan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
DE3643012A1 (de) 1986-12-17 1988-06-30 Hoechst Ag 2,3-disubstituierte isoxazolidine, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3818850A1 (de) 1988-06-03 1989-12-07 Hoechst Ag Oligopeptide mit zyklischen prolin-analogen aminosaeuren
DE4009506A1 (de) 1990-03-24 1991-09-26 Hoechst Ag Hydantoinderivate
JPH04367367A (ja) 1991-06-11 1992-12-18 Nkk Corp ロータリノズル
DE4126277A1 (de) 1991-08-08 1993-02-11 Cassella Ag Hydantoinderivate
US5204350A (en) 1991-08-09 1993-04-20 Merck & Co., Inc. Method of inhibiting osteoclast-mediated bone resorption by administration of n-heterocyclicalkyl-substituted phenyl derivatives
US5217994A (en) * 1991-08-09 1993-06-08 Merck & Co., Inc. Method of inhibiting osteoclast-mediated bone resorption by administration of aminoalkyl-substituted phenyl derivatives
DE4207254A1 (de) 1992-03-07 1993-09-09 Cassella Ag 4-oxo-2-thioxoimidazolidin-derivate
DE4213634A1 (de) 1992-04-24 1993-10-28 Cassella Ag 2,4-Dioxo-imidazolidin-Derivate
DE4224414A1 (de) * 1992-07-24 1994-01-27 Cassella Ag Phenylimidazolidin-derivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4228717A1 (de) * 1992-08-28 1994-03-03 Cassella Ag Imidazolidin-Derivate
AU674553B2 (en) 1992-10-14 1997-01-02 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
AU675689B2 (en) 1992-12-01 1997-02-13 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
DE4301747A1 (de) * 1993-01-23 1994-07-28 Cassella Ag Substituierte Aminoverbindungen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4308034A1 (de) 1993-03-13 1994-09-15 Cassella Ag Neue Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4427979A1 (de) * 1993-11-15 1996-02-15 Cassella Ag Substituierte 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
US5770565A (en) 1994-04-13 1998-06-23 La Jolla Cancer Research Center Peptides for reducing or inhibiting bone resorption
EP0760658B1 (en) 1994-05-27 2002-11-13 Merck & Co. Inc. Compounds for inhibiting osteoclast-mediated bone resorption
ZA955391B (en) 1994-06-29 1996-02-09 Smithkline Beecham Corp Vitronectin receptor antagonists
JPH10504808A (ja) 1994-06-29 1998-05-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ビトロネクチン受容体拮抗物質
TW449590B (en) * 1995-04-14 2001-08-11 Boehringer Ingelheim Kg New arylglycinamide derivatives, processes for the manufacture thereof and pharmaceutical compositions containing these compounds
JP3895792B2 (ja) * 1995-12-08 2007-03-22 プロスケリア・エス・ア・エス 骨形成促進剤
EP0796855B1 (de) 1996-03-20 2002-02-06 Hoechst Aktiengesellschaft Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten

Also Published As

Publication number Publication date
NO314547B1 (no) 2003-04-07
EP0796855B1 (de) 2002-02-06
US6620820B2 (en) 2003-09-16
TW363064B (en) 1999-07-01
CA2199923A1 (en) 1997-09-20
JPH09255664A (ja) 1997-09-30
DK0796855T3 (da) 2002-05-27
IL120479A0 (en) 1997-07-13
IL120479A (en) 2001-03-19
KR970065523A (ko) 1997-10-13
CN1206005A (zh) 1999-01-27
JP4546584B2 (ja) 2010-09-15
NO971268D0 (no) 1997-03-19
AU715729B2 (en) 2000-02-10
HRP970156A2 (en) 1998-04-30
HUP9700602A1 (hu) 1998-03-30
NO971268L (no) 1997-09-22
HU9700602D0 (en) 1997-05-28
SK35097A3 (en) 1997-10-08
ES2171768T3 (es) 2002-09-16
ATE212990T1 (de) 2002-02-15
US20010021708A1 (en) 2001-09-13
US20020119999A1 (en) 2002-08-29
HUP9700602A3 (en) 2000-04-28
PT796855E (pt) 2002-07-31
BR9701335A (pt) 1998-08-18
MX9702070A (es) 1998-03-31
DE59706273D1 (de) 2002-03-21
AU1638097A (en) 1997-09-25
HK1017346A1 (en) 1999-11-19
EP0796855A1 (de) 1997-09-24
AR006273A1 (es) 1999-08-11
NZ314433A (en) 1999-03-29
CN1072647C (zh) 2001-10-10
PL319071A1 (en) 1997-09-29
CZ82397A3 (en) 1997-12-17
US6218415B1 (en) 2001-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ289696B6 (cs) Pětičlenné heterocykly a farmaceutické přípravky, které je obsahují
KR100541172B1 (ko) 골흡수억제제및비트로넥틴수용체길항제로서의사이클로알킬유도체,이의제조방법및이를함유하는약제학적조성물
US6005117A (en) Imino compounds, process for their preparation and their use as victronectin antagonists
US6011045A (en) Vitronectin receptor antagonists, their preparation and their use
BG64754B1 (bg) Нови ацилгуанидинови производни като инхибитори на костната резорбция и като антагонисти на витронектиновите рецептори
CZ287885B6 (cs) Deriváty 2,4-dioxoimidazolidinu, způsob jejich výroby, jejich použití a farmaceutický prostředek, tyto látky obsahující
CZ294437B6 (cs) Substituované purinové deriváty, způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky s jejich obsahem
CZ292573B6 (cs) Substituované pětičlenné heterocykly, způsob jejich výroby a jejich použití v léčivech
US7763621B2 (en) Vitronectin receptor antagonist derivatives, method for preparing same, use thereof as medicines and pharmaceutical compositions containing same
RU2195460C2 (ru) Новые ингибиторы рассасывания костей и антагонисты рецептора витронектина
US20040225111A1 (en) Antagonist derivatives of the vitronectin receptor
MXPA97005586A (en) New derivatives of imino as inhibitors of the bone resortion and antagonists of vitronect receptors
MXPA97005585A (en) New cyclalacyl derivatives as inhibitors of bone resortion and vitronect receptor antagonists

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20040318