NO20230913A1 - Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse - Google Patents

Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse Download PDF

Info

Publication number
NO20230913A1
NO20230913A1 NO20230913A NO20230913A NO20230913A1 NO 20230913 A1 NO20230913 A1 NO 20230913A1 NO 20230913 A NO20230913 A NO 20230913A NO 20230913 A NO20230913 A NO 20230913A NO 20230913 A1 NO20230913 A1 NO 20230913A1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
crystal
crystal form
ray powder
compound
mixture
Prior art date
Application number
NO20230913A
Other languages
English (en)
Other versions
NO347902B1 (no
Inventor
Koji Ando
Motohide Satoh
Takashi Matsuda
Kentaro Kondo
Koji Matsuda
Shuji Miyake
Hideto Uehara
Takahisa Matomura
Original Assignee
Japan Tobacco Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35079161&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO20230913(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Publication of NO20230913A1 publication Critical patent/NO20230913A1/no
Application filed by Japan Tobacco Inc filed Critical Japan Tobacco Inc
Publication of NO347902B1 publication Critical patent/NO347902B1/no

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C07D215/54—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen attached in position 3
    • C07D215/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen attached in position 3 with oxygen atoms in position 4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Quinoline Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Beskrivelse av stabil krystall av 4-oksoquinolinforbindelse Teknisk område
Den foreliggende oppfinnelsen angår en stabil krystall av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-okso-1,4-dihydroquinolin-3-karboksylsyre
(i det følgende noen ganger til å være forbindelse A) og en blandet krystall derav. Den foreliggende oppfinnelsen angår også en farmasøytisk sammensetning som omfatter krystallen eller den blandede krystallen.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Den foreliggende søker har beskrevet i japansk patentsøknad nr.2003-293117 innlevert av foreliggende søker at forbindelsen A beskrevet over har en inhibitorisk funksjon på integrase som er et essensielt enzym for veksten av HIV (human immundefektvirus), som er et forårsakende virus til AIDS (ervervet immundefektsyndrom), og viser en anti-HIV-effekt (særlig eksempel 4 – 32 og eksperimentelt eksempel).
Generelt når en forbindelse benyttes som et farmasøytisk produkt kreves det en viss kjemisk og fysisk stabilitet av oppfinnelsen for å opprettholde kvalitet og/eller gi beskyttelse. Det er ønskelig at ikke bare den endelige farmasøytiske sammensetningen, men også en forbindelse som et syntetisk startmateriale er kjemisk og fysisk stabilt for de samme årsakene.
Derfor er en slik forbindelse fortrinnsvis en krystall, mer ønskelig en stabil krystall. Når forbindelsen har krystallpolymorfisme velges generelt den mest stabile krystallen.
Når søknaden nevnt over beskriver forbindelse A, finnes ingen konkret beskrivelse angående krystallformen til forbindelse A.
Sammendrag av oppfinnelsen
Således har de foreliggende oppfinnerne studert ulike krystallformer av forbindelse A i et forsøk på å finne en stabil krystall av forbindelse A. Som et resultat har de funnet at forbindelse A har krystallpolymorfisme, og en krystall av forbindelse A, som har en bestemt krystallform, er anvendelig som en stabil krystall, og basert på disse resultatene har de fullført den foreliggende oppfinnelsen.
I samsvar med dette tilveiebringer den foreliggende oppfinnelsen følgende.
[1] En krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-okso-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster, som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(°) på 6,56, 13,20, 19,86, 20,84, 21,22, 25,22º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter;
[2] en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2metylpropyl]-7-metoksy-4-okso-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster, som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(°) på 8,54, 14,02, 15,68, 17,06, 17,24, 24,16, 25,74º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter;
[3] en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-okso-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har en ekstrapolert begynnelsestemperatur på 162,1 ± 5,0ºC;
[4] krystallen til en hvilken som helst av de som er nevnt over [1] til [3], som har en krystallrenhet på ikke mindre enn 70%;
[5] en blandet krystall som omfatter krystallen til den som er nevnt over 1 og krystallen til de som er nevnt over i [2] eller [3];
[6] den blandede krystallen til det som er nevnt over i [5], hvor krystallrenheten ikke er mindre enn 70%;
[7] en farmasøytisk sammensetning som omfatter krystallen til enhver av de som er nevnt over i [1] til [4] eller den blandede krystallen av det som er nevnt over i [5] eller [6], og en farmasøytisk akseptabel bærer;
[8] en integraseinhibitor som omfatter krystallen til enhver av de som er nevnt over i [1] til [4] eller blandingskrystallen til de som er nevnt over i [5] eller [6] som en aktiv ingrediens;
[9] en antivirusfaktor som omfatter krystallen til enhver av de som er nevnt over i [1] til [4] eller den blandede krystallen til de som er nevnt over i [5] eller [6] som en aktiv ingrediens;
[10] en anti-HIV-faktor som omfatter krystallen til enhver av de som er nevnt over i [1] til [4] eller den blandede krystallen til én av de som er nevnt over i [5] eller [6] som en aktiv ingrediens;
[11] en anti-HIV-sammensetning som omfatter krystallen til enhver av de som er nevnt over i [1] til [4] eller den blandede krystallen til de som er nevnt over i [5] eller [6] og én eller flere slag av andre anti-HIV-aktive substanser som aktive ingredienser; og [12] en anti-HIV-faktor for en mangesidig medikamentbehandling med annen anti-HIV-faktor, som omfatter krystallen til enhver av de som er nevnt over i [1] til [4] eller blandingskrystallen til de som er nevnt over i [5] eller [6] som en aktiv ingrediens.
KORT BESKRIVELSE AV TEGNINGENE
Fig. 1 viser mangfoldige fortegnelser av røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønstre, hvor den øvre linje viser diffraksjonsmønsteret til krystallform III, den midterste linjen viser diffraksjonsmønsteret til krystallform I, den nederste linjen viser diffraksjonsmønsteret til krystallform II, den vertikale aksen viser diffraksjonsintensiteten (cps: opptellinger per sekund: intervaller på skala er 2500 cps) og den transverse akse viser diffraksjonsvinkel 2θ(º).
Fig. 2 viser mangfoldige fortegnelser av røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønstre ervervet fra prøven etter en tredagers konservering av stabilitetstesten til krystallform I. For sammenligning viser den øverste linjen diffraksjonsmønsteret (begynnende forhold) til krystallform II, og den nederste linjen viser diffraksjonsmønsteret (begynnende forhold) til krystallform I. Fra andre linje er det vist diffraksjonsmønstre under konserveringsforhold #6 (60ºC/75% R.H., åpen beholder, 3 uker konservering), konserveringsforhold #4 (60ºC, beholder med stopper, 3 uker konservering), konserveringsforhold #5 (60ºC, åpen beholder, 3 uker konservering), konserveringsforhold #3 (80ºC, åpen beholder, 3 dager konservering) og konserveringsforhold #2 (80ºC), beholder med stopper, 3 dager konservering). Den vertikale aksen viser diffraksjonsintensitet (cps: opptellinger per sekund: intervaller på skala er 2500 cps) og den transverse akse viser diffraksjonsvinkel 2θ (º).
EFFEKT AV OPPFINNELSEN
Krystallen eller den blandede krystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen har den bestemte krystallformen som er nevnt over og er overordnet i fysisk og kjemisk stabilitet som igjen gjør at kvaliteten til forbindelse A kan opprettholdes over lang tid og som muliggjør konservering. I tillegg har de fordelene ved at håndteringen gjennom produksjonen av de ulike farmasøytiske sammensetningene og i større volum er lett, noe som reduserer produksjonskostnaden.
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelsen forklares i detalj i det følgende.
I den foreliggende oppfinnelsen menes ”krystallform II” av forbindelse A en krystall av forbindelse A, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(°) på 6,56, 13,20, 19,86, 20,84, 21,22, 25,22° som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter.
I den foreliggende oppfinnelsen menes ”krystallform av forbindelse A en krystall av forbindelse A, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(°) på 8,54, 14,02, 15,68, 17,06, 17,24, 24,16, 25,74° som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter.
Diffraksjonstoppverdien ved den nevnte diffraksjonsvinkelen 2θ (º) kan vise ubetydelige målingsfeil på grunn av målingsinstrumentene eller målingsforholdene og lignende. For å være mer spesifikk kan målingsfeilen være innenfor rekkevidden av ± 0,2, fortrinnsvis ± 0,1, eller mer ønskelig ± 0,06.
Krystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen karakteriseres også ved termisk analyse. For eksempel når krystallformen III av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen underkastes differensiell skanningkalorimetri (DSC), er entalpien til endotermisk topp omtrent 81 J/g, og ekstrapolert begynnelsestemperatur er 162,1 ± 5,0ºC, fortrinnsvis 162,1 ± 3,0ºC, mer ønskelig 162,1 ± 1,0ºC, hvor den ”ekstrapolerte begynnelsestemperatur” betyr, som definert av JIS K 7121 (målingsmetode på overførselstemperatur til plastikk), temperaturen ved et skjæringspunkt på den ekstrapolerte grunnlinjen til den lavere temperatursiden mot den høyere temperatursiden med tangentlinjen tegnet ved punktet som viser det største fall på fremkanten til smeltetoppen på en lavere temperaturside i en DSC-kurve. Når entalpien og den ekstrapolerte begynnelsestemperaturen til den endotermiske toppen er innenfor rekkevidden som er nevnt over, er krystallen til forbindelse A stabil.
Krystallen til forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen kan enten være en krystallform II eller en krystallform III, eller en blandet krystall av en krystallform II og en krystallform III. For anvendelse av forbindelse A i et farmasøytisk produkt eller lignende, er krystallformen II eller krystallformen III ønskelig fordi de er stabile krystaller, og en krystallform III er mest ønskelig fordi den er den mest stabile krystallen. I tillegg er en krystallform II ønskelig i lys av absorpsjonsevnen til levende organismer ved administrering som en farmasøytisk forbindelse.
I den foreliggende oppfinnelsen, menes ”krystallrenhet” renheten til krystallformen II eller krystallformen III av forbindelse A. I tilfelle av en blandet krystall av en krystallform II og en krystallform III, menes forholdet av krystall relativt til den totale mengden av substans av en krystallform II og en krystallform III. Krystallrenheten i den foreliggende oppfinnelsen kan bestemmes ved, for eksempel, kjente metoder slik som røntgenstrålepulverdiffraksjonsmetri, termisk analyse og lignende. Renheten til krystallen eller den blandede krystallen i den foreliggende oppfinnelsen behøver ikke være 100%, og kan være ikke mindre enn 70%, fortrinnsvis ikke mindre enn 80%, mer ønskelig ikke mindre enn 90%, mest ønskelig ikke mindre enn 95% og mest foretrukket ikke mindre enn 98%. Renhet innenfor denne rekkevidde er ønskelig for å garantere kvaliteten.
Krystallen eller den blandede krystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen kan administreres til et pattedyr (menneske, mus, rotte, hamster, kanin, katt, hund, kveg, sau, ape osv.) og lignende, da lignende farmasøytiske sammensetninger, slik som anti-HIV-faktorer, HIV-integraseinhibitorer, antivirusfaktorer og lignende anvendes til, for eksempel for å forebygge og/eller behandle AIDS.
Når krystallen eller blandingskrystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen anvendes som en farmasøytisk sammensetning, blandes den med farmasøytiske aksepterbare bærere, tilsetningsstoffer, fortynningsmidler, utvidende faktorer, nedbrytbare stoffer, stabilisatorer, konserveringsmidler, buffere, emulgeringsmidler, aromastoffer, fargestoffer, søtningsmidler, fortykningsmidler, forbedringsmidler, oppløsningssyrer, og andre tilsetningsstoffer, som i seg selv generelt er kjent, slik som vann, vegetabilsk olje, alkohol (for eksempel etanol eller benzylalkohol osv.), polyetylenglykol, glyceroltriacetat, gelatin, karbohydrat (for eksempel laktose, stivelse osv.), magnesiumstearat, talkum, lanolin, petrolatum og lignende, formet til piller, tabletter, pulver, partikler, stikkpiller, injeksjon, øyedråper, væske, kapsler, troké, aerosol, eliksir, suspensjon, emulsjon, sirup og lignende ved en konvensjonell metode, og administreres systemisk eller topisk, og oralt eller parenteralt.
Mens dosene varierer avhengig av alder, kroppsvekt, symptom, behandlingseffekt, administreirngsmetode og lignende, er det generelt 0,01 mg til 1 g per administrering til en voksen, som gis én til flere ganger daglig oralt eller i en doseringsform, slik som intravenøs injeksjon og lignende.
En anti-HIV-faktor kreves generelt å vedlikeholde sin effekt i en lang tidsperiode, slik at den kan være effektiv ikke bare for en timelig nedtrykking av virusvekst, men også for å hindre virusgjenvekst. Dette betyr at en forlenget administrering er nødvendig og at høye enkeltdoser ofte kan være uunngåelige for å opprettholde effekten i en lengre tidsperiode om natten og lignende. Slik forlenget og administrering med høye doser øker risikoen for bieffekter.
I lys av dette er én av de ønskelige måtene i den foreliggende oppfinnelsen en forbindelse, som tillater høy absorpsjon ved oral administrering og en forbindelse kvalifisert til å opprettholde blodkonsentrasjon av den administrerte forbindelsen for en utstrakt tidsperiode.
Ved fortegnelsen ”forebyggelse av AIDS” menes det, for eksempel, å administrere en farmasøytisk faktor til et individ som har testet HIV-positiv, men som ikke enda har utviklet sykdomstilstanden av AIDS, og administrere en farmasøytisk faktor til et individ som viser en forbedret sykdomstilstand av AIDS etter behandling, men som fremdeles bærer HIV og hvor er bekymret for tilbakefall av AIDS, og å administrere en farmasøytisk faktor for å hindre mulig infeksjon.
Anti-HIV-sammensetningen i den foreliggende oppfinnelsen anvendes til for eksempel en sammensatt medikamentkombinasjonsbehandling av AIDS. Eksempler på ”annen anti-HIV aktiv substans” som kan anvendes for anti-HIV-sammensetningen inkluderer et anti-HIV-antistoff, en HIV-vaksine, immunstimulanser, slik som interferon og lignende, et HIV-ribozym, et HIV-antisensmedikament, en HIV-revers transkriptaseinhibitor, en HIV-proteaseinhibitor, en inhibitor for bindingen mellom en bindingsreseptor (CD4, CXCR4, CCR5 og lignende) i en vertscelle gjenkjent av virus og viruset, og lignende.
Spesifikke eksempler på HIV-revers transkriptaseinhibitor inkluderer Retrovir(R) (zidovudin), Epivir(R) (lamivudin), Zerit(R) (sanilvudin), Videx(R) (didanosin), Hivid(R) (zalcitabin), Ziagen(R) (abacavirsulfat), Viramun(R) (nevirapin), Stocrin(R) (efavirenz), Rescriptor(R) (delavirdinmesylat), Combivir(R) (zidovudin+lamivudin), Trizivir(R) (abacavirsulfat+lamivudin+zidovudin), Coactinon(R) (emivirin), Phosphonovir(R), Coviracil(R), alovudin (3’-fluor-3’-deokstymidin), Thiovir (tiofosfonmaursyre), Capravirin (5-[(3,5-diklorofenyl)thio]-4-isopropyl-1-(4-pyridylmetyl)imidazol-2-metanolkarbamatsyre), Tenofovirdisoproksilfumarat ((R)-[[2-(6-amino-9H-purin-9-yl)-1-metyletoksy]metyl]fosfonisk syre bis(isopropoksykarbonyloksymetyl)esterfumarat), DPC-083 ((4S)-6-klor-4-[(1E)-cyklopropyletenyl]-3,4-dihydro-4-trifluormetyl-2(1H)-kinazolinon), DPC-961 ((4S)-6-klor-4-(cyklopropyletynyl)-3,4-dihydro-4-(trifluormetyl)-2(1H)-kinazolinon), DAPD ((-)-β-D-2,6-diaminopurindioksolan), Immunocal, MSK-055, MSA-254, MSH-143, NV-01, TMC-120, DPC-817, GS-7340, TMC-125, SPD-754, D-A4FC, capravirin, UC-781, emtricitabin, alovudin, Phosphazid, UC-781, BCH-10618, DPC-083, Etravirin, BCH-13520, MIV-210, Abacavirsulfat/lamivudin, GS-7340, GW-5634, GW-695634 og lignende, hvor (R) betyr et registrert varemerke (i det følgende det samme) og navnene på andre farmasøytiske faktorer er generelle navn.
Spesifikke eksempler på HIV-proteaseinhibitoren inkludererCrixivan(R)
(indinavir sulfate ethanolate), saquinavir, Invirase(R)
(saquinavir mesylate), Norvir(R) (ritonavir), Viracept(R) (nelfinavir mesylate), lopinavir, Prozei(R) (amprenavir), Kaletra(R) (ritonavir+lopinavir), mozenavirdimesylat ([4R-(4α,5α,6β)]-1,3-bis[(3-aminofenyl)fenyl]hexahydro-5,6-dihydroksy-4,7-bis(fenylfenyl)-2H-1,3-diazepin-2-one dimetansulfonat), tipranavir (3’-[(1R)-1-[(6R)-5,6-dihydro-4-hydroksy-2-oxo-6-fenyletyl-6-propyl-2H-pyran-3-yl]-propyl]-5-(trifluorofenyl)-2-pyridinsulfonamid), lasinavir (N-[5(S)-(tert-butoksykarbonylamino)-4(S)-hydroksy-6-fenyl-2(R)-(2,3,4-trimetoksybenzyl)heksanoyl]-L-valin-2-metoksyetylenamid), KNI-272 ((R)-N-tert-butyl-3-[(2S,3S)-2-hydroksy-3-N-[(R)-2-N-(isokinolin-5-yloxyacetyl)amino-3-fenylthiopropanoyl]amino-4-fenylbutanoyl]-5,5-difenyl-1,3-thiazolidine-4-karboxamid), GW-433908, TMC-126, DPC-681, buckminsterfulleren, MK-944A (MK944 (N-(2(R)-hydroksy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylfenyl-4(S)-hydroksy-5-[4-(2-benzo[b]furanylfenyl)-2(S)-(tert-butylkarbamoyl)piperazin-1-yl]pentanamid)+indinavirsulfat), JE-2147 ([2(S)-oxo-4-fenylfenyl-3(S)-[(2-fenyl-3-oxy)fenylkarbonylamino]-1-oxabutyl]-4-[(2-fenylfenyl)fenylamino]karbonyl-4(R)-5,5-difenyl-1,3-thiazol), BMS-232632 ((3S,8S,9S,12S)-3,12-bis(1,1-difenyletyl)-8-hydroksy-4,11-dioxo-9-(fenylfenyl)-6-[[4-(2-pyridinyl)fenyl]fenyl]-2,5,6,10,13-pentaazatetradekanedikarboksylisyre-dimetylester), DMP-850 ((4R,5S,6S,7R)-1-(3-amino-1H-indazol-5-ylfenyl)-4,7-dibenzyl-3-butyl-5,6-dihydroksyperhydro-1,3-diazepin-2-on), DMP-851, RO-0334649, Nar-DG-35, R-944, VX-385, TMC-114, Tipranavir, Fosamprenavirnatrium, Fosamprenavirkalsium, Darunavir, GW-0385, R-944, RO-033-4649, AG-1859 og lignende.
HIV-integraseinhibitoren illustreres ved S-1360, L-870810 og lignende, DNA-polymeraseinhibitoren eller DNA-synteseinhibitoren illustreres ved Foscavir(R), ACH-126443 (L-2’,3’-didehydro-dideoksy-5-fluorcytidin), entecavir ((1S,3S,4S)-9-[4-hydroksy-3-(hydroksymetyl)-2-metylencyklopentyl]guanin), calanolid A ([10R-(10α,11β,12α)]-11,12-dihydro-12-hydroksy-6,6,10,11-tetrametyl-4-propyl-2H,6H,10H-benzo[1,2-b:3,4-b’:5,6-b”]tripyran-2-on), calanolid B, NSC-674447 (1,1’-azobisformamid), Iscador (viscum alubm-ekstrakt), Rubitecan og lignende, HIV-antisensmedikamentet illustreres ved HGTV-43, GEM-92 og lignende, anti-HIV-antistoffet eller andre antistoff illustreres ved NM-01, PRO-367, KD-247, Cytolin (R), TNX-355 (CD4-antistoff, AGT-1, PRO-140 (CCR5 antistoff), Anti-CTLA-4MAb og lignende, HIV-vaksinen eller andre vaksinere illustreres ved ALVAC (R), AIDSVAX (R), Remune (R), HIVgp41 vaksine, HIVgp120 vaksine, HIVgp140 vaksine, HIVgp160 vaksine, HIVp17 vaksine, HIVp24 vaksine, HIVp55 vaksine, AlphaVax Vector System, canarypox gp160 vaksine, AntiTat, MVA-F6 Nef vaksine, HIVrev vaksine, C4-V3 peptide, p2249f, VIR-201, HGP-30W, TBC-3B, PARTICLE-3B og lignende, antiferon (interferon-α-vaksine) og lignende, interferonet eller interferonagonisten illustreres ved Sumiferon (R), MultiFeron (R), interferon-τ, Reticulse, human leukocyttinterferon α og lignende, CCR5-antagonisten illustreres ved SCH-351125 og lignende, den farmasøytiske faktoren som virker på HIV p24 illustreres ved GPG-NH2 (glycyl-propyl-glycinamid) og lignende, HIV-fusjonsinhibitoren illustreres ved FP-21399 (1,4-bis[3-[(2,4-diklorfenyl)karbonylamino]-2-oxo-5,8-dinatriumsulfonyl]naftyl-2,5-dimetoksyfenyl-1,4-dihydrazone), T-1249, Syntetisk polymerkonstruksjon nr.3, pentafusid, FP-21399, PRO-542, Enfuvirtid og lignende, IL-2-agonisten eller –antagonisten illustreres ved interleukin-2-, Imunace(R), Proleukin(R), Multikine(R), Ontak(R) og lignende, TNF-αantagonisten illustreres ved Thalomid(R) (thalidomid), Remicade(R) (infliximab), curdlansulfat, α-glukosidaseinhibitoren illustreres ved Bucast (R) og lignende, purinnukleosidfosforylaseinhibtoren illustreres ved peldesin (2-amino-4-oxo-3H,5H-7-[(3-pyridyl)metyl]pyrrolo[3,2-d]pyrimidin) og lignende, apoptoseagonisten eller –inhibitoren illustreres ved Arkin Z(R), Panavir(R), Coenzym Q10 (2-deca(3-metyl-2-butenylen)-5,6-dimetoksy-3-metyl-p-benzokinon) og lignende, kolinesteraseinhibitoren illustreres ved Cognex (R) og lignende, og immunmodulatoren illustreres ved Imunox (R), Prokine (R), Met-enkephalin (6-de-L-arginin-7-de-L-arginin-8-de-L-valinamid-adrenorfin), WF-10 (10 ganger fortynnet tetraklordecaoksidløsning), Perthon, PRO-542, SCH-D, UK-427857, AMD-070, AK-602 og lignende.
I tillegg illustreres Neurotropin (R), Lidakol (R), Ancer 20 (R), Ampligen (R), Anticort (R), Inactivin (R) og lignende, PRO-2000, Rev M10 gen, HIV-spesifikk cytotoksisk T-celle (CTL-immunterapi, ACTG protokoll 080-behandling, CD4-ζ genterapi), SCA bindingsprotein, RBC-CD4 kompleks, Motexafin-gadolinium, GEM-92, CNI-1493, (±)-FTC, Ushercell, D2S, BufferGel(R), VivaGel(R), Glyminox vaginalgel, natriumlaurylsulfat, 2F5, 2F5/2G12, VRX-496, Ad5gag2, BG-777, IGIV-C, BILR-255og lignende.
Som ”annen anti-HIV-aktivitetssubstans” som kan anvendes for anti-HIV-sammensetningen i den foreliggende oppfinnelsen i den sammensatte medikamentkombinasjonsbehandlingen, foretrekkes det en HIV-revers transkriptaseinhibitor og en HIV-proteaseinhibitor. To eller tre, eller flere farmasøytiske faktorer kan anvendes i kombinasjon, hvor en kombinasjon av farmasøytiske faktorer som har ulike virkningsmekanismer er én av de foretrukne utførelsesformer. I tillegg er utvelgelse av farmasøytiske faktorer fri for duplisering av bieffekter ønskelig.
Spesifikke eksempler på kombinasjon av farmasøytiske faktorer inkluderer en kombinasjon av en gruppe bestående av efavirenz, tenofovir, emtricitabine, indinavir, nelfinavir, atazanavir, ritonavir indinavir, ritonavir lopinavir og ritonavir saquinavir, didanosine lamivudine, zidovudine didanosine, stavudine didanosine, zidovudine lamivudine, stavudine lamivudine og emtriva, og krystallen eller den blandede krystallen i den foreliggende oppfinnelsen (Guidelines for the Use of Antiretroviral Agents in HIV-Infected Adults and Adolescents. August 13, 2001). Særlig foretrukket er en kombinert anvendelse av to faktorer av krystallen eller den blandede krystallen i den foreliggende oppfinnelsen med efavirenz, indinavir, nelfinavir, tenofovir, emtricitabine, zidovudine eller lamivudine, og en kombinert anvendelse av tre faktorer av krystallen eller den blandede krystallen i den foreliggende oppfinnelsen med zidovudine lamivudine, tenofovir lamivudine, tenofovir zidovudine, tenofovir efavirenz, tenofovir nelfinavir, tenofovir indinavir, tenofovir emtricitabine, emtricitabine lamivudine, emtricitabine zidovudine, emtricitabine efavirenz, emtricitabine nelfinavir, emtricitabine indinavir, nelfinavir lamivudine, nelfinavir zidovudine, nelfinavir efavirenz, nelfinavir indinavir, efavirenz lamivudine, efavirenz zidovudine eller efavirenz indinavir.
Produksjonsmetoden for krystallen eller den blandede krystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen er ikke særlig begrenset, og krystallen kan produseres i og for seg ved en kjent metode eller metoder vist i de følgende eksempler og lignende.
Eksempler
Selv om produksjonsmetoden til krystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen forklares i det følgende ved å referere til eksempler, er dette kun eksempler og vil ikke på noen slags måte begrense den foreliggende oppfinnelse.
Henvisning til eksempel 1: Produksjon av krystallform I av forbindelsen A
Trinn 1
2,4-difluorbenzosyre (50 g, 316 mmol) ble løst i svovelsyre (200 ml), og N-jodsuksinimid (68 g, 300 mmol) ble tilsatt i porsjoner ved ikke mer enn 5ºC. Etter sluttføringen av tilsatsen ble blandingen rørt ved den samme temperaturen i 4,5 timer. Reaksjonsblandingen ble helt opp i isvann (ca.600 ml), deretter ble 10% vannholdig natriumsulfittløsning tilsatt og blandingen ble rørt. Det presipiterte, faste stoffet ble samlet ved filtrering, vasket med vann og vakuumtørket til å gi ubearbeidede krystaller (85 g). De ubearbeidede krystallene ervervet på samme måte ble kombinert (total mengde 205 g), og rekrystallisert fra 50% vannholdig etanol (820 ml) til å gi 2,4-difluor-5-jodbenzosyre (148 g, utbytte 73%) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR(CDCl3300MHz) (σ) ppm: 6,94(1H, dd, J=10,3, 10,3Hz), 8,46 (1H, d, J=7,5Hz)
Trinn 2
Forbindelsen (148 g, 521 mmol) ervervet i trinn 1 ble løst i toluen (750 ml), tionylklorid (76 ml, 1,04 mol) og dimetylformamid (katalytisk mengde) ble tilsatt, og blandingen ble varmet under tilbakestrømning i 2 timer. Det uløselige materialet ble filtrert vekk ved 60ºC, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med toluen (330 ml). Enheten ble løst i tetrahydrofuran (400 ml), og denne løsning ble tilsatt dråpevis til en løsning av etyl-3,3-dimetylaminoakrylat (82 g, 573 mmol) og trietylamin (87 ml, 625 mmol) i tetrahydrofuran (400 ml), og blandingen ble varmet under tilbakestrømning i 7 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle ved romtemperatur, og konsentrert under redusert trykk. Vann (700ml) og etylacetat (800 ml) ble tilsatt for deling. Det organiske laget ble vasket suksessivt med mettet, vannholdig natriumhydrogenkarbonat (250 ml, X2), vann (300 ml) og mettet saltlake (300 ml), og tørket over natriumsulfat. Etter filtrering av uløselig materiale ble filtratet konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (210 g) av 2-(2,4-difluor-5-jodbenzoyl)-3-dimetylaminoakrylsyreetylester som et brunt faststoff.
Trinn 3
Det ubehandlede produktet (210 g) ervervet i trinn 2 ble løst i tetrahydrofuran (500 ml), (S)-(+)-valinol (54 g, 521 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk og enheten ble løst i dimetylformamid (600 ml). Kaliumkarbonat (144 g, 1,04 mol) ble tilsatt og blandingen ble rørt under varming ved 70ºC i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle og tilsatt til vann (1500 ml) og rørt. Det presipiterte, faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering og det ervervede faste stoffet ble vasket suksessivt med 30% vandig etanol (500 ml) og et blandet løsningsmiddel av dietyleter (150ml) og heksan (150 ml) og vakuumtørket til å gi 7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (178 g, utbytte 76%) som et beige faststoff. <1>H NMR(DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72(3H, d, J=6,6Hz), 1,10 (3H, d, J=6,6Hz), 1,28(3H, t, J=7,0Hz), 2,27 (1H, br), 3,77 (1H, br), 3,86(1H, br), 4,23 (2H, q, J=7,0Hz), 4,56(1H, br), 5,12 (1H, t, J=4,9Hz), 8,09(1H, d, J=11,1Hz), 8,62 (1H, d, J=7,5Hz), 8,68(1H, s)
MS(ESI): M+ 448
Trinn 4
hvor TBDMS betyr en tert-butyldimetylsilylgruppe.
Forbindelsen (80 g, 179 mmol) ervervet i trinn 3 ble løst i dimetylformamid (320 ml), imidazol (16 g, 233 mmol) og tert-butyldimetylsilylklorid (30 g, 197 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1,5 timer. Vann ble tilsatt til reaksjonsblandingen og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med mettet vannholdig ammoniumkloridløsning og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Det organiske laget ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble renset ved silikagelkromatografi (etylacetat:heksan = 1:3 til 1:2) til å gi 1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-7-fluor-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (77 g, utbytte 77%) som en fargeløs amorf form.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0,07(3H, s), -0,05(3H, s), 0,77(9H, s), 0,84(3H,d, J=6,5Hz), 1,18(3H, d, J=6,5Hz), 1,40(3H, t, J=7,2Hz), 2,35-2,50(1H, m), 3,85-3,95(1H, m), 3,98-4,10(2H, m), 4,30-4,40(2H, m), 7,26(1H,s), 8,64(1H, s), 8,94(1H, d, J=7,2Hz) MS(ESI): M+ 562
Trinn 5
(Fremstilling av en løsning av 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran)
Under en argonstrøm ble sinkpulver (11 g, 267 mmol) suspendert i tetrahydrofuran (30 ml), 1,2-dibrometan (0,15 ml, 1,8 mmol) og trimetylsilylklorid (0,45 ml, 3,6 mmol) ble tilsatt ved 65ºC og blandingen ble rørt under oppvarming i 30 minutter. En løsning av 3-klor-2-fluorbenzylbromid (41 g, 178 mmol) i tetrahydrofuran (100 ml) ble tilsatt dråpevis ved 65ºC, og blandingen ble rørt under oppvarming i 2 timer og tillat å avkjøle til romtemperatur for å gi en løsning av 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran. Dette ble anvendt i det neste hovedtrinnet.
(Hovedtrinn)
Forbindelsen (75 g, 136 mmol) ervervet i trinn 4 ble løst i tetrahydrofuran (600 ml) og, under en argonstrøm, ble dibenzylidenacetonpalladium(II) (3,2 g, 5,5 mmol) og trifurylfosfin (2,6 g, 11,0 mmol) tilsatt og en løsning av det tidligere nevnte 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromidet i tetrahydrofuran (178 ml, 178 mmol) ble tilsatt dråpevis ved 60ºC. Etter fullførelsen av den dråpevise tilsetningen ble blandingen rørt under oppvarming ved den samme temperaturen i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, mettet vannholdig ammoniumkloridløsning ble tilsatt, og blandingen ble filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble ekstrahert to ganger med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann (2 ganger) og mettet saltlake, og tørket over magnesiumsulfat. Det organiske laget ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk, og den ervervede enheten ble renset ved silikagelkromatografi (kloroform:aceton = 40:1) til å gi 1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (68 g, utbytte 84%) som en fargeløs amorf form.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0,09(3H, s), -0,05(3H, s), 0,75(9H, s), 0,85(3H,d, J=6,7Hz), 1,18(3H, d, 6,7Hz), 1,39(3H, t, J=7,1Hz), 2,45(1H, br), 3,89-3,92(1H, m), 3,98-4,02(1H, m), 4,07-4,12(1H, m), 4,12(2H, s), 4,34-4,41(2H, m), 6,96-7,00(1H, m), 7,03-7,05(1H, m), 7,21-7,24(1H, m), 7,26-7,29(1H, m), 8,39(1H, d, J=8,8Hz), 8,63(1H, s)
Trinn 6
Forbindelsen (48 , 86 mmol) oppnådd i trinn 5 ble løst i metanol (300 ml), vann (5 ml) og 28% natriumetoksid-metanoloppløsning (176 ml, 862 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og blandingen ble nøytralisert ved å tilsette 6N saltsyre. Metanol ble fordampet under redusert trykk. Vann ble tilsatt til den ervervede løsningen og blandingen ble rørt. Det presipiterte faste stoffet ble samlet ved filtrering og det ervervede faste stoffet ble løst i etylacetat. Blandingen ble vasket med vann og tørket over natriumsulfat. Løsningen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble rekrystallisert fra etylacetat-heksan til å gi en forbindelse (32 g, utbytte 86%) som et hvitt faststoff. Den ervervede forbindelsen (32 g) ble løst i butylacetat (160 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning, og krystallform II ble sådd ved 75ºC. Blandingen ble rørt i 3,5 timer og tillatt å avkjøle som den var. Det utfelte, faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering, vasket med butylacetat (25 ml) og vakuumtørket til å gi en forbindelse (25 g, utbytte 77%) som et hvitt faststoff. Den ervervede forbindelsen (4,0 g) ble løst i metanol (40 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning ved 50ºC, og tilsatt dråpevis til vann (40 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 16 timer, filtrert, og det gjenværende, faste stoffet ble vasket med 66% vannholdig metanol, og vakuumtørket til å gi en krystall av forbindelse A (krystallform I) (3,9 g, utbytte 97%) som et hvitt faststoff.
sm.p. 151 - 152ºC
<1>H NMR (DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,5Hz), 1,16 (3H, d, J=6,5Hz), 2,30-2,50 (1H, m), 3,70-3,90 (1H, m), 3,90-4,00 (1H, m), 4,03 (3H, s), 4,12 (2H,s), 4,80-4,90 (1H, m), 5,19 (1H, t), 7,19-7,25 (2H, m), 7,46-7,51 (2H, m), 8,04(1H, s), 8,88 (1H, s), 15,44 (1H, s)
MS (ESI) : M+ 448
Eksempel 1: Fremstilling av krystallform II av forbindelsen A
Trinn 1
2,4-difluorbenzosyre (50 g, 0,316 mmol) ble løst i konsentrert svovelsyre (200 ml), og N-jod-suksinimid (68 g, 300 mmol) ble tilsatt i deler ved ikke mer enn 5ºC. Etter sluttførelsen av tilsatsen ble blandingen rørt ved den samme temperaturen i 4,5 timer. Reaksjonsblandingen ble helt i isvann (ca.600 ml), deretter ble 10% vannholdig natriumsulfittløsning tilsatt, og blandingen ble rørt. Det utfelte, faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering, og vasket med vann, og vakuumtørket til å gi ubehandlede krystaller (85 g). De ubehandlede krystallene ervervet på samme måte ble kombinert (total mengde 205 g), og rekrystallisert fra 50% vannholdig etanol (820 ml) for å gi 2,4-difluor-5-jodbenzosyre (148 g, utbytte 73%) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR(CDCl3300MHz) (σ) ppm: 6,94(1H, dd, J=10,3, 10,3Hz), 8,46 (1H, d, J=7,5Hz)
Trinn 2
Forbindelsen (148 g, 521 mmol) ervervet i trinn ble løst i toluen (750 ml), tionylklorid (76 ml, 1,04 mol) og dimetylformamid (katalytisk mengde) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 2 timer. Det uløselige materialet ble filtrert vekk ved 60ºC og filtratet ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med toluen (330 ml). Enheten ble løst i tetrahydrofuran (400 ml), og denne løsning ble tilsatt dråpevis til en løsning av etyl-3,3-dimetylaminoakrylat (82 g, 573 mmol) og trietylamin (87 ml, 625 mmol) i tetrahydrofuran (400 ml), og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 7 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og konsentrert trykk. Vann (700 ml) og etylacetat (800 ml) ble tilsatt for å tillate deling. Det organiske laget ble vasket suksessivt med mettet vannholdig natriumhydrogenkarbonat (250 ml) to ganger, vann (300 ml) og mettet saltlake (300 ml), og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (210 g) av 2-2,4-difluor-5-jodbenzyl)-3-dimetylaminoakrylsyreetylester som et brunt faststoff.
Trinn 3
Det ubehandlede produktet (210 g) ervervet i trinn 2 ble løst i tetrahydrofuran (500 ml), (S)-(+)-valinol (54 g, 0,521 mmol) ble tilsatt og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk, og enheten ble løst i dimetylformamid (600 ml). Kaliumkarbonat (144 g, 1,04 mol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt under oppvarming ved 70ºC i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, tilsatt til vann (1500 ml) og blandingen ble rørt. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering. Det ervervede, faste stoffet ble vasket suksessivt med 30% vannholdig etanol (500 ml) og en blandet løsning av dietyleter (150 ml) og heksan (150 ml), og vakuumtørket til å gi 7-fluor-1-((S)-1-hdyroksymetyl-2-metylpropyl)-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (178 g, utbytte 76% (relativt til trinn 2)) som et beige faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72(3H, d, J=6,6Hz), 1,10 (3H, d, J=6,6Hz), 1,28(3H, t, J=7,0Hz), 2,27 (1H, br), 3,77 (1H, br), 3,86(1H, br), 4,23 (2H, q, J=7,0Hz), 4,56(1H, br), 5,12 (1H, t, J=4,9Hz), 8,09(1H, d, J=11,1Hz), 8,62 (1H, d, J=7,5Hz), 8,68(1H, s)
MS(ESI): M+ 448
Trinn 4
Forbindelsen (150 g, 335 mmol) ervervet i trinn 3 ble løst i dimetylformamid (500 ml), imidazol (30 g, 0,436 mmol) og tert-butyldimetylsilylklorid (56 g, 369 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1,5 timer. Vann ble tilsatt til reaksjonsblandingen og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann, mettet, vannholdig ammoniumkloridløsning og mettet saltlake og tørket over natriumsulfat. Det organiske laget ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk, og den ervervede enheten ble renset ved silikagelkromatografi (etylacetat:heksan = 1:3 til 1:2) til å gi 1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-7-fluor-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etlester (173 g, utbytte 92%) som en fargeløs amorf form.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0,07(3H, s), -0,05(3H, s), 0,77(9H, s), 0,84(3H,d, J=6,5Hz), 1,18(3H, d, J=6,5Hz), 1,40(3H, t, J=7,2Hz), 2,35-2,50(1H, m), 3,85-3,95(1H, m), 3,98-4,10(2H, m), 4,30-4,40(2H, m), 7,26(1H,s), 8,64(1H, s), 8,94(1H, d, J=7,2Hz) MS(ESI): M+ 562
Trinn 5
(Fremstilling av en løsning av 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran)
Under argonstrøm ble sinkpulver (11 g, 175 mmol) suspendert i tetrahydrofuran (30 ml), 1,2-dibrometan (0,1 ml), 1,20 mmol) og trimetylsilylklorid (0,29 ml, 2,4 mmol) ble tilsatt ved 60ºC, og blandingen ble rørt under oppvarming i 30 minutter. En løsning av 3-klor-2-fluorbenzylbromid (27 g, 119 mmol) i tetrahydrofuran (60 ml) ble tilsatt dråpevis ved 60ºC. Blandingen ble rørt under oppvarming i 1 time og tillatt å avkjøle til romtemperatur for å gi en løsning av 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran. Dette ble anvendt i det neste hovedtrinnet.
(Hovedtrinn)
Forbindelsen (50 g, 89 mmol) ervervet i trinn 4 ble løst i tetrahydrofuran (400 ml) og, under en argonstrøm, ble diklorbis(trifenylfosfin)palladium(II) (2,1 g, 3,6 mmol) tilsatt og en løsning av den nevnte 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromidet over i tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis ved 60ºC. Etter sluttførelsen av den dråpevise tilsetningen, ble blandingen rørt under oppvarming ved den samme temperaturen i 1,5 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, 1N saltsyre ble tilsatt og blandingen ble ekstrahert 3 ganger med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt og mettet saltlake, og tørket over magnesiumsulfat. Det organiske laget ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk, og den ervervede enheten ble renset ved silikagelkromatografi (etylacetat:heksan = 1:2 til 1:1) til å gi 1-((S)-1tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-flluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (43 g, utbytte 83%) som et en brun amorf form.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0.09(3H, s), -0.05(3H, s), 0.75(9H, s), 0.85(3H,d, J=6.7Hz), 1.18(3H, d, 6.7Hz), 1.39(3H, t, J=7.1Hz), 2.45(1H, br), 3.89-3.92(1H, m), 3.98-4.02(1H, m), 4.07-4.12(1H, m), 4.12(2H, s), 4.34-4.41(2H, m), 6.96-7.00(1H, m), 7.03-7.05(1H, m), 7.21-7.24(1H, m), 7.26-7.29(1H, m), 8.39(1H, d, J=8.8Hz), 8.63(1H, s)
Trinn 6
Forbindelsen (43 g, 74 mmol) ervervet i trinn 5 ble løst i metanol (280 ml), 28% natriummetoksidmetanolløsning (151 ml, 742 mmol) og vann (4,3 ml) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 20 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Vann (400 ml) ble tilsatt til enheten, og blandingen ble vasket med heksan (100 ml). Det vannholdige laget ble forsuret ved å tilsette konsentrert saltsyre (65 ml), og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Løsningen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Det ervervede ubehandlede produktet (35 g, brun olje) ble løst i etylacetat (49 ml) ved å oppvarme under tilbakestrømning, heksan (30 ml) ble tilsatt mens tillatt å avkjøle, og blandingen ble rørt i 18,5 timer. Det utfelte, faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering, vasket med et blandet oppløsningsmiddel av etylacetat og heksan (1:1) og vakuumtørket til å gi en krystall av forbindelse A (krystallform II) (27 g, utbytte 82%) som et hvitt faststoff.
sm.p. 153,7-153,9°C
<1>H NMR (DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,5Hz), 1,16 (3H, d, J=6,5Hz), 2,30-2,50 (1H, m), 3,70-3,90 (1H, m), 3,90-4,00 (1H, m), 4,03 (3H, s), 4,12 (2H,s), 4,80-4,90 (1H, m), 5,19 (1H, t), 7,19-7,25 (2H, m), 7,46-7,51 (2H, m), 8,04(1H, s), 8,88 (1H, s), 15,44 (1H, s)
MS (ESI) : M+ 448
Eksempel 2: Fremstilling av krystallform II av forbindelsen A
Eksempel 2-1: Fremstilling av krystallform II av forbindelsen A
Trinn 1
2,4-difluorbenzosyre (100 g, 633 mmol) ble løst i konsentrert svovelsyre (400 ml), og N-jodsuksinimid (142 , 601 mol) ble tilsatt delvis ved ikke mer enn 5ºC. Etter fullførelsen av tilsatsen, ble blandingen rørt ved den samme temperaturen i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble helt i isvann (ca.2400 ml), deretter ble mettet vannholdig natriumsulfittløsning tilsatt, og blandingen ble rørt. Det utfelte, faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering, vasket med vann og vakuumtørket til å gi ubehandlede krystaller (188 g). De ubehandlede krystallene ervervet på samme måte ble kombinert (total mengde 568 g) og rekrystallisert fra 50% vannholdig etanol (2600 ml) til å gi 2,4-difluor-5-jodbenzosyre (388 g, utbytte 68%) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR(CDCl3300MHz) (σ) ppm: 6,94(1H, dd, J=10,3, 10,3Hz), 8,46 (1H, d, J=7,5Hz)
Trinn 2
Forbindelsen (200 g, 704 mmol) ervervet i trinn 1 ble løst i toluen (1000 ml), tionylklorid (103 ml, 408 mmol) og dimetylformamid (katalytisk mengde) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 2 timer. Det uløselige materialet ble filtrert vekk, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med toluen. Enheten ble løst i tetrahydrofuran (500 ml), denne løsning ble tilsatt dråpevis til en løsning av etyl-3,3-dimetylaminoakrylat (111 g, 775 mmol) og trietylamin (118 ml, 845 mmol) i tetrahydrofuran (500 ml), og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Vann (500 ml) og etylacetat (800 ml) ble tilsatt for å tillate deling. Det organiske laget ble vasket suksessivt med mettet vannholdig natriumhydrogenkarbonat (200 ml), vann (200 ml) og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Det organske laget ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (273 g) av 2-(2,4-diflur-5-jodbenzoyl)-3-dimetylaminoakrylsyre-etylester som et brunt faststoff.
Trinn 3
Det ubehandlede produktet (273 g) ervervet i trinn 2 ble løst i tetrahydrofuran (650 ml), (S)-(+)-valinol (73 g, 708 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk og enheten ble løst i dimetylformamid (800 ml). Kaliumkarbonat (195 g, 1,41 mol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt under oppvarming ved 70ºC i 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, tilsatt til vann (2000 ml) og blandingen ble rørt. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering. Det ervervede, faste stoffet ble underkastet slamvasking suksessivt med vann og 30% vannholdig etanol (650 ml) og vakuumtørket til å gi et ubehandlet produkt (217 g). Det ervervede, ubehandlede produktet (217 g) ble underkastet slamvasking med et blandet oppløsningsmiddel av etylacetat (650 ml) og heksan (440 ml) med oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble filtrert, og det gjenværende, faste stoffet ble vakuumtørket til å gi 7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (207 g, utbytte 66% (relativt til trinn 2)) som et blekbrunt faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72(3H, d, J=6,6Hz), 1,10 (3H, d, J=6,6Hz), 1,28(3H, t, J=7,0Hz), 2,27 (1H, br), 3,77 (1H, br), 3,86(1H, br), 4,23 (2H, q, J=7,0Hz), 4,56(1H, br), 5,12 (1H, t, J=4,9Hz), 8,09(1H, d, J=11,1Hz), 8,62 (1H, d, J=7,5Hz), 8,68(1H, s)
MS(ESI): M+ 448
Trinn 4
Forbindelsen (150 g, 335 mmol) ervervet i trinn 3 ble løst i dimetylformamid (450 ml), imidazol (27 g, 397 mmol) og tert-butyldimetylsilylklorid (58 g, 385 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt over natten ved romtemperatur. Vann (900 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat (680 ml). Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann (450 ml, 3 ganger) og mettet saltlake (200 ml), og tørket over natriumsulfat. Det organiske laget ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (192 g) av 1-((S)-1-tertbutyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-7-fluor-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etyleser som en blekgul amorf form.
Trinn 5
Det ubehandlede produktet (162 g) ervervet i trinn 4 ble løst i tetrahydrofuran (160 ml) og, under en argonstrøm, ble dibenzylidenaceton-palladium(II) (1,7 g, 2,9 mmol) og trifurylfosfin (1,3 g, 5,8 mmol) tilsatt. Til denne blandingen ble det dråpevis tilsatt ved 60ºC en løsning av (375 ml, 375 mmol) av 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran ervervet på samme måte som i eksempel 1, trinn 5 og etter fullførelsen av den dråpevise tilsatsen ble blandingen rørt under oppvarming ved samme temperatur i 3,5 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, etylacetat (640 ml) og 10% vannholdig sitronsyreløsning (400 ml) ble tilsatt, og blandingen ble filtrert gjennom kelitt, og filtratet ble fordelt. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann (20 ml), mettet vannholdig natriumhydrogenkarbonat (400 ml) og mettet saltlake (200 ml), og tørket over natriumsulfat. Det organiske laget ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (186 g) av 1-((S)-1-tertbutyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester som en brun olje.
Trinn 6
Det ubehandlede produktet (193 g) ervervet i trinn 5 ble løst i isopropanol (650 ml), 1N vannholdig natriumhydroksidløsning (1290 ml, 1,29 mol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, og filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble forsuret ved å tilsette konsentrert saltsyre, og blandingen ble rørt. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering, og vakuumtørket til å gi et ubehandlet produkt (132 g) som et blekgult faststoff. De ubehandlede produktene ervervet på samme måte ble kombinert (total mengde 143 g), suspendert i butylacetat (430 ml) og underkastet slamrøring med oppvarming under tilbakestrømning i 1 time. Suspensjonen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og filtrert og vakuumtørket til å gi 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-1-((S)-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre (99 g, utbytte 74% (relativt til trinn 3)) som et grått faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6400MHz) (δ) ppm: 0,71 (3H, d, J=6,5Hz), 1,13 (3H, d, J=6,5Hz), 2,36 (1H, br), 3,77(1H, br), 3,94 (1H, br), 4,25 (2H, s), 4,77(1H, br), 5,16 (1H, t, J=2,4Hz), 7,19-7,23(1H, m), 7,32-7,35 (1H, m), 7,48-7,52(1H, m), 8,24-8,28 (2H, m), 9,00 (1H, s), 15,00 (1H, s)
MS(ESI): M+ 436
Trinn 7
Forbindelsen (99 g, 227 mmol) ervervet i trinn 6 ble løst i metanol (530 ml), 28% natriummetoksidmetanolløsning (465 ml, 2,28 mol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 20 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Enheten ble forsuret ved å tilsette vann (200 ml) og konsentrert saltsyre (190 ml), og ekstrahert med etylacetat (500 ml). Det organiske laget ble vasket to ganger med vann (200 ml), og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (108 g). Det ervervede, ubehandlede produktet (108 g) ble løst i isobutylacetat (330 ml) under oppvarming og blandingen ble rørt for å tillate å avkjøle i 24 timer. Det utfelte stoffe ble oppsamlet ved filtrering, og vakuumtørket til å gi forbindelse A (71 g, utbytte 69%) som et hvitt faststoff. De ubehandlede krystallene ervervet på samme måte ble kombinert (total mengde 233 g), løst i isobutylacetat (470 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning og blandingen ble rørt over natten for å tillate avkjøling. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering, og vakuumtørket til å gi en krystall av forbindelse A (krystallform II) (206 g, utbytte 88%) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,5Hz), 1,16 (3H, d, J=6,5Hz), 2,30-2,50 (1H, m), 3,70-3,90 (1H, m), 3,90-4,00 (1H, m), 4,03 (3H, s), 4,12 (2H, s), 4,80-4,90 (1H, m), 5,19 (1H, t), 7,19-7,25 (2H, m), 7,46-7,51 (2H, m), 8,04 (1H, s), 8,88 (1H, s), 15,44 (1H, s)
MS (ESI) : M+ 448
Eksempel 2-2: Fremstillelse av krystallform II av forbindelsen A
Trinn 1
5-brom-2,4-difluorbenzosyre (82,7 kg, 349 mol) ble løst i toluen (420 l), tionylklorid (62,3 kg, 523 mol) og dimetylformamid (katalytisk mengde) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved 70ºC i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, konsentrert under redusert trykk, og azeotropert igjen med toluen (420 l). Enheten ble løst i toluen (220 l), denne løsning ble tilsatt dråpevis til en løsning av etyl-3,3-dimetylaminoakrylat (55,0 kg, 384 mol) og diisopropyletylamin (58,6 kg, 523 mol) i toluen (220 l), og blandingen ble rørt under oppvarming ved 70ºC i 21 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, (S)-(+)-valinol (36,0 kg, 349 mol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1,5 timer. Vann (420 l) ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å tillate deling, og det organiske laget ble vasket suksessivt med 1N saltsyre (250 l, 2 ganger), vann (420 l), 5% vannholdig natriumhydrogenkarbonat (250 l, 2 ganger), vann (420 l) og 10% saltlake (250 l). Ekstraktet ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med dimetylformamid (420 l) til å gi en konsentrert enhet (330 l) inneholdende et ubehandlet produkt av 2-(5-brom-2,4-difluorbenzoyl)-3-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropylmetylamino)akrylsyre-etylester.
Trinn 2
Til en løsning (330 l) av det ubehandlede produktet ervervet i trinn 1 i dimetylformamid ble tilsatt 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undekan (105 kg, 349 mol) og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 23 timer. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt dimetylformamid (330 l), og deretter vann (170 l) og, etter røring i 2 timer, ble vann (170 l) tilsatt dråpevis. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vasket med dimetylformamid- (170 l) vann- (170 l) blanding, og deretter med etanol- (460l) vann (200 l) blandet løsning. Det ervervede faste stoffet ble vakuumtørket, suspendert i en etylacetat- (330 l) n-heptan-(330 l) blanding og underkastet slamvasking. Suspensjonen ble filtrert og det gjenværende faste stoffet ble vakuumtørket til å gi 6-brom-7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (102 kg, utbytte 73%) som et gulhvitt faststoff. Denne forbindelse ble bekreftet å være ekvivalent til standardproduktet av forbindelsen ved høy utførelse væskekromatografi- (HPLC) analyse.
Trinn 3
Forbindelsen (45,0 kg, 112 mol) ervervet i trinn 2 og imidazol (9,95 kg, 146 mol) ble suspendert i toluen (180 l), en løsning av tert-butyldimetylsilylklorid (17,8 kg, 118 mol) i toluen (45 l) ble tilsatt ved 50ºC, og blandingen ble rørt ved den samme temperaturen i 3 timer. Toluen (230 l) ble tilsatt til reaksjonsblandingen, og vasket suksessivt med vann (450 l, 2 ganger) og 20% saltlake (450 l). Ekstraktet ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med tetrahydrofuran (320 l) til å gi en konsentrert enhet (390 l) inneholdende et ubehandlet produkt av 6-brom-1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester.
Trinn 4
(Fremstillelse av en løsning av 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran) Under en nitrogenstrøm ble sinkpulver (18,8 kg, 287 mol) suspendert i tetrahydrofuran (130 l), 1,2-dibrometan (470 g, 2,50 mol) ble tilsatt ved 60ºC, og blandingen ble rørt ved den samme temperaturen i 30 minutter. Trimetylsilylklorid (560 g, 3,10 mol) ble tilsatt til denne suspensjonen ved romtemperatur, og blandingen ble rørt ved oppvarming i 30 minutter. En løsning av 3-klor-2-fluorbenzylbromid (54,0 kg, 242 mol) i tetrahydrofuran (65 l) ble tilsatt dråpevis ved 0ºC, og blandingen ble rørt ved 20ºC i 3 timer. Det gjenværende sinket ble filtrert vekk til å gi en løsning av 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid i tetrahydrofuran. Dette ble anvendt i det neste hovedtrinnet.
(Hovedtrinn)
Under en nitrogenstrøm ble tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (1,96 kg, 3,36 mol) og trifenylfosfin (1,77 kg, 6,72 mol) ble løst i tetrahydrofuran (180 l), og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1 time. En løsning (390 l) av det ubehandlede produktet ervervet i trinn 3 i tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis ved romtemperatur og vasket med tetrahydrofuran (45 l). En løsning (164 kg, 157 mol) av det nevnte 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromidet i tetrahydrofuran, som var fremstilt på forhånd, ble tilsatt dråpevis ved romtemperatur, og blandingen ble rørt under oppvarming ved 55ºC i 5 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, toluen (230 l) og 25% vannholdig ammoniumkloridløsning (230 l) ble tilsatt og blandingen ble rørt. Etter filtrering ble blandingen delt. Det organiske laget ble vasket suksessivt med 25% vannholdig ammoniumkloridløsning (230 l), vann (230 l), 5% vannholdig natriumhydrogenkarbonat (230 l, 3 ganger) og 10% saltlake (230 l). Ekstraktet ble konsentrert under trykk til å gi et ubehandlet produkt (80 l) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre som en brun olje.
Trinn 5
Det ubehandlede produktet (80 l) ervervet i trinn 4 ble løst i isopropanol (180 l), 1N vandig natriumhydroksidløsning (180 l, 180 mol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt under oppvarming ved 50ºC i 9 timer. Aktivert karbon (4,5 kg) ble tilsatt til reaksjonsblandingen. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter, filtrert gjennom cellulosepulver og grundig vasket med en isopropanol (45 l) – vann (45 l) blanding. Vann (180 l) og n-heptan (230 l) ble tilsatt til filtratet og, etter røring, ble blandingen fordelt. Det vannholdige laget ble vasket igjen med n-heptan (230 l).4N saltsyre (45 l, 180 mol) og metylisopropylketon (450 l) ble tilsatt til det organiske laget og, etter røring ble blandingen fordelt. Det organiske laget ble vasket suksessivt med 10% saltlake (230 l), 2 ganger med 8,5% vannholdig natriumhydrogenkarbonat (230 l), 0,5N saltsyre (230 l) og vann (230 l). Ekstraktet ble konsentrert under redusert trykk, azeotropert 3 ganger med toluen (230 l). Enheten ble rørt ved 100ºC i 1,5 timer og deretter tillatt å avkjøle til romtemperatur og rørt i 3 timer. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og det ervervede, faste stoffet ble vasket med toluen (45 l) og vakuumtørket til å gi 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-1-[(S)-1-hydroksymetyl-3-metylpropyl]-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre (42,5 kg, utbytte 87%) som en blekgult faststoff. Denne forbindelse ble bekreftet å være ekvivalent til standardproduktet ved HPLC-analyse.
Trinn 6
Forbindelsen (39, 2kg, 89,9 mol) ervervet i trinn 5 ble oppløst i metanol (240 l), 28% natriummetoksid-metanolløsning (173 kg, 899 mol) ble tilsatt dråpevis ved 10ºC, og blandingen ble rørt under oppvarming ved 70ºC i 21 timer. Aktivert karbon (3,9 kg) ble tilsatt til reaksjonsblandingen. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1 time, filtrert gjennom cellulosepulver og grundig vasket med metanol (80 l). Vann (29 kg, 1620 mol) ble tilsatt til filtratet og blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Enheten ble azeotropert to ganger med isopropanol (240 l, 120 l). Til enheten ble det tilsatt 15% saltlake (200 l) og toluen (200 l) og, etter røring ble blandingen fordelt. Det organiske laget ble vasket suksessivt med 20% saltlake (200 l, 3 ganger), 0,5N saltsyre (200 l) inneholdende natriumklorid (10 kg) og 20% saltlake (200 l). Det organiske laget ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med etylacetat (200 l). Etylacetat (320 l) og vann (200 l) ble tilsatt til enheten og, etter røring, ble blandingen fordelt. Det organiske laget ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert to ganger med isobutylacetat (200 l). Enheten ble oppløst ved varming og filtrert mens den var varm, og grundig vasket med isobutylacetat (20 l). En såkrystall (krystallform II av forbindelse A, 39 g) ble tilsatt til filtratet ved 60ºC, og blandingen ble rørt ved den samme temperaturen i 1,5 time. Blandingen ble rørt under oppvarming ved 80ºC i 2 timer, og tillatt å avkjøle til romtemperatur og ytterligere rørt i 6 timer. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering. Det ervervede, faste stoffet ble vasket med isobutylacetat (40 l) og vakuumtørket til å gi en krystall av forbindelse A (krystallform II) (29,0 kg, utbytte 72%) som et hvitt faststoff. Denne krystall ble bekreftet å være ekvivalent til standardproduktet av krystallen (krystallform II av forbindelse A, ervervet i eksempel 2-1) ved HPLC- og røntgenstrålepulverdiffraksjons- (XRPD) analyse.
Eksempel 2-3: Fremstillelse av krystallform II av forbindelsen A
Krystallform II kan også fremstilles ved krystallisering i henhold til fremgangsmåter beskrevet i eksempler 2-3-1 til 2-3-26.
Eksempel 2-3-1
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i 1-butanol (2 ml) under oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (125 mg, utbytte 63%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-2
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i butylacetat (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (102 mg, utbytte 51%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-3
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i metylisobutylketon (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 6 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (168 mg, utbytte 84%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-4
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i etanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (56 mg, utbytte 28%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-5
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i etylacetat (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (1,6 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 6 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (166 mg, utbytte 83%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-6
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i metyletylketon (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (4 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 6 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (123 mg, utbytte 62%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-7
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i1-propanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (91 mg, utbytte 46%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-8
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i isopropanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (88 mg, utbytte 44%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-9
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i kumol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (188 mg, utbytte 94%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-10
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i anisol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 17 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (107 mg, utbytte 54%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-11
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i aceton (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 16,5 timer og tillatt å avkjøle. Heptan (4 ml) ble ytterliggere tilsatt, og blandingen ble ytterligere rørt i 24 timer. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (174 mg, utbytte 67%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-12
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i etanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (4 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 19 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (120 mg, utbytte 65%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-13
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i isopropanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (4 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 19 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (166 mg, utbytte 83%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-14
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i 1-propanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (4 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 19 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (158 mg, utbytte 79%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-15
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i isobutanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (131 mg, utbytte 66%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-16
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i toluen (2 ml) under oppvarming ved 100ºC. Blandingen ble rørt i 37 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (190 mg, utbytte 95%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-17
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i metylbutylketon (2 ml) under oppvarming ved 60ºC. Heptan (1,8 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 37 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (191 mg, utbytte 96%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-18
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i kloroform (1 ml) under oppvarming ved 60ºC. Isopropyleter (1,8 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 37 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (184 mg, utbytte 92%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-19
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i tetrahydrofuran (1 ml) under oppvarming ved 60ºC. Isopropyleter (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 41 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (144 mg, utbytte 72%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-20
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i isobutanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (160 mg, utbytte 80%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-21
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i butanol (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (152 mg, utbytte 76%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-22
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i isobutylacetat (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (140 mg, utbytte 70%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-23
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i isobutylacetat (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (178 mg, utbytte 89%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-24
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i butylacetat (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Heptan (1,5 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (158 mg, utbytte 78%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-25
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i anisol (2 ml) under oppvarming ved 110ºC. Heptan (2 ml) ble tilsatt dråpevis og blandingen ble rørt i 21 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (187 mg, utbytte 89%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-3-26
Forbindelsen A (200 mg) ervervet i eksempel 1 ble løst i butylacetat (2 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Etter rask avkjøling ble blandingen rørt i 2 timer. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (131 mg, utbytte 66%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-4: Fremstillelse av krystallform II av forbindelsen A
Trinn 1
1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (48 g, 86 mmol) ervervet i eksempel 1, trinn 5 ble løst i metanol (300 ml), vann (5 ml) og 28% natriummetoksidmetanolløsning (176 ml, 862 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, nøytralisert med 6N saltsyre og metanol ble fordampet under redusert trykk. Vann ble tilsatt til den ervervede løsningen og, etter røring, ble det utfelte stoffet oppsamlet ved filtrering. Det ervervede, faste stoffet ble løst i etylacetat, vasket med vann, og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble rekrystallisert fra etylacetat-heksan til å gi forbindelse A (primærkrystall 29,5 g, sekundærkrystall 2,8 g, totalt 32,3 g, utbytte 86%) som et hvitt faststoff.
sm.p. 151-152°C
<1>H NMR (DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,5Hz), 1,16 (3H, d, J=6,5Hz), 2,30-2,50 (1H, m), 3,70-3,90 (1H, m), 3,90-4,00 (1H, m), 4,03 (3H, s), 4,12 (2H,s), 4,80-4,90 (1H, m), 5,19 (1H, t), 7,19-7,25 (2H, m), 7,46-7,51 (2H, m), 8,04 (1H, s), 8,88 (1H, s), 15,44 (1H, s)
MS (ESI) : M+ 448
Trinn 2
Forbindelse A (32,3 g) ervervet i trinn 1 ble løst i butylacetat (160 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. Krystallformen II i eksempel 2 ble sådd ved 63ºC og blandingen ble rørt i 3 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallen til forbindelse A (krystallform II) (24,79 g, utbytte 77%) som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-5: Fremstillelse av krystallform II av forbindelsen A
Trinn 1
1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (19 g, 33 mmol) ervervet i eksempel 1, trinn 5 ble løst i isopropanol (100 ml), 1N vannholdig natriumhydroksidløsning (200 ml, 200 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 2,5 time. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, og blandingen ble filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble forsuret ved å tilsette konsentrert saltsyre, og rørt ved romtemperatur i 2 timer. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre (12 g, utbytte 82%) som et blekgult faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6400MHz) (δ) ppm: 0,71(3H, d, J=6,5Hz), 1,13(3H, d, J=6,5Hz), 2,36(1H, br), 3,77(1H, br), 3,94(1H, br), 4,25(2H, s), 4,77(1H, br), 5,16(1H, t, J=2,4Hz), 7,19-7,23(1H, m), 7,32-7,35(1H, m), 7,48-7,52(1H, m), 8,24-8,28(2H, m), 9,00(1H, s), 15,00(1H, s)
Trinn 2
Forbindelsen (12 g, 27 mmol) ervervet i trinn 1 ble løst i metanol (64 ml), 28% natriummetoksid-metanolløsning (52 ml, 256 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjølte til romtemperatur og filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Enheten ble forsuret ved å tilsette vann (360 ml) og konsentrert saltstyre, og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann og mettet saltlake og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (13 g) som en brun olje. Det ervervede, ubehandlede produktet (13 g) ble løst i isobutylacetat (60 ml) ved oppvarming og, etter utsåing, ble blandingen rørt i 23 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering, og vakuumtørket til å gi forbindelse A (9,2 g, utbytte 75%) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,5Hz), 1,16 (3H, d, J=6,5Hz), 2,30-2,50 (1H, m), 3,70-3,90 (1H, m), 3,90-4,00 (1H, m), 4,03 (3H, s), 4,12 (2H,s), 4,80-4,90 (1H, m), 5,19 (1H, t), 7,19-7,25 (2H, m), 7,46-7,51 (2H, m), 8,04(1H, s), 8,88 (1H, s), 15,44 (1H, s)
MS (ESI): M+ 448
Trinn 3
2-(2,4-difluor-5-jodbenzoyl)-3-dimetylaminoakrylsyre-etylester (20 g) ervervet i eksempel 1, trinn 2 ble underkastet slamvasking med et blandet løsningsmiddel av etylacetat (60 ml) og heksan (40 ml) og oppvarmet under tilbakestrømning. Blandingen ble filtrert, og det gjenværende, faste stoffet ble vakuumtørket til å gi 7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (18 g, utbytte 94%) som et beige faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,6Hz), 1,10 (3H, d, J=6,6Hz), 1,28 (3H, t, J=7,0Hz), 2,27 (1H, br), 3,77 (1H, br), 3,86 (1H, br), 4,23 (2H, q, J=7,0Hz), 4,56(1H, br), 5,12 (1H, t, J=4,9Hz), 8,09 (1H, d, J=11,1Hz), 8,62 (1H, d, J=7,5Hz), 8,68 (1H, s)
MS(ESI): M+ 448
Trinn 4
Forbindelsen (19 g, 42 mmol) ervervet i trinn 3 ble løst i dimetylformamid (65 ml), imidazol (3,4 g, 49,9 mmol) og tert-butyldimetylsilylklorid (7,2 , 47,8 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1,5 time. Vann ble tilsatt til reaksjonsblandingen, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann, mettet vannholdig ammoniumkloridløsning og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Det organiske laget ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (24 g) av 1.((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-7-fluor-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester som en beige, amorf form.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0,07(3H, s), -0,05(3H, s), 0,77(9H, s), 0,84(3H,d, J=6,5Hz), 1,18(3H, d, J=6,5Hz), 1,40(3H, t, J=7,2Hz), 2,35-2,50(1H, m), 3,85-3,95(1H, m), 3,98-4,10(2H, m), 4,30-4,40(2H, m), 7,26(1H,s), 8,64(1H, s), 8,94(1H, d, J=7,2Hz) MS(ESI): M+ 562
Trinn 5
Det ubehandlede produktet (24 g) ervervet i trinn 4 ble løst i tetrahydrofuran (200 ml) og, under en argonstrøm, ble dibenzylidenacetonpalladium(II) (984 mg, 1,7 mmol) og trifurylfosfin (795 mg, 3,4 mmol) ble tilsatt, og en løsning (56 ml, 56 mmol) av 1M 3-klor-2-florbenzylsinkbromid ervervet på samme måte som i eksempel 1, trinn 5 i tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis ved 60ºC. Etter fullførelsen av den dråpevise tilsatsen, ble blandingen rørt under oppvarming ved samme temperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, mettet vannholdig ammoniumkloridløsning ble tilsatt, og filtrert gjennom kelitt, og filtratet ble ekstrahert to ganger med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann (to ganger) og mettet saltlake, og tørket over magnesiumsulfat. Det organiske laget ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (30 g) av 1-((S)-1-tertbutyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester som en brun pasta.
Trinn 6
Det ubehandlede produktet (30 g) ervervet i trinn 5 ble løst i isopropanol (150 ml), 1N vannholdig natirumhydroksidløsning (300 ml, 300 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 2,5 time. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og blandingen ble filtrert gjennom kelitt. Filtratet ble forsuret ved å tilsette konsentrert saltsyre, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 2 timer. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi et ubehandlet produkt (18 g) som et beige faststoff. Det ervervede, ubehandlede produktet (18 g) ble suspendert i butylacetat (90 ml), og underkastet slamrøring med oppvarming under tilbakestrømning i 1 time. Suspensjonen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, filtrert og vakuumtørket til å gi 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre (11 g, utbytte 62% (relativt til trinn 3)) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6400MHz) (δ) ppm: 0,71 (3H, d, J=6,5Hz), 1,13 (3H, d, J=6,5Hz), 2,36 (1H, br), 3,77(1H, br), 3,94 (1H, br), 4,25 (2H, s), 4,77 (1H, br), 5,16 (1H,t, J=2,4Hz), 7,19-7,23 (1H, m), 7,32-7,35 (1H, m), 7,48-7,52(1H, m), 8,24-8,28 (2H, m), 9,00 (1H, s), 15,00 (1H, s)
MS(ESI): M+ 436
Trinn 7
Forbindelsen (11 g, 26 mmol) ervervet i trinn 6 ble løst i metanol (60 ml), 28% natriummetoksid-metanolløsning (52 ml, 256 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og filtrert gjennom kelitt, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Enheten ble forsuret ved å tilsette vann (330 ml) og konsentrert saltsyre, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket suksessivt med vann og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (12 g) som en brun olje. Det ervervede, ubehandlede produktet (12 g) ble løst i isobutylacetat (60 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning. En såkrystall (krystallform II av forbindelse A) ble sådd, og blandingen ble rørt i 23 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi forbindelse A (8,2 g, utbytte 71%) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,5Hz), 1,16 (3H, d, J=6,5Hz), 2,30-2,50 (1H, m), 3,70-3,90 (1H, m), 3,90-4,00 (1H, m), 4,03 (3H, s), 4,12 (2H,s), 4,80-4,90 (1H, m), 5,19 (1H, t), 7,19-7,25 (2H, m), 7,46-7,51 (2H, m), 8,04(1H, s), 8,88 (1H, s), 15,44 (1H, s)
MS (ESI) : M+ 448
Trinn 8
Forbindelse A (7,66 g) ervervet i trinn 7 og forbindelse A (9,17 g) ervervet i trinn 2 ble løst i isobutylacetat (84 ml) ved oppvarming under tilbakestrømning og blandingen ble rørt i 16 timer og tillatt å avkjøle. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vakuumtørket til å gi krystallform II (14,73 g, utbytte 88%) av forbindelse A som et hvitt faststoff.
Eksempel 2-6: Fremstillelse av krystallform II av forbindelsen A
Trinn 1
2,4-difluorbenzosyre (100 g, 633 mmol) ble løst i trifluormetansulfonsyre (400 ml) og N-jodsuksinimid (157 g, 696 mmol) ble tilsatt delesvis ved ikke mer enn 5ºC. Etter fullførelsen av tilsatsen ble blandingen rørt ved 50ºC i 1,5 time. Reaksjonsblandingen ble helt i isvann, og blandingen ble rørt i 1 time. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering, vasket suksessivt med vann og heksan, og vakuumtørket til å gi 2,4-difluor-5-jodbenzosyre (179 g, utbytte kvantitativt) som et hvitt faststoff.
<1>H NMR(CDCl3300MHz) (σ) ppm: 6,94(1H, dd, J=10,3, 10,3Hz), 8,46 (1H, d, J=7,5Hz)
Trinn 2
Forbindelsen (28 g, 100 mmol) ervervet i trinn 1 ble løst i etylacetat (300 ml), oxalylklorid (11 ml, 122 mmol) og dimetylformamid (katalytisk mengde) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 2 timer. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk og azeotropert med toluen. Enheten ble løst i tetrahydrofuran (100 ml), denne løsningen ble tilsatt dråpevis til en løsning av etyl-3,3-dimetylaminoakrylat (17 g, 120 mmol) og trietylamin (21 ml, 150 mmol) i tetrahydrofuran (100 ml), og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle og etylacetat (200 ml) ble tilsatt. Blandingen ble vasket suksessivt med vann (to ganger) og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble underkastet slamrøring med et blandet løsningsmiddel av dietyleter (50 ml) og heksan (50 ml). Blandingen ble filtrert og det gjenværende faste stoffet ble vakuumtørket til å gi et ubehandlet produkt (26 g, utbytte 63%) av 2-(2,4-difluor-5-jodbenzoyl)-3-dimetylaminoakrylsyre-etylester som et gult faststoff.
Trinn 3
Det ubehandlede produktet (22 g, 55 mmol) ervervet i trinn 2 ble løst i tetrahydrofuran (110 ml), (S)-(+)-valinol (6,8 g, 65,8 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt under oppvarming ved 50ºC i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk, og enheten ble løst i etylacetat (100 ml), vasket suksessivt med vann og mettet saltlake, og tørket over magnesiumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble løst i dimetylformamid (80 ml), kaliumkarbonat (19 g, 137 mmol) ble tilsatt og blandingen ble rørt under oppvarming ved 60ºC i 1,5 time. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur og konsentrert under redusert trykk. Vann (250 ml) ble tilsatt til den ervervede enheten og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter. Det utfelte stoffet ble oppsamlet ved filtrering. Det ervervede faste stoffet ble vasket suksessivt med et blandet løsningsmiddel av vann (100 ml), etylacetat (10 ml) og heksan (40 ml) og vakuumtørket til å gi 7-fluor-1-((S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl)-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (22 g, utbytte 88%) som et blekgult faststoff.
<1>H NMR(DMSO-d6300MHz) (δ) ppm: 0,72 (3H, d, J=6,6Hz), 1,10 (3H, d, J=6,6Hz), 1,28 (3H, t, J=7,0Hz), 2,27 (1H, br), 3,77 (1H, br), 3,86 (1H, br), 4,23 (2H, q, J=7,0Hz), 4,56(1H, br), 5,12 (1H, t, J=4,9Hz), 8,09 (1H, d, J=11,1Hz), 8,62 (1H, d, J=7,5Hz), 8,68 (1H, s)
MS(ESI): M+ 448
Trinn 4
Forbindelsen (22 g, 48 mmol) ervervet i trinn 3 ble løst i dimetylformamid (60 ml), imidazol (3,9 g, 57,7 mmol) og tert-butyldimetylsilylklorid (8,0 g, 53,0 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1,5 time. Reaksjonsblandingen ble konsentrert trykk, og den ervervede enheten ble løst i etylacetat (200 ml), vasket suksessivt med vann (to ganger) og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble renset ved silikagelkromatografi (etylacetat:heksan = 3:7 til 4:6) til å gi 1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-7-fluor-6-jod-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (25 g, utbytte 92%) som en hvit voks.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0,07(3H, s), -0,05(3H, s), 0,77(9H, s), 0,84(3H,d, J=6,5Hz), 1,18(3H, d, J=6,5Hz), 1,40(3H, t, J=7,2Hz), 2,35-2,50(1H, m), 3,85-3,95(1H, m), 3,98-4,10(2H, m), 4,30-4,40(2H, m), 7,26(1H,s), 8,64(1H, s), 8,94(1H, d, J=7,2Hz) MS(ESI): M+ 562
Trinn 5
Forbindelsen (25 g, 44 mmol) ervervet i trinn 4 ble løst i tetrahydrofuran (200 ml) og, under en argonstrøm, ble dibenzylidenacetonpalladium(II) (1,0 g, 1,8 mmol) og trifurylfosfin (824 mg, 3,5 mmol) tilsatt. En løsning (58 ml, 58 mmol) av 1M 3-klor-2-fluorbenzylsinkbromid ervervet på den samme måte som i eksempel 1, trinn 5 i tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis ved 60ºC. Etter fullførelsen av den dråpevise tilsatsen ble blandingen oppvarmet under tilbakestrømning i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, etylacetat (200 ml) ble tilsatt, vasket med suksessivt 1N saltsyre, vann, mettet vannholdig natriumhydrogenkarbonat, vann og mettet saltlake, og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Den ervervede enheten ble renset ved silikagelkromatografi (etylacetat:heksan = 4:6 til 1:1) til å gi 1-((S)-1-tert-butyldimetylsilyloksymetyl-2-metylpropyl)-6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-7-fluor-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre-etylester (17 g, utbytte 68%) som en blekgul olje.
<1>H NMR(CDCl3400MHz) (δ) ppm: -0,09(3H, s), -0,05(3H, s), 0,75(9H, s), 0,85(3H,d, J=6,7Hz), 1,18(3H, d, 6,7Hz), 1,39(3H, t, J=7,1Hz), 2,45(1H, br), 3,89-3,92(1H, m), 3,98-4,02(1H, m), 4,07-4,12(1H, m), 4,12(2H, s), 4,34-4,41(2H, m), 6,96-7,00(1H, m), 7,03-7,05(1H, m), 7,21-7,24(1H, m), 7,26-7,29(1H, m), 8,39(1H, d, J=8,8Hz), 8,63(1H, s)
Trinn 6
Forbindelsen (17 g, 30 mmol) ervervet i trinn 5 ble løst i metanol (120 ml), 28% natriummetoksid-metanolløsning (62 ml, 304 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning i 19 timer. Reaksjonsblandingen ble tillatt å avkjøle til romtemperatur, vann (200 ml) ble tilsatt, og metanol ble fordampet under redusert trykk. Enheten ble forsuret ved å tilsette konsentrert saltsyre, ekstrahert med etylacetat, og tørket over natriumsulfat. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til å gi et ubehandlet produkt (14 g) av forbindelse A som en blek gul olje.
Trinn 7
Forbindelse A (14,11 g) ervervet i trinn 6 ble suspendert i et blandet løsningsmiddel av etylacetat (20 ml) og heksan (20 ml) ved romtemperatur, en såkrystall (krystallform II av forbindelse A) ble utsådd, og blandingen ble rørt i 1 time. Suspensjonen ble filtrert, og det gjenværende faste stoffet ble vakuumtørket til å gi forbindelse A (krystallform II, 10,40 g, utbytte 77%) som et hvitt faststoff.
Eksempel 3: Fremstillelse av krystallform III av forbindelsen A
Eksempel 3-1: Fremstillelse av krystallform III av forbindelsen A
Krystallformen II av forbindelse A (10,0 g, 22, 3 mmol) ervervet i eksempel 2-2 ble tilsatt til isobutylacetat (30 ml) og krystallen ble løst ved oppvarming under tilbakestrømning. Løsningen ble avkjølt til 90ºC, og rørt i 5 timer for å tillate utfelling av krystaller. Denne løsning ble ytterligere tillatt å avkjøle til romtemperatur, og ytterligere rørt i 12 timer. Den utfelte krystallen ble oppsamlet ved filtrering. Den ervervede krystallen ble vasket med isobutylacetat (10 ml) og vakuumtørket til å gi en hvit krystall (9,85 g, utbytte 98,5%). Siden denne krystallen ble bekreftet å være ulik krystallform II ved XRPD-analyse, ble en krystall som viser XRPD-kartet (fig.1) nedskrevet som krystallform III.
Eksempel 3-1: Fremstillelse av krystallform III av forbindelsen A
Krystallformen II av forbindelse A (250 g, 558 mmol) ervervet i eksempel 2-2 ble tilsatt til isobutylacetat (750 ml). En såkrystall (12,5 g) av krystallformen III av forbindelse A ervervet i eksempel 3 ble tilsatt ved romtemperatur og blandingen ble rørt i 17 timer. Den utfelte krystallen ble oppsamlet ved filtrering. Den ervervede krystallen ble vasket med isobutylacetat (250 ml), og vakuumtørket til å gi det tilsiktede produktet (krystallform III, 259 g, utbytte 98,6%) som en hvit krystall. Denne krystall ble bekreftet å være ekvivalent til standardproduktet av krystallen (krystallform III av forbindelse A ervervet i eksempel 3-1) ved XRPD-analyse.
Eksempel 3-3: Fremstillelse av krystallform III av forbindelsen A
Forbindelse A (krystallform II, 10,0 g, 22,3 mmol) ervervet i eksempel 2-2 ble tilsatt til isopropanol (30 ml), og blandingen ble oppvarmet under tilbakestrømning for å løse krystallen. Løsningen ble avkjølt til 70ºC og en såkrystall (10 mg) avkrystallformen III av forbindelse A ervervet i eksempel 3-1 ble tilsatt, og blandingen ble rørt i 5 timer. Denne blandingen ble ytterligere tillatt å avkjøle til romtemperatur, rørt i 12 timer, og krystallen ble oppsamlet ved filtrering. Den ervervede krystallen ble vasket med isopropanol (10 ml), og vakuumtørket til å gi det tilsiktede produktet (krystallform III, 9,72 g, utbytte 97,2%) som en hvit krystall. Denne krystall ble bekreftet å være ekvivalent til standardproduktet av krystallen (krystallform III av forbindelse A ervervet i eksempel 3-1) ved XRPD-analyse.
Eksempel 3-4: Fremstillelse av krystallform III av forbindelse A
Krystallformen II av forbindelse A (7,00 g, 15,6 mmol) ervervet i eksempel 2-2 ble tilsatt til en blandet løsning av etanol (52,5 ml) og vann (7 ml) og løst ved oppvarming. Vann (28 ml) ble tilsatt, en såkrystall (10 mg) av det tilsiktede produktet ble tilsatt ved 70ºC og blandingen ble rørt i 4 timer. Etter at blandingen ble avkjølt til romtemperatur ble blandingen isavkjølt og ytterligere rørt i 2 timer, og krystallene ble oppsamlet ved filtrering. De ervervede krystallene ble vasket med en blandet løsning av avkjølt etanol (8,4 ml) og vann (5,6 ml) og vakuumtørket til å gi det tilsiktede produktet som hvite krystaller (krystallform III, 6,77 g, utbytte 96,8%). Denne krystall ble bekreftet å være ekvivalent til standardproduktet (eksempel 3-1) ved XRPD-analyse.
Eksperimentelt eksempel
Egenskapsverdiene til hver krystallform ble bestemt ved de følgende analysetestene, og stabilitetstesten til hver krystallform ble utført ved å bruke dem som indisier.
Prøve
Med mindre noe annet er spesifisert, ble den tidligere nevnte krystallen (krsytallform I) ervervet i referanseeksempel 1, krystallen (krystallform II) ervervet i eksempel 1 og krystallen (krystallform III) ervervet i eksempel 3-1 anvendt som prøver.
Analysetest
1. Røntgenstrålepulverdiffraktometri
Denne analysen har til hensikt å oppnå røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønsteret for å spesifisere krystallformen til krystallene ervervet i referanseeksempel 1, eksempel 1 og eksempel 3-1. Diffraksjonsmønstrene benyttes til å spesifisere krystallformen, evaluere stabiliteten og for å bestemme renheten og lignende.
En prøve ble festet til et aluminiumelement, og målingen ble utført ved å bruke et røntgenstrålepulverdiffraktometer (RINT 2000/PC Ultima<+>, fremstilt av Rigaku Corporation, røntgenstrålekilde: Cu-Kα1-stråle, tubespenning: 40 kV, tubeelektrisk strøm: 40 mA, scanhastighet: 5º per minutt, trinnvidde: 0,02º, diffraksjonsvinkel: 5 -40º), basert på hvilke diffraksjonsmønsteret ble ervervet. De ervervede diffraksjonsmønstrene er vist i figur 1.
Som vist i fig.1, ble røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønstrene ervervet fra de respektive prøvene ulike.
Derfor ble det bekreftet at krystallene ervervet i referanseeksempel 1, eksempel 1 og eksempel 3-1 ble forskjellige og viste karakteristiske diffraksjonsmønstere som vist i røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønsteret. Derfor ble de i den foreliggende spesifikasjonen navngitt som krystallform I, krystallform II og krystallform III basert på disse røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønstere.
For spesifikasjon av krystallformen kan diffraksjonstoppen som er karakteristisk for hver krystall evalueres på en omfattende måte basert på diffraksjonskartet i fig.1.
Hoveddiffraksjonstoppene og de karakteristiske diffraksjonstoppene spesifisert fra diffraksjonsmønstrene i fig.1 er vist under.
[Krystallform I]
Hoveddiffraksjonstopp: 2θ=6,58, 14,40, 14,64, 15,24, 16,48, 19,16, 20,90, 21,14, 22,24, 24,74, 25,64, 26,12, 27,20°;
Karakteristisk diffraksjonstopp:2θ=6,58, 14,40, 19,16, 20,90, 21,14°,
[Krystallform II]
Hoveddiffraksjonstopp:2θ=6,56, 9,04, 13,20, 14,62, 15,24, 16,48, 19,86, 20,84, 21,22, 22,24, 25,22, 25,96, 26,12, 27,34°;
Karakteristisk diffraksjonstopp:2θ=6,56, 13,20, 19,86, 20,84, 21,22, 25,22°,
[Krystallform III]
Hoveddiffraksjonstopp:2θ=8,54, 14,02, 15,68, 15,90, 16,00, 17,06, 17,24, 17,84, 18,12, 19,50, 19,90, 22,26, 22,68, 23,02, 24,16, 24,76, 25,18, 25,74, 25,98, 27,50, 28,80, 30,38, 30,72, 32,54°;
Karakteristisk diffraksjonstopp:2θ=8,54, 14,02, 15,68, 17,06, 17,24, 24,16, 25,74°.
2. Termisk analyse
Denne analyse er tilsiktet målingen av entalpien og den ekstrapolerte begynnelsestemperaturen ved en endotermisk topp på den differensielle skanningkalorimetri (DSC) målingskurven. Disse verdiene er blant indisiene på stabilitet til den nevnte krystallformen I, krystallform II og krystallform III, og kan anvendes som en indeks til å spesifisere krystallformen.
2.1 Entalpi og ekstrapolert begynnelsestemperatur til krystallform I og krystallform II
Krystallform I og krystallform II ble underkastet måling ved å anvende differensiell skanningkalorimetri (DSC) målingsapparat (DSC8240, fremstilt av Rigaku Corporation), under atmosfæretrykk, målingsprøve 5 ± 1 mg, temperaturstigningshastighet: 10ºC/min, åpen aluminiumsform, og aluminiumoksid som en referanse. Entalpien og den ekstrapolerte begynnelsestemperaturen veden endotermisk topp på den ervervede DSC-kurven ble bestemt.
2.2. Entalpi og ekstrapolert begynnelsestemperatur til krystallform III
Krystallform III ble underkastet måling ved å anvende DSC målingsapparat (DSC8240, fremstilt av Rigaku Corporation, under atmosfæretrykk, målingsprøve 5,0 ± 0,5 mg, temperaturstigningshastighet: 5ºC/min, lukket aluminiumsform, og aluminiumoksid som en referanse. Entalpien og den ekstrapolerte begynnelsestemperaturen ved en endotermisk topp på den ervervede DSC-kurven ble bestemt.
Resultatene er vist i tabell 1.
Tabell 1
DSC-kurve ved endotermisk topp på entalpi og ekstrapolert begynnelsestemperatur
Som vist i tabell 1 viser krystallform III størst entalpi og høyest ekstrapolert begynnelsestemperatur blant de tre krystallformene. Således ble krystallform III bekreftet å være den mest stabile form.
3. Renhetstest
Denne analyse er tilsiktet måling av renheten til forbindelse A. Renheten kan anvendes som indisier på kjemisk stabilitet.
3.1.1. Renhet til forbindelse av krystallform I og krystallform II
Hver prøve (krystallform I og krystallform II, ca.10 mg) ble løst i acetonitril til å utgjøre en mengde på 10 ml og anvendt som en prøveløsning. Denne løsning (10 µl) ble påført høy utførsels-væskekromatografi (HPLC) under de følgende betingelsene. Topparealet til hver prøveløsning ble målt ved automatisk integrering, og renheten ble bestemt ved den følgende formelen. Renheten er vist i tabell 5 og 6 under.
Renhet (%) = 100 – (Asum/As) X 100
As: totale toppareal til toppene ervervet fra prøveløsning
Asum: totale toppareal til toppene unntatt hovedtoppen ervervet fra prøveløsning Testbetingelser
Detektor: UV-absorpsjonsmeter (bølgelengde: 259 nm)
Kolonne: CAPCELL PAK MG (indre diameter 4,6 cm, lengde 15 cm, partikkelstørrelse 5 µm, fremstilt av Shiseido Co., Ltd.
Kolonnetemperatur: konstant temperatur rundt 40ºC
Mobil fase A: trifluoreddiksyreløsning (1:1000)
Mobil fase B: løsning av trifluoreddiksyre i acetonitril (1:1000)
Gradientprogram: Som vist i den følgende tabell 2, blandingsforholdet til mobil fase A og mobil fase B er endret for å kontrollere konsentrasjonsgradient.
Tabell 2
Strømningsfase: 1 ml/min
3.2 Renhet til forbindelse av krystallform III
En prøve (krystallform III, ca.50 mg) ble løst i en blanding (4:1) av mobil fase B og mobil fase A til en total mengde på 50 ml, som ble anvendt som en prøveløsning. Denne løsning (1 ml) ble nøyaktig målt og en blanding (4:1) av mobil fase B og mobil fase A ble tilsatt til å utgjøre nøyaktig 100 ml, som ble anvendt som en standardløsning. Prøveløsningen og standardløsningen (15 µl) ble påført høy utførsels-væskekromatografi (HPLC) under de følgende betingelsene. Topparealet til hver løsning ble målt ved automatisk integrering, og renheten ble bestemt ved den følgende formelen. Renheten er vist i tabell 7 under.
Renhet (%) = 100 – (Asum/Ar)
Ar: toppareal av hovedtopp ervervet fra standardløsning
Asum: totale toppareal til toppene unntatt hovedtoppen ervervet fra prøveløsning
Testbetingelser
Detektor: UV-absorpsjonsmeter (bølgelengde: 259 nm)
Kolonne: Waters XTerra MC C18 (indre diameter 4,6 cm, lengde 5 cm, partikkeldiameter 2,5 µm, fremstilt av Waters)
Kolonnetemperatur: konstant temperatur rundt 40ºC
Mobil fase A: fosforsyre tilsettes til dikaliumhydrogenfosfatløsning (1→1149) for å justere pH til 7,0
Mobil fase B: acetonitril
Gradientprogram: Som vist i den følgende tabell 3, blandingsforholdet mellom mobil fase A og mobil fase B endres for å kontrollere konsentrasjonsgradient.
Tabell 3
Strømningshastighet: ： 0.9 ml/min
4. Oppløselighetstest
Denne test er tilsiktet måling av oppløselighet til krystallen i ulike testløsninger og under ulike pH-verdier. Oppløseligheten er én av indisiene på stabiliteten til den nevnte krystallform I, krystallform II og krystallform III, og kan også anvendes som en referanseindeks på absorpsjonsevne av krystallform av levende organismer.
Hver prøve (krystallform I type I, krystallform II og krystallform III, ca.10 mg) ble plassert i et 10 ml sentrifugerør sammen med den følgende testløsningen (5 ml) og rystet med en ryster (SR-1M; fremstilt av Tietech Co., Ltd.) i 14 timer. Etter rysting ble blandingen sentrifugert (3000 rpm, 20 min) og supernatanten ble filtrert gjennom 0,2 µm porestørrelse – 13 mm diameter polytetrafluoretylen-diskfilter (Millex-LG; fremstilt av Millipore Corporation). Målingen ble utført ved høy utførsels-væskekromatografi (HPLC). Resultatene er vist i tabell 4.
Tabell 4 Oppløselighetstest
<1) >Japanese Pharmacopoeia, generell testmetode, disintegrasjonstestmetode, 1. væske. Saltsyre (7,0 ml) og vann tilsettes til natriumklorid (2,0 g) for å utgjøre en mengde på 1000 ml. Denne løsning er gjennomsiktig og fargeløs og har en pH på omtrent 1,2.
<2) >Japanese Pharmacopoeia, generell testmetode, disintegrasjonstestmetode, 2. væske.
0,2 mol/l natriumhydroksidprøve (118 ml) og vann tilsettes til 0,2 mol/l kaliumdinatriumfosfatprøve (250 ml) for å utgjøre en mengde på 1000 ml. Denne løsning er gjennomsiktig og fargeløs og har en pH på omtrent 6,8.
<3) >McIlvaine-buffer ervervet ved å blande dinatriumhydrogenfosfat og sitronsyre i et gitt forhold for å justere til en gitt pH.
Fra resultatene som er beskrevet over ble det bekreftet at krystallform II har høyere oppløselighet enn krystallform III.
5. Stabilitetstest
En stabilitetstest av hver prøve ble utført under de følgende konserveringsbetingelser. Resultatene til krystallform I er vist i tabell 5, resultatene til krystallform II er vist i tabell 6 og resultatene til krystallform III er vist i tabell 7.
Som vist i tabell 6 og tabell 7 viste ikke krystallform II og krystallform III noen forskjeller i testresultatene under alle konserveringsbetingelser, når disse ble sammenlignet med den initielle prøven. I motsetning, som vist i tabell 5, viste krystallform I endringer i røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønsteret ervervet fra prøven etter konservering under konserveringsbetingelse nr. 3 (80ºC, konservering i en åpen beholder i 3 dager) og konserveringsbetingelse nr. 5 (60ºC, konservering i en åpen beholder i 3 uker), og røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster til krystallform I ble observert å overlappe med røntgenpulverdiffraksjonsmønster avledet fra krystallform II. Således ble det evaluert at en del av prøven viste krystallovergang til krystallform II under konservering. Røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønstrene til prøvenes konserveringsprøve under konserveringsbetingelser 1 til 6 av krystallform I er vist i fig.2.
Tabell 5 Resultater fra stabilitetstest av kr stallform I
R.H.: relative fuktighet
XRD: Røntgenstrålepulverdiffraksjonsmetri Tabell 6 Resultater fra stabilitetstest av kr stallform II
R.H.: relativ fuktighet
XRD: Røntgenstrålepulverdiffraksjonsmetri Tabell 7 Resultater fra stabilitetstest av kr stallform III
R.H.: relativ fuktighet
XRD: Røntgenstrålepulverdiffraksjonsmetri Fra resultatene til den nevnte stabilitetstesten ble det observert at krystallform I var ustabil, men krystallform II og krystallform III var ekstremt stabile under ulike konserveringsbetingelser. Derfor ble det bevist at krystallform II og krystallform III foretrekkes anvendt som et farmasøytisk produkt og lignende.
Som for absorpsjonsevnen til levende organismer, er krystallform II mer foretrukket og krystallform III mest foretrukket fordi den er den mest stabile krystallen.
Siden krystallform II og krystallform III begge er stabile, kan en blandingskrystall av dem anvendes i den foreliggende oppfinnelsen.
Eksperimentelt eksempel
Det følgende forklarer evalueringsmetoder av den HIV-integraseinhibitoriske aktiviteten til en krystall eller en blandingskrystall av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen.
(i) Konstruksjon av rekombinant integrase genekspresjonssystem
Fenylalanin i posisjon 185 i HIN-integrase fullengdegenet (J. Virol., 67, 425 – 437 (1993)) ble substituert med histidin og satt inn i restriksjonsenzymsetene til NdeI og XhoI i plasmidet pET21a(+) (fremstilt av Novagen), hvorved en integrase-ekspresjonsvektor (pET21a-IN-F185H ble konstruert.
(ii) Produksjon og opprensing av integraseprotein
Escherichia coli-rekombinant BL21 (DE3) transformert med plasmid (pET21a-IN-F185H) ervervet i (i) ble rystet i kultur ved 30ºC i et væskemedium inneholdende ampicillin. Da kulturen nådde den logaritmiske fasen, ble isopropyl-β-D-tiogalaktopyranosid tilsatt for å fremme ekspresjon av integrasegenet. Kulturen ble fortsatt i 3 timer for å fremme akkumulering av integraseproteinet. Den rekombinante E. coli ble oppsamlet i pelleter ved sentrifugal separering og konservert ved -80ºC.
E. coli ble suspendert i lyseringsbuffer (20 mM HEPES (pH 7,5), 5 mM DTT, 10 mM CHAPS, 10% glyserol) inneholdende 1M natriumklorid og underkastet repeterende trykksetting og detrykksetting for sprenging, og sentrifugal separering ved 4ºC, 40,000xg, 60 min for å utvinne en vannløselig fraksjon (supernatant). Denne ble fortynnet 10 ganger med lyseringsbuffer uten natriumklorid, blandet med SP-Sepharose (fremstilt av Pharmacia Corporation) og rørt ved 4ºC i 60 minutter for å tillate adsorpsjon av integraseprotein til kulene. Kulene ble vasket med lyseringsbuffer inneholdende 100 mM natriumklorid og integraseproteinet ble eluert med lyseringsbuffer inneholdende 1M natriumklorid.
Den eluerte integraseproteinløsningen ble påført til en Superdex 75 (Pharmacia Corporation) kolonne for gelfiltrering. Proteinet ble eluert med lyseringsbuffer inneholdende 1M natriumklorid.
De ervervede fraksjonene av integraseproteinet ble oppsamlet og konsevert ved -80ºC.
(iii) Fremstillelse av DNA-løsning
Det følgende DNA syntetisert av Greiner ble løst i TE-buffer (10 mM tris-saltsyre (pH 8,0), 1 mM EDTA) og blandet med donor-DNA, mål-DNA og hver komplementær tråd (+- og –tråder) til en 1 mM. Blandingen ble oppvarmet ved 95ºC i 5 minutter, 80ºC i 10 minutter, 70ºC i 10 minutter, 60ºC i 10 minutter, 50ºC i 10 minutter og 40ºC i 10 minutter og konsververt ved 25ºC til å gi en dobbelttrådet DNA, som ble anvendt i testen.
Donor-DNA (-tråd som har biotin festet til den 5’ terminale enden)
Donor -tråd: 5’-Biotin-ACC CTT TTA GTC AGT GTG GAA AAT CTC TAG CA-3’ (SEQ ID NO:1)
Donor -tråd: 5’-ACT GCT AGA GAT TTT CCA CAC TGA CTA AAA G-3’ (SEQ ID NO:2)
Mål-DNA (+, -tråder som begge har digoxigenin tilsatt til 3’ terminal ende)
Mål -tråd: 5’-TGA CCA AGG GCT AAT TCA CT-Dig-3’ (SEQ ID NO:3) Mål --tråd: 5’-AGT GAA TTA GCC CTT GGT CA-Dig-3’ (SEQ ID NO:4)
(iv) Bestemmelse av enzym (HIV-integrase) inhibitorisk aktivitet
Donor-DNA ble fortynnet med TE-buffer til 10 nM, hvor 50 µl ble tilsatt til hver brønn i en streptavidinbekledd mikrotiterplate (fremstilt av Roche) og tillatt å adsorbere ved 37ºC i 60 minutter. DNA ble deretter vasket med fosfatbuffer (Dulbecco PBS, Sanko Junyaku Co., Ltd.) inneholdende 0,1% Tween 20 og fosfatbuffer. Deretter ble en reaksjonsblanding (70 µl, se den følgende * for sammensetningen), en testsubstans (10 µl) fortynnet med reaksjonsblandingen og 100 µg/ml integraseprotein (10 µl) tilsatt til hver brønn og reagert ved 37ºC i 60 minutter. ;;Deretter ble 50 nM mål-DNA (10 µl) tilsatt, reagert ved 37ºC i 10 minutter og vasket med fosfatbuffer inneholdende 0,1% Tween 20 for å stoppe reaksjonen. ;;Deretter ble 100 mU/ml peroksidasemerket anti-digoxigenin antistoffløsning (fremstilt av Roche, 100 µl) tilsatt, og blandingen ble reagert ved 37ºC i 60 minutter, etterfulgt av vask med fosfatbuffer inneholdende 0,1% Tween 20. ;;En peroksidase fargeløsning (fremstilt av BioRad, 100 µl) ble tilsatt og tillatt å reagere ved romtemperatur i 4 minutter. Fargereaksjonen ble stoppet ved å tilsette 1N svovelsyre (100 µl). Absorbansen ved 450 nm ble målt. ;;Den HIV-integraseinhibitoriske aktiviteten (IC50) til forbindelsen A i den foreliggende oppfinnelsen ble beregnet fra inhiberingshastigheten i henhold til den følgende formelen. Resultatene er vist i tabell 8. ;;Inhiberingshastighet (%) = [1-(objekt-blank)/(kontroll-blank)]x100 ;;Objekt; absorbanse i brønn ved tilstedeværelsen av testforbindelse ;Kontroll; absorbanse i brønn i fraværet av testforbindelse ;Blank; absorbanse i brønn i fraværet av testforbindelse, i fraværet av integraseprotein ;;*Sammensetning av reaksjonsblandingen: 30 mM morfolinpropansulfonsyre (MOPS), 5 mM MgC2, 3 mM ditriotreitol (DTT), 0,1 mg/ml bovint serumalbumin (BSA), 5% glyserol, 10% dimetylsulfoksid (DMSO), 0,01% Tween 20.
Tabell 8
Evaluering av antivirusaktivitet
Effekten fra kombinert anvendelse av krystall eller en blandingskrystall av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen og eksisterende anti-HIV-faktorer kan bestemmes på den følgende måten.
For eksempel evalueres effekten av kombinert anvendelse av to faktorer fra eksisterende nukleosid revers transkriptaseinhibitorer (zidovudine, lamivudine, tenofovir), ikkenukleosid revers transkriptaseinhibitorer (efavirenz) eller proteaseinhibitorer (indinavir, nelfinavir) og en krystall eller en blandingskrystall av forbindelse A og lignende ved XTT-metode ved å anvende CEM-SS-celler infisert med HIV-1 IIIB.
I tillegg evalueres effekten av kombinert anvendelse av tre faktorer av en krystall eller en blandingskrystall av forbindelse A, zidovudine og lamivudine, eller en krystall eller en blandingskrystall av en forbindelse A, tenofovir og lamivudine og lignende.
Før den kombinerte analysetesten måles IC50 og CC50 til hver farmasøytisk faktor alene. Fem konsentrasjoner av farmasøytisk faktor A og ni konsentrasjoner av farmasøytisk faktor B, bestemt basert på disse resultater, kombineres for å evaluere effekten av kombinert anvendelse av to faktorer. For kombinert anvendelse av tre faktorer, blandes en høyt konsentrert farmasøytisk faktor B og en farmasøytisk faktor C og farmasøytisk faktor A og konsentrasjonen kombineres for evaluering.
Testresultatene til krystallen eller blandingskrystallen av forbindelse A og kombinasjonsmedikamentet alene eller i kombinasjon derav, analyseres basert på programmer til Prichard and Shipman MacSynergy II versjon 2.01 og Deltagraph versjon 1.5d.
Et tredimensjonalt plot tegnes fra % inhibering ved konsentrasjonene av hver kombinert farmasøytisk faktor, ervervet fra tre ganger av testene, med 95% (eller 68%, 99%) konfidensgrenser, og effekten av den kombinerte anvendelsen evalueres basert på de numeriske verdier av µM<2>% beregnet derfra. Kriteriene for evaluering er vist i det følgende.
Definisjon av interaksjon µM<2>%
Sterk synergistisk virkning >100
Mild synergistisk virkning 51 - 100
Additiv virkning 50 - -50
Mild antagonistisk virkning -51 - -100
Sterk antagonistisk virkning <-100
INDUSTRIELL ANVENDELSE
Krystallen av forbindelse A i den foreliggende oppfinnelsen, som har den nevnte, bestemte krystallformen, viser en anti-HIV-effekt så vel som overlegen krystallstabilitet. Derfor er den anvendelig som et startmateriale til en farmasøytisk sammensetning, mer nøyaktig, ulike farmasøytiske sammensetninger for profylaksen og/eller behandling av AIDS.
Denne søknad er basert på patentsøknad nr.2004-150979 innlevert i Japan, hvor innholdet her er inkorporert ved referanse. Alle referansene som det her er referert til, inkludert patenter, patentsøknader og publikasjoner, er her inkorporert i deres helhet ved referanse.
1.
Anti-HIV-sammensetning, k a r a k t e r i s e r t v e d at den omfatter enten
a) en krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 6,56 ± 0,2, 13,20 ± 0,2, 19,86 ± 0,2, 20,84 ± 0,2, 21,22 ± 0,2, 25,22º ± 0,2 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller
b) en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 8,54± 0,2, 14,02 ± 0,2, 15,68 ± 0,2, 17,06 ± 0,2, 17,24 ± 0,2, 24,16 ± 0,2, 25,74º ± 0,2 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller
c) en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har en ekstrapolert begynnelsestemperatur på 162,1 ± 5,0ºC, eller
d) en blandingskrystall som omfatter krystallen ifølge a) og krystallen ifølge b) eller c),
og én eller flere varianter av andre anti-HIV-aktive substanser som aktive ingredienser.
2.
Anti-HIV-sammensetning ifølge krav 1, k a r a k t e r i s e r t v e d at krystallen ifølge hvilken som helst av a), b), c), d) har en krystallrenhet på ikke mindre enn 70%.
3.
Anti-HIV-faktor for en mangfoldig medikamentbehandling med annen anti-HIV-faktor, k a r a k t e r i s e r t v e d at den omfatter enten
a) en krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 6,56 ± 0,2, 13,20 ± 0,2, 19,86 ± 0,2, 20,84 ± 0,2, 21,22 ± 0,2, 25,22º ± 0,2 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller
b) en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 8,54± 0,2, 14,02 ± 0,2, 15,68 ± 0,2, 17,06 ± 0,2, 17,24 ± 0,2, 24,16 ± 0,2, 25,74º ± 0,2 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller
c) en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har en ekstrapolert begynnelsestemperatur på 162,1 ± 5,0ºC, eller
d) en blandingskrystall som omfatter krystallen ifølge a) og krystallen ifølge b) eller c),
som en aktiv ingrediens.
4.
Anti-HIV-faktor ifølge krav 3, k a r a k t e r i s e r t v e d at krystallen ifølge hvilken som helst av a), b), c), d) har en krystallrenhet på ikke mindre enn 70%.

Claims (4)

Patentkrav s ø k n a d 2 0 1 9 0 0 5 1
1.
Fremgangsmåte for å fremstille en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 8,54º, 14,02º, 15,68º, 17,06º, 17,24º, 24,16º, 25,74º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, k a r a k t e r i s e r t v e d at fremgangsmåten omfatter:
å oppløse en krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 6,56º, 13,20º, 19,86º, 20,84º, 21,22º, 25,22º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, i et oppløsningsmiddel; og tilsette en såkrystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 8,54º, 14,02º, 15,68º, 17,06º, 17,24º, 24,16º, 25,74º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, til oppløsningen.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, k a r a k t e r i s e r t v e d at oppløsningsmidlet er valgt fra gruppen bestående av :
isobutylacetat;
isopropanol; eller
vannholdig etanol.
3.
Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, k a r a k t e r i s e r t
v e d at fremgangsmåten omfatter å oppløse krystallform II ved oppvarming.
4.
Fremgangsmåte ifølge krav 3, k a r a k t e r i s e r t v e d at fremgangsmåten omfatter å oppløse krystallform II ved oppvarming under
tilbakestrømning.
Patentkrav s ø k n a d 2 0 2 0 0 8 7 3
1.
Farmasøytisk sammensetning for anvendelse som en antivirusfaktor, som omfatter enten
a) en krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 6,56 ± 0,2, 13,20 ± 0,2, 19,86 ± 0,2, 20,84 ± 0,2, 21,22 ± 0,2, 25,22º ± 0,2 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller
b) en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 8,54 ± 0,2, 14,02 ± 0,2, 15,68 ± 0,2, 17,06 ± 0,2, 17,24 ± 0,2, 24,16 ± 0,2, 25,74º ± 0,2 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller som har en ekstrapolert begynnelsestemperatur på 162,1 ± 5,0ºC, eller
c) en blandingskrystall som definert i a) og b),
og én eller flere varianter av andre anti-HIV-aktive substanser som aktive ingredienser.
2.
Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 1, hvori de andre HIV-aktive substansene er en revers transkriptase inhibitor.
3.
Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 1, hvori de andre anti-HIV aktive substanser er propan-2-yl (2S)-2-[[1-(6-aminopurin-9-yl)propan-2-yloksymetylfenoksyfosforyl]-amino]propanoat (GS-7340).
Patentkrav s ø k n a d 2 0 2 2 0 6 9 0
1.
Fremgangsmåte for å fremstille en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ på 8,54º, 14,02º, 15,68º, 17,06º, 17,24º, 24,16º, 25,74º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, k a r a k t e r i s e r t v e d at fremgangsmåten omfatter:
å oppløse en krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ på 6,56º, 13,20º, 19,86º, 20,84º, 21,22º, 25,22º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, i et oppløsningsmiddel; og tilsette en såkrystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ på 8,54º, 14,02º, 15,68º, 17,06º, 17,24º, 24,16º, 25,74º som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, til oppløsningen.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, k a r a k t e r i s e r t v e d at oppløsningsmidlet er valgt fra gruppen bestående av :
isobutylacetat;
isopropanol; eller
vannholdig etanol.
3.
Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, k a r a k t e r i s e r t
v e d at fremgangsmåten omfatter å oppløse krystallform II ved oppvarming.
4.
Fremgangsmåte ifølge krav 3, k a r a k t e r i s e r t v e d at fremgangsmåten omfatter å oppløse krystallform II ved oppvarming under
tilbakestrømning.
Patentkrav f o r a v d e l t s ø k n a d
1.
Farmasøytisk sammensetning, som omfatter
a) en krystall (krystallform II) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 6,56, 13,20, 19,86, 20,84, 21,22, 25,22 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller b) en krystall (krystallform III) av 6-(3-klor-2-fluorbenzyl)-1-[(S)-1-hydroksymetyl-2-metylpropyl]-7-metoksy-4-oxo-1,4-dihydrokinolin-3-karboksylsyre, som har et røntgenstrålepulverdiffraksjonsmønster som har karakteristiske diffraksjonstopper ved diffraksjonsvinkler 2θ(º) på 8,54, 14,02, 15,68, 17,06, 17,24, 24,16, 25,74 som målt ved røntgenstrålepulverdiffraksjonsmeter, eller
c) en blandingskrystall som omfatter krystallen av ovenfor nevnte a) og krystallen av ovenfor nevnte b),
og GS-7340.
2.
Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 1, som videre omfatter en farmasøytisk akseptabel bærer.
3.
Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 1 eller 2, for anvendelse i behandling av HIV.
NO20230913A 2004-05-20 2023-08-25 Farmasøytisk sammensetning NO347902B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2004150979 2004-05-20
PCT/JP2005/009604 WO2005113508A1 (en) 2004-05-20 2005-05-19 Stable crystal of 4-oxoquinoline compound

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20230913A1 true NO20230913A1 (no) 2007-02-07
NO347902B1 NO347902B1 (no) 2024-05-06

Family

ID=35079161

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20065790A NO339223B1 (no) 2004-05-20 2006-12-14 Stabil krystall av 4-oksoquinolinforbindelse
NO20161297A NO20161297A1 (no) 2004-05-20 2016-08-12 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20190051A NO20190051A1 (no) 2004-05-20 2019-01-15 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20200873A NO20200873A1 (no) 2004-05-20 2020-08-04 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20220690A NO20220690A1 (no) 2004-05-20 2022-06-17 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20230913A NO347902B1 (no) 2004-05-20 2023-08-25 Farmasøytisk sammensetning

Family Applications Before (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20065790A NO339223B1 (no) 2004-05-20 2006-12-14 Stabil krystall av 4-oksoquinolinforbindelse
NO20161297A NO20161297A1 (no) 2004-05-20 2016-08-12 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20190051A NO20190051A1 (no) 2004-05-20 2019-01-15 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20200873A NO20200873A1 (no) 2004-05-20 2020-08-04 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse
NO20220690A NO20220690A1 (no) 2004-05-20 2022-06-17 Stabil krystall av 4-oxoquinolinforbindelse

Country Status (32)

Country Link
US (6) US7635704B2 (no)
EP (4) EP1636190B1 (no)
JP (1) JP3754064B2 (no)
KR (1) KR20080064909A (no)
CN (1) CN1956961B (no)
AR (2) AR049280A1 (no)
AU (1) AU2005245296B2 (no)
BR (1) BRPI0510114B8 (no)
CA (1) CA2566922C (no)
CY (1) CY1113010T1 (no)
DK (2) DK1636190T3 (no)
ES (2) ES2388441T3 (no)
FI (2) FI3281939T3 (no)
FR (1) FR23C1040I1 (no)
HK (1) HK1083341A1 (no)
HR (2) HRP20231588T3 (no)
HU (2) HUE064615T2 (no)
IL (1) IL179250A0 (no)
LT (1) LT3281939T (no)
MX (1) MXPA06013405A (no)
MY (1) MY134672A (no)
NO (6) NO339223B1 (no)
NZ (1) NZ551839A (no)
PE (2) PE20120361A1 (no)
PL (2) PL1636190T3 (no)
PT (2) PT1636190E (no)
RS (2) RS52375B (no)
RU (1) RU2330845C1 (no)
SI (2) SI1636190T1 (no)
TW (1) TWI329015B (no)
WO (1) WO2005113508A1 (no)
ZA (1) ZA200610647B (no)

Families Citing this family (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6891227B2 (en) 2002-03-20 2005-05-10 International Business Machines Corporation Self-aligned nanotube field effect transistor and method of fabricating same
DE60329318D1 (de) * 2002-11-20 2009-10-29 Japan Tobacco Inc 4-oxochinolinverbindungen und deren verwendung als hiv-integrase-inhibitoren
MY134672A (en) * 2004-05-20 2007-12-31 Japan Tobacco Inc Stable crystal of 4-oxoquinoline compound
WO2007063869A1 (ja) * 2005-11-30 2007-06-07 Japan Tobacco Inc. 高純度キノロン化合物の製造方法
US20090233964A1 (en) * 2005-12-30 2009-09-17 Gilead Sciences, Inc. Methods for improving the pharmacokinetics of hiv integrase inhibitors
AU2013203476C1 (en) * 2005-12-30 2016-11-17 Gilead Sciences, Inc. Methods for improving the pharmacokinetics of hiv integrase inhibitors
KR20160074018A (ko) * 2005-12-30 2016-06-27 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Ｈｉｖ 인테그라제 억제제의 약동학을 개선하기 위한 방법
US20090018162A1 (en) * 2006-02-01 2009-01-15 Yuji Matsuzaki Use of 6-(3-chloro-2-fluorobenzyl)-1-[(2s)-1-hydroxy-3-methylbutan-2-yl]-7-methoxy-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid or salt thereof for treating retrovirus infection
WO2007092802A1 (en) * 2006-02-09 2007-08-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for treating hiv infection through co-administration of tipranavir and gs 9137
CA2645119C (en) 2006-03-06 2012-01-24 Japan Tobacco Inc. Method for producing 4-oxoquinoline compound
IN2014CN00532A (no) 2006-03-06 2015-04-03 Japan Tobacco Inc
RS54237B9 (sr) 2006-07-07 2019-07-31 Gilead Sciences Inc Modulatori farmakokinetičkih svojstava terapeutika
WO2008033836A2 (en) 2006-09-12 2008-03-20 Gilead Sciences, Inc. Process and intermediates for preparing integrase inhibitors
AR065439A1 (es) 2007-02-23 2009-06-10 Gilead Sciences Inc Derivados de tiazoles 1,3 no condensados,composiciones farmaceuticas que los contienen y usos como agentes antivirales, en particular anti hiv.
SG182228A1 (en) * 2007-06-29 2012-07-30 Gilead Sciences Inc Therapeutic compositions and uses thereof
US20100331331A1 (en) * 2007-06-29 2010-12-30 Therapeutic Compositons And Use Thereof Therapeutic compositions and the use thereof
AR068403A1 (es) * 2007-09-11 2009-11-18 Gilead Sciences Inc Proceso e intermediarios para la preparacion de inhibidores de integrasa
ES2553897T3 (es) 2008-05-02 2015-12-14 Gilead Sciences, Inc. El uso de partículas de vehículo sólido para mejorar la procesabilidad de un agente farmacéutico
SG2014007744A (en) 2009-02-06 2014-05-29 Gilead Sciences Inc Tablets for combination therapy
WO2010137032A2 (en) * 2009-05-14 2010-12-02 Matrix Laboratories Ltd. Novel polymorphic forms of elvitegravir and its pharmaceutically acceptable salts
WO2011004389A2 (en) * 2009-06-18 2011-01-13 Matrix Laboratories Ltd An improved process for the preparation of elvitegravir
CN102212032B (zh) * 2011-04-20 2013-07-31 复旦大学 一种5-羟基喹诺酮类衍生物及其制备方法和用途
US10071957B2 (en) 2012-07-06 2018-09-11 Genentech, Inc. N-substituted benzamides and methods of use thereof
PT2880017T (pt) 2012-08-03 2016-12-14 Gilead Sciences Inc Processo e intermediários para preparar inibidores da integrase
CN103819402B (zh) * 2012-11-17 2016-03-30 上海迪赛诺化学制药有限公司 埃替拉韦中间体及其制备方法和应用
CN103864682B (zh) * 2012-12-18 2016-12-28 上海迪赛诺化学制药有限公司 一种制备iii型埃替拉韦晶体的方法
SG11201504857SA (en) 2012-12-21 2015-07-30 Gilead Sciences Inc Polycyclic-carbamoylpyridone compounds and their pharmaceutical use
NO2865735T3 (no) 2013-07-12 2018-07-21
CA2916993C (en) 2013-07-12 2019-01-15 Gilead Sciences, Inc. Polycyclic-carbamoylpyridone compounds and their pharmaceutical use
CN105315203A (zh) * 2014-06-06 2016-02-10 上海迪赛诺化学制药有限公司 一种v型埃替拉韦晶体及其制备方法
TW201613936A (en) 2014-06-20 2016-04-16 Gilead Sciences Inc Crystalline forms of(2R,5S,13aR)-8-hydroxy-7,9-dioxo-n-(2,4,6-trifluorobenzyl)-2,3,4,5,7,9,13,13a-octahydro-2,5-methanopyrido[1',2':4,5]pyrazino[2,1-b][1,3]oxazepine-10-carboxamide
NO2717902T3 (no) 2014-06-20 2018-06-23
TWI677489B (zh) 2014-06-20 2019-11-21 美商基利科學股份有限公司 多環型胺甲醯基吡啶酮化合物之合成
TWI695003B (zh) 2014-12-23 2020-06-01 美商基利科學股份有限公司 多環胺甲醯基吡啶酮化合物及其醫藥用途
PL3277691T3 (pl) 2015-04-02 2019-07-31 Gilead Sciences, Inc. Policykliczne związki karbamoilopirydonowe i ich zastosowanie farmaceutyczne
CN106008195B (zh) * 2016-05-19 2018-08-03 绍兴文理学院 一种2，4-二氟-5-碘苯甲酸的制备方法
EP3984536A1 (en) * 2020-10-19 2022-04-20 Centre national de la recherche scientifique Inhibition of the hiv-1 replication by compounds directed against a new target of the viral cycle

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3472859A (en) * 1966-11-01 1969-10-14 Sterling Drug Inc 1-alkyl-1,4-dihydro-4-oxo-3 quinoline-carboxylic acids and esters
WO1998045269A1 (fr) * 1997-04-08 1998-10-15 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Derives de quinoleines en tant qu'inhibiteurs de la vih integrase

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS567162B1 (no) 1970-09-14 1981-02-16
JPS4826772A (no) 1971-08-11 1973-04-09
JPS6450979A (en) 1987-08-21 1989-02-27 Hitachi Shipbuilding Eng Co Method for discriminating whistle sound
JPH0651229B2 (ja) 1989-07-31 1994-07-06 新日本製鐵株式会社 プラズマアーク溶接方法および装置
IL100555A (en) 1991-02-07 2000-08-31 Hoechst Marion Roussel Inc N-substituted quinoline derivatives their preparation their use for the preparation of medicaments and the pharmaceutical compositions containing them
JP2993316B2 (ja) 1992-05-27 1999-12-20 宇部興産株式会社 アリール基又は複素芳香環基置換アミノキノロン誘導体及びエイズ治療剤
NO304832B1 (no) 1992-05-27 1999-02-22 Ube Industries Aminokinolonderivater samt middel mot HIV
JPH06199835A (ja) 1993-01-08 1994-07-19 Hokuriku Seiyaku Co Ltd ８−ジフルオロメトキシキノリン−３−カルボン酸誘導体
JPH06271568A (ja) 1993-03-22 1994-09-27 Hokuriku Seiyaku Co Ltd ７−フェニルピペラジニルキノリン−３−カルボン酸誘導体
JP2930539B2 (ja) 1994-07-18 1999-08-03 三共株式会社 トリフルオロメチルキノリンカルボン酸誘導体
EP0773214A4 (en) 1994-07-18 1998-04-15 Ube Industries TRIFLUORMETHYLQUINOLINE CARBONIC ACID DERIVATIVES
JPH0826772A (ja) 1994-07-22 1996-01-30 Sony Corp 融着用ガラス、その製造方法及び製造装置、並びに磁気ヘッドの製造方法
DK0892801T3 (da) 1996-04-12 2002-04-22 Us Gov Health & Human Serv Acridon-afledte forbindelser, der er anvendelige som antineoplastiske og antiretrovirale midler
JP3776203B2 (ja) 1997-05-13 2006-05-17 第一製薬株式会社 Ｉｃａｍ−１産生阻害剤
GB9721964D0 (en) 1997-10-16 1997-12-17 Pfizer Ltd Isoquinolines
US6399629B1 (en) 1998-06-01 2002-06-04 Microcide Pharmaceuticals, Inc. Efflux pump inhibitors
US6248736B1 (en) 1999-01-08 2001-06-19 Pharmacia & Upjohn Company 4-oxo-1,4-dihydro-3-quinolinecarboxamides as antiviral agents
US6248739B1 (en) 1999-01-08 2001-06-19 Pharmacia & Upjohn Company Quinolinecarboxamides as antiviral agents
PE20011349A1 (es) 2000-06-16 2002-01-19 Upjohn Co 1-aril-4-oxo-1,4-dihidro-3-quinolincarboxamidas como agentes antivirales
US6559145B2 (en) 2000-07-12 2003-05-06 Pharmacia & Upjohn Company Heterocycle carboxamides as antiviral agents
JP2004517860A (ja) 2000-10-12 2004-06-17 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド Ｈｉｖインテグラーゼ阻害薬として有用なアザ−およびポリアザ−ナフタレニルカルボキサミド類
AU2002230392A1 (en) 2000-10-12 2002-05-15 Merck & Co., Inc. AZA-and polyaza-naphthalenyl ketones useful as HIV integrase inhibitors
BR0207809A (pt) 2001-03-01 2004-03-09 Shionogi & Co Compostos heteroarila contendo nitrogênio possuindo atividade inibidora contra integrase de hiv
JP2002293745A (ja) 2001-03-29 2002-10-09 St Marianna Univ School Of Medicine 慢性関節リウマチ治療剤
US20030138483A1 (en) * 2001-05-25 2003-07-24 Sergio Petriconi Soft elastic capsules and compositions thereof
US6627646B2 (en) * 2001-07-17 2003-09-30 Sepracor Inc. Norastemizole polymorphs
FR2827600A1 (fr) 2001-07-20 2003-01-24 Lipha Derives acides de quinolone et leurs applications en therapeutique
JP4035765B2 (ja) 2002-10-31 2008-01-23 横河電機株式会社 フーリエ変換型赤外線分光計
JP3567162B1 (ja) 2002-11-20 2004-09-22 日本たばこ産業株式会社 ４−オキソキノリン化合物及びそのｈｉｖインテグラーゼ阻害剤としての利用
DE60329318D1 (de) 2002-11-20 2009-10-29 Japan Tobacco Inc 4-oxochinolinverbindungen und deren verwendung als hiv-integrase-inhibitoren
US7531554B2 (en) * 2004-05-20 2009-05-12 Japan Tobacco Inc. 4-oxoquinoline compound and use thereof as HIV integrase inhibitor
MY134672A (en) * 2004-05-20 2007-12-31 Japan Tobacco Inc Stable crystal of 4-oxoquinoline compound
EP2229945A1 (en) 2004-05-21 2010-09-22 Japan Tobacco, Inc. Combinations comprising a 4-isoquinolone derivative and anti-HIV agents

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3472859A (en) * 1966-11-01 1969-10-14 Sterling Drug Inc 1-alkyl-1,4-dihydro-4-oxo-3 quinoline-carboxylic acids and esters
WO1998045269A1 (fr) * 1997-04-08 1998-10-15 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Derives de quinoleines en tant qu'inhibiteurs de la vih integrase

Also Published As

Publication number Publication date
ES2960824T3 (es) 2024-03-06
US20190185433A1 (en) 2019-06-20
EP3281939B1 (en) 2023-10-18
EP4299563A3 (en) 2024-02-28
ES2388441T3 (es) 2012-10-15
PL3281939T3 (pl) 2024-03-18
IL179250A0 (en) 2007-03-08
US20150361044A1 (en) 2015-12-17
PT1636190E (pt) 2012-08-20
CY1113010T1 (el) 2016-04-13
FIC20240008I1 (fi) 2024-03-20
NO339223B1 (no) 2016-11-21
RS64845B1 (sr) 2023-12-29
HUE064615T2 (hu) 2024-04-28
SI3281939T1 (sl) 2024-02-29
PE20060358A1 (es) 2006-05-12
HUS2400006I1 (hu) 2024-04-28
AU2005245296A1 (en) 2005-12-01
DK1636190T3 (da) 2012-09-24
FR23C1040I1 (fr) 2023-12-29
NO20190051A1 (no) 2007-02-07
MXPA06013405A (es) 2007-03-01
BRPI0510114B1 (pt) 2020-09-15
JP3754064B2 (ja) 2006-03-08
TWI329015B (en) 2010-08-21
FI3281939T3 (fi) 2023-10-23
LT3281939T (lt) 2023-11-27
HRP20120681T1 (hr) 2012-09-30
US20060030710A1 (en) 2006-02-09
EP2514746A1 (en) 2012-10-24
NO20200873A1 (no) 2007-02-07
MY134672A (en) 2007-12-31
AR049280A1 (es) 2006-07-12
CN1956961B (zh) 2010-05-26
NO20161297A1 (no) 2007-02-07
PT3281939T (pt) 2023-11-22
RS52375B (en) 2012-12-31
AU2005245296B2 (en) 2010-08-12
CN1956961A (zh) 2007-05-02
PL1636190T3 (pl) 2012-10-31
US20100204271A1 (en) 2010-08-12
TW200600097A (en) 2006-01-01
BRPI0510114B8 (pt) 2021-05-25
CA2566922C (en) 2011-01-11
KR20080064909A (ko) 2008-07-09
EP1636190B1 (en) 2012-06-27
DK3281939T3 (da) 2024-01-22
WO2005113508A1 (en) 2005-12-01
US8981103B2 (en) 2015-03-17
NO20065790L (no) 2007-02-07
RU2330845C1 (ru) 2008-08-10
HK1083341A1 (en) 2006-06-30
US20220235009A1 (en) 2022-07-28
AR096100A2 (es) 2015-12-09
SI1636190T1 (sl) 2012-09-28
PE20120361A1 (es) 2012-05-03
NO20220690A1 (no) 2007-02-07
HRP20231588T3 (hr) 2024-03-15
ZA200610647B (en) 2008-06-25
NO347902B1 (no) 2024-05-06
US7635704B2 (en) 2009-12-22
NZ551839A (en) 2009-11-27
US20180029989A1 (en) 2018-02-01
CA2566922A1 (en) 2005-12-01
BRPI0510114A (pt) 2007-09-25
EP4299563A2 (en) 2024-01-03
JP2006001927A (ja) 2006-01-05
EP3281939A1 (en) 2018-02-14
EP1636190A1 (en) 2006-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO347902B1 (no) Farmasøytisk sammensetning
JP4629104B2 (ja) ４−オキソキノリン誘導体および抗ｈｉｖ剤を含む併用剤
US7531554B2 (en) 4-oxoquinoline compound and use thereof as HIV integrase inhibitor
NO327098B1 (no) 4-oksokinolin forbindelser, anvendelser derav, farmasoytiske sammensetninger samt kommersielle forpakninger
JP2011037857A (ja) レトロウイルス感染症の治療のための、６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸またはその塩の使用
US20060084665A1 (en) Quinolizinone compound and use thereof as HIV integrase inhibitor
KR100866296B1 (ko) ４―옥소퀴놀린 화합물의 안정한 결정체