NL8103563A - Werkwijze voor het bereiden van een hoogconcentraat van de factor viii (ahf). - Google Patents
Werkwijze voor het bereiden van een hoogconcentraat van de factor viii (ahf). Download PDFInfo
- Publication number
- NL8103563A NL8103563A NL8103563A NL8103563A NL8103563A NL 8103563 A NL8103563 A NL 8103563A NL 8103563 A NL8103563 A NL 8103563A NL 8103563 A NL8103563 A NL 8103563A NL 8103563 A NL8103563 A NL 8103563A
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- polyethylene glycol
- ahf
- subjected
- fraction
- factor viii
- Prior art date
Links
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 title claims description 17
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 27
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 27
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 19
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 17
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 15
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 13
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 8
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 5
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 5
- 238000000151 deposition Methods 0.000 claims description 4
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 claims description 4
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 claims description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 3
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 21
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 9
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 9
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 8
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 5
- 108010035369 Cohn fraction I Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQBCLHCLJAHVPV-UHFFFAOYSA-N CCO.NCC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O Chemical compound CCO.NCC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O JQBCLHCLJAHVPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000252095 Congridae Species 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N ethanol etoh Chemical compound CCO.CCO OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- ZMRUPTIKESYGQW-UHFFFAOYSA-N propranolol hydrochloride Chemical compound [H+].[Cl-].C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 ZMRUPTIKESYGQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
- Y10S530/831—Cohn fractions
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
---- w . * * m — VO 218½
Betr.: Werkwijze voor het "bereiden van een hoogconcentraat van de factor VIII (AHF).
De uitvinding "betreft een werkwijze voor het "bereiden van een hoogconcentraat van de factor VIII (AHF) met een specifieke activiteit van tenminste 2,5 eenheden AHF en een fihrinogeengehalte van minder dan 0,25 mg/mg proteïne uit menselijk of dierlijk plasma door een veel-5 trapsfraciionering van het plasma in het "bijzonder door een cryo- precipitatie en zuivering met een eivitneerslagmiddel als polyethyleen-glycol.
Er zijn reeds factor VIII (AHF )-concentraten "bekend, die uit menselijk of dierlijk plasma worden, "bereid en vergeleken met natief 10 plasma een verhoogde activiteit aan factor VIII bezitten. Bekende methoden voor het bereiden van factor VTII-concentraten bedienen zich als fractioneermaatregelen van een behandeling van het plasma met ethanol, met ether, met polyethyleenglycol en/of glycine. Bekend is ook een cryoprecipitatie van het plasm volgens Fool (19&5, "The New England 15 Journal of Medicine" 273, 1^3) of een cryoethanolprecipitatie van het plasma volgens Johnson (Congr. Int. Soc. Blood Iransf., Sydney, Australië, Abstracts of Paper, blz. 1109 (l966)).
Er zijn nog andere methoden bekend om factor VlII-concentraten te bereiden, n.1. een behandeling van het plasma met adsorptiemiddelen, 20 zoals florigel, bentoniet, ionenuitwisselaars en permeatiechromato-gr af iemiddelen.
Voorzover de stand van de techniek de behandeling van plasma met ethanol betreft^werd dit voor het eerst door Cohn (J. Am. Chem.
Soc. 68, ^59 (19½)) beschreven. Bij de behandeling van plasma met 25 ethanol wordt de z.g. Cohn-fractie I verkregen, die echter slechts een betrekkelijk geringe factor VlII-activiteit bezit. De Cohn-methode werd door Blomback (Arkiv for Kemi, 12, 387 (1958)) verbeterd, waarbij de Cohn-fractie I door een extractie met een ethanol-glycine-citraat-buffer verder werd gezuiverd. Daarbij ontstond de z.g. fractie 1-0.
30 Deze kan, zoals Simonetti et al (Ji.emostase 1, 57 (19^1)) beschreven, met looizuur verder worden gezuiverd; ook deze verbeterde concentraten hebben slechts een betrekkelijk geringe factor VlII-activiteit. Deze concentraten hebben voorts het nadeel, dat ze hoge gehalten aan vreemde eiwitten, d.w.z. aan qua factor VIII inactieve proteïnen, 8103563 s'* - “ m
• V
-2- bevatten. Zo is in de Cohn-fractie I. meer dan 60% van het eiwit fibrino— geen en in de Slomback-fractie 1-0 zelfs meer dan 80 % fibrinogeen aanwezig .
Wat de bekende fractionering door een cryoprecipitatie betreft, 5 werd deze zo uitgevoerd, dat menselijk, of dierlijk uitgangsplasma diep werd gevroren en weer opgedooid. Het cryoprecipitaat werd in een.buffer-oplossing opgelost en eventueel door een eiwitneerslagmiddel,als poly-ethyleenglycol en glycine, verder gezuiverd. Door de cryoprecipitatie is men er niet in geslaagd de factor VlII-activiteit belangrijk te 10 verbogen. De factor VlII-activiteit werd door bet cryoprecipiteren^ vergeleken met bet uitgangsplasma^slechts met ca*, bet’-tienvoudige verhoogd, maar ook. de in combinatie met de. cryoprecipitatie toegepaste verdere maatregelen hebben tot. dusver de activiteit van de verkregen produkten niet aldus; kunnen verbogen zoals dit. was gewenst.
15 Veeltrapsfractioneri-ngsmethoden in combinatie, met een eerste cryoprecipitatietrap zijn in de Amerikaanse octrooiscbriften 3.652.530, 3.63I.OI8, 3.682.881 alsmede in het Oostenrijkse öetrooischriffc 3^9.639 beschreven.
Dit soort produkten zijn als sterk gezuiverd AHF of als "High 20 Purity ΑΗΡ" aangeduid. Hun factor VlII-activiteit bedroeg evenwel ook niet meer dan de 90 tot 100-voudige activiteit vergeleken met. oorspronkelijk plasma,, terwijl het gehalte aan factor VIII onwerkzaam eiwit (fibrinogeen) nog steeds 35 % van het totale eiwit uitmaakte.
De uitvinding beoogt een vermijding van de geschilderde nadelen 25 en moeilijkheden en beoogt verder een hoog geconcentreerde factor VlU, waaruit de inerte, niet als factor VIII werkzame eiwitten practisch volledig zijn verwijderd, waarin het gehalte aan fibrinogeen zo laag mogelijk is gehouden en de factor VlII-activiteit berekend op het in het concentraat aanwezige eiwit, hoger is dan bij de bekende 30 therapeutisch gebruikte preparaten. In het bijzonder beoogt de uitvinding een werkwijze voor het bereiden van'een hoog geconcentreerde factor VIII (AHF) met een specifieke activiteit van tenminste 2,5 eenheden AHF en een fibrinogeen gehalte van minder dan 0,25 mg/mg eiwit, welk procédé op technische schaal toepasbaar is en een hoge 35 economie garandeert.
8103563 ·«· ¥ -3- ----- .-. *.......... . ........
*
Een en. ander wordt "bereikt door een veeltraps fractioneringswerk-wijze wan de in de aanhef beschreven soort, waarbij bij voorkeur als eerste trap een cryoprecipitatie wordt toegepast, die tot kenmerk heeft dat een door deze fractioneringsmaatregelen gezuiverde en qua factor 5 VIII (AHF) verrijkte fractie aan een cryo-alcoholneerslag onderworpen wordt en het verkregen neerslag in een houdbare vorm. wordt opgewerkt.
Volgens een voorkeursuitvoeringsvam van de uitvinding wordt de gezuiverde en aan factor VIH (AHF) verrijkte fractie bij een pH van.
5,9-6*3 en een. temperatuur van 0- tot -3°C met een een- of meerwaardige 10 alcohol, zoals methanol, ethanol, polyethyleenglycol of een polyester-gLycol (Pluronic) gemengd, dit mengsel diepgevroren: en daarna bij 0 tot lj-°C opgedooid, waarna het hoog geconcentreerde AÏÏF-houdende neerslag wordt opgelost en door diepvriezen en Iyofiliseren in een houdbare vorm wordt gébracht..
15 Een voorkeursuitvoeringsvom. van de uitvinding omvat een combi natie van de volgende maatregelen? - het menselijke of dierlijke plasma wordt aan een eerste cryoprecipitatie onderworpen; - het eryoprecipitaat wordt in een waterige hufferoplossing opgelost, 20 op een pH van 6,15-6,25 ^gebracht en deze oplossing aan. een eerste zuiveringsneerslagbehandeling met polyethyleenglycol onderworpen; - de na wegwerpen van het neerslag verkregen bovenstaande vloeistof wordt tenminste eenmaal aan een reinigingsneerslaan met polyethyleenglycol onderworpen en 25 - de na wegwerpen van de neerslagen uiteindelijk verkregen, aan factor VIII (AHF) verrijkte fractie wordt aan een cryoalcoholneerslagbe-handeling onderworpen, door deze fractie met een een- of meerwaardige alcohol als methanol, ethanol, polyethyleenglycol of polyester-glycol (Pluronic) te mengen, het mengsel diep te vriezen en daarna hij 30 0-b°C op te dooien, waarna het hoog geconcentreerde AHF bevattende neerslag wordt qpgelost en door diepvriezen en Iyofiliseren in een houdbare vorm gebracht.
Liefst worden daarbij de eerste polyethyleenglycolneerslag-behandeling met 3 G/V $rs polyethyleenglycol en de tweede resp. de 35 verdere polyethyleenglycolneerslagbehandelingen met 8 G/V %'s poly- 8103563 -]*- ethyleenglycol uitgevoerd.
Doelmatig wordt voor het meer slaan van het factor VUI-concentraat een ca. 10 G/V $'s. Pluronic-oplossing gebruikt.
In plaats van polyethyleenglycol als eiwitneerslagmiddel kan 5 ook Pluronic worden gebruikt, in welk geval de combinatie uit de volgende kenmerken bestaat: - het menselijk of dierlijk plasma, wordt aan een eerste coprécipitatie onderworpen; -het cryoprecipitaat wordt in een. waterige buff er oplossing opgelost, IQ op een pH van 6,25 gebracht en deze oplossing aan .een eerste zuiverings-neerslagbehandeling met Pluronic onderworpen; - de na wegwerpen, van het neerslag verkregen bovenstaande vloeistof wordt, tenminste aan. een. verdere zuiveringsneerslagbehandeling met Pluronic onderworpen, en 15 - de na. wegwerpen van. de neerslagen uiteindelijk verkregen gezuiverde aan factor VIII (AHF) verrijkte fractie, wordt aan een cryoalcohol-neerslagbehandeling onderworpen, door deze fractie met een een- of meerwaardige alcohol als methanol,, ethanol, polyethyleenglycol of polyester glycol (Pluronic) te mengen, het mengsel diep te .vriezen en 20 vervolgens, bij 0-^°C op te dooien, waarna het hoog geconcentreerd AHF-hevattende neerslag wordt opgelost en door diepvriezen en lyo-filiseren in houdbare vorm wordt gebracht.
De uitvinding wordt door de volgende voorbeelden nader toegelicht: Voorbeeld 1: 25 b60 1 vers bevroren plasma werd bij 0 tot +U°C opgedooid. Het 4 gevormde cryoprecipitaat werd door centrifugeren afgescheiden en in 9»6 1 trinatriumcitraat bij 3T°C opgelost.
De pH van de oplossing werd op 6,2 gebracht en 3 G/V %'s polyethyleenglycol 2000 toegevoegd. Daarbij ontstond een neerslag, dat door 30 centrifugeren werd afgescheiden· en weggeworpen.
De iónensterkte van de bovenstaande vloeistof, die factor VIII (AHF) bevatte, werd door toevoegen van trinatriumcitraat verhoogd.
De overige ongewenste proteïne!werden door verhoging van de polyethyleenglycol 2000-concentratie op 8 G/V % neergeslagen en na 35 centrifugeren weggeworpen.
8103563 & ; -5-
Door een. toevoeging van 8 G/V $'s ethanol hij -2°C en een pH van 6,1 werd een factor VXII-concentraat neergeslagen; de suspensie werd ingevroren en na opdooien "bij +1<-0C het factor VlII-houdende cryoalcohol-precipitaat in een fysiologische buffer opgelost, gesteriliseerd, af-5 gevuld en gevriesdroogd.
Voorbeeld 2; 96ΟΟ cm^ vers bevroren plasma werd bij 0 tot +U°C opgedooid. Het 3 gecentrifugeerde cryoprecipitaat werd in 2U0 cm trinatriumcitraat bij 37°C opgeloat.
1Ö De pH van de oplossing werd op 6,2 gebracht en 3 G/V %'s poly- ethyleenglycol 2000 toegevoegd. Het gevormde neerslag werd afgescheiden en weggeworpen.
Door een toevoeging van. trinatriumcitraat werd de ionensterkte verhoogd, door een toevoeging van de verdere polyethyleenglycol 2000 15 op 8 G/V % de ongewenste proteïnen neergeslagen en de laatste afgescheiden en weggeworpen.
Bij pH 6,0 en -2 tot -3°C werd een factor VIH-concentraat met 10 G/V %'s methanol neergeslagen; de suspensie werd ingevroren en na opdooien het cryoalcoholprecipitaat in een isotone buffer opgelost, 20 steriel gefiltreerd, afgevuld en gevriesdroogd.
Voorbeeld 3:
De werkwijze volgens voorbeeld 2 werd herhaald, echter in plaats van 10 G/V $'s methanol 12$'s polyethyleenglycol voor het neerslaan van het factor VlII-concentraat gebruikt.
25 Voorbeeld kt
Voorbeeld 2 werd herhaald, echter in plaats van 10 G/V $'s methanol 10 G/V $’s Pluronie voor het neerslaan van het factor VIII-concentraat gebruikt.
Voorbeeld 5' 30 10,U 1 vers bevroren plasma werd bij 0-U°C opgedooid. Het cryo- 3 precipitaat werd m 250 cm tnnatnumcitraatbuffer opgelost.
De pH van de oplossing werd op 6,3 gebracht en 2,5 g G/V $’s Pluronie toegevoegd. Het neerslag werd weggeworpen. Ha verhogen van de ionensterkte werd de Pluronic-concentratie op 7,5 G/V % verhoogd 35 en het neerslag nogmaals weggeworpen.
8103563 0 -6-
De "bovenstaande vloeistof werd bij een pH van 6,0 en een temperatuur van -2°C met 8 G/Y %'s ethanol behandeld, waarbij een factor VlH-concentraat neersloeg. De suspensie werd ingevroren en na opdooien bij +1+°C het cryoalcoholprecipitaat afgescheiden.
5 De door de onderhavige werkwij ze sterk verhoogde specifieke activiteit van de verkregen hoge concentraten resp. de verrijking . aan AÏÏF met meer dan het 200-voudige vergeleken met het uitgangsplasma, wordt aangetoond door tabel A vergeleken met bekende, in·'de handel zijnde AHF-concentraten.
10 Tabel A -
Specificiteit Zuiverheid vergeleken eenh/mg met plasma
Plasma 0,017 .1 cryoprecipitaat 0,1^5 9-voudig ^ High Purity ΑΗΡ 1,667 98-voudig
Hoogconcentraat, verkregen 206-voudig volgens de uitvinding >
Het geringe gehalte van het onderhavige concentraat aan fibrino-20 geen vergeleken met bekende concentraten volgt uit tabel B.
Tabel B
Cohn-fractie I - 60 % fibrinogeen
Blomback-fractie 1-0 - 80 % fibrinogeen
Gezuiverd of High ,
Purity AHF - 35 % fibrinogeen
Concentraat volgens de uitvinding 10 % fibrinogeen.
8103563
Claims (4)
1. Werkwijze voor het "bereiden van een hoog geconcentreerde factor VIII (AHF) met een specifieke activiteit van tenminste 2,5 eenheden AHF en een fihrinogeengehalte van minder dan 0,25 mg/mg eiwit uit menselijk of dierlijk plasma door een veeltraps-fractionering van een plasma, in 5 het "bijzonder door cryoprecipiteren en zuiveren met een eiwitneerslag-middel als polyethyleenglycol, met het kenmerk, dat een door deze frac-tioneringsmaatregelen gezuiverde en aan factor VIII (AHF) verrijkte fractie aan een cryoalcoholneerslagbehandeling wordt onderworpen en het verkregen neerslag in een houdbare vorm wordt opgewerkt.
2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de gezuiverde en aan factor VEt (AHF) verrijkte fractie "bij een pH van 5s9-6,3 en een temperatuur van 0 tot -3°C met een een- of meerwaardige alcohol als methanol, ethanol, polyethyleenglycol of een polyesterglycol (Pluro-nic) wordt gemengd, het mengsel diep wordt gevroren en vervolgens 15 "hij een temperatuur van 0-k°C wordt opgedooid, waarna het hoog geconcentreerde AEF-houdende neerslag wordt opgelost en door diepvriezen en lyofiliseren in een houdbare vorm wordt- gebracht.
3. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat een combinatie van de volgende maatregelen wordt toegepast: 20. het menselijke cf dierlijke plasma wordt onderworpen aan een eerste cryoprecipitatie; - het cryoprecipitaat wordt in een waterige bufferoplossing opgelost, op een pH van 6,15-6,25 gebracht en deze oplossing aan een eerste zuiveringsneerslagbehandeling met polyethyleenglycol onderworpen; 25. de na wegwerpen van het neerslag verkregen bovenstaande vloeistof wordt tenminste aan een verdere zuiveringsneerslagbehandeling met polyethyleenglycol onderworpen en - de na wegwerpen van de neerslagen uiteindelijk verkregen gezuiverde aan factor VIII (AHF) verrijkte fractie wordt aan een cryoalcohol- 30 neerslagbehandeling onderworpen door deze fractie met een een- of meerwaardige alcohol als methanol, ethanol, polyethyleenglycol of een polyesterglycol (Pluronic) te mengen, het mengsel diep te vriezen en daarna bij een temneratuur van 0-U°C op te dooien, waarna het hoog geconcentreerde AHF-houdende neerslag wordt opgelost en 35 door diepvriezen en lyofiliseren in een houdbare vorm wordt gebracht. 8103563 -8- ·¥ * · b. Werkwijze volgens conclusie 3* met het kenmerk, dat. de eerste polyethyleenglycol-neerslagbehandeling met 3 G/V %'s polyethyleen-glycol en de tweede resp. de verdere polyethyleenglycolneerslagbehan-delingen met 8 G/V %'s polyethyleenglycol worden uitgevoerd. 5 5· Werkwijze volgens conclusie H, met het kenmerk, dat voor het neerslaan van het. factor VIII-coneentraat een ca. 10 G/V %'s Pluronic-oplossing wordt gebruikt.
6. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat een combinatie van de volgende maatregelen wordt toegepast: 10. het menselijke of dierlijke plasma wordt aan een eerste cryopre- cipitatie onderworpen; - het eryopreeipitaat wordt in een waterige buff er oplossing opgelost, op een pH van. 6,25 gebracht, en de oplossing aan een eerste zuiverings-neerslagbehandeling met Pluronic onderworpen; 15. de na wegwerpen van het neerslag verkregen bovenstaande vloeistof wordt aan tenminste, een verdere zuiveringsneerslagbehandeling met Pluronic onderworpen en - de na wegwerpen van de neerslagen uiteindelijk, verkregen ..gezuiverde met factor VIII (AHF) verrijkte fractie wordt aan een cryoalcohol- 20 neerslagbehandeling onderworpen door deze fractie met een een- of meerwaardige alcohol als methanol, ethanol, polyethyleenglycol of een polyesterglycol (Pluronic) te mengen, het mengsel diep te vriezen en daarna bij 0 tot U°C op te dooien, waarna het hoog geconcentreerde AHF-houdende neerslag wordt opgelost en door diep-25 vriezen en lyofiliseren in een houdbare vorm gebracht. 8103563
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT433880 | 1980-08-27 | ||
| AT0433880A AT369263B (de) | 1980-08-27 | 1980-08-27 | Verfahren zur herstellung eines faktor viii(ahf) -hochkonzentrates |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL8103563A true NL8103563A (nl) | 1982-03-16 |
Family
ID=3562706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL8103563A NL8103563A (nl) | 1980-08-27 | 1981-07-28 | Werkwijze voor het bereiden van een hoogconcentraat van de factor viii (ahf). |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4404131A (nl) |
| JP (1) | JPS5928537B2 (nl) |
| AR (1) | AR228874A1 (nl) |
| AT (1) | AT369263B (nl) |
| BE (1) | BE890003A (nl) |
| CA (1) | CA1160567A (nl) |
| CH (1) | CH652030A5 (nl) |
| DE (1) | DE3129987C2 (nl) |
| DK (1) | DK156764C (nl) |
| ES (1) | ES504859A0 (nl) |
| FI (1) | FI72653C (nl) |
| FR (1) | FR2489150A1 (nl) |
| GB (1) | GB2083047B (nl) |
| HU (1) | HU183542B (nl) |
| IT (1) | IT1138511B (nl) |
| LU (1) | LU83577A1 (nl) |
| NL (1) | NL8103563A (nl) |
| NO (1) | NO157884C (nl) |
| SE (1) | SE459639B (nl) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU555305B2 (en) * | 1982-09-29 | 1986-09-18 | Bayer Corporation | Antihemophilic factor concentrate |
| DE3481109D1 (de) * | 1983-05-09 | 1990-03-01 | Novo Nordisk As | Antihaemophilie-faktor-viii-konzentrat und dessen herstellungsverfahren. |
| AT379510B (de) * | 1983-05-20 | 1986-01-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf) -haeltigen praeparation |
| US4965199A (en) * | 1984-04-20 | 1990-10-23 | Genentech, Inc. | Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection |
| US5149787A (en) * | 1984-05-22 | 1992-09-22 | The Blood Center Research Foundation | Method for maintaining intact, non-degraded factor VIII/von-Willebrand factor during blood processing |
| US4710381A (en) * | 1984-05-22 | 1987-12-01 | The Blood Center Of Southeastern Wisconsin | Method for maintaining intact, non-degraded factor VIII/von-Willebrand factor during blood processing |
| US4543210A (en) * | 1984-10-04 | 1985-09-24 | Miles Laboratories, Inc. | Process for producing a high purity antihemophilic factor concentrate |
| US4743680A (en) * | 1985-02-01 | 1988-05-10 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| US4952675A (en) * | 1985-02-01 | 1990-08-28 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| US4847362A (en) * | 1985-02-01 | 1989-07-11 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| AU6487286A (en) * | 1985-11-08 | 1987-05-14 | Baxter Travenol Laboratories Inc. | Antihemophilic factor by cold precipitation |
| WO1995003332A1 (en) * | 1993-07-23 | 1995-02-02 | Baxter International Inc. | Activated human factor viii and method of preparation |
| US5576291A (en) * | 1993-09-13 | 1996-11-19 | Baxter International Inc. | Activated factor VIII as a therapeutic agent and method of treating factor VIII deficiency |
| US5659017A (en) * | 1995-11-07 | 1997-08-19 | Alpha Therapeutic Corporation | Anion exchange process for the purification of Factor VIII |
| BR0008405B1 (pt) | 1999-02-22 | 2014-04-22 | Baxter Int | Composição de fator viii formulada sem a adição de albumina, uso de uma composição de fator viii, e, método de liofilizar uma formulação farmacêutica aquosa |
| US6893639B2 (en) * | 2001-10-19 | 2005-05-17 | Hemacare Corporation | Method for high yield purification of immune globulins from blood plasma and blood plasma intermediates |
| JP5779780B2 (ja) * | 2008-11-07 | 2015-09-16 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ | 第ｖｉｉｉ因子製剤 |
| CN116322920A (zh) | 2020-11-09 | 2023-06-23 | 武田药品工业株式会社 | 使用氧化硅吸附从血浆中纯化fviii |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3652530A (en) * | 1967-08-28 | 1972-03-28 | American Nat Red Cross | Antihemophilic factor prepared from blood plasma using polyethylene glycol |
| US3631018A (en) * | 1970-05-01 | 1971-12-28 | Baxter Laboratories Inc | Production of stable high-potency human ahf using polyethylene glycol and glycine to fractionate a cryoprecipitate of ahf concentrate |
| US3682881A (en) * | 1970-10-02 | 1972-08-08 | Baxter Laboratories Inc | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol |
| US3869436A (en) * | 1971-06-01 | 1975-03-04 | Statens Bakteriologiska Lab | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers |
| US4188318A (en) * | 1975-06-16 | 1980-02-12 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity Factor VIII concentrate |
| US4069216A (en) * | 1975-06-16 | 1978-01-17 | Edward Shanbrom, Inc. | Simplified methods for preparation of very high purity Factor VIII concentrate |
| CA1101332A (fr) * | 1976-01-30 | 1981-05-19 | Edward Shanbrom | Procedes simplifies pour la preparation de concentres de facteur viii de tres grande purete |
| DE2624373C2 (de) | 1976-05-31 | 1983-02-03 | Arnold Dr. 8782 Karlstadt Seufert | Verfahren zur Herstellung von steril filtriertem Kryopräzipilat mit einer Anreicherung des Faktors VIII |
| CA1054052A (en) | 1976-08-14 | 1979-05-08 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity factor viii concentrate |
| FR2460305A2 (fr) * | 1979-06-29 | 1981-01-23 | Merieux Inst | Procede de preparation d'un concentre de facteur viii |
-
1980
- 1980-08-27 AT AT0433880A patent/AT369263B/de not_active IP Right Cessation
-
1981
- 1981-07-22 SE SE8104482A patent/SE459639B/sv not_active IP Right Cessation
- 1981-07-28 NL NL8103563A patent/NL8103563A/nl not_active Application Discontinuation
- 1981-07-29 DE DE3129987A patent/DE3129987C2/de not_active Expired
- 1981-07-29 US US06/287,912 patent/US4404131A/en not_active Expired - Fee Related
- 1981-08-11 HU HU812315A patent/HU183542B/hu not_active IP Right Cessation
- 1981-08-12 GB GB8124600A patent/GB2083047B/en not_active Expired
- 1981-08-13 DK DK360281A patent/DK156764C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-08-18 BE BE0/205702A patent/BE890003A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-08-20 CA CA000384242A patent/CA1160567A/en not_active Expired
- 1981-08-20 FI FI812567A patent/FI72653C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-08-20 ES ES504859A patent/ES504859A0/es active Granted
- 1981-08-24 AR AR286519A patent/AR228874A1/es active
- 1981-08-24 FR FR8116169A patent/FR2489150A1/fr active Granted
- 1981-08-24 LU LU83577A patent/LU83577A1/de unknown
- 1981-08-24 CH CH5443/81A patent/CH652030A5/de not_active IP Right Cessation
- 1981-08-26 NO NO812905A patent/NO157884C/no unknown
- 1981-08-26 JP JP56134808A patent/JPS5928537B2/ja not_active Expired
- 1981-08-27 IT IT23660/81A patent/IT1138511B/it active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3129987C2 (de) | 1984-11-29 |
| AT369263B (de) | 1982-12-27 |
| FI72653C (fi) | 1987-07-10 |
| NO812905L (no) | 1982-03-01 |
| GB2083047A (en) | 1982-03-17 |
| DE3129987A1 (de) | 1982-04-22 |
| FR2489150A1 (fr) | 1982-03-05 |
| FI72653B (fi) | 1987-03-31 |
| CA1160567A (en) | 1984-01-17 |
| JPS5928537B2 (ja) | 1984-07-13 |
| ATA433880A (de) | 1982-05-15 |
| DK156764C (da) | 1990-02-19 |
| DK360281A (da) | 1982-02-28 |
| SE8104482L (sv) | 1982-02-28 |
| NO157884C (no) | 1988-06-15 |
| IT8123660A0 (it) | 1981-08-27 |
| GB2083047B (en) | 1984-03-28 |
| AR228874A1 (es) | 1983-04-29 |
| SE459639B (sv) | 1989-07-24 |
| FI812567L (fi) | 1982-02-28 |
| IT1138511B (it) | 1986-09-17 |
| ES8302017A1 (es) | 1983-01-01 |
| NO157884B (no) | 1988-02-29 |
| FR2489150B1 (nl) | 1984-06-29 |
| LU83577A1 (de) | 1981-12-01 |
| HU183542B (en) | 1984-05-28 |
| US4404131A (en) | 1983-09-13 |
| CH652030A5 (de) | 1985-10-31 |
| BE890003A (fr) | 1981-12-16 |
| ES504859A0 (es) | 1983-01-01 |
| DK156764B (da) | 1989-10-02 |
| JPS5775928A (en) | 1982-05-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NL8103563A (nl) | Werkwijze voor het bereiden van een hoogconcentraat van de factor viii (ahf). | |
| US4105650A (en) | Method of preserving blood plasma i | |
| FI60022B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av rent intravenoesdugligt gammaglobulin | |
| US3682881A (en) | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol | |
| US4188318A (en) | Simplified method for preparation of high yield, high purity Factor VIII concentrate | |
| EP0047216B1 (en) | Method of selectively increasing yield and purity of certain cryoprecipitate proteins | |
| JPS62502116A (ja) | 沈殿による血液凝固８因子の精製 | |
| US20090004242A1 (en) | Coatings and Biomedical Implants Formed From Keratin Biomaterials | |
| JPS596845B2 (ja) | 抗血友病因子の収率改良法 | |
| US4027013A (en) | Clottable fibrinogen free factor VIII and albumin product and process | |
| CN101730540A (zh) | 含有角蛋白生物材料的伤口愈合组合物 | |
| US4727059A (en) | Fibronectin solution suitable for use in humans and process for its preparation | |
| JPH0348888B2 (nl) | ||
| USH1509H (en) | Heparin enhanced process for separating antihemophilic factor (Factor VIII) and fibronectin from cryoprecipitate | |
| JPS59222420A (ja) | 第８因子含有製剤の製造法 | |
| CZ20023454A3 (cs) | Přípravek obsahující hemostaticky aktivní vWF a způsob jeho přípravy | |
| JPH0822879B2 (ja) | 冷沈澱により抗血友病因子を製造し且つ得られる抗血友病因子製品の溶解度を改善するための方法 | |
| JP2001500867A (ja) | 血漿タンパク質含有薬剤の製造方法 | |
| US4137223A (en) | Method of preserving blood plasma II | |
| US4189425A (en) | Method of preserving blood plasma I | |
| NO145563B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et renset konsentrat av faktor-viii. | |
| SU1127525A3 (ru) | Способ выделени альбумина | |
| WO1988008004A1 (en) | Extraction of factor viii | |
| JPS5959626A (ja) | 抗血友病因子濃縮物 | |
| US3038838A (en) | Method of producing purified properdin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BA | A request for search or an international-type search has been filed | ||
| BB | A search report has been drawn up | ||
| BC | A request for examination has been filed | ||
| A85 | Still pending on 85-01-01 | ||
| DNT | Communications of changes of names of applicants whose applications have been laid open to public inspection |
Free format text: IMMUNO AKTIENGESELLSCHAFT |
|
| BV | The patent application has lapsed |