HU183542B - Process for producing concentrated viii-bracket-ahf-bracket closed-factor - Google Patents
Process for producing concentrated viii-bracket-ahf-bracket closed-factor Download PDFInfo
- Publication number
- HU183542B HU183542B HU812315A HU231581A HU183542B HU 183542 B HU183542 B HU 183542B HU 812315 A HU812315 A HU 812315A HU 231581 A HU231581 A HU 231581A HU 183542 B HU183542 B HU 183542B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- ahf
- precipitation
- polyethylene glycol
- precipitate
- factor viii
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 claims abstract description 31
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 26
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 26
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 5
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 claims description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 claims description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 3
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 claims description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 abstract description 12
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 abstract description 12
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 abstract description 12
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 18
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 9
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 5
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- YBHYYFYQHRADCQ-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O YBHYYFYQHRADCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000252095 Congridae Species 0.000 description 1
- -1 Florigel Substances 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001104043 Syringa Species 0.000 description 1
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
- Y10S530/831—Cohn fractions
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás VIII(AHF)-faktor-koncentrátum előállítására, amelynek specifikus aktivitása legalább 2,5 AHF-egység és kevesebb mint 0,25 mg fibrinogént tartalmaz 1 mg emberi vagy iillati plazmára számítva. Az eljárást a plazma többfokozatú frakcionálásával, különösen fehérjekicsapós: terek — mint pl. polietilén-glikol — segítségével végzelt krioprecipitálásával és tisztításával hajtjuk végre.
Ismeretesek VIII(AHF)-faktorok, amelyeket emberi vagy állati plazmából állítanak elő, és amelyek a natív plazmánál nagyobb VlII-faktor-aktivitással rendelkeznek. A VlII-faktor-koncentrátumok előállítását a plazma etanol, éter, polietilén-glikol és/vagy glicerin segítségével végrehajtott frakcionálási eljárásával végzik. Ismert eljárás még a plazma krioprecipitálása Pool szerint (1965. „The New Englaid Journal of Medfi^lije”; 273, 1443) vagy Johnson sznint (Congr. Int. Soc. Blood Transf., Sydney, Australia, Abstract of Paper, 1109 (1966)).
A krioetanolos kicsapási eljárást ismerteti még J. Newman, A. J. Johnson, Μ. H. Karpatkin és S. Pusztán a Brit. J. Haematol 1971, 21, I. irodalmi helyen, míg a polietilén-glikolos krioprecipitációt .1. Johnson, V. E. Macdonald és J. Brind a VOX SANG. 1979, 36, 72—76 helyen ismerteti.
A Vili-faktor előállítására más módszerek is léteznek, mégpedig a plazma kezelése adszoipciós szerekkel, mint pl. Florigél, bentonit, ioncserélők és kromatografáló szerek. A plazma etanollal végzett kezelését először Cohn ismertette (J. Am. Chem. Soc. 68, 459 (1946)). A plazma etanolos kezelésénél a: úgynevezett I-Cohn-faktort kapjuk, amely azonban viszonylag alacsony VlII-faktor-aktivitással rendelkezik. A Cohn-féle módszert Bombáck fejlesztette tovább (Aktív för Kérni, 12, 387 (1958)), szerinte a; I-Cohn-faktort etanol-glicin-citrát-pufferral kell extrahálni és így tovább tisztítani. így kapható az úgynevezett I-O-frakció.
Simonetti és munkatársai szerint (Hemostase 1, 57 (1961)) ezt még tovább lehet tisztítani csnrsavval, ez a javított koncentrátum azonban még m ndig csekély VlII-faktor-aktivitással rendelkezik. Ezeknek a koncentrátumoknak az a hátrányuk, hogy magas az idegen fehérje tartalmuk, azaz a Vili-faktor hatástalan fehérjéket is tartalmaz. így az Ι-Cohn-frakció több mint 60% fibrinogént, míg az I-O-Borrback-frakció több mint 80% fibrinogént tartalmaz.
Az ismert krioprecipitátumot egy pu 'fer-oldatban feloldják és adott esetben fehérje kiciapó szerrel, mint pl. polietilén-glikollal és glicinnel tavább tisztítják. A krioprecipitációs módszerrel nem sikerült a VlII-faktor-aktivitást tovább növelni. A krioprecipitációval a VlII-faktor-aktivitást a kiindulási plazmához képest csak mintegy tízszeresre siktrült növelni, és a krioprecipitációval kombinált egyéb módszerek útján sem sikerült az aktivitást annyira növelni, mint az elvárható lenne.
Első krioprecipitációval kombinált többfokozatú frakcionálási eljárásokat ismertetnek a 3 652 530, 3 631 018 és 3 682 881 számú amerikai igyesült államokbeli szabadalmi leírások, valamint a 349 639 számú ausztriai szabadalmi leírás.
Ezeket a termékeket nagytisztaságú AHF néven hozzák forgalomba. VlII-faktor-aktivitások azonban még mindig csupán 90—100-szorosa a natív plazmáé2 nak, míg a Vili-faktorként hatástalan fehérjetartalmuk (fibrinogén) az összes protein 35%-át teszi ki.
A találmány célja az ismertetett hátrányok és nehézségek kiküszöbölésével eljárás kidolgozása olyan 5 VlII-faktor-koncentrátum előállítására, amelyben az inért, Vili-faktorként hatástalan fehérjék legteljesebb mértékben el vannak távolítva, és amelyben a fibrinogén tartalom a lehető legalacsonyabb értéken van tartva, míg a VlII-faktor-aktivitás a teljes fehérjetarta10 lomra számítva magasabb, mint az eddig terápiás célokra használt preparátumok esetén. Közelebbről a találmány feladata VIII(AHF)-faktor-koncentrátum előállítására egy olyan eljárás kidolgozása melynek segítségével előállított termék legalább 2,5 AHF-egy15 ség specifikus aktivitással és 0,25 mg/mg fehérje fibrinogén-tartalommal ipari körülmények között gazdaságosan előállítható.
Ezt a feladatot úgy oldottuk meg, hogy kidolgoztuk a bevezetésben ismertetett többfokozatú eljárást, ahol 20 előnyösen az első fokozat krioprecipitáció, és a frakcionálási eljárással kapott VIII(AHF)-faktorra nézve feldúsított frakciót krialkoholos kicsapássa! kezeljük, és a kapott csapadékot eltartható készítménnyé alakítjuk.
A találmány szerinti eljárás egyik előnyös megvalósítási módja szerint a VIII(AHF)-faktorra nézve feldúsított frakcióhoz 5,9 és 6,3 pH-érték között, 0 és —3 °C közötti hőmérsékleten egy-egy többértékű alkoholt, mint pl. metanolt, etanolt, polietilén-glikolt vagy poliészter-glikolt (PLURONIC) adunk, az elegyet mélyhűtjük, majd 0 és 4 °C közötti hőmérsékleten felengedtetjük, az AHF-koncentrátumot tartalmazó csapadékot feloldjuk és mélyfagyasztással és liofilezéssel eltartható készítménnyé alakítjuk.
A találmány szerinti eljárás előnyös megvalósítási módja a következő lépések kombinációját tartalmazza:
— az emberi vagy állati plazmát először kriopreci40 pitációval kezeljük, — a krioprecipitátumot vizes pufferoldatban feloldjuk, pH-ját 6,15 és 6,25 közötti értékre állítjuk be, és az oldatot polietilén-glikollal tisztítjuk.
— a csapadék eltávolítása után kapott maradékot 45 legalább még egyszer kezeljük polietilén-glikollal, és — végül a csapadékok eltávolítása után kapott tisztított Vili-faktorra nézve feldúsított frakciót krioalkoholos kezelésnek vetjük alá, ahol ehhez a frakcióhoz egy- vagy többértékű alkoholt, mint pl. metanolt, etanolt, polietilén-glikolt vagy poliészter-glikolt (PLURONIC) adunk, az elegyet mélyfagyasztjuk, majd 0 és 4 °C közötti hőmérsékleten felengedtetjük, az AHF-koncentrátum tartalmú csapadékot feloldjuk és mélyfagyasztással és liofilezéssel eltartható formá55 ba hozzuk.
Az első polietilén-glikolos kicsapatást előnyösen 3 súly/térf %-os polietilén-glikollal, a második és a további kicsapást 8 súly/térf. %-os polietilén-glikollal végezzük.
A VlII-faktor-koncentrátum kicsapására előnyösen mintegy 10 súly/térf. %-os PLURONIC-oldatot használunk.
Polietilén-glikol mint fehérjekicsapó-szer helyett PLURONIC is használható, ebben az esetben az eljá65 rás a következő lépésekből áll:
— az emberi vagy állati plazmát először krioprecipitációval kezeljük, — a krioprecipitátumot vizes pufferoldatban feloldjuk, pH-ját 6,25-re állítjuk be, és az oldatot PLURONIC-oldattal kezeljük, — a csapadék eltávolítása után kapott maradékot legalább még egyszer kezeljük PLURONIC-oldattal, és — végül a csapadékok eltávolítása után kapott tisztított, VIII(AHF)-faktorra nézve feldúsított frakció krialkoholos kicsapással kezeljük, ahol a frakcióhoz egy- vagy többértékű alkoholt, mint pl. metanolt, eta nolt, polietilén-glikolt vagy poliészter-glikolt (PLURONIC) adunk, az elegyet mélyfagyasztjuk, majd (> és 4 °C közötti hőmérsékleten felengedtetjük, az AHF-tartalmú koncentrátumot feloldjuk, és mélyfa gyasztással és liofilezéssel eltartható formába hozzuk
A találmány szerinti eljárást a következő példákká szemléltetjük.
1. példa
4601 frissen fagyasztott plazmát Oés +4 °C között hőmérsékleten felengedtetünk. A kapott krioprecipi tátumot centrifogálással elválasztjuk, és 9,6 1 trinát rium-citrátban 37 °C-on feloldjuk. Az oldat pH-jái
6,2-re állítjuk be 3 súly/térf%-os polietilén-gliko 2000-t adunk hozzá. A kapott csapadékot centrifugálással elválasztjuk és eldobjuk.
A VIII(AHF)-faktort tartalmazó maradék ionerősségét trinátrium-citrát hozzáadásával megnöveljük. A maradék nemkívánt fehérjetartalmat a polietilén-glikol 2000 koncentrációjának 8 súly/térf%-osra való emelésével és centrifugálással távolítjuk el.
A maradékhoz —2 °C-on, 6,1 ρΗ-értéknél í súly/térf%-os etanolt adunk, és így a VlII-faktorkoncentrátum kicsapódik. A szuszpenziót megfagyasztjuk és +4 °C-on történt felengedtetés után a VlII-faktor-tartalmú krioalkohol-precipitátumot fiziológiás pufferben feloldjuk, sterilezzük adagoljuk és liofilezzük.
2. példa
9600 ml frissen fagyasztott plazmát 0 és +4 °C közötti hőmérsékleten felengedíetünk, lecentrifugálunk, és a krioprecipitátumot 240 ml trinátrium-citrátban oldjuk 37 °C-on. Az oldat pH-ját 6,2-re állítjuk be és 3 súly/térf%-os polietilén-glikol 2000-t adunk hozzá. A kapott csapadékot elválasztjuk és eldobjuk.
Trinátrium-citrát adagolásával növeljük az ionerősséget, 8 sú!y/térf%-os polietilén-glikol 2000 adagolásával a további nemkívánt fehérjét eltávolítjuk, elválasztjuk és eldobjuk.
6,0 pH-értéknél, — 2 és — 3 °C közötti hőmérsékleten 10 súly/térf%-os metanol adagolásával a VIIIfaktor-koncentrátumot kicsapjuk, a szuszpenziót fagyasztjuk és felengedtetés után a krioalkohol-precipitátumot izotóniás pufferoldatban feloldjuk, sterilezzük, adagoljuk és liofilezzük.
3. példa
A 2. példa szerinti eljárást ismételjük, azzal a különbséggel, hogy 10 súly/térf%-os metanol helyett 5 12%-os polietilén-glikolt használunk a Vili-faktor kicsapására.
4. példa
A 2. példa szerinti eljárást ismételjük, azzal a különbséggel, hogy 10 súly/térf%-os metanol helyett 10 súly/térf%-os „PLURONIC”-oldatot használunk a Vili-faktor kicsapására.
5. példa
10,4 frissen fagyasztott plazmát 0 és +4 °C közötti 20 hőmérsékleten felengedtetünk. A krioprecipitátumot 250 ml trinátrium-citrát-pufferral feloldjuk. Az oldat pH-ját 6,3-ra állítjuk be, és 2,5 súly/térf%-os PLURONIC-oldatot adunk hozzá. A csapadékot eldobjuk. Az ionerősség növelése után a PLURONIC25 koncentrációt 7,5 súly/térf%-ra emeljük, és a csapadékot ismét eldobjuk.
A maradékot 6,0 pH-értéknél és — 2 °C-on 8 súly/térf%-os etanollal kezeljük, így a VlII-faktorkoncentrátum kicsapódik. A szuszpenziót megfa30 gyasztuk és +4 °C-on végzett felengedtetés után a krioalkohol-precipitátumot elválasztjuk.
A találmány szerinti eljárással előállított koncentrátum lényegesen javított specifikus aktivitását, illetve a kiindulási plazmához képest több mint 200-szo-
| ros AHF-dúsulását mutatja az I. táblázat az ismert és kereskedelemben kapható AHF-koncentrátumokhoz | |
| képest. | |
| I. táblázat | |
| Specifikusság Egység/mg | Tisztaság a plazmához viszonyítva |
| Plazma | 0,017 | 1 |
| Krioprecipitátum | 0,145 | 9-szeres |
| Nagy tisztaságú AHF | 1,667 | 98-szeres |
| A találmány szerinti eljá- | ||
| rással előállított koncent- | ||
| rátum | > 3,500 | 206-szeres |
A II. táblázat az egyes készítmények fibrinogéntartalmának összehasonlítását mutatja.
II. táblázat
6C I-Cohn-frakció
I-O-Blomback-frakció Nagytisztaságú AHF A találmány szerinti eljárással előállított koncent65 rátum
60% Fibrinogén 2 80% Fibrinogén 2 35% Fibrinogén
10% Fibrinogén
Claims (6)
1. eljárás legalább 2,5 AHF-egység specifikus aktivitású és 0,25 mg/mg-fehérjénél kevesebb fibrinogént tartalmazó VIII(AHF)-faktor-koncentratum előállítására, emberi vagy állati plazmából a plazma többlépéses frakcionálása, különösen krioprecipitációja és fehérjekicsapószerrel, előnyösen polie ilén-glikollal végzett tisztítása útján, azzal jellemezve, hogy a fenti többlépéses frakcionálással nyert, VIII(AHF)-faktor- 1 ra nézve dúsított frakcióhoz egy- vagy többértékű alkoholt, előnyösen metanolt, etanolt, poli etilén-glikolt vagy poliészterglikolt adunk, az elegyet r íélyfagyasztjuk, 0 és 4 °C közötti hőmérsékleten fe engedtetjük, majd az AHF-koncentrátumot tartalmaz 5 csapadékot 1 feloldjuk, és mélyfagyasztással és liofilezéssel eltartható készítménnyé alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az egy- vág)' többértékű alkoholt 5,9 és 6,3 közötti pFI-érléknél és 0 és 2 —3 °C közötti hőmérsékleten adagoljuk.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljár ás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a következő lépések kombinációját alkalmazzuk:
— emberi vagy állati plazmát krioprecipitálunk, 2 — a krioprecipitátumot vizes puffért Jdatban feloldjuk, pH-ját 6,15 és 6,25 közötti értékre állítjuk be, és az oldatot polietilén-glikollal egy első kicsapássaí tisztítjuk, — a csapadék eltávolítása után kapott maradékot 3 polietilén-glikollal végzett kicsapássaí legalább mégegyszer tisztítjuk, és — a csapadékok eltávolítása után kapjtt tisztított, VIII(AHF)-faktorra nézve dúsított frakc ót krioalkoholos kicsapással tisztítjuk, ahol a frakcióhoz egy- 3 vagy többértékű alkoholt, előnyösen metanolt, etanolt, polietilén-glikolt vagy poliészter-glikolt adunk, az elegyet mélyfagyasztjuk majd 0 és +4 °C közötti hőmérsékleten felengedtetjük, majd az AHF-kon5 centrátumot tartalmazó csapadékot feloldjuk és mélyfagyasztással és liofilezéssel eltartható készítménnyé alakítjuk.
4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a polietilén-glikollal 0 végzett első kicsapáskor 3 súly/térf%-os polietilénglikolt, és a második és további kicsapáskor 8 súly/térf%-os polietilén-glikolt használunk.
5. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítsi módja, azzal jellemezve, hogy a VIII(AHF)-faktor5 koncentrátum utolsó kicsapására mintegy 10 súly/térf%-os poliészter-glikolt használunk.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a következő lépéseket alkalmazzuk:
0 — emberi vagy állati plazmát krioprecipitálunk, — a krioprecipitátumot vizes pufferoldatban feloldjuk, pH-ját 6,25-re állítjuk be, és az oldatot poliészter-glikollal végzett első kicsapással tiszt'tjük, — a csapadék eltávolítása után kapott maradékot 5 poliészter-glikollal legalább mégegyszer tisztítjuk, és — a csapadékok eltávolítása után kapott tisztított, VIII(AHF)-faktorra nézve dúsított frakciót krioalkoholos kicsapással tisztítjuk, ahol a frakcióhoz egyvagy többértékű alkoholt, előnyösen metanolt, eta0 nőit, polietilén-glikolt vagy poliészter-glikolt adunk, az elegyet mélyfagyasztjuk, majd Oés +4 °C közötti hőmérsékleten felengedtetjük, majd az AHF-koncentrátumot tartalmazó csapadékot feloldjuk, és mélyfagyasztással és liofilezéssel eltartható készítik ménnyé alakítjuk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0433880A AT369263B (de) | 1980-08-27 | 1980-08-27 | Verfahren zur herstellung eines faktor viii(ahf) -hochkonzentrates |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU183542B true HU183542B (en) | 1984-05-28 |
Family
ID=3562706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU812315A HU183542B (en) | 1980-08-27 | 1981-08-11 | Process for producing concentrated viii-bracket-ahf-bracket closed-factor |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4404131A (hu) |
| JP (1) | JPS5928537B2 (hu) |
| AR (1) | AR228874A1 (hu) |
| AT (1) | AT369263B (hu) |
| BE (1) | BE890003A (hu) |
| CA (1) | CA1160567A (hu) |
| CH (1) | CH652030A5 (hu) |
| DE (1) | DE3129987C2 (hu) |
| DK (1) | DK156764C (hu) |
| ES (1) | ES8302017A1 (hu) |
| FI (1) | FI72653C (hu) |
| FR (1) | FR2489150A1 (hu) |
| GB (1) | GB2083047B (hu) |
| HU (1) | HU183542B (hu) |
| IT (1) | IT1138511B (hu) |
| LU (1) | LU83577A1 (hu) |
| NL (1) | NL8103563A (hu) |
| NO (1) | NO157884C (hu) |
| SE (1) | SE459639B (hu) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU555305B2 (en) * | 1982-09-29 | 1986-09-18 | Bayer Corporation | Antihemophilic factor concentrate |
| WO1984003628A1 (en) * | 1983-05-09 | 1984-09-27 | Nordisk Insulinlab | A concentrate of the antihemophilic factor viii and a process for producing it |
| AT379510B (de) * | 1983-05-20 | 1986-01-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf) -haeltigen praeparation |
| US4965199A (en) * | 1984-04-20 | 1990-10-23 | Genentech, Inc. | Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection |
| US5149787A (en) * | 1984-05-22 | 1992-09-22 | The Blood Center Research Foundation | Method for maintaining intact, non-degraded factor VIII/von-Willebrand factor during blood processing |
| US4710381A (en) * | 1984-05-22 | 1987-12-01 | The Blood Center Of Southeastern Wisconsin | Method for maintaining intact, non-degraded factor VIII/von-Willebrand factor during blood processing |
| US4543210A (en) * | 1984-10-04 | 1985-09-24 | Miles Laboratories, Inc. | Process for producing a high purity antihemophilic factor concentrate |
| US4743680A (en) * | 1985-02-01 | 1988-05-10 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| US4952675A (en) * | 1985-02-01 | 1990-08-28 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| US4847362A (en) * | 1985-02-01 | 1989-07-11 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| AU6487286A (en) * | 1985-11-08 | 1987-05-14 | Baxter Travenol Laboratories Inc. | Antihemophilic factor by cold precipitation |
| AU7254894A (en) * | 1993-07-23 | 1995-02-20 | Baxter International Inc. | Activated human factor viii and method of preparation |
| US5576291A (en) * | 1993-09-13 | 1996-11-19 | Baxter International Inc. | Activated factor VIII as a therapeutic agent and method of treating factor VIII deficiency |
| US5659017A (en) * | 1995-11-07 | 1997-08-19 | Alpha Therapeutic Corporation | Anion exchange process for the purification of Factor VIII |
| DK2193809T3 (en) | 1999-02-22 | 2015-05-26 | Univ Connecticut | The albumin-free Factor VIII formulation |
| US6893639B2 (en) * | 2001-10-19 | 2005-05-17 | Hemacare Corporation | Method for high yield purification of immune globulins from blood plasma and blood plasma intermediates |
| MX339060B (es) | 2008-11-07 | 2016-05-09 | Baxter Int | Formulaciones del factor viii. |
| US20220380439A1 (en) | 2020-11-09 | 2022-12-01 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Purification of fviii from plasma using silicon oxide adsorption |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3652530A (en) * | 1967-08-28 | 1972-03-28 | American Nat Red Cross | Antihemophilic factor prepared from blood plasma using polyethylene glycol |
| US3631018A (en) * | 1970-05-01 | 1971-12-28 | Baxter Laboratories Inc | Production of stable high-potency human ahf using polyethylene glycol and glycine to fractionate a cryoprecipitate of ahf concentrate |
| US3682881A (en) * | 1970-10-02 | 1972-08-08 | Baxter Laboratories Inc | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol |
| US3869436A (en) * | 1971-06-01 | 1975-03-04 | Statens Bakteriologiska Lab | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers |
| US4069216A (en) * | 1975-06-16 | 1978-01-17 | Edward Shanbrom, Inc. | Simplified methods for preparation of very high purity Factor VIII concentrate |
| US4188318A (en) * | 1975-06-16 | 1980-02-12 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity Factor VIII concentrate |
| CA1101332A (fr) * | 1976-01-30 | 1981-05-19 | Edward Shanbrom | Procedes simplifies pour la preparation de concentres de facteur viii de tres grande purete |
| DE2624373C2 (de) | 1976-05-31 | 1983-02-03 | Arnold Dr. 8782 Karlstadt Seufert | Verfahren zur Herstellung von steril filtriertem Kryopräzipilat mit einer Anreicherung des Faktors VIII |
| CA1054052A (en) | 1976-08-14 | 1979-05-08 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity factor viii concentrate |
| FR2460305A2 (fr) * | 1979-06-29 | 1981-01-23 | Merieux Inst | Procede de preparation d'un concentre de facteur viii |
-
1980
- 1980-08-27 AT AT0433880A patent/AT369263B/de not_active IP Right Cessation
-
1981
- 1981-07-22 SE SE8104482A patent/SE459639B/sv not_active IP Right Cessation
- 1981-07-28 NL NL8103563A patent/NL8103563A/nl not_active Application Discontinuation
- 1981-07-29 US US06/287,912 patent/US4404131A/en not_active Expired - Fee Related
- 1981-07-29 DE DE3129987A patent/DE3129987C2/de not_active Expired
- 1981-08-11 HU HU812315A patent/HU183542B/hu not_active IP Right Cessation
- 1981-08-12 GB GB8124600A patent/GB2083047B/en not_active Expired
- 1981-08-13 DK DK360281A patent/DK156764C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-08-18 BE BE0/205702A patent/BE890003A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-08-20 FI FI812567A patent/FI72653C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-08-20 ES ES504859A patent/ES8302017A1/es not_active Expired
- 1981-08-20 CA CA000384242A patent/CA1160567A/en not_active Expired
- 1981-08-24 LU LU83577A patent/LU83577A1/de unknown
- 1981-08-24 FR FR8116169A patent/FR2489150A1/fr active Granted
- 1981-08-24 AR AR286519A patent/AR228874A1/es active
- 1981-08-24 CH CH5443/81A patent/CH652030A5/de not_active IP Right Cessation
- 1981-08-26 JP JP56134808A patent/JPS5928537B2/ja not_active Expired
- 1981-08-26 NO NO812905A patent/NO157884C/no unknown
- 1981-08-27 IT IT23660/81A patent/IT1138511B/it active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IT1138511B (it) | 1986-09-17 |
| FR2489150B1 (hu) | 1984-06-29 |
| FR2489150A1 (fr) | 1982-03-05 |
| NO157884C (no) | 1988-06-15 |
| NL8103563A (nl) | 1982-03-16 |
| LU83577A1 (de) | 1981-12-01 |
| SE8104482L (sv) | 1982-02-28 |
| IT8123660A0 (it) | 1981-08-27 |
| FI72653B (fi) | 1987-03-31 |
| GB2083047A (en) | 1982-03-17 |
| FI72653C (fi) | 1987-07-10 |
| JPS5775928A (en) | 1982-05-12 |
| DK156764B (da) | 1989-10-02 |
| ATA433880A (de) | 1982-05-15 |
| AR228874A1 (es) | 1983-04-29 |
| BE890003A (fr) | 1981-12-16 |
| CA1160567A (en) | 1984-01-17 |
| SE459639B (sv) | 1989-07-24 |
| FI812567L (fi) | 1982-02-28 |
| NO812905L (no) | 1982-03-01 |
| ES504859A0 (es) | 1983-01-01 |
| JPS5928537B2 (ja) | 1984-07-13 |
| AT369263B (de) | 1982-12-27 |
| DE3129987A1 (de) | 1982-04-22 |
| ES8302017A1 (es) | 1983-01-01 |
| DK156764C (da) | 1990-02-19 |
| DK360281A (da) | 1982-02-28 |
| NO157884B (no) | 1988-02-29 |
| GB2083047B (en) | 1984-03-28 |
| CH652030A5 (de) | 1985-10-31 |
| DE3129987C2 (de) | 1984-11-29 |
| US4404131A (en) | 1983-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU183542B (en) | Process for producing concentrated viii-bracket-ahf-bracket closed-factor | |
| US4203891A (en) | Method of collecting anti-hemophilic factor VIII from blood and blood plasma using heparin or sodium heparin | |
| US4188318A (en) | Simplified method for preparation of high yield, high purity Factor VIII concentrate | |
| USRE29698E (en) | Stabilization of AHF using heparin | |
| US3682881A (en) | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol | |
| EP0035202B1 (en) | Method of blood plasma fractionation | |
| DE2734821A1 (de) | Verfahren zur herstellung einer blutgerinnungsfoerdernden praeparation aus menschlichem blutplasma | |
| US4104266A (en) | Method for preparation of antihemophilic factor | |
| JPH0676337B2 (ja) | 高純度抗血友病性因子濃縮物の製造法 | |
| US4727059A (en) | Fibronectin solution suitable for use in humans and process for its preparation | |
| US4670544A (en) | Process for the manufacture of the cold insoluble globulin and pharmaceutical preparation containing it | |
| US4650858A (en) | Concentrate of the antihemophilic factor VIII and a process for producing it | |
| CA1182748A (en) | Method for synthesizing procoagulant factor viii activity | |
| JPS61189228A (ja) | 血液凝固第８因子製剤の製法 | |
| US3449316A (en) | Process for the purification of gamma globulin employing bentonite | |
| US4197238A (en) | Method of preparation of human albumin using polyethylene glycol | |
| JPS6242887B2 (hu) | ||
| US4056614A (en) | Immunity depressant medicine | |
| US4873222A (en) | Placenta-derived anticoagulating substance | |
| CA1130725A (en) | Method for producing high potency factor viii | |
| EP0449897B1 (en) | A pure factor i protein and a process for producing said protein | |
| JP2931319B2 (ja) | 血液凝固第▲ｖｉｉｉ▼因子の製造法 | |
| GB2079292A (en) | Blood Clotting Factor Production | |
| JPH0345080B2 (hu) | ||
| JPS59128335A (ja) | α↓１−アンチトリプシンの分離取得方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |