FI72653B - Foerfarande foer framstaellning av ett faktor viii(ahf)-koncentrat. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av ett faktor viii(ahf)-koncentrat. Download PDFInfo
- Publication number
- FI72653B FI72653B FI812567A FI812567A FI72653B FI 72653 B FI72653 B FI 72653B FI 812567 A FI812567 A FI 812567A FI 812567 A FI812567 A FI 812567A FI 72653 B FI72653 B FI 72653B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- ahf
- factor viii
- concentrate
- precipitate
- polyethylene glycol
- Prior art date
Links
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 title claims description 31
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title claims description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title 1
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 30
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 30
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 18
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 12
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 11
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 10
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 10
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 8
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 8
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims description 8
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 6
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 4
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 108010035369 Cohn fraction I Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 4
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 4
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- -1 florigel Substances 0.000 description 3
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQBCLHCLJAHVPV-UHFFFAOYSA-N CCO.NCC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O Chemical compound CCO.NCC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O JQBCLHCLJAHVPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000252095 Congridae Species 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004567 concrete Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- ZMRUPTIKESYGQW-UHFFFAOYSA-N propranolol hydrochloride Chemical compound [H+].[Cl-].C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 ZMRUPTIKESYGQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
- Y10S530/831—Cohn fractions
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
72653
Menetelmä tekijä VI11(AHF)-1iivist een valmistamiseksi -Förfarande för framställning av ett faktor VIII(AHF)-koncentrat
Keksintö koskee menetelmää sellaisen tekijä 5 VIII(AHF)-tiivisteen valmistamiseksi, jonka spesifinen aktiivisuus on vähintään 2,5 yksikköä AHF ja fibrinogeeni-pitoisuus vähemmän kuin 0,25 mg/mg proteiinia ja joka saadaan ihmis- tai eläinplasmasta monivaiheisella fraktioinnilla, erityisesti kryosaostuksella ja puh-10 distaraalla proteiinisaosteella, kuten polyetyleeni- glykolilla.
On jo tunnettuja tekijä VIII(AHF)-konsentraatteja, jotka valmistetaan ihmis- tai eläinplasmasta ja joilla on luonnon plasmaan verrattuna korotettu tekijä VIII-15 aktiivisuus. Tunnettuja tekijä VIII-konsentraattien valmistusmenetelmiä voidaan käyttää fraktiointitoimen-piteinä plasman käsittelyssä etanolilla, eetterillä, polyetyleeniglykolill a ja/tai glysiinillä. Tunnettu on myös plasman kryosaostus Poolin mukaan (1965. "The 20 New England Journal of Medicine" 273, 1^3) tai plasman kryoetanolisaostus Johnsonin mukaan (Congr.
Int. Soc. Blood Transf., Sydney. Australia. Abstracts of Paper, sivu 1109 (1966)).
On olemassa myös vielä muita tekijä VIII-kon-25 sentraattien valmistusmenetelmiä, nimittäin plasman käsittely absorptioaineilla, kuten florigel, betonit, ioninvaihtajät ja läpäisykromatografiset keinot.
Mitä tulee tekniikan tasoon plasman käsittelyssä etanolilla, tämän kuvasi ensimmäisenä Cohn (j. Amer., 30 Chem. Soc. _68, J+ 59 (19^6)). Käsiteltäessä plasmaa etanolilla saadaan nk. Cohn-fraktio I, jolla on kuitenkin vain suhteellisen vähäinen tekijä VIII-aktiivi-suus. Cohn-menetelmää paransi Blombäck (Arkiv för Kemi, 12 387 (1958)), jolloin Cohn-fraktio I puhdistettiin 35 edelleen uuttamalla etanoii-glysiini-s itraattipuskurilla. Täten muodostui nk. fraktio I-O. Tämä voidaan, kuten 7265 3
Simonetti et ai. (Hemostase 1, 57 ( 1961 ) ) kuvaavat, puhdistaa edelleen parkkihapolla; myös näiden puhdistettujen konsentraattien tekijä VIII-aktiivisuus on suhteellisen vähäinen. Näillä konsentraateilla on myös 5 se haittapuoli, että niiden vierasproteiinipitoisuus , so. tekijä VIII-tehoton proteiinipitoisuus, on suuri.
Täten Cohn-fraktiossa I on yli 60 % proteiineista fihrinogeenia ja Blombäck-fraktiossa 1-0 jopa yli 80 % fibrinogeenia.
10 Mitä tulee tunnettuun fraktiointiin kryosaos- tuksella, tämä suoritettiin siten, että ihmis- tai eläinlähtöplasma syväjäädytettiin ja sulatettiin uudelleen. Kryosaostuma liuotettiin puskuriliuokseen ja kyseessä olevassa tapauksessa puhdistettiin edelleen 15 proteiinisaosteella, kuten polyetyleeniglykolilla tai glysiinillä. Kryosaostuksella ei ole onnistuttu nostamaan tekijä VIII-aktiivisuutta oleellisesti. Tekijä VIII-aktiivisuus nousee kryosaostuksella vain noin kymmenkertaiseksi verrattuna lähtöplasmaan, eivätkä myöskään 20 kryosaostuksen yhteydessä käytetyt lisätoimenpiteet ole tähän mennessä pystyneet nostamaan saatujen tuotteiden aktiivisuutta toivotulla tavalla.
Monivaiheisia fraktiointimenetelmiä ensimmäisen kryosaostusvaiheen yhteydessä on kuvattu US-patenttijul-25 kaisussa 3 652 530, 3 631 018, 3 682 881 ja AT-patentti-julkaisussa 3^9 639.
Tällaisia tuotteita nimitetään "erittäin hyvin puhdistetuksi AHF:ksi" tai "High Purity AHF:ksi". Niiden tekijä VIII-aktiivisuus kuitenkin on myös ainoastaan 30 90...100-kertainen verrattuna luonnon plasmaan , ja tekijä VIII-tehoton proteiinipitoisuus (fibrinogeeni ) on yhä vielä 35 % kokonaisproteiinista.
Keksintö pyrkii välttämään kuvattuja haittoja ja vaikeuksia ja sen tehtävänä on luoda tekijä 35 VIII-tiiviste, jossa inertit, ei-tekijä-VIII-vaikuttavat proteiinit on eliminoitu niin pitkälle kuin mahdollista, 3 72653 fibrinogeenipitoisuus on pidetty niin alhaisena kuin mahdollista, ja tekijä VIII-aktiivisuus, kohdistettuna konsentraatissa olevaan proteiiniin, on korkeampi kuin tunnetuilla terapeuttisesti käytetyillä valmisteilla.
5 Erityisesti keksinnön tehtävänä on luoda valmistusmenetelmä tekijä VIII(AHF)-tiivisteelle, jonka spesifinen aktiivisuus on vähintään 2,5 yksikköä AFH ja fibrinogeeni-pitoisuus vähemmän kuin 0,25 mg/mg proteiinia, menetelmä, joka on käyttökelpoinen tuotannon kannalta tai teknisessä 10 mittakaavassa ja joka on hyvin taloudellinen.
Tämä tehtävä ratkaistaan alussa kuvatunlaisella monivaiheisella fraktiointimenetelmällä , jossa lähinnä ensimmäisenä vaiheena käytetään kryosaostusta, siten että fraktiolle, joka on puhdistettu näillä fraktiointi-15 toimenpiteillä ja rikastettu tekijä VIII(AHF):llä, suoritetaan kryoalkoholisaostus, ja saatu saostuma muokataan pysyvään muotoon.
Keksinnön suositeltavan suoritustavan mukaan puhdistettuun ja tekijä VIII (AHF):llä rikastettuun 20 fraktioon lisätään pH:ssa 5,9...6,3 ja lämpötilassa 0,..-3°C yksi- tai useampiarvoista alkoholia, kuten metyylialkoholia, etyylialkoholia, polyetyleeniglykolia tai polyesteriglykolia (PLURONIC), seos syväjäähdytetään ja sitten sulatetaan lämpötilassa 0...^°C, josta 25 AHF-tiivisteen sisältävä saostuma liuotetaan ja saatetaan pysyvään muotoon syväjäähdyttämällä ja lyofilisoimalla.
Keksinnön edullinen suoritustapa käsittää seuraavien toimenpiteiden yhdistelmän: että ihmis- tai eläinplasmalle suoritetaan 30 ensimmäinen kryosaostus; että kryosaostuma liuotetaan puskurin vesi-liuokseen, säädetään pH-arvoon 6,15...6,25 ja liuokselle suoritetaan ensimmäinen puhdistussaostus polyetyleeni-glykolilla; 35 - että saostuman poistamisen jälkeen saadulle ylijäämälle suoritetaan vähintään yksi 1isäpuhdistus- 72653 k saostus polyetyleeniglykolilla ja saostumien poistamisen jälkeen lopulta saadulle puhdistetulle, tekijä VIII (AHF):llä rikastetulle fraktiolle suoritetaan kryoalkoholisaostus, jossa tähän 5 fraktioon lisätään yksi- tai useampiarvoista alkoholia, kuten metyylialkoholia, etyylialkoholia, polyetyleeni-glykolia tai polyesteriglykolia (PLUROKIC), seos syvä-jäädytetään ja sitten sulatetaan lämpötilassa 0...1+°C, josta AHF-t i i vi st ett ä sisältävä saostuma 10 liuotetaan ja saatetaan pysyvään muotoon syväjäädyttämällä ja lyofilisoimalla.
Täten suoritetaan edullisesti ensimmäinen polyetyleeniglykolisaostus 3 paino-% polyetyleeniglykolilla ja toinen tai seuraavat polyetyleeniglykolisaos-15 tukset 8 paino-$ polyetyleeniglykolilla,
Tarkoituksenmukaisesti käytetään tekijä VIII-konsentraatin saostukseen 10 paino-$ PLURONIC-liuosta.
Polyetyleeniglykolin sijasta proteiinisaosteena voidaan käyttää myös "PLURONIC"ia, jolloin kombinaatiolla 20 on seuraavat tunnusmerkit: että ihmis- tai eläinplasmalle suoritetaan ensimmäinen kryosaostus; että kryosaostuma liuotetaan puskurin vesiliuokseen, säädetään pH-arvoon 6,25 ja liuokselle 25 suoritetaan ensimmäinen puhdistussaostus PLURONIC:11a; että saostuman poisheittämisen jälkeen saadulle ylijäämälle suoritetaan vähintään yksi lisäpuhdistussaostus PLURONICilla ja saostumien poistamisen jälkeen lopulta saa-30 dulle, tekijä VIII (AHF):llä rikastetulle fraktiolle suoritetaan kryoalkoholisaostus, jossa tähän fraktioon lisätään yksi- tai useampiarvoista alkoholia, kuten metyylialkoholia, etyylialkoholia, polyetyleeniglykolia tai polyesteriglykolia (PLURONIC), seos syväjäädytetään 35 ja sitten sulatetaan lämpötilassa O...U°C, josta AHF-tiivistettä sisältävä saostuma liuotetaan ja 5 72653 saatetaan pysyvään muotoon syväjäädyttämällä ja lyofili-soimalla.
Keksinnön mukaista menetelmää selostetaan seuraa-villa esimerkeillä lähemmin: 5 Es imerkki 1: k61 1 tuoreena jäädytettyä plasmaa sulatetaan 0...+U°C:ssa. Muodostunut kryosaostuma erotetaan sentrifugoimalla ja liuotetaan 9,6 1:aan trinatriumsit-raattia 3T°C:ssa.
10 Liuoksen pH säädetään 6,2:een ja lisätään 3 paino-$ polyetyleeniglykoli 2000:ta. Tällöin muodostuu saostuma, joka erotetaan sentrifugoimalla ja heitetään pois.
Ylijäämän, joka sisältää tekijä VIII (AHF):a ioni-15 vahvuutta korotetaan lisäämällä trinatriumsitraattia. Jäljellä olevat ei-toivotut proteiinit saostetaan korottamalla polyetyleeni 2000-konsentraatista 8 paino-$:iin ja sentrifugoinnin jälkeen heitetään pois.
Lisäämällä 8 paino-$ etanolia -2°C:ssa ja 20 pH:ssa 6,1 saostetaan tekijä VIII-konsentraatti , suspensio jäädytetään, ja +i+0C:ssä sulattamisen jälkeen tekijä Vlllraa sisältävä kryoalkoholisaostuma liuotetaan fysiologiseen puskuriin, steriilisuodatetaan , dekantoi-daan ja sublimaatiokuivataan.
25 Esimerkki 2: 9Ö00 ml tuoreena jäädytettyä plasmaa sulatetaan 0...°C:s s a. Sentrifugoitu kryosaostuma liuotetaan 2l40ml:aan tr inatr iums itraatt ia 37°C:ssa.
Liuoksen pH säädetään arvoon 6,2 ja lisätään 30 3 paino-$ polyetyleeniglykoli 2000:ta. Muodostunut saostuma erotetaan ja heitetään pois.
Ionivahvuutta korotetaan lisäämällä trinatriumsitraattia, lisäämällä edelleen polyetyleeniglykoli 2000:ta 8 paino-%:iin asti saostuvat 35 ei-toivotut proteiinit; nämä erotetaan ja heitetään pois.
Tekijä VIII-konsentraatti saostetaan 10 paino-% 6 72653 metanolilla pH:ssa 6,0 ja -2..,-3°C: ssa; tämä suspensio jäädytetään ja sulattamisen jälkeen kryoalkoholisaostuma liuotetaan isotoniseen puskuriin, steriilisuodatetaan , dekantoidaan ja sublimaatiokuivataan.
5 Esimerkki 3:
Esimerkin 2 työmenetelmä toistetaan, kuitenkin 10 paino-# metanolin sijasta käytetään 12 #:sta polyety- · leeniglykolia tekijä VIII-konsentraatin saostamiseen.
Esimerkki ^: 10 Esimerkin 2 työmenetelmä toistetaan, kuitenkin 10 paino-# metanolin sijasta käytetään 10 paino-# PLURONICia tekijä VIII-konsentraatin saostamiseen.
Esimerkki 5: 10,k 1 tuoreena jäädytettyä plasmaa sulatetaan 15 0 . . . + L°C : s sa . Kryosaostuma liuotetaan 250 ml : aan trinatriumsitraattipuskuria.
Liuoksen pH säädetään arvoon 6,3 ja lisätään 2,5 paino-# PLURONICia. Saostuma heitetään pois. Ionivoimakkuuden korottamisen jälkeen PLURONIC-konsentraa-20 tio nostetaan 7,5 paino-#:iin ja saostuma heitetään j älleen pois.
Ylijäämä käsitellään 8 paino-# etanolilla pH:ssa 6,0 ja lämpötilassa -2°C, jolloin tekijä VIII-konsentraatti saostuu. Suspensio jäädytetään ja +^°C:ssä 25 sulattamisen jälkeen kryoalkoholisaostuma erotetaan.
Taulukko 1 osoittaa keksinnön mukaisella menetelmällä oleellisesti korotetun, saadun tiivisteen spesifisen aktiivisuuden tai AHF:n rikastamisen enemmän kuin 200-kertaiseksi lähtöplasmaan nähden 30 verrattuna tunnettuihin, kaupan oleviin AHF-konsentraat- teihin.
72653 τ
Taulukko I
spesifisyys puhtaus ver-yksikköä/rag rattuna plasmaan 5 Plasma 0,017 1
Kryosaostuma 0,1^5 9-kertainen
High Purity AHF 1,66? 98-
Tiivdste, valmistettu keksinnön mukaan >3,500 206- " 10 Keksinnön mukaisten tiivisteiden vähäisempi fibrinogeeni-pitoisuus verrattuna tunnettuihin konsentraatteihin näkyy taulukosta II.
Taulukko II
Cohn-fraktio I · >60 % fibrinogeeniä 15 Blombäck-fraktio 1-0 >80 % " puhdistettu tai High
Purity AHF >35 % " tiiviste, valmistettu keksinnön mukaan 10 % "
Claims (2)
1. Menetelmä tekijä VIII(AKF)-tiivisteen valmistamiseksi, jonka spesifinen aktiivisuus on vähintään 2,5 yksikköä AHF ja fibrinogeenip itoisuus 5 vähemmän kuin 0,25 mg/mg proteiinia, joka saadaan ihmis- tai eläinplasmasta monivaiheisella fraktioin-nilla, erityisesti kryosaostuksella ja puhdistamalla proteiinisaosteella, kuten polyetyleenig lykolilla, tunnettu siitä, että fraktiolle, joka on puhdis-10 tettu näillä fraktiointitoimenpiteillä ja rikastettu tekijä VIII (AHF):llä, suoritetaan alkoholisaostus ja tämän jälkeen koko suspension syväjäädytys, ja sulamisen jälkeen saatu saostuma muokataan pysyvään muotoon.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että puhdistettuun ja tekijä VIII (AHF):llä rikastettuun fraktioon lisätään pH:ssa 5,9...6,3 ja lämpötilassa 0,..-3°C yksi- tai useampiarvoista alkoholia, kuten metyylialkoholia, etyylialkoholia, polyetyleeniglykolia tai polyesteri-20 glykolia (PLURONIC),seos syväjäädytetään ja sitten sulatetaan lämpötilassa O...U°C, josta AHF-tiivisteen sisältävä saostuma liuotetaan ja saatetaan pysyvään muotoon syväjäädyttämällä ja lyofilisoimalla.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT433880 | 1980-08-27 | ||
| AT0433880A AT369263B (de) | 1980-08-27 | 1980-08-27 | Verfahren zur herstellung eines faktor viii(ahf) -hochkonzentrates |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI812567L FI812567L (fi) | 1982-02-28 |
| FI72653B true FI72653B (fi) | 1987-03-31 |
| FI72653C FI72653C (fi) | 1987-07-10 |
Family
ID=3562706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI812567A FI72653C (fi) | 1980-08-27 | 1981-08-20 | Foerfarande foer framstaellning av ett faktor viii(ahf)-koncentrat. |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4404131A (fi) |
| JP (1) | JPS5928537B2 (fi) |
| AR (1) | AR228874A1 (fi) |
| AT (1) | AT369263B (fi) |
| BE (1) | BE890003A (fi) |
| CA (1) | CA1160567A (fi) |
| CH (1) | CH652030A5 (fi) |
| DE (1) | DE3129987C2 (fi) |
| DK (1) | DK156764C (fi) |
| ES (1) | ES8302017A1 (fi) |
| FI (1) | FI72653C (fi) |
| FR (1) | FR2489150A1 (fi) |
| GB (1) | GB2083047B (fi) |
| HU (1) | HU183542B (fi) |
| IT (1) | IT1138511B (fi) |
| LU (1) | LU83577A1 (fi) |
| NL (1) | NL8103563A (fi) |
| NO (1) | NO157884C (fi) |
| SE (1) | SE459639B (fi) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU555305B2 (en) * | 1982-09-29 | 1986-09-18 | Bayer Corporation | Antihemophilic factor concentrate |
| DE3481109D1 (de) * | 1983-05-09 | 1990-03-01 | Novo Nordisk As | Antihaemophilie-faktor-viii-konzentrat und dessen herstellungsverfahren. |
| AT379510B (de) * | 1983-05-20 | 1986-01-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf) -haeltigen praeparation |
| US4965199A (en) * | 1984-04-20 | 1990-10-23 | Genentech, Inc. | Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection |
| US4710381A (en) * | 1984-05-22 | 1987-12-01 | The Blood Center Of Southeastern Wisconsin | Method for maintaining intact, non-degraded factor VIII/von-Willebrand factor during blood processing |
| US5149787A (en) * | 1984-05-22 | 1992-09-22 | The Blood Center Research Foundation | Method for maintaining intact, non-degraded factor VIII/von-Willebrand factor during blood processing |
| US4543210A (en) * | 1984-10-04 | 1985-09-24 | Miles Laboratories, Inc. | Process for producing a high purity antihemophilic factor concentrate |
| US4847362A (en) * | 1985-02-01 | 1989-07-11 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| US4952675A (en) * | 1985-02-01 | 1990-08-28 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| US4743680A (en) * | 1985-02-01 | 1988-05-10 | New York University | Method for purifying antihemophilic factor |
| AU6487286A (en) * | 1985-11-08 | 1987-05-14 | Baxter Travenol Laboratories Inc. | Antihemophilic factor by cold precipitation |
| WO1995003332A1 (en) * | 1993-07-23 | 1995-02-02 | Baxter International Inc. | Activated human factor viii and method of preparation |
| US5576291A (en) * | 1993-09-13 | 1996-11-19 | Baxter International Inc. | Activated factor VIII as a therapeutic agent and method of treating factor VIII deficiency |
| US5659017A (en) * | 1995-11-07 | 1997-08-19 | Alpha Therapeutic Corporation | Anion exchange process for the purification of Factor VIII |
| CN100553678C (zh) | 1999-02-22 | 2009-10-28 | 巴克斯特国际有限公司 | 新的无白蛋白的因子ⅷ制剂 |
| US6893639B2 (en) * | 2001-10-19 | 2005-05-17 | Hemacare Corporation | Method for high yield purification of immune globulins from blood plasma and blood plasma intermediates |
| JP5779780B2 (ja) | 2008-11-07 | 2015-09-16 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ | 第ｖｉｉｉ因子製剤 |
| EP4240757A2 (en) | 2020-11-09 | 2023-09-13 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Purification of fviii from plasma using silicon oxide adsorption |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3652530A (en) * | 1967-08-28 | 1972-03-28 | American Nat Red Cross | Antihemophilic factor prepared from blood plasma using polyethylene glycol |
| US3631018A (en) * | 1970-05-01 | 1971-12-28 | Baxter Laboratories Inc | Production of stable high-potency human ahf using polyethylene glycol and glycine to fractionate a cryoprecipitate of ahf concentrate |
| US3682881A (en) * | 1970-10-02 | 1972-08-08 | Baxter Laboratories Inc | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol |
| US3869436A (en) * | 1971-06-01 | 1975-03-04 | Statens Bakteriologiska Lab | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers |
| US4188318A (en) * | 1975-06-16 | 1980-02-12 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity Factor VIII concentrate |
| US4069216A (en) * | 1975-06-16 | 1978-01-17 | Edward Shanbrom, Inc. | Simplified methods for preparation of very high purity Factor VIII concentrate |
| CA1101332A (fr) * | 1976-01-30 | 1981-05-19 | Edward Shanbrom | Procedes simplifies pour la preparation de concentres de facteur viii de tres grande purete |
| DE2624373C2 (de) | 1976-05-31 | 1983-02-03 | Arnold Dr. 8782 Karlstadt Seufert | Verfahren zur Herstellung von steril filtriertem Kryopräzipilat mit einer Anreicherung des Faktors VIII |
| CA1054052A (en) | 1976-08-14 | 1979-05-08 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity factor viii concentrate |
| FR2460305A2 (fr) * | 1979-06-29 | 1981-01-23 | Merieux Inst | Procede de preparation d'un concentre de facteur viii |
-
1980
- 1980-08-27 AT AT0433880A patent/AT369263B/de not_active IP Right Cessation
-
1981
- 1981-07-22 SE SE8104482A patent/SE459639B/sv not_active IP Right Cessation
- 1981-07-28 NL NL8103563A patent/NL8103563A/nl not_active Application Discontinuation
- 1981-07-29 US US06/287,912 patent/US4404131A/en not_active Expired - Fee Related
- 1981-07-29 DE DE3129987A patent/DE3129987C2/de not_active Expired
- 1981-08-11 HU HU812315A patent/HU183542B/hu not_active IP Right Cessation
- 1981-08-12 GB GB8124600A patent/GB2083047B/en not_active Expired
- 1981-08-13 DK DK360281A patent/DK156764C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-08-18 BE BE0/205702A patent/BE890003A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-08-20 ES ES504859A patent/ES8302017A1/es not_active Expired
- 1981-08-20 CA CA000384242A patent/CA1160567A/en not_active Expired
- 1981-08-20 FI FI812567A patent/FI72653C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-08-24 AR AR286519A patent/AR228874A1/es active
- 1981-08-24 CH CH5443/81A patent/CH652030A5/de not_active IP Right Cessation
- 1981-08-24 FR FR8116169A patent/FR2489150A1/fr active Granted
- 1981-08-24 LU LU83577A patent/LU83577A1/de unknown
- 1981-08-26 NO NO812905A patent/NO157884C/no unknown
- 1981-08-26 JP JP56134808A patent/JPS5928537B2/ja not_active Expired
- 1981-08-27 IT IT23660/81A patent/IT1138511B/it active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3129987C2 (de) | 1984-11-29 |
| GB2083047B (en) | 1984-03-28 |
| AR228874A1 (es) | 1983-04-29 |
| NO157884B (no) | 1988-02-29 |
| NO812905L (no) | 1982-03-01 |
| FI72653C (fi) | 1987-07-10 |
| FR2489150A1 (fr) | 1982-03-05 |
| CH652030A5 (de) | 1985-10-31 |
| DK156764C (da) | 1990-02-19 |
| DK360281A (da) | 1982-02-28 |
| NO157884C (no) | 1988-06-15 |
| JPS5775928A (en) | 1982-05-12 |
| IT1138511B (it) | 1986-09-17 |
| US4404131A (en) | 1983-09-13 |
| FR2489150B1 (fi) | 1984-06-29 |
| ES504859A0 (es) | 1983-01-01 |
| ATA433880A (de) | 1982-05-15 |
| NL8103563A (nl) | 1982-03-16 |
| LU83577A1 (de) | 1981-12-01 |
| IT8123660A0 (it) | 1981-08-27 |
| SE8104482L (sv) | 1982-02-28 |
| SE459639B (sv) | 1989-07-24 |
| JPS5928537B2 (ja) | 1984-07-13 |
| AT369263B (de) | 1982-12-27 |
| GB2083047A (en) | 1982-03-17 |
| ES8302017A1 (es) | 1983-01-01 |
| DE3129987A1 (de) | 1982-04-22 |
| FI812567L (fi) | 1982-02-28 |
| BE890003A (fr) | 1981-12-16 |
| HU183542B (en) | 1984-05-28 |
| CA1160567A (en) | 1984-01-17 |
| DK156764B (da) | 1989-10-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI72653B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett faktor viii(ahf)-koncentrat. | |
| FI60022B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av rent intravenoesdugligt gammaglobulin | |
| US4203891A (en) | Method of collecting anti-hemophilic factor VIII from blood and blood plasma using heparin or sodium heparin | |
| IE912444A1 (en) | Growth hormone crystals and a process for production of these GH-crystals | |
| CA1323139C (en) | Method of producing substantially pure albumin | |
| US4670544A (en) | Process for the manufacture of the cold insoluble globulin and pharmaceutical preparation containing it | |
| EP0127603B1 (de) | Verfahren zur Herstellung einer Faktor VIII(AHF)-hältigen Präparation | |
| AT391808B (de) | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf)-haeltigen fraktion | |
| EP0032655A1 (en) | A process in purification and concentration of the factor VIII-complex | |
| CA1293941C (en) | Method for preparing antihemophilic factor (ahf) by cold precipitation and for improving solubility of recovered ahf product | |
| US4197238A (en) | Method of preparation of human albumin using polyethylene glycol | |
| FI84136C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av gamma-globulin vilket laempar sig foer intravenoest administration. | |
| CA2161682A1 (en) | Liquid globulin composition for intravenous injection, process for producing the same, and method of inhibiting globulin dimer increase in said composition | |
| ATE44750T1 (de) | Verfahren zur herstellung eines antihaemophiliefaktor-konzentrats. | |
| JPS6242887B2 (fi) | ||
| DE2404265C3 (de) | Verfahren zum Abreichen von Immunglobulinen | |
| SU1127525A3 (ru) | Способ выделени альбумина | |
| CA1038292A (en) | Process for isolating albumin from blood | |
| JPS62195331A (ja) | 血液凝固第８因子製剤の製法 | |
| JPS5625114A (en) | Preparation of human gamma globulin | |
| AT369265B (de) | Verfahren zur herstellung eines antiserums gegen ein leucinreiches 3,1s-alpha2-glykoprotein | |
| AGREN | The Purification of Aminopolypeptidase from the Hog's pyloric Mucosa. III. | |
| IE42460B1 (en) | Process for isolating albumin from blood | |
| JPS5843372B2 (ja) | ＩｇＡの精製法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: "IMMUNO" AKTIENGESELLSCHAFT FUER |