MX2014008943A - Composiciones y metodos para el tratamiento de superficies con lipasas. - Google Patents

Abstract

Se describe métodos y composiciones para tratar textiles y superficies duras con composiciones que tienen lipasas específicas. Las composiciones tienen una estabilidad incrementada a la degradación oxidativa, particularmente, debido a catalizadores de blanqueo.

Description

COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA EL TRATAMIENTO DE SUPERFICIES CON LIPASAS REFERENCIA A UNA LISTA DE SECUENCIAS La presente solicitud contiene una lista de secuencias legible por computadora, que se incorpora como referencia.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con composiciones que comprenden enzimas lipasa y agentes blanqueadores, así como métodos para producir y usar tales composiciones que son, preferentemente, productos para el cuidado de telas y del hogar.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los fabricantes de detergentes aún tratan de proporcionar composiciones de limpieza, particularmente, composiciones para limpieza de telas y vajillas que proporcionen los sistemas de limpieza más fuertes. En el caso de la limpieza con enzimas lipasa, pueden ser particularmente vulnerables a la oxidación, especialmente cuando tales enzimas entran en contacto con blanqueador durante el almacenamiento o durante una etapa de lavado o tratamiento, ya sea que ambos se incorporen en la etapa de lavado o de tratamiento o que un componente o el otro se traslade de una etapa previa al tratamiento, particularmente, por ejemplo, de una etapa de blanqueamiento previa al tratamiento. Esto produce pérdida de la actividad o eficacia de la composición en general y, particularmente, pérdida de la actividad enzimática. Ciertos componentes blanqueadores son particularmente problemáticos, tales como los perácidos preformados y catalizadores o reforzadores de blanqueo. La patente núm. WO2007/001262 se relaciona con composiciones de limpieza que comprenden catalizadores orgánicos con una mejor compatibilidad de enzimas, específicamente, para una mejor compatibilidad de enzimas amilasa. Todavía existe una necesidad de una composición que alivie este problema.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCIÓN De conformidad con la presente invención, se proporciona un método para limpiar y/o tratar un textil, superficie dura y/u otra superficie para el cuidado de telas y/o del hogar; el método comprende las siguientes etapas: a) poner un textil, superficie dura y/u otra superficie para el cuidado de telas y/o del hogar en contacto con una solución acuosa que comprende una lipasa; y (¡i) un Componente blanqueador y (iii) complemento detergente opcional; b) enjuagar y secar el textil o superficie dura; en donde la lipasa tiene una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa en comparación con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 y actividad de lipasa, preferentemente, la variante de lipasa comprende una variante de lipasa que comprende una sustitución en una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1.

La presente invención proporciona, además, un método para producir una composición detergente que comprende una variante de lipasa que muestra una estabilidad mejorada para la degradación oxidativa en comparación con la variante de lipasa de la sec. con núm. de ident.:1 , y la actividad de lipasa; el método comprende la etapa de mezclar la variante de lipasa con un complemento detergente. Preferentemente, la variante de lipasa es una variante de la sec. con núm. de ident.:1 que comprende una sustitución una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1.

De conformidad con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona una composición que comprende una variante de lipasa que tiene actividad de lipasa y que muestra una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa y un complemento detergente. La presente invención proporciona, además, a composición de limpieza y/o tratamiento que comprende una variante de lipasa que tiene actividad de lipasa y que comprende una sustitución una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 y un complemento detergente. Se puede preferir que las composiciones comprendan, además, un componente blanqueador.

De conformidad con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para producir una composición detergente que comprende una lipasa y que muestra una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa; el método comprende la etapa de mezclar una variante de lipasa que comprende una sustitución en una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa, con un complemento detergente.

Una variante de lipasa que muestra una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa se puede determinar al realizar la prueba en el Ejemplo 1. Las variantes de lipasa que muestran una estabilidad mejorada para la degradación oxidativa tienen un RR de lavado de por lo menos 1.01 o por lo menos 1.2 o incluso por lo menos 1.5. La lipasa convencional para comparación es la de la sec. con núm. de ident.:1.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones A menos que se indique de cualquier otra manera, todos los niveles del componente o composición están como referencia a la porción activa del componente o composición, y excluyen las impurezas, por ejemplo, solventes residuales o subproductos, los cuales pueden estar presentes en fuentes comercialmente disponibles de los componentes o composiciones.

Todos los porcentajes y relaciones (1) se calculan en peso a menos que se indique de otra manera y (2) se calculan en base a la composición total a menos que se indique de otra manera.

Como se usan en la presente descripción, los artículos "un" y "una(o)", cuando se usan en una reivindicación, debe interpretarse que significan uno o más de lo que se reivindica o describe.

Como se usan en la presente descripción, los términos "incluyen", "incluye" y "que incluye" no son limitantes.

Como se usa en la presente descripción, el término "sólido" incluye las formas del producto en tabletas, granular, en polvo y en barra.

Como se usa en la presente descripción, el término "fluido" incluye las formas de producto líquido, en gel, pasta y gas.

Como se usa en la presente descripción, el término "lipasa" o "enzima lipolítica" o "esterasa de lípidos" se refiere a una enzima en la clase EC 3.1 ,1 según la nomenclatura de enzimas. Puede tener actividad de lipasa (triacilglicerol lipasa, EC 3.1.1.3), actividad de cutinasa (EC 3.1.1.74), actividad de esterol esterasa (EC 3.1.1.13) y/o actividad de éster hidrolasa de cera (EC 3.1.1.50). Para los propósitos de la presente invención, la actividad de lipasa se determina de conformidad con el procedimiento descrito en la sección Ejemplos. En un aspecto, las variantes de la presente invención tienen por lo menos 20 %, por ejemplo, por lo menos 25 %, por lo menos 30 %, por lo menos 35 %, por lo menos 40 %, por lo menos 45 %, por lo menos 50 %, por lo menos 55 %, por lo menos 60 %, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 % o por lo menos 100 % de la actividad de lipasa del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

Como se usa en la presente descripción, el término "variante alélica" se refiere a cualquiera de las dos o más formas alternas de un gen que ocupa el mismo locus cromosómico. La variación alélica surge naturalmente a través de mutación y puede producir polimorfismo dentro de las poblaciones. Las mutaciones génicas pueden ser silenciosas (sin cambio en el polipéptido codificado) o pueden codificar polipéptidos que tienen secuencias de aminoácidos alteradas. Una variante alélica de un polipéptido es un polipéptido codificado por una variante alélica de un gen.

Como se usa en la presente descripción, el término "ADNc" se refiere a una molécula de ADN que se puede preparar por transcripción inversa a partir de uría molécula de ARNm maduro o cortado y empalmado obtenido de una célula eucariota o procariota. El ADNc carece de secuencias de intrones que pueden estar presentes en el ADN genómico correspondiente. El transcrito de ARN primario inicial es un precursor para el ARNm que se procesa a través de una serie de etapas que incluyen la escisión y empalme antes de transformarse en ARNm maduro cortado y empalmado.

Como se usa en la presente descripción, el término "secuencia codificante" se refiere a un polinucleótido que especifica directamente la secuencia de aminoácidos de una variante. Los límites de la secuencia codificante se determinan, generalmente, por un marco de lectura abierta que empieza con un codón de inicio, tal como ATG, GTG o TTG, y termina con un codón de terminación, tal como TAA, TAG o TGA. La secuencia codificante puede ser un ADN genómico, ADNc, ADN sintético o una combinación de estos.

Como se usa en la presente descripción, el término "secuencias control" se refiere a secuencias de ácido nucleico necesarias para la expresión de un polinucleótido que codifica una variante de la presente invención. Cada secuencia control puede ser natural (es decir, del mismo gen) o extraña (es decir, de un gen diferente) para el polinucleótido que codifica la variante o pueden ser naturales o extraños entre sí. Tales secuencias de control incluyen, pero no se limitan a, un líder, una secuencia de poliadenilación, una secuencia de propéptido, un promotor, una secuencia de péptidos de señal y un terminador de transcripción. Como mínimo, las secuencias de control incluyen un promotor y señales de terminación de transcripción y traducción. Se puede proporcionar conectores a las secuencias de control con el propósito de introducir sitios de restricción específicos que faciliten la unión de las secuencias de control con la región codificante del polinucleótido que codifica una variante.

Como se usa en la presente descripción, el término "expresión" incluye cualquier etapa involucrada en la producción de una variante que incluye, pero no se limita a, transcripción, modificación postranscripcional, traducción, modificación postraslacional y secreción.

Como se usa en la presente descripción, el término "vector de expresión" se refiere a una molécula de ADN lineal o circular que comprende un poiinucieótido que codifica una variante y se une operativamente a las secuencias control que facilitan su expresión.

Como se usa en la presente descripción, el término "fragmento" se refiere a un polipéptido que tiene uno o más (por ejemplo, varios) aminoácidos ausentes del término amino y/o carboxilo de un polipéptido maduro; en donde el fragmento tiene actividad de lipasa. En un aspecto, un fragmento contiene por lo menos 50 %, por lo menos 55 %, por lo menos 60 %, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 % y por lo menos 95 % del número de aminoácidos del polipéptido maduro.

Como se usa en la presente descripción, el término "condiciones de rigurosidad alta" se refiere a sondas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, prehibridación e hibridación a 42 °C en SSPE 5X, SDS al 0.3 %, 200 microgramos/ml de ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y formamida al 50 %, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern durante 12 a 24 horas. El material portador se lava finalmente tres veces durante 15 minutos cada vez con el uso de SSC 2X, SDS al 0.2 % a 65 °C.

Como se usa en la presente descripción, el término "célula huésped" se refiere a cualquier tipo celular que es susceptible a la transformación, transfección, transducción o lo similar con un constructo de ácido nucleico o vector de expresión que comprende un poiinucieótido de la presente invención. El término "célula huésped" abarca cualquier progenie de una célula genitora que no es idéntica a la célula genitora debido a mutaciones que se producen durante la replicación.

Como se usa en la presente descripción, el término "propiedad mejorada" se refiere a una característica asociada con una variante que se mejora en comparación con el genitor. Tales propiedades mejoradas incluyen rendimiento mejorado en presencia de un catalizador orgánico. En algunas modalidades preferidas, la presente invención se relaciona con una composición o método, en donde la variante tiene una estabilidad mejorada a un catalizador orgánico seleccionado del grupo que consiste en catalizadores orgánicos que tienen las siguientes fórmulas: a) fórmula 1 ; b) fórmula 2; o c) mezclas de estas, mezclas de estas, en donde cada R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene de 3 a 24 carbonos o un grupo alquilo lineal que contiene de 1 a 24 carbonos, particularmente, en donde R es 2-butiloctilo y, preferentemente, la estabilidad mejorada es en presencia de la Fórmula 2 en la que R es 2-butiloctilo.

Como se usa en la presente descripción, el término "aislada" se refiere a una sustancia en una forma o ambiente que no es de origen natural. Los ejemplos no limitantes de sustancias aisladas incluyen (1) cualquier sustancia que no es de origen natural, (2) cualquier sustancia que incluye, pero no se limita a, cualquier enzima, variante, ácido nucleico, proteína, péptido o cofactor, que se retira por lo menos parcialmente de uno o más o todos los constituyentes de origen natural con los que se asocia en la naturaleza; (3) cualquier sustancia modificada por la mano del hombre con relación a la sustancia que se encuentra en la naturaleza; o (4) cualquier sustancia modificada al incrementar la cantidad de la sustancia con relación a otros componentes con los que se asocia naturalmente {por ejemplo, múltiples copias de un gen que codifica la sustancia; uso de un promotor más fuerte que el promotor que se asocia naturalmente con el gen que codifica la sustancia). Una sustancia aislada puede estar presente en una muestra de caldo de fermentación.

Como se usa en la presente descripción, el término "condiciones de rigurosidad baja" se refiere a sondas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, pre ibridación e hibridación a 42 °C en SSPE 5X, SDS al 0.3 %, 200 microgramos/ml de ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y formamida al 25 %, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern durante 12 a 24 horas. El material portador se lava finalmente tres veces durante 15 minutos cada vez con el uso de SSC 2X, SDS al 0.2 % a 50 °C.

Como se usa en la presente descripción, el término "polipéptido maduro" se refiere a un polipéptido en su forma final después de la traducción y cualquier modificación postraduccional, tales como el procesamiento en N-terminal, truncamiento en C-terminal, glicosilación, fosforilación, etc. En un aspecto, el polipéptido maduro es de los aminoácidos 1 al 269 de la sec. con núm. de ¡dent.: 1.

Como se usa en la presente descripción, el término "condiciones de rigurosidad media" se refiere a sondas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, prehibridación e hibridación a 42 °C en SSPE 5X, SDS al 0.3 %, 200 microgramos/ml de ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y formamida al 35 %, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern durante 12 a 24 horas. El material portador se lava finalmente tres veces durante 15 minutos cada vez con el uso de SSC 2X, SDS al 0.2 % a 55 °C.

Como se usa en la presente descripción, el término "condiciones de rigurosidad media-alta" se refiere a sondas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, prehibridación e hibridación a 42 °C en SSPE 5X, SDS al 0.3 %, 200 microgramos/ml de ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y cualquier formamida al 35 %, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern durante 12 a 24 horas. El material portador se lava finalmente tres veces durante 15 minutos cada vez con el uso de SSC 2X, SDS al 0.2 % a 60 °C.

Como se usa en la presente descripción, el término "muíante" se refiere a un polinucleótido que codifica una variante.

Como se usa en la presente descripción, el término "constructo de ácido nucleico" se refiere a una molécula de ácido nucleico, ya sea monocatenaria o bicatenaria, que se aisla de un gen de origen natural o se modifica para contener segmentos de ácidos nucleicos de una manera que no existiría de cualquier otra manera en la naturaleza o que es sintética, que comprende una o más secuencias control.

Como se usa en la presente descripción, el término "unido operativamente" se refiere a una configuración en la que una secuencia control se coloca en una posición adecuada con relación a la secuencia codificante de un polinucleótido de manera que la secuencia control dirige la expresión de la secuencia codificante.

Como se usa en la presente descripción, el término "genitor" o "lipasa genitora" se refiere a una lipasa que se somete a una alteración para producir las variantes enzimáticas de la presente invención. El genitor puede ser un polipéptido de origen natural (silvestre) o una variante o fragmento de este.

Identidad de secuencias: la relación entre dos secuencias de aminoácidos o entre dos secuencias de nucleótidos está descrita por el parámetro "identidad de secuencias". Para los propósitos de la presente invención, la identidad de secuencias entre dos secuencias de aminoácidos se determina con el uso del algoritmo de Needleman-Wunsch (Needleman and Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453) como se implemento en el programa Needle del paquete EMBOSS (EMBOSS: The European Molecular Biology Open Software Suite, Rice y col., 2000, Trends Genet. 16: 276-277), preferentemente, la versión 5.0.0 o posterior. Los parámetros usados son penalizacion de apertura de interrupciones de 10, penalizacion de extensión de interrupciones de 0.5 y la matriz de sustitución EBLOSUM62 (EMBOSS versión de BLOSUM62). El resultado de Needle, denominado "identidad más larga" (obtenida por medio de la opción nobrief (extendida)) se usa como porcentaje de identidad y se calcula de la siguiente manera: (Residuos idénticos x 100)/(Longitud del alineamiento - Cantidad total de espacios en el alineamiento) Para los propósitos de la presente invención, la identidad de secuencias entre dos secuencias de desoxirribonucleótidos se determina con el uso del algoritmo de Needleman-Wunsch (Needleman and Wunsch, 1970, supra) como se implemento en el programa Needle del paquete EMBOSS (EMBOSS: The European Molecular Biology Open Software Suite, Rice y col., 2000, suprá), preferentemente, la versión 5.0.0 o posterior. Los parámetros usados son penalizacion de apertura de interrupciones de 10, penalizacion de extensión de interrupciones de 0.5 y la matriz de sustitución EDNAFULL (EMBOSS versión'de NCBI NUC4.4). El resultado de Needle, denominado "identidad más larga" (obtenida por medio de la opción nobrief (extendida)) se usa como porcentaje de identidad y se calcula de la siguiente manera: (desoxirribonucleótidos idénticos x 100)/(longitud del alineamiento - Cantidad total de espacios en el alineamiento) Como se usa en la presente descripción, el término "subsecuencia" se refiere a un polinucleótido que tiene uno o más {por ejemplo, varios) nucleótidos ausentes del extremo 5' y/o 3' de una secuencia codificante de polipéptidos maduros; en donde la subsecuencia codifica un fragmento que tiene actividad de lipasa. En un aspecto, una subsecuencia contiene por lo menos 50 %, por lo menos 55 %, por lo menos 60 %, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 % y por lo menos 95 % del número de nucleótidos de la secuencia codificante de polipéptidos maduros.

Como se usa en la presente descripción, el término "variante" se refiere a un polipéptido que tiene actividad de lipasa que comprende una sustitución en una o más {por ejemplo, varias) posiciones. Una sustitución se refiere al reemplazo del aminoácido que ocupa una posición con un aminoácido diferente. Las variantes de la presente invención tienen por lo menos 20 %, por ejemplo, por lo menos 25 %, por lo menos 30 %, por lo menos 35 %, por lo menos 40 %, por lo menos 45 %, por lo menos 50 %, por lo menos 55 %, por lo menos 60 %, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 % o por lo menos 100 % de la actividad de lipasa del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

Como se usa en la presente descripción, el término "condiciones de rigurosidad muy alta" se refiere a sondas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, prehibridación e hibridación a 42 °C en SSPE 5X, SDS al 0.3 %, 200 microgramos/ml de ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y formamida al 50 %, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern durante 12 a 24 horas. El material portador se lava finalmente tres veces durante 15 minutos cada vez con el uso de SSC 2X, SDS al 0.2 % a 70 °C.

Como se usa en la presente descripción, el término "condiciones de rigurosidad muy baja" se refiere a sondas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, prehibridación e hibridación a 42 °C en SSPE 5X, SDS al 0.3 %, 200 microgramos/ml de ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y formamida al 25 %, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern durante 12 a 24 horas. El material portador se lava finalmente tres veces durante 15 minutos cada vez con el uso de SSC 2X, SDS al 0.2 % a 45 °C.

Como se usa en la presente descripción, el término lipasa "silvestre" se refiere a una lipasa expresada por un microorganismo de origen natural, tal como una bacteria, levadura u hongo filamentoso que se encuentra en la naturaleza.

Convenciones para la designación de variantes Para los propósitos de la presente invención se usa el polipéptido maduro descrito en la sec. con núm. de ident.: 1 se usa para determinar el residuo de aminoácidos correspondiente en otra lipasa. La secuencia de aminoácidos de otra lipasa se alinea con el polipéptido maduro descrito en la sec. con núm. de ident.: 1, y en base al alineamiento se determina el número de la posición del aminoácido que corresponde a cualquier residuo de aminoácido en el polipéptido maduro descrito en la sec. con núm. de ident.: 1 con el uso del algoritmo de Needleman-Wunsch (Needleman y Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453) como se implemento en el programa Needle del paquete EMBOSS (EMBOSS: The European Molecular Biology Open Software Suite, Rice y coi, 2000, Trends Genet. 16: 276-277), preferentemente, la versión 5.0.0 o posterior. Los parámetros usados son penalización de apertura de interrupciones de 10, penalización de extensión de interrupciones de 0.5 y la matriz de sustitución EBLOSUM62 (EMBOSS versión de BLOSUM62).

La identificación del residuo de aminoácidos correspondiente en otra lipasa se puede determinar por un alineamiento de múltiples secuencias de polipéptidos con el uso de diversos programas informáticos que incluyen, pero no se limitan a, MUSCLE (comparación de múltiples secuencias por log-expectativa; versión 3.5 o posterior; Edgar, 2004, Nucleic Acids Research 32: 1792-1797), MAFFT (versión 6.857 o posterior; Katoh and Kuma, 2002, Nucleic Acids Research 30: 3059-3066; Katoh y col. 2005, Nucleic Acids Research 33: 511-518; Katoh and Toh, 2007, Bioinformatics 23: 372-374; Katoh y col. 2009, Methods in Molecular Bioloav 537: 39-64: Katoh and Toh, 2010, Bioinformatics 26: 1899-1900) y EMBOSS EMMA con el uso de ClustalW (versión 1.83 o posterior; Thompson y col. 1994, Nucleic Acids Research 22: 4673-4680), con el uso de sus parámetros predeterminados correspondientes.

Cuando la otra enzima se desvió del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident: 1 de manera que la comparación tradicional basada en secuencias no detecta su relación (Lindahl y Elofsson, 2000, J. Mol. Biol. 295: 613-615) se puede usar otros algoritmos de comparación de secuencias en pares. Una sensibilidad mayor en la búsqueda basada en secuencias puede alcanzarse con el uso de programas de búsqueda que usan representaciones probabilísticas de familias (perfiles) de polipéptidos para buscar en las bases de datos. Por ejemplo, el programa PSI-BLAST genera perfiles a través de un proceso de búsqueda iterativo en bases de datos y es capaz de detectar homólogos remotos (AtschuI y col., 1997, Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402). Se puede obtener una sensibilidad aun mayor si la familia o superfamilia para el polipéptido tiene uno o más representantes en las bases de datos de estructuras de proteínas. Los programas tales como GenTHREADER (Jones, 1999, J. Mol. Biol. 287: 797-815; McGuffin y Jones, 2003, Bioinformatics 19: 874-881) usan información de diversas fuentes (PSI-BLAST, predicción de estructura secundaria, perfiles de alineamiento estructural y potenciales de solvatación) como entrada para una red neural que predice el pliegue estructural para una secuencia de consulta. De manera similar, el método de Gough y col., 2000, J. Mol. Biol. 313: 903-919 se puede usar para alinear una secuencia de estructura desconocida con los modelos de superfamilia presentes en la base de datos de SCOP. A su vez, estos alineamientos se pueden usar para generar modelos de homología para el polipéptido, y tales modelos pueden evaluarse para determinar la precisión con el uso de diversas herramientas desarrolladas para ese propósito.

Para las proteínas de estructura conocida se dispone de varias herramientas y recursos para recuperar y generar alineamientos estructurales. Por ejemplo, las superfamilias SCOP de proteínas se han alineado estructuralmente y es posible acceder a esos alineamientos y descargarlos. Dos o más estructuras de proteínas pueden alinearse con el uso de diversos algoritmos tales como la matriz de alineamiento de distancia (Holm y Sander, 1998, Proteins 33: 88-96) o extensión combinatoria (Shindyalov y Bourne, 1998, Protein Engineering 11 : 739-747) y la implementación de estos algoritmos se puede usar adicionalmente para consultar las bases de datos de estructuras con una estructura de interés para descubrir homólogos estructurales posibles (por ejemplo, Holm and Park, 2000, Bioinformatics 16: 566-567).

Al describir las variantes de la presente invención, la nomenclatura que se describe a continuación se adapta para facilitar la referencia. Se usa la abreviatura de aminoácidos de una sola letra o de tres letras de la IUPAC.

Sustituciones. Para una sustitución de aminoácido, se usa la siguiente nomenclatura: aminoácido original, posición, aminoácido sustituido. Por lo tanto, la sustitución de treonina en la posición 226 con alanina se designa "Thr226Ala" o "T226A". Múltiples mutaciones se separan por signos de adición ("+"), por ejemplo, "Gly205Arg +Ser411 Phe" o "G205R +S411 F", que representan sustituciones en las posiciones 205 y 411 de glicina (G) con arginina (R) y serina (S) con fenilalanina (F), respectivamente.

Múltiples sustituciones. Las variantes que comprenden múltiples sustituciones se separan por signos de adición ("+"), por ejemplo, "Arg170Tyr +Gly195Glu" o "R170Y +G195E" que representan una sustitución de arginina y glicina en las posiciones 170 y 195 con tirosina y ácido glutámico, respectivamente.

Sustituciones diferentes. Cuando se puede introducir alteraciones diferentes en una posición, las alteraciones diferentes se separan por una coma, por ejemplo, "Arg170Tyr,Glu" o "R170Y,E" que representa una sustitución de arginina en la posición 170 con tirosina o ácido glutámico. Por lo tanto, "Tyr167Gly,Ala + Arg170Gly,Ala" designa las variantes siguientes: "Tyr167Gly +Arg170Gly", "Tyr167Gly +Arg170Ala", "Tyr167Ala +Arg170Gly" y "Tyr167Ala +Arg170Ala".

Variantes de lipasa Para evaluar la estabilidad a la degradación oxidativa de la variante de lipasa, se determina el valor para el rendimiento relativo (RR de lavado), es decir, el rendimiento (R) de lavado de la variante de lipasa a evaluar, y se divide por el rendimiento de lavado de la lipasa de la sec. con núm. de ident.:1. Por lo tanto, RR de lavado = R(variante de lipasa de la invención) / R(lipasa de la sec. con núm. de ident.:1). Las variantes de lipasa que tienen una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa tienen un valor de RR de lavado de por lo menos 1.01, preferentemente, por lo menos 1.1 o incluso por lo menos 1.5.

Una variante de lipasa adecuada para usar en la presente invención comprende una sustitución en una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91. Preferentemente, la variante de lipasa es una variante de lipasa aislada. Las variantes de lipasa adecuadas para usar en la presente invención comprenden, preferentemente, una sustitución en una o más {por ejemplo, varias) posiciones correspondientes a las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, NSgA.CD.E.F.GJ.K.L.M.P.Q.RJ.V.W.Y y G91 D,H,I,P,Q o incluso G91A del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa. Con la máxima preferencia, la sustitución o sustituciones se combinan con T231 R o N233R o, preferentemente, con ambos.

Preferentemente, la variante tiene una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por ejemplo, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 91 %, por lo menos 92 %, por lo menos 93 %, por lo menos 94 %, por lo menos 95 %, por lo menos 96 %, por lo menos 97 %, por lo menos 98 % o por lo menos 99 %, pero menor que 100 %, con la secuencia de aminoácidos de la lipasa genitora.

En otra modalidad la variante tiene por lo menos 60 %, por ejemplo, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 91 %, por lo menos 92 %, por lo menos 93 %, por lo menos 94 %, por lo menos 95 %, tal como por lo menos 96 %, por lo menos 97 %, por lo menos 98 % o por lo menos 99 %, pero menor que 100 %, de identidad de secuencias con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En un aspecto, la cantidad de sustituciones en las variantes de la presente invención es 1 -20, por ejemplo, 1 -10 y 1 -5, tal como 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 sustituciones.

En otro aspecto, una variante comprende una sustitución en una o más (por ejemplo, varias) posiciones correspondientes a las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, N39A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,P,Q,R,T,V,W,Y y G91D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1. En otro aspecto, una variante comprende una alteración en dos posiciones correspondientes a cualquiera de las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, N39A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,P,Q,R,T,V,W,Y y G91D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1. En otro aspecto, una variante comprende una alteración en tres posiciones correspondientes a cualquiera de las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, ?39? ?,?,?,6,?,?,?,?,? ?,?,?,??,? y G91 D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en una sustitución en una posición correspondiente a la posición T37 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 que se sustituye con Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, GIn, Glu, Gly, His, lie, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr o Val, preferentemente, con Ala, Arg, Asn, Asp, GIn, Glu, Gly, His, Me, Leu, Phe, Pro, Ser, Trp, Tyr o Val. En otro aspecto, la variante comprende o consiste en la sustitución T37A, T37D, T37E, T37F, T37G, T37H, T37I, T37L, T37N, T37P, T37Q, T37R, T37S, T37V, T37W o T37Y del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en una sustitución en una posición correspondiente a la posición N39 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 que se sustituye con Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, GIn, Glu, Gly, His, lie, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr o Val, preferentemente, con Ala, Arg, Asp, Cys, GIn, Glu, Gly, lie, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Thr, Trp, Tyr o Val. En otro aspecto, la variante comprende o consiste en la sustitución N39A, N39C, N39D, N39E, N39F, N39G, N39I, N39K, N39L, N39M, N39P, N39Q, N39R, N39T, N39V, N39W, N39Y del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en una sustitución en una posición correspondiente a la posición G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 que se sustituye con Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, lie, Leu, Lys, et, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr o Val, preferentemente, con Asp, Gln, His, He o Pro. En otro aspecto, la variante comprende o consiste en la sustitución G91 D, G91 H, G91 I, G91 P, G91Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1. En un aspecto preferido, la variante comprende o consiste en una sustitución en una posición correspondiente a G91 que es G91A.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en sustituciones en las posiciones correspondientes a las posiciones T37 y N39, tales como las descritas anteriormente.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en sustituciones en las posiciones correspondientes a las posiciones T37 y G91 , tales como las descritas anteriormente.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en sustituciones en las posiciones correspondientes a las posiciones N39 y G91 , tales como las descritas anteriormente.

En otro aspecto, la variante comprende o consiste en sustituciones en las posiciones correspondientes a las posiciones T37, N39 y G91 , tales como las descritas anteriormente.

Las variantes pueden comprender, además, una o más sustituciones adicionales en una o más (por ejemplo, varias) posiciones diferentes.

Los cambios de aminoácidos pueden ser de carácter menor, es decir, sustituciones o inserciones conservadoras de aminoácidos que no afectan significativamente el plegamiento y/o actividad de la proteína; deleciones pequeñas, típicamente, de 1 a 30 aminoácidos; extensiones pequeñas del término amino o carboxilo, como un residuo de metionina del término amino; un péptido conector pequeño de hasta 20-25 residuos; o una extensión pequeña que facilita la purificación al cambiar la carga neta u otra función, tal como un tracto de polihistidina, un epftopo antigénico o un dominio de unión.

Los ejemplos de sustituciones conservadoras se encuentran en los grupos de aminoácidos básicos (arginina, lisina e histidina), aminoácidos acídicos (ácido glutámico y ácido aspártico), aminoácidos polares (glutamina y asparagina), aminoácidos hidrófobos (leucina, isoleucina y valina), aminoácidos aromáticos (fenilalanina, triptófano y tirosina) y aminoácidos pequeños (glicina, alanina, serina, treonina y metionina).

Alternativamente, los cambios de aminoácidos son de un carácter con el cual las propiedades fisicoquímicas de los polipéptidos se alteran. Por ejemplo, los cambios de aminoácidos pueden mejorar la estabilidad térmica del polipéptido, alterar la especificidad del sustrato, cambiar el pH óptimo y lo similar.

Por ejemplo, las variantes pueden comprender una sustitución en una posición correspondiente a las posiciones D96, T143, A150, E210, G225, T231 , N233 y P250 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident: 1. En algunas modalidades, la sustitución se selecciona de D96G, T143A, A150G, E210Q, G225R, T231 R, N233R y P250R.

En una modalidad preferida, la variante de lipasa para usar en la presente invención se relaciona con variantes seleccionadas de: G91A +D96G +T231 R +N233R G91A +D96G +G225R +T231 R +N233R G91 N +E210Q +T231 R +N233R +P250R G91L +E210Q +T231 R +N233R G91 A +D96G +A150G +T231 R +N233R Los aminoácidos esenciales en un polipéptido pueden identificarse de conformidad con procedimientos conocidos en la industria, tales como mutagénesis sitio dirigida o mutagénesis de escaneo de alanina (Cunningham and Wells, 1989, Science 244: 1081-1085). En la última técnica, se introduce mutaciones únicas de alanina en cada residuo en la molécula y las moléculas mutantes resultantes se analizan para detectar actividad de lipasa para identificar los residuos de aminoácidos que son fundamentales para la actividad de la molécula. Ver, además, Hilton y col., 1996, J. Biol. Chem. 271 : 4699-4708. El sitio activo de la enzima u otra interacción biológica puede determinarse, además, por análisis físico de la estructura, según técnicas como resonancia magnética nuclear, cristalografía, difracción por electrones o etiquetado por fotoafinidad, en conjunto con mutación de aminoácidos de sitio de contacto putativo. Ver, por ejemplo, de Vos y col., 1992, Science 255: 306-312; Smith y col., 1992, J. Mol. Biol. 224: 899-904; Wlodaver y col., 1992, FEBS Lett. 309: 59-64. La identidad de los aminoácidos esenciales se puede deducir, además, a partir de un alineamiento con un polipéptido relacionado.

Las variantes pueden comprender por lo menos 50 %, por lo menos 55 %, por lo menos 60 %, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por to menos 90 % y por lo menos 95 % del número de aminoácidos del polipéptido maduro.

En una modalidad, la variante tiene un rendimiento mejorado, particularmente, en presencia de un componente blanqueador. Las variantes preferidas tienen un rendimiento mejorado en presencia de un catalizador orgánico seleccionado del grupo que consiste en catalizadores orgánicos que tienen las siguientes fórmulas: a) c) mezclas de estas, mezclas de estas, en donde cada R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene de 3 a 24 carbonos o un grupo alquilo lineal que contiene de 1 a 24 carbonos; y recuperar la variante.

En algunas modalidades, R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene de 8 a 18 carbonos o un grupo alquilo lineal que contiene de 8 a 18 carbonos.

En algunas modalidades, R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en 2-propilheptilo, 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, n-dodecilo, n-tetradecilo, n-hexadecilo, n-octadecilo, iso-nonilo, iso-decilo, iso-tridecilo e iso-pantadecilo.

Preferentemente, R1 se selecciona del grupo que consiste en 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, iso-tridecilo e iso-pantadecilo. Las variantes preferidas tienen un rendimiento mejorado en presencia de un catalizador de la Fórmula b), en donde R es 2-butiloctilo.

Lipasas genitoras La lipasa genitora puede ser un polipéptido que tiene por lo menos 60 % de identidad de secuencias con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En un aspecto, el genitor tiene una identidad de secuencia con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 de por lo menos 60 %, por ejemplo, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 91 %, por lo menos 92 %, por lo menos 93 %, por lo menos 94 %, por lo menos 95 %, por lo menos 96 %, por lo menos 97 %, por lo menos 98 %, por lo menos 99 % o 100 %, que tiene actividad de lipasa. En un aspecto, la secuencia de aminoácidos del genitor difiere por no más de 20 aminoácidos, por ejemplo, 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 desde el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En otro aspecto, el genitor comprende o consiste en la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.: 1. En otro aspecto, el genitor comprende o consiste en el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1. En otro aspecto, el genitor comprende o consiste en los aminoácidos 1 a 269 de la sec. con núm. de ident.: 1.

En otro aspecto, el genitor es un fragmento del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 que contiene por lo menos 50 %, por lo menos 55 %, por lo menos 60 %, por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 % y por lo menos 95 % del número de aminoácidos del polipéptido maduro.

En otra modalidad, el genitor es una variante alélica del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

El polipéptido de la sec. con núm. de ident.: 1 o un fragmento de este puede usarse para diseñar sondas de ácido nucleico para identificar y clonar ADN que codifica un genitor de las cepas de géneros o especies diferentes de conformidad con métodos muy conocidos en la materia. Particularmente, tales sondas pueden usarse para hibridación con el ADN genómico o ADNc de una célula de interés, de conformidad con procedimientos convencionales de transferencia de Southern, para identificar y aislar el gen correspondiente en este. Tales sondas pueden ser considerablemente más cortas que la secuencia completa, pero deberían tener una longitud de al menos 15, por ejemplo, al menos 25, al menos 35 o al menos 70 nucleótidos. Preferentemente, la sonda de ácido nucleico tiene una longitud de al menos 100 nucleótidos, por ejemplo, al menos 200 nucleótidos, al menos 300 nucleótidos, al menos 400 nucleótidos, al menos 500 nucleótidos, al menos 600 nucleótidos, al menos 700 nucleótidos, al menos 800 nucleótidos o al menos 900 nucleótidos. Se puede usar sondas de ADN y de ARN. Las sondas se marcan, típicamente, para detectar el gen correspondiente (por ejemplo, con 32P, 3H, 35S, biotina o avidina). Tales sondas están comprendidas en la presente invención.

Una genoteca de ADN genómico o ADNc preparada a partir de tales cepas diferentes se puede analizar para detectar el ADN que se hibridiza con las sondas descritas anteriormente y codifica un genitor. El ADN genómico u otro ADN de tales cepas diferentes puede separarse por electroforesis en gel de agarosa o poliacrilamida u otras técnicas de separación. El ADN de las genotecas o el ADN separado se puede trasladar a e inmovilizar en nitrocelulosa u otro material portador adecuado. Para identificar un clon o ADN que se hibridiza con la sec. con núm. de ident.: 1 o una subsecuencia de esta, el material portador se usa en una hibridación Southern.

El polipéptido puede ser un polipéptido híbrido en donde una región de un polipéptido se fusiona en el extremo N-terminal o el extremo C-terminal de una región de otro polipéptido.

El genitor puede ser un polipéptido de fusión o polipéptido de fusión escindible en el que otro polipéptido se fusiona en el extremo N-terminal o el extremo C-terminal del polipéptido de la presente invención. Un polipéptido de fusión se produce al fusionar un polinucleótido que codifica otro polipéptido a un polinucleótido de la presente invención. Las técnicas para producir polipéptidos de fusión son conocidas en la materia, tales como ligar las secuencias codificantes que codifican los polipéptidos de manera que estén en marco y que la expresión del polipéptido de fusión esté bajo control del mismo promotor o promotores y terminador. Los polipéptidos de fusión se pueden construir, además, con el uso de tecnología de inteína en la cual los polipéptidos de fusión se crean postransicionalmente (Cooper y col. 1993, EMBO J. 12: 2575-2583; Dawson y col., 1994, Science 266: 776-779).

Un polipéptido de fusión puede comprender, además, un sitio de clivaje entre los dos polipéptidos. Cuando la proteína de fusión se secreta, el sitio se diva y libera los dos polipéptidos. Los ejemplos de sitios de clivaje incluyen, pero no se limitan a, los sitios descritos en Martin y col., 2003, J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 3: 568-576; Svetina y col., 2000, J. Biotechnol. 76: 245-251; Rasmussen-Wilson y col., 1997, Appl. Environ. Microbiol. 63: 3488-3493; Ward y col., 1995, Biotechnology 13: 498-503; y Contreras y col., 1991, Biotechnology 9: 378-381 ; Eaton y col., 1986, Biochemistry 25: 505-512; Collins-Racie y col., 1995, Biotechnology\3: 982-987; Cárter y col., 1989, Proteins: Structure, Function y Genetics 6: 240-248; y Stevens, 2003, Drug Discovery World 4: 35-48.

El genitor puede obtenerse a partir de microorganismos de cualquier género. Para los propósitos de la presente invención, el término "obtenido de", como se usa en la presente descripción, en relación con una fuente específica se refiere a que el genitor codificado por un polinucleótido se produce por la fuente o por una cepa en donde se ha insertado el polinucleótido de la fuente. En un aspecto, el genitor se secreta extracelularmente.

El genitor puede ser una lipasa bacteriana. Por ejemplo, el genitor puede ser un polipéptido bacteriano gram positivo, tal como una lipasa de Bacillus, Clostridium, Enterococcus, Geobacillus, Lactobacillus, Lactococcus, Oceanobacillus, Staphylococcus, Streptococcus, Streptomyces, Thermobifida fusca alias Thermomonospora fusca o un polipéptido bacteriano gram negativo, tal como una lipasa de Campylobacter, E. coli, Flavobacteríum, Fusobacterium, Helicobacter, llyobacter, Neisseria, Pseudomonas, Salmonella o Ureaplasma.

En un aspecto, el genitor es una lipasa de Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus brevis, Bacillus circulans, Bacillus clausii, Bacillus coagulans, Bacillus firmus, Bacillus lautus, Bacillus lentus, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, Bacillus pumilus, Bacillus stearothermophilus, Bacillus subtilis o Bacillus thuringiensis.

En otro aspecto, el genitor es una alfa-amilasa de Streptococcus equisimilis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus uberis o Streptococcus equi subsp. lipasa de Zooepidemicus.

En otro aspecto, el genitor es una lipasa de Streptomyces achromogenes, Streptomyces avermitilis, Streptomyces coelicolor, Streptomyces griseus o Streptomyces lividans.

El genitor puede ser una lipasa fúngica. Por ejemplo, el genitor puede ser una lipasa de levadura, tal como una lipasa de Candida, Kluyveromyces, Pichia, Saccharomyces, Schizosaccharomyces o Yarrowia; o una lipasa fúngica filamentosa, tal como una lipasa de Acremonium, Agaricus, Alternaría, Aspergillus, Aureobasidium, Botryospaeria, Ceríporiopsis, Chaetomidium, Chrysosporium, Claviceps, Cochliobolus, Coprinopsis, Coptotermes, Corynascus, Cryphonectria, Cryptococcus, Diplodia, Exidia, Filibasidium, Fusarium, Gibberella, Holomastigotoides, Humicola, Irpex, Lentinula, Leptospaeria, Magnaporthe, Melanocarpus, Meripilus, Mucor, Myceliophthora, Neocallimastix, Neurospora, Paecilomyces, Penicillium, Phanerochaete, Piromyces, Poitrasia, Pseudoplectania, Pseudotrichonympha, Rhizomucor, Schizophyllum, Scytalidium, Talaromyces, Thermoascus, Thielavia, Tolypocladium, Trichoderma, Trichophaea, Verticillium, Volvariella o Xylaria.

En otro aspecto, el genitor es una lipasa de Saccharomyces carlsbergensis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces diastaticus, Saccharomyces douglasii, Saccharomyces kluyveri, Saccharomyces norbensis o Saccharomyces oviformis.

En otro aspecto, el genitor es una lipasa de Acremonium cellulolyticus, Aspergillus aculeatus, Aspergillus awamori, Aspergillus foetidus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus japonicus, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Chrysosporium inops, Chrysosporium keratinophilum, Chrysosporium lucknowense, Chrysosporium merdarium, Chrysosporium pannicola, Chrysosporium queenslandicum, Chrysosporium tropicum, Chrysosporium zonatum, Fusarium bactridioides, Fusarium cerealis, Fusarium crookwellense, Fusarium culmorum, Fusarium graminearum, Fusarium graminum, Fusarium heterosporum, Fusarium negundi, Fusarium oxysporum, Fusarium reticulatum, Fusarium roseum, Fusarium sambucinum, Fusarium sarcochroum, Fusarium sporotrichioides, Fusarium sulphureum, Fusarium torulosum, Fusarium trichothecioides, Fusarium venenatum, Humicola grísea, Humicola insolens, Humicola lanuginosa, Irpex lacteus, Mucor miehei, Myceliophthora thermophila, Neurospora crassa, Penicillium funiculosum, Penicillium purpurogenum, Phanerochaete chrysosporium, Thielavia achromatica, Thielavia albomyces, Thielavia albopilosa, Thielavia australeinsis, Thielavia fimeti, Thielavia microspora, Thielavia ovispora, Thielavia peruviana, Thielavia setosa, Thielavia spededonium, Thielavia subthermophila, Thielavia terrestris, Trichoderma harzianum, Trichoderma koningii, Trichoderma longibrachiatum, Trichoderma reesei o Trichoderma viride lipase.

En otro aspecto, el genitor es una lipasa de Humicola lanuginosa, por ejemplo, la lipasa de la sec. con núm. de ident.: 1 o el polipéptido maduro de esta.

Se entenderá que para las especies mencionadas anteriormente, la invención abarca los estados perfecto e imperfecto y otros equivalentes taxonómicos, por ejemplo, anamorfos, independientemente del nombre de las especies por el cual se las conoce. Aquellos con experiencia en la materia reconocerán fácilmente la identidad de los equivalentes apropiados.

Las cepas de estas especies están fácilmente disponibles al público en varias recolecciones de cultivos, tales como la American Type Culture Collection (ATCC), Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ), Centraalbureau Voor Schimmelcultures (CBS) y Agricultural Research Service Patent Culture Collection, Northern Regional Research Center (NRRL).

El genitor se puede identificar y obtener de otras fuentes que incluyen microorganismos aislados de la naturaleza (por ejemplo, suelo, abonos orgánicos, agua, etc.) o muestras de ADN obtenidas directamente de materiales naturales (por ejemplo, suelo, abonos orgánicos, agua, etc.) con el uso de las sondas mencionadas anteriormente. En la materia se conocen las técnicas para aislar microorganismos y ADN directamente de un habitat natural. Después, un polinucleotido que codifica un genitor puede obtenerse de la misma manera por la evaluación de una genoteca de ADN genómico o genoteca de ADNc de otro microorganismo o muestra de ADN mixta. Una vez que se ha detectado un polinucleotido que codifica un genitor con la sonda o sondas, el polinucleotido se puede aislar o clonar con el uso de técnicas conocidas para las personas de habilidad ordinaria en la materia (ver, por ejemplo, Sambrook y col. 1989, supra).

Preparación de variantes La presente invención se relaciona, además, con un método para obtener una variante de lipasa; el método comprende introducir en una lipasa genitora una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones T37, N39 o G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa y en comparación con la lipasa genitora tiene un rendimiento mejorado en presencia de un catalizador orgánico seleccionado del grupo que consiste en catalizadores orgánicos que tienen las siguientes fórmulas: (a) Fórmula 2; o (c) mezclas de estas, en donde cada R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene de 3 a 24 carbonos o un grupo alquilo lineal que contiene de 1 a 24 carbonos; y recuperar la variante.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene de 8 a 18 carbonos o un grupo alquilo lineal que contiene de 8 a 18 carbonos.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en 2-propilheptilo, 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, n-dodecilo, n-tetradecilo, n-hexadecilo, n-octadecilo, ¡so-nonilo, ¡so-decilo, iso-tridecyl e iso-pantadecilo. Preferentemente, R1 se selecciona del grupo que consiste en 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, iso-tridecilo e iso-pantadecilo.

El catalizador orgánico se usa, típicamente, en una cantidad que proporciona 0.001-0.02 g de material activo por litro de líquido de lavado o en una cantidad que proporciona de 0.01 a 4.5, de 0.5 a 4.0, de 1.0 a 3.5, de 1.5 a 3.0 o de 2.0 a 2.5 ppm de material activo por litro de líquido de lavado.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde una fuente de peroxiácidos orgánicos está presente como agente de blanqueo. La fuente de peroxiácidos orgánicos puede ser un perácido preformado o un peróxido de diacilo o puede comprender una fuente de peróxido de hidrógeno y un activador de blanqueo.

Los agentes blanqueadores adecuados incluyen peróxidos de diacilo, activadores de blanqueo, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados y mezclas de estos.

Generalmente, cuando se usa un agente blanqueador, las composiciones de la presente invención pueden comprender de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 50 % o aún de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 25 % del agente blanqueador en peso de la composición limpiadora. El agente de blanqueo es, típicamente, una fuente de peroxiácidos orgánicos o una fuente de peroxígeno activado.

Cuando están presentes, el perácido y/o activador de blanqueamiento se encuentra presente, generalmente, en la composición en cantidades de aproximadamente 0.1 % en peso a aproximadamente 60 % en peso, de aproximadamente 0.5 % en peso a aproximadamente 40 % en peso o incluso de aproximadamente 0.6 % en peso a aproximadamente 10 % en peso en función de la composición. Uno o más perácidos hidrofóbicos o precursores de estos pueden usarse combinados con uno o más perácidos hidrófilos o precursores de estos.

Las cantidades de fuentes de peróxido de hidrógeno y perácido o activador de blanqueamiento se pueden seleccionar de tal manera que la proporción molar del oxígeno disponible (de la fuente de peróxido) y el perácido sea de 1 :1 a 35:1 , o aún de 2:1 a 10:1.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde la lipasa genitora comprende una secuencia de aminoácidos con por lo menos 60 % de identidad con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 ; consiste en la secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 o un fragmento de esta que tiene actividad de lipasa.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde la variante es: (a) un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos con por lo menos 60 % de identidad con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 ; (b) un polipéptido codificado por un polinucleótido que se hibridiza en por lo menos condiciones de rigurosidad baja con: (i) la secuencia codificante de polipéptidos maduros de la sec. con núm. de ident.: 1 ; o (ii) una cadena complementaria de longitud total de (i) o (c) un polipéptido codificado por un polinucleótido que comprende una secuencia de nucleotidos que tiene por lo menos 60 % de identidad con la secuencia codificante de polipéptidos maduros de la sec. con núm. de ident.: 1.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde la sustitución se selecciona de TSTA.D.E.F.G.H^L.N.P.Q.R.S.V.W.Y, N39A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,P,Q,R,T,V,W,Y y G91 D,H,I,P,Q.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde la variante comprende, además, una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones D96, T143, A150, E210, G225, T231 , N233 y P250 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

En algunas modalidades, la presente invención se relaciona con un método en donde la sustitución se selecciona de D96G, T143A, A150G, E210Q, G225R, T231 R, N233R y P250R.

Las variantes se pueden preparar con el uso de cualquier procedimiento de mutagénesis conocido en la industria, tal como mutagénesis sitio dirigida, construcción de genes sintéticos, construcción de genes semisintéticos, mutagénesis aleatoria, barajado, etc.

La mutagénesis sitio dirigida es una técnica en la que una o más {por ejemplo, varias) mutaciones se introducen en uno o más sitios definidos en un polinucleótido que codifica el genitor.

La mutagénesis sitio-dirigida se puede realizar in vitro por PCR para lo cual se usan iniciadores de oligonucleótidos que contienen la mutación deseada. La mutagénesis sitio-dirigida se puede realizar, además, in vitro por mutagénesis por inserción de un cásete que implica la escisión por una enzima de restricción en un sitio en el plásmido que comprende un polinucleótido que codifica el genitor y la posterior unión de un oligonucleotido que contiene la mutación en el polinucleótido. Usualmente, la enzima de restricción que digiere el plásmido y el oligonucleotido es la misma, lo que permite que los extremos pegajosos del plásmido y el inserto se unan entre sí. Ver, por ejemplo, Scherer y Davis, 1979, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 76: 4949-4955; y Barton y col., 1990, Nucleic Acids Res. 18: 7349-4966.

La mutagénesis sitio-dirigida se puede realizar, además, in vivo por métodos conocidos en la materia. Ver, por ejemplo, la publicación de solicitud de patente de los Estados Unidos núm. 2004/0171154; Storici y col., 2001 , Nature Biotechnol. 19: 773-776; Kren y col., 1998, Nat. Med. 4: 285-290; y Calissano y Macino, 1996, Fungal Genet. Newslett. 43: 15-16.

En la presente invención se puede usar cualquier procedimiento de mutagénesis sitio-dirigida. Existen muchos kits comerciales disponibles que se pueden usar para preparar variantes.

La construcción de genes sintéticos implica la síntesis in vitro de una molécula de polinucleotido diseñada para codificar un polipéptido de interés. La síntesis de genes se puede realizar con el uso de varias técnicas, tales como la tecnología basada de microchips múltiples descrita por Tian y col. (2004, Nature 432: 1050-1054) y tecnologías similares en donde los oligonucleótidos se sintetizan y se ensamblan con chips microfluídicos fotoprogramables.

Se puede realizar una o múltiples sustituciones, deleciones y/o inserciones de aminoácidos y se pueden probar con el uso de métodos de mutagénesis, recombinación y/o barajado conocidos, seguido de un procedimiento de análisis relevante, tales como aquellos descritos por Reidhaar-Olson y Sauer, 988, Science 241 : 53-57; Bowie y Sauer, 1989, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 86: 2152-2156; las patentes núm. W095/17413; o la patente núm. WO 95/22625. Otros métodos que se pueden usar incluyen PCR propensa a error, exhibición de fagos (por ejemplo, Lowman y col., 1991 , Biochemistry 30: 10832-10837; la patente de los Estados Unidos núm. 5,223,409; patente núm. WO 92/06204) y mutagénesis dirigida a una región (Derbyshire y col., 1986, Gene 46: 145; Ner y col., 1988, DNA 7: 127).

Los métodos de mutagénesis/barajado pueden combinarse con métodos de análisis automático de gran productividad para detectar la actividad de polipéptidos mutagenizados clonados expresados por células huésped (Ness y coi, 1999, Nature Biotechnology 17: 893-896). Las moléculas de ADN mutagenizadas que codifican polipéptidos activos pueden recuperarse de las células huésped y secuenciarse rápidamente con el uso de métodos estándar conocidos en la materia. Estos métodos permiten determinar rápidamente la importancia de los residuos de aminoácidos individuales en un polipéptido.

Los genes semisintéticos se pueden construir por la combinación de aspectos de construcción de genes sintéticos y/o mutagénesis sitio-dirigida y/o mutagénesis aleatoria y/o barajado. La construcción semisintética se tipifica por un proceso que usa fragmentos de polinucleótidos que se sintetizan, en combinación con técnicas de PCR. Por lo tanto, las regiones definidas de genes se pueden sintetizar de novo, mientras que otras regiones se pueden amplificar con el uso de iniciadores mutagénicos específicos del sitio, mientras que otras regiones adicionales pueden someterse a amplificación por PCR propensa a errores o por PCR no propensa a errores. Después, las subsecuencias de polinucleótidos se pueden barajar.

Polinucleótidos La presente descripción incluye, además, polinucleótidos aislados que codifican una variante de la presente invención.

Constructos de ácido nucleico La presente descripción incluye, además, constructos de ácido nucleico que comprenden un polinucleótido que codifica una variante de la presente invención que se une operativamente a una o más secuencias control que dirigen la expresión de la secuencia codificante en una célula huésped adecuada en condiciones compatibles con las secuencias control.

El polinucleótido se puede manipular en una gran variedad de maneras para facilitar la expresión de una variante. La manipulación del polinucleótido antes de su inserción en un vector puede ser deseable o necesaria según el vector de expresión. Las técnicas para modificar polinucleótidos que usan métodos de ADN recombinante son muy conocidas en la materia.

La secuencia control puede ser un promotor, un polinucleótido que la célula huésped reconoce para la expresión del polinucleótido. El promotor contiene secuencias control transcripcionales que regulan la expresión de la variante. El promotor puede ser cualquier polinucleótido que muestra una actividad transcripcional en la célula huésped que incluye promotores mutantes, truncados e híbridos y se puede obtener de genes que codifican polipéptidos extracelu lares o intracelulares ya sea homólogos o heterólogos para la célula huésped.

Los ejemplos de promotores adecuados para dirigir la transcripción de los constructos de ácido nucleico de la presente invención en una célula huésped bacteriana son los promotores obtenidos del gen alfa-amilasa de Bacillus amyloliquefaciens (amyQ), gen alfa-amilasa de Bacillus licheniformis {amyL), gen penicilinasa de Bacillus licheniformis (penP), gen amilasa maltogénica de Bacillus stearothermophilus (amyM), gen levansucrasa de Bacillus subtilis (sacB), genes xylA y xylB de Bacillus subtilis, gen cryIIIA de Bacillus thuringiensis (Agaisse and Lereclus, 1994, Molecular Microbiology 13: 97-107), operón lac de E. coli, promotor tcr e E. coli (Egon y col. 1988, Gene 69: 301-315), gen agarasa de Streptomyces coelicolor {dagA) y gen beta-lactamasa procariota (Villa-Kamaroff y col. 1978, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 75: 3727-3731 ), así como el promotor tac (DeBoer y col. 1983, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 80: 21 -25). Otros promotores se describen en "Useful proteins from recombinant bacteria" en Gilbert y col. 1980, Scientific American 242: 74-94; y en Sambrook y col. 1989, supra. Los ejemplos de promotores tándem se describen en la patente núm. WO 99/43835.

Los ejemplos de promotores adecuados para dirigir la transcripción de los constructos de ácido nucleico de la presente invención en una célula huésped fúngica filamentosa son promotores obtenidos de los genes para acetamidasa de Aspergillus nidulans, alfa-amilasa neutra de Aspergillus niger, alfa-amilasa estable en ácido de Aspergillus niger, glucoamilasa de Aspergillus niger o Aspergillus awamori {glaA), TAKA amilasa de Aspergillus oryzae, proteasa alcalina de Aspergillus oryzae, triosa fosfato isomerasa de Aspergillus oryzae, proteasa tipo tripsina de Fusarium oxysporum (patente núm. WO 96/00787), amiloglucosidasa de Fusarium venenatum (patente núm. WO 00/56900), Daría de Fusarium venenatum (patente núm. WO 00/56900), Quinn de Fusarium venenatum (patente núm. WO 00/56900), lipasa de Rhizomucor miehei, proteinasa aspártica de Rhizomucor miehei, beta-glucosidasa de Trichoderma reesei, celobiohidrolasa I de Trichoderma reesei, celobiohidrolasa II de Trichoderma reesei, endoglucanasa I de Trichoderma reesei, endoglucanasa II de Trichoderma reesei, endoglucanasa III de Trichoderma reesei, endoglucanasa IV de Trichoderma reesei, endoglucanasa V de Trichoderma reesei, xilanasa I de Trichoderma reesei, xilanasa II de Trichoderma reesei, beta-xilosidasa de Trichoderma reesei, así como el promotor NA2-tpi (un promotor modificado de un gen neutro alfa-amilasa de Aspergillus, en donde el líder sin traducir se ha reemplazado por un líder sin traducir de un gen triosa fosfato isomerasa de Aspergillus; los ejemplos no limitantes incluyen promotores modificados de un gen neutro alfa-amilasa de Aspergillus niger, en donde el líder sin traducir se ha reemplazado por un líder sin traducir de un gen triosa fosfato isomerasa de Aspergillus nidulans o Aspergillus oryzae); y promotores mutantes, truncados e híbridos de estos.

En un huésped de levadura, los promotores útiles se obtienen de los genes para enolasa (ENO-1) de Saccharomyces cerevisiae, galactoquinasa (GAL1) de Saccharomyces cerevisiae, alcohol deshidrogenasa/gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (ADH1 , ADH2/GAP) de Saccharomyces cerevisiae, triosa fosfato isomerasa (TPI) de Saccharomyces cerevisiae, metalotioneína (CUP1) de Saccharomyces cerevisiae y 3-fosfoglicerato quinasa de Saccharomyces cerevisiae. Romanos y col. 1992, Yeastñ: 423-488 describen otros promotores útiles para células huésped de levadura.

La secuencia control puede ser, además, un terminador de transcripción que una célula huésped reconoce para terminar la transcripción. La secuencia terminadora se une operativamente al término 3' del polinucleótido que codifica la vanante.

Se puede usar cualquier terminador que sea funcional en la célula huésped.

Los terminadores preferidos para células huésped bacterianas se obtienen de los genes para proteasa alcalina {aprH) de Bacillus clausii, alfa-amilasa (amyL) de Bacillus licheniformis y ARN ríbosómico (rrnB) de Escherichia coli.

Los terminadores preferidos para células huésped fúngicas filamentosas se obtienen de los genes para antranilato sintasa de Aspergillus nidulans, glucoamilasa de Aspergiilus niger, alfa-glucosidasa de Aspergillus niger, TAKA amilasa de Aspergillus oryzae y proteasa tipo tripsina de Fusarium oxysporum.

Los terminadores preferidos para células huésped de levadura se obtienen de los genes para enolasa de Saccharomyces cerevisiae, citocromo C (CYC1) de Saccharomyces cerevisiae y gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa de Saccharomyces cerevisiae. Romanos y col. 1992, supra, describen otros terminadores útiles para células huésped de levadura.

La secuencia control puede ser, además, una región estabilizadora de ARNm corriente abajo de un promotor y corriente arriba de la secuencia codificante de un gen que incrementa la expresión del gen.

Los ejemplos de regiones estabilizadoras de ARNm adecuadas se obtienen de un gen cryIIIA de Bacillus thuringiensis (patente núm. WO 94/25612) y un gen SP82 de Bacillus subtilis (Hue y col. 1995, Journal of Bacteriology 177: 3465-3471 ).

La secuencia control puede ser, además, una secuencia líder, una región sin traducir, de un ARNm que es importante para la traducción por parte de la célula huésped. La secuencia líder se une operativamente al término 5' del polinucleótido que codifica la variante. Se puede usar cualquier líder que sea funcional en la célula huésped.

Los líderes preferidos para células huésped fúngicas filamentosas se obtienen de los genes para TAKA amilasa de Aspergillus oryzae y triosa fosfato isomerasa de Aspergillus nidulans.

Los líderes adecuados para células huésped de levadura se obtienen de los genes para enolasa (ENO-1 ) de Saccharomyces cerevisiae, 3-fosfoglicerato quinasa de Saccharomyces cerevisiae, alfa-factor de Saccharomyces cerevisiae y alcohol deshidrogenasa/gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (ADH2/GAP) de Saccharomyces cerevisiae.

La secuencia control puede ser, además, una secuencia de poliadenilación, una secuencia unida operativamente al término 3' de la secuencia codificante de variantes y, cuando se transcribe, una célula huésped la reconoce como una señal para agregar residuos de poliadenosina al ARNm transcrito. Se puede usar cualquier secuencia de poliadenilación que sea funcional en la célula huésped.

Las secuencias de poliadenilación preferidas para células huésped fúngicas filamentosas se obtienen de los genes para antranilato sintasa de Aspergillus nidulans, glucoamilasa de Aspergillus niger, alfa-glucosidasa de Aspergillus niger, TAKA amilasa de Aspergillus oryzae y proteasa tipo tripsina de Fusarium oxysporum.

Las secuencias de poliadenilación útiles para células huésped de levadura están descritas por Guo and Sherman, 1995, Mol. Cellular Biol. 15: 5983-5990.

La secuencia control puede ser, además, una región codificante de péptidos señal que codifica un péptido señal unido al extremo N-terminal de una variante y dirige la variante hacia la vía secretora de la célula. El extremo 5' de la secuencia codificante del polinucleótido puede contener inherentemente una secuencia codificante de péptidos señal unida naturalmente en el marco de lectura de traducción con el segmento de la secuencia codificante que codifica la variante. Alternativamente, el extremo 5' de la secuencia codificante puede contener una secuencia codificante de péptidos señal que es extraña para la secuencia codificante. Una secuencia codificante extraña de péptidos señal se puede requerir cuando la secuencia codificante no contiene de manera natural una secuencia codificante de péptidos señal. Alternativamente, una secuencia codificante extraña de péptidos señal puede simplemente reemplazar la secuencia codificante natural de péptidos señal para mejorar la secreción de la variante. Sin embargo, se puede usar cualquier secuencia codificante de péptidos señal que dirige la variante expresada hacia la vía secretora de una célula huésped.

Las secuencias codificantes de péptidos señal efectivas para células huésped bacterianas son las secuencias codificantes de péptidos señal obtenidas de los genes para amilasa maltogénica NCIB 11837 de Bacillus, subtilisina de Bacillus licheniformis, beta-lactamasa de Bacillus licheniformis, alfa-amilasa de Bacillus stearothermophilus, proteasas neutras (nprT, nprS, nprM) de Bacillus stearothermophilus y prsA de Bacillus subtilis. Otros péptidos señal se describen en Simonen and Palva, 1993, Microbiological Reviews 57: 109-137.

Las secuencias codificantes de péptidos señal efectivas para células huésped fúngicas filamentosas son las secuencias codificantes de péptidos señal obtenidas de los genes para amilasa neutra de Aspergillus niger, glucoamilasa de Aspergillus niger, TAKA amilasa de Aspergillus oryzae, celulasa de Humicola insolens, endoglucanasa V de Humicola insolens, lipasa de Humicola lanuginosa y proteinasa aspártica de Rhizomucor miehei.

Los péptidos señal útiles para células huésped de levadura se obtienen de los genes para alfa-factor de Saccharomyces cerevisiae e invertasa de Saccharomyces cerevisiae. Otras secuencias codificantes de péptidos señal útiles se describen en Romanos y col. 1992, supra.

La secuencia control puede ser, además, una secuencia codificante de propéptidos que codifica un propéptido posicionado en el extremo N-termínal de una variante. El polipéptido resultante se conoce como una proenzima o propolipéptido (o un zimógeno, en algunos casos). Un propolipéptido está, generalmente, inactivo y puede convertirse en un polipéptido activo por clivaje catalítico o autocatalítico del propéptido del propolipéptido. La secuencia codificante de propéptidos puede obtenerse de los genes para la proteasa alcalina (aprE) de Bacillus subtilis, proteasa neutra (nprT) de Bacillus subtilis, lacasa de Myceliophthora thermophila (patente núm. WO 95/33836), proteinasa aspártica de Rhizomucor miehei y alfa-factor de Saccharomyces cerevisiae.

Cuando tanto la secuencia de péptidos señal como la de propéptidos están presentes, la secuencia de propéptidos se posiciona al lado del extremo N-terminal de la variante y la secuencia de péptidos señal se posiciona al lado del extremo N-terminal de la secuencia de propéptidos.

Puede ser conveniente, además, agregar secuencias reguladoras que regulan la expresión de la variante con relación al crecimiento de la célula huésped. Los sistemas reguladores ilustrativos son aquellos que producen la expresión del gen a activar o desactivar en respuesta a un estímulo químico o físico, que incluyen la presencia de un compuesto regulador. Los sistemas reguladores en sistemas procariotas incluyen los sistemas operadores lac, tac y trp. En la levadura, se puede usar el sistema ADH2 o el sistema GAL1. En hongos filamentosos, se puede usar el promotor de glucoamilasa de Aspergillus niger, el promotor de TAKA alfa-amilasa de Aspergillus oryzae y el promotor de glucoamilasa de Aspergillus oryzae. Otras secuencias reguladoras ilustrativas son aquellas que permiten la amplificación de genes. En los sistemas eucariotas, estas secuencias reguladoras incluyen el gen dihidrofolato reductasa que se amplifica en presencia de metotrexato y los genes de metalotioneína que se amplifican con metales pesados. En estos casos, el polinucieótido que codifica la variante estaría unido operativamente con la secuencia reguladora.

Vectores de expresión La presente invención se relaciona, además, con vectores recombinantes de expresión que comprenden un polinucieótido que codifica una variante de la presente invención, un promotor y señales de terminación transcripcional y traslacional. Las diversas secuencias de nucleótidos y control pueden unirse para producir un vector recombinante de expresión que puede incluir uno o más sitios de restricción adecuados para permitir la inserción o sustitución del polinucieótido que codifica la variante en tales sitios. Alternativamente, el polinucieótido se puede expresar al insertar el polinucieótido o un constructo de ácido nucleico que comprende el polinucieótido en un vector adecuado para expresión. Al crear el vector de expresión, la secuencia codificante se ubica en el vector de manera que la secuencia codificante se une operativamente con las secuencias control adecuadas para expresión.

El vector recombinante de expresión puede ser cualquier vector {por ejemplo, un plásmido o virus) que se puede someter convenientemente a procedimientos de ADN recombinante y que puede proporcionar aproximadamente la expresión del polinucleótido. La selección del vector depende, típicamente, de la compatibilidad del vector con la célula huésped en donde el vector se introduce. El vector puede ser un plásmido lineal o circular cerrado.

El vector puede ser un vector de replicación autónoma, es decir, un vector que existe como una entidad extracromosómica, cuya replicación es independiente de la replicación cromosómica, por ejemplo, un plásmido, un elemento extracromosómico, un minicromosoma o un cromosoma artificial. El vector puede contener cualquier medio para garantizar la autorreplicación. Alternativamente, el vector puede ser uno que cuando se introduce en la célula huésped se integra en el genoma y se replica junto con el o los cromosomas en los que se integró. Además, se puede usar un solo vector o plásmido o dos o más vectores o plásmidos que juntos contienen el ADN total a introducir en el genoma de la célula huésped o un transposón.

El vector contiene, preferentemente, uno o más marcadores seleccionables que permiten seleccionar fácilmente las células transformadas, transfectadas, transducidas o células similares. Un marcador seleccionable es un gen cuyo producto permite una resistencia a los biocidas o a los virus, resistencia a metales pesados, prototrofía a auxótrofos y lo similar.

Los ejemplos de marcadores seleccionables bacterianos son genes dal de Bacillus licheniformis o Bacillus subtilis o marcadores que confieren una resistencia a antibióticos, tal como la resistencia a la ampicilina, cloranlenicol, canamicina, neomicina, espectinomicina o tetracíclina. Los marcadores adecuados para células huésped de levadura incluyen, pero no se limitan a, ADE2, HIS3, LEU2, LYS2, MET3, TRP1 y URA3. Los marcadores seleccionables para usar en una célula huésped fúngica filamentosa incluyen, pero no se limitan a, amdS (acetamidasa), argB (ornitina carbamoiltransferasa), bar (fosfinotricina acetiltransferasa), hph (higromicina fosfotransferasa), niaD (nitrato reductasa), pyrG (orotidina-5'-fosfato decarboxilasa), sC (sulfato adeniltransferasa) y trpC (antraniiato sintasa), así como equivalentes de estos. En una célula de Aspergillus se prefiere usar los genes amdS and pyrG de Aspergillus nidulans o Aspergillus oryzae y un gen bar de Streptomyces hygroscopicus.

El vector contiene, preferentemente, uno o más elementos que permiten la integración del vector en el genoma de la célula huésped o la replicación autónoma del vector en la célula independiente del genoma.

Para la integración en el genoma de la célula huésped, el vector puede depender de la secuencia del polinucleótido que codifica la variante o cualquier otro elemento del vector para la integración en el genoma por recombinación homologa o no homologa. Alternativamente, el vector puede contener polinucleótidos adicionales para dirigir la integración de la célula huésped por recombinación homologa en el genoma en el o los sitios precisos en el o los cromosomas. Para incrementar la probabilidad de integración en un sitio preciso, los elementos de integración deben contener la cantidad suficiente de ácidos nucleicos, tal como de 100 a 10,000 pares de bases, de 400 a 10,000 pares de bases y de 800 a 10,000 pares de bases, que tiene un grado alto de identidad de secuencias con la secuencia objetivo correspondiente para mejorar la probabilidad de recombinación homologa. Los elementos de integración puede ser cualquier secuencia que sea homologa con la secuencia objetivo en el genoma de la célula huésped. Además, los elementos de integración pueden ser polinucleótidos no codificantes o codificantes. Por otra parte, el vector se puede integrar en el genoma de la célula huésped por recombinación no homologa.

Para la replicación autónoma, el vector puede comprender, además, un origen de replicación que permite al vector replicarse de manera autónoma en la célula huésped en cuestión. El origen de replicación puede ser cualquier replicador de plásmidos que interviene en la replicación autónoma que funciona en una célula. El término "origen de replicación" o "replicador de plásmidos" se refiere a un polinucleótido que permite que el plásmido o vector se replique in vivo.

Los ejemplos de orígenes de replicación bacteriana son los orígenes de replicación de los plásmidos pBR322, pUC19, pACYC177 y pACYC184 que permiten la replicación en E. coli y pUB110, pE194, pTA1060 y ???ß? que permiten la replicación en Bacillus.

Los ejemplos de orígenes de replicación para usar en una célula huésped de levadura son el origen de replicación de 2 micrones, ARS1 , ARS4, la combinación de ARS1 y CEN3 y la combinación de ARS4 y CEN6.

Los ejemplos de orígenes de replicación útiles en una célula fúngica filamentosa son AMA1 y ANS1 (Gems y col. 1991 , Gene 98: 61-67; Cullen y col. 1987, Nucleic Acids Res. 15: 9163-9175; patente núm. WO 00/24883). El aislamiento del gen AMA1 y la construcción de plásmidos o vectores que comprenden el gen se pueden lograr de conformidad con los métodos descritos en la patente núm. WO 00/24883.

Se puede insertar más de una copia de un polinucleótido de la presente invención en una célula huésped para aumentar la producción de una variante. Puede haber un incremento en el número de copias del polinucleótido al integrar por lo menos una copia adicional de la secuencia en el genoma de la célula huésped o al incluir un gen marcador seleccionare amplificable con el polinucleótido en donde las células que contienen copias amplificadas del gen marcador seleccionare y, por lo tanto, copias adicionales del polinucleótido, pueden seleccionarse al cultivar las células en presencia del agente seleccionare adecuado.

Los procedimientos usados para ligar los elementos descritos anteriormente para construir los vectores de expresión recombinantes de la presente invención son muy conocidos para un experto en la industria (ver, por ejemplo, Sambrook y col. 1989, supra).

Células huésped La presente invención se relaciona, además, con células huésped recombinantes que comprenden un polinucleótido que codifica una variante de la presente invención que se une operativamente a una o más secuencias control que dirigen la producción de una variante de la presente invención. Un constructo o vector que comprende un polinucleótido se introduce en una célula huésped de manera que el constructo o vector se mantiene como un integrante cromosómico o como un vector extracromosómico de autorreplicación como se describió anteriormente. El término "célula huésped" incluye cualquier progenie de una célula genitora que no es idéntica a la célula genitora debido a las mutaciones que ocurren durante la replicación. La selección de una célula huésped depende en gran medida del gen que codifica la variante y su fuente.

La célula huésped puede ser cualquier célula útil en la producción recombinante de una variante, por ejemplo, una procariota o una eucariota.

La célula huésped procariota puede ser cualquier bacteria gram positiva o gram negativa. Las bacterias gram positivas incluyen, pero no se limitan a, Bacillus, Clostridium, Enterococcus, Geobacillus, Lactobacillus, Lactococcus, Oceanobacillus, Staphylococcus, Streptococcus y Streptomyces. Las bacterias gram negativas incluyen, pero no se limitan a, Campylobacter, E. coli, Flavobacterium, Fusobacterium, Helicobacter, llyobacter, Neisseria, Pseudomonas, Salmonella y Ureaplasma.

La célula huésped bacteriana puede ser cualquier célula de Bacillus que incluyen, pero no se limitan a, células de Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus brevis, Bacillus circulans, Bacillus clausii, Bacillus coagulans, Bacillus firmus, Bacillus lautus, Bacillus lentus, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, Bacillus pumilus, Bacillus stearothermophilus, Bacillus subtilis y Bacillus thuringiensis.

La célula huésped bacteriana puede ser, además, cualquier célula de Streptococcus que incluyen, pero no se limitan a, células de subespecies de Streptococcus equisimilis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus uberis y Streptococcus equi. Zooepidemicus.

La célula huésped bacteriana puede ser, además, cualquier célula de Streptomyces, que incluyen, pero no se limitan a, células de Streptomyces achromogenes, Streptomyces avermitilis, Streptomyces coelicolor, Streptomyces griseus y Streptomyces lividans.

La introducción de ADN en una célula de Bacillus se puede realizar por transformación de protoplastos (ver, por ejemplo, Chang and Cohén, 1979, Mol. Gen. Genet. 168: 111-115), transformación de células competentes (ver, por ejemplo, Young and Spizizen, 1961 , J. Bacterio!. 81 : 823-829 o Dubnau and Davidoff-Abelson, 1971 , J. Mol. Biol. 56: 209-221), electroporación (ver, por ejemplo, Shigekawa and Dower, 1988, Biotechniques 6: 742-751) o conjugación (ver, por ejemplo, Koehler and Thorne, 1987, J. Bacterio!. 169: 5271-5278). La introducción de ADN en una célula de E. coli se puede realizar por transformación de protoplastos (ver, por ejemplo, Hanahan, 1983, J. Mol. Biol. 166: 557-580) o electroporación (ver, por ejemplo, Dower y col. 1988, Nucleic Acids Res. 16: 6127-6145). La introducción de ADN en una célula de Streptomyces se puede realizar por transformación de protoplastos, electroporación (ver, por ejemplo, Gong y col. 2004, Folia Microbio!. (Praha) 49: 399-405), conjugación (ver, por ejemplo, Mazodier y col. 1989, J. Bacterio!. 171: 3583-3585) o transducción (ver, por ejemplo, Burke y col. 2001 , Proc. Nati. Acad. Sci. USA 98: 6289-6294). La introducción de ADN en una célula de Pseudomonas se puede realizar por electroporación (ver, por ejemplo, Choi y col. 2006, J. Microbiol. Methods 64: 391-397) o conjugación (ver, por ejemplo, Pinedo and Smets, 2005, Appl. Environ. Microbiol. 71 : 51-57). La introducción de ADN en una célula de Streptococcus se puede realizar por competencia natural (ver, por ejemplo, Perry and Kuramitsu, 1981 , Infecí Immun. 32: 1295-1297), transformación de protoplastos (ver, por ejemplo, Catt and Jollick, 1991 , Microbios 68: 189-207), electroporación (ver, por ejemplo, Buckley y col. 1999, Appl. Environ. Microbiol. 65: 3800-3804) o conjugación (ver, por ejemplo, Clewell, 1981 , Microbiol. Rev. 45: 409-436). Sin embargo, se puede usar cualquier método conocido en la industria para introducir ADN en una célula huésped.

La célula huésped puede ser, además, una célula eucariota, tal como una célula de mamífero, insecto, planta u hongo.

La célula huésped puede ser una célula de hongo. "Hongos", como se usa en la presente descripción, incluye el filo Ascomycota, Basidiomycota, Chytridiomycota y Zygomycota así como los hongos Oomycota y todos los hongos mitospóricos (como los definen Hawksworth y col. en Ainsworth and Bisby's Dictionary of The Fungi, 8.° edición, 1995, CAB International, University Press, Cambridge, Reino Unido).

La célula huésped fúngica puede ser una célula de levadura. "Levadura", como se usa en la presente descripción, incluye levadura ascosporógena (Endomycetales), levadura basidiosporógena y levadura perteneciente a los hongos imperfectos (Blastomycetes). Dado que la clasificación de levadura puede cambiar en el futuro, para los propósitos de la presente invención, la levadura debe definirse como se describe en Biology and Activities of Yeast (Skinner, Passmore y Davenport, editores, Soc. App. Bacterio!. Symposium serie núm. 9, 1980).

La célula huésped de levadura puede ser una célula de Candida, Hansenula, Kluyveromyces, Pichia, Saccharomyces, Schizosaccharomyces o Yarrowia cell such as a Kluyveromyces lactis, Saccharomyces carlsbergensis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces diastaticus, Saccharomyces douglasii, Saccharomyces kluyveri, Saccharomyces norbensis, Saccharomyces oviformis o Yarrowia lipolytica.

La célula huésped fúngica puede ser una célula fúngica filamentosa. Los "hongos filamentosos" incluyen todas las formas filamentosas de las subdivisiones Eumycota y Oomycota (como definen Hawksworth y col. 1995, suprá). Los hongos filamentosos se caracterizan, generalmente, por una pared micelial compuesta de quitina, celulosa, glucana, quitosana, mañana, y otros polisacáridos complejos. El crecimiento vegetativo es por alargamiento de hifas y el catabolismo de carbono es forzosamente aerobio. En contraste, el crecimiento vegetativo por levaduras tales como Saccharomyces cerevisiae es por reproducción asexual de un talo unicelular y el catabolismo de carbono puede ser fermentativo.

La célula huésped fúngica filamentosa puede ser una célula de Acremonium, Aspergillus, Aureobasidium, Bjerkandera, Ceriporiopsis, Chrysosporium, Coprinus, Coriolus, Cryptococcus, Filibasidium, Fusarium, Humicola, Magnaporthe, Mucor, Myceliophthora, Neocallimastix, Neurospora, Paecilomyces, Penicillium, Phanerochaete, Phlebia, Piromyces, Pleurotos, Schizophyllum, Talaromyces, Thermoascus, Thielavia, Tolypocladium, Trametes o Trichoderma.

Por ejemplo, la célula huésped fúngica filamentosa puede ser una célula de Aspergillus awamori, Aspergillus foetidus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus japonicus, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Bjerkandera adusta, Ceriporiopsis aneirina, Ceriporiopsis caregiea, Ceriporiopsis gilvescens, Ceriporiopsis pannocinta, Ceriporiopsis rivulosa, Ceriporiopsis subrufa, Ceriporiopsis subvermispora, Chrysosporium inops, Chrysosporium keratinophilum, Chrysosporium lucknowense, Chrysosporium merdarium, Chrysosporium pannicola, Chrysosporium queenslandicum, Chrysosporium tropicum, Chrysosporium zonatum, Coprinus cinereus, Coriolus hirsutus, Fusarium bactridioides, Fusarium cerealis, Fusarium crookwellense, Fusarium culmorum, Fusarium graminearum, Fusarium graminum, Fusarium heterosporum, Fusarium negundi, Fusarium oxysporum, Fusarium reticulatum, Fusarium roseum, Fusarium sambucinum, Fusarium sarcochroum, Fusarium sporotrichioides, Fusarium sulphureum, Fusarium torulosum, Fusarium trichothecioides, Fusarium venenatum, Humicola insolens, Humicola lanuginosa, Mucor miehei, Myceliophthora thermophila, Neurospora crassa, Penicillium purpurogenum, Phanerochaete chrysosporium, Phiebia radiata, Pleurotus eryngii, Thielavia terrestris, Trametes villosa, Trametes versicolor, Trichoderma harzianum, Trichoderma koningii, Trichoderma longibrachiatum, Trichoderma reesei o Trichoderma viride.

Las células fúngicas pueden transformarse por un proceso que incluye la formación de protoplastos, la transformación de los protoplastos y la regeneración de la pared celular de una manera conocida. Los procedimientos adecuados para la transformación de células huésped de Aspergillus y Trichoderma se describen en la patente europea núm. EP 238023, Yelton y col. 1984, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 81 : 1470-1474 y Christensen y col. 1988, Bio/Technology 6: 1419-1422. Los métodos adecuados para transformar especies de Fusarium están descritos por Malardier y col. 1989, Gene 78: 147-156 y en la patente núm. WO 96/00787. La levadura se puede transformar con el uso de los procedimientos descritos por Becker and Guarente, en Abelson, J.N. and Simón, M.I., editores, Guide to Yeast Genetics and Molecular Biology, Methods in Enzymology, volumen 194, págs. 182-187, Academic Press, Inc., New York; Ito y col. 1983, J. Bacterio!. 153: 163; y Hinnen y col. 1978, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 75: 1920.

Métodos de producción La presente descripción incluye, además, métodos para producir una variante; los métodos comprenden: (a) cultivar una célula huésped de la presente invención en afección adecuadas para la expresión de la variante; y (b) recuperar la variante.

Las células huésped se cultivan en un medio de nutrientes adecuado para la producción de la variante con el uso de métodos conocidos en la materia. Por ejemplo, la célula se puede cultivar por cultivo en matraz de agitación o fermentación a pequeña escala o a gran escala (que incluyen fermentaciones continuas, discontinuas, semicontinuas o en estado sólido) en termentadores de laboratorio o industriales que se lleva a cabo en un medio adecuado y en las condiciones que permite que la variante se exprese y/o se aisle. El cultivo se lleva a cabo en un medio con nutrientes adecuado que comprende fuentes de carbono y nitrógeno y sales inorgánicas, con el uso de procedimientos conocidos en la materia. Los medios adecuados están disponibles de proveedores comerciales o se pueden preparar de conformidad con composiciones publicadas (por ejemplo, en catálogos de la American Type Culture Collection). Si la variante se secreta en el medio de nutrientes, la variante se puede recuperar directamente del medio. Si la variante no se secreta, se puede recuperar de los lisados celulares.

La variante se puede detectar con el uso de métodos conocidos en la industria que son específicos para las variantes. Estos métodos de detección incluyen, pero no se limitan a, usar anticuerpos específicos, formar un producto de enzimas o desaparecer un sustrato de enzimas. Por ejemplo, se puede usar un ensayo de enzimas para determinar la actividad de la variante.

La variante se puede recuperar con el uso de métodos conocidos en la industria. Por ejemplo, la variante se puede recuperar del medio de nutrientes por procedimientos convencionales que incluyen, pero no se limitan a, la recolección, centrifugación, filtración, extracción, secado por aspersión, evaporación o precipitación.

La variante se puede purificar por una gran variedad de procedimientos conocidos en la industria que incluyen, pero no se limitan a, cromatografía {por ejemplo, intercambio de iones, afinidad, exclusión hidrófoba, de cromatoenfoque y por tamaño), procedimientos electroforéticos {por ejemplo, enfoque isoeléctrico preparativo), solubilidad diferencial {por ejemplo, precipitación de sulfato amónico), SDS-PAGE o extracción (ver, por ejemplo, Protein Purification, Janson and Ryden, editores, VCH Publishers, New York, 1989) para obtener variantes sustancialmente puras.

En un aspecto alterno, la variante no se recupera, más bien una célula huésped de la presente invención que expresa la variante se usa como una fuente de la variante.

Composiciones La presente descripción incluye, además, composiciones particuladas como se describe en la patente europea núm. EP11170520 que comprenden una variante de lipasa que comprende una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones TSTA.D.E.F.G.H.I.UN.P.Q.R.S.V.W.Y, N39A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,P,Q,R,T,V,W,Y y G91 D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa.

En algunas modalidades, la composición particulada comprende: (a) partículas que comprenden una fuente de peroxiácidos orgánicos; y (b) partículas que comprenden un catalizador de blanqueo; y (c) partículas que comprenden (i) un núcleo que comprende una enzima rodeada por (ii) un recubrimiento de liberación retardada, en donde la enzima es una vanante de lipasa que comprende una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, N39A,C,D,E,F,G ,K,L,M,PAR,T,V,W,Y y G91 D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa.

En algunas modalidades, la composición particulada comprende: (a) partículas que comprenden una fuente de peroxiácidos orgánicos; y (b) partículas que comprenden un catalizador de blanqueo; y (c) partículas que comprenden (i) un núcleo que comprende una enzima que es una enzima lipolítica del primer lavado rodeada por (ii) un recubrimiento de liberación retardada, en donde la variante de lipasa comprende una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, NSgA.CD.E.F.G.I.^UM.P.Q.R.T.V.W.Y y G91D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa.

Usos La presente descripción incluye, además, el uso de una variante de lipasa que comprende una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, N39A,C,D,E,F(G,I,K,L,M,P,Q,R,T,V,W,Y y G91 D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa para preparar partículas de lipasa como se describe en la patente europea núm. EP1 1 170520.

En algunas modalidades, el método para preparar partículas de lipasa comprende: (a) evaluar la sensibilidad al catalizador de blanqueo de por lo menos una enzima al determinar el rendimiento de lavado para una combinación de la enzima con un catalizador de blanqueo y una fuente de peroxiácidos orgánicos y al compararlo con el rendimiento sin el catalizador de blanqueo para identificar una enzima sensible al catalizador de blanqueo; (b) proporcionar un núcleo que comprende la enzima sensible y que envuelve el núcleo con un recubrimiento de liberación retardada, en donde la por lo menos única enzima es una variante de lipasa que comprende una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones T37A,D,E,F,G,H,I,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, NSQA.C E.F I.K^M.P R V.W.Y y G91 D,H,I,P,Q del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1.

Preferentemente, la lipasa está presente en la composición en cantidades de 0.00001 % a 2 %, con mayor preferencia, de 0.0001 % a 0.02 %, con la máxima preferencia, de 0.001 % a 0.01 % en peso. Típicamente, la composición de limpieza y/o tratamiento está presente en agua en una cantidad de 0.001 a 5 %, de manera que las concentraciones preferidas de variante de lipasa en la etapa de tratamiento acuoso son de 0.000001 a 1000 ppm.

Componente blanqueador El componente blanqueador adecuado para incorporar en los métodos y composiciones de la presente invención comprende uno o una mezcla de más de uno de los componentes blanqueadores. Los componentes blanqueadores adecuados incluyen catalizadores de blanqueamiento, fotoblanqueadores, activadores de blanqueo, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados y mezclas de estos. Generalmente, cuando se usa un componente de blanqueamiento, las composiciones de la presente invención pueden comprender de aproximadamente 0.00001 a 90 % en peso, preferentemente, de 0.001 % a aproximadamente 50 % o, incluso, de aproximadamente 0.0001 % a aproximadamente 25 % en peso de componente de blanqueamiento de la composición limpiadora en cuestión. Los ejemplos de componentes blanqueadores adecuados incluyen: (1) Perácidos preformados: Los perácidos preformados adecuados incluyen, pero no se limitan a, compuestos seleccionados del grupo que consiste en peroxiácidos preformados o sales de estos, típicamente un ácido peroxicarboxílico o una sal de este, o un ácido peroxisulfónico o una sal de este.

El peroxiácido preformado o la sal de éste son preferentemente un ácido peroxicarboxílico o una sal de éste que, típicamente, tienen una estructura química correspondiente a la siguiente fórmula: en donde: R 4 se selecciona de grupos alquilo, aralquilo, cicloalquilo, arilo o heterocíclicos; el grupo R14 puede ser lineal o ramificado, sustituido o no sustituido; y Y es cualquier contraión adecuado que logre la neutralidad de carga eléctrica, preferentemente, Y se selecciona de hidrógeno, sodio o potasio. Preferentemente, R14 es un alquilo lineal o ramificado, sustituido o no sustituido de C6-9. Preferentemente, el peroxiácido o la sal de este se seleccionan de ácido peroxihexanoico, ácido peroxiheptanoico, ácido peroxioctanoico, ácido peroxinonanoico, ácido peroxidecanoico, cualquier sal de estos o cualquier combinación de estos. Los peroxiácidos particularmente preferidos son ácidos ftalimido-peroxi-alcanoicos, particularmente, ácido e-ftalimido peroxi-hexanoico (PAP). Preferentemente, el peroxiácido o la sal de este tienen una temperatura de fusión de 30 °C a 60 °C.

El peroxiácido preformado o la sal de éste pueden ser, además un ácido peroxisulfónico o una sal de este que, típicamente, tienen una estructura química correspondiente a la siguiente fórmula: en donde: R15 se selecciona de grupos alquilo, aralquilo, cicloalquilo, arilo o heterocíclicos; el grupo R15 puede ser lineal o ramificado, sustituido o no sustituido; y Z es cualquier contraión adecuado que logra la neutralidad de carga eléctrica, preferentemente, Z se selecciona de hidrógeno, sodio o potasio. Preferentemente, R15 es un alquilo lineal o ramificado, sustituido o no sustituido de C6-9. Preferentemente, los componentes blanqueadores pueden estar presentes en las composiciones de la invención en una cantidad de 0.01 a 50 %, con la máxima preferencia, de 0.1 % a 20 %. (2) Las fuentes de peróxido de hidrógeno incluyen, por ejemplo, sales de perhidrato inorgánico, que incluyen sales de metal alcalino, tales como sales sódicas de perborato (usualmente, mono- o tetra-hidrato), percarbonato, persulfato, perfosfato, sales de persilicato y mezclas de estos. En un aspecto de la invención, las sales inorgánicas de perhidrato se pueden seleccionar del grupo que consiste en sales sódicas de perborato, percarbonato y mezclas de estas. Cuando se usan sales inorgánicas de perhidrato, su concentración varía, típicamente, de 0.05 % en peso a 40 % en peso, o de 1 % en peso a 30 % en peso de la composición total y, típicamente, se incorporan en esas composiciones como un sólido cristalino que puede estar recubierto. Los recubrimientos adecuados incluyen sales inorgánicas, tales como silicato de metales alcalinos, sales de carbonato o borato o mezclas de estos o materiales orgánicos, tales como polímeros, ceras, aceites o jabones grasos solubles o dispersables en agua.

Preferentemente, los componentes blanqueadores pueden estar presentes en las composiciones de la invención en una cantidad de 0.01 a 50 %, con la máxima preferencia, de 0.1 % a 20 %. (3) Los activadores de blanqueo adecuados son los que tienen R-(C=0)-L, en donde R es un grupo alquilo, opcionalmente, ramificado que tiene, cuando el activador de blanqueo es hidrófobo, de 6 a 14 átomos de carbono o de 8 a 12 átomos de carbono y, cuando el activador de blanqueo es hidrófilo, menos de 6 átomos de carbono o incluso menos de 4 átomos de carbono; y L es un grupo saliente. Los ejemplos adecuados de grupos de partida son el ácido benzoico y derivados de ellos, especialmente el sulfonato de benceno. Los activadores de blanqueador adecuados incluyen sulfonato de dodecanoil oxibenceno, sulfonato de decanoil oxibenceno, ácido decanoil oxibenzoico o sales de este, sulfonato de 3,5,5-trimetil hexanoiloxibenceno, tetraacetiletilendiamina (TAED) y sulfonato de nonanoiloxibenceno (NOBS). Los activadores de blanqueo adecuados se describen, además, en la patente núm. WO 98/17767. Aunque puede emplearse cualquier activador de blanqueador adecuado, en un aspecto de la invención, la composición de limpieza de la presente puede comprender NOBS, TAED o mezclas de estos. Cuando está presente en el producto de consumo, el perácido y/o activador de blanqueamiento está presente, generalmente, en una cantidad de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 60 % en peso, de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 40 % en peso o, incluso, de aproximadamente 0.6 a aproximadamente 10 % en peso en base al producto para el cuidado de telas y del hogar. Uno o más perácidos hidrofóbicos o precursores de estos pueden usarse combinados con uno o más perácidos hidrófilos o precursores de estos.

Preferentemente, los componentes blanqueadores pueden estar presentes en las composiciones de la invención en una cantidad de 0.01 a 50 %, con la máxima preferencia, de 0.1 % a 20 %.

Las cantidades de fuentes de peróxido de hidrógeno y perácido o activador de blanqueamiento se pueden seleccionar de tal manera que la proporción molar del oxígeno disponible (de la fuente de peróxido) y el perácido sea de 1 :1 a 35:1 , o aún de 2:1 a 10:1. (4) Peróxidos de diacilo: las especies blanqueadoras de peróxido de diacilo preferidas incluyen las seleccionadas de peróxidos de diacilo de la fórmula general: R1-C(0)-OQ-(0)C-R2 en donde R1 representa un alquilo de C6-Ci8, preferentemente, un grupo alquilo de C6-Ci2 que contiene una cadena lineal de al menos 5 átomos de carbono y que contiene, opcionalmente, uno o más sustituyentes (p. ej., -N+ (CH3)3, -COOH o -CN) y/o una o más entidades interruptoras (p. ej., -CONH- o -CH=CH-) interpoladas entre átomos de carbono adyacentes del radical alquilo, y R2 representa un grupo alifático compatible con una entidad de peróxido, de tal manera que R1 y R2 en conjunto contienen un total de 8 a 30 átomos de carbono. En un aspecto preferido, R1 y R2 son cadenas alquilo lineales no sustituidas de Ce-Cía- Con la máxima preferencia, R1 y R2 son idénticos. Se prefieren, particularmente, los peróxidos de diacilo, en donde ambos R1 y R2 son grupos alquilo de C6-Ci2. Preferentemente, al menos uno de los grupos R (Ri o R2), con la máxima preferencia solo uno de ellos, no contiene ramificaciones ni anillos colgantes en la posición alfa o, preferentemente, en las posiciones alfa o beta, o con la máxima preferencia, ni en las posiciones alfa, beta o gama. En otra modalidad más preferida, la DAP puede ser asimétrica, de tal manera que, preferentemente, la hidrólisis del grupo acilo R1 es rápida para generar perácido, pero la hidrólisis del grupo acilo R2 es lenta.

La especie de blanqueamiento de peróxido de tetraacilo se selecciona, preferentemente, de peróxidos de tetraacilo que tienen la siguiente fórmula general: R3-C(0)-00-C(0)-(CH2)n-C(0)-00-C(0)-R3 en donde R3 representa un grupo alquilo de C1 -C9, preferentemente, de C3 ¦ C7, y n representa un entero de 2 a 12, preferentemente, 4 a 10 inclusive.

Preferentemente, la especie de blanqueamiento de peróxido de diacilo o tetraacilo se encuentra presente en una cantidad suficiente como para proporcionar por lo menos 0.5 ppm, con mayor preferencia, por lo menos 10 ppm y, aun con mayor preferencia, por lo menos 50 ppm, en peso del licor de lavado. En una modalidad preferida, la especie de blanqueamiento está presente en una cantidad suficiente como para proporcionar de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 300 ppm, con mayor preferencia, de aproximadamente 30 a aproximadamente 150 ppm, en peso del licor de lavado.

Preferentemente, el componente blanqueador comprende un catalizador de blanqueo (5 y 6). (5) Se prefiere los catalizadores de blanqueo orgánicos (no metálicos) que incluyen el catalizador de blanqueo con la capacidad de aceptar un átomo de oxígeno de un peroxiácido y/o sal de este y trasladar el átomo de oxígeno a un sustrato oxidable. Los catalizadores de blanqueamiento adecuados incluyen, pero no se limitan a: cationes y poliiones de ¡minio; zwitteriones de ¡minio; aminas modificadas; óxidos de aminas modificados; N-sulfonilo ¡minas; N-fosfonil ¡minas; N-acil ¡minas; dióxidos de tiadiazol; perfluoroiminas; cetonas de azúcar cíclicas y mezclas de estos.

Los cationes y poliones de ¡minio adecuados incluyen, pero no se limitan a, N-metil-3,4-d¡hidroisoqu¡nolina tetrafluoroborato, preparados como se describen en Tetrahedron (1992), 49(2), 423-38 (consulte, por ejemplo, compuesto 4, pág. 433); Sulfonato de N-metil-3,4-dihidroisoquinolinio p-tolueno, preparado como se describe en la patente de los Estados Unidos núm. 5,360,569 (ver, p. ej., columna 1 1 , Ejemplo 1 ); y el sulfonato de N-octilo-3,4-dihidroisoquinolinio p-tolueno, preparado como se describe en la patente de los Estados Unidos núm. 5,360,568 (ver, p. ej., columna 10, Ejemplo 3).

Los zwitteriones de ¡minio adecuados incluyen, pero no se limitan a, la sal interna, N-(3-sulfopropilo)-3,4-dihidroisoquinolinio, preparada como se describe en la patente de los Estados Unidos núm. 5,576,282 (ver, por ejemplo, Columna 31 , Ejemplo II); N-[2-(sulfooxi)dodecilo]-3,4-dihidroisoquinolinio, sal interna, preparada como se describe en la patente de los Estados Unidos núm. 5,817,614 (ver, por ejemplo, Columna 32, Ejemplo V); 2-[3-[(2-etilhexilo)oxi]-2-(sulfooxi)propilo]-3,4-dihidroisoquinolina, sal interna, preparado como se describe en la patente núm. WO05/047264 (ver, por ejemplo, página 18, Ejemplo 8), y 2-[3-[(2-butiloctil)oxi]-2-(sulfooxi)propilo]-3,4-dihidroisoquinolina, sal interna.

Los catalizadores de transferencia de oxígeno de amina modificada adecuados incluyen, pero no se limitan a, 1 ,2,3,4-tetrahidro-2-metil-1 -isoquinolina, que puede elaborarse de acuerdo con los procedimientos descritos en las Tetrahedron Letters (1987), 28(48), 6061-6064. Los catalizadores de transferencia de oxígeno de óxido de amina modificado adecuados incluyen, pero no se limitan a, sodio 1-hidroxi-N-oxi-N-[2-(sulfooxi)decilo]-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolina.

Los catalizadores de transferencia de oxígeno N-sulfonil ¡mina adecuados incluyen, pero no se limitan a, 3-metil-1 ,2-bencisotiazol 1 ,1 -dióxido, preparado de conformidad con el procedimiento descrito en el Journal of Organic Chemistry (1990), 55(4), 1254-61.

Los catalizadores de transferencia de oxígeno N-fosfonil imina adecuados incluyen, pero no se limitan a, [R-(E)]-N-[(2-cloro-5-nitrofenil)metilen]-P-fenil-P-(2,4,6- trimetilfenil)- fosfónico amida, que puede elaborarse de conformidad con los procedimientos descritos en Journal of the Chemical Society, Chemical Communications (1994), (22), 2569-70.

Los catalizadores de transferencia de oxígeno N-acil ¡mina adecuados incluyen, pero no se limitan a, [N(E)]-N-(fenilmetilen)acetamida, que puede elaborarse de conformidad con los procedimientos descritos en Journal of Chemistry (2003), 77(5), 577-590.

Los catalizadores de transferencia de oxígeno de dióxido de tiadiazol adecuados incluyen, pero no se limitan a, 3-metil-4-fenil-1,2,5-tiadiazol 1 ,1-dióxido, que puede estar elaborado de acuerdo con los procedimientos que se describen en la patente de los Estados Unidos núm. 5,753,599 (columna 9, Ejemplo 2).

Los catalizadores de transferencia de oxígeno perfluoroimina adecuados incluyen, pero no se limitan a, (Z)-2,2,3,3,4,4,4-heptafluoro-N-(nonafluorobutil)butanimidoil fluoruro, que puede prepararse de acuerdo con los procedimientos que se describen en la revista "Tetrahedron Letters", 1994, Vol. 35(34), págs. 6329-30.

Los catalizadores de transferencia de oxígeno de azúcar cíclica de cetona adecuados incluyen, pero no se limitan a, 1 ,2:4,5-di-0-isopropilideno-D-eritro-2,3-hexodiuro-2,6-piranosa, como se prepara en la patente de los Estados Unidos núm. 6,649,085 (Columna 12, Ejemplo 1).

Preferentemente, el catalizador de blanqueamiento comprende un grupo funcional ¡minio y/o carbonilo y es capaz, típicamente, de formar un grupo funcional oxaziridinio y/o dioxirano con la aceptación de un átomo de oxígeno, especialmente con la aceptación de un átomo de oxígeno de un peroxiácido y/o sal de este. Preferentemente, el catalizador de blanqueamiento comprende un grupo funcional oxaziridinio y/o es capaz de formar un grupo funcional oxaziridinio con la aceptación de un átomo de oxígeno, especialmente con la aceptación de un átomo de oxígeno de un peroxiácido y/o sal de este. Preferentemente, el catalizador de blanqueamiento comprende un grupo funcional ¡minio cíclico, preferentemente, en donde la entidad cíclica tiene un tamaño de anillo de cinco a ocho átomos (incluido el átomo de nitrógeno), preferentemente, seis átomos. Preferentemente, el catalizador de blanqueamiento comprende un grupo funcional ariliminio, preferentemente, un grupo funcional ariliminio bicíclico, preferentemente un grupo funcional 3,4-dihidroisoquinolina. Típicamente, el grupo funcional ¡mina es un grupo funcional imina cuaternario y, típicamente, es capaz de formar un grupo funcional oxaziridinio cuaternario al aceptar un átomo de oxígeno, especialmente, al aceptar un átomo de oxígeno de un peroxiácido y/o sal de este. En otro aspecto, la composición detergente comprende un componente blanqueador que tiene un logP0 w no mayor que 0, no mayor que -0.5, no mayor que -1.0, no mayor que -1.5, no mayor que -2.0, no mayor que -2.5, no mayor que -3.0 o incluso no mayor que -3.5. El método para determinar el logPo/w se describe en mayor detalle a continuación.

Típicamente, el ingrediente de blanqueo tiene la capacidad de generar una especie de blanqueador que tiene un XSo de 0.01 a aproximadamente 0.30, de 0.05 a aproximadamente 0.25 o aun de aproximadamente 0.10 a 0.20. El método para determinar el Xso se describe en mayor detalle a continuación. Por ejemplo, los ingredientes de blanqueo que tienen una estructura de isoquinolina tienen la capacidad de generar una especie de blanqueador que tiene una estructura de oxaziridinio. En este ejemplo el Xso es el de la especie de blanqueador de oxaziridinio.

Preferentemente, el catalizador de blanqueamiento tiene una estructura química que corresponde a la siguiente fórmula química, en donde: n y m son, independientemente, de 0 a 4, preferentemente, n y m son ambos 0; cada R1 se selecciona, independientemente, de un radical sustituido o no sustituido seleccionado del grupo que consiste en radicales hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilo fusionado, anillo heterocíclico, anillo heterocíclico fusionado, nitro, halo, ciano, sulfonato, alcoxilo, ceto, carboxilo y carboalcoxilo; y dos R1 vecinas sustituyentes pueden combinarse para formar un arilo fundido, carbocíclico fundido o anillo heterocíclico fundido; cada R2 se selecciona, independientemente, de un radical sustituido o no sustituido seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, alcarilo, arilo, aralquilo, alquílenos, anillo heterocíclico, alcoxis, grupos arilcarbonil, grupos carboxialquilo y grupos amida; cualquier R2 puede unirse con otra R2 para formar parte de un anillo común; cualquier R germinal2 puede combinarse para formar un carbonilo; y dos R2 cualesquiera pueden combinarse para formar una entidad insaturada sustituido o no substituido fundida; R3 es un alquilo de a C20 sustituido o no sustituido; R4 es hidrógeno o la entidad Qt-A, en donde: Q es un alquileno ramificado o no ramificado, t = 0 o 1 y A es un grupo aniónico seleccionado del grupo que consiste en OS03', S03", C02", OC02 , OP032', OP03H" y OP02 ; R5 es hidrógeno o la entidad -CR11R12-Y-Gb-Yc-[(CR9R10)y-O]k-R8, en donde: cada Y se selecciona, independientemente, del grupo que consiste en O, S, N-H, o N-R8; y cada R8 se selecciona, independientemente, del grupo que consiste en alquilo, arilo y heteroarilo, tales entidades son sustituidas o no sustituidas, y ya sean tanto sustituidas como no sustituidas, tales entidades tienen menos de 21 carbonos; cada G se selecciona, independientemente, del grupo que consiste en CO, S02, SO, PO y P02; R9 y R10 se seleccionan, independientemente, del grupo que consiste en H y alquilo de Cr C4; R11 y R12 se seleccionan, independientemente, del grupo que consiste en H y alquilo, o cuando se toman juntos pueden unirse para formar un carbonilo; b = 0 o 1 ; c puede ser igual a 0 o 1 , pero debe ser igual a 0 cuando b es 0; y es un entero entre 1 y 6; k es un entero entre 0 y 20; y R6 es H o una entidad alquilo, arilo o heteroarilo; tales entidades pueden ser sustituidas o no sustituidas; y X, si está presente, es una carga adecuada que equilibra al contraión, preferentemente, X está presente cuando R4 es hidrógeno, las X adecuadas incluyen, pero no se limitan a, cloruro, bromuro, sulfato, metosulfato, sulfonato, sulfonato de p-tolueno, tetrafloururo de boro y fosfato.

En una modalidad de la presente invención, el catalizador de blanqueamiento tiene una estructura que corresponde a la fórmula general a continuación: en donde R13 es grupo alquilo ramificado que contiene de tres a 24 átomos de carbono (incluso los átomos de carbono ramificadores) o un grupo alquilo lineal que contiene de uno a 24 átomos de carbono; preferentemente, R13 es un grupo alquilo ramificado que contiene de ocho a 18 átomos de carbono o grupo alquilo lineal que contiene de ocho a dieciocho átomos de carbono; preferentemente, R13 se selecciona del grupo que consiste en 2-propilheptilo, 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, n-dodecilo, n-tetradecilo, n-hexadecilo, n-octadecilo, isononilo, isodecilo, isotridecilo e isopentadecilo; preferentemente, R 3 se selecciona del grupo que consiste en 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, isotridecilo e isopentadecilo.

Preferentemente, el componente blanqueador comprende una fuente de perácido además del catalizador de blanqueo, particularmente, catalizador de blanqueo orgánico. La fuente de perácido se puede seleccionar de (a) perácido preformado; (b) sal de percarbonato, perborato o persulfato (fuente de peróxido de hidrógeno), preferentemente, en combinación con un activador de blanqueo; y (c) enzima perhidrolasa y un éster para formar perácido in situ en presencia de agua en la etapa de tratamiento de un textil o superficie dura.

Cuando están presentes, el perácido y/o activador de blanqueamiento se encuentra presente, generalmente, en la composición en cantidades de aproximadamente 0.1 % en peso a aproximadamente 60 % en peso, de aproximadamente 0.5 % en peso a aproximadamente 40 % en peso o incluso de aproximadamente 0.6 % en peso a aproximadamente 10 % en peso en función de la composición. Uno o más perácidos hidrofóbicos o precursores de estos pueden usarse combinados con uno o más perácidos hidrófilos o precursores de estos.

Las cantidades de fuentes de peróxido de hidrógeno y perácido o activador de blanqueamiento se pueden seleccionar de tal manera que la proporción molar del oxígeno disponible (de la fuente de peróxido) y el perácido sea de 1 :1 a 35:1 , o aún de 2:1 a 10:1. (6) Catalizadores de blanqueo que contienen metal. El componente blanqueador puede estar proporcionado por un complejo de metal catalítico. Un tipo de catalizador de blanqueador a base de metal es un sistema catalizador que comprende un catión de metal de transición de actividad catalítica blanqueadora definida tal como cationes de cobre, hierro, titanio, rutenio, tungsteno, molibdeno o manganeso, un catión auxiliar de metal de poca actividad o sin actividad catalítica blanqueadora tal como cationes de zinc o aluminio, y un secuestrante con constantes definidas de estabilidad para los cationes de metal catalíticos y auxiliares, especialmente ácido etilendiaminotetraacético, ácido etilendiaminotetra(metilen)fosfónico y sales solubles en agua de estos. Estos catalizadores se describen en la patente de los Estados Unidos núm. 4,430,243. Los catalizadores preferidos se describen en la patente núm. WO09/839406, la patente de los Estados Unidos núm. 6218351 y la patente núm. WO00/012667. Se prefiere, particularmente, el catalizador de metales de transición o ligandos de este que son ligandos donantes de N polidentados de puente cruzado.

Cuando sea conveniente, las composiciones de la presente pueden catalizarse por medio de un compuesto de manganeso. Esos compuestos y las concentraciones de uso son muy conocidas en la materia e incluyen, por ejemplo, los catalizadores a base de manganeso descritos en la patente de los Estados Unidos núm. 5,576,282.

Los catalizadores de blanqueo de cobalto útiles en la presente son conocidos y se describen, p. ej., en las patentes de los Estados Unidos núms. 5.597.936 y núm. 5,595,967 Estos catalizadores a base de cobalto se preparan rápidamente por medio de procedimientos conocidos como los descritos, por ejemplo, en las patentes de los Estados Unidos núms. 5,597,936 y 5,595,967.

Las composiciones de la presente invención pueden incluir, además, adecuadamente un complejo de metal de transición de ligandos tales como bispidonas (Estados Unidos 7,501 ,389) o ligandos rígidos macropolicíclicos, abreviados como MRL (por sus siglas en inglés). Por una cuestión práctica y no por vía de limitación, las composiciones y los procesos de la presente pueden ajustarse para proporcionar como mínimo una parte por cien millones de las especies MRL activas en el medio de lavado acuoso y, típicamente, proporcionarán de aproximadamente 0.005 ppm a aproximadamente 25 ppm, de aproximadamente 0.05 ppm a aproximadamente 10 ppm, o incluso de aproximadamente 0.1 ppm a aproximadamente 5 ppm de MRL en el licor de lavado.

Los metales de transición adecuados en el catalizador de blanqueador de metal de transición de la presente incluyen, por ejemplo, manganeso, hierro y cromo. Los MRL adecuados incluyen 5,12-dietil-1 ,5,8,12-tetraazobiciclo[6.6.2]hexadecano.

Los MRL de metales de transición adecuados se preparan fácilmente por procedimientos conocidos, tales como los que se enseñan, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos núm. 6,225,464 y en la patente núm. WO 00/32601. (7) Fotoblanqueadores. Los fotoblanqueadores adecuados incluyen, por ejemplo, talocianina de zinc sulfonada, ftalocianinas de aluminio sulfonadas, tintes de xanteno y mezclas de estos. Los componentes blanqueadores preferidos para usar en las presentes composiciones de la presente invención comprenden una fuente de peróxido de hidrógeno, activador de blanqueo y/o peroxiácido orgánico, opcionalmente, producido in situ por la reacción de una fuente de peróxido de hidrógeno y activador de blanqueo, en combinación con un catalizador de blanqueo. Los componentes blanqueadores preferidos comprenden catalizadores de blanqueamiento, preferentemente, catalizadores de blanqueamiento orgánicos, como se describió anteriormente.

Los componentes blanqueadores particularmente preferidos son los catalizadores de blanqueo, particularmente, los catalizadores orgánicos de blanqueo.

Las composiciones de la presente invención son particularmente composiciones sólidas o líquidas de limpieza y/o tratamiento. En un aspecto preferido de la presente invención, la composición tiene una forma de dosis unitaria de un solo o múltiples compartimientos.

Materiales auxiliares Aunque no es esencial para los propósitos de la presente invención, la lista no limitante de complementos descritos de aquí en adelante es adecuada para usar en las composiciones y métodos de la presente descripción y, de ser posible, puede incorporarse en ciertas modalidades de la presente invención, por ejemplo, para facilitar o mejorar el rendimiento de limpieza, para el tratamiento del sustrato a limpiar o para modificar la estética del producto de consumo como es el caso con los perfumes, colorantes, tintes o lo similar. Los niveles de cualquiera de esos materiales adicionales incorporados en cualquier producto para el cuidado de las telas y el hogar son adicionales al nivel de cualquier material para incorporación mencionado anteriormente. La naturaleza precisa de estos componentes adicionales, así como los niveles de incorporación de estos, dependen de la forma física del producto de consumo y de la naturaleza de la operación limpiadora para la cual se van a usar. Los materiales auxiliares adecuados incluyen, pero no se limitan a, surfactantes, aditivos, agentes quelantes, agentes inhibidores de transferencia de colorante, dispersantes, enzimas y estabilizadores enzimáticos, materiales catalíticos, activadores de blanqueo, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados, agentes dispersantes poliméricos, agentes de eliminación/antirredepósito de manchas arcillosas, abrillantadores, supresores de espuma, tintes, tintes matizantes, perfumes, sistemas de suministro de perfume, agentes elastizantes de la estructura, suavizantes para telas, portadores, hidrótropos, auxiliares de proceso, solventes y/o pigmentos. Adicionalmente a la siguiente descripción, los ejemplos adecuados de estos otros componentes adicionales y las concentraciones de uso se encuentran en las patentes de los Estados Unidos núms. 5,576,282, 6,306,812 B1 y 6,326,348 B1 , que se incorporan como referencia.

Tal como se mencionó, los ingredientes adicionales no son esenciales para los productos de consumo de los solicitantes. Por lo tanto, ciertas modalidades de los productos de consumo de los solicitantes no contienen uno o más de los siguientes materiales auxiliares: surfactantes, aditivoes, agentes quelantes, agentes inhibidores de transferencia de colorante, dispersantes, enzimas adicionales y estabilizadores enzimáticos, materiales catalíticos, activadores de blanqueo, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados, agentes dispersantes poliméricos, agentes de eliminación/antirredepósito de manchas arcillosas, abrillantadores, supresores de espuma, tintes, perfumes, sistemas de suministro de perfume, agentes elastizantes de la estructura, suavizantes para telas, portadores, hidrótropos, auxiliares de proceso, solventes y/o pigmentos. Sin embargo, cuando se incluye uno o más materiales adicionales, esos materiales adicionales pueden estar presentes tal como se describe más adelante: Agentes matizantes de telas apropiados La composición puede comprender un agente matizante de telas. Los agentes matizantes de telas adecuados incluyen tintes, conjugados de tinte-arcilla y pigmentos. Los colorantes apropiados incluyen colorantes de moléculas pequeñas y colorantes poliméricos. Los tintes de moléculas pequeñas apropiados incluyen tintes de moléculas pequeñas seleccionados del grupo que consiste en los colorantes comprendidos en las clasificaciones del índice de color (C.l. por sus siglas en inglés) azul directo, rojo directo, violeta directo, azul ácido, rojo ácido, violeta ácido, azul básico, violeta básico y rojo básico, o mezclas de estos.

En otro aspecto, los tintes de moléculas pequeñas adecuados incluyen tintes de moléculas pequeñas seleccionados del grupo que consiste en los números de índice de color (Society of Dyers and Colourists, Bradford, Reino Unido) violeta directo 9, violeta directo 35, violeta directo 48, violeta directo 51 , violeta directo 66, violeta directo 99, azul directo 1 , azul directo 71 , azul directo 80, azul directo 279, rojo ácido 17, rojo ácido 73, rojo ácido 88, rojo ácido 150, violeta ácido 15, violeta ácido 17, violeta ácido 24, violeta ácido 43, rojo ácido 52, violeta ácido 49, violeta ácido 50, azul ácido 15, azul ácido 17, azul ácido 25, azul ácido 29, azul ácido 40, azul ácido 45, azul ácido 75, azul ácido 80, azul ácido 83, azul ácido 90 y azul ácido 113, negro ácido 1 , violeta básico 1 , violeta básico 3, violeta básico 4, violeta básico 10, violeta básico 35, azul básico 3, azul básico 16, azul básico 22, azul básico 47, azul básico 66, azul básico 75, azul básico 159 y mezclas de estos. En otro aspecto, los colorantes de moléculas pequeñas adecuados incluyen los colorantes de moléculas pequeñas seleccionados del grupo que consiste en los números de índice de color (Society of Dyers and Colourists, Bradford, Reino Unido) violeta ácido 17, violeta ácido 43, rojo ácido 52, rojo ácido 73, rojo ácido 88, rojo ácido 150, azul ácido 25, azul ácido 29, azul ácido 45, azul ácido 113, negro ácido 1 , azul directo 1 , azul directo 71 , violeta directo 51 y mezclas de estos. En otro aspecto, los tintes de moléculas pequeñas adecuados incluyen tintes de moléculas pequeñas seleccionados del grupo que consiste en los números del índice de color (Society of Dyers and Colourists, Bradford, Gran Bretaña) violeta ácido 17, azul directo 71 , violeta directo 51 , azul directo 1 , rojo ácido 88, rojo ácido 150, azul ácido 29, azul ácido 113 o mezclas de estos.

Tintes poliméricos adecuados incluyen tintes poliméricos seleccionados del grupo que consiste en polímeros que contienen cromógenos conjugados (conjugados tinte-polímero), y polímeros con cromógenos copolimerizados dentro de la cadena principal del polímero, y mezclas de estos.

En otro aspecto, los colorantes poliméricos apropiados incluyen colorantes poliméricos seleccionados del grupo que consiste en colorantes sustantivos de telas distribuidos con el nombre comercial Liquitint® (Milliken, Spartanburg, Carolina del Sur, Estados Unidos), conjugados de colorante y polímero formados a partir de por lo menos un colorante reactivo y un polímero seleccionado del grupo que consiste en polímeros que comprenden una entidad seleccionada del grupo que consiste en una entidad hidroxilo, una entidad amino primaria y una entidad amino secundaria, una entidad tiol y mezclas de estos. En aún otro aspecto, los colorantes poliméricos adecuados incluyen aquellos seleccionados del grupo que consiste en Liquitint® (Milliken, Spartanburg, South Carolina, Estados Unidos) Violeta CT, carboximetilcelulosa (CMC) conjugada con un colorante azul reactivo, violeta reactivo o rojo reactivo, tal como CMC conjugada con Cl azul reactivo 19, comercializado por Megazyme, Wicklow, Irlanda, con el nombre de producto AZO-CM-CELLULOSE, código de producto S-ACMC, colorantes poliméricos de trifenil-metano alcoxilado, colorantes poliméricos de tiofeno alcoxilado, y mezclas de estos.

Los tintes tonalizadores preferidos incluyen los agentes blanqueadores que se encuentran en la patente núm. WO 08/87497 A1. Estos agentes blanqueadores pueden caracterizarse mediante la siguiente estructura (I): R2 pueden seleccionarse independientemente de: a) [(CH2CR'HO)x(CH2CR"HO)yH] en donde R' se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, CH20(CH2CH20)ZH, y mezclas de estos; en donde R" se selecciona del grupo que consiste en H, CH20(CH2CH20)ZH, y mezclas de estos; en donde x + y= 5; en donde y > 1 ; y en donde z = de 0 a 5; alquilo, arilo o alquilarilo y R2 = [(CH2CR'HO)x(CH2CR"HO)yH] en donde R' se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, CH20(CH2CH20)zH, y mezclas de estos; en donde R" se selecciona del grupo que consiste en H, CH20(CH2CH20)ZH, y mezclas de estos; en donde x + y= 10; en donde y= 1 ; y en donde z = de 0 a 5; Ri = [CH2CH2(OR3)CH2OR4] y R2 = [CH2CH2(0 R3)CH20 R4] en donde R3 se selecciona del grupo que consiste en H, (CH2CH20)zH, y mezclas de estos; y en donde z = de 0 a 10; en donde R4 se selecciona del grupo que consiste en alquilo de Ci- Ci6, grupos arilo, y mezclas de estos; y en donde R1 y R2 pueden seleccionarse independientemente del producto de adición amino de óxido de estireno, glicidil metil éter, isobutil glicidil éter, isopropilglicidil éter, t-butil glicidil éter, 2-eti Ihexi Ig I icid i I éter y glicidilhexadecil éter, seguido de la adición de 1 a 10 unidades de óxido de alquileno. agente blanqueador preferido de la presente invención puede caracterizarse por la siguiente estructura (II): (II) en donde R' se selecciona del grupo que consiste en H, CH3, CH20(CH2CH20)ZH, y mezclas de estos; en donde R" se selecciona del grupo que consiste en H, CH20(CH2CH20)ZH, y mezclas de estos; en donde x + y= 5; en donde y= 1 ; y en donde z = 0 a 5.

Un agente blanqueador adicional preferido de la presente invención puede caracterizarse por la siguiente estructura (III): (III) que comprende, típicamente, una mezcla que tiene un total de 5 grupos EO. Las moléculas preteridas adecuadas son las de la Estructura I que tienen los siguientes grupos colgantes en la "parte a" que se mencionó anteriormente: Otros agentes blanqueadores útiles incluyen los descritos en la patente de los Estados Unidos núm. 2008 3451 1 A1 (Unilever). Un agente preferido es "Violet 13".

Los conjugados apropiados de colorante y arcilla incluyen conjugados de colorante y arcilla seleccionados del grupo que consiste en por lo menos un colorante catiónico/básico y una arcilla esmectita, y mezclas de estos. En otro aspecto, los conjugados apropiados de colorante y arcilla incluyen conjugados de colorante y arcilla seleccionados del grupo que consiste en un colorante catiónico/básico seleccionado del grupo que consiste en los colores del índice de color amarillo básico 1 a 108, naranja básico 1 a 69, rojo básico 1 a 1 18, violeta básico 1 a 51 , azul básico 1 a 164, verde básico 1 a 14, marrón básico 1 a 23, negro básico 1 a 11 ; y una arcilla seleccionada del grupo que consiste en arcilla montmorilonita, arcilla hectorita, arcilla saponita y mezclas de estas. En todavía otro aspecto, conjugados de arcilla-tinte adecuados incluyen conjugados de arcilla-tinte seleccionados del grupo que consiste en: azul básico montmorillonita B7 C.l. 42595 conjugado, azul básico montmorillonita B9 C.l. 52015 conjugado, violeta básico montmorillonita V3 C.l. 42555 conjugado, verde básico montmorillonita G1 C.l. 42040 conjugado, rojo básico montmorillonita R1 C.l. 45160 conjugado, negro básico montmorillonita C.l. 2 conjugado, azul básico hectorita B7 C.l. 42595 conjugado, azul básico hectorita B9 C.l. 52015 conjugado, violeta básico hectorita V3 C.l. 42555 conjugado, verde básico hectorita G1 C.l. 42040 conjugado, rojo básico hectorita R1 C.l. 45160 conjugado, negro básico hectorita C.l. 2 conjugado, azul básico saponita B7 C.l. 42595 conjugado, azul básico saponita B9 C.l. 52015 conjugado, violeta básico saponita V3 C.l. 42555 conjugado, verde básico saponita G1 C.l. 42040 conjugado, rojo básico saponita R1 C.l. 45160 conjugado, negro básico saponita C.l. 2 conjugado y mezclas de estos.

Los pigmentos apropiados incluyen pigmentos seleccionados del grupo que consiste en flavantrona, indantrona, indantrona clorinada que contiene entre 1 y 4 átomos de cloro, pirantrona, dicloropirantrona, monobromodicloropirantrona, dibromodicloropirantrona, tetrabromopirantrona, diimida de ácido perileno-3,4,9,10-tetracarboxílico, en donde los grupos ¡mida pueden estar no sustituidos o sustituidos por alquilo de C1-C3 o un radical fenilo o heterocíclico, y en donde los radicales fenilo y heterocíclicos también pueden incluir sustituyentes que no confieren solubilidad en agua, amidas de ácido antrapirimidinocarboxílico, violantrona, isoviolantrona, pigmentos de dioxazina, ftalocianina de cobre que puede contener hasta 2 átomos de cloro por molécula, ftalocianina de policloro-cobre o ftalocianina de polibromocloro-cobre que contiene hasta 14 átomos de bromo por molécula, y mezclas de estos.

En otro aspecto, los pigmentos apropiados incluyen pigmentos seleccionados del grupo que consiste en azul ultramar (C.l. azul pigmento 29), violeta ultramar (C.l. violeta pigmento 15) y mezclas de estos.

Los agentes matizantes de telas mencionados anteriormente pueden usarse en conjunto (puede usarse cualquier mezcla de agentes matizantes de telas). Los agentes matizantes adecuados se describen en mayor detalle en la patente de los Estados Unidos núm. 7,208,459 B2. Las concentraciones preferidas de colorante en las composiciones de la presente invención son de 0.00001 a 0.5 % en peso o de 0.0001 a 0.25 % en peso.

La concentración preferida de tintes en agua para la etapa de tratamiento y/o limpieza es de 1 ppb a 5 ppm, preferentemente, de 10 ppb o 20 ppb a 5 ppm. En las composiciones preferidas, la concentración de surfactante es de 0.2 a 3 g/l.

Encapsulados La composición puede comprender un encapsulado. En un aspecto, el encapsulado comprende un núcleo y una cubierta que tiene una superficie interna y una superficie externa; la cubierta encapsula el núcleo.

En un aspecto de ese encapsulado, ese núcleo puede comprender un material seleccionado del grupo que consiste en perfumes; abrillantadores; tintes; repelentes de insectos; siliconas; ceras; saborizantes; vitaminas; agentes suavizantes de telas; agentes para el cuidado de la piel, en un aspecto, parafinas; enzimas; agentes antibacterianos; blanqueadores; agentes de sensación en la piel; y mezclas de estos, y la cubierta puede comprender un material seleccionado del grupo que consiste en polietilenos; poliamidas; polivinilalcoholes, que contienen, opcionalmente, otros comonómeros; poliestirenos; poliisoprenos; policarbonatos; poliésteres; poliacrilatos; aminoplastos; en un aspecto ese aminoplasto puede comprender una poliurea, poliuretano y/o poliurea-uretano; en un aspecto esa poliurea puede comprender polioximetilenurea y/o melamina formaldehído; poliolefinas; polisacáridos, en un aspecto ese polisacárido puede comprender alginato y/o quitosana; gelatina; goma laca; resinas epoxi; polímeros de vinilo; inorgánicos insolubles en agua; silicona; y mezclas de estos.

En un aspecto de ese encapsulado, ese núcleo puede comprender perfume.

En un aspecto de ese encapsulado, esa lámina puede comprender melamina formaldehído y/o melamina formalde ído reticulada.

En un aspecto los encapsulados adecuados pueden comprender un material de núcleo y una cubierta; se describe esa lámina que rodea al menos parcialmente a ese material de núcleo. Al menos 75 %, 85 % o incluso 90 % de esos encapsulados pueden tener una resistencia a la fractura de aproximadamente 0.2 MPa a aproximadamente 10 MPa, de aproximadamente 0.4 MPa a aproximadamente 5 MPa, de aproximadamente 0.6 MPa a aproximadamente 3.5 MPa o incluso de aproximadamente 0.7 MPa a aproximadamente 3 MPa; y una fuga del agente benéfico de 0 % a aproximadamente 30 %, de 0 % a aproximadamente 20 % o incluso de 0 % a aproximadamente 5 %.

En un aspecto, por lo menos 75 %, 85 % o incluso 90 % de los encapsulados puede tener un tamaño de partículas de aproximadamente 1 micrones a aproximadamente 80 micrones, de aproximadamente 5 micrones a 60 micrones, de aproximadamente 10 micrones a aproximadamente 50 micrones o incluso de aproximadamente 15 micrones a aproximadamente 40 micrones.

En un aspecto, al menos 75 %, 85 % o incluso 90 % de esos encapsulados puede tener un grosor de pared de partícula de aproximadamente 30 nm a aproximadamente 250 nm, de aproximadamente 80 nm a aproximadamente 180 nm o incluso de aproximadamente 100 nm a aproximadamente 160 nm.

En un aspecto, el material de núcleo de esos encapsulados puede comprender un material seleccionado del grupo que consiste en una materia prima de perfume y/u, opcionalmente, un material seleccionado del grupo que consiste en aceite vegetal que incluye aceites vegetales puros y/o mezclados que incluyen aceite de ricino, aceite de nuez de coco, aceite de semilla de algodón, aceite de uva, aceite de semilla de colza, aceite de soja, aceite de maíz, aceite de palma, aceite de linaza, aceite de cártamo, aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite de nuez de coco, aceite de palmiste, aceite de ricino, aceite de limón, y mezclas de estos; ésteres de aceites vegetales, ésteres que incluyen adipato de dibutilo, ftalato de dibutilo, bencil butil adipato, bencil octil adipato, fosfato de tricresilo, fosfato de trioctilo, y mezclas de estos; hidrocarburos de cadena lineal o ramificada, que incluyen aquellos hidrocarburos de cadena lineal o ramificada que tienen un punto de ebullición mayor que aproximadamente 80 °C; terfenilos parcialmente hidrogenados, ftalatos de dialquilo, bifenilos de alquilo que incluyen monoisopropilbifenilo, naftaleno alquilado que incluye dipropilnaftaleno, alcoholes de petróleo que incluyen kerosene, aceite mineral, y mezclas de estos; solventes aromáticos que incluyen benceno, tolueno y mezclas de estos; aceites de silicona; y mezclas de estos.

En un aspecto, el material de pared de esos encapsulados puede comprender una resina adecuada que incluye el producto de reacción de un aldehido y una amina, los aldehidos adecuados incluyen formaldehído. Las aminas apropiadas incluyen melamina, urea, benzoguanamina, glicoluril, y mezclas de estos. Las melaminas apropiadas incluyen melamina de metilol, melamina de metilol metilado, melamina imino, y mezclas de estos. Las ureas adecuadas incluyen urea dimetilol, Áureade dimetilol metilado, urea-resorcinol, y mezclas de estas.

En un aspecto, los depuradores de formaldehído adecuados pueden usarse con los encapsulados, por ejemplo, en una suspensión de cápsula y/o añadirse en un producto de consumo antes, durante o después de añadir los encapsulados en ese producto de consumo.

Las cápsulas adecuadas pueden elaborarse según las enseñanzas de la solicitud de patente de los Estados Unidos núm. 2008/0305982 A1 ; y/o la solicitud de patente de los Estados Unidos núm. 2009/0247449 A1. Alternativamente, las cápsulas adecuadas pueden adquirirse de Appleton Papers Inc. de Appleton, Wisconsin Estados Unidos.

En un aspecto preferido, la composición puede comprender, además, un auxiliar de depósito, preferentemente, que consiste en el grupo que comprende polímeros catiónicos o no iónicos. Los polímeros adecuados incluyen almidones catiónicos, hidroxietilcelulosa catiónica, polivinilformaldehído, goma de algarrobilla, mananos, xiloglucanos, goma de tamarindo, polietilentereftalato y polímeros que contienen dimetilaminoetilo metacrilato, opcionalmente, con uno o más monómeros seleccionados del grupo que comprende ácido acrílico y acrilamida.

Perfumes. En un aspecto, la composición comprende un perfume que comprende una o más materias prima de perfume seleccionadas del grupo que consiste en 1 ,1'-oxibis-2-propanol; ácido 1 ,4-ciclohexanodicarboxílico, éster dietilo; ciclododecano(etoximetoxi); 1 ,3-nonanodiol, monoacetato; ácido acético(3-metilbutoxi), 2-éster propenilo; beta-metil ciclododecanoetanol; 2-metil-3-[(1 ,7,7-trimetilbiciclo[2.2.1]hept- 2- ilo)oxi]-1 -propanol; oxaciclohexadecan-2-ona; alfa-metil-acetato bencenometanol; trans- 3- etoxi-1 ,1 ,5-trimetilciclohexano; 4-(1 ,1-dimetiletilo)acetato ciclohexanol; dodecahidro-3a,6,6,9a-tetrametilnafto[2,1 -b]furano; beta-metil bencenopropanal; beta-metil-3-(1-metiletil)bencenopropanal; 4-fenil-2-butanona; 2-ácido metilbutanoico, éster etilo; benzaldehído; 2-ácido metilbutanoico, 1 -éster metiletilo; dihidro-5-pentil-2(3H)furanona; (2E)-l-(2,6,6-trimetilo-2-ciclohexeno-1 -ilo)-2-buteno-1-ona; dodecanal; undecanal; 2-etil-alfa, alfa-dimetilbencenopropanal; decanal; alfa, alfa-acetato de dimetilbencenoetanol; 2-(fenilmetileno)octanal; 2-[[3-[4-(1 ,1 -dimetiletilo)fenilo]-2-metilpropilideno]amino]ácido benzoico, metiléster; 1 -(2,6,6-trimetil-3-ciclohexen-1-il) -2-buten-1-ona 2-pentilciclopentanona; 3-oxo-2-pentil- metil éster del ácido ciclopentanoacético 4-hidroxilo-3-metoxibenzaldehído; 3-etoxi-4-hidroxibenzaldehído; 2-heptilciclopentanona; 1 -(4- metilfenilo)etanona; (3E)-4-(2,6,6-trimetilo-1-ciclohexeno-1-ilo)-3-buteno-2-ona; (3E)-4-(2,6,6-tr¡met¡lo-2-c¡clohexeno-1-ilo)-3-buteno-2-ona; bencenoetanol; 2H-1-benzopirano-2-ona; 4-metoxibezalde ído; 10-undecenal; ácido propanoico, éster de fenilmetilo; beta-metilbencenopentanol; 1 ,1 -dietoxi-3,7-dimetil-2,6-octadieno; alfa, alfa-dimetilbencenoetanol; (2E)-1-(2,6,6-trimetilo-1-ciclohexeno-1 -ilo)-2-buteno-1-ona; ácido acético, éster de fenilmetilo; ácido ciciohexanopropanóico, 2-éster de propenilo; ácido hexanoico, 2-éster de propenilo; 1 ,2-dimetoxi-4-(2-propenilo)benceno; 1 ,5-dimetil-biciclo[3.2.1]octano-8-ona oxima; 4-(4-hidroxilo-4-metilpentil)-3-ciclohexeno-1-carboxaldehído; 3-buten-2-ol; 2-[[[2,4(o 3,5)-dimetil-3-ciclohexeno-1 -ilo metilen]amino]ácido benzoico, metiléster; 8-ciclohexadeceno-1 -ona; metil ionona; 2,6-dimetil-7-octeno-2-ol; 2-metoxi-4-(2-propenil)fenol; (2E)-3,7-dimetil-2,6-Octadien-1-ol; 2-ácido hidroxibenzoico, (3Z)-3-hexenil éster; 2-tridecenonitrilo; 4-(2,2-dimetil-6-metilenociclohexil)-3-metil-3-buteno-2-ona; tetrahidro-4-metil-2-(2-metil-1-propenilo)-2H-piran; Acido acético, (2-metilbutoxi)-, 2-éster de propenilo; Acido benzoico, 2-hidroxilo-, 3-éster de metilbutilo; 2-buten-1-ona, 1 -(2,6,6-trimetil-1-ciclohexen-1 -il)-, (Z)-; ácido ciclopentanocarboxílico, 2-hexil-3-oxo-, éster metílico; bencenopropanal, 4-etil-.alfa.,.alfa.-dimetil-; 3-ciclohexeno-1-carboxaldehído, 3-(4-hidroxi-4-metilpentil)-; etanona, 1-(2,3,4,7,8,8a-hexahidro-3,6,8,8-tetrametil-1 H-3a,7- metanoazulen-5-il)-, [3R-(3.alfa.,3a.beta.,7.beta.,8a.alfa.)]-; undecanal, 2-metil- 2H-piran-2-ona, 6-butiltetrahidro-; bencenopropanal, 4-(1 ,1-dimetiletil)-.alfa.-metil-; 2(3H)-furanona, 5-heptild¡hidro-; ácido benzoico, 2-[(7-hidroxi-3,7-dimetiloctiliden)amino]-, metilo; ácido benzoico, 2-hidroxi-, éster de fenilmetilo; naftaleno, 2-metoxi-; 2-ciclopenteno-1-ona, 2-hexilo-; 2(3H)-furanona, 5-hexildihidro-; ácido oxiranocarboxílico, 3-metil-3-fenil-, éster etílico; 2-oxabiciclo[2.2.2]octano, 1 ,3,3-trimetil-; bencenopentanol,.gamma.-metil-; 3-octanol, 3,7-dimetil-; 3,7-dimetil-2,6-octadienonitrilo; 3,7-dimetil-6-octen-1-ol; acetato de terpineol; 2- met¡l-6-metileno-7-Octen-2-ol, derivado dihidro; SaAS /ya-hexahidro-^y-metano-I H-inden-6-ol propanoato; acetato de 3-metil-2-buten-1-ol; acetato de (Z)-3-Hexen-1-ol; 2-etil-4-(2,2,3-trimetilo-3-ciclopenten-1 -ilo)-2-buten-1 -ol; 4-(octahidro-4,7-metano-5H-inden-5-ilideno)-butanal; 3-2,4-dimetil-ciclohexeno-1-carboxaldeído; 1-(1 ,2,3,4,5,6,7,8-octa idro-2,3,8,8-tetrametil-2- naftalenilo)-etanona; 2-ácido hidroxibenzoico, metiléster; 2-ácido hidroxibenzoico, hexiléster; 2-fenoxietanol; 2-ácido hidroxibenzoico, pentil éster; 2,3-heptanediona; 2-hexen-1-ol; 6-octen-2-ol, 2,6-dimetil-; damascona (alfa, beta, gamma o delta o mezclas de estas), 4,7-metano-1H-inden-6-ol, 3a,4,5,6,7,7a-hexahidro-, acetato; 9-undecenal; 8-undecenal; isociclocitral; etanona, 1-(1 ,2,3,5,6,7,8,8a-octah¡dro-2,3,8,8-tetrametil-2-naftalenil)-; 3-ciclohexeno-1-carboxaldehído, 3,5-dimetil-; 3-ciclohexeno-1-carboxalde ído, 2,4-dimetil-; 1 ,6-octadien-3-ol, 3,7-dimetil-; 1 ,6-octadien-3-ol, 3,7-dimetil-, acetato; lilial (p-t-bucinal) y ciclopentanona, 2-[2-(4-metil-3-ciclohexeno-1-il)propil]- y 1-metil-4-(1-metiletenil)ciclohexeno, y mezclas de estos.

En un aspecto, la composición puede comprender una partícula de perfume encapsulado que comprende ya sea un compuesto hidroxílico soluble en agua or melamina-formaldehído o alcohol polivinílico modificado. En un aspecto, el encapsulado comprende (a) una matriz sólida al menos parcialmente soluble en agua que comprende uno o más compuestos hidroxílicos solubles en agua, preferentemente, almidón; y (b) un aceite esencial encapsulado por la matriz sólida.

En otro aspecto, el perfume puede estar unido previamente como un complejo a una poliamina, preferentemente, una polietilenimina, para formar una base de Schiff.

El producto de consumo puede comprender uno o más polímeros. Los ejemplos son carboximetilcelulosa, poli(vinil-pirrolidona), poli (etilenglicol), poli(alcohol vinílico), poli(vinilpiridina-N-óxido), poli(vinilimidazol), policarboxilatos tal como poliacrilatos, copolímeros de maleico/ácido acrílico y copolímeros de metacrilato de laurilo/ácido acrílico.

El producto de consumo puede comprender uno o más polímeros limpiadores anfifílicos, tales como el compuesto que tiene la estructura general siguiente: bis((C2H50)(C2H40)n)(CH3)-N+-CxH2x-N+-(CH3)-bis((C2H50)(C2H40)n), en donde n = de 20 a 30, y x = de 3 a 8, o variantes sulfatadas o sulfonadas de estos.

El producto de consumo puede comprender polímeros anfifílicos alcoxilados limpiadores de grasa con propiedades hidrofílicas e hidrofóbicas equilibradas, para eliminar las partículas de grasa de las telas y superficies. Las modalidades específicas de los polímeros anfifílicos alcoxilados limpiadores de grasa de la presente invención comprenden una estructura de núcleo y una pluralidad de grupos alcoxilados unidos a esa estructura de núcleo. Estas pueden comprender polialquileniminas alcoxiladas, preferentemente, con un bloque interno de óxido de polietileno y un bloque externo de óxido de polipropileno.

Los policarboxilatos alcoxilados, tales como los preparados a partir de poliacrilatos, son útiles en la presente invención para suministrar rendimiento adicional para la remoción de grasa. Estos materiales se describen en la patente núm. WO 91/08281 y la patente del PCT núm. 90/01815. Químicamente, estos materiales comprenden poliacrilatos que tienen una cadena lateral de etoxi por cada 7-8 unidades de acrilato. Las cadenas laterales son de la fórmula -(CH2CH20)m (CH2)nCH3, en donde m es 2-3 y n es 6-12. Las cadenas laterales están unidas por éster a la "cadena principal" de poliacrilato para proporcionar una estructura poiimérica de tipo "peine". El peso molecular puede variar pero es, típicamente, de aproximadamente 2000 a aproximadamente 50,000. Estos policarboxilatos alcoxilados pueden comprender de aproximadamente 0.05 % a aproximadamente 10 % en peso, de las composiciones de la presente invención.

Los surfactantes derivados de isoprenoides de la presente invención y sus mezclas con otros cosurfactantes y otros ingredientes adicionales son particularmente adecuados para usar con un copolímero anfifílico de injerto, preferentemente, el copolímero anfifílico de injerto comprende (i) una cadena principal de polietilenglicol; y (ii) y al menos una entidad colgante seleccionada de acetato de polivinilo, alcohol polivinílico y mezclas de estos. Un copolímero anfifílico de injerto preferido es Sokalan HP22 suministrado por BASF. Los polímeros adecuados incluyen copolímeros de injerto aleatorios, preferentemente, un copolímero de óxido de polietileno injertado con acetato de polivinilo que tiene una cadena principal de óxido de polietileno y múltiples cadenas laterales de acetato de polivinilo. El peso molecular de la cadena principal de óxido de polietileno es, preferentemente, de aproximadamente 6000, y la relación en peso entre el óxido de polietileno y el acetato de polivinilo es de aproximadamente 40 a 60 y no más de 1 punto de injerto por cada 50 unidades de óxido de etileno.

Polímero de carboxilato. Los productos de consumo en la presente invención pueden incluir, además, uno o más polímeros de carboxilato, tales como un copolímero aleatorio de maleato/acrilato u homopolímero de poliacrilato. En un aspecto, el polímero de carboxilato es un homopolímero de poliacrilato que tiene un peso molecular de 4,000 Da a 9,000 Da o de 6,000 Da a 9,000 Da.

Polímero de desprendimiento de suciedad. Los productos de consumo en la presente invención pueden incluir, además, uno o más polímeros de desprendimiento de suciedad que tienen una estructura como la define una de las siguientes estructuras (I), (II) o (III): (I) -[(OCH R1 -CH R2)a-0-OC-Ar-CO-]d (II) -[(OCHR3-CHR4)b-0-OC-sAr-CO-]e (III) -[(OCHR5-CHR6)c-OR7]( en donde: a, b y c son de 1 a 200; d, e y f son de 1 a 50; Ar es 1 ,4-fenileno sustituido; sAr es 1 ,3-fenileno sustituido en la posición 5 con S03Me; Me es Li, K, Mg/2, Ca/2, Al/3, amonio, mono-, di-, tri-, o tetraalquilamonio en donde los grupos alquilo son alquilo de C C^ o hidroxialquilo de C2- C10, o mezclas de estos; R\ R2, R3, R4, R5 y R6 se seleccionan independientemente de H o Crde n- o isoalquilo; y R7 es un alquilo de C C18 lineal o ramificado, o un alquenilo de C2-C3o lineal o ramificado, o un grupo cicloalquilo con 5 a 9 átomos de carbono, o un grupo arilo de C8-C30 o un grupo arilalquilo de C6-C30.

Los polímeros de desprendimiento de suciedad adecuados son polímeros de desprendimiento de suciedad de poliéster, tales como los polímeros Repel-o-tex, que incluyen Repel-o-tex, SF-2 y SRP6 suministrados por Rhodia. Otros polímeros de desprendimiento de suciedad adecuados incluyen los polímeros de Texcare, que incluyen Texcare SRA100, SRA300, SRN100, SRN170, SRN240, SRN300 y SRN325 suministrados por Ciariant. Otros polímeros de desprendimiento de suciedad adecuados son los polímeros Marloquest, tales como Marloquest SL suministrados por Sasol.

Polímero celulósico. Los productos de consumo en la presente invención pueden incluir, además, uno o más polímeros celulósicos que incluyen los seleccionados de alquil celulosa, alquil alcoxialquil celulosa, carboxialquil celulosa, alquil carboxialquil celulosa. En un aspecto, los polímeros celulósicos se seleccionan del grupo que consiste en carboximetilcelulosa, metilcelulosa, metil hidroxietilcelulosa, metil carboximetilcelulosa, y mezclas de estas. En un aspecto, la carboximetilcelulosa tiene un grado de sustitución de carboximetilo de 0.5 a 0.9 y un peso molecular de 100,000 Da a 300,000 Da.

Enzimas Los productos de consumo pueden comprender una o más enzimas que proporcionan beneficios de rendimiento de limpieza y/o de cuidado de las telas. Los ejemplos de enzimas adecuadas incluyen, pero no se limitan a, hemicelulasas, peroxidasas, proteasas, celulasas, xilanasas, lipasas, fosfolipasas, esterasas, cutinasas, pectinasas, mananasas, pectato liasas, queratinasas, reductasas, oxidasas, fenoloxidasas, lipoxigenasas, ligninasas, pululanasas, tanasas, pentosanasas, malanasas, ß-glucanasas, arabinosidasas, hialuronidasas, condroitinasas, laccasas y amilasas, o mezclas de estas. Una combinación típica es un cóctel de enzimas que puede comprender, por ejemplo, una proteasa y una lipasa junto con amilasa. Cuando se incluyen en un producto de consumo, las enzimas adicionales mencionadas anteriormente pueden estar presentes a concentraciones de aproximadamente 0.00001 % a aproximadamente 2 %, de aproximadamente 0.0001 % a aproximadamente 1 % o incluso de aproximadamente 0.001 % a aproximadamente 0.5 % de proteína enzimática en peso del producto de consumo.

En un aspecto las enzimas preferidas podrían incluir una proteasa. Las proteasas adecuadas incluyen metaloproteasas y serina proteasas que incluyen serina proteasas microbianas neutras o alcalinas, tales como subtilisinas (EC 3.4.21.62). Las proteasas adecuadas incluyen las proteasas de origen animal, vegetal o microbiano. En un aspecto, dicha proteasa adecuada puede ser de origen microbiano. Las proteasas adecuadas incluyen mutantes modificados químicamente o genéticamente de las proteasas adecuadas mencionadas anteriormente. En un aspecto, la proteasa adecuada puede ser una serina proteasa, tal como una proteasa microbiana alcalina y/o una proteasa de tipo tripsina. Algunos ejemplos de proteasas neutras o alcalinas adecuadas incluyen: (a) subtilisinas (EC 3.4.21.62) que incluyen las derivadas de Bacillus, tales como Bacillus lentus, B. alkalophilus, B. subtilis, B. amyloliquefaciens, Bacillus pumilus y Bacillus gibsonii descritas en las patentes de los Estados Unidos núms. 6,312,936 B1 , 5,679,630, 4,760,025, 7,262,042 y en la patente núm. WO 09/021867. (b) proteasas de tipo tripsina o quimotripsina tales como la tripsina (p. ej., de origen porcino o bovino) que incluyen la proteasa Fusarium descrita en la patente núm. WO 89/06270 y las proteasas quimotripsina derivadas de Cellumonas descritas en las patentes núms. WO 05/052161 y WO 05/052146. (c) metaloproteasas que incluyen las derivadas de Bacillus amyloliquefaciens descritas en la patente núm. WO 07/044993A2.

Las proteasas preferidas incluyen las derivadas de Bacillus gibsonii o Bacillus Lentus.

Las enzimas proteasa adecuadas comercialmente disponibles incluyen las distribuidas con el nombre comercial Alcalase®, Savinase®, Primase®, Durazym®, Polarzyme®, Kannase®, Liquanase®, Liquanase Ultra®, Savinase Ultra®, Ovozyme®, Neutrase®, Everlase® y Esperase® de Novozymes A/S (Dinamarca), aquellas distribuidas con el nombre comercial de Maxatase®, Maxacal®, Maxapem®, Properase®, Purafect®, Purafect Prime®, Purafect Ox®, FN3®, FN4®, Excellase® y Purafect OXP® de Genencor International, aquellas distribuidas con el nombre comercial de Opticlean® y Optimase® de Solvay Enzymes, aquellas distribuidas de Henkel/ Kemira, específicamente, BLAP (secuencia mostrada en la Figura 29 de la patente de los Estados Unidos núm. 5,352,604 con las siguientes mutaciones S99D + S101 R + S103A + V104I + G159S, mencionada de aquí en adelante como BLAP), BLAP R (BLAP con S3T + V4I + V199M + V205I + L217D), BLAP X (BLAP con S3T + V4I + V205I) y BLAP F49 (BLAP con S3T + V4I + A194P + V199M + V205I + L217D), todos de Henkel/Kemira; y KAP (subtilisina Bacillus alkalophilus con mutaciones A230V + S256G + S259N) de Kao.

Las alfa-amilasas adecuadas incluyen las de origen bacteriano o fúngico. Se incluyen los mutantes (variantes) modificados química o genéticamente. Una alfa-amilasa alcalina preferida se deriva de una cepa de bacilo, tal como Bacillus licheniformis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus stearothermophilus, Bacillus subtilis, u otras cepas de bacilo, tal como Bacillus sp. NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513, DSM 9375 (patente de los Estados Unidos núm. 7,153,818) DSM 12368, DSMZ núm. 12649, KSM AP1378 (patente núm. WO 97/00324), KSM K36 o KSM K38 (patente europea núm. EP 1 ,022,334). Las amilasas preferidas incluyen: (a) las variantes descritas en las patentes núms. WO 94/02597, WO 94/18314, W096/23874 y WO 97/43424, especialmente las variantes con una o más sustituciones en una o más de las siguientes posiciones contra la enzima enumerada como sec. con núm. de ident. 2 en la patente núm. WO 96/23874: 15, 23, 105, 106, 124, 128, 133, 154, 156, 181 , 188, 190, 197, 202, 208, 209, 243, 264, 304, 305, 391 , 408 y 444. (b) las variantes descritas en la patente de los Estados Unidos núm. 5,856,164 y las patentes núm. W099/2321 1 , WO 96/23873, WO00/60060 y WO 06/002643, especialmente las variantes con una o más sustituciones en las siguientes posiciones contra la enzima AA560 enumerada como sec. con núm. de ident. 12 en la patente núm. WO 06/002643: 26, 30, 33, 82, 37, 106, 1 18, 128, 133, 149, 150, 160, 178, 182, 186, 193, 203, 214, 231 , 256, 257, 258, 269, 270, 272, 283, 295, 296, 298, 299, 303, 304, 305, 31 1 , 314, 315, 318, 319, 339, 345, 361 , 378, 383, 419, 421 , 437, 441 , 444, 445, 446, 447, 450, 461 , 471 , 482, 484, que contienen, además, preferentemente, las supresiones de D183* y G184*; las variantes que exhiben por lo menos 90 % de identidad con la sec. con núm. de ident. 4 en la patente núm. WO06/002643, las enzimas tipo silvestre de Bacillus SP722, especialmente las variantes con deleciones en las posiciones 183 y 184 y las variantes descritas en la patente núm. WO 00/60060, que se incorpora como referencia en la presente descripción. variantes que exhiben una identidad de al menos 95 % con la enzima silvestre de Bacillus esp. 707 (sec. con núm. de ident. :7 en la patente de los Estados Unidos núm. 6,093, 562), especialmente aquellas que comprenden una o más de las siguientes mutaciones M202, 208, S255, R172 y/o M261. Preferentemente, esa amilasa comprende una o más de M202L, M202V, M202S, M202T, M202I, M202Q, M202W, S255N y/o R172Q. Se prefieren, particularmente, las que comprenden las mutaciones M202L o M202T. variantes descritas en la patente núm. WO 09/149130, preferentemente, las que exhiben al menos 90 % de identidad con la sec. con núm. de ¡dent.: 1 o sec. con núm. de ¡dent.:2 en la patente núm. WO 09/149130, la enzima de tipo silvestre de Geobacillus Stearophermophilus o una versión truncada de esta.

Las alfa-amilasas adecuadas comercialmente disponibles incluyen DURAMYL®, LIQUEZYME®, TERMAMYL®, TERMAMYL ULTRA®, NATALASE®, SUPRAMYL®, STAINZYME®, STAINZYME PLUS®, FUNGAMYL® y BAN® (Novozymes A/S, Bagsvaerd, Dinamarca), KEMZYM® AT 9000 Biozym Biotech Trading GmbH Wehlistrasse 27b A-1200 Wien Austria, RAPIDASE®, PURASTAR®, ENZYSIZE®, OPTISIZE HT PLUS®, POWERASE® y PURASTAR OXAM® (Genencor International Inc., Palo Alto, California) y KAM® (Kao, 14-10 Nihonbashi Kayabacho, 1-chome, Chuo-ku Tokio 103-8210, Japón). En un aspecto, las amilasas adecuadas incluyen NATALASE®, STAINZYME® y STAINZYME PLUS® y mezclas de estas.

En un aspecto, tales enzimas pueden seleccionarse del grupo que consiste en: lipasas, que incluyen "lipasas de primer ciclo", tales como las descritas en las patentes de los Estados Unidos núms. 6,939,702 B1 y 2009/0217464. En un aspecto, la lipasa es una lipasa de primer lavado, preferentemente, una variante de la lipasa silvestre de Thermomyces lanuginosus que comprende una o más de las mutaciones T231 R y N233R. La secuencia silvestre son los 269 aminoácidos (aminoácidos 23 - 291) con número de acceso a Swissprot: Swiss-Prot 059952 (derivada de Thermomyces lanuginosus (Humicola lanuginosa)). Las lipasas preferidas podrían incluir las que se venden con los nombres comerciales Lipex® y Lipolex®.

En un aspecto, otras enzimas preferidas incluyen endoglucanasas derivadas de microbios que presentan actividad endo-beta-1 ,4-glucanasa (E.C. 3.2.1.4), que incluye un polipéptido bacterial endógeno a un miembro del gen Bacillus que tiene una secuencia de al menos 90 %, 94 %, 97 % y aun 99 % de identidad a la secuencia de aminoácido con núm. de ident.:2 en la patente de los Estados Unidos núm. 7,141 ,403B2) y mezclas de estos. Las endoglucanasas adecuadas se venden con el nombre comercial de Celluclean® y Whitezyme® (Novozymes A/S, Bagsvaerd, Dinamarca).

Otras enzimas preferidas incluyen pectato Nasas distribuidas con los nombres comerciales de Pectawash®, Pectaway® y mananasas distribuidas con los nombres comerciales de Mannaway® (todas de Novozymes A S, Bagsvaerd, Dinamarca), y Purabrite® (Genencor International Inc., Palo Alto, California).

Surfactantes. Las composiciones de conformidad con la presente invención pueden comprender un surfactante o sistema de surfactantes, en donde el surfactante se puede seleccionar de surfactantes no iónicos, surfactantes aniónicos, surfactantes catiónicos, surfactantes anfolíticos, surfactantes zwitteriónicos, surfactantes no iónicos semipolares y mezclas de estos. Cuando está presente, el surfactante está presente, típicamente, a una concentración de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 50 %, o incluso de aproximadamente 5 % a aproximadamente 40 % en peso del producto de consumo.

Los surfactantes detergentes aniónicos preferidos incluyen surfactantes detergentes de sulfato y sulfonato.

Los surfactantes detersivos de sulfonato adecuados incluyen sulfonato de alquil benceno, en un aspecto, sulfonato de alquil benceno de C10-13. Los sulfonatos de alquil benceno (LAS) adecuados pueden obtenerse al sulfonar alquilbenceno lineal (LAB) comercialmente disponible; LAB adecuado incluye 2-fenil LAB inferiores, tales como los suministrados por Sasol con el nombre comercial de Isochem® o los suministrados por Petresa con el nombre comercial de Petrelab®, otro LAB adecuado incluye 2-fenil LAB superiores, tales como aquellos suministrados por Sasol con el nombre comercial de Hyblene®. Un surfactante detergente aniónico adecuado es un sulfonato de alquilbenceno que se obtiene mediante el proceso catalizado DETAL, aunque pueden resultar, además, adecuadas otras rutas de síntesis tales como HF. En un aspecto, se usa una sal de magnesio de LAS.

Los surfactantes detersivos de sulfato adecuados incluyen alquiisulfato, en un aspecto, alquiisulfato de C8-i8 o, predominantemente, alquiisulfato de C12.

Otro surfactante detersivo de sulfato adecuado es el alquil sulfato alcoxilado, en un aspecto, alquil sulfato etoxilado, en un aspecto, un alquil sulfato alcoxilado de C8-18, en otro aspecto, un alquil sulfato etoxilado de C8.18, típicamente, el alquil sulfato alcoxilado tiene un grado promedio de alcoxilación de 0.5 a 20 o de 0.5 a 10, típicamente, el alquil sulfato alcoxilado es un alquil sulfato etoxilado de C8.i8 que tiene un grado promedio de etoxilación de 0.5 a 10, de 0.5 a 7, de 0.5 a 5 o incluso de 0.5 a 3.

El alquiisulfato, alquiisulfato alcoxilado y sulfonato de alquilbenceno pueden ser lineales o ramificados, sustituidos o no sustituidos.

El surfactante detersivo puede ser un surfactante detersivo ramificado de media cadena, en un aspecto, un surfactante detersivo aniónico ramificado de media cadena, en un aspecto, un alquiisulfato ramificado de media cadena y/o un sulfonato de alquil benceno ramificado de media cadena, por ejemplo, un alquiisulfato ramificado de media cadena. En un aspecto, las ramas de media cadena son grupos alquilo de CM, típicamente, grupos metilo y/o etilo.

Los surfactantes detergentes no iónicos adecuados se seleccionan del grupo que consiste en: etoxilato de alquilo C8-C18 tal como surfactante no iónicos NEODOL® de Shell; alquilfenol alcoxilatos de C6-Ci2 en donde las unidades de alcoxilato son unidades de etilenoxilo o unidades de propilenoxilo, o una mezcla de estos; alcohol de Ci2-Ci8 y condensados de alquilfenol de C6-Ci2 con polímeros en bloque de óxido de etileno/óxido de propileno tales como Pluronic® de BASF; alcoholes ramificados de media cadena de C14-C22; alquil alcoxilato de C14-C22 ramificado de media cadena que tiene, típicamente, un grado promedio de alcoxilacion de 1 a 30; alquilpolisacáridos, en un aspecto, alquilpoliglicósidos; polihidroxi amidas de ácido graso; surfactantes de alcohol poli(oxialcoxilado) con remate de éter; y mezclas de estos.

Los surfactantes detergentes no iónicos adecuados incluyen alquil poliglucósido y/o un alcohol alquil alcoxilado.

En un aspecto, los surfactantes detersivos no iónicos incluyen alquil alcoholes alcoxilados, en un aspecto, alquil alcoholes alcoxilados de C8-i8, por ejemplo, un alquil alcohol etoxilado de C8.18; el alquil alcohol alcoxilado puede tener un grado promedio de alcoxilacion de 1 a 50, de 1 a 30, de 1 a 20 o de 1 a 10. En un aspecto, el alquil alcohol alcoxilado puede ser un alquil alcohol etoxilado de C8-ie que tiene un grado promedio de etoxilación de 1 a 10, de 1 a 7, más de 1 a 5 o de 3 a 7. El alcohol alquil alcoxilado puede ser lineal o ramificado y sustituido o no sustituido.

Los surfactantes no iónicos adecuados incluyen los comercializados con el nombre comercial Lutensol® de BASF.

Los surfactantes detergentes catiónicos adecuados incluyen compuestos de alquil piridinio, compuestos de alquil amonio cuaternario, compuestos de alquil fosfonio cuaternario, compuestos de alquil sulfonio ternario, y mezclas de estos.

Los surfactantes detergentes catiónicos adecuados son compuestos de amonio cuaternario que tienen la fórmula general: (R)(Ri)(R2)(R3)N+ X-en donde R es una entidad alquilo o alquenilo de C6.18 lineal o ramificada, sustituida o no sustituida, ft: y R2 se seleccionan, independientemente, de entidades metilo o etilo, R3 es una entidad hidroxilo, hidroximetilo o hidroxietilo, X es un anión que proporciona neutralidad de carga, y los aniones adecuados incluyen: haluros, por ejemplo, cloruro; sulfato; y sulfonato. Los surfactantes detergentes catiónicos adecuados son cloruros de monoalquil monohidroxietil dimetil amonio cuaternario de C6-18- Los surfactantes detersivos catiónicos altamente adecuados son cloruro de monoalquil monohidroxietil dimetilamonio cuaternario de C8-io, cloruro de monoalquil monohidroxietil dimetilamonio cuaternario de C10-12 y cloruro monoalquil monohidroxietil dimetilamonio cuaternario de Cío- Los surfactantes anfóteros/zwitteriónicos adecuados incluyen óxidos de amina y betaínas. Surfactantes aniónicos neutralizados con aminas. Los surfactantes aniónicos de la presente invención y los cosurfactantes aniónicos adicionales pueden existir en una forma ácida, y esta forma ácida puede neutralizarse para formar una sal de surfactante cuyo uso es deseable en las presentes composiciones detergentes. Los agentes típicos para neutralización incluyen las bases de contraiones metálicos, tales como hidróxidos, por ejemplo, NaOH o KOH. Otros agentes preferidos para neutralizar surfactantes aniónicos de la presente invención y surfactantes o cosurfactantes aniónicos adicionales en sus formas ácidas incluyen amoniaco, aminas o alcanolaminas. Se prefieren las alcanolaminas. Los ejemplos no limitantes adecuados incluyen monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina y otras alcanolaminas lineales o ramificadas conocidas en la materia; por ejemplo, las alcanolaminas más preferidas incluyen 2-amino-1 -propanol, 1-aminopropanol, monoisopropanolamina, o 1-amino-3-propanol. La neutralización de la amina puede realizarse en forma total o parcial, p. ej., parte de la mezcla de surfactante aniónico puede neutralizarse con sodio o potasio o parte de la mezcla de surfactante aniónico puede neutralizarse con aminas o alcanolaminas.

Se puede preferir sistemas de surfactantes que comprenden mezclas de uno o más surfactantes aniónicos y, adicionalmente, uno o más surfactantes no iónicos, opcionalmente, con un surfactante adicional tal como un surfactante catiónico. Las relaciones en peso preferidas de surfactante aniónico y no iónico son por lo menos 2:1 o incluso por lo menos 1 :1 a 1 : 10.

Aditivos. Las composiciones de la presente invención pueden comprender uno o más aditivos de detergente o sistemas de aditivos. Cuando se usa un aditivo, el producto de consumo sujeto comprende, típicamente, por lo menos aproximadamente 1 %, de aproximadamente 2 % a aproximadamente 60 % o incluso de aproximadamente 5 % a aproximadamente 10 % de aditivo en peso del producto de consumo. La composición puede incluso encontrarse sustancialmente libre de aditivos; sustancialmente libre significa zeolita y/o fosfato "no añadidos deliberadamente". Los aditivos de zeolita típicos incluyen zeolita A, zeolita P y zeolita MAP. Un aditivo fosfato común es el tripolifosfato de sodio.

Agentes quelantes e inhibidores de crecimiento de cristales. Las composiciones de la presente descripción pueden contener un agente quelante y/o un inhibidor de crecimiento de cristales. Las moléculas adecuadas incluyen agentes quelantes de cobre, hierro o manganeso, y mezclas de estos. Las moléculas adecuadas incluyen DTPA (ácido dietilentriamina pentaacético), HEDP (ácido hidroxietano difosfónico), DTPMP (dietilentriaminapenta(ácido metilenfosfónico)), hidrato de sal disódica de ácido 1 ,2-dihidroxibenceno-3,5-disulfónico, etilendiamina, dietilentriamina, ácido etilendiaminodisuccínico (EDDS), ácido N-hidroxietiletilendiaminotriacético (HEDTA), ácido trietilentetraaminohexaacético (TTHA), ácido N-hidroxietiliminodiacético (HEIDA), dihidroxietilglicina (DHEG), ácido etilendiaminotetrapropiónico (EDTP), carboximetil inulina y ácido 1 ,2,4-tricarboxílico de 2-fosfonobutano (AM de Bayhibit®), y derivados de estos. Típicamente, el producto de consumo puede comprender de aproximadamente 0.005 % a aproximadamente 15 % o incluso de aproximadamente 3.0 % a aproximadamente 10 % de agente quelante o Inhibidor de crecimiento de cristales en peso del producto de consumo de interés.

Agentes inhibidores de transferencia de tinte. Las composiciones de la presente invención pueden incluir, además, uno o más agentes inhibidores de transferencia de tinte. Los agentes poliméricos inhibidores de transferencia de tinte adecuados incluyen, pero no se limitan a, polímeros de polivinilpirrolidona, polímeros de poliamina N-óxido, copolímeros de N-vinilpirrolidona y N-vinilimidazol, poliviniloxazolidonas y polivinilimidazoles, o mezclas de estos. Cuando están presentes en un producto de consumo sujeto, los agentes inhibidores de transferencia de colorante pueden estar presentes a concentraciones de aproximadamente 0.0001 % a aproximadamente 10 %, de aproximadamente 0.01 % a aproximadamente 5 % o incluso de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 3 % en peso del producto de consumo.

Abrillantadores. Las composiciones de la presente invención pueden también comprender componentes adicionales que pueden teñir los artículos que se limpian, por ejemplo, abrillantadores fluorescentes.

La composición puede comprender abrillantador fluorescente C.l. 260 en forma alfa-cristalina que tiene la siguiente estructura: En un aspecto, el abrillantador es un abrillantador soluble en agua, tal como el abrillantador fluorescente C.l. 260 en forma alfa-cristalina.

En un aspecto, el abrillantador tiene, predominantemente, forma alfa-cristalina, lo que significa que, típicamente, por lo menos 50 % en peso, por lo menos 75 % en peso, por lo menos 90 % en peso, por lo menos 99 % en peso o incluso sustancialmente todo el abrillantador fluorescente C.l. 260 tiene forma alfa-cristalina.

El abrillantador se encuentra, típicamente, en forma particulada micronizada, que tiene un tamaño promedio ponderado de partícula primaria de 3 a 30 micrómetros, de 3 micrómetros a 20 micrómetros, o de 3 a 10 micrómetros.

La composición puede comprender abrillantador fluorescente C.l. 260 en forma beta-cristalina y la relación de peso de: (i) abrillantador fluorescente C.l. 260 en forma cristalina alfa con relación a (ii) abrillantador fluorescente C.l. 260 en forma cristalina beta puede ser de al menos 0.1 o al menos 0.6.

BE680847 se refiere a un proceso para elaborar abrillantador fluorescente C.l. 260 en forma alfa-cristalina.

Los abrillantadores ópticos comerciales que pueden ser útiles en la presente invención pueden clasificarse en subgrupos que incluyen, entre otros, derivados de estilbeno, pirazolina, cumarina, ácido carboxílico, metincianinas, dibenzotiofeno-5,5-dióxido, azoles, heterociclos de 5 y 6 miembros en el anillo, y otros agentes misceláneos. Los ejemplos de estos abrillantadores se describen en "The Production and Application of Fluorescent Brightening Agents", M. Zahradnik, publicado por John Wiley & Sons, Nueva York (1982). Los ejemplos específicos no limitantes de abrillantadores ópticos que son útiles en las presentes composiciones son los que se identifican en las patentes de los Estados Unidos núm. 4,790,856 y 3,646,015.

Otro abrillantador adecuado tiene la estructura incluida más abajo: Las concentraciones adecuadas de los abrillantadores fluorescentes pueden ser de aproximadamente 0.01 , de aproximadamente 0.05, de aproximadamente 0.1 o incluso de aproximadamente 0.2 % en peso hasta 0.5 o incluso hasta 0.75 % en peso.

En un aspecto, el abrillantador se puede colocar sobre arcilla para formar una partícula. Sales de silicato. Las composiciones de la presente invención pueden contener, además, sales de silicato, tales como silicato sódico o silicato potásico. La composición puede comprender de 0 % en peso a menos de 10 % en peso de sal de silicato, a 9 % en peso, o a 8 % en peso, o a 7 % en peso, o a 6 % en peso, o a 5 % en peso, o a 4 % en peso, o a 3 % en peso, o incluso a 2 % en peso y, preferentemente, de más de 0 % en peso, o de 0.5 % en peso, o incluso de 1 % en peso de sal de silicato. Una sal de silicato adecuada es el silicato de sodio.

Dispersantes. Las composiciones de la presente Invención también pueden comprender dispersantes. Los materiales orgánicos solubles en agua adecuados incluyen los ácidos homo o copoliméricos o sus sales, en las cuales el ácido policarboxílico comprende por lo menos dos radicales carboxilo separados entre sí por no más de dos átomos de carbono.

Estabilizadores enzimáticos. Las enzimas para usar en composiciones se pueden estabilizar por diversas técnicas. Las enzimas empleadas en la presente invención pueden estabilizarse por la presencia de fuentes solubles en agua de iones calcio y/o magnesio en los productos para el cuidado de las telas y el hogar terminados que proveen esos iones a las enzimas. En el caso de composiciones acuosas que comprenden proteasa, se puede agregar un inhibidor de proteasa reversible, tal como un compuesto de boro que incluye borato, ácido fenilborónico de 4-formilo, ácido fenilborónico y derivados de estos, o compuestos, tales como formiato cálcico, formiato sódico y 1 ,2-propanodiol para mejorar aún más la estabilidad.

Solventes. Los solventes adecuados incluyen agua y otros disolventes tales como los fluidos lipof ílicos. Los ejemplos de fluidos lipófilos adecuados incluyen siloxanos, otras siliconas, hidrocarburos, glicoléteres, derivados de glicerina como éteres de glicerina, aminas perfluoradas, solventes perfluorados y de hidrofluoroéter, solventes orgánicos no fluorados poco volátiles, solventes a base de dioles, otros solventes compatibles con el medio ambiente, y mezclas de estos.

Agentes de estructuración/espesamiento Los líquidos estructurados pueden estar estructurados internamente, en virtud de lo cual la estructura está formada por ingredientes primarios (p. ej., material surfactante), y/o estructurados externamente, al proporcionar una estructura matriz tridimensional usando ingredientes secundarios (p. ej., polímeros, arcilla y/o material de silicato). La composición puede comprender un agente de estructuración, preferentemente, de 0.01 % en peso a 5 % en peso, de 0.1 % en peso a 2.0 % en peso de agente de estructuración. El agente de estructuración se selecciona, típicamente, del grupo que consiste en diglicéridos y triglicéridos, diestearato de etilenglicol, celulosa microcristalina, materiales a base de celulosa, celulosa de microfibras, emulsiones hinchables en medio alcalino modificadas hidrofóbicamente, tales como Polygel W30 (3VSigma), biopolímeros, goma xantana, goma gelana, y mezclas de estos. Un agente de estructuración adecuado incluye aceite de ricino hidrogenado y derivados no etoxilados de este. Un agente de estructuración adecuado se describe en la patente de los Estados Unidos núm. 6,855,680. Dichos agentes de estructuración tienen un sistema estructurante filiforme que tiene una variedad de relaciones de aspecto. Se describen otros agentes de estructuración adecuados y procesos para elaborarlos en la patente núm. WO2010/034736.

Agentes acondicionadores La composición de la presente invención puede incluir un compuesto graso de punto de fusión alto. El compuesto graso de punto de fusión alto útil en la presente descripción tiene un punto de fusión de 25 °C o más y se selecciona del grupo que consiste en alcoholes grasos, ácidos grasos, derivados de alcoholes grasos, derivados de ácidos grasos, y mezclas de estos. No se pretende que estos compuestos de bajo punto de fusión queden incluidos en esta sección. En la obra International Cosmetic Ingredient Dictionary (Diccionario internacional de ingredientes cosméticos), quinta edición, 1993, y en CTFA Cosmetic Ingredient Handbook (Manual de ingredientes cosméticos de la CTFA), segunda edición, 1992, se ofrecen ejemplos no limitantes de los compuestos de punto de fusión alto.

El compuesto graso de punto de fusión alto se incluye en la composición en un nivel de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 40 %, preferentemente, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 30 %, con mayor preferencia, de aproximadamente 1.5 % a aproximadamente 16 % en peso de la composición, de aproximadamente 1.5 % a aproximadamente 8 % en vista de proporcionar mejores beneficios de acondicionamiento, tales como una sensación desenredante durante la aplicación sobre el cabello húmedo, suavidad y sensación de humedad en el cabello húmedo.

Las composiciones de la presente invención pueden comprender un polímero canónico. Las concentraciones del polímero catiónico en la composición son, típicamente, de aproximadamente 0.05 % a aproximadamente 3 %, en otra modalidad, de aproximadamente 0.075 % a aproximadamente 2.0 % y en aún otra modalidad de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 1.0 %. Los polímeros catiónicos adecuados tienen una densidad de carga catiónica de al menos aproximadamente 0.5 meq/gm, en otra modalidad, al menos aproximadamente 0.9 meq/gm, en otra modalidad, al menos aproximadamente 1.2 meq/gm, en aun otra modalidad, al menos aproximadamente 1.5 meq/gm, pero En una modalidad, además, menos de aproximadamente 7 meq/gm y en otra modalidad menos de aproximadamente 5 meq/gm, al pH del uso previsto de la composición cuyo pH será, generalmente, de aproximadamente pH 3 a aproximadamente pH 9, en una modalidad, de aproximadamente pH 4 a aproximadamente pH 8. En la presente descripción, "densidad de carga catiónica" de un polímero se refiere a la relación del número de cargas positivas en el polímero con respecto al peso molecular del polímero. El peso molecular promedio de estos polímeros catiónicos adecuados varía, generalmente, de aproximadamente 10,000 a 10 millones, en una modalidad, de aproximadamente 50,000 a aproximadamente 5 millones y, en otra modalidad, de aproximadamente 100,000 a aproximadamente 3 millones.

Los polímeros catiónicos adecuados para su uso en las composiciones de la presente invención contienen entidades con nitrógeno catiónico, tales como entidades de amonio cuaternario o entidades amino catiónicas protonadas. Puede usarse cualquier contraión aniónico en asociación con los polímeros catiónicos, siempre que los polímeros sigan siendo solubles en agua, ya sea en la composición o en una fase coacervada de la composición, y siempre que los contraiones sean física y químicamente compatibles con los componentes esenciales de la composición o no afecten excesivamente el rendimiento del producto, la estabilidad o la estética. Los ejemplos no limitantes de este tipo de contraiones incluyen haluros (p. ej., cloruro, fluoruro, bromuro, yoduro), sulfato y sulfato de metilo.

Los ejemplos no limitantes de estos polímeros se describen en CTFA Cosmetic Ingredient Dictionary (Diccionario de ingredientes cosméticos de la CTFA), 3.a edición, editado por Estrin, Crosley, y Haynes, (The Cosmetic, Toiletry y Fragrance Association (Asociación de cosméticos, artículos de tocador y fragancias), Inc., Washington, D.C. (1982)).

Otros polímeros catiónicos adecuados para usar en la composición incluyen polímeros de polisacáridos, derivados catiónicos de goma de guar, ésteres de celulosa que contienen nitrógeno cuaternario, polímeros sintéticos, copolímeros de celulosa eterificada, guar y almidón. Cuando se usan, los polímeros catiónicos de la presente invención son solubles en la composición o en una fase del coacervado complejo de la composición formada por el polímero catiónico y el componente surfactante aniónico, anfotérico y/o zwitteriónico descrito anteriormente. Los coacervados complejos del polímero catiónico también pueden formarse con otros materiales de la composición que tengan carga.

Los polímeros catiónicos adecuados se describen en las patentes de los Estados Unidos núms. 3,962,418; 3,958,581 ; y en la publicación de patente de los Estados Unidos núm. 2007/0207109A1 , todas incorporadas en la presente descripción como referencia.

La composición de la presente invención puede incluir un polímero no iónico como agente acondicionador. Los polialquilenglicoles que tiene un peso molecular mayor de aproximadamente 1000 son útiles en la presente invención. Los polialquilenglicoles útiles son los que tienen la fórmula general: en donde R95 se selecciona del grupo que está formado por H, metilo y mezclas de estos. En la composición pueden incluirse agentes acondicionadores y, particularmente, siliconas. Los agentes acondicionadores útiles en las composiciones de la presente invención comprenden, típicamente, un líquido no volátil, insoluble en agua y dispersable en agua que forma partículas líquidas emulsificadas. Los agentes acondicionadores adecuados para usarse en la composición son aquellos agentes acondicionadores caracterizados en términos generales como siliconas (por ejemplo, aceites de silicona, siliconas catiónicas, gomas de silicona, siliconas de alta refracción y resinas de silicona), aceites acondicionadores orgánicos (por ejemplo, aceites de hidrocarburos, poliolefinas y ésteres grasos) o combinaciones de estos, o aquellos agentes acondicionadores que de cualquier otra manera forman partículas dispersadas líquidas en la matriz acuosa surfactante de la presente invención. Estos agentes acondicionadores deben ser física y químicamente compatibles con los componentes esenciales que aquí se describen o no deben afectar indebidamente la estabilidad, la apariencia estética o el rendimiento del producto.

La concentración del agente acondicionador en la composición debería ser suficiente para proporcionar los beneficios de acondicionamiento deseados. Esta concentración puede variar en función del agente acondicionador, la acción acondicionadora deseada, el tamaño promedio de las partículas del agente acondicionador, el tipo y concentración de otros componentes y otros factores similares.

La concentración del agente acondicionador de silicona es, típicamente, de aproximadamente 0.01 % a aproximadamente 10 %. Se describen ejemplos no limitantes de agentes acondicionadores de silicona adecuados y agentes de suspensión opcionales para la silicona en la reemisión de patente de los EE. UU núm. 34,584 y en las patentes de los Estados Unidos núms. 5,104,646 y 5,106,609; 4,152,416; 2,826,551 ; 3,964,500; 4,364,837; 6,607,717; 6,482,969; 5,807,956; 5,981 ,681 ; 6,207,782; 7,465,439; 7,041 ,767; 7,217,777; solicitud de patente publicada de los Estados Unidos núms. 2007/0286837A1 ; 2005/0048549A1 ; 2007/0041929A1 ; la patente británica núm. 849,433; la patente alemana núm. DE 10036533, todas ellas incorporadas en la presente descripción como referencia; Chemistry and Technology of Silicones, Nueva York: Academic Press (1968). y en las fichas de especificaciones técnicas del caucho de silicona de General Electric SE 30, SE 33, SE 54 y SE 76; Silicon Compounds, Petrarch Systems, Inc. (1984); y en Encyclopedia of Polymer Science and Engineering, vol. 15, 2. edición, págs. 204-308, John Wiley & Sons, Inc. (1989).

Las composiciones de la presente invención pueden comprender, además, de aproximadamente 0.05 % a aproximadamente 3 % de al menos un aceite acondicionador orgánico como el agente acondicionador, solo o en conjunto con otros agentes acondicionadores, tales como las siliconas (descritas en la presente descripción). Los aceites acondicionadores adecuados incluyen aceites de hidrocarburos, poliolefinas y ésteres grasos. Además, son adecuados para usar en las composiciones de la presente descripción, los agentes acondicionadores descritos por Procter & Gamble Company en las patentes de los Estados Unidos núms. 5,674,478 y 5,750,122. Además, son adecuados para usar en la presente descripción los agentes acondicionadores descritos en las patentes de los Estados Unidos núms. 4,529,586, 4,507,280, 4,663,158, 4,197,865, 4,217, 914, 4,381 ,919 y 4,422, 853.

Higiene y mal olor. Las composiciones de la presente invención pueden comprender, además, uno o más de ricinoleato de zinc, timol, sales de amonio cuaternario, tales como Bardac®, polietileniminas (tales como Lupasol® de BASF) y complejos de zinc de estos, plata y compuestos de plata, especialmente, los diseñados para liberar lentamente Ag+ o nanodispersiones de plata.

Probióticos. Las composiciones pueden comprender probióticos, tales como los descritos en la patente núm. WO2009/043709.

Potenciadores de espuma. Si se desea mucha formación de espuma, potenciadores de espuma, tales como las alcanolamidas de Ci0-C 6 o alquilsulfatos de C10-C14 pueden incorporarse en las composiciones, típicamente, a concentraciones de 1 % a 10 %. Las monoetanol y dietanolamidas de C10-Ci4 ilustran una clase típica de tales reforzadores de espuma. También es ventajoso el uso de estos potenciadores de espuma con surfactantes agregados de mucha espuma, como óxidos de amina, betaínas y sultaínas mencionadas anteriormente. Si se desea, se puede añadir sales de magnesio y/o calcio solubles en agua tales como MgCI2, MgS04, CaCI2, CaS04 y lo similar, típicamente, en niveles de 0.1 %-2 %, para proporcionar espuma adicional y para mejorar el rendimiento de remoción de grasa.

En las composiciones de la presente invención, se puede incorporar compuestos con supresores de espuma para reducir o suprimir la formación de espumas. La reducción de espuma puede ser de particular importancia en el proceso conocido como "proceso de limpieza de concentración alta" como se describe en las patentes de los Estados Unidos núms. 4,489,455 y 4,489,574, y en lavarropas de carga frontal.

Una amplia variedad de materiales puede usarse como supresores de espuma y estos supresores son bien conocidos para aquellos con experiencia en la industria. Ver, por ejemplo, Kirk Othmer Encyclopedia of Chemical Technology, tercera edición, volumen 7, págs. 430-447 (John Wiley & Sons, Inc., 1979). Los ejemplos de reductores de espuma incluyen ácidos grasos monocarboxílicos y sales solubles de estos, hidrocarburos de alto peso molecular, tales como parafina, ésteres de ácidos grasos (p. ej., triglicéridos de ácidos grasos), ésteres de ácidos grasos de alcoholes monovalentes, cetonas alifáticas de Ci8-C40 (p. ej., estearona), aminotriazinas N-alquiladas, hidrocarburos cerosos que tienen, preferentemente, un punto de fusión por debajo de aproximadamente 100 °C, reductores de espuma de silicona y alcoholes secundarios. Los supresores de espuma se describen en las patentes de los Estados Unidos núms. 2,954,347; 4,265,779; 4,265,779; 3,455,839; 3,933,672; 4,652,392; 4,978,471 ; 4,983,316; 5,288,431 ; 4,639,489; 4,749,740; y 4,798,679; 4,075,1 18; solicitud de patente europea núm. 89307851.9; la patente núm. EP 150,872; y la patente núm. DOS 2,124,526.

En el caso de las composiciones detergentes útiles en lavarropas automáticos para lavandería no debería formarse tanta espuma como para desbordarse del lavarropas. Cuando se usan, los supresores de espuma están presentes, preferentemente, en una "cantidad supresora de espuma". "Cantidad supresora de espuma" significa que el formulador de la composición puede seleccionar una cantidad de este agente de control de espuma que controlará suficientemente la espuma para producir un detergente para lavandería de baja espuma para usar en lavarropas automáticos para lavandería.

Las composiciones de la presente invención comprenderán, generalmente, de 0 % a aproximadamente 10 % de supresor de espuma. Cuando se usan como supresores de espuma, los ácidos grasos monocarboxílicos y las sales en estos estarán presentes, típicamente, en cantidades de hasta aproximadamente 5 %, en peso, de la composición detergente. Preferentemente, se usa de aproximadamente 0.5 % a aproximadamente 3 % de supresor de espuma de monocarboxilato graso. Los supresores de espuma de silicona se usan, típicamente, en cantidades de hasta aproximadamente 2.0 %, en peso, de la composición detergente, si bien pueden usarse cantidades superiores. Los supresores de espuma de monoestearil fosfato se usan, generalmente, en cantidades de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 2 %, en peso, de la composición. Los supresores de espuma de hidrocarburos se usan, típicamente, en cantidades de aproximadamente 0.01 % a aproximadamente 5.0 %, si bien pueden usarse niveles más altos. Los supresores de espuma de alcohol se usan, típicamente, en una concentración de 0.2 %-3 % en peso de las composiciones finales.

Película soluble en agua. Las composiciones de la presente invención pueden encapsularse, además, dentro de una película soluble en agua. Los materiales preferidos de la película son, preferentemente, materiales poliméricos. El material de película puede, por ejemplo, obtenerse por colada, moldeo por soplado, extrusión o extrusión soplada del material polimérico, como se conoce en la materia.

Los polímeros, copolímeros o derivados de estos preferidos, adecuados para usar como material de la bolsita se seleccionan de alcoholes polivinílicos, polivinilpirrolidona, óxido de polialquileno, acrilamida, ácido acrílico, celulosa, éteres de celulosa, ésteres de celulosa, amidas de celulosa, acetato de polivinilo, ácidos policarboxílicos y sus sales, poliaminoácidos o péptidos, poliamidas, poliacrilamidas, copolímeros de ácidos maleico/acrílico, polisacáridos, que incluyen almidón y gelatina, gomas naturales, tales como xantana y carragenina. Los polímeros que más se prefieren se seleccionan de poliacrilatos y copolímeros de acrilato soluble en agua, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, dextrina, etilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, maltodextrina, polimetacrilatos y, con la máxima preferencia, seleccionados de alcoholes polivinílicos, copolímeros de alcohol polivínilico e hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) y combinaciones de estos. Preferentemente, el nivel del polímero en el material de la bolsita, por ejemplo, un polímero de PVA, es de al menos 60 %. El polímero puede tener cualquier peso molecular promedio ponderado, preferentemente, de aproximadamente 1000 a 1 ,000,000, con mayor preferencia, de aproximadamente 10,000 a 300,000, aun con mayor preferencia, de aproximadamente 20,000 a 150,000. Además, se pueden usar mezclas de polímeros como material para la bolsita.

Naturalmente, se pueden emplear materiales de película diferentes y/o películas de diferente grosor para fabricar los compartimientos de la presente invención. Un beneficio de seleccionar películas diferentes es que los compartimientos resultantes pueden presentar características distintas de solubilidad o liberación.

Los materiales de película de mayor preferencia son películas de PVA conocidas con la marca MonoSol, referencia M8630, M8900, H8779 (como se describe en las solicitudes copendientes de los solicitantes, referencia 44528 y 11599) y aquellos descritos en las patentes de los Estados Unidos núms. 6,166,117 y 6,787,512, y las películas de PVA con características de solbubilidad y deformación correspondientes.

El material de la película de la presente también puede comprender uno o más ingredientes aditivos. Por ejemplo, puede resultar benéfico agregar agentes plastificantes, por ejemplo, glicerol, etilenglicol, dietilenglicol, propilenglicol, sorbitol, y mezclas de estos. Otros aditivos incluyen aditivos con función detergente que se suministran en el agua de lavado, por ejemplo, agentes dispersantes orgánicos poliméricos, etc.

Procesos para preparar las composiciones Las composiciones de la presente invención pueden formularse en cualquier forma adecuada y prepararse por cualquier proceso que el formulador seleccione, cuyos ejemplos no limitantes se describen en los ejemplos de los solicitantes y en la patente de los Estados Unidos núm. 4,990,280; la patente de los Estados Unidos núm. 20030087791 A1 ; la patente de los Estados Unidos núm. 20030087790A1 ; la patente de los Estados Unidos núm. 20050003983A1 ; la patente de los Estados Unidos núm. 20040048764A1 ; la patente de los Estados Unidos núm. 4,762,636; la patente de los Estados Unidos núm. 6,291 ,412; la patente de los Estados Unidos núm. 20050227891 A1 ; la patente europea núm. EP 1070115A2; la patente de los Estados Unidos núm. 5,879,584; 5,691,297; 5,574,005; 5,569,645; 5,565,422; 5,516,448; 5,489,392; y 5,486,303, todas ellas incorporadas en la presente descripción como referencia. Las composiciones de la presente invención o las composiciones preparadas de conformidad con la presente invención comprenden una composición de limpieza y/o tratamiento que incluye, pero no se limita a, productos para tratar telas, superficies duras y cualquier otra superficie en el área de cuidado de telas y del hogar, que incluyen: cuidado ambiental, que incluyen modificadores ambientales y sistemas de suministro de fragancias, cuidado del automóvil, lavado de vajilla, acondicionamiento de telas (que incluyen renovadores y/o suavizantes de telas), detergentes para lavandería, cuidados y/o aditivos de enjuague y lavandería, limpieza y/o tratamiento de superficies duras, que incluyen limpiadores para pisos y tazas de inodoro, agentes de lavado granulares o en polvo de gran rendimiento o para todo propósito, especialmente, detergentes de limpieza; agentes de lavado multipropósito líquidos, en gel o pasta, especialmente, los tipo líquidos denominados de gran rendimiento; detergentes líquidos para telas delicadas; agentes para el lavado manual de vajilla o agentes de bajo rendimiento para el lavado de vajilla, especialmente, los del tipo que producen mucha espuma; agentes para lavadoras automáticas de vajilla, que incluyen los diversos tipos en forma de tableta, gránulo, líquido y auxiliar de enjuague para uso institucional y doméstico: champús para automóviles o alfombras, limpiadores de baño que incluyen limpiadores de inodoro; así como auxiliares de limpieza, tales como aditivos de blanqueamiento y tipos de "limpiamanchas en barra" o para pretratamiento, productos cargados de sustratos tales como hojas añadidas en el secador. Se prefiere las composiciones y métodos para limpiar y/o tratar textiles y/o superficies duras, con la máxima preferencia, textiles. Las composiciones son, preferentemente, composiciones usadas en una etapa previa al tratamiento o etapa de lavado principal de un proceso de lavado, con la máxima preferencia, para usar en la etpa de lavado de textiles.

Como se usa en la presente descripción, la expresión "composición de tratamiento y/o limpieza de telas y/o superficies duras" es un subconjunto de las composiciones de tratamiento y limpieza que incluye, a menos que se indique de cualquier otra manera, agentes de lavado granulares o en polvo de gran rendimiento o para todo propósito, especialmente, los detergentes de limpieza; agentes de lavado multipropósito líquidos, en gel o pasta, especialmente los tipos líquidos denominados de gran rendimiento; detergentes líquidos para telas delicadas; agentes para el lavado manual de vajilla o agentes de bajo rendimiento para el lavado de vajilla, especialmente, los del tipo que producen mucha espuma; agentes para lavadoras automáticas de vajillas, que incluyen los diversos tipos en forma de tableta, gránulos o líquidos y auxiliares de enjuague para uso institucional y doméstico; agentes limpiadores y desinfectantes líquidos, champús para automóviles o alfombras, limpiadores de baño, que incluyen limpiadores de inodoro; productos acondicionadores de telas que incluyen suavizantes y/o renovadores pueden estar en forma líquida, sólida y/o de hojas añadidas en el secador; así como auxiliares de limpieza, tales como aditivos de blanqueamiento y tipos de "limpiamanchas en barra" o para pretratamiento, productos cargados de sustratos tales como hojas añadidas en el secador. Todos estos productos de aplicación pueden estar en forma normal, concentrada o incluso altamente concentrada hasta el punto de poder ser, en ciertos aspectos, no acuosos.

Método de uso La presente invención incluye un método para limpiar y/o tratar una tela o superficie dura u otra superficie en el cuidado de telas o del hogar. En un aspecto preferido de la presente invención, el método comprende la etapa de poner en contacto la superficie a tratar en una etapa previa al tratamiento o etapa de lavado principal de un proceso de lavado, con la máxima preferencia, para usar en una etapa de lavado de telas. En una modalidad de la presente invención, la variante de lipasa y los componentes blanqueadores se agregan secuencialmente en el método para limpiar y/o tratar la superficie. Por ejemplo, en un método preferido puede haber una etapa de blanqueamiento previa al tratamiento en la que el componente blanqueador se puede poner en contacto con la superficie en una etapa previa al tratamiento y la superficie tratada previamente en presencia del componente blanqueador se pone entonces en contacto en una segunda etapa con la variante de lipasa. Alternativamente, la variante de lipasa se puede poner en contacto con la superficie antes de la adición posterior del componente blanqueador.

Como se usa en la presente descripción, lavado incluye, pero no se limita a, restregado y agitación mecánica. El secado de esas superficies o telas se puede realizar por cualquiera de los medios comunes usados en el hogar o en la industria. Las composiciones de limpieza de la presente invención son idealmente adecuadas para usar en aplicaciones de lavandería. En consecuencia, la presente invención incluye un método para el lavado de telas. El método comprende el contacto entre la tela que se lavará y la solución limpiadora que contiene al menos una modalidad de la composición limpiadora o aditivo de limpieza de la presente o una mezcla de estos. La tela puede comprender casi cualquier tela que habitualmente se pueda lavar en las condiciones normales del uso propio o institucional. La solución tiene, preferentemente, un pH de aproximadamente 8 a aproximadamente 10.5. Las composiciones pueden emplearse en concentraciones de aproximadamente 500 ppm a aproximadamente 15,000 ppm en solución. Las temperaturas del agua varían, típicamente, de aproximadamente 5 °C a aproximadamente 90 °C. La proporción aproximada del agua a la tela típicamente varía entre 1 :1 y 30:1.

La presente invención se describe, además, por medio de los siguientes ejemplos que no deben interpretarse como limitantes del alcance de la presente invención.

Ejemplos Ejemplo 1. Ensayo de esfuerzo mecánico automático para lavandería Para evaluar la estabilidad a la degradación oxidativa de la variante de lipasa, se determina el valor para el rendimiento relativo (RR de lavado): rendimiento (R) de lavado de la variante de lipasa de la presente invención en comparación con la lipasa de la sec. con núm. de ident.:1 o RR = R(variante de lipasa de la invención) / R(lipasa de la sec. con núm. de ident.:1). El rendimiento de lavado se determina al llevar a cabo experimentos de lavado de ropa con el uso del ensayo de esfuerzo mecánico automático (AMSA, por sus siglas en inglés). Con el AMSA, se puede examinar el rendimiento de lavado de una cantidad grande de volúmenes pequeños de soluciones de lipasa-detergente. La placa del AMSA tiene varias ranuras para las soluciones de prueba y una tapa que aprieta firmemente la tela manchada contra todas las aberturas de las ranuras. Durante el tiempo de lavado, la placa, las soluciones de prueba, la tela y la tapa se agitan vigorosamente para poner la solución de prueba en contacto con la tela y aplicar estrés mecánico en una forma oscilante periódica y regular. Para una mayor descripción ver la patente núm. WO 02/42740, especialmente, el párrafo "Modalidades especiales del método" en las páginas 23-24.

Los experimentos de lavandería se llevan a cabo en condiciones experimentales que se especifican a continuación: Los detergente modelo y los materiales de prueba fueron los siguientes: * el catalizador de blanqueo tiene una estructura química correspondiente a la fórmula química: en en donde R13 es 2-butiloctilo, La durezas del agua se ajusta hasta 18 °dH por adición de CaCI2, MgCI2 y NaHC03 (Ca2+:Mg2+ = 4:1 :7.5) en el sistema de prueba. Después de lavar, las telas se colocan en agua del grifo y se secan durante 5 minutos a 85 °C en una unidad de calentamiento.

El rendimiento de lavado se determina como el brillo del color de la tela lavada. El brillo puede expresarse, además, como la intensidad de la luz reflejada a partir de la muestra cuando se ilumina con luz blanca. Cuando la muestra está manchada la intensidad de la luz reflejada es más baja que la de una muestra limpia. Por lo tanto, la intensidad de la luz reflejada puede usarse para medir el rendimiento de lavado.

Se realizan mediciones del color con un escáner de cama plana profesional (Kodak ¡Qsmart, Kodak, Midtager 29, DK-2605 Brondby, Dinamarca) que se usa para captar una imagen de la tela lavada.

Para obtener un valor para la intensidad de la luz a partir de las imágenes escaneadas, los valores en pixeles de 24 bits de la imagen se convierten en valores para rojo, verde y azul (RGB). El valor de la intensidad (Int) se calcula al sumar los valores RGB juntos como vectores y tomar, después, la longitud del vector resultante: Int=^r2 +g2 +b2 El rendimiento (R) de lavado de la variante de lipasa se calcula de conformidad con la siguiente fórmula: R = Alnt = lnt(v) - lnt(r), en donde lnt(v) es el valor de intensidad de luz de la superficie textil lavada con la variante de lipasa e lnt(r) es el valor de intensidad de luz de la superficie textil lavadaa sin la variante de lipasa.

Cálculo del puntaje de rendimiento relativo (RR de lavado): El puntaje de desempeño relativo se expresa como el resultado de la escala completa lavada de acuerdo con la definición: Los puntajes de rendimiento relativo (RR de lavado) dan un rendimiento (R) de la variante de lipasa de la presente invención contra la lipasa convencional: RR = R(variante de lipasa de la invención) / R(lipasa convencional). Se considera que una formulación de lipasa muestra un rendimiento de lavado mejorado, si se comporta mejor que la lipasa convencional.

Ejemplo 2. Variantes de G91 con un rendimiento mejorado en presencia de catalizadores de blanqueo Ejemplo 3. Variantes de T37 con un rendimiento mejorado en presencia de catalizadores de blanqueo Eiemplo 4: Variantes de N39 con un rendimiento mejorado en presencia de catalizadores de blanqueo Eiemplo 5. Variantes con dos o más mutaciones v con un rendimiento meiorado en presencia de catalizadores de blanqueo Ejemplos 1-6 de la composición Composiciones detergentes granulares para lavandería diseñadas para el lavado a mano o en lavadoras de carga superior.

El copolímero de injerto aleatorio es un copolímero de óxido de polietileno injertado con acetato de polivinilo que tiene una cadena principal de óxido de polietileno y múltiples cadenas laterales de acetato de polivinilo. El peso molecular del esqueleto de óxido de polietileno es aproximadamente 6000 y la relación en peso del óxido de polietileno a acetato de polivinilo es aproximadamente 40 a 60 y no mayor que 1 punto de injerto por 50 unidades de óxido de etileno.

Ejemplos 7-12 de la composición Composiciones detergentes granulares para lavandería diseñadas para lavarropas automáticos de carga frontal.

Cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente se usa para lavar telas a una concentración de 7000 a 10000 ppm en agua, 20-90 °C y una relación 5:1 de aguaítela. El pH típico es de aproximadamente 10. Después, las telas se secan. En un aspecto, las telas se secan activamente mediante el uso de un secador. En un aspecto, las telas se secan activamente mediante el uso de una plancha. En otro aspecto, las telas simplemente se dejan secar en una cuerda en donde están expuestas al aire y, opcionalmente, a la luz solar.

Ejemplos 13-18 de la composición. Composiciones de detergente para ropa líquido de gran rendimiento Ejemplos 19-31 de la composición - Composiciones de dosis unitaria. Estas son las formulaciones para detergentes para ropa de dosis unitaria. Dichas formulaciones en dosis unitarias pueden comprender uno o varios compartimentos.

Polietilenimina (MW = 600) con 20 grupos de etoxilato por -NH.

Materias primas v notas para los ejemplos de composiciones 1 a 23 El sulfonato de alquilbenceno lineal con una extensión promedio de cadena alifática carbonada de Cu -C12, suministrado por Stepan, Northfield, Illinois, Estados Unidos El cloruro de dimetilhidroxietil amonio de C12-14 es suministrado por Clariant GmbH, Sulzbach, Alemania AE3S es alquil etoxi (3) sulfato de C12-15, suministrado por Stepan, Northfield, Illinois, Estados Unidos AE7 es alcohol etoxilado de C1 2-15, con un grado promedio de etoxilación de 7, suministrado por Huntsman, Salt Lake City, Utah, Estados Unidos AE9 es etoxilato de alcohol de C12-13, con un grado promedio de etoxilación de 9, suministrado por Huntsman, Salt Lake City, Utah, Estados Unidos HSAS es un alquilsulfato primario de media cadena con una longitud de la cadena de carbono de aproximadamente 16-17 El tripolifosfato de sodio es distribuido por Rhodia, París, Francia.

La zeolita A es distribuida por Industrial Zeolite (Reino Unido) Ltd, Grays, Essex, Reino Unido.

El silicato 1.6R es distribuido por Koma, Nestemica, República Checa.

El carbonato de sodio es suministrado por Solvay, Houston, Texas, Estados Unidos El pollacrilato MW 4500 es distribuido por BASF, Ludwigshafen, Alemania. La carboximetilcelulosa es Finnfix® V suministrada por CP Kelco, Arnhem, Países Bajos Los quelantes adecuados son, por ejemplo, ácido dietilentetraamina pentaacétido (DTPA) suministrado por Dow Chemical, Midland, Michigan, Estados Unidos o hidroxietano difosfonato (HEDP) suministrado por Solutia, St Louis, Missouri, Estados Unidos Savinase®, Natalase®, Stainzyme®, Lipex®, Celluclean™, Mannaway® y Whitezyme® son todos productos de Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca.

Las proteasas pueden estar suministradas por Genencor International, Palo Alto, California, Estados Unidos (p. ej. Purafect Prime®), o por Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca (p. ej. Liquanase®, Coronase®).

El abrillantador fluorescente 1 es AMS de Tinopal®, el abrillantador fluorescente 2 es CBS-X de Tinopal®, la ftalocianina de zinc sulfonada y el violeta directo 9 es Violet BN-Z de Pergasol®, todos suministrados por Ciba Specialty Chemicals, Basel, Suiza El percarbonato de sodio es distribuido por Solvay, Houston, Texas, Estados Unidos El perborato de sodio es distribuido por Degussa, Hanau, Alemania.

NOBS es sulfonato de nonanoiloxibenceno sódico, distribuido por Future Fuels, Batesville, Arkansas, Estados Unidos TAED es tetraacetiletilendiamina, distribuida con el nombre comercial Peractive® por Clariant GmbH, Sulzbach, Alemania.

El catalizador orgánico de blanqueo tiene la siguiente estructura, en donde R13 = 2-butiloctilo, y se produce de conformidad con la solicitud de patente de los Estados Unidos núm. 2006/0089284A1.

S-ACMC es carboximetilcelulosa conjugada con C.l. azul reactivo 19, distribuida por Megazyme, Wickiow, Irlanda, con el nombre de producto AZO-CM-CELLULOSE, código de producto S-ACMC.

El agente de desprendimiento de suciedad es SRA300 de Texcare®, suministrado por Clariant, Frankfurt, Alemania El copolímero de ácido acrílico/ácido maleico tiene un peso molecular de 70,000 y una proporción de acrilato:maleato de 70:30, y es distribuido por BASF, Ludwigshafen, Alemania.

La sal sódica de isómero (S,S) de ácido etilendiamina-N,N'-disuccín¡co (EDDS) es distribuida por Octel, Ellesmere Port, Reino Unido.

El hidroxietano difosfónico (HEDP) es suministrado por Dow Chemical, Midland, Michigan, Estados Unidos El aglomerado supresor de espuma es distribuido por Dow Corning, Midland, Michigan, Estados Unidos HSAS (alquilsulfato de alta solubilidad, por sus siglas en inglés) es alquilsulfato de media cadena, tal como se describe en las patentes de los Estados Unidos núms. 6,020,303 y 6,060,443 Óxido de dimetilamina de C suministrado por Procter &Gamble Chemicals, Cincinnati, Ohio, Estados Unidos Violet CT de Liquitint® y los tintes de tiofeno etoxilado se suministran por Milliken, Spartanburg, South Carolina, Estados Unidos Las dimensiones y los valores expuestos en la presente no deben entenderse como estrictamente limitados a los valores numéricos exactos mencionados. En lugar de eso, a menos que se especifique de cualquier otra manera, cada una de esas dimensiones se referirá tanto al valor mencionado como a un intervalo funcionalmente equivalente que comprende ese valor. Por ejemplo, una dimensión expresada como "40 mm" se entenderá como "aproximadamente 40 mm".

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Un método para limpiar un textil o superficie dura u otra superficie en el cuidado de telas y del hogar; el método comprende las siguientes etapas: a) poner la superficie en contacto con una solución acuosa que comprende (i) una lipasa; y (ii) un componente blanqueador y (iii) complemento detergente opcional; b) enjuagar y secar el textil o superficie dura; caracterizado porque la lipasa tiene una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa en comparación con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 y actividad de lipasa.

2. Un método para limpiar un textil o superficie dura u otra superficie en el cuidado de telas y del hogar; el método comprende las siguientes etapas: a) poner la superficie en contacto con una solución acuosa que comprende (i) una lipasa; y (ii) un componente blanqueador y (iii) complemento detergente opcional; b) enjuagar y secar el textil o superficie dura; caracterizado porque la lipasa comprende una variante de lipasa que comprende una sustitución en una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 , en donde la variante tiene actividad de lipasa.

3. Un método para producir una composición detergente que comprende una lipasa que muestra una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa; el método comprende la etapa de mezclar una variante de lipasa que tiene una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa en comparación con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ¡dent.:1 , caracterizado porque la variante tiene actividad de lipasa y comprende, preferentemente, una sustitución en una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 , con un complemento detergente.

4. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la lipasa muestra una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa en presencia de un compuesto de la Fórmula 2: Fórmula 2 en donde R1 es 2-butiloctilo, según la prueba definida en el Ejemplo 1 de la presente descripción.

5. Un método de conformidad con la reivindicación 3 o reivindicación 4, caracterizado además porque la lipasa se mezcla con un componente blanqueador.

6. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , 2 o 5, caracterizado además porque el componente blanqueador comprende un catalizador de blanqueo que tiene la capacidad de aceptar un átomo de oxígeno de un peroxiácido y trasladar el átomo de oxígeno a un sustrato oxidable y (ii) una especie de peróxido de diacilo y/o de tetraacilo, preferentemente, un catalizador de blanqueo que comprende un grupo funcional iminio y/o carbonilo, con la máxima preferencia, un grupo funcional oxazidinio y/o dioxirano y/o tiene la capacidad de formar un grupo funcional oxaziridinio y/o dioxirano con la aceptación de un átomo de oxígeno.

7. Un método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque el catalizador de blanqueo tiene una estructura química correspondiente a la fórmula química: en donde: n y m son independientemente de 0 a 4; cada R se selecciona independientemente de un radical sustituido o no sustituido seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilo fusionado, anillo heterocíclico, anillo heterocíclico fusionado, radicales nitro, halo, ciano, sulfonato, alcoxi, ceto, carboxílico y carboalcoxi y dos sustituyentes R1 vecinales cualquiera pueden combinarse para formar un arilo fusionado, anillo carbocíclico fusionado o anillo heterocíclico fusionado; cada R2 se selecciona, independientemente, de un radical sustituido o no sustituido seleccionado, independientemente, del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, alcarilo, arilo, aralquilo, alquileno, anillo heterocíclico, alcoxi, grupos arilcarbonilo, grupos carboxialquilo y grupos amida; cualquier R2 puede unirse con otra R2 para formar parte de un anillo común; cualquier R germinal2 puede combinarse para formar un carbonilo; y caracterizada además porque dos R2 cualquiera pueden combinarse para formar una entidad sustituida o no sustituida fundida insaturada; R3 es un alquilo de Ci a C20 sustituido o no sustituido; R4 es hidrógeno o la entidad Qt-A, caracterizado además porque: Q es un alquileno ramificado o no ramificado, t = 0 o 1 , y A es un grupo aniónico seleccionado del grupo que consiste en OS03~, S03', C02", OC02", OP032~, OP03H" y OP02"; R5 es hidrógeno o la entidad -CR11R 2-Y-Gb-Yc-[(CR9R10)y-O]k-R8. en donde: cada Y se selecciona, independientemente, del grupo que consiste en O, S, N-H, o N-R8; y cada R8 se selecciona, independientemente, del grupo que consiste en alquilo, arilo y heteroarilo, tales entidades son sustituidas o no sustituidas, y ya sean tanto sustituidas como no sustituidas, tales entidades tienen menos de 21 carbonos; cada G se selecciona, independientemente, del grupo que consiste en CO, S02, SO, PO y P02; R9 y R10 se seleccionan, independientemente, del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo de CrC4; R11 y R12 se seleccionan, independientemente, del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo, o cuando se toman juntos pueden unirse para formar un carbonilo; b = 0 o 1 ; c puede ser igual a 0 o 1 , pero debe ser igual a 0 cuando b es 0; y es un entero de 1 a 6; k es un entero de 0 a 20; R6 es H o una entidad alquilo, arilo o heteroarilo; tales entidades pueden ser sustituidas o no sustituidas; y X, si está presente, es un contraión de balance de carga adecuado, preferentemente, el catalizador de blanqueo tiene una estructura química correspondiente a la fórmula química: en donde R13 es un grupo alquilo ramificado que contiene de 3 a 24 carbonos o un grupo alquilo lineal que contiene de 1 a 24 carbonos, con la máxima preferencia, en donde R13 se selecciona del grupo que consiste en 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, iso- tridecilo e iso-pentadecilo.

8. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la lipasa genitora comprende una secuencia de aminoácidos con por lo menos 60 % de identidad con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ¡dent.: 1 ; consiste en la secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 o un fragmento de esta que tiene actividad de lipasa.

9. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la variante es: a. un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos con por lo menos 60 % de identidad con el polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 ; b. un polipéptido codificado por un polinucleótido que se hibridiza en por lo menos condiciones de rigurosidad baja con: (i) la secuencia codificante de polipéptidos maduros de la sec. con núm. de ident.: 1 ; o (ii) una cadena complementaria de longitud total de (i) o c. un polipéptido codificado por un polinucleótido que comprende una secuencia de nucleotidos que tiene por lo menos 60 % de identidad con la secuencia codificante de polipéptidos maduros de la sec. con núm. de ident.: 1.

10. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la sustitución en la variante de lipasa se selecciona de T37A,D,E,F,G,HJ,L,N,P,Q,R,S,V,W,Y, NSQA.C.D.E.F^. K.L.M.P.Q.RJ.V.W.Y y G91 D,H,I,P,Q.

1 1. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la variante comprende la sustitución G91 A.

12. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la variante comprende, además, una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones D96, T143, A150, E210, G225, T231 , N233 y P250 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.: 1 , preferentemente, una sustitución seleccionada de D96G, T143A, A150G, E210Q, G225R, T231 R, N233R y P250R, y mezclas de estos.

13. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado además porque la variante tiene las siguientes sustituciones: a. G91 A +D96G +T231 R +N233R; b. G91 Q +T143A +E21 OQ +T231 R +N233R +P250R; c. G91 Q +A150G +E21 OQ +T231 R +N233R +P250R; d. T37R +N39R +G91 A +D96G +T231 R +N233R; e. G91A +D96G +G225R +T231 R +N233R; f . G91 Q +E21 OQ +T231 R +N233R +P250R; g. G91 +E21 OQ +T231 R +N233R +P250R; h. G911 +E21 OQ +T231 R +N233R +P250R; i. G91 L +E21 OQ +T231 R +N233R; o j. G91A +D96G +A150G +T231 R +N233R.

14. Una composición de limpieza y/o tratamiento que comprende una variante de lipasa que tiene actividad de lipasa y que muestra una estabilidad mejorada a la degradación oxidativa y un complemento detergente.

15. Una composición de limpieza y/o tratamiento que comprende una variante de lipasa que tiene actividad de lipasa y que comprende una sustitución en una o más de las posiciones seleccionadas del grupo de posiciones correspondientes a T37, N39 y G91 del polipéptido maduro de la sec. con núm. de ident.:1 y un complemento detergente.