KR20210039411A - 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 2H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도 - Google Patents

톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 2H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20210039411A
KR20210039411A KR1020217005766A KR20217005766A KR20210039411A KR 20210039411 A KR20210039411 A KR 20210039411A KR 1020217005766 A KR1020217005766 A KR 1020217005766A KR 20217005766 A KR20217005766 A KR 20217005766A KR 20210039411 A KR20210039411 A KR 20210039411A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
compound
cancer
moiety
group
Prior art date
Application number
KR1020217005766A
Other languages
English (en)
Inventor
얌 비. 포우델
산지브 강과르
리치 헤
프라산나 시바프라카삼
Original Assignee
브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 filed Critical 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Publication of KR20210039411A publication Critical patent/KR20210039411A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

화학식 II에 따른 화합물은 톨-유사 수용체 7 (TLR7)의 효능제로서 유용하다. 이러한 화합물은 암 치료, 특히 항암 면역요법제와 조합하여 또는 백신 보조제로서 사용될 수 있다.

Description

톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 2H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 35 U.S.C. §119(e) 하의 2018년 8월 3일에 출원된 미국 가출원 일련 번호 62/714,238의 이익을 청구하고; 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
개시내용의 배경
본 개시내용은 톨-유사 수용체 7 ("TLR7") 효능제 및 그의 접합체, 및 이러한 효능제 및 그의 접합체의 제조 방법 및 용도에 관한 것이다.
톨-유사 수용체 ("TLR")는 특정 클래스의 병원체 내에 보존된 소분자 모티프인 병원체-연관 분자 패턴 ("PAMP")을 인식하는 수용체이다. TLR은 세포의 표면 상에 또는 세포내에 위치될 수 있다. TLR과 동족 PAMP의 결합에 의한 TLR의 활성화는 숙주 내에서 연관된 병원체의 존재- 즉, 감염 -를 신호전달하여, 숙주의 면역계가 감염과 싸우도록 자극한다. 인간은 TLR1, TLR2, TLR3 등으로 명명되는 10종의 TLR을 갖는다.
효능제에 의한 TLR의 활성화는 - TLR7이 가장 많이 연구됨 - 전체적인 면역 반응을 자극함으로써, 실제 병원체 감염 이외의 다양한 상태의 치료에서 백신 및 면역요법제의 작용에 대한 긍정적인 효과를 가질 수 있다. 따라서, 백신 보조제로서의 또는 암 면역요법에서 인핸서로서의 TLR7 효능제의 사용에 상당한 관심이 있다. 예를 들어, 문헌 [Vasilakos and Tomai 2013, Sato-Kaneko et al. 2017, Smits et al. 2008, 및 Ota et al. 2019]을 참조한다.
엔도솜의 막에 위치된 세포내 수용체인 TLR7은 단일-가닥 RNA 바이러스와 연관된 PAMP를 인식한다. 그의 활성화는 제I형 인터페론 예컨대 IFNα 및 IFNβ의 분비를 유도한다 (Lund et al. 2004). TLR7은 2개의 결합 부위을 가지며, 하나는 단일 가닥 RNA 리간드에 대한 것이고 (Berghoefer et al. 2007), 하나는 소분자 예컨대 구아노신에 대한 것이다 (Zhang et al. 2016).
TLR7은 구아노신-유사 합성 효능제 예컨대 1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린 스캐폴드에 기반한 이미퀴모드, 레시퀴모드 및 가르디퀴모드에 결합하고, 그에 의해 활성화될 수 있다. 소분자 TLR7 효능제의 검토를 위해, 문헌 [Cortez and Va 2018]을 참조한다.
Figure pct00001
프테리디논 분자 스캐폴드에 기반한 합성 TLR7 효능제는 베사톨리모드에 의해 예시된 바와 같이 공지되어 있다 (Desai et al. 2015).
Figure pct00002
퓨린-유사 스캐폴드에 기반한 다른 합성 TLR7 효능제는 빈번하게 화학식 (A)에 따라 개시된 바 있다:
Figure pct00003
여기서 R, R', 및 R"은 구조적 가변기이고, R"은 전형적으로 비치환되거나 또는 치환된 방향족 또는 헤테로방향족 고리를 함유한다.
퓨린-유사 스캐폴드를 갖는 생물활성 분자 및 상태 예컨대 섬유증, 염증성 장애, 암 또는 병원성 감염을 치료하는데 그의 용도에 대한 개시내용은 하기를 포함한다: Akinbobuyi et al. 2015 and 2016; Barberis et al. 2012; Carson et al. 2014; Ding et al. 2016, 2017a, and 2017b; Graupe et al. 2015; Hashimoto et al. 2009; He et al. 2019a and 2019b; Holldack et al. 2012; Isobe et al. 2009a and 2012; Poudel et al. 2019a and 2019b; Pryde 2010; 및 Young et al. 2019.
기 R"는 피리딜일 수 있다: Bonfanti et al. 2015a and 2015b; Halcomb et al. 2015; Hirota et al. 2000; Isobe et al. 2002, 2004, 2006, 2009a, 2009b, 2011, and 2012; Kasibhatla et al. 2007; Koga-Yamakawa et al. 2013; Musmuca et al. 2009; Nakamura 2012; Ogita et al. 2007; 및 Yu et al. 2013.
화학식 (A)의 6,5-융합 고리계 - 이미다졸 5원 고리에 융합된 피리미딘 6원 고리 -가 변형된 것인 관련 분자의 개시내용이 존재한다. (a) 문헌 [Dellaria et al. 2007, Jones et al. 2010 and 2012, 및 Pilatte et al. 2017]은 피리미딘 고리가 피리딘 고리로 대체된 것인 화합물을 개시한다. (b) 문헌 [Chen et al. 2011, Coe et al. 2017, 및 Zhang et al. 2018]은 이미다졸 고리가 피라졸 고리로 대체된 것인 화합물을 기재한다. (c) 문헌 [Cortez et al. 2017 and 2018; Li et al. 2018; 및 McGowan et al. 2016a, 2016b, and 2017]은 이미다졸 고리가 피롤 고리로 대체된 것인 화합물을 기재한다.
문헌 [Bonfanti et al. 2015b and 2016 및 Purandare et al. 2019]는 퓨린 모이어티의 2개의 고리가 마크로사이클에 의해 가교된 것인 TLR7 조정제를 개시하고 있다:
TLR7 효능제는 예를 들어 인지질, 폴리(에틸렌 글리콜) ("PEG"), 항체 또는 또 다른 TLR (통상적으로 TLR2)일 수 있는 파트너 분자에 접합될 수 있다. 예시적인 개시내용은 하기를 포함한다: Carson et al. 2013, 2015, and 2016, Chan et al. 2009 and 2011, Cortez et al. 2017, Gadd et al. 2015, Lioux et al. 2016, Maj et al. 2015, Vernejoul et al. 2014, 및 Zurawski et al. 2012. 빈번한 접합 부위는 화학식 (A)의 R" 기이다.
문헌 [Jensen et al. 2015]은 TLR7 효능제의 전달을 위한 양이온성 지질 비히클의 용도를 개시하고 있다.
레시퀴모드를 포함하여, 일부 TLR7 효능제는 이중 TLR7/TLR8 효능제이다. 예를 들어 문헌 [Beesu et al. 2017, Embrechts et al. 2018, Lioux et al. 2016, 및 Vernejoul et al. 2014]을 참조한다.
제1 저자 또는 발명자 및 연도에 따른 본원에 인용된 문헌에 대한 정식 인용은 본 명세서의 말미에 열거되어 있다.
본 명세서는 TLR7 효능제로서의 활성을 갖는, 2H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 방향족계를 갖는 화합물에 관한 것이다.
Figure pct00004
한 측면에서, 화학식 II에 따른 구조를 갖는 화합물이 제공된다:
Figure pct00005
여기서
각각의 X1은 독립적으로 N 또는 CR2이고;
X2는 O, CH2, NH, S, 또는 N(C1-C3 알킬)이고;
R1은 H, CH3(CH2)1-3, CH3(CH2)0-1O(CH2)2-3, CH3(CH2)0-3C(=O), CH3(CH2)0-1O(CH2)2-3C(=O),
Figure pct00006
이고;
R2는 H, O(C1-C3 알킬), C1-C3 알킬, Cl, F, 또는 CN이고;
R3은 H, 할로, OH, CN, NH2, NH(C1-C5 알킬), N(C1-C5 알킬)2, NH(CH2)0-1(C3-C6 시클로알킬), NH(C4-C8 비시클로알킬), NH(C6-C10 스피로시클로알킬), N(C3-C6 시클로알킬)2, NH(CH2)1-3(아릴), N((CH2)1-3(아릴))2, 구조
Figure pct00007
를 갖는 시클릭 아민 모이어티, 6-원 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티 또는 5-원 헤테로방향족 모이어티이고;
여기서
알킬, 시클로알킬, 비시클로알킬, 스피로시클로알킬, 시클릭 아민, 6-원 방향족 또는 헤테로방향족, 또는 5-원 헤테로방향족 모이어티는 OH, 할로, CN, (C1-C3 알킬), O(C1-C3 알킬), C(=O)(Me), SO2(C1-C3 알킬), C(=O)(Et), NH2, NH(Me), N(Me)2, NH(Et), N(Et)2, 및 N(C1-C3 알킬), (CH2)1-2OH, (CH2)1-2OMe로부터 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
시클로알킬, 비시클로알킬, 스피로시클로알킬, 또는 시클릭 아민 모이어티는 O, S, SO2, NH, C(=O), N(C1-C3 알킬), NC(=O)(C1-C3 알킬), 또는 N(Boc)로 대체된 CH2 기를 가질 수 있고;
m은 0 또는 1이고;
n은 1, 2, 또는 3이다.
본원에 개시된 화합물은 TLR7 효능제로서 활성을 갖고, 일부는 의도된 작용의 표적 조직 또는 기관에 대한 표적화 전달을 위해 항체에 접합될 수 있다. 이들은 또한 PEG화되어 이들의 제약 특성을 조정할 수 있다.
본원에 개시된 화합물 또는 그의 접합체 또는 그의 PEG화 유도체는 면역계의 활성화에 의한 치료에 적용가능한 상태를 앓는 대상체에게 치료 유효량의 이러한 화합물 또는 그의 접합체의 또는 그의 PEG화 유도체를 특히 백신 또는 암 면역요법제와 조합하여 투여함으로써, 상기 대상체를 치료하는데 사용될 수 있다.
도 1, 2a, 2b, 3, 4a 및 4b는 본원에 개시된 화합물에 대한 반응식을 나타낸다.
도 5 및 6은 본 개시내용의 화합물에 링커를 부착하여 이들을 접합에 적합하게 하기 위한 반응식을 나타낸다.
정의
"항체"는 전체 항체 및 그의 임의의 항원 결합 단편 (즉 "항원-결합 부분") 또는 단일 쇄 변형체를 의미한다. 전체 또는 전장 항체는 디술피드 결합에 의해 상호-연결된 적어도 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)를 포함하는 단백질이다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 3개의 도메인인 CH1, CH2 및 CH3을 포함하는 중쇄 불변 영역을 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 (VL 또는 Vk) 및 1개의 단일 도메인인 CL을 포함하는 경쇄 불변 영역을 포함한다. VH 및 VL 영역은 보다 보존된 프레임워크 영역 (FR)이 점재된, 상보성 결정 영역 (CDR)으로 명명되는 초가변성의 영역으로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 아미노 말단에서 카르복시 말단으로 하기 순서: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, 및 FR4로 배열된, 3개의 CDR 및 4개의 FR을 포함한다. 가변 영역은 항원과 상호작용하는 결합 도메인을 함유한다. 불변 영역은 면역계의 다양한 세포 (예를 들어, 이펙터 세포) 및 전형적 보체계의 제1 성분 (Clq)을 포함한 숙주 조직 또는 인자에 대한 항체의 결합을 매개할 수 있다. 항체는 항체가 5 x 10-8 M 이하, 보다 바람직하게는 1 x 10-8 M 이하, 보다 바람직하게는 6 x 10-9 M 이하, 보다 바람직하게는 3 x 10-9 M 이하, 보다 더 바람직하게는 2 x 10-9 M 이하의 KD로 항원 X에 결합하는 경우에, 항원 X에 "특이적으로 결합한다"고 한다. 항체는 키메라, 인간화, 또는 바람직하게는, 인간일 수 있다. 중쇄 불변 영역은 글리코실화 유형 또는 정도에 영향을 미치거나, 항체 반감기를 연장시키거나, 이펙터 세포 또는 보체계와의 상호작용을 증진 또는 감소시키거나, 또는 일부 다른 특성을 조정하기 위해 조작될 수 있다. 조작은 1개 이상의 아미노산의 대체, 부가 또는 결실에 의해, 또는 도메인의 또 다른 이뮤노글로불린 유형으로부터의 도메인으로의 대체에 의해, 또는 상기의 조합에 의해 달성될 수 있다.
항체의 "항원 결합 단편" 및 "항원 결합 부분" (또는 간단하게 "항체 부분" 또는 "항체 단편")은 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는, 항체의 1개 이상의 단편을 의미한다. 항체의 항원-결합 기능은 전장 항체의 단편, 예컨대 (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 디술피드 가교에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) 본질적으로 힌지 영역의 일부를 갖는 Fab인 Fab' 단편 (예를 들어, 문헌 [Abbas et al., Cellular and Molecular Immunology, 6th Ed., Saunders Elsevier 2007] 참조); (iv) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (v) 항체의 단일 아암의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (vi) VH 도메인으로 이루어진 dAb 단편 (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546); (vii) 단리된 상보성 결정 영역 (CDR); 및 (viii) 단일 가변 도메인 및 2개의 불변 도메인을 함유하는 중쇄 가변 영역인 나노바디에 의해 수행될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 바람직한 항원 결합 단편은 Fab, F(ab')2, Fab', Fv, 및 Fd 단편이다. 추가로, Fv 단편의 2개의 도메인, VL 및 VH는 별개의 유전자에 의해 코딩되지만, 이들은 VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 1가 분자를 형성한 단일 단백질 쇄 (단일 쇄 Fv, 또는 scFv로 공지됨)로 제조될 수 있게 하는 합성 링커에 의해서 재조합 방법을 사용하여 연결될 수도 있다; 예를 들어 문헌 [Bird et al. (1988) Science 242:423-426; 및 Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)] 참조. 이러한 단일 쇄 항체는 용어 항체의 "항원-결합 부분" 내에 또한 포괄된다.
달리 나타내지 않는 한 - 예를 들어 서열식별번호 목록의 선형 넘버링 참조에 의한 - 항체 중쇄 또는 경쇄 가변 영역 (VH 또는 VL)의 아미노산 위치의 넘버링에 대한 참조는 카바트 시스템 (문헌 [Kabat et al., "Sequences of proteins of immunological interest, 5th ed., Pub. number 91-3242, U.S. Dept. Health & Human Services, NIH, Bethesda, Md., 1991], 이하 "카바트"])에 따르고, 항체 중쇄 또는 경쇄 불변 영역 (CH1, CH2, CH3, 또는 CL)의 아미노산 위치의 넘버링에 대한 참조는 카바트에 제시된 바와 같이 EU 인덱스에 따른다. 문헌 [Lazar et al., US 2008/0248028 A1]을 참조하며, 그의 개시내용, 예를 들어 이러한 용법의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다. 또한, 이뮤노제네틱스 인포메이션 시스템(ImMunoGeneTics Information System, IMGT)은 그의 웹사이트에 중쇄 불변 영역에 대한 그의 넘버링 시스템, EU 넘버링 및 카바트 넘버링 사이의 대응을 보여주는 표제 "IMGT 사이언티픽 차트: C 넘버링 사이의 대응(IMGT Scientific Chart: Correspondence between C Numberings)"의 표를 제공한다.
"단리된 항체"는 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 의미한다 (예를 들어, 항원 X에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 항원 X 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 없음). 그러나, 항원 X에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 다른 종으로부터의 항원 X 분자와 같은 다른 항원에 대해 교차-반응성을 가질 수 있다. 특정 실시양태에서, 단리된 항체는 인간 항원 X에 특이적으로 결합하고, 다른 (비-인간) 항원 X 항원과는 교차-반응하지 않는다. 더욱이, 단리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질이 실질적으로 없을 수 있다.
"모노클로날 항체" 또는 "모노클로날 항체 조성물"은 특정한 에피토프에 대해 단일 결합 특이성 및 친화도를 나타내는, 단일 분자 조성의 항체 분자의 제제를 의미한다.
"인간 항체"는 프레임워크 및 CDR 영역 둘 다 (및 존재하는 경우에 불변 영역)가 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 것인 가변 영역을 갖는 항체를 의미한다. 인간 항체는 천연 또는 합성 변형을 포함한 후기 변형을 포함할 수 있다. 인간 항체는 인간 배선 이뮤노글로불린 서열에 의해 코딩되지 않는 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내 무작위 또는 부위-특이적 돌연변이유발에 의해 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, "인간 항체"는 또 다른 포유동물 종, 예컨대 마우스의 배선으로부터 유래된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열 상으로 그라프트된 것인 항체는 포함하지 않는다.
"인간 모노클로날 항체"는 단일 결합 특이성을 나타내며, 프레임워크 및 CDR 영역 둘 다가 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 것인 가변 영역을 갖는 항체를 의미한다. 한 실시양태에서, 인간 모노클로날 항체는 불멸화 세포에 융합된 인간 중쇄 트랜스진 및 경쇄 트랜스진을 포함하는 게놈을 갖는 트랜스제닉 비인간 동물, 예를 들어 트랜스제닉 마우스로부터 수득된 B 세포를 포함하는 하이브리도마에 의해 생산된다.
"지방족"은 명시된 수의 탄소 원자를 갖거나 (예를 들어, "C3 지방족", "C1-5 지방족", "C1-C5 지방족" 또는 "C1 내지 C5 지방족"에서와 같으며, 후자 3개의 어구는 1 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 지방족 모이어티에 대한 동의어임) 또는 탄소 원자의 수가 명확하게 명시되지 않은 경우에는 1 내지 4개의 탄소 원자 (불포화 지방족 모이어티의 경우에는 2 내지 4개의 탄소)를 갖는 직쇄 또는 분지쇄, 포화 또는 불포화, 비-방향족 탄화수소 모이어티를 의미한다. 유사한 이해가 C2-4 알켄, C4-C7 시클로지방족 등에서와 같은 다른 유형에서의 탄소의 수에 적용된다. 유사한 맥락에서, "(CH2)1-3"과 같은 용어는 이러한 용어가 CH2, CH2CH2, 및 CH2CH2CH2를 나타내도록, 아래첨자가 1, 2, 또는 3인 것에 대한 약칭으로서 이해되어야 한다.
"알킬"은 포화 지방족 모이어티를 의미하며, 여기서 탄소 원자의 수의 지정에 대한 동일한 규정이 적용가능하다. 예시로서, C1-C4 알킬 모이어티는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 이소부틸, t-부틸, 1-부틸, 2-부틸 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. "알킬렌"은 알킬 기의 2가 대응물, 예컨대 CH2CH2, CH2CH2CH2, 및 CH2CH2CH2CH2를 의미한다.
"알케닐"은 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 지방족 모이어티를 의미하며, 여기서 탄소 원자의 수의 지정에 대한 동일한 규정이 적용가능하다. 예시로서, C2-C4 알케닐 모이어티는 에테닐 (비닐), 2-프로페닐 (알릴 또는 프로프-2-에닐), 시스-1-프로페닐, 트랜스-1-프로페닐, E- (또는 Z-) 2-부테닐, 3-부테닐, 1,3-부타디에닐 (부트-1,3-디에닐) 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
"알키닐"은 적어도 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 지방족 모이어티를 의미하며, 여기서 탄소 원자의 수의 지정에 대한 동일한 규정이 적용가능하다. 예시로서, C2-C4 알키닐 기는 에티닐 (아세틸레닐), 프로파르길 (프로프-2-이닐), 1-프로피닐, 부트-2-이닐 등을 포함한다.
"시클로지방족"은 1 내지 3개의 고리를 가지며, 각각의 고리가 3 내지 8개 (바람직하게는 3 내지 6개)의 탄소 원자를 갖는, 포화 또는 불포화, 비-방향족 탄화수소 모이어티를 의미한다. "시클로알킬"은 각각의 고리가 포화된 시클로지방족 모이어티를 의미한다. "시클로알케닐"은 적어도 1개의 고리가 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 시클로지방족 모이어티를 의미한다. "시클로알키닐"은 적어도 1개의 고리가 적어도 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 시클로지방족 모이어티를 의미한다. 예시로서, 시클로지방족 모이어티는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로펜테닐, 시클로헥실, 시클로헥세닐, 시클로헵틸, 시클로옥틸 및 아다만틸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 바람직한 시클로지방족 모이어티는 시클로알킬 모이어티, 특히 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실이다. "시클로알킬렌"은 시클로알킬 기의 2가 대응물을 의미한다. 유사하게, "비시클로알킬렌" 및 "스피로시클로알킬렌" (또는 "스피로알킬렌")은 비시클로알킬 및 스피로시클로알킬/스피로알킬 기의 2가 대응물을 지칭한다.
"헤테로시클로지방족"은 그의 적어도 1개의 고리 내에서, 3개 이하 (바람직하게는 1 내지 2개)의 탄소가 N, O, 또는 S로부터 독립적으로 선택된 헤테로원자로 대체된 것인 시클로지방족 모이어티를 의미하며, 여기서 N 및 S는 임의로 산화될 수 있고, N은 임의로 4급화될 수 있다. 바람직한 시클로지방족 모이어티는 5- 내지 6-원 크기인 1개의 고리로 이루어진다. 유사하게, "헤테로시클로알킬", "헤테로시클로알케닐", 및 "헤테로시클로알키닐"은 그의 적어도 1개의 고리가 이렇게 하여 변형된, 각각 시클로알킬, 시클로알케닐, 또는 시클로알키닐 모이어티를 의미한다. 예시적인 헤테로시클로지방족 모이어티는 아지리디닐, 아제티디닐, 1,3-디옥사닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸릴, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로티오피라닐, 테트라히드로티오피라닐 술폰, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 티오모르폴리닐 술폭시드, 티오모르폴리닐 술폰, 1,3-디옥솔라닐, 테트라히드로-1,1-디옥소티에닐, 1,4-디옥사닐, 티에타닐 등을 포함한다. "헤테로시클로알킬렌"은 헤테로시클로알킬 기의 2가 대응물을 의미한다.
"알콕시", "아릴옥시", "알킬티오", 및 "아릴티오"는 각각 -O(알킬), -O(아릴), -S(알킬), 및 -S(아릴)을 의미한다. 예는 각각 메톡시, 페녹시, 메틸티오 및 페닐티오이다.
보다 좁은 의미가 지정되지 않는 한, "할로겐" 또는 "할로"는 플루오린, 염소, 브로민 또는 아이오딘을 의미한다.
"아릴"은 각각의 고리가 3 내지 7개의 탄소 원자를 갖고 적어도 1개의 고리가 방향족인 모노-, 비-, 또는 트리시클릭 고리계 (바람직하게는 모노시클릭)를 갖는 탄화수소 모이어티를 의미한다. 고리계 내의 고리는 서로 융합될 수 있거나 (나프틸에서와 같음) 또는 서로 결합될 수 있으며 (비페닐에서와 같음), 비-방향족 고리에 융합 또는 결합될 수 있다 (인다닐 또는 시클로헥실페닐에서와 같음). 추가 예시로서, 아릴 모이어티는 페닐, 나프틸, 테트라히드로나프틸, 인다닐, 비페닐, 페난트릴, 안트라세닐 및 아세나프틸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. "아릴렌"은 아릴 기의 2가 대응물, 예를 들어 1,2-페닐렌, 1,3-페닐렌, 또는 1,4-페닐렌을 의미한다.
"헤테로아릴"은 각각의 고리가 3 내지 7개의 탄소 원자를 갖고 적어도 1개의 고리가 N, O, 또는 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 방향족 고리인 모노-, 비-, 또는 트리시클릭 고리계 (바람직하게는 5 내지 7-원 모노시클릭)를 갖는 모이어티를 의미하며, 여기서 N 및 S는 임의로 산화될 수 있고, N은 임의로 4급화될 수 있다. 이러한 적어도 1개의 헤테로원자 함유 방향족 고리는 다른 유형의 고리에 융합될 수 있거나 (벤조푸라닐 또는 테트라히드로이소퀴놀릴에서와 같음) 또는 다른 유형의 고리에 직접 결합될 수 있다 (페닐피리딜 또는 2-시클로펜틸피리딜에서와 같음). 추가 예시로서, 헤테로아릴 모이어티는 피롤릴, 푸라닐, 티오페닐 (티에닐), 이미다졸릴, 피라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피리딜, N-옥소피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 퀴노잘리닐, 나프티리디닐, 벤조푸라닐, 인돌릴, 벤조티오페닐, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 페노티아졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조트리아졸릴, 디벤조푸라닐, 카르바졸릴, 디벤조티오페닐, 아크리디닐 등을 포함한다. "헤테로아릴렌"은 헤테로아릴 기의 2가 대응물을 의미한다.
"비치환되거나 또는 치환된 C1-C5 알킬" 또는 "임의로 치환된 헤테로아릴"에서와 같은 "비치환되거나 또는 치환된" 또는 "임의로 치환된" 어구의 사용에 의해서와 같이 모이어티가 치환될 수 있는 것으로 나타낸 경우에, 이러한 모이어티는 1개 이상의 독립적으로 선택된 치환기, 바람직하게는 수에 있어서 1 내지 5개, 보다 바람직하게는 수에 있어서 1 또는 2개를 가질 수 있다. 치환기 및 치환 패턴은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해, 치환기가 부착되는 모이어티를 고려하여, 화학적으로 안정하고 관련 기술분야에 공지된 기술뿐만 아니라 본원에 제시된 방법에 의해 합성될 수 있는 화합물을 제공하도록 선택될 수 있다. 모이어티가 "비치환되거나 또는 치환된" 또는 "임의로 치환된" 것으로 확인되는 경우에, 바람직한 실시양태에서 이러한 모이어티는 비치환된다.
"아릴알킬", "(헤테로시클로지방족)알킬", "아릴알케닐", "아릴알키닐", "비아릴알킬" 등은, 예를 들어 벤질, 페네틸, N-이미다조일에틸, N-모르폴리노에틸 등에서와 같이, 경우에 따라 알킬, 알케닐, 또는 알키닐 모이어티에서 개방 (비충족) 원자가를 갖는, 경우에 따라 아릴, 헤테로시클로지방족, 비아릴 등의 모이어티로 치환된 알킬, 알케닐, 또는 알키닐 모이어티를 의미한다. 반대로, "알킬아릴", "알케닐시클로알킬" 등은, 경우에 따라 예를 들어 메틸페닐 (톨릴) 또는 알릴시클로헥실에서와 같이, 경우에 따라 알킬, 알케닐 등의 모이어티로 치환된 아릴, 시클로알킬 등의 모이어티를 의미한다. "히드록시알킬", "할로알킬", "알킬아릴", "시아노아릴" 등은, 경우에 따라 확인된 치환기 (경우에 따라 히드록실, 할로 등) 중 1개 이상으로 치환된 알킬, 아릴 등의 모이어티를 의미한다.
예를 들어, 허용되는 치환기는 알킬 (특히 메틸 또는 에틸), 알케닐 (특히 알릴), 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 시클로지방족, 헤테로시클로지방족, 할로 (특히 플루오로), 할로알킬 (특히 트리플루오로메틸), 히드록실, 히드록시알킬 (특히 히드록시에틸), 시아노, 니트로, 알콕시, -O(히드록시알킬), -O(할로알킬) (특히 -OCF3), -O(시클로알킬), -O(헤테로시클로알킬), -O(아릴), 알킬티오, 아릴티오, =O, =NH, =N(알킬), =NOH, =NO(알킬), -C(=O)(알킬), -C(=O)H, -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(알킬), -C(=O)O(히드록시알킬), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(알킬), -C(=O)N(알킬)2, -OC(=O)(알킬), -OC(=O)(히드록시알킬), -OC(=O)O(알킬), -OC(=O)O(히드록시알킬), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(알킬), -OC(=O)N(알킬)2, 아지도, -NH2, -NH(알킬), -N(알킬)2, -NH(아릴), -NH(히드록시알킬), -NHC(=O)(알킬), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(알킬), -NHC(=O)N(알킬)2, -NHC(=NH)NH2, -OSO2(알킬), -SH, -S(알킬), -S(아릴), -S(시클로알킬), -S(=O)알킬, -SO2(알킬), -SO2NH2, -SO2NH(알킬), -SO2N(알킬)2 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
치환될 모이어티가 지방족 모이어티인 경우에, 바람직한 치환기는 아릴, 헤테로아릴, 시클로지방족, 헤테로시클로지방족, 할로, 히드록실, 시아노, 니트로, 알콕시, -O(히드록시알킬), -O(할로알킬), -O(시클로알킬), -O(헤테로시클로알킬), -O(아릴), 알킬티오, 아릴티오, =O, =NH, =N(알킬), =NOH, =NO(알킬), -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(알킬), -C(=O)O(히드록시알킬), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(알킬), -C(=O)N(알킬)2, -OC(=O)(알킬), -OC(=O)(히드록시알킬), -OC(=O)O(알킬), -OC(=O)O(히드록시알킬), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(알킬), -OC(=O)N(알킬)2, 아지도, -NH2, -NH(알킬), -N(알킬)2, -NH(아릴), -NH(히드록시알킬), -NHC(=O)(알킬), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(알킬), -NHC(=O)N(알킬)2, -NHC(=NH)NH2, -OSO2(알킬), -SH, -S(알킬), -S(아릴), -S(=O)알킬, -S(시클로알킬), -SO2(알킬), -SO2NH2, -SO2NH(알킬), 및 -SO2N(알킬)2이다. 보다 바람직한 치환기는 할로, 히드록실, 시아노, 니트로, 알콕시, -O(아릴), =O, =NOH, =NO(알킬), -OC(=O)(알킬), -OC(=O)O(알킬), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(알킬), -OC(=O)N(알킬)2, 아지도, -NH2, -NH(알킬), -N(알킬)2, -NH(아릴), -NHC(=O)(알킬), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(알킬), -NHC(=O)N(알킬)2, 및 -NHC(=NH)NH2이다. 페닐, 시아노, 할로, 히드록실, 니트로, C1-C4알콕시, O(C2-C4 알킬렌)OH, 및 O(C2-C4 알킬렌)할로가 특히 바람직하다.
치환될 모이어티가 시클로지방족, 헤테로시클로지방족, 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티인 경우에, 바람직한 치환기는 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로, 할로알킬, 히드록실, 히드록시알킬, 시아노, 니트로, 알콕시, -O(히드록시알킬), -O(할로알킬), -O(아릴), -O(시클로알킬), -O(헤테로시클로알킬), 알킬티오, 아릴티오, -C(=O)(알킬), -C(=O)H, -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(알킬), -C(=O)O(히드록시알킬), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(알킬), -C(=O)N(알킬)2, -OC(=O)(알킬), -OC(=O)(히드록시알킬), -OC(=O)O(알킬), -OC(=O)O(히드록시알킬), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(알킬), -OC(=O)N(알킬)2, 아지도, -NH2, -NH(알킬), -N(알킬)2, -NH(아릴), -NH(히드록시알킬), -NHC(=O)(알킬), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(알킬), -NHC(=O)N(알킬)2, -NHC(=NH)NH2, -OSO2(알킬), -SH, -S(알킬), -S(아릴), -S(시클로알킬), -S(=O)알킬, -SO2(알킬), -SO2NH2, -SO2NH(알킬), 및 -SO2N(알킬)2이다. 보다 바람직한 치환기는 알킬, 알케닐, 할로, 할로알킬, 히드록실, 히드록시알킬, 시아노, 니트로, 알콕시, -O(히드록시알킬), -C(=O)(알킬), -C(=O)H, -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(알킬), -C(=O)O(히드록시알킬), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(알킬), -C(=O)N(알킬)2, -OC(=O)(알킬), -OC(=O)(히드록시알킬), -OC(=O)O(알킬), -OC(=O)O(히드록시알킬), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(알킬), -OC(=O)N(알킬)2, -NH2, -NH(알킬), -N(알킬)2, -NH(아릴), -NHC(=O)(알킬), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(알킬), -NHC(=O)N(알킬)2, 및 -NHC(=NH)NH2이다. C1-C4 알킬, 시아노, 니트로, 할로, 및 C1-C4알콕시가 특히 바람직하다.
"C1-C5 알킬" 또는 "5 내지 10%"에서와 같이 범위가 언급된 경우에, 이러한 범위는 첫 번째 경우에서는 C1 및 C5 및 두 번째 경우에서는 5% 및 10%에서와 같은 범위의 종점을 포함한다.
특정한 입체이성질체가 구체적으로 (예를 들어, 구조 화학식에서의 관련 입체중심에서 굵은선 또는 파선 결합에 의해, 구조 화학식에서 E 또는 Z 배위를 갖는 것으로서의 이중 결합의 도시에 의해, 또는 입체화학-지정 명명법 또는 기호의 사용에 의해) 나타나 있지 않은 한, 모든 입체이성질체는 순수한 화합물뿐만 아니라 그의 혼합물로서 본 발명의 범주 내에 포함된다. 달리 나타내지 않는 한, 라세미체, 개별 거울상이성질체 (광학적으로 순수하거나 또는 부분적으로 분해됨), 부분입체이성질체, 기하 이성질체, 및 그의 조합 및 혼합물은 모두 본 발명에 의해 포괄된다.
관련 기술분야의 통상의 기술자는 화합물이 본원에 사용된 구조 화학식에 도시된 것들과 등가인 호변이성질체 형태 (예를 들어, 케토 및 엔올 형태), 공명 형태 및 쯔비터이온 형태를 가질 수 있다는 것 및 구조 화학식이 이러한 호변이성질체, 공명 또는 쯔비터이온 형태를 포괄한다는 것을 인지할 것이다.
"제약상 허용되는 에스테르"는 생체내에서 (예를 들어 인간 신체에서) 가수분해되어 모 화합물 또는 그의 염을 생산하거나, 또는 그 자체로 모 화합물의 것과 유사한 활성을 갖는 에스테르를 의미한다. 적합한 에스테르는 C1-C5 알킬, C2-C5 알케닐 또는 C2-C5 알키닐 에스테르, 특히 메틸, 에틸 또는 n-프로필을 포함한다.
"제약상 허용되는 염"은 제약 제제에 적합한 화합물의 염을 의미한다. 화합물이 1개 이상의 염기성 기를 갖는 경우에, 염은 산 부가염, 예컨대 술페이트, 히드로브로마이드, 타르트레이트, 메실레이트, 말레에이트, 시트레이트, 포스페이트, 아세테이트, 파모에이트 (엠보네이트), 히드로아이오다이드, 니트레이트, 히드로클로라이드, 락테이트, 메틸술페이트, 푸마레이트, 벤조에이트, 숙시네이트, 메실레이트, 락토비오네이트, 수베레이트, 토실레이트 등일 수 있다. 화합물이 1개 이상의 산성 기를 갖는 경우에, 염은 칼슘 염, 칼륨 염, 마그네슘 염, 메글루민 염, 암모늄 염, 아연 염, 피페라진 염, 트로메타민 염, 리튬 염, 콜린 염, 디에틸아민 염, 4-페닐시클로헥실아민 염, 벤자틴 염, 나트륨 염, 테트라메틸암모늄 염 등과 같은 염일 수 있다. 다형성 결정질 형태 및 용매화물은 본 발명의 범주 내에 또한 포괄된다.
용어 "대상체"는 영장류 (예를 들어, 인간), 원숭이, 소, 돼지, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 또는 마우스를 포함하나, 이에 제한되지는 않는 동물을 지칭한다. 용어 "대상체" 및 "환자"는, 예를 들어 포유동물 대상체, 예컨대 인간과 관련하여 본원에서 참조로 상호교환가능하게 사용된다.
질환 또는 장애를 치료하는 것과 관련하여, 용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 장애, 질환 또는 상태, 또는 장애, 질환 또는 상태와 연관된 증상 중 1종 이상의 완화 또는 제거; 또는 질환, 장애 또는 상태 또는 그의 1종 이상의 증상의 진행, 확산 또는 악화의 저속화를 포함하도록 의도된다. "암의 치료"는 하기 효과: (1) 종양 성장의 (i) 저속화 및 (ii) 완전 성장 정지를 포함하는 어느 정도까지의 억제; (2) 종양 세포 수의 감소; (3) 종양 크기의 유지; (4) 종양 크기의 감소; (5) 말초 기관으로의 종양 세포 침윤의 (i) 감소, (ii) 저속화 또는 (iii) 완전 예방을 포함하는 억제; (6) 전이의 (i) 감소, (ii) 저속화 또는 (iii) 완전 예방을 포함하는 억제; (7) (i) 종양 크기의 유지, (ii) 종양 크기의 감소, (iii) 종양 성장의 저속화, (iv) 침습의 감소, 저속화 또는 예방을 유발할 수 있는 항종양 면역 반응의 증진, 및/또는 (8) 장애와 연관된 1종 이상의 증상의 중증도 또는 수의 어느 정도까지의 경감 중 1종 이상을 지칭한다.
본 명세서의 화학식에서, 결합을 가로지르는 파상선 (
Figure pct00008
) 또는 결합의 말단에서의 별표 (*)는 공유 부착 부위를 나타낸다. 예를 들어, 화학식
Figure pct00009
에서 R이
Figure pct00010
이거나 또는 R이
Figure pct00011
이다라는 언급은
Figure pct00012
임을 의미한다.
본 명세서의 화학식에서, 방향족 고리를 그의 2개의 탄소 사이를 가로지르는 결합은 결합에 부착된 기가 암시적으로 그곳에 존재하는 수소의 제거에 의해 이용가능하게 되는 방향족 고리의 임의의 위치에 위치할 수 있음을 의미한다. 예시로서, 화학식
Figure pct00013
는
Figure pct00014
를 나타낸다.
다른 설명에서,
Figure pct00015
는
Figure pct00016
를 나타내고,
Figure pct00017
는
Figure pct00018
를 나타낸다.
관련 기술분야의 통상의 기술자는 특정 구조가 1종의 호변이성질체 형태 또는 또 다른 것 -예를 들어, 케토 대 엔올 -로 그려질 수 있고, 2종의 형태는 동등한 것으로 인식될 것이다.
화합물
한 실시양태에서, 모이어티
Figure pct00019
내에서 각각의 X1은 CR2이거나 또는 2개 이하의 X1는 N이고, 바람직하게는
Figure pct00020
이다.
바람직하게는 기 R1은
Figure pct00021
이다.
R3의 실시예는 Cl, OH,
Figure pct00022
를 포함한다.
기 R3이 구조
Figure pct00023
를 갖는 예 (상기 본원에 개시된 바와 같이, 1개 이상의 O, S, SO2, NH, C(=O), N(C1-C3 알킬), NC(=O)(C1-C3 알킬), 또는 N(Boc)로 임의로 대체된 1개 이상의 메틸렌 (CH2) 기를 갖거나 또는 그에 융합된 또 다른 고리를 갖는 경우를 포함함)는
Figure pct00024
이다.
또 다른 실시양태에서, R3이
Figure pct00025
로 이루어진 군으로부터 선택된다.
화학식 II의 한 실시양태에서, m이 0이고, 이 경우에 화학식 II'로 단순화된다:
Figure pct00026
화학식 II에서, 바람직하게는
Figure pct00027
은
Figure pct00028
이다.
화학식 II에 따른 화합물의 한 실시양태는 화학식 IIa에 의해 나타내어지고, 여기서 R1 및 R3은 상기 본원의 화학식 II와 관련하여 정의된 바와 같다. 이러한 화합물의 실시예는 표 A에 제시된다. 표 A는 하기 본원에 기재된 바와 같이, HEK-블루™ TLR7 리포터 검정을 사용하는 TLR7 효능작용 활성에 대한 생물학적 활성 데이터를 포함한다. 비교를 위해, 레시퀴모드 및 가르디퀴모드의 활성이 또한 제시된다.
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
Figure pct00033
Figure pct00034
m이 1인 화학식 II에 따른 화합물의 한 실시양태는 화학식 IIb에 의해 나타내어지고, 여기서 R1, R3 및 X1은 상기 본원의 화학식 II와 관련하여 정의된 바와 같다.
Figure pct00035
바람직하게는, 화학식 IIb에서
Figure pct00036
은
Figure pct00037
이다.
화학식 IIb에 따른 화합물의 실시예는 표 B에 제시된다:
Figure pct00038
또한, 본 명세서는 화합물 III-02 (EC50 5,000 nM)를 개시한다.
Figure pct00039
접합체
일반사항
본원에 개시된 TLR7 효능제는 국소 투여에 의해 또는 표적화 전달에 의해 표적화 모이어티와의 접합체로 의도된 작용 부위로 전달될 수 있다. 바람직하게는, 표적화 모이어티는 항체 또는 그의 항원 결합 부분이고, 그의 항원은 의도된 작용의 구역에 존재하고, 예를 들어 의도된 작용 부위가 종양 (암)인 경우 종양 연관 항원에 존재하는 것이다. 바람직하게는, 종양 연관 항원은 정상 세포와 비교하여, 암 세포에 의해 고유하게 발현되거나 과다발현된 것이다. 종양 연관 항원은 암 세포의 표면에 위치하거나 또는 암 세포에 의해 그의 주위에 분비될 수 있다.
한 측면에서, 화학식 (IV)로 나타내어지는, 본 발명의 화합물 및 리간드를 포함하는 접합체가 제공된다.
[D(XD)a(C)c(XZ)b]mZ (IV)
여기서 Z는 표적화 모이어티이고, D는 본 발명의 효능제이고, -(XD)aC(XZ)b-는 그들이 Z 및 D를 연결시키기 때문에 집합적으로 "링커 모이어티" 또는 "링커"로 지칭된다. 링커 내에서, C는 D의 의도된 생물학적 작용 부위에서 또는 그 근처에서 절단되도록 설계된 절단가능한 기이고; XD 및 XZ는 각각 D와 C 및 C와 Z를 이격시키는 스페이서 모이어티 (또는 "스페이서")이고; 아래첨자 a, b, 및 c는 독립적으로 0 또는 1이다 (즉, XD, XZ, 및 C의 존재는 임의적임). 아래첨자 m은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 (바람직하게는 1, 2, 3, 또는 4)이다. D, XD, C, XZ 및 Z는 하기에 보다 완전히 기재되어 있다.
항원 또는 수용체가 위치하는 표적 조직 또는 세포에 결합함으로써, Z는 접합체를 그곳으로 유도한다. 표적 조직 또는 세포에서 기 C의 절단은 D를 방출시켜 그의 효과를 국부적으로 표출한다. 이러한 방식으로, D의 정밀한 전달이 의도된 작용 부위에서 달성되어, 필요한 투여량이 감소된다. 또한, D는 그의 접합된 상태에서 통상적으로 생물학적으로 불활성 (또는 유의하게 덜 활성)이고, 그에 의해 오프-타겟 효과가 감소된다.
아래첨자 m에 의해 반영되는 바와 같이, 각각의 Z는, Z가 갖는 접합에 이용가능한 부위의 수 및 사용되는 실험 조건에 따라 하나 초과의 D와 접합될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 각각의 개별 Z가 정수개의 D에 접합되는 한편, 접합체의 제제는 통계적 평균을 반영하여 비-정수 비의 D 대 Z로 분석될 수도 있음을 인지할 것이다. 이 비는 치환 비 ("SR")로서, 또는 약물-항체 비 ("DAR")로서 지칭된다.
표적화 모이어티 Z
바람직하게는, 표적화 모이어티 Z는 항체이다. 편의성 및 간결성을 위해 및 비제한적으로, Z 및 그의 접합체에 대한 본 명세서의 상세한 논의는 그것이 항체와 관련하여 기록되어 있지만, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 필요한 변경을 가하여 다른 유형의 Z가 접합될 수 있음을 이해할 것이다. 예를 들어, 표적화 모이어티로서의 폴산과의 접합체는 그의 표면 상에 폴레이트 수용체를 갖는 세포를 표적화할 수 있다 (Leamon et al., Cancer Res. 2008, 68 (23), 9839). 동일한 이유로, 본 명세서의 상세한 논의는 주로 1:1 비의 Z 대 D (m = 1)의 관점에서 기록되어 있다.
본 발명의 접합체에 사용될 수 있는 항체는 하기 항원을 인식하는 것들을 포함한다: 메소텔린, 전립선 특이적 막 항원 (PSMA), CD19, CD22, CD30, CD70, B7H3, B7H4 (O8E로도 공지됨), 단백질 티로신 키나제 7 (PTK7), 글리피칸-3, RG1, 푸코실-GM1, CTLA-4, 및 CD44. 항체는 동물 (예를 들어, 뮤린), 키메라, 인간화, 또는 바람직하게는, 인간일 수 있다. 항체는 바람직하게는 모노클로날, 특히 모노클로날 인간 항체이다. 상기 언급된 항원 중 일부에 대한 인간 모노클로날 항체의 제조는 문헌 [문헌 [Korman et al., US 8,609,816 B2 (2013; B7H4, 08E로도 공지됨; 특히 항체 2A7, 1G11, 및 2F9); Rao-Naik et al., 8,097,703 B2 (2012; CD19; 특히 항체 5G7, 13F1, 46E8, 21D4, 21D4a, 47G4, 27F3, 및 3C10); King et al., US 8,481,683 B2 (2013; CD22; 특히 항체 12C5, 19A3, 16F7, 및 23C6); Keler et al., US 7,387,776 B2 (2008; CD30; 특히 항체 5F11, 2H9, 및 17G1); Terrett et al., US 8,124,738 B2 (2012; CD70; 특히 항체 2H5, 10B4, 8B5, 18E7, 및 69A7); Korman et al., US 6,984,720 B1 (2006; CTLA-4; 특히 항체 10D1, 4B6, 및 1E2); Korman et al., US 8,008,449 B2 (2011; PD-1; 특히 항체 17D8, 2D3, 4H1, 5C4, 4A11, 7D3, 및 5F4); Huang et al., US 2009/0297438 A1 (2009; PSMA. 특히 항체 1C3, 2A10, 2F5, 2C6); Cardarelli et al., US 7,875,278 B2 (2011; PSMA; 특히 항체 4A3, 7F12, 8C12, 8A11, 16F9, 2A10, 2C6, 2F5, 및 1C3); Terrett et al., US 8,222,375 B2 (2012; PTK7; 특히 항체 3G8, 4D5, 12C6, 12C6a, 및 7C8); Harkins et al., US 7,335,748 B2(2008; RG1; 특히 항체 A, B, C, 및 D); Terrett et al., US 8,268,970 B2 (2012; 메소텔린; 특히 항체 3C10, 6A4, 및 7B1); Xu et al., US 2010/0092484 A1 (2010; CD44; 특히 항체 14G9.B8.B4, 2D1.A3.D12, 및 1A9.A6.B9); Deshpande et al., US 8,258,266 B2 (2012; IP10; 특히 항체 1D4, 1E1, 2G1, 3C4, 6A5, 6A8, 7C10, 8F6, 10A12, 10A12S, 및 13C4); Kuhne et al., US 8,450,464 B2 (2013; CXCR4; 특히 항체 F7, F9, D1, 및 E2); 및 Korman et al., US 7,943,743 B2 (2011; PD-L1; 특히 항체 3G10, 12A4, 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7, 및 13G4)]에 개시되어 있으며; 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다. 바람직하게는, 항체는 항-메소텔린 항체이다.
항체인 것뿐만 아니라, Z는 또한 항체 단편 (예컨대 Fab, Fab', F(ab')2, Fd, 또는 Fv) 또는 항체 모방체, 예컨대 아피바디, 도메인 항체 (dAb), 나노바디, 유니바디, DARPin, 안티칼린, 베르사바디, 듀오칼린, 리포칼린, 또는 아비머일 수 있다.
Z 상의 여러 상이한 반응성 기 중 임의의 1개는 리신 잔기 내의 ε-아미노 기, 펜던트 탄수화물 모이어티, 아스파르트산 또는 글루탐산 측쇄 상의 카르복실산 기, 시스테인-시스테인 디술피드 기, 및 시스테인 티올 기를 포함한 접합 부위일 수 있다. 접합에 적합한 항체 반응성 기에 대한 검토를 위해, 예를 들어 문헌 [Garnett, Adv. Drug Delivery Rev. 2001, 53, 171-216 및 Dubowchik and Walker, Pharmacology & Therapeutics 1999, 83, 67-123]을 참조하며, 그 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
대부분의 항체는 다중 리신 잔기를 가지며, 이는 아미드, 우레아, 티오우레아, 또는 카르바메이트 결합을 통해 그의 ε-아미노 기를 통해 접합될 수 있다.
시스테인의 측쇄 내의 티올 (-SH) 기는 여러 방법에 의해 접합체를 형성하는데 사용될 수 있다. 그것을 사용하여 그것과 링커 상의 티올 기 사이에 디술피드 결합을 형성할 수 있다. 또 다른 방법은 링커 상의 말레이미드 기로의 그의 마이클(Michael) 첨가를 통한 것이다.
전형적으로, 항체가 시스테인 잔기를 갖고 있지만, 항체는 그의 모든 시스테인이 쇄내 또는 쇄간 디술피드 결합에 관여되기 때문에 유리 티올 기가 결핍되어 있다. 유리 티올 기를 생성하기 위해, 천연 디술피드 기가 환원될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Packard et al., Biochemistry 1986, 25, 3548; King et al., Cancer Res. 1994, 54, 6176; 및 Doronina et al., Nature Biotechnol. 2003, 21, 778]을 참조한다. 대안적으로, 유리 -SH 기를 갖는 시스테인은 항체를 돌연변이시키거나, 시스테인을 또 다른 아미노산으로 대체하거나, 또는 하나를 폴리펩티드 쇄로 삽입시키는 것에 의해 도입될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Eigenbrot et al., US 7,521,541 B2 (2009); Chilkoti et al., Bioconjugate Chem. 1994, 5, 504; Urnovitz et al., US 4,698,420 (1987); Stimmel et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 30445; Bam et al., US 7,311,902 B2 (2007); Kuan et al., J. Biol. Chem. 1994, 269, 7610; Poon et al., J. Biol. Chem. 1995, 270, 8571; Junutula et al., Nature Biotechnology 2008, 26, 925 및 Rajpal et al., 미국 가출원 번호 62/270245 (2015년 12월 21일에 출원됨)]을 참조한다. 또 다른 접근법에서, 시스테인은 중쇄 또는 경쇄의 C-말단에 부가된다. 예를 들어, 문헌 [Liu et al., US 8,865,875 B2 (2014); Cumber et al., J. Immunol. 1992, 149, 120; King et al., Cancer Res. 1994, 54, 6176; Li et al., Bioconjugate Chem. 2002, 13, 985; Yang et al., Protein Engineering 2003, 16, 761; 및 Olafson et al., Protein Engineering Design & Selection 2004, 17, 21]을 참조한다. 본 단락에 인용된 문헌의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
링커 및 그의 성분
상기에 기재된 바와 같이, 링커는 최대 3개의 요소를 포함한다: 절단가능한 기 C 및 임의적인 스페이서 XZ 및 XD.
기 C는 생리학적 조건 하에 절단가능하다. 바람직하게는 그것은 접합체가 혈액에서 순환하는 동안 비교적 안정하지만, 접합체가 그의 의도된 작용 부위에 도달했을 때 용이하게 절단된다.
바람직한 기 C는, 혈청 내의 프로테아제에 의한 것과 대조적으로, 표적 세포 내부의 프로테아제에 의해 선택적으로 절단되는 펩티드이다. 전형적으로, 펩티드는 1 내지 20개의 아미노산, 바람직하게는 1 내지 6개의 아미노산, 보다 바람직하게는 2 내지 3개의 아미노산을 포함한다. 아미노산(들)은 천연 및/또는 비-천연 α-아미노산일 수 있다. 천연 아미노산은 유전자 코드에 의해 코딩되는 것들, 뿐만 아니라 그로부터 유래된 아미노산, 예를 들어 히드록시프롤린, γ-카르복시글루타메이트, 시트룰린, 및 O-포스포세린이다. 본 명세서에서, 용어 "아미노산"은 또한 아미노산 유사체 및 모방체를 포함한다. 유사체는 R 기가 천연 아미노산 중에서 발견되는 것이 아닌 것을 제외하고는, 천연 아미노산의 동일한 일반적 H2N(R)CHCO2H 구조를 갖는 화합물이다. 유사체의 예는 호모세린, 노르류신, 메티오닌-술폭시드, 및 메티오닌 메틸 술포늄을 포함한다. 아미노산 모방체는 α-아미노산의 일반적 화학 구조와 상이한 구조를 갖지만, 그와 유사한 방식으로 기능하는 화합물이다. 아미노산은 유전자 코딩된 아미노산의 "L" 입체화학, 뿐만 아니라 거울상이성질체 "D" 입체화학의 것일 수 있다.
바람직하게는, C는 프로테아제에 대한 절단 인식 서열인 아미노산 서열을 함유한다. 많은 절단 인식 서열이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어 문헌 [Matayoshi et al. Science 247: 954 (1990); Dunn et al. Meth. Enzymol. 241: 254 (1994); Seidah et al. Meth. Enzymol. 244: 175 (1994); Thornberry, Meth. Enzymol. 244: 615 (1994); Weber et al. Meth. Enzymol. 244: 595 (1994); Smith et al. Meth. Enzymol. 244: 412 (1994); 및 Bouvier et al. Meth. Enzymol. 248: 614 (1995)]을 참조하고; 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
기 C는 암의 부근에서 세포외 매트릭스에 존재하는 프로테아제, 예를 들어 근처의 사멸 중인 암 세포에 의해 방출되는 프로테아제 또는 암 세포에 의해 분비되는 종양-연관 프로테아제에 의해 절단되도록 선택될 수 있다. 예시적인 세포외 종양-연관 프로테아제는 플라스민, 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP), 티메트 올리고펩티다제 (TOP) 및 CD10이다. 예를 들어, 문헌 [Trouet et al., US 7,402,556 B2 (2008); Dubois et al., US 7,425,541 B2 (2008); 및 Bebbington et al., US 6,897,034 B2 (2005)]을 참조한다. 통상적으로 세포 내부에서 발견되는 리소솜 효소인 카텝신 D는 아마 사멸 중인 암 세포에 의해 방출되어 때때로 종양의 환경에서 발견된다.
효소에 의하도록 설계된 접합체의 경우, C는 바람직하게는 프로테아제 예컨대 카텝신 B, C, D, H, L 및 S, 특히 카텝신 B에 의한 절단을 위해 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 예시적인 카텝신 B 절단가능한 펩티드는 Val-Ala, Val-Cit, Val-Lys, Lys-Val-Ala, Asp-Val-Ala, Val-Ala, Lys-Val-Cit, Ala-Val-Cit, Val-Gly, Val-Gln, 및 Asp-Val-Cit를 포함한다. (여기서, 아미노산 서열은 문맥이 달리 명백하게 나타내지 않는 한, H2N-AA2-AA1-CO2H에서와 같이 N에서 C 방향으로 기록되어 있음.) 문헌 [Dubowchik et al., Biorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 3341; Dubowchik et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 3347; 및 Dubowchik et al., Bioconjugate Chem. 2002, 13, 855]을 참조하며; 그의 개시내용은 참조로 포함된다.
펩티딜 링커를 절단하기 위해 이용될 수 있는 또 다른 효소는 Ala-Ala-Asn에서 우선적으로 절단하는 리소솜 시스테인 프로테아제인 레구마인이다.
한 실시양태에서, 기 C는 2개-아미노산 서열 -AA2-AA1- (여기서 AA1은 리신, 아르기닌, 또는 시트룰린이고, AA2는 페닐알라닌, 발린, 알라닌, 류신, 또는 이소류신임)을 포함하는 펩티드이다. 또 다른 실시양태에서, C는 Val-Cit, Ala-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Cit-Cit, Val-Lys, Ala-Ala-Asn, Lys, Cit, Ser, 및 Glu로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 아미노산의 서열로 이루어진다. 보다 바람직하게는, 그것은 상기 군으로부터의 2 내지 3개의 아미노산 펩티드이다.
단일 아미노산으로 이루어진 절단가능한 기 C의 제조 및 설계는 문헌 [Chen et al., US 8,664,407 B2 (2014)]에 개시되어 있으며, 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
기 C는 Z 또는 D에 직접 결합될 수 있으며; 즉, 스페이서 XZ 또는 XD는, 경우에 따라, 부재할 수 있다.
존재하는 경우에, 스페이서 XZ는 C와 Z 사이의 공간적 분리를 제공하여, 전자가 후자에 의한 항원 결합을 입체적으로 방해하거나 또는 후자가 전자의 절단을 입체적으로 방해하지 않도록 한다. 추가로, 스페이서 XZ는 상승된 용해도 또는 감소된 응집 특성을 접합체에 부여하는데 사용될 수 있다. 스페이서 XZ는 1개 이상의 모듈 세그먼트를 포함할 수 있으며, 이는 임의의 수의 조합으로 조립될 수 있다. 스페이서 XZ에 대한 적합한 세그먼트의 예는
Figure pct00040
및 그의 조합이며,
여기서 아래첨자 g는 0 또는 1이고, 아래첨자 h는 1 내지 24, 바람직하게는 2 내지 4이다. 이들 세그먼트는 하기 예시된 바와 같이 조합될 수 있다:
Figure pct00041
존재하는 경우에, 스페이서 XD는 C와 D 사이의 공간적 분리를 제공하여, 후자가 전자의 절단을 입체적으로 또는 전자적으로 방해하지 않도록 한다. 스페이서 XD는 또한 추가의 분자 질량 및 화학적 관능기를 접합체에 도입하도록 기능할 수 있다. 일반적으로, 추가의 질량 및 관능기는 접합체의 혈청 반감기 및 다른 특성에 영향을 미칠 것이다. 따라서, 스페이서 기의 신중한 선택을 통해, 접합체의 혈청 반감기는 조정될 수 있다. 스페이서 XD는 또한 스페이서 XZ에 대한 상기 기재와 유사하게, 모듈화된 세그먼트로부터 조립될 수 있다.
존재하는 경우에, 스페이서 XZ 및/또는 XD는 바람직하게는 각각 Z와 C 또는 D와 C 사이에 4 내지 25개의 원자, 보다 바람직하게는 4 내지 20개의 원자의 선형 분리를 제공한다.
링커는 항체 및 약물을 공유 연결시키는 것 이외에도 다른 기능을 수행할 수 있다. 예를 들어, 링커는 폴리(에틸렌 글리콜) ("PEG") 기를 함유할 수 있다. 접합 단계는 전형적으로 수성 매질에서 약물-링커를 항체에 커플링하는 것을 수반하기 때문에, PEG 기 다수는 약물-링커의 수용해도를 증진시킨다. 또한, PEG 기는 용해도를 증진시키거나 또는 생성된 ADC에서 응집을 감소시킬 수 있다. PEG 기가 존재하는 경우에, 이는 스페이서 XZ 또는 XD 중 어느 하나 또는 둘 다에 혼입될 수 있다. PEG 기 내의 반복 단위의 수는 2 내지 20개, 바람직하게는 4 내지 10개일 수 있다.
스페이서 XZ 또는 XD 중 어느 하나 또는 둘 다는 자기-희생 모이어티를 포함할 수 있다. 자기-희생 모이어티는 (1) C 및 Z 또는 D에 결합되고, (2) 기 C로부터의 절단이 경우에 따라 Z 또는 D로부터의 자기-희생 모이어티 결합분리 그 자체를 생성하는 반응 순서를 개시하도록 하는 구조를 갖는 모이어티이다. 다시 말해서, Z 또는 D로부터의 원위 부위에서의 반응 (기 C로부터의 절단)은 XZ-Z 또는 XD-D 결합이 또한 파열되도록 한다. 자기-희생 모이어티의 존재는 스페이서 XD의 경우에 바람직하며, 이는 접합체의 절단 후, 스페이서 XD 또는 그의 일부가 D에 부착된 채 유지되어야 하는 경우에, D의 생물학적 활성이 손상될 수 있기 때문이다. 자기-희생 모이어티의 사용은 절단가능한 기 C가 폴리펩티드인 경우에 특히 바람직하고, 이 경우에 자기-희생 모이어티는 전형적으로, D가 펩티드 절단을 입체적으로 또는 전자적으로 방해하는 것을 방지하기 위해, 그곳에 인접하여 위치한다.
D의 히드록실 또는 아미노 기에 결합된 예시적인 자기-희생 모이어티 (i)-(v)는 하기 제시되어 있다:
Figure pct00042
자기-희생 모이어티는 점선 a 및 b (또는 점선 b 및 c) 사이의 구조이며, 여기서 인접한 구조적 특색은 맥락을 제공하기 위해 제시되어 있다. 자기-희생 모이어티 (i) 및 (v)는 D-NH2에 결합되며 (즉, 접합은 아미노 기를 통한 것임), 자기-희생 모이어티 (ii), (iii), 및 (iv)는 D-OH에 결합된다 (즉, 접합은 히드록실 또는 카르복실 기를 통한 것임). 효소 - 구조 (i)-(v)의 경우에 펩티다제 및 구조 (vi)의 경우에 β-글루쿠로니다제 -에 의한 점선 b에서의 결합의 절단은 점선 a에서의 결합의 절단 및 경우에 따라 D-OH 또는 D-NH2의 결과적인 방출을 발생시키는 자기-희생 반응 순서를 개시한다. 예시로서, 구조 (i) 및 (iv)에 대한 자기-희생 메카니즘은 하기 제시된다:
Figure pct00043
다시 말해서, 자기-희생 기의 일부분에서의 제1 화학 결합의 절단은 자기-희생 기의 상이한 부분에서 제2 화학 결합 - 자기-희생 기를 약물에 연결시킨 것 -의 절단을 발생시켜 그로 인해 약물을 방출시키는 단계의 순서를 개시한다.
일부 경우에, 자기-희생 기는 구조 (vii)에 의해 제시된 바와 같이 탠덤으로 사용될 수 있다. 이러한 경우에, 점선 c에서의 절단은 1,6-제거 반응에 의한 점선 b 및 c 사이의 모이어티의 자기-희생, 이어서 고리화-제거 반응에 의한 점선 a 및 b 사이의 모이어티의 자기-희생을 촉발한다. 자기-희생 모이어티에 관한 추가의 개시내용에 대해, 문헌 [Carl et al., J. Med. Chem. 1981, 24, 479; Carl et al., WO 81/01145 (1981); Dubowchik et al., Pharmacology & Therapeutics 1999, 83, 67; Firestone et al., US 6,214,345 B1 (2001); Toki et al., J. Org. Chem. 2002, 67, 1866; Doronina et al., Nature Biotechnology 2003, 21, 778 (erratum, p. 941); Boyd et al., US 7,691,962 B2; Boyd et al., US 2008/0279868 A1; Sufi et al., WO 2008/083312 A2; Feng, US 7,375,078 B2; Jeffrey et al., US 8,039,273; 및 Senter et al., US 2003/0096743 A1]을 참조하며; 그의 개시내용은 참조로 포함된다.
또 다른 실시양태에서, Z와 D는 비-절단가능한 링커에 의해 연결되며, 즉, C는 부재한다. D의 대사는 결국 링커를 D의 생물학적 활성을 방해하지 않는 작은 첨부된 모이어티로 환원시킨다.
접합 기술
본원에 개시된 TLR7 효능제의 접합체는 바람직하게는 먼저 D 및 링커 (XD)a(C)c(XZ)b (여기서 XD, C, XZ, a, b, 및 c는 화학식 (II)에 대해 정의된 바와 같음)를 포함하는 화합물을 제조하여, 하기 화학식 (V)에 의해 나타내어지는 약물-링커 조성물을 형성함으로써 제조된다:
D-(XD)a(C)c(XZ)b-R31 (V)
여기서 R31은 Z 상의 상보적 관능기와 반응하여 접합체를 형성하는데 적합한 관능기이다. 적합한 기 R31의 예는 아미노, 아지드, 티올, 시클로옥틴,
Figure pct00044
를 포함하고;
여기서 R32는 Cl, Br, F, 메실레이트, 또는 토실레이트이고, R33은 Cl, Br, I, F, OH, -O-N-숙신이미딜, -O-(4-니트로페닐), -O-펜타플루오로페닐, 또는 -O-테트라플루오로페닐이다. 적합한 모이어티 D-(XD)aC(XZ)b-R31의 제조에 일반적으로 이용가능한 화학반응은 문헌 [Ng et al., US 7,087,600 B2 (2006); Ng et al., US 6,989,452 B2 (2006); Ng et al., US 7,129,261 B2 (2006); Ng et al., WO 02/096910 A1; Boyd et al., US 7,691,962 B2; Chen et al., US 7,517,903 B2 (2009); Gangwar et al., US 7,714,016 B2 (2010); Boyd et al., US 2008/0279868 A1; Gangwar et al., US 7,847,105 B2 (2010); Gangwar et al., US 7,968,586 B2 (2011); Sufi et al., US 8,461,117 B2 (2013); 및 Chen et al., US 8,664,407 B2 (2014)]에 개시되어 있고; 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
바람직하게는 반응성 관능기 -R31은 -NH2, -OH, -CO2H, -SH, 말레이미도, 시클로옥틴, 아지도 (-N3), 히드록실아미노 (-ONH2) 또는 N-히드록시숙신이미도이다. 특히 바람직한 관능기 -R31은 하기이다:
Figure pct00045
-OH 기는 항체 상의, 예를 들어 아스파르트산 또는 글루탐산 측쇄 상의 카르복시 기로 에스테르화될 수 있다.
-CO2H 기는 -OH 기로 에스테르화되거나 또는 항체 상의 (예를 들어 리신 측쇄 상의) 아미노 기로 아미드화될 수 있다.
N-히드록시숙신이미드 기는 기능적으로 활성화된 카르복실 기이고, (예를 들어, 리신으로부터의) 아미노 기와의 반응에 의해 편리하게 아미드화될 수 있다.
말레이미드 기는 마이클 첨가 반응에서, (예를 들어, 시스테인으로부터의, 또는 술프히드릴 관능기를 도입하기 위한 항체의 화학적 변형으로부터의) 항체 상의 -SH 기와 접합될 수 있다.
항체가 접합에 이용가능한 시스테인 -SH를 갖지 않은 경우에, 리신 잔기의 측쇄의 ε-아미노 기는 2-이미노티올란 또는 N-숙신이미딜-3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트 ("SPDP")와 반응시켜 유리 티올 (-SH) 기를 도입할 수 있고 - 말하자면 시스테인 대용물을 생성한다. 티올 기를 말레이미드 또는 다른 친핵체 수용자 기와 반응시켜 접합을 실시할 수 있다. 2-이미노티올란에 의한 메카니즘이 하기 예시된다.
Figure pct00046
전형적으로, 항체당 2 내지 3개의 티올의 티올화 수준이 달성된다. 대표적 절차에 대해, 문헌 [Cong et al., US 8,980,824 B2 (2015)]을 참조하며, 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
역배열에서, 항체 Z는 그곳에 말레이미드 기를 도입하기 위해 N-숙신이미딜 4-(말레이미도메틸)-시클로헥산카르복실레이트 ("SMCC") 또는 그의 술폰화 변형체 술포-SMCC에 의해 변형될 수 있으며, 이들 둘 다는 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)로부터 입수가능하다. 이어서, 접합은 링커 상에 -SH 기를 갖는 약물-링커 화합물로 실시될 수 있다.
대안적 접합 방법은 아지드 기를 변형된 시클로옥틴을 가로질러 부가하여 1,2,3-트리아졸 고리를 형성하는 구리-무함유 "클릭 화학"을 사용한다. 예를 들어, 문헌 [Agard et al., J. Amer. Chem. Soc. 2004, 126, 15046; Best, Biochemistry 2009, 48, 6571]을 참조하며, 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다. 아지드는 항체 상에 위치하고, 시클로옥틴은 약물-링커 모이어티 상에 위치할 수 있거나, 또는 그 반대의 경우일 수 있다. 바람직한 시클로옥틴 기는 디벤조시클로옥틴 (DIBO)이다. DIBO 기를 갖는 다양한 시약은 오레곤주 유진 소재의 인비트로젠(Invitrogen)/몰레큘라 프로브스(Molecular Probes)로부터 입수가능하다. 하기 반응은 DIBO 기가 항체 (Ab)에 부착된 경우에 대한 클릭 화학 접합을 설명한다:
Figure pct00047
또 다른 접합 기술은 비-천연 아미노산을 항체에 도입하는 것을 수반하며, 여기서 비-천연 아미노산은 약물 모이어티 내의 반응성 관능기와의 접합을 위한 관능기를 제공한다. 예를 들어, 비천연 아미노산인 p-아세틸페닐알라닌을, 문헌 [Tian et al., WO 2008/030612 A2 (2008)]에 교시되어 있는 바와 같이 항체 또는 다른 폴리펩티드에 혼입시킬 수 있다. p-아세틸페닐알라닌 내의 케톤 기는 링커-약물 모이어티 상의 히드록실아미노 기와의 옥심의 형성을 통한 접합 부위일 수 있다. 대안적으로, 비-천연 아미노산 p-아지도페닐알라닌은 항체에 혼입되어 상기 논의된 바와 같은 클릭 화학을 통한 접합을 위해 아지드 관능기를 제공할 수 있다. 비천연 아미노산은 또한, 문헌 [Goerke et al., US 2010/0093024 A1 (2010) 및 Goerke et al., Biotechnol. Bioeng. 2009, 102 (2), 400-416]에 교시된 바와 같이, 항체 또는 다른 폴리펩티드에 무세포 방법을 사용하여 혼입될 수 있다. 상기 개시내용은 본원에 참조로 포함된다. 따라서, 한 실시양태에서, 접합체를 제조하는데 사용되는 항체는 바람직하게는 p-아세틸페닐알라닌 또는 p-아지도페닐알라닌, 보다 바람직하게는 p-아세틸페닐알라닌인 비-천연 아미노산에 의해 대체된 1개 이상의 아미노산을 갖는다.
또 다른 접합 기술은 문헌 [Jeger et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49, 9995]에 따라, 효소 트랜스글루타미나제 (바람직하게는 스트렙토미세스 모바라엔시스(Streptomyces mobaraensis)로부터의 박테리아 트랜스글루타미나제 또는 BTG)를 사용한다. BTG는 글루타민의 측쇄 카르복스아미드 (아민 수용자)와, 예를 들어 리신의 ε-아미노 기 또는 5-아미노-n-펜틸 기일 수 있는 알킬렌아미노 기 (아민 공여자) 사이의 아미드 결합을 형성한다. 전형적 접합 반응에서, 하기 제시된 바와 같이, 글루타민 잔기는 항체 상에 위치하며, 알킬렌아미노 기는 링커-약물 모이어티 상에 위치한다:
Figure pct00048
폴리펩티드 쇄 상의 글루타민 잔기의 위치설정은 BTG 매개 아미드교환에 대한 그의 감수성에 대해 큰 효과를 갖는다. 항체 상의 어떠한 글루타민 잔기도 통상적으로 BTG 기질이 아니다. 그러나, 항체가 탈글리코실화된 경우 - 글리코실화 부위가 중쇄의 아스파라긴 297 (N297; 문헌 [Kabat et al., "Sequences of proteins of immunological interest," 5th ed., Pub. number 91-3242, U.S. Dept. Health & Human Services, NIH, Bethesda, Md., 1991; 이하 "카바트"]에서 제시된 바와 같은 EU 인덱스에 따른 넘버링)인 경우 - 근처의 글루타민 295 (Q295)는 BTG 감수성이 된다. 항체는 PNGase F (펩티드-N-글리코시다제 F)로의 처리에 의해 효소적으로 탈글리코실화될 수 있다. 대안적으로, 항체는 N297A 돌연변이를 불변 영역에 도입하여 N297 글리코실화 부위를 제거함으로써 글리코시드 무함유로 합성될 수 있다. 추가로, N297Q 치환은 글리코실화를 제거할 뿐만 아니라, 또한 아민 수용자인 제2 글루타민 잔기 (위치 297)를 도입하는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 한 실시양태에서, 항체는 탈글리코실화된다. 또 다른 실시양태에서, 항체는 N297Q 치환을 갖는다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 합성후 변형에 의한 또는 N297A 돌연변이를 도입하는 것에 의한 탈글리코실화가 항체당 2개의 BTG-반응성 글루타민 잔기 (위치 295에서, 중쇄당 1개)를 생성시키며, N297Q 치환을 갖는 항체가 4개의 BTG-반응성 글루타민 잔기 (위치 295 및 297에서, 중쇄당 2개)를 가질 것임을 인지할 것이다.
항체는 또한 예를 들어, 문헌 [Pons et al., US 2013/0230543 A1 (2013) 및 Rao-Naik et al., WO 2016/144608 A1]에 교시된 바와 같이, 그것에 글루타민 함유 펩티드, 또는 "태그"를 도입함으로써 BTG-매개 접합에 대해 감수성이 되도록 할 수 있다.
보완적 접근법에서, 문헌 [Rao-Naik et al., WO 2017/059158 A1 (2017)]에 교시된 바와 같이, BTG의 기질 특이성을 그의 아미노산 서열을 변경함으로써 변경시켜서, 그것이 비변형된 항체에서 글루타민 295와 반응할 수 있도록 한다.
가장 통상적으로 이용가능한 박테리아 트랜스글루타미나제는 에스. 모바라엔시스(S. mobaraensis)로부터의 것이지만, 다소 상이한 기질 특이성을 갖는 다른 박테리아로부터의 트랜스글루타미나제, 예컨대 스트렙토베르티실리움 라다카눔(Streptoverticillium ladakanum)으로부터의 트랜스글루타미나제가 고려될 수 있다 (Hu et al., US 2009/0318349 A1 (2009), US 2010/0099610 A1 (2010), 및 US 2010/0087371 A1 (2010)).
2급 아민이 링커의 부착을 위한 관능기를 제공하기 때문에, 1급 또는 2급 알킬 아민을 갖는 본 개시내용의 TLR7 효능제가 접합체에의 사용에 특히 적합하다. 그러한 TLR7 효능제-링커 화합물의 예는, 화합물 IIa-01로부터 제조할 수 있고 효소적으로 절단가능한 링커를 함유하는 화합물 41이다. 도 5는 화합물 41을 제조할 수 있는 반응식을 나타낸다.
Figure pct00049
비-효소적으로 절단가능한 링커를 함유하는 TLR7 효능제-링커 화합물의 예는 화합물 IIa-01로부터 또한 제조할 수 있는 화합물 43이다. 도 6은 화합물 43을 합성하기 위한 경로를 나타낸다.
Figure pct00050
화합물 41 및 43 둘 다는 이들을 트랜스글루타미나제에 의한 접합에 적용가능하게 하는 1급 알킬아미노 기를 함유한다. 적합한 접합 절차는 하기 제시된 실시예에 기재된다.
접합은 또한 문헌 [Levary et al., PLoS One 2011, 6(4), e18342; Proft, Biotechnol. Lett. 2010, 32, 1-10; Ploegh et al., WO 2010/087994 A2 (2010); 및 Mao et al., WO 2005/051976 A2 (2005)]에 교시되어 있는 바와 같이 효소 소르타제 A를 사용하여 실시할 수도 있다. 소르타제 A 인식 모티프 (전형적으로 LPXTG, 여기서 X는 임의의 천연 아미노산임)는 리간드 Z 상에 위치할 수 있고, 친핵성 수용자 모티프 (전형적으로 GGG)는 화학식 (III)에서의 기 R31일 수 있거나, 또는 그 반대의 경우일 수 있다.
TLR7 효능제 접합체
상기 기재된 기술을 적용하여, 하기 제시된 것과 같은 TLR7 효능제 접합체가 제조될 수 있다:
Figure pct00051
여기서 m은 1, 2, 3 또는 4이고 Ab는 항체이다.
PEG화
약물에 대한 폴리(에틸렌 글리콜) (PEG) 쇄의 부착 ("PEG화")은 약물의 약동학적 특성을 개선시킬 수 있다. 약물의 순환 반감기가 때때로 10배 넘게 증가되어 동시에 목적하는 치료 효과를 달성하는데 요구되는 투여량이 감소된다. PEG화는 또한 약물의 대사 분해를 감소시키고 그의 면역원성을 감소시킬 수 있다. 검토를 위해 문헌 [Kolate et al., J. Controlled Release 2014, 192, 167]을 참조한다.
처음에, PEG화는 생물학적 약물에 적용되었다. 2016년 이래로, 10종 초과의 PEG화 생물제제가 승인받았다. 문헌 [Turecek et al., J. Pharmaceutical Sci. 2016, 105, 460]. 보다 최근에 생물제제에의 상기 개념의 성공적 응용에 의해 자극되어 소분자 약물에 대한 그의 적용에 주목하게 되었다. 상기 언급된 이익뿐만 아니라, PEG화 소분자 약물은 용해도가 증가되고 보다 적은 독성 효과를 야기할 수 있다. 문헌 [Li et al. Prog. Polymer Sci. 2013, 38, 421].
본원에 개시된 화합물은 PEG화될 수 있다. 화합물이 지방족 1급 또는 2급 아민 또는 지방족 히드록실을 갖는 경우, 예컨대 하기 도시된 화살표로 나타낸 위치에서의 화합물의 경우, 이는 통상적인 기술 예컨대 디시클로헥실카르보디이미드, HATU, N-히드록시숙신이미드 에스테르 등을 이용하여 에스테르, 아미드, 카르보네이트 또는 카르바메이트 기를 통해 카르복시-함유 PEG 분자와 PEG화될 수 있다. 제약 분자를 PEG화하는 다양한 다른 방법이 문헌 [Alconcel et al., Polymer Chem. 2011, 2, 1442]에 개시되어 있고, 그의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
Figure pct00052
원하는 경우에, 본원에 개시된 TLR7 효능제는 자기-희생 모이어티를 포함하는 효소적으로 절단가능한 링커를 통해 PEG화되어 설계된 방식으로 비-PEG화 효능제의 방출을 가능하게 할 수 있다. 또한, PEG화는 PEG-함유 분자가 적합한 관능기 예컨대 단백질에 대한 부착을 위한 아민을 갖는 경우, 단백질 예컨대 항체에의 접합과 조합될 수 있다. 단백질은 추가의 치료 기능을 제공할 수 있거나, 또는 항체인 경우 표적화 기능을 제공할 수 있다. 이들 개념은 하기 반응 순서에 예시되며, 여기서 TLR7-NH-R은 일반적으로 TLR7 효능제를 나타낸다:
Figure pct00053
상기 반응 순서에서, 발린-시트룰린 (Val-Cit) 디펩티드는 효소 카텝신 B에 의해 절단가능하고, 여기서 p-아미노벤질 옥시카르보닐 (PABC) 기가 자기-희생 스페이서의 역할을 한다. 접합을 위한 관능기는 아민 기이고, Fmoc 기에 의해 일시적으로 보호된다. 접합은 효소 트랜스글루타미나제에 의해 실시되고, 여기서 글루타민 (Gln) 측쇄가 아실 수용자로서 작용한다. PEG 반복 단위의 수를 표시하는 아래첨자 x는 하기 논의되는 바와 같이 PEG화의 목적에 따라 크게 달라질 수 있다. 일부 목적을 위해, x는 비교적 작을 수 있고, 예컨대 2, 4, 8, 12, 또는 24일 수 있다. 다른 목적을 위해, x는 크고, 예를 들어 약 45 내지 약 910이다.
관련 기술분야의 통상의 기술자는 순서가 예시적이고 다른 요소 - 펩티드, 자기-희생 기, 접합 방법, PEG 길이 등 -는 관련 기술분야에 널리 공지된 바와 같이 사용될 수 있음을 이해할 것이다. 그들은 또한 상기 순서가 PEG화와 접합을 조합하지만, PEG화에 접합이 필요한 것은 아니고 그 반대의 경우도 그러한 것을 이해할 것이다.
화합물이 지방족 히드록실 또는 지방족 1급 또는 2급 아민이 결여된 경우에도, 이는 여전히 피리미딘 고리 상의 방향족 아민에서 PEG화될 수 있다. 이러한 위치에서 PEG화시키는 방법은 [Zarraga, US 2017/0166384 A1 (2007)]에 의해 개시되어 있고, 그의 개시내용은 참조로서 포함된다.
일부 실시양태에서, 다수의 PEG화 효능제를 단일 분자로 연결되게 하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 펜타에리트리톨 (C(CH2OH)4) 상에 4개의 PEG화 아암(arm)이 구성될 수 있고, TLR7 효능제가 각각의 PEG화 아암에 부착될 수 있다. 그의 개시내용이 참조로 포함된 문헌 [Gao et al., US 2013/0028857 A1 (2013)]을 참조한다.
약동학을 조정하기 위해, 일반적으로 바람직하게는 PEG 모이어티는 약 2 kDa (약 45개의 -(CH2CH2O)- 반복 단위에 상응함) 내지 약 40 kDa (약 910개의 -(CH2CH2O)- 반복 단위에 상응함), 보다 바람직하게는 약 5 kDa 내지 약 20 kDa의 화학식량을 갖는다. 즉, 상기 화학식에서 아래첨자 x의 범위는 약 45 내지 약 910이다. PEG 조성물은 100% 균질하지는 않고, 분포된 분자량을 나타내는 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 예를 들어 "20kDa PEG"이라는 언급은 20 kDa의 평균 분자량을 갖는 PEG를 의미한다.
PEG화는 또한 효능제의 용해도를 개선시키기 위해 사용될 수 있다. 이러한 경우에 예를 들어 2, 4, 8, 12 또는 24개의 반복 단위를 포함하는 보다 짧은 PEG 쇄가 사용될 수 있다.
제약 조성물 및 투여
또 다른 측면에서, 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 함께 제제화되는, 본원에 개시된 화합물 또는 그의 접합체를 포함하는 제약 조성물이 제공된다. 이는 1종 이상의 추가의 제약 활성 성분, 예컨대 생물학적 또는 소분자 약물을 임의로 함유할 수 있다. 제약 조성물은 또 다른 치료제, 특히 항암제와의 조합 요법으로 투여될 수 있다.
제약 조성물은 1종 이상의 부형제를 포함할 수 있다. 사용될 수 있는 부형제는 담체, 표면 활성제, 증점제 또는 유화제, 고체 결합제, 분산 또는 현탁 보조제, 가용화제, 착색제, 향미제, 코팅, 붕해제, 윤활제, 감미제, 보존제, 등장화제, 및 그의 조합을 포함한다. 적합한 부형제의 선택 및 용도는 문헌 [Gennaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 2003)]에 교시되어 있다.
바람직하게는, 제약 조성물은 (예를 들어, 주사 또는 주입에 의한) 정맥내, 근육내, 피하, 비경구, 척수 또는 표피 투여에 적합하다. 투여 경로에 따라, 활성 화합물은 이를 불활성화시킬 수 있는 산 및 다른 천연 조건의 작용으로부터 이를 보호하기 위한 물질로 코팅될 수 있다. 어구 "비경구 투여"는 통상적으로 주사에 의한, 경장 및 국소 투여 이외의 다른 투여 방식을 의미하며, 비제한적으로 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 피막내, 안와내, 심장내, 피내, 복강내, 경기관, 피하, 각피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 경막외 및 흉골내 주사 및 주입을 포함한다. 대안적으로, 제약 조성물은 비-비경구 경로, 예컨대 국소, 표피 또는 점막 투여 경로를 통해, 예를 들어 비강내로, 경구로, 질로, 직장으로, 설하로 또는 국소로 투여될 수 있다.
제약 조성물은 멸균 수용액 또는 분산액 형태일 수 있다. 그들은 또한 마이크로에멀젼, 리포솜, 또는 높은 약물 농도를 달성하기에 적합한 다른 정렬된 구조로 제제화될 수 있다. 조성물은 또한 투여 전에 물 중 재구성을 위해, 동결건조물 형태로 제공될 수 있다.
단일 투여 형태를 제조하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료될 대상체 및 특정한 투여 방식에 따라 달라질 것이며, 일반적으로 치료 효과를 생성시키는 조성물의 양일 것이다. 일반적으로 100%를 기준으로, 이 양은 제약상 허용되는 담체와 조합된 활성 성분의 약 0.01% 내지 약 99%, 바람직하게는 약 0.1% 내지 약 70%, 가장 바람직하게는 활성 성분의 약 1% 내지 약 30% 범위일 것이다.
투여 요법은 치료 반응을 제공하도록 조정된다. 예를 들어, 단일 볼루스가 투여될 수 있거나, 여러 분할 용량이 시간 경과에 따라 투여될 수 있거나, 또는 용량이 상황의 위급성에 의해 지시된 바와 같이 비례적으로 감소 또는 증가될 수 있다. 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제제화하는 것이 특히 유리하다. "투여 단위 형태"는 치료될 대상체에 대한 단일 투여량으로서 적합화된 물리적 이산 단위를 지칭하며; 각각의 단위는 목적하는 치료 반응을 생성시키도록 계산된 미리 결정된 양의 활성 화합물을, 필요한 제약 담체와 함께 함유한다.
투여량은 숙주 체중의 약 0.0001 내지 100 mg/kg, 보다 통상적으로 0.01 내지 5 mg/kg 범위이다. 예를 들어 투여량은 0.3 mg/kg 체중, 1 mg/kg 체중, 3 mg/kg 체중, 5 mg/kg 체중 또는 10 mg/kg 체중 또는 1-10 mg/kg, 또는 대안적으로 0.1 내지 5 mg/kg 범위 내일 수 있다. 예시적인 치료 요법은 1주에 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 1개월에 1회, 3개월마다 1회, 또는 3 내지 6개월마다 1회 투여이다. 바람직한 투여 요법은 하기 투여 스케줄 중 하나를 사용하여, 정맥내 투여를 통한 1 mg/kg 체중 또는 3 mg/kg 체중을 포함한다: (i) 6회 투여량에 대해 4주마다, 이어서 3개월마다; (ii) 3주마다; (iii) 3 mg/kg 체중 1회에 이은 3주마다 1 mg/kg 체중. 일부 방법에서, 투여량은 약 1-1000 μg/mL, 및 일부 방법에서는 약 25-300 μg/mL의 혈장 항체 농도가 달성되도록 조정된다.
"치료 유효량"의 본 발명의 화합물은 바람직하게는 질환 증상의 중증도에서의 감소, 질환 무증상 기간의 빈도 및 지속기간에서의 증가, 또는 질환 고통으로 인한 손상 또는 장애의 예방을 생성시킨다. 예를 들어, 종양-보유 대상체의 치료를 위해, "치료 유효량"은 바람직하게는 종양 성장을 비치료 대상체에 비해 적어도 약 20%, 보다 바람직하게는 적어도 약 40%, 보다 더 바람직하게는 적어도 약 60%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 약 80% 억제한다. 치료 유효량의 치료 화합물은 전형적으로 인간이지만 또 다른 포유동물일 수 있는 대상체에서 종양 크기를 감소시키거나 또는 증상을 달리 호전시킬 수 있다. 2종 이상의 치료제가 조합 치료로 투여되는 경우에, "치료 유효량"은 개별적으로 각 작용제의 효능이 아닌 조합의 전체로서의 효능을 지칭한다.
제약 조성물은 임플란트, 경피 패치, 및 마이크로캡슐화 전달 시스템을 포함한 제어 또는 지속 방출 제제일 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르, 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978]을 참조한다.
치료 조성물은 의료 장치 예컨대 (1) 무바늘 피하 주사 장치; (2) 마이크로-주입 펌프; (3) 경피 장치; (4) 주입 장치; 및 (5) 삼투 장치를 통해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 생체내에서 적절한 분포가 보장되도록 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 치료 화합물이 혈액-뇌 장벽을 가로지르는 것을 보장하기 위해, 이들은 리포솜 중에 제제화될 수 있으며, 이는 특이적 세포 또는 기관에 대한 선택적 수송을 증진하기 위한 표적화 모이어티를 추가적으로 포함할 수 있다.
산업상 적용성
본원에 개시된 TLR7 효능제 화합물은 TLR7의 활성화에 의해 개선될 수 있는 질환 또는 상태의 치료에 사용될 수 있다.
한 실시양태에서, TLR7 효능제는 면역-종양학 작용제로도 알려져 있는 항암 면역요법제와 조합으로 사용된다. 항암 면역요법제는 신체의 면역계를 자극하여, 특히 T 세포의 활성화를 통해 암 세포를 공격하고 파괴함으로써 작용한다. 면역계는 수많은 체크포인트 (조절) 분자를 가져, 면역계가 적당한 표적 세포를 공격하는 것과 면역계가 건강한 정상 세포를 공격하는 것을 방지하는 것 사이의 균형을 유지하도록 돕는다. 일부는 그의 결속이 T 세포 활성화를 촉진하고, 면역 반응을 증진시키는 것을 의미하는 자극제 (상향-조절자)이다. 다른 것은 그의 결속이 T 세포 활성화를 억제하고, 면역 반응을 감소시키는 것을 의미하는 억제제 (하향-조절자 또는 브레이크)이다. 효능작용 면역요법제의 자극성 체크포인트 분자로의 결합은 후자의 활성화 및 암 세포에 대한 증진된 면역 반응으로 이어질 수 있다. 반대로, 항면역요법제의 억제 체크포인트 분자로의 결합은 후자에 의한 면역계의 하향-조절을 방지하고, 암 세포에 대한 격렬한 반응을 유지하는 것을 보조할 수 있다. 자극성 체크포인트 분자의 예는 B7-1, B7-2, CD28, 4-1BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, CD40, ICOS-L, OX40, OX40L, GITR, GITRL, CD70, CD27, CD40, DR3 및 CD28H이다. 억제 체크포인트 분자의 예는 CTLA-4, PD-1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, 갈렉틴 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, 갈렉틴-1, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1, CD96 및 TIM-4이다.
어떠한 항암 면역요법제의 작용 방식이든지, 그의 유효성은 면역계의 일반적 상향조절 예컨대 TLR7의 활성화에 의해 증가될 수 있다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 명세서는 암을 앓는 환자에게 항암 면역요법제와 본원에 개시된 TLR7 효능제의 치료상 유효한 조합을 투여하는 것을 포함하는, 이러한 암을 치료하는 방법을 제공한다. 투여 시기는 동시, 순차적, 또는 교대일 수 있다. 투여 방식은 전신 또는 국부일 수 있다. TLR7 효능제는 접합체를 통해, 표적화 방식으로 전달될 수 있다.
상기 기재된 바와 같이 조합 치료로 치료될 수 있는 암의 비제한적 예는 급성 골수성 백혈병, 부신피질 암종, 카포시 육종, 림프종, 항문암, 충수암, 기형양/횡문근양 종양, 기저 세포 암종, 담관암, 방광암, 골암, 뇌암, 유방암, 기관지 종양, 카르시노이드 종양, 심장 종양, 자궁경부암, 척삭종, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수증식성 신생물, 결장암, 결장직장암, 두개인두종, 담관암, 자궁내막암, 상의세포종, 식도암, 감각신경모세포종, 유잉 육종, 안암, 난관암, 담낭암, 위장 카르시노이드 종양, 위장 기질 종양, 배세포 종양, 모발상 세포 백혈병, 두경부암, 심장암, 간암, 하인두암, 췌장암, 신장암, 후두암, 만성 골수 백혈병, 구순암 및 구강암, 폐암, 흑색종, 메르켈 세포 암종, 중피종, 구내암, 구강암, 골육종, 난소암, 음경암, 인두암, 전립선암, 직장암, 타액선암, 피부암, 소장암, 연부 조직 육종, 고환암, 인후암, 갑상선암, 요도암, 자궁암, 질암, 및 외음부암을 포함한다.
본원에 기재된 바와 같이 조합 요법에 사용될 수 있는 항암 면역요법제는 하기를 포함한다: AMG 557, AMP-224, 아테졸리주맙, 아벨루맙, BMS 936559, 세미플리맙, CP-870893, 다세투주맙, 두르발루맙, 에노블리투주맙, 갈릭시맙, IMP321, 이필리무맙, 루카투무맙, MEDI-570, MEDI-6383, MEDI-6469, 무로모납-CD3, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, 스파르탈리주맙, 트레멜리무맙, 우렐루맙, 우토밀루맙, 바를리루맙, 본레롤리주맙. 하기 표 C는 그의 대체 명칭 (상표명, 이전 명칭, 연구 코드 또는 동의어) 및 각 표적 체크포인트 분자를 열거한다.
Figure pct00054
TLR7 효능제를 사용하는 조합 치료의 한 실시양태에서, 항암 면역요법제는 길항작용 항-CTLA-4, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 항체이다. 암은 폐암 (비소세포 폐암 포함), 췌장암, 신장암, 두경부암, 림프종 (호지킨 림프종 포함), 피부암 (흑색종 및 메르켈 피부암 포함), 요로상피암 (방광암 포함), 위암, 간세포성암 또는 결장직장암일 수 있다.
TLR7 효능제를 사용하는 조합 치료의 또 다른 실시양태에서, 항암 면역요법제는 길항작용 항-CTLA-4 항체, 바람직하게는 이필리무맙이다.
TLR7 효능제를 사용하는 조합 치료의 또 다른 실시양태에서, 항암 면역요법제는 길항작용 항-PD-1 항체, 바람직하게는 니볼루맙 또는 펨브롤리주맙이다.
본원에 개시된 TLR7 효능제는 백신 보조제로서 유용하다.
생물학적 활성
TLR7 효능제로서 본원에 개시된 화합물의 생물학적 활성은 하기 절차에 의해 검정될 수 있다.
인간 TLR7 효능제 활성 검정
이 절차는 본 명세서에 개시된 화합물의 인간 TLR7 (hTLR7) 효능제 활성을 검정하는 방법을 기재한다.
인간 TLR7-분비 배아 알칼리성 포스파타제 (SEAP) 리포터 트랜스진을 보유하는 조작된 인간 배아 신장 블루 세포 (HEK-블루™ TLR 세포; 인비보젠(Invivogen))를 비-선택적인 배양 배지 (10% 소 태아 혈청 (시그마(Sigma))이 보충된 DMEM 고-글루코스 (인비트로겐(Invitrogen))) 중에 현탁시켰다. HEK-블루™ TLR7 세포를 384-웰 조직-배양 플레이트의 각 웰에 첨가하고 (웰 당 15,000개 세포), 16-18시간 동안 37℃, 5% CO2에서 인큐베이션하였다. 화합물 (100 nl)을 HEK-블루™ TLR 세포를 함유하는 웰에 분배하고, 처리된 세포를 37℃, 5% CO2에서 인큐베이션하였다. 18시간 처리 후, 10 마이크로리터의 새로 제조된 퀀티-블루™ 시약 (인비보젠)을 각각의 웰에 첨가하고, 30분 동안 인큐베이션하고 (37℃, 5% CO2), SEAP 수준을 엔비전 플레이트 판독기 (OD = 620 nm)를 사용하여 측정하였다. 반수 최대 유효 농도 값 (EC50; 검정 기준선과 최대값 사이의 반응 중간값을 유도하는 화합물 농도)을 계산하였다. 보고된 활성은 다수의 측정의 평균일 수 있다.
인간 혈액에서의 제I형 인터페론 유전자 (MX-1) 및 CD69의 유도
제I형 인터페론 (IFN) MX-1 유전자 및 B-세포 활성화 마커 CD69의 유도는 TLR7 경로의 활성화시 발생하는 하류 이벤트이다. 하기는 TLR7 효능제에 반응하는 그의 유도를 측정하는 인간 전혈 검정이다.
헤파린첨가 인간 전혈을 인간 대상체로부터 수거하고, 1mM의 시험 TLR7 효능제 화합물로 처리하였다. 혈액을 RPMI 1640 배지로 희석하고, 에코(Echo)를 사용하여 웰당 10 nL을 적가하여 최종 농도 1uM (혈액 10uL 중 10nL)를 수득하였다. 30초 동안 진탕기에서 혼합한 후, 플레이트를 덮고, 챔버에 37℃에서 o/n=17시간 동안 두었다. 고정/용해 완충제를 제조하고 (H2O 중 5x->1x, 37℃에서 가온; Cat# BD 558049), 나중에 사용하기 위해 투과화 완충제 (얼음 상)를 유지하였다.
표면 마커 염색 (CD69)의 경우: 표면 Abs: 0.045ul hCD14-FITC (써모피셔(ThermoFisher) Cat # MHCD1401) + 0.6ul hCD19-ef450 (써모피셔 Cat # 48-0198-42) + 1.5ul hCD69-PE (cat# BD555531) + 0.855ul FACS 완충제를 제조했다. 3ul/웰을 첨가하고, 1분 동안 1000 rpm 회전시키고, 진탕기에서 30초 동안 혼합하고, 얼음 상에 30분 동안 두었다. 30분 후에 70uL의 미리가온된 1x 고정/용해 완충제를 사용하여 자극을 중지시키고, 펠릭스 메이트를 사용하여 현탁시키고 (15회, 각 플레이트에 대해 팁을 바꿈), 37℃에서 10분 동안 인큐베이션하였다.
2000 rpm에서 5분 동안 원심분리하고, HCS 플레이트 세척기로 흡인하고, 진탕기에서 30초 동안 혼합한 다음, 이어서 dPBS 70uL로 세척하고, 2xs (2000rpm, 5분 동안) 펠릿화하고, FACS 완충제 50ul로 세척하고, 1xs (2000rpm, 5분 동안) 펠릿화하였다. 진탕기에서 30초 동안 혼합하였다. 세포내 마커 염색 (MX-1)의 경우: 50ul의 BD 투과화 완충제 III을 첨가하고, 진탕기에서 30초 동안 혼합하였다. 얼음 상에서 30분 동안 (암소에서) 인큐베이션하였다. 50uL의 FACS 완충제 2X (투과화 후에 회전 @2300rpm x 5분)로 세척한 다음, 진탕기에서 30초 동안 혼합하였다. MX1 항체()(4812)-알렉사 647: 노부스 바이올로지칼스(Novus Biologicals) #NBP2-43704AF647) 20ul FACS bf + 0.8ul hIgG + 0.04ul MX-1을 함유하는 20ul의 FACS 완충제에 재현탁시켰다. 1000rpm로 1분 동안 회전시키고, 진탕기에서 30초 동안 혼합하고, 샘플을 암소에서 실온에서 45분 동안 인큐베이션한 다음, 이어서 2x FACS 완충제로 세척하였다 (투과화 후에 회전 @2300rpm x 5분). 20ul (35uL, 웰 당 총계)의 FACS 완충제를 재현탁시키고, 호일로 덮고, 4℃에서 두어 다음날 판독하였다. 플레이트를 i큐플러스(iQuePlus)에서 판독하였다. 결과를 툴세트에 기록하고, 커브 마스터에서 IC50 곡선을 생성한다. y-축 100%를 1uM의 레시퀴모드로 설정한다.
마우스 혈액에서의 TNF-알파 및 제I형 IFN 반응 유전자의 유도
TNF-알파 및 제I형 IFN 반응 유전자의 유도는 TLR7 경로의 활성화시 발생하는 하류 이벤트이다. 하기는 TLR7 효능제에 반응하는 마우스 전혈에서의 그의 유도를 측정하는 검정이다.
헤파린첨가 마우스 전혈을 Pen-Strep을 함유한 RPMI 1640에 의해 5:4 (50 uL 전혈 및 배지 40 uL)의 비로 희석하였다. 희석된 혈액 90 uL의 부피를 팔콘(Falcon) 편평 바닥 96-웰 조직 배양 플레이트의 웰로 옮기고, 플레이트를 4℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 100% DMSO 스톡 중 시험 화합물을 농도 반응 검정 동안 동일한 배지에서 20배 희석한 다음, 이어서 희석된 시험 화합물 10 uL을 웰에 첨가하여 최종 DMSO 농도가 0.5%가 되었다. 대조군 웰은 5% DMSO를 함유하는 10 uL 배지를 수용하였다. 이어서, 플레이트를 5% CO2 인큐베이터에서 37℃에서 17시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 배양 배지 100 uL을 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 원심분리하고, 상청액 130 uL을 ELISA (인비트로젠, 카탈로그 번호 88-7324, 써모-피셔 사이언티픽(Thermo-Fisher Scientific)에 의함)에 의한 TNFa 생산의 검정에 사용하기 위해 제거하였다. 인비트로젠 mRNA 캐처 플러스 키트 (Cat#K1570-02)로부터의 DTT를 함유한 mRNA 캐처 용해 완충제 (1x) 70 uL 부피를 웰 내의 나머지 70 uL 샘플에 첨가하고, 5회 상하로 피펫팅하여 혼합하였다. 이어서, 플레이트를 실온에서 5 - 10분 동안 진탕한 다음, 이어서 프로테이나제 K 2 uL을 각 웰에 첨가하였다 (20 mg/mL). 이어서, 플레이트를 실온에서 15 - 20분 동안 진탕하였다. 이어서, 플레이트를 추가로 가공할 때까지 -80℃에서 저장하였다.
동결된 샘플을 해동시키고, mRNA를 인비트로젠 mRNA 캐처 플러스 키트 (Cat# K1570-02)를 사용하여 제조업체의 지침서에 따라 추출하였다. RNA 추출로부터의 절반 수율의 mRNA를 사용하여 인비트로젠 슈퍼스크립트 IV VILO 마스터 믹스 (Cat# 11756500)를 사용하여 20 μL 리버스 트랜스크립타제 반응물 중에 cDNA를 합성하였다. 택맨(TaqMan)® 실시간 PCR을 써모피셔 (어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems))로부터의 퀀트스튜디오 실시간 PCR 시스템을 사용하여 수행하였다. 모든 실시간 PCR 반응을 마우스 IFIT1, IFIT3, MX1 및 PPIA 유전자 발현에 대해 상업적으로 예비설계된 택맨 검정 및 택맨 마스터 믹스를 사용하여 이중으로 실행하였다. PPIA를 하우스키핑 유전자로서 사용하였다. 제조업체의 권장사항을 따랐다. 모든 미가공 데이터 (Ct)를 평균 하우스키핑 유전자 (Ct)에 의거해 정규화하고, 이어서 비교 Ct (ΔΔCt) 방법을 사용하여 실험적 분석에 대한 상대 유전자 발현을 정량화 (RQ)하였다.
합성
본 발명의 실시는 추가로 하기 실시예를 참조하여 이해될 수 있고, 이는 제한이 아니라 예시로 제공된다.
실시예 후의 표는 본원에 사용된 두문자어 및 약어 및 그의 의미를 열거한다.
실시예 1 - 도 1에 대한 화합물의 합성
본 실시예 및 도 1은 화합물 IIa-01의 합성에 관한 것이다.
화합물 3. 메탄올 (50 mL) 중 메틸 4-아미노-1H-피라졸-5-카르복실레이트 2 (4 g, 28.3 mmol) 및 메틸 (Z)-4-(2,3-비스(메톡시카르보닐)구아니디노)-1H-피라졸-5-카르복실레이트 1을 아세트산 (8.11 mL, 142 mmol)으로 처리하며, 이때 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 소듐 메톡시드 (64.8 mL, 283 mmol)를 첨가하고, 교반을 밤새 계속하였다. LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 아세트산을 느리게 첨가하여 pH를 5로 조정하고, 이에 의해 침전물이 형성되고, 물에 이어서 아세토니트릴로 세척하고, 건조시켜 화합물 3을 회백색 고체 5.2 g로서 수득하였다.
LCMS ESI: C7H7N5O3 계산치 = 210.16 (M+H+), 실측치 210.0 (M+H+).
화합물 4. DMSO (10 mL) 중 화합물 3 (2g, 9.56 mmol), 부탄-1-아민 (1.8 mL, 9 mmol), 및 DBU (1.6 mL, 10 mmol)를 BOP (5 g, 11 mmol)로 천천히 처리하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였으며, 이 때 LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 반응물을 직접 역상 콤비플래쉬(COMBIFLASH)™ 장치에 의해 0-100% 아세토니트릴/물 (0.1% 포름산)을 포함하는 80 g C-18 칼럼 용리를 사용하여 정제하여 화합물 4를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS ESI: C11H16N6O2 계산치 = 265.28 (M+H+), 실측치 265.2 (M+H+).
1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ 8.02 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 1.74 - 1.66 (m, 2H), 1.49 - 1.38 (m, 2H), 1.25 (s, 1H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
화합물 6. DMF (2 mL) 중 메틸 4-(브로모메틸)-2-메톡시벤조에이트 5 (1g, 3.86 mmol) 및 시클로부탄아민 5a (0.659 mL, 7.72 mmol)의 혼합물을 70℃에서 30분 동안 가열하고, 이때 LCMS는 아민 생성물의 형성을 나타내었다. 과량의 염기를 증발시키고, 휘니그 염기 (1.348 mL, 7.72 mmol)를 첨가하고, 이어서 Boc-무수물 (0.896 mL, 3.86 mmol)의 첨가를 첨가하였다. LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 콤비플래쉬™ 장치에 의해 EtOAc/헥산을 사용하여 정제하여 0.82g 목적 생성물 6을 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS ESI: C19H27NO5 계산치 = 350.42 (M+H+), 실측치 350.1 (M+H+).
화합물 7. 0℃에서 THF (5 mL) 중 화합물 6 (0.82g, 2.347 mmol)의 용액을 LiAlH4 (THF 중 2 M, 1.173 mL, 2.347 mmol)로 천천히 처리하고, 30분 동안 교반하고, 이때 LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 반응물을 메탄올을 느리게 첨가하여 켄칭하고, 로쉘 염 용액과 함께 2시간 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 조 생성물 7을 콤비플래쉬™ 장치에 의해 EtOAc/헥산, 실리카 겔 칼럼을 사용하여 정제하였다.
LCMS ESI: C18H27NO4 계산치 = 322.41 (M+H+), 실측치 322.1 (M+H+).
화합물 8 및 9. THF (3 mL) 중 화합물 4 (100 mg, 0.378 mmol), 화합물 7 (182 mg, 0.568 mmol) 및 트리페닐포스핀 (248 mg, 0.946 mmol)의 혼합물을 5분에 걸쳐 DIAD (0.110 mL, 0.568 mmol)로 천천히 처리하고, N2 하에 실온에서 30분 동안 교반하며, 이때 LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 역상 콤비플래쉬™ 장치에 의해 80 g C-18 칼럼을 사용하여 0-100% 아세토니트릴/물 (1 mM TEAA)로 용리시키면서 정제하여 화합물 8 및 9의 혼합물을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS ESI: C29H41N7O5 계산치 = 566.69 (M-H+), 실측치 566.3 (M-H+).
이성질체를 키랄 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 칼럼: 크로마실 5-셀루코트, 21 x 250 mm, 5 마이크로미터, 이동상: 15% MeOH-DEA / 85 CO2, 유량 조건: 45 mL/분, 150 Bar, 40℃, 검출기 파장: 230 nm, 주입 세부사항: MeOH 중 ~25mg/mL 0.5 mL를 사용하여 분리하여 화합물 8 17 mg 및 화합물 9 25 mg을 수득하였다.
화합물 8에 대한 분석 데이터: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.61 (s, 2H), 7.86 (s, 2H), 6.94 (s, 2H), 6.83 (s, 2H), 6.63 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 6.51 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 5.69 (s, 4H), 4.39 (s, 4H), 3.79 (s, 6H), 3.63 (s, 6H), 3.48 (d, J = 6.2 Hz, 4H), 3.33 (s, 20H), 3.18 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 2.05 - 1.95 (m, 8H), 1.53 (t, J = 7.5 Hz, 7H), 1.35 (s, 11H), 1.23 (q, J = 7.2 Hz, 6H), 0.86 (t, J = 7.4 Hz, 6H).
화합물 9에 대한 분석 데이터: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.37 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.71 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.48 (s, 2H), 4.42 (s, 3H), 3.78 (d, J = 18.0 Hz, 4H), 3.69 (s, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.51 - 3.42 (m, 3H), 2.06 - 1.97 (m, 6H), 1.61 - 1.47 (m, 6H), 1.36 (s, 8H), 1.34 - 1.26 (m, 6H), 0.99 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.94 - 0.85 (m, 4H).
화합물 8a. 화합물 8의 용액 (13 mg, 0.023 mmol)을 THF (0.5 mL) 중에 용해시키고, TFA (0.018 mL, 0.229 mmol)로 처리하였다. 30분 내의 LCMS은 Boc 탈보호를 나타내었다. TFA을 증발시키고, 이 혼합물을 수산화나트륨 (9.16 mg, 0.229 mmol)으로 처리하고, 60℃에서 2시간 동안 가열하고, 이때 LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 염기를 6M HCl의 느린 첨가에 의해 중화시키고, EtOAc/물로 후처리하였다. 조 물질을 하기 조건 하에 정제용 HPLC에 의해 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 200 mm x 19 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 5:95 아세토니트릴: 물, 10 mM 아세트산암모늄 포함; 이동상 B: 95:5 아세토니트릴: 물, 10-mM 아세트산암모늄 포함; 구배: 7% B에서 0-분 유지, 20분에 걸쳐 7-47% B, 이어서 100% B에서 4-분 유지; 유량: 20 mL/분.
LCMS ESI: C22H31N7O 계산치 = 410.5 (M+H+), 실측치 410.2 (M+H+).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.54 (s, 3H), 7.02 (s, 3H), 6.76 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 6.47 - 6.38 (m, 5H), 5.60 (d, J = 11.5 Hz, 10H), 3.58 (s, 2H), 3.47 (s, 1H), 3.42 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 3.18 - 3.11 (m, 2H), 2.02 (s, 4H), 1.90 (s, 5H), 1.70 (t, J = 9.5 Hz, 5H), 1.60 (d, J = 9.8 Hz, 3H), 1.49 (dt, J = 24.2, 8.3 Hz, 9H), 1.36 (d, J = 19.4 Hz, 4H), 1.20 (dt, J = 15.0, 7.2 Hz, 6H), 0.84 (t, J = 7.4 Hz, 9H).
화합물 IIa-01. 화합물 IIa-01을 화합물 8a에 사용된 방식과 유사한 방식으로 제조하였다.
LCMS ESI: C22H31N7O 계산치 = 410.5 (M-H+), 실측치 410.2 (M-H+).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.64 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.90 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.37 (s, 2H), 3.56 (s, 1H), 3.18 - 3.11 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.04 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 1.88 (s, 6H), 1.71 (t, J = 9.7 Hz, 2H), 1.56 (dq, J = 19.1, 10.6, 10.2 Hz, 4H), 1.31 (q, J = 7.7 Hz, 2H), 0.88 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
실시예 2 - 도 2a-2b에 대한 화합물의 합성
본 실시예 및 도 2a-2b는 화합물 IIa-14 및 IIa-19, 및 유사하게 제조된 다른 화합물의 합성에 관한 것이다.
화합물 12 및 13. DMF (20 mL) 중 메틸 4-니트로-1H-피라졸-5-카르복실레이트 10 (3.27 g, 19.11 mmol)의 용액을 K2CO3 (2.90 g, 21.02 mmol) 및 메틸 4-(브로모메틸)-3-메톡시벤조에이트 11 (5 g, 19.30 mmol)로 처리하였다. 반응을 0℃에서 시작하고, 1시간 동안 진행되도록 하며, 이때 LCMS는 생성물의 ~1:5 혼합물을 포함한 반응의 완결을 나타내었다. 염기를 여과하고, 반응을 EtOAc로 희석하고, 물로 2회 세척하였다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 후속 단계에 그대로 사용하였다.
LCMS ESI: C15H15N3O7 계산치 = 350.2 (M-H+), 실측치 350.0 (M-H+).
특징화 목적을 위해, 소량의 생성물의 혼합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 0-50% EtOAc/헥산을 사용하여 분리하였다.
화합물 12에 대한 분석 데이터: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.40 (s, 1H), 7.57 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.53 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.84 (d, J = 16.2 Hz, 6H).
화합물 13에 대한 분석 데이터: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.05 (s, 1H), 7.62 - 7.51 (m, 2H), 7.28 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.47 (s, 2H), 3.87 (s, 8H), 3.31 (s, 1H).
화합물 14 및 15. 화합물 12 및 13 (2g, 5.73 mmol), 아연 및 포름산암모늄의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 여과 및 농축에 의해 화합물 14 및 15의 조 혼합물을 수득하였다.
LCMS ESI: C15H17N3O5 계산치 = 320.3 (M+H+), 실측치 320.2 (M+H+).
화합물 16 및 17. MeOH (20 mL) 중 화합물 14 및 15 (1.830 g, 5.73 mmol) 및 화합물 1의 혼합물을 아세트산 (1.640 mL, 28.7 mmol)으로 처리하고, 밤새 교반하였다. 용액을 소듐 메톡시드 (13.11 mL, 57.3 mmol)로 처리하고, 밤새 교반하였다. LCMS는 생성물로의 전환을 나타내었다. pH을 5로 조정하고, 생성된 침전물을 물로 세척하였다. 잔류물을 건조시켜 화합물 16 및 17의 혼합물을 수득하였다.
LCMS ESI: C17H17N5O6 계산치 = 388.3 (M+H+), 실측치 388.1 (M+H+).
화합물 18 및 19. DMSO (10 mL) 중 화합물 16 및 17 (1g, 2.58 mmol)의 혼합물을 부탄-1-아민 (0.510 mL, 5.16 mmol), DBU (0.428 mL, 2.84 mmol)로 처리한 다음, 이어서 BOP (1.370 g, 3.10 mmol)로 천천히 처리하였다. 반응물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였으며, 이때 LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 반응물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 후속 단계에 그대로 사용하였다.
LCMS ESI: C21H26N6O5 계산치 = 443.4 (M+H+), 실측치 443.2 (M+H+).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.41 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.57 - 7.42 (m, 3H), 6.93 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.80 (s, 1H), 5.60 (s, 2H), 4.04 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.95 - 3.82 (m, 10H), 3.62 (d, J = 6.1 Hz, 4H), 3.45 (q, J = 7.0 Hz, 3H), 2.68 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 2.57 - 2.50 (m, 6H), 2.00 (s, 1H), 1.59 (p, J = 7.3 Hz, 3H), 1.54 - 1.48 (m, 1H), 1.39 - 1.26 (m, 3H), 1.18 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 0.86 (dt, J = 29.5, 7.3 Hz, 5H).
화합물 18a 및 IIa-14. THF (2.58 mL, 5.16 mmol) 중 화합물 18 및 19 (1.142 g, 2.58 mmol)의 용액을 0℃에서 LiAlH4 (THF, 2.58 mL, 5.16 mmol)로 처리하고, 1시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 반응물을 MeOH로 켄칭하고, 로쉘 염 용액과 함께 밤새 교반하였다. 생성물을 EtOAc로 추출하고, 후속 단계에 조 화합물의 혼합물로서 사용하여 중간체를 환원시켰다.
LCMS ESI: C20H26N6O4 계산치 = 415.4 (M+H+), 실측치 415.2 (M+H+).
1,4-디옥산 (10 mL) 중 중간체 (1069 mg, 2.58 mmol)의 혼합물을 수성 수산화나트륨 (2.58 mL, 25.8 mmol)으로 처리하고, 80℃에서 5시간 동안 가열하였으며, 이후 LCMS는 생성물의 형성을 나타내었다. 염기를 6M HCl로 중화시키고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 5 mL DMF에 녹이고, 시린지를 여과하였다. 용매를 증발시켜 화합물 18a 및 IIa-14의 3:1 혼합물을 수득하였다.
LCMS ESI: C18H24N6O2 계산치 = 357.4 (M+H+), 실측치 357.2 (M+H+).
화합물 18b 및 IIa-19. THF (1 mL) 중 화합물 Ia-38 및 IIa-14 (420 mg, 1.178 mmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (0.172 mL, 2.357 mmol)로 처리하고, 30분 동안 교반한 후, LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 후속 단계에 그대로 사용하였다.
LCMS ESI: C18H23ClN6O 계산치 = 375.8 (M+H+), 실측치 375.2 (M+H+).
DMF (1 mL) 중 이전 조 생성물 혼합물 (20 mg, 0.053 mmol) 및 테트라히드로-2H-피란-4-아민 22 (5.40 mg, 0.053 mmol)의 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 가열한 후, LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 반응물을 시린지 여과하고, 조 생성물을 정제용 LC/MS를 통해 하기 조건을 사용하여 정제하고 분리하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 200 mm x 19 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 5:95 아세토니트릴: 물, 0.1% 트리플루오로아세트산 포함; 이동상 B: 95:5 아세토니트릴: 물, 0.1% 트리플루오로아세트산 포함; 구배: 6% B에서 2-분 유지, 25분에 걸쳐 6-27% B, 이어서 100% B에서 2-분 유지; 유량: 20 mL/분; 칼럼 온도: 25℃. 분획 수집을 MS 신호에 의해 촉발시켰다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
IIa-19에 대한 분석 데이터:
LCMS ESI: C23H33N7O2 계산치 = 440.5 (M+H+), 실측치 440.1 (M+H+).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.94 (s, 0H), 7.86 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.14 - 7.03 (m, 2H), 5.51 (s, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.96 - 3.90 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.29 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.89 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.55 (s, 1H), 2.00 (d, J = 12.6 Hz, 2H), 1.58 (p, J = 7.5 Hz, 4H), 1.31 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
추가의 화합물을 최종 단계에서 테트라히드로-2H-피란-4-아민 22 대신에 표 D에 나타낸 아민을 사용하는 것을 제외하고는 화합물 IIa-19와 유사하게 제조하였다.
Figure pct00055
실시예 3 - 도 3에 대한 화합물의 합성
화합물 IIa-35를 도 3의 합성 반응식에 따라 제조하였다. 예상 질량 (M+H) 401.4; 관찰치 401.1.
실시예 4 - 도 4a-4b에 대한 화합물의 합성
본 실시예 및 도 4a-4b는 화합물 IIb-01 및 IIb-04, 및 유사하게 제조된 다른 화합물의 합성에 관한 것이다.
화합물 30. 디옥산 (5 mL) 중 화합물 4 (400 mg, 1.513 mmol)의 현탁액을 수산화나트륨 (물 중 10 N, 1.513 mL, 15.13 mmol)로 처리하고, 60℃에서 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 조 생성물을 물 중에 용해시키고, 역상 크로마토그래피에 의해 콤비플래쉬™ 유닛에서 150 g C-18 칼럼을 사용하여 아세토니트릴 중 10 mM TEAA:물 중 10mM, 0-70% 구배로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 결빙시키고, 동결건조시켜 화합물 30 (150 mg, 0.727 mmol, 48.1% 수율)을 수득하였다.
LCMS ESI: C9H15N6 계산치 = 207.1 (M+H+), 실측치 207.2 (M+H+).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 (br s, 1H), 5.53 (br s, 2H), 3.43 (br d, J=6.2 Hz, 2H), 1.57 (t, J=7.2 Hz, 2H), 1.44 - 1.29 (m, 2H), 0.95 - 0.76 (m, 3H).
화합물 33. DMF (26.3 ml) 중 6-플루오로니코틴알데히드 31 (1.809 g, 14.46 mmol), 메틸 4-히드록시벤조에이트 32 (2 g, 13.15 mmol), 및 K2CO3 (1.998 g, 14.46 mmol)의 현탁액을 110℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 냉각시킨 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 물로 헹구고, 진공 하에 건조시켜 화합물 33 (3.30 g, 12.84 mmol, 95.1% 수율)을 수득하였다.
LCMS ESI: C14H11NO4 계산치 = 258.1 (M+H+), 실측치 258.0(M+H+).
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 10.01 (s, 1H), 8.63 (d, J=2.4 Hz, 1H), 8.23 (dd, J=8.6, 2.4 Hz, 1H), 8.17 - 7.97 (m, 2H), 7.27 - 7.22 (m, 2H), 7.10 (d, J=8.6 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H).
화합물 34. MeOH (100 ml) 중 화합물 33 (3.76 g, 14.62 mmol)의 용액을 0℃에서 NaBH4 (0.553 g, 14.62 mmol)로 조금씩 처리한 다음, 계속 냉각하면서 10분 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응물을 반포화 NH4Cl을 천천히 첨가하여 켄칭하였다. 교반을 실온에서 30분 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 고체를 물에 슬러리로 만들고, 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 화합물 34 (3.37 g, 13.00 mmol, 89% 수율)를 수득하였다.
LCMS ESI: C14H13NO4 계산치 = 260.1(M+H+), 실측치 260.0(M+H+).
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.21 (d, J=2.2 Hz, 1H), 8.12 - 8.04 (m, 2H), 7.81 (dd, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 2H), 6.99 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.91 (s, 3H).
화합물 35. DCM (75 mL) 중 화합물 34 (7.9 g, 30.5 mmol)를 MsCl (2.61 mL, 33.5 mmol)로 0℃에서 처리하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 반응을 완결하였다. 반응물을 물로 켄칭하였다. DCM (3 x 20 mL)으로 추출한 후, 합한 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 이스코 실리카 칼럼 (80g)에 의해 에틸 아세테이트:헥산, 0-70% 구배로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 농축시켜 화합물 35 (7.47g, 26.9 mmol, 88% 수율)를 수득하였다.
LCMS ESI: C14H13ClNO3 계산치 = 278.1(M+H+), 실측치 278.0(M+H+).
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 8.19 (d, J=2.2 Hz, 1H), 8.13 - 8.02 (m, 2H), 7.79 (dd, J=8.5, 2.5 Hz, 1H), 7.22 - 7.14 (m, 2H), 6.99 (d, J=8.6 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.92 (s, 3H).
화합물 36 및 37. DMF (1 mL) 중 화합물 30 (70 mg, 0.339 mmol)을 탄산세슘 (332 mg, 1.018 mmol)에 이어서 화합물 35 (94 mg, 0.339 mmol)로 처리하였다. 실온에서 5시간 동안 교반한 후, 반응이 완결되었다. 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x10mL)로 추출한 후, 합한 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진한 조 생성물을 이스코 실리카 칼럼 (24g)에 의해 DCM:DCM, 0-60% 구배 중 20% MeOH로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 농축시켜 화합물 36 및 37 (120 mg, 0.080 mmol, 79% 수율)의 혼합물을 1:4 비율로 수득하였다.
LCMS ESI: C23H26N7O3 계산치 = 448.2 (M+H+), 실측치 448.3 (M+H+).
화합물 36a 및 IIb-01. THF (2 mL) 중 화합물 36 및 37 (60 mg, 0.114 mmol)의 혼합물을 0℃에서 N2 하에 LiAlH4 (THF 중 1.0 M, 0.22 mL, 0.22 mmol)로 천천히 처리하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였으며, 이때 LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 반응물을 Na2SO4·10 H20에 이어서 MeOH로 천천히 첨가하여 켄칭하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 DMF 중에 용해시키고, 생성물을 정제용 LC/MS를 통해 하기 조건을 사용하여 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 200 mm x 19 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 5:95 아세토니트릴: 물, 0.1% 트리플루오로아세트산 포함; 이동상 B: 95:5 아세토니트릴: 물, 0.1% 트리플루오로아세트산 포함; 구배: 10% B에서 0-분 유지, 20분에 걸쳐 10-45% B, 이어서 100% B에서 4-분 유지; 유량: 20mL/분. 분획 수집을 MS 및 UV 신호에 의해 촉발시켰다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
화합물 IIb-01에 대한 분석 데이터:
LCMS ESI: C22H26N7O2 계산치 = 420.2 (M+H+), 실측치 420.2 (M+H+).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.45 - 9.29 (m, 1H), 8.21 - 8.15 (m, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.86 - 7.78 (m, 1H), 7.78 - 7.68 (m, 1H), 7.35 (br d, J=8.2 Hz, 2H), 7.08 - 7.03 (m, 2H), 7.03 - 6.99 (m, 1H), 5.52 (s, 2H), 4.50 (br d, J=4.9 Hz, 2H), 2.98 - 2.82 (m, 2H), 1.65 - 1.51 (m, 2H), 1.40 - 1.27 (m, 2H), 0.90 (br t, J=7.2 Hz, 3H).
화합물 IIb-04. THF (1 mL) 중 화합물 36a 및 화합물 IIb-04 (40 mg, 0.095 mmol)의 혼합물을 티오닐 클로라이드 (0.14 mL, 1.9 mmol)로 처리하였다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 용매를 증발시키고, 과량의 티오닐 클로라이드를 DCM을 사용하여 공비혼합적으로 제거하였다. 조 클로라이드 물질을 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
LCMS ESI: C22H25N7O 계산치 = 438.2 (M+H+), 실측치 438.1 (M+H+).
상기 단락으로부터의 이전 클로라이드의 혼합물 (40 mg, 0.091 mmol)을 DMF (1.0 mL) 중에 용해시키고, 2-아미노에탄-1-올 (55.0 μl, 0.91 mmol)으로 처리한 다음, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 혼합물을 정제용 LC/MS를 통해 하기 조건을 사용하여 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 200 mm x 19 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 5:95 아세토니트릴: 물, 10 mM 아세트산암모늄 포함; 이동상 B: 95:5 아세토니트릴: 물, 10 mM 아세트산암모늄 포함; 구배: 8% B에서 0-분 유지, 25분에 걸쳐 8-48% B, 이어서 100% B에서 4-분 유지; 유량: 20 mL/분; 칼럼 온도: 25℃. 분획 수집을 MS 신호에 의해 촉발시켰다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
화합물 IIb-04에 대한 분석 데이터:
LCMS ESI: C24H31N8O2 계산치 = 463.2 (M+H+), 실측치 463.3 (M+H+).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (br s, 2H), 7.91 (br s, 1H), 7.84 (br d, J=8.7 Hz, 1H), 7.55 (br d, J=8.1 Hz, 2H), 7.18 (br d, J=8.3 Hz, 2H), 7.09 (br d, J=8.7 Hz, 1H), 5.55 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.73 - 3.63 (m, 2H), 3.12 - 2.74 (m, 4H), 1.69 - 1.50 (m, 2H), 1.38 - 1.25 (m, 2H), 0.91 (br t, J=7.3 Hz, 3H).
도 4a-4b의 반응식에서 6-플루오로니코틴알데히드 31을 4-플루오로-2-메톡시벤즈알데히드로 대체하고 일반적으로 상기 절차에 따라, 표 E 내의 화합물을 나타낸 아민을 사용하여 제조하였다.
Figure pct00056
실시예 5 - 화합물 III-01 및 III-02의 합성
본 실시예는 화합물 III-01 및 III-02의 제조에 관한 것이다. 이들 화합물을 화합물 36 및 37과 MeMgCl 그리냐르 시약을 반응시켜 제조하였다.
Figure pct00057
THF (1 mL) 중 화합물 36 및 37 (60 mg, 0.134 mmol)의 혼합물에 0℃에서 MeMgCl (0.171 mL, 0.513 mmol)을 첨가하였다. 1시간 후, LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 혼합물을 정제용 LC/MS를 통해 하기 조건을 사용하여 정제하였다: 칼럼: 엑스브리지 C18, 200 mm x 19 mm, 5-μm 입자; 이동상 A: 5:95 아세토니트릴: 물, 0.1% TFA 포함; 이동상 B: 95:5 아세토니트릴: 물, 0.1% TFA 포함; 구배: 10% B에서 0-분 유지, 20분에 걸쳐 10-45% B, 이어서 100% B에서 4-분 유지; 유량: 20mL/분; 칼럼 온도: 25℃. 분획 수집을 MS 신호에 의해 촉발시켰다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 원심 증발을 통해 건조시켰다.
III-02에 대한 분석 데이터.
LCMS ESI: C24H30N7O2 계산치 = 448.2 (M+H+), 실측치 448.2 (M+H+).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.06 - 7.97 (m, 2H), 7.87 (br dd, J=8.5, 2.4 Hz, 2H), 7.23 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.15 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.99 - 5.97 (m, 1H), 5.56 (s, 2H), 3.58 - 3.54 (m, 2H), 1.64 - 1.49 (m, 2H), 1.37 - 1.25 (m, 2H), 1.17 (s, 6H), 0.90 (t, J=7.4 Hz, 3H), 0.71 - 0.70 (m, 1H)
상기 본 발명의 상세한 설명은 본 발명의 특정한 부분 또는 측면과 주로 또는 독점적으로 관련된 구절을 포함한다. 이는 명확성 및 편의성을 위한 것이고, 특정한 특색은 그것이 개시된 구절을 넘어 관련될 수 있으며, 본원의 개시내용은 상이한 구절에서 발견된 정보의 모든 적절한 조합을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 유사하게, 본원의 다양한 도면 및 설명은 본 발명의 구체적 실시양태와 관련되어 있지만, 구체적 특색이 특정한 도면 또는 실시양태의 문맥에서 개시되는 경우에, 이러한 특색은 또한 적절한 정도로, 또 다른 도면 또는 실시양태의 문맥에서, 또 다른 특색과 조합되어, 또는 본 발명에서 일반적으로 사용될 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
추가로, 본 발명이 특정의 바람직한 실시양태의 면에서 구체적으로 기재되기는 하였지만, 본 발명이 이러한 바람직한 실시양태로 제한되는 것은 아니다. 오히려, 본 발명의 범주는 첨부된 청구범위에 의해 정의된다.
두문자어들 및 약어들
이는 본 명세서에 사용된 두문자어 및 약어의 목록을 그의 의미와 함께 제공한다.
Figure pct00058
참고문헌
본 명세서에 앞에서 제1 저자 (또는 발명자) 및 연도에 따른 약기 방식으로 인용된 하기 참고문헌에 대한 전체 인용이 하기에 제공된다. 각각의 이들 참고문헌은 모든 목적을 위해 본원에 참조로 포함된다.
Akinbobuyi et al., Tetrahedron Lett. 2015, 56, 458, "Facile syntheses of functionalized toll-like receptor 7 agonists"
Akinbobuyi et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2016, 26, 4246, "Synthesis and immunostimulatory activity of substituted TLR7 agonists."
Barberis et al., US 2012/0003298 A1 (2012).
Beesu et al., J. Med. Chem. 2017, 60, 2084, "Identification of High-Potency Human TLR8 and Dual TLR7/TLR8 Agonists in Pyrimidine-2,4-diamines."
Berghoefer et al., J. Immunol. 2007, 178, 4072, "Natural and Synthetic TLR7 Ligands Inhibit CpG-A- and CpG-C-Oligodeoxynucleotide-Induced IFN-α Production."
Bonfanti et al., US 2014/0323441 A1 (2015) [2015a].
Bonfanti et al., US 2015/0299221 A1 (2015) [2015b].
Bonfanti et al., US 2016/0304531 A1 (2016).
Carson et al., US 2013/0202629 A1 (2013).
Carson et al., US 8,729,088 B2 (2014).
Carson et al., US 9,050,376 B2 (2015).
Carson et al., US 2016/0199499 A1 (2016).
Chan et al., Bioconjugate Chem. 2009, 20, 1194, "Synthesis and Immunological Characterization of Toll-Like Receptor 7 Agonistic Conjugates."
Chan et al., Bioconjugate Chem. 2011, 22, 445, "Synthesis and Characterization of PEGylated Toll Like Receptor 7 Ligands."
Chen et al., US 7,919,498 B2 (2011).
Coe et al., US 9,662,336 B2 (2017).
Cortez and Va, Medicinal Chem. Rev. 2018, 53, 481, "Recent Advances in Small-Molecule TLR7 Agonists for Drug Discovery"
Cortez et al., US 2017/0121421 A1 (2017).
Cortez et al., US 9,944,649 B2 (2018).
Dellaria et al., WO 2007/028129 A1 (2007).
Desai et al., US 9,127,006 B2 (2015).
Ding et al., WO 2016/107536 A1 (2016).
Ding et al., US 2017/0273983 A1 (2017) [2017a].
Ding et al., WO 2017/076346 A1 (2017) [2017b].
Gadd et al., Bioconjugate Chem. 2015, 26, 1743, "Targeted Activation of Toll-Like Receptors: Conjugation of a Toll-Like Receptor 7 Agonist to a Monoclonal Antibody Maintains Antigen Binding and Specificity."
Graupe et al., US 8,993,755 B2 (2015).
Embrechts et al., J. Med. Chem. 2018, 61, 6236, "2,4-Diaminoquinazolines as Dual Toll Like Receptor (TLR) 7/8 Modulators for the Treatment of Hepatitis B Virus."
Halcomb et al., US 9,161,934 B2 (2015).
Hashimoto et al., US 2009/0118263 A1 (2009).
He et al., US 2019/0055246 A1 (2019) [2019a].
He et al., US 2019/0055247 A1 (2019) [2019b].
Hirota et al., US 6,028,076 (2000).
Holldack et al., US 2012/0083473 A1 (2012).
Isobe et al., US 6,376,501 B1 (2002).
Isobe et al., JP 2004137157 (2004).
Isobe et al., J. Med. Chem. 2006, 49 (6), 2088, "Synthesis and Biological Evaluation of Novel 9-Substituted-8-Hydroxyadenine Derivatives as Potent Interferon Inducers."
Isobe et al., US 7,521,454 B2 (2009) [2009a].
Isobe et al., US 2009/0105212 A1 (2009) [2009b].
Isobe et al., US 2011/0028715 A1 (2011).
Isobe et al., US 8,148,371 B2 (2012).
Jensen et al., WO 2015/036044 A1 (2015).
Jones et al., US 7,691,877 B2 (2010).
Jones et al., US 2012/0302598 A1 (2012).
Kasibhatla et al., US 7,241,890 B2 (2007).
Koga-Yamakawa et al., Int. J. Cancer 2013, 132 (3), 580, "Intratracheal and oral administration of SM-276001: A selective TLR7 agonist, leads to antitumor efficacy in primary and metastatic models of cancer."
Li et al., US 9,902,730 B2 (2018).
Lioux et al., US 9,295,732 B2 (2016).
Lund et al., Proc. Nat'l Acad. Sci (USA) 2004, 101 (15), 5598, "Recognition of single-stranded RNA viruses by Toll-like receptor 7."
Maj et al., US 9,173,935 B2 (2015).
McGowan et al., US 2016/0168150 A1 (2016) [2016a].
McGowan et al., US 9,499,549 B2 (2016) [2016b].
McGowan et al., J. Med. Chem. 2017, 60, 6137, "Identification and Optimization of Pyrrolo[3,2-d]pyrimidine Toll-like Receptor 7 (TLR7) Selective Agonists for the Treatment of Hepatitis B."
Musmuca et al., J. Chem. Information & Modeling 2009, 49 (7), 1777, "Small-Molecule Interferon Inducers. Toward the Comprehension of the Molecular Determinants through Ligand-Based Approaches."
Nakamura et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 13, 669, "Synthesis and evaluation of 8-oxoadenine derivatives as potent Toll-like receptor agonists with high water solubility."
Ogita et al., US 2007/0225303 A1 (2007).
Ota et al., WO 2019/124500 A1 (2019).
Pilatte et al., WO 2017/216293 A1 (2017).
Poudel et al., US 2019/0055243 A1 (2019) [2019a].
Poudel et al., US 2019/0055245 A1 (2019) [2019b].
Purandare et al., PCT Application Ser. No. PCT/US19/28697, filed April 23, 2019.
Pryde, US 7,642,350 B2 (2010).
Sato-Kaneko et al., JCI Insight 2017, 2, e93397, "Combination Immunotherapy with TLR Agonists and Checkpoint Inhibitors Suppresses Head and Neck Cancer"
Smits et al., The Oncologist 2008, 13, 859, "The Use of TLR7 and TLR8 Ligands for the Enhancement of Cancer Immunotherapy"
Vasilakos and Tomai, Expert Rev. Vaccines 2013, 12, 809, "The Use of Toll-like Receptor 7/8 Agonists as Vaccine Adjuvants"
Vernejoul et al., US 2014/0141033 A1 (2014).
Young et al., US 2019/0055244 A1 (2019).
Yu et al., PLoS One 2013, 8 (3), e56514, "Toll-Like Receptor 7 Agonists: Chemical Feature Based Pharmacophore Identification and Molecular Docking Studies."
Zhang et al., Immunity 2016, 45, 737, "Structural Analysis Reveals that Toll-like Receptor 7 Is a Dual Receptor for Guanosine and Single-Stranded RNA."
Zhang et al., WO 2018/095426 A1 (2018)>
Zurawski et al., US 2012/0231023 A1 (2012).

Claims (13)

  1. 화학식 II에 따른 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00059

    여기서
    각각의 X1은 독립적으로 N 또는 CR2이고;
    X2는 O, CH2, NH, S, 또는 N(C1-C3 알킬)이고;
    R1은 H, CH3(CH2)1-3, CH3(CH2)0-1O(CH2)2-3, CH3(CH2)0-3C(=O), CH3(CH2)0-1O(CH2)2-3C(=O),
    Figure pct00060

    이고;
    R2는 H, O(C1-C3 알킬), C1-C3 알킬, Cl, F, 또는 CN이고;
    R3은 H, 할로, OH, CN, NH2, NH(C1-C5 알킬), N(C1-C5 알킬)2, NH(CH2)0-1(C3-C6 시클로알킬), NH(C4-C8 비시클로알킬), NH(C6-C10 스피로시클로알킬), N(C3-C6 시클로알킬)2, NH(CH2)1-3(아릴), N((CH2)1-3(아릴))2, 구조
    Figure pct00061
    를 갖는 시클릭 아민 모이어티, 6-원 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티 또는 5-원 헤테로방향족 모이어티이고;
    여기서
    알킬, 시클로알킬, 비시클로알킬, 스피로시클로알킬, 시클릭 아민, 6-원 방향족 또는 헤테로방향족, 또는 5-원 헤테로방향족 모이어티는 OH, 할로, CN, (C1-C3 알킬), O(C1-C3 알킬), C(=O)(Me), SO2(C1-C3 알킬), C(=O)(Et), NH2, NH(Me), N(Me)2, NH(Et), N(Et)2, 및 N(C1-C3 알킬), (CH2)1-2OH, (CH2)1-2OMe로부터 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
    시클로알킬, 비시클로알킬, 스피로시클로알킬, 또는 시클릭 아민 모이어티는 O, S, SO2, NH, C(=O), N(C1-C3 알킬), NC(=O)(C1-C3 알킬), 또는 N(Boc)로 대체된 CH2 기를 가질 수 있고;
    m은 0 또는 1이고;
    n은 1, 2, 또는 3이다.
  2. 제1항에 있어서, 기 R1이
    Figure pct00062

    인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, 모이어티
    Figure pct00063
    에서 각각의 X1이 CR2이거나 또는 2개 이하의 X1이 N인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, 모이어티
    Figure pct00064
    가
    Figure pct00065
    인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, 기 R3이 Cl, H,
    Figure pct00066

    로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 화합물.
  6. 제1항에 있어서, 화학식 II'에 따른 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00067
  7. 제1항에 있어서, 화학식 IIa에 따른 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00068
  8. 제1항에 있어서, 화학식 IIb에 따른 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00069
  9. 제1항에 있어서, 2 kDa 내지 40 kDa 크기의 폴리(에틸렌 글리콜) 모이어티에 공유 결합된 화합물.
  10. 암을 앓는 환자에게 항암 면역요법제 및 제1항에 따른 화합물의 치료상 유효한 조합을 투여하는 것을 포함하는, 이러한 암을 치료하는 방법.
  11. 제10항에 있어서, 항암 면역요법제가 길항작용 항-CTLA-4, 항-PD-1 또는 항-PD-L1 항체인 방법.
  12. 제11항에 있어서, 암이 폐암 (비소세포 폐암 포함), 췌장암, 신장암, 두경부암, 림프종 (호지킨 림프종 포함), 피부암 (흑색종 및 메르켈 피부암 포함), 요로상피암 (방광암 포함), 위암, 간세포성암 또는 결장직장암인 방법.
  13. 제12항에 있어서, 암이 이필리무맙, 니볼루맙 또는 펨브롤리주맙인 방법.
KR1020217005766A 2018-08-03 2019-08-01 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 2H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도 KR20210039411A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862714238P 2018-08-03 2018-08-03
US62/714,238 2018-08-03
PCT/US2019/044578 WO2020028610A1 (en) 2018-08-03 2019-08-01 2H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS AND METHODS AND USES THEREFOR

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210039411A true KR20210039411A (ko) 2021-04-09

Family

ID=67742964

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217005765A KR20210039410A (ko) 2018-08-03 2019-08-01 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도
KR1020217005766A KR20210039411A (ko) 2018-08-03 2019-08-01 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 2H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217005765A KR20210039410A (ko) 2018-08-03 2019-08-01 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물 및 그의 방법 및 용도

Country Status (19)

Country Link
US (3) US11554120B2 (ko)
EP (2) EP3830089B1 (ko)
JP (4) JP7337909B2 (ko)
KR (2) KR20210039410A (ko)
CN (2) CN112752759A (ko)
AR (1) AR115885A1 (ko)
AU (1) AU2019314444A1 (ko)
BR (1) BR112021001503A2 (ko)
CA (1) CA3108512A1 (ko)
CL (1) CL2021000216A1 (ko)
CO (1) CO2021000942A2 (ko)
EA (1) EA202190442A1 (ko)
ES (2) ES2941768T3 (ko)
IL (1) IL280473A (ko)
MX (1) MX2021001311A (ko)
PE (1) PE20211812A1 (ko)
SG (1) SG11202101031XA (ko)
TW (1) TW202019933A (ko)
WO (2) WO2020028608A1 (ko)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL263616B1 (en) 2016-07-07 2024-09-01 Univ Leland Stanford Junior Antibody-adjuvant conjugates
ES2975336T3 (es) 2016-12-22 2024-07-04 Novartis Ag Moduladores del receptor NMDA y usos de los mismos
US11554120B2 (en) * 2018-08-03 2023-01-17 Bristol-Myers Squibb Company 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (TLR7) agonists and methods and uses therefor
PE20210948A1 (es) 2018-08-03 2021-05-24 Cadent Therapeutics Inc Moduladores del receptor nmda heteroaromatico y usos de los mismos
AU2020241686A1 (en) 2019-03-15 2021-11-04 Bolt Biotherapeutics, Inc. Immunoconjugates targeting HER2
WO2021154667A1 (en) 2020-01-27 2021-08-05 Bristol-Myers Squibb Company C3-SUBSTITUTED 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
EP4097101A1 (en) 2020-01-27 2022-12-07 Bristol-Myers Squibb Company 1h-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (tlr7) agonists
EP4097106A1 (en) 2020-01-27 2022-12-07 Bristol-Myers Squibb Company 1h-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (tlr7) agonists
US20230122249A1 (en) * 2020-01-27 2023-04-20 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
EP4097100A1 (en) * 2020-01-27 2022-12-07 Bristol-Myers Squibb Company 1h-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (tlr7) agonists
CN115210236A (zh) * 2020-01-27 2022-10-18 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
US20230140430A1 (en) 2020-01-27 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
CN115135654A (zh) 2020-01-27 2022-09-30 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
CN115279765A (zh) * 2020-01-27 2022-11-01 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
US20230219962A1 (en) * 2020-06-04 2023-07-13 Merck Sharp & Dohme Llc PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE DERIVATIVES AND METHODS OF USE THEREOF FOR THE TREATMENT OF CELLULAR PROLIFERATIVE DISORDERS
CN114805392A (zh) * 2021-01-20 2022-07-29 上海维申医药有限公司 大环tlr7激动剂、其制备方法、药物组合物及其用途
JP2024517341A (ja) * 2021-05-13 2024-04-19 清華大学 抗体薬物コンジュゲート、その製造方法及び使用

Family Cites Families (106)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1981001145A1 (en) 1979-10-18 1981-04-30 Univ Illinois Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs
US4698420A (en) 1985-02-25 1987-10-06 Xoma Corporation Antibody hybrid molecules and process for their preparation
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
AU698419B2 (en) 1996-07-03 1998-10-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. A novel purine derivative
TW572758B (en) 1997-12-22 2004-01-21 Sumitomo Pharma Type 2 helper T cell-selective immune response inhibitors comprising purine derivatives
US7425541B2 (en) 1998-12-11 2008-09-16 Medarex, Inc. Enzyme-cleavable prodrug compounds
US6984720B1 (en) 1999-08-24 2006-01-10 Medarex, Inc. Human CTLA-4 antibodies
AU2001286727A1 (en) 2000-08-24 2002-03-04 Coulter Pharmaceutical, Inc. Prodrugs activated by plasmin and their use in cancer chemotherapy
US7571211B1 (en) 2002-04-15 2009-08-04 Lightwaves Systems, Inc. Method for routing messages over a network based on location
JP4331944B2 (ja) 2001-04-17 2009-09-16 大日本住友製薬株式会社 新規アデニン誘導体
MXPA03011094A (es) 2001-05-31 2004-12-06 Medarex Inc Citotoxinas, profarmacos, ligadores, y estabilizadores utiles para ello.
CA2450316A1 (en) 2001-06-11 2002-12-19 Medarex, Inc. Cd10-activated prodrug compounds
US7091186B2 (en) 2001-09-24 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. p-Amidobenzylethers in drug delivery agents
EP2336133A1 (en) 2001-10-30 2011-06-22 Conforma Therapeutics Corporation Purine analogs having HSP90-inhibiting activity
JP4562395B2 (ja) 2002-01-09 2010-10-13 メダレックス， インク． Ｃｄ３０に対するヒトモノクローナル抗体
US7754728B2 (en) 2002-09-27 2010-07-13 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Adenine compound and use thereof
JP2004137157A (ja) 2002-10-16 2004-05-13 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd 新規アデニン誘導体を有効成分として含有する医薬
JP4753867B2 (ja) 2003-04-15 2011-08-24 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー ヒトｉｌ−１８を含むコンジュゲートおよびその置換変異体
TWI353992B (en) 2003-07-22 2011-12-11 Schering Ag Rg1 antibodies and uses thereof
WO2005051976A2 (en) 2003-11-20 2005-06-09 Ansata Therapeutics, Inc. Protein and peptide ligation processes and one-step purification processes
EP2865687A1 (en) 2003-12-10 2015-04-29 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. IP-10 antibodies and their uses
JP5064037B2 (ja) 2004-02-23 2012-10-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 複素環式自壊的リンカーおよび結合体
US7276585B2 (en) 2004-03-24 2007-10-02 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the Fc region
US20070225303A1 (en) 2004-03-26 2007-09-27 Haruhisa Ogita 8-Oxoadenine Compound
EP1747021B1 (en) 2004-05-19 2015-09-09 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Self-immolative linkers and drug conjugates
RU2402548C2 (ru) 2004-05-19 2010-10-27 Медарекс, Инк. Химические линкеры и их конъюгаты
NZ553500A (en) 2004-09-23 2009-11-27 Genentech Inc Genentech Inc Cysteine engineered antibodies and conjugates withCysteine engineered antibodies and conjugates with a free cysteine amino acid in the heavy chain a free cysteine amino acid in the heavy chain
WO2006046135A2 (en) 2004-10-28 2006-05-04 Pharmacia & Upjohn Company Llc Pyrazolo[4,3-d] pyrimidine derivatives useful as pde-5 inhibitors
US7875278B2 (en) 2005-02-18 2011-01-25 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (PSMA) lacking in fucosyl residues
MX2007009878A (es) 2005-02-18 2007-10-03 Medarex Inc Anticuerpos monoclonales para antigeno de membrana especifica para prostata (amep).
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
EA200702235A1 (ru) 2005-05-04 2008-04-28 Пфайзер Лимитед Производные 2-амидо-6-амино-8-оксопурина в качестве модуляторов toll-подобных рецепторов для лечения рака и вирусных инфекций, таких как гепатит с
CN117534755A (zh) 2005-05-09 2024-02-09 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
US8097703B2 (en) 2005-06-20 2012-01-17 Medarex, Inc. CD19 antibodies and their uses
KR101888321B1 (ko) 2005-07-01 2018-08-13 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
US8039273B2 (en) 2005-07-18 2011-10-18 Seattle Genetics, Inc. β-glucuronide-linker drug conjugates
EA200800396A1 (ru) 2005-09-02 2008-08-29 Пфайзер Инк. Гидроксизамещенные 1н-имидазопиридины и способы
WO2007034817A1 (ja) 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規アデニン化合物
US20090105212A1 (en) 2005-09-22 2009-04-23 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. a corporation of Japan Novel adenine compound
NZ566395A (en) 2005-09-26 2012-03-30 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to CD70
BRPI0617546A2 (pt) 2005-09-26 2011-07-26 Medarex Inc conjugado de fÁrmaco-anticorpo, formulaÇço farmacÊutica, mÉtodo para matar uma cÉlula de tumor, mÉtodo para retardar ou interromper o crescimento de um tumor em um sujeito mamÍfero e composto
BRPI0619331A2 (pt) 2005-10-26 2011-09-27 Medarex Inc método para fazer um composto para preparar um análogo de cbi cc-1065, método para preparar um análogo de cbi cc-1065 e composto
WO2007059404A2 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
EP1963371A2 (en) 2005-12-08 2008-09-03 Medarex Inc. Human monoclonal antibodies to o8e
CN101360761B (zh) 2005-12-08 2012-09-12 米德列斯公司 抗蛋白质酪氨酸激酶7（ptk7）的人单克隆抗体及其用途
ATE532784T1 (de) 2006-02-17 2011-11-15 Pfizer Ltd 3-deazapurinderivate als tlr7-modulatoren
US8715958B2 (en) 2006-06-29 2014-05-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Cell-free synthesis of proteins containing unnatural amino acids
WO2008020075A1 (en) 2006-08-18 2008-02-21 Novo Nordisk Health Care Ag Transglutaminase variants with improved specificity
CA2662752C (en) 2006-09-08 2016-04-12 Ambrx, Inc. Site specific incorporation of non-natural amino acids by vertebrate cells
US8450464B2 (en) 2006-10-02 2013-05-28 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies that bind CXCR4
MX2009005776A (es) 2006-12-01 2009-06-10 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se enlazan al cd 22 y sus usos.
UY30776A1 (es) 2006-12-21 2008-07-03 Medarex Inc Anticuerpos cd44
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 Medarex Llc 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
SI2510946T1 (sl) 2007-02-07 2015-12-31 The Regents Of The University Of California Konjugati sintetičnih agonistov TLR in njihove uporabe
JP2010519310A (ja) 2007-02-21 2010-06-03 メダレックス インコーポレイテッド 単一のアミノ酸を有する化学リンカーおよびその複合体
BRPI0808014A2 (pt) 2007-02-22 2014-06-17 Novo Nordisk Healthcare Ag Variantes de transglutaminase com especificidade melhorada
PE20081887A1 (es) 2007-03-20 2009-01-16 Dainippon Sumitomo Pharma Co Nuevo compuesto de adenina
WO2008118454A2 (en) 2007-03-23 2008-10-02 Amgen Inc. Derivatives of quinoline or benzopyrazine and their uses for the treatment of (inter alia) inflammatory diseases, autoimmune diseases or various kinds of cancer
MX2009013832A (es) 2007-06-29 2010-03-10 Gilead Sciences Inc Derivados de purina y su uso como moduladores del receptor 7 similar a un puente.
ATE501136T1 (de) 2007-08-03 2011-03-15 Pfizer Ltd Imidazopyridinone
WO2009026274A1 (en) 2007-08-22 2009-02-26 Medarex, Inc. Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions
AU2008308956B2 (en) 2007-10-01 2013-03-14 Bristol-Myers Squibb Company Human antibodies that bind mesothelin, and uses thereof
ES2623794T3 (es) 2008-12-09 2017-07-12 Gilead Sciences, Inc. Intermedios para la preparación de moduladores de receptores tipo toll
EP2391714B2 (en) 2009-01-30 2019-07-24 Whitehead Institute for Biomedical Research Methods for ligation and uses thereof
MX2011008500A (es) 2009-02-11 2011-09-26 Univ California Moduladores del receptor tipo toll y tratamiento de enfermedades.
CN102666541B (zh) 2009-10-22 2015-11-25 吉里德科学公司 用于治疗特别是病毒感染的嘌呤或脱氮嘌呤的衍生物
KR20130056249A (ko) 2010-04-30 2013-05-29 텔로메딕스 에스에이 인지질 약물 유사체
US20130202629A1 (en) 2010-04-30 2013-08-08 The Regents Of The University Of California Uses of phospholipid conjugates of synthetic tlr7 agonists
AU2011247359A1 (en) 2010-04-30 2012-11-15 Telormedix Sa Methods for inducing an immune response
US20120083473A1 (en) 2010-09-21 2012-04-05 Johanna Holldack Treatment of conditions by toll-like receptor modulators
JP6105477B2 (ja) 2010-11-05 2017-03-29 ライナット ニューロサイエンス コーポレイション 操作されたポリペプチドコンジュゲートおよびトランスグルタミナーゼを用いてそれを作製する方法
US20120231023A1 (en) 2011-03-08 2012-09-13 Baylor Research Institute Novel Vaccine Adjuvants Based on Targeting Adjuvants to Antibodies Directly to Antigen-Presenting Cells
CN103702687A (zh) 2011-07-29 2014-04-02 西莱克塔生物科技公司 产生体液和细胞毒性t淋巴细胞（ctl）免疫应答的合成纳米载体
PT2776439T (pt) 2011-11-09 2018-11-02 Janssen Sciences Ireland Uc Derivados de purina para o tratamento de infeções virais
AU2013288600B2 (en) 2012-07-13 2017-06-29 Janssen Sciences Ireland Uc Macrocyclic purines for the treatment of viral infections
UA114109C2 (xx) 2012-08-24 2017-04-25 Піразолопіримідинові сполуки
KR102217111B1 (ko) 2012-10-10 2021-02-18 얀센 사이언시즈 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 바이러스 감염 및 다른 질환 치료를 위한 피롤로[3,2-d]피리미딘 유도체
EP2732825B1 (en) 2012-11-19 2015-07-01 Invivogen Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist
DK2956173T3 (en) 2013-02-14 2017-07-17 Bristol Myers Squibb Co TUBULYSIS RELATIONSHIPS, METHODS OF PRODUCING AND USING THEREOF
US9295732B2 (en) 2013-02-22 2016-03-29 Invivogen Conjugated TLR7 and/or TLR8 and TLR2 polycationic agonists
EA202090547A3 (ru) 2013-03-29 2020-12-30 Янссен Сайенсиз Айрлэнд Юси Макроциклические деаза-оксипурины для лечения вирусных инфекций
SG10201803331PA (en) 2013-06-27 2018-06-28 Janssen Sciences Ireland Uc Pyrrolo[3,2-d]pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections and other diseases
EP3033089A2 (en) 2013-08-16 2016-06-22 The Regents of The University of California Uses of phospholipid conjugates of synthetic tlr7 agonists
WO2015036044A1 (en) 2013-09-13 2015-03-19 Telormedix Sa Cationic lipid vehicles for delivery of tlr7 agonists for specific targeting of human cd14+ monocytes in whole blood
MX362341B (es) 2014-05-01 2019-01-11 Novartis Ag Compuestos y composiciones como agonistas del receptor tipo toll 7.
KR20160144399A (ko) 2014-05-01 2016-12-16 노파르티스 아게 톨-유사 수용체 7 효능제로서의 화합물 및 조성물
WO2015171527A1 (en) * 2014-05-05 2015-11-12 Global Blood Therapeutics, Inc. Pyrazolopyridine pyrazolopyrimidine and related compounds
CN110759916B (zh) 2014-08-15 2021-02-19 正大天晴药业集团股份有限公司 作为tlr7激动剂的吡咯并嘧啶化合物
CN105732635A (zh) 2014-12-29 2016-07-06 南京明德新药研发股份有限公司 一类Toll样受体7激动剂
JP2018510864A (ja) 2015-03-10 2018-04-19 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ トランスグルタミナーゼによって結合可能な抗体およびそれによって製造される結合体
WO2017059158A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Bristol-Myers Squibb Company Transglutaminase variants for conjugating antibodies
MA44334A (fr) * 2015-10-29 2018-09-05 Novartis Ag Conjugués d'anticorps comprenant un agoniste du récepteur de type toll
CN108349982B (zh) 2015-11-05 2020-05-05 正大天晴药业集团股份有限公司 作为tlr7激动剂的7-(噻唑-5-基)吡咯并嘧啶化合物
WO2017100557A1 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Graphic Packaging International, Inc. Container with absorption features
KR102472198B1 (ko) 2016-06-16 2022-11-28 얀센 파마슈티카 엔.브이. Pi3k 베타 저해제로서의 아자벤즈이미다졸 유도체
ES2894605T3 (es) 2016-09-13 2022-02-15 Hoffmann La Roche Tratamiento combinado con un agonista de TLR7 y un inhibidor del ensamblaje de la cápside del VHB
MY192084A (en) 2016-11-28 2022-07-26 Jiangsu Hengrui Medicine Co Pyrazolo-heteroaryl derivative, preparation method and medical use thereof
US10472361B2 (en) 2017-08-16 2019-11-12 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a benzotriazole moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
US10487084B2 (en) 2017-08-16 2019-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a heterobiaryl moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
US10508115B2 (en) 2017-08-16 2019-12-17 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having heteroatom-linked aromatic moieties, conjugates thereof, and methods and uses therefor
US10457681B2 (en) 2017-08-16 2019-10-29 Bristol_Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a tricyclic moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
US10494370B2 (en) 2017-08-16 2019-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a pyridine or pyrazine moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
JP7506981B2 (ja) 2017-12-21 2024-06-27 住友ファーマ株式会社 Ｔｌｒ７アゴニストを含む併用薬
US11485741B2 (en) 2018-04-24 2022-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic toll-like receptor 7 (TLR7) agonists
US11554120B2 (en) * 2018-08-03 2023-01-17 Bristol-Myers Squibb Company 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (TLR7) agonists and methods and uses therefor
US11664120B1 (en) * 2020-05-11 2023-05-30 Walgreen Co. Apparatuses, systems, and methods for reducing return of prescriptions to stock

Also Published As

Publication number Publication date
JP2023179420A (ja) 2023-12-19
CA3108512A1 (en) 2020-02-06
CO2021000942A2 (es) 2021-02-17
AR115885A1 (es) 2021-03-10
US20200038403A1 (en) 2020-02-06
US11554120B2 (en) 2023-01-17
EP3830090A1 (en) 2021-06-09
CL2021000216A1 (es) 2021-06-04
WO2020028608A1 (en) 2020-02-06
ES2941768T3 (es) 2023-05-25
AU2019314444A1 (en) 2021-03-18
JP2021533135A (ja) 2021-12-02
BR112021001503A2 (pt) 2021-04-27
WO2020028610A1 (en) 2020-02-06
PE20211812A1 (es) 2021-09-14
EP3830089A1 (en) 2021-06-09
EP3830089B1 (en) 2023-03-08
US11400094B2 (en) 2022-08-02
JP7337907B2 (ja) 2023-09-04
ES2941520T3 (es) 2023-05-23
CN112513046A (zh) 2021-03-16
EP3830090B1 (en) 2023-03-01
US20200039986A1 (en) 2020-02-06
JP7337909B2 (ja) 2023-09-04
IL280473A (en) 2021-03-01
KR20210039410A (ko) 2021-04-09
TW202019933A (zh) 2020-06-01
JP2023182569A (ja) 2023-12-26
CN112752759A (zh) 2021-05-04
MX2021001311A (es) 2021-04-13
JP2021532162A (ja) 2021-11-25
US20230140047A1 (en) 2023-05-04
SG11202101031XA (en) 2021-02-25
EA202190442A1 (ru) 2021-05-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3830089B1 (en) 2h-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (tlr7) agonists and methods and uses therefor
JP7474820B2 (ja) 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体
ES2887253T3 (es) Derivados de 6-amino-7,9-dihidro-8h-purin-8-ona como agonistas inmunoestimulantes del receptor 7 tipo toll (tlr7)
KR102628855B1 (ko) 면역자극제 톨-유사 수용체 7 (tlr7) 효능제로서의 6-아미노-7,9-디히드로-8h-퓨린-8-온 유도체
CN111225918B (zh) 具有三环部分的Toll样受体7(TLR7)激动剂、其缀合物及其方法和用途