KR20140041598A - 인간화된 면역조절 모노클로날 항체의 변이체 - Google Patents

인간화된 면역조절 모노클로날 항체의 변이체 Download PDF

Info

Publication number
KR20140041598A
KR20140041598A KR1020137034590A KR20137034590A KR20140041598A KR 20140041598 A KR20140041598 A KR 20140041598A KR 1020137034590 A KR1020137034590 A KR 1020137034590A KR 20137034590 A KR20137034590 A KR 20137034590A KR 20140041598 A KR20140041598 A KR 20140041598A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
thr
gly
seq
val
Prior art date
Application number
KR1020137034590A
Other languages
English (en)
Inventor
리나트 로템-예후다르
마이클 쉬클러
Original Assignee
큐어 테크 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 큐어 테크 리미티드 filed Critical 큐어 테크 리미티드
Publication of KR20140041598A publication Critical patent/KR20140041598A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Abstract

본 발명은 인간화된 모노클로날 항체, 이를 포함하는 약제학적 조성물, 및 다양한 징후, 특히 암 및 면역결핍 질환의 치료를 위한 이의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 hBAT-1으로 명명된 인간화된 모노클로날 면역조절 항체와 비교하여 특이적 아미노산 변이를 갖는 변이된 항체 또는 이의 단편을 제공한다.

Description

인간화된 면역조절 모노클로날 항체의 변이체{VARIANTS OF HUMANIZED IMMUNOMODULATORY MONOCLONAL ANTIBODIES}
본 발명은 면역치료 분야에 관한 것이고, 보다 구체적으로는 다양한 징후의 치료, 특히 암 및 면역결핍 질환의 치료에 유용한 인간화된 모노클로날 항체에 관한 것이다.
특히, T 세포 반응의 수준에서 면역 조절의 분자 및 세포 기초에 대한 최근의 급속한 지식 증가는 항-종양 백신의 개발을 포함하는 면역치료 접근법의 새로운 무기를 제공한다. 특정한 모노클로날 항체는 T 세포의 표면 상에서 결정소를 결합하고 이들 세포의 증식, 활성화, 성숙 또는 분화를 유도하는 능력을 포함하는 면역조절 활성을 갖는 것으로 밝혀졌다.
BAT(mBAT-1 또는 BAT-1로도 지칭됨)은, 다양한 유형의 종양에 대해 항종양 및 면역자극 효과를 나타내는 것으로 밝혀진 버킷(Burkitt) 림프종 세포주(Daudi)의 막 제제에 대해 생성된 쥐 모노클로날 항체이다[참조: Hardy et al., 2001, Int. J. Oncol. 19:897]. 이러한 모노클로날 항체는 미국 특허 제5,897,862호(Hardy et al.)에 최초로 개시되었다. BAT-1은 CNCM 수탁번호 I-1397을 갖는 하이브리도마 세포주에 의해 분비된다. 쥐 BAT의 면역조절 효과는 시험관내에서 또한 연구되었다. 쥐 BAT는 CD4+ T 세포를 활성화시키고, 이들 세포로부터 IFN-γ의 분비를 유도한다[참조: Hardy et al., 2000, Int. Immunol. 12:1623 and Quaglino E. et al., 2005, Vaccine 9:23(25):3280-7]. 또한, BAT는 T 세포의 증식을 유발하고 이들의 세포용해 활성을 증가시키는 것으로 밝혀졌다[참조: Hardy, B. et al., 1997, Hum. Antibodies, 8:95].
쥐 BAT의 폴리뉴클레오티드 및 아미노산 서열은 국제공개공보 제WO 00/58363호(Hardy et al.) 및 미국 특허 제7,695,715호에 기재되어 있다.
쥐 BAT를 기반으로 하는 다수의 인간화된 모노클로날 항체(mAb)는 미국 특허 제7,332,582호에 기재되어 있고, 이의 내용은 본원에서 참조로서 도입된다. 미국 특허 제7,332,582호의 특정한 양태에서, 인간화된 모노클로날 항체는 서열번호 1 내지 4로부터 선택된 경쇄 가변 영역(각각 BATRKD, BATRKA, BATRKB 및 BATRKC로서 표시됨) 및 서열번호 5 내지 9로부터 선택된 중쇄 가변 영역(각각 BATRHC, BATRHA, BATRHB, BATRHD 및 BATRHE로 표시됨)을 포함한다. 경쇄 및 중쇄 항체 변이체의 아미노산 서열은 하기 본원의 표 1에 제시되어 있다. 상기 가변 영역이 상이한 잔기는 회색 배경으로 제시되어 있다(경쇄 영역의 위치 2, 30, 69, 77, 97 및 98 및 중쇄의 위치 35, 69, 70 및 71).
미국 특허 제7,332,582호에 따라, 인간화된 모노클로날 BAT 항체는 모 쥐 BAT 항체에 의해 유도된 것들보다 큰 항종양 효과를 유도하는 것처럼 보인다. 시험된 다양한 모델 시스템 중에서, BAT 항종양 활성은 SCID(중증 복합 면역결핍 질환) 마우스, NK 세포가 결핍된 베이지 마우스 및 T 세포가 결핍된 누드 마우스에서 연구되었다[참조: Hardy, B., 1997, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:5756]. 모든 마우스는, 폐에서 종양을 후속적으로 발달시킨 쥐 B16 흑색종 세포가 정맥내 주입되었다. BAT 항체는 쥐 또는 인간 림프구로 이식된 SCID 마우스에서만 항종양 효과를 나타냈다. 무흉선 누드 마우스 및 베이지 마우스에서 BAT 항체는 항종양 활성을 나타냈으나, 이러한 활성은 야생형 마우스에서 BAT 항체의 항종양 활성과 비교하여 덜 효과적이었다.
BAT 항체는, 유리한 방식으로 면역 반응을 조절하기 위해, 종양 세포 자체가 아니라 대상체 또는 환자의 면역-작용 세포를 표적화할 것으로 예상되지 않음을 염두에 두어야 한다.
문헌[참조: Berger et al., 2008]은 진행된 혈액암 및 관련 약력학을 갖는 환자에게 mBAT-1에 기반하는 인간화된 모노클로날 항체 CT-011의 투여를 개시한다[참조: Berger et al. Clin. Cancer Res. 2008;14(10) May 15, 2008].
국제공개공보 제WO 09/101611호는, mBAT-1으로 지정된 쥐 모노클로날 항체로부터 유도된 CDR 영역을 포함하는 인간화된 모노클로날 항체를 적어도 하나의 화학치료제와 배합하여 투여함을 포함하는, 포유동물에서 종양 성장을 억제하고 종양을 갖는 대상체의 생존을 증가시키고 종양 재발로부터의 보호를 유도하는 방법에 관한 것이다.
배경 기술하의 어디에도, 적어도 하나의 부위 특이적 아미노산 변이를 포함하는 인간화된 mBAT-1 모노클로날 항체의 사용이 다양한 증상의 치료, 특히 암 및 면역-결핍 관련 질환 및 질병의 치료에 유익할 수 있음을 교시하거나 시사하고 있지 않다.
본 발명은, 공지된 인간화된 모노클로날 항체 hBAT-1과 비교하여, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 아미노산 치환 및 결실을 포함하는 부위 특이적 아미노산 변이를 갖는 돌연변이된 인간화 모노클로날 항체 또는 이의 단편을 제공한다. 또한, 본 발명은 변이된 항체 또는 이의 단편을 포함하는 약제학적 조성물, 및 암 및 면역결핍 질환을 치료하기 위한 이의 용도를 제공한다. 일부 양태에서, 본 발명의 변이된 항체는 hBAT-1의 면역조절 활성을 보유하고, B 림프아구성 세포에 결합하고, 말초 혈액 림프구의 증식 및 활성화를 유도한다.
본 발명의 항체는 우수한 특징, 예를 들면, 본원에서 하기에 상세된 바와 같이 hBAT-1 항체 변이체의 적어도 하나의 아미노산의 특이적 변이에 기인하여 향상된 생물활성 및 안정성 및/또는 감소된 면역원성을 입증한다.
[표 1]
공지된 hBAT -1 경쇄 및 중쇄의 가변 및 불변 영역
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
표 1은 hBAT-1 항체 변이체의 경쇄 및 중쇄의 가변 및 불변 영역의 아미노산 서열을 열거한다. 일부 양태에서, 본 발명의 항체를 생산하기 위해 치환되는 적어도 하나의 아미노산은 볼드체로 제시되어 있다. 특정 양태에서, 적어도 하나의 아미노산은 서열번호 1의 위치 5, 20, 71, 75, 76, 93 및 97의 아미노산; 서열번호 5의 위치 54, 55 및 107의 아미노산, 서열번호 11의 위치 157, 158, 169 및 170의 아미노산; 및 서열번호 13의 위치 120, 124, 159, 160, 203, 204, 221, 222, 225, 252, 270, 271, 280, 281, 297, 298, 315, 316, 384, 385, 399, 400, 401, 402, 434, 435, 447 및 428의 아미노산으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
한 가지 측면에 따라, 본 발명은, 서열번호 1, 2, 3 및 4로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5, 6, 7, 8 및 9로 이루어진 그룹으로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 경쇄 가변 영역의 Phe 97 및 Phe 93으로부터 선택된 위치에서 Ala, Leu 또는 Val로의 적어도 하나의 아미노산 치환, 또는 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 Ala, Leu, Val 또는 Tyr로의 치환을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명의 일부 양태에서, 항체 및 이의 항원 결합 단편은 경쇄 가변 영역의 Phe 97의 치환 및 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 아미노산 치환을 포함한다. 또 다른 양태에서, 항체 또는 이의 항원 단편은 경쇄 가변 영역의 Phe 93의 아미노산 치환 및 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 아미노산 치환을 포함한다.
또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 및 21로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 한 가지 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 14에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 15에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 특정한 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 29에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 특정 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 30에 기재된 아미노산 서열을 포함한다.
또 다른 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열번호 24, 25, 26, 27 및 28로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 특정한 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열번호 24에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 특정 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열번호 31에 기재된 아미노산 서열을 포함한다.
또 다른 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75 및 Ser 76 및 중쇄 가변 영역의 Asp 54 및 Ser 55로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 추가로 포함한다.
또 다른 측면에 따라, 본 발명은 서열번호 1, 2, 3 및 4로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5, 6, 7, 8 및 9로 이루어진 그룹으로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97 및 중쇄 가변 영역의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변영을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명의 일부 양태에 따라서, 아미노산 변이는 아미노산 치환이다. 한 가지 양태에 따라, 아미노산 치환은 보존적 치환이다. 또 다른 양태에 따라, 아미노산 치환은 비-보존적 치환이다. 또 다른 양태에 따라, 아미노산 변이는 아미노산 결실이다. 일부 양태에 따라, 본 발명의 변이된 항체는 아미노산 변이의 조합, 예를 들면, 1개 잔기의 아미노산 치환 및 또 다른 잔기의 아미노산 결실의 조합을 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 변이된 항체는 적어도 하나의 아미노산 치환 및 적어도 하나의 아미노산 결실을 포함한다.
본 발명의 다양한 양태에 따라, 변이된 항체 또는 이의 단편은 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역의 조합을 포함하고, 상기 조합이 서열번호 5/서열번호 1, 서열번호 6/서열번호 2, 서열번호 7/서열번호 2, 서열번호 7/서열번호 3, 서열번호 8/서열번호 3 및 서열번호 7/서열번호 1로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 본 발명의 특정 양태에 따라, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 5/서열번호 1에 상응하는 가변 영역의 조합을 포함한다. 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 조합은, 한 가지 양태에서, 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97 및 중쇄 가변 영역의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함한다. 또 다른 양태에서, 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 조합은 경쇄 가변 영역의 Phe 93 및 Phe 97 및 중쇄 가변 영역의 Trp 107로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 10에 기재된 경쇄 불변 영역을 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 10의 Asn 51, Ser 52, Asp 63 및 Ser 64로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 변이된 경쇄 불변 영역을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 11에 기재된 경쇄를 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 11의 Asn 157, Ser 158, Asp 169 및 Ser 170으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 아미노산 변이를 포함하는 서열번호 11에 기재된 변이된 경쇄를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 12에 기재된 중쇄 불변 영역을 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 12의 Thr 3, Ser 7, Asn 42, Ser 43, Asn 86, His 87, Asp 104, Lys 105, Thr 108, Met 135, Asp 153, Pro 154, Asp 163, Gly 164, Asn 180, Ser 181, Asn 198, Gly 199, Asn 267, Gly 268, Asp 282, Ser 283, Asp 284, Ser 285, Asn 317, His 318, Lys 330 및 Met 311로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 변이된 중쇄 불변 영역을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 13에 기재된 중쇄를 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 항체는 서열번호 13의 Thr 120, Ser 124, Asn 159, Ser 160, Asn 203, His 204, Asp 221, Lys 222, Thr 225, Met 252, Asp 270, Pro 271, Asp 280, Gly 281, Asn 297, Ser 298, Asn 315, Gly 316, Asn 384, Gly 385, Asp 399, Ser 400, Asp 401, Ser 402, Asn 434, His 435, Lys 447 및 Met 428로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 서열번호 13에 기재된 중쇄를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명은, 서열번호 1, 2, 3 및 4로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경쇄 가변 영역 또는 서열번호 5, 6, 7, 8 및 9로 이루어진 그룹으로부터 선택된 중쇄 가변 영역, 또는 이와 적어도 85% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편로서,
(i) 서열번호 1 내지 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97;
(ii) 서열번호 5 내지 9의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107;
(iii) 서열번호 10의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 불변 영역의 Asn 51, Ser 52, Asp 63 및 Ser 64; 및
(iv) 서열번호 12의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 불변 영역의 Thr 3, Ser 7, Asn 42, Ser 43, Asn 86, His 87, Asp 104, Lys 105, Thr 108, Met 135, Asp 153, Pro 154, Asp 163, Gly 164, Asn 180, Ser 181, Asn 198, Gly 199, Asn 267, Gly 268, Asp 282, Ser 283, Asp 284, Ser 285, Asn 317, His 318, Lys 330 및 Met 311로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에서, 항체는 서열번호 1, 2, 3 및 4로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경쇄 가변 영역 또는 서열번호 5, 6, 7, 8 및 9로 이루어진 그룹으로부터 선택된 중쇄 가변 영역, 또는 이와 적어도 88%, 적어도 90%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
본 발명의 다양한 양태에 따라, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 적어도 2개의 아미노산 변이, 적어도 3개의 아미노산 변이, 적어도 4개의 아미노산 변이 또는 적어도 5개의 아미노산 변이를 포함하는 변이된 아미노산의 조합을 포함하고, 여기서 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에 따라, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 서열번호 1 내지 4의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이; 및 서열번호 5 내지 9의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 1, 2, 3, 4 또는 11 중의 어느 하나의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나의 아미노산 변이를 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 중쇄 가변 영역은 서열번호 5, 6, 7, 8, 9 또는 13 중의 어느 하나의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나의 변이된 아미노산을 갖는다.
특정한 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 1, 4 또는 11 중의 어느 하나의 위치 Cys 71에 존재한다. 또 다른 양태에서, Cys 71은 Ser, Val, Gly, Thr, Ile, Leu 및 Ala로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산으로 치환된다. 어떠한 이론 또는 작용 메카니즘으로 국한시키고자 하는 것은 아니지만, 상기 시스틴 잔기의 치환은 바람직하지 않은 디설파이드 결합의 위험을 감소시킨다.
어떠한 이론 또는 작용 메카니즘으로 국한시키고자 하는 것은 아니지만, 하기 아미노산 쌍: Asn-Ser; Asp-Ser; Asn-His; 또는 Asn-Gly 중의 하나 또는 둘 모두의 아미노산의 변이는 탈아미드화 위험을 감소시켜 본 발명의 항체의 용해도를 증가시킨다. 특정한 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 1, 2, 3, 4 또는 11 중의 어느 하나의 Asn 75, Ser 76로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다. 또 다른 양태에서, 아미노산 변이는 서열변호 10의 Asn 157, Ser 158로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다. 또 다른 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 11의 Asn 159, Ser 160, Asn 297, Ser 298로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다.
한 가지 양태에서, 아미노산 쌍 Asn-Ser은 Ser-Asn으로 치환된다. 또 다른 양태에서, 아미노산 쌍 Asn-Ser은 Asp-Ser; Asn-His; 또는 Asn-Gly 이외의 임의의 아미노산 쌍으로 치환된다. 특정한 양태에서, Asn은 Ala, Val, Ser, Leu, Gly, Glu 또는 Ser로부터 선택된 임의의 아미노산으로 치환된다. 또 다른 특정한 양태에서, Asn은 Gln 또는 Asp 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 특정한 양태에서, Ser은 Ala, Val, Leu, Gly, Ile, Thr 또는 Asn으로부터 선택된 임의의 아미노산으로 치환된다. 또 다른 특정 양태에서, Ser은 Ala, Val, Leu, Gly, Ile 또는 Asn으로부터 선택된 임의의 아미노산으로 치환된다. 또 다른 특정한 양태에서, Ser은 Gly 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 5, 6, 7, 8, 9 또는 13 중의 어느 하나의 Asp 54, Ser 55로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다.
한 가지 양태에서, 아미노산 쌍 Asp-Ser은 Ser-Asp로 치환된다. 또 다른 양태에서, 아미노산 쌍 Asp-Ser은 Asn-Ser; Asn-His 또는 Asn-Gly 이외의 임의의 아미노산 쌍으로 치환된다. 특정한 양태에서, Asp는 Ala, Val, Ser, Leu, Gly 또는 Ser로부터 선택된 임의의 아미노산으로 치환된다. 또 다른 특정 양태에서, Asp는 Glu 또는 Asn 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 특정한 양태에서, Ser은 Ala, Val, Leu, Ile, Gly 또는 Asn로부터 선택된 임의의 아미노산으로 치환된다. 또 다른 특정한 양태에서, Ser은 Gly 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에서, 변이는 잔기 쌍: 서열번호 11의 Asn 203 및 His 204; Asn 315 및 Gly 316; Asn 384 및 Gly 385; Asn 434 및 His 435로부터 선택된 적어도 하나의 잔기의 치환이다. 특정한 양태에서, 아미노산 쌍은 상호 교환된다(예를 들면, Asn-His는 His-Asn으로 치환되고; Asn-Gly은 Gly-Asn으로 치환됨). 또 다른 양태에서, 아미노산 쌍 Asn-His는 Asn-Ser; Asp-Ser; 또는 Asn-Gly 이외의 임의의 아미노산 쌍으로 치환된다. 또 다른 양태에서, 아미노산 쌍 Asn-Gly는 Asn-Ser; Asp-Ser; 또는 Asn-His 이외의 임의의 아미노산 쌍으로 치환된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에서, 아미노산 변이는 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20으로부터 선택된 위치에 존재한다. 또 다른 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 12에 기재된 중쇄 불변 영역의 Thr 3, Ser 7 및 Thr 108로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다. 또 다른 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 13에 기재된 중쇄의 Thr 120, Ser 124, Thr 225로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다. 또 다른 양태에서, 트레오닌 잔기는 세린 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 또 다른 양태에서, 세린 잔기는 트레오닌 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 특정한 양태에서, 트레오닌 및/또는 세린 잔기는 알라닌 잔기로 치환된다. 어떠한 이론 또는 작용 메카니즘에 국한시키고자 하는 것은 아니지만, 상기 트레오닌 또는 잔기의 치환은 바람직하지 않은 O-결합된 글리코실화의 위험을 감소시킨다.
어떠한 이론 또는 작용 메카니즘에 국한시키고자 하는 것은 아니지만, 하기 아미노산 쌍: Asp-Ser; Asp-Lys; Asp-Gly 중의 하나 또는 두 아미노산의 변이는 아스프라트산 이성질화의 위험을 감소시켜 퇴화 위험을 방지하거나 저하시킨다. 특정한 양태에서, 아미노산 변이는 서열번호 10의 Asp 63-Ser 64; 서열번호 11의 Asp 169-Ser 170; 서열번호 12의 Asp 104-Lys 105, Asp 163-Gly 164, Asp 282-Ser 283, Asp 285, Ser 286; 및 서열번호 13의 Asp 221-Lys 222, Asp 280-Gly 281, Asp 339-Ser 400, Asp 401, Ser 402로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에 존재한다. 특정한 양태에서, 아미노산 쌍은 상호 교환된다(예를 들면, Asp-Ser은 Ser-Asp로 치환됨). 또 다른 양태에서, 아미노산 쌍은 Asp-Ser, Asp-Lys 또는 Asp-Gly 이외의 임의의 아미노산으로 치환된다. 한 가지 양태에서, Asp는 Glu로 치환된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
다양한 양태에 따라, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 mBAT-1과 유사하거나 이보다 큰 항종양 활성을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 hBAT-1과 유사하거나 이보다 큰 항종양 활성을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 hBAT-1과 비교하여 향상된 안정성을 갖는다.
다양한 양태에 따라, 인간화된 항체의 단편은 Fv, F(ab'), F(ab')2 및 단일쇄 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명은 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 제공한다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터가 제공된다. 특정한 양태에 따라, 완전 인간화된 항체, 경쇄 가변 영역, 중쇄 가변 영역, 가변 영역의 두개 쇄로 이루어진 그룹으로부터 선택된 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 제공된다.
또 다른 측면에 따라, 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터를 함유하는 숙주 세포가 제공된다.
또 다른 측면에 따라, 활성 성분으로서 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 및 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 안정화제를 포함하는, 약제학적 조성물이 제공된다.
또 다른 양태에 따라, 활성 성분으로서 본 발명의 항체를 포함하는 약제학적 조성물은 암의 치료에 사용된다. 또 다른 양태에 따라, 약제학적 조성물은, 대상체에서 원발성 또는 속발성 종양의 검출 후에 또는 고도의 암 발달 위험을 갖는 대상체의 예방적 치료로서 투여될 수 있다. 일부 양태에 따라, 본 발명의 항체는 다양한 종양에서 항-종양 효과를 유도한다.
또 다른 측면에 따라, 본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 유효량의 약제학적 조성물를 대상체에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 질병을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 질환 또는 질병은 암이다. 일부 양태에서, 질환 또는 질병은 면역-결핍 관련 질환 또는 질병이다.
한 가지 양태에서, 대상체는 고형 종양 또는 비-고형 종양으로부터 선택된 종양을 갖는다. 일부 양태에서, 종양은 고형 종양이다. 일부 양태에서, 종양은 비-고형 종양이다. 일부 양태에서, 비-고형 종양은 혈액암이다.
특정 양태에서, 암은 대장암, 비-소세포 폐암(NSCLC), 소세포 폐암(SCLC), 유방암; 흑색종; 난소암, 자궁경부암, 췌장암, 두경부암, 위장암, 식도 종양, 간세포 암종, 다발성 골수종, 신장 세포암, 전립선 종양, 비-호지킨 림프종, 호지킨 질환, 외투 세포 림프종, 카포시 육종, 편평 세포암, 기저 세포암, 급성 골수 백혈병(AML), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 림프구성 백혈병(ALL) 및 만성 림프구성 백혈병(CLL)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
특정한 양태에 따라, 암은 대장암, 흑색종, 췌장암, 두경부암, 식도 종양, 다발성 골수종, 신장 세포암, 비-호지킨 림프종 및 호지킨 질환으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다양한 양태에 따라, 대상체는 비-인간 포유동물이다. 다양한 바람직한 양태에 따라, 대상체는 인간이다.
추가의 측면에서, 본 발명은 종양의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은, 종양의 치료에 사용하기 위한, 서열번호 1 내지 4로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97 및 중쇄 가변 영역의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
추가의 측면에서, 본 발명은 종양을 치료하기 위한 의약품(medicament)의 제조하기 위한 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은, 종양 치료용 의약품을 제조하기 위한, 서열번호 1 내지 4로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97 및 중쇄 가변 영역의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명의 기타 목적, 특징 및 잇점은 하기 상세한 설명 및 첨부된 특허청구범위로부터 명백해질 것이다.
도 1은, 인간화된 모노클로날 항체 BAT-1(CT-011로 표시됨) 및, 경쇄 가변 영역의 위치 Phe 97 및 중쇄 가변 영역의 Trp 107에서 알라닌 치환을 포함하는 CT-011 이중 돌연변이체와 함께 배양한 후의 CD4+ T 림프구 생존력을 입증하는 그래프이다.
본 발명은, 인간화된 모노클로날 항체, 상기 항체를 포함하는 약제학적 조성물, 및 이로써 한정되는 것은 아니지만, 암 및 면역결핍 질환을 포함하는 다양한 징후를 치료하기 위한 이의 용도를 제공한다. 특히, 본 발명은, hBAT-1 인간화된 모노클로날 면역조절 항체 변이체와 비교하여, 아미노산 치환 등의 특이적 아미노산 변이를 갖는 변이된 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
또 다른 양태에 따라, 서열번호 1 내지 4 중의 어느 하나와 적어도 85% 동일한 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9 중의 어느 하나와 적어도 85% 동일한 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 서열번호 1과 비교하여 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 변이된 아미노산 및 서열번호 5와 비교하여 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 변이된 아미노산을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
본 발명의 또 다른 양태에서, 항체는 서열번호 1 내지 4 중의 어느 하나와 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 92%, 적어도 95% 또는 적어도 98% 동일한 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9 중의 어느 하나에 기재된 중쇄 가변 영역을 포함한다. 또 다른 양태에서, 항체는 서열번호 5 내지 9 중의 어느 하나와 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 92%, 적어도 95% 또는 적어도 98% 동일한 중쇄 가변 영역 및 서열번호 1 내지 4 중의 어느 하나에 기재된 경쇄 가변 영역을 포함한다. 또 다른 양태에서, 항체는 서열번호 1 내지 4 중의 어느 하나와 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 92%, 적어도 95% 또는 적어도 98% 동일한 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9 중의 어느 하나와 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 92%, 적어도 95% 또는 적어도 98% 동일한 중쇄 가변 영역을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
용어 "적어도 X 퍼센트 동일한" 또는 "적어도 X 퍼센트 동일성을 갖는"은, 서열을 최적으로 정렬하는 경우에 2개의 비교된 서열에서 동일한 아미노산 잔기의 퍼센트를 지칭한다. 따라서, 예를 들면, 85% 아미노산 서열 동일성은 2개 이상의 최적으로 정렬된 폴리펩티드 서열 중의 85%의 아미노산이 동일함을 의미한다.
또 다른 양태에 따라, 서열번호 1 내지 4로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 경쇄 가변 영역이 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하고, 상기 중쇄 가변 영역이 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
한 가지 양태에 따라서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 1에 기재된 아미노산 서열(BATRKD)을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 2에 기재된 아미노산 서열(BATRKA)을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 3에 기재된 아미노산 서열(BATRKB)을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열(BATRKC)을 갖는다.
또 다른 양태에 따라, 항체 또는 이의 단편은 서열번호 1 또는 서열번호 4 중의 어느 하나의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에 따라, 항체 또는 이의 단편은 서열번호 2 또는 서열번호 3 중의 어느 하나의 Thr 5, Thr 20, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태를 나타낸다.
또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 5에 기재된 아미노산 서열(BATRHC)을 갖는다. 또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 6에 기재된 아미노산 서열(BATRHA)을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 7에 기재된 아미노산 서열(BATRHB)을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열(BATRHD)을 갖는다. 또 다른 양태에 따라, 경쇄 가변 영역은 서열번호 9에 기재된 아미노산 서열(BATRHE)을 갖는다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 경쇄 가변 영역의 Phe 93 또는 Phe 97로부터 선택된 위치에서 아미노산 변이를 포함한다. 또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역(서열번호 1 내지 4 중의 어느 하나)은 Trp 및 Tyr 이외의 임의의 아미노산으로 Phe 93 또는 Phe 97의 치환에 의해 변이된다. Phe 및/또는 Trp의 아미노산 치환의 비제한적 예는 Ala, Leu 및 Val을 포함한다. 특정 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 및 21로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 특정 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 14, 16, 18, 20 및 22로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 특정 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 15, 17, 19, 21 및 23으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 추가의 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 14에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 15에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, Phe 잔기는 Ala 잔기로 치환된다.
또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 Phe 93 및 Phe 97의 Ala, Leu 또는 Val로의 아미노산 치환을 포함한다. 특정 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 22에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, 경쇄 가변 영역은 Phe 93 및 Phe 97의 Ala로의 아미노산 치환을 포함한다. 특정한 양태에서, 경쇄 가변 영역은 서열번호 23의 아미노산 서열을 갖는다.
본 발명의 또 다른 양태에서, 중쇄 가변 영역(서열번호 5 내지 9 중의 어느 하나)는 Phe 이외의 임의의 아미노산으로의 Trp 107의 치환에 의해 변이된다. Trp의 아미노산 치환의 비제한적 예는 Ala, Leu, Tyr 및 Val을 포함한다. 특정 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열번호 24, 25, 26, 27 및 28로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, 중쇄 가변 영역은 서열번호 24에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, Trp 잔기는 Ala 잔기로 치환된다.
또 다른 양태에 따라, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역의 Trp 107 및 경쇄 가변 영역의 Phe 97로부터 선택된 위치에서 아미노산 변이를 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 중쇄 가변 영역의 Trp 107 및 경쇄 가변 영역의 Phe 97의 아미노산 변이를 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역의 Trp 107 및 경쇄 가변 영역의 Phe 93으로부터 선택된 위치에서 아미노산 변이를 포함한다. 또 다른 양태에 따라, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역의 Trp 107 및 경쇄 가변 영역의 Phe 93의 아미노산 변이를 포함한다. 특정한 양태에서, 상기 변이는 알라닌 잔기로의 치환이다.
[표 2]
F93, F97 또는 W107 아미노산 치환을 포함하는 hBAT -1 돌연변이된 경쇄 및 중쇄의 예시적 가변 영역
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
또 다른 양태에 따라, 본 발명은 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 제공한다. 따라서, 변이된 항체는 완전 인간화된 항체 또는 인간화된 항체의 경쇄 가변 영역 또는 중쇄 가변 영역 또는 두 쇄의 가변 영역을 코딩할 수 있는 폴리뉴클레오티드의 발현에 의해 생산된다. 추가로, 인간화된 항체는 중쇄 또는 경쇄를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 각각 포함하는 독특한 벡터의 공-형질감염 후 또는 경쇄 및 중쇄 폴리뉴클레오티드 서열 둘 다를 포함하는 단일 벡터의 형질감염에 의해 숙주 세포에서 발현시킬 수 있다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명의 변이된 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터가 제공된다.
또 다른 양태에 따라, 완전 인간화된 항체, 경쇄 가변 영역, 중쇄 가변 영역, 가변 영역의 쇄 둘 다로 이루어진 그룹으로부터 선택된 본 발명의 변이된 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터가 제공된다.
또 다른 양태에 따라, 당해 벡터는 내성 유전자, 프로모터, 시그날 펩티드, 폴리A 전사 터미네이터, 선별 마커, 게놈 인간 카파 불변 영역으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 성분을 코딩하는 적어도 하나의 서열을 추가로 포함한다.
또 다른 바람직한 양태에 따라, 벡터의 성분들은 암피실린 내성 유전자, 네오마이신 내성 유전자, HCMV 즉시 초기 프로모터, 게놈 인간 카파 불변 영역, 마우스 면역글로불린 시그날 펩티드 서열, 코작 서열, 시그날 서열 인트론, BGH 폴리A 전사 터미네이터, 네오/G418 선별 마커, 햄스터 dhfr 선별 마커로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 양태에 따라, 당해 벡터는 내성 유전자, 프로모터, 시그널 펩티드, 폴리A 전사 터미네이터, 선별 마커, 게놈 인간 Ig 불변 영역으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 성분을 코딩하는 적어도 하나의 서열을 추가로 포함한다.
또 다른 바람직한 양태에 따라, 벡터의 성분들은 암피실린 내성 유전자, 네오마이신 내성 유전자, HCMV 즉시 초기 프로모터, 게놈 인간 카파 불변 영역, 마우스 면역글로불린 시그날 펩티드 서열, 코작 서열, 시그날 서열 인트론, BGH 폴리A 전사 터미네이터, 네오/G418 선별 마커, 햄스터 dhfr 선별 마커로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 측면에 따라, 저장, 전파, 항체 생산 및 치료학적 적용 목적을 위해 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터를 함유하는 숙주 세포가 제공된다.
또 다른 양태에 따라, 숙주 세포는 CHO, CHOdhfr, NSO, NSO/GS, COS, COS7로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다.
정의
용어 "변이된 항체", "돌연변이된 항체" 및 유사한 문법적 표현은, 본래의 공지된 인간화된 모노클로날 항체 BAT-1 면역글로불린의 서열과 비교하여, 예를 들면, 하나 이상의 아미노산 잔기의 치환 또는 결실 또는 화학적 변이에 의한 아미노산 서열의 변화를 지칭한다.
"인간화된 모노클로날 항체 hBAT-1"은, 미국 특허 제7,332,582호(이의 내용은 본원에서 참조로서 도입됨)에 개시된, 쥐 BAT(mBAT-1)을 기반으로 하는 다수의 인간화된 모노클로날 항체와 관련된다. hBAT-1 mAb는 서열번호 1, 2, 3 및 4로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경쇄 가변 영역(각각 BATRKD, BATRKA, BATRKB 및 BATRKC로 명명됨) 및 서열번호 5, 6, 7, 8 및 9로 이루어진 그룹으로부터 선택된 중쇄 가변 영역(각각 BATRHC, BATRHA, BATRHB, BATRHD 및 BATRHE로 명명됨)을 포함한다. 경쇄 및 중쇄 항체 변이체의 아미노산 서열(서열번호 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 및 9)은 표 1에 제시되어 있다. 상기 가변 영역이 상이한 잔기는 회색 배경으로 제시되어 있다(경쇄 영역의 위치 2, 30, 69, 77, 97 및 98 및 중쇄의 위치 35, 69, 70 및 71). 쥐 BAT(mBAT-1)의 뉴클레오티드 및 아미노산 서열은 미국 특허 제7,695,715호에 개시되어 있고, 이의 내용은 본원에서 참조로서 도입된다. hBAT-1 항체의 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역의 특정한 조합은 서열번호 5/서열번호 1; 서열번호 6/서열번호 2; 서열번호 7/서열번호 2; 서열번호 7/서열번호 3; 서열번호 8/서열번호 3 및 서열번호 7/서열번호 1로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 본 발명의 특정한 양태에서, 돌연변이된 항체는 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 상기 특정 조합에 기반하고, 개시된 아미노산으로부터 선택된 치환 등의 적어도 하나의 부위 특이적 변이를 포함한다.
본원에 사용된 "아미노산 변이"는, 예를 들면, 상기 아미노산의 치환 또는 결실 또는 화학적 변이에 의한 아미노산의 변화를 지칭한다. 추가로, 본 발명의 항체는, 처리 또는 기타 해독후 변이 등의 자연적 처리 또는 화학적 변이 기술에 의해 하나 이상의 아미노산 잔기에서 화학적으로 변이될 수 있다. 화학적 변이는, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 아세틸화, 아실화, 아미드화, ADP-리보실화, 글리코실화, GPI 앵커 형성, 액체 또는 지질 유도체의 공유 결합, 메틸화, 미리스틸화, 페길화, 프레닐화, 포스포릴화, 유비퀴틴화 또는 임의의 유사한 공정을 포함한다.
용어 "아미노산"은 아미노산 유사체를 포함하는 비천연 발생 아미노산 뿐만 아니라 천연 발생 아미노산을 포함하는 이의 가장 넓은 의미로 사용된다. 이러한 광범위한 정의에 비추어, 당해 기술분야의 통상의 기술자는 아미노산에 대한 본원에서의 참조가, 예를 들면, 천연 발생 단백질원성 (L)-아미노산, (D)-아미노산, 화학적으로 변이된 아미노산, 예를 들면, 아미노산 유사체, 천연 발생-비단백질원성 아미노산, 예를 들면, 아미노산 노르류신, 및 아미노산의 특징인 것으로 당해 기술분야에 공지된 특성을 갖는 화학적으로 합성된 화합물을 포함한다는 것을 알 수 있을 것이다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "단백질원성"은 아미노산이 대사 경로를 통해 세포 중의 단백질 내로 도입될 수 있음을 나타낸다. 본 발명에 사용된 아미노산은 상업적으로 입수가능하거나 통상의 합성 방법에 의해 입수가능한 것들이다. 특정한 잔기는 펩티드 내로의 도입을 위한 특별한 방법을 필요로 하고, 펩티드 서열에 대한 연속, 분화 및 수렴 합성 방법이 본 발명에 유용하다. 명시하지 않는 경우, L 또는 D 이성체가 사용될 수 있다.
당해 기술분야의 기술자에게 공지된 아미노산의 보존적 치환은 본 발명의 범위내에 포함된다. 보존적 아미노산 치환은 하나의 아미노산이 동일한 유형의 관능기 또는 측쇄(예: 지방족, 방향족, 양으로 하전된, 음으로 하전된)를 갖는 또 다른 아미노산으로 대체되는 것을 포함한다. 당해 기술분야의 기술자라면, 단일 아미노산 또는 코딩된 서열에서 작은 비율의 아미노산을 변화, 부가 또는 결실하는 펩티드, 폴리펩티드 또는 단백질 서열에 대한 개개 치환, 결실 또는 부가는 당해 변화가 화학적으로 유사한 아미노산에 의한 아미노산의 치환을 생성하는 "보존적으로 변이된 변이체"임을 인지할 것이다. 기능상 유사한 아미노산을 제공하는 보존적 치환 표는 당해 기술분야에 공지되어 있다.
하기 6개 그룹은 각각 서로 보존적 치환인 아미노산을 함유한다:
1) 알라닌(Ala; A), 세린(Ser; S), 트레오닌(Thr; T);
2) 아스파르트산(Asp; D), 글루탐산(Glu; E);
3) 아스파라긴(Asn; N), 글루타민(Gln; Q);
4) 아르기닌(Arg; R), 히스티딘(His, H), 리신(Lys; K);
5) 이소류신(Ile; I), 류신(Leu; L), 메티오닌(Met; M), 발린(Val; V); 및
6) 페닐알라닌(Phe; F), 티로신(Tyr; Y), 트립토판(Trp; W).
한 가지 양태에 따라, 아미노산 치환은 보존적 치환이다.
또 다른 양태에 따라, 아미노산 치환은 비-보존적 치환이다. 본원에 사용된 바와 같이, "비-보존적 치환"은 상기한 보존적 치환 이외의 임의의 아미노산 치환이다. 비-보존적 치환에 대한 비제한적 예는 페닐알라닌 또는 트립토판의 알라닌, 류신 또는 발린으로의 치환을 포함한다.
특정한 양태에서, 본 발명의 아미노산 변이 치환(즉, 본 발명의 변이된 항체를 생산하기 위해)은 미국 특허 제7,332,582호에 기재된 치환 이외의 것이다.
용어 "항체"(또한 "면역글로불린"으로 지칭됨)는, 이들이 목적하는 생물학적 활성을 나타내는 한, 가장 광범위한 의미로 사용되고 구체적으로는 모노클로날 항체(전장 모노클로날 항체 포함) 및 항체 단편을 포함한다. "항체 단편"은 전장 항체의 일부분, 일반적으로 이의 항원 결합 또는 가변 영역을 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 단편; 디아바디; 선형 항체; 단일쇄 항체 분자; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체를 포함한다.
천연 발생 항체 구조의 기본 단위는, 2개의 동일한 경쇄(L) 및 2개의 동일한 중쇄(H)로 구성되고 비공유 결합 및 디설파이드 결합에 의해 함께 연결된 약 150,000 달톤의 이종사량체 당단백질 복합체이다. 각각의 중쇄 및 경쇄는 또한 조절 간격의 쇄간 디설파이드 브릿지를 갖는다. 5개의 인간 항체 부류(IgG, IgA, IgM, IgD 및 IgE)가 존재하며, 이들 부류 내에서 다양한 아부류가 구조적 차이, 예를 들면, 단일 항체 분자 중의 면역글로불린 단위의 수, 개개 단위의 디설파이드 브릿지 구조, 및 쇄 길이 및 서열의 차이에 기초하여 인지된다. 항체의 부류 및 아부류는 이의 이소형이다.
중쇄 및 경쇄의 아미노 말단 영역은 카복시 말단 영역보다 더욱 서열 분화성이고, 따라서 가변 도메인으로 명명된다. 항체 구조의 이러한 부분은 항체의 항원-결합 특이성을 부여한다. 경쇄 가변(VH) 도메인 및 경쇄 가변(VL) 도메인은 함께 단일 항원-결합 부위를 형성하고, 따라서 기본 면역글로불린 단위는 2개의 항원-결합 부위를 갖는다. 특정한 아미노산 잔기는 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 사이의 계면을 형성하는 것으로 생각된다[참조: Chothia et al., J. Mol. Biol. 186, 651-63 (1985); Novotny and Haber, (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82 4592-4596].
중쇄 및 경쇄의 카복시 말단 부분은 불변 도메인, 즉 CH1, CH2, CH3, CL을 형성한다. 이들 도메인에서는 다양성이 훨씬 덜하지만, 동물 종마다 차이가 있고, 추가로 동일한 개체에는 몇몇 상이한 이소형의 항체가 있으며, 각각은 상이한 기능을 갖는다.
용어 "골격 영역" 또는 "FR"은, 본원에 정의된 초가변 영역 아미노산 잔기가 아닌 항체의 가변 도메인 중의 아미노산 잔기를 지칭한다. 본원에서 사용된 용어 "초가변 영역"은 항원 결합에 관여하는 항체의 가변 도메인 중의 아미노산 잔기를 지칭한다. 초가변 영역은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"로부터의 아미노산 잔기를 포함한다. CDR은 항원의 에피토프에 대한 결합에 주로 관여한다. FR 및 CDR의 크기는 정확하게 정의되어 있다[참조: Kabat et al., ibid].
용어 "수용체 인간 면역글로불린"은 인간화된 항체에 대한 골격을 제공하는 인간 면역글로불린을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "인간화된 항체"는 인간 항체로부터의 골격 영역 및 비-인간(통상 마우스 또는 랫트) 면역글로불린으로부터의 하나 이상의 CDR을 포함하는 항체를 지칭한다. 가능하게는, CDR을 제외한 인간화된 면역글로불린 부분은 천연 인간 면역글로불린 서열의 상응하는 부분과 실질적으로 동일하다. 그러나, 일부 경우에, 예를 들면, 골격 영역 중의 특이적 아미노산 잔기는 인간화된 항체의 성능을 최적화하도록 변이될 수 있다. 중요하게는, 인간화된 항체는 CDR을 제공하는 공여체 항체와 동일한 항원에 결합할 것으로 예상된다. 추가의 상세는 미국 특허 제5,225,539호(Medical Research Council에게 양도됨, UK)를 참조한다.
용어 "수용체 인간 면역글로불린의 골격 영역" 및 "수용체 인간 면역글로불린으로부터 유도된 골격 영역" 및 유사한 문법적 표현은 본원에서 상호 교대로 사용되어 수용체 인간 면역글로불린의 동일한 아미노산 서열을 갖는 골격 영역 또는 이의 부분을 지칭한다.
용어 "인간 항체"는 인간에서 실제로 발생하는 유전자, 또는 이의 대립인자, 변이체 또는 돌연변이체에 의해 코딩된 항체를 지칭한다.
본 발명의 변이된 인간화된 모노클로날 항체는 바람직하게는 CDR 이식을 사용하는 재조합 DNA 기술에 의해 생성된다.
용어 "포유동물"은 애완 동물(예: 개 및 고양이); 농장 동물(예: 돼지, 소, 양 및 염소); 실험 동물(예: 마우스 및 랫트); 영장류(예: 원숭이, 유인원 및 침팬지); 및 바람직하게는 인간을 포함하는 임의의 포유동물을 의미한다.
본 발명의 방법
암 면역치료는 종양 세포의 사멸을 유도 또는 향상시키고 종양 성장을 조절하기 위해 면역계 반응을 조절하는 것을 주로 목적으로 한다. 이러한 접근법은 T 세포 상의 특이적 결정인자에 선택적으로 결합하여 활성화 경로를 개시하거나 억제 효과를 유도하는 모노클로날 항체를 포함하는 다양한 면역조절제의 사용을 이용한다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명은, 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 활성 성분으로 포함하는 유효량의 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함하는, 질환 또는 질병, 특히 암의 진단 또는 치료 방법을 제공한다.
모든 유형의 종양이 본 발명의 방법에 의해 치료될 수 있다. 종양은 고형 또는 비-고형일 수 있다.
본 발명의 배합물로 치료될 수 있는 고형 종양의 몇몇 예는 암종, 육종, 아세포종 및 신경교종을 포함한다. 이러한 종양의 몇몇 예는 유표피종, 편평상피종, 예를 들면, 두경부암, 대장암, 전립선암, 유방암, 폐암(소세포 및 비소세포 폐암 포함), 췌장암, 갑상선암, 난소암, 간암, 식도암 및 위암을 포함한다. 기타 예는 카포시 육종, CNS 신생물, 신경아세포종, 모상 혈관모 세포종, 수막종 및 대뇌 전이, 흑색종, 위장 및 신장 암 및 육종, 횡문근 육종, 교아종, 바람직하게는 다형 교아종 및 평활근 육종을 포함한다. 혈관화 피부암의 예는 악성 각질세포, 예를 들면, 인간 악성 각질세포의 성장을 억제함으로써 치료될 수 있는 편평세포암, 기저 세포암 및 피부 암을 포함한다.
비-고형 종양의 몇몇 예는 백혈병, 다발성 골수종 및 림프종을 포함한다. 백혈병의 일부 예는 급성 골수 백혈병(AML), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 림프구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 적내형 백혈병 또는 단핵구 백혈병을 포함한다. 림프종의 일부 예는 호지킨 질환, 비호지킨 질환 또는 외투 세포 림프종을 포함한다.
현재 바람직한 유형의 종양은 하기 그룹: 대장암; 비-소세포 폐암(NSCLC) 소세포 폐암(SCLC)을 포함하는 폐암; 유방암; 흑색종; 난소암; 자궁경부암, 췌장암; 두경부암; 위장암; 식도 종양; 간세포 암종; 다발성 골수종; 신장 세포암; 전립선 종양; 비-호지킨 림프종; 호지킨 질환; 외투 세포 림프종; 카포시 육종; 편평 세포암; 기저 세포암; 급성 골수 백혈병(AML); 만성 골수성 백혈병(CML); 급성 림프구성 백혈병(ALL); 및 만성 림프구성 백혈병(CLL)으로부터 선택된다.
본원에서 사용된 용어 "항종양 효과"는 종양 용적의 감소 또는 안정화, 종양 세포 수의 감소 또는 안정화, 종양 성장 속도의 감소 또는 안정화, 전이 수의 감소 또는 안정화, 종양 재발의 보호, 종양을 갖는 대상체의 수명 또는 생존의 증가, 종양을 갖는 대상체의 질환 진행 없이 수명 또는 생존의 증가 또는 암 증상과 관련된 다양한 생리학적 증상의 완화 중의 임의의 하나 이상에 의해 명백해질 수 있는 유리한 생물학적 효과를 지칭한다. "항종양 효과"는 또한 첫째로 종양의 발생 또는 종양의 재발을 방지하는 능력에 의해 명백해질 수 있다. 이의 특성이 제공되면, 본 발명의 방법은 암 예방 뿐만 아니라 급성 암, 우성의 조절되거나 안정화된 암의치료에 사용될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "향상된 생존"은 본 발명의 방법으로 치료한 후에 대상체 또는 환자가 생존하는 연장된 길이의 시간을 지칭한다. 향상된 생존은 특정 치료 후에 암을 앓고 있는 개체에 있어서 질환 진행이 없는 정지 가능성의 증가를 나타낸다. 또한, 이는 대조군 그룹과 비교하여 소정 기간 후에 질환이 안정한 상태로 유지(진행의 징후를 나타내지 않음)되는 그룹 중의 상승된 비율의 개체를 기재하기 위해 사용된다. 또한, 이는 대조군 그룹과 비교하여 소정 기간 후에 질환이 치유(질환의 징후를 나타내지 않음)되는 그룹 중의 상승된 비율의 개체를 기재하기 위해 사용된다. 이러한 매개변수는 특정 치료 효능의 지표로서 사용된 "무진행(progression-free) 생존", "전체 생존" 및 "무질환(disease free) 생존"으로 나타낸 통상의 임상 종점 중의 어느 하나에 의해 측정될 수 있다.
용어 "종양 재발"은, 최초 종양의 성장이 역전, 정지 또는 억제된 기간 후에 동일한 위치 또는 상이한 위치에서 동일한 종양 유형의 재출현, 재발, 재성장 또는 증식을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "림프구 생존을 향상시키거나 증가시키는"은, 본 발명의 항체와 접촉되지 않은 동일한 세포 모집단의 생존력과 비교하여, 시험관내 또는 생체내에서 림프구의 생존력을 연장시키는 본 발명의 항체의 능력을 지칭한다. 본 발명의 조합 치료와 관련하여, 당해 용어는, 단지 하나의 치료제를 사용한 동일한 세포 모집단의 생존력과 비교하여, 시험관내에서 또는 생체내에서 림프구의 생존력을 연장시키는 특정 치료제 조합의 능력을 지칭한다.
mBAT-1 또는 hBAT-1과 유사한 항종양 활성은 mBAT-1 또는 hBAT-1과 약 5% 또는 10% 이하로 유사한 항종양 효과를 지칭한다. mBAT-1 또는 hBAT-1 초과의 항종양 활성은, mBAT-1 또는 hBAT-1보다 큰 항종양 활성과 비교하여, 10% 초과, 30% 초과 또는 30% 초과의 항종양 활성을 지칭한다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명의 항체는 다른 제제의 투여와 함께, 투여 전제 또는 투여 후에 투여될 수 있고, 이는 이와 부가적 또는 상승작용 방식으로 작용할 수 있다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명의 항체는 사이토킨, IL-1(인터류킨-1), IL-2, IL-6, INF-α(인터페론-α), 세포 백신, 항체, T-세포 자극 항체, 항-종양 치료 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택된 제제의 투여와 함께, 투여 전에 또는 투여 후에 투여된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 양태이다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 방법으로 치료된 질환 또는 질병은 중증 복합 면역결핍 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 및 림프구, 구체적으로는 T 세포, NK 세포, NK-T 세포, B 세포, 단핵구, 마크로파지 또는 이의 임의의 배합의 파괴, 약독화 및/또는 기능부전을 수반하는 임의의 질환으로부터 선택된 면역-결핍 관련 질환 또는 질병이다.
또 다른 양태에서, 질환 또는 질병은 화학치료 또는 방사선 조사 후에 확립된 면역결핍증, 면역 기능부전 또는 면역 무력증이고, 이는 이후에 집합적으로 면역결핍 질환으로 지칭된다. 특정한 양태에 따라, 본 발명의 항체를 포함하는 약제학적 조성물은 골수, 제대혈 또는 말초혈로부터 유도된 자가, 동종이계 또는 동계 간세포 이식 및 공여체 백혈구 주입과 결합하여 사용된다.
또 다른 양태에 따라, 면역결핍 질환은 중증 복합 면역결핍 질환, 후천성 면역결핍 증후군, X-결합된 무감마글로불린혈증(agammaglobulinaemia), 공통 가변성 면역결핍증, IgA 결핍, IgG 아부류 결핍, 비스코트-알드리치(Wiskott-Aldrich) 증후군, 디게오르그 증후군(DiGeorge anomaly), 혈관확장성 운동실조증(Ataxia Telangiectasia), 아데노신 데아미나제 결핍 및 활성화-유도된 시티딘 데아미나제 결핍으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 양태에 따라, 면역결핍 질환은 바이러스 감염, 진균 감염 또는 세균 감염과 관련된다. 또 다른 양태에 따라, 면역결핍 질환은 중독과 관련된다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명의 방법은 빈혈증, 특히 재생불량성 빈혈 및 골수형성이상 증후군(MDS)을 치료하기 위해, 주로 면역결핍 질환에 기인하는 빈혈의 추가 합병증을 방지하기 위해 사용된다.
화학치료와의 배합 치료
본 발명의 특정한 측면에 따라, 적어도 하나의 항종양 화학치료제와 결합하여 변이된 아미노산을 포함하는 면역자극 인간화된 항체의 투여는 화학치료제의 항종양 효과를 향상시키도록 작용하고, 그 반대로도 작용한다. 바람직한 양태에서, 적어도 하나의 화학치료제와 함께 면역자극 항체의 배합물은 각각의 치료제 단독과 비교하여 유의적 방식으로 임상적 결과를 개선시킨다. 바람직한 양태에서, 종양이 적어도 하나의 화학치료제와 결합하여 및 임의로 추가로 방사선 조사와 결합하여 본 발명의 인간화된 항체로 치료되는 경우에 상승작용한다.
달리 말하면, 본 발명의 한 가지 측면에 따라, 본 발명의 인간화된 항체의 항종양 효과는 적어도 하나의 화학치료제와 배합될 때에 예상되는 것보다 증가된다.
본 발명의 배합물에 의해 유도된 항종양 효과는, 암성 및 비암성 종양을 포함하여, 예방, 종양 진행의 억제, 종양 성장의 감소 및 종양 재발로부터의 보호를 포함한다. 종양의 진행은 종양의 침입, 전이, 재발 및 크기 증가를 포함한다. 종양 성장의 감소는 또한 완전한 완화(complete remission)를 유도하는 종양의 파괴 또는 제거를 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 항체는 화학치료제에 대한 내성의 개선에 효과적이다. 당해 기술분야에 공지된 바와 같이, 암 화학치료를 받는 환자에 대한 주요 방해는 대부분 화학치료제의 강력한 독성에 기인하여 중증 및 유해한 부작용의 출현이다.
본 발명은, 자체로 또는 임의로 하나 이상의 화학치료제의 추가 투여와 배합하여, 본 발명의 인간화된 항체의 투여를 포함하는 종양을 갖는 대상체의 생존을 향상시키는 방법을 추가로 제공한다.
본 발명은, 자체로 또는 임의로 하나 이상의 화학치료제의 추가 투여와 배합하여, 본 발명의 인간화된 항체의 투여를 포함하는 종양 재발을 감소 또는 방지하는 방법을 추가로 제공한다. 일부 양태에서, 본 발명의 인간화된 항체 및 화학치료제를 사용하는 실험 동물의 배합 치료는 "기억" 효과를 유도했고, 따라서 종양 재발은 최초 종양 유형에 의한 재-자극시에 억제된다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명은, (i) 유효량의 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하고, (ii) 유효량의 적어도 하나의 화학치료제를 대상체에게 투여하여, 종양을 치료함을 포함하는, 종양 치료 방법을 제공한다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명은, 유효량의 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 이를 필요로 하는 대상체(여기서, 당해 대상체는 적어도 하나의 화학치료제에 의한 화학치료를 받고 있다)에게 투여하여 상기 화학치료제에 대한 내성을 개선시킴을 포함하는, 적어도 하나의 화학치료제에 대한 내성을 개선시키는 방법을 추가로 제공한다.
용어 "화학치료제에 대한 내성"은 하나 이상의 화학치료제에 의한 치료와 관련된 부작용에 내성이 있는 대상체의 생리학적, 물리화학적 및 면역학적 능력을 지칭한다. 따라서, 용어 "화학치료제에 대한 내성을 개선시키는"은 이러한 부작용에 대한 생리학적 및 물리화학적 능력이 증가하여 부작용의 증증도가 감소되고/되거나 부작용의 수가 감소되는 것을 지칭한다. 따라서, "화학치료제에 대한 내성을 개선시키는"은 화학치료제로 치료한 암 환자의 삶의 질을 개선시키는 것을 지칭할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 유효량의 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 투여하여 대상체의 생존을 향상시킴을 포함하는, 적어도 하나의 화학치료제로 치료되는 종양 대상체에서 생존력을 향상시키거나 질환 진행을 억제시키는 방법이 제공된다.
또 다른 양태에 따라, 본 발명은, 유효량의 본 발명의 항체 또는 이의 단편을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하여 종양 재발을 감소 또는 예방함을 포함하는, 종양 재발을 감소 또는 예방하는 방법을 제공한다. 한 가지 양태에 따라, 종양 재발을 감소 또는 예방하는 방법은 적어도 하나의 화학치료제를 대상체에게 투여함을 추가로 포함한다. 특정 양태에 따라, 대상체는 적어도 하나의 화학치료제에 의한 화학치료 과정을 받았거나 고려되었다.
다양한 양태에 따라, 본 발명의 항체 및 적어도 하나의 화학치료제의 투여는 실질적으로 동시에, 동시에, 교대로, 순차로 또는 연속적으로 수행된다. 일부 양태에서, 항체 및 적어도 하나의 화학치료제는 중복 스케줄에 따라 투여된다.
특정 양태에 따라, 항체의 투여는 적어도 하나의 화학치료제의 초기 투여 전에 수행된다.
다른 양태에 따라, 항체 및 적어도 하나의 화학치료제 중의 하나 또는 둘 다의 투여는 정맥내, 경구, 복강내, 피하, 격리된 사지 관류, 기관으로의 주입 및 이의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경로에 의해 수행된다.
특정한 양태에서, 본 발명의 방법은 종양 성장 속도, 종양 용적, 전이 수, 종양 재발 및 이의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 매개변수를 평가하는 것을 추가로 포함한다.
본 발명의 교시에 따라, 본 발명의 변이된 인간화된 항체는, 이들의 조합 뿐만 아니라 화학치료 및 임의로 방사선 치료의 개시 전, 개시 동안 또는 개시 후에, 즉 화학치료 및 임의로 방사선 치료의 개시 전 및 동안, 개시 전후, 개시 동안 및 후, 또는 개시 전, 개시 동안 및 개시 후에 투여될 수 있음에 주목해야 한다. 예를 들면, 본 발명의 항체는 화학치료 개시 전 또는 후에 1 내지 30일간 투여될 수 있다. 당해 항체는 추가로 화학치료 과정 사이에 투여될 수 있다.
본 발명의 배합 치료 방법에서, 당해 항체는 화학치료와 동시에, 예를 들면, 실질적으로 동시에 또는 함께 투여될 수 있다. 다른 투여 스케줄, 예를 들면, 중복 스케줄 또는 2개 치료 유형의 교대, 순차 또는 연속 투여를 수반하는 것들이 또한 사용될 수 있다.
다양한 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 항대사물질, 백금계 약물, 유사분열 억제제, 안트라사이클린 항생제, 토포이소머라제 억제제, 항-혈관형성제 및 이들의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 특정 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 본 발명의 변이된 hBAT-1이 화학치료제와 함께 사용될 때에 림프구의 생존을 향상시키도록 선택된다. 전형적으로, 향상된 또는 증가된 생존은 시험관내에서 편리하게 분석될 수 있다.
따라서, 다양한 양태에서, 화학치료제는 항대사물질(예: 피리미딘 동족체 5-플루오로우라실 또는 사이타라빈), 또는 백금계 약물(예: 옥살리플라틴 또는 시스플라틴)로부터 선택될 수 있다. 추가로, 다양한 양태에서, 화학치료제는 토포이소머라제 I 억제제(예: SN-38) 및 알킬화제(예: 사이클로포스파미드)로부터 선택된 제제 이외의 것일 수 있다.
일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는, 퓨린 길항제, 피리미딘 길항제 및 엽산 길항제를 포함하는 항대사물질이다. 일부 양태에 따라, 항대사물질은 피리미딘 길항제이다. 일부 양태에 따라, 항대사물질은 5-플루오로우라실, 우라실 머스타드, 우라실, 카페시타빈, 6-머캅토퓨린, 메토트렉세이트, 젬시타빈, 시타라빈, 플루다라빈 및 페메트렉스트로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 5-플루오로우라실이다. 일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 시타라빈이다. 일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 시스플라틴, 카보플라틴 및 옥살리플라틴으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 백금계 약물이다. 다른 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 파클리탁셀, 도세탁셀, 에토포사이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴 및 비노렐빈으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 유사분열 억제제이다. 다른 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 다우노루비신, 레스피노마이신 D 및 이다루비신으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 안트라사이클린 항생제이다. 일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 베바시주맵, 도파민, 테트라티오몰리브데이트 및 VEGF의 항혈관형성 변이체로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항-혈관형성제이다. 일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 토포이소머라제 I 억제제 이외의 것이다. 일부 양태에 따라, 적어도 하나의 화학치료제는 알킬화제 이외의 것이다.
화학치료 약물은 암 세포에 대한 효과, 약물이 간섭하는 세포 활성 또는 과정, 또는 약물이 영향을 받는 세포 사이클의 특정 상(phase)에 기반하여 몇개 그룹으로 분류된다. 따라서, 화학치료 약물은 하기 범주 중의 하나에 속한다: 알킬화제, 니트로소우레아, 항대사물질, 안트라사이클린, 토포이소머라제 I 및 II 억제제, 유사분열 억제제, 특히 백금계 약물, 스테로이드 및 항-혈관형성제.
항대사물질(또한 "뉴클레오사이드 유사체"로서 지칭됨)은 DNA 분자에서 구성 블록으로서 천연 물질을 대체하여, 세포 대사 및 단백질 합성에 요구되는 효소의 기능을 변화시킨다. 이들이 세포 성장에 요구되는 영양소와 유사한 경우, 세포는 결국 용해된다. 뉴클레오사이드가 비-작용성 뉴클레오사이드 유사체로 대체되는 경우, 후자는 DNA 및 RNA로 도입되어, DNA를 합성하는 세포의 능력을 억제함으로써 결국 세포 사이클 정지 및 아폽토시스를 유도한다. 항대사물질은 세포-사이클 특이적이고, 이들이 새로운 세포의 형성을 위해 새로운 DNA를 합성하는 세포에 주로 작용함에 따라 세포 분화의 S-상 동안에 가장 효과적이다. 이들 약물과 관련된 독성은 신속하게 성장 및 분화하는 세포에서 관찰된다. 항대사물질의 예는 퓨린 길항제, 피리미딘 길항제 및 엽산 길항제를 포함한다. 이들 제제는 S 상 동안에 세포를 손상시키고, 기타 암 뿐만 아니라 백혈병, 유방, 난소 및 위장관의 종양을 치료하기 위해 통상 사용된다. 항대사물질의 구체적 예는 5-플루오로우라실(또한 5FU로서 공지됨), 카페시타빈, 6-머캅토퓨린, 메토트렉세이트, 젬시타빈, 시타라빈, 플루다라빈 및 페메트렉스트를 포함한다.
백금계 화학치료 약물은 몇몇 상이한 방식으로 DNA를 가교결합하여 유사분열에 의한 세포 분화를 간섭한다. 손상된 DNA는 DNA 수복 메카니즘을 유도하고, 이는 또한 수복이 불가능한 것으로 판명될 때에 아폽토시스를 활성화시킨다. DNA 변화 중에서 가장 주목할 만한 것은 퓨린 염기와 1,2-인트라스트랜드 가교결합이다. 이들은 거의 90%의 부가체를 형성하는 1,2-인트라스트랜드 d(GpG) 부가체 및 보다 덜 통상적인 1,2-인트라스트랜드 d(ApG) 부가체를 포함한다. 1,3-인트라스트랜드 d(GpXpG) 부가체가 발생하지만, 뉴클레오티드 절단 수복(NER)에 의해 용이하게 절단된다. 다른 부가체는 백금계 약물의 활성에 관여하는 것으로 추정되는 인터-스트랜드 가교결합 및 비작용성 부가체를 포함한다. 세포 단백질, 특히 HMG 도메인 단백질과의 상호작용은 또한 유사분열을 간섭하는 메카니즘으로 진행되었지만, 이는 이의 주요 작용 방법이 아닐 것이다. 백금계 화학치료 약물은 시스플라틴(또한 시스플라티늄 또는 시스-디아민디클로리도플라티늄 II(CDDP)으로 공지됨), 카보플라틴 및 옥살리플라틴을 포함한다. 시스플라틴은 종종 알킬화제로서 지정되지만, 이는 알킬 그룹을 갖지 않고 알칼화 반응을 수행할 수 없다. 정확하게는 알킬화 유사인 것으로 분류된다. 백금계 화학치료 약물은, 육종, 일부 암종(예: 소세포 폐암 및 난소암), 림프종 및 생식 세포 종양을 포함하는 다양한 유형의 암을 치료하기 위해 사용된다.
유사분열 억제제는 세포 분화를 간섭한다. 이러한 범주에서 가장 공지된 화학치료제는 파클리탁셀(또한 탁솔(Taxol®), "식물 알칼로이드", "탁산" 및 "항미세소관제"로서 공지됨)이다. 도세탁셀과 함께, 이는 탁산의 약물 범주를 형성한다. 그러나, 다른 유사분열 억제제는 공지되어 있고, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 에토포사이드, 빈블라스틴 및 빈크리스틴을 포함한다. 파클리탁셀은 이들의 기능 정지에 의해 세포 분열 동안 정상 미세소관 성장을 간섭함으로써 작용하고, 이는 이들의 구조를 과-안정화시킨다. 이는 가요성 방식으로 이의 세포골격을 사용하는 세포의 능력을 파괴한다. 구체적으로는, 파클리탁셀은 튜블린의 β 아단위, 즉 미세소관의 "구성 블록"에 결합하고, 파클리탁셀의 결합은 대신에 이들 구성 블록을 고정시킨다. 생성된 미세소관/파클리탁셀 복합체는 분해 능력을 갖지 않는다. 이는, 미세소관의 단축 및 연장(역학적 불안정성으로 명명됨)이 다른 세포 성분들을 수송하는 메카니즘으로서 이들의 기능에 필요하기 때문에 세포 기능에 영향을 미친다. 예를 들면, 유사분열 동안, 미세소관은 이들의 복제 및 2개의 딸세포 핵으로부터 후속 분할을 통해 염색체 모두를 위치시킨다. 추가로, 파클리탁셀은 단백질 Bc1-2(B-세포 백혈병 2)를 정지하여 이의 기능을 정지하는 아폽토시스에 대한 결합에 의해 암 세포에서 프로그램된 세포 사멸(아폽토시스)을 유도한다.
항암 화학치료에 광범위하게 사용된 또 다른 그룹의 DNA-상호작용 약물은, 특히, 다우노루비신, 독소루비신(또한 아드리아마이신(Adriamycin®) 및 독소루비신 하이드로클로라이드로서 공지됨), 레스피노마이신 D 및 이다루비신을 포함하는 안트라사이클린 항생물질 그룹이다. 이들 약물은 거대분자 생합물의 삽입 및 억제 의해 DNA와 상호작용하여 효소 토포이소머라제 II의 진행을 억제하고, 이는 전사를 위해 DNA를 푼다. 이들은, 복제를 위해 DNA 쇄를 파쇄한 후에 토포이소머라제 II 복합체를 안정화시켜, DNA 이중 나선이 재밀봉되는 것을 방지하고, 이에 의해 복제 과정을 정지한다. 이는 광범위한 암의 치료에 통상적으로 사용된다.
알킬화 항종양제는 직접 DNA를 공격한다. 이들은 알킬 그룹을 DNA에 부착시켜 DNA 이중 나선 가닥 중의 구아닌 뉴클레오염기를 가교결합시킨다. 이는 당해 가닥을 풀어 분리할 수 없게 한다. 이는 DNA 복제에 필요하기 때문에, 세포는 더이상 분열할 수 없다. 이들 약물은 비특이적으로 작용한다. 사이클로포스파미드는 알킬화제이지만, 매우 강력한 면역억제 물질이다.
토포이소머라제 I 및 II 억제제는 각각 토포이소머라제 I 및 2의 효소 활성을 간섭하고, 결국 DNA 복제 및 전사 둘 다의 억제를 유도한다. 토포이소머라제 I 억제제의 예는 토포테칸 및 이리노테칸을 포함한다. 이리노테칸은 카복시레스테라제-전환 효소에 의해 생물학적 활성 대사물질 7-에틸-10-하이드록시-캄프토테신(SN-38)으로 전환된 약물이다. 모 화합물 이리노테칸보다 100배 더 강력한 SN-38은 토포이소머라제 I 및 DNA 사이의 개열가능한 복합체를 안정화시켜 토포이소머라제 I 활성을 억제함으로써, DNA 복제를 억제하고 아폽토시스 세포 사멸을 유발하는 DNA 파괴를 생성한다. 진행하는 DNA 합성이 이의 세포독성 효과를 발휘하는 이리노테칸에 요구되기 때문에, 이는 또한 S-상-특이적 제제로서 분류된다. 이소토포머라제 II 억제제의 예는 에토포사이드 및 테니포사이드를 포함한다.
항-혈관형성제는 새로운 혈관의 생성을 간섭하여, 결국 종양의 "기아상태"를 유도한다. 항-혈관형성제의 비제한적 예는 모노클로날 항체 베바시주맵, 도파민 및 테트라티오몰리브데이트를 포함한다.
혈관 내피 성장 인자(VEGF)는, 혈관확장, 증가된 혈관 투과능 및 내피 세포 분열을 매개하는 32-42 kDa 이량체성 당단백질이다. VEGF 유전자의 감별 엑손 스플라이싱은 3개의 분비된 이소형(아래첨자는 아미노산의 수를 나타낸다): VEGF189, VEGF206 및 VEGF121을 코딩하는 3개의 주요 mRNA 종을 생성한다. 미세 스플라이싱 변이체의 수가 또한 기재되어 있다(VEGF206, VEGF183, VEGF145 및 VEGF148). VEGF 폴리펩티드의 변이체 및 암 치료에서의 이들의 용도는, 예를 들면, 국제공개공보 제WO 2003/012105호에 개시되어 있다.
방사선 조사를 사용한 배합 치료
다양한 양태에 따라, 당해 방법은 대상체를 방사선 조사로 처리함을 추가로 포함한다. 다양한 양태에 따라, 당해 방법은 본 발명의 항체를 투여하는 것, 적어도 하나 이상의 화학치료제를 투여하는 것 및 대상체를 방사선 조사로 처리하는 것 모두를 포함한다. 일부 양태에 따라, 항체, 적어도 하나의 화학치료제 및 방사선 조사 처리는 실질적으로 동시에, 함께, 교대로, 연속적으로 또는 중복 스케줄에 따라 투여된다.
본 발명의 변이된 항체 및 화학치료제(들)와 배합하여 사용될 수 있는 방사선 조사 공급원은 치료되는 환자의 외부 또는 내부에 존재할 수 있다. 당해 공급원이 환자의 외부에 존재하는 경우, 당해 치료는 외부 빔 방사선 치료(EBRT)로서 공지되어 있다. 방사선 조사 공급원이 환자 내부에 존재하는 경우, 당해 처리는 근접조사요법(BT)로서 불리워진다.
방사선 조사는 이러한 목적을 위해 제조된 표준 장치, 예를 들면, AECL 테라트론 및 바리안 클리낙을 사용하는 공지된 표준 기술에 따라 투여된다.
외부 방사선 공급원 및 환자로의 도입점 사이의 거리는 표적 세포의 사멸 및 부작용의 최소화 사이의 허용되는 균형을 나타내는 임의의 거리일 수 있다. 전형적으로, 외부 방사선의 공급원은 환자 내로의 도입점으로부터 70 내지 100cm 사이이다.
근접조사요법은 일반적으로 환자에서 방사선의 공급원을 위치시킴으로써 수행된다. 전형적으로, 방사선의 공급원은 치료되는 조직으로부터 대략 0-3cm에 위치되어 있다. 공지된 기술은 간질성, 체강내 및 표면 근접조사요법을 포함한다. 방사활성 씨드는 영구적 또는 일시적으로 이식될 수 있다. 영구 이식에 사용된 일부 전형적인 방사활성 원자는 요오드-125 및 라돈을 포함한다. 일시적 이식에 사용된 일부 전형적 방사활성 원자는 라듐, 세슘-137 및 이리듐-192를 포함한다. 근접조사요법에 사용된 일부 추가의 방사활성 원자는 아메리슘-241 및 금-198을 포함한다.
방사선의 용량은 당해 기술분야에 공지된 바와 같이 다수의 인자에 의존한다. 이러한 인자는 치료되는 기관, 의도하지 않게 역으로 영향을 미칠 수 있는 방사선 경로에서 건강한 기관, 방사선 치료에 대한 환자의 내성 및 치료를 필요로 하는 신체의 부분을 포함한다. 이러한 용량은 전형적으로 1 내지 100 Gy 및 보다 특히는 2 내지 80 Gy일 것이다. 보고된 몇몇 용량은 척수에 대해 35 Gy, 신장에 대한 15 Gy, 간에 대해 20 Gy 및 전립선에 대해 65 내지 80 Gy을 포함한다. 그러나, 본 발명은 임의의 특정 용량으로 한정되지 않음이 강조되어야 한다. 당해 용량은, 상술한 인자를 포함하여, 소정 상황에서 특정 인자에 따라 치료 의사에 의해 결정될 것이다.
근접조사요법을 위한 방사선의 용량은 외부 빔 방사선 치료를 위해 상술한 것과 동일할 수 있다. 외부 빔 방사선 치료의 용량을 결정하는 상술한 인자 이외에, 사용된 방사활성 원자의 성질은 또한 근접조사요법의 용량의 측정시에 고려된다.
본 발명의 인간화된 항체
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "BAT" 및 "BAT 항체"는 넓은 의미로 사용되고, 구체적으로 mBAT-1로 공지된 쥐 모노클로날 항체와 동일하거나 이에 기반을 둔 항체, 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 모노크로날 항체 mBAT-1은 미국 특허 제5,897,862호에 개시된 바와 같이, 등록 번호 1-1397 하에 Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM)에 기탁된 하이브리도마 세포주에 의해 분비된다. 추가로 "BAT" 및 "BAT 항체"는 mBAT-1과 동일한 항원성 에피토프를 인식하는 항체, 예를 들면, 미국 특허원 공개공보 제2003/0026800호에 기재된 키메라 항체를 지칭할 수 있다. BAT 항체는 또한 인간화된 항체를 포함하고, 다수의 예는 국제공개공보 제WO03/099196호 및 미국 특허원 공개공보 제2008/0025980호에 개시되어 있고, 상호교대로 "CT-011", "hBAT" 및 "hBAT-1"으로 표시된다.
일반적으로, 인간화된 모노클로날 항체의 경쇄 가변 영역은 하기 화학식을 특징으로 한다:
FRL1-CDRL1-FRL2-CDRL2-FRL3-CDRL3-FRL4
상기 화학식에서,
각각의 FR은 독립적으로 인간 항체의 골격 영역이고, 각각의 CDR은 독립적으로 모노클로날 mBAT-1 항체의 상보성 결정 영역이다.
일반적으로, 인간화된 모노클로날 항체의 중쇄 가변 영역을 하기 화학식을 특징으로 한다:
FRH1-CDRH1-FRH2-CDRH2-FRH3-CDRH3-FRH4
상기 화학식에서,
각각의 FR은 독립적으로 인간 항체의 골격 영역이고, 각각의 CDR은 독립적으로 모노클로날 mBAT-1 항체의 상보성 결정 영역이다.
특정한 양태에서, FR은 인간 TEL9 항체의 경쇄 가변 영역으로부터 유도되거나, 특정 아미노산 잔기에서 이로부터 변이된다. 인간 TEL-9 항체는 비면역화된 공여체의 말초혈 림프구로부터 제조된 면역글로불린 중쇄(VH) 및 경쇄(V 카파 및 V 람다) 쇄 가변(V) 유전자의 각종 라이브러리에서 동정되었다[참조: Marks et al. J MoI Biol. 1991, 222:581-97]. 이러한 항체는 터키 난백 리소자임(TEL) 항원에 특이적으로 결합하는 것을 밝혀졌다.
특정 양태에서, FR은 인간 hsighv1295 항체의 중쇄 가변 영역으로부터 유도되거나, 특정 아미노산 잔기에서 이로부터 변이된다. 인간 hsiggv1295 항체는 류마티스성 관절염을 갖는 3명의 환자 및 전신성 홍반성 낭창을 갖는 1명의 환자의 활액(synovial fluid) 또는 말초혈로부터 안정한 하이브리도마 및 엡스타인-바르 바이러스-형질전환된 B 세포주로부터 분리된다[참조: Fang et al., J Exp Med. 1994, 179:1445-56].
조성물, 투여 및 용량
본 발명의 방법에 사용하기 위해, 인간화된 항체는, 특히 단백질 활성제와 관련하여, 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 안정화제 또는 부형제(비히클)를 사용하여 당해 기술분야에 공지된 약제학적 조성물을 형성하는 통상의 방식으로 제형화될 수 있다. 담체(들)는 조성물의 다른 성분과 혼화성이라는 측면에서 "허용"되고, 이의 수용체에 유해하지 않아야 한다. 적합한 담체는 전형적으로 글리세롤 또는 프로필렌 글리콜 등의 생리학적 염수 또는 에탄올 폴리올을 포함한다.
항체는 중성 또는 염 형태로 제형화될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 염은 산 부가 염(유리 아미노 그룹으로 형성됨)을 포함하고, 염산 또는 인산 등의 무기산 또는 아세트산, 옥살산, 타르타르산 및 말레산 등의 유기산으로 형성된다. 유리 카복실 그룹으로 형성된 염은 또한 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘 또는 수산화철 등의 무기 염기 및 이소프로필아민, 트리메틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘 및 프로카인 등의 유기 염기로부터 유도될 수 있다.
조성물은 정맥내, 근육내, 피하 또는 복강내 투여를 위해 적합하게는 제형화될 수 있고, 편리하게는 항체의 멸균 수용액을 포함하고, 이는 바람직하게는 수용체의 혈액과 등장성이다. 이러한 제형은 전형적으로 염화나트륨, 글리신 등의 생리학적으로 적합한 물질을 함유하고 생리학적 조건과 혼화성인 완충된 pH를 갖는 물에 고체 활성 성분들 용해시켜 수용액을 제조하고 상기 용액을 멸균성으로 되게 함으로써 제조된다. 이들은 단위 또는 다중-용량 용기, 예를 들면, 밀봉된 앰플 또는 바이알에서 제조될 수 있다.
당해 조성물은 안정화제, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜, 단백질, 당류(예: 트레할로즈), 아미노산, 무기산 및 이들의 혼합물을 도입할 수 있다. 안정화제는 적절한 농도 및 pH에서 수용액에서 사용된다. 수용액의 pH는 5.0-9.0의 범위, 바람직하게는 6-8의 범위 내인 것으로 조정된다. 항체의 제형화에 있어서, 항-흡수제가 사용될 수 있다. 다른 적합한 부형제는 전형적으로 아스코르브산 등의 산화방지제를 포함할 수 있다.
당해 조성물은 단백질을 복합체화하거나 흡수하기 위해 중합체를 사용하여 달성될 수 있는 조절 방출 제제로서 제형화될 수 있다. 조절 방출 제형에 적합한 중합체는, 예를 들면, 폴리에스테르, 폴리아미노산, 폴리비닐, 피롤리돈, 에틸렌비닐아세테이트 및 메틸셀룰로즈를 포함한다. 또 다른 가능한 조절 방출 방법은 항체를 중합성 물질의 입자, 예를 들면, 폴리에스테르, 폴리아미노산, 하이드로겔, 폴리(락트산) 또는 에틸렌 비닐아세테이트 공중합체에 도입시키는 것이다. 또는, 이들 제제를 중합성 입자에 도입하는 대신, 이들 물질들을, 예를 들면, 코아세르베이션 기술에 의해 또는 계면 중합에 의해 제조된 마이크로캡슐에서, 예를 들면, 각각 하이드록시메틸셀룰로즈 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리(메틸렌메타크릴레이트) 마이크로캡슐에서, 또는 콜로이드성 약물 전달 시스템, 예를 들면, 리포솜, 알부민 미소구, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐에서 또는 매크로에멀젼에서 걸러낼 수 있다.
경구 제제가 요구되는 경우, 당해 조성물은 담체, 예를 들면, 락토스, 수크로즈, 전분, 활석 마그네슘 스테아레이트, 결정성 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 카복시메틸 셀룰로즈, 글리세린, 나트륨 알기네이트 또는 아라비아 고무와 결합될 수 있다.
본 발명의 인간화된 항체는 바람직하게는 비경구로, 일반적으로 정맥내 주입으로 투여된다. 또한, 복강내, 경구, 피하 또는 근육내 경로로 투여될 수 있다. 항체는 일반적으로 환자 체중 1kg당 약 0.1 내지 약 20mg의 범위, 통상적으로 약 0.5 내지 약 10mg/kg, 종종 약 1 내지 약 5mg/kg의 범위로 투여된다. 이와 관련하여, 적어도 12시간 이상, 바람직하게는 적어도 4일 이상, 더욱 바람직하게는 21일 이하의 순환 반감기를 갖는 항체를 사용하는 것이 바람직하다. 키메라 및 인간화된 항체는 각각 4일 이하 및 14 내지 21일 이하의 순환 반감기를 가질 것으로 기대된다. 몇몇 경우에, 처리 기간 동안 다량의 부하량, 이어서 주기적(예: 매주) 유지량을 투여하는 것이 유리할 수 있다. 항체는 또한 서방출 전달 시스템, 펌프 및 연속 주입용으로 기타 공지된 전달 시스템에 의해 전달될 수 있다. 투여 섭생을 변화시켜 이의 약물동태학에 기초하는 특이적 항체의 목적하는 순환 수준을 제공할 수 있다. 따라서, 치료제의 목적하는 순환 수준이 유지될 수 있도록 투여량을 계산한다.
통상적으로, 유효량은 대상의 상태 뿐만 아니라 치료할 대상의 체중 또는 표면적에 의해 결정된다. 투여량의 크기 및 투여 섭생은 또한 특별한 대상에게 본 발명의 변이된 항체의 투여를 수반하는 임의의 부작용의 존재, 특성 및 정도에 의해 결정된다. 투여될 치료학적 조성물의 유효량을 측정하는데 있어서, 의사는 특히, 순환 혈장 수준, 독성 및 질환의 진행을 평가할 필요가 있다.
본 발명의 인간화된 항체 및 화학치료제(들)와 관련하여 용어 "유효량"은 과도하거나 조절될 수 없는 부작용을 일으키지 않고, 치료 효과를 달성하는데 필요한 이들 활성 제제 각각의 양을 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 치료학적 최종 결과를 달성하는데 필요한 유효량은, 예를 들면, 특정 형태의 종양 및 환자 상태의 중증도를 포함하는 다수의 인자 및 배합물이 추가로 방사선과 공동 투여되는지 여부에 따라 좌우될 수 있다. 본 발명의 문맥에서, 활성제의 유효량(투여량)은 대상에게서 종양 성장의 억제, 종양 성장 속도의 감소, 종양 및 전이 성장의 예방 및 향상된 생존율을 포함하는, 경시적으로 유리한 치료학적 반응을 초래하기에 충분해야 한다.
본 발명의 병용 방법의 각종 양태에서, 항체 및 화학치료제는 각 활성제의 투여 빈도 및 순서를 참조하여 "투약 계획" 또는 "투여 섭생"으로 지칭되기도 하는 임의의 다수의 치료 계획에 따라 투여될 수 있다. 예를 들면, 항체 및 화학치료제는, 예를 들면, 배합 투여 형태 또는 개별 투여 형태를 사용하여 실질적으로 동시에, 즉 같은 시간에 투여될 수 있다. 이러한 투여 형태는 또한 "동시" 투여로서 지칭될 수 있다. 동시 투여는 동일한 일반적 시간 기간 내에, 예를 들면, 반드시 동일 시간은 아니지만 동일한 날(들)에 활성제의 투여를 의미한다. 예를 들면, 하나의 활성제는 식품과 함께 투여할 필요가 있는 반면, 나머지는 반-공복 상태로 투여할 필요가 있다. 대체 투여는 특별한 시간 기간 동안, 예를 들면, 수일 또는 1주일 동안 하나의 제제의 투여, 이어서 후속되는 동일 기간의 시간 동안 다른 제제를 투여하고, 이어서 하나 이상의 사이클 동안 패턴을 반복함을 포함한다. 순차적 또는 연속 투여는 최초 기간 동안 하나 이상의 투여량을 사용하여 하나의 제제를 투여한 다음, 2차 기간 동안 하나 이상의 투여량을 사용하여 다른 제제를 투여함을 포함한다. 중첩 계획을 또한 사용할 수 있고, 이는 반드시 규칙적인 순서에 따르지는 않고 치료 기간에 상이한 날에 활성제를 투여함을 포함한다. 이러한 일반 지침에 대한 변이는 사용되는 제제 및 대상의 상태에 따라 또한 사용될 수 있다.
일부 특별한 배합물에서, 특정 투여 순서, 예를 들면, 다른 것에 앞서 하나의 제제를 사용하는 것이 유리할 수 있다.
이하, 본 발명을 일반적으로 설명하며, 본 발명은, 예시로서 제공되고 본 발명을 제한하는 것으로 의되되지 않는 다음 실시예를 참조하여 보다 용이하게 이해된다.
실시예
실시예 1
CT-011 이중 돌연변이에 의한 배양 후 CD4+ T 림프구 생존력
Trp 107의 Ala로의 및 Phe 97의 Ala로의 아미노산 치환을 포함하는 CT-011 이중 돌연변이 항체가 형성되었다(w222+F97로 표시됨). 48시간 활성화된 인간 CD4+ T 림프구의 대표적인 예를 추가의 72시간 동안 1ug/ml 또는 0.1ug/ml CT-011 또는 CT-011 이중 돌연변이 W222+F97 또는 이소형 대조군 항체로 배양했다. 세포 생존력은 트리판 블루 배제로 평가했다.
도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 림프구 생존력은 이중 돌연변이 항체를 포함하는 배양물에서 더 높다. 도 1의 Y축은 생존 세포의 농도를 나타낸다.
실시예 2
쥐 종양 모델에서 변이된 hBAT-1의 생체내 효과
본 발명의 변이된 항체가 mBAT-1 또는 hBAT-1의 생물학적 효과 특성을 유전시킬 수 있는지를 시험하기 위해, 변이된 항체의 효능을 생체내에서 연구한다.
C57BL 마우스에게 B16 흑색종 세포를 접종하여 폐 전이를 유도한다. 본 발명의 변이된 mAb의 증가하는 양(1, 10 및 20㎍)을 종양 접종 후 12일째에 주입하고, 최적 투여량 10㎍ mBAT-1 및/또는 hBAT-1과 비교했다. 폐 중량을 종양 접종 24일 후에 측정하여 종양의 확립을 나타낼 수 있다. 처리당 평균 폐 중량은 각종 시험된 mAbs의 지표이다.
실시예 3
변이된 hBAT-1에 의해 SCID 마우스에서 인간 흑색종(SK-28)의 억제
마우스 및 인간 BAT-1 mAb는 인간 말초 혈액 림프구(hPBL)의 존재하에 인간-종양 전이의 형성을 억제하는 것으로 나타났다. 인간 암을 억제하는데 있어서 변이된 hBAT-1의 효능을 평가하기 위해, 변이된 항체를 종양 및 인간 기원의 림프구 둘 다를 결합한 모델에서 연구한다. 중증 복합 면역 결핍 마우스(SCID)에 hPBL을 이식시켜 면역 능력을 회복한다. 마우스를 인간 흑색종 세포(SK-28)로 시험접종시키고, 종양 접종 후 11일째에 단일 정맥내 투여로 투여된 인간화된 항체의 증가하는 농도로 처리했다.
실시예 4
누드 마우스에서 변이된 hBAT-1 mAb에 의해 인간 대장암 간 전이의 면역치료
LIM6 및 HM7은 이들의 높은 무친 합성 및 전이 가능성에 대해 선택된 인간 CRC 세포주 LS174T의 두 개의 서브클론이다. 종양 세포를 마취된 누드 세포의 노출된 비장에 주입한다. 1분 후, 비장을 제거하고, 절개부를 밀폐시킨다. 낮은 투여량의 mBAT-1, hBAT-1 및 본 발명의 변이된 hBAT-1 항체를 12일 후에 투여하고, 마우스를 종양 접종 35일 후에 희생시킨다. 간을 칭량하고, 전이성 결절의 수를 계산하고, 간 조직을 조직학 및 면역조직화학 연구를 위해 처리했다.
실시예 5
CD4 및 CD8에 위해 변이된 hBAT의 공동-국소화
마우스 및 인간 BAT-1은 CD4+ 및 CD8+ 서브세트를 인지하여 인간 림프구를 결합하는 것으로 나타났다. 본 발명의 변이된 인간화 mAbs의 결합 특이성을 확립하기 위해, 인간 말초 혈액 림프구(PBL)를, 이하 기재된 바와 같이, 정상 공여체의 혈액으로부터 분리하고, 공지된 림프구 마커로 hBAT의 공동-국소화에 대해 분석한다.
말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 피콜로 분리하고, 조직 배양 플레이트에서 배양하여 부착 세포를 제거한다. 분리물은 림프구 상에서는 크기 및 입도에 의해 및 생세포 상에서는 프로피디움 요오드(PI) 배제로 게이트화한다. 결합은 4℃에서 1시간 동안 수행하고, 게이트된 림프구 상에서 유동 세포 분석법으로 측청한다.
실시예 6
변이된 hBAT-1의 B 림프구로의 결합
본 발명의 변이된 인간화된 mAb를 인간 B 림프구 세포주인 다우디(Daudi) 세포의 막에 대해 생성시킨다. 정상 공여체로부터의 PBL을, 당해 분야에 공지된 바와 같이, 피콜로 분리시키고, 조직 배양 플레이트에 부착시킨다. 비-부착 세포를 CD19 및 CD20을 포함하는 B-세포 마커로 항체의 공동-국소화에 대해 시험한다. 결합은 4℃에서 1시간 동안 수행하고, 게이트된 림프구 상에서 유동 세포 분석법으로 측청한다.
실시예 7
변이된 hBAT-1의 안정성
서열번호 1 내지 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75, Ser 76, Phe 93 및 Phe 97; 서열번호 5 내지 9의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 Asp 54, Ser 55 및 Trp 107; 서열번호 10의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 불변 영역의 Asn 51, Ser 52, Asp 63 및 Ser 64; 또는 서열번호 12의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 불변 영역의 Thr 3, Ser 7, Asn 42, Ser 43, Asn 86, His 87, Asp 104, Lys 105, Thr 108, Met 135, Asp 153, Pro 154, Asp 163, Gly 164, Asn 180, Ser 181, Asn 198, Gly 199, Asn 267, Gly 268, Asp 282, Ser 283, Asp 284, Ser 285, Asn 317, His 318, Lys 330 및 Met 311로부터 선택된 위치에 적어도 하나의 아미노산 변이를 포함하는 CT-001 mAb는 당해 분야에 공지된 바와 같이 형성된다.
변이된 mAbs의 안정성은 당해 분야에 공지된 바와 같이 항체의 크기, 응집 상태, 구조 및 분자간 접촉을 평가하는 각종 생화학적 및 생물 물리학적 기술을 사용하여 평가한다. 예를 들면, 항체의 순도 및 응집 상태는 크기 배제 크로마토그래피(SEC) 및 분석적 초원심분리(AUC)로 연구할 수 있다.
구체적 양태들에 대한 상술한 설명은 본 발명의 일반적 특성을 충분히 나타내어 다른 사람들이 과도한 실험 없이, 일반적인 개념으로부터 벗어나지 않고, 현재의 지식을 적용함으로써, 상기 구체적 양태를 용이하게 변형시키고/시키거나 다양한 용도로 개작할 수 있으며, 따라서 이러한 개작 및 변형은 기재된 양태의 등가물의 의미 및 범위 내인 것으로 이해된다. 본원에 사용된 표현 및 용어는 제한 없이 설명을 목적으로 하는 것으로 이해된다. 각종 기술된 기능을 수행하기 위한 수단, 물질 및 단계는 본 발명으로부터 벗어나지 않고도 각종 대체 형태가 있을 수 있다.
<110> CureTech Ltd. <120> VARIANTS OF HUMANIZED IMMUNOMODULATORY MONOCLONAL ANTIBODIES <130> IPA131207 <150> US 61/511,055 <151> 2011-07-24 <160> 31 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 1 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 2 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 2 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 3 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 3 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 4 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 4 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Ser Phe Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 5 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 5 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 6 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 6 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Lys Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 7 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 7 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Lys Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 8 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 8 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 9 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 9 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 10 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 10 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 1 5 10 15 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 25 30 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 50 55 60 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 75 80 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 85 90 95 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 11 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 11 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 12 <211> 330 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 12 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 225 230 235 240 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 13 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 13 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 14 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 14 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Xaa Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 15 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 15 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Xaa Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 16 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 16 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Xaa Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 17 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 17 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Xaa Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 18 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 18 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Xaa Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 19 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 19 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Xaa Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 20 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 20 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Xaa Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 21 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 21 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Xaa Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 22 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <220> <221> MISC_FEATURE <222> (97)..(97) <223> Xaa = Ala, Leu or Val <400> 22 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Xaa Pro Leu Thr 85 90 95 Xaa Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 23 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 23 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Ala Pro Leu Thr 85 90 95 Ala Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 24 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (107)..(107) <223> Xaa = Ala, Leu, Tyr or Val <400> 24 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Xaa Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 25 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (107)..(107) <223> Xaa = Ala, Leu, Tyr or Val <400> 25 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Lys Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Xaa Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 26 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (107)..(107) <223> Xaa = Ala, Leu, Tyr or Val <400> 26 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Lys Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Xaa Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 27 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (107)..(107) <223> Xaa = Ala, Leu, Tyr or Val <400> 27 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Xaa Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 28 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (107)..(107) <223> Xaa = Ala, Leu, Tyr or Val <400> 28 Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Xaa Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 29 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 29 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Ala Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 30 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 30 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Arg Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Cys Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Phe Pro Leu Thr 85 90 95 Ala Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 31 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 31 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Gln Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Asp Ser Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Thr Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Gly Met Tyr Phe Cys 85 90 95 Val Arg Val Gly Tyr Asp Ala Leu Asp Tyr Ala Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115

Claims (28)

  1. 서열번호 1, 2, 3 및 4로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5, 6, 7, 8 및 9로 이루어진 그룹으로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서,
    상기 경쇄 가변 영역의 Phe 97 및 Phe 93으로부터 선택된 위치에서 Ala, Leu 또는 Val로의 적어도 하나의 아미노산 치환, 또는 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 Ala, Leu, Val 또는 Tyr로의 치환을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  2. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역의 Phe 97의 치환 및 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 아미노산 치환을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  3. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역의 Phe 93의 아미노산 치환 및 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 아미노산 치환을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  4. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역이 서열번호 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 및 21로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  5. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역이 서열번호 14 또는 15 중의 어느 하나에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  6. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역이 서열번호 29에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  7. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역이 서열번호 30에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  8. 제1항에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 24, 25, 26, 27 및 28로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  9. 제1항에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 24에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  10. 제1항에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역이 서열번호 31에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  11. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역의 Thr 5, Thr 20, Cys 71, Asn 75 및 Ser 76 및 중쇄 가변 영역의 Asp 54 및 Ser 55로 이루어진 그룹으로부터 선택된 위치에서 적어도 하나의 아미노산 변이를 추가로 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  12. 제1항에 있어서, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역의 조합을 포함하고, 상기 조합이 서열번호 5/서열번호 1, 서열번호 6/서열번호 2, 서열번호 7/서열번호 2, 서열번호 7/서열번호 3, 서열번호 8/서열번호 3 및 서열번호 7/서열번호 1로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  13. 제1항에 있어서, 서열번호 5/서열번호 1에 상응하는 가변 영역을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  14. 제1항에 있어서, mBAT-1과 유사하거나 이보다 큰 항종양 활성을 갖는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  15. 제1항에 있어서, hBAT-1과 유사하거나 이보다 큰 항종양 활성을 갖는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  16. 제1항에 있어서, 인간화된 항체의 단편이 Fv, F(ab'), F(ab')2 및 단일쇄 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  17. 제1항 내지 제13항 중의 어느 한 항에 따르는 항체 또는 이의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열.
  18. 제17항의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터.
  19. 제18항의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터를 함유하는 숙주 세포.
  20. 활성 성분으로서 제1항 내지 제13항 중의 어느 한 항의 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 및 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 안정화제를 포함하는, 약제학적 조성물.
  21. 제20항에 있어서, 암의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
  22. 제20항에 따르는 유효량의 약제학적 조성물을 대상체에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서 암 또는 면역결핍 질환을 치료하는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 상기 대상체가 고형 종양 또는 비-고형 종양으로부터 선택된 종양을 갖는, 방법.
  24. 제22항에 있어서, 상기 대상체가 비-고형 종양을 갖는, 방법.
  25. 제24항에 있어서, 상기 대상체가 혈액암(hematologic malignancy)을 갖는, 방법.
  26. 제23항에 있어서, 상기 암이 대장암, 비-소세포 폐암(NSCLC), 소세포 폐암(SCLC), 유방암; 흑색종; 난소암, 자궁경부암, 췌장암, 두경부암, 위장암, 식도 종양, 간세포 암종, 다발성 골수종, 신장 세포암, 전립선 종양, 비-호지킨 림프종, 호지킨 질환, 외투 세포 림프종, 카포시 육종, 편평 세포암, 기저 세포암, 급성 골수 백혈병(AML), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 림프구성 백혈병(ALL) 및 만성 림프구성 백혈병(CLL)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 암이 대장암, 흑색종, 췌장암, 두경부암, 식도 종양, 다발성 골수종, 신장 세포암, 비-호지킨 림프종 및 호지킨 질환으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
  28. 종양 치료용 의약품을 제조하기 위한,
    서열번호 1 내지 4로부터 선택된 경쇄 가변 영역 및 서열번호 5 내지 9로부터 선택된 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 경쇄 가변 영역의 Phe 97 및 Phe 93으로부터 선택된 위치에서 Ala, Leu 또는 Val로의 적어도 하나의 아미노산 치환, 또는 중쇄 가변 영역의 Trp 107의 Ala, Leu, Tyr 또는 Val로의 치환을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 용도.
KR1020137034590A 2011-07-24 2012-07-23 인간화된 면역조절 모노클로날 항체의 변이체 KR20140041598A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161511055P 2011-07-24 2011-07-24
US61/511,055 2011-07-24
PCT/IL2012/050267 WO2013014668A1 (en) 2011-07-24 2012-07-23 Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20140041598A true KR20140041598A (ko) 2014-04-04

Family

ID=47555917

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137034590A KR20140041598A (ko) 2011-07-24 2012-07-23 인간화된 면역조절 모노클로날 항체의 변이체

Country Status (12)

Country Link
US (2) US8686119B2 (ko)
EP (1) EP2734551B1 (ko)
JP (1) JP6240600B2 (ko)
KR (1) KR20140041598A (ko)
AU (1) AU2012288413B2 (ko)
BR (1) BR112013032552A2 (ko)
CA (1) CA2840018C (ko)
ES (1) ES2664622T3 (ko)
IL (1) IL230057A (ko)
LT (1) LT2734551T (ko)
RU (1) RU2604814C2 (ko)
WO (1) WO2013014668A1 (ko)

Families Citing this family (162)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL3409278T3 (pl) 2011-07-21 2021-02-22 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Heterocykliczne inhibitory kinazy białkowej
CA2840018C (en) * 2011-07-24 2019-07-16 Curetech Ltd. Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies
CN112587658A (zh) 2012-07-18 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
US20150329638A1 (en) * 2012-12-28 2015-11-19 Biogen Ma Inc. Use of DR6 Antagonists to Improve Motor Neuron Disease
US9580504B1 (en) 2013-11-07 2017-02-28 Curetech Ltd. Pidilizumab monoclonal antibody therapy following stem cell transplantation
SG11201605455YA (en) 2014-01-10 2016-08-30 Birdie Biopharmaceuticals Inc Compounds and compositions for treating egfr expressing tumors
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
WO2015134605A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of renal cancer using a combination of an anti-pd-1 antibody and another anti-cancer agent
KR20230144099A (ko) 2014-05-15 2023-10-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항암제의 조합물을 사용한 폐암의 치료
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
AU2015286043B2 (en) 2014-07-09 2020-08-20 Birdie Biopharmaceuticals Inc. Anti-PD-L1 combinations for treating tumors
CN105440135A (zh) 2014-09-01 2016-03-30 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
LT3179992T (lt) 2014-08-11 2022-06-27 Acerta Pharma B.V. Btk inhibitoriaus, pd-1 inhibitoriaus ir (arba) pd-l1 inhibitoriaus terapiniai deriniai
WO2016128912A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor, a pd-1 inhibitor, and/or a pd-l1 inhibitor
ES2861352T3 (es) 2015-04-28 2021-10-06 Bristol Myers Squibb Co Tratamiento del melanoma positivo para PD-L1 utilizando un anticuerpo anti-PD-1
US10174113B2 (en) 2015-04-28 2019-01-08 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of PD-L1-negative melanoma using an anti-PD-1 antibody and an anti-CTLA-4 antibody
MA44594B1 (fr) 2015-05-29 2020-09-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anticorps anti-ctla-4 et méthodes d'utilisation de ceux-ci
KR20180011117A (ko) 2015-05-31 2018-01-31 큐어제닉스 코포레이션 면역 요법용 복합 조성물
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
TW201709929A (zh) 2015-06-12 2017-03-16 宏觀基因股份有限公司 治療癌症的聯合療法
EA201890285A1 (ru) 2015-07-13 2018-08-31 Сайтомкс Терапьютикс, Инк. Антитела против pd-1, активируемые антитела против pd-1 и способы их применения
EP3328419B1 (en) 2015-07-30 2021-08-25 MacroGenics, Inc. Pd-1-binding molecules and methods of use thereof
JP2018526989A (ja) 2015-08-07 2018-09-20 ピエリス ファーマシューティカルズ ゲーエムベーハー Ｌａｇ−３およびｐｄ−１に特異的な新規融合ポリペプチド
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
MX2018003689A (es) 2015-09-29 2018-04-30 Celgene Corp Proteinas de union a pd-1 y metodos para usarlas.
KR102146319B1 (ko) 2015-10-02 2020-08-25 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pd1 및 tim3에 특이적인 이중특이성 항체
MA45429A (fr) 2015-10-08 2019-05-01 Macrogenics Inc Polythérapie pour le traitement du cancer
MX2018005517A (es) 2015-11-02 2018-11-09 Five Prime Therapeutics Inc Polipeptidos del dominio extracelular de cd80 y su uso en el tratamiento del cancer.
AU2016359609B2 (en) 2015-11-23 2023-12-07 Five Prime Therapeutics, Inc. FGFR2 inhibitors alone or in combination with immune stimulating agents in cancer treatment
AU2016370376B2 (en) 2015-12-14 2023-12-14 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules having immunoreactivity with PD-1 and CTLA-4, and methods of use thereof
MA44146B1 (fr) 2015-12-22 2023-10-31 Regeneron Pharma Combinaison d'anticorps anti-pd-1 et d'anticorps bispécifiques anti-cd20/anti-cd3 pour traiter le cancer
CN115554406A (zh) 2016-01-07 2023-01-03 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-cd20组合
CN106943598A (zh) 2016-01-07 2017-07-14 博笛生物科技（北京）有限公司 用于治疗肿瘤的抗-her2组合
CN115252792A (zh) 2016-01-07 2022-11-01 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-egfr组合
ES2839408T3 (es) 2016-01-13 2021-07-05 Acerta Pharma Bv Combinaciones terapéuticas de un antifolato y un inhibidor de BTK
US11180546B2 (en) 2016-02-17 2021-11-23 Novartis Ag TGFbeta 2 antibodies
TWI822521B (zh) 2016-05-13 2023-11-11 美商再生元醫藥公司 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
KR20230091191A (ko) 2016-05-27 2023-06-22 아게누스 인코포레이티드 항-tim-3 항체 및 이의 사용 방법
CA3029813A1 (en) 2016-06-13 2017-12-21 Torque Therapeutics, Inc. Methods and compositions for promoting immune cell function
KR20190068521A (ko) 2016-09-09 2019-06-18 티지 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 혈액암을 치료하기 위한 항-cd20 항체, pi3 키나아제-델타 억제제, 및 항-pd-1 또는 항-pd-l1 항체의 조합
US10766958B2 (en) 2016-09-19 2020-09-08 Celgene Corporation Methods of treating vitiligo using PD-1 binding antibodies
JP2019531284A (ja) 2016-09-19 2019-10-31 セルジーン コーポレイション Ｐｄ−１結合タンパク質を使用して免疫障害を治療する方法
WO2018071500A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Agenus Inc. Anti-lag-3 antibodies and methods of use thereof
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
UY37463A (es) 2016-11-02 2018-05-31 Glaxosmithkline Ip No 2 Ltd Proteínas de unión
US11279694B2 (en) 2016-11-18 2022-03-22 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
WO2018098352A2 (en) 2016-11-22 2018-05-31 Jun Oishi Targeting kras induced immune checkpoint expression
BR112019011651A2 (pt) 2016-12-07 2020-01-07 Agenus Inc. Anticorpos anti-cttla-4 e métodos de uso dos mesmos
CN110300599A (zh) 2016-12-07 2019-10-01 艾吉纳斯公司 抗体和其使用方法
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11034667B2 (en) 2017-01-09 2021-06-15 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
BR112019014510A2 (pt) 2017-01-13 2020-02-18 Agenus Inc. Receptores de célula t que se ligam ao ny-eso-1 e métodos de uso dos mesmos
WO2018134279A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptides specific for lag-3 and pd-1
US20200237874A1 (en) 2017-01-20 2020-07-30 Novartis Ag Combination therapy for the treatment of cancer
KR20190115053A (ko) 2017-02-10 2019-10-10 노파르티스 아게 1-(4-아미노-5-브로모-6-(1h-피라졸-1-일)피리미딘-2-일)-1h-피라졸-4-올 및 암 치료에 있어서의 이의 용도
KR20240011262A (ko) 2017-02-21 2024-01-25 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 폐암의 치료를 위한 항-pd-1 항체
EP3585431A4 (en) 2017-02-24 2020-12-16 MacroGenics, Inc. BISPECIFIC BINDING MOLECULES CAPABLE OF BINDING TO CD137 AND TUMOR ANTIGENS, AND THEIR USES
PE20191494A1 (es) 2017-04-03 2019-10-21 Hoffmann La Roche Inmunoconjugados de un anticuerpo anti-pd-1 con un il-2 mutante o con il-15
CN116375876A (zh) 2017-04-05 2023-07-04 豪夫迈·罗氏有限公司 特异性结合pd1和lag3的双特异性抗体
US11603407B2 (en) 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
BR112019017241A2 (pt) 2017-04-13 2020-04-14 Agenus Inc anticorpos anti-cd137 e métodos de uso dos mesmos
CN108728444A (zh) 2017-04-18 2018-11-02 长春华普生物技术股份有限公司 免疫调节性多核苷酸及其应用
CN108794467A (zh) 2017-04-27 2018-11-13 博笛生物科技有限公司 2-氨基-喹啉衍生物
EP3628070B1 (en) 2017-04-28 2021-09-08 Five Prime Therapeutics, Inc. Cd80 extracellular domain polypeptides for use in increasing central memory t cells
US11021537B2 (en) 2017-05-01 2021-06-01 Agenus Inc. Anti-TIGIT antibodies and methods of use thereof
US11685787B2 (en) 2017-05-16 2023-06-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of cancer with anti-GITR agonist antibodies
AR111760A1 (es) 2017-05-19 2019-08-14 Novartis Ag Compuestos y composiciones para el tratamiento de tumores sólidos mediante administración intratumoral
CA3060984A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lag-3 positive tumors
EP3630179A2 (en) 2017-05-30 2020-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising an anti-lag-3 antibody or an anti-lag-3 antibody and an anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody
JOP20190279A1 (ar) 2017-05-31 2019-11-28 Novartis Ag الصور البلورية من 5-برومو -2، 6-داي (1h-بيرازول -1-يل) بيريميدين -4- أمين وأملاح جديدة
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
EP3641812A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag ANTIBODY MOLECULES DIRECTED AGAINST CD73 AND CORRESPONDING USES
US11517567B2 (en) 2017-06-23 2022-12-06 Birdie Biopharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions
CA3066747A1 (en) 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
US20200172617A1 (en) 2017-07-20 2020-06-04 Novartis Ag Dosage regimens of anti-lag-3 antibodies and uses thereof
JP7387585B2 (ja) 2017-09-04 2023-11-28 アジェナス インコーポレイテッド 混合系統白血病（ｍｌｌ）特異的ホスホペプチドに結合するｔ細胞受容体およびその使用方法
JP7196160B2 (ja) 2017-09-12 2022-12-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤アルボシジブを用いた、ｂｃｌ－２阻害剤に対して非感受性である癌の治療レジメン
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
CN111655288A (zh) 2017-11-16 2020-09-11 诺华股份有限公司 组合疗法
KR20200096253A (ko) 2017-11-30 2020-08-11 노파르티스 아게 Bcma-표적화 키메라 항원 수용체, 및 이의 용도
WO2019136432A1 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Novartis Ag Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
CN112004537A (zh) 2018-01-09 2020-11-27 穿梭药业公司 用于治疗人疾病的选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂
CN111770936A (zh) 2018-01-12 2020-10-13 百时美施贵宝公司 抗il-8抗体和抗pd-1抗体联合治疗用于治疗癌症
CA3096287A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
WO2019149716A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies comprising an antigen-binding site binding to lag3
CA3090249A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
EP3752203A1 (en) 2018-02-13 2020-12-23 Novartis AG Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
BR112020020826A2 (pt) 2018-04-12 2021-01-19 Bristol-Myers Squibb Company Terapia de combinação anticâncer com anticorpo antagonista de cd73 e anticorpo antagonista do eixo pd-1/pd-l1
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
CA3096909A1 (en) 2018-04-26 2019-10-31 Agenus Inc. Heat shock protein-binding peptide compositions and methods of use thereof
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CN112384531A (zh) 2018-06-01 2021-02-19 诺华股份有限公司 针对bcma的结合分子及其用途
TW202005985A (zh) 2018-06-21 2020-02-01 美商再生元醫藥公司 用雙特異性抗ＣＤ３ｘＭＵＣ１６抗體及抗ＰＤ－１抗體治療癌症的方法
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
JP2021532143A (ja) 2018-07-26 2021-11-25 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company 癌の処置のためのｌａｇ−３併用療法
WO2020021061A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Humanized anti-pd-1 antibodies and uses thereof
US20210246219A1 (en) 2018-08-27 2021-08-12 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Combination therapies comprising cd137/her2 bispecific agents and pd-1 axis inhibitors and uses thereof
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
WO2020044252A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Novartis Ag Dosage regimes for anti-m-csf antibodies and uses thereof
WO2020049534A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Novartis Ag Sting agonist and combination therapy thereof for the treatment of cancer
BR112021003678A2 (pt) 2018-09-20 2021-05-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. métodos para criopreservar tecido de tumor, para fabricar, para preparar e para expandir linfócitos infiltrantes de tumor, para tratar um indivíduo com câncer e para tratar câncer para um indivíduo humano, e, fragmento de tumor criopreservado .
WO2020080715A1 (ko) 2018-10-15 2020-04-23 연세대학교 산학협력단 생산성이 향상된 항체 및 이의 제조방법
EP3867409A1 (en) 2018-10-16 2021-08-25 Novartis AG Tumor mutation burden alone or in combination with immune markers as biomarkers for predicting response to targeted therapy
CN113038939A (zh) 2018-11-14 2021-06-25 瑞泽恩制药公司 损害内施用pd-1抑制剂用于治疗皮肤癌
MX2021006544A (es) 2018-12-04 2021-07-07 Sumitomo Pharma Oncology Inc Inhibidores de cinasa dependiente de ciclina 9 (cdk9) y polimorfos de los mismos para uso como agentes para el tratamiento de cancer.
EP3923940A1 (en) 2019-02-12 2021-12-22 Novartis AG Pharmaceutical combination comprising tno155 and a pd-1 inhibitor
JP2022520361A (ja) 2019-02-12 2022-03-30 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド 複素環式タンパク質キナーゼ阻害剤を含む製剤
SG11202108089SA (en) 2019-02-28 2021-08-30 Regeneron Pharma Administration of pd-1 inhibitors for treating skin cancer
JP2022523804A (ja) 2019-03-06 2022-04-26 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド がんの処置における増強された有効性のためのｉｌ－４／ｉｌ－１３経路阻害剤
JP2022525149A (ja) 2019-03-20 2022-05-11 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド ベネトクラクスが失敗した急性骨髄性白血病（ａｍｌ）の処置
JP2022519923A (ja) 2019-03-22 2022-03-25 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｐｋｍ２モジュレーターを含む組成物およびそれを使用する処置の方法
MX2021013815A (es) 2019-05-13 2021-12-14 Regeneron Pharma Combinacion de inhibidores de pd-1 e inhibidores de lag-3 para mejorar la eficacia en el tratamiento contra el cancer.
KR20220041080A (ko) 2019-06-18 2022-03-31 얀센 사이언시즈 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 B형 간염 바이러스(hbv) 백신 및 항-pd-1 또는 항-pc-l1 항체의 조합
CN114206379A (zh) 2019-06-18 2022-03-18 爱尔兰詹森科学公司 乙型肝炎病毒(hbv)疫苗和抗pd-1抗体的组合
MX2022000164A (es) 2019-07-03 2022-04-01 Sumitomo Pharma Oncology Inc Inhibidores de tirosina cinasa no receptora 1 (tnk1) y usos de los mismos.
GB201912107D0 (en) 2019-08-22 2019-10-09 Amazentis Sa Combination
BR112022003740A2 (pt) 2019-08-30 2022-05-31 Agenus Inc Anticorpos anti-cd96 e métodos de uso dos mesmos
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
EP4031578A1 (en) 2019-09-18 2022-07-27 Novartis AG Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
BR112022007179A2 (pt) 2019-10-21 2022-08-23 Novartis Ag Inibidores de tim-3 e usos dos mesmos
TW202128166A (zh) 2019-10-21 2021-08-01 瑞士商諾華公司 組合療法
US20220395553A1 (en) 2019-11-14 2022-12-15 Cohbar, Inc. Cxcr4 antagonist peptides
US20230000864A1 (en) 2019-11-22 2023-01-05 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Solid dose pharmaceutical composition
CN115052662A (zh) 2019-12-20 2022-09-13 诺华股份有限公司 抗TGFβ抗体和检查点抑制剂用于治疗增殖性疾病的用途
US20230058489A1 (en) 2020-01-17 2023-02-23 Novartis Ag Combination comprising a tim-3 inhibitor and a hypomethylating agent for use in treating myelodysplastic syndrome or chronic myelomonocytic leukemia
KR20220132598A (ko) 2020-01-28 2022-09-30 제넨테크, 인크. 암 치료를 위한 IL15/IL15R 알파 이종이량체 Fc-융합 단백질
AU2021225491A1 (en) 2020-02-28 2022-10-20 Novartis Ag A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, an Erk inhibitor and a RAF inhibitor
MX2022013031A (es) 2020-04-21 2023-01-04 Novartis Ag Regimen de dosificacion para el tratamiento de una enfermedad modulada por csf-1r.
CA3176356A1 (en) 2020-04-22 2021-10-28 Anne BROOKS Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
EP4157464A1 (en) 2020-05-26 2023-04-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cervical cancer by administering the pd-1 inhibitor antibody cemiplimab
WO2022009157A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Novartis Ag Lhc165 and spartalizumab combinations for treating solid tumors
WO2022046833A1 (en) 2020-08-26 2022-03-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer by administering a pd-1 inhibitor
WO2022043558A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230321285A1 (en) 2020-08-31 2023-10-12 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
JP2023542490A (ja) 2020-09-03 2023-10-10 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｐｄ－１阻害剤を投与することによりがん疼痛を処置する方法
US20230374160A1 (en) 2020-10-02 2023-11-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of antibodies for treating cancer with reduced cytokine release syndrome
AU2021373366A1 (en) 2020-11-06 2023-06-01 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
CA3202218A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Century Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptor systems with adaptable receptor specificity
JP2024506557A (ja) 2021-01-29 2024-02-14 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 修飾された腫瘍浸潤リンパ球を作製する方法及び養子細胞療法におけるそれらの使用
JP2024505049A (ja) 2021-01-29 2024-02-02 ノバルティス アーゲー 抗ｃｄ７３及び抗ｅｎｔｐｄ２抗体のための投与方式並びにその使用
WO2022204672A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer in immunosuppressed or immunocompromised patients by administering a pd-1 inhibitor
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
CA3213079A1 (en) 2021-04-13 2022-10-20 Kristin Lynne ANDREWS Amino-substituted heterocycles for treating cancers with egfr mutations
KR20240014054A (ko) 2021-05-26 2024-01-31 센트로 데 인뮤놀러지아 모레큘러 상피 유래 종양을 가진 환자를 치료하기 위한 치료용 조성물의 용도
WO2023004287A1 (en) 2021-07-19 2023-01-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of checkpoint inhibitors and an oncolytic virus for treating cancer
WO2023015198A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 Genentech, Inc. Il15/il15r alpha heterodimeric fc-fusion proteins for the expansion of nk cells in the treatment of solid tumours
WO2023133280A1 (en) 2022-01-07 2023-07-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating recurrent ovarian cancer with bispecific anti-muc16 x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2023147488A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods
WO2023159102A1 (en) 2022-02-17 2023-08-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combinations of checkpoint inhibitors and oncolytic virus for treating cancer
WO2023161453A1 (en) 2022-02-24 2023-08-31 Amazentis Sa Uses of urolithins
WO2023177772A1 (en) 2022-03-17 2023-09-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating recurrent epithelioid sarcoma with bispecific anti-muc16 x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2023192478A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-il-8 antibodies and anti-pd-1 antibodies for treating cancer
WO2023224912A1 (en) 2022-05-16 2023-11-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating metastatic castration-resistant prostate cancer with bispecific anti-psma x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2024023740A1 (en) 2022-07-27 2024-02-01 Astrazeneca Ab Combinations of recombinant virus expressing interleukin-12 with pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2024030453A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating metastatic castration-resistant prostate cancer with bispecific anti-psma x anti-cd28 antibodies in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2024040175A1 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Pulmatrix Operating Company, Inc. Methods for treating cancer using inhaled angiogenesis inhibitor
WO2024076926A1 (en) 2022-10-03 2024-04-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer with bispecific egfr x cd28 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
IL108501A (en) 1994-01-31 1998-10-30 Mor Research Applic Ltd Antibodies and pharmaceutical compositions containing them
US6417337B1 (en) * 1996-10-31 2002-07-09 The Dow Chemical Company High affinity humanized anti-CEA monoclonal antibodies
US6884879B1 (en) * 1997-04-07 2005-04-26 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
IL129299A0 (en) 1999-03-31 2000-02-17 Mor Research Applic Ltd Monoclonal antibodies antigens and diagnosis of malignant diseases
WO2003012105A2 (en) 2001-08-01 2003-02-13 University Of Bristol Vegf isoform
IL149820A0 (en) * 2002-05-23 2002-11-10 Curetech Ltd Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency
US7322582B2 (en) * 2003-07-17 2008-01-29 Mind Wurx, Llc Enhanced shopping cart with lowered center of gravity and frame therefor
FI20050753A (fi) * 2004-09-03 2006-03-04 Licentia Oy Uudet peptidit
ES2639857T3 (es) 2008-02-11 2017-10-30 Cure Tech Ltd. Anticuerpos monoclonales para el tratamiento del tumor
CA2840018C (en) * 2011-07-24 2019-07-16 Curetech Ltd. Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
US20140220010A1 (en) 2014-08-07
AU2012288413B2 (en) 2016-10-13
BR112013032552A2 (pt) 2017-12-12
US9416175B2 (en) 2016-08-16
IL230057A (en) 2017-08-31
EP2734551A1 (en) 2014-05-28
EP2734551A4 (en) 2015-03-18
EP2734551B1 (en) 2018-01-10
RU2014106671A (ru) 2015-08-27
ES2664622T3 (es) 2018-04-20
JP6240600B2 (ja) 2017-11-29
CA2840018A1 (en) 2013-01-31
US8686119B2 (en) 2014-04-01
US20130022595A1 (en) 2013-01-24
JP2015508280A (ja) 2015-03-19
RU2604814C2 (ru) 2016-12-10
CN103687877A (zh) 2014-03-26
CA2840018C (en) 2019-07-16
WO2013014668A1 (en) 2013-01-31
LT2734551T (lt) 2018-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2012288413B2 (en) Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies
AU2012288413A1 (en) Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies
US9309308B2 (en) Monoclonal antibodies for tumor treatment
EP3497130B1 (en) Combination therapy for cancer
EP3344658B1 (en) Antibodies specific to human t-cell immunoglobulin and itim domain (tigit)
CN107530419B (zh) 治疗疾病的组合疗法
AU782994B2 (en) Treatment of refractory human tumors with epidermal growth factor receptor antagonists
WO2019189780A1 (ja) 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物
KR102239752B1 (ko) 종양 특이적 약물복합체와 항pd-l1 항체를 유효성분으로 하는 암 예방 또는 치료를 위한 병용 투여용 약학 조성물
CN103687877B (zh) 人源化免疫调节单克隆抗体的变体
US20240010696A1 (en) IL-12 Variants and Uses Thereof
CN116059377A (zh) 抗ox40抗体在联合用药中的应用
AU2015201986A1 (en) Monoclonal antibodies for tumor treatment

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right