KR20050013148A - 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물 - Google Patents

인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물

Info

Publication number
KR20050013148A
KR20050013148A KR10-2004-7020858A KR20047020858A KR20050013148A KR 20050013148 A KR20050013148 A KR 20050013148A KR 20047020858 A KR20047020858 A KR 20047020858A KR 20050013148 A KR20050013148 A KR 20050013148A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
factor vii
fvii
polyol
mannitol
Prior art date
Application number
KR10-2004-7020858A
Other languages
English (en)
Inventor
젠슨마이클베흐
한슨버드리케가아르드
코른펠트트로엘스
Original Assignee
노보 노르디스크 에이/에스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34178323&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR20050013148(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 노보 노르디스크 에이/에스 filed Critical 노보 노르디스크 에이/에스
Publication of KR20050013148A publication Critical patent/KR20050013148A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4846—Factor VII (3.4.21.21); Factor IX (3.4.21.22); Factor Xa (3.4.21.6); Factor XI (3.4.21.27); Factor XII (3.4.21.38)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21021—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 화학적으로는 물론 물리적으로 안정한, 인자 Ⅶ 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드를 포함하는 조성물에 관련되며 이러한 조성물은 실온에서 저장, 취급 및 사용될 수 있다. 조성물은 a) 산화방지제 및 만니톨의 조합, b) 메티오닌 및 폴리올의 조합, c) 당류 및 만니톨의 조합, d) 수크로스 및 폴리올의 조합 및 e) 메티오닌으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함한다. 산화방지제는 예를 들어, 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌 또는 글루타티온이다. 당류는 예를 들어, 수크로스, 덱스트로즈, 락토오즈, 말토오즈, 트레할로즈, 시클로덱스트린, 말토덱스트린 또는 덱스트란이다. 폴리올은 예를 들어, 만니톨, 소르비톨 또는 자일리톨이다.

Description

인자 Ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물{STABILISED SOLID COMPOSITIONS OF FACTOR Ⅶ POLYPEPTIDES}
인자 Ⅶ은 혈액 응고 과정에 포함되는 폴리펩티드이다. 현재, 인자 Ⅶa는 재조합 기술에 의해 제조될 수 있고 (rFⅦa) 전-지혈제로써 널리 사용된다. 인자 Ⅶ (인간 야생형)은 미국 특허 제 4,784, 950호에서 설명되었다. rFⅦa는 현재 출혈을 경험하는 혈우병 환자에서 신속하고 고효율적인 전-지혈 반응을 제공한다.
유리하게, rFⅦa는 항체 형성으로 인해 다른 응고 인자 제품으로는 치료될 수 없는 혈우병 환자를 치료하는데 사용될 수 있다. 또한 인자 Ⅶ 결핍증에 걸린 개체 또는 정상적인 응고 시스템을 갖되 여전히 과량의 출혈이 있는 개체는 rFⅦa로 성공적으로 치료될 수 있다.
인자 Ⅶa와 같은 폴리펩티드를 포함하는 약물의 개발 시, 몇몇 매개변수를 고려할 필요가 있다. 예를 들어, 약물은 효과적이고, 안전하며 양호한 환자 순응을 유도할 필요가 있다. 더욱이, 약물은 약제학적으로 허용되는 부형제를 이용하여 비경구 투여용으로 제제될 수 있는데, 이러한 부형제는 다양한 전세계 의료 조절 기구의 승인을 받아야 할 것이다. 비경구 투여를 위해서, 제제는 대략적으로 등장 상태이고 제제의 pH는 주사/주입 후 생리학적으로 적합한 범위 내에 있는 것이 매우 바람직하며, 그렇지 않을 경우 환자에게 고통 및 불쾌감을 일으킬 수 있다. 단백질 제제의 일반적인 리뷰는, 예를 들어, Cleland et al. : The development of stable protein formulations : A closer look at protein aggregation, deamidation and oxidation, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 1993,10 (4): 307-377; 및 Wang et al., Parenteral formulations of proteins and peptides: Stability and stabilizers, Journal of Parenteral Science and Technology 1988 (부록), 42 (2S)를 참조한다.
그러나, 폴리펩티드를 포함하는 약물에 있어서 안전성은 폴리펩티드의 물리적 및 화학적 안정성과 직접 관련될 수 있다. 폴리펩티드가 되면, 인자 Ⅶ 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드는 이합체, 올리고머 및 다합체의 형태로 존재하는 가용성 또는 비가용성 응집체의 형성과 같은 변성 및 응집을 포함하는 물리적 분해, 또는 예를 들어, 가수분해, 탈아민화 및 산화를 포함하는 화학적 분해가 일어나기 쉽다. 결과적으로, 상기 물리적 및 화학적 불안정은 인자 Ⅶ 폴리펩티드 활성의 손실, 독성 및 면역원성 분해 생성물의 형성, 분해된 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 주사 후 도입되는 혈전증의 심각한 위험, 주사에 사용된 바늘의 폐쇄 및 비-상동성의 위험을 일으킬 수 있다.
따라서, 물리적 및 화학적 분해에 대하여 안정화된 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 조성물을 제공하는 것이 중요하다.
오늘날, 재조합형으로 제조된 FⅦ 폴리펩티드는 약 2 내지 약 8℃ 사이의 온도에서 저장되는 것을 의미하는 냉동-건조된 제품으로서 제공된다. 냉각 상태의 요건은 제조업자 또는 공급자는 물론이고 최종 소비자 (환자)에게 부담을 야기하며 불편함을 준다.
현재 재조합형으로 제조된 FⅦ 제품은 1.2 mg의 재조합 인간 인자 Ⅶa, 5.84 mg NaCl, 2.94 mg CaCl2, 2 H2O, 2.64 mg 글리실글리신, 0.14 mg 폴리소르베이트 80 및 60.0 mg 만니톨로 구성된 NovoSeven® (Novo Nordisk A/S, Denmark)이다. 2.0 ml의 주사용수 (WFI)로 재구성하면, pH는 5.5이고 이렇게 제조된 FⅦ-함유 용액은 실온에서 24시간동안 충분히 안정하다.
본 발명자들은 동결건조된 NovoSeven® 제품을 25℃에서 6 개월동안 저장하면 초기 함량이 약 6 내지 7 질량 %인 rFⅦa가 응집체의 형태로 존재한다는 것을 밝혔다.
따라서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 조성물은 대기 온도에서의 저장 및 취급이 허용되도록 안정화될 필요가 있다. 그러나, 폴리펩티드의 불안정성은 몇몇 매개변수와 관련되고 인자 Ⅶa 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드를 안정화하는 고유의 방식을 예측하기는 불가능하다.
단백질을 안정화하는 하나의 접근 방법은 예를 들어, 단백질을 냉동-건조 공정에서 획득되는 최종 물질인 동결건조 케이크의 형태로 제공하는 것과 같이, 단백질로부터 물을 제거하는 것과 관련된다. 그러나, 냉동-건조 공정 자체는 또한 단백질에게 해가 되며; 냉동-건조 도중, 단백질 용액은 적당히 동결될 때까지 일단 냉각되고 단백질 용액 내의 벌크 물은 이 단계에서 얼음을 형성할 것이다. 이 결과 단백질은 동결-유발 스트레스를 받아 변형 및 침전이 일어나기 쉽다. 다음 단계인 소위 1차 건조 단계에서, 얼음이 승화하고 2차 건조 단계에서, 흡수 또는 결합된 물은 상승된 온도 하에서 제거된다. 이 수분 제거 도중에, 단백질은 주로 수소 결합을 통해 제공되는 그 고유의 구조를 잃을 수 있다.
그러므로, 냉동-건조 도중 단백질의 구조, 활성 및 안정성을 유지하기 위하여, 폴리펩티드 용액은 동결 건조 방지제 및/또는 동결 방지제 성질을 갖는 충분한 양의 고유한 부형제로 보충하여 동결-유발 스트레스 및/또는 수분 제거 도중의 스트레스로부터 각각 단백질을 보호할 필요가 있다.
게다가, 동결건조 제품을 제공할 때, 본질적인 특징은 동결건조 케이크의 성질에 관련된다. 이 케이크는 그것의 형태 및 구조에 있어서 양호한 성질을 가질 필요가 있는데, 즉 붕괴된 케이크는 사용하기 전에 용해(재구성)되기 어렵거나 심지어는 불가능할 수 있으므로 붕괴되지 말아야 한다. 역으로, 동결건조 케이크의 물리적 구조는 너무 느슨하거나 연하지 말아야 한다. 따라서, 하나 이상의 소위 벌크제가 냉동-건조 전에 단백질 용액에 첨가된다.
폴리펩티드의 관심 있는 관련 안정화에 관한 다른 출원은 다음과 같다 :
U. S. 20010031721 A1 (American Home Products)은 고도의 농축, 동결건조 및 액체 인자 IX 제제에 관련된다.
WO 97/26909 (Genetics Institute)는 저장 및 투여에 있어서 안정한 인자 IX의 동결건조 조제에 관련된다. 조제는 동결 방지제로서 수크로스 또는 만니톨을 포함할 수 있다.
WO 95/28954 (Genetics Institute)는 저장 및 투여에 있어서 안정한 인자 IX의 동결건조 조제에 관련된다. 조제는 동결 방지제로서 수크로스를 포함할 수 있다
본 발명의 목적은 안정한, 구체적으로 바람직하게는 대기 상태에서 예를 들어 적어도 6 개월 동안의 연장된 저장 후에도, 분해 생성물이 없고 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 활성 감소가 없는, 인자 Ⅶ 폴리펩티드 조성물을 제공하는 것이다. 더욱이, 안정한 조성물이 비경구 투여에 적합하여 환자에게 어떠한 불편도 야기하지 않도록 하는 것이 목적이다.
본 발명은 인자 Ⅶ 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드를 포함하는 물리적으로 뿐만 아니라 화학적으로 안정한 조성물에 관련되는 것으로 이러한 조성물은 실온에서 저장, 취급 및 사용될 수 있다.
발명의 개요
본 발명자들은 인자 Ⅶ 폴리펩티드가 적어도 약 8 개월 동안 실온에서 저장될 수 있도록 충분히 안정한 조성물로 제공될 수 있다는 것을 발견하였다. 안정화는 몇몇 약제학적으로 허용되는 부형제의 적당한 결합에 관련된다는 것을 발견하였다.
따라서, 본 발명은 첫 번째 양태에서 약 3%를 넘지 않는 수분 함량을 가지고 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및 a) 내지 e)로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 안정화된 조성물에 관련된다:
a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌.
나아간 양태에서, 본 발명은 안정한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 제법에 관련되는데, 이 제법은 :
i) a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 용액으로 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 제공하는 단계;
ii) 약 3 % w/w 이하의 수분 함량을 갖는 고체 조성물을 얻기 위해 상기 용액을 프로세싱하는 단계를 포함한다.
언급한 바와 같이, 안정화된 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 치료 목적을 위해 인자 V 폴리펩티드를 투여할 때 불리한 사건의 위험을 최소화하고 안전성 및 효능을 개선하도록 요구된다. 그러므로, 본 발명의 더 나아간 양태는 인자 Ⅶ-반응성 증후군의 치료를 위한 약물의 조제에 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 사용에 관련되는데, 상기 약물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 조성물을 포함하고, 상기 조성물은 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는다.
결국, 본 발명은 인자 Ⅶ-반응성 증후군의 치료를 위해 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 투여하는 것에 관련되는데, 이러한 투여는 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하고, 상기 조성물은 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 저장-안정성 조성물에 관련된다.
조성물은 실온에서 장기간 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 실질적인 분해가 일어나지 않고 저장될 수 있다. 실온은 실내의 대기 온도를 의미하고; 보통은 약 5℃ 내지 약 40℃, 예를 들어 약 10℃ 내지 30℃, 또는 15℃ 내지 25℃의 범위이다.
약제학적으로 허용되는 특정한 부형제의 적당한 사전결정 조합에 의해, 본발명자들은 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 안정화된 조성물을 제공하였고, 따라서 적어도 약 8 개월과 같은 장기간 동안 실온에서 조성물이 저장되는 것이 허용되었다. 유리하게도, 안정화된 조성물은 2 내지 8℃와 같은 냉각된 조건에서 저장될 필요가 없다.
본 발명은 또한 약 30℃에서 적어도 약 8 개월 동안 저장해도 안정한 저장-안정성 조성물에 관련된다. 조성물은 음지에서 저장되는 것이 바람직하다. 따라서 본 발명은 이러한 조성물을 투여한 환자에게 불리한 사건의 위험이 증가하지 않고 실온에서 이러한 조성물을 저장하는 것을 가능하게 한다.
유리하게도, 개선된 저장-안정성은 저장에 있어서 특별한 냉각 상태를 요구하지 않으므로 비용을 감소시키고, 나아가 사용자로 하여금 조성물을 더욱 편리하게 취급하도록 할 수 있다.
용어 "인자 Ⅶ 폴리펩티드"는 출혈을 예방하거나 치료하는데 효과적인 어떠한 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 의미한다. 이것은 혈액 또는 혈장으로부터 유래되거나, 또는 재조합 수단에 의해 생산된 인자 V 폴리펩티드를 포함한다.
여기에서 사용될 때, "인자 Ⅶ 폴리펩티드"는 인자 Ⅶ은 물론이고, 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용어 "인자 Ⅶ"은 (미국 특허 제 4,784, 950호에 개시된 것과 같이) 야생형 인간 인자 Ⅶ의 아미노산 서열 1-406을 갖는 폴리펩티드는 물론이고, 예를 들어, 소, 돼지, 개, 취 및 연어와 같은 다른 종으로부터 유래된 야생형 인자 Ⅶ을 포함하지만 이에 제한되지 않고, 상기 인자 Ⅶ은 혈액 또는 혈장으로부터 유래되거나, 또는 재조합 수단에 의해 생산된다. 이미 존재하고 하나의 개체로부터 다른 것으로 발생할 수 있는 인자 Ⅶ의 천연 대립유전자 변이가 더 포함된다. 또한, 글리코실화 또는 다른 번역 후 변형의 정도 및 위치는 선택된 숙주 세포 및 숙주 세포 환경의 성질에 의존하여 변화할 수 있다. 용어 "인자 Ⅶ"은 또한 절단되지 않은 (효소원) 형태의 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 물론이고, 단백질 분해 공정이 일어난 그들 각각의 생물활성 형태를 포함하도록 의도되는데, 이는 인자 Ⅶa로 나타낼 수 있다. 전형적으로, 인자 Ⅶ은 152 및 153 잔기 사이에서 절단되어 인자 Ⅶa를 생산한다.
언급된 것과 같이, 용어 "인자 Ⅶ 폴리펩티드"는 또한 "인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드"를 의미하도록 나타난다. 용어 "인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드"는 절단되지 않은 (효소원) 형태의 폴리펩티드는 물론이고 단백질 분해 공정이 일어난 그들 각각의 생물활성 형태를 포함하도록 의도된다. 여기에서 사용될 때, "인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드"는 야생형 인간 인자 Ⅶ에 비하여 실질적으로 동일하거나 또는 개선된 생물학적 활성을 나타내는 폴리펩티드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 폴리펩티드는 화학적으로 변형된 인자 Ⅶ 또는 인자 Ⅶa 및 폴리펩티드의 생물학적 활성을 약간 변형하거나 개선하도록 특정 아미노산 서열의 변경이 도입된 인자 Ⅶ을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
더욱이, 실질적으로 야생형 인자 Ⅶ과 동일하거나 또는 더 양호한 생물학적 활성을 나타내는 인자 Ⅶ의 변체를 포함하는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드는 하나 이상의 아미노산의 삽입, 삭제, 또는 치환에 의해 야생형 인자 Ⅶ의 서열과 상이한 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
실질적으로 야생형 인자 Ⅶa에 비하여 동일하거나 또는 개선된 생물학적 활성을 갖는 변체를 포함하는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드는 본 명세서에 설명된 것과 같이 하나 이상의 응고 검정, 단백질 분해 검정, 또는 TF 결합 검정으로 시험될 때, 적어도 약 25%, 바람직하게는 적어도 약 50%, 더 바람직하게는 적어도 약 75%, 더욱 바람직하게는 적어도 약 100%, 더욱 바람직하게는 적어도 약 110%, 더욱 바람직하게는 적어도 약 120%, 및 가장 바람직하게는 적어도 약 130%의, 동일한 세포 타입에서 생산된 야생형 인자 Ⅶa의 특이적 활성을 나타내는 것들을 포함한다.
몇몇 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 특별한 변체로 존재하는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드인데, 여기에서 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 활성과 천연 인간 인자 Ⅶa (야생형 FⅦa)와의 활성 비율은 "시험관 내 가수분해 검정"(아래 실시예 9 참조)으로 시험했을 때 적어도 약 1.25이고 ; 다른 구체예에서, 비율은 적어도 약 2.0이고; 나아간 구체예에서, 비율은 적어도 약 4.0이다. 본 발명의 몇몇 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 특별한 변체로 존재하는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드인데, 여기에서 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 활성과 천연 인간 인자 Ⅶa (야생형 FⅦa)와의 활성 비율은 "시험관 내 가수분해 검정"(아래 실시예 9 참조)으로 시험했을 때 적어도 약 1.25이고 ; 다른 구체예에서, 비율은 적어도 약 2.0이고; 나아간 구체예에서, 비율은 적어도 약 4.0이고; 나아간 구체예에서, 비율은 적어도 약 8.0이다.
야생형 인자 Ⅶ과 실질적으로 동일하거나 또는 개선된 생물학적 활성을 갖는 인자 Ⅶ 변체는 S52A-FⅦ, S60A-FⅦ (Lino et al., Arch. Biochem. Biophys. 352:182-192,1998) ; L305V-FⅦ, L305V/M306D/D309S-FⅦ, L3051-FⅦ, L305T-FⅦ, F374P-FⅦ, V158T/M298Q-FⅦ, V158D/E296V/M298Q-FⅦ, K337A-FⅦ, M298Q-FⅦ, V158D/M298Q-FⅦ, L305WK337A-FⅦ, V158D/E296V/M298Q/L305V-FⅦ, V158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, V158D/E296V/M298Q/L305WK337A-FⅦ, K157A-FⅦ, E296V-FⅦ, E296WM298Q-FⅦ, V158D/E296V-FⅦ, V158D/M298K-FⅦ, 및 S336G-FⅦ ; 미국 특허 제 5,580, 560에 개시된 것과 같이 증가된 단백질 분해 안정성을 나타내는 FⅦa 변체 ; 290번 잔기 및 291번 잔기 사이 또는 315번 및 316번 잔기 사이에서 단백질 분해 절단된 인자 Ⅶa (Mollerup et al., Biotechnol. Bioeng. 48: 501-505,1995) ; 인자 Ⅶa의 산화된 형태 (Kornfelt et al., Arch. Biochem. Biophys. 363: 43-54,1999) ; PCT/DK02/00189에서 개시된 것과 같은 FⅦ 변체 ; WO 02/38162 (Scripps Research Institute)에서 개시된 것과 같은 증가된 단백질 분해 안정성을 나타내는 FⅦ 변체 ; WO 99/20767 (University of Minnesota)에 개시된 것과 같이 변형된 Gla-도메인을 가지며 향상된 막 결합을 나타내는 FⅦ 변체 ; WO 01/58935 (Maxygen ApS)에 개시된 것과 같은 FⅦ 변체 ; WO 01/83725, WO 02/22776, WO 02/077218, PCT/DK02/00635, 덴마크 특허 출원 PA 2002 01423, 덴마크 특허 출원 PA 2001 01627; WO 02/38162 (Scripps Research Institute)에 개시된 것과 같이 야생형 FⅦa에 비하여 증가된 생물학적 활성을 갖는 FⅦ 변체 ; 및 JP 2001061479 (Chemo-Sero-Therapeutic Res Inst.)에 개시된 것과 같이 향상된 활성을 갖는 FⅦa를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
인자 Ⅶ 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드의 예는 야생형 인자 Ⅶ, L305V-FⅦ,L305VWM306D/D309S-FⅦ, L3051-FⅦ, L305T-FⅦ, F374P-FⅦ, V158T/M298Q-FⅦ, V158D/E296V/M298Q-FⅦ, K337A-FⅦ, M298Q-FⅦ, V158D/M298Q-FⅦ, L305V/K337A-FⅦ, V158D/E296V/M298Q/L305V-FⅦ, V158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, V158D/E296V/ M298Q/L305V/K337A-FⅦ, K157A-FⅦ, E296V-FⅦ, E296WM298Q-FⅦ, V158D/E296V-FⅦ, V158D/M298K-FⅦ, 및 S336G-FⅦ, L305WK337A-FⅦ, L305VN158D-FⅦ, L305V/E296V-FⅦ, L305V/M298Q-FⅦ, L305VN158T-FⅦ, L305V/K337AN158T-FⅦ, L305V/K337A/M298Q-FⅦ, L305V/K337A/E296V-FⅦ, L305WK337AN158D-FⅦ, L305VN158D/M298Q-FⅦ, L305VN158D/E296V-FⅦ, L305VN158T/M298Q-FⅦ, L305VN158T/E296V-FⅦ, L305V/E296WM298Q-FⅦ, L305VN158D/E296V/M298Q-FⅦ, L305V/V158T/E296V/M298Q-FⅦ, L305V/V158T/K337A/M298Q-FⅦ, L305V/V158T/E296V/K337AFⅦ, L305VN158D/K337A/M298Q-FⅦ, L305VN158D/E296WK337A-FⅦ, L305VN158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, L305VN158T/E296WM298Q/K337A-FⅦ, S314E/K316H- FⅦ, 5314E/K316Q-FⅦ, S314E/L305V-FⅦ, S314E/K337A-FⅦ, S314EN158D-FⅦ, S314E/E296V-FⅦ, S314E/M298Q-FⅦ, S314EN158T-FⅦ, K316H/L305V-FⅦ, K316H/K337A-FⅦ, K316HN158D-FⅦ, K316H/E296V-FⅦ, K316H/M298Q-FⅦ, K316HN158T-FⅦ, K316Q/L305V-FⅦ, K316Q/K337A-FⅦ, K316QN158D-FⅦ, K316Q/E296V-FⅦ, K316Q/M298Q-FⅦ, K316QN158T-FⅦ, S314E/L305V/K337A-FⅦ, S314E/L305VN158D-FⅦ, 5314E/L305WE296V-FⅦ, S314E/L305V/M298Q- FⅦ, S314E/L305VN158T-FⅦ, S314E/L305V/K337AN158T-FⅦ, S314E/L305V/K337A/M298Q-FⅦ, S314E/L305V/K337A/E296V-FⅦ,S314E/L305WK337AN158D-FⅦ, S314E/L305VN158D/M298Q-FⅦ, S314E/L305VN158D/E296V-FⅦ, S314E/L305VN158T/M298Q-FⅦ, S314E/L305VN158T/E296V-FⅦ, S314E/L305WE296V/M298Q-FⅦ, S314E/L305VN158D/E296V/M298Q-FⅦ, S314E/L305VN158T/E296WM298Q-FⅦ, S314E/L305VN158T/K337A/M298Q-FⅦ, S314E/L305VN158T/E296V/K337A-FⅦ, S314E/L305VN158D/K337A/M298Q-FⅦ, S314E/L305VN158D/E296V/K337A-FⅦ, S314E/L305VN158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, S314E/L305VN158T/E296WM298Q/K337A-FⅦ, K316H/L305WK337A-FⅦ, K316H/L305VN158D- FⅦ, K316H/L305V/E296V-FⅦ, K316H/L305V/M298Q-FⅦ, K316H/L305V/V158T-FⅦ, K316H/L305V/K337AN158T-FⅦ, K316H/L305V/K337A/M298Q-FⅦ, K316H/L305WK337A/E296V- FⅦ, K316H/L305WK337AN158D-FⅦ, K316H/L305VN158D/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158D/E296V-FⅦ, K316H/L305VN158T/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158T/E296V-FⅦ, K316H/L305V/E296V/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158D/E296V/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158T/E296V/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158T/K337A/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158T/E296V/K337A-FⅦ, K316H/L305VN158D/K337A/M298Q-FⅦ, K316H/L305VN158D/E296WK337A-FⅦ, K316H/L305VN158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, K316H/L305VN158T/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, K316Q/L305V/K337A-FⅦ, K316Q/L305VN158D-FⅦ, K316Q/L305WE296V-FⅦ, K316Q/L305WM298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158T-FⅦ, K316Q/L305WK337AN158T-FⅦ, K316Q/L305V/K337A/M298Q-FⅦ, K316Q/L305V/K337A/E296V-FⅦ,K316Q/L305V/K337AN158D-FⅦ, K316Q/L305VN158D/M298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158D/E296V-FⅦ, K316Q/L305VN158T/M298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158T/E296V-FⅦ, K316Q/L305WE296WM298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158D/E296V/M298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158T/E296WM298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158T/K337A/M298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158T/E296WK337A-FⅦ, K316Q/L305VN158D/K337A/M298Q-FⅦ, K316Q/L305VN158D/E296V/K337A-FⅦ, K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, F374Y/K337A-FⅦ, F374Y/V158D-FⅦ, F374Y/E296V-FⅦ, F374Y/M298Q-FⅦ, F374YN158T-FⅦ, F374Y/S314E-FⅦ, F374Y/L305V-FⅦ, F374Y/L305V/K337A-FⅦ, F374Y/L305VN158D-FⅦ, F374Y/L305WE296V-FⅦ, F374Y/L305V/M298Q-FⅦ, F374Y/L305VN158T-FⅦ, F374Y/L305V/S314E-FⅦ, F374Y/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/K337AN158T-FⅦ, F374Y/K337A/M298Q-FⅦ, F374Y/K337A/E296V-FⅦ, F374Y/K337AN158D-FⅦ, F374YN158D/S314E-FⅦ, F374YN158D/M298Q-FⅦ, F374YN158D/E296V-FⅦ, F374YN158T/S314E-FⅦ, F374YN158T/M298Q-FⅦ, F374YN158T/E296V-FⅦ, F374Y/E296WS314EFⅦ, F374Y/S314E/M298Q-FⅦ, F374Y/E296V/M298Q-FⅦ, F374Y/L305V/K337AN158D-FⅦ, F374Y/L305WK337A/E296V-FⅦ, F374Y/L305WK337A/M298Q-FⅦ, F374Y/L305V/K337AN158T-FⅦ, F374Y/L305V/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V-FⅦ, F374Y/L305VN158D/M298Q-FⅦ, F374Y/L305VN158D/S314E-FⅦ, F374Y/L305WE296V/M298Q-FⅦ, F374Y/L305WE296VN158T-FⅦ,F374Y/L305V/E296V/S314E-FⅦ, F374Y/L305WM298QN158T-FⅦ, F374Y/L305WM298Q/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158T/S314E-FⅦ, F374Y/K337A/S314E/V158T-FⅦ, F374Y/K337A/S314E/M298Q-FⅦ, F374Y/K337A/S314E/E296V-FⅦ, F374Y/K337A/S314EN158D-FⅦ, F374Y/K337AN158T/M298Q-FⅦ, F374Y/K337AN158T/E296V-FⅦ, F374Y/K337A/M298Q/E296V-FⅦ, F374Y/K337A/M298QN158D-FⅦ, F374Y/K337A/E296VN158D-FⅦ, F374YN158D/S314E/M298Q-FⅦ, F374YN158D/S314E/E296V-FⅦ, F374YN158D/M298Q/E296V-FⅦ, F374YN158T/S314E/E296V-FⅦ, F374YN158T/S314E/M298Q-FⅦ, F374YN158T/M298Q/E296V-FⅦ, F374Y/E296V/S314E/M298Q-FⅦ, F374Y/L305WM298Q/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/E296V/M298Q/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/M298Q/S314E-FⅦ, F374YN158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, F374YN158D/E296V/M298Q/S314E-FⅦ, F374Y/L305V1V158D/K337A/S314E-FⅦ, F374YN158D/M298Q/K337A/S314E-FⅦ, F374YN158D/E296V/K337A/5314E-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V/M298Q-FⅦ, F374Y/L305VN158D/M298Q/K337A-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V/K337A-FⅦ, F374Y/L305VN158D/M298Q/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V/5314E-FⅦ, F374YN158T/E296WM298QIK337A-FⅦ, F374YN158T/E296WM298Q/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158T/K337A/S314E-FⅦ, F374YN158T/M298Q/K337A/S314E-FⅦ, F374YN158T/E296V/K337A/S314E-FⅦ,F374Y/L305VN158T/E296V/M298Q-FⅦ, F374Y/L305VN158T/M298Q/K337A-FⅦ, F374Y/L305VN158T/E296WK337A-FⅦ, F374Y/L305VN158T/M298Q/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158T/E296V/S314E-FⅦ, F374Y/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FⅦ, F374YN158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/L305V/V158D/E296WM298Q/S314E-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/M298QN158T/S314E-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/K337A/Vl58T/S314E-FⅦ, F374Y/L305WM298Q/K337AN158TIS314E-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V/M298Q/K337A-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158D/M298Q/K337A/S314E-FⅦ, F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337AN1158T/S314E-FⅦ, F374Y/L305VN158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FⅦ, S52A-인자 Ⅶ, S60A-인자 Ⅶ ; 및 P11Q/K33E-FⅦ, T106N-FⅦ, K143N/N145T-FⅦ, V253N-FⅦ, R290N/A292T-FⅦ, G291N-FⅦ, R315NN317T-FⅦ, K143N/N145T/R315NN317T-FⅦ ; 233번 Thr부터 240번 Asn까지의 아미노산 서열에서 치환, 첨가 또는 결실을 갖는 FⅦ, 304번 Arg부터 329번 Cys까지의 아미노산 서열에 치환, 첨가 또는 결실을 갖는 FⅦ, 및 lle153 - Arg223의 아미노산 서열에 치환, 첨가 또는 결실을 갖는 FⅦ를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 목적으로, 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 생물학적 활성 ("인자 Ⅶ 생물학적 활성")은 예를 들어 미국 특허 제 5,997, 864호에 개시된 것과 같이, 인자 Ⅶ-결핍 혈장 및 트롬보플라스틴을 사용하여 조제물이 혈액 응고를 촉진하는 능력을측정함으로써 정량하였다. 이 검정에서, 생물학적 활성은 대조 샘플에 대한 응고 시간에서의 감소로서 표현하였고 1 유닛/ml 인자 Ⅶ 활성을 함유한 수집된 인간 표준 혈청과 비교함으로써 "인자 Ⅶ 단위"로 전환하였다. 대안으로, 인자 Ⅶa 생물학적 활성은 :
(i) 인자 Ⅶa 또는 인자 Ⅶa-관련 폴리펩티드가 액체 막에 포매된 TF를 포함하는 시스템에서 활성화된 인자 X (인자 Xa) 및 인자 X를 생산하는 능력을 측정하는 단계 (Persson et al., J. Biol. Chem. 272: 19919-19924, 1997);
(ii) 수성 시스템에서 인자 X 가수분해를 측정하는 단계 (아래 실시예 12의 "시험관내 단백질 가수분해 검정" 참조);
(iii) 표면 플라즈몬 공명법에 기초한 기구를 이용하여 인자 Ⅶa 또는 인자 Ⅶa-관련 폴리펩티드와 TF의 물리적 결합을 측정하는 단계 (Persson, FEBS Letts. 413: 359-363,1997) ;
(iv) 인자 Ⅶa 및/또는 인자 Ⅶa-관련 폴리펩티드에 의한 합성 물질의 가수분해를 측정하는 단계 (아래 실시예 12의 "시험관내 단백질 가수분해 검정" 참조) ; 및
(v) TF-독립적인 시험관 내 시스템에서 트롬빈의 생성을 측정하는 단계에 의해 정량할 수 있다.
용어 "인자 Ⅶ 생물학적 활성" 또는 "인자 Ⅶ 활성"은 트롬빈을 생성하는 능력을 포함하도록 의도되고; 이 용어는 또한 조직 인자의 부재 하에서 활성화된 혈소판의 표면에 트롬빈을 생성하는 능력을 포함한다.
본 명세서의 실시예 12는 FⅦ의 생물학적 활성을 검정하는데 유용한 검정을 자세히 설명한다.
더욱이, 본 명세서를 통해, 하기 용어들은 다음과 같은 의미를 갖는다:
용어 "안정화"는 조성물의 저장 또는 생산 도중에 응집체 (비가용성 및/또는 가용성)의 형성 및/또는 화학적 분해를 최소화하는 것은 물론이고 단백질의 pH 및 고유의 구조를 유지하여 생물학적 활성 및 단백질 안정성의 실질적인 보유를 유지하는 것을 포함하도록 의도된다. 더욱이, 안정화는 또한 냉동-건조 상태에서 조성물의 생산 도중 단백질의 동결 건조 방지 및 동결 방지를 의미하도록 나타낸다.
용어 "구조적 안정화" 또는 구조적 안정성"은 양호한 성질 및 외관을 갖는 동결건조 플러그 또는 케이크를 형성하는 (예를 들어, 붕괴되지 않고 사용 전에 손쉽게 용해되는) 능력을 포함하도록 의도된다.
용어 "저장-안정성"은 5℃ 내지 40℃ 사이의 온도에서 저장된 후 안정화되고 적당한 기간-흔히 몇 개월 동안 사전-선택된 제품 설명서 내에 남아있는 제품을 정의하도록 의도된다.
용어 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 "물리적 안정성"은 이합체, 올리고머 및 다합체 형태인 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 비가용성 및/또는 가용성 응집체의 형성은 물론이고 분자의 어떤 구조적 변형 및 변성과도 관련된다.
용어 "화학적 안정성"은 가속된 조건에서 용해된 또는 고체 상태로 저장된 후 인자 Ⅶ 폴리펩티드에서의 어떤 화학적 변화의 형성과 관련되도록 의도된다. 가수분해, 탈아미드화 및 산화가 그 예이다. 특히, 황-함유 아미노산은 산화하여상응하는 설폭시드를 형성하는 경향이 있다.
여기에서 사용될 때 용어 "동결 방지제"는 일반적으로 동결-유발 스트레스로부터 단백질에 안정성을 제공하는 작용제를 포함한다. 동결 방지제의 예는 만니톨과 같은 폴리올 및 수크로스와 같은 당류를 포함함은 물론 폴리소르베이트, 폴록사머 또는 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 계면 활성제를 포함한다. 동결 방지제는 또한 제제의 긴장성에도 기여한다.
여기에서 사용될 때 용어 "동결 건조 방지제"는 동결 건조 공정의 건조 과정 상에서 수분 제거 도중 (예를 들어 단백질 고유의 구조를 유지시킴으로써) 단백질에 안정성을 제공하는 작용제를 포함한다. 동결 건조 방지제의 예는 당류, 특히 이당류 또는 삼당류를 포함한다. 동결 방지제는 또한 동결 건조 방지제 효과를 가질 수 있다.
용어 "3 내지 9의 범위에서 pH를 유지하는데 적합한 작용제"는 3.0 및 9.0 사이의 허용되는 범위 내에 용액의 pH를 유지시키는 작용제를 포함한다. 3 내지 9 범위 내에 pH를 유지시킬 수 있는 작용제의 전형적인 예는 시트르산, 아세트산, 히스티딘, 말산, 인산, 타르타르산, 숙신산, MES, HEPES, PIPES, 이미다졸, TRIS, 락트산, 글루타르산 및 글리실글리신의 산 형태 또는 염이다. 본 발명에서는 이러한 작용제의 조합이 사용될 수 있는데, 여기에서 작용제의 조합은 상기 설명된 범위에 pH를 유지시키는데 적합하다.
여기에서 사용될 때 용어 "동결 건조 케이크"는 용해되거나 또는 적어도 부분적으로 용해된 조성물을 가공하여 얻은 고체 조성물을 포함하도록 나타나는데,여기에서 가공은 상기 용해/부분 용해된 조성물을 적어도 한번 냉각하여 얼리는 단계 후 적어도 한번의 진공 건조 단계를 포함하는 조건 하에서 실행된다.
용어 "동결건조" 및 "냉동-건조"는 용해된 또는 부분적으로 용해된 용액을 냉각하여 얼린 후 진공 건조하는 적어도 하나의 단계를 포함하는 조건 하에서 용해된 또는 적어도 부분적으로 용해된 조성물로부터 액체가 제거되는 동안의 공정을 포함한다. 동결건조, 또는 냉동-건조는 두 개의 주요 단계, 즉, 고체 단백질 약제를 제조하는데 있어서 가장 통상적인 공정이다. 공정은 단백질 용액을 냉동하는 단계, 및 냉동된 고체를 진공 하에서 건조하는 단계로 구성된다. 건조 단계는 1차 및 2차 건조의 두 시기로 더욱 분할된다. 1차 건조는 냉동된 물을 제거하고 (얼음의 승화) 2차 건조는 냉동되지 않고 "결합된"물을 제거한다 (물의 탈착). 각 동결건조 단계의 더욱 자세한 분석은 예를 들어, Wang et al, International Journal of Pharmaceutics 203 (2000): 1-60 (제 4장, 16 쪽 참조)에 나타난다.
전형적으로, 조성물은 바이알 내로 채워지고, 냉동건조기의 선반 상에서 냉동됨으로써 냉동-건조된 후, 진공이 성립되고 1차 건조 (또는 얼음의 승화)를 수행하도록 선반이 가열된다. 그 후로, 2차 건조 (또는 흡수된 물의 탈착)는 공정이 완료될 때까지, 예를 들어 조성물이 충분히 낮은 수분 (물) 함량을 함유할 때까지 더 높은 온도에서 수행된다. 냉동-건조 방법은 업계에 일반적으로 공지되며, 예를 들어 Wang et al, International Journal of Pharmaceutics 203 (2000): 1-60을 참조한다. 온도(군), 각 온도에서의 시간(군), 및 특정 조성물을 위한 가공 도중에 사용되는 압력에 관한 냉동-건조 조건을 최적화하는 것은 실행자의 숙련도 내에 있다.
용어 "수분 함량"은 생성물에 결합된 물을 포함하도록 의도되며, 동결된 용질에 사로잡혀 있거나 또는 흡수된 얼지 않은 물 및/또는 비결정상에 결합되거나 또는 결정화된 고체에 흡수된 물과 같은 흡수된 형태의 물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용어 "물 함량"은 "수분 함량"과 호환이 가능하게 사용된다.
원하는 잔류 수분 수준 (수분 함량)은 2차 건조 단계의 기간 및 온도의 기능이다. 동결 건조 동안의 잔류 수분 함량을 결정하기 위한 몇몇 방법이 업계에 공지되는데 ; 예를 들어, 전자 습도계 또는 잔류 가스 분석기가 사용될 수 있다. 냉동-건조 제제의 수분 함량은 예를 들어, 로손(losson)-건조, Karl Fischer 적정, 열 중력측정 분석 (TGA), 가스 크로마토그래피 (GC), 또는 근접 IR (예를 들어, Wang et al, International Journal of Pharmaceutics 203 (2000): 1-60 참조)와 같은, 업계에 공지된 몇몇 방법에 의해 측정될 수 있다. 물 함량 (수분 함량)의 측정법은 또한 유럽 및 미국 약전 모두에서 설명된다. 예를 들어, 물 함량의 측정은 미국 약전 (USP < 921, Ic>) 또는 유럽 약전 (EP <2.5.32>)에 설명된 것과 같이 Karl Fischer 전량분석 적정에 의해 수행될 수 있다.
간단히 말해서, 방법은 다음과 같다 :
전량분석 적정에 의한 물 함량의 측정 : 물의 전량분석적 측정에는 무수 배지에서 물과 이산화황 및 요오드와의 양적 반응에 기초한 Karl Fischer 반응이 사용된다. 요오드는 요오드화물의 산화에 의해 반응 전지에서 전기화학적으로 생산된다. 양극에서 생산된 요오드는 반응 전지에 함유된 물 및 이산화황과 즉각 반응한다. 재료에 있는 물의 양은 적정의 종점까지의 전기량과 정비례한다. 전지 내의 모든 물이 소모되면, 종점에 다다르고 따라서 과량의 요오드는 전기측정으로 검출된 종점을 가리키는 것으로 나타난다. 그 다음, 재료에 존재하는 물 함량의 퍼센트를 계산한다.
수분 함량은 분석 시 바이알 내에 있는 샘플의 질량에 의해 정의될 수 있고 (즉, 소위 습시료 중량 기준인 고체 + 물) 또는 샘플 내에서 측정된 물에 대하여 수정된 것에 의해 정의될 수도 있다 (즉, 건시료 중량 기준). 낮은 수분 함량을 갖는 냉동-건조 생성물의 경우 두 가지 측정 (습시료 중량 기준 대 건시료 중량 기준)은 매우 유사한 결과를 가져온다. 여기에서 사용될 때, 수분 함량은 고체와 존재하는 물의 합(습시료 중량 기준)에 의해 정의된다.
용어 "벌크제"는 일반적으로, 양호한 동결건조 케이크 성질을 제공하고, 약제학적으로 품위 있는 생성물을 형성하고, 단백질이 예를 들어 동결건조 공정과 연관된 절단/동결로부터 발생하는 다양한 스트레스를 극복하도록 도와주고, 냉동-건조 공정 및 그 후의 저장 도중에 단백질 활성 수준을 유지하게끔 도와주는 작용제를 포함한다. 벌크제의 전형적인 예는 만니톨, 글리신, 수크로스, 락토오즈를 포함한다. 이들 작용제는 또한 제제의 긴장성에 기여할 수 있다.
용어 "긴장성 변형제"는 조성물의 긴장성을 조절하여 사용 시 조성물을 용해할 때, 조성물이 혈액, 복막액 또는 다른 관련된 체액의 생리학적 범위 내에 있는 긴장성을 갖게 할 수 있는 어떠한 작용제를 의미하도록 나타난다. 분명하게, 긴장성은 또한 재구성 용액이 긴장성-변화 작용제를 포함하는지에 의존할 수 있다.
용어 "계면 활성제"는 일반적으로, 공기/용액 경계면-유발 스트레스 및 용액/표면 유발 스트레스로부터 단백질을 보호하는 작용제를 포함한다. 예를 들어 계면 활성제는 응집으로부터 단백질을 보호할 수 있다. 적합한 계면 활성제는 예를 들어, 폴리소르베이트, Brij 35®와 같은 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, 또는 Tween 20, Tween 80, 또는 폴록사머 188과 같은 폴록사머를 포함할 수 있다. 바람직한 세정제는 폴록사머 188, 폴록사머 407과 같은 폴록사머 ; Brij 35®와 같은 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, Cremophor A25, Sympatens ALM/230; 및 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80과 같은 폴리소르베이트/Tween이다. 더 바람직한 것은 폴록사머 188과 같은 폴록사머, 및 Tween 20 및 Tween 80과 같은 Tween이다.
용어 "초기 함량"은 조제 시 조성물에 첨가되는 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 양에 관련된다. 여기에서 주어지는 농도 (mg/ml)는 수분을 제거하기 전 (즉, 냉동-건조 전) 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 용액에서의 또는 재구성된 조성물에서의 농도를 지칭하거나, 또는 질량 %로서 지칭되는데, 이것은 예를 들어 동결건조 케이크와 같은 고체 조성물에서의 농도에 관련된다.
여기에서 사용될 때, 상술된 양은 약 10%인 것으로 이해되며; 따라서 약 50 mM은 50 mM ± 5mM를 포함하며, 4%는 4% ± 0.4% 등을 포함한다.
위에 설명된 것과 같이, 본 발명자들은 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 안정화시킴으로써 위험의 증가 및 사용자의 불편함을 일으킴 없이 장기간 저장이 가능하도록 업계에 본질적으로 기여하였다.
본 발명자들은 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 안정화시키도록 조절하는데 있어서 다수의 결정적인 매개변수가 필요하다는 것을 발견하였다. 하나의 중요한 매개변수는, 적어도 부분적으로, 수분 함량 , 즉 물에 관련된다. 수분 함량은 제한되어야 한다. 다른 중요한 매개변수로서, 조성물은 적어도 하나의 안정화제를 포함해야 한다. 본 발명에 따라, 적당한 안정화제는 산화방지제, 당류 및 폴리올로 구성된 군으로부터 선택되는 약제학적으로 허용되는 부형제 중 적어도 두 집단의 조합을 포함한다. 당류 및 폴리올은 적어도 부분적으로 조성물이 냉동건조되는 사건에서 중요할 수 있는 동결건조 방지제 및/또는 동결 방지제 성질을 갖는다. 일반적으로, 개선된 안정화는 부분적으로 이들 부형제 집단 중 적어도 두 개의 적당한 조합에 의해 성취될 수 있다. 그러나, 상기 조합이 당류 (수크로스) 또는 산화방지제 (메티오닌)을 포함하면, 안정화 효과는 훨씬 더 커질 수 있다는 것이 발견되었다. 더욱이, 메티오닌은 놀랍게도 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 산화성 분해를 방지한다는 것 또한 발견되었다.
첫번째 양태에서 본 발명은 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 조성물에 관련되며, 상기 조성물은 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는다.
본 발명의 한 구체예는 산화방지제 및 만니톨의 조합을 포함하고; 두번째 구체예는 메티오닌 및 폴리올의 조합을 포함하고; 다른 구체예는 당류 및 만니톨의 조합을 포함하고; 또 다른 구체예에서는, 조성물이 수크로스 및 폴리올의 조합을 포함하고; 마지막으로 다른 적합한 구체예에서는 조성물이 메티오닌을 포함한다는 것이 언급된다.
설명된 것과 같이, 본 발명에 따른 안정화제는 약제학적으로 허용되는 부형제 중 적어도 두 집단의 조합을 포함한다. 그것의 적합한 구체예에서, 안정화제는 부형제의 세 번째 집단을 포함한다. 그러므로, 하나의 구체예에서, 산화방지제 및 만니톨의 조합은 당류를 더 포함한다. 그것의 두 번째 구체예에서, 메티오닌 및 폴리올의 조합은 당류를 더 포함한다. 또 다른 관심 있는 구체예에서, 당류 및 만니톨의 조합은 산화방지제를 더 포함하고 수크로스 및 폴리올의 조합은 산화방지제를 더 포함한다. 한 구체예에서, 본 발명의 조성물은 만니톨 및 수크로스를 포함하고; 또다른 구체예에서, 조성물은 만니톨, 수크로스 및 메티오닌을 포함하고; 또다른 구체예에서, 조성물은 만니톨 및 트레할로즈를 포함하고; 또다른 구체예에서, 조성물은 만니톨, 트레할로즈 및 메티오닌을 포함한다.
본 발명에 따라, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 상기 설명된 것과 같은 폴리펩티드를 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 적합한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa, 재조합 인간 인자 Ⅶa 및 인자 Ⅶ 서열 변체로 구성된 군으로부터 선택된다. 바람직하게, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa 또는 재조합 인간 인자 Ⅶa 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드인데 여기에서 상기 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드 및 야생형 인자 Ⅶ 사이의 비율은 본 명세서에 설명된 것과 같이 하나 이상의 "시험관내 단백질 가수분해 검정" 및 "시험관 내 가수분해 검정"으로 시험될 때 적어도 1.25이다.
설명된 것과 같이, 수분 함량은 제한되어야 한다. 본 발명을 위하여, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 벌크로 제공될 때 고체 또는 액체 형태로 제공될 수 있다. 그러나, 전형적으로 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 벌크로 제공될 때 액체 형태이다. 따라서, 조성물의 제조를 위한 벌크 단백질의 나아간 공정은 적합한 부형제의 첨가 단계 및 벌크로부터 액체의 제거 단계를 요구하는데, 상기 부형제의 첨가는 액체의 제거 전 또는 후에 수행될 수 있다. 단백질로부터 액체를 제거하기 위한 이러한 수단 중 하나는 냉동-건조에 관련된다. 그러므로, 본 발명의 바람직한 구체예에서, 조성물은 동결건조 케이크의 형태로 존재한다. 그러나, 본 발명은 벌크 폴리펩티드로부터 액체를 제거하여 약 3 % w/w 이하의 수분 함량을 갖는 고체 조성물을 성취하는데 적합한 다른 공정을 배제하지는 않는다.
더욱이, 본 발명에 따라, 수분 함량은 약 2.5 % w/w인 것이 바람직하고, 바람직하게는 약 2 % w/w 이하, 가장 바람직하게는 약 1.5 % w/w 이하이다.
이해될 수 있는 것과 같이, 본 발명은 예를 들어 부형제의 혼합 및 액체의 제거 도중과 같은 조제 도중 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 분해를 제한하여 최대 3 % w/w의 수분 함량을 갖는 고체 조성물을 성취하고, 예를 들어 환자에 의해 조성물이 투여되는 것과 같은 사용 시까지 고체 조성물의 제조 시간으로부터 상기 분해를 제한하는 것과 부분적으로 관련된다.
그러므로, 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 조성물을 안정화시키기 위한 또다른 매개변수로서, 예를 들어, 증류수 또는 수성 완충제와 같은 수성 용매에 용해될 때 3 내지 9 내의 pH 범위가 유지되어야 한다. 다시 말해 냉동-건조와 같은 수분 함량의 제거 전 시기에 폴리펩티드 용액 내의 pH는 약 3 내지 약 9 내의 pH로 유지되어야 한다. 유리하게, 이러한 pH 범위는 또한 원하는 생리학적 범위 내이고, 그럼으로써 비경구 수단에 의해 조성물을 투여하는데 있어서 사용자에게 해를 일으키지 않는다. 바람직하게, 용액의 pH는 4.0 내지 8.0, 4.0 내지 7.5, 4.0 내지 7.0, 4.5 내지 7.0, 4.5 내지 6.8, 4.5 내지 6.5, 5.0 내지 7.0, 5.0 내지 6.5, 5.0 내지 6.0, 5.5 내지 6.5와 같이 약 4.0 내지 약 9.0이거나, 또는 약 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 또는 6.0과 같이 약 5.5 내지 약 6.0이다.
그러므로, 본 발명의 관심있는 구체예는 상기 조성물을 수성 용액 (예를 들어, 물)에 용해시켰을 때 그것의 pH를 3 내지 9의 범위에 유지시키기에 적합한 작용제를 더욱 포함한다. 따라서, 그것의 적합한 구체예에서, 3 내지 9의 범위에 PH를 유지시키기에 적합한 작용제는 시트르산, 아세트산, 히스티딘, 말산, 인산, 타르타르산, 숙신산, 이미다졸, TRIS, 락트산, 글루타르산, PIPES 및 글리실글리신의 산 또는 염으로 구성된 군으로부터 선택된다.
더욱이, 3 내지 9의 범위에 PH를 유지시키기에 적합한 작용제는 이러한 열거된 작용제 중 적어도 두 개의 혼합물이 될 수 있는데, 여기에서 혼합물은 상술된 범위에 있는 pH 값을 제공할 수 있다. 적합한 작용제의 농도는 약 0.1 mM 내지 100 mM; 약 0.2 mM 내지 50 mM; 약 0.5 mM 내지 25 mM; 약 1 mM 내지 20 mM; 또는 약 1 mM 내지 10 mM의 범위이다.
실시예 5 및 6에 나타난 것과 같이, 본 발명자들은 적합한 양의 만니톨 (폴리올), 수크로스 (당류) 및 산화방지제 (메티오닌)을 조합함으로써 제조 공정의 종결 상에서, 즉 냉동-건조 공정의 종결 상에서 낮은 함량의 산화 형태 및 응집체를 갖는 조성물을 제공하였다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 저장 전에 낮은 초기 함량의 산화 형태 및 응집체를 갖는 것으로 특성결정 된다.
산화 경로는 물론이고 응집 경로에 의한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 분해는 안정화의 민감한 매개변수이다.
전형적으로, 조성물은 냉동-건조의 종결 상에서 안정화되어 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량의 4, 3 또는 2 % w/w와 같은 5 % w/w 미만이 그것의 산화된 형태로 전환된다. 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 초기 함량은 냉동-건조 단계 전에 조성물의 조제 상에서 조성물에 첨가된 양이다. 더욱이, 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 초기 함량의 4.0%, 3.0%, 2.5%, 2%, 1.5%, 미만 또는 1 % w/w와 같은 5 % w/w 미만은 (예를 들어, 본 명세서의 실시예에서 설명된 것과 같은) 기존의 분석 방법에 의해 측정된 것과 같이 응집체 형태로서 회수된다.
본 발명자들은 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 그 이상의 분해는 (즉, 제조 공정의 종결로부터 8개월까지 30℃에서 저장된 것으로 계산될 때) 대기 조건 하에서 저장 후에 최소라는 것을 발견하였다. 실시예 5에 나타난 것과 같이, 30℃에서 8개월동안 저장한 후 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 초기 함량 중 10 % w/w 미만은 냉동-건조 종결 시에 존재하던 산화된 형태의 함량 외에 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 산화된 형태로서 회수되었다. 매우 중요한 것은, 산화방지제 (메티오닌)을 포함한 조성물은 인자 V 폴리펩티드의 산화적 분해에 대하여 더욱 안정한 것으로 나타났다.
그러므로, 본 발명에 따라, 적합한 조성물은 대기 조건에서 적어도 8개월동안 저장된 후에도 산화된 형태의 함량에 있어서 제한적으로 증가한다. 즉, 더욱 관심있는 구체예에서 조성물은 약 6 % w/w 이하의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량은 제조 공정 (예를 들어, 냉동 건조 공정)의 종결 후 30℃에서 8개월동안 조성물을 저장하면 산화된 형태로 추가적으로 분해되는 것이 안정하다. 그것의 다른 적당한 구체예에서, 약 5, 4, 3, 2, 또는 1.5 % w/w 이하의 인자 Ⅶ 폴리펩티드는, 제조 공정의 종결시로부터 8개월까지 30℃에서 저장한 것으로 계산될 때, 추가적으로 산화된 형태로 전환된다. 본 발명의 이러한 구체예에서, 조성물은 약 5 % w/w 이하 (4, 3, 2, 또는 1.5 %)의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량이 30℃에서 8개월동안 상기 조성물을 저장한 후 산화된 형태로 전환될 만큼 안정하다. 상기 설명된 것과 같이, 초기 함량은 냉동-건조 단계에 앞서 조성물의 조제 후 조성물에 첨가된 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 양과 관련된다.
나타낸 것과 같이, 응집 경로에 의한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 분해는 또한 본질적인 안정화를 가리키는 매개변수로서 간주될 수 있다.
본 발명자들은 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 그 이상의 분해는 (즉, 제조 공정의 종결로부터 8개월까지 30℃에서 저장된 것으로 계산될 때) 대기 조건 하에서 저장 후에 최소라는 것을 발견하였다. 실시예 6에 나타난 것과 같이, 4, 3, 2.5, 2.0, 1.5, 또는 1.0 중량 %와 같은 5 % w/w 이하의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 함량은 8개월동안 30℃에서 저장된 후 응집체로서 추가적으로 회수된다. 또한 중요한 것은, 당류(수크로스)를 포함한 조성물이 응집의 형성에 대하여 더욱 안정하다는 것이 발견되었다.
따라서, 본 발명의 관심있는 구체예는 약 5 % w/w 이하의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량이 30℃에서 8개월동안 상기 조성물을 저장한 후 응집체로 회수될 만큼 안정한 것과 관련된다. 상기 설명된 것과 같이, 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 초기 함량은 냉동-건조 단계 전에 조성물의 조제 후 조성물에 첨가된 양이다. 적어도 부분적으로 당류, 폴리올 및 산화방지제 함량의 적당한 최적화에 의해, 조성물은 4.0, 3.0, 2.5, 2.0, 1.5, 또는 1.0 % w/w의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량이 30℃에서 8개월동안 상기 조성물을 저장한 후 응집체로서 전환될 만큼 안정하다.
따라서, 유리하게, 본 발명의 조성물은 제조 공정의 종결, 즉 냉동-건조 공정의 종결 후 낮은 함량의 산화된 형태 및 응집체를 가지며, 따라서 본 발명에 따른 조성물은 저장되기 전에 낮은 산화된 형태 및 응집체의 초기 함량을 갖는 것으로써 특성결정 되는데, 예를 들어, 제조 공정의 종결 후에 5 % w/w 이하 (4 % w/w, 3 % w/w, 또는 2 % w/w)의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량이 산화된 형태로 전환되고 5 % w/w 미만 (4.0%, 3.0%, 2.5%, 2%, 1.5%, 또는 약 1 % 미만)이 이합체 또는 더 높은 등급의 다합체 형태로 전환된다.
더욱 유리하게, 본 발명의 조성물은 저장-안정성으로, 예를 들어 암지에서 적어도 8 개월동안 30℃에서 저장된 후 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 또는 1.5 % w/w와 같은 10 % w/w 미만의 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량이 산화된 형태로 전환되고, 4%, 3%, 2.5%, 2%, 1.5%, 또는 1 % w/w와 같은 5 % w/w는 이합체 또는 더 높은 등급의다합체 형태로 전환된다.
언급된 것과 같이, 상기 개선된 안정성은 특별한 부형제의 적당한 조합에 관련된다. 본 발명에 따라, 부형제는 당류, 폴리올 및 산화방지제의 군으로부터 선택되어야 하고 여기에서 당류 및 폴리올은 동결 건조 방지제 및/또는 동결 방지 성질을 나타낸다. 더 구체적으로, 본 발명에 따른 적합한 구체예에서, 관심있는 당류는 수크로스, 덱스트로즈, 락토오즈, 말토오즈, 트레할로즈, 시클로덱스트린, 말토덱스트린 및 덱스트란으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있는 이- 및 삼-당류 및 다당류이다. 더욱이, 몇몇 구체예에서, 폴리올은 만니톨, 소르비톨 및 자일리톨로 구성된 군으로부터 선택된다. 더욱 관심있는 구체예에서, 산화방지제는 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌, 글루타티온, 및 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌 및 글루타티온 중 어느 하나를 함유한 펩티드로 구성된 군으로부터 선택된다.
당류 및 폴리올 부형제는 각각 적어도 두 개의 이러한 열거된 작용제의 혼합물이 될 수 있는 것으로 이해된다. 본 발명의 일련의 구체예에서, 사용된 당류 부형제는 예를 들어, 시클로덱스트린과 조합된 수크로스, 시클로덱스트린과 조합된 트레할로즈, 덱스트란과 조합된 수크로스, 또는 락토오즈와 조합된 수크로스와 같이, 적어도 두 개의 이-, 삼- 및/또는 다당류의 조합이다. 본 발명의 일련의 구체예에서, 사용된 폴리올 부형제는 예를 들어, 소르비톨과 조합된 만니톨, 자일리톨과 조합된 만니톨, 또는 자일리톨과 조합된 소르비톨과 같이, 적어도 두 개의 폴리올의 조합이다. 본 발명의 일련의 구체예에서, 사용된 산화방지 부형제는 예를 들어, 메티오닌과 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌, 글루타티온, 및 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌 및 글루타티온 중 어느 하나를 함유한 펩티드의 조합과 같은, 적어도 두 개의 산화방지제의 조합이다.
본 발명자들은 적어도 부분적으로, 바람직한 안정성을 성취하기 위한 폴리올 및 당류의 적합한 조합은 물론이고 그것의 함량까지 인지하였다.
그러므로, 본 발명의 몇몇 더욱 관심있는 구체예에서, 폴리올은 약 5 % w/w 내지 약 90 % w/w 범위의 양으로 존재한다. 바람직하게, 폴리올의 양은 약 18 % w/w 내지 약 83 % w/w, 25% 내지 80%, 30% 내지 65%, 30% 내지 80%, 40% 내지 80%, 50% 내지 80%, 30% 내지 75%, 40% 내지 75%, 50% 내지 75%, 또는 약 50% 내지 70% w/w와 같은 약 18% w/w 내지 약 88% w/w의 범위에 존재한다. 폴리올은 2 내지 60 mg/ml, 5 mg/ml 내지 55 mg/ml, 8 내지 45 mg/ml, 10 내지 40 mg/ml, 10 내지 30 mg/ml, 또는 2 내지 45 mg/ml, 5 mg/ml 내지 45 mg/ml, 5 내지 35 mg/ml, 5 내지 25 mg/ml, 5 내지 20 mg/ml, 20 내지 40 mg/ml, 또는 약 20 내지 30 mg/ml와 같이 약 0.5 내지 75 mg/ml 범위의 양으로 존재한다.
더욱이, 그것의 관심있는 구체예는 물론이고 본 발명의 몇몇 다른 관심있는 구체예에서, 당류는 약 0 내지 약 85% w/w 범위의 양으로 조성물에 존재한다. 그것의 더욱 관심있는 구체예에서, 양은 약 7% w/w 내지 약 75% w/w, 10% 내지 70%, 10% 내지 50%, 20% 내지 50%, 10% 내지 40%, 또는 약 10% w/w 내지 약 35% w/w와 같이, 약 3% w/w 내지 약 80% w/w의 범위이다. 당류는 약 2 내지 60 mg/ml, 약 5 mg/ml 내지 55 mg/ml, 약 8 내지 45 mg/ml, 약 10 내지 40 mg/ml, 약 10 내지 30mg/ml, 또는 약 2 내지 45 mg/ml, 약 5 mg/ml 내지 45 mg/ml, 약 5 내지 35 mg/ml, 약 5 내지 25 mg/ml, 및 약 5 내지 20 mg/ml과 같이 약 0.5 내지 75 mg/ml 범위의 양이어야 한다.
더욱이, 본 발명자들은 산화방지제의 적당한 양은 약 0.1 내지 5 mg/ml, 0.1 mg/ml 내지 2.5 mg/ml, 0.1 내지 2 mg/ml, 또는 약 0.1 내지 1 mg/ml과 같이, 약 0.05 내지 10 mg/ml 사이에 있어야 한다는 것을 인지했다..
중요하게, 폴리올 및 당류의 비율은 적합하게 조절될 필요가 있다. 본 발명의 적당한 구체예에서, 상기 폴리올은 상기 당류에 대하여 중량으로 약 100:1 내지 1:50의 비율을 갖는다. 그것의 훨씬 더 적당한 구체예에서, 상기 중량 비는 약 50:1이고, 더 바람직하게는 약 20:1 내지 1:5이다. 다른 적당한 구체예에서, 중량 비는 약 10:1 내지 1:2, 및 약 6:1 내지 1:2의 범위와 관련된다. 그러나, 본 발명자들에 의해 발견된 것과 같이 (실시예 5 참조), 동결건조된 케이크는 다량의 당류와 결합한 후 붕괴된다. 이와 같이, 매우 적당한 구체예는 상기 당 알콜이 상기 당류에 대하여 약 4:1 내지 3:2 또는 약 1:1 내지 3:2와 같이 약 4:1 내지 1:1 범위의 중량 비인 것들에 관련된다.
본 발명의 몇몇 구체예에서, 폴리올은 만니톨이고 또 다른 구체예에서 당류는 수크로스이다. 더욱이, 또 다른 구체예에서 산화방지제는 메티오닌이다.
조성물은 비경구 투여, 특히 정맥내 투여에 적합한 조성물을 성취하기 위해 다른 약제학적으로 허용되는 부형제를 혼합함으로써 더욱 적합해질 수 있다. 비경구 투여를 위한 조성물의 실제 조제 방법은 업계에 공지되거나 또는 명백할 것이고더 자세히는, 예를 들어 Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed. , Mack Publishing Company, Easton, PA (1995)에 설명된다. 용어 "부형제"는 양호한 동결건조 케이크 성질 (벌크제)을 제공함은 물론, 저장 도중 pH의 유지, 단백질의 고유의 구조뿐만 아니라 허용되는 긴장성의 유지를 제공하여 생물학적 활성의 실질적인 보유 및 단백질 안정성이 유지되도록 하는 약제학적으로 허용되는 시약을 포함한다.
따라서, 본 발명에 따라, 조성물은 긴장성 변형제를 더욱 포함한다. 긴장성 변형제는 아세트산 나트륨, 락트산 나트륨, 염화 나트륨, 염화 칼륨 및 염화 칼슘으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다. 그러나, 다른 적당한 긴장성 변형제도 배제되지 않는다. 조성물이 사용에 앞서 등장이 되거나 또는 등장에 가까운 한 (예를 들어, 약간의 고장 또는 저장), 예를 들어 벌크 조성물이 생리학적 범위를 갖는 등장액이 될 필요가 없는 한 조성물은 훨씬 더 높은 농도의 긴장성-변형제를 포함할 수 있다는 것 또한 언급되었다.
인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 조성물의 더 나아간 안정화는 계면 활성제의 첨가에 의해 얻어질 수 있다. 따라서, 본 발명의 또다른 관심있는 구체예에서, 조성물은 계면 활성제를 더욱 포함하고, 계면 활성제는 Tween®, 폴리소르베이트 20 또는 80과 같은 폴리소르베이트; 폴리옥실 23 라우릴 에테르 (Brij ®)와 같은 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르 또는 폴록사머 88 (예를 들어, Pluronic®) 또는 폴록사머 407 (예를 들어, Lutrol®)과 같은 폴록사머 및 다른 에틸렌/폴리에틸린 블록 폴리머, PEG8000과 같은 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)로 구성된 군으로부터 선택된다.전형적으로, 계면 활성제는 0.005 내지 5 mg/ml의 양으로 첨가된다. 바람직한 양은 0.01 내지 3 mg/ml이고, 더 바람직하게는 Tween 20 및/또는 Tween 80에 있어서 0.01 내지 0. 3 mg/ml이고 폴록사머 188에 있어서는 0.05 내지 3.0 mg/ml이다.
본 발명의 또다른 바람직한 구체예에서, 조성물은 벌크제로서 작용하는 다른 약제학적 부형제를 더욱 포함한다. 즉, 만니톨 외의 벌크제가 조성물에 포함된다. 특히, 벌크제는 냉동 건조에 의해 조제되는 조성물에 포함된다.
조성물에서 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 초기 함량은 약 0.6 mg/ml 내지 약 6.0 mg/ml, 약 0.6 mg/ml 내지 약 5 mg/ml, 또는 약 0.6 mg/ml 내지 약 4 mg/ml와 같이 약 0.6 mg/ml 내지 약 10.0 mg/ml인 것이 바람직하다.
한 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 및 Tween 80을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
한 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 메티오닌 및 Tween 80을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
또 다른 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 히스티딘 및 Tween 80을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
한 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 메티오닌, 히스티딘 및 Tween 80을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
또 다른 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 및 폴록사머 188을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
또 다른 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 메티오닌 및 폴록사머 188을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
또 다른 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 히스티딘 및 폴록사머 188을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
또 다른 구체예에서, 조성물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 히스티딘, 메티오닌, 및 폴록사머 188을 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 가지고, 물에 조성물이 용해될 때 5.0 내지 7.0 범위의 pH를 갖는다. 한 구체예에서, 조성물은 CaCl2, NaCl 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더욱 포함한다. 한 구체예에서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa이다.
나아간 구체예에서, 조성물은 하기 표 A에 나타난 것과 같다.
나아간 구체예에서, 조성물은 하기 표 B에 나타난 것과 같다.
나아간 구체예 E1-L1에서, 조성물은 상기 표 B에 나열된 것과 같이 부형제 및 그것의 양을 함유하되, pH 5.9에서 제제된다.
나아간 구체예 E2-L2에서, 조성물은 상기 표 B에 나열된 것과 같이 부형제 및 그것의 양을 함유하되, pH 5.8에서 제제된다.
나아간 구체예 E3-L3에서, 조성물은 상기 표 B에 나열된 것과 같이 부형제 및 그것의 양을 함유하되, pH 5.7에서 제제된다.
나아간 구체예 E4-L4에서, 조성물은 상기 표 B에 나열된 것과 같이 부형제 및 그것의 양을 함유하되, pH 5.6에서 제제된다.
나아간 구체예 E5-L5에서, 조성물은 상기 표 B에 나열된 것과 같이 부형제 및 그것의 양을 함유하되, pH 5.5에서 제제된다.
상기 고찰된 것과 같이, 본 발명자들은 선택된 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 고체 조성물로 단백질을 제공함으로써 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 안정화하는 방법을 제공하였다. 본 발명에 따라, 이러한 안정화제는 당류, 폴리올 또는 산화방지제인 부형제로부터 선택되는 적어도 두 집단의 부형제 조합에 포함된다. 더욱이, 본 발명자들은 당류 (수크로스) 및 산화방지제 (메티오닌)가 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 안정성을 개선하는데 중요하다는 것을 발견하였다.
그러므로, 본 발명의 나아간 양태는 안정한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 조제 방법에 관련된다. 방법은
i) a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 용액으로 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 제공하는 단계;
ii) 약 3 % w/w 이하의 수분 함량을 갖는 고체 조성물을 얻기 위해 상기 용액을 프로세싱하는 단계를 포함한다.
그것의 특별한 관심 있는 구체예에서, 방법은 상기 산화방지제가 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌, 글루타티온, 및 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌 및 글루타티온 중 어느 하나를 함유하는 펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 포함한다. 바람직한 구체예에서, 산화방지제는 메티오닌이다. 또다른 구체예에서, 상기 당류는 수크로스, 덱스트로즈, 락토오즈, 말토오즈, 트레할로즈, 시클로덱스트린, 말토덱스트린 및 덱스트란으로 구성된 군으로부터 선택된다. 바람직한 구체예에서 폴리올은 만니톨이고 당류는 수크로스이다. 더욱이, 더욱 바람직한 구체예에서, 산화방지제는 메티오닌이다.
상기 용액 i)에 있는 바람직한 당류의 함량 및 선택적인 산화방지제의 함량은 양질의 안정화된 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 성취하기 위해 조절되어야 한다.
본 발명에 따라, 당류는 약 0.5 내지 75 mg/ml, 약 2 내지 60 mg/ml, 약 5 mg/ml 내지 55 mg/ml, 약 8 내지 45 mg/ml, 약 10 내지 40 mg/ml, 약 10 내지 30 mg/ml, 또는 약 2 내지 45 mg/ml, 약 5 mg/ml 내지 45 mg/ml, 약 5 내지 35 mg/ml, 약 5 내지 25 mg/ml, 약 5 내지 20 mg/ml 범위의 양으로 존재해야 한다.
본 발명에 따라, 폴리올은 약 0.5 내지 75 mg/ml, 약 2 내지 60 mg/ml, 약 5 mg/ml 내지 55 mg/ml, 약 8 내지 45 mg/ml, 약 10 내지 40 mg/ml, 약 10 내지 30 mg/ml, 또는 약 2 내지 45 mg/ml, 약 5 mg/ml 내지 45 mg/ml, 약 5 내지 35 mg/ml, 약 5 내지 25 mg/ml, 약 5 내지 20 mg/ml 범위의 양으로 존재해야 한다.
산화방지제는 약 0.05 내지 10 mg/ml, 바람직하게는 약 0.1 내지 5 mg/ml, 더 바람직하게는 약 0.1 mg/ml 내지 2.5 mg/ml, 더욱 바람직하게는 약 0.1 내지 2 mg/ml, 가장 바람직하게는 약 0.1 내지 1 mg/ml 범위의 양으로 제공되어야 한다.
바람직한 구체예에서, 안정한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 조제 방법은 냉동-건조를 포함한다. 냉동-건조는 가공에 관련되는데, 여기에서 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 용액은 동결건조 바이알 등에 채워진다. 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 추가적으로 냉동-건조의 시작에 앞서 멸균 여과될 수 있다. 냉각은 임계 생성물 온도 아래에서 바이얼 및 용액을 냉동하기 위해 냉동-건조기의 선반에 적용된다. 물은 진공을 도입함으로써 제거되고 물의 응축은 냉동-건조기의 얼음-응축기 상에서 발산된다. (예를 들어, 상기 설명된 것과 같이 Karl Fischer 전량분석 적정에 의해 측정된) 생성물이 보통 3% 미만의 잔류 수분 함량으로 건조되면, 바이알을 밀폐하고 봉한다. 제조가 종결되고 조성물은 동결건조 케이크의 형태가 된다.
이러한 조성물은, 주사 수단에 의해 환자에게 투여될 때, 사용에 앞서 적합한 액체에 재구성될 필요가 있다. 이들은 또한 예를 들어 다른 약제학적 조성물로의 재조제와 같은 다른 목적으로 재구성될 수 있다. 그러나, 본 발명은 조성물이 고체 형태로 환자에게 투여될 수 있다는 것도 배제하지 않는다.
조성물은 허용되는, 바람직하게는 멸균된 희석제 또는 담체, 바람직하게는 수성 담체를 사용하여 재구성된다. 물 (예를 들어, 주사용수/WFI), 완충액, 식염수 (예를 들어, 0.4% 식염수), 글리신 (예를 들어, 0.3% 글리신), 히스티딘 등과 같은 다양한 수성 담체가 사용될 수 있다. 재구성 희석액은 또한 칼슘 염 (예를들어, CaCl2) 또는 나트륨 염 및 칼슘 염의 조합 (예를 들어, NaCl 및 CaCl2)과 같은 하나 이상의 염을 함유할 수 있다.
재구성된 조성물은 예방적 및/또는 치료적 처치를 위한 비경구적 투여로 의도된다. 바람직하게, 약제학적 조성물은 정맥 내, 피하, 또는 근육 내와 같이 비경구적으로 투여되거나, 또는 연속적 또는 박동성 주입의 방식에 의해 투여된다.
그러므로, 본 발명의 나아간 양태는 인자 Ⅶ-반응성 증후군의 치료를 위한 약물의 조제에 있어서 고체의 안정화된 조성물의 사용에 관련된다. 즉, 본 발명의 한 양태는 인자 Ⅶ-반응성 증후군을 치료하기 위한 약물의 조제에 있어서 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 사용에 관련되는데, 상기 약물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 조성물을 포함하고, 상기 조성물은 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는다.
더욱이, 또다른 양태에서 본 발명은 인자 Ⅶ-반응성 증후군을 치료하기 위하여 상기 안정화된 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 환자에게 투여하는 것에 관련된다. 따라서, 본 발명은 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 조성물의 유효량을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 상기 조성물은 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는다.
다른 구체예에서, 상기 인자 Ⅶ-반응성 증후군은 A형 혈우병, B형 혈우병, 인자 XI 결핍증, 인자 Ⅶ 결핍증, 혈소판 감소증, von Willebrand병, 응고 인자 저해제의 존재, 수술 및 외상이다. 게다가, 인자 Ⅶ-반응성 증후군은 항응고 요법과 연관될 수 있다.
설명된 것과 같이 조성물은 고체 상태이다. 따라서, 적당한 구체예에서 약물은 용해되기에 적합하여, 약물의 비경구적 투여를 허용해야 한다. 따라서, 조성물이 환자에게 투여될 때, 투여 단계에 앞서 적합한 액체에 용해되는 단계가 포함된다.
본문에 사용된 약어:
FⅦ 단일 사슬 형태의 응고 인자 Ⅶ
FⅦa 절단된, 활성화된 이중-사슬 형태의 응고 인자 Ⅶ
rFⅦ(rFⅦa) 재조합 인자 Ⅶ (재조합 인자 Ⅶa)
하기 실시예는 설명일 뿐, 제한의 방법은 아니다.
실시예 1
인자 Ⅶ 폴리펩티드를 포함하는 조성물 및 실시예 2에 따라 제조되는 것이 나타난다. 전형적인 부형제 및 그것의 전형적인 양이 나타난다.
표 1은 조성물이 액체 형태인 사건에서, 즉 제조의 종결 (예를 들어, 냉동-건조의 종결) 전에, 또는 재구성된 용액에서 활성 성분 및 부형제의 농도를 나타낸다.
표 2는 조성물이 고체 상태인 사건에서, 즉 냉동-건조된 형태에서 활성 성분 및 부형제의 농도를 나타낸다.
실시예 2
조성물의 제조
일반적으로, 조성물은 정제된 벌크 용액으로부터 조제하였다. 부형제를 첨가하고, 원하는 rFⅦa의 농도로 용액을 희석하였다. 멸균 막 필터 (0.2 마이크론 천공 크기 또는 이에 상당하는 것)를 사용하여 결과 용액을 멸균 여과하고 멸균 유리 바이얼에 채웠다. 바이알을 냉동-건조하고, 마개를 막은 후 알루미늄 플립-오프 타입 캡으로 밀봉했다.
실시예 3
실시예 2에 설명된 공정에 따라 다양한 양의 염화 나트륨, 만니톨, 수크로스및 메티오닌을 포함하고 다양한 pH 값을 갖는 조성물 1-19를 조제하였다. 조성물은 고정된 농도의 인자 Ⅶ (1.0 mg/ml), 염화 칼슘, 2H20 (1.47 mg/ml), 글리실글리신 (1.32 mg/ml) 및 폴리소르베이트 80 (1.0 mg/ml)를 포함한다.
실시예 4
안정성 지표 매겨변수 측정에 사용된 분석 방법
A. 역상 HPLC (RP-HPLC)에 의한 산화된 형태의 측정:
HPLC 칼럼 : 5pm의 입자 크기 및 300Å의 천공 크기를 갖는 부틸결합 실리카로 포장된 4.5x250 mm 칼럼. 칼럼 온도 : 70℃. 용리액 A : 물 99.9 부피% 및 트리플루오르아세트산 0.1 부피%. 용리액 B : 아세토니트릴 80 부피%, 트리플루오르 아세트산 0.09 부피% 및 물 19.91 부피%. X% B 부터 (X+13) % B까지의 직선 구배로 30분 동안 칼럼을 용리하였다. 유속 : 1.0 ml/분. 검출 : 214 nm.
산화된 형태는 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 메티오닌 설폭시드이다. 예를 들어, FⅦ의 두가지 주요 유도체는 Met(0)298 FⅦ 및 Met(0)306 FⅦ이다.
산화된 형태는 조제 후 조성물 내의 인자 Ⅶ의 초기 함량 백분율로서 표현하였고 인자 Ⅶ의 산화된 형태로서 회수하였다.
B. 겔 침투 HPLC (GP-HPLC)에 의한 인자 Ⅶ 폴리펩티드 응집체의 측정.
GP-HPLC는 Waters Protein Pak 300 SW 칼럼 상에서 작동하였다. 7.5x300 mm. 이동상으로서 5% 이소프로판올을 함유한 0.2 M 황산 암모늄 pH 7.0 사용. 유속 : 0.5 ml/분 및 검출: 215 nm.
응집체의 함량은 조제 후 조성물에 있는 인자 Ⅶ의 초기량의 백분율로서 나타냈고 인자 Ⅶ의 이합체, 올리고머 및 다합체 형태로서 회수하였다.
실시예 5
냉동-건조 공정의 종결 후 및 저장 상에서 인자 Ⅶa의 산화된 형태의 함량
실시예 3의 조성물 1-19는 냉동-건조의 종결 후 및 30℃에서의 2 및 8 개월 저장 후 산화된 형태의 함량에 대하여 방법 A (실시예 4)로 분석하였다.
통계적 분석은 메티오닌을 포함하는 조성물이 산화적 분해에 대하여 더욱 안정하다는 것을 나타낸다.
실시예 6
냉동-건조 공정의 종결 후 및 저장 상에서 인자 Ⅶa 응집체의 함량:
실시예 3의 조성물 1-19는 냉동-건조의 종결 후 및 30℃에서의 2 및 8 개월 저장 후 산화된 형태의 함량에 대하여 방법 B (실시예 4)로 분석하였다.
통계적 분석은 조성물 내 수크로스의 존재가 응집체의 형성을 감소시키기 위해 중요하다는 것을 나타낸다.
실시예 7
냉동-건조 공정의 종결 후 인자 Ⅶa의 이합체 및 올리고머 형태의 함량:
아래 표에 열거된 것과 같이 폴리올 및 당류를 포함하는 조성물 A는 실시예 2에 설명한 공정에 따라 조제하였다. 조성물은 인자 Ⅶa (1.0 mg/ml), 염화 칼슘,2H20 (1.47 mg/ml), 글리실글리신 (1.32 mg/ml) 및 폴리소르베이트e 80 (0.7 mg/ml)을 더 포함한다. pH는 5.0이다.
조성물 A는 냉동-건조의 종결 후 및 30℃에서 1 및 2 개월 간의 저장 후 응집체의 함량에 대하여 방법 B (실시예 4)로 분석하였다. 표는 응집체로서 회수된 인자 Ⅶa의 초기 함량의 %를 나타낸다.
실시예 8
냉동-건조된 케이크의 구조적 안정성은 다양한 조성물 1-19에 대하여 나타나며, 실시예 3을 참조한다. 수크로스에 대한 만니톨의 비율은 각 조성물에 대하여 보고하였다.
실시예 9
하기 제제는 1 및 5 ml의 충전 부피를 이용하여 실시예 2에 설명한 것과 같이 조제하였다.
제제의 안정성은 25℃, 30℃ 및 40℃에서 실험하였고, 하기 결과를 얻었다. 바이알은 분석에 앞서 물에 재구성하였다.
이합체 및 올리고머 형태
이합체 및 올리고머 형태의 함량은 실시예 4에서 설명한 것과 같이 GP-HPLC로 측정하였다. 모든 결과는 %로 나타낸다.
5 ml 충전 부피:
1 ml 충전 부피:
더욱이, 제제 A (= 참조) 및 제제 B (= 신규)에 대한, 충전 부피 5 ml의 응집체 형태의 함량은 도 2a에 나타난다.
산화된 형태
산화된 형태의 함량은 실시예 4에서 설명한 것과 같이, RP-HPLC로 측정하였다.
5 ml 충전 부피:
1 ml 충전 부피:
더욱이, 제제 A (= Ref) 및 제제 B (= New)에 대한, 충전 부피 5 ml의 산화된 형태의 함량은 도 2b에 나타난다.
활성
활성은 실시예 12에 설명된 것과 같이 30℃에서 3개월동안 저장한 제제에 대하여 1단계 응고 검정으로 측정하였다. 특이적 활성은 제제 내의 rFⅦa 함량에 기초하여 계산하였고 하기 결과를 얻었다.
결과의 해석
결과는 만니톨, 수크로스, 및 메티오닌을 함유하는 제제 B 및 C가 더욱 안정하다-즉, 이합체 및 올리고머 형태 및 산화된 형태의 함량이 더 느리게 증가하는 것으로 나타난다. 따라서, 이러한 제제의 활성은 30℃에서 3 개월동안 저장된 후 측정된 바와 같이 더 높다.
실시예 10
하기 제제는 5 ml의 충전 부피를 이용하여 실시예 2에 설명된 것과 같이 조제하였다.
바이알은 물에 재구성하고 제제의 물리적 안정성을 시험하기 위해 19 시간 동안 교반하였다. 교반의 효과는 시각적 정밀 검사 및 400 nm (= 하기 표의 Abs)에서의 UV 흡광도 측정을 통해 연구하였다. 하기 결과는 세정제의 첨가에 의해 증가한 물리적 안정성을 명백히 나타낸다.
실시예 11
실시예 2에 설명된 것과 같이 6가지 제제를 조제하였다. 제제의 조성물은 다음과 같다.
rFⅦa 1. 0 mg/ml
CaCl210 mM
글리실글리신 10 mM
L-히스티딘 10 mM
NaCl 39 mM
Tween 80 0.07 mg/ml
만니톨 25 mg/ml
수크로스 10 mg/ml
6가지 제제 각각은 상이한 pH로 조절하였다.
제제 A: pH 5.0
제제 B: pH 5.5
제제 C: pH 6.0
제제 D: pH 6.5
제제 E: pH 7.0
제제 F: pH 7.5
6가지 제제의 안정성은 25℃ 및 40℃에서 저장한 바이알에 대하여 연구하였다. 하기 표 (및 도 1a 및 1b)에 나타난 결과를 얻었다.
이합체 및 올리고머 형태 및 산화된 형태의 함량은 실시예 4에 설명된 것과 같이 측정하였다.
실시예 12
인자 Ⅶ 폴리펩티드의 생물학적 활성을 시험하기 위한 검정 :
인자 Ⅶ a 활성에 대한 시험 :
인자 Ⅶa 활성을 시험함으로써 적합한 인자 Ⅶa 변체를 선택하기에 적합한검정은 단순한 예비적인 시험관 내 시험 ("시험관 내 가수분해 검정")으로써 수행할 수 있다.
시험관 내 가수분해 검정
천연 (야생형) 인자 Ⅶa 및 인자 Ⅶa 변체 (양자 모두 이하 "인자 Ⅶa"로서 지칭함)는 특이적 활성에 대하여 검정될 수 있다. 또한 이들의 특이적 활성을 직접 비교하도록 평행으로 검정될 수 있다. 검정은 마이크로티터 플레이트(MaxiSorp, Nunc, Denmark)에서 수행하였다. 발색 물질인 D-Ile-Pro-Arg-p-니트로아닐리드 (S-2288, Chromogenix, Sweden)를 최종 농도 1 mM로 0.1 M NaCl, 5 mM CaCl2및 1 mg/ml 소 혈청 알부민을 함유한 50 mM Hepes, pH 7.4 중 인자 Ⅶ에 첨가하였다 (최종 농도 100 nM). 405 nm에서의 흡광도를 SpectraMax™340 플레이트 판독기 (Molecular Devices, USA)에서 연속적으로 측정하였다. 20분의 인큐베이션 동안 발생한 흡광도는, 효소를 함유하지 않은 블랭크 웰에서의 흡광도를 공제한 후, 변체 및 야생형 인자 Ⅶa의 활성도 사아의 비율을 계산하는데 사용하였다 :
비율 = (A405nm 인자 Ⅶa 변체)/ (A405nm 인자 Ⅶa 야생형).
여기에 기초하여, 예를 들어 변체의 활성 및 천연 인자 Ⅶ (야생형 FⅦ)의 활성이 대략 1.0 이상인, 인자 Ⅶa에 상당하거나 또는 더 높은 활성을 갖는, 인자 Ⅶa 변체를 식별할 수 있다.
인자 Ⅶa 또는 인자 Ⅶa 변체의 활성은 또한 100-1000 nM의 농도에서 적당히 인자 X와 같은 생리학적 물질을 이용하여 측정할 수 있는데, 생성된 인자 Xa는 적합한 발색 물질 (예를 들어, S-2765)의 첨가 후 측정한다 ("시험관 내 단백질 가수분해 검정"). 그 외에, 활성 검정은 생리학적 온도에서 실행할 수 있다.
시험관 내 단백질 가수분해 검정
천연 (야생형) 인자 Ⅶa 및 인자 Ⅶa 변체 (양자 모두 이하 "인자 Ⅶa"로서 지칭함)는 이들의 특이적 활성을 직접 비교하도록 평행으로 검정될 수 있다. 검정은 마이크로티터 플레이트(MaxiSorp, Nunc, Denmark)에서 수행하였다. 0.1 M NaCl, 5 mM CaCl2및 1 mg/ml 소 혈청 알부민을 함유한 100μl 50 mM Hepes, pH 7.4 중 인자 Ⅶa (10 nM) 및 인자 X (0.8 마이크로M)은 15분 동안 인큐베이션 하였다. 그 다음 0.1 M NaCl, 20 mM EDTA 및 1 mg/ml 소 혈청 알부민을 함유한 50 μl 50 mM Hepes, pH 7.4를 첨가하여 인자 X 절단을 중지하였다. 생성된 인자 Xa의 양은 발색 물질인 Z-D-Arg-Gly-Arg-p-니트로아닐리드 (S-2765, Chromogenix, Sweden)를 최종 농도 0.5 mM로 첨가하여 측정하였다. 405 nm에서의 흡광도는 SpectraMax™340 플레이트 판독기 (Molecular Devices, USA)에서 연속적으로 측정하였다. 10분 동안 발생한 흡광도는, FⅦa를 함유하지 않은 블랭크 웰에서의 흡광도를 공제한 후, 변체 및 야생형 인자 Ⅶa의 단백질 가수분해 활성 간의 비율을 계산하는데 사용하였다 :
비율 = (A405nm 인자 Ⅶa 변체)/ (A405nm 인자 Ⅶa 야생형).
여기에 기초하여, 예를 들어 변체의 활성 및 천연 인자 Ⅶ (야생형 FⅦ)의 활성이 대략 1.0 이상인, 인자 Ⅶa에 상당하거나 또는 더 높은 활성을 갖는, 인자Ⅶa 변체를 식별할 수 있다.
트롬빈 생성 검정 :
인자 Ⅶ 또는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드 또는 인자 Ⅷ 또는 인자 Ⅷ-관련 폴리펩티드 (예를 들어, 변체)의 트롬빈 생성 활성은 (참고문헌으로서 여기 수록된 Monroe et al. (1997) Brit. J. Haematol. 99,542-547의 543 페이지에 설명된 것과 같이)모든 관련된 생리적 농도의 응고 인자 및 저해제 및 활성화된 혈소판을 포함한 검정에서 측정할 수 있다.
응고 검정 :
인자 Ⅶ 폴리펩티드의 활성은 또한 본질적으로 WO 92/15686 또는 US 5,997,864에 설명된 것과 같이 1-단계 응고 검정 (검정 4)을 이용하여 측정할 수 있다. 간단하게, 시험되는 샘플은 50 mM Tris (pH 7.5)에 희석하고, 0. 1 % BSA 및 100 μL는 100 μL의 인자 Ⅶ 결핍 혈장 및 10 mM Ca2+를 함유한 200 μL 200의 트롬보플라스틴 C와 인큐베이션 한다. 응고 시간을 측정하고 참고 표준 또는 일련의 희석에서 정상 인간 혈청의 풀을 이용한 표준 곡선과 비교한다.

Claims (54)

  1. 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
    a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
    b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
    c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
    d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
    e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서, 산화방지제 및 만니톨의 조합은 당류를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서, 메티오닌 및 폴리올의 조합은 당류를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서, 당류 및 만니톨의 조합은 산화방지제를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서, 수크로스 및 폴리올의 조합은 산화방지제를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 산화방지제는 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌, 글루타티온, 및 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌 및 글루타티온 중 어느 하나를 함유한 펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 당류는 수크로스, 덱스트로즈, 락토오즈, 말토오즈, 트레할로즈, 시클로덱스트린, 말토덱스트린 및 덱스트란으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리올은 만니톨, 소르비톨 및 자일리톨로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 30℃에서 8 개월 동안 저장된 후 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 초기 함량 중 약 5 % w/w 이하, 바람직하게는 약 4.0% w/w, 3.0% w/w, 2.5% w/w, 2.0% w/w, 1.5% w/w 이하, 또는 약 1.0% w/w 이하가 응집체로 전환될 만큼 안정한 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 30℃에서 8 개월 동안저장된 후 인자 Ⅶ 폴리펩티드 초기 함량 중 약 6% w/w 이하, 바람직하게는 약 5% w/w, 4.0% w/w, 3.0% w/w, 2.5% w/w, 2.0% w/w 이하, 또는 약 1.5% w/w 이하가 산화된 형태로 전환될 만큼 안정한 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 선행하는 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리올은 약 5% w/w 내지 90% w/w, 바람직하게는 약 18% w/w 내지 88% w/w, 18% 내지 83%, 25% 내지 80%, 40% 내지 80%, 50% 내지 80%, 또는 약 50% w/w 내지 70% w/w 범위의 양인 것을 특징으로 하는 조성물.
  12. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류는 약 0 내지 85% w/w, 바람직하게는 약 3% w/w 내지 80% w/w, 7% 내지 75%, 10% 내지 70%, 10% 내지 50%, 10% 내지 40%, 또는 약 10% w/w 내지 35% w/w 범위의 양인 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리올은 상기 당류에 대하여 약 100:1 내지 1:50, 바람직하게는 약 50:1 내지 1:10 ; 20:1 내지 1:5; 10:1 내지 1:2 ; 6:1 내지 1:2 ; 4:1 내지 1:1; 또는 약 4:1 내지 3:2의 중량비인 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 수성 용매에 용해될 때 상기 조성물의 pH가 3 내지 9의 범위, 바람직하게는 pH가 4 내지 7의 범위, 더 바람직하게는 4.5내지 6.5의 범위, 훨씬 더욱 바람직하게는 5 내지 6의 범위로 유지하는데 적합한 작용제를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제 14 항에 있어서, 상기 작용제는 시트레이트, 아세테이트, 히스티딘, 말레이트, 포스페이트, 타르타르산, 숙신산, MES, HEPES, PIPES, 이미다졸, TRIS, 락테이트, 글루타메이트 및 글리실글리신으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  16. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 긴장성 변형제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  17. 제 16 항에 있어서, 긴장성 변형제는 아세트산 나트륨, 락트산 나트륨, 염화 나트륨, 염화 칼륨 및 염화 칼슘으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  18. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 계면 활성제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  19. 제 18 항에 있어서, 계면 활성제는 폴리소르베이트 20 또는 80과 같은 폴리소르베이트; Brij 35®와 같은 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르 또는 폴록사머 188 또는 407과 같은 폴록사머; 및 다른 에틸렌/폴리프로필렌 블록 폴리머 또는 PEG8000과 같은 폴리에틸렌글리콜 (PEG)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  20. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 벌크제로서 작용하는 다른 약제학적 부형제를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  21. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 당류는 수크로스인 것을 특징으로 하는 조성물.
  22. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리올은 만니톨인 것을 특징으로 하는 조성물.
  23. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa, 재조합 인간 인자 Ⅶa 및 인자 Ⅶ 서열 변체로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  24. 제 23 항에 있어서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 Ⅶa 또는 재조합 인간 인자 Ⅶa인 것을 특징으로 하는 조성물.
  25. 제 1 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항에 있어서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드이고 여기에서 상기 인자 Ⅶ-관련 폴리펩티드 및 야생형 인자 Ⅶ의 활성 사이의 비율은 본 명세서에 설명된 것과 같이 하나 이상의 "시험관 내 단백질 가수분해 검정" 및 "시험관 내 가수분해 검정"으로 시험될 때 적어도 1.25인 것을 특징으로 하는 조성물.
  26. 제 23 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 약 0.6 mg/ml 내지 약 6 mg/ml, 약 0.6 mg/ml 내지 약 5 mg/ml, 또는 약 0.6 mg/ml 내지 약 4 mg/ml와 같은, 약 0.6 mg/ml 내지 약 10.0 mg/ml의 농도로 존재하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  27. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 수분 함량은 약 2.5% w/w 이하, 바람직하게는 약 2% w/w 이하, 가장 바람직하게는 약 1.5% w/w 이하인 것을 특징으로 하는 조성물.
  28. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 동결건조된 케이크인 것을 특징으로 하는 조성물.
  29. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은, 인자 Ⅶ 폴리펩티드, 만니톨, 수크로스, 및 Tween 80® 또는 폴록사머 188®과 같은 폴리소르베이트 또는 폴록사머로부터 선택되는 계면 활성제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  30. 제 29 항에 있어서, 메티오닌을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  31. 제 29 항 또는 제 30 항 중 어느 한 항에 있어서, L-히스티딘을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  32. 제 29 항 내지 제 31 항 중 어느 한 항에 있어서, CaCl2, NaCl, 및 글리실글리신의 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  33. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 제제 A 내지 D의 목록으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  34. 선행하는 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 제제 Ex 내지 Lx의 목록으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  35. 제 29 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서, 인자 Ⅶ 폴리펩티드는 인간 인자 Ⅶa인 것을 특징으로 하는 조성물.
  36. i) a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
    b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
    c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
    d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
    e) 메티오닌
    으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하는 용액으로 상기 인자 Ⅶ 폴리펩티드를 제공하는 단계;
    ii) 약 3 % w/w 이하의 수분 함량을 갖는 고체 조성물을 얻기 위해 상기 용액을 프로세싱하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 안정한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 조제 방법.
  37. 제 36 항에 있어서, 산화방지제는 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌, 글루타티온, 및 호모시스테인, 시스테인, 시스타티오닌, 메티오닌 및 글루타티온 중 어느 하나를 함유한 펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  38. 제 36 항 또는 제 37 항에 있어서, 당류는 수크로스, 덱스트로즈, 락토오즈, 말토오즈, 트레할로즈, 시클로덱스트린, 말토덱스트린 및 덱스트란으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  39. 제 36 항 내지 제 38 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리올은 만니톨, 소르비톨 및 자일리톨로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  40. 제 36 항 내지 제 39 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리올은 약 0.5 내지 약 75 mg/ml, 바람직하게는 약 5 mg/ml 내지 45 mg/ml, 약 5 내지 35 mg/ml, 약 5 내지 25 mg/ml, 5 내지 20 mg/ml, 20 내지 40 mg/ml, 또는 약 20 내지 약 30 mg/ml와 같이, 약 2 내지 45 mg/ml 범위의 양으로 존재하는 것을 특징으로 하는 방법.
  41. 제 36 항 내지 제 40 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류는 약 0.5 내지 75 mg/ml, 바람직하게는 약 5 mg/ml 내지 45 mg/ml, 약 5 내지 35 mg/ml, 약 5 내지 25 mg/ml, 또는 약 5 내지 20 mg/ml와 같이, 약 2 내지 45 mg/ml 범위의 양으로 존재하는 것을 특징으로 하는 방법.
  42. 제 36 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 산화방지제는 약 0.05 내지 10 mg/ml, 바람직하게는 약 0.1 내지 5 mg/ml, 더 바람직하게는 약 0.1 mg/ml 내지 2.5 mg/ml, 더욱 더 바람직하게는 약 0.1 내지 2 mg/ml, 가장 바람직하게는 약 0.1 내지 1 mg/ml 범위의 양으로 존재하는 것을 특징으로 하는 방법.
  43. 제 36 항 내지 제 42 항 중 어느 한 항에 있어서, 당류는 수크로스인 것을특징으로 하는 방법.
  44. 제 36 항 내지 제 43 항 중 어느 한 항에 있어서, 산화방지제는 메티오닌인 것을 특징으로 하는 방법.
  45. 제 36 항 내지 제 43 항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리올은 만니톨인 것을 특징으로 하는 방법.
  46. 제 36 항 내지 제 45 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 공정은 냉동-건조를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  47. 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
    a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
    b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
    c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
    d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
    e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하고, 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는 조성물의 유효량을 이것이 필요한 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 인자 Ⅶ-반응성 증후군의 치료 방법.
  48. 제 47 항에 있어서, 상기 증후군은 A형 혈우병, B형 혈우병, 인자 XI 결핍증, 인자 Ⅶ 결핍증, 혈소판 감소증, von Willebrand병, 응고 인자 저해제의 존재, 수술, 외상, 희석성 응고병증, 및 항응고 요법으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  49. 제 47 항 또는 제 48 항 중 어느 한 항에 있어서, 투여 단계에 앞서 적합한 액체에 조성물을 용해시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  50. 제 47 항 내지 제 49 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 제 1 항 내지 제 33 항 중 어느 한 항에 의해 정의되는 것을 특징으로 하는 방법.
  51. 인자 Ⅶ-반응성 증후군을 치료하기 위한 약물의 조제를 위한 인자 Ⅶ 폴리펩티드의 사용으로서, 상기 약물은 인자 Ⅶ 폴리펩티드 및
    a) 산화방지제 및 만니톨의 조합 ;
    b) 메티오닌 및 폴리올의 조합 ;
    c) 당류 및 만니톨의 조합 ;
    d) 수크로스 및 폴리올의 조합 ; 및
    e) 메티오닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 안정화제를 포함하고, 상기 조성물은 약 3% 이하의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 인자Ⅶ 폴리펩티드의 사용.
  52. 제 51 항에 있어서, 상기 증후군은 A형 혈우병, B형 혈우병, 인자 XI 결핍증, 인자 Ⅶ 결핍증, 혈소판 감소증, von Willebrand 병, 응고 인자 저해제의 존재, 수술, 외상 및 항응고 요법으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 사용.
  53. 제 51 항 또는 제 52 항 중 어느 한 항에 있어서, 약물은 용해되기에 적합한 것을 특징으로 하는 사용.
  54. 제 51 항 내지 제 53 항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 제 1 항 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 의해 정의된 것과 같은 것을 특징으로 하는 사용.
KR10-2004-7020858A 2002-06-21 2003-06-20 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물 KR20050013148A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DKPA200200963 2002-06-21
DKPA200200963 2002-06-21
PCT/DK2003/000419 WO2004000347A1 (en) 2002-06-21 2003-06-20 Stabilised solid compositions of factor vii polypeptides

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020117007292A Division KR101212025B1 (ko) 2002-06-21 2003-06-20 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20050013148A true KR20050013148A (ko) 2005-02-02

Family

ID=34178323

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR10-2004-7020858A KR20050013148A (ko) 2002-06-21 2003-06-20 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물
KR1020117007292A KR101212025B1 (ko) 2002-06-21 2003-06-20 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020117007292A KR101212025B1 (ko) 2002-06-21 2003-06-20 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물

Country Status (16)

Country Link
US (11) US20040248793A1 (ko)
EP (2) EP2283856B1 (ko)
JP (1) JP4648002B2 (ko)
KR (2) KR20050013148A (ko)
CN (2) CN1671410B (ko)
AU (1) AU2003240438A1 (ko)
BR (1) BRPI0311959B8 (ko)
CA (1) CA2490342C (ko)
DK (2) DK2283856T3 (ko)
ES (2) ES2523655T5 (ko)
HU (1) HUE037603T2 (ko)
IL (1) IL165608A (ko)
PL (1) PL207018B1 (ko)
PT (2) PT2283856T (ko)
RU (1) RU2366451C2 (ko)
WO (1) WO2004000347A1 (ko)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040247607A1 (en) * 1999-11-08 2004-12-09 Novus International, Inc. Use of surfactants to stabilize oocysts
BR0215216A (pt) 2001-12-21 2004-11-16 Novo Nordisk Healthcare Ag Composição aquosa lìquida, método para preparar uma composição aquosa lìquida de um polipeptìdeo de fator vii, uso de uma composição aquosa lìquida, e, método para o tratamento de uma sìndrome de resposta ao fator vii
PT2283856T (pt) * 2002-06-21 2017-12-26 Novo Nordisk Healthcare Ag Composições sólidas estabilizadas de polipéptidos do fator viia
JP4658041B2 (ja) 2003-06-25 2011-03-23 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト Ｖｉｉ因子ポリペプチドの液体組成物
DE602004023848D1 (de) * 2003-07-01 2009-12-10 Novo Nordisk Healthcare Ag Von factor vii polypeptiden
AU2011203354B2 (en) * 2003-12-19 2014-07-17 Novo Nordisk Health Care Ag Stabilised compositions of factor VII polypeptides
TR201809670T4 (tr) * 2003-12-19 2018-07-23 Novo Nordisk Healthcare Ag Faktör VII polipeptitlerinin stabilize edilmiş kompozisyonları.
EP2492261B1 (en) 2003-12-23 2015-02-18 Infinity Discovery, Inc. Analogs of benzoquinone-containing ansamycins for the treatment of cancer
ES2339953T5 (es) † 2004-05-04 2020-05-06 Novo Nordisk Healthcare Ag Glicoformas de factor VII ligadas a O y método de fabricación
US20090130085A1 (en) * 2005-02-24 2009-05-21 Novo Nordish Healthcare Ag Amidino-Compounds for Stabilizing Factor VII Polypeptide Formulations
AU2012213951B2 (en) * 2005-04-28 2014-10-16 Novo Nordisk Health Care Ag A closed container comprising an activated factor VII polypeptide, processes for the preparation of the same, and a kit and a method for use of the kit
US8703706B2 (en) * 2005-04-28 2014-04-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Closed container comprising an activated factor VII polypeptide, processes for the preparation of the same, and a kit and a method for use of the kit
US8137677B2 (en) * 2005-10-06 2012-03-20 Allergan, Inc. Non-protein stabilized clostridial toxin pharmaceutical compositions
ES2257225B1 (es) * 2006-02-17 2007-03-16 Grifols, S.A Preparacion terapeutica de fviia de muy alta pureza y metodo para su obtencion.
TW200806317A (en) * 2006-03-20 2008-02-01 Wyeth Corp Methods for reducing protein aggregation
JP2010513462A (ja) * 2006-12-20 2010-04-30 バイエル・ヘルスケア・エルエルシー 第ＶＩＩおよび第ＶＩＩａ因子組成物
US20080255080A1 (en) * 2007-04-12 2008-10-16 Wright James L Hydroquinone Ansamycin Formulations
JP5401446B2 (ja) * 2007-04-26 2014-01-29 バイエル ヘルスケア エルエルシー 凍結貯蔵を目的とした、組み換えタンパク質溶液の安定化
WO2008135500A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-13 Novo Nordisk Health Care Ag High concentration factor vii polypeptide formulations comprising an aromatic preservative and an antioxidant
JP5513380B2 (ja) 2007-06-25 2014-06-04 アムジエン・インコーポレーテツド 肝細胞増殖因子に対する特異的結合剤の組成物
CN101648012A (zh) * 2008-04-24 2010-02-17 伊玛提克斯生物技术有限公司 结合到人类白细胞抗原(hla)ⅰ类或ⅱ类分子上用作疫苗的肿瘤相关肽新制剂
SI2113253T1 (sl) 2008-04-30 2010-06-30 Immatics Biotechnologies Gmbh Nove formulacije s tumorjem povezanih peptidov ki se vežejo na molekule humanega levkocitnega antigena HLA razreda I ali II za cepiva
WO2010045442A1 (en) 2008-10-15 2010-04-22 Infinity Discovery, Inc. Ansamycin hydroquinone compositions
FR2947181B1 (fr) 2009-06-26 2012-05-04 Lfb Biotechnologies Composition de facteur vii
EP2364690A1 (en) 2010-02-12 2011-09-14 Centro De Ingenieria Genetica Y Biotecnologia Orally administrable pharmaceutical pellet of epidermal growth factor
CN102441172B (zh) * 2011-12-06 2014-05-07 中国医学科学院输血研究所 高纯度凝血酶原复合物制品冷冻干燥稳定剂
US8883979B2 (en) 2012-08-31 2014-11-11 Bayer Healthcare Llc Anti-prolactin receptor antibody formulations
US9795714B2 (en) * 2013-12-24 2017-10-24 Ares Trading S.A. FGF-18 formulation in alginate/collagen hydrogels
CN104826117B (zh) * 2015-05-05 2017-11-14 广东卫伦生物制药有限公司 用于人体血清免疫球蛋白溶液制剂的储存稳定剂
CN105424946B (zh) * 2015-07-16 2016-08-24 青岛古高生物科技有限公司 一种含迷迭香酸的凝血酶时间测定试剂
CN106139127B (zh) * 2016-08-05 2020-04-07 无锡药明生物技术股份有限公司 重组凝血因子ⅷ冻干制剂
AR109621A1 (es) * 2016-10-24 2018-12-26 Janssen Pharmaceuticals Inc Formulaciones de vacunas contra glucoconjugados de expec
CN112138149A (zh) * 2019-06-28 2020-12-29 北京基科晟斯医药科技有限公司 重组凝血因子viii制剂
EP3833381B1 (en) 2019-08-15 2022-08-03 Catalyst Biosciences, Inc. Modified factor vii polypeptides for subcutaneous administration
WO2023245335A1 (en) * 2022-06-20 2023-12-28 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd . Activators of coagulation factor x and formulations thereof for treating bleeding disorders
CN117860874B (zh) * 2024-03-12 2024-07-02 正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司 重组人凝血因子VIIa的药物组合物

Family Cites Families (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US115590A (en) 1871-06-06 Lfxlproxeixie
DE2916711A1 (de) 1979-04-25 1980-11-06 Behringwerke Ag Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung
US4956386A (en) * 1980-04-25 1990-09-11 Gist-Brocades N.V. Pharmaceutical compositions and process for their preparation
US4404132A (en) 1980-05-27 1983-09-13 Cutter Laboratories, Inc. Blood coagulation promoting product
CA1182748A (en) 1980-11-21 1985-02-19 Gerard Marx Method for synthesizing procoagulant factor viii activity
US4495278A (en) * 1981-04-27 1985-01-22 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Process for making novel blood clotting enzyme compositions
US4382083A (en) 1981-06-25 1983-05-03 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Therapeutic method for treating blood-clotting defects with factor VIIa
GR860984B (en) 1985-04-17 1986-08-18 Zymogenetics Inc Expression of factor vii and ix activities in mammalian cells
US5180583A (en) 1985-11-26 1993-01-19 Hedner Ulla K E Method for the treatment of bleeding disorders
ES2037664T3 (es) 1985-11-26 1993-07-01 Novo Nordisk A/S Composiciones y metodos para el tratamiento de trastornos hemorragicos.
US5595886A (en) 1986-01-27 1997-01-21 Chiron Corporation Protein complexes having Factor VIII:C activity and production thereof
JP2593500B2 (ja) 1986-06-24 1997-03-26 ノルデイスク ゲントフテ エー／エス ▲ｖｉｉｉ▼因子フラグメントの凝固活性複合物の製造方法
DE3877529T2 (de) 1987-10-23 1996-11-07 Centre Regional De Transfusion Herstellung von hoch-gereingtem menschlichen Faktor IX sowie anderem Plasmaproteinkonzentrat und dessen therapeutische Verwendung.
CA1329760C (en) 1987-10-29 1994-05-24 Ted C. K. Lee Plasma and recombinant protein formulations in high ionic strength media
US5472850A (en) 1991-04-10 1995-12-05 Oklahoma Medical Research Foundation Quantitative clotting assay for activated factor VII
JP2824430B2 (ja) 1989-08-02 1998-11-11 財団法人化学及血清療法研究所 血液凝固第▲ｖｉｉ▼因子または活性型血液凝固第▲ｖｉｉ▼因子の調製方法
US5580560A (en) 1989-11-13 1996-12-03 Novo Nordisk A/S Modified factor VII/VIIa
DE3939346A1 (de) 1989-11-29 1991-06-06 Behringwerke Ag Arzneimitel zur subkutanen oder intramuskulaeren applikation enthaltend polypeptide
DE4001451A1 (de) 1990-01-19 1991-08-01 Octapharma Ag Stabile injizierbare loesungen von faktor viii und faktor ix
AU651573B2 (en) 1990-01-29 1994-07-28 Novo Nordisk Health Care Ag Anticoagulant proteins
CA2103546C (en) 1991-02-28 2002-10-01 Kathleen L. Berkner Modified factor vii
US5788965A (en) 1991-02-28 1998-08-04 Novo Nordisk A/S Modified factor VII
US5833982A (en) 1991-02-28 1998-11-10 Zymogenetics, Inc. Modified factor VII
US5997864A (en) 1995-06-07 1999-12-07 Novo Nordisk A/S Modified factor VII
US5817788A (en) 1991-02-28 1998-10-06 Zymogenetics, Inc. Modified factor VII
WO1993000807A1 (en) 1991-07-03 1993-01-21 Cryolife, Inc. Method for stabilization of biomaterials
FR2684999A1 (fr) 1991-12-16 1993-06-18 Aquitaine Dev Transf Sanguine Procede de fabrication d'un concentre de facteur vii active de haute purete essentiellement depourvu des facteurs vitamine k dependants et des facteurs viiic et viiicag.
JP3155797B2 (ja) 1991-12-26 2001-04-16 株式会社日立製作所 過電圧自己保護型半導体装置、及び、それを使用した半導体回路
EP0638091B1 (en) 1992-04-30 2005-12-07 Probitas Pharma Inc. Improved solubilization and stabilization of factor viii complex
DE69329682T2 (de) 1992-08-27 2001-05-17 Stichting Sanquin Bloedvoorziening, Amsterdam Antikoerper spezifisch fur ein haemostatisches protein; seine verwendung zur isolation von intaktem protein; haemostatische zusammensetzungen ohne proteolytische spaltprodukte des proteins
DK38293D0 (da) 1993-03-31 1993-03-31 Novo Nordisk As Fremstilling af proteiner
SE9301581D0 (sv) * 1993-05-07 1993-05-07 Kabi Pharmacia Ab Protein formulation
HU219682B (hu) 1993-05-21 2001-06-28 Novo Nordisk A/S. Módosított VII faktor
WO1995003332A1 (en) 1993-07-23 1995-02-02 Baxter International Inc. Activated human factor viii and method of preparation
US6277828B1 (en) 1993-08-20 2001-08-21 Syntex (U.S.A.) Inc. Pharmaceutical formulations of nerve growth factor
US5576291A (en) 1993-09-13 1996-11-19 Baxter International Inc. Activated factor VIII as a therapeutic agent and method of treating factor VIII deficiency
IL113010A0 (en) 1994-03-31 1995-10-31 Pharmacia Ab Pharmaceutical formulation comprising factor VIII or factor ix with an activity of at least 200 IU/ml and an enhancer for improved subcutaneous intramuscular or intradermal administration
US6372716B1 (en) 1994-04-26 2002-04-16 Genetics Institute, Inc. Formulations for factor IX
US5580856A (en) 1994-07-15 1996-12-03 Prestrelski; Steven J. Formulation of a reconstituted protein, and method and kit for the production thereof
DE4435520A1 (de) 1994-10-04 1996-04-11 Immuno Ag Verfahren zur Trennung von rekombinantem pro-Faktor IX von rekombinantem Faktor IX
SE9403915D0 (sv) 1994-11-14 1994-11-14 Annelie Almstedt Process A
US5649959A (en) 1995-02-10 1997-07-22 Sherwood Medical Company Assembly for sealing a puncture in a vessel
US6255091B1 (en) 1995-04-28 2001-07-03 Axys Pharmaceuticals, Inc. Potentiating metal mediated serine protease inhibitors with cobalt or zinc ions
DE19531637A1 (de) 1995-08-28 1997-03-06 Immuno Ag Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Blutgerinnungsstörugnen, Verfahren zur Herstellung derselben und deren Verwendung
DE19538715A1 (de) 1995-10-18 1997-04-30 Behringwerke Ag Verfahren zur Reinigung von Faktor VII und aktiviertem Faktor VII
SE9503679D0 (sv) 1995-10-20 1995-10-20 Pharmacia Ab Antioxidants
US5993795A (en) 1995-11-09 1999-11-30 Takemoto Yushi Kabushiki Kaisha Protein composition derived from sesame seed and use thereof
US5925738A (en) * 1995-12-01 1999-07-20 The American National Red Cross Methods of production and use of liquid formulations of plasma proteins
US6320029B1 (en) 1996-11-29 2001-11-20 The American National Red Cross Methods of production and use of liquid formulations of plasma proteins
US5830852A (en) 1995-12-19 1998-11-03 Cobra Therapeutics, Ltd. Compositions for insulin-receptor mediated nucleic acid delivery
US5770700A (en) 1996-01-25 1998-06-23 Genetics Institute, Inc. Liquid factor IX formulations
DE19903693A1 (de) 1998-04-24 1999-10-28 Centeon Pharma Gmbh Protease zur Aktivierung des Gerinnungsfaktors VII
TWI240627B (en) 1996-04-26 2005-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Erythropoietin solution preparation
US5763401A (en) * 1996-07-12 1998-06-09 Bayer Corporation Stabilized albumin-free recombinant factor VIII preparation having a low sugar content
NZ336548A (en) 1996-12-24 2001-09-28 Biogen Inc Stable liquid interferon formulations comprising an amino acid as the stabilising agent
US5804420A (en) 1997-04-18 1998-09-08 Bayer Corporation Preparation of recombinant Factor VIII in a protein free medium
AU740753C (en) 1997-04-28 2002-10-10 Eli Lilly And Company Improved methods for processing activated protein C
US6461610B1 (en) 1997-07-18 2002-10-08 Novo Nordisk A/S Methods for modifying cell motility using factor VIIa or inactivated factor VIIa
US6310183B1 (en) 1997-09-10 2001-10-30 Novo Nordisk A/S Coagulation factor VIIa composition
AT409334B (de) 1997-09-19 2002-07-25 Immuno Ag Pharmazeutisches präparat enthaltend vitamin k-abhängige einzelfaktoren
US6017882A (en) 1997-10-23 2000-01-25 Regents Of The University Of Minnesota Modified vitamin K-dependent polypeptides
RU2142278C1 (ru) * 1997-10-31 1999-12-10 Чухаджян Ара Гарникович Гемостатическое средство местного действия
AT408613B (de) 1998-06-17 2002-01-25 Immuno Ag Pharmazeutisches faktor vii-präparat
CA2342606A1 (en) 1998-10-07 2000-04-13 Sigma-Aldrich Co. Thromboplastin reagents and methods for preparing and using such reagents
DE19853033A1 (de) 1998-11-18 2000-05-25 Centeon Pharma Gmbh Stabilisierte Proteinzubereitung für einen Gewebekleber
DK1820516T3 (da) 1999-02-22 2013-10-28 Univ Connecticut Nye albuminfrie faktor VIII-præparater
JP2000247903A (ja) 1999-03-01 2000-09-12 Chugai Pharmaceut Co Ltd 長期安定化製剤
US20010031721A1 (en) 1999-05-05 2001-10-18 Chandra Webb Highly concentrated, lyophilized, and liquid factor IX formulations
ES2252028T3 (es) 1999-07-13 2006-05-16 Biovitrum Ab Composiciones estables del factor viii.
DE19937218A1 (de) 1999-08-06 2001-02-08 Aventis Behring Gmbh Verfahren zur Reindarstellung der den Blutgerinnungsfaktor VII aktivierenden Protease, ihres Proenzyms oder eines Gemisches beider Proteine mittels Affinitätschromatographie
EP1210361B1 (en) 1999-08-17 2004-04-14 Novo Nordisk Health Care AG Stabilisation of freeze-dried cake
US6586574B1 (en) 1999-08-17 2003-07-01 Nn A/S Stabilization of freeze-dried cake
JP4451514B2 (ja) 1999-08-24 2010-04-14 財団法人化学及血清療法研究所 血液凝固第ｖｉｉ因子改変体
TWI245645B (en) 1999-09-08 2005-12-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Protein solution formulations and stabilization methods thereof
US6750053B1 (en) 1999-11-15 2004-06-15 I-Stat Corporation Apparatus and method for assaying coagulation in fluid samples
PL206148B1 (pl) 2000-02-11 2010-07-30 Bayer HealthCare LLCBayer HealthCare LLC Koniugat polipeptydowy, polipeptyd, sekwencja nukleotydowa, wektor ekspresyjny, komórka gospodarz, sposób wytwarzania koniugatu polipeptydowego, środek farmaceutyczny i zastosowanie koniugatu polipeptydowego
AU2001254624A1 (en) 2000-05-03 2001-11-12 Novo-Nordisk A/S Human coagulation factor vii variants
EP1280548B1 (en) 2000-05-03 2013-12-11 Novo Nordisk Health Care AG Subcutaneous administration of coagulation factor VII
IL152554A0 (en) 2000-05-10 2003-05-29 Novo Nordisk As PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING A FACTOR VIIa AND A FACTOR XIII
US7015194B2 (en) 2000-05-10 2006-03-21 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical composition comprising factor VIIa and anti-TFPI
IL154520A0 (en) 2000-09-13 2003-09-17 Novo Nordisk As Human coagulation factor vii variants
RU2325181C2 (ru) * 2000-10-02 2008-05-27 Ново Нордиск Хелт Кэр Аг Гликоформы фактора vii
HUP0301267A3 (en) 2000-10-02 2005-12-28 Novo Nordisk Healthcare Ag Factor vii glycoforms
WO2002038162A1 (en) 2000-11-09 2002-05-16 The Scripps Research Institute MODIFIED FACTOR VIIa
DE50114021D1 (de) 2001-01-08 2008-07-24 Csl Behring Gmbh Stabilisierte Flüssigzubereitung der den Blutgerinnungsfaktor VII aktivierenden Protease oder ihres Proenzyms
US6825323B2 (en) 2001-01-10 2004-11-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Compositions for treatment of hemorrhaging with activated factor VIIa in combination with fibrinogen and methods of using same
WO2002077218A1 (en) 2001-03-22 2002-10-03 Novo Nordisk Health Care Ag Coagulation factor vii derivatives
WO2003006054A1 (fr) 2001-07-10 2003-01-23 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Compositions hemostatiques pharmaceutiquement stables
GB0117879D0 (en) 2001-07-21 2001-09-12 Common Services Agency Storage of liquid compositions
US6858587B2 (en) 2001-11-02 2005-02-22 Novo Nordisk Pharmaceuticals, Inc. Use of tissue factor agonist or tissue factor antagonist for treatment of conditions related to apoptosis
US20030119743A1 (en) 2001-11-09 2003-06-26 Rasmus Rojkjaer Pharmaceutical composition comprising factor VII polypeptides and tissue plasminogen inhibitors
JP2005510515A (ja) 2001-11-09 2005-04-21 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト Ｖｉｉ因子ポリペプチドおよびプロテインｃ阻害剤を含む薬学的組成物
US7078479B2 (en) 2001-11-09 2006-07-18 Novo Nordisk Healthcare A/G Pharmaceutical composition comprising factor VII polypeptides and alpha2-antiplasmin polypeptides
US7125846B2 (en) 2001-11-09 2006-10-24 Novo Nordisk Healthcare A/G Pharmaceutical composition comprising factor VII polypeptides and factor V polypeptides
KR20040065278A (ko) 2001-12-21 2004-07-21 노보 노르디스크 에이/에스 변경된 인자 ⅶ 폴리펩티드의 액체 조성물
BR0215216A (pt) 2001-12-21 2004-11-16 Novo Nordisk Healthcare Ag Composição aquosa lìquida, método para preparar uma composição aquosa lìquida de um polipeptìdeo de fator vii, uso de uma composição aquosa lìquida, e, método para o tratamento de uma sìndrome de resposta ao fator vii
AU2002351755A1 (en) 2001-12-21 2003-07-15 Novo Nordisk A/S Liquid composition of modified factor vii polypeptides
US20040009981A1 (en) 2002-03-15 2004-01-15 David Bebbington Compositions useful as inhibitors of protein kinases
US20040009918A1 (en) 2002-05-03 2004-01-15 Hanne Nedergaard Stabilised solid compositions of modified factor VII
WO2003092731A1 (en) † 2002-05-03 2003-11-13 Novo Nordisk A/S Stabilised solid compositions of modified factor vii
PT2283856T (pt) 2002-06-21 2017-12-26 Novo Nordisk Healthcare Ag Composições sólidas estabilizadas de polipéptidos do fator viia
US6933808B2 (en) 2002-07-17 2005-08-23 Qing Ma Microelectromechanical apparatus and methods for surface acoustic wave switching
EP1422309A1 (de) 2002-11-22 2004-05-26 Siemens Aktiengesellschaft Verwendung einer Sprühkompaktierungsanlage zur Erzeugung einer Schicht und Schichtsystem hergestellt mittels einer Sprühkompaktierungsanlage und Schichtsystem
AT501088A2 (de) 2002-12-18 2006-06-15 Bio Prod & Bio Eng Ag Stabile therapeutische proteine
JP2006524195A (ja) 2003-03-18 2006-10-26 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト Ｖｉｉ因子ポリペプチドの液状水性医薬組成物
US7897734B2 (en) 2003-03-26 2011-03-01 Novo Nordisk Healthcare Ag Method for the production of proteins
WO2004103398A1 (en) 2003-05-23 2004-12-02 Novo Nordisk Health Care Ag Protein stabilization in solution
EP1646398A2 (en) 2003-06-13 2006-04-19 Novo Nordisk Health Care AG Formulations comprising factor viia and a factor vii related polypeptide
DE602004023848D1 (de) 2003-07-01 2009-12-10 Novo Nordisk Healthcare Ag Von factor vii polypeptiden
WO2005016365A2 (en) 2003-08-14 2005-02-24 Novo Nordisk Health Care Ag Liquid, aqueous pharmaceutical composition of factor vii polypeptides
TR201809670T4 (tr) 2003-12-19 2018-07-23 Novo Nordisk Healthcare Ag Faktör VII polipeptitlerinin stabilize edilmiş kompozisyonları.
US8703706B2 (en) 2005-04-28 2014-04-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Closed container comprising an activated factor VII polypeptide, processes for the preparation of the same, and a kit and a method for use of the kit

Also Published As

Publication number Publication date
WO2004000347A1 (en) 2003-12-31
AU2003240438A1 (en) 2004-01-06
EP2283856B1 (en) 2017-09-20
CA2490342A1 (en) 2003-12-31
RU2005101340A (ru) 2005-12-10
DK2283856T3 (da) 2017-11-20
RU2366451C2 (ru) 2009-09-10
US20150343064A1 (en) 2015-12-03
PL207018B1 (pl) 2010-10-29
CN101912601A (zh) 2010-12-15
US20070207956A1 (en) 2007-09-06
CN1671410B (zh) 2010-05-12
US20180085439A1 (en) 2018-03-29
US20190111118A1 (en) 2019-04-18
EP1517698B1 (en) 2014-08-13
KR101212025B1 (ko) 2013-01-09
IL165608A (en) 2011-04-28
US20040248793A1 (en) 2004-12-09
BR0311959A (pt) 2005-04-26
US20130017184A1 (en) 2013-01-17
DK1517698T3 (en) 2014-11-24
US8299029B2 (en) 2012-10-30
DK1517698T4 (da) 2018-01-29
US8729022B2 (en) 2014-05-20
EP1517698B2 (en) 2017-12-06
BRPI0311959B1 (pt) 2021-01-05
US20160228553A1 (en) 2016-08-11
PL373904A1 (en) 2005-09-19
ES2653555T3 (es) 2018-02-07
HUE037603T2 (hu) 2018-09-28
JP2006513983A (ja) 2006-04-27
CN1671410A (zh) 2005-09-21
US20200254072A1 (en) 2020-08-13
EP2283856A1 (en) 2011-02-16
CN101912601B (zh) 2012-08-29
ES2523655T3 (es) 2014-11-28
PT1517698E (pt) 2014-11-19
US20170128550A1 (en) 2017-05-11
CA2490342C (en) 2015-06-16
EP1517698A1 (en) 2005-03-30
US20190328851A1 (en) 2019-10-31
KR20110049897A (ko) 2011-05-12
BRPI0311959B8 (pt) 2021-05-25
US20140178356A1 (en) 2014-06-26
ES2523655T5 (es) 2018-04-23
IL165608A0 (en) 2006-01-15
PT2283856T (pt) 2017-12-26
JP4648002B2 (ja) 2011-03-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101212025B1 (ko) 인자 ⅶ 폴리펩티드의 안정화된 고체 조성물
JP5852024B2 (ja) Ｖｉｉ因子ポリペプチドの安定化された組成物
AU2011203354B2 (en) Stabilised compositions of factor VII polypeptides

Legal Events

Date Code Title Description
N231 Notification of change of applicant
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
J201 Request for trial against refusal decision
A107 Divisional application of patent
AMND Amendment
B601 Maintenance of original decision after re-examination before a trial
J301 Trial decision

Free format text: TRIAL DECISION FOR APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL REQUESTED 20110228

Effective date: 20120222

Free format text: TRIAL NUMBER: 2011101001550; TRIAL DECISION FOR APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL REQUESTED 20110228

Effective date: 20120222