KR20030009537A - 글루카곤-유사 펩티드-1 유사체 - Google Patents

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Abstract

11, 12, 16, 22, 23, 24, 25, 27, 30, 33, 34, 35, 36 또는 37 위치에 하나 이상의 변형을 갖는 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1) 화합물을 개시하였다. 이런 GLP-1 화합물로 치료하는 방법을 또한 개시하였다.

Description

글루카곤-유사 펩티드-1 유사체 {Glucagon-like Peptide-1 Analogs}
본 출원은 2000년 6월 16일자로 출원된 미국 가출원 제60/212,171호 및 2000년 10월 13일자로 출원된 미국 가출원 제60/240,349호의 이점을 청구한다.
글루카곤-유사 펩티드 1 (GLP-1)은 음식물 섭취에 반응하여 소장의 L-세포에서 분비되는 37 개 아미노산 펩티드이다. 인슐린 분비 (인슐린 분비 작용)의 자극에 의해 세포에 의한 글루코스 흡수가 야기되고 혈청 글루코스 농도가 감소된다는 것이 밝혀졌다 (문헌 [Mojsov, S., Int. J. Peptide Protein Research, 40: 333-343 (1992)]을 참조). 그러나, GLP-1(1-37)은 활성이 좋지 않고, GLP-1보다 생물학적으로 훨씬 효능있는 GLP 화합물로 불리는 절단된 유사체에 초점이 맞추어졌다. 예로는 GLP-1(7-37), GLP-1(7-36)NH2, Gly8-GLP-1(7-37)OH 및 Ser34-GLP-1(7-37)OH가 있다. 이들의 인슐린 분비를 자극하는 능력 때문에, GLP 화합물은 당뇨병, 비만 및 이와 관련된 증상의 치료를 위한 약물로서 밝은 전망을 보인다.
GLP-1 화합물은 2 개 이상의 다른 형태로 존재할 수 있다. 첫번째 형태는 생리적으로 활성이고 생리적 pH (7.4)에서 수용액에 쉽게 용해된다. 반대로, 두번째 형태는 인슐린 분비 활성이 거의 또는 전혀 없고 pH 7.4의 물에서 대체로 불용성이다. 불행히도, GLP-1 수용액을 교반시키거나, 소수성 표면에 노출시키거나,넓은 공기/물 계면을 가지는 경우 불활성 형태가 쉽게 생성된다. 혼합 작용 또는 펌프를 통한 연속적인 이동은 대량 제조 방법에서 통상적이며 이들 공정은 교반, 공기/물 계면 및(또는) 소수성 표면과의 접촉을 야기하여 불용성 형태를 생성하기 때문에, 불용성 형태로 전환하려는 경향이 활성 GLP-1 화합물의 상업적인 양의 생성을 매우 어렵게 한다. 불활성 형태로의 전환은 또한 저장하는 동안 또는 피검체에게 투여한 후 발생할 수 있는데, 이는 약물로서 상기 화합물의 사용을 더 어렵게 한다. 따라서, 현재 입수할 수 있는 GLP-1 화합물 보다 불용성 형태로의 전환이 더 어려운 생물학적으로 활성인 GLP-1 유사체가 더 필요하다.
본 발명에 의해 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 또는 37 번 위치에서 하나 이상이 변형된 다수의 GLP-1 유사체가 GLP-1(7-37)OH와 비교해서 응집하려는 경향이 현저하게 감소된다는 것이 밝혀졌다.
다수의 상기 유사체는 GLP-1(7-37)OH 및 Val8-GLP-1(7-37)OH와 같은 공지된 GLP-1 화합물에 필적하거나 일부 경우에서 더 큰 GLP-1 수용체 활성을 보유한다. 예를 들어, Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH의 응집 시간은 20 배 이상 더 길고 그의 GLP-1 수용체 활성은 GLP-1(7-37)OH보다 약 25％ 더 크다. 이런 발견에 기초하여, 신규 GLP-1 화합물 및 신규 GLP-1 화합물을 사용한 처리 방법이 본원에 개시되어 있다.
본 발명의 하나의 실시양태는 하기 화학식 I (서열 1)의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드이다:
His-Xaa8-Glu-Gly-Xaa11-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-
Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Xaa24-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-
Ile-Ala-Xaa31-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-R
상기 식에서,
Xaa8은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser 또는 Thr이고,
Xaa11은 Asp, Glu, Arg, Thr, Ala, Lys 또는 His이고,
Xaa12는 His, Trp, Phe 또는 Tyr이고,
Xaa16은 Leu, Ser, Thr, Trp, His, Phe, Asp, Val, Glu 또는 Ala이고,
Xaa22는 Gly, Asp, Glu, Gln, Asn, Lys, Arg, Cys 또는 시스테인산이고,
Xaa23은 His, Asp, Lys, Glu 또는 Gln이고,
Xaa24는 Glu, His, Ala 또는 Lys이고,
Xaa26은 Asp, Lys, Glu 또는 His이고,
Xaa27은 Ala, Glu, His, Phe, Tyr, Trp, Arg 또는 Lys이고,
Xaa30은 Ala, Glu, Asp, Ser 또는 His이고,
Xaa33은 Asp, Arg, Val, Lys, Ala, Gly 또는 Glu이고,
Xaa34는 Glu, Lys 또는 Asp이고,
Xaa35는 Thr, Ser, Lys, Arg, Trp, Tyr, Phe, Asp, Gly, Pro, His 또는 Glu이고,
Xaa36은 Arg, Glu 또는 His이고,
R은 Lys, Arg, Thr, Ser, Glu, Asp, Trp, Tyr, Phe, His, -NH2, Gly, Gly-Pro 또는 Gly-Pro-NH2이거나 또는 결실되나,
단 폴리펩티드는 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)-NH2의 서열을 갖지 않고, 폴리펩티드는 Gly8-GLP-1(7-37)OH, Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, Val8-GLP-1(7-36)NH2, Leu8-GLP-1(7-37)OH, Leu8-GLP-1(7-36)NH2, Ile8-GLP-1(7-37)OH, Ile8-GLP-1(7-36)NH2, Ser8-GLP-1(7-37)OH, Ser8-GLP-1(7-36)NH2, Thr8-GLP-1(7-37)OH 또는 Thr8-GLP-1(7-36)NH2, Ala11-GLP-1(7-37)OH, Ala11-GLP-1(7-36)NH2, Ala16-GLP-1(7-37)OH, Ala16-GLP-1(7-36)NH2, Ala27-GLP-1(7-37)OH, Ala27-GLP-1(7-36)NH2, Glu27-GLP-1(7-37)OH, Glu27-GLP-1(7-36)NH2, Ala33-GLP-1(7-37)OH, 또는 Ala33-GLP-1(7-36)NH2가 아니다.
본 발명의 다른 실시양태는 하기 화학식 II (서열 2)의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드이다:
His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-
Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Glu-Phe-
Ile-Xaa30-Trp-Leu-Val-Lys-Xaa35-Arg-R
상기 식에서,
Xaa8은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser 또는 Thr이고,
Xaa12는 His, Trp, Phe 또는 Tyr이고,
Xaa16은 Leu, Ser, Thr, Trp, His, Phe, Asp, Val, Glu 또는 Ala이고,
Xaa22는 Gly, Asp, Glu, Gln, Asn, Lys, Arg, Cys 또는 시스테인산이고,
Xaa23은 His, Asp, Lys, Glu 또는 Gln이고,
Xaa26은 Asp, Lys, Glu 또는 His이고,
Xaa30은 Ala, Glu, Asp, Ser 또는 His이고,
Xaa35는 Thr, Ser, Lys, Arg, Trp, Tyr, Phe, Asp, Gly, Pro, His 또는 Glu이고,
R은 Lys, Arg, Thr, Ser, Glu, Asp, Trp, Tyr, Phe, His, -NH2, Gly, Gly-Pro 또는 Gly-Pro-NH2이거나 또는 결실되나,
단 폴리펩티드는 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)-NH2의 서열을 갖지 않고, 폴리펩티드는 Gly8-GLP-1(7-37)OH, Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, Val8-GLP-1(7-36)NH2, Leu8-GLP-1(7-37)OH, Leu8-GLP-1(7-36)NH2, Ile8-GLP-1(7-37)OH, Ile8-GLP-1(7-36)NH2, Ser8-GLP-1(7-37)OH, Ser8-GLP-1(7-36)NH2, Thr8-GLP-1(7-37)OH, Thr8-GLP-1(7-36)NH2, Ala16-GLP(7-37)OH 또는 Ala16-GLP-1(7-36)NH2가 아니다.
본 발명의 다른 실시양태는 하기 화학식 III (서열 3)의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드이다:
His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-
Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Lys-Xaa27-Phe-Ile-
Xaa30-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R
상기 식에서,
Xaa8은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser 또는 Thr이고,
Xaa22는 Gly, Asp, Glu, Gln, Asn, Lys, Arg, Cys 또는 시스테인산이고,
Xaa23은 His, Asp, Lys, Glu 또는 Gln이고,
Xaa27은 Ala, Glu, His, Phe, Tyr, Trp, Arg 또는 Lys이고,
Xaa30은 Ala, Glu, Asp, Ser 또는 His이고,
R은 Lys, Arg, Thr, Ser, Glu, Asp, Trp, Tyr, Phe, His, -NH2, Gly, Gly-Pro 또는 Gly-Pro-NH2이거나 또는 결실되나,
단 폴리펩티드는 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)-NH2의 서열을 갖지 않고, 폴리펩티드는 Gly8-GLP-1(7-37)OH, Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, Val8-GLP-1(7-36)NH2, Leu8-GLP-1(7-37)OH, Leu8-GLP-1(7-36)NH2, Ile8-GLP-1(7-37)OH, Ile8-GLP-1(7-36)NH2, Ser8-GLP-1(7-37)OH, Ser8-GLP-1(7-36)NH2, Thr8-GLP-1(7-37)OH, Thr8-GLP-1(7-36)NH2, Ala16-GLP-1(7-37)OH, Ala16-GLP-1(7-36)NH2, Glu27-GLP-1(7-37)OH 또는 Glu27-GLP-1(7-36)NH2가 아니다.
본 발명의 다른 실시양태는 하기 화학식 IV (서열 4)의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드이다:
Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-
Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-
Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R
상기 식에서,
Xaa7은 L-히스티딘, D-히스티딘, 데스아미노-히스티딘, 2-아미노-히스티딘, β-히드록시-히스티딘, 호모히스티딘, α-플루오로메틸-히스티딘 또는 α-메틸-히스티딘이고,
Xaa8은 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린 또는 트레오닌이다. 바람직하게, Xaa8은 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린 또는 트레오닌이고,
Xaa22는 아스파르트산, 글루탐산, 글루타민, 아스파라긴, 리신, 아르기닌, 시스테인 또는 시스테인산이고,
R은 -NH2또는 Gly(OH)이다.
본 발명의 다른 실시양태는 8 번 위치에 알라닌 이외의 아미노산 및 22 번 위치에 글리신 이외의 아미노산을 갖는 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1) 화합물 이다.
본 발명의 다른 실시양태는 GLP-1 수용체 자극을 필요로 하는 피검체에서 GLP-1 수용체를 자극하는 방법이다. 상기 방법은 본원에 기재된 GLP-1 화합물 또는 서열 1, 서열 2, 서열 3, 서열 4의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드의 효과량을 피검체에게 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 GLP-1 수용체 자극을 필요로 하는 피검체에서 GLP-1 수용체를 자극하는데 사용하기 위한 본원에 기재된 GLP-1 화합물 또는 서열 1, 서열 2, 서열 3 또는 서열 4의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드이다.
본 발명의 GLP-1 화합물은 GLP-1 수용체 활성 능력을 보유하고, 추가로, 다른 GLP-1 화합물에 비해 응집하려는 경향이 감소되었다. 그 결과, 상기 화합물의 용액을 교반했을 때 불용성, 불활성 형태로의 전환을 최소로 할 수 있다. 이런 이점은 제조 과정을 매우 단순화시킨다. 추가로, 피검체에게 투여한 후 생체내에서 거의 또는 전혀 응집이 발생하지 않고, 따라서 활성도는 증가하고 불리한 반응의 가능성은 최소가 될 것이라 예상된다. 추가로, 상기 GLP-1 화합물은 디아미노펩티다제 IV 분해에 내성이 있고 아연과 결합하며, 따라서 생체내 작용 시간을 연장시키는 것으로 믿어진다.
도 1은 Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 5), Val8-Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열 6), Val8-Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 7) 및 Val8-Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 8)의 아미노산 서열을 나타낸다.
도 2는 Gly8-Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 9), Gly8-Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열10), Gly8-Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 11) 및 Gly8-Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 12)의 아미노산 서열을 나타낸다.
도 3은 Val8-Glu30-GLP-1(7-37)OH (서열 13), Gly8-Glu30-GLP-1(7-37)OH (서열 14), Val8-His37-GLP-1(7-37)OH (서열 15) 및 Gly8-His37-GLP-1(7-37)OH (서열 16)의 아미노산 서열을 나타낸다.
도 4는 Val8-Glu22-Ala27-GLP-1(7-37)OH (서열 17) 및 Val8-Lys22-Glu23-GLP-1(7-37)OH (서열 18)의 아미노산 서열을 나타낸다.
GLP-1 화합물은 자연적으로 생성되거나 자연적으로 생성되지 않는 약 25 내지 약 39 개 아미노산을 갖는 폴리펩티드이고 인슐린 분비 활성을 나타내기에 충분하게 GLP-1(7-37)OH와 상동성을 갖는다. 자연적으로 생성되지 않는 아미노산의 예로는 α-메틸 아미노산 (예를 들어, α-메틸 알라닌), D-아미노산, 히스티딘-유사 아미노산 (예를 들어, 2-아미노-히스티딘, β-히드록시-히스티딘, 호모히스티딘, α-플루오로메틸-히스티딘 및 α-메틸-히스티딘), 측쇄에 추가의 메틸렌을 갖는 아미노산 ("호모" 아미노산) 및 측쇄의 카르복실산 작용기가 술폰산 기 (예를 들어, 시스테인산)로 치환된 아미노산이 있다. 그러나, 본 발명의 GLP-1 화합물은 본원에 구체적으로 기재된 아미노산을 제외하고는 자연적으로 생성되는 아미노산만을 포함하는 것이 바람직하다.
통상적으로, GLP-1 화합물은 GLP-1(7-37)OH, GLP-1(7-37)OH의 유사체, GLP-1(7-37)OH 단편 또는 GLP-1(7-37)OH 유사체 단편의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드를 포함한다. GLP-1(7-37)OH는 서열 19의 아미노산 서열을 갖는다:
7His-Ala-Glu-10Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-15Asp-Val-Ser-Ser-
Tyr-20Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-25Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-30Ala-
Trp-Leu-Val-Lys-35Gly-Arg-37Gly (서열 19).
당업계 관례에 따라, GLP-1(7-37)OH의 아미노 말단은 잔기 7 번 및 카르복시-말단은 37 번으로 지정하였다. 서열 19에 나타낸 바와 같이, 폴리펩티드의 다른 아미노산은 연속적으로 번호가 매겨진다. 예를 들어, 12 번 위치는 페닐알라닌이고 22 번 위치는 글리신이다. 다른 언급이 없는 경우, C-말단은 전통적인 카르복시 형태이다.
"GLP-1 단편"은 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-37)OH 유사체의 N-말단 및(또는) C-말단으로부터 하나 이상의 아미노산 절단 후 수득된 폴리펩티드이다. GLP-1(7-37)OH를 기재하는데 사용된 명명법은 GLP-1 단편에도 영향을 준다. 예를 들어, GLP-1(9-36)OH는 N-말단으로부터 2 개의 아미노산 및 C-말단으로부터 1 개의 아미노산을 절단하여 수득한 GLP-1 단편을 나타낸다. 단편의 아미노산을 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 동일한 번호로 나타낸다. 예를 들어, GLP-1(7-37)OH에서와 같이 GLP-1(9-36)OH의 N-말단 글루탐산은 9 번 위치에 있고, 12 번 위치에는 페닐알라닌이 있고, 22 번 위치에는 글리신이 있다.
"GLP-1 화합물"은 또한 하나 이상의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 그의 단편의 N-말단 및(또는) C-말단에 첨가된 폴리펩티드를 포함한다. 이런 유형의 GLP-1 화합물은 약 39 개 이하의 아미노산을 갖는다. "확장된" GLP-1 화합물의 아미노산을 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 동일한 번호로 나타낸다. 예를 들어, GLP-1(7-37)OH의 N-말단에 2 개의 아미노산을 첨가하여 수득한 GLP-1 화합물의 N-말단 아미노산은 5 번 위치에 있고, GLP-1(7-37)OH의 C-말단에 1 개의 아미노산을 첨가하여 수득한 GLP-1 화합물의 C-말단 아미노산은 38 번 위치에 있다. 따라서, GLP-1(7-37)OH에서와 같이 이들 "확장된 " GLP-1 화합물 둘 다에서, 12 번 위치에는 페닐알라닌이 있고 22 번 위치에는 글리신이 있다. 확장된 GLP-1 화합물의 1 내지 6 번 아미노산은 동일하거나 GLP-1(1-37)OH의 상응하는 위치에서 아미노산이 보존적 치환되는 것이 바람직하다. 확장된 GLP-1 화합물의 38 내지 45 번 아미노산은 동일하거나 글루카곤 또는 엑센딘-4의 상응하는 위치에서 아미노산이 보존적 치환되는 것이 바람직하다.
"GLP-1 유사체"는 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-37)OH 단편과 충분한 상동성을 갖기 때문에 유사체는 인슐린 분비 활성을 갖는다. 바람직하게, GLP-1 유사체는 변형되어 1, 2, 3, 4, 또는 5 개의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-37)OH 단편의 상응하는 위치에 있는 아미노산과 상이한, GLP-1(7-37)OH 또는 그의 단편의 아미노산 서열을 갖는다. GLP-1 화합물을 지시하기 위해 본원에 사용된 명명법에서, 치환된 아미노산 및 그의 위치는 모 구조 앞에 나타낸다. 예를 들어, Glu22-GLP-1(7-37)OH는 GLP-1(7-37)OH의 22 번 위치에서 통상적으로 발견되는 글리신을 글루탐산으로 치환시킨 GLP-1 화합물을 지시하고, Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH는 GLP-1(7-37)OH의 8 번 위치에서 통상적으로 발견되는 알라닌 및 22 번 위치에서 통상적으로 발견되는 글리신을 발린 및 글루탐산으로 각각 치환시킨 GLP-1 화합물을 지시한다.
GLP-1 화합물의 N-말단은 일반적으로 비치환되거나 또한 알킬화 또는 아실화 (바람직하게 C1-C20)될 수 있다. GLP-1(7-37)OH의 경우에서와 같이, C-말단은 치환되지않거나, -NH2, -NHR 또는 NRR'로 아미드화 되거나 -OR"로 에스테르화될 수 있다. R 및 R'은 독립적으로 알킬 또는 아실 기 (바람직하게 C1-C20)이다. R"는 알킬 (C1-C20)이다. GLP-1(7-36)NH2는 "아미드화된 GLP 화합물"의 예이다. 바람직하게, 본 발명의 GLP-1 화합물은 비치환되거나 -NH2로 치환된 C-말단을 갖는다.
바람직하게 본 발명의 GLP-1 화합물은 GLP-1 유사체 또는 GLP-1 유사체 단편을 포함하는데, 이 때 상기 유사체 또는 단편에 대한 주쇄는 8 번 위치에 알라닌 이외의 아미노산을 함유한다 (8 번 위치 유사체). 주쇄는 또한 7 번 위치에 L-히스티딘, D-히스티딘 또는 히스티딘의 변형된 형태, 예를 들어 데스아미노-히스티딘, 2-아미노-히스티딘, β-히드록시-히스티딘, 호모히스티딘, α-플루오로메틸-히스티딘 또는 α-메틸-히스티딘을 포함할 수 있다. 상기 8 번 위치 유사체가 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 및 37 번 위치에 하나 이상의 추가 변형을 함유하는 것이 바람직하다. 상기 8 번 위치 유사체가 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 12, 16, 22, 23, 26, 30, 35 및 37 번 위치에 하나 이상의 추가 변형을 함유하는 것이 더 바람직하다. 상기 8 번 위치 유사체가 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 22, 23, 27, 30 및 37 번 위치에 하나 이상의 추가 변형을 함유하는 것이 훨씬 더 바람직하다.
상기 유사체가 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 6 개 이하의 변형을 갖는 것이 또한 바람직하다. 더 바람직한 유사체는 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 5 개 이하의 변형을 갖거나 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 4 개 이하의 변형을 갖는다. 상기 유사체는 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 3 개 이하의 변형을 갖는 것이 훨씬 더 바람직하다. 상기 유사체는 본래의 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 아미노산과 비교하여 2 개 이하의 변형을 갖는 것이 가장 바람직하다.
상기 치환은 응집되고 불용성 형태를 생성하려는 GLP-1 화합물의 경향을 감소시킨다는 것이 밝혀졌다. 예를 들어 실시예 3에 기재된 응집 분석에 의해 평가되는 경우, 본 발명의 GLP-1 화합물은 일반적으로 GLP-1(7-37)OH보다는 약 5 배 이상 덜 빠르게 응집되고, 바람직하게는 약 20 배 이상 덜 빠르게, 더 바람직하게는 약 40 배 이상 덜 빠르게, 더 바람직하게는 약 50 배 이상 덜 빠르게, 훨씬 더 바람직하게는 약 60 배 이상 덜 빠르게, 훨씬 더 바람직하게는 약 65 배 이상 덜 빠르게 응집된다. 바람직하게, 본원에 기재된 GLP-1 화합물은 GLP-1(7-36)NH2또는 GLP-1(7-37)OH의 유사체이다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 GLP-1 화합물의 22 번 위치 아미노산은 2 개 이상의 탄소 원자 및 극성 또는 전하를 띤 작용기를 포함하는 측쇄를 갖는다. 메틸렌 및 카르복실 탄소를 가진 아스파르트산이 포함된다. 더 바람직하게, 22 번 위치 아미노산의 측쇄는 2 내지 6 개의 탄소 원자 및 전하를 띤 작용기, 예를 들어 카르복실산, 아민, 구아니디노 기 또는 술폰산 기와 함께 있는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 기이다. 따라서, 22 번 위치 아미노산의 바람직한 예로는 글루탐산, 아스파르트산, 아르기닌 및 리신이 존재한다. 22 번 위치에 아스파르트산, 글루탐산, 아르기닌 또는 리신이 존재하는 경우, 8 번 위치에 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌이 있는 것이 바람직하고 발린 또는 글리신이 존재하는 것이 더 바람직하다. 측쇄 시스테인산의 술폰산 기와 함께 있는 아미노산의 예 (-NH-CH(CH2SO3)-CO-, 약어 "Cya"로 나타냄). 22 번 위치가 시스테인산과 같은 술폰산인 경우, 8 번 위치는 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌이 바람직하고 발린 또는 글리신이 더 바람직하다.
다른 바람직한 실시양태에서, 8 번 위치의 아미노산은 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌이 바람직하고 발린 또는 글리신이 더 바람직하고, 30 번 위치는 글루탐산, 아스파르트산, 세린 또는 히스티딘이 바람직하고 글루탐산이 더 바람직하다.
다른 바람직한 실시양태에서, 8 번 위치의 아미노산은 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌이 바람직하고 발린 또는 글리신이더 바람직하고, 37 번 위치는 히스티딘, 리신, 아르기닌, 트레오닌, 세린, 글루탐산, 아스파르트산, 트립토판, 티로신 또는 페닐알라닌이 바람직하고 히스티딘이 더 바람직하다.
다른 바람직한 실시양태에서, 8 번 위치의 아미노산은 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌이 바람직하고 발린 또는 글리신이 더 바람직하고, 22 번 위치는 글루탐산, 리신, 아스파르트산 또는 아르기닌이 바람직하고 글루타민산 또는 리신이 더 바람직하며, 23 번 위치는 리신, 아르기닌, 글루탐산, 아스파르트산 및 히스티딘이 바람직하고 리신 또는 글루탐산이 더 바람직하다.
다른 바람직한 실시양태에서, 8 번 위치의 아미노산은 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌이 바람직하고 발린 또는 글리신이 더 바람직하고, 22 번 위치는 글루탐산, 리신, 아스파르트산 또는 아르기닌이 바람직하고 글루타민 산 또는 리신이 더 바람직하며, 27 번 위치는 알라닌, 리신, 아르기닌, 트립토판, 티로신, 페닐알라닌 또는 히스티딘이 바람직하고 알라닌이 더 바람직하다.
다른 실시양태에서, 본 발명의 GLP-1 화합물은 8 번 위치의 아미노산을 갖고 11 번 위치, 12 번 위치, 16 번 위치, 22 번 위치, 23 번 위치, 24 번 위치, 26 번 위치, 27 번 위치, 30 번 위치, 33 번 위치, 34 번 위치, 35 번 위치, 36 번 위치 및 37 번 위치로 이루어진 군 중에서 선택된 1, 2 또는 3 개의 아미노산을 갖는데, 이 때 아미노산은 본래의 GLP-1(7-37)OH의 하기 상응하는 위치의 아미노산이 다르다.
다른 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 GLP-1 화합물은 8 번 위치의 아미노산 외에, 11 번 위치, 12 번 위치, 16 번 위치, 22 번 위치, 23 번 위치, 24 번 위치, 26 번 위치, 27 번 위치, 30 번 위치, 33 번 위치, 34 번 위치, 35 번 위치, 36 번 위치 및 37 번 위치로 이루어진 군 중에서 선택된 1 또는 2 개의 아미노산을 갖는데, 이 때 아미노산은 본래의 GLP-1(7-37)OH의 하기 상응하는 위치의 아미노산이 다르다.
상기 기재한 바와 같이, 본 발명의 GLP-1 화합물은 GLP-1(7-37) 또는 GLP-1 (7-37) 단편의 상응하는 위치의 아미노산과 다른 8, 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 및 37 번 위치의 아미노산 이외의 아미노산을 가질 수 있다. GLP 화합물에서 GLP-1(7-37)OH의 상응하는 위치의 아미노산과 다른 8, 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 및 37 번 위치의 아미노산 이외의 아미노산은 보존적 치환이 바람직하고 강한 보존적 치환이 더 바람직하다.
바람직하게, 본 발명의 GLP-1 화합물은 GLP-1(7-37) 또는 GLP-1 (7-37) 단편의 상응하는 위치의 아미노산과 다른 8 및 22 번 위치의 아미노산 외에 0, 1, 2 또는 3 개의 아미노산을 갖는다. 한가지 예에서, 8 및 22 번 위치의 아미노산 외에, GLP-1 화합물의 7, 21 또는 27 번 위치의 하나 이상의 아미노산은 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-37)OH 단편의 상응하는 아미노산과 다르다.
7, 8 및 22 번 위치의 아미노산만이 GLP-1(7-37)OH (또는 그의 단편)의 상응하는 위치의 아미노산과 다른 것이 바람직하다. GLP-1 화합물의 22 번 위치의 글리신 및 바람직하게는 8 번 위치의 알라닌을 본원에 기재한 적합한 아미노산으로 치환하여 응집 특성이 감소된 다른 개선된 GLP-1 화합물을 공지된 생물학적으로 활성인 GLP-1 화합물로부터 수득할 수 있다는 것이 예상된다. 공지된 생물학적으로 활성인 GLP-1 화합물은 전체 교시가 본원에 참고로 인용된 호프만 (Hoffmann) 등의 미국 특허 제5,977,071호 및 버클리 (Buckley) 등의 미국 특허 제5,545,618호, 아델호스트 (Adelhorst) 등의 문헌 [J. Biol. Chem. 269 : 6275 (1994)]에 개시되어 있다.
"보존적 치환"은 하나의 아미노산을 동일한 알짜 전자 전하 및 거의 동일한 크기 및 형태를 갖는 다른 아미노산으로 치환하는 것이다. 지방족 또는 치환된 지방족 아미노산 측쇄를 가진 아미노산은 이들 측쇄의 전체 탄소 수 및 헤테로원자 수가 약 4 개 이하로 다른 경우 거의 동일한 크기를 갖는다. 이들은 이들 측쇄의 분지 수가 1 개 이하로 다른 경우 거의 동일한 형태를 갖는다. 이들 측쇄의 페닐 또는 치환된 페닐 기를 가진 아미노산은 거의 동일한 크기 및 형태를 갖는 것으로 생각된다. 하기 목록에는 5 개 군의 아미노산이 있다. GLP-1 화합물의 아미노산을 같은 군 내의 다른 아미노산으로 치환하는 것은 보존적 치환이다:
I 군: 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌, 시스테인 및 C1-C4 지방족 또는 C1-C4 히드록실 치환된 지방족 측쇄 (직쇄 또는 단분지)를 갖는 자연적으로 생성되지 않는 아미노산.
II 군: 글루탐산, 아스파르트산 및 카르복실산 치환된 C1-C4 지방족 측쇄 (비분지 또는 하나의 분지점)를 갖는 자연적으로 생성되지 않는 아미노산.
III 군: 리신, 오르니틴, 아르기닌 및 아민 또는 구아니디노 치환된 C1-C4 지방족 측쇄 (비분지 또는 하나의 분지점)를 갖는 자연적으로 생성되지 않는 아미노산.
IV 군: 글루타민, 아스파라긴 및 아미드 치환된 C1-C4 지방족 측쇄 (비분지 또는 하나의 분지점)를 갖는 자연적으로 생성되지 않는 아미노산.
V 군: 페닐알라닌, 페닐글리신, 티로신 및 트립토판.
본원에 구체적으로 지시한 것을 제외하고, 보존적 치환은 자연적으로 생성되는 아미노산으로 이루어지는 것이 바람직하다.
"강한 보존적 치환"은 측쇄에 동일한 작용기를 가지며 거의 동일한 크기 및 형태를 갖는 다른 아미노산으로 아미노산을 치환하는 것이다. 지방족 또는 치환된 지방족 아미노산 측쇄를 갖는 아미노산은 측쇄의 전체 탄소 및 헤테로원자 수가 2 개 이하로 다른 경우 거의 동일한 크기를 갖는다. 이들은 측쇄에 동일한 수의 분지를 갖는 경우 거의 같은 형태를 갖는다. 강한 보존적 치환의 예로는 루이신을 발린, 세린을 트레오닌, 글루탐산을 아스파르트산 및 페닐알라닌을 페닐글리신으로의 치환이 있다. 강한 보존적 치환이 아닌 예로는 발린을 알라닌, 세린을 알라닌 및 세린을 아스파르트산으로의 치환이 있다.
본 발명의 GLP-1 화합물의 하나의 예로는 서열 1의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드가 있다. 바람직한 한가지 예에서, GLP-1 화합물은 Xaa8이 Gly 또는 Val이고, Xaa22가 Glu 또는 Lys이고, Xaa23이 Glu 또는 Lys인 것을 제외하고는 GLP-1(7-37)OH와 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 다른 예에서, GLP-1 화합물은 Xaa8이 Gly 또는 Val이고 Xaa30이 Glu인 것을 제외하고는 GLP-1(7-37)OH이다. 추가의 예로는 Xaa8이 Gly 또는 Val이고 Xaa37이 His인 것을 제외하고는 GLP-1(7-37)OH인 GLP-1 화합물이 있다.
본 발명의 GLP-1 화합물의 다른 예로는 서열 4의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드가 있다. 바람직한 예에서, 서열 4에서 Xaa7은 L-히스티딘, D-히스티딘, 데스아미노-히스티딘, 2-아미노-히스티딘, β-히드록시-히스티딘, 호모히스티딘, α-플루오로메틸-히스티딘 및 α-메틸-히스티딘이고, Xaa8은 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린 또는 트레오닌이고, 바람직하게는 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린 또는 트레오닌이고, R은 -NH2또는 Gly(OH)이며 Xaa22는 리신, 글루탐산, 아스파르트산 또는 아르기닌이다. 더 바람직한 예에서, Xaa7은 L-히스티딘이고, Xaa8은 글리신 또는 발린이고, Xaa22는 리신, 글루탐산, 아스파르트산 또는 아르기닌이고 R은 Gly(OH)이다. 별법으로, 서열 4에서 Xaa7, Xaa8및 R은 상기 기재된 바와 같고 Xaa22는 술폰산 기, 예를 들어 시스테인산을 포함하는 측쇄를 가진 아미노산이다.
본 발명의 GLP-1 화합물의 다른 예에서, 22 번 위치의 아미노산이 C1-C2 알킬 측쇄, C1-C2 히드록실화된 알킬 측쇄 또는 C1-C2 티오닐화된 알킬 쇄 (예를 들어, 시스테인)를 갖는 경우, 8 번 위치의 아미노산은 D-아미노산이 아니고 글리신, 세린, 트레오닌, 시스테인 또는 베타-알라닌의 측쇄를 갖지 않는다. 본 발명의 GLP-1 화합물의 바람직한 예에서, 22 번 위치의 아미노산이 C1-C4 알킬 측쇄, C1-C4 히드록실화된 알킬 측쇄 또는 C1-C4 티올화된 알킬 쇄를 갖는 경우, 8 번 위치의 아미노산은 D-아미노산이 아니고 글리신, 세린, 트레오닌, 시스테인 또는 베타-알라닌의 측쇄를 갖지 않는다.
본 발명의 GLP-1 화합물의 다른 예에서, 8 번 위치의 아미노산은 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 메티오닌, 세린, 트레오닌, 시스테인, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 아르기닌, 아스파라긴, 글루타민, 페닐알라닌, 티로신, 히스티딘 또는 트립토판이고, 22 번 위치의 아미노산은 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 아르기닌, 아스파라긴, 글루타민 또는 히스티딘이다.
본 발명의 GLP-1 화합물의 구체적인 예로는 Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 20), Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열 21), Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 22), Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 23), Cya22-GLP-1(7-37)OH (서열 24), Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 5), Val8-Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열 6), Val8-Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 7), Val8-Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 8), Val8-Cya22-GLP-1(7-37)OH (서열 25), Gly8-Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 9), Gly8-Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열 10), Gly8-Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 11), Gly8-Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 12), Gly8-Cya22-GLP-1(7-37)OH (서열 26), Glu22-GLP-1(7-36)NH2(서열 27), Asp22-GLP-1(7-36)NH2(서열 28), Arg22-GLP-1(7-36)NH2(서열 29), Lys22-GLP-1(7-36)NH2(서열 30), Cya22-GLP-1(7-36)NH2. (서열 31), Val8-Glu22-GLP-1(7-36)NH2(서열 32), Val8-Asp22-GLP-1(7-36)NH2(서열 33), Val8-Arg22-GLP-1(7-36)NH2(서열 34), Val8-Lys22-GLP-1(7-36)NH2(서열 35), Val8-Cya22-GLP-1(7-36)NH2(서열 36), Gly8-Glu22-GLP-1(7-36)NH2(서열 37), Gly8-Asp22-GLP-1(7-36)NH2(서열 38), Gly8-Arg22-GLP-1(7-36)NH2(서열 39), Gly8-Lys22-GLP-1(7-36)NH2(서열 40) 및 Gly8-Cya22-GLP-1(7-36)NH2(서열 41), Val8-Lys23-GLP-1(7-37)OH (서열 42), Val8-Ala27-GLP-1(7-37)OH (서열 43), Val8-Glu30-GLP-1(7-37)OH (서열 44), Gly8-Glu30-GLP-1(7-37)OH (서열 45), Val8-His35-GLP-1(7-37)OH (서열 46), Val8-His37-GLP-1(7-37)OH (서열 47), Val8-Glu22-Lys23-GLP-1(7-37)OH (서열 48), Val8-Glu22-Glu23-GLP-1(7-37)OH (서열 49), Val8-Glu22-Ala27-GLP-1(7-37)OH (서열 50), Val8-Gly34-Lys35-GLP-1(7-37)OH (서열 51), Val8-His37-GLP-1(7-37)OH (서열 52), Gly8-His37-GLP-1(7-37)OH (서열 53)가 있다.
본원에 사용된 용어 "GLP-1 화합물"은 또한 본원에 기재된 화합물의 제약상 허용가능한 염을 포함한다. 본 발명의 GLP-1 화합물은 상당히 산성인 작용기, 상당히 염기성인 작용기 또는 둘 다의 작용기를 보유할 수 있고, 따라서 임의의 다수의 무기 염기 및 무기 산 및 유기 산과 반응하여 염을 형성할 수 있다. 산 부가 염을 형성하기 위해 일반적으로 사용하는 산은 무기 산, 예를 들어, 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 인산 등 및 유기 산, 예를 들어 p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 옥살산, p-브로모페닐술폰산, 탄산, 숙신산, 시트르산, 벤조산, 아세트산 등이 있다. 이런 염의 예로는 황산염, 피로황산염, 중황산염, 아황산염, 중아황산염, 인산염, 인산일수소염, 인산이수소염, 메타인산염, 피로인산염, 염화물, 브롬화물, 요오드화물, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포르메이트, 이소부티레이트, 카프로에이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 숙시네이트, 수버레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 히드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 술포네이트, 크실렌술포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, 감마-히드록시부티레이트, 글리콜레이트, 타르트레이트, 메탄술포네이트, 프로판술포네이트, 나프탈렌-1-술포네이트, 나프탈렌-2-술포네이트, 만델레이트 등이 있다.
염기 부가 염은 무기 염기, 예를 들어 암모늄 또는 알칼리 또는 알칼리 토금속 수산화물, 탄산염, 중탄산염 등으로부터 유도된 염기 부가 염을 포함한다. 따라서, 본 발명의 염을 제조하는데 유용한 이런 염기는 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 수산화 암모늄, 탄산 칼륨 등을 포함한다.
GLP-1 화합물은 광범위한 질병 및 증상을 가진 피검체를 치료하는데 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물을 포함하는 GLP-1 화합물은 "GLP-1 수용체" (토렌스 (Thorrens)의 미국 특허 제5,670,360호 참조)라 불리는 수용체에 작용하여 그의 생물학적 효과를 나타내는 것으로 믿어진다. 그러므로 GLP-1 수용체 자극 또는 GLP-1 화합물의 투여에 대해 유리하게 반응하는 질병 및(또는) 증상을 가진 피검체를 본 발명의 GLP-1 화합물로 치료할 수 있다. 이런 피검체를 "GLP-1 화합물로의 치료를 필요로 하는" 또는 "GLP-1 수용체 자극을 필요로 하는" 피검체라 한다. 상기 피검체는 인슐린 비의존성 당뇨병, 인슐린 의존성 당뇨병, 졸중 (에펜딕 (Efendic)에 의한 WO 00/16797 참조), 심근 경색증 (에펜딕에 의한 WO 98/08531 참조), 비만 (에펜딕에 의한 WO 98/19698 참조), 수술후 이화작용 변화 (에펜딕에 의한 미국 특허 제6,006,753 참조), 기능성 소화불량 및 과민성 대장 증후군 (에펜딕에 의한 WO 99/64060 참조)을 가진 피검체를 포함한다. 또한 상기 피검체는 GLP-1 화합물로 예방적 치료가 필요한 피검체, 예를 들어 인슐린 비의존성 당뇨병 (WO 00/07617 참조)이 발병할 위험이 있는 피검체를 포함한다. 내당능 장애 또는 공복 혈당 장애에 걸린 피검체, 체중이 피검체의 신장 및 체격에 대한 정상 체중의 약 25％ 이상인 피검체, 부분 췌장 절제술을 한 피검체, 한 명 이상의 부모가 인슐린 비의존성당뇨병에 걸린 피검체, 임신성 당뇨병에 걸린 피검체 및 급성 또는 만성 췌장염에 걸린 피검체는 비의존성 당뇨병이 발병할 위험이 있다.
GLP-1 화합물의 "효과량"은 GLP-1 수용체 자극을 필요로 하는 피검체에게 투여하는 경우 원하지 않는 부작용을 일으키지 않고 원하는 치료 및(또는) 예방 효과를 나타내는 양이다. "원하는 치료 효과"는 1) 질병 또는 증상과 관련된 증후(들)의 개선; 2) 질병 또는 증상과 관련된 증후의 발병을 지연; 3) 치료하지 않았을 때와 비교하여 증가된 수명; 및 4) 치료하지 않았을 때와 비교하여 향상된 삶의 질 중 하나 이상을 포함한다. 예를 들어, 당뇨병 치료를 위한 GLP-1 화합물의 "효과량"은 치료하지 않았을 때보다 혈당 농도를 더 크게 조절하여 당뇨병 합병증, 예를 들어 망막병증, 신경병증 또는 신장 질병의 발병을 지연시키는 양을 말한다. 당뇨병의 예방을 위한 GLP-1 화합물의 "효과량"은 치료하지 않았을 때와 비교하여 항-저혈당제, 예를 들어 술포닐 우레아, 티아졸리딘디온, 인슐린 및(또는) 비스구아니딘으로 치료하는 것을 필요로 하는 혈당 농도 상승의 개시를 지연시키는 양이다.
피검체에게 투여하는 GLP-1 화합물의 "효과량"은 또한 질병의 유형 및 중증도 및 피검체의 특성, 예를 들어 일반적인 건강 상태, 연령, 성별, 체중 및 약물에 대한 내성에 의존할 것이다. 숙련된 당업자는 이들 및 다른 요인에 따라 적절한 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 통상적으로, GLP-1 화합물의 치료 효과량은 성인 한 명 당 하루에 약 0.01 mg 내지 하루에 약 1000 mg의 범위일 수 있다. 바람직하게, 투여량은 1 일 당 약 0.1 mg 내지 1 일 당 약 100 mg의 범위이고, 더 바람직하게는 약 1.0 mg/일 내지 약 10 mg/일의 범위이다.
본 발명의 GLP-1 화합물은 경구, 비내 투여, 흡입 또는 비경구로 투여할 수 있다. 예를 들어, 비경구 투여는 전신 투여, 예를 들어 근육내, 정맥내, 피하 또는 복강내 주사를 포함한다. GLP-1 화합물은 상기 논의한 질병을 치료하기 위한 제약 조성물의 일부로 제약상 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제와 함께 피검체에게 투여할 수 있다. 비경구 투여하는 경우, 제약 조성물은 GLP-1 화합물의 용액 또는 현탁액 또는 하기 기재한 2 가 금속 양이온과 GLP-1 화합물의 착물의 현탁액일 수 있다. 적합한 제약상 담체는 펩티드 또는 펩티드 유도체와 상호작용하지 않는 불활성 성분을 포함할 수 있다. 레밍톤 (Remington)의 문헌 [Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA]에 기재된 바와 같은 표준 제약 제형 기술을 사용할 수 있다. 비경구 투여를 위한 적합한 제약상 담체의 예로는 멸균 수, 생리 염수, 정균 염수 (약 0.9％ mg/ml 벤질 알코올을 함유하는 염수), 인산염 완충 염수, 행크 (Hank) 용액, 링거 (Ringer) 락테이트 등이 있다. 적합한 부형제의 몇몇 예로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 트레할로스, 소르비톨 및 만니톨이 있다.
"피검체"는 포유동물, 바람직하게는 인간이지만, 또한 동물, 예를 들어 반려 동물 (예를 들어, 개, 고양이 등), 농장 동물 (예를 들어, 암소, 양, 돼지, 말 등) 및 실험 동물 (예를 들어, 랫트, 마우스, 기니 피그 등)일 수 있다.
본 발명의 GLP-1 화합물은 적합한 2 가 금속 양이온과 착물을 형성할 수 있다. GLP-1 화합물의 2 가 금속 착물은 일반적으로 대략 생리적 pH의 수용액에서 불용성이다. 따라서, 상기 착물은 현탁액으로 피하에 투여하여 생체 내 방출 속도를 감소시킬 수 있고, 따라서 화합물의 작용 시간을 연장시킬 수 있다. 적합한 2 가 금속 양이온의 예로는 Zn++, Mn++, Fe++, Ca++, Co++, Cd++, Ni++ 등이 있다. Zn++가 바람직하다.
본 발명의 GLP-1 화합물과 2 가 금속 양이온 간의 착물을 수득하기 위해, GLP-1을 금속 염의 존재하에 적합한 완충용액에 용해시킨다. 혼합물을 주위의 온도에서 인큐베이션하여 착물을 침전시킨다. 적합한 완충용액은 약 3.0 내지 약 9.0 범위의 pH에서 혼합물을 유지하고 착물 형성 반응을 방해하지 않는다. 예로는 인산 완충용액, 아세테이트 완충용액, 시트레이트 완충용액 및 구디(Goode) 완충용액, 예를 들어 HEPES, 트리스 (Tris) 및 트리스 아세테이트가 있다. 적합한 금속 염은 금속이 착물 형성에 이용가능한 금속염이다. 적합한 아연 염의 예로는 염화 아연, 아연 아세테이트, 산화 아연 및 황산 아연이 있다. 바람직하게, 염화 아연과 같은 2 가 금속 양이온을 과량으로 공급하여 GLP-1 화합물의 각각의 분자에 대해 약 50 분자 이하의 2 가 금속 양이온의 몰 비로 공급한다.
"인슐린 분비 활성"은 글루코스 농도 상승에 반응하여 인슐린 분비를 자극하고, 따라서 세포에 의한 글루코스 섭취를 야기하고 혈청 글루코스 농도를 감소시키는 것을 나타낸다. 인슐린 분비 활성은 생체내 실험 및 GLP-1 수용체 결합 활성도 또는 수용체 활성도를 측정하는 시험관내 분석, 예를 들어 겔판트 (Gelfand)의 EP 619,322 및 미국 특허 제5,120,712호에 각각 기재된 이자섬 세포 또는 인슐린종 세포를 사용하는 분석을 사용하는 것을 포함하는 당업계 공지된 방법으로 평가할 수 있다. 상기 참고문헌의 전체 교시는 본원에 참고로 인용된다.
본 발명의 GLP-1 화합물은 고상 펩티드 합성 기술의 표준 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 펩티드 합성기는, 예를 들어 캘리포니아주 포스터 시티에 소재한 어플라이드 바이오시스템 (Applied Biosystem)으로부터 상업적으로 시판된다. 고상 합성을 위한 시약은, 예를 들어 인디애나주 피셔에 소재한 미드웨스트 바이오텍 (Midwest Biotech)으로부터 상업적으로 시판된다. 고상 펩티드 합성기는 간섭 기를 차단, 반응에 대해 아미노산을 보호, 커플링, 디커플링 및 반응하지 않는 아미노산을 캡핑하기 위해 제조사의 지시에 따라 사용할 수 있다.
통상적으로, α-N-카바모일 보호된 아미노산 및 수지 상에서 성장하는 펩티드 쇄의 N-말단 아미노산은 실온의 불활성 용매, 예를 들어 디메틸포름아미드, N-메틸피롤리돈 또는 염화 메틸렌 중에서 디시클로헥실카르보디이미드 및 1-히드록시벤조트리아졸과 같은 커플링제 및 디이소프로필에틸아민과 같은 염기 존재하에 커플링된다. α-N-카바모일 보호기를 트리플루오로아세트산 또는 피페리딘과 같은 시약을 사용하여 생성된 펩티드 수지로부터 제거하고, 커플링 반응을 그 다음의 원하는 N-보호된 아미노산을 사용하여 반복하여 펩티드 쇄에 첨가한다. 적합한 아민 보호기는 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어 전체 교시가 참고로 인용된 그린 (Green) 및 웃츠 (Wuts)의 문헌 ["Protecting Groups in Organic Synthesis" John Wiley and Sons, 1991]에 기재되었다. 예로는 t-부틸옥시카르보닐 (tBoc) 및 플루오레닐메톡시카르보닐 (Fmoc)이 있다.
펩티드를 또한 적절한 측쇄 보호와 함께 t-부톡시카르보닐- 또는 플루오레닐메톡시카르보닐-알파-아미노산을 사용하는 표준 자동화된 고상 합성 프로토콜을 사용하여 합성한다. 합성이 완결된 후, 펩티드를 표준 플루오르화 수소 방법을 사용하는 동시 측쇄 탈보호로 고상 지지체에서 절단한다. 이어서 조 펩티드를 0.1％ 트리플루오로아세트산 (TFA) 중 아세토니트릴 구배를 사용하는 바이닥 (Vydac) C18 칼럼 상 역상 크로마토그래피를 사용하여 추가로 정제한다. 아세토니트릴을 제거하기 위해, 펩티드를 0.1％ TFA, 아세토니트릴 및 물을 함유하는 용액으로 동결건조시킨다. 정제는 분석용 역상 크로마토그래피로 확인할 수 있다. 펩티드의 확인은 질량 분석법으로 확인할 수 있다. 펩티드는 중성 pH의 수성 완충용액에 용해시킬 수 있다.
본 발명은 하기 실시예에 예시되어 있는데, 이는 본 발명을 어떤 식으로도 제한하려는 것은 아니다.
실시예 1- 고상 t-Boc 화학에 의한 본 발명의 GLP-1 화합물의 제조
Boc Gly-PAM 수지 약 0.5 내지 0.6 g (0.38-0.45 mmole)을 표준 60 ml 반응 용기에 두고 이중 커플링을 어플라이드 바이오시스템즈 ABI430A 펩티드 합성기에서 수행하였다. 하기 측쇄 보호된 아미노산 (Boc 아미노산의 2 mmole 카트리지)을 미드웨스트 바이오텍 (인디애나주 피셔에 소재)으로부터 구입하고 합성에 사용하였다: Arg-토실 (TOS), Asp-δ-시클로헥실 에스테르 (CHXL), Glu-δ-시클로헥실 에스테르 (CHXL), His-벤질옥시메틸 (BOM), Lys-2-클로로벤질옥시카르보닐 (2C1-Z), Met-술폭시드 (0), Ser-O-벤질 에테르 (OBzl), Thr-O-벤질 에테르 (OBzl), Trp-포르밀 (CHO) 및 Tyr-2-브로모벤질옥시카르보닐 (2Br-Z) 및 Boc Gly-PAM 수지. DMF중 트리플루오로아세트산 (TFA), 디-이소프로필에틸아민 (DIEA), 0.5 M 히드록시벤조트리아졸 (HOBt) 및 디클로로메탄 중 0.5 M 디시클로헥실카르보디이미드 (DCC)를 PE-어플라이드 바이오시스템즈 (캘리포니아주 포스터 시티 소재)으로부터 구입하였다. 디메틸포름아미드 (DMF-Burdick and Jackson) 및 디클로로메탄 (DCM-Mallinkrodt)을 메이즈 케미칼 컴파니 (Mays Chemical Co.) (인디애나주 인디애나폴리스 소재)로부터 구입하였다.
표준 이중 커플링은 DCC를 사용하여 형성시킨 대칭 무수물 또는 HOBt 에스테르를 사용하여 수행하였다. 이중 커플링의 제2 세트 (TFA 탈보호 없음)를 Trp31, Thr13 및 Thr11에서 수행하였다. 합성이 완료되면, N-말단 Boc 기를 제거하고 펩티딜 수지를 DMF 중 20％ 피페리딘으로 처리하여 Trp 측쇄를 탈포르밀화 하였다. DCM으로 세척한 후, 수지를 테프론 (TEFLON) 반응 용기로 옮기고 진공에서 건조시켰다.
Met를 함유한 유사체에 대해, 수지 상 환원을 TFA/108 디메틸 술피드 (DMS)/2％ 농축 HCl을 사용하여 수행하였다. 반응 용기를 HF (플루오르화 수소산) 기구 (페닌술라 래보래토리즈 (Penninsula Laboratories))에 반응 용기를 부착하여 절단을 수행하였다. 수지 그램 당 m-크레졸 1 ml을 첨가하고 HF (AGA (인디애나주 인디애나폴리스 소재)로부터 구입) 10 ml을 미리 냉각시킨 용기로 응축하였다. 메티오닌이 존재하는 경우 수지 그램 당 DMS 1 ml을 첨가하였다. 반응물을 얼음조에서 1 시간 동안 교반시키고 HF를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 에틸 에테르에 현탁시키고 고체를 여과하며 에테르로 세척하였다. 각각의 펩티드를 수성 아세트산으로 추출하고 동결 건조시키거나 역상 칼럼에 직접 로딩하였다.
완충용액 A (물 중 0.1％ 트리플루오로아세트산, B: 아세토니트릴 중 0.1％ TFA)로 2.2 x 25 cm VYDAC C18 칼럼에서 정제를 수행하였다. 20％에서 90％ B로의 구배를 10 ml/분으로 120 분 동안 HPLC (워터스 (Waters))에서 수행하면서 280 nm (4.0 A)에서 UV를 모니터링하고 1 분 분율을 수집했다. 적절한 분율을 혼합하고, 동결시키고, 동결건조시켰다. 건조시킨 생성물을 HPLC (0.46 x 15 cm METASIL AQ C18) 및 MALDI 질량 분석법으로 분석하였다.
실시예 2- 고상 F-Moc 화학에 의한 본 발명의 GLP-1 화합물의 제조
FMOC Gly WANG 수지 (노바바이오켐 (NovaBiochem)으로부터 구입, 캘리포니아주 라졸라 소재) 약 114 mg (50 mmole)을 96-웰 반응 블럭의 각각의 프로그램된 웰에 넣고 이중 커플링을 어드밴스드 켐텍 (Advanced ChemTech) 396 펩티드 합성기에서 수행하였다. C-말단 아미드와 함께 있는 유사체를 링크 아미드 (Rink Amide) AM 수지 (노바바이오켐, 캘리포니아주 라졸라 소재) 75 mg (50 μmole)을 사용하여 제조하였다.
하기 FMOC 아미노산을 어드밴스트 켐텍 (켄터키주 루이스빌 소재), 노바바이오켐 (캘리포니아주 라졸라에 소재) 및 미드웨스트 바이오텍 (인디애나주 피셔에 소재)으로부터 구입하였다: Arg-2,2,4,6,7-펜타메틸디히드로벤조푸란-5-술포닐 (Pbf), Asn-트리틸 (Trt), Asp-β-t-부틸 에스테르 (tBu), Glu-δ-t-부틸 에스테르 (tBu), Gln-트리틸 (Trt), His-트리틸 (Trt), Lys-t-부틸옥시카르보닐 (Boc), Ser-t-부틸 에테르 (OtBu), Thr-t-부틸 에테르 (OtBu), Trp-t-부틸옥시카르보닐 (Boc),Tyr-t-부틸 에테르 (OtBu).
용매 디메틸포름아미드 (DMF-Burdick and Jackson), N-메틸 피롤리돈 (NMP-Burdick and Jackson), 디클로로메탄 (DCM-Mallinkrodt)을 메이즈 케미칼 컴파니 (인디애나주 인디애나폴리스 소재)로부터 구입하였다.
히드록시벤조트리아졸 (HOBt), 디-이소프로필카르보디이미드 (DIC), 디-이소프로필에틸아민 (DIEA) 및 피페리딘 (Pip)을 알드리치 케미탈 컴파니 (Aldrich Chemical Co) (위스콘신주 밀워키 소재)로부터 구입하였다.
모든 아미노산을 NMP 중 0.45 M HOBt에 용해시키고 20％ Pip/DMF를 사용하여 20 분 동안 탈보호한 후 50 분 동안 DIC/HOBt 활성화시킨 커플링을 수행하였다. 탈보호 및 커플링 한 후 각각의 수지를 DMF로 세척하였다. 최종 커플링 및 탈보호 후, 펩티딜 수지를 DCM으로 세척하고 반응 블럭에서 진공으로 건조시켰다.
적합한 반응/절단 블럭 어셈블리를 사용하여, 시약 K 2 ml을 각각의 웰에 첨가하고 절단 반응물을 2 시간 동안 혼합하였다 (시약 K= 페놀 0.75 gm, 티오아니솔 0.5 ml, 에탈디티올 0.25 ml, 트리플루오로아세트산 (TFA) 10 ml 당 물 0.5 ml, 모든 시약을 위스콘신주 밀워키에 소재한 알드리치 케미칼 컴파니로부터 구입). TFA 여액을 에틸 에테르 40 ml에 첨가하고 침전물을 2000 rpm에서 2 분 동안 원심분리하였다. 상층액을 제거하고, 펠렛을 에테르 40 ml에 재현탁시키고, 다시 원심분리하고, 다시 제거하며, 질소하에서 건조시킨 후 진공에서 건조시켰다.
각각의 생성물 0.3 내지 0.6 mg을 0.1％ TFA/아세토니트릴 (ACN) 1 ml에 용해시키고 20 ㎕를 HPLC (0.46 x 15 cm METASIL AQ C18, 1 ml/분, 45 ℃ , 214 nM(0.2A), A = 0.1％ TFA, B = 0.1％ TFA/50％ ACN. 구배 = B 50％에서 B 90％로 30 분 동안)로 분석하였다.
정제를 완충용액 A (물 중 0.1％ 트리플루오로아세트산, B: 아세토니트릴 중 0.1％ TFA)에서 2.2 x 25 cm VYDAC C18 칼럼으로 수행하였다. 20％에서 90％로의 B의 구배를 10 ml/분으로 120 분 동안 HPLC (워터스)에서 수행하면서 280 nm (4.O A)에서 UV를 모니터링하고 1 분 분율을 수집했다. 적절한 분율을 혼합하고 동결시키며 동결건조시켰다. 건조된 생성물을 HPLC (0.46 x 15 cm METASIL AQ C18) 및 MALDI 질량 분석법으로 분석하였다.
실시예 3- GLP 응집 분석:
본 발명의 GLP 펩티드를 용액 중에서 응집의 가능성에 대해 분석하였다. 일반적으로, 시간의 함수로서 350 nm에서 혼탁도를 기록하면서 용액 중 펩티드를 승온의 적합한 완충용액에서 교반하였다. 응집이 시작되는 시간을 측정하여 이런 스트레스 조건하에서 GLP 분자의 응집 가능성을 정량하였다.
프로토콜:
GLP-1 화합물을 우선 알칼리 조건 (pH 10.5)하에서 30 분 동안 용해시켜 임의의 미리 응집된 물질을 용해하였다. 이어서 용액을 pH 7.4로 맞추고 여과하였다. 구체적으로, 동결건조된 GLP-1 화합물 4 mg을 10 mM 인산염/10 mM 시트레이트 3 ml에 용해시켰다. pH를 10.0 내지 10.5로 맞추고 30 분 동안 두었다. 용액을 HCl을 사용하여 pH 7.4로 맞추고 적합한 필터, 예를 들어 밀렉스 (Millex) GV 주사기 필터 (밀리포어 코포레이션 (Millipore Corporation), 매사추세츠주 베드포드에소재)를 통해 여과하였다. 이어서 상기 용액을 10 mM 시트레이트, 10 mM 인산염, 150 mM NaCl 중 0.3 mg/mL 단백질을 함유한 최종 샘플로 희석하고, pH 7.4 내지 7.5로 맞추었다. 샘플을 37 ℃의 석영 큐벳에서 인큐베이션 하였다. 매 5 분 마다 용액의 혼탁도를 350 nm에서 AVIV 모델 (Model) 14DS UV-VIS 분광광도계 (뉴저지주 레이크우드에 소재)로 측정하였다. 측정하기 전 30 초 동안 및 측정하는 동안에 용액을 스타나 셀즈, 인크 (Starna Cells, Inc.) (캘리포니아주 아타스카데로에 소재)로부터 구입한 자석 교반 막대를 사용하여 교반하였다. 350 nm에서 OD의 증가는 GLP-펩티드의 응집을 지시한다. 응집에 대한 시간은 드레이크 (Drake) [Arvinte T, Cudd A, and Drake AF. (1993) J. Bio.Chem. 268, 6415-6422]의 방법에 따르는 예비-성장 및 성장기에 대한 선형 작도의 교차점에 근접하였다.
큐벳을 가성 비누 용액 (예를 들어, 콘트라드 (Contrad)-70)을 사용하여 실험 사이에 세척하였다.
본 발명의 다수의 GLP-1 화합물의 결과를 화합물이 응집하는데 필요한 시간 (시간)으로서 하기 표 1에 기록하였다. 표에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 화합물이 선행 기술에 공지된 GLP-1 화합물보다 응집 시간이 크게 증가되었음을 보여준다.
실시예 4- 본 발명의 GLP-1 화합물을 사용한 GLP-1 수용체 활성
GLP-1 수용체를 활성화시키는 본 발명의 GLP-1 화합물의 능력을 겔판트 (Gelfand) 등의 EP 619,322 및 미국 특허 제5,120,712호에 각각 기재된 바와 같이 시험관내 분석을 사용하여 평가하였다. 이 참고문헌의 전체 교시를 본원에 참고로인용한다. GLP-1(7-37)OH의 활성도와 비교한 상기 화합물의 활성도를 하기 표 1에 기록하였다. 이 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 GLP-1 화합물의 활성도는 일반적으로 거의 GLP-1(7-37)OH 만큼 양호하거나 더 양호하다.
실시예 5- GLP-1 화합물의 아연 침전
각각의 GLP-1 화합물을 실시예 1 또는 2에 기재한 바와 같이 제조했다. 각각의 동결건조된 GLP 분자 3 mg을 pH 10.5의 0.1 M HEPES 완충용액 3 ml에 용해시켰다. 이어서 생성된 용액의 pH를 0.2 N NaOH를 사용하여 10.0과 10.5 사이로 맞추었다. 용액을 주위 온도에서 30 분 동안 교반시킨 후 용액을 0.2 N HCl을 사용하여 pH 7.4로 맞추었다. 용액을 예를 들어, 밀렉스 GV 주사기 필터 (밀리포어 코포레이션, 매사추세츠주 베드포드에 소재)를 통해 여과시키고, GLP-1 화합물의 농도를 분광광도계, 예를 들어 벡크만 (Beckman) DU640에서 280 nm의 흡광도를 측정하여 확인하였다. 이어서 단백질 농도를 pH 7.4의 HEPES 중에서 200 μM로 맞추었다.
여과된 GLP-1 용액 (100 ㎕)을 ELISA 플레이트 (예를 들어, 팔콘 마이크로테스트 (Falcon Microtest) (등록상표) 96)에서 다양한 농도의 염화 아연을 함유한 pH 7.4의 0.1 M HEPES 100 ㎕로 희석하여 다양한 농도의 염화 아연 및 100 μM GLP-1 화합물을 함유하는 용액 200 ㎕를 생성하였다. 상기 용액을 주위의 온도 (22 ℃)에서 18 시간 동안 인큐베이션한 후, 예를 들어 마이크로플레이트 어댑터가 있는 조우안 (Jouan) CR412 원심분리기에서 원심분리하였다. 원심분리 후 상층액 150 ㎕를 UV-판독가능한 ELISA 마이크로타이터 (microtiter) 플레이트 (예를 들어, 코스타 (Costar) UV 플레이트)로 옮기고 마이크로플레이트 판독기 (예를 들어, 몰레큘라 디바이스 (Molecular Devices) SPECTRAmax PLUS, SOFTmax PRO)로 280 nm에서 OD를 측정하였다. 실험의 결과를 하기 표 2에 나타낸다. A280값은 2 개의 독립적인 측정의 결과이다.
상기 결과는 상기 희석액으로부터 다양한 GLP-1 화합물의 상당한 부분과 착물을 형성시키고 침전시키는데 소량의 아연만이 필요하다는 것을 보여준다.
등가물
본 발명은 본 발명의 바람직한 실시양태를 참조하여 구체적으로 나타내고 기재했지만, 당업자는 첨부된 청구 범위에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 진의 및 범위에서 벗어나지 않으면서 형태 및 세부사항의 다양한 변화가 만들어질 수 있다는 것을 이해할 것이다. 당업자는 단지 일상의 실험 (routine experimentation)을 사용하여 본원에 구체적으로 기재된 본 발명의 특정 실시양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있을 것이다. 상기 등가물을 청구 범위의 범위 내에 포함시키려 한다.

Claims (45)

  1. 하기 화학식 I (서열 1)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-1 화합물:
    <화학식 I (서열 1)>
    His-Xaa8-Glu-Gly-Xaa11-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-
    Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Xaa24-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-
    Ile-Xaa30-Trp-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-R
    상기 식에서,
    Xaa8은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser 또는 Thr이고,
    Xaa11은 Asp, Glu, Arg, Thr, Ala, Lys 또는 His이고,
    Xaa12는 His, Trp, Phe 또는 Tyr이고,
    Xaa16은 Leu, Ser, Thr, Trp, His, Phe, Asp, Val, Tyr, Glu 또는 Ala이고,
    Xaa22는 Gly, Asp, Glu, Gln, Asn, Lys, Arg, Cys 또는 시스테인산이고,
    Xaa23은 His, Asp, Lys, Glu, Gln 또는 Arg이고,
    Xaa24는 Glu, Arg, Ala 또는 Lys이고,
    Xaa26은 Trp, Tyr, Phe, Asp, Lys, Glu 또는 His이고,
    Xaa27은 Ala, Glu, His, Phe, Tyr, Trp, Arg 또는 Lys이고,
    Xaa30은 Ala, Glu, Asp, Ser 또는 His이고,
    Xaa33은 Asp, Arg, Val, Lys, Ala, Gly 또는 Glu이고,
    Xaa34는 Glu, Lys 또는 Asp이고,
    Xaa35는 Thr, Ser, Lys, Arg, Trp, Tyr, Phe, Asp, Gly, Pro, His 또는 Glu이고,
    Xaa36은 Thr, Ser, Asp, Trp, Tyr, Phe, Arg, Glu 또는 His이고,
    R은 Lys, Arg, Thr, Ser, Glu, Asp, Trp, Tyr, Phe, His, -NH2, Gly, Gly-Pro 또는 Gly-Pro-NH2이거나 또는 결실되나,
    단 GLP-1 화합물은 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)-NH2의 서열을 갖지 않고, GLP-1 화합물은 Gly8-GLP-1(7-37)OH, Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, Val8-GLP-1(7-36)NH2, Leu8-GLP-1(7-37)OH, Leu8-GLP-1(7-36)NH2, Ile8-GLP-1(7-37)OH, Ile8-GLP-1(7-36)NH2, Ser8-GLP-1(7-37)OH, Ser8-GLP-1(7-36)NH2, Thr8-GLP-1(7-37)OH 또는 Thr8-GLP-1(7-36)NH2, Ala11-GLP-1(7-37)OH, Ala11-GLP-1(7-36)NH2,Ala16-GLP-1(7-37)OH, Ala16-GLP-1(7-36)NH2, Ala18-GLP-1(7-37)OH, Ala18-GLP-1(7-36)NH2, Ala27-GLP-1(7-37)OH, Ala27-GLP-1(7-36)NH2, Ala33-GLP-1(7-37)OH, 또는 Ala33-GLP-1(7-36)NH2가 아니다.
  2. 하기 화학식 II (서열 2)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-1 화합물:
    <화학식 II (서열 2)>
    His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-
    Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Glu-Phe-
    Ile-Xaa30-Trp-Leu-Val-Lys-Xaa35-Arg-R
    상기 식에서,
    Xaa8은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser 또는 Thr이고,
    Xaa12는 His, Trp, Phe 또는 Tyr이고,
    Xaa16은 Leu, Ser, Thr, Trp, His, Phe, Asp, Val, Glu 또는 Ala이고,
    Xaa22는 Gly, Asp, Glu, Gln, Asn, Lys, Arg, Cys 또는 시스테인산이고,
    Xaa23은 His, Asp, Lys, Glu 또는 Gln이고,
    Xaa26은 Asp, Lys, Glu 또는 His이고,
    Xaa30은 Ala, Glu, Asp, Ser 또는 His이고,
    Xaa35는 Thr, Ser, Lys, Arg, Trp, Tyr, Phe, Asp, Gly, Pro, His 또는 Glu이고,
    R은 Lys, Arg, Thr, Ser, Glu, Asp, Trp, Tyr, Phe, His, -NH2, Gly, Gly-Pro 또는 Gly-Pro-NH2이거나 또는 결실되나,
    단 GLP-1 화합물은 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)-NH2의 서열을 갖지 않고, GLP-1 화합물은 Gly8-GLP-1(7-37)OH, Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, Val8-GLP-1(7-36)NH2, Leu8-GLP-1(7-37)OH, Leu8-GLP-1(7-36)NH2, Ile8-GLP-1(7-37)OH, Ile8-GLP-1(7-36)NH2, Ser8-GLP-1(7-37)OH, Ser8-GLP-1(7-36)NH2, Thr8-GLP-1(7-37)OH, Thr8-GLP-1(7-36)NH2또는 Ala16-GLP-1(7-36)NH2가 아니다.
  3. 하기 화학식 III (서열 3)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-1 화합물:
    <화학식 III (서열 3)>
    His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-
    Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Lys-Xaa27-Phe-Ile-
    Xaa30-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R
    상기 식에서,
    Xaa8은 Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser 또는 Thr이고,
    Xaa22는 Gly, Asp, Glu, Gln, Asn, Lys, Arg, Cys 또는 시스테인산이고,
    Xaa23은 His, Asp, Lys, Glu 또는 Gln이고,
    Xaa27은 Ala, Glu, His, Phe, Tyr, Trp, Arg 또는 Lys이고,
    Xaa30은 Ala, Glu, Asp, Ser 또는 His이고,
    R은 Lys, Arg, Thr, Ser, Glu, Asp, Trp, Tyr, Phe, His, -NH2, Gly, Gly-Pro 또는 Gly-Pro-NH2이거나 또는 결실되나,
    단 GLP-1 화합물은 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)-NH2의 서열을 갖지 않고, GLP-1 화합물은 Gly8-GLP-1(7-37)OH, Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1(7-37)OH, Val8-GLP-1(7-36)NH2, Leu8-GLP-1(7-37)OH, Leu8-GLP-1(7-36)NH2, Ile8-GLP-1(7-37)OH, Ile8-GLP-1(7-36)NH2, Ser8-GLP-1(7-37)OH, Ser8-GLP-1(7-36)NH2, Thr8-GLP-1(7-37)OH, Thr8-GLP-1(7-36)NH2, Ala16-GLP-1(7-37)OH, Ala16-GLP-1(7-36)NH2, Glu27-GLP-1(7-37)OH 또는 Glu27-GLP-1(7-36)NH2가 아니다.
  4. 제1항, 제2항 또는 제3항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-1 화합물의 6 개 이하의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)NH2의 상응하는 아미노산과 다른 GLP-1 화합물.
  5. 제4항에 있어서, GLP-1 화합물의 5 개 이하의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)NH2의 상응하는 아미노산과 다른 GLP-1 화합물.
  6. 제5항에 있어서, GLP-1 화합물의 4 개 이하의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)NH2의 상응하는 아미노산과 다른 GLP-1 화합물.
  7. 제6항에 있어서, GLP-1 화합물의 3 개 이하의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)NH2의 상응하는 아미노산과 다른 GLP-1 화합물.
  8. 제7항에 있어서, GLP-1 화합물의 2 개 이하의 아미노산이 GLP-1(7-37)OH 또는 GLP-1(7-36)NH2의 상응하는 아미노산과 다른 GLP-1 화합물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, Xaa8이 글리신 또는 발린인 GLP-1 화합물.
  10. 제4항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, Xaa8이 글리신 또는 발린이고, Xaa30이 알라닌, 글루탐산, 아스파르트산, 세린 또는 히스티딘인 GLP-1 화합물.
  11. 제10항에 있어서, Xaa30이 글루탐산인 GLP-1 화합물.
  12. 제4항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, Xaa8이 글리신 또는 발린이고, Xaa37이 히스티딘, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 아스파르트산, 글루탐산, 세린, 트레오닌, 아르기닌 또는 리신인 GLP-1 화합물.
  13. 제12항에 있어서, Xaa37이 히스티딘인 GLP-1 화합물.
  14. 제4항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, Xaa8이 글리신 또는 발린이고,Xaa22가 아스파르트산, 글루탐산, 글루타민, 아스파라긴, 리신, 아르기닌, 시스테인 또는 시스테인산인 GLP-1 화합물.
  15. 제14항에 있어서, Xaa22가 아스파르트산, 글루탐산, 리신 또는 아르기닌인 GLP-1 화합물.
  16. 제15항에 있어서, Xaa22가 글루탐산인 GLP-1 화합물.
  17. 제4항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, Xaa8이 글리신 또는 발린이고, Xaa22가 글루탐산 또는 리신이고, Xaa23이 글루탐산 또는 리신인 GLP-1 화합물.
  18. 제4항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, Xaa8이 글리신 또는 발린이고, Xaa22가 글루탐산이고, Xaa27이 알라닌인 GLP-1 화합물.
  19. 8 번 위치에 알라닌 이외의 아미노산 및 22 번 위치에 글리신 이외의 아미노산을 가진 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1) 화합물.
  20. 제19항에 있어서, 상기 GLP-1 화합물이 8 번 및 22 번 위치의 아미노산 이외에 GLP-1(7-37)OH, GLP-1(7-36)NH2또는 그의 단편에 상응하는 아미노산과 다른 아미노산을 3 개 이하로 포함하는 GLP-1 화합물.
  21. 제20항에 있어서, 상기 GLP-1 화합물이 8 번 및 22 번 위치의 아미노산 이외에 GLP-1(7-37)OH, GLP-1(7-36)NH2또는 그의 단편에 상응하는 아미노산과 다른 아미노산을 2 개 이하로 포함하는 GLP-1 화합물.
  22. 제21항에 있어서, 상기 GLP-1 화합물이 8 번 및 22 번 위치의 아미노산 이외에 GLP-1(7-37)OH, GLP-1(7-36)NH2또는 그의 단편에 상응하는 아미노산과 다른 아미노산을 1 개 이하로 포함하는 GLP-1 화합물.
  23. 제20항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-1(7-37)OH, GLP-1(7-36)NH2또는 그의 단편에 상응하는 아미노산과 다른 아미노산이 GLP-1(7-37)OH, GLP-1(7-36)NH2또는 그의 단편에 상응하는 아미노산의 보존적 치환인 GLP-1 화합물.
  24. 제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 22 번 위치의 아미노산 측쇄가 2 개 이상의 탄소 원자 및 극성 또는 전하를 띤 작용기를 포함하는 GLP-1 화합물.
  25. 제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
    a) 8 번 위치의 아미노산이 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 메티오닌, 세린, 트레오닌, 시스테인, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 아르기닌, 아스파라긴, 글루타민, 페닐알라닌, 티로신, 히스티딘 또는 트립토판이고; 및
    b) 22 번 위치의 아미노산이 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 아르기닌, 아스파라긴, 글루타민 또는 히스티딘인 GLP-1 화합물.
  26. 제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 22 번 위치의 아미노산이 2 내지 6 개의 탄소 원자를 포함하고 전하를 띤 작용기로 치환된 직쇄 또는 분지쇄 알킬 측쇄를 갖는 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1) 화합물.
  27. 제26항에 있어서, 22 번 위치의 아미노산이 아스파르트산, 글루탐산, 리신 또는 아르기닌인 GLP-1 화합물.
  28. 제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 8 번 위치의 아미노산이 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린, 트레오닌 또는 메티오닌인 GLP-1 화합물.
  29. 제28항에 있어서, 8 번 위치의 아미노산이 글리신 또는 발린인 GLP-1 화합물.
  30. 제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 22 번 위치에 술폰산 기를 포함하는 측쇄를 가진 아미노산을 갖는 GLP-1 화합물.
  31. 제29항에 있어서, 측쇄를 가진 아미노산이 시스테인산이고 8 번 위치의 아미노산이 알라닌이 아닌 GLP-1 화합물.
  32. 하기 서열 4의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-1 화합물:
    (서열 4)
    Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-
    Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-
    Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R
    상기 식에서,
    Xaa7은 L-히스티딘, D-히스티딘, 데스아미노-히스티딘, 2-아미노-히스티딘, β-히드록시-히스티딘, 호모히스티딘, α-플루오로메틸-히스티딘 및 α-메틸-히스티딘이고,
    Xaa8은 글리신, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린 또는 트레오닌이고,
    Xaa22는 아스파르트산, 글루탐산, 글루타민, 아스파라긴, 리신, 아르기닌, 시스테인 또는 시스테인산이고, 및
    R은 NH2또는 Gly(OH)이다.
  33. 제32항에 있어서, Xaa8이 글리신, 발린, 루이신, 이소루이신, 세린 또는 트레오닌인 GLP-1 화합물.
  34. 제33항에 있어서, Xaa22가 리신, 아스파르트산, 글루탐산 또는 아르기닌인 GLP-1 화합물.
  35. 제34항에 있어서, Xaa7이 L-히스티딘이고, Xaa8이 글리신 또는 발린이고, R이 Gly(OH)인 GLP-1 화합물.
  36. 제34항에 있어서, GLP-1 화합물이 a) Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 5); b) Val8-Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열 6); c) Val8-Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 7); 및 d) Val8-Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 8)로 이루어진 군 중에서 선택된 GLP-1 화합물.
  37. 제34항에 있어서, GLP-1 화합물이 a) Gly8-Glu22-GLP-1(7-37)OH (서열 9); b) Gly8-Asp22-GLP-1(7-37)OH (서열 10) ; c) Gly8-Arg22-GLP-1(7-37)OH (서열 11) ; 및 d) Gly8-Lys22-GLP-1(7-37)OH (서열 12)로 이루어진 군 중에서 선택된 GLP-1 화합물.
  38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 GLP-1 화합물이 2 가 금속 양이온과 착물을 형성한 GLP-1 화합물.
  39. 제38항에 있어서, 상기 GLP-1 화합물이 2 가 아연 양이온과 착물을 형성한 GLP-1 화합물.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항의 GLP-1 화합물의 효과량을 GLP-1 수용체의 자극이 필요한 피검체에게 투여하는 단계를 포함하는 GLP-1 수용체의 자극을 필요로 하는 피검체에서 GLP-1 수용체를 자극하는 방법.
  41. 제40항에 있어서, 피검체가 인슐린 비의존성 당뇨병에 대해 치료되는 것인 방법.
  42. 제41항에 있어서, 피검체가 인슐린 비의존성 당뇨병에 대해 예방적으로 치료되는 것인 방법.
  43. 제40항에 있어서, 피검체가 비만, 졸중, 심근 경색증, 수술후 이화작용 변화 또는 과민성 대장 증후군에 대해 치료되는 것인 방법.
  44. 인슐린 비의존성 당뇨병의 치료를 위한 의약의 제조에서 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 따른 GLP-1 화합물의 용도.
  45. 비만, 졸중, 심근 경색증, 수술후 이화작용 변화 또는 과민성 대장 증후군의 치료를 위한 의약의 제조에서 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 따른 GLP-1 화합물의 용도.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100851560B1 (ko) * 2006-12-27 2008-08-11 고려대학교 산학협력단 새로운 글루카곤 유사 펩타이드-1 (ｇｌｐ-1) 작용제 및 그용도

Families Citing this family (157)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001000654A2 (en) 1999-06-29 2001-01-04 Pharmaceutical Discovery Corporation Purification and stabilization of peptide and proteins in pharmaceutical agents
US9006175B2 (en) 1999-06-29 2015-04-14 Mannkind Corporation Potentiation of glucose elimination
DK1695983T3 (da) * 2000-06-16 2009-05-18 Lilly Co Eli Glucagon-lignende peptid-1 analoger
DK1326630T3 (da) 2000-09-18 2008-09-15 Sanos Bioscience As Anvendelse af GLP-2-peptider
US7186683B2 (en) 2000-09-18 2007-03-06 Sanos Bioscience A/S Use of GLP for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related and nutrition-related disorders
US7371721B2 (en) 2000-09-18 2008-05-13 Sanos Bioscience A/S Use of GLP-2 and related compounds for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related disorders and calcium homeostasis related syndromes
US20030119734A1 (en) * 2001-06-28 2003-06-26 Flink James M. Stable formulation of modified GLP-1
CN1363654A (zh) 2001-07-19 2002-08-14 上海华谊生物技术有限公司 生产促胰岛素分泌肽glp－1(7－36)的基因工程菌以及生产glp－1(7－36)的方法
HUP0501192A3 (en) 2001-08-23 2006-06-28 Lilly Co Eli Glucagon-like peptide-1 analogs
GB0121709D0 (en) * 2001-09-07 2001-10-31 Imp College Innovations Ltd Food inhibition agent
IL160917A0 (en) * 2001-10-18 2004-08-31 Bristol Myers Squibb Co Human glucagon-like-peptide-1 mimics and their use in the treatment of diabetes and related conditions
EP2261250B1 (en) 2001-12-21 2015-07-01 Human Genome Sciences, Inc. GCSF-Albumin fusion proteins
DE60217918T2 (de) * 2001-12-29 2007-11-15 Novo Nordisk A/S Kombinierte verwendung einer glp-1-verbindung und eines aldose reduktase inhibitors
NZ534125A (en) * 2002-02-20 2006-11-30 Emisphere Tech Inc A formulation comprising a GLP-1 compound and a delivery agent
EP1894591B1 (en) 2002-03-20 2013-06-26 MannKind Corporation Cartridge for an inhalation apparatus
WO2003103572A2 (en) * 2002-06-04 2003-12-18 Eli Lilly And Company Modified glucagon-like peptide-1 analogs
US20080260838A1 (en) * 2003-08-01 2008-10-23 Mannkind Corporation Glucagon-like peptide 1 (glp-1) pharmaceutical formulations
US7790681B2 (en) 2002-12-17 2010-09-07 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cardiac arrhythmias with GLP-1 receptor ligands
US7731947B2 (en) 2003-11-17 2010-06-08 Intarcia Therapeutics, Inc. Composition and dosage form comprising an interferon particle formulation and suspending vehicle
WO2004067548A2 (en) * 2003-01-31 2004-08-12 Theratechnologies Inc. Chemically modified metabolites of regulatory peptides and methods of producing and using same
CN1750842A (zh) * 2003-02-19 2006-03-22 研究及应用科学协会股份有限公司 Glp－1的类似物
ATE549028T1 (de) 2003-05-15 2012-03-15 Tufts College Stabile analoga von glp-1
EP1631308B1 (en) * 2003-05-30 2013-07-31 Amylin Pharmaceuticals, LLC Novel methods and compositions for enhanced transmucosal delivery of peptides and proteins
WO2004105790A1 (en) * 2003-06-03 2004-12-09 Novo Nordisk A/S Stabilized pharmaceutical peptide compositions
CN102940879B (zh) * 2003-06-03 2017-06-06 诺沃挪第克公司 稳定化的药物肽组合物
PT1641823E (pt) 2003-06-12 2011-11-08 Lilly Co Eli Proteínas de fusão de análogos de glp-1
KR101243648B1 (ko) * 2003-11-20 2013-03-14 노보 노르디스크 에이/에스 제조 및 주사 장치용에 최적인 프로필렌 글리콜 함유펩티드 제제
EP2298337B1 (en) 2003-12-09 2017-02-22 Novo Nordisk A/S Regulation of food preference using GLP-1 agonists
ES2393335T3 (es) 2003-12-16 2012-12-20 Ipsen Pharma Análogos de GLP-1
CA2550695A1 (en) * 2003-12-16 2005-06-30 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques (S.C.R Glp-1 pharmaceutical compositions
BRPI0506694A (pt) 2004-01-08 2007-05-02 Theratechnologies Inc análogos de peptìdeo-1 semelhante ao glucagon com longa duração de ação
NZ550602A (en) 2004-04-30 2009-11-27 Dow Agrosciences Llc Plants comprising herbicide resistance gene encoding aryloxyalkanoate dioxygenase
US20090069226A1 (en) * 2004-05-28 2009-03-12 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Transmucosal delivery of peptides and proteins
JP2008501765A (ja) 2004-06-11 2008-01-24 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１アゴニストを用いた薬剤誘発性肥満の中和
DK1786784T3 (da) 2004-08-20 2011-02-14 Mannkind Corp Katalyse af diketopiperazinsyntese
CN104436170B (zh) 2004-08-23 2018-02-23 曼金德公司 用于药物输送的二酮哌嗪盐
PL1789434T3 (pl) * 2004-08-31 2014-07-31 Novo Nordisk As Zastosowanie tris(hydroksymetylo)aminometanu do stabilizacji peptydów, polipeptydów i białek
EP1799711B1 (en) 2004-10-07 2012-06-20 Novo Nordisk A/S Protracted exendin-4 compounds
WO2006037810A2 (en) * 2004-10-07 2006-04-13 Novo Nordisk A/S Protracted glp-1 compounds
JP5175103B2 (ja) 2004-11-12 2013-04-03 ノヴォ ノルディスク アー／エス 安定なペプチド製剤
JP4785206B2 (ja) 2005-01-14 2011-10-05 ウクスィ・グランドチャンプ・ファーマシューティカル・テクノロジー・カンパニー・リミテッド 修飾されたエキセンディン（Ｅｘｅｎｄｉｎｓ）及びその使用
WO2006083761A2 (en) 2005-02-03 2006-08-10 Alza Corporation Solvent/polymer solutions as suspension vehicles
US11246913B2 (en) 2005-02-03 2022-02-15 Intarcia Therapeutics, Inc. Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide
WO2006098524A1 (ja) * 2005-03-18 2006-09-21 Ajinomoto Co., Inc. ストレスによる腸疾患の予防・治療剤
DE602006017202D1 (de) * 2005-05-13 2010-11-11 Lilly Co Eli Pegylierte glp-1-verbindungen
MX2008001468A (es) * 2005-06-30 2008-04-07 Sod Conseils Rech Applic Composiciones farmaceuticas del peptido similar al glucagon-1.
HUE028623T2 (en) 2005-09-14 2016-12-28 Mannkind Corp Active substance formulation method based on increasing the affinity of the active ingredient for binding to the surface of crystalline microparticles
EP1947926B1 (en) 2005-10-28 2014-11-26 Dow AgroSciences LLC Novel herbicide resistance genes
ES2572952T3 (es) 2005-11-07 2016-06-03 Indiana University Research And Technology Corporation Análogos de glucagón que muestran solubilidad y estabilidad fisiológicas
CN100374462C (zh) * 2005-11-21 2008-03-12 大连帝恩生物工程有限公司 截短胰高血糖素样肽1(sGLP-1)、制法及其应用
US8841255B2 (en) 2005-12-20 2014-09-23 Duke University Therapeutic agents comprising fusions of vasoactive intestinal peptide and elastic peptides
EP1971355B1 (en) 2005-12-20 2020-03-11 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
US20130172274A1 (en) 2005-12-20 2013-07-04 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
WO2008063203A2 (en) * 2006-01-27 2008-05-29 Whitehead Institute For Biomedical Research Compositions and methods for efficient gene silencing in plants
IN2015DN00888A (ko) 2006-02-22 2015-07-10 Mannkind Corp
MX2008013304A (es) 2006-04-20 2008-10-27 Amgen Inc Compuestos de peptido 1 tipo glucagon.
CA2651855C (en) 2006-05-30 2011-08-02 Intarcia Therapeutics, Inc. Two-piece, internal-channel osmotic delivery system flow modulator
CN101466398A (zh) * 2006-06-09 2009-06-24 诺瓦提斯公司 稳定的胰岛素样生长因子多肽
CA2655923A1 (en) * 2006-07-06 2008-01-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Glucagon-like peptides and uses thereof
US8071103B2 (en) * 2006-07-18 2011-12-06 Centocor, Inc. Pharmaceutical composition comprising a human GLP-1 mimetibody
ES2422864T3 (es) 2006-08-09 2013-09-16 Intarcia Therapeutics, Inc Sistemas de liberación osmótica y unidades de pistón
ES2628063T3 (es) 2007-01-05 2017-08-01 Indiana University Research And Technology Corporation Análogos de glucagón que muestran una mayor solubilidad en tampones de pH fisiológicos
CN101041693B (zh) * 2007-02-06 2011-08-17 珠海联邦制药股份有限公司 一种降血糖多肽及其应用
CA2677932A1 (en) 2007-02-15 2008-08-21 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/glp-1 receptor co-agonists
PT2157967E (pt) 2007-04-23 2013-04-03 Intarcia Therapeutics Inc Formulações de suspensões de péptidos insulinotrópicos e suas utilizações
GB2448895A (en) * 2007-05-01 2008-11-05 Activotec Spp Ltd GLP-1 like compounds and uses thereof
US8464239B2 (en) * 2007-06-11 2013-06-11 Red Hat, Inc. Real-time installation and/or configuration assistant
EP3260129A1 (en) * 2007-08-03 2017-12-27 Eli Lilly and Company An fgf-21 compound and a glp-1 compound for use in the treatment of obesity
WO2009055740A2 (en) * 2007-10-24 2009-04-30 Mannkind Corporation Method of preventing adverse effects by glp-1
US8785396B2 (en) 2007-10-24 2014-07-22 Mannkind Corporation Method and composition for treating migraines
BRPI0818874A2 (pt) * 2007-10-24 2015-05-05 Mannkind Corp Liberação de agentes ativos
JP5771005B2 (ja) 2007-10-30 2015-08-26 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションＩｎｄｉａｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ グルカゴンアンタゴニスト及びｇｌｐ−１アゴニスト活性を示す化合物
ES2509883T3 (es) 2007-10-30 2014-10-20 Indiana University Research And Technology Corporation Antagonistas de glucagón
EP2240155B1 (en) 2008-02-13 2012-06-06 Intarcia Therapeutics, Inc Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents
ES2570400T3 (es) 2008-06-13 2016-05-18 Mannkind Corp Un inhalador de polvo seco y un sistema para el suministro de fármacos
US8485180B2 (en) 2008-06-13 2013-07-16 Mannkind Corporation Dry powder drug delivery system
CL2009001424A1 (es) 2008-06-17 2010-04-30 Univ Indiana Res & Tech Corp Peptido tipo glucagon; dimero que comprende dos de dichos peptidos; composicion farmaceutica que lo comprende; y su uso para tratar diabetes o inducir perdida de peso.
CL2009001425A1 (es) 2008-06-17 2010-04-30 Univ Indiana Res & Tech Corp Analogos de glucagon con un aminoacido aromatico grande que carece de cadena lateral de imidazol que le confiere actividad agonista del receptor gip; composiciones farmaceutica; kit que los contiene y uso para reducir el aumento de peso, tratar la diabetes o inducir paralisis del tracto intestinal.
CA2727161A1 (en) * 2008-06-17 2009-12-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility and stability physiological ph buffers
JP5479465B2 (ja) 2008-06-20 2014-04-23 マンカインド コーポレイション 吸入努力をリアルタイムにプロファイルする対話式機器および方法
WO2009158704A2 (en) * 2008-06-27 2009-12-30 Duke University Therapeutic agents comprising elastin-like peptides
TWI532497B (zh) 2008-08-11 2016-05-11 曼凱公司 超快起作用胰島素之用途
CN101337989B (zh) * 2008-08-28 2012-10-24 中国药科大学 一类新型胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN101367873B (zh) * 2008-10-08 2011-05-04 南开大学 一种改构的胰高血糖素样肽-1的类似物和修饰物及其应用
EP2344519B1 (en) 2008-11-07 2016-09-28 The General Hospital Corporation C-terminal fragments of glucagon-like peptide-1 (glp-1)
AU2009327418A1 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Indiana University Research And Technology Corporation Amide based glucagon superfamily peptide prodrugs
US8314106B2 (en) 2008-12-29 2012-11-20 Mannkind Corporation Substituted diketopiperazine analogs for use as drug delivery agents
EP2405963B1 (en) 2009-03-11 2013-11-06 MannKind Corporation Apparatus, system and method for measuring resistance of an inhaler
KR101875969B1 (ko) 2009-06-12 2018-07-06 맨카인드 코포레이션 한정된 비표면적을 갖는 디케토피페라진 마이크로입자
IN2012DN00377A (ko) 2009-06-16 2015-08-21 Univ Indiana Res & Tech Corp
ES2537287T3 (es) 2009-07-13 2015-06-05 Zealand Pharma A/S Análogos de glucagón acilados
AU2010282250B2 (en) * 2009-08-14 2015-11-12 Immunoforge Co., Ltd. Modified Vasoactive Intestinal Peptides
KR101823699B1 (ko) 2009-09-28 2018-01-30 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 실질 항정상태 약물 전달의 신속 확립 및/또는 종결
US20120264684A1 (en) * 2009-10-30 2012-10-18 Yasuhiro Kajihara Glycosylated Form of Antigenic GLP-1 Analogue
JP5784622B2 (ja) 2009-11-03 2015-09-24 マンカインド コーポレ−ション 吸入活動をシミュレートするための装置及び方法
EP2504019A2 (en) 2009-11-25 2012-10-03 ArisGen SA Mucosal delivery composition comprising a peptide complexed with a crown compound and/or a counter ion
US8703701B2 (en) 2009-12-18 2014-04-22 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists
US8551946B2 (en) 2010-01-27 2013-10-08 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon antagonist-GIP agonist conjugates and compositions for the treatment of metabolic disorders and obesity
WO2011123943A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Mount Sinai Hospital Methods for treating disorders of the gastrointestinal tract using a glp-1 agonist
US9127088B2 (en) 2010-05-13 2015-09-08 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting nuclear hormone receptor activity
MX2012013005A (es) 2010-05-13 2013-02-26 Univ Indiana Res & Tech Corp Peptidos de la superfamilia de glucagon que presentan actividad del receptor acoplado a proteinas g.
ES2528496T3 (es) * 2010-05-17 2015-02-10 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd. Nuevos análogos de péptido similar a glucagón, composición, y métodos de uso
MX359281B (es) 2010-06-21 2018-09-21 Mannkind Corp Sistema y metodos para suministrar un farmaco en polvo seco.
CA2796894A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 Indiana University Research And Technology Corporation Amide based glucagon superfamily peptide prodrugs
RU2013103763A (ru) 2010-07-02 2014-08-10 Ангиохем Инк. Короткие и содержащие d-аминокислоты полипептиды для терапевтических конъюгатов и их применения
WO2012061466A2 (en) 2010-11-02 2012-05-10 The General Hospital Corporation Methods for treating steatotic disease
BR112013015389A2 (pt) 2010-12-22 2016-11-22 Univ Indiana Res & Tech Corp análogo de glucagon exibindo atividade de receptor gip
US20120208755A1 (en) 2011-02-16 2012-08-16 Intarcia Therapeutics, Inc. Compositions, Devices and Methods of Use Thereof for the Treatment of Cancers
MX353285B (es) 2011-04-01 2018-01-05 Mannkind Corp Paquete de blister para cartuchos farmaceuticos.
CN102180963B (zh) * 2011-04-22 2014-06-25 中国药科大学 胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN102219850A (zh) * 2011-05-03 2011-10-19 上海格尼生物技术有限公司 新的长效glp-1化合物
CA2873553C (en) 2011-06-06 2020-01-28 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Use of modified vasoactive intestinal peptides in the treatment of hypertension
WO2012174472A1 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Mannkind Corporation High capacity diketopiperazine microparticles
MX347703B (es) 2011-06-22 2017-05-09 Univ Indiana Res & Tech Corp Co-agonistas del receptor de glucagon/glp-1.
MX2013015168A (es) 2011-06-22 2014-03-31 Univ Indiana Res & Tech Corp Co-agonista del receptor de glucagon/glp-1.
WO2013006692A2 (en) 2011-07-06 2013-01-10 The General Hospital Corporation Methods of treatment using a pentapeptide derived from the c-terminus of glucagon-like peptide 1 (glp-1)
CA2849673A1 (en) * 2011-09-23 2013-03-28 Novo Nordisk A/S Novel glucagon analogues
CN103945859A (zh) 2011-10-24 2014-07-23 曼金德公司 用于治疗疼痛的方法和组合物
CA2847246A1 (en) 2011-11-17 2013-05-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting glucocorticoid receptor activity
KR20150023013A (ko) 2012-06-21 2015-03-04 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 수용체 활성을 나타내는 글루카곤 유사체
WO2014012069A2 (en) 2012-07-12 2014-01-16 Mannkind Corporation Dry powder drug delivery systems and methods
EP2911690A1 (en) 2012-10-26 2015-09-02 MannKind Corporation Inhalable influenza vaccine compositions and methods
CN103087178A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087175A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 新型长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087176A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087179A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087177A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 一类长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
AU2014228415B2 (en) 2013-03-15 2018-08-09 Mannkind Corporation Microcrystalline diketopiperazine compositions and methods
MX362275B (es) 2013-04-18 2019-01-10 Novo Nordisk As Co-agonista de peptido similar a glucagon tipo 1 (glp-1) receptor de glucagon de larga duracion, estables para uso medico.
KR102321339B1 (ko) 2013-07-18 2021-11-02 맨카인드 코포레이션 열-안정성 건조 분말 약제학적 조성물 및 방법
US11446127B2 (en) 2013-08-05 2022-09-20 Mannkind Corporation Insufflation apparatus and methods
CN104262481B (zh) * 2013-08-09 2018-02-09 天津药物研究院有限公司 一种侧链修饰的长效glp‑1类似物的制备方法及其应用
CN103405753B (zh) * 2013-08-13 2016-05-11 上海仁会生物制药股份有限公司 稳定的促胰岛素分泌肽水针药物组合物
US10307464B2 (en) 2014-03-28 2019-06-04 Mannkind Corporation Use of ultrarapid acting insulin
US11052132B2 (en) 2014-05-08 2021-07-06 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating cystic fibrosis
WO2015185640A1 (en) 2014-06-04 2015-12-10 Novo Nordisk A/S Glp-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
US9889085B1 (en) 2014-09-30 2018-02-13 Intarcia Therapeutics, Inc. Therapeutic methods for the treatment of diabetes and related conditions for patients with high baseline HbA1c
US10561806B2 (en) 2014-10-02 2020-02-18 Mannkind Corporation Mouthpiece cover for an inhaler
EP3209682B1 (en) * 2014-10-24 2020-12-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Co-agonists of the glucagon and glp-1 receptors
EP3256151B1 (en) 2015-02-09 2020-08-05 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating muscle disease and disorders
US10925639B2 (en) 2015-06-03 2021-02-23 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant placement and removal systems
KR20170080521A (ko) * 2015-12-31 2017-07-10 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체
KR102574993B1 (ko) 2016-05-16 2023-09-06 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 글루카곤-수용체 선택적 폴리펩티드 및 이들의 이용 방법
USD860451S1 (en) 2016-06-02 2019-09-17 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant removal tool
USD840030S1 (en) 2016-06-02 2019-02-05 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant placement guide
KR20190104039A (ko) 2017-01-03 2019-09-05 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 Glp-1 수용체 효능제의 연속적인 투여 및 약물의 동시-투여를 포함하는 방법
AR112480A1 (es) 2017-08-24 2019-10-30 Novo Nordisk As Composiciones de glp-1 y sus usos
WO2019140021A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Eli Lilly And Company Combination therapy
KR20200141469A (ko) 2018-04-05 2020-12-18 썬 파마슈티칼 인더스트리스 리미티드 신규한 glp-1 유사체
TWI705820B (zh) 2018-06-22 2020-10-01 美商美國禮來大藥廠 Gip/glp1促效劑組合物
CA3116023A1 (en) 2018-10-11 2020-04-16 Intarcia Therapeutics, Inc. Human amylin analog polypeptides and methods of use
KR20210081376A (ko) 2018-10-30 2021-07-01 지아닝 리우 Glp-1 수용체 작용제 활성을 갖는 glp-1 폴리펩티드 및 그의 용도
CA3056663C (en) 2019-04-05 2022-10-18 Jeffrey S. RIESMEYER Use of dulaglutide in reducing risk of cardiovascular events in patients with type 2 diabetes mellitus
CN112898406B (zh) * 2019-10-12 2023-11-10 深圳纳福生物医药有限公司 不同构型的glp-1类似肽修饰二聚体及其制备方法在治疗ii型糖尿病中的应用
WO2021139744A1 (en) 2020-01-11 2021-07-15 Beijing Ql Biopharmaceutical Co., Ltd. Conjugates of fusion proteins of glp-1 and fgf21
AU2021208601A1 (en) 2020-02-18 2022-07-28 Novo Nordisk A/S Glp-1 compositions and uses thereof
US11981718B2 (en) * 2020-05-27 2024-05-14 Ampsource Biopharma Shanghai Inc. Dual-function protein for lipid and blood glucose regulation

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5545618A (en) 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
ATE164852T1 (de) * 1990-01-24 1998-04-15 Douglas I Buckley Glp-1-analoga verwendbar in der diabetesbehandlung
US5424286A (en) 1993-05-24 1995-06-13 Eng; John Exendin-3 and exendin-4 polypeptides, and pharmaceutical compositions comprising same
US5705483A (en) * 1993-12-09 1998-01-06 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
UA65549C2 (uk) * 1996-11-05 2004-04-15 Елі Ліллі Енд Компані Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція
DK1019077T4 (da) 1997-08-08 2011-03-07 Amylin Pharmaceuticals Inc Hidtil ukendte exendinagonistforbindelser
DK1032587T4 (da) 1997-11-14 2013-04-08 Amylin Pharmaceuticals Llc Hidtil ukendte exendinagonist-forbindelser
ATE381939T1 (de) 1997-11-14 2008-01-15 Amylin Pharmaceuticals Inc Neuartige exendin agonisten
US6380357B2 (en) * 1997-12-16 2002-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 crystals
AU2610799A (en) 1998-02-27 1999-09-15 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 per cent, forming partially structured micellar-like aggregates
JP2002512175A (ja) 1998-02-27 2002-04-23 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１類似体の誘導体類
EP1306091A3 (en) * 1998-07-31 2003-05-21 Novo Nordisk A/S Stimulation of beta cell proliferation
US6429197B1 (en) * 1998-10-08 2002-08-06 Bionebraska, Inc. Metabolic intervention with GLP-1 or its biologically active analogues to improve the function of the ischemic and reperfused brain
DK1695983T3 (da) * 2000-06-16 2009-05-18 Lilly Co Eli Glucagon-lignende peptid-1 analoger
CZ306180B6 (cs) * 2000-12-07 2016-09-14 Eli Lilly And Company GLP-1 fúzní proteiny
DE60228972D1 (de) * 2001-07-31 2008-10-30 Us Gov Health & Human Serv Glp 1 exendin 4 peptidanaloga und deren verwendungen
AU2010279305A1 (en) * 2009-08-07 2012-03-01 Perry Felix Method and apparatus for surface and subsurface sanitizing of food products in a cooking appliance using ultraviolet light

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100851560B1 (ko) * 2006-12-27 2008-08-11 고려대학교 산학협력단 새로운 글루카곤 유사 펩타이드-1 (ｇｌｐ-1) 작용제 및 그용도

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