KR20020013978A - 피부 관리 조성물 - Google Patents

Abstract

(a) 공액 리놀산 및(또는) 이의 유도체;

(b) 페놀계 화합물 또는 이의 혼합물; 및

(c) 피부학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하며, 단 상기 페놀계 화합물은 햇빛 차단제가 아닌 국소 조성물. 이 제품은 특히 주름을 치료하고 민감성 피부를 진정하는데 유용하다.

Description

피부 관리 조성물{Skin Care Composition}

피부는 피부병, 환경적 악재(바람, 공조 및 중앙 난방)에 의해, 또는 피부가 햇빛에 노출시 가속화(광노화)될 수 있는 정상적인 노화 과정(시간적 노화)을 통하여 나빠지게 된다. 최근 피부의 외관 및 상태를 개선하기 위한 미용 조성물 및 미용 방법에 대한 요구가 상당히 증가되었다.

시간적 노화 및 광노화 피부의 가시적 신호, 예컨대 주름, 주름선, 처짐, 색소 침착 과도 및 노화성 반점을 치료 또는 지연하는 노화 방지 미용 제품에 대한 소비자들의 요구가 증가되고 있는 실정이다.

소비자들은 종종 미용 제품으로부터 노화 방지뿐 아니라 다른 이점도 또한 추구한다. 민감성 피부라는 개념은 민감하고, 건조하고(하거나) 박피되는 피부의 외관 및 상태를 개선하고 적색의 및(또는) 자극받은 피부를 진정하는 미용 제품에 대한 소비자의 요구를 또한 창출했다. 소비자들은 유분/피지 조절 효과를 갖는 미용 제품을 또한 원한다.

많은 사람들이 그들 피부의 색소 침착 정도를 염려한다. 예를 들면, 노화성반점 또는 주근깨가 있는 사람들은 그러한 색소 침착 반점이 보다 덜 두드러지는 것을 바랄 것이다. 또 다른 사람들은 햇빛에 노출되어 검어진 피부를 완화시키거나 그들 본래의 피부색을 미백화하고 싶어할 수도 있다. 이러한 요구에 부합하기 위하여, 많은 시도가 행해져서 멜라닌 세포의 색소 생산을 감소시키는 제품이 개발되었다. 그러나, 지금까지 확인된 물질들은 바람직하지 않은 부작용을 갖는데, 예를 들면 피부 자극이 있다.

따라서 상기 물질들은 미용 용도에는 적절하지 않거나 또는 피부 미백 효과가 원하는 수준에 못 미치는 농도로 밖에 사용할 수 없다. 여러 피부 미백 물질을 병용하여 부작용을 완화시키는 것을 생각할 수 있으나, 이러한 병용 방법은 경쟁효과로 인하여 피부 미백 효과가 감소될 수 있다는 상당한 위험성도 존재한다. 그러므로, 미용 피부 미백 제품의 효과에 있어서의 개선이 요구되는데, 특히 피부를 자극하지 않아야 한다.

제 J07277939 호는 (A) 플로르 드 마니타(Flor de Manita) 및 (B) 산소 제거제, 항산화제, 세포 활성화제, 항염증제, 티로시나제 저해제 및 수분 유지제로부터 선택된 적어도 1종의 활성성분을 함유하는 피부 노화 및 피부 염증을 개선하기 위한 피부 관리 조성물을 기술하고 있다. 성분 B로서 기술된 다수의 선택 가능한 성분들 중에서 특히 퀘르세틴, 퀘르시톨린, 카테킨, 갈산, 감마-리놀렌산 및 아이코사펜타엔산이 있다.

제 J05271046 호는 탄소수 18 내지 22이며 2개 이상의 불포화 결합을 갖는 불포화 지방산, 예컨대 리놀산 및 아라키돈산과 폴리페놀을 함유하는 피부 미백 조성물을 기술한다.

제 WO99/26588 호는 공액 리놀산을 포함하며 임의로 종래의 햇빛 차단제, 예컨대 벤조페논을 함유할 수 있는 노화 방지 피부 관리 제제를 기술하고 있다.

상기 언급된 선행 기술은 공액 리놀산과 페놀계 화합물(햇빛 차단제가 아니다)의 특정 상승적 조합뿐만이 아니라 상기 특정 조합의 주름, 민감성 피부, 건조 피부를 치료하고, 유분/피지 분비를 조절하고, 또는 피부를 미백하기 위한 용도도 또한 전혀 교시하지 않았다. 햇빛 차단제로서 작용하는 페놀계 화합물은 본 발명의 범위에서 명확히 배제된다.

햇빛 차단제는 문헌[Food and Drug Adminstration Monograph Sunscreen Drug Products for Over-The-Counter Human use; Final Monograph published in the Federal Register Volume 64, No 98, 1999년 5월 21일, page 27666-27691]에 기술되어 있는 표준화 프로토콜을 사용하여 미용 제품 제제를 인간 피부에 대하여 시험할 때 최소 2 이상의 햇빛 차단 지수(SPF)를 제공하는 성분으로 정의된다.

본 발명에 이르러 시간적 노화 또는 광노화로 인한 정상적인, 그러나 미용적으로 바람직하지 않은 피부 상태, 예컨대 주름, 주름선, 처짐, 색소 침착 과다 및 노화성 반점의 효과적인 치료 및 예방이, 공액 리놀산 및(또는) 이의 유도체와 페놀계 화합물(단 페놀계 화합물이 햇빛 차단제는 아님)을 포함하는, 미용 조성물을 피부에 사용함으로써 달성될 수 있다는 것이 발견되었다. 본 발명자들은 또한 상기 미용 조성물의 사용은 노화 방지뿐 아니라 추가의 피부 관리 이점, 예컨대 민감성 및(또는) 자극받은 피부를 진정하고, 유분/피지 분비를 조절하고 피부를 미백하는 효과를 이롭게 제공한다는 것을 발견하였다.

발명의 요약

본 발명의 제 1 면에 따르면,

(a) 공액 리놀산 및(또는) 이의 유도체;

(b) 페놀계 화합물 또는 이의 혼합물; 및

(c) 피부학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하며, 단 상기 페놀계 화합물은 햇빛 차단제가 아닌 국소 조성물이 제공된다.

본 발명의 제 2 면에 따르면, 주름, 처짐, 건조, 노화 및(또는) 광손상 피부의 치료/예방; 피부 중 콜라겐 침착의 증가, 피부 중 데코린 생산의 증가, 조직 회복 증진; 자극받은 적색의 및(또는) 민감성 피부의 진정; 피부 결, 매끄러움 및(또는) 피부탄력의 개선; 피부 미백; 유분/피지 분비의 조절로부터 선택된 적어도 하나의 피부 관리 이점을 제공하는 미용 방법이 제공되는데, 이 방법은 피부에 상기한 미용 조성물을 사용하는 것을 포함한다.

본 발명은 또한 주름, 처짐, 노화 및(또는) 광손상 피부의 치료/예방; 피부 중 콜라겐 침착의 증가, 피부 중 데코린 생산의 증가, 조직 회복 증진; 자극받은 적색의 및(또는) 민감성 피부의 진정; 피부 결, 매끄러움 및(또는) 피부탄력의 개선; 피부 미백; 및 유분/피지 분비의 조절로부터 선택된 적어도 하나의 피부 관리 이점을 제공하기 위한 본 발명 조성물의 용도를 포함한다.

본 발명의 또 하나의 면에 따르면 주름, 처짐, 노화 및(또는) 광손상 피부의 치료/예방; 피부 중 콜라겐 침착의 증가, 피부 중 데코린 생산의 증가, 조직 회복증진; 자극받은 적색의 및(또는) 민감성 피부의 진정; 피부 결, 매끄러움 및(또는) 피부탄력의 개선; 피부 미백; 유분/피지 분비의 조절로부터 선택된 적어도 하나의 미용 피부 관리 이점을 제공하기 위한 미용 국소 조성물에 공액 리놀산 및(또는) 이의 유도체를 페놀계 화합물 또는 이의 혼합물(단, 페놀계 화합물이 햇빛차단제는 아님)과 함께 사용하는 용도가 제공된다.

그러므로 본 발명의 조성물, 방법 및 용도는 노화 방지 이점을 제공하여 이로 인해 탄력이 개선되고 주름 및 피부의 노화가 완화되거나 지연되고 피부색이 개선된 외관의 매끄럽고 유연한 피부를 만든다. 피부의 외관, 결 및 상태에 있어서의, 특히 광택, 투명도, 및 전반적으로 젊어 보이는 외관에 대한 전반적인 개선이 달성된다. 본 발명의 조성물, 방법 및 용도는 또한 민감성 및(또는) 자극받은 피부의 진정 및 안정, 피부 미백 및 유분/피지 분비 조절에 이롭다. 그러므로 본 발명은 광범위한 피부 관리 이점을 유리하게 제공한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "치료하는"은 본 발명의 범위 내에서 상기한 정상적인, 그러나 미용적으로는 바람직하지 않은 피부 상태, 예컨대 주름지고, 노화되고(되거나), 광손상되고(되거나), 자극된 피부를 완화, 지연 및(또는) 예방하는 것과 자극, 주름을 예방 또는 완화하고 피부의 신축성, 탄력, 매끄러움, 유연성 및 탄성을 증진함으로써 피부의 질을 전반적으로 향상시키고 이의 외관 및 결을 개선하는 것을 포함한다. 본 발명에 따른 조성물, 방법 및 용도는 이미 주름지고, 노화되고, 광손상되었으며 자극된 상태의 피부를 개선하거나 정상적 노화/광노화 과정으로 인한 상기한 바와 같은 바람직하지 않은 변화를 예방 또는 완화하기 위해젊은 피부를 치료하는데 유용할 것이다.

본 발명은 인간 피부에 바르는 국소 조성물 및 피부 상태 및 외관을 개선하기 위한 이의 용도에 관한 것이다.

공액 리놀산

공액 리놀산(하기에는 CLA로 지칭된다)은 2불포화 장쇄(C18) 지방산이다. CLA는 위치(6,8), (7,9), (8,10), (9,11), (10,12) 또는 (11,13)에서의 여러 형태의 시스 및 트랜스 이중 결합이 가능한 리놀산의 위치 및 기하 이성질체군을 포함한다. 그러므로 24종의 상이한 CLA의 이성질체가 존재한다.

본 발명은 또한 공액 리놀산 부분을 포함하는 유리산의 유도체를 포함한다. 바람직한 유도체는 산의 카르복실기를 치환하여 유도된 것들, 예컨대 에스테르(예를 들면, 트리글리세라이드 에스테르, 모노글리세라이드 에스테르, 디글리세라이드 에스테르, 포스포에스테르), 아미드(예를 들면, 세라미드 유도체), 염(예를 들면, 알칼리금속 및 알칼리토금속 염, 암모늄 염); 및(또는) C18 탄소 사슬의 치환으로 유도된 것들, 예컨대 알파 히드록시 및(또는) 베타 히드록시 유도체를 포함한다.

트리글리세라이드 에스테르 유도체의 경우에 있어서, 글리세롤 주쇄 상의 CLA 치환기의 모든 위치 이성질체가 포함된다. 트리글리세라이드는 적어도 하나의 CLA 부분을 함유해야 한다. 예를 들면, 글리세롤 주쇄 상의 3개의 에스테르화 가능한 위치 중, 제1 및 2위치가 CLA로 에스테르화되고, 제3위치에서는 다른 지질에 의해 에스테르화될 수 있고 또는 글리세롤 주쇄는 제1 및 3위치에서 CLA로 에스테르화되고, 제2위치에서는 다른 지질로 에스테르화될 수 있다.

본 발명에 사용되기에 가장 바람직한 CLA의 이성질체는 시스9 트랜스11(c9t11) 또는 트랜스10 시스12(t10 c12) 이성질체이다. 바람직하게는 조성물에 존재하는 총 CLA(및(또는) CLA 부분)의 적어도 1중량％ 이상이 c9, t11 이성질체 및(또는) t10, c12 이성질체의 형태이다. 조성물에 존재하는 총 CLA 및(또는) CLA 부분의 보다 바람직하게는 20중량％ 이상, 가장 바람직하게는 40중량％ 이상이 c9, t11 이성질체 및(또는) t10, c12 이성질체의 형태이다. 특히 바람직한 실시태양에 있어서 공액 리놀산은 c9, t11 이성질체 및(또는) t10, c12 이성질체가 풍부한 것이다. 풍부하다는 것은 조성물에 존재하는 총 CLA 및(또는) CLA 부분의 50중량％ 이상이 시스9, 트랜스11 이성질체 또는 트랜스 10, 시스 12 이성질체의 형태이고-조성물에 존재하는 총 CLA 및(또는) CLA 부분의 바람직하게는 70중량％ 이상, 보다 바람직하게는 80중량％ 이상, 가장 바람직하게는 90중량％ 이상이 c9, t11 이성질체 또는 t10, c12 이성질체의 형태인 것을 의미한다.

본 발명에 따른 CLA 및(또는) CLA 부분을 포함하는 이의 유도체는 공액 리놀산 트리글리세라이드가 풍부한 기름로서 상업적으로 구입할 수 있는데, 예컨대 Tung 기름 또는 탈수 피마자유(유니케마(Unichema))이다. 혼합 이성질체 제품은 시그마(Sigma)로부터 구입할 수 있으며 c9 t11 이성질체가 풍부한 CLA는 마트레야 Inc.(Matreya Inc.)로부터 구입할 수 있다. 또는 본 발명의 바람직한 실시태양에 따른 CLA를 제 WO97/18320 호에 교시된 방법에 따라서 제조할 수도 있으며 이는 본 명세서에 참고문헌으로 인용된다. 이 제조방법의 바람직한 방법을 하기 실시예 1 및 2에 기술한다.

용어 공액 리놀산 또는 CLA가 본 명세서에 사용될 때 CLA 부분을 포함하는이의 유도체도 또한 포함되는 것으로 이해해야 한다. CLA 부분은 CLA 유도체의 CLA 지방 아실 부분(들)을 지칭한다.

본 발명에 따라서 사용되는 CLA는 국소 조성물 중에 유효량으로 존재한다. 통상적으로 활성 성분의 총량은 조성물의 0.0001중량％ 내지 50중량％의 양으로 존재한다. 최소한의 비용으로 최대한의 효과를 얻기 위하여, 보다 바람직하게는 이 양은 0.01％ 내지 10％, 가장 바람직하게는 0.1％ 내지 5％이다.

페놀계 화합물

페놀계 화합물은 이들의 기본 화학 구조에 따라서 적어도 10개의 상이한 부류로 분류될 수 있다. 화합물은 단순 페놀(C₆), 벤조퀴논(C₆), 페놀산(C₆-C₁), 아세토페논(C₆-C₂), 페닐아세트산(C₆-C₂), 히드록시신남산(C₆-C₃), 페닐프로펜(C₆-C₃), 쿠마린, 이소쿠마린(C₆-C₃), 크로몬(C₆-C₃), 나프토퀴논(C₆-C₄), 잔톤(C₆-C₁-C₆), 스틸벤(C₆-C₂-C₆), 플라보노이드(C₆-C₃-C₆), 리그난, 네오리그난(C₆-C₃)₂및 리그닌(C₆-C₃)_n을 포함한다.

용어 플라보노이드는 3개의 탄소 단위에 의해 연결된 두개의 방향족 환, 예를 들면 C₆-C₃-C₆으로 구성된 화합물의 다수 군을 나타낸다. 플라보노이드 부류는 이소플라보노이드, 모노머 플라보놀, 디히드로플라보노이드, 카테킨, 에피카테킨(예를 들면, 라우론), 류코안토시아나딘, 프로안토시아나딘, 안토시아나딘, 플라본, 플라보논, 칼콘, 디히드로칼콘, 이소플라본, 네오플라본, 아우론, 플라반3올, 플라본3올 및 안트로시아닌을 포함한다. 용어 이소플라보노이드는 또한 이소플라본, 프테로카르판, 이소플라보논, 로테노이드, 이소플라반 및 이소플라바놀을 포함한다.

본 발명의 조성물에 사용하기에 바람직한 페놀계 화합물은 플라보논, 예컨대 나린제닌, 플라보놀, 예컨대 퀘르세틴, 카테킨(예를 들면, 에피갈로카테킨갈레이트, EGCG), 이소플라보노이드, 예컨대 다이드제인, 제니스테인, 라이세틴을 포함하는 플라보노이드 및 또한 페놀산, 예컨대 갈산 및 녹차 폴리페놀이다.

퀘르세틴, 나린제닌, 다이드제인, 제니스테인, EGCG 및 녹차 폴리페놀을 시그마로부터 구입할 수 있다. 페놀계 화합물을 함유하는 식물 추출물도 또한 본 발명에 사용되기에 적절하다. 예를 들면, 루틴, 달맞이꽃, 양파, 광귤나무 종은 퀘르세틴 및 나린제닌을 함유하고, 콩은 다이드제인 및 제니스테인을 함유하고 녹차 변종, 예컨대 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis) 및 아사미카(assamica)는 EGCG 및 녹차 폴리페놀을 함유한다.

본 발명에서 특별하게 제외되는 페놀계 화합물은 햇빛차단제로서 통상적으로 사용되는 것들, 예컨대 파라-아미노 벤조산 및 벤조페논이다.

페놀계 화합물 또는 이의 혼합물은 본 발명의 조성물에 약 0.01％ 내지 약10％의 양으로, 바람직하게는 약10％ 내지 약1％의 양으로, 가장 바람직하게는 약 0.1％ 내지 약 5％의 양으로 사용된다.

피부학적으로 허용 가능한 부형제

본 발명에 따라서 사용되는 조성물은 또한 활성 성분에 대한 희석제, 분산제또는 담체로서 작용하는 피부학적으로/미용학적으로 허용 가능한 부형제를 포함한다. 부형제는 피부 관리 제품에 통상적으로 사용되는 물질, 예컨대 물, 액상 또는 고상 연화제, 실리콘 기름, 유화제, 용매, 습윤제, 증점제, 분말, 추진제 등을 포함할 수 있다.

부형제는 통상적으로 조성물 중량의 5％ 내지 99.9％, 바람직하게는 25％ 내지 80％를 형성할 것이며, 다른 미용 보조제를 사용하지 않는다면, 조성물의 나머지 부분을 구성할 수 있다.

임의의 피부에 이로운 물질 및 미용 보조제

활성 성분에 추가하여, 기타 특정한 피부에 이로운 활성 물질, 예컨대 햇빛차단제, 기타 피부 미백제, 피부 일광욕제도 또한 포함될 수 있다. 부형제는 또한 추가로 보조제, 예컨대 항산화제, 향료, 유백제, 보존제, 착색제 및 완충제를 포함할 수 있다.

제품 제조, 형태, 용도 및 포장

본 발명의 방법에 사용되는 국소 조성물을 제조하기 위하여, 피부 관리 제품을 제조하는 통상적인 방법이 사용될 수 있다. 활성 성분은 일반적으로 피부학적으로/미용학적으로 허용 가능한 담체 중에 통상적인 방법에 의해 혼입된다. 활성 성분은 먼저 조성물 중에 혼입되는 물 또는 기타 용매 또는 액체의 일부에 적절하게 용해되거나 분산될 수 있다. 바람직한 조성물은 수중유 또는 유중수 또는 수중유중수 에멀전이다.

조성물은 통상적인 피부 관리 제품의 형태, 예컨대 크림, 겔 또는 로션, 캡슐 등일 수 있다. 조성물은 또한 소위 세척 제품의 형태, 예를 들면 세정 도중 피부로의 부착을 촉진하는 활성 성분 전달 시스템을 포함할 수 있는 목욕 또는 샤워 겔의 형태일 수도 있다. 가장 바람직하게는 제품은 리브-온(leave-on) 제품인데; 피부에 바른 후의 세정 단계 없이 피부에 사용되는 제품이다.

조성물은 임의의 적절한 방식으로, 예컨대 작은 병, 병, 튜브, 롤-볼(roll-ball) 등으로 통상적인 방법에 의해 포장될 수 있다. 본 발명의 조성물은 제 1 조성물은 공액 리놀산을 함유하고 제 2 조성물은 페놀계 화합물을 함유하며, 피부에 사용될 때는 동시에 또는 연속적으로 사용되는 두개의 별개의 조성물의 키트로서 포장될 수도 있다.

본 발명에 따른 조성물은 또한 캡슐, 정제 등과 같은 경구 섭취에 적절한 형태로 제형될 수 있다.

본 발명의 방법은 치료를 필요로 하는 피부에 매일 1회 이상 수행될 것이다. 피부 외관의 개선은 피부 상태, 본 발명의 방법에 사용되는 활성 성분의 농도, 사용되는 조성물의 양 및 사용되는 횟수에 따라서, 통상적으로 3 내지 6개월 후에 가시적으로 나타날 것이다. 일반적으로, 소량, 예를 들면 0.1 내지 5ml의 조성물을 적절한 용기 또는 도포기로부터 피부에 도포하고 손 또는 손가락 또는 적절한 기구를 사용하여 피부에 펴 바르고(바르거나) 문지른다. 조성물이 리브-온 또는 세척 제품으로 제형되느냐에 따라서 세정 단계가 임의로 이후에 수행될 것이다.

본 발명을 보다 용이하게 이해하기 위하여, 하기 실시예가 주어졌으며, 이는 단지 설명을 위한 것이다.

실시예 1

본 실시예는 c9 t11 이성질체 및 t10 c12 이성질체를 포함하는 공액 리놀산의 합성을 설명한다.

CLA의 혼합 이성질체의 제조

'어낼러 시약'(Analar Reagent, AR) 수산화나트륨(0.6kg)를 6kg의 제약학적 등급의 프로필렌 글리콜 중에 혼합하여 용해시키고 80-85℃로 가열했다. 샘플을 냉각하고 2kg의 잇꽃 기름을 첨가했다. 표준 실험 규모 장치를 사용하여 혼합물을 고속 교반시키면서 170℃에서 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 약 95℃로 냉각시키고, 교반기를 중간 속도로 감속하고, 혼합물을 탈염수(8리터) 중에 용해된 1.280리터의 35.5％ 염산을 사용하여 온도를 약 90℃로 유지하면서 중화했다. 반응 혼합물을 침강시키고 수성상을 방출했다. 임의의 비누상 물질을 버리면서, 유성 상을 1리터의 5％ AR 염 용액으로 2회 및 1리터의 탈염수로 2회 90℃에서 세척했다. CLA이 풍부한 기름을 100℃에서 진공하에 건조시킨 다음 약 50℃에서 배출하고 와트만(Whatman) 여과기 및 셀라이트-하이플로-여과기 보조제의 박층을 포함하는 부크너(Buchner) 시스템을 통하여 여과했다. 혼합 이성질체 CLA 기름을 질소하 -25℃에서 필요할 때까지 저장했다. 이 방법에 의해 생산된 기름의 조성을 하기 표 1에 기재했다:

혼합 CLA 지방산의 조성(wt％):	총 지방산 지질에 대한 상대 백분율
c9, t11	34.1(총 CLA의 47％)
t10, c12	34.1(총 CLA의 47％)
c9, c11 & c10, c12	2.3
t9, t11t & t10, 12t	0.7
기타 CLA	1.4
총 CLA	72.6
16:0	7.0
16:1	0.8
18:0	2.5
18:1	13.3
18:2(비-CLA)	3.3
기타 지방산	0.5

2. c9 t11 이성질체가 풍부한 CLA의 제조

(I) 라우릴 에스테르의 제조:

잇꽃(2.0kg)으로부터 제조된 CLA를 2배 몰 당량의 라우릴 알콜(1-도데칸올; 98％, 예를 들면 알드리치 케미칼즈(Aldrich Chemicals))에 5.96kg의 탈염수와 함께 첨가했다. 온도를 25℃로 조정하고 소량의 물과 미리 혼합된 1％(w/w)의 지오트리컴 칸디덤(Geotrichum Candidum)(예를 들면, 아마노 파마슈티칼즈(Amano Pharmaceuticals), 일본)을 첨가하고, 강하게 혼합했다. 반응을 44시간만에 정지시켰다. 용기를 80-90℃로 가열하고, 수성 층을 배출하고 기름을 탈염수로 세척하고 100℃ 진공하에서 30분간 건조했다. 기름을 50℃로 냉각하고 와트만 여과기 및 셀라이트-하이플로-여과기 보조제의 박층을 포함하는 부크너 시스템을 통해 여과시켰다.

(II) c9, t11이 풍부한 CLA 에스테르의 제조:

130℃에서 분당 25-35ml로 분자 증류하여 잔류 라우릴 알콜을 제거했다.158℃에서 분당 25-35ml의 유속으로 증발시켜서 잔류물을 라우릴 에스테르(c9, t11이 풍부한 CLA) 및 유리산(t10, c12이 풍부한 CLA)으로 대강 분리했다. 171℃에서 30-40ml/분의 유속으로 추가 증류시켜서 라우릴 에스테르 잔류물 중의 임의의 잔류 유리산을 줄였다. 2790g의 라우릴 에스테르 잔류물을 90℃에서 330ml의 4M AR 수산화나트륨을 사용하여 중화한 후에, 수성 상으로부터 기름을 분리하고, 뜨거운 탈염수 중에서 기름을 3회 세척하고, 또한 0.1M 알칼리 세척하고, 뜨거운 물로 2회 세척했다. 농축 라우릴 에스테르 기름 샘플을 전술한 바와 같이 건조시켰다.

(III) c9,t11이 풍부한 CLA 라우릴 에스테르의 비누화

c9, t11이 풍부한 CLA의 라우릴 에스테르를 AR 수산화나트륨/96％ 식품 등급 에탄올을 사용하여 비누화하고 AR이 풍부한 염산을 사용하여 재-산성화했다. CLA가 풍부한 유리 지방산을 함유하는 반응 혼합물을 100℃에서 건조하고 전술한 바와 같이 약 50℃에서 여과했다. 라우릴 알콜을 132℃에서 분당 25-30ml로 증발시켰다. 임의의 잔류 라우릴 알콜을 제거하기 위하여, SP392 무코 미에헤이(Mucor miehei) 리파제(5％, batch lux 0110, 예를 들면 노보 노르디스크(Novo Nordisk))를 사용하여 유리 알콜을 반응 혼합물 중에 존재하는 지방산으로 에스테르화했다. 진공하 155℃에서 분자 증류하여 분당 15-20ml로 지방산을 함유하는 c9 t11이 풍부한 CLA를 라우릴 에스테르로부터 분리했다.

상기 방법에 의해 생산된 c9 t11이 풍부한 CLA의 조성을 하기 표 2에 기재했다:

c9, t11이 풍부한 CLA 지방산의 통상적인제제의 조성(wt％):	총 지방산 지질에 대한 상대 백분율
c9, t11	66.1(총 CLA의 93％)
t10, c12	4.1
c9, c11 & c10, c12	0.3
t9, t11t & t10, 12t	0.4
기타 CLA	0.2
총 CLA	71.1
16:0	1.6
16:1	-
18:0	0.4
18:1	22.3
18:2(비-CLA)	4.5
기타 지방산	0.1

(II) t10, c12이 풍부한 CLA의 분리

잔류 라우릴 알콜을 분자 증류에 의해 130℃에서 분당 25-35ml 유속으로 제거했다. 158℃에서 분당 25-35ml의 유속으로 증발시켜 잔류물을 라우릴 에스테르(c9, t11이 풍부한 CLA) 및 유리산(t10,c12이 풍부한 CLA)으로 대강 분리했다.

t10, c12이 풍부한 CLA의 분리

상기 단계(II)로부터의 CLA 유리산을 다시 160-165℃ 및 20-30ml/분에서 증류하여 에스테르 함량을 줄였다. 131℃ 및 25-30ml/분 유속에서 증류하여 잔류 라우릴 알콜을 더 줄였다. 임의의 잔류 라우릴 알콜을 제거하기 위하여, 유리 알콜을 SP392 무코 미에헤이 리파제(5％, batch lux 0110, 예를 들면 노보 노르디스크)를 사용하여, 반응 혼합물 중에 존재하는 지방산으로 에스테르화했다. 155℃ 및 진공에서 분당 15-20ml으로 분자 증발시켜서 지방산을 함유하는 t10,c12이 풍부한 CLA를 라우릴 에스테르로부터 분리했다. 이 방법에 의해 생산된 t10, c12이 풍부한 CLA의 조성을 하기 표 3에 기재했다.

t10, c12이 풍부한 CLA 지방산의 통상적인 제제의 제조의 조성 (wt％):	B
c9, t11	8.3
t10, c12	53.9(총 CLA의 80.5％)
c9, c11 & c10, c12	2.9
t9, t11t & t10, 12t	1.1
기타 CLA	0.7
총 CLA	66.9
16:0	13.6
16:1	-
18:0	4.6
18:1	10.3
18:2(비-CLA)	3.1
기타 지방산	1.5

실시예 2-t10, c12 CLA 트리글리세라이드의 제조

실시예 1에 따라서 제조된 t10, c12이 풍부한 CLA(10g)를 1.01g(10.1％)의 글리세롤(Pricerine 9083 글리세린 CP, 엘리스 앤드 에베랄즈(Ellis and Everards))과 혼합하고 0.5g(대략 5％)의 SP392 무코 메이히에 비-특이성 리파제(Mucor Meihie, 예를 들면 노보 노르디스크 Batch Lux 0110)를 첨가했다. 혼합 물질을 회전 증발기 중에서 60℃ 진공하에서 질소를 약하게 유출시키면서 교반했다. 96시간 후에, CLA 트리글리세라이드 유성상을 수거하는 부크너 여과기 상에서 셀라이트 수퍼-셀 여과 보조제의 박층을 통하여 혼합물을 여과함으로써 반응을 정지시켰으며, 이의 조성을 하기 표 4에 기재했다.

트리글리세라이드의 지방산 조성	총 지방산 지질에 대한 상대 백분율
c9, t11	8.3
t10, c12	54.8(총 CLA의 81.7％)
c9, c11 & c10, c12	2.7
t9, t11t & t10, 12t	1.3
기타 CLA	0
총 CLA	67.1
16:0	13.5
16:1	0.1
18:0	4.9
18:1	10.3
18:2(비-CLA)	3.4
기타 지방산	0.7

실시예 3

인간 피부 섬유아세포 중 프로콜라겐-I 및 데코린 합성의 측정 방법

피부 섬유아세포 조정 배지의 제조

2대째 배양(P2)한 1차 인간 포피 섬유아세포를 12-웰 플레이트에 10000개 세포/cm²로 접종하고 10％ 태아 소 혈청으로 보충된 달베코 변형 이글 배지(DMEM) 중에서 5％ 이산화탄소 및 4％ 산소 분위기에서 24시간 동안 유지했다. 이 시간 후에 세포를 무 혈청 DMEM으로 세척한 다음 새로운 무 혈청 DMEM 중에서 60시간 더 배양했다. 섬유아세포 단분자층을 다시 무 혈청 DMEM으로 세척했다. 시험 시약 및 부형제 대조용을 3개 한조로 최종 부피 0.4ml/웰의 새로운 무 혈청 DMEM 중의 세포에 첨가하고 24시간 동안 더 배양했다. 섬유아세포 조정 배지를 즉시 분석하거나 액체 질소 중에서 급속 냉동하여 차후의 분석을 위하여 -70℃에서 저장했다. 세포를 세고 도트-블로트(dot-blot) 분석 데이타를 이어서 세포 수에 대하여 표준화했다.

실시예 4

피부 섬유아세포 조정 배지 중 프로콜라겐-I 및 데코린 단백질의 도트 블로트 분석

부형제(대조용) 또는 시험 시약으로 처리한 피부 섬유아세포 조정 배지의 샘플에 20mM 디티오트레이톨(200mM 원액의 1:10 희석) 및 0.1％ 나트륨 도데실술페이트(10％ 원액의 1:100 희석)로 보충하고, 잘 혼합한 다음 75℃에서 2분간 배양했다. 175cm²플라스크에 10000개 세포/cm²로 접종하고 상기한 바와 같이 무 혈청 DMEM 중에서 유지한 섬유아세포의 순수한 섬유아세포 조정 배지를 연속 희석하여 분석 표준을 만들었다.

이어서 바이오-라드(Bio-Rad)의 96-웰 Bio-Dot 장치를 제조자 사용법에 따라서 사용하여 분석 샘플을 세개 한조로 Immobilon-P 전달 막의 미리 젖은 시트에 적용했다. 웰 당 대략 200㎕의 배지를 사용했다. 배지를 중력 하에서 막을 통하여 여과하고(30분), 그 후에 막을 PBS(200㎕)로 2회 세척했다. 이들 PBS 세척물을 중력 하에서 막을 통하여 여과했다(2x15분). Bio-Dot 장치를 진공 다기관에 부착하고 제 3 및 최종 PBS 세척을 흡인하면서 수행했다. 장치를 분해하고, 막을 제거하고 필요하다면 신속하게 절단한 후에, 차단 완충제 중에 4℃에서 하룻밤 동안 넣어 두었다.

데코린 분석을 위해 준비한 막은 PBS 중 3％(w/v) BSA/0.1％(v/v) Tween 20으로 차단하고, 프로콜라겐-I 분석을 위해 준비한 막은 PBS 중 5％(w/v) 탈지 건조분유/0.05％ Tween20으로 차단했다. 다음 날, 막을 1:10000 희석 비율의 인간 프로콜라겐-I에 대한 1차 항체(MAB1912: 쥐 단클론성; 케미콘 Int. Inc.(Chemicon Int. Inc.), 캘리포니아주 테메쿨라) 또는 인간 데코린에 대한 1차 항체(토끼 다클론성; 바이오제네시스(Biogenesis))로 실온에서 2시간 동안 프로브했다. 이어서 막을 TBS/0.05％ Tween 20으로 세척(3x5분)한 다음 필요하다면 1:1000 희석 비율의¹²⁵I-접합 항-쥐 또는 항-토끼 F(ab')2 분획(아머샴(Amersham))과 함께 실온에서 1시간 동안 배양했다. 다음에 Immobilon 스트립을 다시 TBS/Tween 20으로 세척(3x5분)한 다음 공기 중 실온에서 방치하여 건조시켰다. 건조된 막을 셀로판으로 싸고 Molecular Dynamics 저장 인 스크린에 16-18시간 동안 노출시켰다. 이 시간의 마지막에 노출된 스크린을 인영상분석기(Molecular Dynamics Phosphorimager SF)에 의해 ImageQuant^TM소프트웨어를 사용하여 스캐닝했다. 도트 강도를 ImageQuant^TM중의 정량 도구를 사용하는 컴퓨터 보조 영상 분석에 의해 분석하고, 세포수로 표준화하고, 여러 시험 시약의 데코린 및 프로콜라겐 I의 합성에 대한 효과를 100의 임의 단위의 부형제 처리 대조용 값에 비교하여 측정했다.

실시예 5

시험

하기 표 5는 공액 리놀산을 페놀계 화합물인 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG)와 함께 사용했을 때의 인간 피부 섬유아세포 중의 프로콜라겐-I 및(또는) 데코린 합성에 대한 상승 효과를 나타내며, 표 중의 양은 활성 성분이 사용된 양이다. 결과를 표준화하기 위하여 시험 물질의 효과를 100의 임의 단위의 부형제 처리 대조용 값에 비교하여 측정했다. 시험 중 사용된 시약의 농도는 세포 생존율에 영향을 미치지 않았다.

처리제	프로콜라겐-I	데코린
대조용(부형제)	100	100
0.1μM CLA		68.29％
0.5㎍/ml EGCG		99.6％
0.1μM CLA 0.5㎍/ml EGCG		157.11％

표 5의 결과는 공액 리놀산을 페놀계 화합물과 함께 사용했을 때 인간 피부 섬유아세포 중의 프로콜라겐-I 및(또는) 데코린의 합성이 현저하게 상승됨을 나타낸다. 피부 중 데코린의 수치는 피부의 개선된 상태 및 외관과 관련이 있다. 피부 중 데코린 수치의 상승은 피부 중 콜라겐의 조절되고 정확한 침착에 중요한데 이는 주름 제거 및 광손상 피부의 피부 회복과 같은 다수의 피부 이점에 관련되어 있다.

실시예 6

본 실시예는 피부 섬유아세포 염증 반응의 감소에 대한 공액 리놀산과 페놀계 화합물의 특정 조합의 상승 효과를 증명한다.

섬유아세포 PGE ₂ 및 ICAM 분석

인간 피부 섬유아세포에 의한 세포내 부착 분자(ICAM) 및 PGE₂의 생산은 염증 자극 PMA(포르볼 미리스테이트 아세테이트)에 의해 유도될 수 있다. PMA는 세포 중 산화 스트레스 및 염증 반응을 유도하는 외부 스트레스유발인자이다. 이 모델은 생체내 염증 모델에 사용된다.

2대째 배양(P2)한 1차 인간 포피 섬유아세포를 96-웰 플레이트에 10000개 세포/웰로 접종하고 10％ 태아 소 혈청을 보충한 달베코 변형 이글 배지(DMEM) 중에 5％ 이산화탄소 분위기에서 24시간 동안 유지했다. 하기 표 7에 기재된 시험물질을 최종 농도 <1％로 디메틸 술폭시드 및 에탄올 중의 새로운 세포 배지(DMEM, 10％ 태아 소 혈청으로 보충)에 3개 한조로 첨가하고 24시간 동안 더 배양했다. 포르볼 미리스테이트 아세테이트(PMA)(시그마)를 배지에 10nM 첨가하고 세포를 추가의 24시간 동안 배양했다. 부형제만을 함유하는 대조용은 어떠한 시험 화합물 또는 어떠한 PMA도 함유하지 않았다. 섬유아세포/배지를 하기한 바와 같이 즉시 분석하거나 액체 질소 중에서 급속 동결하고 차후의 분석을 위하여 -70℃에서 저장했다. 세포를 세고 도트-블로트(dot-blot) 분석에서의 데이타를 이어서 세포수에 대하여 표준화했다.

프로스타글란딘 E2(PGE ₂ ) 분석:

배양 플레이트를 약하게 진탕한 후에 50㎕ 부피의 배양 배지를 PGE₂분석을 위하여 취했다. 배지 중의 PGE₂수치를 Biotrack PGE₂면역분석 키트(아머샴, 영국)로 측정했다. 이 분석은 샘플 중 비표지 PGE₂및 고정량의 양고추냉이 퍼옥시다제 표지 PGE₂의 제한된 양의 고정 PGE₂특이성 항체에 대한 경쟁을 기초로했다. 동시에 비표지 샘플 PGE₂의 농도를 얻어진 표준 곡선에 따라서 측정했다.

ICAM-1 분석

배지를 버리고 세포를 달베코 PBS로 세척했다. 세척된 세포에 150㎕의 0.1％ Triton X-100(시그마)를 3분간 첨가하여 세포막으로부터 ICAM을 추출했다. 추출물을 에펜도르프 원심분리 관으로 이동시키고 1000g에서 2분간 원심분리하여 세포 데브리스를 제거했다. 100㎕ 부피의 상청액을 ICAM 분석용으로 사용했다. 가용성 ICAM-1을 상업적으로 구입할 수 있는 면역효소측정 분석 키트(R&D 시스템즈(R&D Systems))로 분석했다. 샘플 중 ICAM-1의 농도를 평행 진행 표준 곡선을 기초로하여 측정했다.

PGE₂및 ICAM 분석에서 얻은 결과를 하기 표 6에 요약했다.

처리제	섬유아세포 PGE2수치의 저해(％)	섬유아세포 ICAM생산의 저해(％)
대조용	100	100
PMA 처리	0	0
PMA + CLA 0.1μM	16.9
PMA + EGCG 5μM	35.6
PMA + CLA 0.1μM + EGCG 5μM	59.4
PMA + CLA 1μM		27.7
PMA + EGCG 5μM		4.5
PMA + CLA 1μM + EGCG 5μM		93.1
PMA + CLA 5μM	14.5
PMA + 제니스테인 5μM	52
PMA + CLA 5μM + 제니스테인 5μM	85.7

상기 결과는 세포를 염증 자극제, 예컨대 PMA(포르볼 미리스틸 아세테이트)로 자극하는 것은 프로스타글란딘 E2(PGE₂) 생산으로 측정시 염증 반응을 증가시키는 것을 보여준다. 이 공액 리놀산과 페놀계 화합물의 특정 조합은 PGE₂생산으로 측정시 염증 반응을 상승적으로 감소시킨다. 그러므로 이 결과는 본 발명 범위내 활성 성분의 특정 조합이 놀라운 상승적 소염 활성을 나타낸다는 것을 증명한다.

상기 결과는 또한 세포를 PMA로 자극하는 것은 ICAM 생산 증가를 야기한다는 것을 보여준다. 세포를 공액 리놀산과 페놀계 화합물의 조합으로 처리하면, 염증의 또 다른 지표인 세포내 부착 분자(ICAM)의 생산을 상승적으로 감소시켰다. 그러므로 이들 결과는 본 발명 범위 내의 활성 성분의 특정 조합이 놀랍고 우수한 상승적 소염 활성을 나타낸다는 것도 또한 증명한다.

실시예 7

하기 제제는 본 발명에 따른 방법 및 용도에 적절한 수중유 크림을 설명한다. 표시된 백분율은 조성물의 중량에 의한 것이다.

	wt％	wt％	wt％
광유	4	4	4
공액 리놀산(트리글리세라이드) ex Loders Croklaan	1.5	2	3
녹차 폴리페놀	0	2	0
EGCG	0	0	1
퀘르세틴	0.5	0	0
Brij 56*	4	4	4
Alfol 16RD*	4	4	4
트리에탄올아민	0.75	0.75	0.75
부탄-1,3-디올	3	3	3
잔탄 검	0.3	0.3	0.3
향료	충분량	충분량	충분량
부틸화 히드록시 톨루엔	0.01	0.01	0.01
물	100까지	100까지	100까지
* Brij56은 세틸 알콜 POE(10)이다.Alfol 16RD는 세틸 알콜이다.

실시예 8

하기 제제는 본 발명에 따른 에멀전 크림을 설명한다.

완전한 화학적 명칭 또는 CTFA 명칭	상표명	wt％	wt％	wt％
CLA 트리글리세라이드 93％, c9,t11 이성질체(실시예 1에 따라서 제조된 총 CLA 부분의 중량에 의함) Croklaan		2.0	3	1.5
갈산		1	0	0
제니스테인		0	2
다이드제인		0	0	1.5
이나트륨 EDTA	Sequesterene Na2	0.05	0.05	0.05
마그네슘 알루미늄 실리케이트	Veegum Ultra	0.6	0.6	0.6
메틸 파라벤	Methyl Paraben	0.15	0.15	0.15
시메티콘	DC Antiform Emulsion	0.01	0.01	0.01
부틸렌 글리콜 1,3	Butylene Glycol 1,3	3.0	3.0	3.0
히드록시에틸셀룰로스	Natrosol 250HHR	0.5	0.5	0.5
글리세린, USP	Glycerine USP	2.0	2.0	2.0
잔탄검	Keltrol	0.2	0.2	0.2
트리에탄올아민	Triethanolamine(99％)	1.2	1.2	1.2
스테아르산	Pristerene 4911	3.0	3.0	3.0
프로필 파라벤 NF	Propylparaben NF	0.1	0.1	0.1
글리세릴 히드로스테아레이트	Naturechem GMHS	1.5	1.5	1.5
스테아릴 알콜	Lanette 18 DEO	1.5	1.5	1.5
이소스테아릴 팔미테이트	Protachem ISP	6.0	6.0	6.0
C12-15 알콜 옥타노에이트	Hetester FAO	3.0	3.0	3.0
디메티콘	Silicone Fluid200(50cts)	1.0	1.0	1.0
콜레스테롤 NF	Cholesterol NF	0.5	0.5	0.5
소르비탄 스테아레이트	Sorbitan Stearate	1.0	1.0	1.0
부틸화 히드록시톨루엔	Embanox BHT	0.05	0.05	0.05
토코페릴 아세테이트	Vitamin E Acetate	0.1	0.1	0.1
PEG-100 스테아레이트	Myrj 59	2.0	2.0	2.0
나트륨 스테아로일 락틸레이트	Pationic SSL	0.5	0.5	0.5
히드록시카프릴산	Hydroxycaprylic Acid	0.1	0.1	0.1
알파-비스아볼올	Alpha-bisabolol	0.2	0.2	0.2
물, DI		충분량100까지	충분량100까지	충분량100까지

실시예 7 및 8의 상기 국소 조성물은 노화 또는 광손상에 의해 열화된 정상적 피부에 사용하면 주름지고, 노화되고, 광손상되고(되거나) 자극된 피부의 외관을 개선하며, 젊은 피부에 사용하면 상기한 열화 변화를 예방 또는 지연하는 효과적인 미용 치료를 제공한다. 이 조성물은 또한 자극된 피부를 진정시키고, 건조한 피부를 조절하고, 피부색을 미백하고 기름 및 피지 분지를 감소시키는데 효과적이다. 이 조성물은 통상적인 방법으로 가공될 수 있다.

Claims (11)

1. (a) 공액 리놀산 및(또는) 이의 유도체;

   (b) 페놀계 화합물 또는 이의 혼합물; 및

   (c) 피부학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하며, 단 상기 페놀계 화합물은 햇빛 차단제가 아닌 국소 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 산 및(또는) 이의 유도체의 공액 리놀산 부분중 1중량％ 이상이 시스 9, 트랜스 11 이성질체 및(또는) 트랜스 10, 시스 12 이성질체로서 존재하는 국소 조성물.
3. 제 2 항에 있어서, 상기 산 및(또는) 이의 유도체의 공액 리놀산 부분중 50중량％ 이상, 바람직하게는 90중량％ 이상이 시스 9, 트랜스 11 이성질체 및(또는) 트랜스 10, 시스 12 이성질체로서 존재하는 국소 조성물.
4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 페놀계 화합물이 단순 페놀(C₆), 벤조퀴논(C₆), 페놀산(C₆-C₁), 아세토페논(C₆-C₂), 페닐아세트산(C₆-C₂), 히드록시신남산(C₆-C₃), 페닐프로펜(C₆-C₃), 쿠마린, 이소쿠마린(C₆-C₃), 크로몬(C₆-C₃), 나프토퀴논(C₆-C₄), 잔톤(C₆-C₁-C₆), 스틸벤(C₆-C₂-C₆), 플라보노이드(C₆-C₃-C₆),리그난, 네오리그난(C₆-C₃)₂및 리그닌(C₆-C₃)_n으로부터 선택되는 것인 국소 조성물.
5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 페놀계 화합물이 페놀산, 플라보노이드, 이소플라보노이드 또는 이의 유도체, 또는 이의 혼합물을 포함하는 군으로부터 선택되는 것인 국소 조성물.
6. 제 5 항에 있어서, 상기 페놀계 화합물이 에피갈로카테킨 갈레이트, 나린제닌, 퀘르세틴, 카테킨, 다이드제인, 제니스테인, 라이세틴, 갈산 또는 녹차 페놀인 국소 조성물.
7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 페놀계 화합물이 조성물의 0.01 내지 10중량％의 양으로 존재하는 국소 조성물.
8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 리브 온(leave on) 조성물인 국소 조성물.
9. 피부에 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 국소 조성물을 사용하는 것을 포함하는, 주름, 처짐, 건조, 노화 및(또는) 광손상 피부의 치료/예방; 피부 중 콜라겐 수치의 상승/유지, 피부 중 데코린 수치의 상승/유지, 조직 회복 증진; 자극받은 적색의 및(또는) 민감성 피부의 진정; 피부 결, 매끄러움 및(또는) 피부탄력의 개선; 피부 미백; 유분/피지 분비의 조절로부터 선택된 적어도 하나의 미용 피부 관리 이점을 제공하는 미용 방법.
10. 주름, 처짐, 건조, 노화 및(또는) 광손상 피부의 치료/예방; 피부 중 콜라겐 수치의 상승/유지, 피부 중 데코린 수치의 상승/유지, 조직 회복 증진; 자극받은 적색의 및(또는) 민감성 피부의 진정; 피부 결, 매끄러움 및(또는) 피부탄력의 개선; 피부 미백; 유분/피지 분비의 조절로부터 선택된 적어도 하나의 미용 피부 관리 이점을 제공하기 위한 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 미용 조성물의 용도.
11. 주름, 처짐, 노화 및(또는) 광손상 피부의 치료/예방; 피부 중 콜라겐 수치의 상승/유지, 피부 중 데코린 수치의 상승/유지, 조직 회복 증진; 자극받은 적색의 및(또는) 민감성 피부의 진정; 피부 결, 매끄러움 및(또는) 피부탄력의 개선; 피부 미백; 유분/피지 분비의 조절로부터 선택된 적어도 하나의 미용 피부 관리 이점을 제공하기 위한 미용 국소 조성물 중에 공액 리놀산 및(또는) 이의 유도체를 페놀계 화합물 또는 이의 혼합물과 함께 사용하는 용도.