KR19990082260A - Cox－２ 억제제의 약물 전구체로서의 디페닐 스틸벤 - Google Patents

Cox－２ 억제제의 약물 전구체로서의 디페닐 스틸벤 Download PDF

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Abstract

본 발명은 사이클로옥시게나제-2-매개성 질환의 치료에 유용한 화학식 I의 신규한 화합물을 포함한다. 이에 더하여, 본 발명은 사이클로옥시게나제-2-매개성 질환의 치료를 위한, 화학식 I의 화합물을 포함하는 특정의 약제학적 조성물을 포함한다.
화학식 I

Description

ＣＯＸ－２ 억제제의 약물 전구체로서의 디페닐 스틸벤
본 발명은 사이클로옥시게나제(cyclooxygenase)-매개성 질환의 치료 방법 및 이를 위한 특정의 약제학적 조성물에 관한 것이다.
비-스테로이드성 항염증 약물의 대부분은 사이클로옥시게나제로 알려져 있는 프로스타글란딘 G/H 합성효소를 억제함으로써, 항염증, 진통 및 해열제로서의 활성을 나타내고 호르몬-유도성 자궁 수축 및 특정 종류의 암 성장을 억제한다. 처음에는 한가지 형태의 사이클로옥시게나제- 구성 효소인 사이클로옥시게나제-1(COX-1) -만이 알려져 있었는 데, 이는 소의 정낭에서 최초로 확인되었다. 최근에 두 번째로 알려진 유도 형태의 사이클로옥시게나제인 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 유전자가 클로닝되었고, 그 서열 및 특성도 밝혀졌으며, 처음에는 닭, 쥐 및 인간에서 유래한 것이었다. 이 효소는 양, 쥐 및 인간을 포함한 여러 종에서 유래하였으며, 클로닝되었고, 그 서열 및 특성이 밝혀져 있는 COX-1과는 뚜렷이 구별된다. 두 번째 형태의 사이클로옥시게나제인 COX-2는 유사분열촉진인자, 엔도톡신, 호르몬, 사이토카인 및 성장 인자 등의 수많은 인자들에 의해 신속, 용이하게 유도된다. 프로스타글란딘은 두 가지 역할, 즉 생리학적 및 병리학적 역할 모두를 수행하므로, 구성(constitutive) 효소인 COX-1은 주로 프로스타글란딘의 내인성 기저 방출에 대해 책임을 지며, 따라서 위장 형태(gastrointestinal integrity) 보전 및 신장(renal)의 혈류와 같은 생리학적 기능에 있어서 중요한 역할을 하는 것으로 결론을 내렸다. 반면에, 유도 형태인 COX-2는 주로 프로스타글란딘의 병리학적 효과에 대해 책임을 지는 것으로 결론을 내렸는 데, 여기서 이 효소는 염증제, 호르몬, 성장 인자 및 사이토카인 등의 제제에 반응하여 급속히 유도된다. 따라서, COX-2를 선택적으로 억제하는 억제제는 종래의 비-스테로이드성 항염증 약물과 유사하게 항염증, 해열 및 진통제로서의 특성을 가지며, 호르몬-유도성 자궁 수축을 억제하고, 강력한 항암 효과도 가지지만, 이에 따르는 부작용 중에서 몇 가지는 감소한다. 특히, 이러한 화합물을 사용하는 경우 위장 독성, 신장 부작용이 감소할 수 있으며, 출혈 시간에 미치는 영향이 감소하고, 아스피린에 민감한 천식 환자의 경우 천식 발작을 감소시킬 수 있을 것이다.
게다가, 이러한 화합물은 수축성 프로스타노이드(prostanoid)의 합성을 방해하여 프로스타노이드-유도성 평활근 수축도 억제할 것이다. 따라서 월경불순, 조기분만, 천식 및 에오시노필(eosinophil)-관련성 질환의 치료에 유용할 수 있다. 또한, 알츠하이머 질환, 특히 폐경기 이후의 여성에게서 나타나는 뼈의 감소(즉, 골다공증) 및 녹내장 치료에도 유용할 것이다.
사이클로옥시게나제-2의 억제제가 갖는 강력한 유용성에 대해 문헌에서 간단히 설명해 주고 있다[참조: John Vane,Nature, Vol. 367, pp. 215-216, 1994 및Drug News and Perspectives, Vol. 7, pp. 501-512, 1994].
수많은 스틸벤(stilbene) 유도체가 화학 문헌에 공지되어 있다. Chem. Commun. 1234-5 (1984)에서 Toda 등이 디알데히드 A를 설명하고 있고, J. Am. Chem. Soc. 88, 1289-92 (1966)에서 Tsuji 등이 디올 B를 기술하고 있으며, 디올 C는 Dhawau 등에 의해 제조되었다[참조: J. Org. Chem., 45, 922-4 (1980)]. 이러한 화합물의 유용성에 대해서는 기술된 바가 없고, 본 발명의 R1치환기를 갖지도 않는다.
하기의 구조 D는 과지질혈증(hyperlipidemia) 치료에 유용하다고 문헌에 개시되어 있다[참조: Hashimoto 등, 1991년 5월 2일자로 출원한 유럽 특허 출원 424,541].
D
상기 식에 있어서,
X, Y는 할로겐;
R은 C1-6알킬; 및
n은 0, 1 또는 2이다.
상기 화합물(D)은 본 발명의 2번째 탄소 치환기 X가 결여되어 있으며, 유용성도 서로 관련성이 없다.
발명의 요약
본 발명에서는 화학식 I의 신규한 화합물 및 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 화학식 I의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 COX-2-매개성 질환의 치료 방법을 포함하고 있다. 이 화합물은 COX-1 보다 COX-2를 선택적으로 억제하는 화합물의 약물 전구체이다. 이 약물 전구체는 생체 내에서 상기의 선택적인 억제제로 변환된다.
또한, 본 발명에서는 화학식 I의 화합물을 포함한 COX-2-매개성 질환의 치료를 위한 특정의 약제학적 조성물을 포함하고 있다.
본 발명의 한 양태에서는, 화학식 I의 신규한 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 COX-2-매개성 질환의 치료 방법을 포함하고 있다.
화학식 I
상기 식에 있어서,
X는 (a) CH2OH,
(b) CHO,
(c) CO2R4또는
(d) CONR4 2이고;
Y는 (a) CH3또는
(b) CH2OR5이고;
R1은 (a) S(O)2CH3,
(b) S(O)2NH2,
(c) S(O)2NHC(O)CF3,
(d) S(O)(NH)CH3,
(e) S(O)(NH)NH2,
(f) S(O)(NH)NHC(O)CF3,
(g) P(O)(CH3)OH 및
(h) P(O)(CH3)NH2로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
R2및 R3는 (a) 수소,
(b) 할로,
(c) C1-6알콕시,
(d) C1-6알킬티오,
(e) CN,
(f) CF3,
(g) C1-6알킬 및
(h) N3로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
R4는 (a) 수소,
(b) C1-6알킬 및
(c) 일치환 또는 이치환된 벤질{여기서, 치환기는 하기로부터 선택된다:
(1) 수소,
(2) 할로,
(3) C1-6알킬,
(4) C1-6알콕시,
(5) C1-6알킬티오,
(6) OH,
(7) CN 및
(8) CF3}로 구성되는 그룹중에서 선택되거나,
또는 동일한 질소 원자에 결합한 2개의 R4그룹은 산소 또는 황 이거 나 질소 원자를 추가로 함유하거나, 함유하지 않는 5,6 또는 7-원 포화 고리를 형성할 수 있고(이 때, 상기 질소 원자는 수소 또는 C1-6알킬로 치 환된다);
R5는 (a) C1-6알킬,
(b) 일치환 또는 이치환된 벤질｛여기서, 치환기는 하기로부터 선택된 다:
(1) 수소,
(2) 할로,
(3) C1-6알킬,
(4) C1-6알콕시,
(5) C1-6알킬티오,
(6) OH,
(7) CN,
(8) CF3및
(9) CO2R4}로 구성되는 그룹중에서 선택된다.
한 유형(genus)에서는, 본 양태내에 속하는 바람직한 화합물이 하기를 내용으로하는 화합물이다:
R1은 (a) S(O)2CH3및
(b) S(O)2NH2로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
R2및 R3는 (1) 수소,
(2) 불소, 염소 및 브롬으로 구성되는 그룹중에서 선택된 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된다.
다른 유형에서는, 본 양태내에 속하는 바람직한 화합물이 하기를 내용으로하는 화합물이다:
Y는 CH3또는 CH2OC1-6알킬이다.
본 유형내에 속하는 화합물의 클래스는 하기와 같다:
Y는 CH3또는 CH2OC1-6알킬이고;
R1은 (a) S(O)2CH3,
(b) S(O)2NH2,
(c) S(O)2NHC(O)CF3,
(d) S(O)(NH)CH3,
(e) S(O)(NH)NH2및
(f) S(O)(NH)NHC(O)CF3로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
R2및 R3는 (a) 수소,
(b) 불소, 염소 및 브롬,
(c) C1-4알콕시,
(d) C1-4알킬티오,
(e) CN,
(f) CF3및
(g) C1-4알킬로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된다.
본 클래스내에 속하는 서브-클래스의 화합물은 하기와 같다:
R2및 R3는 (1) 수소 및
(2) 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
R4는 수소 또는 메틸이고;
R5는 C1-6알킬이다.
다른 유형에서는, 상기 양태내에 속하는 바람직한 화합물이 하기를 내용으로하는 화합물이다:
X가 CO2R4이다.
본 유형에 속하는 화합물의 클래스는 하기와 같다:
X는 CO2R4이고;
Y 메틸 또는 CH2OR5이고;
R1은 S(O)2CH3이고;
R2및 R3는 (a) 수소 및
(b) 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
R4는 (a) 수소 및
(b) C1-6알킬로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
R5는 (a) C1-6알킬,
(b) 일치환 또는 이치환된 벤질｛여기서, 치환기는 하기로부터 선택된 다:
(1) 수소,
(2) 할로,
(3) C1-6알콕시 및
(4) OH}로 구성되는 그룹중에서 선택된다.
본 클래스내에 속하는 화합물의 서브-클래스는 하기와 같다:
X는 CO2R4이고;
Y는 메틸 또는 CH2OR5이고;
R1은 S(O)2CH3이고;
R2및 R3는 (a) 수소 및
(b) 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
R4는 (a) 수소 및
(b) C1-6알킬로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
R5는 (a) C1-6알킬,
(b) 일치환 또는 이치환된 벤질｛여기서, 치환기는 하기로부터 선택된 다:
(1) 수소,
(2) 할로,
(3) C1-6알콕시 및
(4) OH}로 구성되는 그룹중에서 선택된다.
표 2 및 표 3에서 본 발명의 화합물을 예시하고 있다.
본 출원 명세서에 있어서, 알킬은 지정된 탄소수를 가진 선형, 가지 및 고리 구조를 포함하는 것으로 정의된다. 알킬의 예로는, 메틸, 에틸, 프로필, 2-프로필, s- 및 t-부틸, 펜틸, 헥실, 1,1-디메틸에틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 및 사이클로헥실이 있다. 이와 유사하게, 알콕시 및 알킬티오도 지정된 탄소수를 갖는 선형, 가지 및 고리 구조를 의미한다.
본 출원 명세서에 있어서, "CONR4 2" 에서의 "R4"와 같이 정의가 2번 나오는 경우, 각각 서로 독립적인 것으로 간주된다. 따라서, "CONR4 2"에서 "R4" 그룹은 서로 동일할 필요가 없다.
본 출원 명세서에 있어서, 할로는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 의미한다.
하기의 약어들의 의미는 다음과 같다:
AA = 아라키돈산
Ac = 아세틸
AIBN = 2.2-아조비시소부티로니트릴
Bn = 벤질
CHO = 중국 햄스터의 난소
CMC = 1-사이클로헥실-3-(2-모르폴리노에틸)카르보디이미드메토-p-톨루엔 설포네이트
COX = 시클로옥시게나제
DBU = 디아자바이사이클로[5.4.0]언덱-7-엔
DMAP = 4-(디메틸아미노)피리딘
DMF = N,N-디메틸포름아미드
DMSO = 디메틸 설폭사이드
Et3N = 트리에틸아민
HBSS = 행스(Hanks)-조화된 염 용액
HEPES = N-[2-하이드록시에틸]피페라진-N1-[2-에탄설폰산]
HWB = 인간의 완전 혈액
KHMDS = 헥사메틸디실라잔 칼륨
LDA = 디이소프로필아미드 리튬
LPS = 리포폴리사카라이드
mCPBA = 메타클로로 페르벤조산
MMPP = 모노퍼옥시프탈레이트 마그네슘
Ms = 메탄설포닐 = 메실
Ms0 = 메탄설포네이트 = 메실레이트
NBS = N-브로모석신이미드
NCS = N-클로로석신이미드
NIS = N-요오도석신이미드
NSAID = 비-스테로이드성 항-염증 약물
OxoneR= 퍼옥시모노설페이트 칼륨
PCC = 피리디니움 클로로크로메이트
PDC = 피리디니움 디크로메이트
r.t. = 실온
rac. = 라셈체
Tf = 트리플루오로메탄설포닐 = 트리플릴
TFAA = 트리플루오로아세트 무수물
Tf0 = 트리플루오로메탄설포네이트 = 트리플레이트
THF = 테트라하이드로퓨란
TLC = 박층 크로마토그래피
TMPD = N,N,N',N'-테트라메틸-p-페닐렌디아민
Ts = p-톨루엔설포닐 = 토실
TsO = p-톨루엔설포네이트 = 토실레이트
Tz = 1H(또는 2H)-테트라졸-5-일
SO2Me = 메틸 설폰(또한 SO2CH3)
SO2NH2= 설폰아미드
알킬 그룹 약어 용량 약어
Me = 메틸 bid = bis in die = 2회/일
Et = 에틸 qid = quater in die = 4회/일
n-Pr = 노르말 프로필 tid = ter in die = 3회/일
i-Pr = 이소프로필
n-Bu = 노르말 부틸
i-Bu = 이소부틸
s-Bu = 2차 부틸
t-Bu = 3차 부틸
c-Pr = 사이클로프로필
c-Bu = 사이클로부틸
c-Pen = 사이클로펜틸
c-Hex = 사이클로헥실
여기에 기술되어 있는 몇 몇 화합물들은 비대칭 중심을 하나 이상 함유하고 있으며, 따라서 부분입체이성질체(diastereomer) 및 광학 이성질체가 생긴다. 본 발명은 이러한 부분입체이성질체, 이의 라셈체와 용해되어 있으며 순수한 거울상 이성질체 형태 및 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
여기에 기술되어 있는 몇 몇 화합물은 올레핀 이중 결합을 함유하고 있으며, 특별한 언급이 없는 경우에는 E 및 Z 기하이성질체를 모두 포함함을 의미한다.
화학식 I의 화합물은 통증, 류마티스열 등의 다양한 상태의 열 및 염증, 인플루엔자 또는 기타 바이러스성 감염과 관련한 증상, 감기, 등 아래쪽 및 목 통증, 월경 불순, 두통, 치통, 염좌(sprain) 및 좌상(strain), 근육염, 신경통, 활막염, 연소성 관절염 등의 관절염, 퇴행성 관절 질환(골관절염), 통풍(gout) 및 강직성 척추염, 활액낭염, 화상, 외상, 외과 및 치과 치료 이후에 유용하다. 이에 더하여, 이 화합물은 종양으로의 세포변환 및 전이성 종양으로의 성장을 억제하므로, 암 치료에 사용할 수 있다. 또한, 화합물 I은 당뇨병성-망막증 및 종양 혈관형성시에 나타나는 사이클로옥시게나제-매개성 증식 질환의 치료 및/또는 예방에도 유용할 수 있다.
또한, 화합물 I이 생체 내에서 COX-2 억제제로 전환됨으로써, 수축성 프로스타노이드의 합성을 방해하여 프로스타노이드에 의해 유도되는 평활근 수축을 억제한다. 따라서, 월경 불순, 조기 분만, 천식 및 에오시노필-관련성 질환의 치료에 유용할 수 있다. 게다가, 알츠하이머 질환, 특히 폐경기 이후의 여성에게서 나타나는 골 손실(즉, 골다공증) 및 녹내장 치료에도 유용할 것이다.
화합물 I은 선택적으로 COX-2를 억제하는 억제제의 약물 전구체이며, 생체내에서 선택적인 COX-2 억제제로 변환되어 그 활성을 나타낸다. 본 발명의 화합물로부터 형성되는 이러한 활성 화합물에 대해서는 참조 문헌에 포함되어 있는 하기의 문헌에서 기술하고 있다:
1995년 1월 5일자로 공개된 WO 95/00501, 1995년 7월 13일자로 공개된 WO 95/18799 및 1995년 12월 12일자로 공개된 미국 특허 5,474,995.
특정 측면에 있어서, 약력학 및/또는 안전성에 있어서 향상된 본 발명의 화합물이 상기의 문헌에 기술되어 있는 화합물에 비해 우월하다.
Waller 및 George의 문헌에서는, 약제학적으로 유용한 화합물로서의 약물 전구체의 잇점 및 용도에 대해서 일반적으로 설명하고 있다[참조:Br. J. Clin. Pharmac.Vol. 28, pp. 497-507, 1989].
예를 보면, 본 발명의 하기 화합물들이 상기에서 기술한 COX-2의 선택적 억제제로 변환된다.
화합물 I은 생체내에서 COX-2에 대한 강력한 억제력 및/또는 COX-1 보다 COX-2에 대해 특이성을 갖는 화합물로 변환되어, 통상의 비-스테로이드성 항-염증 약물(NSAID)의 대체제로 유용할 것인데, 위궤양, 위염, 국부성 장염, 궤양성 대장염, 게실염 또는 재발성 위장 병변; GI 출혈, 저프로트롬빈혈증 같은 빈혈, 혈우병 또는 기타 출혈성 질환을 포함한 응혈 질환; 신장 질환을 가진 환자 또는 수술이나 항-응혈제 투여전의 환자에 있어서 통상의 비-스테로이드성 항-염증 약물의 사용이 금지될 수 있는 경우에 특히 그러하다.
본 발명의 약제학적 조성물은 활성 성분으로서의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하며, 약제학적으로 허용가능한 담체도 포함할 수 있으며, 그 외의 다른 치료 성분들도 원하면 포함할 수도 있고 포함하지 않을 수도 있다. 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"이란 무기 염기 및 유기 염기를 포함한 약제학적으로 허용가능한 비-독성 염기로부터 제조되는 염을 의미한다. 무기 염기로부터 유래하는 염으로는 알루미늄염, 암모늄염, 칼슘염, 구리염, 제2 철염, 제1 철염, 리튬염, 마그네슘염, 제2 망간염, 제1 망간염, 칼륨염, 나트륨염, 아연염 등이 포함된다. 특히 암모늄염, 칼슘염, 마그네슘염, 칼륨염 및 나트륨염이 바람직하다. 약제학적으로 허용가능한 비-독성 유기 염기로부터 유래하는 염으로는 1차, 2차 및 3차 아민염, 자연적으로 발생하는 치환 아민을 포함한 치환 아민염, 고리화 아민염(예를 들면, 아르기닌, 베타인, 카페인, 콜린, N,N-디벤질에틸렌디아민, 디에틸아민, 2-디에틸아미노에탄올, 2-디메틸아미노에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-에틸모르폴린, N-에틸피페리딘, 글루카민, 글루코사민, 히스티딘, 히드라바민, 이소프로필아민, 라이신, 메틸글루카민, 모르폴린, 피페라진, 피페리딘, 폴리아민 수지, 프로카인, 퓨린, 테오브로민, 트리에틸아민, 트리메틸아민, 트리프로필아민, 트로메타민 등) 및 기본 염기 이온 교환 수지 등이 포함된다.
하기의 치료 방법을 논의함에 있어서, 화학식 I을 지칭하는 경우 이의 약제학적으로 허용가능한 염도 포함하는 것을 의미한다.
화학식 I의 화합물은 통증, 류마티스열 등의 다양한 상태의 열 및 염증, 인플루엔자 또는 기타 바이러스성 감염과 관련한 증상, 감기, 등 아래쪽 및 목 통증, 월경 불순, 두통, 치통, 염좌(sprain) 및 좌상(strain), 근육염, 신경통, 활막염, 연소성 관절염등의 관절염, 퇴행성 관절 질환(골관절염), 통풍(gout) 및 강직성 척추염, 활액낭염, 화상, 외상, 외과 및 치과 치료 이후에 유용하다. 이에 더하여, 이 화합물은 종양으로의 세포변환 및 전이성 종양으로의 성장을 억제하므로, 암 치료에 사용할 수 있다. 또한, 화합물 I은 당뇨병성-망막증 및 종양 혈관형성시에 나타나는 사이클로옥시게나제-매개성 증식 질환의 치료 및/또는 예방에도 유용할 것이다.
또한, 화합물 I이 수축성 프로스타노이드의 합성을 방해하여 프로스타노이드에 의해 유도되는 평활근 수축을 억제한다. 따라서, 월경 불순, 조기 분만, 천식 및 에오시노필-관련성 질환의 치료에 유용할 것이다. 게다가, 알츠하이머 질환, 골 손실 예방(골다공증 치료) 및 녹내장 치료에도 유용하다.
화합물 I이 갖는 COX-2에 대한 강력한 억제력 및/또는 COX-1 보다 COX-2에 대해 갖는 특이성으로 인해, 화합물 I은 통상의 비-스테로이드성 항-염증 약물(NSAID)의 대체제로서 유용하다는 것이 밝혀졌는 데, 위궤양, 위염, 국부성 장염, 궤양성 대장염, 게실염 또는 재발성 위장 병변; GI 출혈, 저프로트롬빈혈증 같은 빈혈, 혈우병 또는 기타 출혈성 질환을 포함한 응혈 질환; 신장 질환을 가진 환자나 수술 또는 항응혈제 투여전의 환자에 있어서 통상의 비-스테로이드성 항-염증 약물의 사용이 금지될 수 있는 경우에 특히 그러하다.
이와 유사하게, 현재 NSAID를 기타의 약제 또는 성분과 함께 투여하는 제제에 있어서, 화합물 I은 통상의 NSAID의 부분적인 또는 완전한 대체물로서 유용할 것이다. 따라서, 본 발명의 다른 측면에서는, 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 화학식 I의 화합물 및 하나 이상의 성분(예를 들면, 아세토미노펜 또는 페나세틴 등의 진통제; 카페인 등의 상승인자; 수산화알루미늄, 수산화마그네슘, 시메티콘 등의 H2길항제; 페닐에프린, 페닐프로파놀아민, 슈도페드린, 옥시메타졸린, 에피네프린, 나파졸린, 크실로메타졸린, 프로필헥세드린 또는 레보-데속시에페드린 등의 충혈제거제; 코데인, 하이드로코돈, 카라미펜, 카르베타펜탄 또는 덱스트라메토르판 등의 기침억제제; 미소프로스톨, 엔프로스틸, 리오프로스틸, 오르노프로스톨 또는 로사프로스톨 등의 프로스타글란딘; 이뇨제; 진정 효과를 갖거나 갖지않는 항-히스타민)을 포함한 상기에서 기술한 COX-2-매개성 질환을 치료하기 위한 약제학적 조성물이 포함된다. 게다가, 본 발명에서는 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 화학식 I의 화합물을 치료를 필요로하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 사이클로옥시게나제-매개성 질환을 치료하는 방법을 포함한다(이 때, 필요에 따라 상기에 나열되어 있는 하나 이상의 성분과 함께 투여할 수도 있고, 그렇지 않을 수도 있다).
이러한 사이클로옥시게나제-매개성 질환의 치료를 위해, 통상적으로 사용되는 약제학적으로 허용가능한 비-독성 담체, 보조제 및 비히클을 함유하는 용량 단위 형태로 화합물 I을 경구, 국부, 비경구, 흡입 분무, 직장을 통해 투여할 수 있다. 여기서 사용되는 비경구 투여에는 피하주사, 정맥주사, 근육주사, 흉골내주사 또는 주입 기법이 포함된다. 본 발명의 화합물은 쥐, 들쥐, 말, 소, 양, 개, 고양이 등과 같은 온혈동물 이외에 인간을 치료하는 데에도 유효하다.
상기에서 기술한 바와 같이, COX-2-매개성 질환을 치료하기 위한 약제학적 조성물에는 필요한 경우 상기에서 나열한 성분을 하나 이상 포함할 수도 있고, 아닐 수도 있다.
활성 성분을 함유하는 약제학적 조성물은 예를 들면 정제, 트로케(troche), 로젠지(lozenge), 수성 또는 유성 현탁액, 분산 분말 또는 과립, 유탁액, 경캡슐 또는 연캡슐, 시럽 또는 엘릭서로 경구 투여에 적합한 형태를 가질 수 있다. 경구 투여용 조성물은 약제학적 조성물을 제조하는 해당 기술분야에 공지되어 있는 방법이라면 어느 것이라도 사용하여 제조할 수 있으며, 약제학적으로 훌륭하며 맛도 좋은 제제를 제공하기 위해 이러한 조성물에 감미제, 방향제, 착색제 및 방부제로 구성되는 그룹중에서 선택되는 제제를 하나 이상 함유할 수 있다. 정제에는 정제 제조에 적합한, 독성을 갖지 않으면서 약제학적으로 허용가능한 부형제와 혼합한 활성 성분이 함유되어 있다. 이러한 부형제의 예로는, 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨 같은 불활성 희석제; 옥수수 전분 또는 알긴산 같은 과립화제 및 붕해제; 전분, 젤라틴 또는 아카시아 같은 결합제; 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 또는 탈크 같은 윤활제가 있다. 정제는 피막을 입히지 않을 수도 있고, 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시켜 장시간 지속적으로 활성을 나타낼 수 있도록 공지의 기술을 이용하여 피막을 입힐 수도 있다. 예를 들면, 모노스테아르산 글리세롤 또는 디스테아르산 글리세롤 같은 시간 지연 물질을 사용할 수 있다. 미국 특허 4,256,108; 4,166,452; 및 4,265,874에서 설명하고 있는 기술을 사용하여 정제에 피막을 입혀, 삼투압을 이용한 치료 정제를 형성하여 그 방출을 통제한다.
경구 투여를 위한 형태는 경(hard) 젤라틴 캡슐[여기서, 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린 같은 불활성 고체 희석제와 활성 성분이 혼합되어 있다] 또는 연(soft) 젤라틴 캡슐[여기서, 물이나 프로필렌 글리콜, PEG 및 에탄올 같은 수성 용매 또는 혼화성 용매이거나 땅콩 오일, 액체 파라핀 또는 올리브 오일 같은 오일 매체와 활성 성분이 혼합되어 있다] 형태일 수도 있다.
수성 현탁액은 이의 제조에 적합한 부형제와 혼합되어 있는 활성 물질을 함유하고 있다. 이러한 부형제로는 카복시메틸셀룰로오스 나트륨, 메틸셀룰로오스, 하이드록시-프로필메틸셀룰로오스, 알긴산나트륨, 폴리비닐-피롤리돈, 트라가칸트 고무 및 아카시아 고무 같은 현탁제; 레시틴 같은 자연 발생적인 포스포티드, 폴리에틸렌 스테아레이트 같은 알킬렌 산화물과 지방산과의 축합 생성물, 헵타데카에틸렌옥시세타놀 같은 에틸렌 산화물과 긴 사슬-지방족 알코올의 축합 생성물, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 모노올레에이트 같은 에틸렌 산화물과 지방산 및 헥시톨에서 유래한 부분적인 에스테르의 축합 생성물 또는 폴리에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 같은 에틸렌 산화물과 지방산 및 헥시톨 무수물에서 유래한 부분적인 에스테르의 축합 생성물 같은 분산제 또는 습윤제가 있다. 수성 현탁액에는 에틸 또는 n-프로필, p-하이드록시벤조에이트 같은 하나 이상의 방부제, 하나 이상의 착색제, 하나 이상의 방향제 및 수크로오스, 사카린 또는 아스파르탐 같은 감미제를 하나 이상 함유할 수도 있다.
유성 현탁액은 아라키스 오일, 올리브 오일, 참깨 오일, 코코넛 오일 같은 식물성 오일 또는 수성 파라핀 같은 광물성 오일중에 활성 성분을 현탁시켜 제형화할 수 있다. 유성 현탁액에는 밀랍, 경화 파라핀, 세틸 알코올 같은 농화제를 함유할 수 있다. 상기에서 언급한 감미제 및 방향제를 첨가하여, 맛이 좋은 경구 제제를 만들 수 있다. 이러한 조성물은 아스코르브산 같은 산화방지제를 첨가하여 보존할 수 있다.
물을 첨가하여 수성 현탁액을 제조하기에 적합한 분산 분말 및 과립은 분산제 또는 습윤제, 현탁제 및 하나 이상의 방부제와 혼합되어 있는 활성 성분을 제공한다. 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제는 상기에서 예시한 바와 같다. 감미제, 방향제 및 착색제 같은 부형제가 추가로 있을 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 수중유적(oil-in-water) 유탁액 형태일 수도 있다. 오일 상(phase)은 올리브 오일, 아라키스 오일 같은 식물성 오일이거나 액체 파라핀 같은 광물성 오일이거나 이들의 혼합물일 수 있다. 유화제로는 콩, 레시틴 같은 자연 발생적인 포스포티드, 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유래한 에스테르 또는 부분 에스테르(예를 들면, 소르비탄 모노올레에이트)와 이 부분 에스테르와 에틸렌 산화물의 축합 생성물(예를 들면, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트)이 적합하다. 이러한 유화제는 감미제 및 방향제를 함유할 수도 있다.
시럽 및 엘릭서는 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 소르비톨 또는 수크로오스 같은 감미제와 함께 제형화할 수 있다. 이러한 제제는 진통제, 방부제, 방향제, 착색제를 함유할 수도 있다. 약제학적 조성물은 무균 주사용 수성 또는 유성 현탁액 형태를 가질 수 있다. 이러한 현탁액은 상기에서 기술한 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 이용한 공지의 기술에 따라 제형화할 수 있다. 무균 주사용 제제는 독성을 나타내지 않는 비-경구용으로 적합한 희석제 또는 용매중의 무균 주사용 용액이나 현탁액(예를 들면, 1,3-부탄 디올중의 용액)일 수 있다. 허용가능한 비히클 및 용매중에는 물, Ringer 용액, 염화나트륨 등장액이 있다. 에탄올, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜 같은 보조 용매를 사용할 수도 있다. 이에 더하여, 용매 또는 현탁 매체로는 통상 무균의 비-휘발유를 사용한다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노글리세리드 또는 디글리세리드 등의 무균 비-휘발유는 어떠한 것이라도 사용할 수 있다. 게다가, 올레산 같은 지방산을 주사용 제제에 사용할 수 있다.
화합물 I은 좌약 형태로 직장을 통해 투여할 수도 있다. 이 약물과 통상의 온도에서는 고체 상태이나 직장내의 온도에서는 액체 형태인 적합한 비-자극성 부형제를 혼합하여 이러한 조성물을 제조할 수 있으며, 이는 직장에서 녹아서 약물을 방출하게 된다. 이러한 물질로는 코코아 버터 및 폴리에틸렌 글리콜이 있다.
화학식 I의 화합물을 함유한 크림, 연고, 젤, 용액 또는 현탁액 등을 국소용으로 사용할 수 있다(이러한 목적을 위해서는, 구강 청결제 또는 가글 등이 포함된다). 국소용 제형에는 약제학적 담체, 보조용매, 유화제, 침투 강화제, 보존 시스템 및 완화제가 일반적으로 포함된다.
이 화합물의 투여량 수준은 1일당 약 0.01㎎ 내지 140㎎/체중 ㎏, 또는 환자 1인당 약 0.5㎎ 내지 7g이 상기에서 기술한 상태를 치료하는 데에 유용하다. 예를 들면, 이 화합물을 1일당 약 0.01㎎ 내지 50㎎/체중 ㎏, 또는 환자 1인당 약 0.5㎎ 내지 3.5g를 투여하는 경우, 염증을 효과적으로 치료할 수 있을 것이다.
담체 물질과 결합하여 단일 투여 형태로 만드는 활성 성분의 양은 치료 대상이 되는 수용자 및 특정의 투여 형태에 따라 달라진다. 예를 들면, 인간의 경구 투여를 위한 제제에는 총 조성물의 약 5 내지 95%를 차지하는 담체 물질 적정량과활성 제제 0.5㎎ 내지 5g이 포함될 수 있다. 용량 단위 형태는 일반적으로 활성 성분을 약 1㎎ 내지 500㎎을 함유하며, 대개 25㎎, 50㎎, 100㎎, 200㎎, 300㎎, 400㎎, 500㎎, 600㎎, 800㎎ 또는 1000㎎을 함유한다.
반면에, 특정 환자에 대한 구체적인 투여량 수준은 나이, 체중, 일반적인 건강, 성별, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배출률, 약물 혼합 및 치료를 하고 있는 질병의 심각성 정도 등 다양한 인자에 따라 달라진다.
본 발명의 화합물은 하기의 방법에 따라 제조할 수 있다.
방법 A:
케탈 1 및 비스트리메틸케텐 아세탈 2에 적절한 용매(예를 들면, CH2Cl2)중의 루이스 산(예를 들면, TiCl4또는 Et2OㆍBF3)을 처리하여, 부분입체이성질체 혼합물인 부가물 3를 수득한다. CH2N2로 3을 에스테르화시킨 후, DBU 같은 염기를 처리하면, 실리카 젤 크로마토그래피에 의해 분리되는 5 및 6의 혼합물을 수득한다. 5를 MMPP 또는 mCPBA로 산화시켜서 목적하는 7을 수득한다.
방법 B:
에스테르 7을 수성 용매 혼합물(예를 들면, THF/H2O 또는 MeOH/H2O)중의 염기(예를 들면, LiOH 또는 NaOH)로 가수분해시켜서, 목적하는 카르복시산 8을 수득한다.
방법 C:
카르복시산 8을 옥살릴 클로라이드로 처리한 후, 적합한 아민으로 처리하여 목적하는 아미드 9를 수득한다.
방법 D:
디페닐 락톤10을 적당한 용매(예를 들면, 톨루엔, 헥산, 테트라하이드로퓨란 또는 에테르)중의 적합한 환원제(예를 들면, 디이소부틸 알루미늄 수소화물 또는 리튬 알루미늄 수소화물)를 이용하여 디올11로 환원시킨다. 디올11은 NaH 또는 KOBut같은 염기 존재하에서 알킬 할로겐화물 또는 벤질 할로겐화물을 사용하여 알킬화시킨다. 이러한 알킬화를 통해 목적하는 이성질체12및 목적으로 하지 않는 이성질체13을 수득하며, 이들은 크로마토그래피 또는 결정화에 의해 분리된다. 화합물12를 디옥사이드 마그네슘 같은 시약을 사용하여 알데히드14로 산화시킨다. 14를 NaClO2를 사용하여 한번 더 산화시켜서, 산15를 수득한다. 또는,12를 시약 Cr+6를 사용하여 산화시켜서, 직접 산15를 수득할 수 있다.15에 염기를 처리하여 염16을 수득한다. 염기 존재하에서15를 알킬화제와 반응시켜, 에스테르17을 수득한다.15의 메틸 에스테르는15를 에테르 중의 디아조메탄과 반응시켜, 손쉽게 소량을 제조할 수 있다.
방법 E :
디페닐 말레인산 무수물18을 적합한 수소 환원제(예를 들면, 디-이소부틸 알루미늄 수소화물 또는 리튬 알루미늄 수소화물)를 사용하여 디올11로 환원시킬 수 있다. 톨루엔, 테트라하이드로퓨란, 에테르 같은 용매 또는 이의 혼합물이 환원에 적합하다.
방법 F:
2,3-디페닐 말레인산 무수물18은 Fields의 방법으로 제조할 수 있다[참조: J. Org. Chem., Vol. 55, pp. 5165-70 (1990); 미국 특허 4,596,867]. 이 방법에서는, 페닐아세트산19를 환류 아세트산 무수물중의 α-옥소페닐아세트산20(바람직하게는, 이의 칼륨염)과 반응시킨다.
21및22같은 페닐아세토니트릴로부터18을 수득하는 다단계의 순서에 대해서는 Smith 등의 문헌에 기술되어 있다[참조: J. Org. Chem., vol. 55, pp. 3351-62 (1990)].
Florac 및 그의 동료들은 문헌에서 α-브로모 페닐아세토 하이드라지드23및24로부터 몇 단계를 거쳐서18을 합성하는 다른 방법을 기술하고 있다[참조: Tetrahedron, vol. 46, pp. 445-52 (1990)].
표 1에서는 몇몇 락톤10을 보여주고 있는 데, 이로부터 방법 D를 사용하여본 발명의 화합물을 제조할 수 있다.
표 2 및 3에서는 본 발명을 대표하는 화합물을 보여주고 있다(구조 Ia 및 Ib).
생물학적 활성의 측정 분석
사이클로옥시게나제-2에 대한 억제 활성을 측정하기 위해, 하기와 같이 분석하여 화학식 I의 화합물을 테스트할 수 있다.
사이클로옥시게나제 활성의 억제
완전 세포(whole cell) 사이클로옥시게나제 분석에서, 화합물은 사이클로옥시게나제 활성의 억제제로서 테스트된다. 이러한 분석에서는 방사성면역분석을 이용하여, 아라키돈산에 반응하는 프로스타글란딘 E2의 합성을 측정한다. 이러한 분석에서, 100% 활성은 아라키도네이트 존재 및 부존재하에서의 프로스타글란딘 E2합성간의 차이로서 정의된다.
완전 세포 분석(Whole cell assay)
사이클로옥시게나제 분석을 위해, 합류하게 될 때까지(1-2×105세포/웰) 골육종 세포를 24-웰 멀티-접시(Nunclon)내의 배지 1㎖내에서 배양시킨다. U-937 세포를 회전 플라스크내에서 성장시킨 후, 24-웰 멀티-접시(Nunclon)내에서 재현탁시켜서 최종 농도가 1.5 ×106세포/㎖가 되도록한다. HBSS 1㎖내에서 골육종 세포 및 U-937 세포를 세척하고 재현탁시킨 후, 테스트 화합물의 DMSO 용액 또는 DMSO 비히클 1㎕를 첨가하고, 표본을 부드럽게 혼합한다. 모든 분석은 3중으로 한다. 그리고 나서, 아라키돈산을 첨가하기 전에 표본을 37℃에서 5 내지 15분간 배양시킨다. 아라키돈산(퍼옥시드 없음, Cayman Chemical)은 에탄올 중에 10mM 스탁(stock) 용액으로서 제조되고, HBSS내에서 10배 희석시킨다. 이 희석 용액중 10㎕ 를 세포에 첨가하여, 최종 아라키돈산 농도 10μM을 수득한다. 대조용 표본은 아라키돈산 대신에 에탄올 비히클을 사용하여 배양한다. 표본을 다시 한번 부드럽게 혼합한 후, 37℃에서 10분간 더 배양시킨다. 그리고 나서, 골육종 세포의 경우, 1N HCl 100㎕를 혼합하면서 첨가한 후, 이 용액을 세포 단일층으로부터 신속하게 제거함으로써 반응을 종결한다. U-937 세포의 경우, 1N HCl 100㎕를 혼합하면서 첨가함으로써 반응을 종결한다. 그리고 나서, 1N NaOH 100㎕를 첨가하여 표본을 중화시킨 후, PGE2수준을 방사성면역분석으로 측정한다.
형질감염된 CHO 세포 라인을 이용한 COX-2 및 COX-1의 완전 세포 분석
이 분석에서는 인간의 COX-1 또는 COX-2 cDNA를 함유하는 진핵세포의 발현 벡터 pCDNAIII로 안정되게 형질감염된 중국 햄스터 난소(CHO) 세포 라인을 사용한다. 이 세포 라인은 각각 CHO[hCOX-1] 및 CHO[hCOX-2]로 일컫는다. 사이클로옥시게나제 분석을 위해, 현탁액 배양물로부터의 CHO[hCOX-1] 세포 및 부착 배양물을 트립신화함으로써 제조되는 CHO[hCOX-2] 세포를 원심분리(300×g, 10분)를 통해 수득한 후, pH 7.4인 HEPES 15mM을 함유하는 HBSS내에서 1회 세척하고나서, 세포 농도 1.5×106세포/㎖에서 pH 7.4인 15mM HEPES를 함유하는 HBSS내에서 재현탁시킨다. 테스트할 약물을 DMSO내에 용해시켜서, 가장 높은 약물 농도보다 66.7배의 농도를 갖도록한다. 화합물은 가장 높은 약물 농도를 갖는 DMSO 중에 3배 연속 희석(3-fold serial dilution)하여, 농도 8에서 대개 이중으로 테스트한다. 세포(200㎕중에 0.3×106세포)를 테스트 약물 또는 DMSO 비히클 3㎕와 함께 37℃에서 15분간 예비 배양시킨다. 퍼옥사이드가 없는 AA의 용액(CHO[hCOX-1 및 CHO[hCOX-2분석을 위해 각각 5.5μM 및 110μM)은 pH 7.4인 HEPES 15mM을 함유하는 HBSS내에서 에탄올 중의 농축된 AA 용액을 10배 희석하여 제조한다. 그리고 나서, 약물 존재하 또는 부재하에서 세포에 AA/HBSS 용액을 투여하여, CHO[hCOX-1] 분석에서 최종 농도가 0.5μM 인 AA를 수득하고, CHO[hCOX-2] 분석에서 최종 농도가 10μM인 AA를 수득한다. 1N HCl 10㎕를 첨가한 후, 0.5N NaOH 20㎕로 중성화시켜 반응을 종결한다. 이 표본을 4℃에서 300×g으로 10분간 원심분리를 한 후, 투명한 상층액 일부를 적절하게 희석시켜서, PGE2를위한 효소-관련 면역분석(PGE2효소면역분석 키트, Assay Designs, Inc.)을 이용하여 PGE2수준을 측정한다. 테스트 화합물이 존재하지 않는 경우, 사이클로옥시게나제의 활성은 아라키돈산을 투여한 세포의 PGE2수준과 에탄올 비히클을 이용하여 거짓으로 투여한 세포의 PGE2수준과의 차이로 측정한다. 테스트 화합물에 의한 PGE2합성의 억제는 약물 존재하에서의 활성에 대한 양성 조절 표본에서의 활성을 퍼센트로 계산한다.
U 937 세포 마이크로좀으로부터의 COX-1의 활성 분석
U 937 세포를 500×g으로 5분간 원심분리를 하여 펠렛한 후, 인산 완충액 식염수로 1회 세척한 후 한 번 더 펠렛을 한다. 0.1M Tris-HCl, pH 7.4, 10mM EDTA, 2㎍/㎖ 류펩틴, 2㎍/㎖ 콩 트립신 억제제, 2㎍/㎖ 아프로티닌 및 1mM 페닐 메틸 설포닐 플루오리드로 구성된 균질화 완충액내에서 세포를 재현탁시킨다. 세포 현탁액을 10초 동안 4회에 걸쳐 초음파분해한 후, 4℃에서 10,000×g으로 10분간 원심분리를 한다. 그리고 나서, 상층액을 4℃에서 100,000×g으로 1시간 동안 원심분리를 한다. 100,000×g 마이크로좀 펠렛을 0.1M Tris-HCl, pH 7.4, 10mM EDTA내에서 재현탁시켜서 약 7㎎ 단백질/㎖를 수득한 후, -80℃에서 보관한다.
사용하기 바로 직전에 마이크로좀 제제를 녹인 후, 잠시동안 초음파분해를 하고나서, 10mM EDTA, 0.5mM 페놀, 1mM 환원된 글루타티온 및 1μM 헤마틴을 함유하는 pH 7.4인 0.1M Tris-HCl 완충액중에서 희석시켜서 단백질의 농도가 125㎍/㎖가 되도록 한다. 최종 용적 250㎕에서 2중으로 분석한다. 먼저, DMSO 비히클 또는 DMSO중의 약물 5㎕를 96-웰 폴리프로필렌 타이터 플레이트의 웰내에 10mM EDTA를 함유하는 pH 7.4인 0.1M Tris-HCl 완충액 20㎕에 첨가한다. 그리고 나서, pH 7.4인 0.1M Tris-HCl 및 10mM EDTA중에 1M 아라키돈산 25㎕를 첨가하기 전에, 마이크로좀 제제 200㎕를 첨가한 후 실온에서 15분간 예비 배양시킨다. 표본을 실온에서 40분간 배양시킨 후, 1N HCl 25㎕를 첨가함으로써 반응을 종결한다. 방사성면역분석(Dupont-NEN 또는 Amersham assay kits)에 의해 PGE2의 양을 측정하기 전에, 표본을 1N NaOH 25㎕로 중화시킨다. 사이클로옥시게나제의 활성은 아라키돈산 존재하에서 배양시킨 표본에서의 PGE2수준과 에탄올 비히클 존재하에서 배양시킨 표본에서의 PGE2수준의 차이로 정의된다.
정제된 인간의 COX-2 활성 분석
COX-2에 의해 PGG2가 환원되어 PGH2가 되는 도중에, N,N,N',N'-테트라메틸-p-페닐렌디아민(TMPD)의 산화에 기초한 색소원 분석을 사용하여 이 효소의 활성을 측정한다[Copeland 등 (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. 91, 11202-11206].
인간의 재조합 COX-2는 이미 기술되어 있는 바와 같이 Sf9 세포로부터 정제된다[Percival 등(1994) Arch. Biochem. Biophys. 15, 111-118]. 분석 혼합물(180㎕)에는 100mM 인산나트륨, pH 6.5, 2mM 제나폴 X-100, 1μM 헤마틴, 1㎎/㎖ 젤라틴, 정제된 단백질 80 내지 100 단위(여기서, 1 단위는 610nm에서 1분당 0.001의 O.D.변화가 생기는 데 필요한 효소의 양을 의미한다) 및 DMSO중의 테스트 화합물 4㎕가 함유되어 있다. 분석 완충액(효소 및 헤마틴 부존재)중에 1mM 아라키돈산(AA) 및 1mM TMPD의 초음파 분해된 용액 20㎕를 첨가함으로써 효소 반응이 개시되기 이전에, 혼합물을 실온(22℃)에서 15분간 예비 배양시킨다. 반응 개시후 36초 동안 TMPD 초기 산화 속도를 추정하여, 효소 활성을 측정한다. 비-특이적 산화율은 효소가 부존재하는 상태에서 측정한 후(0.007-0.010 O.D./분), % 억제를 계산하기 이전에 뺀다. IC50수치는 로그-투여량에 대한 % 억제도의 4-파라미터 최소 정방형 비-회귀 분석으로부터 구한다.
인간의 완전 혈액 분석
이론적 근거
인간의 완전 혈액(whole blood)은 선택적인 COX-2 억제제 같은 항-염증 화합물의 생화학적 효율을 연구하기에 적합한 단백질 및 세포가 풍부한 환경을 제공해준다. 연구 결과를 보면, 정상적인 인간의 혈액에는 COX-2 효소가 포함되어 있지 않다. 이것은 COX-2 억제제가 정상적인 혈액내에서의 PGE2생산에 아무런 영향을 끼치지 않는다는 관측 결과와도 일치한다. 이 억제제는 인간의 완전 혈액을 COX-2를 유도하는 LPS와 함께 배양한 이후에만 활성을 나타낸다. 이러한 분석결과를 이용하여, 선택적인 COX-2 억제제가 갖는 PGE2생산에 대한 억제 효과를 측정할 수 있다. 게다가, 완전 혈액내에 있는 혈소판에는 COX-1 효소가 다량 함유되어 있다. 혈병이 생긴 직후, 혈소판은 트롬빈에 의해 매개되는 메카니즘을 통해 활성화된다. 이 반응으로 인해, COX-1가 활성화되어 트롬복산 B2(TxB2)가 생산된다. 따라서, 혈병 생성 이후의 테스트 화합물이 TxB2수준에 대해 갖는 효과을 측정할 수 있으며, COX-1의 활성 표지로 사용할 수 있다. 따라서, 테스트 화합물이 갖는 선택도는 LPS 유도 후의 PGE2의 수준(COX-2) 및 동일한 분석에서 혈병 생성 후의 TxB2(COX-1)를 측정하여 결정한다.
방법
A. COX-2(LPS에 의해 유도되는 PGE2생산)
남성 및 여성 지원자들의 정맥으로부터 신선한 혈액을 수집하여, 헤파린화한 튜브에 모아둔다. 이들에게서 염증 상태가 보이지는 않았으며, 혈액 채취하기 적어도 7일내에는 어떠한 NSAID도 복용하지 않았다. 혈장은 2㎖ 혈액 부분표본으로부터 바로 수득하여, 블랭크(blank, PGE2의 기저 수준)로 사용한다. 남은 혈액을 LPS와 함께 실온에서 5분간 배양한다[최종 농도 100㎍/㎖, Sigma Chem, 이.콜라이로부터의 #L-2630; 0.1% BSA(인산 완충액 식염수)중에서 희석]. 500㎕ 혈액 부분표본을 비히클(DMSO) 2㎕ 또는 테스트 화합물 2㎕와 함께 최종 농도 10nM 내지 30μM, 37℃에서 24시간 동안 배양시킨다. 배양이 종료되면, 5분간 12,000×g에서 원심분리를 하여 혈장을 수득한다. 단백질을 침강시키기 위해, 혈장 100㎕를 메탄올 400㎕와 혼합한다. 상층액을 수득하고나서, 제조 공정에 따라 PGE2를 이의 메틸 옥시메이트 유도체로 전환시킨 후 방사선면역분석 키트(Amersham, RPA#530)를 사용하여 PGE2분석을 한다.
B. COX-1(혈병에 의해 유도되는 TxB2생산)
신선한 혈액을 항-응혈제가 없는 배큐테이너(vacutainer)내에 수집한다. 500㎕ 혈액부분표본을 곧바로 최종 농도 10nM 내지 30μM에서 DMSO 또는 테스트 화합물 2㎕를 미리 넣어둔 실리콘화된 미소원심분리기 튜브로 옮긴다. 이 튜브를 와동(vortex)시킨 후, 37℃에서 1시간 동안 배양시켜 혈병이 생기도록 한다. 배양이 끝나면, 원심분리(5분간 12,000×g)를 통해 혈청을 수득한다. 혈청 100㎕를 메탄올 400㎕와 혼합하여 단백질을 침강시킨다. 상층액을 수득한 후, 제조자의 지시에 따라 효소면역분석 키트(Cayman, #519031)를 사용하여 TxB2분석을 한다.
들쥐의 발 부종 분석
프로토콜
수컷 스프래그-돌리(Sprague-Dawley) 들쥐(150-200g)를 밤새 단식시킨 후, 비히클(1% 메토셀 또는 5% Tween 80) 또는 테스트 화합물을 주입한다. 1시간 후, 측정할 다리 부위를 정하기 위해 한쪽 뒷발목 위쪽에 영구적인 마커를 사용하여 줄을 긋는다. 발의 용적(V0)은 물 치환 원칙에 기초하여 플레티스모미터(plethysmometer, Ugo-Basile, Italy)를 사용하여 측정한다. 25-게이지 바늘을 갖는 인슐린 주사기를 사용하여, 식염수중의 1% 카라겐 용액(FMC Corp, Maine) 50㎕를 발바닥 밑으로 주입한다(즉, 카라겐 500㎍/발). 3시간 후에 발의 용적(V3)을 측정한 후, 발 용적의 증가(V3-V0)를 계산한다. 그리고 나서, CO2로 질식시킨 후, 위 병변의 존재여부를 숫자로 나타낸다. 데이터를 비히클-대조용 수치와 비교한 후, % 억제를 계산한다. 관찰자의 편견을 제거하기 위해, 치료를 받은 모든 그룹을 암호화한다.
NSAID로 유도된 들쥐의 위질환
이론적 근거
기존의 NSAID의 주요 부작용은 인간에게 있어서 위병변을 생기게할 수 있다는 것이다. 이러한 작용은 위장관에서 COX-1을 억제함으로써 유발된다고 믿고 있다. 들쥐는 특히 NSAID의 활성에 민감하다. 실제로, 기존의 NSAID가 위장관에 끼치는 부작용을 측정하기 위해 들쥐를 주로 사용하여 왔다. 본 분석에서는51Cr으로 표지된 적혈구를 전신에 주사한 후, 배설물에서의51Cr 배출을 측정하여 NSAID로 유도된 위장 손실을 측정한다. 동물 및 인간의 경우 위장의 완전한 상태여부를 검사하는 데에 있어서, 배설물의51Cr 방출을 검사하는 것은 잘 확립된, 민감한 기술이다.
방법
수컷 스프래그 돌리 들쥐(150-200g)에 테스트 화합물을 1회(급성 투여) 또는 5일 동안 매일 2회씩(만성 투여) 구강으로 투여한다. 마지막으로 투여한 직후, 공여체 들쥐의 적혈구 0.5㎖를51Cr으로 표지하여 꼬리에 있는 정맥에 주사한다. 이 들쥐를 각각 음식과 물을 갖춘 대사 우리(metabolism cage)에 임의적으로 넣는다. 배설물을 48시간 동안 수집한 후, 배설물의51Cr 방출을 총 주사량의 %로 계산한다. 하기의 공정을 통해,51Cr로 표지된 적혈구를 제조한다. 공여체 들쥐의 대정맥을 통해, 혈액 10㎖를 헤파린화된 튜브내에 모은다. 원심 분리를 통해서 혈장을 제거한 후, 동일 체적의 HBSS로 보충한다. 적혈구를51크로메이트 나트륨의 400 Ci와 함께 37℃에서 30분간 배양시킨다. 배양이 끝난 후, 20㎖ HBSS로 적혈구를 2회 세척하여 유리된51크로메이트 나트륨을 제거한다. 적혈구를 최종적으로 10㎖ HBSS중에 재구성한 후, 용액 0.5㎖(약 20 Ci)를 들쥐에게 한 마리씩 주사한다.
다람쥐 원숭이에서의 단백질-손실 위질환
이론적 근거
단백질-손실 위질환(GI관내에 순환하는 세포 및 혈장 단백질이 존재하는 것을 의미한다)은 표준적인 비-스테로이드성 항-염증 약물(NSAID) 투여를 제한하는 주요한 부작용이다. 이는51CrCl3용액의 정맥내 투여에 의해 수량화하여 평가할 수 있다. 이 동위원소 이온은 세포, 혈청 글로빈 및 세포의 내형질 망상체에 강력하게 결합할 수 있다. 따라서, 이 동위원소를 투여한 후 24시간 동안 수집한 배설물에 나타나는 방사능을 측정하면, 단백질-손실 위질환의 민감성 및 수량성 지수를 얻게 된다.
방법
수컷 다람쥐 원숭이 그룹(0.8 내지 1.4㎏)에 H2O 비히클중의 1% 메토셀 또는 5% Tween 80(매일 2회씩 3㎖/㎏)이거나 5일 동안 1 내지 100㎎/㎏씩 매일 2회씩 테스트 화합물을 강제로 투여한다. 최종으로 약물/비히클을 투여한 후 1시간이 지난후에51Cr(인산 완충액 식염수(PBS) 1㎖/㎏중에 5Ci/㎏)을 정맥내로 투여한 후, 대사 우리(metabolism cage)내에서 24시간 동안 배설물을 수집하고나서, 방출된51Cr을 감마 계측으로 측정한다. 최종적으로 약물을 투여한 후 1시간 및 8시간 이후의 정맥혈을 표본으로 하고, 약물의 혈장 농도를 RP-HPLC로 측정한다.
들쥐의 혈장 수준
들쥐에서의 Per Os 약력학
공정:
동물 보호에 관한 캐나다 위원회의 지침에 따라, 동물들을 수용, 사육 및 관리한다.
각각의 PO 혈액수준 연구를 하기 전에, 수컷 스프래그 돌리 들쥐(325-375g)를 밤새 단식시킨다.
들쥐를 한번에 한 마리씩 우리(restrainer)에 넣고, 상자를 단단히 잠근다. 쥐의 꼬리끝을 약간 칼로 그어서(1㎜ 이하), 제로(zero) 혈액 표본을 수득한다. 그리고 나서, 꼬리를 강하게 치면서, 부드럽게 위에서부터 아래쪽으로 피를 짜낸다. 약 1㎖의 피를 헤파린화한 배큐테이너(vacutainer)내에 수집한다.
표준 투여량인 10㎖/㎏의 화합물을 요구하는 바와 같이 제조한 후, 16 게이지, 3" 주사바늘을 위로 밀어넣음으로써 구강내로 투입한다.
이후의 출혈에서는 꼬리를 다시 칼로 긋는 것을 제외하고는, 제로 출혈과 같은 방식으로 한다. 꼬리를 거어즈를 사용하여 깨끗이 한 후, 적절히 표지되어 있는 시험관내에 상기한 바와 같이 수집한다.
표본을 만든 직후, 혈액을 원심분리, 분리, 분명하게 표지되어 있는 병에 넣은 후, 분석이 끝날 때까지 냉장고 내에 저장한다.
PO 투여 이후의 들쥐의 혈액 수준을 측정하기 위한 통상적인 시각은 하기와 같다:
0, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간.
출혈후 4시간이 지난 후, 들쥐에게 음식을 마음껏 먹을 수 있도록 제공한다. 물은 연구를 하는 동안 계속 제공된다.
비히클:
하기의 비히클은 들쥐의 PO 혈액 수준 측정에 사용할 수 있다:
PEG 200/300/400 - 2㎖/㎏에 한정된다.
메토셀(Methocel) 0.5% - 1.0% 10㎖/㎏
Tween 80 5% 10㎖/㎏
PO 혈액 수준을 측정하기 위한 화합물은 현탁액 형태일 수 있다. 용해가 더잘 되도록 하기 위해서, 이 용액을 약 5분간 초음파기에 놓아둘 수 있다.
들쥐에서의 정맥내 약력학
공정:
동물 보호에 관한 캐나다 위원회의 지침에 따라, 동물들을 수용, 사육 및 관리한다.
수컷 스프래그 돌리 들쥐(325-375g)를 매달려 있는 바닥, 뚜껑, 물병 및 음식을 갖춘 플래스틱 신발 상자내에 놓아 둔다.
표준 투여량인 1㎖/㎏의 화합물을 제조한다.
제로(zero)혈액표본을 얻기 위해 들쥐를 출혈시킨 후, CO2질식상태에서 투여한다. 이 들쥐를 프라임된 CO2실에 한 번에 한 마리씩 넣은 후, 정위 반사(righting reflex)를 잃게 되면 바로 꺼낸다. 그리고 나서, 이 들쥐를 구속판(restraining board) 위에 올려놓고, CO2를 전달하는 노즈콘(nose cone)을 비구부(muzzle)에 놓고서, 고무로 들쥐를 판에 결박한다. 집게 및 가위를 사용하여, 경정맥을 노출시킨 후, 제로 표본을 수득한 후, 일정량의 화합물을 경정맥내로 주사한다. 주사 부위를 가볍게 손으로 누른 후, 노즈콘을 제거한다. 시간을 기록해 둔다. 이것이 제로 시각이 된다.
꼬리 끝부분을 약간 칼로 그어서(1-2㎜), 5분간 출혈케 한다. 그리고 나서, 꼬리를 강하게 치면서, 부드럽게 위에서부터 아래쪽으로 피를 짜낸다. 약 1㎖의 피를 헤파린화한 수집병내에 모은다.
이후의 출혈에서는 꼬리를 다시 칼로 긋는 것을 제외하고는, 제로 출혈과 마찬가지로 한다. 꼬리를 거어즈를 사용하여 깨끗이 한 후, 적절히 표지되어 있는 시험관내에 상기한 바와 같이 수집한다.
I.V. 투여 이후의 들쥐의 혈액 수준을 측정하기 위한 통상적인 시각은 하기와 같다:
0, 5분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 6시간
또는 0, 5분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간.
비히클:
하기의 비히클은 들쥐의 IV 혈액수준 측정에 사용될 수 있다:
덱스트로스: 1㎖/㎏
몰레큐솔 25%: 1㎖/㎏
DMSO: (디메틸설폭사이드)투여량은 동물 1개체당 0.1㎖으로 한정된다.
PEG 200: 60%이하(40% 멸균수와 혼합되어 있다) - 1㎖/㎏
용액이 혼탁한 경우, 이탄산나트륨 또는 탄산나트륨을 덱스트로스와 함께 첨가할 수 있다.
분석을 위해, 부분표본을 동일 용적의 아세토니트릴로 희석시킨 후, 원심분리를 하여 단백질 침강물을 제거한다. 상층액을 직접 C-18 HPLC 칼럼상에 주입하여, UV 검출을 한다. 알고 있는 약물량을 투여한 혈액 표본에 대한 상대적인 수량을 알아본다. 생체이용률(F)은 p.o.에 대한 i.v.의 곡선 아래의 면적(AUC)을 비교하여 측정할 수 있다.
F= × ×100%
제거율(clearance rate)은 하기의 관계식으로부터 계산된다:
Cl=
Cl의 단위는 ㎖/hㆍ㎏(밀리리터/시간ㆍ킬로그램)이다.
대표적인 생물학적 데이타
본 발명의 화합물은 COX-2 억제제의 약물 전구체이며, 따라서 상기에서 기술한 여러 가지의 COX-2-매개성 질환의 치료에 유용하다. 이 화합물이 활성을 나타내는 COX-2 억제제로 전환되는 정도에 대해서는 하기에서 보여주고 있는 대표적인 결과에서 볼 수 있다. 들쥐를 상기의 약물 전구체 20㎎/㎏을 구강내로 투여한 경우의 혈장 수준은 활성을 나타내는 COX-2 억제제의 최다 혈장 농도를 나타낸다.
예 혈장 수준(μM)*
1 1.0
*상기의 약물 전구체 20㎎/㎏을 구강내로 투여한 경우, 들쥐에서 관측되는 락톤의 최대 혈장 농도
본 발명은 하기의 실시예를 통해 예시될 것이며, 이에 제한되지는 않는다. 여기서, 다른 말이 없는 경우는 하기와 같다:
(ⅰ) 모든 반응은 실온 또는 주위 온도, 즉 18-25℃에서 수행된다;
(ⅱ) 용매의 증발은 욕조 온도(최상 60℃까지) 및 감압하에서(600-4000 파스칼: 4.5-30㎜Hg) 회전 증발기를 사용하여 수행한다;
(ⅲ) 일련의 반응 과정후에는 박층 크로마토그래피(TLC)를 하며, 반응 시간은 예시를 위한 목적으로 주어진 것이다;
(ⅳ) 융점은 결함이 있으며, 'd'는 분해를 의미한다; 융점은 상기에서 기술한 바와 같이 제조된 물질의 융점이다; 동질 이상(polymorphism)으로 인해 몇 몇 제제에서는 상이한 융점을 갖는 물질들이 분리된다;
(ⅴ) 모든 최종 산물의 구조 및 순도는 하기에서 보여주고 있는 기술중 하나 이상을 이용하여 확인한다:
TLC, 질량분석계측, 핵자기공명(NMR)계측 또는 미소분석 데이터;
(ⅵ) 수율은 예시를 위한 목적으로 주어진 것이다;
(ⅶ) NMR 데이터가 주어진 경우, 이 데이타는 내부 표준으로서의 테트라메틸실란(TMS)에 대한 상대적인 값으로서 주요 진단용 양자에 대한 델타(δ)수치의 형태로 되어 있다(여기서, ppm 형태로 되어 있으며, 지적한 용매를 사용하여 300 또는 400MHz에서 측정한다); 신호로 통상 사용되는 약어는 다음과 같다: s는 단일; d는 이중; t는 3중; m은 다중; br은 광범위 등: "Ar"은 방향족을 의미한다;
(ⅷ) 화학적 부호는 통상의 의미를 갖는다; 하기의 약어들은 다음과 같다: v(용적), w(체중), b.p.(비등점), M.P.(융점), L(리터), mL(밀리리터), g(그램), mg(밀리그램), mol(몰), mmol(밀리몰), eq(등가).
실시예 1
(E)-3-(4-메틸설포닐)페닐-2-페닐부트-2-에노산 메틸 에스테르
단계 1: 2-메톡시-3-(4-메틸티오)페닐-2-페닐부타논산 메틸 에스테르
-78℃로 냉각한 CH2Cl2100mL중의 1-(1,1-디메톡시에틸)-4-메틸티오벤젠(2.9g, 13.7mmol) 용액에 TiCl4(13.7mL, CH2Cl2중에 1M)용액을 적가한 후, (2,2-비스트리메틸실릴옥시비닐)벤젠(4.6g, 16.4mmol, Ainsworth, J. Organomet. Chem. 1972. 46, 73에 기술되어 있는 공정에 따라 제조한다)을 첨가한다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2시간 동안 교반한 후, pH 7인 완충 용액(60mL, NaH2PO4/Na2HPO4)으로 완화시킨다. 이 혼합물을 CH2Cl23×50mL로 추출한다. 이 추출물을 결합시킨 후, MgSO4상에서 건조시켜서 농축시킨다. 잔류물은 에테르 50mL중에 용해시킨 후, 과량의 에테르 중의 CH2Cl2용액으로 처리한다. 에테르를 증발시켜서, 부분입체이성질체 혼합물로서의 본 실시예 명칭의 조(crude) 화합물을 수득한다.
단계 2: (E) 및 (Z)-3-(4-메틸설포닐)페닐-2-페닐부트-2-에노산 메틸 에스테르
단계 1의 조생산물(0.62g)을 MeOH 10mL중에 용해시킨 후, 0℃로 냉각시킨다. 옥손 용액(4.0mL, 물 중의 0.75M)을 적가한 후, 이 혼합물을 0℃에서 10분간 교반하고나서, 2시간 동안 실온에서 교반한다. 그리고 나서, 이 혼합물을 물(10mL)로 희석시킨 후, CH2Cl23×20mL로 추출한다. 추출물을 결합시킨 후, MgSO4상에서 건조시켜서 농축시킨다. 잔류물은 CH3CN(10mL)중에 용해시킨 후, DBU(0.51mL)로 처리한다. 그리고 나서, 혼합물을 가열하여 22시간 동안 환류시킨 후, 실온으로 냉각시킨다. 이 용매는 증발시키고, 잔류물은 실리카 젤 크로마토그래피로 정제한다. 9:1 헥산/EtOAc를 이용한 용출로 목적하는 백색 고체인 E-이성체(0.25g)을 수득한다.
1H NMR (400 MHz, CDC14) δ 7.69 (2H, d), 7.20 (2H, d), 7.11 (3H, m), 6.96 (2H, m), 3.78 (3H, s), 2.97 (3H, s), 2.34 (3H, s).
4:1 헥산/EtOAc를 이용한 연속 용출로 백색 고체의 Z-이성체(0.35g)을 수득한다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.92 (2H, d), 7.48 (2H, d), 7.41 (2H, m), 7.33 (3H, m), 3.44 (3H, s), 3.07 (3H, s), 2.01 (3H, s).
실시예 2
(E-)3-(4-메틸설포닐)페닐-2-페닐부트-2-에노산
(E-)3-(4-메틸설포닐)페닐-2-페닐-부트-2-에노산 메틸 에스테르(258mg), 디옥산 5mL 및 물 5mL중의 LiOHㆍH2O(98mg)의 혼합물을 가열하여 2시간 동안 환류시킨다. 그리고 나서, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 1N HCl로 pH~1까지 산성화시키고나서, EtOAc 50mL로 추출한다. EtOAc층을 Na2SO4상에서 건조시켜서 농축시킨다. 1:1 헥산/EtOAc로부터의 결정화를 통해, 본 실시예 명칭의 백색 고체의 산(200mg)을 수득한다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (2H, d), 7.19 (2H, d), 7.13 (3H, m), 6.98 (2H, m), 2.97 (3H, s), 2.47 (3H, s).
실시예 3
(E)-2-(4-플루오로페닐)-3-(4-메틸설포닐)페닐-부트-2-에노산 메틸 에스테르
1H NMR(400MHz, 아세톤-d6) δ 7.76 (2H, d), 7.36 (2H, d), 7.06 (2H, m), 6.90 (2H, m), 3.76 (3H, s), 3.05 (3H, s), 2.36 (3H, s).
실시예 4
(E)-3-(4-메틸설포닐)페닐-1-모르폴린-4-일-2-페닐부트-2-엔-1-온
본 명칭의 화합물은 방법 C에서 설명한 공정에 따라 제조한다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.73 (2H, d), 7.28 (2H, d), 7.13 (3H, m), 7.01 (2H, m), 3.72 (2H, m), 3.64 (2H, m), 3.42 (4H, bs), 3.00 (3H, s), 2.21 (3H, s).
실시예 5
(E)-4-메톡시-3-(4-메틸설포닐페닐)-2-페닐부테논산
본 명칭의 화합물은 방법 D에서 설명한 공정에 따라 제조한다.
1H NMR (400 MHz, 아세톤-d6) δ 7.75 (2H, m), 7.42 (2H, d), 7.15 (5H, m), 4.55 (2H, s), 3.30 (3H, s), 3.05 (3H, s).

Claims (17)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염
    화학식 I
    상기 식에 있어서,
    X는 (a) CH2OH,
    (b) CHO,
    (c) CO2R4또는
    (d) CONR4 2이고;
    Y는 (a) CH3또는
    (b) CH2OR5이고;
    R1은 (a) S(O)2CH3,
    (b) S(O)2NH2,
    (c) S(O)2NHC(O)CF3,
    (d) S(O)(NH)CH3,
    (e) S(O)(NH)NH2,
    (f) S(O)(NH)NHC(O)CF3,
    (g) P(O)(CH3)OH 및
    (h) P(O)(CH3)NH2로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
    R2및 R3는 (a) 수소,
    (b) 할로,
    (c) C1-6알콕시,
    (d) C1-6알킬티오,
    (e) CN,
    (f) CF3,
    (g) C1-6알킬 및
    (h) N3로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
    R4는 (a) 수소,
    (b) C1-6알킬 및
    (c) 일치환 또는 이치환된 벤질｛여기서, 치환기는 하기로부터 선택된 다:
    (1) 수소,
    (2) 할로,
    (3) C1-6알킬,
    (4) C1-6알콕시,
    (5) C1-6알킬티오,
    (6) OH,
    (7) CN 및
    (8) CF3}로 구성되는 그룹중에서 선택되거나,
    또는 동일한 질소 원자에 결합한 2개의 R4그룹은 산소 내지 황 또는 질소 원자를 추가로 함유하거나, 함유하지 않는 5,6 또는 7-원 포화 고리를 형성할 수 있다(이 때, 상기 질소 원자는 수소 또는 C1-6알킬로 치 환된다);
    R5는 (a) C1-6알킬,
    (b) 일치환 또는 이치환된 벤질｛여기서, 치환기는 하기로부터 선택된 다:
    (1) 수소,
    (2) 할로,
    (3) C1-6알킬,
    (4) C1-6알콕시,
    (5) C1-6알킬티오,
    (6) OH,
    (7) CN,
    (8) CF3및
    (9) CO2R4}로 구성되는 그룹중에서 선택된다.
  2. 제1항에 있어서, Y가 CH3또는 CH2OC1-6알킬인 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항에 있어서,
    Y는 CH3또는 CH2OC1-6알킬이고;
    R1은 (a) S(O)2CH3,
    (b) S(O)2NH2,
    (c) S(O)2NHC(O)CF3,
    (d) S(O)(NH)CH3,
    (e) S(O)(NH)NH2및
    (f) S(O)(NH)NHC(O)CF3으로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
    R2및 R3는 (a) 수소,
    (b) 불소, 염소 및 브롬,
    (c) C1-4알콕시,
    (d) C1-4알킬티오,
    (e) CN,
    (f) CF3및
    (g) C1-4알킬로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  4. 제3항에 있어서,
    R2및 R3는 (1) 수소 및
    (2) 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
    R4는 수소 또는 메틸이고;
    R5는 C1-6알킬인 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  5. 제4항에 있어서,
    R1은 (a) S(O)2CH3및
    (b) S(O)2NH2으로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
    R2및 R3는 (1) 수소 및
    (2) 불소, 염소 및 브롬으로 구성되는 그룹중에서 선택된 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되는 화합물 또는 이 의 약제학적으로 허용가능한 염.
  6. 제1항에 있어서, X가 CO2R4인 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  7. 제6항에 있어서,
    X는 CO2R4이고;
    Y는 메틸 또는 CH2OR5이고;
    R1은 S(O)2CH3이고;
    R2및 R3는 (a) 수소 및
    (b) 할로로 구성되는 그룹중에서 각각 독립적으로 선택되고;
    R4는 (a) 수소 및
    (b) C1-6알킬로 구성되는 그룹중에서 선택되고;
    R5는 (a) C1-6알킬,
    (b) 일치환 또는 이치환된 벤질｛여기서, 치환기는 하기로부터 선택된 다:
    (1) 수소,
    (2) 할로,
    (3) C1-6알콕시 및
    (4) OH}로 구성되는 그룹중에서 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  8. 하기 화학식 Ia의 화합물.
    상기 식에 있어서,
  9. 하기 화학식 Ib의 화합물.
    상기 식에 있어서,
  10. 제1항에 있어서,
    (a) (E)-3-(4-메틸설포닐)페닐-2-페닐부트-2-에노산 메틸 에스테르,
    (b) (E)-3-(4-메틸설포닐)페닐-2-페닐부트-2-에노산,
    (c) (E)-2-(4-플루오로페닐)-3-(4-메틸설포닐)페닐-부트-2-에노산 메틸 에스테르,
    (d) (E)-3-(4-메틸설포닐)페닐-1-모르폴린-4-일-2-페닐부트-2-엔-1-온 및
    (e) (E)-4-메톡시-3-(4-메틸설포닐페닐)-2-페닐부테논산으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  11. 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 비-스테로이드성 항-염증제를 이용한 치료가 작용할 수 있는 염증성 질환을 치료하기 위한 약제학적 조성물.
  12. 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, COX-1 보다 COX-2를 선택적으로 억제하는 활성 제제에 의해 성공적으로 치료되는 사이클로옥시게나제-매개성 질환의 치료를 위한 약제학적 조성물.
  13. 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 제1항의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 치료를 필요로하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 비-스테로이드성 항-염증제 치료가 작용할 수 있는 염증성 질환의 치료 방법.
  14. 독성을 나타내지 않으면서 치료에 효과적인 양의 제1항의 화합물을 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, COX-1 보다 COX-2를 선택적으로 억제하는 활성 제제에 의해 성공적으로 치료되는 사이클로옥시게나제-매개성 질환의 치료 방법.
  15. 약제학적으로 허용가능한 담체와 결합되어 있으며, 허용가능하며 항-염증 작용을 나타내는 양의 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제6항, 제7항, 제8항, 제9항 또는 제10항에서 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 항-염증 약제학적 조성물.
  16. COX-1 보다 COX-2를 선택적으로 억제하는 제제에 의해 성공적으로 치료되는 사이클로옥시게나제-매개성 질환의 치료에 사용되는, 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제6항, 제7항, 제8항, 제9항 또는 제10항에서 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  17. 비-스테로이드성 항-염증제를 이용한 치료가 작용할 수 있는 염증성 질환 의 치료를 위한 약제의 제조에 사용되는, 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제6항, 제7항, 제8항, 제9항 또는 제10항에서 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도.
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