KR19990067596A - 단백질 키나아제 c 억제제 - Google Patents

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로리 에이. 리차드슨
레오날드 엘. 쥬니어 위너로스키
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피터 지. 스트링거
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Abstract

본 발명은 하기 일반식 Ia의 신규한 비스-인돌릴말레이미드 마크로사이클 유도체 및 그의 용매화물을 제공한다. 본 발명은 또한 그의 제조 방법, 제약학적 제제 및 포유 동물에서 단백질 키나아제 C를 억제하는데 사용하는 방법을 제공한다.
<화학식 1a>

Description

단백질 키나아제 Ｃ 억제제
단백질 키나아제 C(PKC)는 세린/트레오닌 키나아제로서 작용하는 밀접히 관련된 효소들의 군으로 이루어져 있다. 단백질 키나아제 C는 세포-세포 신호, 유전자 발현에서, 그리고 세포 분화 및 생장을 조절함에 있어서 중요한 역할을 한다. 현재, 조직 분포, 효소 특이성 및 규칙이 다른 PKC의 효소가 10 개 이상 공지되어 있다(니시주카 와이(Nishizuka Y.)Annu. Rev. Biochem. 58: 31-44 (1989); 니시주카 와이.Science 258: 607-614 (1992) 참조).
단백질 키나아제 C 효소들은 길이가 592 내지 737 아미노산 범위인 단일 폴리펩티드 사슬이다. 이들 효소들은 연결기 펩티드에 의해 연결된 제어 도메인과 촉매 도메인을 함유한다. 제어 도메인과 촉매 도메인은 항상성 영역과 가변성 영역으로 더 세분될 수 있다. 단백질 키나아제 C의 촉매 도메인은 다른 단백질 키나아제에서 발견되는 것들과 매우 유사한 반면 제어 도메인은 PKC 효소에만 독특하다. PKC 효소들은 군 중에서 아미노 산 수준이 40 내지 80% 상동성인 것으로 나타난다. 그러나, 다른 종 들 간에서 단일 효소의 상동성은 일반적으로 97% 보다 크다.
단백질 키나아제 C는 막 인지질, 칼슘 및 포스포리파아제의 활성화에 의해 유리되는 디아실글리세롤과 같은 특정 막 지질을 포함하는 여러 인자에 의해 알로스테릭적으로 제어되는 막 관련 효소이다. (벨, 알.엠(Bell, R.M.)과 번스, 디.제이.(Burns, D.J.),J. Biol. Chem. 266: 4661-4664 (1991); 니시주카, 와이.Science 258: 607-614 (1992)를 참조). 단백질 키나아제 C 효소, 알파(α), 베타(β)-1, 베타(β)-2 및 감마(γ)는 완전한 활성화를 위해 막 인지질, 칼슘 및 디아실글리세롤/포르볼 에스테르를 필요로 한다. PKC의 델타(δ), 입실론(ε), 에타(η) 및 세타(θ) 형태는 활성화 방식에서 칼슘에 대해 독립적이다. PKC의 제타(ζ) 및 람다(λ) 형태는 칼슘과 디아실글리세롤 모두에 독립적이고 활성화를 위해 막인지질만을 요하는 것으로 생각된다.
단백질 키나아제 C 효소 중 하나 또는 두 개 만이 주어진 질병 상태에 관여할 수 있다. 예를 들면, 당뇨병에서 발견되는 상승된 혈당 수준은 혈관 조직에서 베타-2 효소의 효소 특이적 상승을 초래한다(이노구치(Inoguchi) 등,Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 11059-11065 (1992)를 참조). 당뇨병과 관련되어 사람 혈소판 중의 베타 효소가 상승하는 것은 그들의 작동제에 대한 반응이 변화된 것과 상호관련이 있다(바스티르 3세, 디.제이.(Bastyr III, E.J.)와 루, 제이.(Lu, J.)Diabets 42: (Suppl. 1) 97A (1993)을 참조). 사람 비타민 D 수용체는 단백질 키나아제 C 베타에 의해 선택적으로 포스포릴화되는 것으로 밝혀졌다. 이러한 포스포릴화는 수용체의 기능을 변화시키는 것과 관련이 있다(흐시에(Hsieh) 등),Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 9315-9319 (1991); 흐시에 등,J. Biol. Chem. 268: 15118-15126 (1993)을 참조). 그밖에, 최근의 연구에 따르면 베타-2 효소는 적백혈병 세포 증식에 관련이 있고 알파 효소는 같은 세포 중에서 거핵구 분화에 포함되는 것으로 밝혀졌다(머레이(Murray) 등,J. Biol. Chem. 268: 15847-15853 (1993)을 참조).
단백질 키나아제 C 효소의 편재하는 특성 및 생리학적으로 중요한 그들의 역할은 매우 선택적인 PKC 억제제를 생성하는데 동기를 제공한다. 특정 효소와 질병 상태 간의 관련성을 증명하는 증거가 제공되면, 다른 PKC 효소 및 다른 단백질 키나아제에 대해 하나 또는 두 개의 단백질 키나아제 C 효소에 선택적인 억제제 화합물을 탁월한 치료제로 추정해 볼 수 있다. 이들 화합물들은 그들의 특이성으로 인해 큰 효능과 낮은 독성을 보인다.
일군의 N,N'-브릿징 비스인돌릴말레이미드가 1995년 6월 14일 공고된 히쓰(Heath) 등의 EP 0 657 458(U.S.S.N. 08/413,735)에 개시되어 있다. 이들 N,N'-브릿징된 화합물들 중 바람직한 것은 하기 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명은 신규하고 강력한 상기 화학식 I 화합물의 염 형태를 제공한다. 놀랍게도 청구된 염 형태의 용해도가 개선되었고 환자에 대한 생체이용률이 크게 개선되었다. 또한 본 발명의 염은 결정질 형태로 쉽게 제조되고 정제될 수 있다. 따라서 청구된 염은 제약학적으로 외관이 우수하고 개선된 치료제이다. 청구된 염은 당뇨증 및 그의 합병증 관련 증상, 허혈, 염증, 중추 신경계 질환, 심장혈관계 질환, 피부 질환 및 암을 치료하는데 유용하다.
본 발명은 상기 화학식 I의 화합물의 메실레이트 염을 제공한다. 그리하여, 본 발명은 하기 화학식 Ia의 화합물 및 그의 용매화물을 제공한다.
본 발명의 다른 양면은 화학식 Ia의 화합물의 제약학적 유효량을 단백질 키나아제 C의 억제를 요하는 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는 단백질 키나아제 C의 억제 방법이다. 본 발명은 또한 단백질 키나아제 C가 참여하는 것으로 입증된 허혈, 염증, 중추 신경계 질환, 심장혈관계 질환, 피부 질환 및 암과 같은 병변의 증상을 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 상기 치료를 요하는 포유동물에게 화학식 Ia의 화합물의 제약학적 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 특히 미세혈관 당뇨 합병증, 특히 당뇨병 망막증, 신장병 및 신경 장해를 치료하는데 약제로서 유용하다. 그러므로, 본 발명은 또한 당뇨증 및 그의 합병증을 치료하는 방법을 제공한며, 이 방법은 상기 치료를 요하는 포유동물에게 화학식 Ia의 화합물의 제약학적 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명의 마지막 양면은 화학식 Ia의 화합물과 함께 제약학적으로 허용되는 1 종 이상의 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 제약학적 제제이다.
본원에 개시되고 청구된 본 발명의 목적을 위해 하기 용어 및 약어는 다음과 같이 정의한다.
본원에서 용어 "제약학적 유효량"은 포유동물에서 PKC 활성을 억제할 수 있는 화합물의 양을 나타낸다. 본 발명에 따라 투여되는 화합물의 구체적인 투여량은 물론 투여되는 화합물, 투여 경로, 치료하려는 특정 증상 및 유사한 연구를 포함하는 구체적인 주변 상황에 의해 결정될 것이다. 화합물은 경구, 직장, 경피, 피하, 국부, 혈관내, 근육내 또는 비강내 경로를 포함하는 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 화합물은 경구 투여하는 것이 바람직하다. 상기 지적된 모든 투여에 대해 대표적인 1일 투여량은 본 발명의 활성 화합물을 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 20 ㎎/㎏ 함유할 것이다. 1일 투여량이 약 0.01 내지 약 10 ㎎/㎏인 것이 바람직하고, 1 ㎎/㎏ 미만인 것이 보다 바람직하고, 약 0.05 내지 약 0.5 ㎎/㎏인 것이 가장 바람직하다.
본원에서 용어 "치료하다"는 질환, 증상 또는 질병을 제거하기 위해 환자를 관리하고 보호하는 것을 나타내며 본 발명의 화합물을 투여하여 증후 또는 합병증의 개시를 막거나, 증상 또는 합병증을 완화하거나, 질환, 증상 또는 질병을 소멸시키는 것을 포함한다.
본원에서 용어 "전체 관련 물질"은 최종 생성물 중의 불순물의 상대량을 나타낸다. 불순물은 업스트림 반응 중간체 또는 최종 생성물 중의 원치 않는 반응 부산물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 전체 관련 물질은 순도의 척도이다.
앞서 지적한 바와 같이 본 발명은 단백질 키나아제 C를 선택적으로 억제하는 하기 화학식 Ia의 화합물 및 그의 용매화물을 제공한다.
<화학식 Ia>
화학식 Ia의 화합물은 물(수화물), 메탄올, 에탄올, 디메틸포름아미드, 에틸 아세테이트 등과 같은 용매화물로서 존재할 수 있다. 이러한 수화물 및 용매화물의 혼합물이 또한 제조될 수 있다. 이러한 수화물 및(또는) 용매화물은 결정화의 용매로부터 유래되거나 또는 제조 또는 결정화의 용매 중에 고유하거나 또는 상기 용매에 대해 우생일 수 있다. 상기 수화물 및 용매화물은 본 발명의 범위 내 포함된다. 화학식 Ia의 화합물은 일수화물 또는 삼수화물로서 제조하는 것이 바람직하다.
화학식 Ia의 화합물의 여러 입체 이성질체 형태가 존재할 수 있음이 인정된다. 바람직한 본 발명의 화합물은 하기 화학식 Ib 및 Ic를 갖는 것이다.
그러나, 이들의 라세미체 및 개개의 에난티오머 및 혼합물이 본 발명을 구성한다.
자유 염기인 화학식 I의 제조는 1995년 6월 14일 EP 0 657 458로 공고된 히쓰의 EP 0657 458(본원에 참조 문헌으로 인용됨)에 기재되어 있다. 화합물은 하기와 같이 제조하는 것이 바람직하다.
상기 식에서 R1은 O메실 또는 Br이다. P1은 히드록시 보호기이며, t-부틸디페닐실릴옥시(TBDPS), t-부틸디메틸실릴옥시(TBDMS), 트리페닐메틸(트리틸), 모노- 또는 디-메톡시트리틸 또는 알킬 또는 아릴 에스테르가 바람직하다. L은 클로로, 브로모, 요도, 메실, 토실 등과 같은 우수한 이탈기이다. L은 O-메실 또는 Br이 바람직하다.
화합물 IV를 형성하는 반응은 N-치환 인돌을 제조하는 임의의 공지된 방법에 의해 실시된다. 반응은 통상적으로 대략 동몰량의 반응물 II와 III을 포함하지만, 특히 알킬화제가 과량으로 존재하는 다른 비율도 작업가능하다. 반응은 알칼리 금속 염 또는 당 분야에서 인정된 다른 알킬화 조건을 사용하여 극성 비양성자성 용매 중에서 수행하는 것이 가장 좋다. 반응 조건은 하기를 포함한다: 디메틸포름아미드 또는 테트라히드로푸란 중의 칼륨 헥사메틸디실라지드, 디메틸포름아미드 중의 수소화 나트륨. 반응은 아세토니트릴 또는 디메틸포름아미드(DMF) 중에서 탄산세슘을 서서히 역첨가하면서 수행하는 것이 바람직하다. 반응의 온도는 약 주변 온도 내지 반응 혼합물의 환류 온도가 바람직하다.
화합물 IV는 당분야에서 인정된 히드록시 탈보호 기술에 의해 화합물 V로 전환시킨다. 화합물 V를 질소 하에 THF 또는 메틸렌 클로라이드 중에서 메탄술폰산 무수물 및 피리딘과 반응시키거나 또는 알콜을 메틸렌 클로라이드, THF 또는 아세토니트릴 또는 다른 적합한 용매 중에서 트리페닐 포스핀 또는 트리페닐 포스파이트 및 피리딘 존재하에 브롬과 반응시켜 화합물 VI로 전환시키는 것이 편리하다. 화합물 VI는 DMF, THF/물, 디메틸아세트아미드와 같은 극성 용매 중에서 또는 다른 당분야에서 인정된 조건 하에서 디메틸아민과 반응시켜 화합물 I인 디메틸아민으로 전환시킨다.
청구된 메실레이트 염은 화학식 I의 화합물을 비반응성 유기 용매, 바람직하게는 유기/물 혼합물, 가장 바람직하게는 물-아세톤 중에서 메탄술폰산과 반응시켜 제조한다. 다른 용매, 예컨데, 메탄올, 아세톤, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물이 작업가능하다. 용매 대 물의 비율은 중요하지 않으며 일반적으로 반응물의 용해도에 의해 결정한다. 용매 대 물의 비율은 일반적으로 0.1:1 내지 100:1(부피비)이 바람직하다. 비율은 1:1 내지 20:1이 더 바람직하고, 5:1 내지 10:1이 가장 바람직하다. 최적의 비율은 선택되는 용매에 좌우되고 아세톤 대 물의 비율이 9:1인 용매가 바람직하다. 반응은 통상적으로 거의 동몰량의 두 개 반응물을 포함하지만, 특히 메탄술폰산이 과량으로 존재하는 다른 비율은 작업가능하다. 메탄술폰산의 첨가 속도는 반응에 있어서 중요하지 않으며 신속하게(< 5분) 또는 서서히(6 시간 이상에 걸쳐) 첨가할 수 있다. 반응은 0℃ 내지 환류 범위의 온도에서 수행한다. 반응은 X-선 분말 회절에 의해 결정하여 염의 형성이 완결될 때까지 교반하며 5 분 내지 12 시간이 소요될 수 있다. 본 발명의 염은 결정질 형태로 제조되는 것이 바람직하고 용이하다. 염의 삼수화물 형태는 건조시키거나 20 내지 60% 상대 습도에 노출시켜 일수화물로 쉽게 전환시킬 수 있다. 이 염은 실질적으로 한정된 융점, 복굴절 및 X-선 회절 패턴을 보이는 결정질이다. 일반적으로, 이 결정은 10% 미만의 무정형 고체를 가지며, 바람직하게는 5% 미만, 가장 바람직하게는 1% 미만의 무정형 고체를 갖는다.
메실레이트 염은 여과 또는 당분야에 인정된 다른 분리 기술에 의해 반응 혼합물로부터 50% 내지 100%의 수율로 직접 단리된다. 원한다면 당분야에 공지되어 있는 재결정화 및 다른 정제 기술을 사용하여 염을 추가 정제할 수 있다.
하기 실시예 및 제조예는 본 발명을 단지 더 예시하기 위해 제공되었다. 본 발명의 범위는 단지 하기 실시예만으로 이루어진 것으로 해석되어서는 안된다. 하기 실시예 및 제조예에서, 융점, 핵자기 공명 스펙트럼, 질량 스펙트럼, 실리카 겔 상 고압 액체 크로마토그래피, N,N-디메틸포름아미드, 탄소상 팔라듐, 테트라히드로푸란 및 에틸 아세테이트는 각각 M.Pt., NMR, MS, HPLC, DMF, Pd/C, THF 및 EtOAc로 간략하게 기재하였다. 용어 "NMR" 및 "MS"는 스펙트럼이 원하는 구조와 일치함을 나타낸다.
제조예 1
3-(2-[(메틸술포닐)옥시]에톡시]-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올 메탄 술포네이트
트리틸 클로라이드(175.2 g, 0.616 몰)을 N2하에 CH2Cl2500 ㎖ 중에 용해하였다. 트리에틸아민(71.9 g, 100 ㎖, 0.710 몰)을 첨가하고나서, R,S-글리시돌(50.0 g, 0.648 몰)을 첨가하고, 반응 용액을 4 시간 동안 온건하게 환류(42℃)fh 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각tlzl고 염화암모늄 포화 수용액 250 ㎖로 2회 그리고나서 염수 250 ㎖로 추출하였다. 수성층을 CH2Cl2100 ㎖로 역추출하고, 유기층을 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 트리틸-글리시돌 오일을 얻었으며, 이를 에탄올로부터 재결정화하여 트리틸-글리시돌 고체 104.4 g(54%)을 얻었다.
비닐마그네슘 브로마이드의 1 M THF 용액(50 ㎖, 50 밀리몰, 2.0 당량)을 N2하에 -20℃로 냉각시키고 요오드화 구리의 촉매량(0.24 g, 1.26 밀리몰, 0.05 당량)을 첨가하였다. 결과 얻어진 혼합물을 -20℃에서 5 분 동안 교반하고나서 건조 THF 40 ㎖ 중의 트리틸-글리시돌(7.91 g, 25.0 밀리몰)의 용액을 -20℃에서 15 분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 -20℃에서 3 시간 동안 교반하고나서 실온으로 가온시키고 15 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -30℃로 냉각시켜 켄칭시키고 염화암모늄 포화 수용액 125 ㎖를 서서히 첨가하였다. 결과 얻어진 혼합물을 에틸 아세테이트 200 ㎖로 추출하였다. 그리고나서 유기층을 탈이온수 125 ㎖ 중의 에틸렌디아민테트라아세트산, 이나트륨 염 이수화물 0.93 g(2.50 밀리몰, 0.1 당량)의 수용액으로 추출하여 임의의 금속을 제거하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 50 ㎖로 역추출하고, 유기층을 합하여 염수 100 ㎖로 세척하고 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 오일을 얻었으며 이를 실리카(76 g)을 통해 3/1의 헥산/에틸 아세테이트 1.2 ℓ를 사용하여 여과하였다. 여액을 진공 중에 증발시켜 1-0-(트리페닐메틸)-2-히드록시-펜타놀 9.07 g을 엷은 황색 오일(100%)로 얻었다.
광유(6.13 g, 0.153 몰, 1.5 당량) 중의 수소화나트륨의 60% 현탁액을 건조 THF 175 ㎖ 중에 현탁시키고 실온에서 첨가하였다. 결과 얻어진 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하고나서 새로 증류한 알릴 브로마이드 17.7 ㎖(0.204 밀리몰, 2.0 당량)을 주사기로 첨가하였다. 반응을 1 시간 동안 45℃로 가열하였다. 반응은 TLC 또는 HPLC로 추적할 수 있다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 염화 암모늄 포화수용액 400 ㎖를 서서히 첨가하여 과잉 염기를 켄칭시켰다. 결과 얻어진 혼합물을 에틸 아세테이트 800 ㎖로 추출하고, 유기층을 물 500 ㎖로 세척하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 100 로 역추출하고 유기층을 합하여 염수 200 ㎖로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 1,1',1"-[[[2-(2-프로페닐옥시)-4-펜테닐]옥시]메틸리딘]트리스[벤젠] 41.5 g(>100%)을 황색 오일로서 얻었다.
1,1',1"-[[[2-(2-프로페닐옥시)-4-펜테닐]옥시]메틸리딘]트리스[벤젠](39.3 g, 0.102 몰)을 무수 메틸 알콜 390 ㎖ 및 CH2Cl260 ㎖의 용액 중에 용해하고 점성 반응 용액을 통해 N2를 버블링시키면서 -50 내지 -40℃로 냉각시켰다. 그리고나서 -50 내지 -40℃에서 80 분 동안 반응이 엷은 청색으로 변할 때까지 반응 혼합물을 통해 오존을 버블링시켰다. 결과 얻어진 반응 혼합물을 N2하에 0℃로 가온하고 나서 반응 온도를 10℃ 이하로 유지하면서 에탄올 85 ㎖/ 물 85 ㎖ 중의 나트륨 보로하이드라이드(23.15 g, 0.612 몰, 6 당량)의 용액을 서서히 첨가하여 반응을 켄칭시켰다. 반응을 얼음 베쓰 내에서 30 분 동안 교반하고나서 실온으로 가온시키고 밤새 교반하였다. 온도는 가온하면 31℃로 올라갔다. 반응 혼합물을 염화암모늄 포화 수용액 400 ㎖로 희석하고 에틸 아세테이트 800 ㎖로 추출하였다. 유기층을 물 400 ㎖로 세척하고 수성층을 에틸 아세테이트 150 ㎖로 역추출하였다. 유기층을 합하고, 염수 200 ㎖로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 탁한 오일을 얻었다. 이 오일을 2/1의 헥산/에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 3번째 수확에서 3-(2-히드록시에톡시)-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올 28.9 g(72%)을 얻었다.
3-(2-히드록시에톡시)-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올(14.0 g, 35.7 밀리몰)을 CH2Cl2140 ㎖ 중에 용해시키고, N2하에 0℃로 냉각시키고, 트리에틸아민(10.8 g, 14.9 ㎖, 0.107 몰, 3.0 당량)을 첨가하였다. 그리고나서 메탄술포닐 클로라이드(11.0 g, 7.46 ㎖, 96.4 밀리몰, 2.7 당량)을 5℃ 미만에서 적가하였다. 결과 얻어진 반응 혼합물을 추가 CH2Cl2(300 ㎖)로 희석하고, 물 200 ㎖ 및 염화암모늄 포화 수용액 200 ㎖로 세척하였다. 수성층을 CH2Cl250 ㎖로 역추출하고, 합한 유기층을 염수 100 ㎖로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 3-(2-[(메틸술포닐)옥시]에톡시]-4-트리페닐메톡시)-1-부탄올 메탄 술포네이트 18.4 g(94%)를 백색 고체로 얻었다.
제조예 2
(S)-트리틸 글리시돌
트리틸 클로라이드(2866 g, 10.3 몰)을 N2하에 CH2Cl27 ℓ 중에 용해하였다. 트리에틸아민(1189 g, 1638 ㎖, 11.8 몰)을 적가하고나서, CH2Cl21ℓ를 헹굼액으로 사용하여 (R)-(+)-글리시돌(795.0 g, 10.6 몰)을 첨가하였다. 반응 용액을 3 내지 4 시간 동안 온건한 환류 하에(42℃) 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고나서 염수 3 ℓ를 cja가하였다. 유기층을 건조시키고(Na2SO4600 g), 진공 중에 증발시켜 오일의 표제 화합물을 얻고 이를 에탄올로부터 재결정화하여 표제 화합물 고체 2354 g(70%)를 얻었다.
제조예 3
(S)-3-[2-(메틸술포닐)옥시]에톡시]-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올 메탄술포네이트
비닐마그네슘 브로마이드(5.76 ℓ, 5.76 몰, 1.96 당량) 1M THF 용액을 N2하에서 -20℃로 냉각시키고 촉매량의 요오드화구리(28.2 g, 0.148 몰, 0.05 당량)을 첨가하였다. 결과 얻어진 혼합물을 -20℃에서 5 분 동안 교반하고나서 건조 THF 3.2 ℓ 중의 (S)-트리틸-글리시돌(929.0 g, 2.94 몰) 용액을 1.5 시간 동안 -20℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -20℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -30℃로 냉각시켜 반응을 켄칭시키고, 염화암모늄 포화수용액 5 ℓ를 서서히 첨가하였다. 그리고나서 유기층을 에틸렌디아민테트라아세트산, 이나트륨염 이수화물(EDTA)의 10 중량/부피% 용액 1 ℓ로 2 회 추출하여 임의의 금속을 제거하였다. 유기층을 염수 2 ℓ로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 오일로서 (S)-1-0-트리페닐메틸-4-히드록시펜탄올 1061 g(96%)를 얻었다.
광유 중의 수소화나트륨의 60% 현탁액을 N2하에 건조 THF 2.8 ℓ 중에 현탁시키고, 건조 THF 5.6 ℓ 중의 (S)-1-0-트리페닐메틸-4-히드록시펜탄올(1543 g, 4.48 몰) 용액을 실온에서 첨가하였다. 결과 얻어진 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하고나서 새로 증류한 알릴브로마이드 770 ㎖(8.89 몰, 2.0 당량)을 20 분에 걸쳐 첨가하였다. 반응을 1 내지 2 시간 동안 45℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 15 내지 20℃로 냉각시키고, 염화암모늄 포화수용액 2 ℓ를 서서히 첨가하여 과잉 염기를 켄칭시켰다. 결과 얻어진 혼합물을 에틸 아세테이트 1 ℓ 및 물 1 ℓ로 희석하고 유기층을 단리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 500 ㎖로 역추출하고, 합한 유기층을 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 황색 오일의 (S)-1,1',1"-[[[2-(2-프로페닐옥시)-4-펜테닐]옥시]메틸리딘]트리스[벤젠] 1867 g(98%)을 얻었다.
(S)-1,1'-2"-[[[2-(2-프로페닐옥시)-4-펜테닐]옥시]메틸리딘]트리스[벤젠](1281 g, 3.33 몰)을 무수 메틸알콜 4 ℓ 및 CH2Cl23.6 ℓ의 용액 중에 용해하고, 점성 반응 용액을 통해 N2를 버블링시키면서 -50 내지 -40℃로 냉각시켰다. 수단 III 지시제를 반응에 첨가하고 -50 내지 -35℃에서 13 시간 동안 반응이 복숭아색에서 밝은 녹/황색으로 변할 때까지 오존을 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 결과 얻어진 반응 혼합물을 N2하에 0℃로 가온하고나서 40 분에 걸쳐 2.5 ℓ 에탄올/2.5 ℓ 물 중의 나트륨 보로하이드라이드(754 g, 19.9 몰, 6 당량)의 용액에 서서히 첨가하면서 반응의 온도를 30℃ 이하로 유지하였다. 그리고나서 반응을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응은 HPLC에 의해 모니터링할 수 있다. 반응 혼합물을 10 내지 15℃로 냉각시키고 20℃ 미만에서 염화암모늄 포화수용액 4 ℓ에 서서히 첨가하였다. 그리고나서 켄칭된 반응 혼합물을 여과하고 고체를 CH2Cl23 ℓ로 세척하였다. 유기층을 단리하고 염화암모늄 포화수용액 3 ℓ로 세척하고 수성층을 CH2Cl21ℓ로 역추출하였다. 합한 유기층을 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 오일로서 (S)-3-(2-히드록시에톡시)-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올 1361 g(>100%)을 얻었다.
(S)-3-(2-히드록시에톡시)-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올(500 g, 1.27 몰)을 CH2Cl24.8 ℓ 중에 용해하고, N2하에 0℃로 냉각시키고, 트리에틸아민(386.4 g, 532 ㎖, 3.81 몰, 3.0 당량)을 첨가하였다. 염화메탄술포닐(396.3 g, 268 ㎖, 3.46 몰, 2.7 당량)을 5℃ 미만에서 30 분에 걸쳐 적가하였다. 결과 얻어진 반응 혼합물을 1 내지 2 시간 동안 0 내지 5℃에서 교반하고 HPLC에 의해 모니터링하였다. 반응 혼합물을 추가 CH2Cl2로 희석하고, 물 2 ℓ 및 염화암모늄 포화수용액 2 ℓ로 2회 세척하였다. 수성층을 CH2Cl21 ℓ로 역추출하고, 합한 유기층을 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 조고체를 얻고 이를 1/1의 헵탄/에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 3번째 수확에서 고체로서 (S)-3-[2-[(메틸술포닐)옥시]에톡시]-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올 메탄 술포네이트 615 g(99%)를 얻었다. NMR. MS.
제조예 4
3-[2-요도에톡시]-4-(트리페닐메톡시)-1-요도부탄
반응물 등급 아세톤 500 ㎖ 중의 3-(2-[(메틸술포닐)옥시]에톡시]-4-트리페닐메톡시)-1-부탄올 메탄 술포네이트(5.0 g, 9.10 밀리몰)의 용액을 중탄산나트륨(0.770 g, 0910 밀리몰, 0.1 당량) 및 요오드화나트륨(34.2 g, 0.228 몰, 25 당량)으로 처리하였다. 결과 얻어진 혼합물을 대략 16 시간 동안 N2하에 50℃에서 교반하였다. 이 반응은 HPLC로 모니터링할 수 있다. 아세톤을 반응 혼합물로부터 진공 중에 제거하고 결과 얻어진 고체를 에틸 아세테이트 300 ㎖/ 물 200 ㎖ 혼합물 내로 추출하였다. 유기층을 추가 물 200 ㎖로 세척하고, 합한 수성층을 추가 에틸 아세테이트 100 ㎖로 역추출하였다. 합한 유기층을 아황산나트륨 10% 수용액 200 ㎖(이 세척으로 황색이 제거됨), 염수 100 ㎖로 세척하고, 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 맑은 오일의 3-[2-요도에톡시]-4-(트리페닐메톡시)-요도부톤 5.45 g(98%)을 얻었다. MS. NMR.
제조예 5
(S)-10, 11, 14, 15-테트라히드로-13-[메탄술포닐옥시(메틸)]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H],[3,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3-디온
3,4-(비스)-(1H-인돌-3-일)-N-메틸말레미드(10.04 g, 29.4 밀리몰) 및 (S)-3-(2-요도에톡시)-4-(t-부틸디페닐실릴옥시)-1-요도부탄(17.9 g, 29.4 밀리몰)을 합하고 무수 DMF(80 ㎖) 중에 용해하였다. 용액을 N2하에 50℃에서 무수 DMF(1.7 ℓ) 중의 탄산세슘(38.3 g, 118 밀리몰)의 현탁액에 72 시간에 걸쳐 주사기 펌프를 통해 첨가하였다. DMF를 진공 중에 제거하였다. 잔류물을 CHCl3/1 N HCl에 분배하였다. 산성층을 클로로포름 및 에틸 아세테이트로 역추출하였다. 합한 유기층을 1 N HCl(1x), 물(2x), 염수(2x)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 환원시켜 자홍색 고체를 얻었다. 조 반응 혼합물을 추가 정제 없이 사용하였다.
조 반응 혼합물을 에탄올(700 ㎖) 중에 현탁시키고 5N KOH(800 ㎖)로 처리하였다. 반응 온도를 80℃로 올렸다. 72 시간 후 에탄올을 진공 중에 제거하고, 수성 현탁액을 0℃로 냉각시키고, 5N HCL로 산성화하였다. 보라색 침전물을 수집하여 에틸 아세테이트로 용출하면서 실리카 플러그를 통과시켰다. 용출물을 농축시켜 부분적으로 실릴화된 말레이미드를 자홍색 고체 8.7 g으로 얻고 이를 추가 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.
질소 하에 주변 온도에서 상기 무수물(8.7 g, 19.7 밀리몰)의 DMF 용액(1 ℓ)에 1,1,1,3,3,3-헥사메틸디실라잔(41.6 ㎖, 197 밀리몰) 및 메탄올(4 ㎖, 98.5 밀리몰)을 첨가하였다. 40 시간 후, 반응을 진공 중에 농축시키고, 2:1(부피/부피)의 MeCN/1N HCl 용액(100 ㎖)를 첨가하였다. 잔류물을 1 시간 동안 교반하였다. 유기 용매를 제거하고, 수성 현탁액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 용매를 제거하여 말레이미드 8.9 g을 얻고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
상기 말레이미드(8.9 g, 20 밀리몰)의 CH2Cl2(800 ㎖) 현탁액에 피리딘(4.85 ㎖, 60 밀리몰) 및 약간 과량의 메탄술폰산 무수물(4.21 ㎖, 24 밀리몰)을 첨가하였다. 16 시간 후, 반응 혼합물을 0.1N HCl, 염수로 세척하고, 유기층을 농축시켰다. 잔류물을 CH2Cl2중의 MeCN을 0에서 10%로 서서히 증가시키며 용출하여 실리카 플러그를 통과시켰다. 원하는 메실레이트를 함유한 용출 분획을 농축시켜 자색 고체의 표제 화합물 2.8 g을 얻었다. 이요오드화물로부터의 전체 수율은 18%였다. MS.
제조예 6
(S)-13-[(디메틸아미노)메틸]-10,11,14,15-테트라히드로-4,9:16-21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온
2,3-비스-(1H-인돌-3-일)-N-메틸말레이미드(114.7 g, 0.336 몰) 및 (S)-3-[2-[(메틸술포닐)옥시]에톡시]-4-(트리페닐메톡시)-1-부탄올 메탄 술포네이트(220.0 g, 0.401 몰, 1.2 당량)을 DMF 4.3 ℓ 중에 용해하였다. 그리고나서 이 반응물의 용액을 70 시간에 걸쳐 서서히 DMF 7 ℓ 중의 탄산세슘(437.8 g, 1.34 몰, 4.0 당량)의 50℃ 슬러리에 첨가하였다. 70 내지 72 시간 후에 반응을 냉각시키고, 여과하고, DMF를 진공 중에 제거하여 잔류물을 얻고 이를 CH2Cl24.6 ℓ 중에 용해하였다. 유기층을 1N HCl 수용액 1.15 ℓ로 추출하고나서 염수 4.6 ℓ로 추출하였다. 합한 수성층을 CH2Cl21.1 ℓ로 역추출하였다. 합한 유기층을 건조시키고(Na2SO4)로 건조시키고 여과하였다. 대부분의 용매를 진공 중에 제거하고, 결과 얻어진 용액을 추가 CH2Cl24 내지 5 갤론을 사용하여 실리카 겔 2 ㎏을 통해 여과하여 기본 물질을 제거하였다. 용매를 진공 중에 제거하고, 결과 얻어진 자주색 고체를 아세토니트릴 7 부피(조 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-2-메틸-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온의 중량 기준)에 분쇄하고 건조시킨 후 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-2-메틸-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 150.2 g(57%)를 얻었다(HPLC에 따른 순도 89%(표준 비교)).
(S)-10,11,14,15-테트라히드로-2-메틸-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온(32.7 g, 46.9 밀리몰)을 에탄올 1.6 ℓ 및 10N KOH 수용액 1.6 ℓ 중에 현탁시켰다. 결과 얻어진 혼합물을 온건한 환류(78℃)로 19 시간 동안 가열하였다. 대부분의 고체가 환류에 도달했을 때 용해되었다. 반응 용액을 10 내지 15℃로 냉각시키고, 10N HCl(1.2 ℓ)를 15℃ 미만에서 서서히 첨가하여 pH 1로 산성화하였다. 산성화하면 적색 슬러리가 전개되었다. 반응 혼합물을 C수성층Cl2500 ㎖로 희석하고 20 분 동안 교반하고 여과하여 대부분의 염을 제거하였다. 염을 추가 CH2Cl2(1.5 ℓ)로 세척하고, 여액을 물 1 ℓ로 2회 추출하였다. 합한 수성층을 CH2Cl21 ℓ로 역추출하고, 유기층을 건조시켰다(MgSO4). 용매를 진공 중에 제거하여 자색 고체의 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-13H-디벤조[E,K]푸로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3-디온 36.0 g(>100%)를 얻었다(HPLC 면적에 따른 순도 80%).
(S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-13H-디벤조[E,K]푸로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3-디온(36.0 g, 대략 46.9 밀리몰)을 N2하에 건조 DMF 320 ㎖ 중에 용해하고, 1,1,1,3,3,3-헥사메틸디실라잔(99 ㎖, 75.7 g, 0.469 몰, 10 당량) 및 메탄올(9.5 ㎖, 7.51 g, 0.235 몰, 5 당량)의 예비 혼합 용액으로 처리하였다. 결과 얻어진 용액을 7 시간 동안 45℃에서 가열하였다. 반응을 HPLC로 모니터링할 수 있다. 대부분의 DMF를 진공 중에 제거하고, 결과 얻어진 잔류물을 에틸 아세테이트 200 ㎖로 추출하고 물 200 ㎖로 그리고나서 5% LiCl 수용액 100 ㎖로 2회 세척하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 100 ㎖로 역추출하였다. 합한 유기층을 염화암모늄 포화수용액 200 ㎖로 세척하였다. 합한 유기층을 건조시키고(MgSO4), 진공 중에 증발시켜 자주색 고체의 조 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H;13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 35.9 g(>100%)를 얻었다.
(S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(트리페닐메톡시)메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H;13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온(34.0 g, 46.8 밀리몰)을 CH2Cl2350 ㎖ 중에 용해하고 N2하에 -25℃로 냉각시켰다. 무수 HCl 기체를 반응 용액을 통해 0℃ 미만에서 대략 1 내지 2 분 동안 버블링시켰다. 결과 얻어진 슬러리를 실온으로 가온시키고 1 시간 동안 교반하였다. 반응을 HPLC로 모니터링할 수 있다. 슬러리를 여과하고, 고체를 CH2Cl2200 ㎖로 세척하였다. 고체를 진공 중에 50℃의 오븐에서 건조시켜 자주색 고체의 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-(히드록시메틸)-4,9:16,21-디메테노-1H;13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 18.6 g(90%)를 얻었다(HPLC 면적에 따른 93% 순도).
THF 900 ㎖ 중의 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-(히드록시메틸)-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온(18.2 g, 41.2 밀리몰)의 현탁액을 피리딘(9.78 g, 10.0 ㎖, 0.124 밀리몰, 3 당량) 및 메탄술폰산 무수물(14.3 g, 80.4 밀리몰, 2 당량)으로 처리하고 N2하에 16 시간 동안 환류(67℃)로 가열하였다. 이 반응은 HPLC에 의해 모니터링할 수 있다. 그리고나서 반응을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 600 ㎖로 희석하고, 1N HCl 300 ㎖로 2회 및 물 600 ㎖로 1회 추출하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 300 ㎖로 역추출하고, 유기층을 건조시켰다(MgSO4). 용매를 진공 중에 제거하여 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(메틸술포닐)옥시]메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 19.0 g을 얻고 이를 뜨거운(40℃) CH2Cl2190 ㎖ 중에서 분쇄하고, 여과하고, 추가로 실온의 CH2Cl2100 ㎖로 세척하여 자주색 고체의 (S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(메틸술포닐)옥시]메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 17.3 g(81%)를 얻었다(HPLC 면적에 따른 96% 순도).
(S)-10,11,14,15-테트라히드로-13-[(메틸술포닐)옥시]메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온(9.50 g, 18.3 밀리몰)을 THF 475 ㎖ 중에 용해하고, 디메틸아민(0.173 몰, 75 당량)의 40% 수용액 172 ㎖를 첨가하고, 결과 얻어진 용액을 밀봉 반응기(8 내지 10 psi) 내 65℃에서 19 시간 동안 가열하였다. 반응을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 900 ㎖로 희석하고 유기층을 물 450 ㎖로 2회 및 염수 200 ㎖로 1회 추출하였다. 수성층을 추가 에틸 아세테이트 250 ㎖로 역추출하고 유기층을 건조시키고(MgSO4), 용매를 제거하여 (S)-13-[(디메틸아미도)메틸]-10,11,14,15-테트라히드로-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 7.82 g(91%)를 얻었다.
실시예 1
메실레이트 염
(S)-13-[(디메틸아미노)메틸]-10,11,14,15-테트라히드로-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온(3.0 g, 6.4 밀리몰)을 반응물 등급 아세톤 90 ㎖ 중에 현탁시켰다. 메탄술폰산(0.62 g, 1 당량)을 탈이온수 10 ㎖ 중에 용해하고 출발물질/아세톤 슬러리에 첨가하였다. 결과 얻어진 붉은 오렌지색 슬러리를 교반하고 행굼제로서 아세톤 25 ㎖를 사용하여 여과하고 건조시킨 후 메실레이트염 2.92 g(81%)를 얻었다. 헹굼을 포함하여 모든 절차는 실온에서 수행하였다.
실시예 2
모노/히드로클로라이드 염
(S)-13-[(디메틸아미노)메틸]-10,11,14,15-테트라히드로-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온(3.0 g, 6.4 밀리몰)을 메탄올 120 ㎖(1 당량) 중에 현탁시켜 그의 모노히드로클로라이드 염을 제조하였다. 1N HCl 수용액을 첨가하였다. 결과 얻어진 혼합물을 대략 16 시간 동안 교반하고 헹굼제로서 메탄올 25 ㎖를 사용하여 여과하였다. 결과 얻어진 염을 진공 오븐 내 50℃에서 밤새 건조시켜 HCl 염 2.65 g(82%)를 얻었다. 헹굼을 포함하여 모든 절차는 실온에서 수행하였다.
실시예 3 - 8
히드로클로라이드, 술페이트, 타르트레이트, 숙시네이트,
아세테이트 및 포스페이트 염
당 분야에서 인정된 기술에 의해 메탄올/물 용매 혼합물을 사용하여 히드로클로라이드, 술페이트, 타르트레이트, 숙시네이트, 아세테이트 및 포스페이트 염을 제조하였다. (S)-13-[(디메틸아미노)메틸]-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온의 메탄올 현탁액에 산 수용액을 첨가하여 각각의 염을 제조하였다.
가장 의외의 결과는 본 발명에서 청구된 염 형태의 용해도가 개선된 것이고, 가장 중요한 것은 환자에 대한 생체이용률이 극적으로 개선된 것이다. 본 발명의 염은 단일 결정질 형태로 쉽게 제조되며 불순물이 크게 줄었다. 하기 실시예들은 청구됨 염의 예상외의 특성 및 우수한 특성을 입증하는 비교 분석을 제공한다.
실시예 9
수율, 전체 관련 물질 및 잔류 용매의 비교
전체 관련 물질은 최종 생성물 내 불순물의 상대량을 나타내며 따라서 순도의 척도이다. 제조된 염에 있어서, 술페이트의 제조 중에 가장 높은 수율인 82%가 관찰되었고(표 I) 숙시네이트에 대해 가장 낮은 수율인 52%가 얻어졌다. 전체 관련 물질(TRS)이 각 염의 제조에서 감소되었지만, 메실레이트염의 제조에서 5.26%로 가장 크게 감소되었다. 히드로클로라이드 염이 대략 16 시간 동안 진공 오븐 내 50℃에서 건조시킨 후 잔류 메탄올(0.62 중량%)을 함유한 유일한 염이다. 숙시네이트, 아세테이트 및 포스페이트을 GC 분석에 따르면 0.18 내지 1.32 % THF를 함유하였으며, 이는 수성 THF 내에서 수행하는 합성 중의 끝에서 두 번째 단계에서 남은 염으로 추정된다.
여러 가지 염 형태의 수율, TRS% 및 잔류 용매% 결과
염 수율(%) TRS(%, HPLC)a 잔류 용매(%)b
HCl 69 9.12 0.62 MeOH
술페이트 82 7.28 없음
타르트레이트 77 8.95 없음
메실레이트 63 4.72 없음
숙시네이트c 52 7.86 1.32 THF
아세테이트c 68 8.05 1.12 THF
포스페이트d 79 6.28 0.18 THF
a: 상기 염들을 제조하는데 사용된 자유 염기가 9.98%의 전체 관련 물질을 가짐.
b: 검색의 분석 한계가 0.1%(1000 ppm)였음. 모든 염은 메탄올/물 중에서 제조하였으며, 분석 전에 50℃의 진공 오븐 내에서 대략 16 시간 동안 건조시켰음.
c: 숙시네이트 및 아세테이트를 X-선 분말 회절로 검색할 때 제조를 위한 조건 하에서 완전히 적정되지 않았음.
d: 포스페이트는 X-선 분말 회절로 검색할 때 부분적으로 적정되었음
실시예 10
X-선 회절에 의한 비교
염들을 또한 편광현미경법에 의해 비교하여 결정도를 결정하였다(복굴절). 분말 X-선 회절에 따르면 히드로클로라이드, 메실레이트, 숙시네이트 및 아세테이트 염 만이 결정질로 나타났으며, 독특한 X-선 패턴을 보였다. 숙시네이트 및 아세테이트 X-선 분말 패턴은 서로 매우 유사하였으며 자유 염기 패턴이 상호 관련되어 있는 것으로 나타났다. 술페이트, 타르트레이트 및 포스페이트 염은 불량한 결정질이였으며 무정형 특성을 많이 가졌다. 결정질 염은 정제 및 후속 처리가 용이하기 때문에 바람직하다.
실시예 11
용해도의 비교
각 염들의 수 용해도를 UV 분석(표 II)에 의해 결정하고 비교하였다. 가장 예상치 못했던 것은 메실레이트 염이 1.76 ㎎/㎖의 가장 큰 수 용해도를 가진 것이다. 메실레이트의 용해도는 다른 염들 보다 상당히 더 크다. 표 II의 데이터는 청구된 염이 가장 통상적인 제약학적으로 허용되는 염인 히드로클로라이드 염(0.268 ㎎/㎖) 보다 물에 6 배나 더 잘 용해될 수 있음을 나타낸다. 후속 연구들도 2 내지 6 배의 용해도 증가를 일관되게 입증하였다. 숙시네이트 및 아세테이트 염에서 가장 높은 pH가 관찰되었으며 이는 적정되지 않은 자유 염기가 존재함을 나타낸다.
수용해도
염 용해도 (염 ㎍/H2O ㎖) 용해도 (염기 ㎍/H2O ㎖) pH (포화 수용액)
HCl 268 249 4.98
술페이트 14 12 2.57
메실레이트 1760 1460 4.69
숙시네이트 0.5 0.4 7.72
타르트레이트 71 54 3.77
아세테이트 1 0.9 7.80
포스페이트 736 609 3.78
메실레이트 염의 수 용해도는 pH 의존성이 크며 최적의 용해도는 pH 4.0 내지 5.0에서, 바람직하게는 pH 4.5(2.25 ㎎/㎖)에서 관찰된다. 용해도는 이 보다 높거나 낮은 pH에서 현저하게 떨어진다. 메실레이트 염의 수용해도는 용해도의 pH 의존성 외에도 HCl 염이 형성되기 때문에 클로라이드를 염화나트륨 형태로 첨가하면 크게 저하된다.
실시예 12
열중량 분석법(TGA), 차동 주사 열량 측정법(DSC) 및 메틀러(Mettler) 고온 상태 현미경법
각각의 염들을 TGA, DSC 및 메틀러 고온 상태 현미경법에 의해 분석하고 비교하였다(표 III). 염들은 20 내지 100℃로 가열했을 때 0.73 내지 5.50%의 중량 손실을 보였다. 술페이트, 타르트레이트 및 포스페이트의 중량 손실은 각각 5.50%로 가장 컸다. 염들을 100 내지 200℃로 가열하면, 히드로클로라이드, 숙시네이트 및 아세테이트 염 만이 추가 중량 손실을 보였다. DSC 분석에 따르면 메실레이트 염이 261.6℃에서 날카로운 흡열 용융 피크를 보였다. 술페이트 염은 267.4℃에서 다소 넓은 흡열을 보였다. 히드로클로라이드, 숙시네이트, 타르트레이트, 아세테이트 및 포스페이트 염은 DSC에 따르면 용융 흡열을 보이지 않았다. 숙시네이트, 아세테이트 및 포스페이트는 대략 245℃에서 DSC 흡열을 보였다. 샘플들을 또한 메틀러 고온 상태를 사용하여 고온 상태 현미경법에 의해 검사하였다. 히드로클로라이드 염은 300℃까지 실질적인 용융을 보이지 않았다. 나머지 검사한 염들은 215 내지 270℃에서 액화의 징후가 보였다.
TGA, DSC 및 고온 상태 현미경 결과
염 TGA (중량 손실%) 20 내지 100℃ TGA (중량 손실%) 100 내지 200℃ DSC 흡열 최대값 (℃) 고온 상태 현미경법 (℃)
HCl 1.42 0.9 용융 안됨 용융 안됨
술페이트 5.50 - 267.4 260-270
메실레이트 3.97 - 261.6 230-264
숙시네이트 0.73 1.90 용융 안됨 230-270
타르트레이트 5.50 - 용융 안됨 215-255
아세테이트 0.77 1.44 용융 안됨 245-265
포스페이트 5.50 - 용융 안됨 230-250
실시예 13
흡습성의 비교
염들을 상대 습도(RH) 27%, 35%, 65% 및 80%에서 흡습성을 검사하였으며 표 IV에 나타내었다. 샘플들을 먼저 진공 하에 두어 RH 데이터의 기준점을 정하였다. 각각의 염에 함유된 물의 양은 또한 칼-피셔(전기량 분석)에 의해 결정하였다.
흡습성 및 칼-피셔(K.F.) 결과
염 흡습성 (초기, 중량%) 진공 RH 27% RH 35% RH 65% RH 80% K.F. (%)
HCl 100 98.7 98.2 99.3 100.4 100.6 1.3
술페이트 100 98.9 98.4 99.8 100.9 101.9 4.9
메실레이트 100 99.0 98.5 99.4 100.7 104.4 3.6
숙시네이트 100 99.3 98.5 99.1 100.0 100.5 0.2
타르트레이트 100 97.9 98.2 101.3 103.8 105.4 5.1
아세테이트 100 99.4 98.6 99.2 100.2 100.6 0.3
포스페이트 100 98.2 98.6 102.6 105.5 106.6 4.6
염들은 진공에 노출했을 때에 비교하여 80% 상대 습도에 노출할 때 1.2 내지 8.4 중량%를 얻었다. 포스페이트 염이 가장 흡습성이며, 그 뒤로 타르트레이트염, 메실레이트염, 술페이트염, 아세테이트염, 히드로클로라이드 염 및 숙시네이트 염 순이다. 칼-피셔 데이터는 타르트레이트, 술페이트, 포스페이트 및 메실레이트 염이 가장 많은 물을 함유한다는 점에서 흡습성 데이터와 꽤 일치하였다.
실시예 14
염 제조를 위한 용매
메탄올/물, 100% 아세톤, 9:1의 아세톤/물, 3:1의 아세톤/물 및 1:1의 아세톤/물 중에서 메실레이트 염을 제조하였다. 이들 염을 제조하는데 사용된 염기는 9.98%의 전체 관련 물질을 함유하였다. 이들 각각의 염으로부터 얻어진 수율 및 전체 관련 물질을 표 V에 기재하였다. 비교를 위해 HCl 염의 데이터도 기재하였다. 표 V에서 N.A.는 데이터를 얻을 수 없었음을 나타낸다.
HCl 및 메실레이트 염의 수율 및 TRS%
염 용매 수율 % TRS (%, HPLC)a 잔류 용매(%)c
HCl 30:1 MeOH/H2O 69 9.12a 0.62 MeOH
HCl 9:1 아세톤/H2O 83 4.73a N.A.
HCl 20:1 MeOH/H2O 82 2.23b 0.05 MeOH
메실레이트 7:1 MeOH/H2O 63 4.72a 없음
메실레이트 아세톤 85 9.80a N.A.
메실레이트 9:1 아세톤/H2O 73 2.00a N.A.
메실레이트 5:1 아세톤/H2O 39 0.69a N.A.
메실레이트 1:1 아세톤/H2O 29 4.12a N.A.
메실레이트 9:1 아세톤/H2O 81 0.91b 0.69 아세톤
a: 이들 염을 제조하는데 사용된 염기는 9.98%의 전체 관련 물질을 가짐.
b: 이들 염을 제조하는데 사용된 염기는 7.03%의 전체 관련 물질을 가짐.
c: 검색 분석의 한계는 0.1%(1000 ppm)이었음.
5:1의 아세톤/물로부터 제조한 메실레이트 염이 0.7%의 전체 관련 물질을 가졌고 자유 염기의 TRS가 9.% 저하되었지만, 수율은 39%로 낮았다. 수율은 9:1의 아세톤/물을 사용했다면 73%로 증가하였고 TRS는 20%였다. 히드로클로라이드 염의 TRS 또한 4.7%로 감소되어 5.3% 만큼 감소되었지만 2.4%의 미확인 관련 물질이 존재하였다. 불순물이 현저히 감소된 청구된 염의 제조가 가능함으로써 보다 효율적인 제조가 가능하고 값비싼 다운스트림의 정제를 피할 수 있다.
히드로클로라이드 염이 가장 통상적인 제약학적 염이고 1995년 6월 14일 공고된 EP 0 657 458(실시예 5)에 구체적으로 개시되어 있기 때문에 메실레이트와 HCl 염의 생물학적 비교를 수행하였다. 뜻밖에도 메실레이트 염이 HCl 염 보다 훨씬 더 생체이용률이 컸다. 염 형태의 생체이용률은 4 마리의 숫컷 비글 개에게 10% 아카시아 현탁액 중의 HCl 염 및 청구된 메실레이트 염 20 ㎎/㎏을 경구 투여하여 측정하였다. 투여 사이에 1 주일의 워쉬아웃 기간을 두었다. 투여량은 교차법(2 마리개/염/조사 중인 개)으로 투여하였다. 활성 신진대사물 뿐만 아니라 활성 화합물의 혈장 농도를 모니터링하였다. 동일한 투여량의 HCl 염 보다 청구된 메실레이트 염의 경구 투여 후에 각 개에서 보다 높은 (S)-13-[(디메틸아미노)메틸]-10,11,14,15-테트라히드로-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3,4-H][1,4,13]옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 및 신진대사물의 혈장 농도를 얻었다. HCl 염의 투여 후 평균 최대 혈장 농도(Cmax±오차)는 400±142 ng/㎖(화합물) 및 862±255 ng/㎖(신진대사물)이었다. 청구된 메실레이트 염의 투여 후 평균 최대 혈장 농도(Cmax±오차)는 896±243 ng/㎖(화합물) 및 2455±930 ng/㎖(신진대사물)이었다. 이는 화합물 및 신진대사물의 혈장 농도가 대략 260% 증가한 것을 나타낸다.
신진대사물 뿐만 아니라 화합물의 혈장 농도를 또한 검사 중에 시간의 함수로서 좌표로 작성하였다. 농도 곡선 아래의 면적(AUC) 비는 환자에 대한 화합물의 생체이용률의 척도이다. HCl 염 및 청구된 메실레이트의 AUC 비를 계산하고 표 VI에 제시하였다.
HCl 및 메실레이트 염을 20 ㎎/㎏ 1회 경구 투여한 때의 AUC 비
시험 개 신진대사물메실레이트:HCl 화합물메실레이트:HCl
1 2.77 3.89
2 2.97 1.62
3 2.02 2.14
4 2.74 2.56
평균 2.62 2.55
표준 오차 0.21 0.49
놀랍게도 표 VI의 데이터로부터 메실레이트 염의 생체이용률이 HCl 염 보다 2.58 배 더 높게 입증되었다. 이러한 생체이용률의 현저한 증가는 동일한 제약학적 효과를 얻기 위해 환자에게 보다 적은 량의 투여량을 투여할 수 있게 한다. 그리하여 환자에 대한 노출이 최소화된다. 그밖에, 보다 적은 단위 투여량 형태는 화합물의 비용을 낮추고 제조에 필요한 화합물의 양을 감소시킨다. 따라서, 본 발명의 메실레이트 염의 사용량은 0.5 ㎎/㎏/투여량 내지 0.25 ㎎/㎏/투여량, 보다 바람직하게는 0.1 내지 0.2 ㎎/㎏/투여량으로 예상된다.
7 개 염의 물리학적 데이터를 요약하면 메실레이트 염이 히쓰 등의 EP 0 657 458에서 연구되고 개시된 염의 물리적 특성을 크게 개선한 것으로 나타난다. 가장 중요한 것은 청구된 염과 HCl 염의 생체이용률을 비교할 때, 청구된 메실레이트 염이 극적인 치료학적 시약의 개선을 본 것이다. 그리하여 청구된 메실레이트 염의 장점으로는 (1) 높은 수용해도; (2) HPLC에서의 전체 관련 물질의 큰 감소; (3) GC 분석에 따른 잔류 용매가 없음; (4) X-선 분말 회절 및 편광현미경에 따른 결정질; (5) DSC에 의한 날카로운 용융점; 및 (6) HCl 염 보다 생체이용률이 2.5 배 더 큰 것이 포함된다.
앞서 지적한 바와 같이, 본 발명의 화합물은 선택적 단백질 키나아제 C 억제제로서의 활성을 갖는다. 화합물의 활성은 1995년 6월 14일 공고된 히쓰 등의 EP 0 657 458에 개시되어 있다. 활성은 칼슘 칼모듈린 의존성 단백질 키나아제 분석법, 카제인 단백질 키나아제 II 분석법, cAMP-의존성 단백질 키나아제 촉매 하위단위 분석법 및 단백질 티로신 키나아제 분석법으로 결정하였다. 메실레이트 염은 이들 분석법에서 10 μM 보다 작은 IC50값에서 활성을 갖고 효소 선택적인 것으로 밝혀졌다. 이와 같이 입증된 제약학적 약물학적 활성을 갖는 화합물은 단백질 키나아제 C가 병인에 참여한 것으로 나타난 증상을 치료하는데 유용하다. 당 분야에서 인정된 증상으로는 당뇨증 및 그의 합병증(망막증, 신경 장해 및 신장병), 허혈, 염증, 중추 신경계 질환, 심장 혈관계 질환, 알쯔하이머병, 피부 질환 및 암이 포함된다.
청구된 화합물은 투여 전에 배합하는 것이 바람직하다. 그러므로, 본 발명의 또 다른 실시 양태는 화학식 Ia의 화합물 및 하나 이상의 제약학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약학적 제제이다.
본 발명의 제약학적 제제는 널리 공지되어 있고 쉽게 입수가능한 성분을 사용하여 공지된 절차에 의해 제조한다. 본 발명의 조성물을 제조함에 있어서, 활성 성분은 통상적으로 담체와 혼합하거나 담체로 희석하거나, 캡슐, 사세, 종이 또는 다른 용기 형태일 수 있는 담체 내에 밀봉할 것이다. 담체가 희석제로서 작용하는 경우에는, 활성 성분의 비히클, 부형제 또는 매질로서 작용하는 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있다. 따라서 조성물은 정제, 필제, 분제, 로젠지제, 사세제, 카세제, 엘릭서, 현탁액, 유제, 용제, 시럽, 에어로졸(고체 또는 액제 매질 중에 존재), 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌약, 멸균 주사 용액 및 멸균 포장 분제의 형태일 수 있다.
적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 검, 인산칼슘, 알긴산염, 트라가간트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로즈, 물엿, 메틸 셀룰로즈, 메틸 및 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광유를 포함한다. 제제는 추가로 윤활제, 습윤제, 유화제 및 현탁화제, 방부제, 감미제 또는 향미제를 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 환자에게 투여한 후 활성 성분을 신속히, 지속적으로 또는 지연시켜 방출하도록 제제화할 수 있다. 조성물은 단위 투여량 형태로 제제화되는 것이 바람직하며, 각각의 투여량은 활성 성분을 약 1 내지 약 20 ㎎, 보다 통상적으로는 약 2 내지 약 10 ㎎ 함유한다. 그러나, 투여할 치료학적 사용량은 치료할 증상, 투여할 화합물의 선택 및 선택된 투여 경로를 포함하는 관련 환경에 비추어 담당 의사가 결정할 것이며, 따라서 상기 사용량 범위는 어떤 식으로도 본 발명의 범위를 제한할 수 없다. 용어 "단위 사용 형태"는 인간 피험자 및 다른 포유 동물을 위한 단위 사용에 적합한 물리적으로 분리된 단위를 나타내며, 각각의 단위는 제약학적 담체와 함께 원하는 치료학적 효과를 얻기 위해 계산된 소정의 활성 물질을 함유한다.
하기 제제화 실시예는 단지 예시를 위한 것이며 본 발명의 범위를 제한하려는 의도는 없다.
제제화 1
하기 성분들을 사용하여 경질 캡슐을 제조하였다.
수량 (㎎/캡슐)
활성 시약 5
전분(건조 상태) 85
마그네슘 스테아레이트 10
총합 100 ㎎
상기 성분들을 혼합하고 100 ㎎의 양으로 경질 캡슐에 충전하였다.
제제화 2
하기 성분들을 사용하여 정제를 제조하였다.
수량 (㎎/캡슐)
활성 시약 7
셀룰로즈 (미세결정질) 78
마그네슘 스테아레이트 10
이산화규소 (훈증) 5
총합 100 ㎎
성분들을 블렌딩하고 압착하여 각각의 중량이 100 ㎎인 정제를 형성한다.
제제화 3
활성 성분 10 ㎎을 함유하는 정제를 하기와 같이 제조하였다.
수량 (㎎/캡슐)
활성 시약 10
전분 45
미세결정질 셀룰로즈 35
폴리비닐피롤리돈 (물 중의 10% 용액) 4
소듐 카르복시메틸 전분 4.5
마그네슘 스테아레이트 0.5
탈크 1
총합 100 ㎎
활성 성분, 전분 및 셀룰로즈를 No. 45 메쉬 U.S. 체를 통과시키고 완전히 혼합하였다. 결과 얻어진 분말과 폴리비닐피롤리돈의 용액을 혼합하고나서 No. 14 메쉬 U.S. 체를 통과시켰다. 이렇게 생성된 과립을 50℃에서 건조시키고 No. 18 메쉬 U.S. 체를 통과시켰다. 그리고나서 사전에 No. 60 메쉬 U.S. 체를 통과시킨 소듐 카르복시메틸 전분, 마그네슘 스테아레이트 및 탈크를 과립에 첨가하고 혼합한 후 정제 제조기 상에서 압착하여 중량이 100 ㎎인 정제를 얻었다.
제제화 4
약제 8 ㎎을 함유한 캡슐을 하기와 같이 제조하였다.
수량 (㎎/캡슐)
활성 시약 8
전분 95
미세결정질 셀룰로즈 95
마그네슘 스테아레이트 2
총합 200 ㎎
활성 성분, 셀룰로즈, 전분 및 마그네슘 스테아레이트를 블렌딩하고, No. 45 메쉬 U.S. 체를 통과시키고, 200 ㎎ 수량으로 경질 젤라틴 캡슐에 충전하였다.
본 발명의 원리, 바람직한 실시 양태 및 작업 방식들을 상기 명세서에 기재하였다. 본원에서 보호받고자 하는 발명은 개시된 특정 형태에만 제한되는 것으로 해석되어서는 안되는데 이는 제한이 아닌 예시로 고려되어야 하기 때문이다. 당업자라면 본 발명의 사상으로부터 벗어남이 없이 수정 및 변경이 가능할 것이다.

Claims (17)

  1. 하기 화학식의 염 및 그의 용매화물.
  2. 제 1 항에 있어서, 하기 화학식의 염 및 그의 용매화물.
  3. 제 1 또는 2 항에 있어서, 실질적으로 결정질인 염.
  4. 제 3 항에 있어서, (S)-13-[(디메틸아미노)메틸]-10,11,14,15-테트라히드로-4,9:16,21-디메테노-1H,13H-디벤조[E,K]피롤로[3.4-H][1,4,13]-옥사디아자시클로헥사데신-1,3(2H)-디온 메탄술포네이트 일수화물인 염.
  5. 제 1 내지 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 약 5% 미만의 전체 관련 물질을 갖는 염.
  6. 미세 혈관 당뇨병 합병증의 치료를 요하는 포유 동물에게 제 1 내지 5 항 중 어느 한 항의 화합물의 제약학적 유효량을 투여하는 것을 포함하는 미세 혈관 당뇨병 합병증의 치료 방법.
  7. 제 6 항에 있어서, 제약학적 유효량이 0.05 ㎎/㎏/일 내지 0.25 ㎎/㎏/일인 방법.
  8. 제 1 내지 5 항 중 어느 한 항의 염과 함께 1 종 이상의 제약학적으로 허용되는 희석제, 부형제 또는 담체를 포함하는 제약학적 제제.
  9. 제 8 항에 있어서, 약 1 내지 약 20 ㎎의 염을 포함하는 제약학적 제제.
  10. 제 1 내지 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 약제로 사용하기 위한 염.
  11. 제 1 내지 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 미세 혈관 당뇨병 합병증의 치료에 사용하기 위한 염.
  12. 하기 화학식의 화합물과 메탄술폰산을 비반응성 유기 용매 중에서 반응시키는 것을 포함하는 제 1 내지 5 항 중 어느 한 항에서 청구된 염의 제조 방법.
  13. 제 12 항에 있어서, 용매가 아세톤-물인 방법.
  14. 제 13 항에 있어서, 아세톤-물 용매의 부피비가 약 5:1 내지 약 10:1인 방법.
  15. 제 14 항에 있어서, 아세톤-물 용매의 부피비가 약 9:1인 방법.
  16. 제 12 내지 15 항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 화합물.
  17. 실질적으로 본원의 실시예 중 어느 하나에 기재된 화합물.
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Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5624949A (en) * 1993-12-07 1997-04-29 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
US6093740A (en) * 1997-04-30 2000-07-25 Eli Lilly And Company Therapeutic treatment for skin disorders
AR017200A1 (es) 1997-12-23 2001-08-22 Astrazeneca Ab Compuestos inhibidores de la proteina cinasa c, sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, formulaciones farmaceuitcas que los comprenden, usode las mismas y proceso para la sintesis de dichos compuestos
US6620977B1 (en) 1998-01-30 2003-09-16 Daiso Co., Ltd. Process for producing butanetriol derivative
US6103712A (en) * 1998-03-05 2000-08-15 Eli Lilly And Company Therapeutic treatment for asthma
US6291446B1 (en) * 1998-03-05 2001-09-18 Eli Lilly And Company Therapeutic treatment for cytomegalovirus infection
US6103713A (en) * 1998-03-05 2000-08-15 Eli Lilly And Company Therapeutic treatment for autoimmune diseases
US6225301B1 (en) 1998-03-05 2001-05-01 Eli Lilly And Company Therapeutic treatment for renal dysfunction
CA2245029A1 (en) 1998-03-13 1999-09-13 University Of British Columbia Granulatimide compounds as g2 checkpoint inhibitors
SE9800835D0 (sv) 1998-03-13 1998-03-13 Astra Ab New Compounds
ATE251624T1 (de) * 1998-03-13 2003-10-15 Univ British Columbia Granulatimide-derivate zur behandlung von krebs
US6706721B1 (en) 1998-04-29 2004-03-16 Osi Pharmaceuticals, Inc. N-(3-ethynylphenylamino)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-quinazolinamine mesylate anhydrate and monohydrate
US6127401A (en) 1998-06-05 2000-10-03 Cephalon, Inc. Bridged indenopyrrolocarbazoles
TWI223598B (en) * 1998-06-22 2004-11-11 Pfizer Ireland Pharmaceuticals An intranasal pharmaceutical composition for the treatment of male erectile dysfunction or female sexual disorders, an intranasal delivery system or device and sildenafil mesylate
GB9828640D0 (en) * 1998-12-23 1999-02-17 Smithkline Beecham Plc Novel method and compounds
US6841567B1 (en) 1999-02-12 2005-01-11 Cephalon, Inc. Cyclic substituted fused pyrrolocarbazoles and isoindolones
US6492406B1 (en) 1999-05-21 2002-12-10 Astrazeneca Ab Pharmaceutically active compounds
US6284783B1 (en) 1999-06-09 2001-09-04 The Uab Research Foundation Use of bisindolylmaleimide compounds to induce Fas-mediated apoptosis
US6399780B1 (en) * 1999-08-20 2002-06-04 Cephalon, Inc. Isomeric fused pyrrolocarbazoles and isoindolones
US7087613B2 (en) * 1999-11-11 2006-08-08 Osi Pharmaceuticals, Inc. Treating abnormal cell growth with a stable polymorph of N-(3-ethynylphenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-quinazolinamine hydrochloride
UA74803C2 (uk) 1999-11-11 2006-02-15 Осі Фармасьютікалз, Інк. Стійкий поліморф гідрохлориду n-(3-етинілфеніл)-6,7-біс(2-метоксіетокси)-4-хіназолінаміну, спосіб його одержання (варіанти) та фармацевтичне застосування
US6852688B2 (en) 2000-03-10 2005-02-08 University Of Florida Compositions for treating diabetic retinopathy and methods of using same
US6852510B2 (en) 2000-07-03 2005-02-08 Gala Design Inc Host cells containing multiple integrating vectors
US20030224415A1 (en) * 2001-06-29 2003-12-04 Gala Design, Inc. Selection free growth of host cells containing multiple integrating vectors
US20020106729A1 (en) * 2000-07-03 2002-08-08 Bleck Gregory T. Expression vectors
US6300106B1 (en) * 2000-11-22 2001-10-09 Ppg Industries Ohio, Inc. Method of preparing 3-[2-{(Methylsulfonyl)oxy}-ethoxy ]-4-(triphenylmethoxy)-1-butanol, methane sulfonate
US7384738B2 (en) * 2002-03-28 2008-06-10 Bremel Robert D Retrovirus-based genomic screening
US20040038304A1 (en) * 2002-03-28 2004-02-26 Gala Design, Inc. Antibody libraries
EP1501511A4 (en) * 2002-05-06 2006-06-07 Univ Washington METHODS OF TREATING GLAUCOMA AND OTHER CONDITIONS INDUCED BY EXPRESSION OF NOS-2 BY INHIBITING THE EGFR PATHWAY
DE10244453A1 (de) * 2002-09-24 2004-04-01 Phenomiques Gmbh Hemmung der Proteinkinase C-alpha zur Behandlung von Krankheiten
US7232842B2 (en) * 2003-01-10 2007-06-19 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Kinase inhibitors and associated pharmaceutical compositions and methods of use
EP1633774B1 (en) 2003-06-18 2010-02-17 Tranzyme Pharma Inc. Macrocyclic antagonists of the motilin receptor
US20050152942A1 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Medtronic Vascular, Inc. Medical devices to treat or inhibit restenosis
US20050221429A1 (en) * 2004-01-16 2005-10-06 Cardinal Health Pts, Llc Host cells containing multiple integrating vectors comprising an amplifiable marker
NZ550340A (en) * 2004-03-17 2010-08-27 Lars Michael Larsen Prevention of retinopathy by inhibition of the visual cycle using a retinoid
DE102004019413A1 (de) * 2004-04-19 2005-11-24 Phenos Gmbh Hemmung der Proteinkinase C epsilon zur Behandlung von Krankheiten
US20090111786A1 (en) * 2004-12-03 2009-04-30 Glass Christopher K Compounds that Prevent Macrophage Apoptosis and Uses Thereof
WO2006068988A1 (en) * 2004-12-20 2006-06-29 Eli Lilly And Company Combination therapy for vascular complications associated with hyperglycemia
US8034823B2 (en) * 2005-02-22 2011-10-11 Savvipharm Inc Method of increasing drug oral bioavailability and compositions of less toxic orotate salts
GB0504203D0 (en) * 2005-03-01 2005-04-06 Novartis Ag Organic compounds
EP1877424A4 (en) * 2005-04-11 2010-09-29 Pharmagap Inc INHIBITORS OF PROTEIN KINASES AND USES THEREOF
US8508369B2 (en) 2006-09-01 2013-08-13 Intermec Ip Corp. RFID tag system with block coding, such as space-time block coding
AR069799A1 (es) * 2007-12-21 2010-02-17 Novartis Ag Composicion farmaceutica
EP2181999A1 (en) 2008-11-03 2010-05-05 Zentiva, A.S. Method of manufacturing ruboxistarin
US9265764B2 (en) * 2009-02-27 2016-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Uses of chemicals to modulate GSK-3 signaling for treatment of bipolar disorder and other brain disorders
WO2011120911A1 (en) 2010-03-30 2011-10-06 Novartis Ag Pkc inhibitors for the treatment of b-cell lymphoma having chronic active b-cell-receptor signalling
TR201806682T4 (tr) 2012-11-29 2018-06-21 Novartis Ag Farmasötik kombinasyonlar.
WO2014174478A1 (en) 2013-04-26 2014-10-30 Novartis Ag Pharmaceutical combinations of a pkc inhibitor and a c-met receptor tyrosine kinase inhibitor
JO3589B1 (ar) 2014-08-06 2020-07-05 Novartis Ag مثبطات كيناز البروتين c وطرق استخداماتها
CN110300584A (zh) 2016-12-19 2019-10-01 克罗马德姆公司 治疗色素沉着过度病症的方法
WO2018175340A1 (en) 2017-03-20 2018-09-27 Sienna Biopharmaceuticals, Inc. Reduced exposure conjugates modulating therapeutic targets
WO2018175302A1 (en) 2017-03-20 2018-09-27 Sienna Biopharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates targeting c-src with reduced exposure
US11590131B2 (en) 2017-07-28 2023-02-28 Applied Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating galactosemia
JP2023524504A (ja) 2020-05-01 2023-06-12 アプライド セラピューティクス， インコーポレイテッド ソルビトールデヒドロゲナーゼ欠乏症を処置するためのアルドースレダクターゼ阻害剤
KR20230128175A (ko) * 2022-02-25 2023-09-04 주식회사 온코크로스 루복시스타우린을 포함하는 항암용 조성물

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SK278989B6 (sk) * 1988-02-10 1998-05-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituované pyroly, ich použitie na výrobu lieči
US5292747A (en) * 1990-08-07 1994-03-08 Hoffman-La Roche Inc. Substituted pyrroles
US5589472A (en) * 1992-09-25 1996-12-31 Vice; Susan F. Diindolo compounds and pharmaceutical compositions containing them
US5624949A (en) * 1993-12-07 1997-04-29 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
BR9404831A (pt) 1993-12-07 1995-08-08 Lilly Co Eli Composto,formulação farmacêutica e processo de preparação de um composto

Also Published As

Publication number Publication date
RO120074B1 (ro) 2005-08-30
EP0776895A1 (en) 1997-06-04
CO4750823A1 (es) 1999-03-31
HUP9903377A2 (hu) 2000-02-28
MY118068A (en) 2004-08-30
AU711125B2 (en) 1999-10-07
TR199800759T2 (xx) 2001-01-22
US6015807A (en) 2000-01-18
PL184715B1 (pl) 2002-12-31
IL124417A (en) 2002-11-10
US5710145A (en) 1998-01-20
CA2237221C (en) 2003-03-25
JPH11500149A (ja) 1999-01-06
NZ323571A (en) 1998-12-23
CZ150298A3 (cs) 1998-12-16
YU49315B (sh) 2005-06-10
CZ297524B6 (cs) 2007-01-03
UA61897C2 (en) 2003-12-15
DE69600784D1 (de) 1998-11-19
PL326754A1 (en) 1998-10-26
EA000967B1 (ru) 2000-08-28
ZA969646B (en) 1998-05-18
ATE172199T1 (de) 1998-10-15
HU226821B1 (en) 2009-11-30
MX9803792A (es) 1998-09-30
PE22798A1 (es) 1998-05-11
EA199800374A1 (ru) 1998-10-29
CA2237221A1 (en) 1997-05-29
ES2122764T3 (es) 1998-12-16
WO1997018809A1 (en) 1997-05-29
EP0776895B1 (en) 1998-10-14
AR004336A1 (es) 1998-11-04
BR9611724A (pt) 1999-06-01
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