KR102626155B1 - Ras 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법 - Google Patents

Ras 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102626155B1
KR102626155B1 KR1020177028572A KR20177028572A KR102626155B1 KR 102626155 B1 KR102626155 B1 KR 102626155B1 KR 1020177028572 A KR1020177028572 A KR 1020177028572A KR 20177028572 A KR20177028572 A KR 20177028572A KR 102626155 B1 KR102626155 B1 KR 102626155B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cancer
mutant form
pharmaceutical composition
protein
flinabulin
Prior art date
Application number
KR1020177028572A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20170131491A (ko
Inventor
란 황
Original Assignee
비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=56878960&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR102626155(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. filed Critical 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드.
Publication of KR20170131491A publication Critical patent/KR20170131491A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102626155B1 publication Critical patent/KR102626155B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 구현예는 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에 투여하는 것에 의한 암의 치료에 관한 것이다.

Description

RAS 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법{omitted}
임의의 우선권 출원들의 참조에 의한 혼입
본 출원은 2015년 3월 6일에 출원된 미국가출원 제62/129654호, 및 2015년 11월 2일에 출원된 미국가출원 제62/249788호의 이익을 주장하고, 이의 개시내용은 본원에 그 전문이 참조로 포함되어 있다.
기술분야
본 발명은 화학 및 의학의 기술분야에 관련된다. 보다 상세하게는, 본 발명은 플리나불린(Plinabulin)을 사용하는 RAS 돌연변이(RAS mutation)와 관련된 암의 치료 방법에 관한 것이다.
RAS 단백질은 세포내 신호전달 네트워크를 조절하는 2성분 분자 스위치로서 작용한다. RAS-조절 신호 경로는 액틴 세포골격 보전, 증식, 분화, 세포 부착, 어팝토시스, 및 세포 이동과 같은 프로세스를 조절한다. RAS 하위부류는 적어도 21개의 성분 예컨대 KRAS, NRAS, 및 HRAS를 포함한다. RAS 또는 RAS-관련 단백질은 세포의 외부로부터 세포 핵까지 신호를 전달한다. 이러한 신호는 세포를 성장시키고, 분열하거나 또는 성숙하여 특정 기능을 띠도록 (분화하도록) 지시한다. RAS 단백질은 GTPase로 지칭되는 단백질의 부류에 속하고, 이는 이것이 GTP로 지칭되는 분자를 GDP로 지칭되는 다른 분자로 전환시키는 것을 의미한다. RAS 단백질은 스위치 같이 작용하고, 이는 GTP 및 GDP 분자에 의해 켜지거나 꺼진다. 신호를 전달하기 위해, RAS 단백질은 GTP의 분자에 부착(결합)함으로써 켜진다. RAS 단백질은 GTP가 GDP로 전환되는 경우에 꺼지게 된다(불활성화된다). RAS 단백질이 GDP에 결합되는 경우, 이는 세포 핵에 신호를 전달하지 않는다. RAS 단백질은 특정 코돈에서 돌연변이되는 경우, RAS 단백질은 이의 GTP 결합 상태로 고정되어, 이로써 이는 신호를 핵으로 지속적으로 전송하고, 세포는 분열되는 것을 중지할 수 없고, 이는 미조절된 세포 성장 또는 암이 된다.
RAS 유전자는 암유전자로 알려진 한 부류의 유전자에 속한다. RAS 유전자의 돌연변이 형태는 정상 세포가 암성이 되게 하는 잠재력을 가진다. 이러한 RAS 유전자로부터 생성된 단백질이 GTPases이다. 이러한 단백질은 세포 분열, 세포 분화, 및 세포 어팝토시스에서 중요한 역할을 한다. 그러나, 어떤 메카니즘에 의해 발암성 RAS가 종양 성장을 유지, 특히 종양 미세환경을 유지하도록 전환을 조절하는지, 및 어떤 특정 물질대사 경로가 RAS-중재 종양 유지에 본질적인지 여부가 여전히 활성 조사의 영역으로 남아 있다. RAS 돌연변이로 특정되는 암은 공지된 요법을 사용하여 치료하기 어렵고, 이러한 암을 치료하기 위해 승인된 약이 존재하지 않는다. RAS 돌연변이는 암환자 생존율의 부정적인 예측 변수이고; 암환자는 이의 암이 RAS 돌연변이를 가지는 경우 더 좋지 않은 예후 결과 (또는 더 단축된 생존)을 가진다. 따라서, 암성 RAS 유전자 돌연변이와 관련된 암에 대한 보다 효과적인 치료에 대한 충족되지 않은 상당한 필요성이 존재한다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
미국특허 제7,064,201호
미국특허 제7,919,497호
국제공개 공보 WO 87/05297
국제공개 공보 WO 04/054498
[비특허문헌]
Cell，２００９년，Vol.137，pp.821-834
European Journal of Medicinal Chemistry，２０１４년，Vol.83，pp.236-2
44
Neoplasia ，２０１３년，Vol.15,No.，pp.939-951
요약
일부 구현예는 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, KRAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, NRAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, RAS 돌연변이를 갖는 세포의 증식의 억제 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, RAS 돌연변이를 갖는 세포에서의 어팝토시스의 유도 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서의 RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 진행의 억제 방법에 관한 것이다.
도 1a-1d는 인간 병리학을 모사하는 교모세포종 (GBM)의 전신경 유전자 상으로 조작된 뮤린 모델 (GEMM)을 나타낸다. 도 1a는 종양주위 부종을 나타내는 인간 GBM의 T2 MRI 이미지를 나타내고, 도 1b는 종양주위 부종을 나타내는 마우스 GBM의 T2 MRI 이미지를 나타내고; 도 1c는 특징적 가성 책상배열 괴사(hallmark pseudopalisading necrosis) 및 미세혈관 증식을 나타내는 GBM의 H&E 염색의 인간 현미경사진 이미지를 나타내고; 도 1d는 특징적 가성 책상배열 괴사 및 미세혈관 증식을 나타내는 GBM의 H&E 염색의 마우스 현미경사진 이미지를 나타낸다.
도 2는 비히클, 테모졸로마이드 또는 분할된 방사선으로 처리된, PDGF-유도된 신경아교종을 갖는 마우스의 종양 크기를 나타낸다.
도 3은 비히클 단독, 도세탁셀 단독, 및 플리나불린 및 도세탁셀의 조합으로 처리된 마우스에서의 종양 중량 부검을 나타낸다.
도 4는 대조군 및 플리나불린으로 처리된, KRAS 돌연변이의 발현을 특징으로 하는 PDGF-유도된 신경아교종을 갖는 마우스의 생존율을 나타낸다.
도 5는 플리나불린, 테모졸로마이드, 및 방사선의 조합 및 테모졸로마이드 및 방사선의 조합으로 처리된 KRAS 돌연변이의 발현을 특징으로 하는 PDGF-유도된 신경아교종을 갖는 마우스의 생존율을 나타낸다.
도 6은 비히클 대조군, 플리나불린, 이리노테칸, 또는 플리나불린 및 이리노테칸의 조합으로 처리된, 마우스에서의 연구의 과정에 걸친 HCT-15 (Kras 돌연변이 G13D) 인간 결장 종양 이종이식을 갖는 마우스에서의 종양 부피의 변화를 나타낸다.
도 7은 비히클 대조군, 플리나불린, 이리노테칸, 또는 플리나불린 및 이리노테칸의 조합으로 처리된, 마우스에서의 연구의 과정에 걸친 Lovo (Kras 돌연변이, p.G13D) 인간 결장 종양 이종이식을 갖는 마우스에서의 종양 부피의 변화를 나타낸다.
플리나불린, (3Z,6Z)-3-벤질리덴-6-{[5-(2-메틸-2-프로파닐)-1H-이미다졸-4-일]메틸렌}-2,5-피페라진디온은 천연 화합물 페닐라히스틴의 합성 유사체이다. 플리나불린은 미국특허 제7,064,201호 및 제7,919,497호에 기재된 방법 및 과정에 따라 용이하게 제조될 수 있고, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함되어 있다. 일부 구현예는 발암성 RAS 돌연변이와 관련된 암의 치료를 위한 플리나불린의 용도에 관한 것이다. 일부 구현예는 대상체서의 RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료를 위한 플리나불린의 용도에 관한 것이다. 일부 구현예는 RAS 돌연변이를 갖는 세포의 증식을 억제하기 위한 플리나불린의 용도에 관한 것이다. 일부 구현예는 RAS 돌연변이를 갖는 세포의 어팝토시스를 유도하기 위한 플리나불린의 용도에 관한 것이다. 일부 구현예는 대상체에서의 RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 진행을 억제하기 위한 플리나불린의 용도에 관한 것이다. 일부 구현예에서, RAS 단백질은 KRAS 단백질이다. 일부 구현예에서, RAS 단백질은 NRAS 단백질이다.
정의
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용되는 모든 기술 및 과학 용어들은 본 개시내용이 속하는 기술분야의 당업자에게 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 모든 특허, 출원, 공개 출원, 및 다른 공보는 그 전문이 참조로 혼입되어 있다. 본원에 용어에 대한 복수개의 정의가 존재하는 경우, 달리 언급되지 않는 한, 해당 부분에서의 정의가 우선한다.
본 명세서에서 사용되는 "대상체"는 인간 또는 비-인간 포유동물, 예를 들면, 개, 고양이, 마우스, 랫트, 소, 양, 돼지, 염소, 비-인간 영장류 또는 조류 예를 들면, 닭, 뿐만 아니라 임의의 다른 척추동물 또는 무척추동물을 의미한다.
용어 "포유동물"은 그것의 보통의 생물학적 의미로 사용된다. 따라서, 구체적으로 이는 비제한적으로, 유인원 (침팬지, 유인원, 원숭이) 및 인간을 포함하는 영장류, 소, 말, 양, 염소, 돼지, 토끼, 개, 고양이, 설치류, 랫트, 마우스, 기니아 피그 등을 포함한다.
본원에 사용되는 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 질환 또는 질병을 치료하는 것을 포함하여 질환 또는 질병의 증상 중 하나 이상의 개시의 가능성을 어느 정도로 완화시키거나 또는 감소시키는데 효과적인 치료제의 양을 지칭한다.
본원에 사용되는 "치료하다", "치료", 또는 "치료함"은 예방적 및/또는 치료적 목적을 위해 대상체에 화합물 또는 약학적 조성물을 투여하는 것을 지칭한다. 용어 "예방적 치료"는 질환 또는 질병의 증상을 아직 나타내지 않으나, 특정 질환 또는 질병에 민감성이거나 또는 그렇지 않으면 이의 위험이 있는 대상체를 치료하는 것을 지칭하고, 이에 의해 치료는 환자에서 질환 또는 질병이 진행될 가능성을 감소시킨다. 용어 "치료적 처리"는 질환 또는 질병을 이미 앓고 있는 대상체에 대해 치료제를 투여하는 것과 관련된다.
용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하고, 생물학적으로 또는 그렇지 않으면 약제로 사용하기에 바람직하지 않지는 않은 염을 지칭한다. 많은 경우에서, 본원에 개시된 화합물은 아미노 및/또는 카복실기 또는 이와 유사한 기의 존재에 의해 산성 및/또는 염기성 염을 형성할 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 산성 부가염은 무기산 및 유기산을 사용하여 형성될 수 있다. 염을 유도할 수 있는 무기산은, 예를 들면, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등을 포함한다. 염을 유도할 수 있는 유기산은, 예를 들면, 아세트산, 프로피온산, 글라이콜산, 피루브산, 옥살산, 말레산, 말론산, 석신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, P-톨루엔설폰산, 살리실산 등을 포함할 수 있다. 또한, 약제학적으로 허용가능한 염은 무기 및 유기 염기를 사용하여 형성될 수 있다. 염을 유도할 수 있는 무기 염기는, 예를 들면, 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 등을 포함하고, 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염이 특히 바람직하다. 일부 구현예에서, 무기 염기로의 본원에 개시된 화합물의 처리는 무기 양이온 예컨대 Li+, Na+, K+, Mg2+ 및 Ca2+ 등을 포함하는 염 형태를 부여하는 화합물로부터의 분해성 수소(labile hydrogen)의 손실을 야기한다. 염을 유도할 수 있는 유기 염기는, 예를 들면 1차, 2차, 및 3차 아민, 자연 발생 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 환형 아민, 염기성 이온교환수지 등, 및 특별하게는 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 및 에탄올아민을 포함한다. 수많은 이러한 염은 1987년 9월 11일에 공개된 Johnston 등의 WO 87/05297 (그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이 본 기술분야에 공지되어 있다.
일부 구현예에서, 조성물은 추가로 1종 이상의 약제학적으로 허용가능한 희석제를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 희석제는 kolliphor® (폴리에틸렌 글리콜 (15)-하이드록시스테아레이트)을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 희석제는 프로필렌 글리콜을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 희석제는 콜리퍼(kolliphor) 및 프로필렌 글리콜을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 희석제는 콜리퍼 및 프로필렌 글리콜을 포함할 수 있고, 여기서 콜리퍼는 희석제의 총 중량 기준으로 약 40 중량%이고, 프로필렌 글리콜은 약 60 중량%이다. 일부 구현예에서, 조성물은 추가로 1종 이상의 다른 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함할 수 있다.
표준 약제학적 제형 기술은 본원에 기재된 약제학적 조성물을 제조하는 데 사용될 수 있으며, 이는 예컨대 본원에 그 전문이 참조로 포함된 문헌 [Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005)]에 기재된 것과 같은 방법일 수 있다. 따라서, 일부 구현예는 (a) 안전한 치료적 유효량의 플리나불린 또는 약제학적으로 허용가능한 그것의 염; 및 (b) 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 부형제 또는 이들의 조합을 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.
다른 구현예는 별개의 조성물 또는 동일한 조성물로 플리나불린 및 추가의 치료제를 공동투여하는 것을 포함한다. 따라서, 일부 구현예는 a) 안전한 치료적 유효량의 플리나불린 또는 약제학적으로 허용가능한 그것의 염 및 (b) 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 부형제 또는 이들의 조합을 포함하는 제1 약제학적 조성물; 및 (a) 안전한 치료적 유효량의 추가의 치료제 및 (b) 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 부형제 또는 이들의 조합을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 포함한다. 일부 구현예는 (a) 안전한 치료적 유효량의 플리나불린 또는 약제학적으로 허용가능한 그것의 염; (b) 안전한 치료적 유효량의 추가의 치료제; 및 (c) 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 부형제 또는 이들의 조합을 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.
본원에 기재된 약제학적 조성물의 투여는 비제한적으로 경구로, 설하로, 구강으로, 피하로, 정맥내로, 비강내로, 국소로, 경피로, 진피내로, 복강내로, 근육내로, 폐내로, 질로, 직장으로, 또는 안구 내로의 방식을 포함하는 유사한 방식과 같이, 작용하는 제제의 투여에 있어 허용되는 방식 중 임의의 것을 통한 것일 수 있다. 경구 및 비경구 투여는 바람직한 구현예의 대상인 적응증을 치료하는데 통상적인 것이다.
용어 "약제학적으로 허용가능한 담체" 또는 "약제학적으로 허용가능한 부형제"는 임의의 그리고 모든 용매, 분산매, 코팅물, 항균 및 항진균제, 등장액 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약제학적으로 활성인 물질에 대한 이러한 매질 및 제제의 사용은 본 기술분야에 잘 알려져 있다. 임의의 종래의 매질 및 제제가 활성 성분과 양립불가인 것을 제외하고, 치료적 조성물에서의 이의 용도가 고려된다. 또한, 일반적으로 본 기술분야에 사용되는 다양한 이러한 아주반트가 포함될 수 있다. 약제학적 조성물에서의 다양한 성분들의 포함에 대한 고려는 문헌 [Gilman et al. (Eds.) (1990); Goodman and Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Pergamon Press]에 기재되어 있고, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함되어 있다.
약제학적으로-허용가능한 담체 또는 그것의 성분으로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 당, 예컨대 락토오스, 글루코오스 및 수크로오스; 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; 셀룰로오스 및 그것의 유도체, 예컨대 나트륨 카복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 및 메틸 셀룰로오스; 분말화된 트라가칸쓰; 말트; 젤라틴; 탈크; 고형 윤활제, 예컨대 스테아르산 및 마그네슘 스테아레이트; 황산칼슘; 식물성 오일, 예컨대 땅콩 오일, 목화씨 오일, 참께 오일, 올리브 오일, 옥수수 오일 및 테오브로마의 오일; 폴리올 예컨대 프로필렌 글리콜, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 및 폴리에틸렌 글리콜; 알긴산; 유화제, 예컨대 TWEENS; 습윤제, 예컨대 나트륨 라우릴 설페이트; 착색제; 풍미제; 정제화 제제, 안정제; 항산화제; 보존제; 무발열원 물; 등장 염수; 및 포스페이트 완충 용액이다.
본원에 기재된 조성물은 바람직하게는 단위 용량 형태(unit dosage form)로 제공된다. 본 명세서에서 사용되는 "단위 용량 형태"는 양호한 의료적 실시에 따라 단일 용량으로 동물, 바람직하게는 포유동물 대상체에 대한 투여에 적합한 화합물 또는 조성물의 양을 포함하는 조성물이다. 단일 또는 단위 용량 형태의 제조는 그러나 용량 형태가 1일 1회 또는 요법의 과정당 1회로 투여되는 것을 의미하지 않는다. 이러한 용량 형태는 1일당 1회, 2회, 3회 또는 그 이상으로 투여되는 것으로 고려되고, 일정 기간 (예를 들면, 약 30분 내지 약 2-6 시간)에 걸친 주입으로서 투여될 수 있거나, 또는 연속 주입으로서 투여될 수 있고, 단일 투여가 특별하게 배제되지 않지만 요법의 과정 동안 1회 초과로 주어질 수 있다. 당업자는 제형이 요법의 전체 과정을 구체적으로 고려한 것이 아니며, 이러한 결정은 제형이 아닌 치료의 기술분야의 당업자에게 좌우됨을 인식할 수 있을 것이다.
상기 기재된 바와 같이 유용한 조성물은, 다양한 투여 경로 예를 들면, 경구, 설하, 구강, 비강, 직장, 국소 (경피 및 진피내 포함), 안구, 뇌내, 두개내, 척추강내, 동맥내, 정맥내, 근육내, 또는 투여의 다른 비경구적 경로에 대한 다양한 적합한 형태 중 임의의 것일 수 있다. 당업자는 경구 및 비강 조성물이 이용가능한 방법에 의해 제조되는, 흡입에 의해 투여되는 조성물을 포함하는 것으로 이해할 것이다. 목적하는 특정한 투여 경로에 따라, 본 기술분야에 공지된 다양한 약제학적으로-허용가능한 담체가 사용될 수 있다. 약제학적으로-허용가능한 담체는, 예를 들면, 고체 또는 액체 충전제, 희석제, 히드로트로피제, 표면-활성제, 및 캡슐화 물질을 포함한다. 임의의 약제학적으로 활성인 물질이 포함될 수 있고, 이는 화합물 또는 조성물의 활성을 실질적으로 방해하지 않는다. 화합물 또는 조성물과 결합하여 이용되는 담체의 양은 화합물의 단위 용량당 투여를 위한 실용적 양의 물질을 제공하기에 충분하다. 본원에 기재된 방법에서 유용한 용량 형태를 제조하기 위한 기술 및 조성물은 하기 참조문헌에 기재되어 있고, 이들 모두는 본원에 참조로 포함되어 있다: 문헌 [Modern Pharmaceutics, 4th Ed., Chapters 9 and 10 (Banker & Rhodes, editors, 2002)]; 문헌 [Lieberman et al., Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989)]; 및 문헌 [Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 8th Edition (2004)].
정제, 캡슐 (예를 들면, 액체 겔 캡슐 및 고형 겔 캡슐), 과립 및 벌크 분말과 같은 이러한 고형물 형태를 포함하는 다양한 경구 용량 형태가 사용될 수 있다. 정제는 압축되고, 정제 습제화되고, 장용 코팅되고, 당-코팅되고, 필름-코팅되고, 또는 다중-압축될 수 있고, 이는 적합한 결합제, 윤활제, 희석제, 붕해제, 착색제, 풍미제, 유동-유도제, 및 용융 제제를 포함한다. 액체 경구 용량 형태는 비발포성 과립으로부터 재구성된 수용액, 에멀젼, 현탁액, 용액 및/또는 현탁액, 및 발포성 과립으로부터 재구성된 발포성 제제를 포함하고, 이는 적합한 용매, 보존제, 유화제, 현탁화제, 희석제, 감미제, 용융 제제, 착색제 및 풍미제를 포함한다.
경구 투여를 위한 단위 용량 형태의 제조를 위해 적합한 약제학적으로-허용가능한 담체는 본 기술분야에 공지되어 있다. 정제는 전형적으로 불활성 희석제와 같은 종래의 약제학적으로-상용가능한 아쥬반트, 예컨대 탈산칼슘, 탄산나트륨, 만니톨, 락토오스 및 셀룰로오스; 결합제 예컨대 전분, 젤라틴 및 수크로오스; 붕해제, 예컨대 전분, 알긴산 및 크로스카멜로스; 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 및 탈크를 포함한다. 활윤제, 예컨대 이산화규소는 분말 혼합물의 유동 특성을 개선하기 위해 사용될 수 있다. 착색제, 예컨대 FD&C 염료는 외형을 위해 첨가될 수 있다. 감미제 및 풍미제, 예컨대 아스파르탐, 사카린, 멘톨, 박하, 및 과일 풍미제는 츄어블 정제에 대한 아쥬반트로 유용하다. 캡슐은 전형적으로 상기 기재된 1종 이상의 고형 희석제를 포함한다. 담체 성분의 선택은 중요하지 않은 맛, 비용, 및 저장 안정성과 같은 부수적 고려사항에 좌우되고, 본 기술분야의 당업자에게 용이하게 이루어질 수 있다.
경구 조성물은 또한 액체 용액, 에멀젼, 현탁액 등을 포함한다. 이러한 조성물의 제조에 적합한 약제학적으로-허용가능한 담체는 본 기술분야에 잘 알려져 있다. 시럽, 엘릭시르, 에멀젼 및 현탁액에 대한 담체의 전형적인 성분은 에탄올, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 액체 수크로오스, 소르비톨 및 물을 포함한다. 현탁액의 경우, 전형적인 현탁화제는 메틸 셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸 셀룰로오스, AVICEL RC-591, 트라가칸쓰 및 나트륨 알기네이트를 포함하고; 전형적인 습윤제는 레시틴 및 폴리소르베이트 80을 포함하고, 전형적인 보전제는 메틸 파라벤 및 나트륨 벤조에이트를 포함한다. 경구 액체 조성물은 또한 1종 이상의 성분 예컨대 상기 기재된 감미제, 풍미제 및 착색제를 포함할 수 있다.
이러한 조성물은 또한 전형적으로 pH 또는 시간-의존적 코팅물로 종래의 방법에 의해 코팅될 수 있고, 이로써 본 조성물은 목적하는 국소 적용의 부군의 위장관에서 또는 목적하는 작용을 연장하는 다양한 회수로 방출되게 한다. 전형적으로, 이러한 용량 형태는 비제한적으로 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트, 폴리비닐아세테이트 프탈레이트, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스 프탈레이트, 에틸 셀룰로오스, 유드라짓 코팅물, 왁스 및 셸락 중 하나 이상을 포함한다.
본원에 기재된 조성물은 임의로 다른 약물 활성물질을 포함할 수 있다.
본 화합물의 전신적 전달을 달성하는데 유용한 다른 조성물은 설하, 구강 및 비강 용량 형태를 포함한다. 이러한 조성물은 전형적으로 용해성 충전제 서브스턴스 예컨대 수크로오스, 소르비톨 및 만니톨; 및 결합제 예컨대 아카시아, 미세결정성 셀룰로오스, 카복시메틸 셀룰로오스 및 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스 중 하나 이상을 포함한다. 상기 개시된 활윤제, 윤활제, 감미제, 착색제, 항산화제 및 풍미제가 또한 포함될 수 있다.
국소적 안과적 사용을 위해 제형화된 액체 조성물은 이것이 눈으로 국소적으로 투여될 수 있도록 제형화된다. 제형 고려사항들 (예를 들면 약물 안정성)이 최적의 안락성 보다 적게 필요로 될 수 있지만, 안락성은 최대로 극대화될 수 있다. 안락성이 극대화될 수 없는 경우, 액체는 액체가 국소적 안과적 사용을 위해 환자에 대해 허용가능하도록 제형화될 수 있다. 추가로, 안과적으로 허용가능한 액체는 단일 용도를 위해 포장될 수 있거나, 또는 복수회의 사용에 대해 오염을 방지하기 위한 보전제를 포함할 수 있다.
안과적 적용을 위해, 용액 또는 약제는 종종 주요 비히클로서 생리적 염수 용액을 사용하여 제조된다. 안과 용액은 바람직하게는 적절한 완충 시스템을 사용하여 편안한 pH에서 유지될 수 있다. 또한, 제형은 종래의, 약제학적으로 허용가능한 보존제, 안정제 및 계면활성제를 포함할 수 있다.
본원에 개시된 약제학적 조성물에서 사용될 수 있는 보존제는 비제한적으로, 벤즈알코늄 염화물, PHMB, 클로로부탄올, 티메로살, 페닐수은, 아세테이트 및 페닐수은 니트레이트를 포함한다. 유용한 계면활성제는, 예를 들면, Tween 80이다. 마찬가지로, 다양한 유용한 비히클은 본원에 개시된 안과용 약제에 사용될 수 있다. 이들 비히클은, 비제한적으로 폴리비닐 알코올, 포비돈, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스, 폴록사머, 카복시메틸 셀룰로오스, 하이드록시에틸 셀룰로오스 및 정제수를 포함한다.
장성 조정제는 필요 또는 편의를 위해 첨가될 수 있다. 이는, 비제한적으로, 염, 특히 염화나트륨, 염화칼륨, 만니톨 및 글리세린, 또는 임의의 다른 적합한 안과적으로 허용가능한 장성 조정제를 포함한다.
pH를 조정하기 위한 다양한 완충액 및 수단은 생성된 제제가 안과적으로 허용가능한 경우에 한하여 사용될 수 있다. 수많은 조성물에 대해, pH는 4 내지 9일 것이다. 따라서, 완충액은 아세테이트 완충액, 시트레이트 완충액, 인산염 버퍼 및 보레이트 완충액을 포함한다. 산 또는 염기가 필요에 따라 이들 제형의 pH를 조정하기 위해 사용될 수 있다.
안과적으로 허용가능한 항산화제는, 비제한적으로, 나트륨 메타바이설파이트, 티오황산나트륨, 아세틸시스테인, 부틸화된 하이드록시아니솔 및 부틸화된 하이드록시톨루엔을 포함한다.
안과용 약제에 포함될 수 있는 다른 부형제 성분은 킬레이트제이다. 유용한 킬레이트제는 에데테이트 디나트륨 (EDTA)이고, 한편 다른 킬레이트제가 또한 이를 대체하여 또는 이와 결합하여 사용될 수 있다.
국소적 사용의 경우, 본원에 개시된 조성물을 포함하는 크림, 연고, 겔, 용액 또는 현탁액 등이 이용된다. 국소적 제형은 일반적으로 약제학적 담체, 보조-용매, 유화제, 침투 증강제, 보존제 시스템, 및 완화제를 포함할 수 있다.
정맥내 투여의 경우, 본원에 기재된 조성물은 약제학적으로 허용가능한 희석제, 예컨대 염수 또는 덱스트로오스 용액에 용해되거나 또는 분산될 수 있다. 적합한 부형제는 목적하는 pH를 달성하기 위해 포함될 수 있고, 이는 비제한적으로 NaOH, 탄산나트륨, 아세트산나트륨, HCl, 및 시트르산을 포함한다. 다양한 구현예에서, 최종 조성물의 pH는 2 내지 8, 또는 바람직하게는 4 내지 7의 범위이다. 항산화 부형제는 아황산수소나트륨, 아세톤 아황산수소나트륨, 나트륨 포름알데하이드, 설폭실레이트, 티오우레아, 및 EDTA를 포함할 수 있다. 최종 정맥내 조성물에서 볼 수 있는 적합한 부형제의 다른 비제한적인 예는 나트륨 또는 칼륨 포스페이트, 시트르산, 타르타르산, 젤라틴, 및 탄수화물 예컨대 덱스트로오스, 만니톨, 및 덱스트란을 포함할 수 있다. 추가적인 허용가능한 부형제는 문헌 [Powell, et al., Compendium of Excipients for Parenteral Formulations, PDA J Pharm Sci and Tech 1998, 52 238-311] 및 문헌 [Nema et al., Excipients and Their Role in Approved Injectable Products: Current Usage and Future Directions, PDA J Pharm Sci and Tech 2011, 65 287-332]에 기재되어 있고, 이들 모두는 그 전문이 본원에 참조로 포함되어 있다. 또한, 항미생물제는 정균 또는 진균증식억제 용액을 달성하기 위해 포함될 수 있고, 이는 비제한적으로 페닐수은 니트레이트, 티메로살, 벤즈에토늄 염화물, 벤즈알코늄 염화물, 페놀, 크레졸, 및 클로로부탄올을 포함한다.
정맥내 투여를 위한 조성물은 투여하기 직전에 적합한 희석제 예컨대 멸균수, 염수 또는 수중의 덱스트로오스로 재구성된 1종 이상의 고형물의 형태로 환자에게 제공될 수 있다. 다른 구현예에서, 본 조성물은 비경구로 용이하게 투여하기 위해 용액에 제공된다. 다른 구현예에서, 본 조성물은 투여하기 이전에 추가로 희석된 용액에 제공된다. 본원에 기재된 화합물 및 또 다른 제제의 조합을 투여하는 것을 포함하는 구현예에서, 상기 조합은 환자에게 혼합물로서 제공될 수 있고, 또는 환자는 투여 이전에 2종의 제제를 혼합할 수 있거나, 또는 2종의 제제는 개별적으로 투여될 수 있다.
본원에 기재된 활성 화합물의 실제 용량은 특정 화합물 및 치료되는 질병에 좌우되고; 적절한 용량의 선택은 당업자의 지식 범위 내에 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 1회 용량은 약 5 mg/체표면적 m2 내지 약 150 mg/체표면적 m2, 약 5 mg/체표면적 m2 내지 약 100 mg/체표면적 m2, 약 10 mg/체표면적 m2 내지 약 100 mg/체표면적 m2, 약 10 mg/체표면적 m2 내지 약 80 mg/체표면적 m2, 약 10 mg/체표면적 m2 내지 약 50 mg/체표면적 m2, 약 10 mg/체표면적 m2 내지 약 40 mg/체표면적 m2, 약 10 mg/체표면적 m2 내지 약 30 mg/체표면적 m2, 약 13.5 mg/체표면적 m2 내지 약 100 mg/체표면적 m2, 약 13.5 mg/체표면적 m2 내지 약 80 mg/체표면적 m2, 약 13.5 mg/체표면적 m2 내지 약 50 mg/체표면적 m2, 약 13.5 mg/체표면적 m2 내지 약 40 mg/체표면적 m2, 약 13.5 mg/체표면적 m2 내지 약 30 mg/체표면적 m2, 약 15 mg/체표면적 m2 내지 약 80 mg/체표면적 m2, 약 15 mg/체표면적 m2 내지 약 50 mg/체표면적 m2, 또는 약 15 mg/체표면적 m2 내지 약 30 mg/체표면적 m2일 수 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 1회 용량은 약 13.5 mg/체표면적 m2 내지 약 30 mg/체표면적 m2일 수 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 1회 용량은 약 5 mg/체표면적 m2, 약 10 mg/체표면적 m2, 약 12.5 mg/체표면적 m2, 약 13.5 mg/체표면적 m2, 약 15 mg/체표면적 m2, 약 17.5 mg/체표면적 m2, 약 20 mg/체표면적 m2, 약 22.5 mg/체표면적 m2, 약 25 mg/체표면적 m2, 약 27.5 mg/체표면적 m2, 약 30 mg/체표면적 m2, 약 40 mg/체표면적 m2, 약 50 mg/체표면적 m2, 약 60 mg/체표면적 m2, 약 70 mg/체표면적 m2, 약 80 mg/체표면적 m2, 약 90 mg/체표면적 m2, 또는 약 100 mg/체표면적 m2일 수 있다.
구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 단일 용량은 약 5 mg 내지 약 300 mg, 약 5 mg 내지 약 200 mg, 약 7.5 mg 내지 약 200 mg, 약 10 mg 내지 약 100 mg, 약 15 mg 내지 약 100 mg, 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 30 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 100 mg, 약 10 mg 내지 약 80 mg, 약 15 mg 내지 약 80 mg, 약 20 mg 내지 약 80 mg, 약 30 mg 내지 약 80 mg, 약 40 mg 내지 약 80 mg, 약 10 mg 내지 약 60 mg, 약 15 mg 내지 약 60 mg, 약 20 mg 내지 약 60 mg, 약 30 mg 내지 약 60 mg, 또는 약 40 mg 내지 약 60 mg일 수 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 단일 용량은 약 20 mg 내지 약 60 mg, 약 27 mg 내지 약 60 mg, 약 20 mg 내지 약 45 mg, 또는 약 27 mg 내지 약 45 mg일 수 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 단일 용량은 약 5 mg, 약 10 mg, 약 12.5 mg, 약 13.5 mg, 약 15 mg, 약 17.5 mg, 약 20 mg, 약 22.5 mg, 약 25 mg, 약 27 mg, 약 30 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150mg, 또는 약 200 mg일 수 있다.
투여 주기는, 종양이 여전히 관리 중에 있고 치료 계획이 임상적으로 허용되는 한, 수 주의 치료 주기일 수 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 1회 용량은 1주일에 한 번, 그리고 바람직하게는 3주 (21일) 치료 주기의 각각 1일 및 8일째 한 번 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 플리나불린 또는 다른 치료제의 1회 용량은 1주일에 한 번, 1주일에 두 번, 주 당 3회, 주 당 4회, 주 당 5회, 주 당 6회, 또는 1주일, 2주일, 3주일, 4주일, 또는 5주일 치료 주기 동안 매일 투여될 수 있다. 투여는 치료 주기 내 매주의 동일하거나 상이한 날에 수행될 수 있다.
치료 주기는 요법이 임상적으로 허용가능한 것인 한 반복될 수 있다. 일부 구현예에서, 치료 주기는 n회 동안 반복되고, 여기서 n은 2 내지 30의 범위의 정수이다. 일부 구현예에서, n은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 일부 구현예에서, 신규한 치료 주기는 이전의 치료 주기의 완료 직후에 일어날 수 있다. 일부 구현예에서, 신규한 치료 주기는 이전의 치료 주기의 완료 후 일정 기간 동안 일어날 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 조성물은 다른 치료제와 조합하여 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 조성물은 화학요법, 방사선, 및 생물학적 요법과 같은 치료와 조합하여 투여되거나 사용될 수 있다.
치료 방법
일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는 RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는 발암성 RAS 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예에서, RAS 단백질의 돌연변이 형태는 KRAS, NRAS, 또는 HRAS 단백질의 돌연변이 형태이다. 일부 구현예에서, RAS 단백질은 KRAS, NRAS, 또는 HRAS 단백질이다. 일부 구현예에서, RAS의 돌연변이 형태는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태이다. 일부 구현예에서, RAS의 돌연변이 형태는 NRAS 단백질의 돌연변이 형태이다. 일부 구현예에서, RAS 유전자 돌연변이는 KRAS 유전자 돌연변이이다. 일부 구현예에서, RAS 유전자 돌연변이는 NRAS 유전자 돌연변이이다.
일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는 발암성 KRAS 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는 NRAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는 발암성 NRAS 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는 플리나불린 및 본원에 기재된 플리나불린을 포함하는 조성물로 암을 치료하는 방법을 포함한다. 일부 방법은 그것을 필요로 하는 대상체에게 본원에 기재된 화합물, 조성물, 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 동물, 예를 들면, 포유동물, 인간일 수 있다.
일부 구현예에서, 암은 결장직장암, 췌장암, 신장암, 폐암, 간암, 유방암, 전립선암, 위장암, 복막암, 흑색종, 자궁내막암, 난소암, 자궁경부암, 자궁 암종, 방광암, 교모세포종, 뇌 전이, 타액샘 암종, 갑상선암, 뇌암, 림프종, 골수종, 및 두경부암으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 암은 편평상피 세포암, 소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 폐의 선암종, 폐의 편평상피 암종, 간세포 암종, 결장암, 자궁내막암종, 및 간세포 암종으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 암은 결장직장암, 전립선암, 유방암, 폐암, 자궁내막암, 다발성 골수종, 췌장, 신장암, 및 교모세포종으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 암은 비-소세포 폐암, 췌장암, 및 교모세포종으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 암은 비-소세포 폐암이다.
일부 구현예에서, KRAS는 코돈 12, 13, 59, 및 61로부터 선택된 하나 이상의 위치에서의 돌연변이를 포함한다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12, G13, S17, P34, A59, 및 Q61로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 위치에서의 돌연변이를 포함한다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12S, G12R, G12F, G12L, G12N, G12A, G12D, G12V, G13C, G13S, G13D, G13V, G13P, S17G, P34S, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61L, Q61R, 및 Q61H로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12, G13, A59, Q61, K117 및 A146으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 위치에서의 돌연변이를 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12R, G12S, G12A, G12D, G12V, G13C, G13R, G13S, G13A, G13D, G13V, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61L, Q61R, Q61H, K117N, K117R, K117E, A146P, A146T 및 A146V로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12, G13, A59, 및 Q61로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 위치에서의 돌연변이를 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12R, G12S, G12A, G12D, G12V, G13C, G13R, G13S, G13A, G13D, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61L, Q61R 및 Q61H로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12, G13, 및 D153으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 위치에서의 돌연변이를 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12A, G12C, G12D, G12V, G12S, G13D, 및 D153V로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12S, 및 D153V로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다.
일부 구현예에서, NRAS는 코돈 12, 13, 59, 61, 및 146으로부터 선택된 하나 이상의 위치에서의 돌연변이를 포함한다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12, G13, A59, Q61, K117 및 A146으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 위치에서의 돌연변이를 가진다. 일부 구현예에서, KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12R, G12S, G12A, G12D, G12V, G13C, G13R, G13S, G13A, G13D, G13V, A59D, A59T, Q61K, Q61L, Q61R, Q61H, K117N, K117R, K117E, A146P, A146T 및 A146V로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다. 일부 구현예에서, NRAS 단백질의 돌연변이 형태는 Q61 또는 A146에서의 하나 이상의 아미노산 위치에서의 돌연변이를 가진다. 일부 구현예에서, NRAS 단백질의 돌연변이 형태는 Q61K, Q61H, Q61R, Q61L, Q61N, Q61E, Q61P, A146T, A146P, A146V, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다. 일부 구현예에서, NRAS 단백질의 돌연변이 형태는 Q61H, Q61R, Q61L, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 가진다.
일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는, RAS 돌연변이를 갖는 세포의 증식을 억제하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, RAS 돌연변이를 갖는 세포에서 어팝토시스를 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 접촉은 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, 대상체에서의 RAS의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 진행을 억제하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 접촉은 플리나불린을 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는, KRAS 돌연변이를 갖는 세포의 증식을 억제하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, KRAS 돌연변이를 갖는 세포에서의 어팝토시스를 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, 대상체에서의 KRAS의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 진행을 억제하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에게 플리나불린을 투여하는 것을 포함하는, NRAS 돌연변이를 갖는 세포의 증식을 억제하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, NRAS 돌연변이를 갖는 세포에서의 어팝토시스를 유도하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예는 세포를 플리나불린과 접촉시키는 것을 포함하는, 대상체에서 NRAS의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 진행을 억제하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예에서, 대상체는 인간이다.
추가의 구현예는 그것을 필요로 하는 대상체에 화합물의 조합을 투여하는 것을 포함한다. 조합은 추가의 약제와 함께 본원에 기재된 화합물, 조성물, 약제학적 조성물을 포함할 수 있다.
일부 구현예는 추가의 약제와 함께 본원에 기재된 기재된 화합물, 조성물, 및/또는 약제학적 조성물을 공동투여하는 것을 포함한다. "공동-투여"는 2종 이상의 제제가 이들이 실제로 투여되는 시점 또는 방법과 무관하게 동시에 환자의 혈류에서 찾을 수 있음을 의미한다. 일 구현예에서, 제제는 동시에 투여된다. 하나의 이와 같은 구현예에서, 조합으로의 투여는 제제를 단일 용량 형태로 조합하여 달성된다. 또 다른 구현예에서, 제제는 순차적으로 투여된다. 일 구현예에서, 제제는 동일한 경로를 통해, 예컨대 경구로 투여된다. 또 다른 구현예에서, 제제는 상이한 경로를 통해 투여되고, 예컨대 그 하나는 경구로 투여되고, 다른 것은 정맥내로 투여된다.
본원에 기재된 방법은 플리나불린을 추가의 활성제와 함께 공동투여하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 본 방법은 추가로 추가의 치료제를 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 도세탁셀이고, 암은 인간 비-소세포 폐암이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 베바시주맙이고, 암은 인간 비-소세포 폐암이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 이리노테칸이고, 암은 결장암이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 테모로조마이드(Temolozomide)이고, 암은 교모세포종이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 이리노테칸이고, 암은 결장암이다.
일부 구현예에서, 추가의 치료제는 테모졸로마이드, 베비시주맙, 에버롤리무스, 카무스틴, 로무스틴, 프로카바진, 빈크리스틴, 이리노테칸, 시스플라틴, 카보플라틴, 메타트렉세이트, 에토포시드, 빈블라사틴, 블레오마이신, 악티노마이신, 사이클로포스파마이드, 또는 이포스파마이드일 수 있다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 베바시주맙, 도세탁셀, 이리노테칸, 및 테모졸로마이드로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 도세탁셀이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 이리노테칸이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 베바시주맙이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 테모졸로마이드이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 젬시타빈이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 카르무스틴이다. 일부 구현예에서, 추가의 치료제는 로무스틴이다.
본원에 기재된 치료 방법은 또한 방사선 요법과 조합하여 사용될 수 있다.
본원에 기재된 방법은 추가로 RAS 단백질의 돌연변이체 유형을 발현하는 것을 특징으로 하는 암을 가진 환자를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 환자를 확인하는 단계는 환자가 RAS 돌연변이를 가지는지 여부를 결정하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예는 RAS 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이고, 본 방법은 환자에게 약제학적 유효량의 플리나불린을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 환자는 (i) 환자로부터 샘플을 수집하는 단계; (ii) 샘플로부터 DNA를 단리하는 단계; (iii) 단리된 DNA에서 RAS 유전자 또는 그것의 단편을 증폭시키는 단계; 및 (iv) 증폭된 RAS 유전자에서 돌연변이가 존재하는지 여부를 검출하여, 이로써 환자가 RAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지는지 여부를 결정하는 단계에 의해 확인된다. RAS 돌연변이를 검출하기 위한 방법의 예는 비제한적으로 증폭내화성 돌연변이시스템(amplification refractory mutation system, ARMS) PCR, BEAMing 검정, 디지털 PCR, 및 서열분석 또는 PCR을 위한 다른 적합한 프라이머, 및 프로브를 포함한다.
본원에 기재된 방법은 추가로 KRAS의 돌연변이체 유형을 발현하는 것을 특징으로 하는 암을 갖는 환자를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 환자를 확인하는 단계는 환자가 KRAS 돌연변이를 가지는지 여부를 결정하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예는 KRAS 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이고, 본 방법은 환자에게 약제학적 유효량의 플리나불린을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 환자는 (i) 환자로부터 샘플을 수집하는 단계; (ii) 샘플로부터 DNA를 단리하는 단계; (iii) 단리된 DNA에서 KRAS 유전자 또는 그것의 단편을 증폭시키는 단계; 및 (iv) 증폭된 KRAS 유전자에서 돌연변이가 존재하는지 여부를 검출하여, 이로써 환자가 KRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지는지 여부를 결정하는 단계에 의해 확인된다.
본원에 기재된 방법은 추가로 KRAS 돌연변이에 대해 시험하는 단계 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예를 들면 코돈 12, 13, 59, 61 및/또는 146에서의 KRAS 돌연변이는 환자로부터 취해진 병리학 샘플로부터 검출될 수 있다. 이러한 시험의 일부 구현예에서, DNA는 샘플로부터 제거되고, 검출이 허용되는 표적화된 돌연변이된 DNA를 증폭시키기 위해 PCR을 사용하여 표지된 올리고뉴클레오타이드 프로브에 대해 시험된다. 일부 구현예에서, 상업적 시험 센터는 이러한 시험을 실시할 수 있다. 일부 구현예에서, 시험 시트 예컨대 TheraScreen: K-RAS 돌연변이 키트 (DxS Ltd, 48 그라프턴 스트리트, 맨체스터 Ml 3 9XX, UK)가 사용될 수 있다. 예를 들면, TheraScreen 키트는 K-RAS 종양유전자의 코돈 12 및 13에서의 돌연변이를 검출할 수 있다:
GIy 12 Asp (GGT>GAT) GIy 12 Arg (GG1>CGT)
GIy 12 Ala (GGT>GCT) GIy 12Cy s (GGT>TGT)
GIy 12VaI (GGT>GTT) GIy 13 Asp (GGOGAC) Glyl2Ser (GGT>AGT)
본원에 기재된 방법은 추가로 NRAS 단백질의 돌연변이체 유형을 발현하는 것을 특징으로 하는 암을 갖는 환자를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 환자를 확인하는 단계는 환자가 NRAS 돌연변이을 가지는지 여부를 결정하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예는 NRAS 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이고, 본 방법은 환자에게 약제학적 유효량의 플리나불린을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 환자는 (i) 환자로부터 샘플을 수집하는 단계; (ii) 샘플로부터 DNA를 단리하는 단계; (iii) 단리된 DNA로부터 NRas 유전자 또는 그것의 단편을 증폭시키는 단계; 및 (iv) 증폭된 NRas 유전자에서 돌연변이가 존재하는지 여부를 검출하는 단계로서, 이로서 환자가 NRas 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지는지 여부를 결정하는 단계에 의해 확인된다.
본원에 기재된 방법은 추가로 NRAS 돌연변이에 대한 시험을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예를 들면 코돈 12, 13, 59, 61 및/또는 146에서의 NRAS 돌연변이는 환자로부터 취해진 병리학 샘플로부터 검출될 수 있다. 이러한 시험의 일부 구현예에서, DNA는 샘플로부터 제거되고, 검출이 허용되는 표적화된 돌연변이된 DNA를 증폭시키기 위해 PCR을 사용하여 표지된 올리고뉴클레오타이드에 대해 시험된다. 다수의 상업적으로 입수가능한 키트 (Dxs Diagnostic Innovations, Applied Biosystems, 및 Quest diagnostics 참조), 프라이머 및 서열분석 또는 PCR을 위한 프로브는 NRAS의 코돈 돌연변이에 기반하여 설계될 수 있다.
본원에 기재된 방법은 추가로 HRAS 단백질의 돌연변이체 유형을 발현하는 것을 특징으로 하는 암을 갖는 환자를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 환자를 확인하는 단계는 환자가 HRAS 돌연변이를 가지는지 여부를 결정하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예는 HRAS 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이고, 본 방법은 환자에게 약제학적 유효량의 플리나불린을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 환자는 (i) 환자로부터 샘플을 수집하는 단계; (ii) 샘플로부터 DNA를 단리하는 단계; (iii) 단리된 DNA에서 HRAS 유전자 또는 그것의 단편을 증폭시키는 단계; 및 (iv) 증폭된 HRAS 유전자에서 돌연변이가 존재하는지 여부를 검출하여, 이로써 환자가 HRAS 돌연변이를 특징으로 하는 암을 가지는지 여부를 결정하는 단계에 의해 확인된다.
본 발명을 추가로 예시하기 위해, 하기 실시예가 포함된다. 본 실시예는 물론 본 발명을 특별하게 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 청구항의 범위 내의 이들 실시예의 변형예는 본 기술분야의 당업자의 관점 내의 것이고, 본원에 청구되고, 기재된 바와 같은 본 발명의 범위 내에서 포함되는 것으로 고려된다. 독자는 본 개시내용을 읽는 숙련가, 및 본 기술분야의 당업자는 철저한 실시예 없이도 본 발명을 제조하고 사용할 수 있다.
실시예
실시예 1
모든 세포주를 2-10% FBS가 보충된 그것의 각각의 적절한 성장 배지에서 성장시켰고, 37℃에서 5% CO2의 분위기 내에 보관하였다.
세포를 100uL 체적으로의 96-웰 미세적정 플레이트 중의 성장 배지 내에 플레이팅시켰다. 세포를 이후 가습된 인큐베이터에서 37℃에서 24시간 동안 배양시켰다. 시험 제제 (플리나불린)의 용량은 HP D300 디지털 분배기를 사용하여 달성되었다. 간단하게는, 디지털 분배기는 DMSO 용매 중의 시험 제제 (플리나불린)을 배지를 함유하는 웰들에 정확한 체적으로 첨가하였다. 대조군 웰은 시험 제제 (플리나불린)가 공급된 등가용적의 DMSO를 공급받았다. 시험 제제의 첨가 이후, 세포를 가습된 인큐베이터 내에서 37℃에서 72시간 동안 표 1에 기재된 농축액 및 희석액에 노출시켰다. 72시간 노출 이후, 플리나불린 및 대조군 배지를 빼내었고, 배지 및 CellTiter-Glo® 시약의 1:1 혼합물 200㎕를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 가습된 인큐베이터 내에서 37℃에서 60분 동안 배양시켰다. 배양 이후, 발광을 발광분석기를 사용하여 기록하였다.
데이터를 발광 신호로부터 계산된 미처리된 (비히클) 대조군의 세포 정상 백분율로서 표현하였다. 세포의 생존율은 미처리된 대조군의 평균 발광값으로 플리나불린으로 처리된 샘플의 평균 발광값을 나누어 측정하였다. 플리나불린 처리된 샘플 및 대조군에 대한 저해 농도 (IC50) 값을 비선형 회귀 분석을 사용하여 데이터를 곡선 핏팅함으로써 Prism 6 소프트웨어 (GraphPad Software, Inc.)을 사용하여 추정하였다.
표 2에 나타난 바와 같이, 단일 활성제로서의 플리나불린은 KRAS 및 NRAS 돌연변이 모두를 포함하는 RAS 돌연변이를 갖는 다양한 종양 세포주에 대해 낮은 IC50 농도에서 세포독성 효과를 가진다.
실시예 2
플리나불린 및 도세탁셀의 조합을 시험하였고, 이의 활성을 A549 (KRAS G12S) 인간 폐 종양 이종이식 모델에서의 표준 화학요법 도세탁셀과 비교하였다. 실험 데이터는 A549 모델에서의 도세탁셀과 조합되는 플리나불린의 잠재적인 추가적 또는 상승적 효과를 결정하였다.
A549 인간 폐 종양 이종이식 모델
대략 20g으로 칭량되는 5 내지 6 주령의 암컷 누드 마우스 (nu/nu)를 Harlan, Inc. (Madison, WI)로부터 구하였다. A549 인간 폐 종양 세포주를 미국 종균 협회 (ATCC)로부터 얻었다. A549 인간 폐 종양 세포주는 KRAS G12S에서 돌연변이를 가졌다. 종양은 58세 백인 남성으로부터의 폐암 조직의 조직절편 배양으로부터 유래된 것이다. 동물은 누드 마우스 호스트에서의 피하 성장 종양으로부터 얻은 A549 인간 종양 암종의 절편을 가진 투관침으로 피하로 이식받았다. 종양이 대략 크기가 46mg가 되는 경우 (접종 이후 18일), 동물은 치료 및 대조군 그룹으로 한쌍으로 매칭되었다. 음성 대조군 그룹은 8마리의 종양 마우스를 포함하였고, 모든 다른 그룹은 9마리의 종양 마우스를 포함하였다. 각각의 마우스에 귀에 태그를 달고, 실험 전반에 걸쳐 개별적으로 후속시켰다. 연구를 비-GLP 셋팅으로 수행하였다. 초기 용량은 한 쌍의 매칭 이후 1일차에 주어졌다. 7.5mg/kg의 플리나불린을 2개의 상이한 스케줄 - 1, 4, 8, 11, 및 15일차 및 qdx5 (5일 동안 1일 1회 용량)으로 i.p.로 투여하였다. 음성 대조군으로서 작용하도록 12.5% 디메틸설폭사이드 (DMSO), 5% 크레모포어, 및 82.5% 땅콩 오일을 조합하고, qdx5로 i.p.로 투여하였다. 양성 대조군으로서 작용하도록 12.5mg/kg으로 1, 3, 및 5일차에 i.v.로 투여된 도세탁셀 (Aventis)을 100mg/kg에서 wklyx3로 i.p.로 투여하였다. qdx5 스케줄로의 7.5mg/kg으로의 플리나불린은 단일 제제와 동일한 용량, 경로, 및 스케줄로 도세탁셀과 조합하여 투여되었다. 플리나불린 및 도세탁셀 조합 그룹에서, 도세탁셀을 플리나불린보다 15-30 분 이전에 투여하였다.
플리나불린을 칭량하고, 이후 12.5% DMSO, 5% 크레모포어, 및 82.5% 땅콩 오일을 각각 첨가하였다. 마지막으로, 화합물을 와류로 혼합하였고, 한시간 이내에 주입하였다.
각 그룹을 8마리의 마우스를 포함하였다. 마우스를 매주 2회 칭량하였고, 종양 측정값을 1일차에 시작하여 매주 2회로 캘리퍼스를 사용하여 얻었다. 이들 종양 측정값을 표준 식 (W2 x L)/2으로 mg 종양 중량으로 변환시켰다. 대조군 그룹 종양 크기가 1 그램의 평균값에 도달되는 경우에 실험을 종료시켰다. 종료시, 마우스를 칭량하고, 희생시켰고, 이의 종양을 절개하였다. 종양을 칭량하고, 그룹당 평균 종양 중량을 계산하였다. 이러한 모델에서, 처리된 평균 종양 중량/대조군 평균 종양 중량 × 100을 100%로부터 감하여 각 그룹에 대해 종양 성장 억제 (TGI)를 구하였다. GraphPad Prismⓒ 소프트웨어 (Macintosh 버전 3.0)을 사용하는 하나의 맞춤형 t-시험을 사용하여 p-값을 계산하였다.
일부 제제는 종양 이종이식 모델에서 종양 수축을 야기할 수 있었다. 이러한 제제와 함께, 주어진 종양의 최종 중량은 1일차 처리의 시작시 자체의 중량으로부터 감하였다. 이러한 차이는 초기 종양 중량으로 나누어 %퇴화율(regression)을 얻었다. 평균 %종양 퇴화율을 종양 퇴화를 겪은 그룹 내의 마우스에서의 데이터로부터 계산하였다.
음성 및 양성 대조군
음성 대조군 그룹은 56일차에서의 870.4mg ± 305.1의 최종 평균 종양 중량을 가졌다. 도세탁셀 (12.5 mg/kg; i.v.; 1, 3, 5일차)은 연구에 대해 양성 대조군으로서 역할을 하였고, 각각 655.1mg ± 109.2 및 691.4 ± 175.8의 최종 평균 종양 중량을 가졌다. 이는 비히클 대조군 그룹과 비교하여 도세탁셀에 대해 26.1%의 TGI를 생성하였고, 수행된 과거 A549 연구에서 볼 수 있는 예상된 활성 범위 내의 것이었다. 도세탁셀 또는 이리노테칸 그룹에서 관찰된 독성 사망은 없었다.
도세탁셀 그룹에서의 동물은 일부 체중 감소를 겪었다. 11일 차에, 초기 평균 체중 감소는 2.7%로 기록되었다. 22일차까지 동물은 그것의 중량이 재측정되었고, 15.4%의 양의 체중 증가를 나타내었다. 양성 대조군 그룹에서 관찰된 독성 사망은 없었다.
플리나불린 및 도세탁셀 조합
1-5일차에서의 7.5 mg/kg으로의 플리나불린의 복강내 투여는 1525.7 mg ± 355.3의 최종 평균 종양 중량을 생성하였다. 플리나불린 (7.5 mg/kg； 1-5일차) 및 도세탁셀 (12.5 mg/kg； i.v.； 1,3,5일차)의 조합 그룹은 56일 차에 265.8 mg ± 113.1의 최종 평균 종양 중량을 가졌다. 이는 74.3%의 TGI을 생성하였다. 조합은 도세탁셀 처리 그룹에 대해 우수하였고, 이는 655.1mg ± 109의 평균 최종 종양 중량을 가졌고, 조합 그룹과 도세탁셀 단일 제제 그룹 사이의 차이는 통계적으로 유의미하였다 (P < 0.05).
플리나불린 단일 제제 그룹에서의 동물은 체중 증가를 겪었다. 11 및 22일차에, 평균 체중 증가는 각각 10.6% 및 21.8%로 기록되었다. 이러한 용량 그룹에서 관측된 독성 사망은 없었다. 조합 그룹에서의 동물은 체중 감소를 겪었다. 11일차에, 초기 평균 체중 감소는 2.7%로 기록되었다. 22일차까지 동물은 그것의 중량이 재측정되었고, 16% 체중 증가를 나타내었다.
평가된 용량 수준 및 스케줄에서, 동물은 단일 제제로서의 플리나불린으로 독성을 겪지 않았다. 5개의 연구 모두에서, 단지 하나의 사망이 단일 제제로 투여되는 경우에 플리나불린 그룹에서 일어났다. 도 3은 복강내 경로를 통해 도세탁셀 (12.5 mg/kg)과 조합하여 플리나불린 (7.5 mg/kg)을 사용하는 경우에 마우스에서 종양 중량 부검을 나타낸다. A549 폐 종양 모델에 대한 도세탁셀과 조합되는 플리나불린은 도세탁셀 단독 (74.3% 대 26.1%)과 비교되는 경우에 TGI에서의 통계적으로 유의미한 (P < 0.05) 증가를 나타내었다. 그 결과는 단일 제제로서 도세탁셀과 비교하는 경우에 플리나불린 및 도세탁셀의 조합에 대한 강한 종양 성장 억제를 나타내었고, 이는 A549 (KRAS G12S) 인간 폐 종양 이종이식 모델에서의 도세탁셀과의 조합되는 플리나불린의 잠재적인 추가적 또는 상승적 효과를 나타낸다.
실시예 3
사용되는 신경아교종의 마우스 모델은 교모세포종 (GBM)의 전신경 분자 하위그룹을 모사하는 신경아교종의 PDGF-유도된 GEMM이었다. 이러한 모델은 체세포 세포 특이적 유전자 전달에 기초하고; 복제-수용(competent) ALV-스플라이스 수용체 (RCAS) 레트로바이러스 시스템은 세포 유형-특이적 방식으로 분화의 엄격하게 조절되는 윈도우 내에서 특정 유전자 변이의 점적주입을 가능하게 하였다. RCAS/tv-a 시스템은 특이적 세포 군집에서 RCAS 수용체 (tv-a)를 발현하도록 유전자 조작된 마우스를 감염시키기 위해 RCAS 레트로바이러스 벡터를 이용하였다. 본원에서, 신경아교종은 PDGF의 뇌에서의 네스틴-발현 세포로의 RCAS-매개된 변이에 의해 생성되었다. 네스틴은 뇌에서 줄기/조상세포 세포 군집에서 발현되었고, 인간 및 마우스 뇌종양 모두에서 말초혈관 영역 (PVN)에 위치한 암 줄기세포에 대한 마커인 것으로 실증되었다. PDGF-유도된 신경아교종은 감염후 4-5주까지 Ink4a-arf-/- 결실과 조합되는 경우에 완전한 침투를 일으켰다. 이러한 종양은 GBM의 "전신경" 하위유형을 근접하게 모사하였고, 이에서 CDKN2A ( p16INK4A 및 p14ARF 모두에 대해 엔코딩됨) 결실은 "전신경" 인간 신경아교종의 56%에서 관측되었다. 인간 신경아교종, 예컨대 Scherer 구조, 미세혈관 증식 및 가성 책상배열 괴사를 정의하는 종양 세포 구조는 도 1a-1d에 나타난 이러한 GEMM에서 재생성되었다. 또한, 신경아교종 세포는 뉴런 및 혈관을 둘러싸는 백질 트랙(matter track)에 따라 이동하였고, 하위-연질 공간에서의 뇌의 가장자리에서 누적되었다. 이와 관련하여, 신경아교종의 PDGF-유도된 GEMM은 PN-GBM와 근사하게 비슷하고, 종양 미세환경에서의 종양 세포 및 비-신생물성 세포 사이의 상호작용을 정의하는 우수한 실험 시스템을 나타낸다.
신경아교종의 PDGF-유도된 모델을 사용하여 도 2에 나타난 바와 같이 방사선 및 테모졸로마이드에 대한 반응을 결정하였다. 신경아교종을 갖는 마우스는 증상에 의해 확인되었고, T2 칭량된 MRI로 확인하였다. 이러한 마우스는 12일 동안 매일 25 mg/kg의 비히클, 테모졸로마이드, 또는 2주 동안 1주일당 5일로 매일 2Gy의 용량으로 분할된 방사선으로 처리하였다. 도 2에서의 2개의 상부 이미지는 미처리된 종양(비히클)의 성장을 나타내고; 반면 테모졸로마이드 처리되고 조사된 종양은 동일한 기간 동안 체적에 있어서 축소되었다. 이들 종양은 처리 이후 재발되었고, 모든 동물은 마우스의 이들 대응하는 집단에 대한 생존율 곡선에서 볼 수 있는 바와 같이 재발된 종양으로 사망하였다. 방사선 및 테모졸로마이드로 처리된 시험 데이터는 하기를 예시하였다: 1) 시험은 이 마우스 모델에서 수행하였고, 2) 마우스 생존율에 대한 이들 처리의 효과는 인간 조건을 반영하였고, 3) 모든 마우스는 질병으로 사멸하였고, 및 4) 이러한 쥣과 집단의 상대적으로 균일한 결과는 본 연구에서의 생존 차이를 검출하는 실험적 패러다임의 사용을 지지하였다.
상기 기재된 과정을 사용하여 제조된 신경아교종의 PDGF-유도된 모델을 생성하였다. 마우스를 ink4a/arf-/- 및 lox-정지-lox 루시퍼라아제의 배경을 갖는 네스틴 프로모터로부터의 RCAS 수용체 (tv-a)의 발현을 위해 유전자 이식시켰고, G12D 돌연변이체 KRAS를 발현하는 RCAS-PDGF 및 RCAS-KRAS로 감염시켰다. 생성된 종양은 최초 3-4 주 내에 발생되었다. 종양은 GBM의 조직학적 특징을 가졌고, 기면의 증상 및 좋지 않은 그루밍(grooming), MRI는 IVIS 시스템을 사용한 T2 칭량된 서열, 또는 생물발광 화상형성을 사용한 MRI 스캔에 의해 확인될 수 있다. 처리 그룹 (KRAS 종양)에서의 마우스는 10 wks 동안 매주 2회로 플리나불린 7.5mg/kg을 i.p.로 투여받았고, 대조군 그룹에서의 마우스는 플리나불린 희석액 (40 wt%의 콜리퍼 및 60 wt%의 프로필렌 글리콜) 단독을 투여받았다. 이들 처리된 마우스는 중량이 증가하기 시작하고, 수일 내에 개선된 증상을 나타낸다.
플리나불린을 G12D 돌연변이체 KRAS를 발현하는 PDGF-유도된 신경아교종을 갖는 마우스에 대해 시험하였다. 4-6 주령 네스틴-tv-a/ink4a-arf-/- 마우스를 이소플루란으로 마취시켰고, RCAS-PDGF-B-HA, RCAS-KRAS로 형질전환된 Df-1 세포를 주사하였다. 마우스에 해밀턴 주사기에 부착된 26-게이지 바늘을 통해 뇌정위적 프레임을 사용하여 2X105 RCAS-PDGF-B-HA/RCAS-KRAS의 1:1 혼합물의 1 마이크로리터를 주사하였다. 세포를 우측 전두골 피질, 측뇌실 정위 좌표 1.75 mm, Lat -0.5mm, 및 2mm의 깊이로 주사하였다. 마우스를 체중 감소에 대해 신중하게 모니터링하였고, 이들이 2일 연속 기간에 걸쳐 총 0.3 그램 초과로 체중이 손실되거나 또는 종양의 외형 징후를 나타내는 경우에 연구를 시작하였다. 마우스를 연구 그룹에 포함시키고, 기면, 구부정한 자세(hunched posture), 식욕 손실, 종양 성장의 외형 징후, 불안, 체중 손실, 및 번식의 완전 불능에 대해 연속적으로 모니터링하면서 상기 기재된 플리나불린 또는 플리나불린 희석액으로 처리하였다. 이것의 체중, 이동성, 사료 공급의 불능이 20% 초과로 감소되는 경우에 또는 수컷에 대해 14 그램/암컷에 대해 12 그램 미만으로 칭량되는 경우에 마우스를 희생시켰다. 마우스를 CO2를 사용하여 희생시켰고; 뇌를 수득하였고, 10% 중성 완충된 포르말린으로 O/N으로 보관하였고, 이후 플렉스 80으로 대체하고, 4도로 보관하였다.
도 4는 G12D Kras 돌연변이를 가진 교모세포종을 갖는 마우스의 생존율을 나타낸다. 도 4에 나타난 바와 같이, 교모세포종의 PDGF-유도된 모델을 갖는 마우스는 일반적으로 대조군 그룹과 비교하여 플리나불린 처리된 그룹에서 상당하게 더 나은 생존율을 가졌다 (p=0.001).
실시예 4
G12D 돌연변이체 KRAS를 발현한 PDGF-유도된 신경아교종을 갖는 마우스를 실시예 3에 따른 과정을 사용하여 준비하였고, 본 실험에서 사용하였다. 4-6 주령 네스틴-tv-a/ink4a-arf-/- 마우스를 이소플루란으로 마취시켰고, RCAS-PDGF-B-HA, RCAS-KRAS로 형질감염된 Df-1 세포를 주사하였다. 마우스에 해밀턴 주사기에 부착된 26-게이지 바늘을 통해 뇌정위적 프레임을 사용하여 2X105 RCAS-PDGF-B-HA/RCAS-KRAS의 1:1 혼합물의 1 마이크로리터를 주사하였다. 세포를 우측 전두골 피질, 측뇌실 정위 좌표 1.75 mm, Lat -0.5mm, 및 2mm의 깊이로 주사하였다. 마우스를 체중 감소에 대해 신중하게 모니터링하였고, 이들이 2일 연속 기간에 걸쳐 총 0.3 그램 초과로 체중이 손실되거나 또는 종양의 외형 징후를 나타내는 경우에 연구를 시작하였다.
마우스를 2개의 연구 그룹에 포함시켰다. 하나의 그룹을 테모졸로마이드 (TMZ), 방사선 및 플리나불린의 조합으로 처리하였고: 방사선은 10gy x1로 주어졌고, 플리나불린 희석액 중의 TMZ 및 플리나불린 7.5 mg/kg을 10주 동안 월요일 및 화요일에 매주 2회 복강내로 투여하였다. 다른 그룹, 대조군 그룹을 TMZ 및 방사선의 조합으로 처리하였고: 방사선은 10gy x1로 주어졌고, TMZ를 10주 동안 월요일 및 화요일에 매주 2회 복강내로 투여하였다. 마우스를 기면, 구부정한 자세, 식욕 손실, 종양 성장의 외형 징후, 불안, 체중 손실, 및 번식의 완전 불능에 대해 연속적으로 모니터링하였다. 이것의 체중, 이동성, 사료 공급의 불능이 20% 초과로 감소되는 경우에 또는 수컷에 대해 14 그램/암컷에 대해 12 그램 미만으로 칭량되는 경우에 마우스를 희생시켰다. 마우스를 CO2를 사용하여 희생시켰고; 뇌를 수득하였고, 10% 중성 완충된 포르말린으로 O/N으로 보관하였고, 이후 플렉스 80으로 대체하고, 4도로 보관하였다. 도 5에 나타난 바와 같이, 교모세포종의 PDGF-유도된 모델을 갖는 마우스는 일반적으로 TMZ 및 방사선을 공급받은 대조군 그룹과 비교하여 플리나불린, TMZ, 및 방사선 처리된 그룹에서 상당하게 더 나은 생존율을 가졌다 (p=0.0149).
실시예 5
플리나불린 및 이리노테칸의 조합을 시험하였고, 그것의 활성을 HCT-15 (KRAS 돌연변이 G13D; P53 돌연변이 S241F) 인간 결장 종양 이종이식 모델에서 표준 화학요법적 이리노테칸과 비교하였다. 실험 데이터는 HCT-15 모델에서 이리노테칸과 조합되는 플리나불린의 상승작용 효과를 결정하였다.
HCT-15 인간 결장 종양 이종이식 모델
암컷 무흉선 누드 마우스 (Hsd:무흉선 누드-Foxn1nu)을 Harlan (인디애나폴리스, IN)에 의해 공급받았다. 4 주령의 마우스를 받았다. 모든 마우스를 취급 전에 순응시켰다. HCT-15 인간 결장 종양 세포주를 ATCC (매너서스, VA)로부터 받았다. 배양액을 10% 소태아 혈청 (FBS; Seradigm; 래드너, PA)를 보충한 RPMI-1640 (Lonza; 워커스빌, MD)에 유지시켰고, 5% CO2 분위기에서 보관하였다. 충분한 양의 세포를 얻을 때까지 배양액을 1:10 스플릿 비로 조직 배양 플라스크에서 증식시켰다. HCT-15 인간 결장 종양 세포주를 KRAS G13D 및 P53 S241F에서의 돌연변이를 가졌다.
암컷 마우스에 HCT-15 종양 세포 (5x106 세포/마우스)의 현탁액을 포함하는 0.1 mL의 50% 배지/50% 매트리겔 혼합물을 피하로 오른쪽 옆구리에 접종시켰다.
플리나불린 (40% 솔루톨:60% 프로필렌 글리콜 중 80 mg/20 mL)을 0.75 mg/mL의 농도로 멸균된 5% 덱스트로오스 용액에 희석시켰다. 7.5mg/kg으의 플리나불린을 연구가 종료시까지 매주 2회 i.p.로 투여하였다. 플리나불린 비히클 (40% 솔루톨:60% 프로필렌 글리콜)을 플리나불린에 대해 동일한 비로 멸균된 5% 덱스트로오스 용액에 희석시켰고, 음성 대조군으로서 사용하였다. 이리노테칸 (Teva 의약품 (어바인, CA)을 10 ml/kg 용량 체적에서의 100 mg/kg의 용량을 전달하기 위해 10 mg/ml의 농도로 0.9% 염화나트륨 용액에 희석시켰다. 이리노테칸을 양성 대조군으로서 역할을 하도록 3주 동안 매주 1회 100 mg/kg의 용량으로 복강내로 투여하였다. 플리나불린을 또한 단일 제제로서 동일한 용량, 경로, 및 스케줄로 이리노테칸과 조합하여 투여하였다. 플리나불린 및 이리노테칸 조합 그룹에서 이리노테칸을 플리나불린보다 120분 이전에 투여하였다.
접종후 7일차에, 종양을 디지털 캘리퍼스를 사용하여 측정하였다. 캘리퍼스를 사용하여 종양의 폭 및 길이 직경을 측정하였다. 측정된 값을 동물 연구 관리 소프트웨어, Study Director V.2.1.1 (Study Log)를 사용하여 디지털 방식으로 기록하였다. 종양 부피를 하기 식을 이용하여 계산하였다: 종양 부피 (mm3) = (a x b2/2), 식 중, 'b'는 최소의 직경이고, 'a'는 최대 직경이다. 104-125 mm3의 종양 크기를 갖는 40마리의 마우스를 10마리의 마우스의 4개의 그룹으로 무작위적으로 추출하였고, 각각은 Study Director (1일차)를 사용하여 무작위 평균화에 의한 대략 112 mm3의 평균을 가졌다. 마우스를 무작위적으로 추출하고 이후 매주 2회로 취하는 경우에 종양 부피 및 체중을 기록하였다. 매일 임상적으로 관찰하였다.
대조군 그룹 종양 크기가 1 그램의 평균에 도달되는 경우에 실험을 종료하였다. 종료시, 마우스를 칭량하였고, 희생시켰고, 이의 종양을 절개하였다. 종양을 칭량하였고, 그룹당 평균 종양 중량뿐만 아니라 종양 괴사의 시각적 평가를 계산하였다.
평균 종양 성장 저해 (TGI)을 27일 (연구의 최종일) 동안 계산하였다. 이종이식 연구에서의 모든 통계적 분석을 Prism GraphPad® v6.00 소프트웨어로 수행하였다. 27일에서의 종양 부피 차이를 분산분석법 (ANOVA) 시험을 사용하여 확인하였다.
음성 및 양성 대조군
음성 대조군 그룹은 1701.4 mm3 ± 178.0의 27일차의 최종 평균 종양 부피를 가졌다. 이리노테칸 (100 mg/kg; i.p.; 1, 8, 15일차)은 연구에 대한 양성 대조군으로서 작용하였고, 1196.2 mm3± 121.7의 최종 평균 종양 부피를 가졌다. 이는 비히클 음성 대조군 그룹과 비교하여 이리노테칸에 대해 31.8%의 TGI를 생성하였다. 이는 음성 대조군 또는 양성 그룹에서 관찰되는 독성 사멸이 존재하지 않았다.
비히클 음성 대조군, 플리나불린, 및 이리노테칸으로의 처리가 잘 용인되었다. 일부 약간의 체중 감소는 연구의 최종적인 수일 내에 비히클 대조군 그룹 및 플리나불린 그룹에서 발생하였고, 그러나 체중 손실은 크지는 않았다. 임상 관찰은 본 종양 모델에 대해 전형적인 것인 종양 괴사로 주로 이루어졌다. 플리나불린 및 이리노테칸으로의 병용 처리는 관찰되는 중간 정도의 체중 감소로 상당하게 잘 용인되었다.
플리나불린 (7.5 mg/kg； 일 1-5) 및 이리노테칸 (100 mg/kg, 일 1,8 및 15)의 조합 그룹은 766.8 mm3 ± 84.2의 27일차의 최종 평균 종양 부피를 가졌다. 이는 58.8%의 TGI를 생성하였다. 본 조합은 이리노테칸 처리 그룹에 대해 우수하였고, 이는 1196.2 mm3 ± 121.7의 평균 최종 종양 부피를 가졌고, 조합 그룹과 이리노테칸 단일 제제 그룹 사이의 차이는 통계적으로 유의미하였다 (p < 0.05).
평가되는 용량 수준 및 스케줄에서, 동물은 단일 제제로서 플리나불린으로 독성을 겪지 않았다. 도 6은 플리나불린 (7.5 mg/kg)을 복강내 경로를 통해 이리노테칸 (100 mg/kg)과 조합하여 사용하는 경우에서의 마우스에서의 연구 과정에 걸친 종양 부피를 나타낸다. HCT-15 결장 종양 모델에 대한 이리노테칸과 조합되는 플리나불린은 이리노테칸 단독 (58.8% 대 31.8%)과 비교하여 통계적으로 TGI에서의 상당한 (p < 0.05) 증분을 입증하였다. 결과는 단일 제제로서 이리노테칸과 비교하는 경우에 플리나불린 및 이리노테칸의 조합에 대해 강한 종양 성장 저해를 나타내었고, 이는 HCT-15 (KRAS G13D) 인간 결장 종양 이종이식 모델에서 이리노테칸과 조합되는 플리나불린의 잠재적인 추가적 또는 상승적 효과를 나타낸다.
실시예 6
플리나불린 및 이리노테칸의 조합을 시험하였고, 그것의 활성을 LoVo (KRAS 돌연변이 p.G13D) 인간 결장 종양 이종이식 모델에서 이리노테칸 단독과 비교하였다. 실험 데이터는 LoVo 모델에서의 이리노테칸과 조합되는 플리나불린의 잠재적인 추가적 또는 상승적 효과를 결정하였다.
LoVo 인간 결장 종양 이종이식 모델: 암컷 무흉선 누드 마우스 (Hsd:무흉선 누드Foxn1nu)을 Harlan (인디애나폴리스, IN)로부터 공급받았다. 마우스를 4 주령차에 공급받았다. 모든 마우스를 취급 전에 순응시켰다. LoVo 인간 결장 종양 세포주를 ATCC (매너서스, VA)로부터 받았다. 배양물을 10% 소태아 혈청 (FBS; Seradigm; 래드너, PA)이 보충된 F12-K (Corning/Cellgro, 매너서스, VA)에서 유지시켰고, 5% CO2 분위기에서 보관하였다. 충분한 양의 세포를 얻을 때까지 1:3 스플릿 비로 배양물을 조직 배양 플라스크 내에서 팽창시켰다. LoVo 인간 결장 종양 세포주는 KRAS p.G13D에서 돌연변이를 가졌다.
암컷 마우스에 LoVo 종양 세포 (1x107 세포/마우스)의 현탁액을 함유하는 0.1 mL의 50% 매질/50% 매트리겔 혼합물을 피하로 오른쪽 옆구리에 접종시켰다.
플리나불린 (40% 솔루톨:60% 프로필렌 글리콜 중의 80 mg/20 mL)을 0.75 mg/mL의 농도로 멸균된 5% 덱스트로오스 용액 중에 희석시켰다. 7.5mg/kg로의 플리나불린을 연구의 종료시까지 매주 2회로 i.p.로 투여하였다. 플리나불린 비히클 (40% 솔루톨:60% 프로필렌 글리콜)을 플리나불린에 대해 동일한 비로 멸균된 5% 덱스트로오스 용액 중에 희석시켰고, 음성 대조군으로서 사용하였다. 이리노테칸 (Teva Pharmaceuticals (어바인, CA)을 10 ml/kg 용량 체적 중의 100 mg/kg의 용량을 전달하기 위해 10 mg/ml의 농도로 0.9% 염화나트륨 용액 중에 희석시켰다. 이리노테칸을 양성 대조군으로서 역할을 하기 위해 3주 동안 매주 1회로 80 mg/kg의 용량으로 복강내로 투여하였다. 플리나불린을 또한 각각의 단일 제제로서 동일한 용량, 경로, 및 스케줄으로 이리노테칸과 조합하여 투여하였다. 플리나불린 및 이리노테칸 조합 그룹에서, 이리노테칸을 플리나불린보다 120분 이전에 투여하였다.
접종하고 7일 이후, 종양을 디지털 캘리퍼스를 사용하여 측정하였다. 캘리퍼스를 사용하여 종양의 폭 및 길이 직경을 측정하였다. 측정된 값을 동물 연구 관리 소프트웨어, Study Director V.2.1.1 (Study Log)를 사용하여 디지털 방식으로 기록하였다. 종양 부피를 하기 식을 이용하여 계산하였다: 종양 부피 (mm3) = (a x b2/2), 식 중, 'b'는 최소의 직경이고, 'a'는 최대 직경이다. 104-125 mm3의 종양 크기를 갖는 40마리의 마우스를 10마리의 마우스의 4개의 그룹으로 무작위적으로 추출하였고, 각각은 Study Director (1일차)를 사용하여 무작위 평균화에 의한 대략 112 mm3의 평균을 가졌다. 마우스를 무작위적으로 추출하고 이후 매주 2회로 취하는 경우에 종양 부피 및 체중을 기록하였다. 매일 임상적으로 관찰하였다.
프로토콜에 개략된 바와 같이 15일차에 1500mm3 이상의 평균 종양 부피에 도달한 이후 비히클 대조군을 희생시켰다. 마우스가 죽은 것으로 발견되거나 빈사상태로 희생되어 이리노테칸 그룹이 774mm3의 평균 종양 부피에 도달되는 경우에 처리 그룹을 종결하였다. 검시 시점에서, 종양은 절개되고, 습윤 중량 측정뿐만 아니라 종양 괴사의 시각적 평가를 기록하였다.
평균 종양 성장 저해 (TGI)을 27일 동안 계산하였다. 이종이식 연구에서의 모든 통계적인 분석을 Prism GraphPad® v6.00 소프트웨어로 수행하였다. 27일에서의 종양 부피 차이를 분산분석법 (ANOVA) 시험을 사용하여 확인하였다. Welch 보정과 함께 하나의 맞춤형 스튜던트 T-시험을 사용하여 각 그룹과 비히클 대조군 사이의 임의의 차이를 확인하고, 2-맞춤형 스튜던트 T-시험을 사용하여 조합 그룹과 그걱의 각각의 단일 제제 사이의 차이를 입증하였다.
비히클 대조군은 15일 차에 2078.1 mm3의 평균 종양 부피에 도달하였다. 이러한 그룹은 연구를 통해 현저한 평균 체중 감소를 겪지 않았다. 10마리의 마우스 중 9마리는 12일차에 최초로 관찰되는 약간 내지 중간 정도의 종양 괴사를 겪었다. 모든 동물은 최종 희생까지 생존하였다.
플리나불린 7.5 mg/kg으로의 처리는 15일 차에 1279.2 mm3의 평균 종양 부피를 생성하였다. 이러한 그룹은 15일 차에 41.0% (n=7)의 TGI를 생성하였다. 15일차에 비히클 대조군과 비교하는 경우 (스튜던트 T-시험), 평균 종양 부피에서의 상당한 감소가 관측되었다 (p<0.05). 이러한 그룹은 연구 전반에 걸쳐 평균 체종 감소를 겪지 않았다. 10마리의 마우스 중 9마리는 12일차에 최초로 관찰되는 약간 내지 중간 정도의 종양 괴사를 겪었다. 중증 종양 괴사로부터의 이환율을 나타내는 임상 관찰로 인하여 19일 차에 마우스 5는 빈사상태로 희생되었다. 마우스 2, 3, 4, 7, 및 10은 연구 과정에서 사멸한 것으로 관찰되었다. 마우스 8은 기술적 오류로 인해 사멸한 것으로 발견되었다. 10마리의 마우스 중 3마리는 최종 희생까지 생존하였다.
이리노테칸 80 mg/kg으로의 처리는 15일 차에 1156.7 mm3의 평균 종양 부피를 생성하였다. 이러한 그룹은 15일 차에 비히클 대조군과 비교하는 경우 47.2% (n=10)의 TGI를 생성하였다. 15일차에 비히클 대조군과 비교하는 경우 (스튜던트 T-시험), 평균 종양 부피에서의 상당한 감소가 관측되었다 (p<0.05). 이러한 그룹은 연구의 최종일인 20일 차에 최대 7.4%로 중간 정도의 체중 감소를 겪었다. 10마리의 마우스 중 8마리는 12일차에 최초로 관찰되는 약간 내지 중간 정도의 종양 괴사를 겪었다. 중증 종양 괴사로부터의 이환율을 나타내는 임상 관찰로 인하여 19, 15, 및 18일 차에 마우스 3, 4, 및 5는 빈사상태로 희생되었다. 마우스 1 및 10은 연구 과정에서 17 및 10일 각각에 사망한 것으로 관찰되었다. 10마리의 마우스 중 5마리는 최종 희생까지 생존하였다.
플리나불린 7.5 mg/kg 및 이리노테칸 80 mg/kg으로의 처리는 15일 차에 468.4 mm3의 평균 종양 부피를 생성하였다. 이러한 그룹은 15일 차에 비히클 대조군과 비교하는 경우 82.4% (n=10)의 TGI를 생성하였다. 15일차 (스튜던트 T-시험) 및 단일 제제 플리나불린 (스튜던트 T-시험)에 비히클 대조군과 비교하는 경우 (스튜던트 T-시험), 평균 종양 부피에서의 상당한 감소가 관측되었다 (p<0.05). 15일 차에 단일 제제 이리노테칸과 비교하는 경우에 평균 종양 부피에 있어서 상당한 차이가 없었다. 이러한 그룹은 연구의 최종일인 20일 차에 최대 5.8%로 중간 정도의 체중 감소를 겪었다. 10마리의 마우스 중 5마리는 15일차에 최초로 관찰되는 약간 내지 중간 정도의 종양 괴사를 겪었다. 모든 10마리의 마우스는 최종 희생까지 생존하였다. 도 7에 나타난 바와 같이, 플리나불린 및 이리노테칸의 조합은 단일 제제로서의 이리노테칸보다 우수할 수 있다. 이리노테칸 단독 그룹에서의 마우스의 손실로 인해, 평균 종양 부피는 15일차에 1157 mm3로부터 20일차의 774 mm3까지 감소하였고, 이는 성능에서의 인지되는 변동을 야기한 것이다.

Claims (34)

  1. 플리나불린을 포함하는, RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 치료용 약제학적 조성물로,
    상기 RAS 단백질의 돌연변이 형태는 NRAS 단백질의 돌연변이 형태, HRAS 단백질의 돌연변이 형태, 또는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태이고,
    상기 돌연변이 형태는, G12C, G12R, G12D, G12F, G12L, G12N, G13C, G13R, G13S, G13A, G13V, G13P, S17G, P34S, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R, Q61H, K117N, A146P, A146T, A146V, 및 D153V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 RAS 단백질의 돌연변이 형태는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태인 약제학적 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 암은 결장직장암, 췌장암, 신장암, 폐암, 간암, 유방암, 전립선암, 위장암, 복막암, 흑색종, 자궁내막암, 난소암, 자궁경부암, 자궁 암종, 방광암, 교모세포종, 뇌 전이, 타액샘 암종, 갑상선암, 뇌암, 림프종, 골수종, 및 두경부암으로부터 선택되는 약제학적 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 암은 편평상피 세포암, 소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 폐의 선암종, 폐의 편평상피 암종, 간세포 암종, 결장암, 자궁내막암종, 및 간세포 암종으로부터 선택되는 약제학적 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 암은 결장직장암, 전립선암, 유방암, 폐암, 자궁내막암, 다발성 골수종, 췌장암, 신장암, 및 교모세포종으로부터 선택되는 약제학적 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 암은 비소세포 폐암, 췌장암, 및 교모세포종으로부터 선택되는 약제학적 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 암은 비소세포 폐암인 약제학적 조성물.
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12R, G12F, G12L, G12N, G12D, G13C, G13S, G13V, G13P, S17G, P34S, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R, 및 Q61H로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  9. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12R, G12D, G13C, G13R, G13S, G13A, G13V, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R, Q61H, K117N, A146P, A146T 및 A146V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  10. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12R, G12D, G13C, G13R, G13S, G13A, G13D, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R 및 Q61H로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12D, G12S, G13D, 및 D153V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  12. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 KRAS 단백질의 돌연변이 형태는 G12C, G12S, 및 D153V로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 위치에서 돌연변이를 포함하는 약제학적 조성물.
  13. 제1항에 있어서, 상기 RAS 단백질의 돌연변이 형태가 NRAS 단백질의 돌연변이 형태인 약제학적 조성물.
  14. 제1항에 있어서, 상기 NRAS 단백질이 코돈 12, 13, 59, 61, 및 146으로부터 선택되는 하나 이상의 위치에서 돌연변이를 포함하는 약제학적 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 상기 NRAS 단백질의 돌연변이 형태는 Q61 또는 A146에서 돌연변이를 포함하는 약제학적 조성물.
  16. 제1항에 있어서, 상기 NRAS 단백질의 돌연변이 형태는 Q61K, Q61H, Q61R, Q61L, Q61N, Q61E, Q61P, A146T, A146P, 및 A146V로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  17. 제1항 또는 제2항에 있어서, 약제학적 조성물은 도세탁셀을 추가로 포함하고, 암은 인간 비소세포 폐암인 약제학적 조성물.
  18. 제1항 또는 제2항에 있어서, 약제학적 조성물은 이리노테칸을 추가로 포함하고, 암은 인간 결장암인 약제학적 조성물.
  19. 플리나불린을 포함하는, RAS 돌연변이를 갖는 세포의 증식을 억제함으로써 암을 치료하기 위한 약제학적 조성물로,
    상기 RAS의 단백질의 돌연변이 형태가 NRAS 단백질의 돌연변이 형태, HRAS 단백질의 돌연변이 형태, 또는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태이고,
    상기 돌연변이 형태는, G12C, G12R, G12D, G12F, G12L, G12N, G13C, G13R, G13S, G13A, G13V, G13P, S17G, P34S, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R, Q61H, K117N, A146P, A146T, A146V, 및 D153V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  20. 플리나불린을 포함하는, RAS 돌연변이를 갖는 세포의 어팝토시스를 유도함으로써 암을 치료하기 위한 약제학적 조성물로,
    상기 RAS의 단백질의 돌연변이 형태가 NRAS 단백질의 돌연변이 형태, HRAS 단백질의 돌연변이 형태, 또는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태이고,
    상기 돌연변이 형태는, G12C, G12R, G12D, G12F, G12L, G12N, G13C, G13R, G13S, G13A, G13V, G13P, S17G, P34S, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R, Q61H, K117N, A146P, A146T, A146V, 및 D153V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 약제학적 조성물.
  21. 대상체에서 RAS 단백질의 돌연변이 형태를 발현하는 것을 특징으로 하는 암의 진행을 억제하기 위한 플리나불린을 포함하는 약제학적 조성물로,
    상기 RAS의 단백질의 돌연변이 형태가 NRAS 단백질의 돌연변이 형태, HRAS 단백질의 돌연변이 형태, 또는 KRAS 단백질의 돌연변이 형태이고,
    상기 돌연변이 형태는, G12C, G12R, G12D, G12F, G12L, G12N, G13C, G13R, G13S, G13A, G13V, G13P, S17G, P34S, A59E, A59G, A59T, Q61K, Q61R, Q61H, K117N, A146P, A146T, A146V, 및 D153V로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는, 약제학적 조성물.
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 삭제
  33. 삭제
  34. 삭제
KR1020177028572A 2015-03-06 2016-03-02 Ras 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법 KR102626155B1 (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562129654P 2015-03-06 2015-03-06
US62/129,654 2015-03-06
US201562249788P 2015-11-02 2015-11-02
US62/249,788 2015-11-02
PCT/US2016/020390 WO2016144635A1 (en) 2015-03-06 2016-03-02 Method of treating cancer associated with a ras mutation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20170131491A KR20170131491A (ko) 2017-11-29
KR102626155B1 true KR102626155B1 (ko) 2024-01-17

Family

ID=56878960

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020177028572A KR102626155B1 (ko) 2015-03-06 2016-03-02 Ras 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법

Country Status (16)

Country Link
US (4) US10238650B2 (ko)
EP (1) EP3265090A4 (ko)
JP (1) JP6769982B2 (ko)
KR (1) KR102626155B1 (ko)
CN (1) CN107530341B (ko)
AU (2) AU2016229294B2 (ko)
BR (1) BR112017018954A2 (ko)
CA (1) CA2978567A1 (ko)
CL (1) CL2017002241A1 (ko)
HK (2) HK1250008A1 (ko)
IL (1) IL254256A0 (ko)
MX (1) MX2017011374A (ko)
MY (1) MY190034A (ko)
RU (1) RU2736045C2 (ko)
SG (2) SG11201707127VA (ko)
WO (1) WO2016144635A1 (ko)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2016229295B2 (en) 2015-03-06 2021-11-04 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Method of treating a brain tumor
MX2017011374A (es) 2015-03-06 2018-01-23 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Método de tratamiento de cáncer asociado con una mutación de ras.
KR20180027563A (ko) 2015-07-13 2018-03-14 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 플리나불린 조성물
US10912748B2 (en) 2016-02-08 2021-02-09 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Compositions containing tucaresol or its analogs
KR20190015361A (ko) 2016-06-06 2019-02-13 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 호중구감소증을 줄이는 조성물 및 방법
JP2020503363A (ja) 2017-01-06 2020-01-30 ビヨンドスプリング ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド チューブリン結合化合物およびその治療的使用
JP2020514412A (ja) 2017-02-01 2020-05-21 ビヨンドスプリング ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 好中球減少症の低減方法
JP2019019094A (ja) * 2017-07-19 2019-02-07 学校法人福岡大学 変異ｋｒａｓ関連シグナル阻害用組成物
CN109498627B (zh) * 2017-09-15 2021-06-04 深圳华大海洋科技有限公司 一种治疗肿瘤的药物组合物及其应用
CN112135614A (zh) * 2018-01-24 2020-12-25 大连万春布林医药有限公司 通过施用普那布林减少血小板减少症的组合物和方法
US11723891B2 (en) 2018-04-12 2023-08-15 Umc Utrecht Holding B.V. Drug combinations for use in the treatment of RAS-mutant cancer
CN112543636B (zh) * 2018-06-01 2024-03-01 大连万春布林医药有限公司 治疗与egfr突变相关的癌症的组合物和方法
CN109652535A (zh) * 2019-01-30 2019-04-19 上海安甲生物科技有限公司 鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒及其使用方法和应用
KR102222693B1 (ko) * 2019-04-04 2021-03-04 금정제약 주식회사 H-rev107 유래 펩타이드의 신규한 용도
CN114728005A (zh) 2019-11-28 2022-07-08 应世生物科技(南京)有限公司 Bi853520在癌症治疗中的用途
CN111534599A (zh) * 2020-06-18 2020-08-14 重庆浦洛通基因医学研究院有限公司 一种甲状腺癌辅助分子诊断试剂盒及使用方法
WO2022216908A1 (en) * 2021-04-09 2022-10-13 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compositions and methods for treating tumors
CA3234699A1 (en) * 2021-10-07 2023-04-13 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancers and tumors
WO2024006678A1 (en) * 2022-06-26 2024-01-04 Biohaven Therapeutics Ltd. Methods of treating glioblastoma with prodrugs of riluzole
CN117919234A (zh) * 2022-10-25 2024-04-26 上海润石医药科技有限公司 一种萘酰胺化合物治疗耐药性肿瘤的用途
CN117919235A (zh) * 2022-10-25 2024-04-26 上海润石医药科技有限公司 一种萘酰胺化合物治疗kras突变相关疾病的用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004054498A2 (en) 2002-08-02 2004-07-01 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Dehydrophenylahistins and analogs thereof and the synthesis of dehydrophenylahistins and analogs thereof
WO2005077940A1 (en) 2004-02-04 2005-08-25 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Dehydrophenylahistins and analogs thereof and the synthesis of dehydrophenylahistins and analogs thereof

Family Cites Families (123)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS509164B1 (ko) 1970-12-29 1975-04-10
MW2380A1 (en) 1979-06-29 1982-03-10 Wellcome Found Pharmaceutical ethers,preparation,use and intermediates therefor and their preparation
DK160866C (da) 1980-12-18 1991-10-14 Wellcome Found Analogifremgangsmaade til fremstilling af phenoletherforbindelser
JPS58167304A (ja) 1982-03-24 1983-10-03 松下電器産業株式会社 ごみ処理装置
AU576322B2 (en) 1983-07-22 1988-08-25 Ici Australia Limited Alpha-substituted-alpha-cyanomethyl alcohols
US4783443A (en) 1986-03-03 1988-11-08 The University Of Chicago Amino acyl cephalosporin derivatives
JPH05255106A (ja) 1990-10-31 1993-10-05 Toray Ind Inc 血小板減少症治療剤
JPH059164A (ja) 1991-07-02 1993-01-19 Sumitomo Chem Co Ltd 光学活性マンデロニトリル誘導体の製造方法
GB9217331D0 (en) 1992-08-14 1992-09-30 Xenova Ltd Pharmaceutical compounds
US6096786A (en) 1992-10-01 2000-08-01 Glaxo Wellcome Inc. Immunopotentiatory agent and physiologically acceptable salts thereof
US5872151A (en) 1992-10-01 1999-02-16 Glaxo Wellcome Inc. Immunopotentiatory agents and physiologically acceptable salts thereof
SG48993A1 (en) 1992-10-01 1998-05-18 Wellcome Found Immunopotentiatory agent and physiologically acceptable salts thereof
WO1994012031A1 (en) 1992-11-27 1994-06-09 Napro Biotherapeutics, Inc. Injectable composition
JPH0725858A (ja) 1993-07-13 1995-01-27 Otsuka Pharmaceut Co Ltd ピペラジン誘導体
US5958980A (en) 1993-08-26 1999-09-28 Glaxo Wellcome, Inc. Immunopotentiatory agent and physiologically acceptable salts thereof
IL110787A0 (en) 1993-08-27 1994-11-11 Sandoz Ag Biodegradable polymer, its preparation and pharmaceutical composition containing it
GB9402807D0 (en) 1994-02-14 1994-04-06 Xenova Ltd Pharmaceutical compounds
GB9402809D0 (en) 1994-02-14 1994-04-06 Xenova Ltd Pharmaceutical compounds
GB9426224D0 (en) 1994-12-23 1995-02-22 Xenova Ltd Pharmaceutical compounds
US5891877A (en) 1995-02-14 1999-04-06 Xenova Limited Pharmaceutical compounds
US5874443A (en) 1995-10-19 1999-02-23 Trega Biosciences, Inc. Isoquinoline derivatives and isoquinoline combinatorial libraries
US5886210A (en) 1996-08-22 1999-03-23 Rohm And Haas Company Method for preparing aromatic compounds
JP3131574B2 (ja) 1996-09-04 2001-02-05 新日本製鐵株式会社 新規抗腫瘍物質、該物質を製造するための微生物及び方法、並びに該物質を有効成分とする細胞周期阻害剤及び抗腫瘍剤
US5939098A (en) 1996-09-19 1999-08-17 Schering Corporation Cancer treatment with temozolomide
US5922683A (en) 1997-05-29 1999-07-13 Abbott Laboratories Multicyclic erythromycin derivatives
AUPO735997A0 (en) 1997-06-17 1997-07-10 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Piperazine derivatives
US6479484B1 (en) 1997-11-21 2002-11-12 Euro-Celtique S.A. Substituted 2-aminoacetamides and the use thereof
KR20010034469A (ko) 1998-01-29 2001-04-25 아벤티스 파마슈티칼즈 프로덕츠 인코포레이티드 Ｎ-[(지방족 또는 방향족)카보닐]-2-아미노아세트아미드화합물 및 환화 화합물의 제조방법
US7141603B2 (en) 1999-02-19 2006-11-28 The Regents Of The University California Antitumor agents
US6069146A (en) 1998-03-25 2000-05-30 The Regents Of The University Of California Halimide, a cytotoxic marine natural product, and derivatives thereof
PL343249A1 (en) 1998-03-26 2001-07-30 Shionogi & Co Indole derivatives with antiviral activity
US6509331B1 (en) 1998-06-22 2003-01-21 Elan Pharmaceuticals, Inc. Deoxyamino acid compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
GB9818627D0 (en) 1998-08-26 1998-10-21 Glaxo Group Ltd Improvements in dva vaccination
FR2784988B1 (fr) 1998-10-23 2002-09-20 Adir Nouveaux composes dihydro et tetrahydroquinoleiniques, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US7026322B2 (en) 1998-11-12 2006-04-11 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Phenylahistin and the phenylahistin analogs, a new class of anti-tumor compounds
US6358957B1 (en) 1998-11-12 2002-03-19 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Phenylahistin and the phenylahistin analogs, a new class of anti-tumor compounds
ATE353365T1 (de) 1999-08-23 2007-02-15 Dana Farber Cancer Inst Inc Neue b7-4 moleküle und deren verwendungen
JP4896327B2 (ja) 1999-08-23 2012-03-14 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート，インコーポレイテッド Ｐｄ−１、ｂ７−４の受容体、およびその使用
CA2392477A1 (en) 1999-11-30 2001-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h1, a novel immunoregulatory molecule
BR0017067A (pt) 2000-01-18 2002-10-22 Nereus Pharmaceuticals Inc Inibidor de divisão de célula, desidrogenase, método para a produção de um inibidor de divisão de célula e composto
AU2001245823A1 (en) 2000-03-17 2001-10-03 Corixa Corporation Novel amphipathic aldehydes and their use as adjuvants and immunoeffectors
DE60137037D1 (de) 2000-05-09 2009-01-29 Angiorx Corp Piperazindion-verbindungen
EP1345938A1 (en) 2000-12-28 2003-09-24 Neurocrine Biosciences, Inc. Tricyclic crf receptor antagonists
US20030082140A1 (en) * 2001-08-20 2003-05-01 Fisher Paul B. Combinatorial methods for inducing cancer cell death
AU2003213673A1 (en) 2002-03-01 2003-09-16 Pintex Pharmaceuticals, Inc. Pin1-modulating compounds and methods of use thereof
KR20050000544A (ko) 2002-05-17 2005-01-05 아방티 파르마 소시에테 아노님 유방암 및 난소암의 보조 요법에서도세탁셀/독소루비신/사이클로포스파미드의 용도
US7012100B1 (en) 2002-06-04 2006-03-14 Avolix Pharmaceuticals, Inc. Cell migration inhibiting compositions and methods and compositions for treating cancer
US7935704B2 (en) 2003-08-01 2011-05-03 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Dehydrophenylahistins and analogs thereof and the synthesis of dehydrophenylahistins and analogs thereof
US7919497B2 (en) 2002-08-02 2011-04-05 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Analogs of dehydrophenylahistins and their therapeutic use
SE0202429D0 (sv) 2002-08-14 2002-08-14 Astrazeneca Ab Novel Compounds
CA2508660C (en) 2002-12-23 2013-08-20 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
US20040197312A1 (en) 2003-04-02 2004-10-07 Marina Moskalenko Cytokine-expressing cellular vaccine combinations
EA010198B1 (ru) 2004-04-19 2008-06-30 Крка, Товарна Здравил, Д.Д., Ново Место Способы получения полиморфной формы i гидросульфата клопидогрела
DE202004018940U1 (de) 2004-12-07 2006-04-13 Asf Verwaltungs Gmbh Druckverschluß, Druckverschlußband und wiederverschließbarer Beutel
SI2439273T1 (sl) 2005-05-09 2019-05-31 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Človeška monoklonska protitelesa za programirano smrt 1 (PD-1) in postopki za zdravljenje raka z uporabo protiteles proti PD-1 samostojno ali v kombinaciji z ostalimi imunoterapevtiki
CN101248089A (zh) 2005-07-01 2008-08-20 米德列斯公司 抗程序性死亡配体1（pd-l1）的人单克隆抗体
EP1926724A1 (en) 2005-09-21 2008-06-04 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Analogs of dehydrophenylahistins and their therapeutic use
JP2009523813A (ja) 2006-01-18 2009-06-25 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 癌を治療するためにインテグリンのリガンドを使用する特異的な治療法
WO2007113648A2 (en) 2006-04-05 2007-10-11 Pfizer Products Inc. Ctla4 antibody combination therapy
US8129527B2 (en) 2006-11-03 2012-03-06 Nereus Pharmacuticals, Inc. Analogs of dehydrophenylahistins and their therapeutic use
JP5755839B2 (ja) 2007-02-15 2015-07-29 マンカインド コーポレイション Ｔ細胞応答の増強方法
WO2008128169A1 (en) 2007-04-13 2008-10-23 Abraxis Bioscience, Inc. Sparc and methods of use thereof
US20090170837A1 (en) * 2007-08-17 2009-07-02 Thallion Pharmaceuticals Inc. Methods for treating ras driven cancer in a subject
US8569262B2 (en) 2007-11-02 2013-10-29 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Polysaccharide compositions and methods of use for the treatment and prevention of disorders associated with progenitor cell mobilization
EP2227296B1 (en) 2008-01-08 2015-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-ctla4 antibody with tubulin modulating agents for the treatment of proliferative diseases
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
UY31952A (es) 2008-07-02 2010-01-29 Astrazeneca Ab 5-metilideno-1,3-tiazolidina-2,4-dionas sustituidas como inhibidores de quinasa pim
UA109108C2 (uk) 2008-12-09 2015-07-27 Дженентек, Інк. Антитіло до pd-l1 та його застосування для посилення функції t-клітин
EA023344B1 (ru) 2009-01-16 2016-05-31 Тева Фармасьютикал Индастриз Лтд. Способ лечения или предотвращения нейтропении или лейкопении или снижения частоты возникновения инфекции, проявляющейся фебрильной нейтропенией
WO2010114922A1 (en) 2009-03-31 2010-10-07 Agios Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer having an aberrant egfr or kras genotype
GB0907551D0 (en) 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions
CA2770397A1 (en) 2009-08-10 2011-02-17 Board Of Regents, The University Of Texas System Treatment of astrocytes-tumor cells with inhibitors of endothelin receptors
US20110160159A1 (en) 2009-09-15 2011-06-30 John Ryan Treatment of cancer
CA2778707A1 (en) 2009-10-23 2011-04-28 Mannkind Corporation Cancer immunotherapy and method of treatment
ES2646863T3 (es) 2009-11-24 2017-12-18 Medimmune Limited Agentes de unión específica contra B7-H1
CN101766815B (zh) 2009-12-31 2012-04-25 胡松华 紫杉醇及多西紫杉醇的用途
US20130225424A1 (en) * 2010-03-03 2013-08-29 Targeted Molecular Diagnostics, Llc Methods for determining responsiveness to a drug based upon determination of ras mutation and/or ras amplification
US20130064831A1 (en) 2010-05-17 2013-03-14 Bristol-Myers Squibb Company Immunotherapeutic dosing regimens and combinations thereof
US20130131018A1 (en) 2010-06-04 2013-05-23 Exonhit S.A. Substituted isoquinolines and their use as tubulin polymerization inhibitors
JP2012033526A (ja) 2010-07-28 2012-02-16 Fuji Electric Co Ltd 薄膜太陽電池およびその製造方法
WO2012035436A1 (en) 2010-09-15 2012-03-22 Tokyo University Of Pharmacy And Life Sciences Plinabulin prodrug analogs and therapeutic uses thereof
WO2012074904A2 (en) 2010-11-29 2012-06-07 Precision Therapeutics, Inc. Methods and systems for evaluating the sensitivity or resistance of tumor specimens to chemotherapeutic agents
TWI386203B (zh) 2011-01-07 2013-02-21 Univ China Medical 治療腦癌或用以降低腦癌細胞對替莫唑胺之抗藥性之醫藥組合物及其應用
DK2699264T3 (en) 2011-04-20 2018-06-25 Medimmune Llc ANTIBODIES AND OTHER MOLECULES BINDING B7-H1 AND PD-1
JP2014533955A (ja) 2011-11-28 2014-12-18 ナショナル リサーチ カウンシル オブ カナダ パクリタキセル応答性がんマーカー
US20150004175A1 (en) 2011-12-13 2015-01-01 Yale University Compositions and Methods for Reducing CTL Exhaustion
CA3122808A1 (en) 2012-05-09 2013-11-14 Cantex Pharmaceuticals, Inc. Treatment of myelosuppression
AU2013204313C1 (en) 2012-06-01 2016-04-07 Bionomics Limited Combination Therapy
US10034939B2 (en) 2012-10-26 2018-07-31 The University Of Chicago Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer
DK2958943T3 (da) 2013-02-20 2019-12-09 Univ Pennsylvania Behandling af cancer ved anvendelse af humaniseret anti-EGFRvIII kimær antigenreceptor
WO2014160183A1 (en) 2013-03-13 2014-10-02 The United States Of America,As Represented By The Secretary,Department Of Health And Human Services Methods for modulating chemotherapeutic cytotoxicity
EP2988668B1 (en) 2013-04-24 2019-07-24 Tel HaShomer Medical Research Infrastructure and Services Ltd. Magnetic resonance maps for analyzing tissue
JP2016520643A (ja) 2013-06-03 2016-07-14 ノバルティス アーゲー 抗ｐｄ−ｌ１抗体とｍｅｋ阻害薬および／またはｂｒａｆ阻害薬の組み合わせ物
CN105705148B (zh) * 2013-10-11 2021-03-23 大连万春布林医药有限公司 使用普那布林和紫杉烷的组合的癌症疗法
JP2016540042A (ja) 2013-11-05 2016-12-22 コグネート バイオサービシズ， インコーポレイテッド がんを処置するためのチェックポイント阻害剤および治療薬の組合せ
JP6657105B2 (ja) 2013-11-06 2020-03-04 アメリカ合衆国 発現プロファイリングによりリンパ腫のタイプをサブタイピングするための方法
CN104796448B (zh) 2014-01-22 2019-02-12 腾讯科技（深圳）有限公司 网络系统的数据处理方法和装置
US9850225B2 (en) 2014-04-14 2017-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
RU148945U1 (ru) 2014-07-29 2014-12-20 Федеральное Государственное Автономное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Дальневосточный Федеральный Университет" (Двфу) Конвективный блок водогрейного котла
JP6698084B2 (ja) 2014-08-08 2020-05-27 オンコクエスト インコーポレイテッドＯｎｃｏｑｕｅｓｔ Ｉｎｃ． がんのチェックポイント干渉療法の成績を高めるための腫瘍抗原特異的抗体およびｔｌｒ３刺激
WO2016081281A1 (en) 2014-11-17 2016-05-26 Salk Institute For Biological Studies Lipophilic bisphosphonates and methods of use
MX2017010338A (es) 2015-02-12 2017-12-20 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Uso de plinabulina en combinación con inhibidores de punto de control inmunitario.
AU2016229295B2 (en) * 2015-03-06 2021-11-04 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Method of treating a brain tumor
MX2017011374A (es) * 2015-03-06 2018-01-23 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Método de tratamiento de cáncer asociado con una mutación de ras.
WO2016165007A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 The University Of British Columbia Inhibitors of estrogen receptor alpha and their use as therapeutics for cancer
CN106279039B (zh) 2015-06-02 2019-01-11 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 氘代脱氢苯基阿夕斯丁类化合物及其制备方法和在制备抗肿瘤的药物中的应用
KR20180027563A (ko) 2015-07-13 2018-03-14 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 플리나불린 조성물
WO2017062505A1 (en) 2015-10-05 2017-04-13 Cedars-Sinai Medical Center Method of classifying and diagnosing cancer
US10912748B2 (en) 2016-02-08 2021-02-09 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Compositions containing tucaresol or its analogs
KR20190015361A (ko) 2016-06-06 2019-02-13 비욘드스프링 파마수티컬스, 인코포레이티드. 호중구감소증을 줄이는 조성물 및 방법
JP2020503363A (ja) 2017-01-06 2020-01-30 ビヨンドスプリング ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド チューブリン結合化合物およびその治療的使用
JP2020514412A (ja) 2017-02-01 2020-05-21 ビヨンドスプリング ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 好中球減少症の低減方法
ES2942889T3 (es) 2017-03-13 2023-06-07 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Composiciones de plinabulina y uso de las mismas
US10933061B2 (en) 2017-12-21 2021-03-02 Shepherd Therapeutics, Inc. Pyrvinium pamoate therapies and methods of use
CN112135614A (zh) 2018-01-24 2020-12-25 大连万春布林医药有限公司 通过施用普那布林减少血小板减少症的组合物和方法
NZ766454A (en) 2018-02-01 2024-02-23 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Composition and method for reducing chemotherapy-induced neutropenia via the administration of plinabulin and a g-csf agent
CN110240592A (zh) 2018-03-08 2019-09-17 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 (z)-3-(3-甲酰基苯亚甲基)哌嗪二酮类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN111936143A (zh) 2018-04-05 2020-11-13 诺维嘉研究公司 用于治疗癌症的微管蛋白聚合抑制剂和聚(adp-核糖)聚合酶(parp)抑制剂的新型联用药品
CN112543636B (zh) 2018-06-01 2024-03-01 大连万春布林医药有限公司 治疗与egfr突变相关的癌症的组合物和方法
CN112638388A (zh) 2018-08-16 2021-04-09 大连万春布林医药有限公司 刺激免疫反应的方法和组合物
WO2020102244A1 (en) 2018-11-14 2020-05-22 Beyondspring Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer using tubulin binding agents
CN112778155B (zh) 2019-11-11 2023-08-11 大连万春布林医药有限公司 妥卡雷琐衍生物及其用途
BR112022022401A2 (pt) 2020-05-04 2022-12-13 Beyondspring Pharmaceuticals Inc Terapia de combinação tripla para aumentar o extermínio de células cancerígenas em cânceres com baixa imunogenicidade

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004054498A2 (en) 2002-08-02 2004-07-01 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Dehydrophenylahistins and analogs thereof and the synthesis of dehydrophenylahistins and analogs thereof
WO2005077940A1 (en) 2004-02-04 2005-08-25 Nereus Pharmaceuticals, Inc. Dehydrophenylahistins and analogs thereof and the synthesis of dehydrophenylahistins and analogs thereof

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Blood, 117(21), 5692-5700, 2011.
Clin. Cancer Res., 16(23), 5892-5899, 2010.
J. Biol. Chem., 272(9), 4929-4936,1998.
J. Clin. Oncol., 32(5s), Supp;: Abs8054.

Also Published As

Publication number Publication date
RU2017131430A3 (ko) 2019-08-28
AU2016229294B2 (en) 2021-11-04
EP3265090A1 (en) 2018-01-10
US11918574B2 (en) 2024-03-05
MX2017011374A (es) 2018-01-23
WO2016144635A1 (en) 2016-09-15
US20180036304A1 (en) 2018-02-08
CN107530341A (zh) 2018-01-02
KR20170131491A (ko) 2017-11-29
RU2017131430A (ru) 2019-04-09
US20210275524A1 (en) 2021-09-09
IL254256A0 (en) 2017-10-31
MY190034A (en) 2022-03-22
US10668063B2 (en) 2020-06-02
JP2018507249A (ja) 2018-03-15
CN107530341B (zh) 2021-10-01
JP6769982B2 (ja) 2020-10-14
AU2021290270A1 (en) 2022-01-27
CL2017002241A1 (es) 2018-04-02
HK1250008A1 (zh) 2018-11-23
EP3265090A4 (en) 2018-08-01
BR112017018954A2 (pt) 2018-05-15
SG11201707127VA (en) 2017-09-28
RU2736045C2 (ru) 2020-11-11
US20200289503A1 (en) 2020-09-17
AU2016229294A1 (en) 2017-09-28
CA2978567A1 (en) 2016-09-15
US20190328727A1 (en) 2019-10-31
SG10202008673WA (en) 2020-10-29
US11045467B2 (en) 2021-06-29
US10238650B2 (en) 2019-03-26
HK1249052A1 (zh) 2018-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102626155B1 (ko) Ras 돌연변이와 관련된 암의 치료 방법
JP7264331B2 (ja) 脳腫瘍の治療方法
JP2014527542A (ja) 骨がんの治療に使用するためまたは原発がん細胞の骨への転移性播種を予防するためのｐｉ３ｋ阻害剤
JP2018535186A (ja) がん治療におけるウレイドマスチン（ｂｏ−１０５５）の使用
JP2000504020A (ja) ＨＥＲ２／ｎｅｕを過剰発現するガン細胞の化学療法剤に対する感作
US20240000791A1 (en) Methods of Using 4-Amino-N-[4-(Methoxymethyl)Phenyl]-7-(1-Methylcyclopropyl)-6-(3-Morpholinoprop-1-YN-1-YL)-7H-Pyrrolo[2,3-D]Pyrimidine-5-Carboxamide for the Treatment of Tumors
NZ749857A (en) Method of treating a brain tumor
NZ749857B2 (en) Method of treating a brain tumor
TW202337469A (zh) 治療小細胞肺癌之方法
TW202404592A (zh) 用於治療癌症之組合療法
TW202404593A (zh) 用於治療癌症的組合療法
CN116635082A (zh) 抗体-药物缀合物和atr抑制剂的组合

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right