KR101920650B1 - 다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말, 화장료 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

Abstract

다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말, 화장료 조성물 및 그 제조방법에 대해 개시한다. 다알리아 조성물의 제조방법은 다알리아 꽃잎을 준비하는 단계, 다알리아 꽃잎에 에탄올을 첨가하고 교반하여서 다알리아 추출물을 추출하는 단계, 다알리아 추출물을 여과하는 단계 및 여과된 다알리아 추출물을 용매에 희석하여 항산화 효능을 가지는 다알리아 조성물을 제조하는 단계를 포함한다. 다알리아 조성물은 다알리아 조성물의 제조방법으로 제조되어, 항산화 효능을 가진다. 또한, 화장료 조성물은 다알리아 추출물을 포함하여 항산화 효능을 가진다.

Description

다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말, 화장료 조성물 및 그 제조방법{DAHLIA PINNATA COMPOSITIONS, DAHLIA PINNATA POWDERY SOLID COMPOSITION, COSMETIC COMPOSITIONS AND MANUFACTURING METHOD OF THE SAME}

본 발명은 다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말, 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 항산화 효과를 가지는 다알리아 꽃잎의 유효성분을 추출한 다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말 및 그 제조방법에 관한 것이다.

인체 내 에너지 생산과정에서 물과 이산화탄소 그리고 산소가 발생하게 되는데 이러한 산소를 활성산소(free radical, reactive oxygen)라 한다. 이러한 활성산소는 체내 면역기능과 신호전달물질로 작용하는 순기능도 있지만, 지나치게 많이 발생하게 되면 노화와 질병의 원인이 된다. 이러한, 활성산소의 과다발생으로 인해 세포 내 다양한 구성물질(지질, 단백질, 핵산) 등은 산화적 손상(oxidative damage)을 입게 된다. 특히, 외부로 노출되어 있는 피부의 경우, 이러한 위협으로부터 지속적으로 영향을 받게 되면, 피부노화가 일어날 수 있기 때문에, 이러한 활성산소는 피부노화의 중요한 요인으로 간주되고 있다.

활성산소에 의한 산화적 손상 및 이로 인한 노화진행을 최소화하기 위해, 항산화 효능을 지닌 생리활성물질(비타민, 플라보노이드, 페놀성 화합물 등)을 섭취(intake)하는 것이 대표적인 방법이다.

이러한 생리활성물질을 단독으로 섭취하는 방법도 있지만, 이를 함유하고 있는 천연물을 섭취하는 방법도 선호된다. 천연물로부터 체내 항산화 시스템을 유지시켜주는 천연항산화 소재에 대해 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 식물에는 다양한 2차 대사물질(secondary metabolites)이 존재하는데, 이들은 항산화 활성을 나타내며 다양한 추출을 통해 얻어질 수 있으며, 천연소재이기 때문에 합성소재에 비해 비교적 안전하게 이용할 수 있다는 장점을 가지고 있다.

항산화 활성을 지닌 이러한 천연항산화 소재는 산업계 전반에 적용되며, 다양한 경로를 통해 생체 내로 섭취될 수 있다. 대표적인 예는 식품 및 화장품에 적용되어 우리 몸에 섭취되고 이를 통해 산화적 피해를 줄여 노화를 방지하는 역할을 한다.

한편, 다알리아(Dahlia pinnata)는 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 여러해살이풀이다. 이러한, 다알리아는 덩이줄기와 초본의 특징을 지니는 식물로서 멕시코가 원산지이며, 관상용으로 각국에서 널리 재배되고 있다. 다알리아는 고구마처럼 생긴 뿌리로 번식한다. 다알리아의 줄기는 원기둥 모양이고 가지를 잘 치며 털이 없고 녹색을 띠며 높이가 1.5∼2m이다. 잎은 마주나고 1∼2회 깃꼴로 갈라진다. 다알리아의 작은 잎은 달걀 모양이고 가장자리에 톱니가 있으며 표면은 짙은 녹색이고 뒷면은 흰빛을 띠고 잎자루에 다소 날개가 있다.

다알리아의 덩이뿌리는 진통 작용이 있어 충치로 인한 치통 이하선염에 약용한다. 또한, 다알리아 꽃잎은 심혈관질환, 치매, 암 등의 질병에 효능이 있다. 이러한, 다알리아 꽃잎을 추출한 다알리아 꽃 조성물을 식품의 원료로 사용하면 심혈관질환, 치매, 암 등의 질병에 약용이 가능하다.

천연항산화 소재를 이용한 항산화 활성 화장품 조성물에 관련된 종래특허로는 대한민국 특허출원 제20020047048호 「항산화 활성을 가지는 찔레나무 추출물을 포함하는 화장품 조성물 및 상기 추출물의 제조방법」, 대한민국 특허출원 제20080107420호 「두충 추출물을 함유하는 항산화 및 피부노화 방지용 화장료 조성물」, 대한민국 특허출원 제20050021778호 「연꽃 추출물을 주요성분으로 하여 항산화 효과를 가지는 화장료 조성물」 등이 존재한다. 그러나 상기 기술된 다알리아 추출물을 주요성분으로 포함한 항산화 활성 조성물은 존재하지 않는 실정이다.

실시 예의 목적은, 다알리아 꽃잎 내 유효성분을 함유하여 항산화 효과를 가지는 다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말, 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 것이다.

또한, 식품 또는 화장품에 첨가할 수 있어, 식품 또는 화장품에 항산화 효과를 부가하고, 항노화 효능을 제공할 수 있는 다알리아 조성물, 다알리아 조성물 분말, 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 것이다.

실시 예에 따른 화장료 조성물에 대해 설명한다.

화장료 조성물은 다알리아 추출물을 포함하여 항산화 효능을 가질 수 있다.

일측에 따르면, 화장료 조성물은, 상기 다알리아 추출물의 농도는 16㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖일 수 있다. 보다 바람직하게는 다알리아 추출물의 농도는 500㎍/㎖ 내지 10000㎍/㎖일 수 있다.

실시 예에 따른 다알리아 조성물의 제조방법에 대해 설명한다.

다알리아 조성물의 제조방법은 다알리아 꽃잎을 준비하는 단계, 상기 다알리아 꽃잎에 에탄올을 첨가하고 교반하여서 다알리아 추출물을 추출하는 단계, 상기 다알리아 추출물을 여과하는 단계 및 상기 여과된 다알리아 추출물을 용매에 희석하여 항산화 효능을 가지는 다알리아 조성물을 제조하는 단계를 포함할 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 추출물을 추출하는 단계는, 상기 다알리아 꽃잎 1g당 에탄올 5㎖ 내지 20㎖를 첨가하여 상기 다알리아 추출물을 추출할 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 조성물은, 페놀성 화합물의 함량이 43.1㎍/100㎎ 내지 56.5㎍/100㎎ 일 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 조성물은 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖ 내지 20000 ㎍/㎖일 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 조성물은, 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000 ㎍/㎖일 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 조성물은, 항산화 성분의 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 자유라디칼 소거능이 85% 내지 89%의 소거능을 가질 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 조성물은, 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖ 내지 400㎍/㎖일 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 조성물은, 초과산화물 불균등화효소 활성저해 측정치가 71.7% 내지 105.6%일 수 있다.

일측에 따르면, 상기 다알리아 추출물을 여과하는 단계는, 상기 다알리아 추출물을 시린지 필터(Syringe filter)로 여과할 수 있다.

실시 예에 따른 다알리아 조성물 분말의 제조방법에 대해 설명한다.

다알리아 조성물 분말의 제조방법은 상기에 기술된 제조방법으로 제조된 상기 다알리아 조성물을 동결 건조하는 단계 및 상기 동결 건조된 다알리아 조성물을 분말형태로 제조하는 단계를 포함할 수 있다.

상기의 기술된 제조방법으로 항산화 효능을 가지는 다알리아 조성물 및 다알리아 조성물 분말이 제조될 수 있다.

또한, 상기의 기술된 제조방법으로 제조된 다알리아 조성물을 포함하여 항산화 효능을 가지는 화장료 조성물이 제조될 수 있다.

실시 예의 목적은, 다알리아 꽃잎 내 유효성분을 추출하여 제조된 다알리아 조성물을 액상 또는 분말 형태로 가공하여, 식품 또는 화장품에 용이하게 첨가가 가능할 수 있다.

또한, 다알리아 조성물이 첨가된 식품 또는 화장품에 항산화 효과를 부가하고, 항노화 효능을 제공할 수 있다.

도 1은 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 제조방법의 순서도이다.
도 2는 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 분말의 제조방법의 순서도이다.
도 3은 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 자유라디칼 소거능 측정치 그래프이다.
도 4는 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 초과산화물 불균화등화효소 활성저해 측정치이다.

이하, 실시 예들을 예시적인 도면을 통해 상세하게 설명한다. 각 도면의 구성요소들에 참조부호를 부가함에 있어서, 동일한 구성요소들에 대해서는 비록 다른 도면상에 표시되더라도 가능한 한 동일한 부호를 가지도록 하고 있음에 유의해야 한다. 또한, 실시 예를 설명함에 있어, 관련된 공지 구성 또는 기능에 대한 구체적인 설명이 실시 예에 대한 이해를 방해한다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다.

또한, 실시 예의 구성 요소를 설명하는 데 있어서, 제 1, 제 2, A, B, (a), (b) 등의 용어를 사용할 수 있다. 이러한 용어는 그 구성 요소를 다른 구성 요소와 구별하기 위한 것일 뿐, 그 용어에 의해 해당 구성 요소의 본질이나 차례 또는 순서 등이 한정되지 않는다. 어떤 구성 요소가 다른 구성요소에 "연결", "결합" 또는 "접속"된다고 기재된 경우, 그 구성 요소는 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되거나 접속될 수 있지만, 각 구성 요소 사이에 또 다른 구성 요소가 "연결", "결합" 또는 "접속"될 수도 있다고 이해되어야 할 것이다.

어느 하나의 실시 예에 포함된 구성요소와, 공통적인 기능을 포함하는 구성요소는, 다른 실시 예에서 동일한 명칭을 사용하여 설명하기로 한다. 반대되는 기재가 없는 이상, 어느 하나의 실시 예에 기재한 설명은 다른 실시 예에도 적용될 수 있으며, 중복되는 범위에서 구체적인 설명은 생략하기로 한다.

본 실시 예를 설명하기 앞서, 다알리아 추출물이란 다알리아 꽃잎에 에탄올을 첨가하여 추출된 다알리아 꽃잎성분을 의미하고, 다알리아 조성물이란 다알리아 추출물이 포함된 용매를 의미한다. 또한, 다알리아 추출물의 농도(㎍/㎖)는 다알리아 추출물이 포함된 용매 즉, 다알리아 조성물 1㎖에 녹아 있는 다알리아 추출물의 ㎍수를 의미한다.

또한, 화장료 조성물은 다알리아 추출물이 포함된 화장료를 의미하며, 화장료는 다알리아 추출물이 포함되지 않은 화장품을 제조하기 위한 첨가물 또는 첨가물들의 조합을 의미한다.

다알리아 꽃잎은 활성산소에 의한 산화적 손상 및 이로 인한 노화진행을 억제하는 페놀성 화합물이 구비된다. 따라서, 다알리아 꽃잎을 추출한 다알리아 꽃 조성물은 항산화 효능이 있어 산화적 손상 및 노화진행이 억제되는 효과를 가진다. 이러한, 다알리아 꽃 조성물은 항산화효과를 가져 식품 또는 화장품으로 제공되면 사용자에게 항산화 효능을 제공할 수 있다. 또한, 다알리아 꽃잎은 종류에 따라 각각 다른 색상을 가지며, 다알리아 꽃잎을 추출한 조성물은 각각 다른 색상을 가져 식품 또는 화장품에 색상을 첨가하기 용이하다.

다알리아 꽃잎을 추출한 다알리아 추출물은 세안화장품, 기초화장품, 색조화장품, 모발화장품, 기능성 화장품 등의 다양한 화장품의 화장료에 첨가되어서 화장품에 미백, 주름개선 등의 항산화 활성의 기능성을 부여할 수 있다. 또한, 다알리아 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 꽃잎의 색상에 따라 색상을 가지기 때문에 메이크업베이스, 파운데이션, 립스틱, 아이쉐도우, 매니큐어 등의 색조화장품의 천연 색소로 활용될 수 있다.

이하에서는 실시 예에 따른 다알리아 꽃 조성물의 제조방법에 대하여 설명한다.

도 1은 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 제조방법의 순서도이다.

도 1을 참조하면, 다알리아 조성물의 제조방법은 다알리아 꽃잎을 준비하는 단계(S10), 다알리아 추출물을 추출하는 단계(S20), 다알리아 추출물을 여과하는 단계(S30) 및 다알리아 조성물을 제조하는 단계(S40)를 포함할 수 있다.

다알리아 꽃잎을 준비하는 단계(S10)에서는 이물질을 제거하고 세척한 다알리아 꽃잎을 준비하는 단계를 포함할 수 있다. 예를 들어, 다알리아 꽃잎은 이물질이 제거되고, 세척되어 20g이 준비될 수 있다. 다만, 이는 일 예시에 불과할 뿐, 다알리아 조성물의 양은 제조되는 다알리아 조성물의 용량에 따라 변형이 가능하다.

다알리아 추출물을 추출하는 단계(S20)는 준비된 다알리아 꽃잎에 에탄올을 첨가하고 교반하여서 항산화 성분을 포함하는 다알리아 추출물을 추출한다. 여기서, 다알리아 꽃잎 0.1g당 에탄올 5㎖ 내지 20㎖를 첨가하여 다알리아 추출물을 추출할 수 있다. 보다 바람직한 예로 다알리아 꽃잎 0.1g당 에탄올 10㎖를 첨가하여 다알리아 추출물을 추출할 수 있다. 예를 들어, 다알리아 꽃잎 20g에 에탄올 200㎖를 첨가하고, 상온에서 5시간 동안 30 rpm의 속도로 교반하여 다알리아 추출물을 추출할 수 있다.

다알리아 꽃을 증류법 또는 압착법으로 추출하게 되면 성분이 파괴될 수 있다. 따라서, 다알리아 추출물을 추출하는 단계에서는 에탄올을 첨가하여 추출하여 다알리아 꽃잎을 에탄올에 담가 꽃잎의 성분이 에탄올에 모두 빠지면 용매는 날려 추출물만을 얻는 방법으로 다알리아 꽃이 함유하고 있는 성분의 파괴되지 않도록 추출할 수 있다. 에탄올을 이용한 추출 방법 이외의 석유 에테르(Petroleum ether), 벤진(benzine), 클로로포름(Chloroform)등의 휘발성 유기용매로도 다알리아 꽃 추출물의 추출이 가능하나, 잔류 유기용매로 인한 독성으로 식품 또는 화장품에 사용되는 다알리아 조성물을 제조하기에는 적합하지 않다.

다알리아 추출물을 여과하는 단계(S30)는 다알리아 추출물을 필터로 여과하고 4℃의 온도에 보관한다. 예를 들어, 다알리아 추출물을 25mm 크기의 시린지 필터(Syringe filter, HM)로 여과하고 4℃ 의 냉장고에 보관한다.

여기서, 시린지 필터는 액체 샘플 내에 있는 부유 물질을 여과할 때 사용하는 일회용 필터다. 시린지 필터는 특정 성분을 분리해 통과시킴으로써 혼합물을 분리할 수 있는 멤브레인 필터를 포함한다. 시린지 필터는 주사기 끝에 부착해 일정한 압력을 넣은 다음 멤브레인 필터의 미세한 구멍으로 여과할 수 있다.

다만, 시린지 필터는 일 예시에 불과할 뿐 다알리아 추출물을 여과할 수 있는 다양한 필터로 변경이 가능하다.

다알리아 조성물을 제조하는 단계(S40)는 여과된 다알리아 추출물을 용매에 희석하여 다알리아 추출물의 농도를 조절하여 다알리아 조성물을 제조한다. 예를 들어, 다알리아 조성물을 제조하는 단계(S40)에서는 용매로 에탄올이 사용될 수 있다. 다알리아 조성물은 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 100000㎍/㎖로 제조할 수 있다. 이때, 다알리아 조성물의 사용용도에 따라 에탄올을 첨가하여 희석할 수 있다. 예를 들어, 다알리아 조성물은 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖로 구성될 수 있다. 다알리아 조성물의 농도는 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖의 범위에서 사용용도에 따라 조절될 수 있다.

일 예로, 다알리아 조성물은 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖일 수 있다. 이 경우, 다알리아 조성물은 항산화 성분의 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 자유라디칼 소거능이 85% 내지 89%의 소거능을 가질 수 있다. 다른 예로, 다알리아 조성물은 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖내지 400㎍/㎖일 수 있다. 이 경우, 다알리아 조성물은 초과산화물 불균등화효소 활성저해 측정치가 67.8% 내지 105.6%일 수 있다.

더욱 바람직한 예로, 다알리아 조성물은 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000㎍/㎖로 구성될 수 있다. 다알리아 조성물은 용매 대비 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000㎍/㎖일 때, 높은 항산화활성을 보인다.

이러한, 다알리아 조성물은 액상형태로 식품에 첨가하여 섭취가 가능하며, 화장품에 첨가하는 것도 가능할 수 있다. 다시 말하면, 다알리아 조성물은 다알리아 추출물이 희석된 에탄올로 구성되고 이 다알리아 조성물을 화장료 또는 식품에 첨가하여 화장료 조성물을 제조하는 것도 가능할 수 있다.

또 다른 예로, 용매는 화장료일 수 있다. 이 경우, 다알리아 추출물을 화장료에 첨가하여 다알리아 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제조가 가능하다.

화장료 조성물은 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖로 포함될 수 있다. 보다 바람직한 예로, 화장료 조성물은 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000㎍/㎖로 포함될 수 있다. 다알리아 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 항산화 활성을 가져 미백, 노화방지, 주름개선 등의 효과를 가진다.

여기서, 화장료 조성물은 세안화장품, 기초화장품, 색조화장품, 모발화장품, 기능성 화장품 등의 화장품 종류에 따라 각각 다른 성분의 다양한 첨가물을 포함하는 화장료를 포함할 수 있다. 여기서, 화장료를 구성하는 첨가물은 공개된 화장품을 제조하기 위한 첨가물을 이용할 수 있다. 따라서, 화장료의 첨가물에 대해 자세한 설명은 생략한다.

실시 예에서의 용매는 에탄올 또는 화장료이지만 이에 한정되는 것은 아니며, 식품에 첨가되는 용매인 것도 가능할 수 있다.

이러한, 다알리아 조성물은 분말형태로도 제조될 수 있다. 이하에서는 도 2를 참조하여 다알리아 조성물의 분말 형태의 제조방법에 대해 설명한다.

도 2는 실시 예에 따른 다알리아 조성물 분말의 제조방법의 순서도이다.

도 2를 참조하면, 다알리아 조성물의 분말의 제조방법은 상기에 기술된 다알리아 조성물의 제조방법으로 제조된 다알리아 조성물을 동결 건조하는 단계(S50) 및 동결 건조된 다알리아 조성물을 분말형태로 제조하는 단계(S60)를 포함할 수 있다.

다알리아 조성물을 동결 건조하는 단계(S50)는 다알리아 조성물을 냉매로 액체질소를 사용하는 냉동기에 투입하여 -70℃ 이하의 온도에서 급속 동결시킨다. 다알리아 조성물을 진공 건조하여 수분함량을 감소시킬 수 있다.

동결 건조된 다알리아 조성물을 분말형태로 제조하는 단계(S60)는 동결 건조된 다알리아 조성물을 초저온 동결분쇄기에 투입하여 동결분쇄한다. 초저온 동결분쇄기에는 액체질소가 투입되어, 분쇄과정 중에 발생하는 열을 감쇠시키며 분쇄한다. 분쇄된 다알리아 조성물은 분말 형태를 가진다. 이러한, 분말형태의 다알리아 추출물은 식품 및 화장품에 첨가하여 사용이 가능할 수 있다.

액상 또는 분말형태의 다알리아 조성물은 항산화 효능을 가지는 페놀성 화합물이 함유되어 있으며, 또한, 항산화 측정에서 높은 항산화 효능을 가지는 것으로 나타났다. 다알리아 꽃은 다양한 색상을 가지고 있어서, 식품 및 화장품에 천연색소로 사용될 뿐만 아니라, 항산화 효능을 가져 노화방지를 할 수 있다.

이하, 실시 예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 국한되지 않는다는 것은 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

<실시 예>

다알리아 꽃잎 20g에 에탄올 200㎖를 첨가하여 상온에서 5시간 동안 30rpm의 속도로 교반하여, 다알리아 추출물을 추출하고, 여액을 25mm 시린저 필터로 여과한 후, 용매로 에탄올을 첨가하여 다알리아 추출물의 농도를 조절하여 다알리아 조성물을 제조하였다.

표 1은 각 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 다알리아 추출물의 농도를 나타내는 표이다.

구분	다알리아 추출물 농도
실시 예1	250㎍/㎖
실시 예2	500㎍/㎖
실시 예3	1000㎍/㎖
실시 예4	10000㎍/㎖
실시 예5	20000㎍/㎖
실시 예6	0.64㎍/㎖
실시 예7	3.2㎍/㎖
실시 예8	16㎍/㎖
실시 예9	80㎍/㎖
실시 예10	400㎍/㎖
실시 예11	100000㎍/㎖

<실험 예1>

실험 예1에서는 폴린 시오칼도 페놀 함량 정량 분석(Folin Ciocalteau (F-C) Phenolic Content Quantification Assay)을 통해 페놀함량을 측정하였다. 폴린 시오칼도 페놀 함량 정량 분석은 실시 예1 내지 실시 예11의 다알리아 조성물 10㎕ 에 7%탄산나트륨 (7% Na₂CO₃) 200㎕를 혼합(mixing)하고, 3분 동안 실온에 방치시킨 후, 1N 폴린 시오칼도 시약 (1N F-C Reagent) 10㎕와 함께 분주하고 30분 대기 후 마이크로 플레이트 리더(microplate reader(Synergy^TM HTX and Synergy^TM 2 Multi-Mode Readers, BioTek))를 사용하여 흡광도(750㎚)를 측정하였다. 표준물질로는 갈릭산(Gallic acid, Sigma Aldrich, USA)를 사용하였다.

표 2는 실시 예1 내지 실시 예11의 실험 예 1에 따른 페놀함량을 나타내는 표이다.

표2를 참조하여 실시 예1 내지 실시 예11의 다알리아 조성물을 실험 예 1의 측정방법으로 측정된 페놀함량에 대해 설명한다.

구분	총 페놀성 화합물 함량 (total phenolic content, ㎍/100㎎)
실시 예1	49.8±6.7
실시 예2
실시 예3
실시 예4
실시 예5
실시 예6
실시 예7
실시 예8
실시 예9
실시 예10
실시 예11

실시 예1 실시 예 11은 다알리아 조성물의 농도에 따라 미차가 있었지만, 다알리아 추출물에 대한 총 페놀성 화합물 함량은 43.1㎍/100㎎ 내지 56.5㎍/100㎎으로 측정되었다. 실시 예에 따라 제조된 다알리아 조성물은 항산화 성분을 가지는 페놀성 화합물의 함유되어 있어서 항산화 기능을 가짐을 알 수 있었다. 페놀성 화합물은 항산화 효과 외에도 항암활성 등의 생리활성을 가진다. 따라서, 다알리아 조성물은 식품 및 화장품에 사용되면 항산화 효과뿐만 아니라 항암활성 등의 효과를 얻을 수 있음을 알 수 있었다.

이하에서는 도 3을 참조하여 실시 예1 내지 실시 예5에 대하여 DPPH 법을 이용한 라디칼 소거능 측정결과에 대해 설명한다.

<비교 예>

아스코브산 (L-Ascorbic acid, Sigma Aldrich, 50-81-7, USA)에 에탄올을 첨가하여, 에탄올에 포함된 아스코브산 농도가 50㎍/㎖가 되도록 조성하였다. 아스코브산(Ascorbic acid)은 항산화 물질 특성을 가지고 있는 유기 화합물이다. 아스코브산은 비타민 C의 하나로, 락톤 구조를 가지고 있다. 아스코브산은 광학 활성 화합물로, 식품첨가물의 산화 방지제로 넓게 사용된다

<실험 예2>

실험 예 2에서는 실시 예 1 내지 실시 예 5에 대하여 DPPH 라디칼 소거능을 측정하였다. DPPH 라디칼 소거능 측정은 실시 예 1 내지 실시 예 5 및 비교예 100㎕에 99.5% 메탄올에 용해시킨 0.2 mM DPPH 용액 100㎕를 넣고 혼합하여 37 에서 30분 동안 반응시킨 후, 517㎚에서 마이크로 플레이트 리더(Synergy^TM HTX and Synergy^TM 2 Multi-Mode Readers, BioTek)를 사용하여 흡광도를 측정하여 DPPH 라디칼 소거능 측정을 통해 항산화 능력을 평가하여 도 3의 그래프와 같은 측정결과를 얻었다.

도 3은 실시 예에 따른 다알리아 조성물의 DPPH 자유라디칼 소거능 측정치 그래프이다.

도 3을 참조하면, 실시 예 1의 다알리아 조성물은 72.5% 내지 74.0%, 실시 예2 의 다알리아 조성물은 85.3% 내지 86.3%, 실시 예3의 다알리아 조성물은 88.07% 내지 89.07%, 실시 예4의 다알리아 조성물은 88.4 내지 89.4% 실시 예5의 다알리아 조성물은 86.3% 내지 87.3%의 DPPH 자유라디칼 소거능을 보였다. 비교 예의 아스코브산은 84.5% 내지 85.9%의 DPPH 자유라디칼 소거능을 보였다. 다시 말하면, 다알리아 추출물 농도가 250㎍/㎖을 초과하는 다알리아 조성물은 아스코브산과 유사한 항산화 효능을 보임을 확인할 수 있었다.

이하에서는 도 4를 참조하여, 실시 예6 내지 실시 예10의 다알리아 조성물의 초과산화물 불균등화효소(Superoxide dismutase, SOD) 활성저해 측정결과에 대해 설명한다.

<실험 예 3>

실험 예 3에서는 실시 예6 내지 실시 예10의 다알리아 조성물에 대해 초과산화물 불균등화 효소 키트(SOD Assay Kit-WST)를 이용하여 초과산화물 불균등화효소를 측정한다. 실시 예6 내지 실시 예10의 다알리아 조성물과 수용성 테트라 졸륨 염(Water soluble tetrazolium salt, WST) 용액, 초과산화물 불균등화효소 용액(SOD enzyme solution), 완충액(buffer solution), 희석수(dilution water)을 이용하여 96 웰 플레이트(Well plate) 에 분주하였다. 이 측정법에 사용하는 효소인 초과산화물 불균등화효소(Superoxide dismutase, SOD)는 가장 중요한 항산화 효소의 하나로 과산화물음이온(Superoxide anion, O₂ ^-)을 과산화 수소(Hydrogen peroxide, H₂O_{2 )}와 산소분자로 분해하는 역할을 하는데 이러한 메커니즘을 기반으로 활성저해를 측정하였다.

실시 예6 내지 실시 예 10의 다알리아 조성물 20㎕ 에 테트라 졸륨 염 용액 200㎕과 초과산화물 불균등화효소 용액 20㎕을 첨가한 복수의 샘플, 탈이온증류수(deionized distilled water, ddH₂O) 20㎕ 에 테트라 졸륨 염 용액 200㎕과 초과산화물 불균등화효소 용액 20㎕을 첨가한 제1블랭크, 실시 예6 내지 실시 예 10의 다알리아 조성물 20㎕ 에 테트라 졸륨 염 용액 200㎕과 희석수 20㎕을 첨가한 제2블랭크 및 탈이온증류수 20㎕에 테트라 졸륨 염 용액 200㎕과 희석수 20㎕ 첨가한 제3블랭크를 조성한다. 각각의 조성물 240㎕을 96 웰 플레이트에 분주한 후, 37℃, 20분간 반응시킨다. 그 후, 마이크로플레이트 리더 (SynergyTM HTX and SynergyTM 2 Multi-Mode Readers, BioTek)를 이용하여 450㎚에서 흡광도를 측정한다. 실시 예6 내지 실시 예 10의 다알리아 조성물의 흡광도 값과 SOD 활성저해 측정치(inhibition rate of SOD activity, %)는 아래의 수학식에 의해 계산된다.

<수학식>

초과산화물 불균화등화효소 활성저해 측정치(Inhibition rate of SOD activity)(%)= {[(A_blank1 - A_blank3) - (A_sample - A_blank2)]/ (A_blank1 - A_blank3)] x 100.

여기서, A_sample은 샘플 각각의 흡광도 값이고,

A_blank1은 제1블랭크의 흡광도 값이고,

A_blank2는 제2블랭크의 흡광도 값이며,

A_blank3은 제3블랭크의 흡광도 값이다.

도 4는 실시예에 따른 다알리아 조성물의 초과산화물 불균화등화효소 활성저해 측정치이다.

도 4를 참조하면, 실시 예 6의 다알리아 조성물은 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 평균치가59.1%로 측정되었으며, 실시 예7의 다알리아 조성물은 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 52.7% 내지 69.1%로 측정되었으며 평균치가 60.9%로 측정되었다. 실시 예8의 다알리아 조성물은 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 71.1% 내지 76.1%로 측정되었으며, 평균치가 73.6%로 측정되었다. 실시 예9의 다알리아 조성물은 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 67.8% 내지 92.7%로 측정되었으며, 평균치가 80.7%로 측정되었다. 그리고, 실시 예10의 다알리아 조성물은 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 101.2% 내지 105.6%로 측정되었으며, 평균치가 103.4%로 측정되었다. 이러한, 측정치를 통해 다알리아 조성물이 초과산화물 불균화등화효소의 활성을 효과적으로 저해함을 확인할 수 있었다. 다알리아 조성물의 초과산화물 불균화등화효소의 활성저해능은 다알리아 추출물의 농도가 높을수록 증가하는 것을 확인할 수 있었다.

이러한, 실험 예 2 및 실험예 3의 실험결과를 참조하면, 다알리아 조성물의 다알리아 추출물 농도는 16㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖로 구성되는 것이 바람직하다. 다알리아 조성물은 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖이하일 경우, 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 70% 미만이 되며, 20000㎍/㎖를 초과하는 경우 DPPH 자유라디칼 소거능이 감소될 수 있다.

도 3 내지 도 4의 실험결과 그래프를 참조하면, 다알리아 조성물의 다알리아 추출물 농도가 10000㎍/㎖를 초과하는 경우, DPPH 자유라디칼 소거능이 감소하는 현상을 보였다. 또한, 다알리아 조성물은 다알리아 추출물 농도가 250㎍/㎖을 초과할 때, DPPH 자유라디칼 소거능이 80%이상을 보임을 확인할 수 있었다. 또한, 다알리아 조성물의 초과산화물 불균화등화효소의 활성저해능은 추출물의 농도가 높을수록 증가하였고, 다알리아 추출물 농도가 400㎍/㎖ 미만일 때, 초과산화물 불균화등화효소 활성저해능이 100%이하로 감소되었다. 다알리아 조성물은 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000 ㎍/㎖일 것이 보다 바람직함을 알 수 있었다.

상기의 실험결과를 참조하여 다알리아 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 화장료 조성물 대비 다알리아 추출물의 농도가 16㎍/㎖ 내지 20000㎍/㎖이 첨가되는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게, 다알리아 추출물은 화장료 조성물 대비 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000 ㎍/㎖ 첨가되는 것이 바람직함을 알 수 있었다.

다알리아 꽃잎으로부터 추출되어 조성된 다알리아 조성물은 항산화효과를 가지고 있다는 것을 실험을 통해 확인할 수 있었다. 이러한, 다알리아 조성물은 액상 또는 분말형태로 제조되어서, 항산화 효능을 필요로 하는 다양한 식품, 화장품 등에 용이하게 첨가될 수 있다.

이상과 같이 비록 한정된 도면에 의해 실시 예들이 설명되었으나, 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기의 기재로부터 다양한 수정 및 변형이 가능하다. 예를 들어, 설명된 기술들이 설명된 방법과 다른 순서로 수행되거나, 및/또는 설명된 구조, 장치 등의 구성요소들이 설명된 방법과 다른 형태로 결합 또는 조합되거나, 다른 구성요소 또는 균등물에 의하여 대치되거나 치환되더라도 적절한 결과가 달성될 수 있다.

Claims (16)

1. 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000㎍/㎖인 다알리아 조성물을 포함하고,
   상기 다알리아 추출물은, 다알리아 꽃잎 1g당 에탄올 5㎖ 내지 20㎖를 첨가하고 교반하여서 추출하고, 페놀성 화합물의 함량이 43.1㎍/100㎎ 내지 56.5㎍/100㎎인 항산화 효능을 가지는 화장료 조성물.
   
2. 삭제
3. 삭제
4. 다알리아 꽃잎을 준비하는 단계;
   상기 다알리아 꽃잎 1g당 에탄올 5㎖ 내지 20㎖를 첨가하고 교반하여서 페놀성 화합물의 함량이 43.1㎍/100㎎ 내지 56.5㎍/100㎎ 인 다알리아 추출물을 추출하는 단계;
   상기 다알리아 추출물을 여과하는 단계; 및
   상기 여과된 다알리아 추출물을 용매에 희석하여 상기 다알리아 추출물의 농도가 500㎍/㎖ 내지 10000㎍/㎖인 항산화 효능을 가지는 다알리아 조성물을 제조하는 단계;
   를 포함하는 다알리아 조성물의 제조방법.
   
5. 삭제
6. 삭제
7. 삭제
8. 삭제
9. 제4항에 있어서,
   상기 다알리아 조성물은,
   항산화성분의 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 자유라디칼 소거능이 85% 내지 89%의 소거능을 가지는 다알리아 조성물의 제조방법
   
10. 삭제
11. 삭제
12. 제4항에 있어서,
    상기 다알리아 추출물을 여과하는 단계는,
    상기 다알리아 추출물을 시린지 필터(Syringe filter)로 여과하는 다알리아 조성물의 제조방법.
    
13. 제4항의 의한 방법으로 제조된 항산화 효능을 가지는 다알리아 조성물.
    
14. 제4항의 의한 방법으로 제조된 상기 다알리아 조성물을 동결 건조하는 단계; 및
    상기 동결 건조된 다알리아 조성물을 분말형태로 제조하는 단계;
    를 포함하는 다알리아 조성물 분말의 제조방법.
    
15. 제14항의 의한 방법으로 제조된 항산화 효능을 가지는 다알리아 조성물 분말.
    
16. 제4항의 방법으로 제조된 다알리아 조성물을 포함하여 항산화 효능을 가지는 화장료 조성물.

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