KR101621910B1 - 전립선암 진행을 예방하거나 감소시키는 데 유용한 조성물 - Google Patents
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Abstract
전립선암 진행의 예방 또는 감소를 위해 활성 성분으로 녹차 추출물과 석류 추출물을 포함하는 조성물이 개시된다.
Description
본 발명은 전립선암의 진행을 예방하거나 감소시키는 데 유용한 조성물에 관 한 것이다.
특히, 본 발명은 활성 성분으로 전립선암의 진행을 예방하거나 감소시키는 데 유용한 녹차 및 석류 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
전립선암은 포유류, 특히 서구 국가의 인간 남성에서 가장 일반적인 암이다(Cancer Statistics 1997, CA Cancer J. Clin. 1997; 47; 5-27).
알려지지 않은 원인, 가변적인 병리, 내분비 인자와의 복잡한 관계 및 역형성 진행과 같은 다양한 인자가 이 질환의 복잡성에 기여한다.
위스콘신주의 위스콘신 메디슨 대학 및 오하이오주의 클리브랜드 소재 케이스 웨스턴 리저브 대학(Case Western Reserve University)의 한 팀의 연구자들은 인간 전립선암에 대한 마우스 모델에서 전립전암 세포의 인슐린-유사 성장 인자-1(IGF-1)-유도된 분자 경로를 조절함에 있어 녹차의 폴리페놀(GTP)의 역할에 대해 보고하였다. 이들 관찰 결과는 IGF-1 수치 증가가 전립선, 유방, 폐 및 대장과 같은 특정 암에서 증가된 위험과 어떤 관련이 있는 지를 보여주는 연구라는 관점에서 의미가 있다. 녹차의 폴리페놀은 전립선암 마우스 모델의 혈청 중 혈관 내피 성장 인자(VEGF)의 양을 통제함으로써 종양 진행을 최소화하는 데 기여한다. VEGF의 감소는 GTP 유도된 IGF-1 수준의 감소에 기인한 것일 수 있다. VEGF는 성장하는 종양에 영양분을 운반하는 신생 혈관이 생성 및 성장하도록 기능한다. VEGF의 양을 감소시킴으로써, GTP는 종양 성장을 위해 흐르며 종양 성장을 지지하는 영양분이 최소화되도록 작용한다.
임상 암 연구(Clinical Cancer Research, 2006년 7월 1일; pp 4018-4026 및 Clinical Cancer Research Vol. 12, 4018-4026, 2006년 7월 1일)는 석류 추출물이 전립선암 진행의 예방 또는 감소에 유용할 수 있음을 개시하였다.
전립선암 및 전립선 질환(Prostate Cancer and Prostatic Diseases (2002) 5, 6-12)은 라이코펜이 전립선암의 진행의 예방 또는 감소에 유용할 수 있음에 대해 개시하였다.
WO 0057892는 세레노아가 전립선암의 치료에 유용함을 기재하고 있다.
WO 03035635는 이소플라보노이드 유도체가 전립선 암의 치료에 유용함을 기재하고 있다.
WO 04091602는 L-카르니틴이 심혈관 질환의 치료에 유용함을 기재하고 있다.
인간에게 셀레늄은 글루타티온 페록시다제와 같은 항산화 효소의 환원에 공동인자로 작용하는 미량 영양 성분이다. 식이 셀레늄은 견과, 시리얼, 육류, 어류 및 계란에서 유래된다. "암 프로젝트의 영양학적 예방"(Nutritional Prevention of Cancer Project)(NPC)에서는 1,312명의 환자들에게 10년까지의 기간 동안 1일 200㎍의 셀레늄 용량 혹은 플라세보를 투여하는 조절된, 무작위 암 예방 시험을 실시하였다. 이 연구에서, 전립선암 및 전립선암 진행의 통계학적으로 유의한 발현 감소가 획득되었다.
녹차와 석류 추출물의 항종양 효과가 이미 알려져 있지만, 상기 언급된 선행 문헌 어디에서도 이들 2개 활성 성분을 전립선암의 진행의 예방 혹은 감소를 위해 조합해서 사용하는 것에 대해 언급하거나 시사하고 있지 않다.
더욱이, 종양의 화학요법에 유용한 다른 제제가 있고 종양성 전립선의 제거 또는 종양을 축소시키기 위해 고안된 방사선 활성 씨드의 배치와 같은 전립선암에 대해 현존하는 다른 침습적 치료 옵션이 있기 때문에, 전립선암에 대해 항-발암 물질로서 공급되어 환자에게 독성이 적고 전통적인 치료법에 부속적으로 또는 보충적으로 유용한 조성물을 제공하는 것이 더욱 바람직할 수 있다.
따라서, 본 발명의 한 목적은 활성 성분으로 녹차 추출물과 석류 추출물을 포함하는 상승적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 언급된 조성물은 라이코펜, 셀레늄, 아연, 세레노아, 이소플라보노이드 유도체 및 L-카르니틴을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 추가의 목적은,
(a) 활성 성분으로 25 내지 800mg 용량, 바람직하게는 125 및 250mg 용량의 녹차 추출물;
(b) 활성 성분으로 25 내지 800mg 용량, 바람직하게는 40, 125 및 250mg 용량의 석류 추출물;
(c) 0.03 내지 30.0mg 용량, 바람직하게는 1.25 및 5mg 용량의 라이코펜;
(d) 8.2 내지 500㎍ 용량, 바람직하게는 55 및 82.5 ㎍ 용량의 셀레늄;
(e) 1 내지 200mg 용량, 바람직하게는 20mg 용량의 아연;
(f) 10 내지 400mg 용량, 바람직하게는 160 및 320mg 용량의 세레노아;
(g) 10 내지 500mg 용량, 바람직하게는 100mg 용량의 이소플라보노이드 유도체(대두 이소플라본); 및
(h) 50 내지 500mg 용량, 바람직하게는 200mg 용량의 L-카르니틴을 포함하는 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 추가 목적은 전립선암의 진행을 예방하거나 감소시킴에 있어 상기 언급한 조성물의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 추가의 목적은 전립선암의 진행을 예방하거나 감소시키는 약제를 제조함에 있어 상기 언급한 조성물의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 추가적 목적은 전립선암의 진행을 예방하거나 감소시키는 식이 보충물을 제조함에 있어 상기 언급한 조성물의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 조성물은 코엔자임, 미네랄 성분, 항산화제, 비타민 및 전립선암의 치료에 유용한 제제를 추가로 포함할 수 있다.
아래 비제한적 실시예는 본 발명을 더욱 예시한다.
실시예 1
아래 확립된 인간 전립선암 세포주에서 보고된 실험을 위해, LNCaP 및 PC3(제조원: American Type Culture Collection Rockville, MD)를 사용하였다.
상기 LNCaP 세포를 10% 소태아 혈청(FBS) 및 1% 페니실린 및 스트렙토마이신으로 보충된 RPMI 1640 배지(제조원: Life Technologies, Rockville, MD)에서 배양하였다. 세포를 공기 중 5%의 CO2의 가습된 대기 중 37℃에서 배양하였다. 2개 세트의 세포 배양물을 10cm 조직 배양 플라스크 중에 80% 컨플루언스(confluence)로 성장시키고, 1:8로 분할하였다. 세포를 96 셀 플레이트에 평편배양하고, 실험에 사용되기 전에 부착되고 60-70%의 컨플루언스에 도달하도록 하였다.
시험관 내에서 세포 성장에 대한 영향
LNCaP 및 PC3 세포의 배양된 세트를, 각각 완성 세포(complete cell) 배지를 포함하는 10개 웰 중에서 녹차 추출물(PBS 중 40 μg/ml) 또는 석류 추출물 (PBS 중 40 μg/ml) 또는 이의 조합(녹차 추출물 및 석류 추출물 모두)으로 처리하였다. 대조군으로 사용된 세포를 완성 세포 배지 중 동일한 양의 PBS와 함께 배양시켰다. 라이코펜(5 mmol/L), 셀레늄(30 ng/ml), 아연 (10 μg/ml), 세레노아 (10 μg/ml), 및 대두 이소플라본 (10 μg/ml)의 효과를 또한 상기 단독 세포 배양물에 이를 첨가하거나, 녹차 추출물 및 석류 추출물의 조합물에 첨가함으로써 시험하였다. 세포의 세포 증식을 시험 제제를 함유하거나 함유하지 않은 채로 37℃에서 24시간 배양한 후 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 (MTT) 색측정 검사를 사용하여 측정하였다. 상기 MTT (5 ng/ml)를 상기 모든 웰에 첨가하고 추가 2시간 동안 배양하였다. 이후, 플레이트를 4℃에서 5분간 500 x g에서 원심분리하였다. MTT 용액을 조심스럽게 채취하여 웰로부터 제거하고, 완충된 DMSO (0.1 ml)를 각각의 웰에 첨가하고 15분간 플레이트를 진탕시켰다. 흡광도를 540nm의 파장으로 마이크로플레이트 리더 상에서 측정하였다. 세포 성장에 대한 각 화합물 단독 및 배합의 효과를 세포 생존의 백분율로써 평가하였으며, 여기서 비처리된 대조 세포는 완전히 생존가능하여 자유롭게 성장할 수 있는 것들로 취해졌다.
수득된 결과는 아래 표 1 내지 4에 기록되어 있다.
표 1, 2, 3 및 4에서 기록된 결과들은 본 발명의 조성물이 단일 성분들에 비해 통계적으로 더욱 활성임을 보여준다.
더욱이, 라이코펜, 셀레늄 및 아연, 또는 세레노아, 대두 이소플라본 및 L-카르니틴의 존재가 본 발명의 조성물의 억제 활성을 증가시키지 않는다.
실시예 2
실험 2 시험관 내에서 세포 분할에 대한 영향
25 mL 배양 플라스크 내 LNCaP 및 PC3 세포를 녹차 추출물(PBS 중 40 μg/ml), 석류 추출물 (PBS 중 40 μg/ml), 세레노아 (10 μg/ml), 대두 이소플라본 (10 μg/ml) 또는 녹차 추출물과 석류 추출물의 조합물 중 어느 하나로 처리하였다.
대조군은 PBS만으로 처리하였다. 부착 후 48시간에 처리를 개시하였다. 세포들을 유세포 분석기로 분석하기 전에 72시간 이하 동안 배양 중 성장시켰다. 비동시성 성장 세포들에 녹차 추출물 또는 석류 추출물 또는 이들 모두로 전처리하거나 전처리 없이, 세포들을 2시간 동안 10mM 브로모데옥시우리딘(BrdU)로 펄스 라벨링하였다. 이후, 세포들을 채집하고, 70% 에탄올로 고정시키고, 0.1% HCl로 처리하고 90℃에서 10분간 가열하여 라벨링된 DNA를 노출시켰다. 세포를 항-BrdU 콘쥬게이트된 FITC(벡톤 딕킨슨)로 염색하고, 프로피디움 요오드화물로 대비염색하였다. 세포 주기 분석을 Lysis II 소프트웨어를 사용하여 벡톤-딕킨슨 FACScan 상에서 실시하였다.
단일 성분들에 대해 본 발명의 조성물을 사용하여 수득된 유세포 분석 결과를 아래 표에 나타내었다.
단일 화합물들의 사용은 LNCaP 및 PC3 세포 모두의 증식에 억제 작용을 나타낸다(표 5-8 및 10-13 참조). 표 9 및 14에 나타난 결과들은 본 발명의 배합 조성물이 LNCaP 및 PC3 세포 모두의 증식 억제에 대해 예상외의 상승 작용을 나타냄을 보여준다. 상기 세포주들은 S기에 정지되어 72시간 동안 LNCaP 및 PC3 세포주에서 각각 최대 60.9% 및 54.8%로 지속되었다.
세포 분열 또는 성장 정지에 대해 비히클 단독 처리된 대조군에서 관찰된 효과는 없었다.
실시예 3
생체내에서
항종양 활성
본 발명의 조합물의 항종양 활성을 측정하기 위해, 고형 종양 종주 LNCap(ATCC)를 사용하였다.
상기 세포를 누드 마우스에서 5 내지 6시간 동안 배양하였다. 이 종주의 고형 암 단편(3mm 정사각형)을 8주령의 nu-nu 누드 수컷 마우스(제조원: NxGen Biosciences, 미국 캘리포니아주, 샌디에고 소재) 의 겨드랑이 부위 피부 아래로 이식하였다. 종양을 신뢰할 수 있게 이식받은 마우스들을(약 20일후) 각각 10마리씩의 4개 그룹으로 무작위적으로 배당하였다. 동물 그룹들을 비히클, 녹차 추출물, 석류 또는 녹차와 석류의 배합물로 처리하였다. 대조군 동물들은 식수만을 제공한 반면, 녹차 및 석류 추출물 또는 이의 배합물을 연속적인 28일동안 아침에 1일 1회 식수 중 1%로 제공하였다. 1주일에 2회 종양 직경을 측정하였고, 종양 용적을 식 0.5238L1L2H(여기서, L1은 장축 지름, L2는 단축 지름, H는 종양 높이이다)를 이용하여 계산하였다. 종양이 약 28일 후에 대조 동물에서 약 1,300 mm3에 도달하면 모든 동물들을 안락사시켰다.
결과(평균 및 SE)는 28일째 종양 용적이 대조군에서는 1305±87인 반면, 녹차 및 석류 추출물 처리군에서는 각각 1026±98(p<0.05) 및 1011±91(p<0.05)이었다. 반면, 배합군(녹차 + 석류 추출물)에서는 종양 감소에 있어서 뚜렷한 상승 효과가 있었다(623±112)(p<0.001). 따라서, 배합에서의 억제율은 녹차(21.4%) 또는 석류(22.5%)에 비해 52.3%였다.
표 15에 나타낸 수득된 결과는 본 발명의 조성물이 단일 성분들에 비해 통계학적으로 더 활성임을 보여준다.
본 발명에 따른 식이 보충제 또는 의약품은 의료 업계의 실무자에게 친숙하며 임상 실습에서 이미 사용하고 있고 이들의 약리학적 프로파일이 공지되어 있는 활성 성분들로 구성될 수 있다.
따라서, 이것들이 오랜 기간 동안 현재 시판되고 있고 인간 또는 동물 투여에 대해 적합한 등급인 제품들인 점을 고려하면, 이것들을 입수하는 것은 매우 용이하다.
아래에서는 본 발명에 따른 조성물의 비제한적 실시예를 기술한다.
조성물 1
녹차 추출물 250mg;
석류 추출물 250mg.
조성물 2
녹차 추출물 250mg;
석류 추출물 250mg;
라이코펜 1.25mg;
셀레늄 82.5㎍;
아연 20mg.
조성물 3
녹차 추출물 125mg;
석류 추출물 125mg;
라이코펜 5mg;
셀레늄 82.5㎍;
아연 20mg;
세레노아 160mg;
대두 이소플라본 100mg.
조성물 4
녹차 추출물 125mg;
석류 추출물 40mg;
라이코펜 5mg;
셀레늄 55㎍;
아연 20mg;
세레노아 320mg;
대두 이소플라본 100mg.
조성물 5
녹차 추출물 125mg;
석류 추출물 125mg;
라이코펜 5mg;
셀레늄 82.5㎍;
아연 20mg;
세레노아 160mg;
대두 이소플라본 100mg;
L-카르니틴 200mg.
Claims (12)
- 활성 성분으로,
25 내지 800mg의 용량으로 존재하는 녹차 추출물;
25 내지 800mg의 용량으로 존재하는 석류 추출물;
0.03 내지 30.0mg의 용량으로 존재하는 라이코펜;
8.2 내지 500㎍의 용량으로 존재하는 셀레늄; 및
1 내지 200mg 의 용량으로 존재하는 아연;
을 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제1항에 있어서,
10 내지 400mg의 용량으로 존재하는 세레노아; 및
10 내지 500mg의 용량으로 존재하는 대두 이소플라본;
을 더 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제2항에 있어서,
50 내지 500mg의 용량으로 존재하는 L-카르니틴;
을 더 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제1항에 있어서,
250mg의 용량으로 존재하는 녹차 추출물;
250mg의 용량으로 존재하는 석류 추출물;
1.25mg의 용량으로 존재하는 라이코펜;
82.5㎍의 용량으로 존재하는 셀레늄; 및
20mg의 용량으로 존재하는 아연;
을 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제2항에 있어서,
125mg의 용량으로 존재하는 녹차 추출물;
125mg의 용량으로 존재하는 석류 추출물;
5mg의 용량으로 존재하는 라이코펜;
82.5㎍의 용량으로 존재하는 셀레늄;
20mg의 용량으로 존재하는 아연;
160mg의 용량으로 존재하는 세레노아; 및
100mg의 용량으로 존재하는 대두 이소플라본;
을 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제2항에 있어서,
125mg의 용량으로 존재하는 녹차 추출물;
40mg의 용량으로 존재하는 석류 추출물;
5mg의 용량으로 존재하는 라이코펜;
55㎍의 용량으로 존재하는 셀레늄;
20mg 의 용량으로 존재하는 아연;
320mg의 용량으로 존재하는 세레노아; 및
100mg의 용량으로 존재하는 대두 이소플라본;
을 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제3항에 있어서,
125mg의 용량으로 존재하는 녹차 추출물;
125mg의 용량으로 존재하는 석류 추출물;
5mg의 용량으로 존재하는 라이코펜;
82.5㎍의 용량으로 존재하는 셀레늄;
20mg 의 용량으로 존재하는 아연;
160mg의 용량으로 존재하는 세레노아;
100mg의 용량으로 존재하는 대두 이소플라본; 및
200mg의 용량으로 존재하는 L-카르니틴;
을 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물.
- 제1항 내지 제7항 중에서 선택된 어느 한 항에 있어서,
코엔자임, 미네랄 성분, 항산화제, 비타민 및 전립선암 치료에 유용한 제제;
를 더 포함하는 전립선암 예방용 약제 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP08161516 | 2008-07-31 | ||
EP08161516.3 | 2008-07-31 |
Publications (2)
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