KR102514074B1 - 체내흡수율이 증가된 엘라그산과 갈산을 고함량 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물 및 efc 공법을 이용한 그의 제조방법 - Google Patents
체내흡수율이 증가된 엘라그산과 갈산을 고함량 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물 및 efc 공법을 이용한 그의 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 체내흡수율이 증가된 엘라그산과 갈산을 고함량 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물 및 EFC 공법을 이용한 그의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 EFC 공법을 이용하여 석류를 특정 효소와 균 주로 발효하여 갈산과 엘라그산 등 유효성분이 현저하게 증가되어 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용으로 유용한 석류 발효조성물과 그 제조방법에 관한 것이다. 이러한 본 발명이 조성물은 건강식품, 약학조성물 또는 동물용 사료첨가제 등으로 유용하다.
Description
본 발명은 체내흡수율이 증가된 엘라그산과 갈산을 고함량 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물 및 EFC 공법을 이용한 그의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 EFC 공법을 이용하여 석류를 특정 효소와 균주로 발효함으로써 갈산과 엘라그산 등 유효성분이 현저하게 증가되어 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선에 효과가 있는 석류 발효조성물과 그 제조방법에 관한 것이다.
석류는 이도금양목, 부처꽃과, 석류나무속, 석류나무과, 석류나무종에 속하는 낙엽 활엽 소교목으로 약 500여종이 존재한다. 석류는 이란이 원산지이고 인도, 파키스탄 등 남아시아에서 주로 생산되며 우리나라에는 조선시대에 들어왔다.
열매는 얇은 칸막이가 된 여섯 개의 작은 방으로 나뉘고 그 안에 수많은 씨앗을 품고 있다. 석류는 새콤달콤하면서 독특한 맛과 뛰어나고 다양한 건강상 이로움 때문에 세계적으로 가장 인기 있는 기능성 식품의 하나로 꼽히고 있으며, 그 소비가 급속히 확대되고 있다.
석류에는 탄수화물 단백질, 지방, 비타민 B군, C, E, K, 무기물 등 풍부한 영양성분을 함유하고 있다. 특히 항산화, 항암, 항균, 항염증 등 강력한 생리활성을 가진 페놀성 화합물을 비롯한 식물 estrogen 등 다양한 종류의 phytochemicals을 함유하고 있다.
석류의 대표적인 효능은 갱년기 장애 개선과 피부보호 기능이며, 이미 대한민국 식품의약품안전처에 건강기능식품 원료로 등재되어있다. 이와 같은 효능은 석류에 함유되어 있는 엘라그산으로부터 생성되는 urolithin과 같은 에스토로겐 유사물질(estrogenic substances)과 갈산과 같은 페놀성 화합물에 의한 강력한 항산화 물질에 기인한다.
그런데 이러한 두가지 대표적인 생리활성 물질은 실제로 석류즙에 함유되어 있기는 하지만 매우 미량 함유하고 있으며, 대부분 이들이 전구물질인 ellagtannin과 gallotannin 등 분해성 탄닌(hydrolyable tannins)으로 존재한다.
따라서 석류 과즙에서 유효성분의 활성을 개선하기 위해서는 엘라그산과 갈산을 증대시켜 체내흡수를 촉진할 수 있는 기능성 원료생산 기술개발이 필요하다.
최근 고령화 사회가 도래하면서 다양한 성인병에 대한 관심과 대책이 요구되고 있다. 고령화에 접어들면서 갱년기 이후 발생하는 노인성 질환으로는 치매, 고혈압, 당뇨, 뇌졸중, 심근경색, 혈관계 질환, 전립선비대증, 성기능 저하 등과 다양한 종류의 암 질환이 증가하는 것으로 알려져 있다.
특히, 이 중에서도 혈관건강의 문제나 전립선 및 성기능 저하에 대해서는 중요한 관심사가 되고 있다.
기존에 석류 등을 이용하여 혈관이나 전립선 또는 성기능과 관련된 개선용 조성물의 예로서, 한국특허공개 제10-2008-7025186호에서는 전립선 특이 항원 배가 시간을 증가시키기 위한 석류 추출물의 사용 방법에 제안되어 있고, 한국특허등록 제10-1621910호에서는 녹차추출물과 석류추출물을 포함하는 전립선암 개선용 조성물이 제안되어 있다.
또한, 한국특허공개 제10-2012-0121468호에서는 석류 등 다양한 한약재의 혼합 발효물을 이용한 혈관 및 성기능 개선용 조성물이 제안되어 있으며, 한국특허공개 제10-2020-0083141호에서는 회화나무열매 추출물과 석류 추출물을 유효성분으로 함유하는 심혈관계 질환을 포함하는 여성갱년기 증상의 개선을 위한 조성물이 제안되어 있다.
그러나 이러한 종래의 기술에서는 단순하게 석류 추출물이 전립선이나 혈관 개선 등에 이용되는 것을 제안하고 있는 수준으로서, 유효성분의 함량이 적어서 혈관건강 개선이나 전립선 개선 등의 효과가 미미할 뿐만 아니라 성기능 개선을 기대할 수 없고, 또 체내 흡수도 한계가 있어서 그 효과를 충분하게 기대하기 어려운 문제가 있었다.
본 발명은 상기와 같은 문제 해결을 위하여, 석류에 함유된 엘라그산, 갈산 등 유효성분의 함량을 현격하게 증대시키고, 체내흡수율을 향상시켜 혈관건강 또는 전립선 개선, 성기능 개선 등의 작용 효과를 현저하게 향상시키는 것을 해결과제로 한다.
따라서 본 발명의 목적은 석류에 함유된 유효성분의 전구물질에 직접 작용하는 효소와 균주를 이용하여 유효성분의 함량을 고함량으로 함유하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물을 제공하는데 있다.
상기와 같은 본 발명의 과제해결을 위하여, 본 발명은 석류를 탄네이즈와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)로 효소발효시켜 얻은 발효물을 유효성분으로 함유하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 발효물은 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중 하나 이상을 발효한 발효물을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 탄네이즈는 0.01∼1 중량% 사용하고, Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)는 0.5x107cfu/ml 내지 3x107cfu/ml 로 발효된 발효물을 포함할 수 있다.
본 발명의 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 조성물은 건강식품으로 유용하다.
또한, 본 발명의 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 조성물은 약학조성물로 유용하다.
또한, 본 발명의 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 조성물은 동물사료용 첨가제로 유용하다.
또한, 본 발명은
석류 과육으로부터 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중 하나이상의 석류 원액을 제조하는 단계;
석류 원액을 5-10brix로 희석하여 탄네이즈 0.01∼1 중량%와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)의 유산균 0.5x107cfu/ml 내지 3x107cfu/ml 로 처리하고 30~40℃에서 2~48시간 동안 진탕 배양하는 단계; 및
상기 진탕 배양하여 얻은 효소반응액을 70∼80℃에서 효소를 실활하는 단계
를 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물을 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 진탕 배양은 80~200rpm으로 교반 하에 이루어질 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 효소를 실활하는 단계는 5~30분간 수행될 수 있다.
본 발명은 석류 추출물에 존재하는 가수분해성 탄닌을 EFC공법으로 발효시켜 엘라그산과 갈산 및 페놀성 화합물 등의 유효성분을 짧은 시간에 선택적으로 다량 생성하여 혈관 등에 우수한 기능성을 부여하도록 체내흡수율을 증강시킬 수 있는 효과가 있다.
본 발명은 상기와 같은 유효성분이 고함량으로 함유되어 있으므로, 이러한 유효성분 강화로 인해 항산화 효과가 우수하고 특히 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선 효능이 현저하게 증가되는 효과가 있다.
또한, 반응을 통해 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중의 tannin이 감소되어 떫은 맛이 줄어 맛을 개선하는 등 품질을 현저하게 향상시킬 수 있는 효과도 있다.
도 1은 EFC 공법으로 발효한 석류 발효조성물의 갈산과 엘라그산의 증가를 나타낸 그림이다.
도 2는 EFC 공법으로 발효한 석류 발효조성물에 대한 갈산과 엘라그산의 함량변화를 보여주는 HPLC profile 이다.
도 3은 석류에 대하여 발효 전(Control)과 비교예 1(Tanase) 및 실시예(Tan+L)의 발효 후 석류즙이 LPS에 의해 유도된 NO생성 억제효과를 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 EFC 공법으로 발효한 석류 발효조성물에 대한 갈산과 엘라그산의 함량변화를 보여주는 HPLC profile 이다.
도 3은 석류에 대하여 발효 전(Control)과 비교예 1(Tanase) 및 실시예(Tan+L)의 발효 후 석류즙이 LPS에 의해 유도된 NO생성 억제효과를 비교하여 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 하나의 구현예로서 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 석류를 이른바 EFC(효소발효공법)을 이용하여 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선에 특히 효과가 우수한 석류 발효조성물로 제조한 것을 특징으로 한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 석류를 효소 발효함으로써, 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 등(이를 ‘석류즙’ 또는 ‘석류 원액’으로 통칭할 수 있음)에 존재하는 가수분해성 탄닌(hydrolyable tannins)을 탄네이즈와 새로운 유산균(Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023))로 효소 발효시켜 엘라그산과 갈산의 함량을 획기적으로 증가시킨 것이다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 이러한 본 발명의 석류 발효조성물은 항산화 및 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선 효과가 우수한 엘라그산과 갈산의 함량이 현저한 증가된 석류발효액으로 제공될 수 있다. 바람직하게는 갈산은 5배 이상, 엘라그산은 1.5배 이상 증가된 효과를 얻을 수 있으며, 유효 활성과 체내흡수율 등을 월등하게 증가시킬 수 있다.
이렇게 본 발명의 방법으로 석류의 주요 유효성분의 함량을 현저하게 향상시킬 수 있는 것은, 석류를 발효함에 있어서 특정 조건의 발효를 수행함으로써 가능한 것이다. 이를 위해 본 발명에서는 석류를 탄네이즈와 유산균으로 발효처리하여 석류즙에서 생리활성 성분을 증가시켜서 현저하게 우수한 효과를 나타낸다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 석류를 효소발효공법을 이용하여 발효처리할 수 있다. 여기서 효소발효공법(EFC; Enzyme Fermentation Control System)이라 함은 효소 존재하에 발효 처리하는 공법으로서, 이러한 공법을 이용해 생리활성 물질을 구조를 전환하면 체내흡수가 현저하게 잘 이루어지고, 또 약리효능이 높은 유효성분을 대량 생산할 수 있도록 해주는 특화된 공법이라 할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 본 발명에서는 석류 추출물에서 핵심 phytoestrogen인 엘라그산과 갈산을 이들의 전구물질에 직접 작용하는 효소와 특수 균주를 사용하여 효소발효공법을 이용함으로 인해 단기간에 엘라그산과 갈산 등 유효성분을 획기적으로 증가시킬 수 있는 것이다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 발효물인 석류 추출물인 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중 하나 이상을 발효한 발효물을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 탄네이즈는 0.01∼1 중량%와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023) 0.5x107cfu/ml 내지 3x107cfu/ml 가 동시에 적용되어 발효된 것을 특징으로 한다, 여기서 효소만 적용하거나 유산균만 적용하는 경우는 본 발명에 따른 현저한 생리활성 효과를 얻기 어렵다.
특히, 본 발명에 따르면 상기 효소는 탄네이즈가 바람직하게 사용될 수 있고, 유산균으로서는 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)가 선택적으로 바람직하게 사용되는데, 여기서 유산균이 다른 종류로 사용되는 경우 본 발명에 따른 우수한 효과를 기대할 수 없다.
이와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 본 발명은 탄네이즈를 단독 사용하거나 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 단독으로 사용하여 발효하는 경우는 본 발명의 목적달성이 어렵다. 또한, 탄네이즈 사용 후 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 사용하거나 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023) 유산균 사용 후 탄네이즈를 사용하는 경우에도 본 발명의 목적달성이 어렵다.
따라서 본 발명은 탄네이즈와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 동시에 사용하여 발효 처리함으로써 상승효과를 얻는 것에 기술적 의의가 있다. 이러한 두 성분을 동시에 사용하는 경우 본 발명의 우수한 효과를 얻을 수 있다. 그러므로 탄네이즈와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 동시에 사용하는 경우 선택적으로 활성성분인 갈산이나 엘라그산 등의 생리활성 성분이 다른 경우에 비해 상승효과로 현저하게 우수한 결과를 나타낼 수 있다. 또한, 체내 흡수율도 현저하게 개선된다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기와 같은 효소발효공법을 적용하기 위해서, 본 발명에서는 우선 석류 과육으로부터 압착방법에 의한 석류 추출물을 준비할 수 있다. 이러한 석류 추출물은 예컨대 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 등으로 준비할 수 있다.
이렇게 준비된 석류 추출물은 특정 효소와 특정 유산균으로 발효처리하는데, 예컨대 석류 추출물을 5-10brix로 희석하여 탄네이즈 0.01∼1 중량%. 더 좋기로는 0.05~0.5 중량%와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)의 유산균 0.5x107cfu/ml 내지 3x107cfu/ml. 더 좋기로는 0.8x107cfu/ml 내지 1.5x107cfu/ml로 처리하여 발효하고 30~40℃에서 2~48시간 동안 진탕 배양하는 단계를 거칠 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기와 같이 발효처리하여 진탕 배양하여 얻은 효소반응액을 70∼80℃에서 효소를 실활하는 단계를 거쳐서 목적하는 석류 발효조성물을 제조할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 진탕 배양은 80~200rpm, 더 바람직하게는 100~150rpm으로 교반 하에 이루어질 수 있다. 또한, 상기 발효 배양 후 효소를 실활하는 단계는 5~30분간 수행될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기와 같이 제조된 석류 발효조성물은 엘라그산이나 갈산 등의 생리활성 성분이 현저하게 향상된 결과물로 얻어질 수 있으며, 이러한 석류 발효조성물은 항산화 효과는 물론 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선에 매우 우수한 효과를 나타낸다.
따라서 본 발명은 상기와 같은 석류 발효조성물을 유효성분으로 하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 조성물을 특징으로 한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 이러한 본 발명의 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 조성물은 건강식품으로 매우 유용하다. 특히 이러한 본 발명의 조성물을 상기 용도로 사용하는 경우 생체 흡수율이 우수하여 우수한 사용 효과를 발휘할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 본 발명의 조성물을 건강식품으로 이용하는 경우에는 정제, 캅셀제, 과립, 그래뉼, 환제, 겔제, 분말, 젤리, 액제, 드링크, 탄산음료, 청량음료 등 다양한 형태로 제조하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 상기와 유사한 제형으로 경구투여용 약학조성물로 유용하다.
본 발명의 조성물은 다양한 형태의 통상적인 첨가제, 부형제 등을 혼합하여 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 건강식품이나 약학조성물은 유효성분 성인 기준으로 1회 10~1,000mg의 량으로 1일 2~3회 경구투여 할 수 있다.
이와 같이, 본 발명에 따른 석류 발효조성물은 본 발명은 석류 추출물에 존재하는 가수분해성 탄닌을 EFC공법으로 발효시켜 엘라그산과 갈산 및 페놀성 화합물을 짧은 시간에 선택적으로 다량 생성할 수 있는 것이다. 그러므로 본 발명은 엘라그산과 갈산 등 유효성분을 단기간에 획기적으로 증가시킬 수 있는 효과가 있다.
이러한 본 발명의 석류 발효조성물은 생리활성이 우수한 유효성분 강화로 인해 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선 효과 등이 현저하게 증가되는 효과가 있다.
또한, 본 발명은 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중 하나이상의 석류 원액에 대하여 효소발효 반응을 통해 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중의 tannin이 감소되어 떫은 맛이 크게 감소하여 맛도 향상시킬 수 있어서, 석류 추출물이나 이를 이용한 건강식품, 의약품 등에 대하여 품질을 향상시킬 수 있는 효과도 있다.
또한, 본 발명은 이러한 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선 효과가 우수함으로 인해 동물용 약제나 동물사료용 첨가제 등으로 활용할 수 있다.
이하, 본 발명의 실시예에 의거 상세하게 설명하겠는바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 : 석류 발효조성물의 제조
(1) 석류과육으로부터 압착방법에 의한 석류착즙 원액(석류즙)을 제조하는 단계를 거친다.
(2) 상기 (1)단계에서 제조한 석류착즙 원액을 8brix로 희석하여 탄네이즈0.2 중량%와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)(1x107cfu/ml)로 처리하고 34℃에서 24시간 발효하고, 120rpm으로 교반하에 진탕 배양하는 단계를 거쳐서 효소반응액을 얻는다.
(3) 상기 (2)단계에서 얻은 효소반응액을 70∼80℃에서 10분간 처리하여 효소를 실활시킨다.
(4) 상기 단계에서 실활한 효소 반응액을 석류 농축액으로 조제하여 석류 발효조성물을 제조한다.
비교예 1
상기 실시예와 동일한 비교 조건으로 실시하되, 효소로 탄네이즈(TAH; Tannin acylhydrolase)를 단독으로 사용하되 유산균을 사용하지 아니한 다음 발효하고 진탕 배양하여 석류 발효조성물을 제조하였다.
비교예 2
상기 실시예와 동일한 비교 조건으로 실시하되, 효소로 탄네이즈(TAH)를 사용한 후, 이어서 유산균으로 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 사용하여 발효하고 진탕 배양하여 석류 발효조성물을 제조하였다.
비교예 3
상기 실시예와 동일한 비교 조건으로 실시하되, 유산균으로 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 사용하여 발효하고, 이어서 효소로 탄네이즈(TAH)를 사용한 후 진탕 배양하여 석류 발효조성물을 제조하였다.
비교예 4
상기 실시예와 동일한 비교 조건으로 실시하되, 유산균으로 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 사용하여 발효하고 진탕 배양하여 석류 발효조성물을 제조하였다.
실험예 1 : 유산균 선발을 위한 발효효과 비교
유산균의 발효 효과를 비교하기 위해, 상기 실시예와 동일한 원료를 사용하여 발효시키되, 효소를 사용하지 아니하고 유산균으로 Lactobacillus brevis, Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023), Lactobacillus panaxibrevis DCY65, Bacillus amyloliquefaciens, Saccharomyces cerevisiae 를 각각 단독으로 사용하여 발효하여 석류 발효조성물을 제조하였다.
상기 각 유산균 사용 발효조성물에 대하여 갈산 생성량을 대조군과 비교하여 측정하였다. 그 결과로, 하기 표 1은 발효를 위한 균주선발을 위해 갈산 생성량을 기준으로 나타낸 결과이다.
상기 표 1에서 보면, 갈산 생성량에서 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)가 다른 균주에 비하여 월등하에 우수한 효과를 보인다. 따라서 유산균으로 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 이용하는 것이 갈산 등 유효 생리활성 물질의 증가에 선택적으로 우수한 효과가 있음을 보여준다.
실험예 2 : 갈산 생성량 비교를 통한 효과 비교실험
상기 실시예와 비교예 1 ~ 4에 대하여 각 시료에 대해 발효처리 후 최종 생성된 석류 발효조성물에 대하여 각각 갈산 생성량을 측정하여 비교하였다.
그 결과는, 하기 표에 나타내었 다. 하기 표 2는 탄네이즈(TAH) 및 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)의 각각 단독 사용과 순차적 사용(화살표로 표시), 그리고 동시 혼합 사용(+로 표시)에 따른 동일 조건에서의 갈산 생성량의 결과를 비교하여 나타낸 것이다.
상기 표 2에서 보면, 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 동시에 사용한 실시예의 경우가 다른 비교군에 비하여 월등하게 우수한 갈산 생성량의 증가을 보여준다. 이 결과로부터, 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 각각 단독으로 사용하거나 순차적으로 사용하는 경우에 비해 이들을 동시에 사용하는 경우가 현저하게 우수한 상승효과가 있음을 확인할 수 있다.
실험예 3 : 갈산과 엘라그산의 함량변화 실험
상기 실시예의 시료에 대한 엘라그산(Ellaguc acid)과 갈산(Gallic acid) 분석은 HPLC시스템으로 분석하였다. HPLC system은 Agilent 1260 Infinity Quaternary 펌프(G1311B), Agilent 1260 Infinity이었으며, 표준자동 시료 주입기(G1329B), Agilent 1260 Infinity 컬럼 온도 조절 장치 구획(G1316A), 및 Agilent 1260 Infinity Variable Wavelength Detector(G1314F)가 기기로 사용되었다.
사용한 컬럼은 ZORBAX Eclipse Plus C18 컬럼(250mm × 4.6mm, 5μm 입자 크기)(Mil ford, MA, USA)이 고정상으로 선택되었다. 이동상은 농도구배로 용리액 조성은 다음과 같다. (0-16분, 15-30% B, 16-34분, 30-100% B, 34-40분, 100-100% B, 40-41분, 100-15% B; 41-42분 15-15% B)
상기 실험으로 석류즙의 발효 전(대조군)과 실시예에 따른 발효 후의 시료에 대하여 갈산 및 엘라그산 함량변화를 측정하여 본 결과는 다음 표 3 및 도 1과 같다.
| 함량단위 (UG/ML 60BRIX) | Gallic acid | Ellagic acid |
| Control | 56 | 140 |
| TAH+L. DCY75 | 314 | 210 |
상기 표에서의 결과에 대해, 함량변화를 보여주는 HPLC profile은 도 2와 같다.
이 결과로부터 실시예와 같은 방법으로 발효처리한 석류 발효조성물의 경우 발효 전에 비해 갈산과 엘라그산 모두에서 월등하게 증가한 것으로 확인되었다.
실험에 4 : 항산화 활성 변화
실시예의 발효추출물의 항산화 활성은 DPPH 이용한 자유 라디칼 소거 활성 측정법으로 실시하였다. 즉, 에탄올에 용해시킨 DPPH 용액을 495㎕씩 시험관에 분주하고, 여기에 상기 시료를 5㎕씩 첨가하여, 최종 반응용액이 500㎕가 되도록 하였다. 이를 일정시간 동안 반응시킨 후, 96-wall plate에 200㎕ 씩 2개의 wall에 분주한 뒤 517nm에서의 흡광도 변화를 측정하였다. 활성도는 gallic acid, Rutin 및 Ascorbic acid 대등량으로 각각 표시하였다.
항산화 활성 척도의 하나인 reduci ng power는 Nayan 등(2013)의 방법에 따라 다음과 같이 측정하였다. 즉, 10-100ug/ml 농도의 시료와 표준용액을 1.0ml의 탈이온 증류수에 녹인 후 2.5ml의 인산염완충액(pH 6.5)과 2.5ml의 potassium ferric yanide 용액과 혼합하였다. 이 용액을 50℃에서 20분간 반응시킨 후 식힌 다음 2.5ml의 10% TCA용액을 천가하고 잘 섞은 후 3,000rpm에서 10분간 원심분리하였 다. 상등액 2.5ml 취한 다음 2.5ml의 증류수와 신선한 0.1% ferric chloride용액을 첨가하고 700nm에서 흡광도 변화를 측정하였다. Reducing power 계산은 gallic acid, rutin 및 ascorbic acid를 대조로 측정하여 나타내었다.
하기 표 4는 시료인 석류즙의 발효 전(대조군)과 비교예 1 및 실시예에 의한 발효 후 항산화 활성 변화를 나타낸 것이다.
상기 표 4에서 보면, 실시예의 시료의 경우 다른 시료에 비해 월등하게 우수한 항산화 활성을 나타내는 것으로 확인된다.
실험예 5 : 중성지방 측정에 의한 혈관건강 개선 효과실험
상기 실시예의 시료에 대하여 혈관건강 효과를 확인하기 위하여, MDI로 분화가 유도된 마우스 유래 지방전구세포 3T3-L1의 cell lysate에서 실시예에서 제조된 석류 발효추출물 등 각 시료를 처리한 후 중성지방의 축적 정도를 정상대조군(p<0.01 vs 정상대조군) 및 유발대조군(p<0.05 vs 유발대조군)과 비교하였다.
중성지방(TG) 측정은 Trypsin-EDTA 처리로 세포를 분리한 다음 원심분리(12,000rpm, 3min, 4℃)하여 상층액을 제거하였다. 1.5 ml의 튜브에 남은 펠릿은 lysis buffer(50 mM Tris, 0.15 M NaCl, 10 mM EDTA 및 0.1% Tween-20, pH 7.5 with HCl, 및 Halt Protease Inhibitor Cocktail)로 세포 내 지방 및 단백질 등을 추출하였다. 추출된 cell lysate 내 TG의 농도는 Enzychrom TM Triglyceride Assay Kit(BioAssay Systems, Hayward, CA, USA,)를 사용하여 spectrophotomerter를 이용하여 흡광도 570nm로 측정하였다
참고로, 유발균에 대해서는 생리식염수를 동일 방법으로 적용하였으며, 이와 같은 실험결과는 다음 표에 나타내었다.
| 시료 | TG (μM/L) | TG 감소율(%) |
| 실시예 | 49 | 22.2 |
| 비교예 1 | 56 | 11.1 |
| 비교예 2 | 57 | 9.5 |
| 비교예 3 | 59 | 6.4 |
| 비교예 4 | 60 | 4.8 |
| 정상군 | 42 | - |
| 유발군 | 63 | - |
이 실험결과로부터 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 동시에 사용한 실시예의 경우 22% 이상의 중성지방(TG) 감소 효과를 보이고 있어서, 다른 비교군의 4.8% ~ 11.1% 감소에 비하여 중성지방 감소율이 현저하게 우수함을 확인할 수 있다. 이로부터 실시예의 시료가 혈관건강 효과에 월등하게 우수한 효과가 있음이 확인된다.
실험예 6 : 전립선 개선 효과 확인실험
상기 실시예와 비교예의 시료에 대하여 전립선 염증 및 비대증 개선 정도를 확인하기 위해 동물실험을 하였다.
동물실험을 위한 대조군(정상쥐, 생리식염수 투여군)과 전립선 비대증에 감염된 실험군쥐에 회당 상기 시료를 300mg/kg을 10마리씩 6주령 웅성마우스에 4주간 1일 2회 경구투여 후 비교하였으며, 그 결과 시료의 비투여군에서는 전립선의 무게가 약 2.3배 증가하였으나, 실험군쥐의 전립선 무게는 최소 97.6% 감소하였고, 전립선조직 내상피세포의 과형성도 현저히 완화되었다. 동시에 전립선비대증의 원인 물질인 디하이드 로테스토스테론(Dihydrotestosterone)은 혈청 중에서는 72.4% 감소하였고, 전립선 내에서는 73.2% 감소하였다.
아래 표는 상기 실시예의 시료를 섭취 후 PSA 지수를 측정한 임상실험결과이다. 여기서, 혈중전립선특이환원(Prostate Specific Antigen; PSA)지수란 정상적으로 전립선에서 생성되는 물질로 전립선 암종 등과 같은 질환에서 혈중치가 상승하여 암을 진단할 때 사용하며, 본 실험예서는 PSA가 증가하면 전립선 염증과 비대증 및 전립선암의 질환이 증가한다고 볼 수 있다.
일반적으로 PSA의 정상수치는 0~4ng/ml로서, PSA수치가 4ng/ml 이상이면 전립선암의 가능성이 있으며, 또 전립선염, 전립선 비대증이 심한 경우, 배뇨곤란이 심한 경우 등에도 PSA의 수치는 높아진다.
실험은 남성 50~60세(제1군), 61~70세(제2군), 71~80세(제3군)으로 실험군을 정하고, 각 실험군별 9명씩 실험에 참여하였다.
실험은 1회 시료 3g 분량을 아침, 저녁으로 1일 2회씩 6개월간 복용하게 하였다. 복용 후 매월 경과 시마다 PSA지수를 측정하여 각 실험군별로 평균치를 구하여 하기 표로 제시하였다.
| 섭취기간 | PSA 지수(ng/ml) | ||
| 제1군 | 제2군 | 제3군 | |
| 섭취 전 | 18.12~21.81 | 24.55~35.21 | 38.82~41.27 |
| 1개월 | 14.92~17.82 | 17.31~29.74 | 30.21~31.24 |
| 2개월 | 11.91~14.88 | 13.11~23.70 | 23.76~24.54 |
| 3개월 | 8.71~11.82 | 10.45~18.92 | 16.32~18.19 |
| 4개월 | 5.93~7.72 | 7.79~13.26 | 9.14~13.86 |
| 5개월 | 3.12~3.98 | 4.92~8.79 | 5.72~6.89 |
| 6개월 | 1.02~1.96 | 1.98~3.03 | 2.92~4.11 |
상기 실험결과, 상기 실시예의 조성물 시료를 투여한 경우, 환자에 따라 차이가 있으나 PSA 지수가 현저히 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 약 3개월 이후부터는 사이에 전립선 염증과 비대증을 치료할 수 있으며, 6개월 이후부터는 매우 안정적으로 관리되고 전립선 비대증과 전립성 염증은 100% 완치가 가능한 것으로 기대된다.
또한, 전체 실험군에서 전립선암 발병 가능성이 현저하게 경감되어 대부분 정상범위(<4ng/ml)로 관리되었다.
실험예 5 : 전립선비대증 세포 내 ROS 함량 측정 시험
상기 실시예와 비교예의 조성물 시료에 대하여 전립선비대증 세포 내 ROS 함량 측정 시험을 실시하였다.
실험은 PC3 전립선 세포를 96웰 플레이트에 각 웰당 약 4×104 세포가 되도록 분주하여 배양한 후 70~80% 정도 되었을 때 각 시료를 12시간 처리하였다. 20uM DCFHH-DA가 함유된 Hank's balanced salt solution(HBSS, pH 7.4)을 1시간 배양한 다음, 1mM H2O2를 30분간 처리하였다. SpectraMax M2 multimode microplate reader(Molecular Devices,Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 excitation 485nm, emission 524nm에서 DCF-DA 형광을 측정하였다.
각 시료를 전처리한 다음, H2O2로 산화적 스트레스를 유도하여 세포내 ROS 함량과 RNS에 의한 nitrotyrosine(NT) 변화를 살펴보았다.
여기서, 대조군 1은 정제수를 사용하였으며, 대조군 2는 H2O2를 사용하였다. 대조군 및 실시예와 비교예의 각 시료 사용 군에 대한 전립선비대증 세포 내 ROS 함량 측정 시험 결과는 하기 표와 같다.
| 시료 | 발현정도(Fold) |
| 대조군1 | 1 |
| 대조군2 | 2.5 |
| 실시예 | 1.1 |
| 비교예1 | 1.8 |
| 비교예2 | 2.0 |
| 비교예3 | 2.1 |
| 비교예4 | 2.1 |
상기 실험결과, 전립선 세포에 H2O2를 처리한 경우, 세포내 ROS함량이 유의적으로 증가한 반면, 실시예의 시료 처리 시 현저하게 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 이와 유사하게, NT 발현량 또한 H2O2 처리군에 비해 실시예의 시료 사용시 비교예에 비해 월등하게 감소되어, H2O2에 의한 산화적 스트레스가 실시예의 시료에 의해 현저하게 저해되어 세포내 ROS 함량및 RNS에 의한 NT발현이 감소된 것으로 보인다.
실험예 6 : 전립선 비대증 억제 실험
상기 실시예와 비교예의 각 조성물 시료를 이용하여 in vivo 상에서 전립선 비대증 활성을 확인해 보았다. 이때 양성대조군으로는 피나스테라이드를 사용하였다.
실험은 수컷 SD계 래트를 대상으로 테스토스테론을 투여하지 않은 control군을 제외하고는 각 그룹당 n=5마리로 2주일 동안 테스토스테론을 3mg/kg/day의 양을 피하주사로 투입하여 전립선 비대를 유발하고, 2주일 후 적출을 통하여 전립선 비대가 충분히 유발되었음을 확인 후, 계속적으로 테스토스테론을 주입하여 전립선 비대를 유지하면서 각 시료를 5㎎/kg의 양으로 경구 투여하였고, 피나스테라이드는 2mg/kg의 양으로 경구 투여하였다. 그리고 약물 투여 3주일이 지난 후 전립선 크기를 측정하였으며, 전립선 조직에서 5-alpha reductase II 활성의 결과를 관찰하였다.
마지막 투여가 끝난 날 체중 측정 후 희생을 한 이후에 채혈 및 전립선을 적출하였다. 적출된 전립선의 무게를 측정하고 체중당 전립선의 무게 비율을 계산하였고, 그 결과를 다음 표에 나타내었다.
전립선 무게비율=전립선 무게(g)/체중(g) x 100
| 항목 | 무처리군 | 테스토스테론 처리군 | ||||||
| 미투여 | 대조군 | 실시예 | 비교예1 | 비교예2 | 비교예3 | 비교예4 | ||
| 전립선무게(g) | 0.55 ±0.09 |
1.38 ±0.14 |
0.95 ±0.11 |
0.97 ±0.12 |
1.27 ±0.11 |
1.28 ±0.12 |
1.31 ±0.11 |
1.33 ±0.09 |
| 전립선 무 게 비율(%) | 0.12 ±0.03 |
0.32 ±0.02 |
0.24 ±0.02 |
0.25 ±0.02 |
0.30 ±0.02 |
0.31 ±0.02 |
0.32 ±0.02 |
0.33 ±0.02 |
실험예 7 : 발기촉진 효과 실험
상기 실시예와 비교예의 조성물 시료를 이용하여 in vivo 상에서 발기 촉진 약효를 측정해 보았다. 이때 양성대조군으로는 실데나필 시트레이트를 사용하였다.
구체적으로, 실험동물로는 웅성의 SPF 뉴질랜드 알비노 래빗(체중 약 3.5 ~ 4.0 ㎏)을 시험 그룹당 각각 5마리씩 사용하였으며, 이들을 우리 속에서 동일한 조건으로 4일 이상 일정량의 통상적인 래빗용 고체 사료 및 물을 공급하여 사육하였다. 래빗은 48시간 이상 절식시킨 후 시험에 사용하였으며, 절식 시에는 물을 자유롭게 마실 수 있게 하였다.
상기와 같이 준비된 래빗에 상기 각 시료를 마리당 50㎎/kg 량으로 구강 내에 투여하였다. 한편, 양성 대조군인 실데나필 시트레이트는 20㎎/kg 량을 경구 투여하였다. 이와 같이 투여 후 발기 시작시간 및 지속시간을 측정하였다.
그 실험결과는 다음 표에 나타내었다.
| 구분 | 대조군 | 실시예1 | 비교예1 | 비교예2 | 비교예3 | 비교예4 |
| 발기시작시간(분) | 6.2±1.2 | 6.2±1.3 | 7.8±1.1 | 7.9±1.2 | 8.1±1.1 | 8.2±1.3 |
| 최대발기시간(분) | 21±1 | 20±1 | 13±1 | 12±1 | 10±1 | 9±1 |
| 발기유지시간(분) | 118±8 | 115±9 | 47±8 | 43±7 | 39±6 | 36±8 |
상기 실험결과, 실시예의 경우 비교예에 비해서는 월등하게 우수하고, 양성 대조군과 비교하여 유사한 수준으로 매우 우수한 발기 성능을 나타내는 것으로 확인되었다.
실험예 8 : 부작용 및 전립선과 성기능 관련 실험
상기 실시예와 비교예에서 제조된 조성물 시료와 대조샘플에 대하여 비교실험을 위해 50-65세 남성으로 구성된 관능검사 요원 25명을 대상으로 하여 1일 500mg 씩 2회, 15일간 꾸준하게 섭취하게 하고 지구력, 성기능 등에 대한 느낌을 관찰하였다. 또한, 전립선에 이상을 느끼는 남성 11명에 대하여 같은 방법으로 전립성 이상 증상에 대한 느낌을 관찰하였다.
준비한 각 시료들은 모두 일반적으로 식품으로 섭취 가능한 물질로 검증된 것으로서, 섭취가 가능한 물질이다. 실제로 섭취 후 부작용 등에 대한 관찰에서 독성, 알러지, 부작용성 이상증세 등 특별한 부작용은 없는 것으로 확인되었다.
실험결과는 참가자가 해당 시료를 섭취한 후 1점 전혀 증상 개선이 없음, 2점 다소 좋은 느낌이지만 확실하지 않음, 3점 각 효능에 대해 좋아진 느낌임, 4점 상당히 개선된 느낌을 받음, 5점 매우 좋게 개선된 느낌이 확실하게 느껴짐 등으로 나타나는 5점 기호척도법으로 평가한 다음 이에 대하여 평균을 계산하여 효능을 평가하였다.
그 결과는 다음 표에 나타내었다.
| 시료 | 지구력 향상 | 성기능 향상 | 전립선 이상 증상 개선 | 활력 등 전체적인 건강개선 | 종합평가 |
| 실시예 | 4.1 | 4.2 | 3.6 | 4.2 | 4.0 |
| 비교예1 | 1.8 | 2.0 | 1.2 | 1.5 | 1.6 |
| 비교예2 | 1.7 | 1.8 | 1.1 | 1.4 | 1.5 |
| 비교예3 | 1.5 | 1.6 | 1.0 | 1.2 | 1.4 |
| 비교예4 | 1.4 | 1.5 | 1.0 | 1.2 | 1.3 |
| 대조군 (소팔메토추출물) |
2.6 | 3,0 | 1.9 | 2.1 | 2.4 |
상기 실험결과, 실시예의 조성물의 경우 다른 실험군에 비하여 전립선 개선이나 성기능 개선 효과에서 월등하게 우수한 효과가 있는 것으로 확인되었다.
실험예 9 : 혈류량 측정 시험
상기 실시예와 비교예의 실험예에서 제조된 시료에 대하여 검사대상자에 대하여 혈류량을 측정하였다. 이러한 혈류량 측정은 지구력 개선, 성기능 향상, 전립선 이상 증상개선에 도움을 주는지의 여부를 확인할 수 있는 지표가 될 수 있다.
혈류량 측정방법은 모세혈관을 흐르는 적혈구가 레이저 빛을 파장으로 전환시키고 전환된 파장을 회복섬유(returning fiber)가 잡아서 전기적 신호로 다시 전환시켜 이 전기적 신호를 수치로 표현하여 혈류량을 나타내 주는 것을 측정하여, 시료의 섭취 전후에 대하여 혈류량 증가 상태를 비교한 결과로 나타내었다.
측정은 실험참가자에 대하여 15일 섭취 후 전팔 부위에 각기 섭취 전후의 혈류량을 스웨덴 페리메드 AB (Perimed AB, Sweden)사에서 제조한 페리플럭스 시스템 5000 (PeriFlux System 5000 ) 혈류량 측정기기를 이용하여 측정하였다.
그 결과는 다음 표에 나타내었다.
| 시료 | 혈류량 개선률 (%) |
| 실시예 | 31% |
| 비교예 1 | 7% |
| 비교예 2 | 6% |
| 비교예 3 | 5% |
| 비교예 4 | 3% |
| 대조군 (쏘팔메토추출물) |
9% |
상기 실험에서, 실시예조성물의 경우 비교예에 비해 혈류량 개선율에서 월등하게 우수한 효과가 있는 것으로 확인되었다.
실험에 10 : NO생성에 미치는 영향
NO 생성 및 억제활성은 Griess 방법으로 측정하였다. 즉, RAW 264.7 세포에서 NO를 측정하기 위하여 먼저 RAW264.7 cell을 well 당 1x104 세포를 seeding하고 24시간 배양하고 1ug/ml의 LPS와 함께 다양한 농도의 석류농축물(PG) 및 석류발효농축물(PG-F0 전처리하였다. 세포에서 생성되어 배양액 중에 유리된 NO를 측정하기 위하여 100ul의 배양액에 동량의 Griess resgent를 첨가하고 540nm에서 흡광도를 측정하였으며 sod. nitrite를 표준용액으로 사용하였다.
도 3은 발효 전(Control)과 비교예 1(Tanase) 및 실시예(Tan+L)의 발효 후 석류즙이 LPS에 의해 유도된 NO생성 억제효과를 비교하여 나타낸 그림이다. 이 실험결과에서, 실시예의 시료다 다르 비교군에 비해 월등하게 우수한 NO 생성 억제 활성 효과가 확인된다.
실험예 11 : 가수분해성 탄닌 함량 실험
상기 실시예와 비교예 1에 따른 시료에 대하여, 동일 조건에서 통상의 방법으로 가수분해성 탄닌의 함량을 측정하여 비교하였다.
이에 대한 대조군(발효나 효소처리 전)과의 비교는 다음 표에 나타내었다.
상기 표는 EFC 공법으로 발효한 석류 발효조성물에 대한 가수분해성 탄닌 함량을 비교하여 나타낸 것이다. 이 실험결과로부터 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 동시에 사용한 실시예의 경우가 다른 비교군에 비하여 월등하게 우수한 탄닌 함량 감소 효과가 있음을 보여준다. 이 결과로부터, 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 혼합 사용하는 경우 탄네이즈 단독 사용에 비해 탄닌 감소에도 월등하게 우수한 상승효과가 있음을 확인할 수 있다.
실험예 12 : 관능평가
상기 실시예와 비교예 1에 따른 시료에 대하여, 동일 조건에서 맛을 비교하는 관능평가를 시행하였다.
관능평가는 5점 평가 방법으로 대학생(남 36명, 여 13명)과 주부(11명) 등 60명을 대상으로 하여 떫은 맛과 단맛을 비교하여 평가하도록 하였다.
이에 대한 대조군(발효나 효소처리 전)과의 비교는 다음 표에 나타내었다.
상기 표 13은 EFC 공법으로 발효한 석류 발효조성물에 대한 떫은 맛과 단맛에 대한 관능을 비교하여 나타낸 것이다. 이 실험결과로부터 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 동시에 사용한 실시예의 경우가 다른 비교군에 비 하여 우수한 맛의 개선 효과가 있음을 보여준다. 이 결과로부터, 탄네이즈(TAH)와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)를 혼합 사용하는 경우 탄네이즈 단독 사용에 비해 맛에서도 우수한 상승효과가 있음을 확인할 수 있다.
상기 실험들의 결과로부터, 본 발명에 따른 실시예의 EFC 공법으로 발효한 석류 발효조성물은 그 특정 효소와 특정 유산균의 선택과 혼합 사용으로 인한 상승효과의 기술적 의의가 있는 것으로 확인되며, 특히 체내흡수율이 증가된 엘라그산, 갈산을 고함량 포함하고, 혈관건강, 전립선 또는 성기능 등에 대하여 현저하게 개선된 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
또한, 이러한 조성물을 체내흡수율이 매우 높고 떫은맛과 단맛 등 맛에서도 뚜렷한 개선 효과가 있음이 확인되었다.
이상 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예를 설명하였지만, 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 내용은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원 시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해되어야 하고, 본 발명의 범위는 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (7)
- 석류를 탄네이즈와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)로 효소 발효시켜 얻은 발효물을 유효성분으로 함유하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 발효물은 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중 하 나이상의 석류 원액을 발효한 발효물을 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 탄네이즈는 0.01∼1 중량%를 사용하고 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)는 0.5x107cfu/ml 내지 3x107cfu/ml를 사용하여 발효된 발효물을 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물.
- 석류를 탄네이즈와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)로 효소 발효시켜 얻은 발효물을 유효성분으로 함유하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물을 포함하는 건강식품.
- 삭제
- 석류를 탄네이즈와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)로 효소 발효시켜 얻은 발 효물을 유효성분으로 함유하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물을 포함하는 동물용 사료첨가제 조성물.
- 석류 과육으로부터 석류즙, 석류쥬스 또는 석류농축액 중 하나 이상의 석류 원액을 제조하는 단계;
석류 원액을 5-10brix로 희석하여 탄네이즈 0.01∼1 중량%와 Lactobacillus vespulae DCY75(KCTC 21023)의 유산균 0.5x107cfu/ml 내지 3x107cfu/ml 로 처리하고, 30~40℃에서 2~48시간 동안 진탕 배양하는 단계; 및
상기 진탕 배양하여 얻은 효소반응액을 70∼80℃에서 효소를 실활하는 단계
를 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물의 제조방법.
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|---|---|---|---|
| KR1020220100135A KR102514074B1 (ko) | 2022-08-10 | 2022-08-10 | 체내흡수율이 증가된 엘라그산과 갈산을 고함량 포함하는 혈관건강, 전립선 또는 성기능 개선용 석류 발효조성물 및 efc 공법을 이용한 그의 제조방법 |
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Non-Patent Citations (1)
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|---|
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