KR100899377B1 - 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 망초 추출물은 췌장 리파아제 저해활성 효과 및 혈장 중성지방 농도 저하 효과를 지니므로, 상기 조성물은 지질대사 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
망초, 지질대사 질환
Description
도 1은 대조군과 망초 추출물 섭취군에서 혈장 중성지방 농도의 변화를 나타낸 도이다.
본 발명은 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
산업사회에서 비만은 가장 흔한 영양학적 문제인데, 미국 통계에 의하면 미국 국민의 1/3, 어린이의 20%가 비만 환자로 보고되고 있으며, 제2형 당뇨병 환자의 70% 이상이 비만하고, 이들에서 고혈압, 고지혈증 및 일부 암 발병 위험이 증가한다. 비만한 사람에서 탄수화물 대사 이상 및 인슐린비의존형 당뇨병이 흔히 동반되며, 체중증가가 기존의 당뇨병 상태를 악화시킨다는 것은 잘 알려져 있으나, 비 만과 당뇨병의 상호관계의 정확한 특성에 관해서는 아직 논란이 많은 상태이다. 아주 심한 비만이 있는 사람이 모두 당뇨병이 있는 것은 아니므로, 비만 자체가 인슐린비의존형 당뇨병을 유발하기에는 충분치 않고 당뇨병에 대한 유전적 소인이나 환경 인자가 함께 관여함으로써 당뇨병이 발생되는 것으로 여겨진다. 그러나 인슐린비의존형 당뇨병의 발생 빈도가 비만한 사람에서 훨씬 높으며, 또한 인슐린비의존형 당뇨병의 발생률은 과거의 비만 정도 및 기간과도 밀접한 관계가 있으므로 비만은 인슐린비의존형 당뇨병의 강력한 위험 인자이다.
한편, 단순한 비만 정도 뿐 아니라 지방 분포가 비만과 관련된 질병위험과 밀접한 관련을 가지는 것으로 최근 알려지고 있는데, 복부 지방이 특히 문제시 되고 있다.
인슐린비의존형 당뇨병 환자는 흔히 비만하거나 비만의 기왕력을 갖고 있다. 서구인의 경우 인슐린비의존형 당뇨병 환자의 60∼90%가 비만하며, 우리나라에서도 인슐린비의존형 당뇨병 환자의 약 70%가 비만의 기왕력을 갖는 것으로 보고 되었다(박중열 외 8명, 한국인 인슐린비의존형 당뇨병 환자의 체중변화 양상, 당뇨병 , 17, pp51-57, 1993).
많은 전향적 연구를 통해서도 비만이 내당 능력 장애 및 인슐린비의존형 당뇨병에 선행한다는 사실이 관찰되었다(Carey VJ. et al., Body fat distribution and risk of non-insulin-dependent diabetes mellitus in women, The nurses' health study, Am J Epidemiol, 145, pp.614-619, 1997). 프라밍함(Framingham) 연구에서는 비만한 사람에서 내당 능력 장애가 빈발함이 관찰되었고, 대부분의 연구 들에서 내당 능력 장애를 갖는 비만한 사람들은 인슐린비의존형 당뇨병 발생의 고위험군임이 관찰되었다.
비만으로부터 당뇨병으로의 진행에 관한 정확한 기전은 알려져 있지 않으나 인슐린 저항성의 증가가 중요한 역할을 할 것으로 여겨지고 있다. 펠버(Felber) 등은 역학적 관찰들에 근거하여 비만한 사람을 경구 당 부하 검사 시 혈당과 인슐린 반응에 따라 정상 내당능군, 내당능 장애군, 고인슐린혈증을 보이는 당뇨군 및 저인슐린혈증을 보이는 당뇨군의 네 군으로 분류하였고, 비만에서 당뇨병으로의 진행도 이러한 과정을 거친다고 하였다(Golay A. et al., Obesity and NIDDMP, the retrograde regulation concept, Diabetes Rev, 5, pp.69-82, 1997).
비만증에 있어서 탄수화물 대사는 경부 당 부하에 대한 혈당 반응은 정상이나 인슐린 분비 반응이 정상보다 높게 나타나는 인슐린 저항성의 양상을 보이며, 인슐린 저항성은 비만과 비만한 인슐린비의존형 당뇨병 환자의 주된 병태생리 이상의 하나로 비만 초기부터 관찰된다. 비만증에서 어떤 기전에 의해 인슐린의 작용이 감소되는지에 관해서는 다양한 가설이 제시되고 있으나 아직 확실히 밝혀진 바는 없다. 즉, 인슐린 작용에 관련된 인슐린 수용체, 포도당 수송체, 당원 합성과 당 산화에 관련된 효소들 등의 기능 감소가 비만시 관찰되나 비만에 의한 이차적인 현상으로 이해되고 있다(Golay A. et al., Obesity and NIDDMP, the retrograde regulation concept, Diabetes Rev, 5, pp.69-82, 1997).
여러 정황적 증거들을 고려할 때 지방세포가 인슐린 저항성의 발생에 기여할 것으로 생각되는데, 즉 지방세포에서 분비되는 인자들 혹은 대사 전달 자(metabolic messenger) 들이 근육 및 간에서 인슐린의 작용을 억제할 것으로 여겨진다. 이러한 인자로써 가장 먼저, 그리고 널리 인정받고 있는 것이 지방 조직에 저장된 중성 지방으로부터 가수분해되어 나오는 유리 지방산이다. 그 외에 최근 지방세포에서 분비되는 TNF- 및 leptin등도 비만에서 인슐린 저항성의 원인으로 제시된 바 있다(Hotamisligil GS. et al., Tumor necrosis factor a, a key component of the obesity-diabetes link, Diabetes, 43, pp.1271-1278, 1994)(Cohen B., Novick D., Rubinstein M., Modulation of insulin activities by leptin, Science, 274, pp.1185-1188, 1996).
비만증에서 에너지 대사는 지질이 주가 되며 지질 분해와 지질 합성이 모두 증가된다. 지질 분해의 증가와 그에 따른 유리 지방산의 이용 증가는 비만, 특히 복부 비만의 특징이며, 지방 용적과 지질 산화 간에 높은 상관관계가 관찰되어 지방 용적의 증가가 혈중 유리 지방산치 및 지질 산화 증가의 원인으로 생각된다. 지질 산화는 비만의 초기에도 증가되어 관찰되며, 공복시나 당 부하 후에도 증가되어 있다.
최근 우리나라에서는 식습관이 서구화되고, 문화수준이 향상됨에 따라 단순 비만자가 현저히 증가하고 있다. 비만은 고혈압, 동맥경화, 지방간 및 당뇨 등 각종 질병의 발생에 관여하거나 악화시키는 원인이 되고 있다. 따라서 비만은 미리 예방하는 것이 좋으며, 비만증이 된 경우에는 체지방의 감소와 지질대사의 개선을 통하여 신체대사가 원활하게 이루어지도록 조절하는 것이 각종 질병의 예방과 건강을 위하여 매우 중요하다.
본 발명의 망초(Erigeron canadensis L.)는 국화목(Asterales목), 국화과(Asteraceae과), 망초속(Erigeron속)에 속하는 식물로써 일년생, 이년생, 다년생초본이다. 전초에 사포닌, 스쿠텔라린, -락톤, 타닌질, 몰식자산과 타닌산, 쓴맛물질, 수지, 콜린, 19mg%의 아스코르브산, 0.84%의 고무질, 0.4-1.7%의 정유(리모넨이 약 85%), 테르피올, 디페텐, 마트리카리아에스테르가 있다. 망초는 식품공전에 주원료로 사용가능한 동식물로 분류되어 있으며, 예전부터 싹을 나물로 먹기도 하였다. 풀 전체를 비봉이라 하며 혈뇨, 구내염(口內炎), 구창(口瘡), 대변불통(大便不通), 동통(疼痛), 부종(浮腫), 설사(泄瀉), 안질(眼疾), 종독(腫毒), 주황병(酒荒炳), 중이염(中耳炎), 출혈(出血), 치통(齒痛), 풍(風), 풍습(風濕), 피로회복(疲勞回復), 해독(解毒), 해열(解熱), 황달(黃疸) 등에 효염이 있다. 민간에서는 전초를 지혈제, 건위약, 지사제, 적리치료약, 신석증과 부기에 오줌내기약, 진정약, 가래약으로 쓴다. 당뇨병과 임질, 관절류마티즘 등에도 효과가 있다고 한다(식품의약품안전청, 식품원재료 검색엔진, rndmoa.kfda.go.kr:9010/index.html).
그러나 과학적으로 그 효능을 규명한 연구는 미비한 실정이며, 어떤 문헌에서도 망초 추출물의 지질대사개선효과에 대해서는 개시되거나 교시된 바 없다.
이에 본 발명자들은 망초 추출물을 이용하여, 췌장 리파아제 저해활성 및 혈장 중성지방 농도 저하 효과를 측정한 결과, 지질대사 개선능이 우수하여 지질대사 질환의 예방 및 치료에 탁월한 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 췌장 리파아제 저해활성 효과 및 혈장 중성지방 농도 저하 효과를 갖는 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 망초 추출물은 망초의 전초, 줄기, 종자, 잎 또는 뿌리, 바람직하게는 전초로부터 추출된 추출물을 포함한다.
상기 망초 추출물은 물, 탄소 수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매, 바람직하게는 물 및 메탄올의 혼합용매, 보다 바람직하게는 60 내지 80% 메탄올에 가용한 추출물을 포함한다.
상기 지질대사 질환은 비만, 당뇨병, 고콜레스테롤증, 고지혈증, 저지질증, 지방단백질증 또는 동맥경화, 바람직하게는 비만 또는 당뇨병을 포함한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 망초 추출물은, 건조시킨 망초를 마쇄하여 그 중량의 약 1 내지 20배, 바람직하게는 약 5 내지 15배의 물, 탄소 수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이 들의 혼합용매로부터 선택된 용매, 바람직하게는 물 및 메탄올의 혼합용매, 보다 바람직하게는 60 내지 80% 메탄올로 실온에서 약 1 내지 48시간, 바람직하게는 20 내지 28시간 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 열수 추출방법을 이용하여 추출한 추출액을 감압여과하여 얻은 추출물을 약 30 내지 80℃, 바람직하게는 약 35 내지 50℃에서 감압농축하여 본 발명의 망초 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명은 상기의 제조공정으로 얻어진 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.
본 발명의 지질대사 질환의 예방 및 치료용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.1 내지 50 중량 %로 포함한다.
본 발명의 추출물을 포함하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 망초 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 망초 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출액에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 망초 추출물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물은 1일 0.0001 내지 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 망초 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기의 제조공정으로 얻어진 망초 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.
또한, 지질대사 질환의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 5g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제, 액제 등의 형태를 포함한다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 망초 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리 톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 망초 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 추출물은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 추출물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
1. 망초 추출물의 제조
(주)광명생약으로부터 제공받은 건조된 망초(Erigeron canadensis L.)의 전 초 200g을 마쇄기로 분쇄하여 얻은 망초 분쇄물에 70% 메탄올 13ℓ를 가하여 24시간동안 열수추출방법으로 추출한 다음, 여지(와트만사, 미국)로 감압여과한 후 여액을 모아 37℃에서 진공회전농축기로 감압농축하여 본 발명의 망초 추출물 17g을 수득하였고, -20℃에서 보관하여 하기 실험예의 시료로 사용하였다.
참고예
1. 실험 동물모델 준비 및 통계처리
1-1. 동물모델 준비
생후 3주령 된 수컷 C57BLKsJ db/db 마우스(n=16)를 한국생명공학연구원(대전)으로부터 분양받아 1주일간 고형사료(Purina rodent chow 5057, Purina)로 적응시킨 후, 체중에 따라 난괴법으로 분리하여 두 군으로 나누어 6주간 사육하였다. 실험동물은 플라스틱 우리에 한 마리씩 사육하였고, 실험식이와 물은 임의(ad libitum)로 공급하였다. 사육실의 온도는 22~25℃로 실온을 유지하였고, 습도는 55± 5%로 유지하였으며, 명암은 12시간 간격으로 점등 및 소등하였고, 동물 체중과 식이 섭취량은 일주일에 3회 측정하였으며, 하기 실험예 2의 동물모델로 사용하였다.
1-2. 통계분석
모든 결과는 평균 ± 표준편차로 나타내었으며, 대조군과 망초 추출물 섭취군 사이의 유의성 검정은 스튜던트 T -검정(Student's t-test)을 사용하여 실시하였다(α = 0.05).
실험예
1.
시험관내(
In vitro
)에서
췌장 리파아제 저해활성 측정
망초 추출물의 췌장 리파아제 저해활성을 측정하기 위해 아라이(Arai, 1999) 등의 방법을 이용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.
시험관에 0.1M 시트레이트-Na2HPO4 완충액(Mclivane buffer, pH 7.4) 20uL, 0.05U 포르신 췌장 리파아제(porcine pancreatic lipase) 25uL, 망초 추출물 5uL 및 0.1mM 4-메틸럼벨리페릴 올레이트(methylumbelliferyl oleate) 50uL를 순서대로 넣은 후, 37℃에서 20분간 배양하여 분광형광광도계(spectrofluorophotometer, 320/450nm)를 이용하여 췌장 리파아제 저해활성을 측정하였으며, 표준품으로는 제니칼(xenical)을 사용하였고, 하기 수학식 1을 이용하여 췌장 리파아제 저해활성(%)을 구하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
처리농도(㎎/㎖) | 제니칼(Xenical) | 망초 추출물 |
0.25 | 90.2 | 63.5 |
0.125 | - | 57.1 |
0.1 | - | 47.9 |
0.025 | - | 26.9 |
0.0125 | - | 17.6 |
실험 결과, 상기 표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 망초 추출물을 0.25mg/㎖ 처리한 경우 췌장 리파아제 저해 활성도가 63.5%로, 탁월한 췌장 리파아제 저해 활성 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
실험예 2. 생체내(
In vivo
)에서 췌장 리파아제 저해활성 측정
망초 추출물의 생체내 췌장 리파아제 저해효과를 알아보기 위하여 혈장 중 중성지방 감소효과를 부오콜의 방법(Buoccole, G. and David, H., Clin . Chem ., 19, p476, 1973)으로 측정하였고, 하기와 같이 실험을 수행하였다.
2-1. 옥수수유의 경구투여 및 혈액수집
상기 참고예 1의 방법으로 준비된 공복 상태의 수컷 생쥐(25-35g)에게 옥수수유(5g/kg) 또는 옥수수유(5g/kg)와 함께 망초 추출물(400mg/kg)을 경구 투여 한 후, 0, 1.5, 3 또는 4시간이 지났을 때 혈액을 채취하였고, 수집한 혈액을 3,000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈장을 수집하였으며, -70℃에서 보관하여 사용하였다.
2-2. 혈장 중성지방 측정
혈청 중의 중성지질로서 트리글리세리드(triglyceride: TG)의 함량은 TG킷트시약(시그마 사, 미국)을 사용하여 분석하였다. 혈청 10 ㎍, 표준용액 (300 mg/dl) 10 ㎍와 블랭크로 사용된 탈이온수 10 ㎍에 TG킷트시약 1.0 ml씩을 첨가하여 잘 혼합한 다음, 37℃ 수조상에서 5분간 반응시킨 후, 분광광도계를 사용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하여 TG의 함량 (mg/이 serum)을 정량하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었으며, 도 1의 그래프를 적분하여 AUC(mg분/dL)값을 구하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
또한, 췌장 리파아제 활성 측정은 트리올레인에서 유리되는 올레익 산의 방출율로 측정하였다. 트리올레인(80 mg), 레시틴(10 mg), 토로콜릭 산(5 mg)를 0.1 M 염화나트륨이 첨가된 0.1 M N-트리스(하이드록시메틸)메틸-2-아미노 에텐설포닉 산(TES, pH 7.0) 9 mL에 넣고 5분간 초음파 분해하여 준비한 기질 0.15 mL에 0.1 mL 췌장 리파아제(200 units/mL)와 망초 열수 추출물을 첨가하여 최종 부피가 0.4 mL가 되게 하여 37℃에서 30분간 배양하였고, 배양 혼합물에 3 mL의 클로로폼 : 헵텐(1:1, 2% 메탄올 함유)용액을 가하여 10분간 쉐이킹하면서 추출하였으며, 혼합물을 2000 Xg에서 20분간 원심 분리하여 상층액은 버리고 하층의 유기물 층에 1 mL 구리 시약을 첨가한 후, 10분간 쉐이킹하였고, 2000 Xg에서 20분간 원심분리 하였다. 추출된 유리 지방산의 구리염이 함유되어 있는 유기물 층 0.5 mL에 0.1% 베토큐프린(bathocuprine)과 0.05% 3-(2)-털트-부틸-4-하이드록시-아니솔(BHA)을 녹인 클로로폼 용액을 0.5 mL를 첨가한 후, 720 nm에서 흡광도를 구하여 망초 추출물의 리파아제에 대한 IC50(mg/mL)값을 측정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
그룹 | AUC(mg분/dL) | IC50(mg/mL) |
대조군 (옥수수유) | 10,800 ± 1,985 | - |
시험군 (옥수수유 + 망초추출물) | 8,063 ± 1,853 | 0.106 |
유의성 p<0.05 |
실험 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 대조군의 혈장 중성지방 농도는 식후1.5시간째에 47.8 ± 14.1 mg/dL, 3 시간째에 79.2 ± 14.5 mg/dL, 4시간째에 18.7 ± 10.9 mg/dL로 나타난 반면, 시험군의 경우 혈장 중성지방 농도가 식후 1.5시간째에 34.6 ± 9.1 mg/dL, 3시간째에 59.8 ± 15.3 mg/dL, 4시간째에 15.5 ± 5.8 mg/dL로 나타났고, 이로부터 망초추출물은 혈장 중성지방의 농도를 감소시키는데 탁월한 효과가 있음을 알 수 있었다. 또한 상기 표 2에 나타난 바와 같이, 대조군의 AUC 값이 10,800 ± 1,985 mg분/dL로 나타난 반면, 시험군의 AUC 값은 8,063 ± 1,853 mg분/dL로 나타났고, 이로부터 망초추출물은 혈장 중성지방 면적을 유의적으로 감소시킴을 확인할 수 있었으며, 망초추출물의 IC50값은 0.106mg/mL으로, 탁월한 췌장 리파아제 저해 활성 효과가 있음을 알 수 있었다.
실험예
3.
급성독성실험
6 주령의 특정병원체부재(specific pathogen-free, SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 각 그룹 당 8마리씩의 동물에 본 발명의 망초 추출물을 100 ㎎/㎏의 용량으로 1회 경구투여 하였다. 실험 물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상 및 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 강장기와 흉강 장기의 이상여부를 관찰하였다.
그 결과, 실험 물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사 및 부검 소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과, 본 발명의 추출물은 랫트에서 각각 100 ㎎/㎏까지도 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD50)은 100 ㎎/㎏이상인 안전한 물질로 판단되었다.
본 발명의 망초 추출물을 함유하는 약학조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예
1.
산제의
제조
망초 추출물 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예
2. 정제의 제조
망초 추출물 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예
3. 캅셀제의 제조
망초 추출물 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예
4. 주사제의 제조
망초 추출물 10 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4·12H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예
5.
액제의
제조
망초 추출물 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예
6. 건강 식품의 제조
망초 추출물 1000 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예
7. 건강 음료의 제조
망초 추출물 100 ㎎
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 100 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3g
물 정량
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
상기와 같이, 본 발명의 망초 추출물은 췌장 리파아제 저해활성 효과 및 혈장 중성지방 농도 저하 효과를 지니므로, 지질대사 질환의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
Claims (7)
- 망초(Erigeron canadensis L.)의 전초 60~80% 메탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학조성물
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-
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