CN107049999B

CN107049999B - 叶黄素用于治疗癌症的用途

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Publication number: CN107049999B
Application number: CN201610871352.3A
Authority: CN
Inventors: 吕全伟
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2015-10-08
Filing date: 2016-09-30
Publication date: 2021-09-03
Anticipated expiration: 2036-09-30
Also published as: US9572783B1; CN112121034B; CN107049999A; PH12016000355B1; CN112121034A; ZA201606921B; PH12016000355A1

Abstract

本发明涉及叶黄素用于治疗癌症的用途。具体讲，本发明涉及叶黄素，特别是虾红素及/或其酯的新颖用途，其用于抑制肿瘤细胞生长。因此，本发明提供一种用于预防或治疗癌症的方法，其包含向有需要的个体投予包含治疗有效量的至少一种叶黄素的组合物。

Description

叶黄素用于治疗癌症的用途

技术领域

本发明涉及叶黄素用于治疗癌症，特别是肾上腺皮质癌、骨肉瘤或多形性胶质母细胞瘤的新颖用途。

背景技术

叶黄素在分子中除含有碳及氢的外，亦含有氧的一群类胡萝卜素。虾红素(astaxanthin，其为一种叶黄素类胡萝卜素)为天然抗氧化剂，其在诸多生物体中产生(Hussein等人,2006)。其天然存在于某些藻类中，且使鲑鱼、鳟鱼、龙虾、虾及其他海产食品呈现粉红色或红色。虾红素为一种天然膳食组分，同时亦可作为食品补充剂使用。美国食品药物管理局(U.S. Food and Drug Administration，FDA)已批准将虾红素特定地用于动物及鱼饲料中作为食品着色剂(或着色添加物)。欧洲委员会认为其为食用色素，且给与其E编号E161j。天然的虾红素通常被FDA认为安全(GRAS)，但在美国，作为食品着色剂，其仅局限用于动物食品。

已于诸多动物模型及临床测试中测试虾红素的生物活性。虾红素可阻断好氧代谢产生的自由基，诸如羟基、过氧化物及活性氧物质，由此防止异常DNA损伤(Higuera-Ciapara等人, 2006)。其他研究亦显示虾红素可参与免疫反应(Kim等人,2009；Park等人,2010)。在每日接受虾红素8周后的受试者中显示有丝分裂原诱导的淋巴细胞增殖上调、自然杀手细胞的细胞毒性活性增加及T及B白血球总数增加。US 6,773,708 B1揭示叶黄素(例如虾红素)治疗自体免疫疾病、慢性病毒感染及细胞内细菌感染的用途，其在患者发生感染及/或发炎期间，于该患者体内抑制过量Th1细胞介导的免疫反应，并刺激Th2细胞介导的免疫反应。

经口投予的虾红素在血管内皮损伤小鼠模型中及易于自发中风的高血压大鼠中抑制血栓形成(Khan等人,2010；Sasaki等人,2011)。CN 101361726 A揭示，虾红素可改善由大鼠脑缺血再灌注损伤所导致的行为症状，减少脑梗塞体积及并降低脑缺血大鼠的脑水肿，因此可用于制备供预防及治疗脑中风的药物。

此外，虾红素亦可保护神经元细胞。在蜘蛛膜下腔出血之后，用虾红素进行的治疗可藉由活化核因子红血球相关因子2及抗氧化反应性元素(Nrf2-ARE)路径来改善神经发炎及早期脑损伤(Wu等人,2014；Zhang等人,2014a；Zhang等人,2014b)。更重要地是，虾红素可穿透天然血脑障壁(BBB)，因此可用于治疗脑神经元疾病(Wu等人,2014)。EP1 867 327 A1揭示包含虾红素及/或其酯的神经细胞保护剂，其可缓解神经细胞中粒线体功能障碍及氧化压力。该神经细胞保护剂可有效保护黑质的多巴胺激导性神经元及蓝斑核的去甲肾上腺素激导性神经元免于退化，而建议该神经细胞保护剂可用于帕金森氏病(Parkinson'sdisease)。

虾红素亦被认为是有潜力的抗肿瘤化合物。其藉由阻断STAT、ERK或PI3K/Akt信号传导来抑制仓鼠口腔癌细胞生长(Kavitha等人,2013；Kowshik等人,2014)。亦有关于虾红素的治疗于肝细胞癌细胞中诱导粒线体依赖性细胞凋亡的报告(Song等人,2011)。US 6,277,417 B1揭示虾红素可抑制酶5α-还原酶的活性，因此提出其可用于治疗或预防由此酶活性引起的病症，特别是良性前列腺增生及前列腺癌。

位于肾脏上方的肾上腺由外部肾上腺皮质部分及内部髓质部分所组成(Else等人,2014)。肾上腺皮质分泌数种类固醇，诸如糖皮质激素及盐皮质激素，以调节体内的代谢稳定。肾上腺皮质癌为一种罕见疾病，且每年每一百万人中有1至2人发病。其为一种具侵略性的肿瘤，且经常转移至其他器官，其5年总存活率仅为20至35％。于肾上腺皮质中发生的肿瘤可诱导类固醇的异常分泌，且表现类似库欣氏症候群(Cushing's syndrome)及男性化的症状(Erickson 等人,2014)。目前使用数种方法来治疗肾上腺皮质癌，例如完全外科切除术、放射线疗法及组合化学疗法(抗肿瘤药物的组合为顺铂(cisplatin)、小红莓(doxorubicin)及依托泊苷 (etoposide))。到目前为止，并没有可有效阻止肾上腺皮质肿瘤细胞生长的单一方法。仍需要开发一种能安全且有效地治疗肾上腺皮质癌的治疗剂。

骨肉瘤为原发性骨癌的最常见组织学形式。其在儿童及青少年中最为流行。目前，欧洲批准以米伐木肽(mifamurtide)

治疗骨肉瘤。高剂量甲胺喋呤(methotrexate)与甲酰四氢叶酸(leucovorin)治疗剂、动脉内投予顺铂、阿德力霉素(adriamycin)、异环磷酰胺 (ifosfamide)与美司钠(mesna)、BCD(博莱霉素(bleomycin)、环磷酰胺、放线菌素 (dactinomycin))、依托泊苷及胞壁酰基三肽的组合亦可用于治疗骨肉瘤。

多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme；GBM)为最严重的恶性神经胶质瘤的一。 GBM被认为不可治愈的，且与高罹患率及死亡率相关联，其在若干治疗之后的中值存活期为15个月(Aldape等人,2015；Alifieris及Trafalis,2015)。目前，欧洲及美国批准以替莫唑胺 (Temozolomide)

治疗GBM。替莫唑胺为一种烷化药物，其用于与放射线疗法并用治疗新诊断患有GBM的成年患者，接着作为维持治疗。目前有数种用于治疗GBM的侵性组合疗法，诸如最安全的外科截除术、放射线疗法及替莫唑胺治疗(Stupp等人,2009)。许多GBM患者对习知化学疗法及放射线疗法反应不佳，预后为12至15个月的不良存活期范围 (中值为14.6个月)。

US 8,632,825 B2揭示四氢大麻酚(THC)及大麻二酚(CBD)用于制造治疗GBM的药剂的用途。US 8,058,243 B2揭示一种用于治疗涉及神经前驱细胞、早期神经祖细胞、神经干细胞 (NSC)或其组合的神经胶母细胞瘤癌的方法，该方法包含向有需要的个体投予治疗有效量的包含艾芬地尔(ifenprodil)的组合物。迄今为止，尚无在不存在其他抗肿瘤药物情况下可有效抑制GBM肿瘤生长的单一化合物。

发明内容

本发明的目的之一为提供用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的方法及/或药剂。

本发明的一方面为提供一种用于抑制肿瘤细胞生长的方法，其包含使该肿瘤细胞与包含治疗有效量的至少一种叶黄素的组合物接触。

在本发明的一较佳实施例中，该肿瘤细胞为肾上腺肿瘤细胞。

在本发明的一较佳实施例中，该肿瘤细胞为骨肿瘤细胞。

在本发明的一较佳实施例中，该肿瘤细胞为脑肿瘤细胞。

本发明的另一方面为提供一种用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的方法，其包含向有需要的个体投予包含治疗有效量的至少一种叶黄素的组合物。

本发明亦提供一种用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的组合物，其包含治疗有效量的至少一种叶黄素及生理学上可接受的载剂。

本发明进一步提供叶黄素用于制造用以预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的药剂的用途。

在本发明的一较佳实施例中，该肾上腺癌选自由以下组成的群组：肾上腺皮质腺瘤、肾上腺皮质癌、神经母细胞瘤及嗜铬细胞瘤。

在本发明的一更佳实施例中，该肾上腺癌为肾上腺皮质癌。

在本发明的一较佳实施例中，该骨癌选自由以下组成的群组：骨瘤、骨样骨瘤、骨软骨瘤、骨母细胞瘤、内生软骨瘤、骨骼的巨细胞瘤、动脉瘤样骨囊肿、骨骼的纤维性结构不良、骨肉瘤、软骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)及纤维肉瘤。

在本发明的一更佳实施例中，该骨癌为骨肉瘤。

在本发明的一较佳实施例中，该脑癌选自由以下组成的群组：神经胶质瘤、脊膜瘤、垂体腺瘤及神经鞘肿瘤，较佳地多形性星形细胞瘤、星形细胞瘤、中枢神经细胞瘤、脉络丛癌瘤、脉络丛乳头状瘤、脉络丛肿瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、脑室膜肿瘤、原纤维性星形细胞瘤、巨细胞神经胶母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(GBM)、脑神经胶瘤病、神经胶质肉瘤、血管外皮瘤、神经管胚细胞瘤、髓上皮瘤、脑膜癌病、神经母细胞瘤、神经细胞瘤、少枝星形细胞瘤、少枝胶质瘤、视神经鞘脑膜瘤、婴儿室管膜瘤、毛细胞型星形细胞瘤、松果腺母细胞瘤、松果体细胞瘤、多形性未分化神经母细胞瘤、多形态黄星形细胞瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、蝶骨脊脑膜瘤、室管膜下巨细胞型星形细胞瘤、室管膜下瘤及三侧性视网膜母细胞瘤。

在本发明的一更佳实施例中，该脑癌为多形性胶质母细胞瘤。

在本发明的一较佳实施例中，该叶黄素为虾红素及/或其酯。

在本发明的一较佳实施例中，该叶黄素来源于天然来源，诸如红球藻属(Haematococcus sp.)藻类的培养物。

在本发明的一更佳实施例中，该红球藻属藻类为雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)。

在本发明的另一较佳实施例中，该叶黄素为化学合成的。

在本发明的一较佳实施例中，叶黄素的治疗有效量在经口投药的情形下为每天约0.1mg 至约10g，或在非经肠投药的情形下为每天约0.01mg至约5g。

本发明的组合物或药剂可单独或与其他治疗并用。在一个较佳实施例中，该组合物或药剂不与放射线疗法及/或化学疗法一起使用。在另一个较佳实施例中，该组合物或药剂与放射线疗法及/或化学疗法并用。在另一较佳实施例中，该组合物或药剂与用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症或控制肾上腺癌、骨癌及脑癌的症状或并发症的一或多种治疗剂同时或分开投予。

在本发明的一较佳实施例中，该癌症已经以手术方式自个体移除。

本发明详细描述于以下部分中。本发明的其他特征、目的及优点可轻易在本发明的详细描述及申请专利范围中发现。

附图说明

图1展示以DMSO(对照组)或40μM虾红素处理24小时(A)或48小时(B)的Y1细胞的明视野显微镜图。

图2展示在以虾红素处理(蓝线或◆)及以DMSO处理(红线或■)后，Y1细胞的生长曲线。每次以四个独立实验进行细胞计数，以平均值±S.D.表示。

图3展示在DMSO或虾红素存在下存活Y1细胞群的定量。**表示与对照组(DMSO处理组)比较，P<0.01。

图4展示在以虾红素处理后，U87MG细胞数目减少。每次以四个独立实验进行细胞计数，且以平均值±S.D.表示。

图5A及图5B展示在以虾红素处理后，U87MG细胞的存活率降低。在DMSO或不同浓度的虾红素存在下对存活U87MG细胞群进行定量。

图6展示在以虾红素处理后，M059K细胞数目减少。每次以四个独立实验进行细胞计数，以平均值±S.D.表示。

图7展示在以虾红素处理后，M059J细胞数目减少。每次以四个独立实验进行细胞计数，以平均值±S.D.表示。

图8展示在以虾红素处理后，U2OS细胞数目减少。每次以四个独立实验进行细胞计数，以平均值±S.D.表示。

具体实施方式

除非本文另外定义，在本发明中使用的科学及技术术语应具有本领域技术人员通常所理解的意义。术语的意义及范畴应为明确的；然而，若存在任何潜在不明确性，则本文所提供的定义优先于任何词典或外来定义。

除非另外指明，否则如根据本发明所利用，以下术语应理解为具有以下意义。

如本文所使用的术语“肾上腺皮质癌(ACC)”指起源于肾上腺皮质(产生类固醇激素的组织)的侵袭性癌。肾上腺皮质癌可于儿童及成人中以不同形式存在。儿童中的大部分肿瘤为功能性的，且男性化为目前最常呈现的症状，其次为库欣氏症候群(Cushing'ssyndrome)及早熟症。在成人呈现的激素症候群中，单独的库欣氏症候群最常见，其次为混合性库欣氏及男性化(糖皮质激素及雄激素过度产生)。女性化及康氏症候群(Connsyndrome)(盐皮质激素过量)发生小于10％例。在少数情况下，有报告于肾上腺皮质癌中发生嗜铬细胞瘤样儿茶酚胺分泌过多。非功能性肿瘤(约40％，依官方数据改变)通常伴随腹部或侧腹疼痛、精索静脉肿及肾静脉血栓一起存在，或其可为无症状的，且偶然地侦测到。

术语“肾上腺癌”包括(但不限于)肾上腺皮质腺瘤、肾上腺皮质癌、神经母细胞瘤及嗜铬细胞瘤。

术语“骨癌”包括(但不限于)骨瘤、骨样骨瘤、骨软骨瘤、骨母细胞瘤、内生软骨瘤、骨骼的巨细胞瘤、动脉瘤样骨囊肿、骨骼的纤维性结构不良、骨肉瘤、软骨肉瘤、尤文氏肉瘤及纤维肉瘤。

术语“骨肉瘤”指骨骼中的癌性肿瘤。具体地讲，其为由间叶细胞源性原始转化细胞引起的侵袭性恶性赘瘤(因此其为肉瘤)，且其呈现骨母细胞分化并产生恶性骨样瘤。

术语“脑癌”包括(但不限于)神经胶质瘤、脊膜瘤、垂体腺瘤及神经鞘肿瘤，较佳地多形性星形细胞瘤、星形细胞瘤、中枢神经细胞瘤、脉络丛癌瘤、脉络丛乳头状瘤、脉络丛肿瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、脑室膜肿瘤、原纤维性星形细胞瘤、巨细胞神经胶母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(GBM)、脑神经胶瘤病、神经胶质肉瘤、血管外皮瘤、神经管胚细胞瘤、髓上皮瘤、脑膜癌病、神经母细胞瘤、神经细胞瘤、少枝星形细胞瘤、少枝胶质瘤、视神经鞘脑膜瘤、婴儿室管膜瘤、毛细胞型星形细胞瘤、松果腺母细胞瘤、松果体细胞瘤、多形性未分化神经母细胞瘤、多形态黄星形细胞瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、蝶骨脊脑膜瘤、室管膜下巨细胞型星形细胞瘤、室管膜下瘤及三侧性视网膜母细胞瘤。

术语“多形性胶质母细胞瘤(GBM)”指人类中发现的最高级别的神经胶质瘤(IV级)。依据 WHO分类，GBM亦指“神经胶母细胞瘤”。神经胶母细胞瘤自正常脑组织产生。其可侵入且于脑内迁移远离主要肿瘤；然而，神经胶母细胞瘤会很少扩散至体内其他处。神经胶母细胞瘤存在两种亚型：新发性(de novo)(新或原发性)及继发性。新发性肿瘤产生快速，且往往为突然发现。其为最常见且极具侵略性的神经胶母细胞瘤形式。在55岁及55岁以上的人中，新发性肿瘤占神经胶母细胞瘤的大部分。继发性神经胶母细胞瘤最常见于45岁及45岁以下的患者中，通常以低级别或中等级别星形细胞瘤开始，其由基因程序化最终会转型成恶性、快速生长的神经胶母细胞瘤。

术语“放射线疗法”指使用高能量放射线杀死癌细胞或收缩肿瘤的一类癌症治疗。用于放射线疗法的放射线剂量以格雷(Gy)为单位进行量测，且取决于所治疗的癌症的类型及分期而变化。

术语“化学疗法”包括(但不限于)投予化学治疗性化合物，诸如阿德力霉素、顺铂、小红莓、依托泊苷、氟嘧啶、伊立替康(irinotecan)、奥沙利铂(oxaliplatin)、紫杉醇(taxol)、拓朴替康(topotecan)等。

如本文所使用的术语“叶黄素”指在分子中除含有碳及氢的外，亦含有氧的一群类胡萝卜素或其衍生物。类胡萝卜素由植物、真菌及一些细菌重新产生。在本发明的一较佳实施例中，叶黄素为虾红素或其酯。

本发明的组合物或药剂中所含虾红素及/或其酯为以下式表示的类胡萝卜素：

其中在虾红素的情形下，R¹及R²均为氢，且R¹及R²各自独立地为氢原子或脂肪酸残基，其限制条件为在虾红素的酯的情形下，R¹及R²中的至少一者为脂肪酸残基。虾红素的酯中脂肪酸残基的实例包括(但不限于)：饱和脂肪酸，诸如棕榈酸及硬脂酸；或不饱和脂肪酸，诸如油酸、亚麻油酸、α-次亚麻油酸、γ-次亚麻油酸、双高-γ-次亚麻油酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸及二十二碳六烯酸。本发明中所使用的虾红素酯可为任何均质或非均质的单酯或二酯。虾红素具有一种结构，其中额外的侧氧基及额外的羟基存在于β-胡萝卜素分子的各端，使得该分子不同于β-胡萝卜素具有较低的稳定性。另一方面，在两端处的羟基以不饱和脂肪酸酯化的酯形式(例如，如磷虾萃取物中获得)较稳定。

本发明中所使用的虾红素及/或其酯可化学合成或来源于天然存在的产物。天然存在的产物的实例包括：红酵母；甲壳动物，诸如剑水蚤(Tigriopus)(红水蚤(red waterflea))及磷虾的外壳；及微藻，诸如绿藻，其含有虾红素及/或其酯。在本发明中，可使用藉由任何方法产生的含有虾红素及/或其酯的任何萃取物，只要其具有虾红素及/或其酯的性质。一般而言，可使用来自那些天然存在的产物的萃取物，且萃取物可为粗品，或必要时，可经纯化。在本发明中，必要时，可单独或组合使用含有该虾红素及/或其酯的天然存在的产物的粗萃取物或碾碎的粉末，或经纯化产物或化学合成产物。鉴于化学稳定性，较佳为使用虾红素的酯形式。

如本文所使用的术语“预防”指推迟易感个体症状的发作，减少病症或病状出现，或抑制病症或病状出现，或停滞病症或病状的发展。

如本文所使用的术语“治疗”指示：减轻、缓解、逆转及/或改善病症或病状或其一或多种症状，或终止易感个体的疾病或病状的症状。

如本文所使用的术语“个体”指示动物，尤其是哺乳动物。在一个较佳实施例中，术语“个体”指示“人类”。

如本文所使用的术语“治疗有效量”指单独或与其他用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的治疗/药剂组合使用以展示治疗功效的活性成分的量。

术语“生理学上可接受的载剂”指本领域技术人员熟知用于制造医药或膳食组合物的溶剂、稀释剂、黏合剂、黏着剂、佐剂、赋形剂、受体、稳定剂、类似物、调味剂、甜味剂、乳化剂或防腐剂。

如本文所使用的语“投予”或“投药”指可用于使本发明的组合物或药剂能够递送至生物作用的所需部位的方法。这些方法包括(但不限于)：经口、十二指肠内、鼻、非经肠注射(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或皮内)；局部及经直肠投药。在一较佳实施例中，本文所述的组合物及药剂经口投予。

除非上下文另外需要，否则单数术语应包括复数，且复数术语应包括单数。

本发明的目的之一为提供一种用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的药剂。

本发明旨在提供用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的方法及/或药剂。

本发明的一方面为提供一种用于抑制肿瘤细胞生长的方法，其包含使肾上腺皮质肿瘤细胞与包含治疗有效量的至少一种叶黄素的组合物接触。

在本发明的方法的实施中，将包含治疗有效量的至少一种叶黄素的组合物投予需要治疗及/或预防来抑制肿瘤细胞生长的个体，例如人类个体。

在实施本发明的方法时，可使用来自任何来源的叶黄素，不论天然抑或合成的。根据本发明的一较佳实施例，叶黄素为虾红素及/或其酯。在本发明的一尤佳实施例中，虾红素来源于天然来源，诸如红球藻属藻类，例如雨生红球藻的培养物。雨生红球藻微藻为用于本发明方法中的虾红素的较佳的天然、可商业购得来源。在本发明的另一较佳实施例中，虾红素为化学合成的。用于制备虾红素的合成方法(R.D.G.Cooper等人,J.Chem Soc.PerkinsTrans. I,(1975)第2195页；F.Kienzle,H.Mayer,Helv.Chim.Acta.,(1978)第61卷,第2609页)，以及自天然来源分离虾红素的方法(Tischer,Z.Physiol.Chem.,(1941)第267卷,第281页；Seybold及 Goodwin,Nature,(1959)第184卷,第1714页)为已知的。因此，虾红素可以合成或自天然来源分离的纯形式投予。

此外，在本发明方法的一较佳实施例中，虾红素作为包含蛋白质、碳水化合物及脂肪酸的组合物的一部分投予。当使用雨生红球藻藻类膳食作为虾红素的来源时，组合物较佳以来源于微藻的形式投予，其包含微藻的天然蛋白、碳水化合物及脂肪酸组分。该微藻为可商业购得的(Cyanotech Corporation,Kailua-Kona,HI)，且通常包含以下各物作为主要组分(以重量计)：约1.5至2％虾红素、约15至30％蛋白质、约35至40％碳水化合物、约10至25％灰分、约5 至20％脂肪及约3至10％水分。该组合物进一步包含包括以下各物的次要组分：铁、镁、钙、生物素、L-肉碱、叶酸、烟酸、泛酸，及维生素B1、B2、B6、B12、C及E。

本发明亦提供一种包含治疗有效量的至少一种叶黄素及生理学上可接受的载剂的组合物，其用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症。

根据本发明的用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的组合物或药剂的投药途径可为口服或非经肠。剂型根据投药途径适当选择。其实例包括非经肠溶液、输注溶液、散剂、颗粒剂、锭剂、胶囊、丸剂、肠溶包衣制剂、糖衣锭、供内服的液体、悬浮液、乳液、糖浆、供外部使用的液体、泥罨剂、滴鼻剂、滴耳剂、滴眼剂、吸入剂、软膏、洗剂、栓剂及经肠养分。取决于疾病的状况，其可单独或组合使用。为了制备此等剂型，必要时可使用常用于医药制造技术领域中的辅助物质，诸如赋形剂、黏合剂、消毒剂、抗氧化剂、崩解剂、润滑剂及调味剂。

根据本发明的用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的癌症的叶黄素的剂量取决于投药的目的或拟投予的个体(性别、年龄、体重等)而变化。在本发明的一较佳实施例中，叶黄素的治疗有效量在经口投予的情形下为每天约0.1mg至约10g，较佳为约1 mg至约4g，更佳为约4mg至约500mg；或在非经肠投药的情形下为每天约0.01mg至约5g，较佳为约0.1mg至约2g，更佳为约0.1至约500mg。

根据本发明的组合物不仅可作为如上文所描述的医药剂使用，亦可作为如以下的管制产品类别使用：“准药物”、化妆品、功能性食品、营养补充物、食品及饮料，及其他类似产品。当用作准药物或化妆品时，必要时，该组合物可与常用于准药物或化妆品或其他技术的领域中的各种辅助物质结合使用。或者，当用作功能性食品、营养补充物或食品及饮料时，必要时，该药剂可与常用于食品的添加剂，例如甜味剂、香辛料、调味料、消毒剂、防腐剂、杀菌剂及抗氧化剂结合使用。必要时，该药剂可呈所需形式使用，诸如溶液、悬浮液、糖浆、颗粒、乳膏、糊状物或胶状物，或可经成形。包含在此等产品中的成分的比率不受特别限制，且可根据预定目的、使用模式及剂量适当选择。

本发明的组合物或药剂可单独或与其他治疗组合使用。在一个较佳实施例中，该组合物或药剂与放射线疗法及/或化学疗法组合使用。在另一个较佳实施例中，该组合物或药剂与用于预防或治疗选自由肾上腺癌、骨癌及脑癌组成的群组的肾上腺皮质癌或管理肾上腺癌、骨癌及脑癌的症状或并发症的一或多种治疗剂同时或分开投予。

现已大体上描述本发明，经由参考如下实例可更容易理解本发明，这些实例提供用于制造本发明的医药组合物及使用其治疗癌症的例示性方案。这些实例仅出于说明的目的提供，且不意欲以任何方式限制本发明的范畴。已尽力确保所用数值(例如，量、温度等)的准确性，但当然应允许一定实验误差及偏差。

实例

实例1：抑制肾上腺肿瘤细胞株

细胞培养及药物处理

在37℃下，使小鼠肾上腺皮质Y1细胞株(ATCC,

CCL-79^TM)在含5％CO₂的潮湿氛围中于补充有10％胎牛血清的达尔伯克氏改良型伊格尔培养基(Dulbecco'smodified Eagle medium，DMEM)-F12中生长。

将虾红素(型号：ATP-9601A；沅育生物科技有限公司(中国台湾))以20mM浓度溶解于二甲亚砜(DMSO)中作为储备溶液。

在分析的前，将Y1细胞与DMSO或40μM的虾红素一起培养1、2或3天。

MTT分析

在处理之后，以PBS洗涤细胞，接着在每个孔中添加1ml MTT(溴化3-(4,5-二甲基噻唑- 2-基)-2,5-二苯基四唑鎓盐)溶液(在PBS中2mg/ml)。在37℃下培养3小时之后，添加2ml DMSO，且在暗处培养细胞30分钟。在570nm波长(OD570)下量测吸亮度。

结果

在1、2或3天处理后，相较于对照组(DMSO处理组)，虾红素处理组中Y1细胞的数目减少(参看图1及图2)。此结果进一步藉由MTT分析确认，该MTT分析量测粒线体丁二酸去氢酶的活性且代表细胞存活率。

如图3所示，相较于DMSO处理组，在虾红素处理48小时后，该处理组的OD570减少。此数据可证明虾红素有效抑制肾上腺皮质肿瘤细胞生长。

实例2：抑制脑肿瘤细胞株

细胞培养及药物处理

在37℃下，使人类U87MG(ATCC,

HTB-14^TM)细胞株在含5％CO₂的潮湿氛围中于补充有10％胎牛血清的DMEM培养基中生长。在37℃下，使M059K(ATCC,

CRL-2365^TM)及M059J(ATCC,

CRL-2366^TM)细胞株在含5％CO2的潮湿氛围中于补充有10％胎牛血清的达尔伯克氏改良型伊格尔培养基(DMEM)-F12中生长。

将虾红素以20mM浓度溶解于二甲亚砜(DMSO)中作为储备溶液。

将U87MG、M059K及M059J细胞株以DMSO，或100、200或400μM的虾红素处理24小时或48小时，之后进行细胞数目计数。

结果

如图4所示，虾红素以剂量依赖性及时间依赖性方式抑制U87MG细胞生长。亦藉由MTT 分析确认此结果(参看图5)。如图6及图7所示，虾红素亦抑制M059K(图6)及M059J(图7)细胞生长。这些数据表示，以虾红素进行的处理可以剂量依赖性方式抑制神经胶母细胞瘤细胞生长。在不受理论限制的情况下，一般相信虾红素可穿透BBB(血脑障壁)，表示虾红素可作为抗神经胶母细胞瘤的化合物。

实例3：抑制骨骼肿瘤细胞株

细胞培养及药物处理

在37℃下，使人类U2OS(ATCC,

HTB-96^TM)细胞株在含5％CO₂的潮湿氛围中于补充有10％胎牛血清的DMEM培养基中生长。

将虾红素以20mM浓度溶解于二甲亚砜(DMSO)中作为储备溶液。

U2OS细胞株以DMSO，或100、200或400μM的虾红素处理72小时，接着进行细胞数目计数。

结果

如图8所示，虾红素以剂量依赖性方式抑制U2OS细胞生长。此等数据表示，以虾红素进行的处理可以剂量依赖性方式抑制骨肉瘤细胞生长。此数据可证明虾红素可有效抑制骨肉瘤细胞生长。

此等数据表示，叶黄素(虾红素)可在无任何放射线疗法及/或化学疗法情况下有效抑制肾上腺皮质肿瘤、骨骼肿瘤及神经胶母细胞瘤生长。

本领域技术人员能想到如以上说明性实例中所阐述的本发明的诸多修改及变化。因此，只有在所附的权利要求书中所记载的限制可用于局限本发明。

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Claims

1.一种虾红素(astaxanthin)用于制造抑制肾上腺皮质癌细胞生长的药剂的用途。

2.一种虾红素(astaxanthin)用于制造预防或治疗肾上腺皮质癌的药剂的用途。

3.根据权利要求1或2的用途，其中该虾红素来源于天然来源及/或化学合成的。

4.根据权利要求3的用途，其中该虾红素来源于红球藻属(Haematococcus sp.)藻类的培养物。

5.根据权利要求4的用途，其中该红球藻属藻类为雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)。

6.根据权利要求1或2的用途，其中虾红素的量为每天0.01mg至10g。

7.根据权利要求1或2的用途，其中该药剂单独使用或与放射线疗法及/或化学疗法并用。

8.根据权利要求1或2的用途，其中该药剂与用于预防或治疗肾上腺皮质癌或管理肾上腺皮质癌的一或多种治疗剂同时或分开投予。

9.根据权利要求1或2的用途，其中该癌症已经以手术方式自需要治疗的个体移除。