KR20200022660A - 혼합 추출물을 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

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서동욱
주재윤
박예진
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Abstract

본 발명은 혼합 추출물을 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및 의약외품 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명에 따른 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물은 체중, 혈청 콜레스테롤, 백색지방, 부고환지방, 내장지방 및 간 조직 내 지방 감소 효과와 지질생성 관련 전사인자 발현 억제 효과를 가지고 있어 지방간, 고지혈증 또는 비만을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 의약품 및 기능성 식품의 제조에 유용하게 사용할 수 있는 바, 지속적인 성장이 예측되는 지방간, 고지혈증 또는 비만 개선 분야에서 다양하게 활용할 수 있다.

Description

혼합 추출물을 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating of fatty liver, hyperlipemia or obesity comprising mixed extracts}
본 발명은 혼합 추출물을 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
비만은 음식물로 섭취한 에너지와 신체활동으로 소비한 에너지 간의 불균형에 의하여 과잉의 에너지가 체지방으로 축적되는 현상이다. 일반적으로 비만은 체내에 지방 조직이 과다한 상태를 의미하며, 이러한 비만 상태가 오랜 시간에 걸쳐 지속되면 당뇨병, 고지혈증, 심장병, 뇌졸증, 동맥경화증, 지방간 등의 각종 대사성질환과 성인병이 유발된다. 최근 과다한 열량 섭취와 운동 부족으로 인하여 서구 선진국뿐만 아니라 우리나라에서도 비만인구가 급증하고 있으며 이는 심각한 사회문제로 대두 되고 있다. 또한 비만은 과잉의 에너지 공급이 지방세포 크기와 수의 증가를 유발하여 체내 지방으로 축적되는 것이 주된 발생원인으로 알려져 있으며, 이 외에도 유전적 요인, 서구화된 식생활에 의한 환경적 요인, 심리적 요인, 에너지 대사 이상 등 다양한 원인이 작용한다고 알려져 있다.
이와 관련하여 비만에 원인이 되는 지방세포를 제어하여 비만을 억제하는 다양한 방법들이 제시되고 있으나, 비만 억제 효과가 없거나 비만 억제 효과가 있는 경우라도 상당한 부작용을 일으키는 등의 문제점이 있었다. 예컨대 현재 미국 FDA가 장기 사용을 승인한 비만 치료 약물은 2가지로, 노르에피네프린(norepinephrine)과 세로토닌(serotonin)의 재흡수를 억제하는 작용을 가진 시부트라민(sibutramine)과 췌장 및 소화기계에서 분비되는 지질분해효소(lipase)를 억제하여 항비만 효과를 나타내는 오리스타트(orlistat)가 있다.
그러나, 시부트라민의 경우, 혈압상승, 불면증, 구강건조, 어지러움 등의 부작용이 흔하게 발생하고, 심혈관질환, 조절되지 않는 고혈압을 가진 환자에게는 사용할 수 없다는 단점이 있다. 또한, 오리스타트는 설사, 지방변, 요실금 등의 부작용이 나타나며, 한국인과 같이 지방섭취가 서양인과 비교하여 적은 경우에는 약물의 효과가 뚜렷하지 않다는 점으로 인해 사용이 제한적이다.
이에 따라 천연물과 같이 비만을 안전하고 효과적으로 예방하거나 치료할 수 있는 방안이 필요한 실정이다.
이에 본 발명자들은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물이 효과적인 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료 효과를 나타내는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은, 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물은 체중, 혈청 콜레스테롤, 백색지방, 부고환지방, 내장지방 및 간 조직 내 지방 감소 효과와 지질생성 관련 전사인자 발현 억제 효과를 가지고 있어 지방간, 고지혈증 또는 비만을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 의약품 및 기능성 식품의 제조에 유용하게 사용할 수 있는 바, 지속적인 성장이 예측되는 지방간, 고지혈증 또는 비만 개선 분야에서 다양하게 활용할 수 있다.
도 1은 본 발명에서 사용한 C57BL/6N 마우스 모델과 실험 프로토콜을 도식화하여 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명에서 사용한 3T3-L1 세포실험 과정을 도식화하여 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 혼합 추출물인 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 혈청 콜레스테롤을 측정하여 부기나와의 혈청 콜레스테롤 감소 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다. 모든 값은 mean ± SEM (n=6)에 따른 것이며 정상식이군(Control)에 대비 ###p < 0.001로, 고지방식이군(HFD) 대비 *p < 0.05로 나타내었다.
도 4는 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 마우스 무게를 측정하여 부기나와의 마우스 무게 증가 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다. 모든 값은 mean ± SEM (n=6)에 따른 것이며 정상식이군(Control)에 대비 #p < 0.05 및 ###p < 0.001로, 고지방식이군(HFD) 대비 *p < 0.05, **p < 0.01로 나타내었다.
도 5는 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 백색지방조직을 관찰하여 부기나와의 백색지방조직 증가 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 부고환지방 및 내장지방 무게를 측정하여 부기나와의 부고환지방 및 내장지방 증가 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다. 모든 값은 mean ± SEM (n=6)에 따른 것이며 정상식이군(Control)에 대비 ###p < 0.001로, 고지방식이군(HFD) 대비 ***p < 0.001로 나타내었다.
도 7은 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 부고환지방조직 내 조직학적 변화를 관찰하여 부기나와의 부고환지방조직의 지질 축적 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 8은 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 부고환지방조직 내 부고환지방 세포의 크기를 측정하여 부기나와의 부고환지방조직의 지질 축적 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다. 모든 값은 mean ± SEM (n=6)에 따른 것이며 정상식이군(Control)에 대비 ###p < 0.001로, 고지방식이군(HFD) 대비 *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001로 나타내었다.
도 9는 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 간 조직 내 형태학적 변화를 관찰하여 부기나와의 간 조직 내 지질 축적 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 10은 본 발명의 부기나와를 마우스 모델에 처리 후 간 조직 내 조직학적 변화를 관찰하여 부기나와의 간 조직 내 지질 축적 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다. 100x 배율로 관찰하였으며 스케일바는 100 μm를 나타낸다.
도 11은 본 발명의 부기나와를 3T3-L1 지방세포에 처리 후 지방세포 분화를 관찰하여 부기나와의 지방세포 분화 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 12는 본 발명의 부기나와를 3T3-L1 지방세포에 처리 후 지방세포 분화를 520 nm에서 흡광도 측정을 통해 정량적으로 측정하여 부기나와의 지방세포 분화 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다. 모든 값은 mean ± SEM (n=3)에 따른 것이며 대조군(Differentiation -) 대비 ###p < 0.001로, 실험군(Differentiation +) 대비 *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001로 나타내었다.
도 13은 본 발명의 부기나와를 3T3-L1 지방세포에 처리 후 지방세포에서 지질 생성 관련 인자인 PPARγ, C/EBPα 및 SREBP1의 단백질 발현을 western-blot 방법으로 측정하여 지방세포 분화를 520 nm에서 흡광도 측정을 통해 정량적으로 측정하여 부기나와의 3T3-L1 지방세포에서의 지질생성 관련 인자 발현 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
본 발명은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물은 “부기나와 (Buginawa)”로 명명하였으며 이하 부기나와는 본 발명의 상기 유효성분을 의미한다.
본 발명의 유효성분인 부기나와 추출물은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추를 혼합하여 추출하거나, 각각을 추출하여 혼합하는 것을 모두 제한없이 포함할 수 있다.
본 발명의 용어 “지방간”은 간의 지방대사 장애로 지방이 간세포에 과도한 양으로 축적된 상태를 말하며, 이는 협심증, 심근경색, 뇌졸중, 동맥경화 및 췌장염 등과 같은 다양한 질병의 원인이 된다. 또한 용어 “고지혈증”은 중성 지방과 콜레스테롤 등의 지방대사가 제대로 이루어지지 않아 혈액 중에 지방량이 많아 유발되는 질환을 말한다. 보다 구체적으로 고지혈증이란 혈액 내의 중성지방, LDL 콜레스테롤, 인지질 및 유리 지방산 등의 지질 성분이 증가된 상태로 발생빈도가 높은 고콜레스테롤혈증 또는 고중성지방혈증을 포함한다. 또한 용어 “비만”은 체내에 체지방이 과도하게 축적되는 것을 의미한다.
상기 비만은 산후 비만, 폐경기 비만, 소아 비만, 복부 비만, 증식성 비만 및 비후성 비만으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상일 수 있고, 바람직하게는 산후 비만일 수 있으며 이에 제한되지는 않는다.
상기 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추의 중량비는 20 내지 30 : 3 내지 5 : 2 내지 3 : 1 내지 3 : 1 : 2 내지 4 : 1 내지 2 : 1 내지 2 : 1 : 1 내지 3 : 1 내지 2 : 1 내지 3 일 수 있고, 바람직하게는 25 : 4 : 2.5 : 2 : 1 : 3 : 1.5 : 1.5 : 1 : 2 : 1.5 : 2 일 수 있다. 상기와 같은 비율로 혼합됨으로써 효과적으로 지방간, 고지혈증 또는 비만을 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 추출물은 물, 알코올 또는 기타 유기용매로 추출된 것일 수 있고, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출된 것일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 물로 추출된 것일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
상기 탄소수 1 내지 5의 알코올은 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol) 및 부탄올(butanol)일 수 있으며 이에 제한되지는 않는다. 또한 상기 유기용매는 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane)으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있으며 이에 제한되지는 않는다.
또한 상기 추출물은 90 내지 110℃, 바람직하게는 95 내지 105℃, 더욱 바람직하게는 99℃에서 1 내지 3시간, 바람직하게는 2시간 동안 가열함으로써 추출할 수 있으며 이에 제한되지는 않는다.
상기 추출물은 체중, 혈청 콜레스테롤, 백색지방, 부고환지방, 내장지방 및 간 조직 내 지방으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상을 감소시키는 것일 수 있다. 또한 상기 추출물은 지질생성 관련 전사인자 발현을 억제시키는 것일 수 있고, 상기 전사인자는 PPARγ, C/EBPα 및 SREBP1로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상일 수 있으며 이에 제한되지는 않는다.
이와 같이 본 발명의 추출물은 상기와 같은 여러 가지 측면에서 감소 효과를 가짐으로써 효과적으로 지방간, 고지혈증 또는 비만을 예방 또는 치료할 수 있다. 따라서 본 발명의 추출물은 비만을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 의약품 및 기능성 식품의 제조에 유용하게 사용할 수 있는 바, 지속적인 성장이 예측되는 지방간, 고지혈증 또는 비만 개선 분야에서 다양하게 활용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 또한, 약학적 조성물의 제조에는 고체 또는 액체의 제제용 첨가물을 사용할 수 있다. 제제용 첨가물은 유기 또는 무기 중 어느 것이어도 된다.
부형제로서는 예를 들면 유당, 자당, 백당, 포도당, 옥수수 전분 (corn starch), 전분, 탈크, 소르비트, 결정 셀룰로오스, 덱스트린, 카올린, 탄산칼슘, 이산화규소 등을 들 수 있다. 결합제로서는 예를 들면 폴리비닐알코올, 폴리비닐에테르, 에틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 아라비아고무, 트래거캔스 (tragacanth), 젤라틴, 셀락(shellac), 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 구연산칼슘, 덱스트린, 펙틴 (pectin)등을 들 수 있다. 활택제로서는 예를 들면 스테아린산마그네슘, 탈크, 폴리에틸렌글리콜, 실리카, 경화식물유 등을 들 수 있다. 착색제로서는 통상 의약품에 첨가하는 것이 허가되어 있는 것이라면 모두 사용할 수 있다. 이들의 정제, 과립제에는 당의(糖衣), 젤라틴코팅, 기타 필요에 따라 적절히 코팅할 수 있다. 또한, 필요에 따라 방부제, 항산화제 등을 첨가할 수 있다.
또한 본 발명의 약학적 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며 (예: 문헌[Remington's Pharmaceutical Science, 최신판; Mack Publishing Company, Easton PA), 제제의 형태는 특별히 한정되는 것은 아니나 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 약학적 유효량은 환자의 상처 종류, 적용부위, 처리회수, 처리시간, 제형, 환자의 상태, 보조제의 종류 등에 따라 변할 수 있다. 사용량은 특별히 한정되지 않지만, 통상 본 발명의 약학 조성물의 일일 유효량을 환자에 적용시 0.00001 내지 10000 μg일 수 있다. 상기 1 일량은 1일에 1회, 또는 적당한 간격을 두고 하루에 2~3회에 나눠 투여해도 되고, 수일(數日) 간격으로 간헐(間歇)투여해도 된다.
그러나, 본 발명의 약학적 조성물의 상기 사용량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 환자의 중증도, 상처 종류, 적용부위, 처리회수, 처리시간, 제형, 환자의 상태, 보조제의 종류 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되는 것이므로 상기 유효량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 아니 된다.
또한 본 발명은 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 개체에 투여하는 단계;를 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명에 있어서, "개체"란 소, 개, 돼지, 닭, 양, 말, 인간을 포함한 포유동물을 의미하나 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 개체는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료를 필요로 하는 환자로, 지방간, 고지혈증 또는 비만 치료 중인 환자, 지방간, 고지혈증 또는 비만 치료를 받은 적이 있는 환자, 지방간, 고지혈증 또는 비만 치료를 받을 필요가 있는 환자를 모두 포함하며, 지방간, 고지혈증 또는 비만 치료를 위하여 외과적 수술을 시행한 환자 또한 포함될 수 있다.
또한 본 발명의 추출물은 이 외 기존의 지방간, 고지혈증 또는 비만 치료를 위한 약물 또는 치료방법과 병용하여 처리될 수 있다. 본 발명의 추출물을 병용 처리하는 경우, 이는 지방간, 고지혈증 또는 비만 치료를 위한 다른 약물 또는 치료방법과 동시에 또는 순차적으로 처리될 수 있다.
본 발명은 또한 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 “식품”은, 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태로 제조할 수 있다. 예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 추출물을 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지, 콘비프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치츠 등), 식용식물유지, 마가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명은 또한 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 "건강기능식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
또한, 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 및 개선을 위한 목적으로 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 약학 투여형태 또는 티백제, 침출차, 건강 음료 등의 형태인 건강기능식품으로 제조 및 가공이 가능하다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명은 또한 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 용어 “의약외품”은 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니한 물품일 수 있으며, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 또는 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다.
본 발명의 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및 의약외품 조성물을 이용하면 체중, 혈청 콜레스테롤, 백색지방, 부고환지방, 내장지방 및 간 조직 내 지방으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 감소 효과를 나타내고 지질생성 관련 전사인자 발현 억제 효과를 나타냄으로써 지방간, 고지혈증 또는 비만을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 의약품 및 기능성 식품의 제조에 유용하게 사용할 수 있는 바, 지속적인 성장이 예측되는 지방간, 고지혈증 또는 비만 개선 분야에서 다양하게 활용할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의거하여 보다 구체적으로 설명한다. 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실험예 1. 혼합 추출물 ‘부기나와’의 제조
본 발명의 유효물질인 혼합 추출물을 제조하기 위해 호박 1kg, 당귀 160 g, 천궁 100 g, 복령 80 g, 자감초 40 g, 자생강 120 g, 구기자 60 g, 모과 60 g, 오가피 40 g, 북창출 80 g, 진피 60 g 및 대추 80 g을 혼합하고 물을 넣어 99℃에서 2시간동안 가열함으로써 추출물을 얻었다. 또한 상기 혼합 추출물을 ‘부기나와’로 명명하였다.
실험예 2. 동물실험 준비 및 실험조건 설정
비만의 임상실험을 위해 사용되는 동물에는 여러 종류가 있으나 고지방식이 유도 마우스 모델은 인간의 비만연구에 유용하여 많이 쓰인다. 그 중에서도 C57BL/6N 마우스는 다른 종과 교접하지 않은 순수한 종으로 식이에 따른 당뇨, 비만, 동맥경화 등의 질병 유발이 쉬워 비만 연구에 적합하다.
이에 본 발명에서는 C57BL/6N 마우스 모델을 사용하였으며 대한바이오링크에서 구입하여 1주일간 사육실에 적응시킨 후 11주에 걸쳐 실험하였다. 사용한 마우스와 실험 프로토콜은 도식화하여 도 1에 나타내었다.
실험을 위해 다음과 같이 20-22g의 수컷 마우스를 6마리씩 식이를 달리하여 여섯 실험군으로 구분하였고, 양성 대조군으로 기존의 지방흡수억제제인 올리스탯을 사용하였다. 본 발명의 여섯 실험군은 다음과 같다: 정상식이군(control), 고지방식이군(High fat diet; HFD, 30%), 고지방식이+올리스텟 저농도군(HFD + Orlistat 10 mg/kg), 고지방식이+올리스텟 고농도군(HFD + Orlistat 20 mg/kg), 고지방식이+부기나와 저농도군(HFD + bugi 50 mg/kg), 고지방식이+부기나와 고농도군(HFD + bugi 100 mg/kg). 상기 여섯 군은 하기 표 1에 나타내었다.
No. Group n
1 정상식이군
(control)		 6
2 고지방식이군
(30% HFD (high-fat diet))		 6
3 고지방식이+올리스텟 저농도군
(HFD + Orlistat 10 mg/kg)		 6
4 고지방식이+올리스텟 고농도군
(HFD + Orlistat 20 mg/kg)		 6
5 고지방식이+부기나와 저농도군
(HFD + bugi 50 mg/kg)		 6
6 고지방식이+부기나와 고농도군
(HFD + bugi 100 mg/kg)		 6
실험예 3. 세포실험 준비 및 실험조건 설정
실험에 사용한 3T3-L1 세포주는 ATCC에서 구입하였으며 10% 소혈청(bovine serum) 및 1% ABAM가 포함된 DMEM(Eagle's minimal essential medium) 배양액에 부유시켜 48시간 동안 융합 상태가 되게 37℃, CO2 조건으로 배양하였다. 지방 세포 분화를 위해 MDI로 유도하였으며 부기나와를 62.5, 125 및 250 μg/ml 처리하였다. 또한 10% FBS(fetal bovina serum), 0.5mM 3-isobutyl-1-methylxanthine, 1 μg/ml 인슐린 및 1 μM　덱사메타손이 함유된 DMEM를 세포주에 2일 처리한 후 인슐린만 함유된 배양액으로 2일간 배양시켰다. 성숙한 지방세포를 확인한 후 10% FBS만 함유된 배양액으로 바꾸어 2일간 배양시켜 Oil-red O 염색을 통해 실험을 진행하였다. 상기 세포실험 과정을 도식화하여 도 2에 나타내었다.
실시예 1. 부기나와의 독성 확인
BUN(Blood Urea Nitrgen)은 신장 독성, AST(aspartate aminotransferase)와 ALT(alanine aminotransaminase)는 간 독성을 나타내는 지표이다. 본 발명에서 제조한 부기나와가 독성을 나타내는지 확인하기 위해 여섯 실험군의 마우스를 대상으로 혈액검사를 실시하여 BUN, AST 및 ALT을 측정하였으며 이에 대한 결과를 표 2에 나타내었다.
Parameters
Groups BUN(mg/dL) AST(U/L) ALT(U/L)
정상식이군 4.15±0.47 36.86±5.79 7.76±1.83
고지방식이군 3.84±0.26 34.11±9.34 7.24±1.63
고지방식이+올리스텟 저농도군 3.69±0.23 30.00±1.32 5.05±0.41
고지방식이+올리스텟 고농도군 3.73±0.24 38.19±5.37 5.26±0.41
고지방식이+부기나와 저농도군 3.99±0.44 39.5±7.55 5.75±1.16
고지방식이+부기나와 고농도군 3.98±0.42 36.75±2.22 5.67±1.21
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 여섯 실험군에서 모두 BUN, AST 및 ALT 수치가 정상 범위에 있는 것을 확인하여 본 발명 부기나와에 의한 간과 신장에서의 독성은 나타나지 않음을 확인하였다.
실시예 2. 부기나와의 혈청 콜레스테롤 감소 효과 확인
부기나와가 혈청 콜레스테롤에 미치는 영향을 확인하기 위해, 여섯 실험군의 마우스 혈청 콜레스테롤을 측정하였으며 이를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 고지방식이군(HFD +, HFD)에서 토탈 콜레스테롤 수치가 정상식이군(HFD -, control)에 비해 유의하게 증가한 것을 확인하였다. 반면 본 발명의 부기나와를 처리한 실험군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서는 고지방식이군에 비해 토탈 콜레스테롤 수치가 유의하게 감소된 것을 확인하였다.
실시예 3. 부기나와의 마우스 무게 및 백색지방조직 증가 억제 효과 확인
부기나와가 마우스 무게 및 백색지방조직에 미치는 영향을 확인하기 위해, 각 실험군의 마우스 무게를 측정하여 도 4에 나타내었으며 백색지방조직을 관찰하여 이를 도 5에 나타내었다.
도 4에 나타낸 바와 같이, 실험 5주차부터 고지방식이군(HFD)에서 마우스의 몸무게가 정상식이군(Control)에 비하여 유의성 있게 증가하는 것을 확인하였다. 반면 부기나와 투여군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서는 HFD군에 비해 몸무게가 유의성있게 감소한 것을 확인하였다.
또한 도 5에 나타낸 바와 같이, HFD군은 control 군과 비교하였을 때 지방조직 역시 비대해지는 것을 육안으로 확인하였다. 반면 부기나와 투여군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서는 HFD군에 비해 지방조직이 감소된 것을 확인하였다.
실시예 4. 부기나와의 부고환지방 및 내장지방 증가 억제 효과 확인
부기나와가 부고환지방 및 내장지방 무게에 미치는 영향을 확인하기 위해이들의 무게를 측정하였으며 부고환지방 무게 측정 결과를 도 6 좌측에, 내장지방 무게 측정 결과를 도 6 우측에 나타내었다.
도 6에 나타낸 바와 같이, 부고환지방 및 내장지방 모두 정상식이군(HFD -, Control)군에 비해 HFD군에서 급격하게 증가한 것을 확인하였다. 반면 부기나와 투여군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서는 HFD군에 비해 부고환지방 및 내장지방 무게가 유의하게 감소된 것을 확인하였다. 특히 부기나와는 저농도 및 고농도 투여군 모두에서 기존의 지방흡수억제제인 올리스탯 투여군(Orilstat 10, 20 mg/kg)과 유사하거나 더욱 뛰어난 부고환지방 및 내장지방 증가 억제 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
실시예 5. 부기나와의 부고환지방조직의 지질 축적 억제 효과 확인
부기나와가 부고환지방조직 내 지질 축적에 미치는 영향을 알아보기 위해 H&E staining 방법으로 조직학적 변화를 관찰하였으며 이에 대한 결과를 도 7에, 부고환지방 세포의 크기를 측정하여 도 8에 나타내었다.
도 7 및 도 8에 나타낸 바와 같이, 정상식이군(HFD -, Control)군에 비해 HFD군에서 지방 세포의 크기가 비대해진 반면, 부기나와 투여군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서는 HFD군 대비 유의하게 지방 세포 크기가 감소한 것을 확인하였다. 이러한 결과를 통해 부기나와가 부고환지방조직의 지질 축적 억제 효과를 나타냄을 확인하였다.
실시예 6. 부기나와의 간 조직 내 지질 축적 억제 효과 확인
부기나와가 간 조직 내 형태학적 및 조직학적 변화에 미치는 영향을 알아보기 위해 육안과 H&E staining 방법을 이용하여 관찰하였으며, 육안으로 관찰한 결과를 도 9에, H&E staining 방법을 이용하여 관찰한 결과를 도 10에 나타내었다.
도 9에 나타낸 바와 같이, Control군에 비해 HFD군에서 간의 색이 옅어져 지질이 축적된 것을 확인하였다. 반면, 부기나와 투여군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서는 HFD군 대비 간의 색 변화가 방지되는 것을 확인하였다.
도 10에서도 상기 도 9의 결과와 유사한 경향을 나타내어, 부기나와 투여군(Bugi 50, 100 mg/kg)에서 HFD군 대비 간 조직의 지질 축적이 억제되는 것을 확인하였다.
실시예 7. 부기나와의 지방세포 분화 억제 효과 확인
부기나와가 3T3-L1 지방세포 분화에 미치는 영향을 알아보기 위해 Oil-red O 염색 방법으로 지질 축적을 확인하였으며 이에 대한 결과를 도 11에 나타내었다.
도 11에 나타낸 바와 같이, 대조군(Differentiation -)에 비해 분화를 유도한 실험군(Differentiation +)에서 지방세포로의 분화가 급격히 증가한 반면, 부기나와 처리시 농도 의존적으로 지방세포 분화가 효과적으로 억제되었음을 확인하였다.
또한 지방세포의 분화를 정량적으로 측정하기 위해 520 nm에서 흡광도를 측정하였으며 이에 대한 결과를 도 12에 나타내었다.
도 12에서도 상기 도 11과 유사한 경향을 확인함으로써 부기나와 처리시 농도 의존적으로 지방세포 분화가 효과적으로 억제되었음을 확인하였다.
실시예 8. 부기나와의 3T3-L1 지방세포에서의 지질생성 관련 인자 발현 억제 효과 확인
부기나와가 3T3-L1 지방 세포에서 지질 생성 관련 인자인 PPARγ, C/EBPα 및 SREBP1의 단백질 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 western-blot 방법을 실시하였으며 이에 대한 결과를 도 13에 나타내었다.
도 13에 나타낸 바와 같이, 대조군(Differentiation -)에 비해 분화를 유도한 실험군(Differentiation +)에서 PPARγ, C/EBPα 및 SREBP1의 단백질 발현이 모두 증가한 것을 확인하였다. 반면, 부기나와 처리시 농도 의존적으로 상기 세 인자의 단백질 발현이 효과적으로 억제되었음을 확인하였다.
제제예 1. 의약품의 제조
1.1 산제의 제조
부기나와 200mg
유당 100mg
탈크 10mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1.2 정제의 제조
부기나와 100mg
옥수수전분 100mg
유당 100mg
스테아린산 마그네슘 2mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1.3 캡슐제의 제조
부기나와 100mg
옥수수전분 100mg
유당 100mg
스테아린산 마그네슘 2mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 정제를 제조한다.
1.4 주사제의 제조
부기나와 10μg/ml
주사용 멸균 증류수 적량
pH 조절제 적량
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2ml) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
1.5 액제의 제조
부기나와 100mg
설탕 20g
이성화당 20g
레몬향 적량
정제수를 가하여 전체 1,00ml로 맞추었다. 통상의 액제의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 갈색병에 충전하고 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 2. 식품의 제조
부기나와 100mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조(예, 영양캔디 등)에 사용할 수 있다.
제제예 3. 음료의 제조
부기나와 100mg
구연산 1000 ㎎
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 ㎖
통상의 건강기능성 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (8)

  1. 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 비만은 산후 비만, 폐경기 비만, 소아 비만, 복부 비만, 증식성 비만 및 비후성 비만으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상인 것을 특징으로 하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추의 중량비는 20 내지 30 : 3 내지 5 : 2 내지 3 : 1 내지 3 : 1 : 2 내지 4 : 1 내지 2 : 1 내지 2: 1 : 1 내지 3 : 1 내지 2 : 1 내지 3 인 것을 특징으로 하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출된 것을 특징으로 하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 체중, 혈청 콜레스테롤, 백색지방, 부고환지방, 내장지방 및 간 조직 내 지방으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상을 감소시키는 것을 특징으로 하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  6. 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  7. 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  8. 호박, 당귀, 천궁, 복령, 자감초, 자생강, 구기자, 모과, 오가피, 북창출, 진피 및 대추 혼합물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
KR1020180098530A 2018-08-23 2018-08-23 혼합 추출물을 포함하는 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물 KR20200022660A (ko)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20220069174A (ko) * 2020-11-19 2022-05-27 한국식품산업클러스터진흥원 천연 복합물을 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물
DE112021001225T5 (de) 2020-02-25 2022-12-22 Mando Corporation Lenksäule für ein fahrzeug

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KR20220069174A (ko) * 2020-11-19 2022-05-27 한국식품산업클러스터진흥원 천연 복합물을 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물

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