KR20140031459A - 필란투스 테넬루스의 추출물을 함유하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
필란투스 테넬루스의 추출물을 함유하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 필란투스 테넬루스의 추출물을 함유하는 골관절염 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 특히 골관절염 예방 및 치료용으로 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 필란투스 테넬루스(Phyllanthus tenellus)의 추출물을 함유하는 골관절염 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 기능성 건강보조식품에 관한 것이다.
필란투스 테넬루스(Phyllanthus tenellus)는 대극과(Euphorbiaceae)의 필란투스(Phyllanthus) 속 한해살이 초본 식물로서 아프리카의 동부, 인도양 남서부에 위치한 섬나라 모리셔스(Mauritius)로부터 도입된 식물종으로 현재는 미국남부와 브라질 등 남미에 많이 서식하고 있다. 농촌진흥청에서는 브라질로부터 2005년에 처음으로 도입하여 육성하였다. 식물학적인 잎의 특징은 엽병이 짧거나 없으며 줄기에 붉은 탁엽이 존재한다. 꽃의 특징으로는 긴 꽃줄기(화경)를 가지고 있고, 암꽃 수꽃이 각각 있는 단성화이면서 암꽃과 수꽃이 한 그루에 달려있는 일가화(자웅동주)이다. 또한 꽃잎의 개수(화수)와 수술의 개수(응예)가 각각 5개인 것이 특징이다.
골관절염(osteoarthritis)은 퇴행성 관절염으로서 윤활 관절에서 연골과 주위골에 퇴행성 변화가 나타나서 생기는 관절염을 말하며, 관절 연골의 점차적인 소실과 연골 하방에 위치한 뼈의 비대, 관절 가장자리 부위의 골 생성 및 비특이적인 활막 염증을 특징으로 하는 질환이다. 골관절염은 연골내 수분 함량이 증가되어 부종을 일으키는 연골 변화 단계(1 단계), 연골이 파괴되면서 연골 표면이 갈라지고 찢어지면서 손상되어 뼈가 드러나고 관절강이 좁아지는 원섬유화(fibrillation) 단계(2 단계), 연골세포가 연골을 회복하기 위해 연골 생성을 시작하지만 연골 생성보다 연골 파괴가 더 빠르게 일어나기 때문에 전반적으로 연골이 줄어들게 되는 단계(3 단계), 뼈가 변형되어 관절 기형 및 기능장애를 초래하는 뼈 변화 단계(4 단계) 및 연조직(soft tissue)이 두꺼워지는 관절 연조직 변화 단계(5 단계)로 진행된다. 반면에, 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis)은 만성 자가면역 질환(autoimmune diseases)으로서 활막 세포의 염증과 증식을 특징으로 하며 골관절염과 달리 관절 주위 뼈의 골다공증 및 골미란 등이 발생한다. 류마티스 관절염은 활막(synovial membrane)의 염증이 관절막(joint capsule)과 인대(ligament), 건(tendon)으로 퍼지는 단계(1 단계), 관절연골(joint cartilage)의 점차적인 파괴로 관절 간격이 좁아지고 관절막과 인대의 장력이 소실되는 단계(2 단계), 염증이 뼈로 침범하여 뼈의 부분적 침식이 발생하는 단계(3 단계), 및 관절기능이 소실되는 단계(4 단계)로 진행되게 된다. 이와 같이, 골관절염과 류마티스 관절염은 그 발명 원인 및 진행단계가 전혀 상이하며, 이에 대한 치료 방법도 상이하다. 아직까지 필란투스 테넬루스의 골괄절염의 예방 또는 치료에 대한 발명은 없었다.
본 발명자들은 신규한 골관절염의 예방 또는 치료제를 개발하기 위해 연구를 수행한 결과, 필란투스 테넬루스의 추출물이 우수한 골관절염의 예방, 개선 및/또는 치료 효과를 갖는 것을 확인하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
본 발명은 유효성분으로서 필란투스 테넬루스(Phyllanthus tenellus)의 추출물, 바람직하게는 C1 -4 알코올 추출물을 단독으로 포함하거나, 약제학적 또는 식품학적으로 허용되는 부형제와 함께 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 상기 필란투스 테넬루스의 추출물을 포함하는 조성물을 함유하는 골관절염의 예방, 개선 또는 치료 효과를 나타내는 식품첨가물, 건강보조식품, 또는 약제학적 조성물을 제공한다. 상기 건강보조식품, 또는 약제학적 조성물은 정제, 캅셀제, 분말제, 과립제, 액상제 및 환제로 구성된 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서, 필란투스 테넬루스의 추출물은 필란투스 테넬루스(Phyllanthus tenellus)의 지상부를 사용하여 추출물을 제조할 수 있으나, 이의 전초 등을 사용하여 추출물을 제조할 수 있다.
이하, 본 발명을 필란투스 테넬루스의 추출과정의 일예를 들어 하기에 상세하게 설명한다.
본 발명에 있어서, 필란투스 테넬루스를 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올 또는 부탄올 등과 같은 C1 -4 알코올, 바람직하게는 C1 -3 알코올, 보다 바람직하게는 메탄올, 에탄올, 또는 주정을 용매로 하여 초음파 추출 등의 통상의 추출방법으로 추출하고, 감압농축하여 알코올 추출물을 얻는다.
본 발명의 필란투스 테넬루스의 추출물은 우수한 골관절염의 예방 또는 치료 효과를 나타내며, 이를 위해서 필란투스 테넬루스의 알코올 추출물을 자체를 투여할 수도 있으며, 상기 추출물을 유기용매 또는 물로 분획하거나, 컬럼크로마토그래피하여 제조한 분획물을 각각 또는 동시에 투여할 수도 있다.
본 발명의 조성물은 약제학적 또는 식품학적 분야에서 공지의 방법의 의해 제제화될 수 있고, 그 자체 또는 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 등과 혼합하여 약제학적 또는 식품학적으로 통상으로 허용되는 제제, 예를 들면 액제, 시럽제, 캡슐제 등으로 제제화될 수 있으며, 이들은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다.
상기 본 발명의 조성물을 포함하는 액제, 캡슐제 등은 건강보조식품으로 사용될 수 있으며, 본 발명에서 사용된, 용어 "건강보조식품"이라 함은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀제, 분말제, 과립제, 액상제, 환제 등의 형태로 제조 가공한 건강식품 또는 음료, 요구르트, 치즈 등의 기능성 식품을 말한다.
본 발명의 조성물은 체내에서 활성성분의 흡수도, 배설속도, 환자의 연령 및 체중, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증정도 등에 따라 적절히 선택되나, 일반적으로 성인에게 1일 0.03~1500mg, 바람직하게는 0.3~600mg으로 투여하는 것이 바람직하다. 이렇게 제형화된 단위투여형 제제는 필요에 따라 일정시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.
본 발명의 필란투스 테넬루스의 추출물은 우수한 골관절염의 예방, 개선 및/또는 치료 효과를 나타낸다.
도 1은 MIA 유도 골관절염 쥐의 무릎연골의 조직병리학적 관절염 지수를 나타낸 도면이고,
도 2는 MIA 유도 골관절염 쥐에서 분리한 혈청에서의 연골콜라겐분해효소(MMP1)의 함량을 나타낸 도면이며,
도 3은 MIA 유도 골관절염 쥐에서 분리한 혈청에서의 연골콜라겐분해효소(MMP13)의 함량을 나타낸 도면이고,
도 4는 MIA 유도 골관절염 쥐로부터 분리한 무릎연골의 조직병리학적 손상을 나타낸 도면이다.
도 2는 MIA 유도 골관절염 쥐에서 분리한 혈청에서의 연골콜라겐분해효소(MMP1)의 함량을 나타낸 도면이며,
도 3은 MIA 유도 골관절염 쥐에서 분리한 혈청에서의 연골콜라겐분해효소(MMP13)의 함량을 나타낸 도면이고,
도 4는 MIA 유도 골관절염 쥐로부터 분리한 무릎연골의 조직병리학적 손상을 나타낸 도면이다.
이하, 본 발명을 하기 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 이들 실시예는 본 발명의 예시 목적을 위한 것이며, 본 발명의 보호범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.
실시예
.
필란투스
테넬루스
추출물의 제조
본 실시예의 필란투스 테넬루스 추출물은 95% 주정을 사용하여 제조하였다. 상세한 추출방법은 다음과 같다. 45℃에서 건조하여 분쇄한 필란투스 테넬루스 분말시료 1kg에 95%의 발효주정을 3리터씩 넣고 30분씩 총 5회 초음파 추출한 후, 다시 60분씩 총 3회 추출하는 방식으로 총 8회 추출, 여과, 농축하는 단계로 제조하였다. 최종 추출 농축물은 89g으로서 최종 추출물의 수율은 8.9%였다.
실험예
MIA
랫드
관절염 유발
체중 160 g 내외의 수컷 Sprague-Dawley계 흰쥐(오리엔트바이오, 한국)를 구입하여 청정동물사육실(온도 23±1℃, 습도 55±5%) 내에서 1주일간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 실험기간동안 사료와 음수는 자유섭취케 하였다. 골관절염은 Guzman (Toxicologic Pathology, 31:619-624, 2003)의 방법을 변형하여 유발시켰다. 모노소듐 요오도아세테이트(Monosodium iodoacetate: MIA, Sigma, USA)를 주사용 생리식염수에 5 mg/ml의 농도로 용해한 MIA 용액을 제조하였다. 실험개시일에 Zoletile:Rumpun (2:1)을 근육주사하여 마취시키고 양측 슬관절의 전면을 소독한 후, 슬관절강내로 각각 MIA 용액 (1mg/50㎕)을 헤밀톤 실린지(26 게이지)에 취하여 무릎 연골 중앙부위 (연골 사이)에 정확히 주사하여 약물을 투입하였다. 정상군은 양측 슬관절강내 각각 주사용 생리식염수 50 ㎕를 주사하였다.
시험물질, 대조물질의 투여
경구투여 시간은 14일간 매일 오전 10-11시에 1일에 1회 경구투여하였으며, 경구투여 그룹 및 투여량은 체중 측정 결과에 따라 투여량 조절하였다. 시험물질 및 대조물질은 하기 표 1과 같이 준비하였고, 시험군 구성 및 투여용량은 하기 표 2에 나타내었다.
| 양성 대조군 | 초록홍합추출물(Goodhealth Co) |
| 흰색 분말, 300 mg/캡슐 | |
| 음성 대조군 | 카르복시메틸 셀룰로스(Sigma-aldrich Co) |
| 흰색 분말, 99%(90kDa) | |
| 시험물질군 | 실시예의 필란투스 테넬루스 95% 주정 추출물 |
| 청록색 점성이 강한 추출물 |
| 그룹 | 유도물질 | 처리 | 용량 (mg/kg) |
부피 (2ml/head) |
실험동물 (마리) |
| 1 | MIA + | 대조군 (0.5% CMC) | 2 | 8 | |
| 2 | MIA + | 초록홍합추출물 | 150 | 2 | 8 |
| 3 | MIA + | 실시예의 필란투스 테넬루스 추출물 | 200 | 2 | 8 |
| 4 | MIA - | 정상군 | 2 | 8 |
* MIA(골관절염 유도물질); +: 투여, -: 미투여.
조직분석
주 1회 체중을 측정하고 D22일째에 심장채혈한 후 혈청을 분리하여 -70℃에 보관하였고, MIA 유도 골관절염이 유발된 각 개체의 무릎연골을 분리하여 고정과 탈회 과정을 거친 후 H & E (Hematoxyline & Eosin) 염색 후 현미경을 통해 관절연골 조직을 관찰하였다. 조직병리 검경 항목은 연골하골 변화 (Subchondral bone change), 연골세포 괴사 (chondrocyte necrosis), 연골 침식 (cartilage erosion), 골극 형성 및 연골 갈라짐 (osteophyte and cartilage cleft)으로 각 항목당 0-5점까지로 독성병리전문가에 의해 수행되었다. 검경 스코어 결과는 평균 및 표준편차로 나타내며, 그 결과는 비모수 통계법인 Kruskal-Wallis test를 이용하여 검정하였다. Kruskal-Wallis test 결과 유의수준이 p<0.05 일 경우, 각 군간의 통계는 Dunn's Multiple comparision test 를 이용하여 검정하였다. 각 군간의 통계처리는 GraphPad PRISM® Version 4.0(GraphPad Software, USA)을 사용하여 실시하였다.
MIA 유도 골관절염 쥐의 무릎연골의 조직병리학적 관절염 지수를 도 1에 나타내었고, MIA 유도 골관절염 쥐에서 분리한 혈청에서의 연골콜라겐분해효소(MMP1)의 함량을 도 2에 나타내었으며, MIA 유도 골관절염 쥐에서 분리한 혈청에서의 연골콜라겐분해효소(MMP13)의 함량을 도 3에 나타내었고, MIA 유도 골관절염 쥐로부터 분리한 무릎연골의 조직병리학적 손상을 도 4에 나타내었다.
도 1 내지 도 3에 있어서, G 1은 MIA + 0.5% 카브복시메틸 셀룰로스(Carboxymethyl cellulose) 200mg/kg 투여군이고, G 2는 MIA + 초록입홍합오일추출물 150mg/kg 투여군이며, G 3은 MIA + 본 실시예의 필란투스 테넬루스 추출물 200mg/kg 투여군이다.
도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 음성대조군(G1), 양성대조군(G2) 두 처리군과 비교하여 필란투스 테넬루스 추출물(G3) 처리군에서는 통계적으로 유의성 있게 관절염 지수 개선 효과가 나타내었는데, 음성대조군의 약 82% 수준으로 관절염 지수를 감소시켰다. 반면에 양성대조군(G2)로 사용된 초록입홍합오일추출물(관절건강 개선 기능성 원료)은 관절염 지수의 개선효과를 나타내지 않았다.
도 2에서 알 수 있는 바와 같이, 음성대조군(G1)과 비교하여 필란투스 테넬루스 추출물(G3) 처리군에서는 통계적으로 유의성 있게 연골 콜라겐 분해효소(MMP1)의 발현을 억제하여 함량을 감소시키는 효과가 나타났으며, 음성대조군 대비 78% 수준으로 골 콜라겐 분해효소(MMP1) 함량을 감소시켰다. 이러한 효과는 양성대조군(G2)로 사용된 초록입홍합오일추출물(관절건강 개선 기능성 원료)보다는 통계적으로 다소 약한 효과였다.
도 3에서 알 수 있는 바와 같이, 음성대조군(G1)과 비교하여 필란투스 테넬루스 추출물(G3) 처리군에서는 통계적으로 유의성 있게 연골 콜라겐 분해효소(MMP13)의 발현을 억제하여 함량을 감소시키는 효과가 나타났으며, 음성대조군 대비 72% 수준으로 연골 콜라겐 분해효소(MMP13) 함량을 감소시켰다. 이러한 효과는 양성대조군(G2)로 사용된 초록입홍합오일추출물(관절건강 개선 기능성 원료)과 비교하여 통계적으로 유사한 정도의 효과였다.
도 4에 있어서, A는 정상군이고, B는 음성대조군(MIA + 0.5% 카브복시메틸 셀룰로스 200mg/kg)이고, C는 양성대조군(MIA + 초록입홍합오일추출물 150mg/kg)이며, D는 MIA + 본 실시예의 필란투스 테넬루스 추출물 200mg/kg 투여군이다.
도 4에서 알 수 있는 바와 같이, 음성대조군(B)에서는 MIA로 골관절염이 유발되어 연골조직이 심하게 손상되고 파괴된 것을 관찰할 수 있었다. 반면에 필란투스 테넬루스 추출물(D) 처리군에서는 연골조직의 손상이 회복되어 음성대조군보다 연골조직이 양호한 것이 관찰되었다.
이상의 결과는 본 발명의 필란투스 테넬루스 추출물이 연골파괴를 억제하고 골관절염을 개선하는 효과가 우수함을 알 수 있다.
조성물
실시예
조성물예 1. 캡슐제의 제조
실시예의 필란투스 테넬루스 주정 추출물 200mg
유당 100mg
전분 93mg
탈크 2mg
스테아린산 마그네슘 적량
상기의 성분을 혼합하고 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충진하여 캡슐제를 제조한다.
조성물예 2. 액제의 제조
실시예의 필란투스 테넬루스 주정 추출물 200mg
설탕 20g
이성화당 20g
레몬향 적량
정제수를 가하여 전체 100ml
상기의 성분을 통상의 액제의 제조방법에 따라서 혼합하고 100ml의 갈색병에 충진하고 멸균시켜서 액제를 제조한다.
조성물예 3. 음료의 제조
실시예의 필란투스 테넬루스 주정 추출물 5 중량%와 식용색소 0.05 중량%, 오렌지 에센스 0.05 중량%, 과당 5.0 중량%, 구연산 0.1중량%, 비타민 C 0.05 중량%를 포함하는 일반 기능성 음료 베이스를 첨가한 조성물을 제조한 다음, 정제수를 적량 첨가하여 음료를 제조하였다.
Claims (5)
- 필란투스 테넬루스(Phyllanthus tenellus)의 추출물을 단독으로 포함하거나, 약제학적 또는 식품학적으로 허용되는 부형제와 함께 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물.
- 제1항에 있어서, 필란투스 테넬루스의 추출물이 C1 -4 알코올 추출물인 골관절염의 예방 또는 개선용 건강보조식품.
- 제1항 또는 제2항의 조성물을 함유하는 골관절염의 예방 또는 개선용 건강보조식품.
- 제3항에 있어서, 건강보조식품이 정제, 캅셀제, 분말제, 과립제, 액상제 및 환제로 구성된 군으로부터 선택된 것인 건강보조식품.
- 제1항 또는 제2항의 조성물을 함유하는 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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|---|---|---|---|
| KR1020120096255A KR101423316B1 (ko) | 2012-08-31 | 2012-08-31 | 필란투스 테넬루스의 추출물을 함유하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| KR1020120096255A KR101423316B1 (ko) | 2012-08-31 | 2012-08-31 | 필란투스 테넬루스의 추출물을 함유하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물 |
Publications (2)
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|---|---|
| KR20140031459A true KR20140031459A (ko) | 2014-03-13 |
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|---|---|---|---|---|
| KR20190010218A (ko) | 2017-07-21 | 2019-01-30 | 계명대학교 산학협력단 | 꽃송이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 골관절염 예방 또는 치료용 약학조성물 |
| KR20190033506A (ko) | 2019-03-21 | 2019-03-29 | 계명대학교 산학협력단 | 꽃송이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 골관절염 예방 또는 치료용 약학조성물 |
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2012
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| KR20190033506A (ko) | 2019-03-21 | 2019-03-29 | 계명대학교 산학협력단 | 꽃송이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 골관절염 예방 또는 치료용 약학조성물 |
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| KR101423316B1 (ko) | 2014-08-12 |
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