TWI599353B

TWI599353B - 葉黃素用於治療癌症的用途

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Publication number: TWI599353B
Application number: TW104133282A
Authority: TW
Inventors: 呂全偉
Original assignee: 呂全偉
Priority date: 2015-10-08
Filing date: 2015-10-08
Publication date: 2017-09-21
Also published as: TW201713321A

Description

葉黃素用於治療癌症的用途

本發明係關於葉黃素用於治療癌症，特別是腎上腺皮質癌、骨肉瘤或多形性膠質母細胞瘤之新穎用途。

葉黃素係在分子中除含有碳及氫之外，亦含有氧的一群類胡蘿蔔素。蝦紅素(astaxanthin，其為一種葉黃素類胡蘿蔔素)為天然抗氧化劑，其在諸多生物體中產生(Hussein等人，2006)。其天然存在於某些藻類中，且使鮭魚、鱒魚、龍蝦、蝦及其他海產食品呈現粉紅色或紅色。蝦紅素為一種天然膳食組分，同時亦可作為食品補充劑使用。美國食品藥物管理局(U.S.Food and Drug Administration，FDA)已批准將蝦紅素特定地用於動物及魚飼料中作為食品著色劑(或著色添加物)。歐洲委員會認為其為食用色素，且給與其E編號E161j。天然的蝦紅素通常被FDA認為安全(GRAS)，但在美國，作為食品著色劑，其僅侷限用於動物食品。

已於諸多動物模型及臨床測試中測試蝦紅素之生物活性。蝦紅素可阻斷好氧代謝產生的自由基，諸如羥基、過氧化物及活性氧物質，由此防止異常DNA損傷(Higuera-Ciapara等人，2006)。其他研究亦顯示蝦紅素可參與免疫反應(Kim等人，2009；Park等人，2010)。在每日接受蝦紅素8週後之受試者中顯示有絲分裂原誘導之淋巴細胞增殖上調、自然殺手細胞之細胞毒性活性增加及T及B白血球總數增加。US 6,773,708 B1揭示葉黃素(例如蝦紅素)治療自體免疫疾病、慢性病毒感染及細胞內細菌感染的用途，其係在患者發生感染及/或發炎期間，於該患者體內抑制過量Th1細胞介導之免疫反應，並刺激Th2細胞介導之免疫反應。

經口投予之蝦紅素在血管內皮損傷小鼠模型中及易於自發中風之高血壓大鼠中抑制血栓形成(Khan等人，2010；Sasaki等人，2011)。CN 101361726 A揭示，蝦紅素可改善由大鼠腦缺血再灌注損傷所導致之行為症狀，減少腦梗塞體積及並降低腦缺血大鼠之腦水腫，因此可用於製備供預防及治療腦中風的藥物。

此外，蝦紅素亦可保護神經元細胞。在蜘蛛膜下腔出血之後，用蝦紅素進行之治療可藉由活化核因子紅血球相關因子2及抗氧化反應性元素(Nrf2-ARE)路徑來改善神經發炎及早期腦損傷(Wu等人，2014；Zhang等人，2014a；Zhang等人，2014b)。更重要地是，蝦紅素可穿透天然血腦障壁(BBB)，因此可用於治療腦神經元疾病(Wu等人，2014)。EP1 867 327 A1揭示包含蝦紅素及/或其酯之神經細胞保護劑，其可緩解神經細胞中粒線體功能障礙及氧化壓力。該神經細胞保護劑可有效保護黑質之多巴胺激導性神經元及藍斑核之去甲腎上腺素激導性神經元免於退化，而建議該神經細胞保護劑可用於帕金森氏病(Parkinson's disease)。

蝦紅素亦被認為是有潛力的抗腫瘤化合物。其藉由阻斷STAT、ERK或PI3K/Akt信號傳導來抑制倉鼠口腔癌細胞生長(Kavitha等人，2013；Kowshik等人，2014)。亦有關於蝦紅素之治療於肝細胞癌細胞中誘導粒線體依賴性細胞凋亡的報告(Song等人，2011)。US 6,277,417 B1揭示蝦紅素可抑制酶5α-還原酶之活性，因此提出其可用於治療或預防由此酶活性引起的病症，特別是良性前列腺增生及前列腺癌。

位於腎臟上方的腎上腺係由外部腎上腺皮質部分及內部髓質部分所組成(Else等人，2014)。腎上腺皮質分泌數種類固醇，諸如糖皮質激素及鹽皮質激素，以調節體內之代謝穩定。腎上腺皮質癌為一種罕見疾病，且每年每一百萬人中有1至2人發病。其為一種具侵略性的腫瘤，且經常轉移至其他器官，其5年總存活率僅為20至35%。於腎上腺皮質中發生之腫瘤可誘導類固醇之異常分泌，且表現類似庫欣氏症候群(Cushing's syndrome)及男性化之症狀(Erickson等人，2014)。目前係使用數種方法來治療腎上腺皮質癌，例如完全外科切除術、放射線療法及組合化學療法(抗腫瘤藥物之組合為順鉑(cisplatin)、小紅莓(doxorubicin)及依託泊苷(etoposide))。到目前為止，並沒有可有效阻止腎上腺皮質腫瘤細胞生長的單一方法。仍需要開發一種能安全且有效地治療腎上腺皮質癌的治療劑。

骨肉瘤為原發性骨癌之最常見組織學形式。其在兒童及青少年中最為流行。目前，歐洲批准以米伐木肽(mifamurtide)(MEPACT®)治療骨肉瘤。高劑量甲胺喋呤(methotrexate)與甲醯四氫葉酸(leucovorin)治療劑、動脈內投予順鉑、阿德力黴素(adriamycin)、異環磷醯胺(ifosfamide)與美司鈉(mesna)、BCD(博萊黴素(bleomycin)、環磷醯胺、放線菌素(dactinomycin))、依託泊苷及胞壁醯基三肽之組合亦可用於治療骨肉瘤。

多形性膠質母細胞瘤(glioblastoma multiforme；GBM)為最嚴重之惡性神經膠質瘤之一。GBM被認為係不可治癒的，且與高罹患率及死亡率相關聯，其在若干治療之後的中值存活期為15個月(Aldape等人，2015；Alifieris及Trafalis,2015)。目前，歐洲及美國批准以替莫唑胺(Temozolomide)(TEMODAR®)治療GBM。替莫唑胺為一種烷化藥物，其係用於與放射線療法併用治療新診斷患有GBM之成年患者，接著作為維持治療。目前有數種用於治療GBM之侵性組合療法，諸如最安全之外科截除術、放射線療法及替莫唑胺治療(Stupp等人，2009)。許多GBM患者對習知化學療法及放射線療法反應不佳，預後為12至15個月之不良存活期範圍(中值為14.6個月)。

US 8,632,825 B2揭示四氫大麻酚(THC)及大麻二酚(CBD)用於製造治療GBM之藥劑的用途。US 8,058,243 B2揭示一種用於治療涉及神經前驅細胞、早期神經祖細胞、神經幹細胞(NSC)或其組合之神經膠母細胞瘤癌的方法，該方法包含向有需要之個體投予治療有效量的包含艾芬地爾(ifenprodil)之組合物。迄今為止，尚無在不存在其他抗腫瘤藥物情況下可有效抑制GBM腫瘤生長的單一化合物。

本發明之目的之一為提供用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的方法及/或藥劑。

本發明之態樣之一為提供一種用於抑制腫瘤細胞生長的方法，其包含使該腫瘤細胞與包含治療有效量之至少一種葉黃素的組合物接觸。

在本發明之一較佳實施例中，該腫瘤細胞為腎上腺腫瘤細胞。

在本發明之一較佳實施例中，該腫瘤細胞為骨腫瘤細胞。

在本發明之一較佳實施例中，該腫瘤細胞為腦腫瘤細胞。

本發明之另一態樣為提供一種用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的方法，其包含向有需要之個體投予包含治療有效量之至少一種葉黃素的組合物。

本發明亦提供一種用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的組合物，其包含治療有效量之至少一種葉黃素及生理學上可接受之載劑。

本發明進一步提供葉黃素用於製造用以預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症之藥劑的用途。

在本發明之一較佳實施例中，該腎上腺癌係選自由以下組成之群：腎上腺皮質腺瘤、腎上腺皮質癌、神經母細胞瘤及嗜鉻細胞瘤。

在本發明之一更佳實施例中，該腎上腺癌為腎上腺皮質癌。

在本發明之一較佳實施例中，該骨癌係選自由以下組成之群：骨瘤、骨樣骨瘤、骨軟骨瘤、骨母細胞瘤、內生軟骨瘤、骨骼之巨細胞瘤、動脈瘤樣骨囊腫、骨骼之纖維性結構不良、骨肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)及纖維肉瘤。

在本發明之一更佳實施例中，該骨癌為骨肉瘤。

在本發明之一較佳實施例中，該腦癌係選自由以下組成之群：神經膠質瘤、脊膜瘤、垂體腺瘤及神經鞘腫瘤，較佳地多形性星形細胞瘤、星形細胞瘤、中樞神經細胞瘤、脈絡叢癌瘤、脈絡叢乳頭狀瘤、脈絡叢腫瘤、胚胎發育不良性神經上皮腫瘤、腦室膜腫瘤、原纖維性星形細胞瘤、巨細胞神經膠母細胞瘤、多形性膠質母細胞瘤(GBM)、腦神經膠瘤病、神經膠質肉瘤、血管外皮瘤、神經管胚細胞瘤、髓上皮瘤、腦膜癌病、神經母細胞瘤、神經細胞瘤、少枝星形細胞瘤、少枝膠質瘤、視神經鞘腦膜瘤、嬰兒室管膜瘤、毛細胞型星形細胞瘤、松果腺母細胞瘤、松果體細胞瘤、多形性未分化神經母細胞瘤、多形態黃星形細胞瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、蝶骨脊腦膜瘤、室管膜下巨細胞型星形細胞瘤、室管膜下瘤及三側性視網膜母細胞瘤。

在本發明之一更佳實施例中，該腦癌為多形性膠質母細胞瘤。

在本發明之一較佳實施例中，該葉黃素為蝦紅素及/或其酯。

在本發明之一較佳實施例中，該葉黃素來源於天然來源，諸如紅球藻屬(Haematococcus sp.)藻類之培養物。

在本發明之一更佳實施例中，該紅球藻屬藻類為雨生紅球藻(Haematococcus pluvialis)。

在本發明之另一較佳實施例中，該葉黃素為化學合成的。

在本發明之一較佳實施例中，葉黃素之治療有效量在經口投藥之情形下為每天約0.1mg至約10g，或在非經腸投藥之情形下為每天約0.01mg至約5g。

本發明之組合物或藥劑可單獨或與其他治療併用。在一個較佳實施例中，該組合物或藥劑不與放射線療法及/或化學療法一起使用。在另一個較佳實施例中，該組合物或藥劑係與放射線療法及/或化學療法併用。在另一較佳實施例中，該組合物或藥劑係與用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症或控制腎上腺癌、骨癌及腦癌之症狀或併發症的一或多種治療劑同時或分開投予。

在本發明之一較佳實施例中，該癌症已經以手術方式自個體移除。

本發明詳細描述於以下部分中。本發明之其他特徵、目的及優點可輕易在本發明之詳細描述及申請專利範圍中發現。

圖1展示以DMSO(對照組)或40μM蝦紅素處理24小時(A)或48小時(B)之Y1細胞的明視野顯微鏡圖。

圖2展示在以蝦紅素處理(藍線或◆)及以DMSO處理(紅線或■)後，Y1細胞之生長曲線。每次以四個獨立實驗進行細胞計數，以平均值±S.D.表示。

圖3展示在DMSO或蝦紅素存在下存活Y1細胞群的定量。**表示與對照組(DMSO處理組)比較，P<0.01。

圖4展示在以蝦紅素處理後，U87MG細胞數目減少。每次以四個獨立實驗進行細胞計數，且以平均值±S.D.表示。

圖5A及圖5B展示在以蝦紅素處理後，U87MG細胞之存活率降低。在DMSO或不同濃度之蝦紅素存在下對存活U87MG細胞群進行定量。

圖6展示在以蝦紅素處理後，M059K細胞數目減少。每次以四個獨立實驗進行細胞計數，以平均值±S.D.表示。

圖7展示在以蝦紅素處理後，M059J細胞數目減少。每次以四個獨立實驗進行細胞計數，以平均值±S.D.表示。

圖8展示在以蝦紅素處理後，U2OS細胞數目減少。每次以四個獨立實驗進行細胞計數，以平均值±S.D.表示。

除非本文另外定義，在本發明中使用之科學及技術術語應具有一般熟習此項技術者通常所理解之意義。術語之意義及範疇應為明確的；然而，若存在任何潛在不明確性，則本文所提供之定義優先於任何詞典或外來定義。

除非另外指明，否則如根據本發明所利用，以下術語應理解為具有以下意義。

如本文所使用之術語「腎上腺皮質癌(ACC)」係指起源於腎上腺皮質(產生類固醇激素之組織)的侵襲性癌。腎上腺皮質癌可於兒童及成人中以不同形式存在。兒童中之大部分腫瘤為功能性的，且男性化為目前最常呈現之症狀，其次為庫欣氏症候群及早熟症。在成人呈現之激素症候群中，單獨的庫欣氏症候群最常見，其次為混合性庫欣氏及男性化(糖皮質激素及雄激素過度產生)。女性化及康氏症候群(Conn syndrome)(鹽皮質激素過量)發生小於10%例。在少數情況下，有報告於腎上腺皮質癌中發生嗜鉻細胞瘤樣兒茶酚胺分泌過多。非功能性腫瘤(約40%，依官方數據改變)通常伴隨腹部或側腹疼痛、精索靜脈腫及腎靜脈血栓一起存在，或其可為無症狀的，且偶然地偵測到。

術語「腎上腺癌」包括(但不限於)腎上腺皮質腺瘤、腎上腺皮質癌、神經母細胞瘤及嗜鉻細胞瘤。

術語「骨癌」包括(但不限於)骨瘤、骨樣骨瘤、骨軟骨瘤、骨母細胞瘤、內生軟骨瘤、骨骼之巨細胞瘤、動脈瘤樣骨囊腫、骨骼之纖維性結構不良、骨肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤及纖維肉瘤。

術語「骨肉瘤」係指骨骼中之癌性腫瘤。具體言之，其為自間葉細胞源性原始轉化細胞引起的侵襲性惡性贅瘤(因此其為肉瘤)，且其呈現骨母細胞分化並產生惡性骨樣瘤。

術語「腦癌」包括(但不限於)神經膠質瘤、脊膜瘤、垂體腺瘤及神經鞘腫瘤，較佳地多形性星形細胞瘤、星形細胞瘤、中樞神經細胞瘤、脈絡叢癌瘤、脈絡叢乳頭狀瘤、脈絡叢腫瘤、胚胎發育不良性神經上皮腫瘤、腦室膜腫瘤、原纖維性星形細胞瘤、巨細胞神經膠母細胞瘤、多形性膠質母細胞瘤(GBM)、腦神經膠瘤病、神經膠質肉瘤、血管外皮瘤、神經管胚細胞瘤、髓上皮瘤、腦膜癌病、神經母細胞瘤、神經細胞瘤、少枝星形細胞瘤、少枝膠質瘤、視神經鞘腦膜瘤、嬰兒室管膜瘤、毛細胞型星形細胞瘤、松果腺母細胞瘤、松果體細胞瘤、多形性未分化神經母細胞瘤、多形態黃星形細胞瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、蝶骨脊腦膜瘤、室管膜下巨細胞型星形細胞瘤、室管膜下瘤及三側性視網膜母細胞瘤。

術語「多形性膠質母細胞瘤(GBM)」係指人類中發現的最高級別之神經膠質瘤(IV級)。依據WHO分類，GBM亦指「神經膠母細胞瘤」。神經膠母細胞瘤自正常腦組織產生。其可侵入且於腦內遷移遠離主要腫瘤；然而，神經膠母細胞瘤會很少擴散至體內其他處。神經膠母細胞瘤存在兩種亞型：新發性(de novo)(新或原發性)及繼發性。新發性腫瘤產生快速，且往往為突然發現。其為最常見且極具侵略性之神經膠母細胞瘤形式。在55歲及55歲以上的人中，新發性腫瘤佔神經膠母細胞瘤之大部分。繼發性神經膠母細胞瘤最常見於45歲及45歲以下的患者中，通常以低級別或中等級別星形細胞瘤開始，其由基因程序化最終會轉型成惡性、快速生長的神經膠母細胞瘤。

術語「放射線療法」係指使用高能量放射線殺死癌細胞或收縮腫瘤的一類癌症治療。用於放射線療法之放射線劑量以格雷(Gy)為單位進行量測，且取決於所治療之癌症的類型及分期而變化。

術語「化學療法」包括(但不限於)投予化學治療性化合物，諸如阿德力黴素、順鉑、小紅莓、依託泊苷、氟嘧啶、伊立替康(irinotecan)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、紫杉醇(taxol)、拓朴替康(topotecan)等。

如本文所使用之術語「葉黃素」係指在分子中除含有碳及氫之外，亦含有氧的一群類胡蘿蔔素或其衍生物。類胡蘿蔔素係由植物、真菌及一些細菌重新產生。在本發明之一較佳實施例中，葉黃素為蝦紅素或其酯。

本發明之組合物或藥劑中所含蝦紅素及/或其酯為以下式表示之類胡蘿蔔素：

其中在蝦紅素之情形下，R¹及R²均為氫，且R¹及R²各自獨立地為氫原子或脂肪酸殘基，其限制條件為在蝦紅素之酯之情形下，R¹及R²中之至少一者為脂肪酸殘基。蝦紅素之酯中脂肪酸殘基之實例包括(但不限於)：飽和脂肪酸，諸如棕櫚酸及硬脂酸；或不飽和脂肪酸，諸如油酸、亞麻油酸、α-次亞麻油酸、γ-次亞麻油酸、雙高-γ-次亞麻油酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸及二十二碳六烯酸。本發明中所使用之蝦紅素酯可為任何均質或非均質的單酯或二酯。蝦紅素具有一種結構，其中額外的側氧基及額外的羥基存在於β-胡蘿蔔素分子之各端，使得該分子不同於β-胡蘿蔔素具有較低的穩定性。另一方面，在兩端處之羥基以不飽和脂肪酸酯化的酯形式(例如，如磷蝦萃取物中獲得)較穩定。

本發明中所使用之蝦紅素及/或其酯可化學合成或來源於天然存在之產物。天然存在之產物之實例包括：紅酵母；甲殼動物，諸如劍水蚤(Tigriopus)(紅水蚤(red water flea))及磷蝦之外殼；及微藻，諸如綠藻，其含有蝦紅素及/或其酯。在本發明中，可使用藉由任何方法產生的含有蝦紅素及/或其酯之任何萃取物，只要其具有蝦紅素及/或其酯之性質。一般而言，可使用來自彼等天然存在之產物的萃取物，且萃取物可為粗品，或必要時，可經純化。在本發明中，必要時，可單獨或組合使用含有該蝦紅素及/或其酯的天然存在之產物之粗萃取物或碾碎之粉末，或經純化產物或化學合成產物。鑒於化學穩定性，較佳為使用蝦紅素之酯形式。

如本文所使用之術語「預防」係指延緩易感個體症狀之發作，減少病症或病狀出現，或抑制病症或病狀出現，或停滯病症或病狀之發展。

如本文所使用之術語「治療」指示：減輕、緩解、逆轉及/或改善病症或病狀或其一或多種症狀，或終止易感個體之疾病或病狀的症狀。

如本文所使用之術語「個體」指示動物，尤其是哺乳動物。在一個較佳實施例中，術語「個體」指示「人類」。

如本文所使用之術語「治療有效量」係指單獨或與其他用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的治療/藥劑組合使用以展示治療功效的活性成分之量。

術語「生理學上可接受之載劑」係指一般熟習此項技術者熟知用於製造醫藥或膳食組合物的溶劑、稀釋劑、黏合劑、黏著劑、佐劑、賦形劑、受體、穩定劑、類似物、調味劑、甜味劑、乳化劑或防腐劑。

如本文所使用之語「投予」或「投藥」係指可用於使本發明之組合物或藥劑能夠遞送至生物作用之所需部位的方法。此等方法包括(但不限於)：經口、十二指腸內、鼻、非經腸注射(包括靜脈內、皮下、肌內、血管內或皮內)；局部及經直腸投藥。在一較佳實施例中，本文所述之組合物及藥劑係經口投予。

除非上下文另外需要，否則單數術語應包括複數，且複數術語應包括單數。

本發明之目的之一為提供一種用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的藥劑。

本發明旨在提供用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的方法及/或藥劑。

本發明之態樣之一為提供一種用於抑制腫瘤細胞生長的方法，其包含使腎上腺皮質腫瘤細胞與包含治療有效量之至少一種葉黃素的組合物接觸。

在本發明之方法的實施中，將包含治療有效量之至少一種葉黃素的組合物投予需要治療及/或預防來抑制腫瘤細胞生長的個體，例如人類個體。

在實施本發明之方法時，可使用來自任何來源的葉黃素，不論天然抑或合成的。根據本發明之一較佳實施例，葉黃素為蝦紅素及/或其酯。在本發明之一尤佳實施例中，蝦紅素係來源於天然來源，諸如紅球藻屬藻類，例如雨生紅球藻的培養物。雨生紅球藻微藻為用於本發明方法中之蝦紅素之較佳的天然、可商業購得來源。在本發明之另一較佳實施例中，蝦紅素為化學合成的。用於製備蝦紅素的合成方法(R.D.G.Cooper等人，J.Chem Soc.Perkins Trans.I,(1975)第2195頁；F.Kienzle,H.Mayer,Helv.Chim.Acta.,(1978)第61卷，第2609頁)，以及自天然來源分離蝦紅素之方法(Tischer,Z.Physiol.Chem.,(1941)第267卷，第281頁；Seybold及Goodwin,Nature,(1959)第184卷，第1714頁)為已知的。因此，蝦紅素可以合成或自天然來源分離之純形式投予。

此外，在本發明方法之一較佳實施例中，蝦紅素係作為包含蛋白質、碳水化合物及脂肪酸之組合物之一部分投予。當使用雨生紅球藻藻類膳食作為蝦紅素之來源時，組合物較佳係以來源於微藻之形式投予，其包含微藻之天然蛋白、碳水化合物及脂肪酸組分。該微藻為可商業購得的(Cyanotech Corporation,Kailua-Kona,HI)，且通常包含以下各物作為主要組分(以重量計)：約1.5至2%蝦紅素、約15至30%蛋白質、約35至40%碳水化合物、約10至25%灰分、約5至20%脂肪及約3至10%水分。該組合物進一步包含包括以下各物之次要組分：鐵、鎂、鈣、生物素、L-肉鹼、葉酸、菸酸、泛酸，及維生素B1、B2、B6、B12、C及E。

本發明亦提供一種包含治療有效量之至少一種葉黃素及生理學上可接受之載劑的組合物，其用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症。

根據本發明的用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症之組合物或藥劑的投藥途徑可為口服或非經腸。劑型係根據投藥途徑適當選擇。其實例包括非經腸溶液、輸注溶液、散劑、顆粒劑、錠劑、膠囊、丸劑、腸溶包衣製劑、糖衣錠、供內服之液體、懸浮液、乳液、糖漿、供外部使用之液體、泥罨劑、滴鼻劑、滴耳劑、滴眼劑、吸入劑、軟膏、洗劑、栓劑及經腸養分。取決於疾病之狀況，其可單獨或組合使用。為了製備此等劑型，必要時可使用常用於醫藥製造技術領域中之輔助物質，諸如賦形劑、黏合劑、消毒劑、抗氧化劑、崩解劑、潤滑劑及調味劑。

根據本發明的用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症之葉黃素的劑量取決於投藥之目的或擬投予之個體(性別、年齡、體重等)而變化。在本發明之一較佳實施例中，葉黃素之治療有效量在經口投予之情形下為每天約0.1mg至約10g，較佳為約1mg至約4g，更佳為約4mg至約500mg；或在非經腸投藥之情形下為每天約0.01mg至約5g，較佳為約0.1mg至約2g，更佳為約0.1至約500mg。

根據本發明之組合物不僅可作為如上文所描述之醫藥劑使用，亦可作為如以下之管制產品類別使用：「準藥物」、化妝品、功能性食品、營養補充物、食品及飲料，及其他類似產品。當用作準藥物或化妝品時，必要時，該組合物可與常用於準藥物或化妝品或其他技術之領域中的各種輔助物質結合使用。或者，當用作功能性食品、營養補充物或食品及飲料時，必要時，該藥劑可與常用於食品之添加劑，例如甜味劑、香辛料、調味料、消毒劑、防腐劑、殺菌劑及抗氧化劑結合使用。必要時，該藥劑可呈所需形式使用，諸如溶液、懸浮液、糖漿、顆粒、乳膏、糊狀物或膠狀物，或可經成形。包含在此等產品中的成分之比率不受特別限制，且可根據預定目的、使用模式及劑量適當選擇。

本發明之組合物或藥劑可單獨或與其他治療組合使用。在一個較佳實施例中，該組合物或藥劑係與放射線療法及/或化學療法組合使用。在另一個較佳實施例中，該組合物或藥劑係與用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之腎上腺皮質癌或管理腎上腺癌、骨癌及腦癌之症狀或併發症的一或多種治療劑同時或分開投予。

現已大體上描述本發明，經由參考如下實例可更容易理解本發明，該等實例提供用於製造本發明之醫藥組合物及使用其治療癌症的例示性方案。該等實例僅出於說明之目的提供，且不意欲以任何方式限制本發明之範疇。已儘力確保所用數值(例如，量、溫度等)之準確性，但當然應允許一定實驗誤差及偏差。

實例 實例1：抑制腎上腺腫瘤細胞株

細胞培養及藥物處理

在37℃下，使小鼠腎上腺皮質Y1細胞株(ATCC,ATCC® CCL-79^TM)在含5% CO₂之潮濕氛圍中於補充有10%胎牛血清的達爾伯克氏改良型伊格爾培養基(Dulbecco's modified Eagle medium，DMEM)-F12中生長。

將蝦紅素(型號：ATP-9601A；沅育生物科技有限公司(台灣))以20mM濃度溶解於二甲亞碸(DMSO)中作為儲備溶液。

在分析之前，將Y1細胞與DMSO或40μM之蝦紅素一起培養1、2或3天。

MTT分析

在處理之後，以PBS洗滌細胞，接著在每個孔中添加1ml MTT(溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓鹽)溶液(在PBS中2mg/ml)。在37℃下培養3小時之後，添加2ml DMSO，且在暗處培養細胞30分鐘。在570nm波長(OD570)下量測吸光度。

結果

在1、2或3天處理後，相較於對照組(DMSO處理組)，蝦紅素處理組中Y1細胞之數目減少(參看圖1及圖2)。此結果進一步藉由MTT分析確認，該MTT分析量測粒線體丁二酸去氫酶之活性且代表細胞存活率。

如圖3所示，相較於DMSO處理組，在蝦紅素處理48小時後，該處理組之OD570減少。此數據可證明蝦紅素有效抑制腎上腺皮質腫瘤細胞生長。

實例2：抑制腦腫瘤細胞株

細胞培養及藥物處理

在37℃下，使人類U87MG(ATCC,ATCC® HTB-14^TM)細胞株在含5% CO₂之潮濕氛圍中於補充有10%胎牛血清的DMEM培養基中生長。在37℃下，使M059K(ATCC,ATCC® CRL-2365^TM)及M059J(ATCC,ATCC® CRL-2366^TM)細胞株在含5% CO₂之潮濕氛圍中於補充有10%胎牛血清的達爾伯克氏改良型伊格爾培養基(DMEM)-F12中生長。

將蝦紅素以20mM濃度溶解於二甲亞碸(DMSO)中作為儲備溶液。

將U87MG、M059K及M059J細胞株以DMSO，或100、200或400μM之蝦紅素處理24小時或48小時，之後進行細胞數目計數。

結果

如圖4所示，蝦紅素以劑量依賴性及時間依賴性方式抑制U87MG細胞生長。亦藉由MTT分析確認此結果(參看圖5)。如圖6及圖7所示，蝦紅素亦抑制M059K(圖6)及M059J(圖7)細胞生長。此等數據表示，以蝦紅素進行之處理可以劑量依賴性方式抑制神經膠母細胞瘤細胞生長。在不受理論限制的情況下，一般相信蝦紅素可穿透BBB(血腦障壁)，表示蝦紅素可作為抗神經膠母細胞瘤之化合物。

實例3：抑制骨骼腫瘤細胞株

細胞培養及藥物處理

在37℃下，使人類U2OS(ATCC,ATCC® HTB-96^TM)細胞株在含5% CO₂之潮濕氛圍中於補充有10%胎牛血清的DMEM培養基中生長。

將蝦紅素以20mM濃度溶解於二甲亞碸(DMSO)中作為儲備溶液。

U2OS細胞株以DMSO，或100、200或400μM之蝦紅素處理72小時，接著進行細胞數目計數。

結果

如圖8所示，蝦紅素以劑量依賴性方式抑制U2OS細胞生長。此等數據表示，以蝦紅素進行之處理可以劑量依賴性方式抑制骨肉瘤細胞生長。此數據可證明蝦紅素可有效抑制骨肉瘤細胞生長。

此等數據表示，葉黃素(蝦紅素)可在無任何放射線療法及/或化學療法情況下有效抑制腎上腺皮質腫瘤、骨骼腫瘤及神經膠母細胞瘤生長。

預期熟習此項技術者能想到如以上說明性實例中所闡述的本發明之諸多修改及變化。因此，只有在所附申請專利範圍中所載限制可用於侷限本發明。

參考文獻

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Claims

一種包含蝦紅素及/或其酯之組合物的用途，其係用於製造抑制腫瘤細胞生長的藥劑，其中該腫瘤細胞選自由腎上腺腫瘤細胞、骨骼腫瘤細胞以及腦腫瘤細胞組成之群。
一種包含蝦紅素及/或其酯之組合物的用途，其係用於製造預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症的藥劑。
如請求項2之用途，其中該腎上腺癌係選自由以下組成之群：腎上腺皮質腺瘤、腎上腺皮質癌、神經母細胞瘤及嗜鉻細胞瘤。
如請求項3之用途，其中該腎上腺癌為腎上腺皮質癌。
如請求項2之用途，其中該骨癌係選自由以下組成之群：骨瘤、骨樣骨瘤、骨軟骨瘤、骨母細胞瘤、內生軟骨瘤、骨骼之巨細胞瘤、動脈瘤樣骨囊腫、骨骼之纖維性結構不良、骨肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤及纖維肉瘤。
如請求項5之用途，其中該骨癌為骨肉瘤。
如請求項2之用途，其中該腦癌係選自由以下組成之群：神經膠質瘤、脊膜瘤、垂體腺瘤及神經鞘腫瘤，較佳地多形性星形細胞瘤、星形細胞瘤、中樞神經細胞瘤、脈絡叢癌瘤、脈絡叢乳頭狀瘤、脈絡叢腫瘤、胚胎發育不良性神經上皮腫瘤、腦室膜腫瘤、原纖維性星形細胞瘤、巨細胞神經膠母細胞瘤、多形性膠質母細胞瘤(GBM)、腦神經膠瘤病、神經膠質肉瘤、血管外皮瘤、神經管胚細胞瘤、髓上皮瘤、腦膜癌病、神經母細胞瘤、神經細胞瘤、少枝星形細胞瘤、少枝膠質瘤、視神經鞘腦膜瘤、嬰兒室管膜瘤、毛細胞型星形細胞瘤、松果腺母細胞瘤、松果體細胞瘤、多形性未分化神經母細胞瘤、多形態黃星形細胞瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、蝶骨脊腦膜瘤、室管膜下巨細胞型星形細胞瘤、室管膜下瘤及三側性視網膜母細胞瘤。
如請求項7之用途，其中該腦癌為多形性膠質母細胞瘤。
如請求項1至8中任一項之用途，其中該蝦紅素及/或其酯係來源於天然來源及/或化學合成的。
如請求項9之用途，其中該蝦紅素及/或其酯係來源於紅球藻屬(Haematococcus sp.)藻類之培養物。
如請求項10之用途，其中該紅球藻屬藻類為雨生紅球藻(Haematococcus pluvialis)。
如請求項1至8中任一項之用途，其中蝦紅素及/或其酯之量為每天約0.01mg至約10g。
如請求項1至8中任一項之用途，其中該藥劑係單獨使用或與放射線療法及/或化學療法併用。
如請求項1至8任一項之用途，其中該藥劑係與用於預防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成之群之癌症或管理腎上腺癌、骨癌及腦癌之症狀或併發症的一或多種治療劑同時或分開投予。
如請求項1至8中任一項之用途，其中該癌症已經以手術方式自個體移除。