KR0173195B1 - It-62-b 물질 및 이를 함유하는 의약조성물 - Google Patents

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Abstract

하기 식(Ⅰ)
로 표시되는 IT-62-B 물질, 그의 그의 생산 방법, 이 물질을 유효성분으로 함유하는 의약조성물, 이와 같은 물질을 투여함으로써 박테리아 원인 전염병 및 종양의 치료방법.
본 발명에 따른 화합물은 그램양성균 및 일부의 그램음성균에 대해 양호한 항균작용을 가지며, 사람 비인강암과 같은 종양에 대해 우수한 항종양 작용을 가지므로 의약으로서 유용하다.

Description

[발명의 명칭]
IT-62-B 물질 및 이를 함유하는 의약조성물 (SUBSTANCE IT-62-B AND MEDICINAL COMPOSITION CONTAINING THE SAME)
[도면의 간단한 설명]
제1도는 실시예 1에서 얻어진 본 발명 물질의 자외선 흡수 스펙트럼을 나타낸다.
제2도는 실시예 1에서 얻어진 본 발명 물질의 적외선 흡수 스펙트럼을 나타낸다.
제3도는 실시예 1에서 얻어진 본 발명 물질의1H-NMR 흡수 스펙트럼을 나타낸다.
[기술분야]
본 발명은 신규의 IT-62-B 물질, 그의 생산 방법, 이 물질을 함유하는 의약조성물, 이와 같은 물질을 투여함으로써 박테리아 원인 전염병 및 종양의 치료방법에 관한 것이다.
종래부터 미생물이 광범위한 화학구조상의 특징을 가지며, 항균성, 항종양성 등의 약리활성을 갖는 각종 물질을 생산하는 것이 알려져 있다.
따라서, 본 발명은 미생물을 이용하여 보다 우수한 약리활성을 갖는 물질을 얻는 것을 목적으로 한다.
[발명의 상세한 설명]
이러한 실정에 감안하여, 본 발명자들은 천연토양으로부터 많은 미생물을 분리하여 유용한 약리활성을 갖는 물질의 생산능에 대하여 검색한 결과, 스트렙토마이세스 속에 속하는 미생물의 스트렙토마이세스 에스피.(Streptomyces sp.) IT-62주가 우수한 항균성 및 항종양성을 나타내는 신규 물질 IT-62-B를 생산하는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 화합물에 유사한 구조를 갖는 미생물 생산물로서는 TAN-1120이 보고되어 있으나(일본국 특개평 288892/1990), 본 발명 물질은 옥사졸리신이 새로운 환축합한 구조를 갖는 신규한 화합물이다.
즉, 본 발명은 다음 식(1)
로 표시되는 IT-62-B 물질을 제공하는 것이다.
본 발명은 스트렙토마이세스 속에 속하고 IT-62-B 물질의 생산능력을 갖는 미생물을 배양하여 배앙물중의 본 화합물을 생산, 축적하고 분리함을 특징으로 하여 IT-62-B 물질을 제조하는 방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 IT-62-B 물질을 유효성분으로 함유하는 의약, 항균제 및 항종양제에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 IT-62-B 물질과 의약적으로 허용되는 담체를 함유하는 의약 조성물에 관한 것이다.
더욱이, 본 발명은 IT-62-B 물질의 유효량을 환자에게 투여함을 특징으로 하는 박테리아 전염병 및 종양의 치료방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 IT-62-B 물질을 의약으로의 사용에 관한 것이다.
[발명을 실시하기 위한 최량의 형태]
본 발명에 따른 IT-62-B 물질은 일반식(I)으로 표시되며, 이 화합물에는 부제탄소로 인한 이성체가 존재하며, 이들 이성체 및 이들의 혼합물은 본 발명에 속한다. 본 발명에 따른 물질은 수화물의 형태로 존재할 수 있으며, 이 수화물도 본 발명에 속한다.
본 발명에 따른 IT-62-B 물질은 본 물질의 생산능력을 갖는 균주(이하, IT-62-B 물질 생산균이라 한다)를 적당한 조건하에서 배양함으로서 제조할 수 있다.
IT-62-B 물질 생산균은 스트렙토마이세스 속에 속하는 균주를 들 수 있으며, 그의 일례로서는 스트렙토마이세스 에스피. IT-62주(Streptomyces sp. strain IT-62)를 들 수 있다. 이 균주는 발명자들이 중화인민공화국 위글주의 토양에서 분리한 스트렙토마이세스 속에 속하는 균주이며, 일본국 통상산업성 공업기술원 생명공학기술연구소에 미생물 표시 Strain IT-62, 기탁번호 FERM BP-4666으로 기탁되었다.
IT-62주를 인터내셔널 저널 시스테마틱 박테리올로지(International Journal of Systematic Bacteriology) 16(3), 313-340, 1960에 기재된 방법에 준하여 검토한 균학적 성질은 다음과 같다.
(a) 형태 :
포자형성균사의 분지법 : 단순분지
포자형성의 형태 : 직상(Straight) 또는 굴곡상(flexibilis), 때때로 루프상(hook), 포자의 형태는 원통형.
포자의 수 : 10~50포자 또는 그 이상.
포자의 표면구조 : 평활(smooth)
포자의 크기 : 0.5~0.8×0.7~1.1㎛.
편모포자의 유무 : 무
포자낭의 유무 : 무
포자가지의 착생위치 : 기균사
균핵형성능 : 무
(b) 각종배지에서의 생육상태
각종배지에서 생육상태를 표 1에 나타낸다. 분류색명은 재단법인 일본 색채연구소 감수 『표준색채 도표 A, 1981년』으로 나타냈다. 또 상세한 색은 콘테이너 코포레이션 오브 아메리카(Container Corporation of America)의 더 칼라 하모니 매뉴얼(The Color Harmony Manual), 제4판 1958년의 색코트로 괄호내에 덧붙였다.
(c) 균체조성 :
일본 방선균학회편 『방선균의 동정실험법-HPLC에 의한 정성분석·정량분석, 1~8면, 1989년』에 기재된 고속액체크로마토그래피법에 의해 전균체의 산가수분해물을 분석한 결과, LL형의 디아미노피메린산이 검출되었다.
이상의 균학적 성질, 특히 기생균사(基生菌絲)로부터 다수의 포자의 연쇄를 갖는 기균사를 형성하고, 세포벽 조성의 아미노산이 LL-디아미노피메린산을 함유하며, 편모포자나 포장낭을 형성하지 않는 성질을 갖는 것으로부터 본 균주는 스트렙토마이세스 속에 속하는 것이 명백하다. 따라서 본 균주를 스트렙토마이세스 에스피. IT-62(Streptomyces Sp. IT-62)로 칭하였다.
본 발명에 따른 IT-62-B 물질은, 예를 들면 IT-62주 또는 변이주 등의 스트렙토마이세스 속에 속하는 각종 IT-62 물질 생산균을 적당한 배지에서 배양하고, 다음에 배양액으로부터 본 발명 물질을 함유하는 조(粗) 추출물을 분리하고, 다시 조추출물로부터 IT-62-B 물질을 분리, 정제함으로서 제조할 수 있다.
상기 미생물의 배양은 원칙적으로 일반 미생물의 배양에 준하여 행하나, 통상액체 배양에 의한 진탕배양법, 통기교반 배양법 등의 호기적 조건하에서 행하는 것이 바람직하다.
배양에 이용되는 배지로서는 IT-62 물질생산균이 이용할 수 있는 영양원을 함유하는 배지이면 좋고, 각종의 합성배지, 반합성배지, 천연배지 등을 어느 것이라도 이용할 수 있다. 배지의 탄소원으로서는 글루코오즈, 슈크로오즈, 프락토오즈, 글리세린, 덱스트린, 전분, 당밀, 콘스팁 리쿼, 유기산 등을 단독 또는 2종 이상 조합한 것이 이용될 수 있고 ; 질소원으로서는 파르마 메디아(Pharma media), 펩톤, 육즙, 효모엑기스, 대두분, 카페인, 아미노산, 요소 등의 유기질소원, 질산나트륨, 질산암모늄 등의 무기질소원을 단독 또는 2종 이상 조합한 것이 이용될 수 있다. 또한 배지에는 나트륨염, 칼륨염, 마그네슘염, 인산염, 기타 중금속염 등이 필요에 따라 적당히 첨가될 수 있다.
또한, 배양중 발포가 현저할 때는, 예를 들면 대두유, 아마인유 등의 식물유, 옥타데카놀, 테트라데카놀, 헵타데카놀등의 고급 알코올류, 각종 실리콘 화합물 등의 소포제를 적당히 배지 중에 첨가할 수 있다.
배지의 pH는 중성부근으로 하는 것이 바람직하다. 배양온도는 IT-62 물질 생산균이 양호하게 생육하는 온도, 통상 20~37℃, 특히 25~30℃ 부근으로 유지하는 것이 좋다. 배양시간은 액체 진탕배양 및 통기교반 배양의 어느 경우도 4~7일간이 바람직하다.
상술한 각종 배양조건은 사용물질의 종류나 특성, 외부조건 등에 따라 적의 변경할 수 있으며, 또한 각각에 따라 상기 범위로부터 최적조건을 선택, 조절할 수 있다.
배양액에서 IT-62-B 물질을 함유하는 조추출물의 분리는 발효 생산물을 채취하는 일반적인 방법에 따라 행할 수 있으며, 예를 들면, 용매추출, 액체교환, 크로마토그래피, 결정화 등의 수단을 단독 또는 2종 이상을 임의의 순서로 조합하여 사용할 수 있다. 보다 상세히는, 상기 배양에서 생산되는 IT-62-B 물질을 주로 하여 배양균체중에 존재하기 때문에, 통상의 방법에 따라, 우선 여과, 원심분리 등을 행하고, 배양여액과 균체고형분을 분리하여, 얻어진 IT-62-B 물질을 함유하는 균체고형분에 대해 메탄올, 아세톤 등의 용매를 사용하여 IT-62-B 물질의 용출을 행하고, 이어서 감압하에서 용매를 증류하면 IT-62-B 물질을 함유하는 조농축액을 얻을 수 있다. 이 조농축액에 에틸아세테이트, 클로로포름, 부탄올 등의 물과 혼합하지 않는 유기용매를 가하여 IT-62-B 물질을 감압하에서 증류하면 IT-62-B 물질을 함유하는 조성물을 얻을 수 있다. 필요에 따라 수산화나트륨 또는 염산으로 pH를 조절하든가, 또는 공업용 식염을 가하여 추출효율을 높이든가, 에멀젼 생성방지 등의 방법을 강구할 수 있다.
또한, 조추출물로부터 IT-62-B 물질을 분리, 정제하기 위하여는 통상의 지용성 저분자 물질의 분리, 정제수단, 예를 들면 실리카겔, 알루미나, 마크로포로우스(macroporous) 비이온흡착수지 등의 흡착제에 의한 각종 흡착 크로마토그래피 및 ODS-결합형 실리카겔 등을 사용하는 역상크로마토그래피가 사용될 수 있다. 이들중, 용출용매에 클로로포름, 클로로포름/메탄올, 클로로 포름/메탄올/벤젠, 톨루엔/메탄올 등의 혼합용매계를 이용하는 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 및 아세토니트릴/물, 메탄올/물 등의 홉합용매계를 용출에 이용하는 역상 크로마토그래피가 특히 바람직하다. 또한, 다시 정제할 필요가 있는 경우에는 상기 크로마토그래피를 반복하든가, 또는 용출용매로서 클로로포름, 메탄올 등을 이용한 세파덱스 LH-20(Pharmacia AB제)에 의한 겔여과 크로마토그래피 등을 적의 조합하여 행함으로써 고순도의 IT-62-B 물질을 얻을 수 있다.
또한, 정제공정중의 IT-62-B 물질의 확인은 본 물질에 의해 증식억제 작용으로 인식되는 미생물, 예를 들면 마이크로코카스 루테우스(Micrococuss luteus)ATTC 9341을 사용하는 바이오앗세이법, 사람 비인강암(鼻咽腔癌) 유래의 주화배양세포(KB 세포)에 대한 살균세포 효과를 조사하는 방법 및 고속액체크로마토그래피를 사용하여 검출하는 방법을 병용하여 행하는 것이 좋다.
전술한 방법으로 정제된 IT-62-B 물질이 의약조성물로 사용되는 경우의 약학적 투여형태로서는, 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 세립제, 액제, 환약, 유탁제, 현탁제 등의 경구제 ; 주사제, 좌제, 연고제, 플래스터, 습포제, 에어로졸, 점안제 등의 비경구제제를 들 수 있다. 이들 투여형태의 제제는 각각 당분야에 통상의 지식을 가진 자에게 공지된 통상의 방법에 따라 제제될 수 있다.
고형 경구제제를 조제하는 경우, 부형제를 첨가할 필요가 있으며, 또한 필요에 따라 본 발명의 활성성분에 결합제, 붕해제, 활택제, 착색제, 향료 등을 첨가하고 이들 혼합물을 당분야의 통상의 방법에 따라 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 세립제 등으로 할 수 있다. 부형제의 예로서는 락토오즈, 슈크로오즈, 전분, 탈크, 스테아린산 마그네슘, 결정셀루로오즈, 메틸셀루로오즈, 카르복시메틸셀루로오즈, 글리세롤, 알긴산 나트륨, 아라비아검 등을 들 수 있다. 결합제의 예로서는 폴리비닐알코올, 폴리비닐에테르, 에틸셀루로오즈, 아라비아검, 셀락, 슈크로오즈 등을 들 수 있다. 활택제의 예로서는 스테아린산 마그네슘 및 탈크를 들 수 있다. 그 외에 통상 알려진 착색제, 붕해제 등을 사용할 수 있다. 정제는 공지의 방법에 의해 당의정으로 할 수 있다.
주사제를 제조하는 경우, 본 발명의 활성성분에 pH 조정제, 완충액, 안정화제, 등장전달제, 국부마취제 등을 첨가하고 이 혼합물을 정맥, 근육내, 피하, 피내, 복강내 주사제로 할 수 있다. pH 조정제 및 완충액으로서는 시트르산 나트륨, 아세트산 나트륨, 인산나트륨 등을 사용할 수 있다. 안정제로는 피로 아황산나트륨, 에틸렌디아민테트라아세트산, 티오글리콜산, 티오아세트산 등을 사용할 수 있다.
좌제는 본 발명의 활성성분의 베이스를 가하고, 필요에 따라 계면활성제 등을 가한 후, 당분야에 공지된 방법에 따라 제조할 수 있다. 베이스로서는, 예컨대, 마크로골, 라놀린, 카카오버터, 지방산, 트리글리세라이드, 위테폴(Dynamit Nobel 사제)과 같은 유성베이스를 사용할 수 있다.
전술한 각종 투여형태의 제제에 결합되는 본 발명에 따른 활성성분의 양은 투여경로, 나이, 성별, 투여되는 환자의 증상, 사용되는 화합물의 종류, 기타 조건에 따라 다르나 일반적으로 0.005~20mg/일의 양을 1회 또는 2~4회 분할 투여할 수 있다.
[실시예]
이하, 실시예 및 시험예를 들어 더 구체적으로 본 발명을 설명하나, 본 발명은 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
[본 발명 IT-62-B 물질의 제조]
(a) 배양공정
글루코오즈 0.5%, 가용성 전분 2.4%, 우육엑기스 0.3%, 효모엑기스 0.5%, 펩톤 0.5%, 콘스팁리쿼 0.4%, 염화코발트 0.002% 및 탄산칼슘 0.4%로 된 배지(pH 7.2) 100㎖를 500㎖의 삼각플라스크에 넣고, 멸균후, 스트렙토마이세스 에스피. IT-62주(기탁번호 FERM BP-4666)을 백금 루프량으로 접종하고, 27℃에서 2일간 회전진탕 배양했다(220rpm, 진폭 7㎝).
(b) 분리공정
상기 공정에서 얻어진 배양액(40ℓ, pH 7.6)을 채취하고, 원심분리, 여과, 배양균체를 아세톤(5ℓ)으로 2회 추출했다. 이 아세톤 추출액을 감압농축하고, 얻어진 농축액을 묽은 수산화나트륨 수용액으로 pH 8.0으로 조정하고, 에틸아세테이트(2ℓ)로 2회 추출했다. 이 에틸아세테이트 추출획분을 감압농축하여 얻어진 유상물질 11g을 클로로포름(40㎖)에 용해하고, 다시 n-헥산(120㎖)을 가하여 침전시키고, 얻어진 침전물을 n-헥산으로 세정후, 건조하여 조추출물 2.7g을 얻었다.
(c) 분리, 정제공정
상기 조추출물을 클로로포름에 용해하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(Merck AG제 실리카겔 60, 내경 4.1㎝×길이 25㎝)에 걸고, 먼저 클로로포름, 이어서 클로로포름/메탄올(50:1 및 25:1 v/v)의 혼합용매를 사용하여 구배용출했다. 용출획분은 마이크로코카스 루테우스 ATCC 9341을 사용하는 바이오앗세이 법에 의해 IT-62-B 물질을 함유하는 활성획분을 모으고, 용매를 증류후, 건고하여 유상물질 155㎎을 얻었다.
얻어진 유상물질중 75㎎을 클로로포름/메탄올(1:1 v/v)에 용해하고, 겔여과 크로마토그래피(Pharmacia AB제품, 세파덱스 LH-20, 내경 2.0㎝×길이 92㎝)에 걸고, 클로로포름/메탄올(1:1 v/v)로 용출했다. IT-62-B 물질을 함유하는 활성획분을 모으고, 용매를 증류하여 유상물질 26㎎을 얻었다. 얻어진 유상물을 아세토니트릴/물(2:3 v/v)에 용해하고, ODS 결합형 실리카겔 칼럼(야마젠사, 울트라펙, ODS, 30~50㎛, 내경 1.0㎝×길이 50㎝)을 사용한 역상액체 크로마토그래피에 걸고, 용매로서 아세토니트릴/물(2:3 v/v)을 사용하여 유속 1.5㎖/분으로 용출했다. 용출획분을 바이오앗세이법 및 고속액체 크로마토그래피법에 의해 검출하여 IT-62-B 물질을 함유하는 활성획분을 모으고, 유기용매를 감압증류한 후, 수용액을 동결건조하여 IT-62-B 물질 12㎎을 적색분말로 얻었다.
얻어진 IT-62-B 물질의 물리화학적 성질을 아래에 나타냈다.
(1) 형상 : 적색분말
(2) 실험식 :
CHNO(고분해능 패스트 아토믹 봄바르드멘트 메스스펙트로메토리법에 의해 측정 CHNONa로서, 실험치 : 792.294 ; 계산치 : 792.284).
(3) 분자량:
769(패스트 아토믹 봄바르드멘트 메스스펙트로메토리로 측정)
(4) 비선광도 :
[α] +360°(, 메탄올)
(5)자외선 흡수스텍트럼, 메탄올 중,
λmax (nm) (ε) :
233(33100), 251(23400), 289(6600), 480(11300), 495(11400), 530(6200 sh)(제1도 참조)
(6) 자외선 흡수스텍트럼, KBr 정제법,
ν max (cm-1)
3435, 2970, 2935, 1710, 1620, 1580, 1415, 1285, 1210, 1120, 1035, 995(제2도 참조)
(7) 헥자기공명 스텍트럼 :
중클로로포름 용액 중에서 측정한 400MHz1H-NMR 스펙트럼(제3도) 및 100MHz13C-NMR 스펙트럼의 화학 시프트치를 표2 및 표3에 나타낸다.
상기 위치는 하기 위치의 프로톤을 나타낸다.
(8) 용해성 :
메탄올, 에탄올, 아세톤, 클로로포름 및 디메틸술폭시드에 쉽게 용해하나, n-헥산, 에테르 및 물에는 난용이다.
(9) 융점 : 153~155℃
(10) 고속액체크로마토그래피 :
하기 분석조건하에서 유지시간(tR) 약 6.9분에 피크가 주어진다.
칼럼 : 이너토실 ODS-2, 5㎛(내경 4.6mm × 길이 150mm, GL Science Co. Ltd제)
이동층 : 아세토니트릴/0.05% 트리플루오로아세트산 수용액(50:50 v/v)
유속 : 1㎖/분
검출 : 210nm, 0.04 a.u.f.s.
[시험예 1 ]
(1) IT-62-B 물질의 항균활성의 측정 :
본 발명 화합물의 각종세균에 대한 최소발육저지농도(MIC)를 일본 화학용법학회 MIC 측정법(일본화학요업학회지, 제29권, 제1호, 76~79면, 1981년 참조)에 따라 측정했다. 즉, 각 소정 농도의 본 발명 화합물을 함유하는 밀러-힌톤(Miller-Hint on) 한천배지(Difco Co.제)를 사용하고, 여기에 이 배지에서 증균(增菌)시킨 각 공시균을 106세포/㎖에 희석하여 접종하고, 37℃에서 18시간 배양한 후, 공시균의 생육상황을 공찰하여 완전히 발육이 저지된 최소농도를 갖고 MIC치(㎍/㎖로) 했다(단, 5개 이하의 집락의 경우는 발육저지로 간주했다). 이 결과를 표 4에 나타냈다.
[시험예 2]
[IT-62-B 물질의 항종양 활성의 측정]
A. 사람 비인강암 유래의 주화배양세포에 대한 50% 증식억제농도의 측정 :
사람비인강암 유래의 주화배양세포(KB세포)에 대한 50% 증식억제농도(IC)를 측정했다. 즉, 사람 비인강암 유래 KB페소(2×10 세포/㎖ 배지)를 10% 송아지혈청을 첨가한 Eagle's minimal essential medium에 심고, 3㎖를 플라스틱 패트리디쉬에 파종하고 탄산가스 인큐베이터(5% CO)중, 37℃에서 배양했다. 하룻밤 배양후, 본 발명 화합물을 1㎍/㎖에서 10배 희석에 의해 1×10 ㎍/㎖까지의 농도까지 희석하여 첨가했다. 3일간 배양후, 세포를 패트리디쉬 표면에서 트립신을 사용하여 박리하고, 트리판 블루를 사용한 색소배제법으로 생세포수를 광학현미경하에서 카운트하여, 대조에 비해 실질 50%의 증식저해를 나타내는 농도(IC치)를 산출했다. 그 결과, IC은 0.06㎍/㎖이었다.
B. 복강내에 이식한 쥐 백혈병 P388 세포에 대한 생존효과 및 독성시험 :
본 발명에 따른 화합물의 항종양 활성을 쥐 백혈병(P388세포)에 대한 생존효과로 판단했다. 3마리의 숫컷 CDF마우스(6주령)를 투여군 시험동물로 사용하고, 비처리된 10마리를 대조군으로 하였다.
쥐 백혈병 P388 세포(1×10 세포)를 모든 마우스의 복강내에 이식했다. 이식 1일후(제1일), 생리식염수중 디메틸술폭시드의 3.5% 용액에 용해한 IT-62-B 물질을 투여군의 마우스에 0.25㎎/㎏ 및 0.74㎎/㎏으로 복강내에 투여하고, 비투여의 콘트롤군 마우스의 생존일을 관찰했다. 이를 하기 표 5에 나타낸다.
생존증가율은 각각의 생존일로부터 다음 식에 따라 계산한 바 119%이었다.
생존증가율=[(투여균의 평균생존일수/비처리 대조군의 평균일수)-1]×100(%)
본 발명의 물질 IT-62-B는 생존일 및 생존율 증가율 계산하기 위하여 마우스의 복강내에 복강내에 투여하였다. 이 시험의 관찰에서, 마우스의 평균 생존일은 놀랍게도 거의 26이었다. 이 생존일은 미투여 콘트롤군의 평균생존일에 비해 약2배이었다. 또한 0.74㎎/Kg/day의 수준으로 투여하고 평균생존일을 관찰하였다. 이 투여 수준에서 이 물질은 상당히 낮은 생존율(약 4.7일)을 나타내었으며, 이는 독성위험이 다량 투여수준에서 증가함을 나타낸다.
따라서, 본 발명의 물질은 낮은 수준으로 사용될 때는 독성이 없다는 결론에 이르렀다.
[결과]
시험예 1로부터 명백한 바와 같이, 본 발명의 IT-62-B 물질은 그램 양성균과 일부의 그램음성균에 대해 항균활성을 나타낸다. 또한, 시험예 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화합물은 사람 비인강암 유래의 주화배양세포(KB세포)에 대한 50% 증식억제 농도(IC)는 0.006㎍/㎖이고, 쥐 백혈병 p388세포를 복강내에 이식된 마우스의 생존에서 119%의퍼센트 증가를 나타냈다. 따라서, 본 발명 화합물은 생체내 및 생체외에서 강한 항종양 활성을 나타낸다.
[산업상이용가능성]
본 발명의 IT-62-B 물질은 그램양성균 및 일부의 그램음성균에 대해 항균활성을 가짐과 동시에 사람비 인강암 등의 종양에 대해서도 우수한 항종양활성을 가지며, 의약으로서 유용하다.

Claims (2)

  1. 하기 식(I)로 표시되는 IT-62-B 물질.
  2. 트렙토마이세스 에스피.를 배지에서 배양하여 배양액에 제1항 기재의 IT-62-B 물질을 축적한 후, IT-62-B 물질을 분리함을 특징으로 하는 제1항 기재의 IT-62-B 물질의 생산방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6133194A (ja) * 1984-07-25 1986-02-17 Sanraku Inc 新規アントラサイクリン抗生物質
JPS62238298A (ja) * 1986-04-08 1987-10-19 Sanraku Inc 新規アントラサイクリン抗生物質ｄｃｐ−１及び２
JP2779652B2 (ja) * 1988-12-27 1998-07-23 武田薬品工業株式会社 生理活性物質ｔａｎ―１１２０，その還元体，それらの製造法および用途ならびに微生物

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