JPWO2015129622A1

JPWO2015129622A1 - 液体クロマトグラフィー用充填剤及び液体クロマトグラフィー用カラム

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Publication number: JPWO2015129622A1
Application number: JP2016505199A
Authority: JP
Inventors: 修弥中島; 岡田　由治; 由治岡田; 英幸近藤
Original assignee: Showa Denko KK
Current assignee: Resonac Holdings Corp
Priority date: 2014-02-28
Filing date: 2015-02-23
Publication date: 2017-03-30
Anticipated expiration: 2035-02-23
Also published as: JP6392318B2; EP3112858A1; CN105940298B; EP3112858B1; EP3112858A4; US20170007981A1; TW201542597A; TWI643875B; WO2015129622A1; US20190015813A1; CN105940298A

Abstract

［課題］耐久性に優れた液体クロマトグラフィー用充填剤及び該充填剤を充填した液体クロマトグラフィー用カラムを提供する。［解決手段］ポリビニルアルコール樹脂を含む親水性の樹脂に、スペーサーを介して、式（１）（Ｒ1は水素原子、または炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ2は水酸基を１個以上有する炭素数１〜６のアルキル基を示す。※は、スペーサーとの結合位置を示す。）で示されるアミノ基が結合していることを特徴とする、液体クロマトグラフィー用充填剤。

Description

本発明は、耐久性に優れた液体クロマトグラフィー用充填剤及び該充填剤を充填した液体クロマトグラフィー用カラムに関する。

糖類は、食品中などに多く含まれており、その分析は食品産業などにおいて極めて重要である。そして、その分析には液体クロマトグラフィーが広く用いられている。液体クロマトグラフィーによる糖類の分析には、配位子交換、親水性相互作用カラムが主に用いられている。

配位子交換カラムを用いた分析では、アノマー分離を抑制するために高温条件下で分析する必要がある。たとえば、特開昭６１−７１３５４号公報（特許文献１）には、スルホン酸基の対イオンとして、銀ならびにアルカリ（土類）金属イオンを用いたイオン交換樹脂粒子を充填剤としたカラムが開示されている。この特許文献１では、カラム温度を６０℃で、分離が行われている。しかしながら、かかる高温下では、充填剤にイオン結合している金属イオンが脱離しやすく、充填剤の経時変化の問題がある。

親水性相互作用カラムを用いた場合、ポリアクリルアミド樹脂からなる充填剤を用いたカラムがある（たとえば、特開２００６−１３７９４４号公報：特許文献２）。しかしながら、配位子交換カラムと同様にアノマー分離を抑制するために高温条件下にする必要がある。

一方、アミノ基を結合させた充填剤を用いたカラム（以下アミノカラムとする）を用いると、アミノ基のアルカリ性によってアノマー分離を抑制することができ、高温条件を必要としないため、アミノカラムは糖分析において広く用いられている。（Ｊ．Ｃ．Ｌｉｎｄｅｎｅｔａｌ．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ａ１０５（１９７５）１２５−１３３）しかしながら、アミノカラムのほとんどはシリカゲルを基材に用いており、アミノ基を結合させたシリカゲルは安定性に乏しく、カラムの耐久性に問題がある。

アミノ基を結合させ、かつ化学的な安定性を有する材料としては、有機高分子担体を用いるものがある。有機高分子担体にアミノ基を結合した材料として、ポリアクリレート系樹脂やスチレン‐ジビニルベンゼン共重合体樹脂にＮ‐メチル‐Ｄ‐グルカミンを結合させた化合物が金属やホウ素の吸着材として用いられている。（Ｊ．Ｓａｎｃｈｅｚｅｔａｌ．Ｊ．ＡＰＰＬＰＯＬＹ．ＳＣＩ．１２９（２０１３）１５４１−１５４５、Ｊ．Ｓａｎｃｈｅｚｅｔａｌ．Ｊ．ＡＰＰＬＰＯＬＹ．ＳＣＩ．１２６（２０１２）１４７５−１４８３）
しかし、ポリアクリレート系樹脂やスチレン‐ジビニルベンゼン共重合体樹脂を用いた材料をアミノカラムに応用すると、親水性が低く糖類の分離が不十分であるという問題がある。

特開昭６１−７１３５４号公報特開２００６−１３７９４４号公報

Ｊ．Ｓａｎｃｈｅｚｅｔａｌ．Ｊ．ＡＰＰＬＰＯＬＹ．ＳＣＩ．１２９（２０１３）１５４１−１５４５Ｊ．Ｓａｎｃｈｅｚｅｔａｌ．Ｊ．ＡＰＰＬＰＯＬＹ．ＳＣＩ．１２６（２０１２）１４７５−１４８３

本発明は、耐久性に優れ、繰り返し分析を行っても経時変化を起こさないアミノカラムに適した充填剤を与えることを目的とする。

本発明者らは、上記課題を達成すべく研究を重ねることで、ポリビニルアルコール樹脂を含む親水性の樹脂を基材とし、特定のアミノ基が導入された充填剤を用いることにより、アミノカラムの耐久性を改善できることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち本発明は次の事項に関する。
［１］ポリビニルアルコール樹脂を含む親水性の樹脂に、スペーサーを介して、式（１）

（Ｒ¹は水素原子、または炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ²は水酸基を１個以上有する炭素数１〜６のアルキル基を示す。※は、スペーサーとの結合位置を示す。）
で示されるアミノ基が結合していることを特徴とする、液体クロマトグラフィー用充填剤。
［２］Ｒ¹が水素原子またはメチル基である［１］の液体クロマトグラフィー用充填剤。
［３］Ｒ²が式（２）

（式中、ｎは０〜４の整数を示す）で示される構造である、［１］または［２］の液体クロマトグラフィー用充填剤。
［４］式（１）で示されるアミノ基がＤ‐グルカミン、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐グルカミン、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐マンニトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐ガラクチトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐イジトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐アラビニトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐キシリトール、４‐アミノ‐１，２，３‐ブタントリオール、３‐アミノ‐１，２‐プロパンジオール、３‐メチルアミノ‐１，２‐プロパンジオールからなる群のうちのいずれか一つのアミン由来である［１］の液体クロマトグラフィー用充填剤。

［５］スペーサーが末端にグリシジル基を有する化合物由来である［１］の液体クロマトグラフィー用充填剤。
［６］前記［１］〜［５］の液体クロマトグラフィー用充填剤を用いた、液体クロマトグラフィー用カラム。
［７］前記［１］〜［５］の液体クロマトグラフィー用充填剤を用いた、糖分析用液体クロマトグラフィー用カラム。
［８］前記［１］〜［５］の液体クロマトグラフィー用充填剤を用いた、親水性相互作用クロマトグラフィー用カラム。

本発明にかかる液体クロマトグラフィー用充填剤は、糖類の分析において高温条件を必要とせず、３０〜５０℃といった低温でも、優れた分離を示す。また、糖類以外にも様々な親水性化合物の分離も可能である。さらに、アルカリ耐性を有しており、従来のアミノカラムに比べ、再現性、耐久性の点で優れている。

実施例１の充填剤について、フルクトース、マンノース、グルコース及びスクロースの４種類の糖類の分析を行って得られたクロマトグラムを示す。実施例１の充填剤について、安定性試験結果を示す。実施例２の充填剤について、４種類の糖類の分析を行って得られたクロマトグラムを示す。実施例３の充填剤について、４種類の糖類の分析を行って得られたクロマトグラムを示す。比較例２の充填剤について、４種類の糖類の分析を行って得られたクロマトグラムを示す。実施例１の充填剤について、フルクトース、ガラクトース、ラクツロース、エピラクトース、ラクトースの５種類の糖類の分析を行って得られたクロマトグラムを示す。分析例６について、溶離液を変更して５種類の糖類の分析を行って得られたクロマトグラムを示す。

本発明の液体クロマトグラフィー用充填剤は、親水性の樹脂に式（１）

（式中、R¹は水素原子、または炭素数１〜４のアルキル基を示し、R²は水酸基を一個以上有する炭素数１〜６のアルキル基を示す。※は、スペーサーとの結合位置を示す）で示されるアミノ基を、スペーサーを介して結合させた粒子である。このときR¹は、水素原子またはメチル基であることが好ましい。
また、R²は、式（２）

（式中、ｎは０〜４の整数を示す）で示されるヒドロキシアルキル基であることが好ましく、さらにはｎが４であることが好ましい。

また、式（１）で示されるアミノ基としては、Ｄ‐グルカミン、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐グルカミン、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐マンニトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐ガラクチトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐イジトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐アラビニトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐キシリトール、４‐アミノ‐１，２，３‐ブタントリオール、３‐アミノ‐１，２‐プロパンジオール、３‐メチルアミノ‐１，２‐プロパンジオールからなる群のアミン類のなかのいずれか一つに由来するものが好ましい。これらのアミン類の窒素に結合した1つの水素が外れて、スペーサーと結合する。本発明では、これらのアミン類を、スペーサーに結合させるが、また、アンモニアを、スペーサーを介して親水性樹脂に結合させたのちに、シアノ水素化ホウ素ナトリウムを用いて、グルコース、マンノース、ガラクトース、キシロースなどのアルドースを、アミノ基を構成する窒素原子に結合させたものであってもよい。これらの中では、分離性能、反応の簡便さ、試薬の入手の容易さといった点で、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐グルカミンを反応させて得られるアミノ基であることが特に好ましい。

このようなアミノ基をスペーサーを介して結合させた充填剤は、糖類の分析において、高温条件を必要とせず、３０〜５０℃といった低温でも、優れた分離を示し、アルカリ耐性を有しており、再現性、耐久性の点で優れている。

本発明における充填剤を構成する親水性樹脂の、大きさ、形状に特に制限はない。ただし、本発明である充填剤のカラムへの充填を考慮すると、その形状は直径が１〜３０μｍの球状が好ましい。材質は架橋あるいは非架橋の樹脂が好ましい。特に好ましくはアルコール性水酸基を有する樹脂が用いられる。

本発明に用いる樹脂は、好ましくはカルボン酸ビニルエステルと架橋性単量体からなる架橋共重合体のエステル基をケン化またはエステル交換反応によってアルコール性水酸基に変換したポリビニルアルコール系樹脂が挙げられる。カルボン酸ビニルエステルとしては、例えば酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル、酪酸ビニル、吉草酸ビニル及びピバリン酸ビニル等があげられ、これらは単独でもよく、２種以上を組み合わせて用いても良い。これらの中でも、酢酸ビニル及びプロピオン酸ビニルが重合及びケン化が容易であるため好ましい。架橋性単量体としてはトリアジン環を有する架橋性単量体が好ましく、中でもトリアリルイソシアヌレートが特に好ましい。

上記の樹脂は、エステル構造やアミド構造のようなアルカリ性に弱い構造を持たない。そのため、本発明の充填剤はアルカリ性においても安定である。よってアルカリ性の分析条件においても好適に使用可能であるという利点がある。

また、上記樹脂以外に本発明の目的を損なわない範囲で、他の樹脂を含むものであってもよい。たとえば、スチレン-ジビニルベンゼン系架橋重合体、メタクリレート系架橋重合体、水酸基含有メタクリレート系架橋重合体粒子に長鎖アシル基が化学結合したものなどを使用することも可能である。これらのその他樹脂の含有量は、樹脂量に対し１０質量％以下、好ましくは５質量％以下の量であればよい。より好ましくは、上記親水性樹脂がポリビニルアルコール樹脂からなるものであれば、耐久性や耐アルカリ性などの点で好ましい。

アミノ基の量は、樹脂重量に対し０．１〜０．７ｍｅｑ／ｇが好ましく、さらに好ましくは０．１５〜０．５ｍｅｑ／ｇの範囲にある。この範囲にあれば、低温条件においても糖類を分析可能となる。

本発明におけるスペーサーは、基材（親水性樹脂）とアミノ基との距離を調整するために用いられる化学結合部位をいう。当該スペーサーは、式（１）のアミノ基と基材との干渉を抑えピーク拡散を抑える機能を付与するために用いる。基材にスペーサーを導入するために用いられる化合物、いわゆるスペーサー化合物としてはグリシジル基を有するものが挙げられ、たとえば、エピクロロヒドリン、１，４‐ブタンジオールジグリシジルエーテル、エチレングリコールジグリシジルエーテル、グリセリンジグリシジルエーテル等が挙げられる。これらのスペーサー化合物の末端ハロゲン基や片方の末端グリシジル基と、親水性樹脂の水酸基が反応する。

グリシジル基の導入量は、０．２〜０．８mol／ｇが好ましく、さらに好ましくは０．４〜０．６mol／ｇの範囲である。この範囲にあれば、好ましい量のアミノ基を導入することができる。

グリシジル基の導入は無溶媒もしくは溶媒下でゲルに対して０．１〜１０倍量の上記試薬を添加して撹拌均一として行われる。
グリシジル基を導入した重合体と、式（１）で示されるアミノ基を導入するための前記アミン類との反応は、次のように行うことができる。まず、グリシジル基を導入した重合体を、水、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の溶媒に分散させる。このときの溶媒は、扱いやすさ、用いるアミンの溶解性などの点において水が最も好ましい。アミンは、グリシジル基を導入した重合体１ｇあたり、２ｍｍｏｌ以上加えることが好ましく、１０ｍｍｏｌ〜２０ｍｍｏｌの範囲で加えることが反応効率と再現性の点でさらに好ましい。反応温度は、再現性と反応効率の観点で、３０〜４０℃が好ましい。反応時間は、反応量と効率の点で、１２時間〜２４時間が好ましい。

本発明の液体クロマトグラフィー用充填剤の粒径としては、体積平均粒径が１〜３０μｍのものが用いられ、好ましくは２〜２０μｍ、さらに好ましくは２〜１０μｍである。体積平均粒径が１μｍ未満の場合はカラムの圧力上昇が大きく、充填が極めて困難となることがある。一方、３０μｍを超えるとカラムの理論段数が低くなるため好ましくない。本願における上記の体積平均粒径は、コールターカウンター法を用いて次のように測定される。すなわち、測定装置としてＭｕｌｔｉｓｉｚｅｒ４（ベックマン・コールター社製）を用い、充填剤サンプル０．２ｇにアイソトン（希釈液）２５ｍＬを加え、超音波を３分間当てて分散させた後、約１０００個の測定個数にて体積平均粒径を測定する。体積平均粒径を好ましい範囲とするには、風力分級、ふるい分けによる分級、沈殿を利用した分級等で制御できる。

本発明の液体クロマトグラフィー用充填剤のカラムへの充填はスラリー法など公知の充填方法に準じて行われる。得られた液体クロマトグラフィー用カラムは、アセトニトリルと水もしくはギ酸アンモニウム、酢酸アンモニウムなどからなる緩衝液の混合溶媒を溶離液として用いることで、糖類やその他の親水性化合物を良好に分離することができる。

本発明における分離対象物質としては、環境汚染物質、ダイオキシン類、環境ホルモン、農薬、界面活性剤、生物毒素、天然薬物、天然色素、天然香料、および天然調味料などが挙げられる。

本発明は、耐久性に優れ、繰り返し分析を行っても経時変化を起こさないアミノカラムに適した充填剤を与えることが可能である。特に低温でも分離可能であるため、高温下では不安定な性質を持つ糖類の分析などの用途にも適用可能となる。

以下実施例により、本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
〔実施例１〕
ポリビニルアルコールゲル（基材）
酢酸ビニル１００ｇ、トリアリルイソシアヌレート１５０ｇ、酢酸ブチル１００ｇ、ｎ‐デカン２５ｇ及び２，２−アゾビスイソブチロニトリル５ｇよりなる均一混合液と、ポリビニルアルコール１２ｇ及びリン酸水素二ナトリウム１８ｇを溶解した水１２００ｍＬと還流冷却器を備えた５Ｌ三口フラスコに入れ１０分攪拌した。次いで、窒素気流下で攪拌しつつ、６０℃で１６時間重合を行うことで粒状重合体を得た。該重合体を濾過、洗浄し、アセトン抽出した後乾燥した。次いで該重合体を１０％カセイソーダ水溶液３Ｌとともに還流冷却器、窒素導入管及び攪拌器を備えた５Ｌの三口フラスコに入れ、窒素気流下で１５℃，２０時間攪拌して該重合体のケン化を行った後、濾過、水洗、更に乾燥した。ケン化によって得られたポリビニルアルコール重合体の水酸基の密度は２．１ｍｅｑ／ｇであった。

糖分析用及び親水性相互作用クロマトグラフィー用充填剤
上記乾燥ポリビニルアルコール重合体１０ｇ、エピクロロヒドリン４５ｇ、ジメチルスルホキシド１００ｍＬ及び３０％苛性ソーダ水溶液５ｍＬをセパラブルフラスコに入れ、３０℃で２０時間撹拌し、該重合体にグリシジル基を導入した。導入後の重合体を、ジメチルスルホキシド、水、メタノールで洗浄後、乾燥した。

上記グリシジル基を導入した重合体４ｇ、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐グルカミン１０ｇ及び水４０ｍＬをセパラブルフラスコに入れ、３０℃で２０時間撹拌し、アミノ基を導入した糖分析用及び親水性相互作用クロマトグラフィー用充填剤を作製した。該充填剤を水での洗浄をはさみながら０．５Ｎ塩酸及び０．５Ｎ苛性ソーダ水溶液で洗浄し、さらにメタノールで洗浄後、乾燥した。このようにして得られた充填剤を、０．５Ｎ塩化カリウム水溶液に分散させ、０．１Ｍ塩酸を用いてアミノ基を滴定することにより該充填剤のアミノ基の密度を測定した結果、０．４４ｍｅｑ／ｇであった。また、該充填剤の体積平均粒径は、５μｍであった。

〔実施例２〕
実施例１と同様にして作製したグリシジル基を導入した重合体２．０ｇ、２５％アンモニア水１．０ｍＬ及び水１９ｍＬをセパラブルフラスコに入れ、３０℃で２０時間撹拌し、アミノ基を導入した。該重合体をろ過後、水洗浄をはさみながら０．５Ｎ塩酸及び０．５Ｎ苛性ソーダ水溶液で洗浄し、さらにメタノールで洗浄後乾燥した。

上記アミノ基を有する重合体１．８ｇ、Ｄ‐マンノース１．９ｇ、シアノ水素化ホウ素ナトリウム０．２ｇ及び０．２Ｍリン酸水素化二カリウム水溶液１２ｍＬをセパラブルフラスコに入れ、６０℃で２０時間撹拌して、アルドースを窒素原子に結合させたアミノ基として、糖分析用及び親水性相互作用液体クロマトグラフィー用充填剤を作製した。該充填剤を、水洗浄をはさみながら、１．０Ｎ硫酸及び１．０Ｎ苛性ソーダ水溶液で洗浄後、乾燥した。
得られたアミノ基を有する重合体のアミノ基の密度を実施例１と同様にして測定した結果、０．２６ｍｅｑ／ｇであった。

〔実施例３〕
実施例１においてエピクロロヒドリン４５ｇの代わりに、１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル１００ｇを用いる以外は同様の条件で液体クロマトグラフィー用充填剤を作製した。実施例１と同様に該充填剤のアミノ基密度を測定した結果、０．１７ｍｅｑ／ｇであった。

〔分析例１〕
実施例１で得られた充填剤を内径４．６ｍｍ、長さ１５０ｍｍのＳＵＳ製のカラムに充填し、糖分析及び親水性相互作用クロマトグラフィー用カラムを調整した。このカラムを用いて、溶離液アセトニトリル／水＝８５／１５、流速０．６ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度４０℃として分析を行った。分析サンプルはフルクトース、マンノース、グルコース及びスクロースの４種の糖を、いずれも５ｍｇ／ｍＬとなるようにアセトニトリル／水＝５／３の混合液に溶解したものを用いた。示差屈折率検出器を用いて得られたクロマトグラムを図１に示す。４種類の糖が良好に分離されている。

〔分析例２〕
また、上記のカラムの安定性試験を行った。０．０５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、流速０．６ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度３０℃にて溶離液を連続して８０時間通液し、通液前後の糖類の保持時間及び理論段数を確認した。これによって得られた結果を図２に示す。本発明の充填剤を使用したカラムでは、溶離液を通液し続けても保持時間などの変化は起こらなかった。

〔分析例３〕
実施例２で得られた充填剤を用い、分析例１と同様の分析を行った結果を図３に示す。４種類の糖が良好に分離されている。

〔分析例４〕
実施例３で得られた充填剤を用い、分析例１と同様の分析を行った結果を図４に示す。４種類の糖が良好に分離されている。

〔比較例１〕
シリカゲルを基材としたアミノ基導入充填剤を使用したカラムを用いて、上記の安定性試験を行った。その結果通液開始から１７時間後に、カラムに詰りが生じて通液不能となった。

〔比較例２〕
グリシジルメタクリレートを重合したアクリレート樹脂２．８ｇ、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐グルカミン６．５ｇ及び水２８ｍＬをセパラブルフラスコに入れ、３０℃で２０時間撹拌し、アクリレート樹脂を基材とした充填剤を作製した。該重合体をろ過後、水洗浄をはさみながら０．５Ｎ塩酸及び０．５Ｎ苛性ソーダ水溶液で洗浄した。

〔分析例５〕
比較例２で得られた充填剤を、分析例１と同様にカラムに充填し、糖類の分析を行った結果を図５に示す。保持が短く、糖類が分離されていないことが分かる。

〔分析例６〕
実施例１で得られた充填剤を内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのＳＵＳ製カラムに充填し、糖分析及び親水性相互作用クロマトグラフィー用カラムを調整した。このカラムを用いてフルクトース、ガラクトース、ラクツロース、エピラクトース、ラクトースの５種類の糖類の分析を行った。分析条件は、流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度４０℃とした。検出器には示差屈折率検出器を使用した。溶離液にアセトニトリル／水＝８０／２０を用いた場合のクロマトグラムを図６に示す。

〔分析例７〕
分析例６の図６では、ラクツロースとエピラクトースのピークが一部重なっている。そこで同じカラムを用いて溶離液をアセトニトリル／メタノール／水＝７５／２０／５に変えて同様のサンプルを分析した場合のクロマトグラムを図７に示す。図６でピークが重なっていたラクツロースとエピラクトースのピークが完全に分離している。したがって、５種類の糖が良好に分離されている。

Claims

ポリビニルアルコール樹脂を含む親水性の樹脂に、スペーサーを介して、式（１）

（Ｒ¹は水素原子、または炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ²は水酸基を１個以上有する炭素数１〜６のアルキル基を示す。※は、スペーサーとの結合位置を示す。）
で示されるアミノ基が結合していることを特徴とする、液体クロマトグラフィー用充填剤。
Ｒ¹が水素原子またはメチル基である請求項１に記載の液体クロマトグラフィー用充填剤。
Ｒ²が式（２）

（式中、ｎは０〜４の整数を示す）で示される構造である、請求項１または２に記載の液体クロマトグラフィー用充填剤。
式（１）で示されるアミノ基がＤ‐グルカミン、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐グルカミン、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐マンニトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐ガラクチトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐イジトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐アラビニトール、１‐アミノ‐１‐デオキシ‐Ｄ‐キシリトール、４‐アミノ‐１，２，３‐ブタントリオール、３‐アミノ‐１，２‐プロパンジオール、３‐メチルアミノ‐１，２‐プロパンジオールからなる群のうちのいずれか一つのアミン由来である請求項１に記載の液体クロマトグラフィー用充填剤。
スペーサーが末端にグリシジル基を有する化合物由来であることを特徴とする、請求項1に記載の液体クロマトグラフィー用充填剤。
請求項１〜５のいずれかに記載の液体クロマトグラフィー用充填剤を用いた、液体クロマトグラフィー用カラム。
請求項１〜５のいずれかに記載の液体クロマトグラフィー用充填剤を用いた、糖分析用液体クロマトグラフィー用カラム。
請求項１〜５のいずれかに記載の液体クロマトグラフィー用充填剤を用いた、親水性相互作用クロマトグラフィー用カラム。