JPWO2007114262A1 - カゼインナノ粒子 - Google Patents
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Abstract
Description
天然高分子は合成高分子と同様に高い構造安定性を示しながら、合成高分子よりも格段に安全性が高く、DDSキャリアーとしての利点を兼ね備えている。しかし、合成高分子に比べて天然高分子キャリアーの困難な点は、粒子作製方法である。天然高分子の粒子作製方法としては、噴霧乾燥、凍結乾燥およびジェットミルが利用できるが、ほとんどの場合、粒子サイズはミクロンサイズであり、大きさの制御が困難である。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を pH3.5〜7.5の酸性水性媒体に注入する工程:
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を攪拌しながら、該溶液のpH を等電点からpH1以上離れたpHまで下降させる工程:
好ましくは、活性物質は、化粧品用成分、機能性食品用成分、又は医薬品成分である。
好ましくは、本発明のカゼインナノ粒子は、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の活性物質を含有する。
好ましくは、塩基性水性媒体の重量に対して、0.1〜100重量%の水と少なくとも10重量%混和性である有機溶剤が添加されている。
好ましくは、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の活性物質を内包したリポソームが添加されている。
好ましくは、工程(b)において、活性物質のシクロデキストリン溶液を添加する。
好ましくは、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の脂質が添加されている。
好ましくは、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の別種のタンパク質が添加されている。
好ましくは、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%のカチオン性またはアニオン性多糖が添加されている。
好ましくは、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%のカチオン性タンパク質またはアニオン性タンパク質が添加されている。
好ましくは、薬物送達剤が、経皮吸収剤、局所治療剤、経口治療剤、化粧品、機能性食品、又はサプリメントとして使用される。
好ましくは、薬物送達剤に含まれるエタノールが20%以下である。
好ましくは、薬物送達剤に、添加物が含まれている。
好ましくは、添加物は、保湿剤、柔軟剤、経皮吸収促進剤、防腐剤、色素剤、香料、又はpH調整剤から選択される1種以上のものである。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を pH3.5〜7.5の酸性水性媒体に注入する工程:
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を攪拌しながら、該溶液のpH を等電点からpH1以上離れたpHまで下降させる工程:
本発明は、活性物質を内包した平均粒経10nm以上300nm未満のカゼインナノ粒子であって、下記の工程(a)から(c)によって作製されるものである。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を pH3.5〜7.5の酸性水性媒体に注入する工程、あるいは工程(b)で得た溶液を攪拌しながら、該溶液のpH をカゼインの等電点からpH1以上離れたpHまで下降させる工程:
脂溶性の物質としては、好ましくはClogPが0より大きく、より好ましくはClogPが1以上であり、さらに好ましくはCLogPが3以上である。
本発明のカゼインナノ粒子は、少なくとも1種の活性物質を含む。活性物質の量は特に限定されないが、一般的には、カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の活性物質を含有する。
本発明において、カゼインをpH8以上の塩基性水性媒体に混合させる温度は、0〜80℃が好ましく、10〜60℃が好ましい。より好ましくは、20〜40℃である。
本発明においては、薬物送達剤は0.01〜50重量%のタンパク質ナノ粒子を含有することが好ましく、0.1〜10重量%のタンパク質ナノ粒子を含有することがさらに好ましい。
好ましくは、薬物送達剤に含まれるエタノールが20%以下である。より好ましくは10%以下である。
以下の実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
カゼイン(乳由来・和光純薬製)20mg、コンドロイチン硫酸-C(和光純薬製)2mgをpH10リン、50mM酸バッファー1mLに混合させる。トコフェロール(和光純薬製)5mgをエタノール1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、超音波をあてた後、外設40℃、800rpmの攪拌条件で、1mLをマイクロシリンジを用いて、pH5、200mMのリン酸バッファー水10mL中に注入したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、57nmであった。
50mLナスフラスコに、レチノール(和光純薬製)を1mg、卵黄ホスファチジルコリン(日本油脂製)20mgを入れ、5mLのエタノールに溶かした後、ロータリーエバポレーターでエタノールを減圧除去する。これにpH9、100mMリン酸バッファー水5mLを加え、ボルテックスミキサーで振とうし、得られた懸濁液に超音波を照射することで、リポソーム分散液が得られた。得られたリポソーム分散液1mL、カゼイン(乳由来・和光純薬製)20mg、pH10、200mMリン酸バッファー水1mL混合する。前記溶液1mLを、外設40℃、800rpmの攪拌条件で、マイクロシリンジを用いて、pH5のリン酸バッファー水10mL中に注入したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
β-カロテン(和光純薬製)5mg、エタノール0.5mL、カゼイン(乳由来・和光純薬製)20mg、シクロデキストリン(和光純薬製)5mg、pH10、50mMリン酸バッファー1mLを混合し、超音波をあてる。前記溶液1mLを、外設40℃、800rpmの攪拌条件で、マイクロシリンジを用いて、pH5、300mMのリン酸バッファー水10mL中に注入することで、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、88nmであった。
カゼイン(乳由来・和光純薬製)20mg、プロタミン硫酸塩(和光純薬製)1mgをpH10、50mMリン酸バッファー1mLに混合させる。α-リポ酸1mgをイオン交換水に溶解させる。この2種の溶液を混合し、外設40℃、800rpmの攪拌条件で、1mLをマイクロシリンジを用いて、pH5、200mMのリン酸バッファー水10mL中に注入したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、48nmであった。
*粒径測定器を変えた所、小さい値になり、電子顕微鏡写真もこの値に近い
カゼインナトリウム(乳由来・和光純薬製)100mgをpH10、100mMホウ酸バッファー10mLに混合させる。酢酸トコフェロール1mgをエタノール0.1mLに溶解させる。グリチルレチン酸5mgをエタノール1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、攪拌下、塩酸を加えpHを7に調整したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、32nmであった。
カゼイン(乳由来・和光純薬製)100mgを、pH10、50mMリン酸バッファー10mLに混合させる。グリチルレチン酸(和光純薬製)3.4mgをエタノール0.1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、攪拌下、塩酸を加えpHを7に調整したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、23nmであった。
カゼインナトリウム(乳由来・和光純薬製)200mgをpH10、200mMリン酸バッファー10mLに混合させる。ニコチン酸ベンジル8.5mgをエタノール0.15mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、攪拌下、塩酸を加えpHを7に調整したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、27nmであった。
カゼインナトリウム(乳由来・和光純薬製)50mgをpH10、25mMリン酸バッファー10mLに混合させる。ヒノキチオール1.7mgをエタノール0.1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、攪拌下、塩酸を加えpHを7に調整したところ、カゼインナノ粒子が得られた。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、16nmであった。
カゼインナトリウム(乳由来・和光純薬製)100mgを蒸留水10mLに混合させる。グリチルレチン酸(和光純薬製)3.4mgをエタノール0.1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合した。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、327nmであった。
カゼイン(乳由来・和光純薬製)100mgを、pH10、50mMリン酸バッファー10mLに混合させる。グリチルレチン酸(和光純薬製)3.4mgをエタノール0.1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、攪拌下、塩酸を加えpHを4に調整したところ、白濁、凝集した。
カゼインナトリウム(乳由来・和光純薬製)100mgをpH12、50mMリン酸バッファー10mLに混合させた。グリチルレチン酸(和光純薬製)3.4mgをエタノール0.1mLに溶解させる。この2種の溶液を混合し、攪拌下、塩酸を加えpHを7に調整した。
上記粒子の平均粒経は、光散乱光度計、日機装(株)製ナノトラックを用い測定したところ、485nmであった。
実施例5から8のナノ粒子を、日立工機社製超遠心機CS100GXLを用いて遠心分離し、上澄み液のHPLC分析結果と添加量から粒子内に内包されている活性物質の内包率を求めた。
Claims (23)
- 下記の工程(a)から(c)によって作製される、活性物質を内包した平均粒経10nm以上300nm未満のカゼインナノ粒子。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を pH3.5〜7.5の酸性水性媒体に注入する工程: - 下記の工程(a)から(c)によって作製される、活性物質を内包した平均粒経10nm以上50nm未満のカゼインナノ粒子。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を攪拌しながら、該溶液のpH をカゼインの等電点からpH1以上離れたpHまで下降させる工程: - 活性物質が、イオン性物質または脂溶性物質である、請求項1又は2に記載のカゼインナノ粒子。
- 活性物質が、化粧品用成分、機能性食品用成分、又は医薬品成分である、請求項1から3の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- 活性物質が、保湿剤、美白剤、育毛剤、養毛剤、発毛剤、抗白髪剤、アンチエイジング剤、抗酸化剤、コラーゲン合成促進剤、抗しわ剤、抗にきび剤、ビタミン剤、紫外線吸収剤、香料、色素剤、制汗剤、冷感剤、温感剤、メラニン生成抑制剤、メラノサイト活性化剤、クレンジング剤、痩身剤であり、機能性食品用成分としてはビタミン、ミネラル、抗酸化剤、抗ストレス剤、栄養補助剤、アミノ酸類、カロテノイド、果実および植物の抽出物であり、医薬品成分としては、育毛剤、養毛剤、発毛剤、抗生剤、制癌剤、抗炎症剤、抗アレルギー剤、ホルモン剤、抗血栓剤、免疫抑制剤、皮膚疾患治療薬、抗真菌薬、核酸医薬、麻酔薬、解熱剤、鎮痛剤、鎮痒剤、抗浮腫剤、鎮咳裾痰剤、抗てんかん剤、抗パーキンソン剤、催眠鎮静剤、抗不安剤、興奮剤、精神神経用剤、筋弛緩剤、抗鬱剤、総合感冒薬剤、自律神経系剤、鎮けい剤、発汗剤、止汗剤、強心剤、不整脈用剤、抗不整脈剤、血管収縮剤、血管拡張剤、抗不整脈剤、血圧降下剤、糖尿治療剤、高脂血漿剤、呼吸促進剤、鎮咳剤、ビタミン剤、寄生性皮膚疾患用剤、恒常性剤、ポリペプチド、ホルモン、不全角化抑制剤、ワクチン、又は皮膚軟化剤である、請求項4に記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の活性物質を含有する、請求項1から5の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- 工程(b)において、水または水と少なくとも10重量%混和性である有機溶剤に溶解した活性物質の溶液を添加する、請求項1から6の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- 塩基性水性媒体の重量に対して、0.1〜100重量%の水と少なくとも10重量%混和性である有機溶剤が添加されている、請求項7に記載のカゼインナノ粒子。
- 工程(b)において、活性物質を内包したリポソーム水分散液を添加する、請求項1から8の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の活性物質を内包したリポソームが添加されている、請求項9に記載のカゼインナノ粒子。
- 工程(b)において、活性物質のシクロデキストリン溶液を添加する、請求項1から8の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%のシクロデキストリンが添加されている、請求項11に記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の脂質が添加されている、請求項1から12の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%の別種のタンパク質が添加されている、請求項1から13の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%のカチオン性またはアニオン性多糖が添加されている、請求項1から14の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- カゼインの重量に対して、0.1〜100重量%のカチオン性タンパク質またはアニオン性タンパク質が添加されている、請求項1から15の何れかに記載のカゼインナノ粒子。
- 請求項1から16の何れかに記載のカゼインナノ粒子を含む、薬物送達剤。
- 経皮吸収剤、局所治療剤、経口治療剤、又はサプリメントとして使用される、請求項17に記載の薬物送達剤。
- エタノール含有量が20%以下である、請求項17又は18に記載の薬物送達剤。
- 薬物送達剤に、添加物が含まれている、請求項17から19の何れかに記載の薬物送達剤。
- 添加物が、保湿剤、柔軟剤、経皮吸収促進剤、防腐剤、色素剤、香料、又はpH調整剤から選択される1種以上のものである、請求項20に記載の薬物送達剤。
- 下記の工程(a)から(c)を含む、活性物質を内包した平均粒経10nm以上300nm未満のカゼインナノ粒子の製造方法。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を pH3.5〜7.5の酸性水性媒体に注入する工程: - 下記の工程(a)から(c)を含む、活性物質を内包した平均粒経10nm以上50nm未満のカゼインナノ粒子の製造方法。
(a)カゼインをpH8以上pH11未満の塩基性水性媒体に混合させる工程;
(b)工程(a)で得た溶液に少なくとも1種の活性物質を添加する工程;及び
(c)工程(b)で得た溶液を攪拌しながら、該溶液のpH をpH3.5〜7.5まで下降させる工程:
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