JPS6244191A - 発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法 - Google Patents
発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法Info
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- JPS6244191A JPS6244191A JP18392385A JP18392385A JPS6244191A JP S6244191 A JPS6244191 A JP S6244191A JP 18392385 A JP18392385 A JP 18392385A JP 18392385 A JP18392385 A JP 18392385A JP S6244191 A JPS6244191 A JP S6244191A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、発酵法によるし一スレオニンノ製造方法に関
するものである。
するものである。
プロピデンノア属に属する微生物を用いる発酵法による
Ｌ−スレオニンの製造法はまだ知られていない。たｔご
し、バーン−のマニュアル・オブ・ノステマティノクパ
クテリオロジー第１、ｌ（１９８１年） で、 一部プ
ロヒデノノア萬に分類変更されｔ：旧プロテウス属に岡
する微生物を用いた発酵法によるＬ−スレオニンの製造
方法としてはＬ−イソロイツノ要求株を用いる方法（特
公昭４３−４４４０号公報）やα−アミノ−β−ヒドロ
キノ吉草酸に耐性をＨしかつＬ−イノロイノン要求性を
有する微生物を用いる方法（日本農芸化学会講演要旨束
Ｐ、９（１９７０））が知られている。
Ｌ−スレオニンの製造法はまだ知られていない。たｔご
し、バーン−のマニュアル・オブ・ノステマティノクパ
クテリオロジー第１、ｌ（１９８１年） で、 一部プ
ロヒデノノア萬に分類変更されｔ：旧プロテウス属に岡
する微生物を用いた発酵法によるＬ−スレオニンの製造
方法としてはＬ−イソロイツノ要求株を用いる方法（特
公昭４３−４４４０号公報）やα−アミノ−β−ヒドロ
キノ吉草酸に耐性をＨしかつＬ−イノロイノン要求性を
有する微生物を用いる方法（日本農芸化学会講演要旨束
Ｐ、９（１９７０））が知られている。
しかしながら、従来の微生物を培養してＬ−スレオニン
を生成せしめる方法は多量のアラニン及びバリンを副生
するため、Ｌ−スレオニンの生成収率が低下し、また高
純度のＬ−スレオニンを得るためには、煩雑な精製工程
を要し、工業的に実用化するには不利であった。
を生成せしめる方法は多量のアラニン及びバリンを副生
するため、Ｌ−スレオニンの生成収率が低下し、また高
純度のＬ−スレオニンを得るためには、煩雑な精製工程
を要し、工業的に実用化するには不利であった。
〔問題点を解決するための手段及び作用〕本発明者らは
、Ｌ−スレオニンの高い生産性を維持すると同時に、ア
ラニンおよび／またはバリンの副生を抑制する方法につ
いて鋭意検討した結果、プロビデンノア属に属し、Ｌ−
スレオニン生産能を有する微生物のピルベートキナーゼ
（Ｅ Ｃ２，７，１，４０）の活性を低下させることに
よりアラニンおよび／またはバリンの副生が効果的に抑
制されることを見いだし本発明に到達した。
、Ｌ−スレオニンの高い生産性を維持すると同時に、ア
ラニンおよび／またはバリンの副生を抑制する方法につ
いて鋭意検討した結果、プロビデンノア属に属し、Ｌ−
スレオニン生産能を有する微生物のピルベートキナーゼ
（Ｅ Ｃ２，７，１，４０）の活性を低下させることに
よりアラニンおよび／またはバリンの副生が効果的に抑
制されることを見いだし本発明に到達した。
すなわち、本発明は、プロビデンシア（Ｐｒｏｖｉｄｅ
ｎｃｉａ ）属に属し、Ｌ−７，１／オニン生産能を有
し、かつピルベートキナーゼ＜ Ｅ Ｃ２，７，１４０
）の活性が、その親株よりも低い変異株を培養して、培
養液中にＬ−スレオニンを生成蓄積せしめ、前記培養液
よりＬ−スレオニンを採取することを特徴とする発酵法
によるＬ−スレオニンの製造方法である。
ｎｃｉａ ）属に属し、Ｌ−７，１／オニン生産能を有
し、かつピルベートキナーゼ＜ Ｅ Ｃ２，７，１４０
）の活性が、その親株よりも低い変異株を培養して、培
養液中にＬ−スレオニンを生成蓄積せしめ、前記培養液
よりＬ−スレオニンを採取することを特徴とする発酵法
によるＬ−スレオニンの製造方法である。
プロビデンシア属に属する微生物のピルベートキナーゼ
の活性が低下した変異株はこれまで分離されたことがな
い。また、ブレビバクテリウム属に属し、ピルベートキ
ナーゼ欠損の変異株を用いてＬ−リジンを°製造するこ
とは公知（Ｈ，０ｚａｋｉ ａｎｄ １．５ｈｉｉｏ
； Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、 Ｖｏｌ、
４７゜Ｐ、 １５６９−１５７６ （１９８３） ）
であるが、本発明のごとく、ピルベートキナーゼの活性
が親株よりも低下した変異株を用いることにより、Ｌ−
スレオニンをＩＩ生成蓄積せしめ、かつ、アラニン、ノ
〈リンの副生が抑制されることはまったく知られていな
かった。
の活性が低下した変異株はこれまで分離されたことがな
い。また、ブレビバクテリウム属に属し、ピルベートキ
ナーゼ欠損の変異株を用いてＬ−リジンを°製造するこ
とは公知（Ｈ，０ｚａｋｉ ａｎｄ １．５ｈｉｉｏ
； Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、 Ｖｏｌ、
４７゜Ｐ、 １５６９−１５７６ （１９８３） ）
であるが、本発明のごとく、ピルベートキナーゼの活性
が親株よりも低下した変異株を用いることにより、Ｌ−
スレオニンをＩＩ生成蓄積せしめ、かつ、アラニン、ノ
〈リンの副生が抑制されることはまったく知られていな
かった。
本発明において使用するピルベートキナーゼの活性が親
株よりも低い菌株としては、親株を基準としてその７０
％以下、好ましくは５０％以下にピルベートキナーゼ活
性が低下したものが望ましく用いられる。
株よりも低い菌株としては、親株を基準としてその７０
％以下、好ましくは５０％以下にピルベートキナーゼ活
性が低下したものが望ましく用いられる。
たとえ、親株を基準としてその７０％以下にピルベート
キナーゼの活性が低下していなくとも、その菌株の誘導
されたもととなる野生株を基準としてその７０％以下に
ピルベートキナーゼ活性が低下していれば、本発明と同
様な効果が達成されるものであるので、そのよ、うな菌
株を用いることは本発明の範囲内に包含される。
キナーゼの活性が低下していなくとも、その菌株の誘導
されたもととなる野生株を基準としてその７０％以下に
ピルベートキナーゼ活性が低下していれば、本発明と同
様な効果が達成されるものであるので、そのよ、うな菌
株を用いることは本発明の範囲内に包含される。
本発明で用いられる微生物はプロビデンシア属（バージ
−のマニュアルーオブ・システマテイクバクテリオロジ
−２，ｓ、ｌ （１９８４） 、第４９５〜４９６頁
に従う）に属する微生物である。また、Ｌ−スレオニン
生成能向上に有効な形質、たとえばＬ−イソロイシン、
Ｌ−ロイシンに対する栄養要求性、α−アミノ−β−ハ
イドロキノ吉草酸等スレオニンアナログに対する耐性お
よびエチオニン等メチオニンアナログに対する耐性等の
うち少なくとも一つを既に付与された変異株であっても
よい。これらの形質は通常の変異誘導操作により付与す
ることが可能である。ここでいう栄養要求性とは広義の
意味であり、不完全欠失型（いわゆるＬｅａｋｙ型）も
含むものである。さらにその要求物質の生合成前駆物質
で要求性が満足される場合も含むものである。
−のマニュアルーオブ・システマテイクバクテリオロジ
−２，ｓ、ｌ （１９８４） 、第４９５〜４９６頁
に従う）に属する微生物である。また、Ｌ−スレオニン
生成能向上に有効な形質、たとえばＬ−イソロイシン、
Ｌ−ロイシンに対する栄養要求性、α−アミノ−β−ハ
イドロキノ吉草酸等スレオニンアナログに対する耐性お
よびエチオニン等メチオニンアナログに対する耐性等の
うち少なくとも一つを既に付与された変異株であっても
よい。これらの形質は通常の変異誘導操作により付与す
ることが可能である。ここでいう栄養要求性とは広義の
意味であり、不完全欠失型（いわゆるＬｅａｋｙ型）も
含むものである。さらにその要求物質の生合成前駆物質
で要求性が満足される場合も含むものである。
本発明で用いられる変異株の代表的なものとしては、例
えば以下のものがある。
えば以下のものがある。
プロビデンシア・レトゲリＦＰＳＳ２５ （ＦＥＲＭＰ
−８２２７）、（α−アミノ−β−）１イドロキシ吉草
酸耐性、エチオニン耐性、Ｌ−イソロイノン要求性ない
し１ｅａｋｙ ＳＬ−ロイシン要求性、ピルベートキナ
ーゼｗｅａｋ ）。この変異株はプロ、ビデノンア０レ
トゲリＴＰ３−１０５ （α−アミノ−β−ハイドロキ
ノ吉草酸耐性、エチオニン耐性、Ｌ−イソロイノン要求
性ないし１ｅａｋｙ ＳＬ−ロイシン要求性）から誘導
されたものである。
−８２２７）、（α−アミノ−β−）１イドロキシ吉草
酸耐性、エチオニン耐性、Ｌ−イソロイノン要求性ない
し１ｅａｋｙ ＳＬ−ロイシン要求性、ピルベートキナ
ーゼｗｅａｋ ）。この変異株はプロ、ビデノンア０レ
トゲリＴＰ３−１０５ （α−アミノ−β−ハイドロキ
ノ吉草酸耐性、エチオニン耐性、Ｌ−イソロイノン要求
性ないし１ｅａｋｙ ＳＬ−ロイシン要求性）から誘導
されたものである。
変異株の誘導は通常の変異処理法によって比較的容易に
取得できる。すなわち、ピルベートキナーゼ活性低下変
異株を得るには、親株を紫外線照射するかあるいは変異
誘発剤（例えばＮ−メチル＝Ｎ′−二トローＮ−二トロ
ソグアニジン、エチルメタノスルホン酸等）で処理した
後、通常の最少培地（例えばディビスの最少培地）にご
く微量 （例えば１μｇ／ ｍｌ ）のβ−フルオロピ
ルビン酸を含む平板培地にて３０℃で３〜４日培養して
生じた小さなコロニーを釣菌分離する。そしてこれらの
菌株のうち、唯一炭素源をグルコースとした場合には増
殖不良で、唯一炭素源をピルビン酸あるいはクエン酸に
した場合には増殖良好な菌株を選定すればよい。
取得できる。すなわち、ピルベートキナーゼ活性低下変
異株を得るには、親株を紫外線照射するかあるいは変異
誘発剤（例えばＮ−メチル＝Ｎ′−二トローＮ−二トロ
ソグアニジン、エチルメタノスルホン酸等）で処理した
後、通常の最少培地（例えばディビスの最少培地）にご
く微量 （例えば１μｇ／ ｍｌ ）のβ−フルオロピ
ルビン酸を含む平板培地にて３０℃で３〜４日培養して
生じた小さなコロニーを釣菌分離する。そしてこれらの
菌株のうち、唯一炭素源をグルコースとした場合には増
殖不良で、唯一炭素源をピルビン酸あるいはクエン酸に
した場合には増殖良好な菌株を選定すればよい。
本発明におけるし一スレオニン生産用の培地は、炭素源
、窒素源、無機イオンおよび必要に応じてその他の有機
微量成分を含有する通常の培地である。
、窒素源、無機イオンおよび必要に応じてその他の有機
微量成分を含有する通常の培地である。
炭素源としては、グルコース、フラクトース、でん粉お
よびセルロースの加水分解物、糖蜜等ノ糖類、フマール
酸、クエン酸、コハク酸等の如き有機酸、グリセロール
の如きアルコール類等を２〜１５％、窒素源として、酢
酸アンモニウムの如き有機アンモニウム塩、硫Ｍアンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸
アンモニウムの如き無機アンモニウム塩、アンモニアガ
ス、アンモニア水、尿素等ヲ０．５〜４．０％、有機微
量栄養素としては、Ｌ−イソロイシン等の被要求物Ｊ［
１，００１〜０．４％、または必要に応じてコーンステ
イープリカー、ペブトノ、酵母エキス等０〜４％をそれ
ぞれ適当量含有する培地が好適に用いられる。これらの
他にリン酸カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第１鉄７
水和物、硫酸マンガン４−６水和物等が微量成分として
少量添加される。−培養は、好気的条件ｔｓｉｔ；う
。培養の藺、培地のｐＨは５から９に、温度は２４〜３
７℃に調節し、４８〜１２０時間振とうまたは通気培養
すれば好ましい結果が得られる。
よびセルロースの加水分解物、糖蜜等ノ糖類、フマール
酸、クエン酸、コハク酸等の如き有機酸、グリセロール
の如きアルコール類等を２〜１５％、窒素源として、酢
酸アンモニウムの如き有機アンモニウム塩、硫Ｍアンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸
アンモニウムの如き無機アンモニウム塩、アンモニアガ
ス、アンモニア水、尿素等ヲ０．５〜４．０％、有機微
量栄養素としては、Ｌ−イソロイシン等の被要求物Ｊ［
１，００１〜０．４％、または必要に応じてコーンステ
イープリカー、ペブトノ、酵母エキス等０〜４％をそれ
ぞれ適当量含有する培地が好適に用いられる。これらの
他にリン酸カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第１鉄７
水和物、硫酸マンガン４−６水和物等が微量成分として
少量添加される。−培養は、好気的条件ｔｓｉｔ；う
。培養の藺、培地のｐＨは５から９に、温度は２４〜３
７℃に調節し、４８〜１２０時間振とうまたは通気培養
すれば好ましい結果が得られる。
培養液よりＬ−スレオニンを採取するには、例えば菌体
を除去した培養Ｐ液をｐＨ２に塩酸で調製したのち、強
酸性カチオンイオノ交換樹脂に通液後、希アンモニア水
で吸着成分を溶出シ、脱アンモニア後、濃縮する。これ
にアルコールを添加し、冷却保存下で生成した結晶を集
め、Ｌ−スレオニンを得ることができる。
を除去した培養Ｐ液をｐＨ２に塩酸で調製したのち、強
酸性カチオンイオノ交換樹脂に通液後、希アンモニア水
で吸着成分を溶出シ、脱アンモニア後、濃縮する。これ
にアルコールを添加し、冷却保存下で生成した結晶を集
め、Ｌ−スレオニンを得ることができる。
以下、実施例によって本発明を具体的に説明する。
実施例１
（ピルベートキナーゼ活性低下変異株の分離）プロビデ
ンシア・レトゲリＴＰ３−１０５ （α−アミノ−β−
ハイドロキシ吉草酸耐性、Ｌ−エチオニン耐性、Ｌ−イ
ソロイシン要求性なイシ１ｅａｋｙ 、 Ｌ−ロイシン
要求性〕の菌体を通常の方法でＮ−メチル−Ｎ’−二ト
ローＮ−二トロソグアニジン処理し、この細胞をβ−フ
ルオロピルビン酸ナトリウムｌμｆ／ｍｌ添加した寒天
平板培地（グルコース０．５％、硫安０．１％、リン酸
第１カリウム０．３％、リン酸第２カリウム０．７％、
硫酸マグ不ノウム７水和物０．Ｏ１％、Ｌ−イソロイシ
ンｏ、 ｏ ｏ ｓ％、Ｌ−ロイシン０．００５％、寒
天２％）に塗布した。次に、３０℃にて４〜５日培養し
、生じたコロニーのうち小さなコロニーを釣菌分離した
。分離された変異株の中でピルベートキナーゼ活性低下
変異株と思われるものを選定するため、以下の方法で検
定しｔこ。
ンシア・レトゲリＴＰ３−１０５ （α−アミノ−β−
ハイドロキシ吉草酸耐性、Ｌ−エチオニン耐性、Ｌ−イ
ソロイシン要求性なイシ１ｅａｋｙ 、 Ｌ−ロイシン
要求性〕の菌体を通常の方法でＮ−メチル−Ｎ’−二ト
ローＮ−二トロソグアニジン処理し、この細胞をβ−フ
ルオロピルビン酸ナトリウムｌμｆ／ｍｌ添加した寒天
平板培地（グルコース０．５％、硫安０．１％、リン酸
第１カリウム０．３％、リン酸第２カリウム０．７％、
硫酸マグ不ノウム７水和物０．Ｏ１％、Ｌ−イソロイシ
ンｏ、 ｏ ｏ ｓ％、Ｌ−ロイシン０．００５％、寒
天２％）に塗布した。次に、３０℃にて４〜５日培養し
、生じたコロニーのうち小さなコロニーを釣菌分離した
。分離された変異株の中でピルベートキナーゼ活性低下
変異株と思われるものを選定するため、以下の方法で検
定しｔこ。
グルコース、ピルビン酸ナトリウム、クエン酸三ナトリ
ウムニ水和物のいづれか一種を０．５％含有する寒天平
板培地（硫安０．１％、リン酸第１カリウム０．３％、
リン酸第２カリウム０．７％、硫酸マグネンウム７水和
物０．０１％、Ｌ−イソロイノンｏ、 ｏ ｏ ｓ％、
Ｌ−ロイジノｏ、ｏｏｓ％、寒天２％）にうずく塗布し
、３０℃にて３〜４日培養してその生育の有無を観察し
た。グルコース含有寒天平板培地で生育が不良でピルビ
ン酸ナトリウムＪ）’；＋ｃ−１！クエン酸三ナトリウ
酸三ナトリウム寒水和物含有寒天培地な変異株をピルベ
ートキナーゼ活性低下変異株であると予想し、実施例２
に示すようにピルベートキナーゼの活性測定を行った。
ウムニ水和物のいづれか一種を０．５％含有する寒天平
板培地（硫安０．１％、リン酸第１カリウム０．３％、
リン酸第２カリウム０．７％、硫酸マグネンウム７水和
物０．０１％、Ｌ−イソロイノンｏ、 ｏ ｏ ｓ％、
Ｌ−ロイジノｏ、ｏｏｓ％、寒天２％）にうずく塗布し
、３０℃にて３〜４日培養してその生育の有無を観察し
た。グルコース含有寒天平板培地で生育が不良でピルビ
ン酸ナトリウムＪ）’；＋ｃ−１！クエン酸三ナトリウ
酸三ナトリウム寒水和物含有寒天培地な変異株をピルベ
ートキナーゼ活性低下変異株であると予想し、実施例２
に示すようにピルベートキナーゼの活性測定を行った。
実施例２
（ピルベートキナーゼ活性測定）
実施例１で得た変異株（ＦＰＳＳ２５）とその親株（Ｔ
Ｐ３−１０５）について活性測定を行った。
Ｐ３−１０５）について活性測定を行った。
粗酵素液の調整は以下の方法で行った。上記菌株をそれ
ぞれ液体ブイヨン培地で３０℃、１６時間振とうして前
培養したのち、あらかじめ１１５℃、１０分間蒸気減菌
した下記に示す主発酵用培地４０ ｍｌを含む１ｇ容三
角フラスコに植継ぎ３０℃、１５Ｑｒｐｍ、振幅３１の
条件下で９０時間培養した。培養終了後、低速遠心し炭
酸力ルンウムを除去し、上清を遠心分離して菌体を得た
。この菌体を生理食塩水で２度洗浄した後、３０％グリ
セロール含有５０ｍＭ１−リス−塩酸緩衝液に懸濁し、
超音波破壊後その遠心上清を粗酵素液とした。
ぞれ液体ブイヨン培地で３０℃、１６時間振とうして前
培養したのち、あらかじめ１１５℃、１０分間蒸気減菌
した下記に示す主発酵用培地４０ ｍｌを含む１ｇ容三
角フラスコに植継ぎ３０℃、１５Ｑｒｐｍ、振幅３１の
条件下で９０時間培養した。培養終了後、低速遠心し炭
酸力ルンウムを除去し、上清を遠心分離して菌体を得た
。この菌体を生理食塩水で２度洗浄した後、３０％グリ
セロール含有５０ｍＭ１−リス−塩酸緩衝液に懸濁し、
超音波破壊後その遠心上清を粗酵素液とした。
酵素活性測定法はＧｕｔｍａｎｎ ｅｔ ａｌ、の方法
（メソード・イノーエンザイマテイクアナリシス第２版
第３巻第７７４−７７８頁（１９７４年））によつｔこ
。その結果を第１表に示す。
（メソード・イノーエンザイマテイクアナリシス第２版
第３巻第７７４−７７８頁（１９７４年））によつｔこ
。その結果を第１表に示す。
発酵用培地（酵素活性測定用〕
グルコース（別減菌） ８％
（Ｎ）Ｌ）ｚｓｏ、 ２．５％ＫＨ２
ＰＯ，Ｏ，ｔ％ Ｍｇ５Ｏ，，７Ｈ２００，０４％ Ｆｅ” ２Ｆ Ｍｎ″ ２Ｆ Ｌ−イノロインン ０．００２５％Ｌ−ロインン
０．０８％酵母エキス ０
．１％ ＣａＣ○３（別滅菌） ４％ｐ Ｈ７，０（
ＫＯＨテ中和） 第 １ 表 実施例３ 第２表に示す各菌株をそれぞれ液体ブイヨン培地で３０
℃、１６時間倣とうして前培養したのち、あらかじめ１
１５℃、１０分間蒸気減菌した下記組成の主発酵用培地
４０ ｍｌを含む１ｇ容三角フラスコに植継ぎ３０℃、
１５０ ｒｐｍ、振幅３ｃ′Ｍの条件下テＴＰ３−１０
５ ハ９０時間、ＦＰＳＳ２５は１２０時間培養した。
ＰＯ，Ｏ，ｔ％ Ｍｇ５Ｏ，，７Ｈ２００，０４％ Ｆｅ” ２Ｆ Ｍｎ″ ２Ｆ Ｌ−イノロインン ０．００２５％Ｌ−ロインン
０．０８％酵母エキス ０
．１％ ＣａＣ○３（別滅菌） ４％ｐ Ｈ７，０（
ＫＯＨテ中和） 第 １ 表 実施例３ 第２表に示す各菌株をそれぞれ液体ブイヨン培地で３０
℃、１６時間倣とうして前培養したのち、あらかじめ１
１５℃、１０分間蒸気減菌した下記組成の主発酵用培地
４０ ｍｌを含む１ｇ容三角フラスコに植継ぎ３０℃、
１５０ ｒｐｍ、振幅３ｃ′Ｍの条件下テＴＰ３−１０
５ ハ９０時間、ＦＰＳＳ２５は１２０時間培養した。
グルコース（別滅菌） ８％
（Ｎ）Ｌ ） ２５０４２ 、ダ％
ＫＨ２Ｐ０． ０．１ ％ＭｇＳＯ
４−７Ｈ２００，０４％ ＦＣ＋＋２Ｗ− Ｍｎ” ２ＦＬ−イノロイン
ノ ０．００２５％Ｌ−ロインノ ０
．０８％ ＣａＣ０３（別滅菌） ４％ １） Ｈ７，Ｏ（ＫＯＨで中和） 培養終了後、菌体、炭酸力ルンウムを除去した７戸液中
の生成アミノ酸濃度を自動アミノ酸分析計（日本電子Ｊ
ＬＣ２００Ａ）で定量したところ第２表に示すような結
果を得た。
４−７Ｈ２００，０４％ ＦＣ＋＋２Ｗ− Ｍｎ” ２ＦＬ−イノロイン
ノ ０．００２５％Ｌ−ロインノ ０
．０８％ ＣａＣ０３（別滅菌） ４％ １） Ｈ７，Ｏ（ＫＯＨで中和） 培養終了後、菌体、炭酸力ルンウムを除去した７戸液中
の生成アミノ酸濃度を自動アミノ酸分析計（日本電子Ｊ
ＬＣ２００Ａ）で定量したところ第２表に示すような結
果を得た。
第 ２ 表
□
※ 未検出をあられす。
各アミノ酸生成収率は、消費グルコースに対する生成ア
ミノ酸の重重収率で表わした。親株に比べ、Ｌ−スレオ
ニン生成収率に有意差はないが、多量に副生じていたア
ラニン、パリンノ生成が本発明法ではＷｉ量になった。
ミノ酸の重重収率で表わした。親株に比べ、Ｌ−スレオ
ニン生成収率に有意差はないが、多量に副生じていたア
ラニン、パリンノ生成が本発明法ではＷｉ量になった。
ＮＤは未検出を表わす。
培養後、培養液より菌体を除き、その１００ｘｌを強力
チオン交換樹脂ダイヤイオンＳＫ Ｉ Ｂ〔Ｈ型〕のカ
ラムに通した。カラムを水洗後、２Ｎアンモニア水でカ
ラムの吸着成分を溶出し、脱色後、減圧濃縮した。これ
にエタノールを加え、冷却し、生成した結晶を集めて乾
燥した結果、ＴＰ３−１０５株の培養液からは純度９６
％のし一スレオニン結晶１．４ダ、ＦＰＳＳ２５株のも
のから純度９８％のＬ−スレオニン結晶１，５ｙが得ら
れた。
チオン交換樹脂ダイヤイオンＳＫ Ｉ Ｂ〔Ｈ型〕のカ
ラムに通した。カラムを水洗後、２Ｎアンモニア水でカ
ラムの吸着成分を溶出し、脱色後、減圧濃縮した。これ
にエタノールを加え、冷却し、生成した結晶を集めて乾
燥した結果、ＴＰ３−１０５株の培養液からは純度９６
％のし一スレオニン結晶１．４ダ、ＦＰＳＳ２５株のも
のから純度９８％のＬ−スレオニン結晶１，５ｙが得ら
れた。
本発明法によりアラニンおよび／またはバリンの副生を
抑制し、高純度のし一スレオニンの生産が可能となった
。煩雑な精製工程を要しないので、工業的に実用化する
のに有利である。
抑制し、高純度のし一スレオニンの生産が可能となった
。煩雑な精製工程を要しないので、工業的に実用化する
のに有利である。
Claims (1)
- （１）プロビデンシア（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ）属に
属し、Ｌ−スレオニン生産能を有し、かつピルベートキ
ナーゼ（ＥＣ２．７．１．４０）の活性が、その親株よ
りも低い変異株を培養して、培養液中にＬ−スレオニン
を生成蓄積せしめ、前記培養液よりＬ−スレオニンを採
取することを特徴とする発酵法によるＬ−スレオニンの
製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18392385A JPS6244191A (ja) | 1985-08-23 | 1985-08-23 | 発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18392385A JPS6244191A (ja) | 1985-08-23 | 1985-08-23 | 発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6244191A true JPS6244191A (ja) | 1987-02-26 |
| JPH0313873B2 JPH0313873B2 (ja) | 1991-02-25 |
Family
ID=16144175
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18392385A Granted JPS6244191A (ja) | 1985-08-23 | 1985-08-23 | 発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6244191A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1053181C (zh) * | 1996-10-18 | 2000-06-07 | 天津大学 | 从味精生产的离子交换洗脱液中回收丙氨酸的方法 |
-
1985
- 1985-08-23 JP JP18392385A patent/JPS6244191A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1053181C (zh) * | 1996-10-18 | 2000-06-07 | 天津大学 | 从味精生产的离子交换洗脱液中回收丙氨酸的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0313873B2 (ja) | 1991-02-25 |
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